Nature.com ಗೆ ಭೇಟಿ ನೀಡಿದ್ದಕ್ಕಾಗಿ ಧನ್ಯವಾದಗಳು. ನೀವು ಬಳಸುತ್ತಿರುವ ಬ್ರೌಸರ್ ಆವೃತ್ತಿಯು CSS ಗೆ ಸೀಮಿತ ಬೆಂಬಲವನ್ನು ಹೊಂದಿದೆ. ಉತ್ತಮ ಅನುಭವಕ್ಕಾಗಿ, ನೀವು ನವೀಕರಿಸಿದ ಬ್ರೌಸರ್ ಅನ್ನು ಬಳಸಬೇಕೆಂದು ನಾವು ಶಿಫಾರಸು ಮಾಡುತ್ತೇವೆ (ಅಥವಾ ಇಂಟರ್ನೆಟ್ ಎಕ್ಸ್‌ಪ್ಲೋರರ್‌ನಲ್ಲಿ ಹೊಂದಾಣಿಕೆ ಮೋಡ್ ಅನ್ನು ಆಫ್ ಮಾಡಿ). ಈ ಮಧ್ಯೆ, ನಿರಂತರ ಬೆಂಬಲವನ್ನು ಖಚಿತಪಡಿಸಿಕೊಳ್ಳಲು, ನಾವು ಶೈಲಿಗಳು ಮತ್ತು ಜಾವಾಸ್ಕ್ರಿಪ್ಟ್ ಇಲ್ಲದೆ ಸೈಟ್ ಅನ್ನು ಪ್ರದರ್ಶಿಸುತ್ತೇವೆ.
ಸಿಸ್ಟಿಕ್ ಫೈಬ್ರೋಸಿಸ್ ಶ್ವಾಸಕೋಶದ ಕಾಯಿಲೆಯ ಚಿಕಿತ್ಸೆಗಾಗಿ ಜೀನ್ ವಾಹಕಗಳು ವಾಹಕ ವಾಯುಮಾರ್ಗಗಳನ್ನು ಗುರಿಯಾಗಿಸಿಕೊಳ್ಳಬೇಕು ಏಕೆಂದರೆ ಬಾಹ್ಯ ಶ್ವಾಸಕೋಶದ ಟ್ರಾನ್ಸ್‌ಡಕ್ಷನ್ ಚಿಕಿತ್ಸಕ ಪ್ರಯೋಜನವನ್ನು ಒದಗಿಸುವುದಿಲ್ಲ. ವೈರಲ್ ಟ್ರಾನ್ಸ್‌ಡಕ್ಷನ್ ದಕ್ಷತೆಯು ವೆಕ್ಟರ್ ನಿವಾಸ ಸಮಯಕ್ಕೆ ನೇರವಾಗಿ ಸಂಬಂಧಿಸಿದೆ. ಆದಾಗ್ಯೂ, ಜೀನ್ ವಾಹಕಗಳಂತಹ ವಿತರಣಾ ದ್ರವಗಳು ಸ್ಫೂರ್ತಿಯ ಸಮಯದಲ್ಲಿ ಅಲ್ವಿಯೋಲಿಯೊಳಗೆ ನೈಸರ್ಗಿಕವಾಗಿ ಹರಡುತ್ತವೆ ಮತ್ತು ಯಾವುದೇ ರೂಪದ ಚಿಕಿತ್ಸಕ ಕಣಗಳು ಮ್ಯೂಕೋಸಿಲಿಯರಿ ಸಾಗಣೆಯಿಂದ ವೇಗವಾಗಿ ತೆರವುಗೊಳ್ಳುತ್ತವೆ. ವಾಯುಮಾರ್ಗಗಳಲ್ಲಿ ಜೀನ್ ವಾಹಕಗಳ ನಿವಾಸ ಸಮಯವನ್ನು ಹೆಚ್ಚಿಸುವುದು ಮುಖ್ಯ ಆದರೆ ಸಾಧಿಸುವುದು ಕಷ್ಟ. ವಾಯುಮಾರ್ಗಗಳ ಮೇಲ್ಮೈಗೆ ನಿರ್ದೇಶಿಸಬಹುದಾದ ಜೀನ್ ವಾಹಕ-ಸಂಯೋಜಿತ ಕಾಂತೀಯ ಕಣಗಳು ಪ್ರಾದೇಶಿಕ ಗುರಿಯನ್ನು ಸುಧಾರಿಸಬಹುದು. ಇನ್ ವಿವೋ ದೃಶ್ಯೀಕರಣದ ಸವಾಲುಗಳಿಂದಾಗಿ, ಅನ್ವಯಿಕ ಕಾಂತೀಯ ಕ್ಷೇತ್ರದ ಉಪಸ್ಥಿತಿಯಲ್ಲಿ ವಾಯುಮಾರ್ಗದ ಮೇಲ್ಮೈಯಲ್ಲಿ ಅಂತಹ ಸಣ್ಣ ಕಾಂತೀಯ ಕಣಗಳ ನಡವಳಿಕೆಯನ್ನು ಸರಿಯಾಗಿ ಅರ್ಥಮಾಡಿಕೊಳ್ಳಲಾಗಿಲ್ಲ. ಅರಿವಳಿಕೆ ಪಡೆದ ಇಲಿಗಳ ಶ್ವಾಸನಾಳದಲ್ಲಿ ಕಾಂತೀಯ ಕಣಗಳ ಸರಣಿಯ ಇನ್ ವಿವೋ ಚಲನೆಯನ್ನು ದೃಶ್ಯೀಕರಿಸಲು ಸಿಂಕ್ರೊಟ್ರಾನ್ ಇಮೇಜಿಂಗ್ ಅನ್ನು ಬಳಸಿಕೊಂಡು ಇನ್ ವಿವೋದಲ್ಲಿ ವೈಯಕ್ತಿಕ ಮತ್ತು ಬೃಹತ್ ಕಣಗಳ ನಡವಳಿಕೆಯ ಡೈನಾಮಿಕ್ಸ್ ಮತ್ತು ಮಾದರಿಗಳನ್ನು ಪರೀಕ್ಷಿಸುವುದು ಈ ಅಧ್ಯಯನದ ಉದ್ದೇಶವಾಗಿತ್ತು. ನಂತರ ನಾವು ಕಾಂತೀಯ ಕ್ಷೇತ್ರದ ಉಪಸ್ಥಿತಿಯಲ್ಲಿ ಲೆಂಟಿವೈರಲ್ ಮ್ಯಾಗ್ನೆಟಿಕ್ ಕಣಗಳ ವಿತರಣೆಯು ಇಲಿಯಲ್ಲಿ ಟ್ರಾನ್ಸ್‌ಡಕ್ಷನ್ ದಕ್ಷತೆಯನ್ನು ಹೆಚ್ಚಿಸುತ್ತದೆಯೇ ಎಂದು ನಿರ್ಣಯಿಸಿದ್ದೇವೆ. ಶ್ವಾಸನಾಳ. ಸಿಂಕ್ರೊಟ್ರಾನ್ ಎಕ್ಸ್-ರೇ ಇಮೇಜಿಂಗ್ ಇನ್ ವಿಟ್ರೊ ಮತ್ತು ಇನ್ ವಿವೊದಲ್ಲಿ ಸ್ಥಿರ ಮತ್ತು ಚಲಿಸುವ ಕಾಂತೀಯ ಕ್ಷೇತ್ರಗಳಲ್ಲಿನ ಕಾಂತೀಯ ಕಣಗಳ ನಡವಳಿಕೆಯನ್ನು ಬಹಿರಂಗಪಡಿಸುತ್ತದೆ. ಕಣಗಳನ್ನು ಆಯಸ್ಕಾಂತಗಳೊಂದಿಗೆ ಜೀವಂತ ವಾಯುಮಾರ್ಗದ ಮೇಲ್ಮೈಯಲ್ಲಿ ಸುಲಭವಾಗಿ ಎಳೆಯಲಾಗುವುದಿಲ್ಲ, ಆದರೆ ಸಾಗಣೆಯ ಸಮಯದಲ್ಲಿ, ನಿಕ್ಷೇಪಗಳು ಕಾಂತೀಯ ಕ್ಷೇತ್ರವು ಪ್ರಬಲವಾಗಿರುವ ವೀಕ್ಷಣಾ ಕ್ಷೇತ್ರದಲ್ಲಿ ಕೇಂದ್ರೀಕೃತವಾಗಿರುತ್ತವೆ. ಕಾಂತೀಯ ಕ್ಷೇತ್ರದ ಉಪಸ್ಥಿತಿಯಲ್ಲಿ ಲೆಂಟಿವೈರಲ್ ಕಾಂತೀಯ ಕಣಗಳನ್ನು ತಲುಪಿಸಿದಾಗ ಟ್ರಾನ್ಸ್‌ಡಕ್ಷನ್ ದಕ್ಷತೆಯು ಆರು ಪಟ್ಟು ಹೆಚ್ಚಾಗಿದೆ. ಒಟ್ಟಾಗಿ, ಈ ಫಲಿತಾಂಶಗಳು ಲೆಂಟಿವೈರಲ್ ಕಾಂತೀಯ ಕಣಗಳು ಮತ್ತು ಕಾಂತೀಯ ಕ್ಷೇತ್ರಗಳು ಜೀನ್ ವೆಕ್ಟರ್ ಗುರಿಯನ್ನು ಸುಧಾರಿಸಲು ಮತ್ತು ಇನ್ ವಿವೊದಲ್ಲಿ ವಾಯುಮಾರ್ಗಗಳನ್ನು ನಡೆಸುವಲ್ಲಿ ಟ್ರಾನ್ಸ್‌ಡಕ್ಷನ್ ಮಟ್ಟವನ್ನು ಹೆಚ್ಚಿಸಲು ಮೌಲ್ಯಯುತ ವಿಧಾನಗಳಾಗಿರಬಹುದು ಎಂದು ಸೂಚಿಸುತ್ತವೆ.
ಸಿಸ್ಟಿಕ್ ಫೈಬ್ರೋಸಿಸ್ (CF) CF ಟ್ರಾನ್ಸ್‌ಮೆಂಬ್ರೇನ್ ಕಂಡಕ್ಟನ್ಸ್ ರೆಗ್ಯುಲೇಟರ್ (CFTR) ಎಂಬ ಒಂದೇ ಜೀನ್‌ನಲ್ಲಿನ ವ್ಯತ್ಯಾಸದಿಂದ ಉಂಟಾಗುತ್ತದೆ. CFTR ಪ್ರೋಟೀನ್ ಒಂದು ಅಯಾನು ಚಾನಲ್ ಆಗಿದ್ದು, ಇದು CF ರೋಗಕಾರಕದ ಪ್ರಮುಖ ತಾಣವಾದ ವಾಹಕ ವಾಯುಮಾರ್ಗಗಳು ಸೇರಿದಂತೆ ದೇಹದಾದ್ಯಂತ ಅನೇಕ ಎಪಿಥೀಲಿಯಲ್ ಕೋಶಗಳಲ್ಲಿ ಇರುತ್ತದೆ. CFTR ದೋಷಗಳು ಅಸಹಜ ನೀರಿನ ಸಾಗಣೆಗೆ ಕಾರಣವಾಗುತ್ತವೆ, ವಾಯುಮಾರ್ಗದ ಮೇಲ್ಮೈಯನ್ನು ನಿರ್ಜಲೀಕರಣಗೊಳಿಸುತ್ತವೆ ಮತ್ತು ವಾಯುಮಾರ್ಗದ ಮೇಲ್ಮೈ ದ್ರವ (ASL) ಪದರದ ಆಳವನ್ನು ಕಡಿಮೆ ಮಾಡುತ್ತದೆ. ಇದು ವಾಯುಮಾರ್ಗಗಳಿಂದ ಉಸಿರಾಡುವ ಕಣಗಳು ಮತ್ತು ರೋಗಕಾರಕಗಳನ್ನು ತೆರವುಗೊಳಿಸಲು ಮ್ಯೂಕೋಸಿಲಿಯರಿ ಸಾರಿಗೆ (MCT) ವ್ಯವಸ್ಥೆಯ ಸಾಮರ್ಥ್ಯವನ್ನು ಸಹ ದುರ್ಬಲಗೊಳಿಸುತ್ತದೆ. CFTR ಜೀನ್‌ನ ಸರಿಯಾದ ಪ್ರತಿಯನ್ನು ತಲುಪಿಸಲು ಮತ್ತು ASL, MCT ಮತ್ತು ಶ್ವಾಸಕೋಶದ ಆರೋಗ್ಯವನ್ನು ಸುಧಾರಿಸಲು ಮತ್ತು vivo1 ನಲ್ಲಿ ಈ ನಿಯತಾಂಕಗಳನ್ನು ಅಳೆಯುವ ಸಾಮರ್ಥ್ಯವಿರುವ ಹೊಸ ತಂತ್ರಜ್ಞಾನಗಳನ್ನು ಅಭಿವೃದ್ಧಿಪಡಿಸುವುದನ್ನು ಮುಂದುವರಿಸುವುದು ನಮ್ಮ ಗುರಿಯಾಗಿದೆ.
LV ವಾಹಕಗಳು CF ವಾಯುಮಾರ್ಗ ಜೀನ್ ಚಿಕಿತ್ಸೆಗೆ ಪ್ರಮುಖ ಅಭ್ಯರ್ಥಿಗಳಲ್ಲಿ ಒಂದಾಗಿದೆ, ಮುಖ್ಯವಾಗಿ ಅವು ಚಿಕಿತ್ಸಕ ಜೀನ್ ಅನ್ನು ವಾಯುಮಾರ್ಗದ ತಳದ ಕೋಶಗಳಲ್ಲಿ (ವಾಯುಮಾರ್ಗ ಕಾಂಡಕೋಶಗಳು) ಶಾಶ್ವತವಾಗಿ ಸಂಯೋಜಿಸಬಹುದು. ಇದು ಮುಖ್ಯವಾಗಿದೆ ಏಕೆಂದರೆ ಅವು ಕ್ರಿಯಾತ್ಮಕ ಜೀನ್-ಸರಿಪಡಿಸಿದ CF-ಸಂಬಂಧಿತ ವಾಯುಮಾರ್ಗ ಮೇಲ್ಮೈ ಕೋಶಗಳಾಗಿ ಪ್ರತ್ಯೇಕಿಸುವ ಮೂಲಕ ಸಾಮಾನ್ಯ ಜಲಸಂಚಯನ ಮತ್ತು ಲೋಳೆಯ ತೆರವುವನ್ನು ಪುನಃಸ್ಥಾಪಿಸಬಹುದು, ಇದು ಜೀವಿತಾವಧಿಯ ಪ್ರಯೋಜನಗಳಿಗೆ ಕಾರಣವಾಗುತ್ತದೆ. LV ವಾಹಕಗಳನ್ನು ವಾಹಕ ವಾಯುಮಾರ್ಗದ ವಿರುದ್ಧ ನಿರ್ದೇಶಿಸಬೇಕು, ಏಕೆಂದರೆ ಇಲ್ಲಿ CF ಶ್ವಾಸಕೋಶದ ಕಾಯಿಲೆ ಪ್ರಾರಂಭವಾಗುತ್ತದೆ. ಶ್ವಾಸಕೋಶಕ್ಕೆ ವೆಕ್ಟರ್ ಅನ್ನು ಆಳವಾಗಿ ತಲುಪಿಸುವುದರಿಂದ ಅಲ್ವಿಯೋಲಾರ್ ಟ್ರಾನ್ಸ್‌ಡಕ್ಷನ್‌ಗೆ ಕಾರಣವಾಗಬಹುದು, ಆದರೆ ಇದು CF ನಲ್ಲಿ ಯಾವುದೇ ಚಿಕಿತ್ಸಕ ಪ್ರಯೋಜನವನ್ನು ಹೊಂದಿಲ್ಲ. ಆದಾಗ್ಯೂ, ಜೀನ್ ವಾಹಕಗಳಂತಹ ದ್ರವಗಳು ಸ್ವಾಭಾವಿಕವಾಗಿ ವಿತರಣೆಯ ನಂತರ ಸ್ಫೂರ್ತಿಯ ಮೇಲೆ ಅಲ್ವಿಯೋಲಿಗೆ ವಲಸೆ ಹೋಗುತ್ತವೆ3,4 ಮತ್ತು ಚಿಕಿತ್ಸಕ ಕಣಗಳನ್ನು MCT ಯಿಂದ ಮೌಖಿಕ ಕುಹರದೊಳಗೆ ವೇಗವಾಗಿ ತೆರವುಗೊಳಿಸಲಾಗುತ್ತದೆ.LV ಟ್ರಾನ್ಸ್‌ಡಕ್ಷನ್ ದಕ್ಷತೆಯು ಸೆಲ್ಯುಲಾರ್ ಹೀರಿಕೊಳ್ಳುವಿಕೆಯನ್ನು ಅನುಮತಿಸಲು ವೆಕ್ಟರ್ ಗುರಿ ಕೋಶಗಳ ಪಕ್ಕದಲ್ಲಿ ಉಳಿಯುವ ಸಮಯಕ್ಕೆ ನೇರವಾಗಿ ಸಂಬಂಧಿಸಿದೆ - "ವಾಸದ ಸಮಯ"5 - ಇದು ವಿಶಿಷ್ಟ ಪ್ರಾದೇಶಿಕ ಗಾಳಿಯ ಹರಿವು ಹಾಗೂ ಸಂಘಟಿತ ಕಣ ಲೋಳೆಯ ಸೆರೆಹಿಡಿಯುವಿಕೆ ಮತ್ತು MCT ಯಿಂದ ಸುಲಭವಾಗಿ ಕಡಿಮೆಯಾಗುತ್ತದೆ. CF ಗೆ, ವಾಯುಮಾರ್ಗದೊಳಗಿನ LV ಯ ನಿವಾಸ ಸಮಯವನ್ನು ಹೆಚ್ಚಿಸುವ ಸಾಮರ್ಥ್ಯವು ಈ ಪ್ರದೇಶದಲ್ಲಿ ಹೆಚ್ಚಿನ ಮಟ್ಟದ ಪ್ರಸರಣವನ್ನು ಸಾಧಿಸಲು ಮುಖ್ಯವಾಗಿದೆ, ಆದರೆ ಇಲ್ಲಿಯವರೆಗೆ ಸವಾಲಿನದ್ದಾಗಿದೆ.
ಈ ಅಡಚಣೆಯನ್ನು ನಿವಾರಿಸಲು, LV ಕಾಂತೀಯ ಕಣಗಳು (MP ಗಳು) ಎರಡು ಪೂರಕ ರೀತಿಯಲ್ಲಿ ಸಹಾಯ ಮಾಡಬಹುದು ಎಂದು ನಾವು ಸೂಚಿಸುತ್ತೇವೆ. ಮೊದಲನೆಯದಾಗಿ, ಗುರಿಯನ್ನು ಸುಧಾರಿಸಲು ಮತ್ತು ಜೀನ್ ವಾಹಕ ಕಣಗಳು ಅಪೇಕ್ಷಿತ ವಾಯುಮಾರ್ಗ ಪ್ರದೇಶದಲ್ಲಿ ವಾಸಿಸಲು ಸಹಾಯ ಮಾಡಲು ಅವುಗಳನ್ನು ವಾಯುಮಾರ್ಗ ಮೇಲ್ಮೈಗೆ ಕಾಂತೀಯವಾಗಿ ಮಾರ್ಗದರ್ಶನ ಮಾಡಬಹುದು; ಮತ್ತು ASL) ಕೋಶ ಪದರ 6 ಕ್ಕೆ ಚಲಿಸಲು ಸಹಾಯ ಮಾಡುತ್ತದೆ. MP ಗಳು ಪ್ರತಿಕಾಯಗಳು, ಕೀಮೋಥೆರಪಿಟಿಕ್ ಔಷಧಗಳು ಅಥವಾ ಜೀವಕೋಶ ಪೊರೆಗಳಿಗೆ ಅಂಟಿಕೊಳ್ಳುವ ಅಥವಾ ಸಂಬಂಧಿತ ಜೀವಕೋಶ ಮೇಲ್ಮೈ ಗ್ರಾಹಕಗಳಿಗೆ ಬಂಧಿಸುವ ಮತ್ತು ಸ್ಥಿರ ವಿದ್ಯುತ್ ಉಪಸ್ಥಿತಿಯಲ್ಲಿ ಗೆಡ್ಡೆಯ ಸ್ಥಳಗಳಲ್ಲಿ ಸಂಗ್ರಹವಾಗುವ ಇತರ ಸಣ್ಣ ಅಣುಗಳಿಗೆ ಬಂಧಿಸಿದಾಗ ಅವುಗಳನ್ನು ಉದ್ದೇಶಿತ ಔಷಧ ವಿತರಣಾ ವಾಹನಗಳಾಗಿ ವ್ಯಾಪಕವಾಗಿ ಬಳಸಲಾಗುತ್ತದೆ. ಕ್ಯಾನ್ಸರ್ ಚಿಕಿತ್ಸೆಗಾಗಿ ಕಾಂತೀಯ ಕ್ಷೇತ್ರಗಳು 7. ಇತರ "ಹೈಪರ್ಥರ್ಮಲ್" ತಂತ್ರಗಳು ಆಂದೋಲನದ ಕಾಂತೀಯ ಕ್ಷೇತ್ರಗಳಿಗೆ ಒಡ್ಡಿಕೊಂಡಾಗ MP ಗಳನ್ನು ಬಿಸಿಮಾಡುವ ಗುರಿಯನ್ನು ಹೊಂದಿವೆ, ಇದರಿಂದಾಗಿ ಗೆಡ್ಡೆಯ ಕೋಶಗಳನ್ನು ನಾಶಮಾಡುತ್ತವೆ. ಜೀವಕೋಶಗಳಿಗೆ DNA ವರ್ಗಾವಣೆಯನ್ನು ಹೆಚ್ಚಿಸಲು ಕಾಂತೀಯ ಕ್ಷೇತ್ರವನ್ನು ಟ್ರಾನ್ಸ್‌ಫೆಕ್ಷನ್ ಏಜೆಂಟ್ ಆಗಿ ಬಳಸುವ ಮ್ಯಾಗ್ನೆಟಿಕ್ ಟ್ರಾನ್ಸ್‌ಫೆಕ್ಷನ್ ತತ್ವವನ್ನು ಸಾಮಾನ್ಯವಾಗಿ ಕಷ್ಟಕರವಾದ ಟ್ರಾನ್ಸ್‌ಡ್ಯೂಸ್ ಕೋಶ ರೇಖೆಗಳಿಗೆ ವೈರಲ್ ಅಲ್ಲದ ಮತ್ತು ವೈರಲ್ ಜೀನ್ ವೆಕ್ಟರ್‌ಗಳ ಶ್ರೇಣಿಯನ್ನು ಬಳಸಿಕೊಂಡು ಇನ್ ವಿಟ್ರೊದಲ್ಲಿ ಬಳಸಲಾಗುತ್ತದೆ. LV ಮ್ಯಾಗ್ನೆಟೋಟ್ರಾನ್ಸ್‌ಫೆಕ್ಷನ್‌ನ ಪರಿಣಾಮಕಾರಿತ್ವವನ್ನು ಸ್ಥಾಪಿಸಲಾಗಿದೆ, ಸ್ಥಿರ ಕಾಂತೀಯ ಕ್ಷೇತ್ರದ ಉಪಸ್ಥಿತಿಯಲ್ಲಿ ಮಾನವ ಶ್ವಾಸನಾಳದ ಎಪಿಥೀಲಿಯಲ್ ಕೋಶ ರೇಖೆಗೆ LV-MP ಗಳ ಇನ್ ವಿಟ್ರೊ ವಿತರಣೆಯೊಂದಿಗೆ, LV ವೆಕ್ಟರ್‌ಗೆ ಹೋಲಿಸಿದರೆ ಟ್ರಾನ್ಸ್‌ಡಕ್ಷನ್ ದಕ್ಷತೆಯನ್ನು 186 ಪಟ್ಟು ಹೆಚ್ಚಿಸುತ್ತದೆ. LV-MP ಅನ್ನು ಇನ್ ವಿಟ್ರೊ CF ಮಾದರಿಗೆ ಸಹ ಅನ್ವಯಿಸಲಾಗಿದೆ, ಅಲ್ಲಿ ಕಾಂತೀಯ ಟ್ರಾನ್ಸ್‌ಫೆಕ್ಷನ್ CF ಕಫದ ಉಪಸ್ಥಿತಿಯಲ್ಲಿ ಗಾಳಿ-ದ್ರವ ಇಂಟರ್ಫೇಸ್ ಸಂಸ್ಕೃತಿಗಳಲ್ಲಿ LV ಟ್ರಾನ್ಸ್‌ಡಕ್ಷನ್ ಅನ್ನು 20 ಪಟ್ಟು ಹೆಚ್ಚಿಸಿದೆ10. ಆದಾಗ್ಯೂ, ಇನ್ ವಿವೋ ಅಂಗಗಳ ಮ್ಯಾಗ್ನೆಟೋಟ್ರಾನ್ಸ್‌ಫೆಕ್ಷನ್ ತುಲನಾತ್ಮಕವಾಗಿ ಕಡಿಮೆ ಗಮನವನ್ನು ಪಡೆದುಕೊಂಡಿದೆ ಮತ್ತು ಕೆಲವು ಪ್ರಾಣಿ ಅಧ್ಯಯನಗಳಲ್ಲಿ ಮಾತ್ರ ಮೌಲ್ಯಮಾಪನ ಮಾಡಲಾಗಿದೆ11,12,13,14,15, ವಿಶೇಷವಾಗಿ ಶ್ವಾಸಕೋಶಗಳು16,17. ಆದಾಗ್ಯೂ, CF ಶ್ವಾಸಕೋಶ ಚಿಕಿತ್ಸೆಯಲ್ಲಿ ಕಾಂತೀಯ ವರ್ಗಾವಣೆಗೆ ಅವಕಾಶಗಳು ಸ್ಪಷ್ಟವಾಗಿವೆ. ಟ್ಯಾನ್ ಮತ್ತು ಇತರರು (2020) "ಪರಿಣಾಮಕಾರಿ ಕಾಂತೀಯ ನ್ಯಾನೊಪರ್ಟಿಕಲ್ ಪಲ್ಮನರಿ ವಿತರಣೆಯ ಪರಿಕಲ್ಪನೆಯ ಪುರಾವೆ ಅಧ್ಯಯನವು CF ರೋಗಿಗಳಲ್ಲಿ ವೈದ್ಯಕೀಯ ಫಲಿತಾಂಶಗಳನ್ನು ಸುಧಾರಿಸಲು ಭವಿಷ್ಯದ CFTR ಇನ್ಹಲೇಷನ್ ತಂತ್ರಗಳಿಗೆ ದಾರಿ ಮಾಡಿಕೊಡುತ್ತದೆ" ಎಂದು ಹೇಳಿದ್ದಾರೆ.
ಅನ್ವಯಿಕ ಕಾಂತೀಯ ಕ್ಷೇತ್ರದ ಉಪಸ್ಥಿತಿಯಲ್ಲಿ ವಾಯುಮಾರ್ಗದ ಮೇಲ್ಮೈಗಳಲ್ಲಿ ಸಣ್ಣ ಕಾಂತೀಯ ಕಣಗಳ ನಡವಳಿಕೆಯನ್ನು ದೃಶ್ಯೀಕರಿಸುವುದು ಮತ್ತು ಅಧ್ಯಯನ ಮಾಡುವುದು ಕಷ್ಟ, ಮತ್ತು ಆದ್ದರಿಂದ ಸರಿಯಾಗಿ ಅರ್ಥಮಾಡಿಕೊಳ್ಳಲಾಗಿಲ್ಲ. ಇತರ ಅಧ್ಯಯನಗಳಲ್ಲಿ, ASL ಆಳ 18 ಮತ್ತು MCT ನಡವಳಿಕೆ 19,20 ರಲ್ಲಿನ ಸೂಕ್ಷ್ಮ ಬದಲಾವಣೆಗಳನ್ನು ಆಕ್ರಮಣಕಾರಿಯಾಗಿ ದೃಶ್ಯೀಕರಿಸಲು ಮತ್ತು ಪ್ರಮಾಣೀಕರಿಸಲು ನಾವು ಸಿಂಕ್ರೊಟ್ರಾನ್-ಪ್ರಸರಣ-ಆಧಾರಿತ ಹಂತ-ವ್ಯತ್ಯಾಸ ಎಕ್ಸ್-ರೇ ಇಮೇಜಿಂಗ್ (PB-PCXI) ವಿಧಾನವನ್ನು ಅಭಿವೃದ್ಧಿಪಡಿಸಿದ್ದೇವೆ. ಇದನ್ನು ನೇರವಾಗಿ ಅನಿಲ ಕಾಲುವೆ ಮೇಲ್ಮೈ ಜಲಸಂಚಯನವನ್ನು ಅಳೆಯಲು ಬಳಸಲಾಗುತ್ತದೆ ಮತ್ತು ಚಿಕಿತ್ಸೆಯ ಪರಿಣಾಮಕಾರಿತ್ವದ ಆರಂಭಿಕ ಸೂಚಕವಾಗಿ ಬಳಸಲಾಗುತ್ತದೆ. ಇದರ ಜೊತೆಗೆ, ನಮ್ಮ MCT ಮೌಲ್ಯಮಾಪನ ವಿಧಾನವು PB-PCXI21 ಬಳಸಿಕೊಂಡು ಗೋಚರಿಸುವ MCT ಮಾರ್ಕರ್‌ಗಳಾಗಿ ಅಲ್ಯೂಮಿನಾ ಅಥವಾ ಹೆಚ್ಚಿನ ವಕ್ರೀಭವನ ಸೂಚ್ಯಂಕ ಗಾಜಿನಿಂದ ಕೂಡಿದ 10–35 µm ವ್ಯಾಸದ ಕಣಗಳನ್ನು ಬಳಸುತ್ತದೆ. MP ಸೇರಿದಂತೆ ವಿವಿಧ ಕಣ ಪ್ರಕಾರಗಳ ದೃಶ್ಯೀಕರಣಕ್ಕೆ ಎರಡೂ ತಂತ್ರಗಳು ಸೂಕ್ತವಾಗಿವೆ.
ಹೆಚ್ಚಿನ ಪ್ರಾದೇಶಿಕ ಮತ್ತು ತಾತ್ಕಾಲಿಕ ರೆಸಲ್ಯೂಶನ್ ಕಾರಣ, ನಮ್ಮ PB-PCXI-ಆಧಾರಿತ ASL ಮತ್ತು MCT ವಿಶ್ಲೇಷಣಾ ತಂತ್ರಗಳು MP ಜೀನ್ ವಿತರಣಾ ತಂತ್ರಗಳನ್ನು ಅರ್ಥಮಾಡಿಕೊಳ್ಳಲು ಮತ್ತು ಅತ್ಯುತ್ತಮವಾಗಿಸಲು ಸಹಾಯ ಮಾಡಲು ಇನ್ ವಿವೋದಲ್ಲಿ ಏಕ ಮತ್ತು ಬೃಹತ್ ಕಣಗಳ ನಡವಳಿಕೆಯ ಚಲನಶೀಲತೆ ಮತ್ತು ಮಾದರಿಗಳನ್ನು ಪರೀಕ್ಷಿಸಲು ಸೂಕ್ತವಾಗಿವೆ. ನಾವು ಇಲ್ಲಿ ಬಳಸುತ್ತಿರುವ ವಿಧಾನವು SPring-8 BL20B2 ಬೀಮ್‌ಲೈನ್ ಅನ್ನು ಬಳಸಿಕೊಂಡು ನಮ್ಮ ಅಧ್ಯಯನಗಳಿಂದ ಬಂದಿದೆ, ಇದರಲ್ಲಿ ನಾವು ನಮ್ಮ ಜೀನ್ ವಾಹಕ ಡೋಸ್ ಪ್ರಾಣಿ ಅಧ್ಯಯನಗಳಲ್ಲಿ ಗಮನಿಸಿದ ನಮ್ಮ ಏಕರೂಪವಲ್ಲದ ಜೀನ್ ಅಭಿವ್ಯಕ್ತಿ ಮಾದರಿಗಳನ್ನು ವಿವರಿಸಲು ಸಹಾಯ ಮಾಡಲು ಇಲಿಗಳ ಮೂಗಿನ ಮತ್ತು ಶ್ವಾಸಕೋಶದ ವಾಯುಮಾರ್ಗಗಳಿಗೆ ಶಾಮ್ ವೆಕ್ಟರ್ ಡೋಸ್ ವಿತರಣೆಯ ನಂತರ ದ್ರವ ಚಲನೆಯನ್ನು ದೃಶ್ಯೀಕರಿಸಿದ್ದೇವೆ 3,4.
ಜೀವಂತ ಇಲಿಗಳ ಶ್ವಾಸನಾಳದಲ್ಲಿ MP ಗಳ ಸರಣಿಯ ಇನ್ ವಿವೋ ಚಲನೆಗಳನ್ನು ದೃಶ್ಯೀಕರಿಸಲು ಸಿಂಕ್ರೊಟ್ರಾನ್ PB-PCXI ಅನ್ನು ಬಳಸುವುದು ಈ ಅಧ್ಯಯನದ ಉದ್ದೇಶವಾಗಿತ್ತು. ಈ PB-PCXI ಇಮೇಜಿಂಗ್ ಅಧ್ಯಯನಗಳು MP ಗಳ ಶ್ರೇಣಿ, ಕಾಂತೀಯ ಕ್ಷೇತ್ರದ ಸಾಮರ್ಥ್ಯಗಳು ಮತ್ತು ಸ್ಥಳಗಳನ್ನು ಪರೀಕ್ಷಿಸಲು ವಿನ್ಯಾಸಗೊಳಿಸಲಾಗಿದೆ, ಇದು MP ಚಲನೆಯ ಮೇಲೆ ಅವುಗಳ ಪರಿಣಾಮವನ್ನು ನಿರ್ಧರಿಸುತ್ತದೆ. ಬಾಹ್ಯವಾಗಿ ಅನ್ವಯಿಸಲಾದ ಕಾಂತೀಯ ಕ್ಷೇತ್ರವು ವಿತರಿಸಿದ MP ಉಳಿಯಲು ಅಥವಾ ಗುರಿ ಪ್ರದೇಶಕ್ಕೆ ಚಲಿಸಲು ಸಹಾಯ ಮಾಡುತ್ತದೆ ಎಂದು ನಾವು ಊಹಿಸಿದ್ದೇವೆ. ಶೇಖರಣೆಯ ನಂತರ ಶ್ವಾಸನಾಳದಲ್ಲಿ ಉಳಿಸಿಕೊಂಡಿರುವ ಕಣಗಳ ಸಂಖ್ಯೆಯನ್ನು ಗರಿಷ್ಠಗೊಳಿಸುವ ಮ್ಯಾಗ್ನೆಟ್ ಸಂರಚನೆಗಳನ್ನು ಗುರುತಿಸಲು ಈ ಅಧ್ಯಯನಗಳು ನಮಗೆ ಅವಕಾಶ ಮಾಡಿಕೊಟ್ಟವು. ಎರಡನೇ ಸರಣಿಯ ಅಧ್ಯಯನಗಳಲ್ಲಿ, ವಾಯುಮಾರ್ಗ ಗುರಿಯ ಸಂದರ್ಭದಲ್ಲಿ LV-MP ಗಳ ವಿತರಣೆಯು ಸುಧಾರಿತ LV ಟ್ರಾನ್ಸ್‌ಡಕ್ಷನ್ ದಕ್ಷತೆಗೆ ಕಾರಣವಾಗುತ್ತದೆ ಎಂಬ ಊಹೆಯ ಆಧಾರದ ಮೇಲೆ, ಇಲಿ ವಾಯುಮಾರ್ಗಕ್ಕೆ LV-MP ಗಳ ಇನ್ ವಿವೋ ವಿತರಣೆಯಿಂದ ಉಂಟಾಗುವ ಟ್ರಾನ್ಸ್‌ಡಕ್ಷನ್ ಮಾದರಿಯನ್ನು ಪ್ರದರ್ಶಿಸಲು ನಾವು ಈ ಸೂಕ್ತ ಸಂರಚನೆಯನ್ನು ಬಳಸಲು ಪ್ರಯತ್ನಿಸಿದ್ದೇವೆ.
ಎಲ್ಲಾ ಪ್ರಾಣಿ ಅಧ್ಯಯನಗಳನ್ನು ಅಡಿಲೇಡ್ ವಿಶ್ವವಿದ್ಯಾಲಯ (M-2019-060 ಮತ್ತು M-2020-022) ಮತ್ತು SPring-8 ಸಿಂಕ್ರೊಟ್ರಾನ್ ಅನಿಮಲ್ ಎಥಿಕ್ಸ್ ಕಮಿಟಿ ಅನುಮೋದಿಸಿದ ಪ್ರೋಟೋಕಾಲ್‌ಗಳ ಪ್ರಕಾರ ನಡೆಸಲಾಯಿತು. ARRIVE ಮಾರ್ಗಸೂಚಿಗಳ ಪ್ರಕಾರ ಪ್ರಯೋಗಗಳನ್ನು ನಡೆಸಲಾಯಿತು.
ಎಲ್ಲಾ ಎಕ್ಸ್-ರೇ ಇಮೇಜಿಂಗ್ ಅನ್ನು ಜಪಾನ್‌ನ SPring-8 ಸಿಂಕ್ರೊಟ್ರಾನ್‌ನಲ್ಲಿರುವ BL20XU ಬೀಮ್‌ಲೈನ್‌ನಲ್ಲಿ, ಹಿಂದೆ ವಿವರಿಸಿದಂತೆಯೇ ಸೆಟಪ್ ಬಳಸಿ ನಡೆಸಲಾಯಿತು21,22. ಸಂಕ್ಷಿಪ್ತವಾಗಿ ಹೇಳುವುದಾದರೆ, ಪ್ರಾಯೋಗಿಕ ಪೆಟ್ಟಿಗೆಯು ಸಿಂಕ್ರೊಟ್ರಾನ್ ಶೇಖರಣಾ ಉಂಗುರದಿಂದ 245 ಮೀ ದೂರದಲ್ಲಿದೆ. ಹಂತ ವ್ಯತಿರಿಕ್ತ ಪರಿಣಾಮಗಳನ್ನು ಉತ್ಪಾದಿಸಲು ಕಣ ಚಿತ್ರಣ ಅಧ್ಯಯನಗಳಿಗೆ 0.6 ಮೀ ಮಾದರಿ-ಪತ್ತೆದಾರಕ ದೂರವನ್ನು ಮತ್ತು ಇನ್ ವಿವೋ ಇಮೇಜಿಂಗ್ ಅಧ್ಯಯನಗಳಿಗೆ 0.3 ಮೀ ಅನ್ನು ಬಳಸಲಾಗುತ್ತದೆ. 25 keV ನ ಏಕವರ್ಣದ ಕಿರಣದ ಶಕ್ತಿಯನ್ನು ಬಳಸಲಾಯಿತು. sCMOS ಡಿಟೆಕ್ಟರ್‌ಗೆ ಜೋಡಿಸಲಾದ ಹೈ-ರೆಸಲ್ಯೂಶನ್ ಎಕ್ಸ್-ರೇ ಪರಿವರ್ತಕ (SPring-8 BM3) ಬಳಸಿ ಚಿತ್ರಗಳನ್ನು ಸೆರೆಹಿಡಿಯಲಾಯಿತು. ಪರಿವರ್ತಕವು 10 µm ದಪ್ಪದ ಸಿಂಟಿಲೇಟರ್ (Gd3Al2Ga3O12) ಅನ್ನು ಬಳಸಿಕೊಂಡು ಎಕ್ಸ್-ರೇಗಳನ್ನು ಗೋಚರ ಬೆಳಕಿಗೆ ಪರಿವರ್ತಿಸುತ್ತದೆ, ನಂತರ ಅದನ್ನು × 10 ಮೈಕ್ರೋಸ್ಕೋಪ್ ಆಬ್ಜೆಕ್ಟಿವ್ (NA 0.3) ಬಳಸಿ sCMOS ಸಂವೇದಕಕ್ಕೆ ನಿರ್ದೇಶಿಸಲಾಗುತ್ತದೆ. sCMOS ಡಿಟೆಕ್ಟರ್ ಓರ್ಕಾ-ಫ್ಲ್ಯಾಶ್ 4.0 (ಹಮಾಮಟ್ಸು ಫೋಟೊನಿಕ್ಸ್, ಜಪಾನ್) ಆಗಿತ್ತು. 2048 × 2048 ಪಿಕ್ಸೆಲ್‌ಗಳ ಶ್ರೇಣಿಯ ಗಾತ್ರ ಮತ್ತು 6.5 × 6.5 µm ಕಚ್ಚಾ ಪಿಕ್ಸೆಲ್ ಗಾತ್ರ. ಈ ಸೆಟಪ್ 0.51 µm ನ ಪರಿಣಾಮಕಾರಿ ಐಸೊಟ್ರೊಪಿಕ್ ಪಿಕ್ಸೆಲ್ ಗಾತ್ರ ಮತ್ತು ಸರಿಸುಮಾರು 1.1 mm × 1.1 mm ನ ವೀಕ್ಷಣಾ ಕ್ಷೇತ್ರವನ್ನು ನೀಡುತ್ತದೆ. ಉಸಿರಾಟ-ಪ್ರೇರಿತ ಚಲನೆಯ ಕಲಾಕೃತಿಗಳನ್ನು ಕಡಿಮೆ ಮಾಡುವಾಗ ವಾಯುಮಾರ್ಗದ ಒಳಗೆ ಮತ್ತು ಹೊರಗೆ ಕಾಂತೀಯ ಕಣಗಳ ಸಿಗ್ನಲ್-ಟು-ಶಬ್ದ ಅನುಪಾತವನ್ನು ಗರಿಷ್ಠಗೊಳಿಸಲು 100 ms ನ ಮಾನ್ಯತೆ ಉದ್ದವನ್ನು ಆಯ್ಕೆ ಮಾಡಲಾಗಿದೆ. ಇನ್ ವಿವೋ ಅಧ್ಯಯನಗಳಿಗಾಗಿ, ಎಕ್ಸ್-ರೇ ಕಿರಣವನ್ನು ಎಕ್ಸ್-ರೇ ಮಾರ್ಗದಲ್ಲಿ ಇರಿಸಲಾಗಿದ್ದು, ಎಕ್ಸ್-ರೇ ಕಿರಣವನ್ನು ಎಕ್ಸ್-ರೇ ಕಿರಣವನ್ನು ನಿರ್ಬಂಧಿಸುವ ಮೂಲಕ ವಿಕಿರಣ ಪ್ರಮಾಣವನ್ನು ಮಿತಿಗೊಳಿಸಲಾಗಿದೆ.
BL20XU ಇಮೇಜಿಂಗ್ ಚೇಂಬರ್ ಜೈವಿಕ ಸುರಕ್ಷತೆ ಮಟ್ಟ 2 ಪ್ರಮಾಣೀಕರಿಸದ ಕಾರಣ ಯಾವುದೇ SPring-8 PB-PCXI ಇಮೇಜಿಂಗ್ ಅಧ್ಯಯನಗಳಲ್ಲಿ LV ವಾಹಕವನ್ನು ಬಳಸಲಾಗಿಲ್ಲ. ಬದಲಾಗಿ, ನಾವು ಎರಡು ವಾಣಿಜ್ಯ ಪೂರೈಕೆದಾರರಿಂದ ಉತ್ತಮವಾಗಿ ನಿರೂಪಿಸಲ್ಪಟ್ಟ MP ಗಳ ಶ್ರೇಣಿಯನ್ನು ಆಯ್ಕೆ ಮಾಡಿದ್ದೇವೆ - ಗಾತ್ರಗಳು, ವಸ್ತುಗಳು, ಕಬ್ಬಿಣದ ಸಾಂದ್ರತೆಗಳು ಮತ್ತು ಅನ್ವಯಿಕೆಗಳ ಶ್ರೇಣಿಯನ್ನು ಒಳಗೊಂಡಂತೆ - ಮೊದಲು ಗಾಜಿನ ಕ್ಯಾಪಿಲ್ಲರಿಗಳಲ್ಲಿ ಮತ್ತು ನಂತರ ಜೀವಂತ ವಾಯುಮಾರ್ಗಗಳಲ್ಲಿ ಕಾಂತೀಯ ಕ್ಷೇತ್ರಗಳು MP ಚಲನೆಯ ಮೇಲೆ ಹೇಗೆ ಪರಿಣಾಮ ಬೀರುತ್ತವೆ ಎಂಬುದನ್ನು ಅರ್ಥಮಾಡಿಕೊಳ್ಳಲು. ಮೇಲ್ಮೈಯಲ್ಲಿ.MP ಗಳು 0.25 ರಿಂದ 18 μm ವರೆಗಿನ ಗಾತ್ರವನ್ನು ಹೊಂದಿರುತ್ತವೆ ಮತ್ತು ವಿವಿಧ ವಸ್ತುಗಳಿಂದ ಮಾಡಲ್ಪಟ್ಟಿವೆ (ಕೋಷ್ಟಕ 1 ನೋಡಿ), ಆದರೆ MP ಯೊಳಗಿನ ಕಾಂತೀಯ ಕಣಗಳ ಗಾತ್ರವನ್ನು ಒಳಗೊಂಡಂತೆ ಪ್ರತಿ ಮಾದರಿಯ ಸಂಯೋಜನೆಯು ತಿಳಿದಿಲ್ಲ. ನಮ್ಮ ವ್ಯಾಪಕವಾದ MCT ಅಧ್ಯಯನಗಳು 19, 20, 21, 23, 24 ರ ಆಧಾರದ ಮೇಲೆ, 5 μm ನಂತಹ ಚಿಕ್ಕ MP ಗಳನ್ನು ಶ್ವಾಸನಾಳದ ವಾಯುಮಾರ್ಗದ ಮೇಲ್ಮೈಯಲ್ಲಿ ಕಾಣಬಹುದು ಎಂದು ನಾವು ನಿರೀಕ್ಷಿಸುತ್ತೇವೆ, ಉದಾಹರಣೆಗೆ MP ಚಲನೆಯ ವರ್ಧಿತ ಗೋಚರತೆಯನ್ನು ನೋಡಲು ಸತತ ಚೌಕಟ್ಟುಗಳನ್ನು ಕಳೆಯುವ ಮೂಲಕ. ಒಂದೇ 0.25 μm-ಗಾತ್ರದ MP ಇಮೇಜಿಂಗ್ ಸಾಧನದ ರೆಸಲ್ಯೂಶನ್‌ಗಿಂತ ಚಿಕ್ಕದಾಗಿದೆ, ಆದರೆ PB-PCXI ಅವುಗಳ ಪರಿಮಾಣದ ವ್ಯತಿರಿಕ್ತತೆಯನ್ನು ಮತ್ತು ಶೇಖರಣೆಯ ನಂತರ ಅವುಗಳನ್ನು ಠೇವಣಿ ಮಾಡಿದ ಮೇಲ್ಮೈ ದ್ರವದ ಚಲನೆಯನ್ನು ಪತ್ತೆ ಮಾಡುತ್ತದೆ ಎಂದು ನಿರೀಕ್ಷಿಸಲಾಗಿದೆ.
ಕೋಷ್ಟಕ 1 ರಲ್ಲಿ ಪ್ರತಿ MP ಗಾಗಿ ಮಾದರಿಗಳನ್ನು 0.63 mm ಒಳ ವ್ಯಾಸದ 20 μl ಗಾಜಿನ ಕ್ಯಾಪಿಲ್ಲರಿಗಳಲ್ಲಿ (ಡ್ರಮಂಡ್ ಮೈಕ್ರೋಕ್ಯಾಪ್ಸ್, PA, USA) ತಯಾರಿಸಲಾಯಿತು. ಕಾರ್ಪಸ್ಕುಲರ್ ಕಣಗಳು ನೀರಿನಲ್ಲಿ ಲಭ್ಯವಿದ್ದರೆ, ಕಾಂಬಿಮ್ಯಾಗ್ ಕಣಗಳು ತಯಾರಕರ ಸ್ವಾಮ್ಯದ ದ್ರವದಲ್ಲಿ ಲಭ್ಯವಿದೆ. ಪ್ರತಿಯೊಂದು ಟ್ಯೂಬ್ ಅರ್ಧದಷ್ಟು ದ್ರವದಿಂದ ತುಂಬಿರುತ್ತದೆ (ಸರಿಸುಮಾರು 11 μl) ಮತ್ತು ಮಾದರಿ ಹೋಲ್ಡರ್ ಮೇಲೆ ಇರಿಸಲಾಗುತ್ತದೆ (ಚಿತ್ರ 1 ನೋಡಿ). ಗಾಜಿನ ಕ್ಯಾಪಿಲ್ಲರಿಗಳನ್ನು ಕ್ರಮವಾಗಿ ಇಮೇಜಿಂಗ್ ಬಾಕ್ಸ್‌ನಲ್ಲಿರುವ ಮಾದರಿ ಹಂತದ ಮೇಲೆ ಅಡ್ಡಲಾಗಿ ಇರಿಸಲಾಯಿತು ಮತ್ತು ದ್ರವದ ಅಂಚುಗಳನ್ನು ಇರಿಸಲಾಯಿತು. 1.17 ರ ಉಳಿದ ಕಾಂತೀಕರಣದೊಂದಿಗೆ 19 mm ವ್ಯಾಸದ (28 mm ಉದ್ದ) ನಿಕಲ್ ಶೆಲ್ ಅಪರೂಪದ ಭೂಮಿಯ ನಿಯೋಡೈಮಿಯಮ್ ಕಬ್ಬಿಣದ ಬೋರಾನ್ (NdFeB) ಮ್ಯಾಗ್ನೆಟ್ (N35, cat. no. LM1652, ಜೇಕಾರ್ ಎಲೆಕ್ಟ್ರಾನಿಕ್ಸ್, ಆಸ್ಟ್ರೇಲಿಯಾ) ಅನ್ನು ಪ್ರತ್ಯೇಕ ಅನುವಾದ ಹಂತಕ್ಕೆ ಜೋಡಿಸಲಾಯಿತು, ಇದು ಇಮೇಜಿಂಗ್ ಸಮಯದಲ್ಲಿ ದೂರದಿಂದಲೇ ಅದರ ಸ್ಥಾನವನ್ನು ಬದಲಾಯಿಸಲು ಸಾಧ್ಯವಾಯಿತು. ಆಯಸ್ಕಾಂತವನ್ನು ಮಾದರಿಯಿಂದ ಸರಿಸುಮಾರು 30 mm ಎತ್ತರದಲ್ಲಿ ಇರಿಸಿದಾಗ ಎಕ್ಸ್-ರೇ ಇಮೇಜ್ ಸ್ವಾಧೀನ ಪ್ರಾರಂಭವಾಗುತ್ತದೆ ಮತ್ತು ಚಿತ್ರಗಳನ್ನು ಸೆಕೆಂಡಿಗೆ 4 ಫ್ರೇಮ್‌ಗಳ ದರದಲ್ಲಿ ಪಡೆಯಲಾಗುತ್ತದೆ. ಚಿತ್ರಣದ ಸಮಯದಲ್ಲಿ, ಆಯಸ್ಕಾಂತವನ್ನು ಗಾಜಿನ ಕ್ಯಾಪಿಲ್ಲರಿ ಟ್ಯೂಬ್ ಹತ್ತಿರಕ್ಕೆ ತರಲಾಯಿತು (ಸುಮಾರು 1 ಮಿಮೀ ದೂರದಲ್ಲಿ) ಮತ್ತು ನಂತರ ಕ್ಷೇತ್ರದ ಬಲ ಮತ್ತು ಸ್ಥಾನದ ಪರಿಣಾಮಗಳನ್ನು ನಿರ್ಣಯಿಸಲು ಟ್ಯೂಬ್ ಉದ್ದಕ್ಕೂ ವರ್ಗಾಯಿಸಲಾಯಿತು.
ಮಾದರಿ xy ಅನುವಾದ ಹಂತದಲ್ಲಿ ಗಾಜಿನ ಕ್ಯಾಪಿಲ್ಲರಿಗಳಲ್ಲಿ MP ಮಾದರಿಗಳನ್ನು ಹೊಂದಿರುವ ಇನ್ ವಿಟ್ರೊ ಇಮೇಜಿಂಗ್ ಸೆಟಪ್. ಎಕ್ಸ್-ರೇ ಕಿರಣದ ಮಾರ್ಗವನ್ನು ಕೆಂಪು ಡ್ಯಾಶ್ ಮಾಡಿದ ರೇಖೆಯಿಂದ ಗುರುತಿಸಲಾಗಿದೆ.
MP ಗಳ ಇನ್ ವಿಟ್ರೊ ಗೋಚರತೆಯನ್ನು ಸ್ಥಾಪಿಸಿದ ನಂತರ, ಅವುಗಳಲ್ಲಿ ಒಂದು ಉಪವಿಭಾಗವನ್ನು ಕಾಡು-ರೀತಿಯ ಹೆಣ್ಣು ಅಲ್ಬಿನೋ ವಿಸ್ಟಾರ್ ಇಲಿಗಳಲ್ಲಿ (~12 ವಾರಗಳ ವಯಸ್ಸು, ~200 ಗ್ರಾಂ) ವಿವೊದಲ್ಲಿ ಪರೀಕ್ಷಿಸಲಾಯಿತು. 0.24 mg/kg ಮೆಡೆಟೊಮಿಡಿನ್ (ಡೊಮಿಟರ್®, ಜೆನೋಕ್, ಜಪಾನ್), 3.2 mg/kg ಮಿಡಜೋಲಮ್ (ಡಾರ್ಮಿಕಮ್®, ಆಸ್ಟೆಲ್ಲಾಸ್ ಫಾರ್ಮಾ, ಜಪಾನ್) ಮತ್ತು 4 mg/kg ಬ್ಯುಟರ್ಫನಾಲ್ (ವೆಟೋರ್ಫೇಲ್®, ಮೀಜಿ ಸೀಕಾ) ಇಲಿಗಳನ್ನು ಫಾರ್ಮಾ, ಜಪಾನ್‌ನ ಮಿಶ್ರಣದಿಂದ ಇಂಟ್ರಾಪೆರಿಟೋನಿಯಲ್ ಇಂಜೆಕ್ಷನ್ ಮೂಲಕ ಅರಿವಳಿಕೆ ಮಾಡಲಾಯಿತು. ಅರಿವಳಿಕೆಯ ನಂತರ, ಶ್ವಾಸನಾಳದ ಸುತ್ತಲಿನ ತುಪ್ಪಳವನ್ನು ತೆಗೆದುಹಾಕಿ, ಎಂಡೋಟ್ರಾಶಿಯಲ್ ಟ್ಯೂಬ್ ಅನ್ನು ಸೇರಿಸುವ ಮೂಲಕ (ET; 16 Ga iv ಕ್ಯಾನುಲಾ, ಟೆರುಮೊ BCT) ಮತ್ತು ದೇಹದ ಉಷ್ಣತೆಯನ್ನು ಕಾಪಾಡಿಕೊಳ್ಳಲು ಥರ್ಮಲ್ ಬ್ಯಾಗ್ ಹೊಂದಿರುವ ಕಸ್ಟಮ್-ನಿರ್ಮಿತ ಇಮೇಜಿಂಗ್ ಪ್ಲೇಟ್‌ನಲ್ಲಿ ಅವುಗಳನ್ನು ಸುಪೈನ್ ಆಗಿ ಇರಿಸುವ ಮೂಲಕ ಇಮೇಜಿಂಗ್ ಪ್ಲೇಟ್ ಅನ್ನು ನಂತರ ಇಮೇಜಿಂಗ್ ಬಾಕ್ಸ್‌ನಲ್ಲಿರುವ ಮಾದರಿ ಅನುವಾದ ಹಂತಕ್ಕೆ ಸ್ವಲ್ಪ ಕೋನದಲ್ಲಿ ಜೋಡಿಸಲಾಯಿತು. ಚಿತ್ರ 2a ನಲ್ಲಿ ತೋರಿಸಿರುವಂತೆ ಎಕ್ಸ್-ರೇ ಚಿತ್ರ.
(ಎ) ಸ್ಪ್ರಿಂಗ್-8 ಇಮೇಜಿಂಗ್ ಬಾಕ್ಸ್‌ನಲ್ಲಿ ವಿವೋ ಇಮೇಜಿಂಗ್ ಸೆಟಪ್‌ನಲ್ಲಿ, ಎಕ್ಸ್-ರೇ ಕಿರಣದ ಮಾರ್ಗವನ್ನು ಕೆಂಪು ಡ್ಯಾಶ್ ಮಾಡಿದ ರೇಖೆಯಿಂದ ಗುರುತಿಸಲಾಗಿದೆ. (ಬಿ, ಸಿ) ಶ್ವಾಸನಾಳದ ಮೇಲಿನ ಮ್ಯಾಗ್ನೆಟ್ ಸ್ಥಳೀಕರಣವನ್ನು ಎರಡು ಲಂಬಕೋನಲಿ ಅಳವಡಿಸಲಾದ ಐಪಿ ಕ್ಯಾಮೆರಾಗಳನ್ನು ಬಳಸಿಕೊಂಡು ದೂರದಿಂದಲೇ ನಿರ್ವಹಿಸಲಾಯಿತು. ಪರದೆಯ ಚಿತ್ರದ ಎಡಭಾಗದಲ್ಲಿ, ತಲೆಯನ್ನು ಹಿಡಿದಿರುವ ವೈರ್ ಲೂಪ್ ಅನ್ನು ಕಾಣಬಹುದು ಮತ್ತು ET ಟ್ಯೂಬ್‌ನೊಳಗೆ ವಿತರಣಾ ಕ್ಯಾನುಲಾವನ್ನು ಸ್ಥಳದಲ್ಲಿ ಕಾಣಬಹುದು.
100 μl ಗಾಜಿನ ಸಿರಿಂಜ್ ಅನ್ನು ಬಳಸಿಕೊಂಡು ರಿಮೋಟ್-ನಿಯಂತ್ರಿತ ಸಿರಿಂಜ್ ಪಂಪ್ ಸಿಸ್ಟಮ್ (UMP2, ವರ್ಲ್ಡ್ ಪ್ರಿಸಿಶನ್ ಇನ್ಸ್ಟ್ರುಮೆಂಟ್ಸ್, ಸರಸೋಟ, FL) ಅನ್ನು 30 Ga ಸೂಜಿಯ ಮೂಲಕ PE10 ಟ್ಯೂಬ್‌ಗೆ (OD 0.61 mm, ID 0.28 mm) ಸಂಪರ್ಕಿಸಲಾಗಿದೆ. ET ಟ್ಯೂಬ್ ಅನ್ನು ಸೇರಿಸುವಾಗ ತುದಿಯು ಶ್ವಾಸನಾಳದಲ್ಲಿ ಸರಿಯಾದ ಸ್ಥಾನದಲ್ಲಿದೆ ಎಂದು ಖಚಿತಪಡಿಸಿಕೊಳ್ಳಲು ಟ್ಯೂಬ್ ಅನ್ನು ಗುರುತಿಸಿ. ಮೈಕ್ರೋಪಂಪ್ ಬಳಸಿ, ಟ್ಯೂಬ್‌ನ ತುದಿಯನ್ನು ವಿತರಿಸಬೇಕಾದ MP ಮಾದರಿಯಲ್ಲಿ ಮುಳುಗಿಸುವಾಗ ಸಿರಿಂಜ್ ಪ್ಲಂಗರ್ ಅನ್ನು ಹಿಂತೆಗೆದುಕೊಳ್ಳಲಾಯಿತು. ನಂತರ ಲೋಡ್ ಮಾಡಲಾದ ವಿತರಣಾ ಟ್ಯೂಬ್ ಅನ್ನು ಎಂಡೋಟ್ರಾಶಿಯಲ್ ಟ್ಯೂಬ್‌ಗೆ ಸೇರಿಸಲಾಯಿತು, ತುದಿಯನ್ನು ನಮ್ಮ ನಿರೀಕ್ಷಿತ ಅನ್ವಯಿಕ ಕಾಂತೀಯ ಕ್ಷೇತ್ರದ ಬಲವಾದ ಭಾಗದಲ್ಲಿ ಇರಿಸಲಾಯಿತು. ನಮ್ಮ ಆರ್ಡುನೊ ಆಧಾರಿತ ಟೈಮಿಂಗ್ ಬಾಕ್ಸ್‌ಗೆ ಸಂಪರ್ಕಗೊಂಡಿರುವ ಉಸಿರಾಟದ ಪತ್ತೆಕಾರಕವನ್ನು ಬಳಸಿಕೊಂಡು ಚಿತ್ರ ಸ್ವಾಧೀನವನ್ನು ನಿಯಂತ್ರಿಸಲಾಯಿತು ಮತ್ತು ಎಲ್ಲಾ ಸಂಕೇತಗಳನ್ನು (ಉದಾ. ತಾಪಮಾನ, ಉಸಿರಾಟ, ಶಟರ್ ತೆರೆಯುವಿಕೆ/ಮುಚ್ಚುವಿಕೆ ಮತ್ತು ಚಿತ್ರ ಸ್ವಾಧೀನ) ಪವರ್‌ಲ್ಯಾಬ್ ಮತ್ತು ಲ್ಯಾಬ್‌ಚಾರ್ಟ್ (AD ಇನ್ಸ್ಟ್ರುಮೆಂಟ್ಸ್, ಸಿಡ್ನಿ, ಆಸ್ಟ್ರೇಲಿಯಾ) ಬಳಸಿ ದಾಖಲಿಸಲಾಗಿದೆ 22. ಚಿತ್ರಣ ಮಾಡುವಾಗ ಆವರಣವು ಪ್ರವೇಶಿಸಲಾಗದಿದ್ದಾಗ, ಎರಡು IP ಕ್ಯಾಮೆರಾಗಳನ್ನು (ಪ್ಯಾನಾಸೋನಿಕ್ BB-SC382) ಸರಿಸುಮಾರು 90° ನಲ್ಲಿ ಇರಿಸಲಾಗಿತ್ತು. ಪರಸ್ಪರ ಮತ್ತು ಚಿತ್ರಣದ ಸಮಯದಲ್ಲಿ ಶ್ವಾಸನಾಳಕ್ಕೆ ಸಂಬಂಧಿಸಿದಂತೆ ಆಯಸ್ಕಾಂತದ ಸ್ಥಾನವನ್ನು ಮೇಲ್ವಿಚಾರಣೆ ಮಾಡಲು ಬಳಸಲಾಗುತ್ತಿತ್ತು (ಚಿತ್ರ 2b,c). ಚಲನೆಯ ಕಲಾಕೃತಿಗಳನ್ನು ಕಡಿಮೆ ಮಾಡಲು, ಅಂತ್ಯ-ಉಬ್ಬರವಿಳಿತದ ಹರಿವಿನ ಪ್ರಸ್ಥಭೂಮಿಯ ಸಮಯದಲ್ಲಿ ಪ್ರತಿ ಉಸಿರಾಟಕ್ಕೆ ಒಂದು ಚಿತ್ರವನ್ನು ಪಡೆಯಲಾಯಿತು.
ಇಮೇಜಿಂಗ್ ಹೌಸಿಂಗ್‌ನ ಹೊರಗಿನಿಂದ ದೂರದಿಂದಲೇ ಇರಿಸಬಹುದಾದ ಎರಡನೇ ಹಂತಕ್ಕೆ ಒಂದು ಮ್ಯಾಗ್ನೆಟ್ ಅನ್ನು ಜೋಡಿಸಲಾಗಿದೆ. ವಿವಿಧ ಮ್ಯಾಗ್ನೆಟ್ ಸ್ಥಾನಗಳು ಮತ್ತು ಸಂರಚನೆಗಳನ್ನು ಪರೀಕ್ಷಿಸಲಾಯಿತು, ಅವುಗಳೆಂದರೆ: ಶ್ವಾಸನಾಳದ ಮೇಲೆ ಸರಿಸುಮಾರು 30° ಕೋನದಲ್ಲಿ ಜೋಡಿಸಲಾಗಿದೆ (ಚಿತ್ರ 2a ಮತ್ತು 3a ನಲ್ಲಿ ತೋರಿಸಲಾಗಿದೆ); ಒಂದು ಮ್ಯಾಗ್ನೆಟ್ ಪ್ರಾಣಿಯ ಮೇಲೆ ಮತ್ತು ಇನ್ನೊಂದು ಕೆಳಗೆ, ಧ್ರುವಗಳನ್ನು ಆಕರ್ಷಿಸಲು ಹೊಂದಿಸಲಾಗಿದೆ (ಚಿತ್ರ 3b); ಒಂದು ಮ್ಯಾಗ್ನೆಟ್ ಪ್ರಾಣಿಯ ಮೇಲೆ ಮತ್ತು ಇನ್ನೊಂದು ಕೆಳಗೆ, ಧ್ರುವಗಳನ್ನು ಹಿಮ್ಮೆಟ್ಟಿಸಲು ಹೊಂದಿಸಲಾಗಿದೆ (ಚಿತ್ರ 3c); ಮತ್ತು ಒಂದು ಮ್ಯಾಗ್ನೆಟ್ ಮೇಲೆ ಮತ್ತು ಶ್ವಾಸನಾಳಕ್ಕೆ ಲಂಬವಾಗಿ (ಚಿತ್ರ 3d). ಪ್ರಾಣಿ ಮತ್ತು ಮ್ಯಾಗ್ನೆಟ್ ಅನ್ನು ಕಾನ್ಫಿಗರ್ ಮಾಡಿದ ನಂತರ ಮತ್ತು ಪರೀಕ್ಷಿಸಬೇಕಾದ MP ಅನ್ನು ಸಿರಿಂಜ್ ಪಂಪ್‌ಗೆ ಲೋಡ್ ಮಾಡಿದ ನಂತರ, ಚಿತ್ರಗಳನ್ನು ಪಡೆದುಕೊಳ್ಳುವಾಗ 4 μl/ಸೆಕೆಂಡ್ ದರದಲ್ಲಿ 50 μl ಡೋಸ್ ಅನ್ನು ತಲುಪಿಸಿ. ನಂತರ ಮ್ಯಾಗ್ನೆಟ್ ಅನ್ನು ಶ್ವಾಸನಾಳದ ಉದ್ದಕ್ಕೂ ಹಿಂದಕ್ಕೆ ಮತ್ತು ಮುಂದಕ್ಕೆ ಅಥವಾ ಪಾರ್ಶ್ವವಾಗಿ ಚಲಿಸಲಾಗುತ್ತದೆ ಮತ್ತು ಚಿತ್ರಗಳನ್ನು ಪಡೆದುಕೊಳ್ಳುವುದನ್ನು ಮುಂದುವರಿಸಲಾಗುತ್ತದೆ.
ಇನ್ ವಿವೋ ಇಮೇಜಿಂಗ್‌ಗಾಗಿ ಮ್ಯಾಗ್ನೆಟ್ ಸಂರಚನೆ (ಎ) ಶ್ವಾಸನಾಳದ ಮೇಲೆ ಸರಿಸುಮಾರು 30° ಕೋನದಲ್ಲಿ ಒಂದೇ ಮ್ಯಾಗ್ನೆಟ್, (ಬಿ) ಆಕರ್ಷಿಸಲು ಎರಡು ಆಯಸ್ಕಾಂತಗಳನ್ನು ಹೊಂದಿಸಲಾಗಿದೆ, (ಸಿ) ಹಿಮ್ಮೆಟ್ಟಿಸಲು ಎರಡು ಆಯಸ್ಕಾಂತಗಳನ್ನು ಹೊಂದಿಸಲಾಗಿದೆ, (ಡಿ) ಶ್ವಾಸನಾಳದಲ್ಲಿ ಮೇಲೆ ಮತ್ತು ಲಂಬವಾಗಿರುವ ಒಂದೇ ಮ್ಯಾಗ್ನೆಟ್. ವೀಕ್ಷಕನು ಬಾಯಿಯಿಂದ ಶ್ವಾಸಕೋಶಕ್ಕೆ ಶ್ವಾಸನಾಳದ ಮೂಲಕ ನೋಡಿದನು, ಮತ್ತು ಎಕ್ಸ್-ಕಿರಣ ಕಿರಣವು ಇಲಿಯ ಎಡಭಾಗದ ಮೂಲಕ ಹಾದು ಬಲಭಾಗದಿಂದ ನಿರ್ಗಮಿಸಿತು. ಆಯಸ್ಕಾಂತವನ್ನು ವಾಯುಮಾರ್ಗದ ಉದ್ದಕ್ಕೂ ಅಥವಾ ಶ್ವಾಸನಾಳದ ಮೇಲೆ ಎಡ ಮತ್ತು ಬಲಕ್ಕೆ ಎಕ್ಸ್-ಕಿರಣ ಕಿರಣದ ದಿಕ್ಕಿನಲ್ಲಿ ಚಲಿಸಲಾಗುತ್ತದೆ.
ಗೊಂದಲಮಯ ಉಸಿರಾಟ ಮತ್ತು ಹೃದಯ ಚಲನೆಯ ಅನುಪಸ್ಥಿತಿಯಲ್ಲಿ ವಾಯುಮಾರ್ಗಗಳಲ್ಲಿನ ಕಣಗಳ ಗೋಚರತೆ ಮತ್ತು ನಡವಳಿಕೆಯನ್ನು ನಿರ್ಧರಿಸಲು ನಾವು ಪ್ರಯತ್ನಿಸಿದ್ದೇವೆ. ಆದ್ದರಿಂದ, ಇಮೇಜಿಂಗ್ ಅವಧಿಯ ಕೊನೆಯಲ್ಲಿ, ಪೆಂಟೊಬಾರ್ಬಿಟಲ್ ಮಿತಿಮೀರಿದ ಸೇವನೆಗಾಗಿ ಪ್ರಾಣಿಗಳನ್ನು ಮಾನವೀಯವಾಗಿ ಕೊಲ್ಲಲಾಯಿತು (ಸೊಮ್ನೊಪೆಂಟಿಲ್, ಪಿಟ್‌ಮನ್-ಮೂರ್, ವಾಷಿಂಗ್ಟನ್ ಕ್ರಾಸಿಂಗ್, ಯುಎಸ್‌ಎ; ~65 ಮಿಗ್ರಾಂ/ಕೆಜಿ ಐಪಿ). ಕೆಲವು ಪ್ರಾಣಿಗಳನ್ನು ಇಮೇಜಿಂಗ್ ಪ್ಲಾಟ್‌ಫಾರ್ಮ್‌ನಲ್ಲಿ ಬಿಡಲಾಯಿತು, ಮತ್ತು ಒಮ್ಮೆ ಉಸಿರಾಟ ಮತ್ತು ಹೃದಯ ಬಡಿತ ನಿಂತ ನಂತರ, ಇಮೇಜಿಂಗ್ ಪ್ರಕ್ರಿಯೆಯನ್ನು ಪುನರಾವರ್ತಿಸಲಾಯಿತು, ವಾಯುಮಾರ್ಗದ ಮೇಲ್ಮೈಯಲ್ಲಿ ಯಾವುದೇ MP ಗೋಚರಿಸದಿದ್ದರೆ MP ಯ ಹೆಚ್ಚುವರಿ ಡೋಸ್ ಅನ್ನು ಸೇರಿಸಲಾಯಿತು.
ಪಡೆದ ಚಿತ್ರಗಳನ್ನು ಸಮತಟ್ಟಾದ ಮತ್ತು ಕತ್ತಲೆಯ ಕ್ಷೇತ್ರಗಳಿಂದ ಸರಿಪಡಿಸಲಾಯಿತು ಮತ್ತು ನಂತರ MATLAB (R2020a, ದಿ ಮ್ಯಾಥ್‌ವರ್ಕ್ಸ್) ನಲ್ಲಿ ಬರೆಯಲಾದ ಕಸ್ಟಮ್ ಸ್ಕ್ರಿಪ್ಟ್ ಬಳಸಿ ಚಲನಚಿತ್ರವಾಗಿ (ಸೆಕೆಂಡಿಗೆ 20 ಫ್ರೇಮ್‌ಗಳು; ಉಸಿರಾಟದ ದರವನ್ನು ಅವಲಂಬಿಸಿ 15-25 × ಸಾಮಾನ್ಯ ವೇಗ) ಜೋಡಿಸಲಾಯಿತು.
ಎಲ್ಲಾ LV ಜೀನ್ ವೆಕ್ಟರ್ ವಿತರಣಾ ಅಧ್ಯಯನಗಳನ್ನು ಅಡಿಲೇಡ್ ವಿಶ್ವವಿದ್ಯಾಲಯದ ಪ್ರಯೋಗಾಲಯ ಪ್ರಾಣಿ ಸಂಶೋಧನಾ ಸೌಲಭ್ಯದಲ್ಲಿ ನಡೆಸಲಾಯಿತು ಮತ್ತು ಕಾಂತೀಯ ಕ್ಷೇತ್ರದ ಉಪಸ್ಥಿತಿಯಲ್ಲಿ LV-MP ವಿತರಣೆಯು ಇನ್ ವಿವೋ ಜೀನ್ ವರ್ಗಾವಣೆಯನ್ನು ಹೆಚ್ಚಿಸಬಹುದೇ ಎಂದು ನಿರ್ಣಯಿಸಲು SPring-8 ಪ್ರಯೋಗದ ಫಲಿತಾಂಶಗಳನ್ನು ಬಳಸುವ ಗುರಿಯನ್ನು ಹೊಂದಿತ್ತು. MP ಮತ್ತು ಕಾಂತೀಯ ಕ್ಷೇತ್ರದ ಪರಿಣಾಮಗಳನ್ನು ನಿರ್ಣಯಿಸಲು, ಎರಡು ಗುಂಪುಗಳ ಪ್ರಾಣಿಗಳಿಗೆ ಚಿಕಿತ್ಸೆ ನೀಡಲಾಯಿತು: ಒಂದು ಗುಂಪಿಗೆ ಆಯಸ್ಕಾಂತವನ್ನು ಇರಿಸಲಾದ LV-MP ನೀಡಲಾಯಿತು, ಮತ್ತು ಇನ್ನೊಂದು ಗುಂಪಿಗೆ ಆಯಸ್ಕಾಂತವಿಲ್ಲದೆ LV-MP ಹೊಂದಿರುವ ನಿಯಂತ್ರಣ ಗುಂಪನ್ನು ನೀಡಲಾಯಿತು.
LV ಜೀನ್ ವಾಹಕಗಳನ್ನು ಹಿಂದೆ ವಿವರಿಸಿದ ವಿಧಾನಗಳು 25, 26 ಬಳಸಿ ಉತ್ಪಾದಿಸಲಾಯಿತು. LacZ ವೆಕ್ಟರ್, ಕಾನ್ಸ್ಟಿಟ್ಯೂಟಿವ್ MPSV ಪ್ರವರ್ತಕ (LV-LacZ) ನಿಂದ ನಡೆಸಲ್ಪಡುವ ನ್ಯೂಕ್ಲಿಯರ್-ಸ್ಥಳೀಕರಿಸಿದ ಬೀಟಾ-ಗ್ಯಾಲಕ್ಟೋಸಿಡೇಸ್ ಜೀನ್ ಅನ್ನು ವ್ಯಕ್ತಪಡಿಸುತ್ತದೆ, ಇದು ಟ್ರಾನ್ಸ್‌ಡ್ಯೂಸ್ಡ್ ಕೋಶಗಳಲ್ಲಿ ನೀಲಿ ಪ್ರತಿಕ್ರಿಯಾ ಉತ್ಪನ್ನವನ್ನು ಉತ್ಪಾದಿಸುತ್ತದೆ, ಶ್ವಾಸಕೋಶದ ಅಂಗಾಂಶ ಮುಂಭಾಗಗಳು ಮತ್ತು ಅಂಗಾಂಶ ವಿಭಾಗಗಳಲ್ಲಿ ಗೋಚರಿಸುತ್ತದೆ. TU/ml ನಲ್ಲಿ ಟೈಟರ್ ಅನ್ನು ಲೆಕ್ಕಾಚಾರ ಮಾಡಲು ಹೆಮೋಸೈಟೋಮೀಟರ್‌ನೊಂದಿಗೆ ಲ್ಯಾಕ್‌Z ಪಾಸಿಟಿವ್ ಕೋಶಗಳ ಸಂಖ್ಯೆಯನ್ನು ಹಸ್ತಚಾಲಿತವಾಗಿ ಎಣಿಸುವ ಮೂಲಕ ಕೋಶ ಸಂಸ್ಕೃತಿಗಳಲ್ಲಿ ಟೈಟರೇಶನ್ ಅನ್ನು ನಡೆಸಲಾಯಿತು. ವಾಹಕಗಳನ್ನು -80 °C ನಲ್ಲಿ ಕ್ರಯೋಪ್ರಿಸರ್ವ್ ಮಾಡಲಾಗುತ್ತದೆ, ಬಳಕೆಗೆ ಮೊದಲು ಕರಗಿಸಲಾಗುತ್ತದೆ ಮತ್ತು 1:1 ಅನುಪಾತದಲ್ಲಿ ಮಿಶ್ರಣ ಮಾಡುವ ಮೂಲಕ ಮತ್ತು ವಿತರಣೆಗೆ ಮೊದಲು ಕನಿಷ್ಠ 30 ನಿಮಿಷಗಳ ಕಾಲ ಮಂಜುಗಡ್ಡೆಯ ಮೇಲೆ ಕಾವುಕೊಡುವ ಮೂಲಕ ಕಾಂಬಿಮ್ಯಾಗ್‌ಗೆ ಬಂಧಿಸಲಾಗುತ್ತದೆ.
ಸಾಮಾನ್ಯ ಸ್ಪ್ರಾಗ್ ಡಾವ್ಲಿ ಇಲಿಗಳಿಗೆ (n = 3/ಗುಂಪು, ~2-3) 0.4 mg/kg ಮೆಡೆಟೊಮಿಡಿನ್ (ಡೊಮಿಟರ್, ಇಲಿಯಮ್, ಆಸ್ಟ್ರೇಲಿಯಾ) ಮತ್ತು 60 mg/kg ಕೆಟಮೈನ್ (ಇಲಿಯಮ್, ಆಸ್ಟ್ರೇಲಿಯಾ) ತಿಂಗಳ ವಯಸ್ಸಿನ) ip) ಇಂಜೆಕ್ಷನ್ ಮತ್ತು 16 Ga iv ಕ್ಯಾನುಲಾದೊಂದಿಗೆ ಶಸ್ತ್ರಚಿಕಿತ್ಸೆಯಲ್ಲದ ಮೌಖಿಕ ಕ್ಯಾನುಲೇಷನ್ ಮಿಶ್ರಣದೊಂದಿಗೆ ಪೆರಿಟೋನಿಯಲ್ ಆಗಿ ಅರಿವಳಿಕೆ ನೀಡಲಾಯಿತು. ಶ್ವಾಸನಾಳದ ವಾಯುಮಾರ್ಗದ ಅಂಗಾಂಶವು LV ಟ್ರಾನ್ಸ್‌ಡಕ್ಷನ್ ಅನ್ನು ಪಡೆಯುತ್ತದೆ ಎಂದು ಖಚಿತಪಡಿಸಿಕೊಳ್ಳಲು, ನಮ್ಮ ಹಿಂದೆ ವಿವರಿಸಿದ ಯಾಂತ್ರಿಕ ಪರ್ಟರ್ಬೇಶನ್ ಪ್ರೋಟೋಕಾಲ್ ಅನ್ನು ಬಳಸಿಕೊಂಡು ಅದನ್ನು ನಿಯಮಾಧೀನಗೊಳಿಸಲಾಯಿತು, ಇದರಲ್ಲಿ ಶ್ವಾಸನಾಳದ ವಾಯುಮಾರ್ಗದ ಮೇಲ್ಮೈಯನ್ನು ತಂತಿಯ ಬುಟ್ಟಿಯಿಂದ ಅಕ್ಷೀಯವಾಗಿ ಉಜ್ಜಲಾಯಿತು (N-ಸರ್ಕಲ್, ನಿಟಿನಾಲ್ ಟಿಪ್‌ಲೆಸ್ ಸ್ಟೋನ್ ಎಕ್ಸ್‌ಟ್ರಾಕ್ಟರ್ NTSE-022115) -UDH, ಕುಕ್ ಮೆಡಿಕಲ್, USA) 30 s28. ನಂತರ LV-MP ಯ ಟ್ರ್ಯಾಶಿಯಲ್ ಆಡಳಿತವನ್ನು ಪರ್ಟರ್ಬೇಶನ್ ನಂತರ ಸುಮಾರು 10 ನಿಮಿಷಗಳ ನಂತರ ಜೈವಿಕ ಸುರಕ್ಷತಾ ಕ್ಯಾಬಿನೆಟ್‌ನಲ್ಲಿ ನಡೆಸಲಾಯಿತು.
ಈ ಪ್ರಯೋಗದಲ್ಲಿ ಬಳಸಲಾದ ಕಾಂತೀಯ ಕ್ಷೇತ್ರವನ್ನು ಇನ್ ವಿವೋ ಎಕ್ಸ್-ರೇ ಇಮೇಜಿಂಗ್ ಅಧ್ಯಯನದಂತೆಯೇ ಕಾನ್ಫಿಗರ್ ಮಾಡಲಾಗಿದೆ, ಡಿಸ್ಟಿಲೇಷನ್ ಸ್ಟೆಂಟ್ ಕ್ಲಿಪ್‌ಗಳನ್ನು ಬಳಸಿಕೊಂಡು ಶ್ವಾಸನಾಳದ ಮೇಲೆ ಹಿಡಿದಿರುವ ಅದೇ ಆಯಸ್ಕಾಂತಗಳೊಂದಿಗೆ (ಚಿತ್ರ 4). ಹಿಂದೆ ವಿವರಿಸಿದಂತೆ ಜೆಲ್ ತುದಿಯನ್ನು ಹೊಂದಿರುವ ಪೈಪೆಟ್ ಬಳಸಿ 50 μl ಪರಿಮಾಣ (2 × 25 μl ಅಲಿಕೋಟ್‌ಗಳು) LV-MP ಅನ್ನು ಶ್ವಾಸನಾಳಕ್ಕೆ (n = 3 ಪ್ರಾಣಿಗಳು) ತಲುಪಿಸಲಾಯಿತು. ನಿಯಂತ್ರಣ ಗುಂಪು (n = 3 ಪ್ರಾಣಿಗಳು) ಮ್ಯಾಗ್ನೆಟ್ ಅನ್ನು ಬಳಸದೆ ಅದೇ LV-MP ಗಳನ್ನು ಸ್ವೀಕರಿಸಿತು. ಇನ್ಫ್ಯೂಷನ್ ಪೂರ್ಣಗೊಂಡ ನಂತರ, ಕ್ಯಾನುಲಾವನ್ನು ET ಟ್ಯೂಬ್‌ನಿಂದ ತೆಗೆದುಹಾಕಲಾಗುತ್ತದೆ ಮತ್ತು ಪ್ರಾಣಿಯನ್ನು ಹೊರಹಾಕಲಾಗುತ್ತದೆ. ಮ್ಯಾಗ್ನೆಟ್ 10 ನಿಮಿಷಗಳ ಕಾಲ ಸ್ಥಳದಲ್ಲಿಯೇ ಇರುತ್ತದೆ, ನಂತರ ಅದನ್ನು ತೆಗೆದುಹಾಕಲಾಗುತ್ತದೆ. ಇಲಿಗಳು ಸಬ್ಕ್ಯುಟೇನಿಯಸ್ ಡೋಸ್ ಮೆಲೊಕ್ಸಿಕಮ್ (1 ಮಿಲಿ/ಕೆಜಿ) (ಇಲಿಯಮ್, ಆಸ್ಟ್ರೇಲಿಯಾ) ಅನ್ನು ಪಡೆದರು, ನಂತರ 1 ಮಿಗ್ರಾಂ/ಕೆಜಿ ಅಟಿಪಮಾಜೋಲ್ ಹೈಡ್ರೋಕ್ಲೋರೈಡ್ (ಆಂಟಿಸೆಡಾನ್, ಜೊಯೆಟಿಸ್, ಆಸ್ಟ್ರೇಲಿಯಾ) ನ ಐಪಿ ಇಂಜೆಕ್ಷನ್ ಮೂಲಕ ಅರಿವಳಿಕೆಯನ್ನು ಹಿಮ್ಮುಖಗೊಳಿಸಲಾಯಿತು. ಇಲಿಗಳನ್ನು ಬೆಚ್ಚಗಿಡಲಾಯಿತು ಮತ್ತು ಅರಿವಳಿಕೆಯಿಂದ ಸಂಪೂರ್ಣವಾಗಿ ಚೇತರಿಸಿಕೊಳ್ಳುವವರೆಗೆ ಮೇಲ್ವಿಚಾರಣೆ ಮಾಡಲಾಯಿತು.
ಜೈವಿಕ ಸುರಕ್ಷತಾ ಕ್ಯಾಬಿನೆಟ್‌ನಲ್ಲಿ LV-MP ವಿತರಣಾ ಸಾಧನ. ET ಟ್ಯೂಬ್‌ನ ತಿಳಿ ಬೂದು ಬಣ್ಣದ ಲೂಯರ್ ಹಬ್ ಬಾಯಿಯಿಂದ ಚಾಚಿಕೊಂಡಿರುವುದನ್ನು ಕಾಣಬಹುದು ಮತ್ತು ಚಿತ್ರದಲ್ಲಿ ತೋರಿಸಿರುವ ಪೈಪೆಟ್‌ನ ಜೆಲ್ ತುದಿಯನ್ನು ET ಟ್ಯೂಬ್ ಮೂಲಕ ಶ್ವಾಸನಾಳದೊಳಗೆ ಅಪೇಕ್ಷಿತ ಆಳಕ್ಕೆ ಸೇರಿಸಲಾಗುತ್ತದೆ.
LV-MP ಡೋಸಿಂಗ್ ಕಾರ್ಯವಿಧಾನದ ಒಂದು ವಾರದ ನಂತರ, ಪ್ರಾಣಿಗಳನ್ನು 100% CO2 ಇನ್ಹಲೇಷನ್ ಮೂಲಕ ಮಾನವೀಯವಾಗಿ ಕೊಲ್ಲಲಾಯಿತು ಮತ್ತು ನಮ್ಮ ಪ್ರಮಾಣಿತ X-gal ಚಿಕಿತ್ಸೆಯನ್ನು ಬಳಸಿಕೊಂಡು LacZ ಅಭಿವ್ಯಕ್ತಿಯನ್ನು ನಿರ್ಣಯಿಸಲಾಯಿತು. ಎಂಡೋಟ್ರಾಶಿಯಲ್ ಟ್ಯೂಬ್ ನಿಯೋಜನೆಯಿಂದ ಯಾವುದೇ ಯಾಂತ್ರಿಕ ಹಾನಿ ಅಥವಾ ದ್ರವ ಧಾರಣವನ್ನು ವಿಶ್ಲೇಷಣೆಯಲ್ಲಿ ಸೇರಿಸಲಾಗಿಲ್ಲ ಎಂದು ಖಚಿತಪಡಿಸಿಕೊಳ್ಳಲು ಮೂರು ಕಾಡಲ್ ಹೆಚ್ಚಿನ ಕಾರ್ಟಿಲ್ಯಾಜಿನಸ್ ಉಂಗುರಗಳನ್ನು ತೆಗೆದುಹಾಕಲಾಯಿತು. ವಿಶ್ಲೇಷಣೆಗಾಗಿ ಎರಡು ಭಾಗಗಳನ್ನು ರಚಿಸಲು ಪ್ರತಿಯೊಂದು ಶ್ವಾಸನಾಳವನ್ನು ಉದ್ದವಾಗಿ ಕತ್ತರಿಸಲಾಯಿತು ಮತ್ತು ಲುಮಿನಲ್ ಮೇಲ್ಮೈಯನ್ನು ದೃಶ್ಯೀಕರಿಸಲು ಮಿನುಟಿಯನ್ ಸೂಜಿ (ಫೈನ್ ಸೈನ್ಸ್ ಟೂಲ್ಸ್) ಬಳಸಿ ಸಿಲಿಕೋನ್ ರಬ್ಬರ್ (ಸಿಲ್ಗಾರ್ಡ್, ಡೌ ಇಂಕ್) ಹೊಂದಿರುವ ಭಕ್ಷ್ಯದಲ್ಲಿ ಅವುಗಳನ್ನು ಜೋಡಿಸಲಾಯಿತು. ಟ್ರಾನ್ಸ್‌ಡ್ಯೂಸ್ಡ್ ಕೋಶಗಳ ವಿತರಣೆ ಮತ್ತು ಮಾದರಿಯನ್ನು ಡಿಜಿಲೈಟ್ ಕ್ಯಾಮೆರಾ ಮತ್ತು ಟಿಕ್ಯಾಪ್ಚರ್ ಸಾಫ್ಟ್‌ವೇರ್ (ಟಕ್ಸೆನ್ ಫೋಟೊನಿಕ್ಸ್, ಚೀನಾ) ಹೊಂದಿರುವ ನಿಕಾನ್ ಮೈಕ್ರೋಸ್ಕೋಪ್ (SMZ1500) ಬಳಸಿ ಮುಂಭಾಗದ ಛಾಯಾಗ್ರಹಣದಿಂದ ದೃಢಪಡಿಸಲಾಯಿತು. ಚಿತ್ರಗಳನ್ನು 20x ವರ್ಧನೆಯಲ್ಲಿ (ಶ್ವಾಸನಾಳದ ಪೂರ್ಣ ಅಗಲಕ್ಕೆ ಅತ್ಯುನ್ನತ ಸೆಟ್ಟಿಂಗ್ ಸೇರಿದಂತೆ) ಪಡೆಯಲಾಯಿತು, ಶ್ವಾಸನಾಳದ ಸಂಪೂರ್ಣ ಉದ್ದವನ್ನು ಹಂತ-ಹಂತವಾಗಿ ಚಿತ್ರಿಸಲಾಗಿದೆ, ಚಿತ್ರಕ್ಕೆ ಅವಕಾಶ ನೀಡಲು ಪ್ರತಿ ಚಿತ್ರದ ನಡುವೆ ಸಾಕಷ್ಟು ಅತಿಕ್ರಮಣವನ್ನು ಖಚಿತಪಡಿಸುತ್ತದೆ. "ಹೊಲಿಗೆ". ನಂತರ ಪ್ರತಿ ಶ್ವಾಸನಾಳದಿಂದ ಚಿತ್ರಗಳನ್ನು ಇಮೇಜ್ ಕಾಂಪೋಸಿಟ್ ಎಡಿಟರ್ v2.0.3 (ಮೈಕ್ರೋಸಾಫ್ಟ್ ರಿಸರ್ಚ್) ಬಳಸಿಕೊಂಡು ಸಮತಲ ಚಲನೆಯ ಅಲ್ಗಾರಿದಮ್ ಅನ್ನು ಬಳಸಿಕೊಂಡು ಒಂದೇ ಸಂಯೋಜಿತ ಚಿತ್ರವಾಗಿ ಜೋಡಿಸಲಾಯಿತು. ಪ್ರತಿ ಪ್ರಾಣಿಯಿಂದ ಶ್ವಾಸನಾಳದ ಸಂಯೋಜಿತ ಚಿತ್ರಗಳಲ್ಲಿನ LacZ ಅಭಿವ್ಯಕ್ತಿ ಪ್ರದೇಶಗಳನ್ನು ಹಿಂದೆ ವಿವರಿಸಿದಂತೆ ಸ್ವಯಂಚಾಲಿತ MATLAB ಸ್ಕ್ರಿಪ್ಟ್ (R2020a, MathWorks) ಬಳಸಿ ಪ್ರಮಾಣೀಕರಿಸಲಾಯಿತು, 0.35 < Hue < 0.58, ಸ್ಯಾಚುರೇಶನ್ > 0.15, ಮತ್ತು ಮೌಲ್ಯ < 0.7 ಸೆಟ್ಟಿಂಗ್‌ಗಳನ್ನು ಬಳಸಿ. ಅಂಗಾಂಶದ ಬಾಹ್ಯರೇಖೆಗಳನ್ನು ಪತ್ತೆಹಚ್ಚುವ ಮೂಲಕ, ಅಂಗಾಂಶ ಪ್ರದೇಶವನ್ನು ಗುರುತಿಸಲು ಮತ್ತು ಶ್ವಾಸನಾಳದ ಅಂಗಾಂಶದ ಹೊರಗಿನಿಂದ ಯಾವುದೇ ತಪ್ಪು ಪತ್ತೆಗಳನ್ನು ತಡೆಗಟ್ಟಲು ಪ್ರತಿ ಸಂಯೋಜಿತ ಚಿತ್ರಕ್ಕೆ GIMP v2.10.24 ನಲ್ಲಿ ಮುಖವಾಡವನ್ನು ಹಸ್ತಚಾಲಿತವಾಗಿ ರಚಿಸಲಾಯಿತು. ಪ್ರತಿ ಪ್ರಾಣಿಯಿಂದ ಎಲ್ಲಾ ಸಂಯೋಜಿತ ಚಿತ್ರಗಳಿಂದ ಕಲೆ ಹಾಕಿದ ಪ್ರದೇಶಗಳನ್ನು ಒಟ್ಟುಗೂಡಿಸಿ ಆ ಪ್ರಾಣಿಗೆ ಒಟ್ಟು ಕಲೆ ಹಾಕಿದ ಪ್ರದೇಶವನ್ನು ಉತ್ಪಾದಿಸಲಾಯಿತು. ನಂತರ ಸಾಮಾನ್ಯೀಕರಿಸಿದ ಪ್ರದೇಶವನ್ನು ಉತ್ಪಾದಿಸಲು ಕಲೆ ಹಾಕಿದ ಪ್ರದೇಶವನ್ನು ಒಟ್ಟು ಮುಖವಾಡ ಪ್ರದೇಶದಿಂದ ಭಾಗಿಸಲಾಯಿತು.
ಪ್ರತಿಯೊಂದು ಶ್ವಾಸನಾಳವನ್ನು ಪ್ಯಾರಾಫಿನ್‌ನಲ್ಲಿ ಹುದುಗಿಸಲಾಯಿತು ಮತ್ತು 5 μm ವಿಭಾಗಗಳನ್ನು ಕತ್ತರಿಸಲಾಯಿತು. ವಿಭಾಗಗಳನ್ನು 5 ನಿಮಿಷಗಳ ಕಾಲ ತಟಸ್ಥ ವೇಗದ ಕೆಂಪು ಬಣ್ಣದಿಂದ ಪ್ರತಿ-ಬಣ್ಣ ಮಾಡಲಾಯಿತು ಮತ್ತು ನಿಕಾನ್ ಎಕ್ಲಿಪ್ಸ್ E400 ಮೈಕ್ರೋಸ್ಕೋಪ್, DS-Fi3 ಕ್ಯಾಮೆರಾ ಮತ್ತು NIS ಎಲಿಮೆಂಟ್ ಕ್ಯಾಪ್ಚರ್ ಸಾಫ್ಟ್‌ವೇರ್ (ಆವೃತ್ತಿ 5.20.00) ಬಳಸಿ ಚಿತ್ರಗಳನ್ನು ಪಡೆಯಲಾಯಿತು.
ಎಲ್ಲಾ ಅಂಕಿಅಂಶಗಳ ವಿಶ್ಲೇಷಣೆಗಳನ್ನು ಗ್ರಾಫ್‌ಪ್ಯಾಡ್ ಪ್ರಿಸಂ v9 (ಗ್ರಾಫ್‌ಪ್ಯಾಡ್ ಸಾಫ್ಟ್‌ವೇರ್, ಇಂಕ್.) ನಲ್ಲಿ ನಡೆಸಲಾಯಿತು. ಅಂಕಿಅಂಶಗಳ ಮಹತ್ವವನ್ನು p ≤ 0.05 ನಲ್ಲಿ ಹೊಂದಿಸಲಾಗಿದೆ. ಶಾಪಿರೋ-ವಿಲ್ಕ್ ಪರೀಕ್ಷೆಯನ್ನು ಬಳಸಿಕೊಂಡು ಸಾಮಾನ್ಯತೆಯನ್ನು ಪರಿಶೀಲಿಸಲಾಯಿತು ಮತ್ತು ಲ್ಯಾಕ್‌ಝಡ್ ಕಲೆಗಳಲ್ಲಿನ ವ್ಯತ್ಯಾಸಗಳನ್ನು ಜೋಡಿಯಾಗದ ಟಿ-ಪರೀಕ್ಷೆಯನ್ನು ಬಳಸಿಕೊಂಡು ನಿರ್ಣಯಿಸಲಾಯಿತು.
ಕೋಷ್ಟಕ 1 ರಲ್ಲಿ ವಿವರಿಸಿದ ಆರು MP ಗಳನ್ನು PCXI ಬಳಸಿ ಪರೀಕ್ಷಿಸಲಾಯಿತು, ಮತ್ತು ಗೋಚರತೆಯನ್ನು ಕೋಷ್ಟಕ 2 ರಲ್ಲಿ ವಿವರಿಸಲಾಗಿದೆ. PCXI ಅಡಿಯಲ್ಲಿ ಎರಡು ಪಾಲಿಸ್ಟೈರೀನ್ MP ಗಳು (MP1 ಮತ್ತು MP2; ಕ್ರಮವಾಗಿ 18 μm ಮತ್ತು 0.25 μm) ಗೋಚರಿಸಲಿಲ್ಲ, ಆದರೆ ಉಳಿದ ಮಾದರಿಗಳನ್ನು ಗುರುತಿಸಬಹುದಾಗಿತ್ತು (ಉದಾಹರಣೆಗಳನ್ನು ಚಿತ್ರ 5 ರಲ್ಲಿ ತೋರಿಸಲಾಗಿದೆ).MP3 ಮತ್ತು MP4 (ಕ್ರಮವಾಗಿ 10-15% Fe3O4; 0.25 μm ಮತ್ತು 0.9 μm) ಮಸುಕಾಗಿ ಗೋಚರಿಸುತ್ತವೆ. ಪರೀಕ್ಷಿಸಲಾದ ಕೆಲವು ಚಿಕ್ಕ ಕಣಗಳನ್ನು ಹೊಂದಿದ್ದರೂ, MP5 (98% Fe3O4; 0.25 μm) ಹೆಚ್ಚು ಉಚ್ಚರಿಸಲಾಗುತ್ತದೆ. ಕಾಂಬಿಮ್ಯಾಗ್ ಉತ್ಪನ್ನ MP6 ಅನ್ನು ಗುರುತಿಸುವುದು ಕಷ್ಟ. ಎಲ್ಲಾ ಸಂದರ್ಭಗಳಲ್ಲಿ, ಆಯಸ್ಕಾಂತವನ್ನು ಕ್ಯಾಪಿಲ್ಲರಿಗೆ ಸಮಾನಾಂತರವಾಗಿ ಹಿಂದಕ್ಕೆ ಮತ್ತು ಮುಂದಕ್ಕೆ ಭಾಷಾಂತರಿಸುವ ಮೂಲಕ MP ಅನ್ನು ಪತ್ತೆಹಚ್ಚುವ ನಮ್ಮ ಸಾಮರ್ಥ್ಯವನ್ನು ಗಮನಾರ್ಹವಾಗಿ ಹೆಚ್ಚಿಸಲಾಯಿತು. ಆಯಸ್ಕಾಂತಗಳು ಕ್ಯಾಪಿಲ್ಲರಿಯಿಂದ ದೂರ ಹೋದಾಗ, ಕಣಗಳು ಉದ್ದವಾದ ತಂತಿಗಳಲ್ಲಿ ವಿಸ್ತರಿಸಲ್ಪಟ್ಟವು, ಆದರೆ ಆಯಸ್ಕಾಂತಗಳು ಹತ್ತಿರವಾದಂತೆ ಮತ್ತು ಕಾಂತೀಯ ಕ್ಷೇತ್ರದ ಬಲವು ಹೆಚ್ಚಾದಂತೆ, ಕಣಗಳು ಕ್ಯಾಪಿಲ್ಲರಿಯ ಮೇಲಿನ ಮೇಲ್ಮೈಗೆ ವಲಸೆ ಹೋದಂತೆ ಕಣಗಳ ತಂತಿಗಳು ಕಡಿಮೆಯಾಗುತ್ತವೆ (ಪೂರಕ ವೀಡಿಯೊ ನೋಡಿ). S1: MP4), ಮೇಲ್ಮೈಯ ಕಣ ಸಾಂದ್ರತೆಯನ್ನು ಹೆಚ್ಚಿಸುತ್ತದೆ. ಇದಕ್ಕೆ ವ್ಯತಿರಿಕ್ತವಾಗಿ, ಕ್ಯಾಪಿಲ್ಲರಿಯಿಂದ ಆಯಸ್ಕಾಂತವನ್ನು ತೆಗೆದುಹಾಕಿದಾಗ, ಕ್ಷೇತ್ರದ ಬಲವು ಕಡಿಮೆಯಾಗುತ್ತದೆ ಮತ್ತು MPಗಳು ಕ್ಯಾಪಿಲ್ಲರಿಯ ಮೇಲಿನ ಮೇಲ್ಮೈಯಿಂದ ವಿಸ್ತರಿಸುವ ಉದ್ದವಾದ ತಂತಿಗಳಾಗಿ ಮರುಹೊಂದಿಸಲ್ಪಡುತ್ತವೆ (ಪೂರಕ ವೀಡಿಯೊ S2:MP4 ನೋಡಿ). ಆಯಸ್ಕಾಂತವು ಚಲಿಸುವುದನ್ನು ನಿಲ್ಲಿಸಿದ ನಂತರ, ಕಣಗಳು ಸಮತೋಲನ ಸ್ಥಾನವನ್ನು ತಲುಪಿದ ನಂತರ ಸ್ವಲ್ಪ ಸಮಯದವರೆಗೆ ಚಲಿಸುತ್ತಲೇ ಇರುತ್ತವೆ. MP ಕ್ಯಾಪಿಲ್ಲರಿಯ ಮೇಲಿನ ಮೇಲ್ಮೈ ಕಡೆಗೆ ಮತ್ತು ದೂರ ಚಲಿಸುವಾಗ, ಕಾಂತೀಯ ಕಣಗಳು ಸಾಮಾನ್ಯವಾಗಿ ದ್ರವದ ಮೂಲಕ ಶಿಲಾಖಂಡರಾಶಿಗಳನ್ನು ಎಳೆಯುತ್ತವೆ.
PCXI ಅಡಿಯಲ್ಲಿ MP ಯ ಗೋಚರತೆಯು ಮಾದರಿಗಳ ನಡುವೆ ಗಮನಾರ್ಹವಾಗಿ ಬದಲಾಗುತ್ತದೆ. (a) MP3, (b) MP4, (c) MP5 ಮತ್ತು (d) MP6. ಇಲ್ಲಿ ತೋರಿಸಿರುವ ಎಲ್ಲಾ ಚಿತ್ರಗಳನ್ನು ಕ್ಯಾಪಿಲ್ಲರಿಯಿಂದ ನೇರವಾಗಿ ಸುಮಾರು 10 ಮಿಮೀ ಎತ್ತರದಲ್ಲಿರುವ ಮ್ಯಾಗ್ನೆಟ್‌ನೊಂದಿಗೆ ತೆಗೆದುಕೊಳ್ಳಲಾಗಿದೆ. ಸ್ಪಷ್ಟವಾದ ದೊಡ್ಡ ವೃತ್ತಗಳು ಕ್ಯಾಪಿಲ್ಲರಿಗಳಲ್ಲಿ ಸಿಕ್ಕಿಬಿದ್ದ ಗಾಳಿಯ ಗುಳ್ಳೆಗಳಾಗಿವೆ, ಇದು ಹಂತ ಕಾಂಟ್ರಾಸ್ಟ್ ಇಮೇಜಿಂಗ್‌ನ ಕಪ್ಪು ಮತ್ತು ಬಿಳಿ ಅಂಚಿನ ವೈಶಿಷ್ಟ್ಯಗಳನ್ನು ಸ್ಪಷ್ಟವಾಗಿ ತೋರಿಸುತ್ತದೆ. ಕೆಂಪು ಪೆಟ್ಟಿಗೆಯು ಕಾಂಟ್ರಾಸ್ಟ್-ವರ್ಧಿಸುವ ವರ್ಧನೆಯನ್ನು ಒಳಗೊಂಡಿದೆ. ಎಲ್ಲಾ ಅಂಕಿಗಳಲ್ಲಿನ ಮ್ಯಾಗ್ನೆಟ್ ಸ್ಕೀಮ್ಯಾಟಿಕ್ಸ್‌ನ ವ್ಯಾಸಗಳು ಅಳೆಯುವಂತಿಲ್ಲ ಮತ್ತು ತೋರಿಸಿದ್ದಕ್ಕಿಂತ ಸರಿಸುಮಾರು 100 ಪಟ್ಟು ದೊಡ್ಡದಾಗಿದೆ ಎಂಬುದನ್ನು ಗಮನಿಸಿ.
ಆಯಸ್ಕಾಂತವನ್ನು ಕ್ಯಾಪಿಲ್ಲರಿಯ ಮೇಲ್ಭಾಗದಲ್ಲಿ ಎಡ ಮತ್ತು ಬಲಕ್ಕೆ ಅನುವಾದಿಸಿದಾಗ, MP ಸ್ಟ್ರಿಂಗ್‌ನ ಕೋನವು ಆಯಸ್ಕಾಂತದೊಂದಿಗೆ ಹೊಂದಿಕೆಯಾಗಲು ಬದಲಾಗುತ್ತದೆ (ಚಿತ್ರ 6 ನೋಡಿ), ಹೀಗಾಗಿ ಕಾಂತೀಯ ಕ್ಷೇತ್ರದ ರೇಖೆಗಳನ್ನು ವಿವರಿಸುತ್ತದೆ. MP3-5 ಗಾಗಿ, ಸ್ವರಮೇಳವು ಮಿತಿ ಕೋನವನ್ನು ತಲುಪಿದ ನಂತರ, ಕಣಗಳನ್ನು ಕ್ಯಾಪಿಲ್ಲರಿಯ ಮೇಲಿನ ಮೇಲ್ಮೈಯಲ್ಲಿ ಎಳೆಯಲಾಗುತ್ತದೆ. ಇದು ಸಾಮಾನ್ಯವಾಗಿ MP ಗಳು ಕಾಂತೀಯ ಕ್ಷೇತ್ರವು ಪ್ರಬಲವಾಗಿರುವ ಸ್ಥಳಕ್ಕೆ ಹತ್ತಿರದಲ್ಲಿ ದೊಡ್ಡ ಗುಂಪುಗಳಾಗಿ ಗುಂಪುಗೂಡಲು ಕಾರಣವಾಗುತ್ತದೆ (ಪೂರಕ ವೀಡಿಯೊ S3:MP5 ನೋಡಿ). ಕ್ಯಾಪಿಲ್ಲರಿ ತುದಿಯ ಹತ್ತಿರ ಚಿತ್ರಿಸುವಾಗ ಇದು ವಿಶೇಷವಾಗಿ ಸ್ಪಷ್ಟವಾಗುತ್ತದೆ, ಇದು MP ಗಳು ದ್ರವ-ಗಾಳಿಯ ಇಂಟರ್ಫೇಸ್‌ನಲ್ಲಿ ಒಟ್ಟುಗೂಡಿಸಲು ಮತ್ತು ಕೇಂದ್ರೀಕರಿಸಲು ಕಾರಣವಾಗುತ್ತದೆ. MP3-5 ಗಿಂತ ಗ್ರಹಿಸಲು ಹೆಚ್ಚು ಕಷ್ಟಕರವಾಗಿದ್ದ MP6 ನಲ್ಲಿರುವ ಕಣಗಳನ್ನು ಆಯಸ್ಕಾಂತವು ಕ್ಯಾಪಿಲ್ಲರಿಯ ಉದ್ದಕ್ಕೂ ಚಲಿಸಿದಾಗ ಎಳೆಯಲಾಗಲಿಲ್ಲ, ಆದರೆ MP ಸ್ಟ್ರಿಂಗ್‌ಗಳು ಬೇರ್ಪಟ್ಟವು, ಕಣಗಳನ್ನು ವೀಕ್ಷಣಾ ಕ್ಷೇತ್ರದಲ್ಲಿ ಬಿಡುತ್ತವೆ (ಪೂರಕ ವೀಡಿಯೊ S4:MP6 ನೋಡಿ). ಕೆಲವು ಸಂದರ್ಭಗಳಲ್ಲಿ, ಆಯಸ್ಕಾಂತವನ್ನು ಇಮೇಜಿಂಗ್ ಸ್ಥಳದಿಂದ ಹೆಚ್ಚಿನ ದೂರಕ್ಕೆ ಚಲಿಸುವ ಮೂಲಕ ಅನ್ವಯಿಸಲಾದ ಕಾಂತೀಯ ಕ್ಷೇತ್ರವನ್ನು ಕಡಿಮೆಗೊಳಿಸಿದಾಗ, ಉಳಿದ ಯಾವುದೇ MP ಗಳು ಸ್ಟ್ರಿಂಗ್‌ನಲ್ಲಿ ಉಳಿದಿರುವಾಗ ಗುರುತ್ವಾಕರ್ಷಣೆಯಿಂದ ಟ್ಯೂಬ್‌ನ ಕೆಳಗಿನ ಮೇಲ್ಮೈಗೆ ನಿಧಾನವಾಗಿ ಇಳಿಯುತ್ತವೆ (ಪೂರಕ ವೀಡಿಯೊ S5: MP3 ನೋಡಿ).
ಆಯಸ್ಕಾಂತವು ಕ್ಯಾಪಿಲ್ಲರಿಯ ಮೇಲೆ ಬಲಕ್ಕೆ ಅನುವಾದಗೊಂಡಂತೆ MP ಸ್ಟ್ರಿಂಗ್‌ನ ಕೋನವು ಬದಲಾಗುತ್ತದೆ. (a) MP3, (b) MP4, (c) MP5 ಮತ್ತು (d) MP6. ಕೆಂಪು ಪೆಟ್ಟಿಗೆಯು ವ್ಯತಿರಿಕ್ತತೆಯನ್ನು ಹೆಚ್ಚಿಸುವ ವರ್ಧನೆಯನ್ನು ಒಳಗೊಂಡಿದೆ. ಪೂರಕ ವೀಡಿಯೊಗಳು ಈ ಸ್ಥಿರ ಚಿತ್ರಗಳಲ್ಲಿ ದೃಶ್ಯೀಕರಿಸಲಾಗದ ಪ್ರಮುಖ ಕಣ ರಚನೆ ಮತ್ತು ಕ್ರಿಯಾತ್ಮಕ ಮಾಹಿತಿಯನ್ನು ಬಹಿರಂಗಪಡಿಸುವುದರಿಂದ ಅವು ಮಾಹಿತಿಯುಕ್ತವಾಗಿವೆ ಎಂಬುದನ್ನು ಗಮನಿಸಿ.
ನಮ್ಮ ಪರೀಕ್ಷೆಗಳು ಶ್ವಾಸನಾಳದ ಉದ್ದಕ್ಕೂ ಆಯಸ್ಕಾಂತವನ್ನು ನಿಧಾನವಾಗಿ ಹಿಂದಕ್ಕೆ ಮತ್ತು ಮುಂದಕ್ಕೆ ಚಲಿಸುವುದರಿಂದ ಸಂಕೀರ್ಣ ಚಲನೆಯ ಸಂದರ್ಭದಲ್ಲಿ MP ಯ ದೃಶ್ಯೀಕರಣವನ್ನು ಸುಗಮಗೊಳಿಸುತ್ತದೆ ಎಂದು ತೋರಿಸಿದೆ. ಪಾಲಿಸ್ಟೈರೀನ್ ಮಣಿಗಳು (MP1 ಮತ್ತು MP2) ಕ್ಯಾಪಿಲ್ಲರಿಯಲ್ಲಿ ಗೋಚರಿಸದ ಕಾರಣ ಇನ್ ವಿವೋ ಪರೀಕ್ಷೆಯನ್ನು ನಡೆಸಲಾಗಿಲ್ಲ. ಉಳಿದ ನಾಲ್ಕು MP ಗಳಲ್ಲಿ ಪ್ರತಿಯೊಂದನ್ನು ಶ್ವಾಸನಾಳದ ಮೇಲೆ ಲಂಬದಿಂದ ಸುಮಾರು 30° ಕೋನದಲ್ಲಿ ಮ್ಯಾಗ್ನೆಟ್ ಉದ್ದನೆಯ ಅಕ್ಷದೊಂದಿಗೆ ವಿವೋದಲ್ಲಿ ಪರೀಕ್ಷಿಸಲಾಯಿತು (ಚಿತ್ರಗಳು 2b ಮತ್ತು 3a ನೋಡಿ), ಏಕೆಂದರೆ ಇದು ಉದ್ದವಾದ MP ಸರಪಳಿಗಳಿಗೆ ಕಾರಣವಾಯಿತು ಮತ್ತು ಮ್ಯಾಗ್ನೆಟ್ ಸಂರಚನೆಯನ್ನು ಕೊನೆಗೊಳಿಸಿದ್ದಕ್ಕಿಂತ ಹೆಚ್ಚು ಪರಿಣಾಮಕಾರಿಯಾಗಿದೆ. ಯಾವುದೇ ಜೀವಂತ ಪ್ರಾಣಿಗಳ ಶ್ವಾಸನಾಳದಲ್ಲಿ MP3, MP4 ಮತ್ತು MP6 ಪತ್ತೆಯಾಗಿಲ್ಲ. ಪ್ರಾಣಿಗಳನ್ನು ಮಾನವೀಯವಾಗಿ ಕೊಂದ ನಂತರ ಇಲಿ ವಾಯುಮಾರ್ಗಗಳನ್ನು ಚಿತ್ರಿಸಿದಾಗ, ಸಿರಿಂಜ್ ಪಂಪ್ ಬಳಸಿ ಹೆಚ್ಚುವರಿ ಪರಿಮಾಣವನ್ನು ಸೇರಿಸಿದಾಗಲೂ ಕಣಗಳು ಅಗೋಚರವಾಗಿರುತ್ತವೆ.MP5 ಅತ್ಯಧಿಕ ಕಬ್ಬಿಣದ ಆಕ್ಸೈಡ್ ಅಂಶವನ್ನು ಹೊಂದಿತ್ತು ಮತ್ತು ಅದು ಮಾತ್ರ ಗೋಚರಿಸುವ ಕಣವಾಗಿತ್ತು ಮತ್ತು ಆದ್ದರಿಂದ MP ಯ ಇನ್ ವಿವೋ ನಡವಳಿಕೆಯನ್ನು ನಿರ್ಣಯಿಸಲು ಮತ್ತು ನಿರೂಪಿಸಲು ಬಳಸಲಾಯಿತು.
MP ವಿತರಣೆಯ ಸಮಯದಲ್ಲಿ ಶ್ವಾಸನಾಳದ ಮೇಲೆ ಆಯಸ್ಕಾಂತವನ್ನು ಇರಿಸುವುದರಿಂದ ಅನೇಕ, ಆದರೆ ಎಲ್ಲಾ MP ಗಳು ವೀಕ್ಷಣಾ ಕ್ಷೇತ್ರದಲ್ಲಿ ಕೇಂದ್ರೀಕೃತವಾಗಿರುತ್ತವೆ. ಶ್ವಾಸನಾಳವನ್ನು ಪ್ರವೇಶಿಸುವ ಕಣಗಳನ್ನು ಮಾನವೀಯವಾಗಿ ತ್ಯಾಗ ಮಾಡಿದ ಪ್ರಾಣಿಗಳಲ್ಲಿ ಉತ್ತಮವಾಗಿ ಗಮನಿಸಬಹುದು. ಚಿತ್ರ 7 ಮತ್ತು ಪೂರಕ ವೀಡಿಯೊ S6: MP5 ವೆಂಟ್ರಲ್ ಶ್ವಾಸನಾಳದ ಮೇಲ್ಮೈಯಲ್ಲಿರುವ ಕಣಗಳ ತ್ವರಿತ ಕಾಂತೀಯ ಸೆರೆಹಿಡಿಯುವಿಕೆ ಮತ್ತು ಜೋಡಣೆಯನ್ನು ತೋರಿಸುತ್ತದೆ, MP ಗಳನ್ನು ಶ್ವಾಸನಾಳದ ಅಪೇಕ್ಷಿತ ಪ್ರದೇಶಗಳಿಗೆ ನಿರ್ದೇಶಿಸಬಹುದು ಎಂದು ಸೂಚಿಸುತ್ತದೆ. MP ವಿತರಣೆಯ ನಂತರ ಶ್ವಾಸನಾಳದ ಉದ್ದಕ್ಕೂ ಹೆಚ್ಚು ದೂರದಲ್ಲಿ ಹುಡುಕಿದಾಗ, ಕೆಲವು MP ಗಳು ಕ್ಯಾರಿನಾಕ್ಕೆ ಹತ್ತಿರದಲ್ಲಿ ಕಂಡುಬಂದವು, ಎಲ್ಲಾ MP ಗಳನ್ನು ಸಂಗ್ರಹಿಸಲು ಮತ್ತು ಉಳಿಸಿಕೊಳ್ಳಲು ಕಾಂತೀಯ ಕ್ಷೇತ್ರದ ಬಲವು ಸಾಕಾಗುವುದಿಲ್ಲ ಎಂದು ಸೂಚಿಸುತ್ತದೆ, ಏಕೆಂದರೆ ಅವುಗಳನ್ನು ದ್ರವ ಪ್ರಕ್ರಿಯೆಯ ಸಮಯದಲ್ಲಿ ಗರಿಷ್ಠ ಕಾಂತೀಯ ಕ್ಷೇತ್ರದ ಬಲದ ಪ್ರದೇಶದ ಮೂಲಕ ತಲುಪಿಸಲಾಯಿತು. ಆದಾಗ್ಯೂ, ಪ್ರಸವಾನಂತರದ MP ಸಾಂದ್ರತೆಗಳು ಚಿತ್ರಿಸಿದ ಪ್ರದೇಶದ ಸುತ್ತಲೂ ಹೆಚ್ಚಿದ್ದವು, ಅನ್ವಯಿಕ ಕಾಂತೀಯ ಕ್ಷೇತ್ರದ ಬಲವು ಅತ್ಯಧಿಕವಾಗಿರುವ ವಾಯುಮಾರ್ಗ ಪ್ರದೇಶಗಳಲ್ಲಿ ಅನೇಕ MP ಗಳು ಉಳಿದಿವೆ ಎಂದು ಸೂಚಿಸುತ್ತದೆ.
ಇತ್ತೀಚೆಗೆ ದಯಾಮರಣಕ್ಕೊಳಗಾದ ಇಲಿಯ ಶ್ವಾಸನಾಳಕ್ಕೆ MP5 ಅನ್ನು ತಲುಪಿಸುವ ಮೊದಲು ಮತ್ತು (b) ನಂತರದ ಚಿತ್ರಗಳು, ಆಯಸ್ಕಾಂತವು ಚಿತ್ರಣ ಪ್ರದೇಶದ ಮೇಲೆ ನೇರವಾಗಿ ಇರಿಸಲ್ಪಟ್ಟಿದೆ. ಚಿತ್ರಿಸಿದ ಪ್ರದೇಶವು ಎರಡು ಕಾರ್ಟಿಲೆಜ್ ಉಂಗುರಗಳ ನಡುವೆ ಇದೆ. MP ವಿತರಣೆಯ ಮೊದಲು, ವಾಯುಮಾರ್ಗದಲ್ಲಿ ಸ್ವಲ್ಪ ದ್ರವವಿದೆ. ಕೆಂಪು ಪೆಟ್ಟಿಗೆಯು ವ್ಯತಿರಿಕ್ತತೆಯನ್ನು ಹೆಚ್ಚಿಸುವ ವರ್ಧನೆಯನ್ನು ಒಳಗೊಂಡಿದೆ. ಈ ಚಿತ್ರಗಳು ಪೂರಕ ವೀಡಿಯೊ S6:MP5 ನಲ್ಲಿ ತೋರಿಸಿರುವ ವೀಡಿಯೊದಿಂದ ಬಂದವು.
ಶ್ವಾಸನಾಳದ ಉದ್ದಕ್ಕೂ ಆಯಸ್ಕಾಂತವನ್ನು ಇನ್ ವಿವೋದಲ್ಲಿ ಭಾಷಾಂತರಿಸುವುದರಿಂದ MP ಸರಪಳಿಯು ಕ್ಯಾಪಿಲ್ಲರಿಗಳಲ್ಲಿ ಕಂಡುಬರುವಂತೆಯೇ ವಾಯುಮಾರ್ಗ ಮೇಲ್ಮೈಯಲ್ಲಿ ಕೋನವನ್ನು ಬದಲಾಯಿಸಲು ಕಾರಣವಾಯಿತು (ಚಿತ್ರ 8 ಮತ್ತು ಪೂರಕ ವೀಡಿಯೊ S7:MP5 ನೋಡಿ). ಆದಾಗ್ಯೂ, ನಮ್ಮ ಅಧ್ಯಯನದಲ್ಲಿ, MP ಗಳನ್ನು ಜೀವಂತ ವಾಯುಮಾರ್ಗದ ಮೇಲ್ಮೈಯಲ್ಲಿ ಕ್ಯಾಪಿಲ್ಲರಿಗಳೊಂದಿಗೆ ಎಳೆಯಲು ಸಾಧ್ಯವಾಗಲಿಲ್ಲ. ಕೆಲವು ಸಂದರ್ಭಗಳಲ್ಲಿ, ಆಯಸ್ಕಾಂತವು ಎಡ ಮತ್ತು ಬಲಕ್ಕೆ ಚಲಿಸುವಾಗ MP ಸರಪಳಿಯು ಉದ್ದವಾಗುತ್ತದೆ. ಕುತೂಹಲಕಾರಿಯಾಗಿ, ಆಯಸ್ಕಾಂತವನ್ನು ಶ್ವಾಸನಾಳದ ಉದ್ದಕ್ಕೂ ರೇಖಾಂಶವಾಗಿ ಚಲಿಸಿದಾಗ ಕಣದ ದಾರವು ಮೇಲ್ಮೈ ದ್ರವ ಪದರದ ಆಳವನ್ನು ಬದಲಾಯಿಸುವಂತೆ ಕಾಣುತ್ತದೆ ಮತ್ತು ಆಯಸ್ಕಾಂತವನ್ನು ನೇರವಾಗಿ ಮೇಲಕ್ಕೆ ಚಲಿಸಿದಾಗ ಮತ್ತು ಕಣದ ದಾರವನ್ನು ಲಂಬ ಸ್ಥಾನಕ್ಕೆ ತಿರುಗಿಸಿದಾಗ ವಿಸ್ತರಿಸುತ್ತದೆ ಎಂದು ನಾವು ಕಂಡುಕೊಂಡಿದ್ದೇವೆ (ಪೂರಕ ವೀಡಿಯೊ S7 ನೋಡಿ). : MP5 0:09 ಕ್ಕೆ, ಕೆಳಗಿನ ಬಲಭಾಗದಲ್ಲಿ).ಆಯಸ್ಕಾಂತವನ್ನು ಶ್ವಾಸನಾಳದ ಮೇಲ್ಭಾಗದಲ್ಲಿ ಪಾರ್ಶ್ವವಾಗಿ (ಅಂದರೆ, ಶ್ವಾಸನಾಳದ ಉದ್ದಕ್ಕೂ ಅಲ್ಲ, ಪ್ರಾಣಿಗಳ ಎಡ ಅಥವಾ ಬಲಕ್ಕೆ) ಅನುವಾದಿಸಿದಾಗ ಚಲನೆಯ ವಿಶಿಷ್ಟ ಮಾದರಿ ಬದಲಾಯಿತು.ಕಣಗಳು ಚಲಿಸುವಾಗ ಇನ್ನೂ ಸ್ಪಷ್ಟವಾಗಿ ಗೋಚರಿಸುತ್ತಿದ್ದವು, ಆದರೆ ಶ್ವಾಸನಾಳದಿಂದ ಆಯಸ್ಕಾಂತವನ್ನು ತೆಗೆದುಹಾಕಿದಾಗ, ಕಣದ ತಂತಿಗಳ ತುದಿಗಳು ಗೋಚರಿಸುತ್ತಿದ್ದವು (0:08 ರಿಂದ ಪ್ರಾರಂಭವಾಗುವ ಪೂರಕ ವೀಡಿಯೊ S8:MP5 ನೋಡಿ).ಇದು ಗಾಜಿನ ಕ್ಯಾಪಿಲ್ಲರಿಯಲ್ಲಿ ಅನ್ವಯಿಕ ಕಾಂತೀಯ ಕ್ಷೇತ್ರದ ಅಡಿಯಲ್ಲಿ ನಾವು ಗಮನಿಸಿದ MP ನಡವಳಿಕೆಗೆ ಅನುಗುಣವಾಗಿರುತ್ತದೆ.
ಜೀವಂತ ಅರಿವಳಿಕೆ ಪಡೆದ ಇಲಿಯ ಶ್ವಾಸನಾಳದಲ್ಲಿ MP5 ಅನ್ನು ತೋರಿಸುವ ಉದಾಹರಣೆ ಚಿತ್ರಗಳು.(a) ಶ್ವಾಸನಾಳದ ಮೇಲೆ ಮತ್ತು ಎಡಕ್ಕೆ ಚಿತ್ರಗಳನ್ನು ಪಡೆಯಲು ಮ್ಯಾಗ್ನೆಟ್ ಅನ್ನು ಬಳಸಲಾಗುತ್ತದೆ, ನಂತರ (b) ಆಯಸ್ಕಾಂತವನ್ನು ಬಲಕ್ಕೆ ಸರಿಸಿದ ನಂತರ. ಕೆಂಪು ಪೆಟ್ಟಿಗೆಯು ವ್ಯತಿರಿಕ್ತತೆಯನ್ನು ಹೆಚ್ಚಿಸುವ ವರ್ಧನೆಯನ್ನು ಒಳಗೊಂಡಿದೆ.ಈ ಚಿತ್ರಗಳು ಪೂರಕ ವೀಡಿಯೊ S7:MP5 ನಲ್ಲಿ ತೋರಿಸಿರುವ ವೀಡಿಯೊದಿಂದ ಬಂದವು.
ಎರಡು ಧ್ರುವಗಳನ್ನು ಶ್ವಾಸನಾಳದ ಮೇಲೆ ಮತ್ತು ಕೆಳಗೆ ಉತ್ತರ-ದಕ್ಷಿಣ ದೃಷ್ಟಿಕೋನದಲ್ಲಿ ಕಾನ್ಫಿಗರ್ ಮಾಡಿದಾಗ (ಅಂದರೆ ಆಕರ್ಷಿಸುವ; ಚಿತ್ರ 3b), MP ಸ್ವರಮೇಳಗಳು ಉದ್ದವಾಗಿ ಕಾಣಿಸಿಕೊಂಡವು ಮತ್ತು ಬೆನ್ನಿನ ಶ್ವಾಸನಾಳದ ಮೇಲ್ಮೈಗಿಂತ ಹೆಚ್ಚಾಗಿ ಶ್ವಾಸನಾಳದ ಪಕ್ಕದ ಗೋಡೆಯ ಮೇಲೆ ನೆಲೆಗೊಂಡಿವೆ (ಪೂರಕ ವೀಡಿಯೊ S9:MP5 ನೋಡಿ). ಆದಾಗ್ಯೂ, ಡ್ಯುಯಲ್-ಮ್ಯಾಗ್ನೆಟ್ ಸಾಧನವನ್ನು ಬಳಸಿದಾಗ ದ್ರವ ವಿತರಣೆಯ ನಂತರ ಒಂದೇ ಸ್ಥಳದಲ್ಲಿ (ಅಂದರೆ, ಶ್ವಾಸನಾಳದ ಬೆನ್ನಿನ ಮೇಲ್ಮೈ) ಕಣಗಳ ಹೆಚ್ಚಿನ ಸಾಂದ್ರತೆಗಳು ಪತ್ತೆಯಾಗಲಿಲ್ಲ, ಇದು ಸಾಮಾನ್ಯವಾಗಿ ಏಕ-ಮ್ಯಾಗ್ನೆಟ್ ಸಾಧನವನ್ನು ಬಳಸಿದಾಗ ಸಂಭವಿಸುತ್ತದೆ. ನಂತರ ಒಂದು ಮ್ಯಾಗ್ನೆಟ್ ಅನ್ನು ಧ್ರುವಗಳನ್ನು ಹಿಮ್ಮೆಟ್ಟಿಸಲು ಕಾನ್ಫಿಗರ್ ಮಾಡಿದಾಗ (ಚಿತ್ರ 3c), ವಿತರಣೆಯ ನಂತರ ವೀಕ್ಷಣಾ ಕ್ಷೇತ್ರದಲ್ಲಿ ಗೋಚರಿಸುವ ಕಣಗಳ ಸಂಖ್ಯೆ ಹೆಚ್ಚಾಗುವುದಿಲ್ಲ. ಆಯಸ್ಕಾಂತಗಳನ್ನು ಕ್ರಮವಾಗಿ ಎಳೆಯುವ ಅಥವಾ ತಳ್ಳುವ ಹೆಚ್ಚಿನ ಕಾಂತೀಯ ಕ್ಷೇತ್ರದ ಸಾಮರ್ಥ್ಯಗಳಿಂದಾಗಿ ಡ್ಯುಯಲ್-ಮ್ಯಾಗ್ನೆಟ್ ಸಂರಚನೆಗಳ ಎರಡೂ ಸೆಟಪ್ ಸವಾಲಿನದ್ದಾಗಿದೆ. ನಂತರ ಸೆಟಪ್ ಅನ್ನು ವಾಯುಮಾರ್ಗಕ್ಕೆ ಸಮಾನಾಂತರವಾಗಿ ಒಂದೇ ಮ್ಯಾಗ್ನೆಟ್ ಆಗಿ ಬದಲಾಯಿಸಲಾಯಿತು ಆದರೆ ಕ್ಷೇತ್ರ ರೇಖೆಗಳು ಶ್ವಾಸನಾಳದ ಗೋಡೆಯನ್ನು ಆರ್ಥೋಗೋನಲ್ ಆಗಿ ದಾಟುವಂತೆ 90 ಡಿಗ್ರಿಗಳಲ್ಲಿ ವಾಯುಮಾರ್ಗದ ಮೂಲಕ ಹಾದುಹೋಗುತ್ತದೆ (ಚಿತ್ರ 3d), ಪಕ್ಕದ ಗೋಡೆಯ ಮೇಲೆ ಕಣಗಳ ಒಟ್ಟುಗೂಡಿಸುವಿಕೆಯನ್ನು ನಿರ್ಧರಿಸಲು ವಿನ್ಯಾಸಗೊಳಿಸಲಾದ ದೃಷ್ಟಿಕೋನ. ಗಮನಿಸಬಹುದು. ಆದಾಗ್ಯೂ, ಈ ಸಂರಚನೆಯಲ್ಲಿ, MP ಸಂಚಯನ ಅಥವಾ ಆಯಸ್ಕಾಂತ ಚಲನೆಯ ಯಾವುದೇ ಗುರುತಿಸಬಹುದಾದ ಚಲನೆ ಇರಲಿಲ್ಲ. ಈ ಎಲ್ಲಾ ಫಲಿತಾಂಶಗಳ ಆಧಾರದ ಮೇಲೆ, ಇನ್ ವಿವೋ ಜೀನ್ ಕ್ಯಾರಿಯರ್ ಅಧ್ಯಯನಗಳಿಗಾಗಿ ಏಕ-ಮ್ಯಾಗ್ನೆಟ್, 30-ಡಿಗ್ರಿ ಓರಿಯಂಟೇಶನ್ ಕಾನ್ಫಿಗರೇಶನ್ (ಚಿತ್ರ 3a) ಅನ್ನು ಆಯ್ಕೆ ಮಾಡಲಾಗಿದೆ.
ಮಾನವೀಯ ಹತ್ಯೆಯ ನಂತರ ಪ್ರಾಣಿಯನ್ನು ಪದೇ ಪದೇ ಚಿತ್ರಿಸಿದಾಗ, ಗೊಂದಲಮಯ ಅಂಗಾಂಶ ಚಲನೆಯ ಅನುಪಸ್ಥಿತಿಯು ಸ್ಪಷ್ಟವಾದ ಇಂಟರ್‌ಕಾಂಡ್ರಲ್ ಕ್ಷೇತ್ರದಲ್ಲಿ ಸೂಕ್ಷ್ಮ ಮತ್ತು ಚಿಕ್ಕ ಕಣ ರೇಖೆಗಳನ್ನು ಗ್ರಹಿಸಲು ಸಾಧ್ಯವಾಯಿತು, ಇದು ಆಯಸ್ಕಾಂತದ ಅನುವಾದ ಚಲನೆಗೆ ಅನುಗುಣವಾಗಿ "ಅಲುಗಾಡುತ್ತಿದೆ". ಆದಾಗ್ಯೂ, MP6 ಕಣಗಳ ಉಪಸ್ಥಿತಿ ಮತ್ತು ಚಲನೆಯನ್ನು ಇನ್ನೂ ಸ್ಪಷ್ಟವಾಗಿ ನೋಡಲು ಸಾಧ್ಯವಿಲ್ಲ.
LV-LacZ ಟೈಟರ್ 1.8 × 108 TU/ml ಆಗಿತ್ತು, ಮತ್ತು 1:1 ಕಾಂಬಿಮ್ಯಾಗ್ MP (MP6) ನೊಂದಿಗೆ ಬೆರೆಸಿದ ನಂತರ, ಪ್ರಾಣಿಗಳು 9 × 107 TU/ml LV ವಾಹನದ (ಅಂದರೆ 4.5 × 106 TU/rat) 50 μl ಶ್ವಾಸನಾಳದ ಪ್ರಮಾಣವನ್ನು ಪಡೆದವು. ).ಈ ಅಧ್ಯಯನಗಳಲ್ಲಿ, ಹೆರಿಗೆಯ ಸಮಯದಲ್ಲಿ ಆಯಸ್ಕಾಂತವನ್ನು ಅನುವಾದಿಸುವ ಬದಲು, ಕಾಂತೀಯ ಕ್ಷೇತ್ರದ ಅನುಪಸ್ಥಿತಿಯಲ್ಲಿ ವೆಕ್ಟರ್ ವಿತರಣೆಗೆ ಹೋಲಿಸಿದರೆ LV ಟ್ರಾನ್ಸ್‌ಡಕ್ಷನ್ (a) ಅನ್ನು ಸುಧಾರಿಸಬಹುದೇ ಎಂದು ನಿರ್ಧರಿಸಲು ನಾವು ಆಯಸ್ಕಾಂತವನ್ನು ಒಂದೇ ಸ್ಥಾನದಲ್ಲಿ ಸರಿಪಡಿಸಿದ್ದೇವೆ ಮತ್ತು (b) ಕೇಂದ್ರೀಕರಿಸಬಹುದೇ ವಾಯುಮಾರ್ಗ ಕೋಶಗಳನ್ನು ಮೇಲ್ಭಾಗದ ವಾಯುಮಾರ್ಗದ ಕಾಂತೀಯ ಗುರಿ ಪ್ರದೇಶಗಳಿಗೆ ವರ್ಗಾಯಿಸಲಾಗುತ್ತದೆ.
ಆಯಸ್ಕಾಂತಗಳ ಉಪಸ್ಥಿತಿ ಮತ್ತು LV ವೆಕ್ಟರ್‌ಗಳೊಂದಿಗೆ ಕಾಂಬಿಮ್ಯಾಗ್‌ನ ಸಂಯೋಜನೆಯು ಪ್ರಾಣಿಗಳ ಆರೋಗ್ಯದ ಮೇಲೆ ಪ್ರತಿಕೂಲ ಪರಿಣಾಮಗಳನ್ನು ಬೀರುವಂತೆ ಕಂಡುಬರಲಿಲ್ಲ, ನಮ್ಮ ಪ್ರಮಾಣಿತ LV ವೆಕ್ಟರ್ ವಿತರಣಾ ಪ್ರೋಟೋಕಾಲ್‌ನಂತೆ. ಯಾಂತ್ರಿಕ ಪ್ರಕ್ಷುಬ್ಧತೆಗೆ ಒಳಗಾದ ಶ್ವಾಸನಾಳದ ಪ್ರದೇಶದ ಮುಂಭಾಗದ ಚಿತ್ರಗಳು (ಪೂರಕ ಚಿತ್ರ 1) ಆಯಸ್ಕಾಂತ ಇದ್ದಾಗ LV-MP ಯೊಂದಿಗೆ ಚಿಕಿತ್ಸೆ ಪಡೆದ ಪ್ರಾಣಿಗಳ ಗುಂಪಿನಲ್ಲಿ ಗಮನಾರ್ಹವಾಗಿ ಹೆಚ್ಚಿನ ಮಟ್ಟದ ಟ್ರಾನ್ಸ್‌ಡಕ್ಷನ್ ಇತ್ತು ಎಂದು ಸೂಚಿಸಿತು (ಚಿತ್ರ 9a). ನಿಯಂತ್ರಣ ಗುಂಪಿನಲ್ಲಿ ಕೇವಲ ಸಣ್ಣ ಪ್ರಮಾಣದ ನೀಲಿ LacZ ಕಲೆಗಳು ಇದ್ದವು (ಚಿತ್ರ 9b). ಸಾಮಾನ್ಯೀಕರಿಸಿದ X-Gal ಬಣ್ಣದ ಪ್ರದೇಶಗಳ ಪ್ರಮಾಣೀಕರಣವು ಕಾಂತೀಯ ಕ್ಷೇತ್ರದ ಉಪಸ್ಥಿತಿಯಲ್ಲಿ LV-MP ಯ ಆಡಳಿತವು ಸರಿಸುಮಾರು 6 ಪಟ್ಟು ಸುಧಾರಣೆಯನ್ನು ಉಂಟುಮಾಡಿದೆ ಎಂದು ತೋರಿಸಿದೆ (ಚಿತ್ರ 9c).
ಕಾಂತೀಯ ಕ್ಷೇತ್ರದ ಉಪಸ್ಥಿತಿಯಲ್ಲಿ LV-MP (a) ಮತ್ತು ಕಾಂತೀಯತೆಯ ಅನುಪಸ್ಥಿತಿಯಲ್ಲಿ (b) ಶ್ವಾಸನಾಳದ ಟ್ರಾನ್ಸ್‌ಡಕ್ಷನ್ ಅನ್ನು ತೋರಿಸುವ ಸಂಯೋಜಿತ ಚಿತ್ರಗಳ ಉದಾಹರಣೆ. (c) ಮ್ಯಾಗ್ನೆಟ್ ಬಳಸುವಾಗ ಶ್ವಾಸನಾಳದೊಳಗೆ ಸಾಮಾನ್ಯೀಕರಿಸಿದ LacZ ಟ್ರಾನ್ಸ್‌ಡಕ್ಷನ್ ಪ್ರದೇಶದಲ್ಲಿ ಸಂಖ್ಯಾಶಾಸ್ತ್ರೀಯವಾಗಿ ಗಮನಾರ್ಹ ಸುಧಾರಣೆ (*p = 0.029, t-ಪರೀಕ್ಷೆ, n = 3 ಪ್ರತಿ ಗುಂಪಿಗೆ, ಸರಾಸರಿ ± SEM).
ತಟಸ್ಥ ವೇಗದ ಕೆಂಪು-ಬಣ್ಣದ ವಿಭಾಗಗಳು (ಉದಾಹರಣೆ ಪೂರಕ ಚಿತ್ರ 2 ರಲ್ಲಿ ತೋರಿಸಲಾಗಿದೆ) ಹಿಂದೆ ವರದಿ ಮಾಡಿದಂತೆ ಇದೇ ರೀತಿಯ ಮಾದರಿ ಮತ್ತು ಸ್ಥಳದಲ್ಲಿ LacZ-ಬಣ್ಣದ ಕೋಶಗಳನ್ನು ತೋರಿಸಿದೆ.
ವಾಯುಮಾರ್ಗ ಜೀನ್ ಚಿಕಿತ್ಸೆಗೆ ಒಂದು ಪ್ರಮುಖ ಸವಾಲು ಎಂದರೆ ವಾಹಕ ಕಣಗಳನ್ನು ಆಸಕ್ತಿಯ ಪ್ರದೇಶಗಳಿಗೆ ನಿಖರವಾಗಿ ಸ್ಥಳೀಕರಿಸುವುದು ಮತ್ತು ಗಾಳಿಯ ಹರಿವು ಮತ್ತು ಸಕ್ರಿಯ ಲೋಳೆಯ ತೆರವು ಉಪಸ್ಥಿತಿಯಲ್ಲಿ ಚಲಿಸುವ ಶ್ವಾಸಕೋಶದಲ್ಲಿ ಹೆಚ್ಚಿನ ಮಟ್ಟದ ಟ್ರಾನ್ಸ್‌ಡಕ್ಷನ್ ದಕ್ಷತೆಯನ್ನು ಸಾಧಿಸುವುದು. CF ವಾಯುಮಾರ್ಗ ಕಾಯಿಲೆಗೆ ಚಿಕಿತ್ಸೆ ನೀಡಲು ವಿನ್ಯಾಸಗೊಳಿಸಲಾದ LV ವಾಹಕಗಳಿಗೆ, ವಾಹಕ ವಾಯುಮಾರ್ಗಗಳೊಳಗೆ ವಾಹಕ ಕಣಗಳ ವಾಸದ ಸಮಯವನ್ನು ಹೆಚ್ಚಿಸುವುದು ಇಲ್ಲಿಯವರೆಗೆ ಅಸ್ಪಷ್ಟ ಗುರಿಯಾಗಿದೆ. ಕ್ಯಾಸ್ಟೆಲ್ಲಾನಿ ಮತ್ತು ಇತರರು ಗಮನಸೆಳೆದಂತೆ, ಟ್ರಾನ್ಸ್‌ಡಕ್ಷನ್ ಅನ್ನು ಸುಧಾರಿಸಲು ಕಾಂತೀಯ ಕ್ಷೇತ್ರಗಳ ಬಳಕೆಯು ಎಲೆಕ್ಟ್ರೋಪೊರೇಷನ್‌ನಂತಹ ಇತರ ಜೀನ್ ವಿತರಣಾ ವಿಧಾನಗಳಿಗೆ ಹೋಲಿಸಿದರೆ ಪ್ರಯೋಜನಗಳನ್ನು ಹೊಂದಿದೆ, ಏಕೆಂದರೆ ಇದು ಸರಳತೆ, ವೆಚ್ಚ-ಪರಿಣಾಮಕಾರಿತ್ವ, ವಿತರಣಾ ಸ್ಥಳೀಕರಣ, ಹೆಚ್ಚಿದ ದಕ್ಷತೆ ಮತ್ತು ಕಡಿಮೆ ಕಾವು ಸಮಯಗಳು ಮತ್ತು ಬಹುಶಃ ಸಣ್ಣ ವಾಹಕ ಪ್ರಮಾಣವನ್ನು ಸಂಯೋಜಿಸಬಹುದು. ಆದಾಗ್ಯೂ, ಬಾಹ್ಯ ಕಾಂತೀಯ ಶಕ್ತಿಗಳ ಪ್ರಭಾವದ ಅಡಿಯಲ್ಲಿ ವಾಯುಮಾರ್ಗಗಳಲ್ಲಿ ಕಾಂತೀಯ ಕಣಗಳ ಇನ್ ವಿವೋ ಶೇಖರಣೆ ಮತ್ತು ನಡವಳಿಕೆಯನ್ನು ಎಂದಿಗೂ ವಿವರಿಸಲಾಗಿಲ್ಲ, ಅಥವಾ ಅಖಂಡ ಜೀವಂತ ವಾಯುಮಾರ್ಗಗಳಲ್ಲಿ ಜೀನ್ ಅಭಿವ್ಯಕ್ತಿ ಮಟ್ಟವನ್ನು ಹೆಚ್ಚಿಸಲು ಈ ವಿಧಾನದ ಕಾರ್ಯಸಾಧ್ಯತೆಯನ್ನು ಇನ್ ವಿವೋದಲ್ಲಿ ಪ್ರದರ್ಶಿಸಲಾಗಿಲ್ಲ.
ನಮ್ಮ ಇನ್ ವಿಟ್ರೊ ಸಿಂಕ್ರೊಟ್ರಾನ್ PCXI ಪ್ರಯೋಗಗಳು, ಪಾಲಿಸ್ಟೈರೀನ್ MP ಹೊರತುಪಡಿಸಿ, ನಾವು ಪರೀಕ್ಷಿಸಿದ ಎಲ್ಲಾ ಕಣಗಳು ನಾವು ಬಳಸಿದ ಇಮೇಜಿಂಗ್ ಸೆಟಪ್‌ನಲ್ಲಿ ಗೋಚರಿಸುತ್ತವೆ ಎಂದು ತೋರಿಸಿವೆ. ಕಾಂತೀಯ ಕ್ಷೇತ್ರದ ಉಪಸ್ಥಿತಿಯಲ್ಲಿ, MPಗಳು ಕಣಗಳ ಪ್ರಕಾರ ಮತ್ತು ಕಾಂತೀಯ ಕ್ಷೇತ್ರದ ಬಲಕ್ಕೆ (ಅಂದರೆ ಆಯಸ್ಕಾಂತದ ಸಾಮೀಪ್ಯ ಮತ್ತು ಚಲನೆ) ಸಂಬಂಧಿಸಿದ ಉದ್ದಗಳನ್ನು ಹೊಂದಿರುವ ತಂತಿಗಳನ್ನು ರೂಪಿಸುತ್ತವೆ. ಚಿತ್ರ 10 ರಲ್ಲಿ ತೋರಿಸಿರುವಂತೆ, ನಾವು ಗಮನಿಸಿದ ತಂತಿಗಳು ಪ್ರತಿಯೊಂದು ಕಣವನ್ನು ಕಾಂತೀಯಗೊಳಿಸುವುದರಿಂದ ಮತ್ತು ತನ್ನದೇ ಆದ ಸ್ಥಳೀಯ ಕಾಂತೀಯ ಕ್ಷೇತ್ರವನ್ನು ಪ್ರೇರೇಪಿಸುವುದರಿಂದ ರೂಪುಗೊಳ್ಳುತ್ತವೆ. ಈ ಪ್ರತ್ಯೇಕ ಕ್ಷೇತ್ರಗಳು ಇತರ ಕಣಗಳ ಸ್ಥಳೀಯ ಆಕರ್ಷಕ ಮತ್ತು ವಿಕರ್ಷಣ ಶಕ್ತಿಗಳಿಂದ ಸ್ಥಳೀಯ ಬಲಗಳಿಂದಾಗಿ ಗುಂಪು ದಾರದಂತಹ ಚಲನೆಗಳೊಂದಿಗೆ ಇತರ ರೀತಿಯ ಕಣಗಳನ್ನು ಒಟ್ಟುಗೂಡಿಸಲು ಮತ್ತು ಸಂಪರ್ಕಿಸಲು ಕಾರಣವಾಗುತ್ತವೆ.
ದ್ರವ ತುಂಬಿದ ಕ್ಯಾಪಿಲ್ಲರಿಗಳ ಒಳಗೆ (a,b) ಮತ್ತು ಗಾಳಿ ತುಂಬಿದ ಶ್ವಾಸನಾಳ (c,d) ಕಣಗಳ ರೈಲುಮಾರ್ಗಗಳನ್ನು ತೋರಿಸುವ ರೇಖಾಚಿತ್ರ. ಕ್ಯಾಪಿಲ್ಲರಿಗಳು ಮತ್ತು ಶ್ವಾಸನಾಳವನ್ನು ಮಾಪಕಕ್ಕೆ ಎಳೆಯಲಾಗಿಲ್ಲ ಎಂಬುದನ್ನು ಗಮನಿಸಿ. ಫಲಕ (a) MP ಯ ವಿವರಣೆಯನ್ನು ಸಹ ಒಳಗೊಂಡಿದೆ, ಇದು ತಂತಿಗಳಲ್ಲಿ ಜೋಡಿಸಲಾದ Fe3O4 ಕಣಗಳನ್ನು ಒಳಗೊಂಡಿದೆ.
ಆಯಸ್ಕಾಂತವನ್ನು ಕ್ಯಾಪಿಲ್ಲರಿಯ ಮೇಲೆ ಸರಿಸಿದಾಗ, ಕಣದ ದಾರದ ಕೋನವು Fe3O4 ಹೊಂದಿರುವ MP3-5 ಗಾಗಿ ನಿರ್ಣಾಯಕ ಮಿತಿಯನ್ನು ತಲುಪಿತು, ಅದರ ನಂತರ ಕಣದ ದಾರವು ಇನ್ನು ಮುಂದೆ ಮೂಲ ಸ್ಥಾನದಲ್ಲಿ ಉಳಿಯಲಿಲ್ಲ, ಆದರೆ ಮೇಲ್ಮೈಯಲ್ಲಿ ಹೊಸ ಸ್ಥಾನಕ್ಕೆ ಚಲಿಸಿತು.ಆಯಸ್ಕಾಂತ. ಗಾಜಿನ ಕ್ಯಾಪಿಲ್ಲರಿ ಮೇಲ್ಮೈ ಈ ಚಲನೆಯನ್ನು ಅನುಮತಿಸುವಷ್ಟು ಮೃದುವಾಗಿರುವುದರಿಂದ ಈ ಪರಿಣಾಮವು ಸಂಭವಿಸುವ ಸಾಧ್ಯತೆಯಿದೆ.ಕುತೂಹಲಕಾರಿಯಾಗಿ, MP6 (ಕಾಂಬಿಮ್ಯಾಗ್) ಈ ರೀತಿ ವರ್ತಿಸಲಿಲ್ಲ, ಬಹುಶಃ ಕಣಗಳು ಚಿಕ್ಕದಾಗಿರುವುದರಿಂದ, ವಿಭಿನ್ನ ಲೇಪನಗಳು ಅಥವಾ ಮೇಲ್ಮೈ ಶುಲ್ಕಗಳನ್ನು ಹೊಂದಿರುವುದರಿಂದ ಅಥವಾ ಸ್ವಾಮ್ಯದ ವಾಹಕ ದ್ರವವು ಅವುಗಳ ಚಲಿಸುವ ಸಾಮರ್ಥ್ಯದ ಮೇಲೆ ಪರಿಣಾಮ ಬೀರಿದೆ.ಕಾಂಬಿಮ್ಯಾಗ್ ಕಣಗಳ ಚಿತ್ರ ವ್ಯತಿರಿಕ್ತತೆಯು ದುರ್ಬಲವಾಗಿದೆ, ಇದು ದ್ರವ ಮತ್ತು ಕಣಗಳು ಒಂದೇ ರೀತಿಯ ಸಾಂದ್ರತೆಯನ್ನು ಹೊಂದಿರಬಹುದು ಮತ್ತು ಆದ್ದರಿಂದ ಪರಸ್ಪರ ಸುಲಭವಾಗಿ ಚಲಿಸುವುದಿಲ್ಲ ಎಂದು ಸೂಚಿಸುತ್ತದೆ.ಆಯಸ್ಕಾಂತವು ತುಂಬಾ ವೇಗವಾಗಿ ಚಲಿಸಿದರೆ ಕಣಗಳು ಸಹ ಸಿಕ್ಕಿಹಾಕಿಕೊಳ್ಳಬಹುದು, ಕಾಂತೀಯ ಕ್ಷೇತ್ರದ ಬಲವು ಯಾವಾಗಲೂ ದ್ರವದಲ್ಲಿನ ಕಣಗಳ ನಡುವಿನ ಘರ್ಷಣೆಯನ್ನು ಜಯಿಸಲು ಸಾಧ್ಯವಿಲ್ಲ ಎಂದು ಸೂಚಿಸುತ್ತದೆ, ಬಹುಶಃ ಕಾಂತೀಯ ಕ್ಷೇತ್ರದ ಬಲ ಮತ್ತು ಆಯಸ್ಕಾಂತ ಮತ್ತು ಗುರಿ ಪ್ರದೇಶದ ನಡುವಿನ ಅಂತರವು ಆಶ್ಚರ್ಯವೇನಿಲ್ಲ ಎಂದು ಸೂಚಿಸುತ್ತದೆ ಬಹಳ ಮುಖ್ಯ.ಒಟ್ಟಿಗೆ ತೆಗೆದುಕೊಂಡರೆ, ಈ ಫಲಿತಾಂಶಗಳು ಆಯಸ್ಕಾಂತಗಳು ಗುರಿ ಪ್ರದೇಶದ ಮೂಲಕ ಹರಿಯುವ ಅನೇಕ MP ಗಳನ್ನು ಸೆರೆಹಿಡಿಯಬಹುದಾದರೂ, ಅದು ಅಸಂಭವವಾಗಿದೆ ಎಂದು ಸೂಚಿಸುತ್ತದೆ. ಶ್ವಾಸನಾಳದ ಮೇಲ್ಮೈಯಲ್ಲಿ ಕಾಂಬಿಮ್ಯಾಗ್ ಕಣಗಳನ್ನು ಚಲಿಸಲು ಆಯಸ್ಕಾಂತಗಳನ್ನು ಅವಲಂಬಿಸಬಹುದು. ಆದ್ದರಿಂದ, ಇನ್ ವಿವೋ LV-MP ಅಧ್ಯಯನಗಳು ವಾಯುಮಾರ್ಗ ಮರದ ನಿರ್ದಿಷ್ಟ ಪ್ರದೇಶಗಳನ್ನು ಭೌತಿಕವಾಗಿ ಗುರಿಯಾಗಿಸಲು ಸ್ಥಿರ ಕಾಂತೀಯ ಕ್ಷೇತ್ರಗಳನ್ನು ಬಳಸಿಕೊಳ್ಳಬೇಕು ಎಂದು ನಾವು ತೀರ್ಮಾನಿಸುತ್ತೇವೆ.
ದೇಹದಲ್ಲಿ ಕಣಗಳನ್ನು ತಲುಪಿಸಿದಾಗ, ಸಂಕೀರ್ಣ ಚಲಿಸುವ ದೇಹದ ಅಂಗಾಂಶಗಳ ಸಂದರ್ಭದಲ್ಲಿ ಅವುಗಳನ್ನು ಗುರುತಿಸುವುದು ಕಷ್ಟ, ಆದರೆ ಅವುಗಳನ್ನು ಪತ್ತೆಹಚ್ಚುವ ಸಾಮರ್ಥ್ಯವನ್ನು ಶ್ವಾಸನಾಳದ ಮೇಲೆ ಅಡ್ಡಲಾಗಿ ಎಂಪಿ ತಂತಿಗಳನ್ನು "ಅಲುಗಾಡಿಸಲು" ಅನುವಾದಿಸುವ ಮೂಲಕ ಹೆಚ್ಚಿಸಲಾಯಿತು. ಲೈವ್ ಇಮೇಜಿಂಗ್ ಸಾಧ್ಯವಾದರೂ, ಪ್ರಾಣಿಯನ್ನು ಮಾನವೀಯವಾಗಿ ಕೊಂದ ನಂತರ ಕಣಗಳ ಚಲನೆಯನ್ನು ಗ್ರಹಿಸುವುದು ಸುಲಭ. ಆಯಸ್ಕಾಂತವನ್ನು ಇಮೇಜಿಂಗ್ ಪ್ರದೇಶದ ಮೇಲೆ ಇರಿಸಿದಾಗ ಈ ಸ್ಥಳದಲ್ಲಿ ಎಂಪಿ ಸಾಂದ್ರತೆಗಳು ಸಾಮಾನ್ಯವಾಗಿ ಅತ್ಯಧಿಕವಾಗಿದ್ದವು, ಆದಾಗ್ಯೂ ಕೆಲವು ಕಣಗಳು ಸಾಮಾನ್ಯವಾಗಿ ಶ್ವಾಸನಾಳದ ಉದ್ದಕ್ಕೂ ಕಂಡುಬರುತ್ತವೆ. ಇನ್ ವಿಟ್ರೊ ಅಧ್ಯಯನಗಳಿಗೆ ವ್ಯತಿರಿಕ್ತವಾಗಿ, ಆಯಸ್ಕಾಂತವನ್ನು ಅನುವಾದಿಸುವ ಮೂಲಕ ಕಣಗಳನ್ನು ಶ್ವಾಸನಾಳದ ಉದ್ದಕ್ಕೂ ಎಳೆಯಲಾಗುವುದಿಲ್ಲ. ಶ್ವಾಸನಾಳದ ಮೇಲ್ಮೈಯನ್ನು ಆವರಿಸುವ ಲೋಳೆಯು ಸಾಮಾನ್ಯವಾಗಿ ಉಸಿರಾಡುವ ಕಣಗಳನ್ನು ಹೇಗೆ ಪ್ರಕ್ರಿಯೆಗೊಳಿಸುತ್ತದೆ, ಅವುಗಳನ್ನು ಲೋಳೆಯಲ್ಲಿ ಬಲೆಗೆ ಬೀಳಿಸುತ್ತದೆ ಮತ್ತು ನಂತರ ಮ್ಯೂಕೋಸಿಲಿಯರಿ ಕ್ಲಿಯರೆನ್ಸ್ ಕಾರ್ಯವಿಧಾನದಿಂದ ತೆರವುಗೊಳಿಸುತ್ತದೆ ಎಂಬುದಕ್ಕೆ ಈ ಸಂಶೋಧನೆಯು ಸ್ಥಿರವಾಗಿದೆ.
ಶ್ವಾಸನಾಳದ ಮೇಲೆ ಮತ್ತು ಕೆಳಗೆ ಆಕರ್ಷಣೆಗಾಗಿ ಆಯಸ್ಕಾಂತಗಳನ್ನು ಬಳಸುವುದರಿಂದ (ಚಿತ್ರ 3b) ಒಂದು ಹಂತದಲ್ಲಿ ಹೆಚ್ಚು ಕೇಂದ್ರೀಕೃತವಾಗಿರುವ ಕಾಂತೀಯ ಕ್ಷೇತ್ರಕ್ಕಿಂತ ಹೆಚ್ಚು ಏಕರೂಪದ ಕಾಂತೀಯ ಕ್ಷೇತ್ರಕ್ಕೆ ಕಾರಣವಾಗಬಹುದು ಎಂದು ನಾವು ಊಹಿಸಿದ್ದೇವೆ, ಇದು ಕಣಗಳ ಹೆಚ್ಚು ಏಕರೂಪದ ವಿತರಣೆಗೆ ಕಾರಣವಾಗಬಹುದು. ಆದಾಗ್ಯೂ, ನಮ್ಮ ಪ್ರಾಥಮಿಕ ಅಧ್ಯಯನವು ಈ ಊಹೆಯನ್ನು ಬೆಂಬಲಿಸಲು ಸ್ಪಷ್ಟ ಪುರಾವೆಗಳನ್ನು ಕಂಡುಹಿಡಿಯಲಿಲ್ಲ. ಅಂತೆಯೇ, ಹಿಮ್ಮೆಟ್ಟಿಸಲು ಒಂದು ಜೋಡಿ ಆಯಸ್ಕಾಂತಗಳನ್ನು ಕಾನ್ಫಿಗರ್ ಮಾಡುವುದರಿಂದ (ಚಿತ್ರ 3c) ಚಿತ್ರಿಸಿದ ಪ್ರದೇಶದಲ್ಲಿ ಹೆಚ್ಚಿನ ಕಣ ಶೇಖರಣೆಗೆ ಕಾರಣವಾಗಲಿಲ್ಲ. ಈ ಎರಡು ಸಂಶೋಧನೆಗಳು ಡ್ಯುಯಲ್-ಮ್ಯಾಗ್ನೆಟ್ ಸೆಟಪ್ MP ಗುರಿಯ ಸ್ಥಳೀಯ ನಿಯಂತ್ರಣವನ್ನು ಗಮನಾರ್ಹವಾಗಿ ಸುಧಾರಿಸುವುದಿಲ್ಲ ಮತ್ತು ಪರಿಣಾಮವಾಗಿ ಬಲವಾದ ಕಾಂತೀಯ ಬಲಗಳನ್ನು ಕಾನ್ಫಿಗರ್ ಮಾಡುವುದು ಕಷ್ಟಕರವಾಗಿದೆ ಎಂದು ತೋರಿಸುತ್ತದೆ, ಇದು ಈ ವಿಧಾನವನ್ನು ಕಡಿಮೆ ಪ್ರಾಯೋಗಿಕವಾಗಿಸುತ್ತದೆ. ಅದೇ ರೀತಿ, ಶ್ವಾಸನಾಳದ ಮೇಲೆ ಮತ್ತು ಶ್ವಾಸನಾಳದ ಮೂಲಕ ಮ್ಯಾಗ್ನೆಟ್ ಅನ್ನು ಓರಿಯಂಟ್ ಮಾಡುವುದು (ಚಿತ್ರ 3d) ಚಿತ್ರಿಸಿದ ಪ್ರದೇಶದಲ್ಲಿ ಉಳಿಸಿಕೊಂಡಿರುವ ಕಣಗಳ ಸಂಖ್ಯೆಯನ್ನು ಹೆಚ್ಚಿಸಲಿಲ್ಲ. ಈ ಪರ್ಯಾಯ ಸಂರಚನೆಗಳಲ್ಲಿ ಕೆಲವು ಯಶಸ್ವಿಯಾಗದಿರಬಹುದು ಏಕೆಂದರೆ ಅವು ಶೇಖರಣಾ ಪ್ರದೇಶದೊಳಗೆ ಕಡಿಮೆ ಕಾಂತೀಯ ಕ್ಷೇತ್ರದ ಬಲಗಳಿಗೆ ಕಾರಣವಾಗುತ್ತವೆ. ಆದ್ದರಿಂದ, ಒಂದೇ 30-ಡಿಗ್ರಿ ಕೋನ ಮ್ಯಾಗ್ನೆಟ್ ಕಾನ್ಫಿಗರೇಶನ್ (ಚಿತ್ರ 3a) ಅನ್ನು ಇನ್ ವಿವೋ ಪರೀಕ್ಷೆಗೆ ಸುಲಭ ಮತ್ತು ಅತ್ಯಂತ ಪರಿಣಾಮಕಾರಿ ವಿಧಾನವೆಂದು ಪರಿಗಣಿಸಲಾಗಿದೆ.
LV-MP ಅಧ್ಯಯನವು LV ವೆಕ್ಟರ್‌ಗಳನ್ನು ಕಾಂಬಿಮ್ಯಾಗ್‌ನೊಂದಿಗೆ ಸಂಯೋಜಿಸಿದಾಗ ಮತ್ತು ಕಾಂತೀಯ ಕ್ಷೇತ್ರದ ಉಪಸ್ಥಿತಿಯಲ್ಲಿ ಭೌತಿಕ ಪ್ರಕ್ಷುಬ್ಧತೆಯ ನಂತರ ವಿತರಿಸಿದಾಗ, ನಿಯಂತ್ರಣಗಳಿಗೆ ಹೋಲಿಸಿದರೆ ಶ್ವಾಸನಾಳದಲ್ಲಿ ಟ್ರಾನ್ಸ್‌ಡಕ್ಷನ್ ಮಟ್ಟಗಳು ಗಮನಾರ್ಹವಾಗಿ ಹೆಚ್ಚಾಗುತ್ತವೆ ಎಂದು ತೋರಿಸಿದೆ. ಸಿಂಕ್ರೊಟ್ರಾನ್ ಇಮೇಜಿಂಗ್ ಅಧ್ಯಯನಗಳು ಮತ್ತು LacZ ಫಲಿತಾಂಶಗಳ ಆಧಾರದ ಮೇಲೆ, ಕಾಂತೀಯ ಕ್ಷೇತ್ರವು ಶ್ವಾಸನಾಳದೊಳಗೆ LV ಅನ್ನು ಸಂರಕ್ಷಿಸಲು ಮತ್ತು ಶ್ವಾಸಕೋಶದೊಳಗೆ ತಕ್ಷಣವೇ ಆಳವಾಗಿ ತೂರಿಕೊಳ್ಳುವ ವೆಕ್ಟರ್ ಕಣಗಳ ಸಂಖ್ಯೆಯನ್ನು ಕಡಿಮೆ ಮಾಡಲು ಸ್ಪಷ್ಟವಾಗಿ ಸಾಧ್ಯವಾಯಿತು. ಅಂತಹ ಗುರಿ ಸುಧಾರಣೆಗಳು ವಿತರಿಸಿದ ಟೈಟರ್‌ಗಳು, ಆಫ್-ಟಾರ್ಗೆಟ್ ಟ್ರಾನ್ಸ್‌ಡಕ್ಷನ್, ಉರಿಯೂತ ಮತ್ತು ರೋಗನಿರೋಧಕ ಅಡ್ಡಪರಿಣಾಮಗಳು ಮತ್ತು ಜೀನ್ ಕ್ಯಾರಿಯರ್ ವೆಚ್ಚಗಳನ್ನು ಕಡಿಮೆ ಮಾಡುವಾಗ ಹೆಚ್ಚಿನ ಪರಿಣಾಮಕಾರಿತ್ವಕ್ಕೆ ಕಾರಣವಾಗಬಹುದು. ಮುಖ್ಯವಾಗಿ, ತಯಾರಕರ ಪ್ರಕಾರ, ಕಾಂಬಿಮ್ಯಾಗ್ ಅನ್ನು ಇತರ ವೈರಲ್ ವೆಕ್ಟರ್‌ಗಳು (AAV ನಂತಹ) ಮತ್ತು ನ್ಯೂಕ್ಲಿಯಿಕ್ ಆಮ್ಲಗಳನ್ನು ಒಳಗೊಂಡಂತೆ ಇತರ ಜೀನ್ ವರ್ಗಾವಣೆ ವಿಧಾನಗಳ ಜೊತೆಯಲ್ಲಿ ಬಳಸಬಹುದು.