Nature.com ಗೆ ಭೇಟಿ ನೀಡಿದ್ದಕ್ಕಾಗಿ ಧನ್ಯವಾದಗಳು.ನೀವು ಬಳಸುತ್ತಿರುವ ಬ್ರೌಸರ್ ಆವೃತ್ತಿಯು CSS ಗೆ ಸೀಮಿತ ಬೆಂಬಲವನ್ನು ಹೊಂದಿದೆ.ಉತ್ತಮ ಅನುಭವಕ್ಕಾಗಿ, ನೀವು ನವೀಕರಿಸಿದ ಬ್ರೌಸರ್ ಅನ್ನು (ಅಥವಾ Internet Explorer ನಲ್ಲಿ ಹೊಂದಾಣಿಕೆ ಮೋಡ್ ಅನ್ನು ಆಫ್ ಮಾಡಿ) ಬಳಸಲು ನಾವು ಶಿಫಾರಸು ಮಾಡುತ್ತೇವೆ. ಈ ಮಧ್ಯೆ, ನಿರಂತರ ಬೆಂಬಲವನ್ನು ಖಚಿತಪಡಿಸಿಕೊಳ್ಳಲು, ನಾವು ಶೈಲಿಗಳು ಮತ್ತು JavaScript ಇಲ್ಲದೆ ಸೈಟ್ ಅನ್ನು ಪ್ರದರ್ಶಿಸುತ್ತೇವೆ.
ಪೊರಸ್ ಸಿಲಿಕಾ ಕಣಗಳನ್ನು ಸೋಲ್-ಜೆಲ್ ವಿಧಾನದಿಂದ ಮ್ಯಾಕ್ರೋಪೊರಸ್ ಕಣಗಳನ್ನು ಪಡೆಯಲು ಕೆಲವು ಮಾರ್ಪಾಡುಗಳೊಂದಿಗೆ ತಯಾರಿಸಲಾಯಿತು. ಈ ಕಣಗಳನ್ನು ರಿವರ್ಸಿಬಲ್ ಸೇರ್ಪಡೆ ವಿಘಟನೆಯ ಸರಪಳಿ ವರ್ಗಾವಣೆ (RAFT) ಪಾಲಿಮರೀಕರಣದಿಂದ N-phenylmaleimide-methylvinylisocyanate (PMI) ಮತ್ತು ಸ್ಟೇಷನರಿ Nimidenylylosocyanate (PMI) ಪಾಲಿಮರೈಸೇಶನ್ (PMINYLEYYLYSYONY) ಬಾಣ-ಬೋರ್ ಸ್ಟೇನ್‌ಲೆಸ್ ಸ್ಟೀಲ್ ಕಾಲಮ್‌ಗಳನ್ನು (100 × 1.8 ಮಿಮೀ ಐಡಿ) ಸ್ಲರಿ ಪ್ಯಾಕಿಂಗ್‌ನಿಂದ ಪ್ಯಾಕ್ ಮಾಡಲಾಗಿದೆ. ಐದು ಪೆಪ್ಟೈಡ್‌ಗಳನ್ನು ಒಳಗೊಂಡಿರುವ ಪೆಪ್ಟೈಡ್ ಮಿಶ್ರಣದ ಮೌಲ್ಯಮಾಪನ PMP ಕಾಲಮ್ ಬೇರ್ಪಡಿಕೆ (ಗ್ಲೈ-ಟೈರ್, ಗ್ಲೈ-ಲಿಯು-ಟೈರ್, ಗ್ಲೈ-ಗ್ಲೈ-ಟೈರ್-ಟೈರ್-ಐಆರ್ಗ್, ಗ್ಲೈರ್-ಕ್ಲೈ-ಆರ್ಗ್, ಗ್ಲೈರ್-ಕೆರ್ಗ್, ಮ್ಯಾಟೊಗ್ರಾಫಿಕ್ ಕಾರ್ಯಕ್ಷಮತೆ) ಮತ್ತು ಹ್ಯೂಮನ್ ಸೀರಮ್ ಅಲ್ಬುಮಿನ್ (HAS) ನ ಟ್ರಿಪ್ಸಿನ್ ಜೀರ್ಣಕ್ರಿಯೆ. ಸೂಕ್ತ ಎಲುಷನ್ ಪರಿಸ್ಥಿತಿಗಳಲ್ಲಿ, ಪೆಪ್ಟೈಡ್ ಮಿಶ್ರಣದ ಸೈದ್ಧಾಂತಿಕ ಪ್ಲೇಟ್ ಎಣಿಕೆಯು 280,000 ಪ್ಲೇಟ್‌ಗಳು/m² ನಷ್ಟು ಹೆಚ್ಚಾಗಿರುತ್ತದೆ. ಅಭಿವೃದ್ಧಿಪಡಿಸಿದ ಕಾಲಮ್‌ನ ಬೇರ್ಪಡಿಕೆ ಕಾರ್ಯಕ್ಷಮತೆಯನ್ನು ವಾಣಿಜ್ಯ ಅಸೆಂಟಿಸ್ ಎಕ್ಸ್‌ಪ್ರೆಸ್‌ನೊಂದಿಗೆ ಹೋಲಿಸಿದಾಗ ಅದು ವಾಣಿಜ್ಯ ಅಸ್ಸೆಂಟಿಸ್ ಎಕ್ಸ್‌ಪ್ರೆಸ್ ಆರ್‌ಪಿ-ಅಮೈಡ್ ಕಾಲಮ್‌ನ ಪ್ರತ್ಯೇಕತೆಯ ಕಾಲಮ್‌ನ ಪ್ರತ್ಯೇಕತೆಯ ಕಾಲಮ್‌ಗೆ ಪ್ರತ್ಯೇಕ ಕಾಲಮ್ ಅನ್ನು ಗಮನಿಸಲಾಯಿತು. ಮತ್ತು ನಿರ್ಣಯ.
ಇತ್ತೀಚಿನ ವರ್ಷಗಳಲ್ಲಿ, ಬಯೋಫಾರ್ಮಾಸ್ಯುಟಿಕಲ್ ಉದ್ಯಮವು ಮಾರುಕಟ್ಟೆ ಪಾಲಿನಲ್ಲಿ ಗಣನೀಯ ಹೆಚ್ಚಳದೊಂದಿಗೆ ವಿಸ್ತರಿಸುತ್ತಿರುವ ಜಾಗತಿಕ ಮಾರುಕಟ್ಟೆಯಾಗಿದೆ. ಬಯೋಫಾರ್ಮಾಸ್ಯುಟಿಕಲ್ ಉದ್ಯಮದ ಸ್ಫೋಟಕ ಬೆಳವಣಿಗೆಯೊಂದಿಗೆ 1,2,3, ಪೆಪ್ಟೈಡ್‌ಗಳು ಮತ್ತು ಪ್ರೋಟೀನ್‌ಗಳ ವಿಶ್ಲೇಷಣೆಯು ಹೆಚ್ಚು ಅಪೇಕ್ಷಣೀಯವಾಗಿದೆ. ಗುರಿ ಪೆಪ್ಟೈಡ್ ಜೊತೆಗೆ, ಹಲವಾರು ಕಲ್ಮಶಗಳು ಪೆಪ್ಟೈಡ್ ಸಂಶ್ಲೇಷಣೆಯ ಸಮಯದಲ್ಲಿ ಉತ್ಪತ್ತಿಯಾಗುತ್ತವೆ. ದೇಹದ ದ್ರವಗಳು, ಅಂಗಾಂಶಗಳು ಮತ್ತು ಜೀವಕೋಶಗಳಲ್ಲಿನ ಪ್ರೋಟೀನ್‌ಗಳ ವಿಶ್ಲೇಷಣೆ ಮತ್ತು ಗುಣಲಕ್ಷಣವು ಒಂದು ಮಾದರಿಯಲ್ಲಿ ಹೆಚ್ಚಿನ ಸಂಖ್ಯೆಯ ಸಂಭಾವ್ಯ ಪತ್ತೆ ಮಾಡಬಹುದಾದ ಜಾತಿಗಳ ಕಾರಣದಿಂದಾಗಿ ಅತ್ಯಂತ ಸವಾಲಿನ ಕೆಲಸವಾಗಿದೆ. ಪೆಪ್ಟೈಡ್ ಮತ್ತು ಪ್ರೊಟೀನ್ ಅನುಕ್ರಮಕ್ಕೆ ಮಾಸ್ ಸ್ಪೆಕ್ಟ್ರೋಮೆಟ್ರಿಯು ಪರಿಣಾಮಕಾರಿ ಸಾಧನವಾಗಿದ್ದರೂ, ಅಂತಹ ಮಾದರಿಗಳನ್ನು ಮಾಸ್ ಸ್ಪೆಕ್ಟ್ರೋಮೀಟರ್‌ಗೆ ಒಂದೇ ಪಾಸ್‌ನಲ್ಲಿ ಚುಚ್ಚಿದರೆ, ಈ ಸಮಸ್ಯೆಯು ದ್ರವರೂಪದಿಂದ ಪ್ರತ್ಯೇಕಿಸಲಾಗುವುದಿಲ್ಲ. MS ವಿಶ್ಲೇಷಣೆ, ನಿರ್ದಿಷ್ಟ ಸಮಯದಲ್ಲಿ ಮಾಸ್ ಸ್ಪೆಕ್ಟ್ರೋಮೀಟರ್‌ಗೆ ಪ್ರವೇಶಿಸುವ ವಿಶ್ಲೇಷಕಗಳ ಸಂಖ್ಯೆಯನ್ನು ಕಡಿಮೆ ಮಾಡುತ್ತದೆ4,5,6. ಜೊತೆಗೆ, ದ್ರವ ಹಂತದ ಪ್ರತ್ಯೇಕತೆಯ ಸಮಯದಲ್ಲಿ, ವಿಶ್ಲೇಷಕಗಳನ್ನು ಕಿರಿದಾದ ಪ್ರದೇಶಗಳಲ್ಲಿ ಕೇಂದ್ರೀಕರಿಸಬಹುದು, ಇದರಿಂದಾಗಿ ಈ ವಿಶ್ಲೇಷಣೆಗಳನ್ನು ಕೇಂದ್ರೀಕರಿಸಬಹುದು ಮತ್ತು MS ಪತ್ತೆ ಸಂವೇದನೆಯನ್ನು ಸುಧಾರಿಸಬಹುದು.
ರಿವರ್ಸ್ಡ್-ಫೇಸ್ ಲಿಕ್ವಿಡ್ ಕ್ರೊಮ್ಯಾಟೋಗ್ರಫಿ (RP-LC) ಅನ್ನು ಪೆಪ್ಟೈಡ್ ಮಿಶ್ರಣಗಳ ಶುದ್ಧೀಕರಣ ಮತ್ತು ಬೇರ್ಪಡಿಸುವಿಕೆಗಾಗಿ ಆಕ್ಟಾಡೆಸಿಲ್-ಮಾರ್ಪಡಿಸಿದ ಸಿಲಿಕಾ (ODS) ಅನ್ನು ಸ್ಥಾಯಿ ಹಂತವಾಗಿ ಬಳಸಲಾಗುತ್ತದೆ11,12,13. ಆದಾಗ್ಯೂ, RP ಸ್ಥಾಯಿ ಹಂತಗಳು ತೃಪ್ತಿಕರವಾದ ಪ್ರತ್ಯೇಕತೆಯನ್ನು ಒದಗಿಸುವುದಿಲ್ಲ. ಈ ವಿಶ್ಲೇಷಣೆಗಳೊಂದಿಗೆ ಸಂವಹನ ನಡೆಸಲು ಮತ್ತು ಉಳಿಸಿಕೊಳ್ಳಲು ಧ್ರುವ ಮತ್ತು ಧ್ರುವೀಯವಲ್ಲದ ಭಾಗಗಳೊಂದಿಗೆ ಪೆಪ್ಟೈಡ್‌ಗಳು ಮತ್ತು ಪ್ರೊಟೀನ್‌ಗಳನ್ನು ವಿಶ್ಲೇಷಿಸಲು ಆರಿ ಹಂತಗಳು ಅಗತ್ಯವಿದೆ ಪ್ರೋಟೀನ್ ಬೇರ್ಪಡಿಕೆಗಳು17,18,19,20,21.ಮಿಶ್ರ-ವಿಧಾನದ ಸ್ಥಾಯಿ ಹಂತಗಳು (WAX/RPLC, HILIC/RPLC, ಪೋಲಾರ್ ಇಂಟರ್‌ಕಲೇಷನ್/RPLC) ಪೆಪ್ಟೈಡ್ ಮತ್ತು ಪ್ರೊಟೀನ್ ಬೇರ್ಪಡಿಕೆಗಳಿಗೆ ಸೂಕ್ತವಾಗಿದೆ ಏಕೆಂದರೆ ಧ್ರುವೀಯ ಮತ್ತು ಧ್ರುವೀಯವಲ್ಲದ ಗುಂಪುಗಳು 22,23,24,25,26,28 ಲಾರ್ ಗುಂಪುಗಳು ಧ್ರುವ ಮತ್ತು ಧ್ರುವೀಯವಲ್ಲದ ವಿಶ್ಲೇಷಕಗಳಿಗೆ ಉತ್ತಮ ಪ್ರತ್ಯೇಕತೆಯ ಶಕ್ತಿ ಮತ್ತು ಅನನ್ಯ ಆಯ್ಕೆಯನ್ನು ತೋರಿಸುತ್ತವೆ, ಏಕೆಂದರೆ ಪ್ರತ್ಯೇಕತೆಯು ವಿಶ್ಲೇಷಕ ಮತ್ತು ಸ್ಥಾಯಿ ಹಂತದ ನಡುವಿನ ಪರಸ್ಪರ ಕ್ರಿಯೆಯನ್ನು ಅವಲಂಬಿಸಿರುತ್ತದೆ.ಮಲ್ಟಿಮೋಡಲ್ ಸಂವಹನಗಳು 29, 30, 31, 32. ಇತ್ತೀಚೆಗೆ, ಜಾಂಗ್ ಮತ್ತು ಇತರರು.30 ಡೋಡೆಸಿಲ್-ಟರ್ಮಿನೇಟೆಡ್ ಪಾಲಿಯಮೈನ್ ಸ್ಥಾಯಿ ಹಂತವನ್ನು ಸಿದ್ಧಪಡಿಸಿದೆ ಮತ್ತು ಹೈಡ್ರೋಕಾರ್ಬನ್‌ಗಳು, ಖಿನ್ನತೆ-ಶಮನಕಾರಿಗಳು, ಫ್ಲೇವನಾಯ್ಡ್‌ಗಳು, ನ್ಯೂಕ್ಲಿಯೊಸೈಡ್‌ಗಳು, ಈಸ್ಟ್ರೋಜೆನ್‌ಗಳು ಮತ್ತು ಹಲವಾರು ಇತರ ವಿಶ್ಲೇಷಣೆಗಳನ್ನು ಯಶಸ್ವಿಯಾಗಿ ಬೇರ್ಪಡಿಸಿತು. ಧ್ರುವೀಯ ಇಂಟರ್‌ಕಲೇಟರ್ ಧ್ರುವೀಯ ಮತ್ತು ಧ್ರುವೀಯವಲ್ಲದ ಗುಂಪುಗಳನ್ನು ಹೊಂದಿದೆ, ಆದ್ದರಿಂದ ಇದನ್ನು ಪೆಪ್ಟೈಡ್‌ಗಳು ಮತ್ತು ಹೈಡ್ರೋಫೋಬಿಕ್ ಪ್ರೊಟೀನ್‌ಗಳನ್ನು ಪ್ರತ್ಯೇಕಿಸಲು ಬಳಸಬಹುದು. ide-Embedded C18 ಕಾಲಮ್‌ಗಳು) ವಾಣಿಜ್ಯಿಕವಾಗಿ Ascentis Express RP-Amide ಕಾಲಮ್‌ಗಳ ಅಡಿಯಲ್ಲಿ ಲಭ್ಯವಿದೆ, ಆದರೆ ಈ ಕಾಲಮ್‌ಗಳನ್ನು ಅಮೈನ್ 33 ರ ವಿಶ್ಲೇಷಣೆಗಾಗಿ ಮಾತ್ರ ಬಳಸಲಾಗುತ್ತದೆ.
ಪ್ರಸ್ತುತ ಅಧ್ಯಯನದಲ್ಲಿ, HSA ಯ ಪೆಪ್ಟೈಡ್‌ಗಳು ಮತ್ತು ಟ್ರಿಪ್ಸಿನ್ ಡೈಜೆಸ್ಟ್‌ಗಳನ್ನು ಬೇರ್ಪಡಿಸಲು ಪೋಲಾರ್-ಎಂಬೆಡೆಡ್ ಸ್ಟೇಷನರಿ ಹಂತವನ್ನು (N-ಫೀನೈಲ್ಮಲೈಮೈಡ್-ಎಂಬೆಡೆಡ್ ಪಾಲಿಸ್ಟೈರೀನ್) ಸಿದ್ಧಪಡಿಸಲಾಗಿದೆ ಮತ್ತು ಮೌಲ್ಯಮಾಪನ ಮಾಡಲಾಗಿದೆ. ಈ ಕೆಳಗಿನ ತಂತ್ರವನ್ನು ಬಳಸಿಕೊಂಡು ಸ್ಥಾಯಿ ಹಂತವನ್ನು ತಯಾರಿಸಲಾಗಿದೆ. ಲೈಕಾಲ್ (PEG), TMOS, ವಾಟರ್ ಅಸಿಟಿಕ್ ಆಮ್ಲವನ್ನು ದೊಡ್ಡ ರಂಧ್ರದ ಗಾತ್ರದೊಂದಿಗೆ ಸಿಲಿಕಾ ಕಣಗಳನ್ನು ತಯಾರಿಸಲು ಸರಿಹೊಂದಿಸಲಾಗಿದೆ. ಎರಡನೆಯದಾಗಿ, ಹೊಸ ಲಿಗಾಂಡ್, ಫಿನೈಲ್ಮಲೈಮೈಡ್-ಮೀಥೈಲ್ ವಿನೈಲ್ ಐಸೊಸೈನೇಟ್ ಅನ್ನು ಸಂಶ್ಲೇಷಿಸಲಾಯಿತು ಮತ್ತು ಸಿಲಿಕಾ ಕಣಗಳನ್ನು ವ್ಯುತ್ಪನ್ನಗೊಳಿಸಲು ಬಳಸಲಾಯಿತು. ಐಡಿ) ಆಪ್ಟಿಮೈಸ್ಡ್ ಪ್ಯಾಕಿಂಗ್ ಸ್ಕೀಮ್ ಅನ್ನು ಬಳಸುವುದು. ಕಾಲಮ್‌ನೊಳಗೆ ಏಕರೂಪದ ಹಾಸಿಗೆಯನ್ನು ರಚಿಸಲಾಗಿದೆ ಎಂದು ಖಚಿತಪಡಿಸಿಕೊಳ್ಳಲು ಕಾಲಮ್ ಪ್ಯಾಕಿಂಗ್ ಅನ್ನು ಯಾಂತ್ರಿಕ ಕಂಪನದೊಂದಿಗೆ ಸಹಾಯ ಮಾಡಲಾಗುತ್ತದೆ. ಐದು ಪೆಪ್ಟೈಡ್‌ಗಳನ್ನು ಒಳಗೊಂಡಿರುವ ಪೆಪ್ಟೈಡ್ ಮಿಶ್ರಣಗಳ ಪ್ಯಾಕ್ ಮಾಡಿದ ಕಾಲಮ್ ಬೇರ್ಪಡಿಕೆಯನ್ನು ಮೌಲ್ಯಮಾಪನ ಮಾಡಿ;(Gly-Tyr, Gly-Leu-Tyr, Gly-Gly-Tyr-Arg, Tyr-Ile-Gly-Ser-Arg, Leucine Enkephalin) ಮತ್ತು ಮಾನವ ಸೀರಮ್ ಅಲ್ಬುಮಿನ್ (HAS) ನ ಟ್ರಿಪ್ಸಿನ್ ಡೈಜೆಸ್ಟ್. ಆರ್‌ಪಿ-ಅಮೈಡ್ ಕಾಲಮ್
PEG (ಪಾಲಿಥಿಲೀನ್ ಗ್ಲೈಕಾಲ್), ಯೂರಿಯಾ, ಅಸಿಟಿಕ್ ಆಸಿಡ್, ಟ್ರೈಮೆಥಾಕ್ಸಿ ಆರ್ಥೋಸಿಲಿಕೇಟ್ (TMOS), ಟ್ರೈಮಿಥೈಲ್ ಕ್ಲೋರೋಸಿಲೇನ್ (TMCS), ಟ್ರಿಪ್ಸಿನ್, ಹ್ಯೂಮನ್ ಸೀರಮ್ ಅಲ್ಬುಮಿನ್ (HSA), ಅಮೋನಿಯಮ್ ಕ್ಲೋರೈಡ್, ಯೂರಿಯಾ, ಹೆಕ್ಸೇನ್ ಮೆಥೈಲ್ಡಿಸಿಲಾಝೇನ್ (HMDS), ಬೆನ್‌ಡ್ರೊಕ್ಸೈಲ್-ಕ್ಲೋರೈಡ್ (, ಎಮ್‌ಸಿಡಿಎಕ್ಸ್-4 ಕ್ಲೋರೈಡ್) ide (BPO), HPLC ಗ್ರೇಡ್ ಅಸಿಟೋನಿಟ್ರೈಲ್ (ACN), ಮೆಥನಾಲ್, 2-ಪ್ರೊಪನಾಲ್ ಮತ್ತು ಅಸಿಟೋನ್ ಅನ್ನು ಸಿಗ್ಮಾ-ಆಲ್ಡ್ರಿಚ್ (St. ಲೂಯಿಸ್, MO, USA) ನಿಂದ ಖರೀದಿಸಲಾಗಿದೆ.
ಯೂರಿಯಾ (8 ಗ್ರಾಂ), ಪಾಲಿಥಿಲೀನ್ ಗ್ಲೈಕಾಲ್ (8 ಗ್ರಾಂ), ಮತ್ತು 0.01 ಎನ್ ಅಸಿಟಿಕ್ ಆಮ್ಲದ 8 ಎಂಎಲ್ ಮಿಶ್ರಣವನ್ನು 10 ನಿಮಿಷಗಳ ಕಾಲ ಬೆರೆಸಿ, ನಂತರ 24 ಮಿಲಿ ಟಿಎಂಒಎಸ್ ಅನ್ನು ಐಸ್-ಶೀತದ ಪರಿಸ್ಥಿತಿಗಳಲ್ಲಿ ಸೇರಿಸಲಾಯಿತು. ಪ್ರತಿಕ್ರಿಯೆ ಮಿಶ್ರಣವನ್ನು 40 ° C ಗೆ 6 ಗಂಟೆಗಳ ಕಾಲ ಬಿಸಿಮಾಡಲಾಗುತ್ತದೆ ಮತ್ತು ನಂತರ 120 ° C ಗೆ 120 ಗಂಟೆಗಳವರೆಗೆ ನೀರು ಕಡಿಮೆಯಾಗಿದೆ. ಐಡಿಯಲ್ ವಸ್ತುವನ್ನು 12 ಗಂಟೆಗಳ ಕಾಲ 70 ° C ನಲ್ಲಿ ಒಣಗಿಸಲಾಗುತ್ತದೆ. ಒಣಗಿದ ಮೃದು ದ್ರವ್ಯರಾಶಿಯನ್ನು ಒಲೆಯಲ್ಲಿ ನಯವಾದ ನೆಲದ ಮತ್ತು 12 ಗಂಟೆಗಳ ಕಾಲ 550 ° C ನಲ್ಲಿ ಕ್ಯಾಲ್ಸಿನ್ ಮಾಡಲಾಗಿತ್ತು. ಕಣದ ಗಾತ್ರ, ರಂಧ್ರದ ಗಾತ್ರ ಮತ್ತು ಮೇಲ್ಮೈ ಪ್ರದೇಶದಲ್ಲಿ ಪುನರುತ್ಪಾದನೆಯನ್ನು ಪರೀಕ್ಷಿಸಲು ಮೂರು ಬ್ಯಾಚ್‌ಗಳನ್ನು ತಯಾರಿಸಲಾಗುತ್ತದೆ ಮತ್ತು ನಿರೂಪಿಸಲಾಗಿದೆ.
ಪೂರ್ವ ಸಂಶ್ಲೇಷಿತ ಲಿಗಾಂಡ್ ಫಿನೈಲ್ಮಲೈಮೈಡ್-ಮೀಥೈಲ್ವಿನೈಲಿಸೊಸೈನೇಟ್ (ಪಿಸಿಎಂಪಿ) ನೊಂದಿಗೆ ಸಿಲಿಕಾ ಕಣಗಳ ಮೇಲ್ಮೈ ಮಾರ್ಪಾಡು ಮತ್ತು ಸ್ಟೈರೀನ್ ಜೊತೆಗೆ ರೇಡಿಯಲ್ ಪಾಲಿಮರೀಕರಣದ ಮೂಲಕ, ಧ್ರುವೀಯ ಗುಂಪನ್ನು ಒಳಗೊಂಡಿರುವ ಸಂಯುಕ್ತವನ್ನು ತಯಾರಿಸಲಾಯಿತು.ಸಮುಚ್ಚಯಗಳು ಮತ್ತು ಪಾಲಿಸ್ಟೈರೀನ್ ಸರಪಳಿಗಳಿಗೆ ಸ್ಥಾಯಿ ಹಂತ. ತಯಾರಿಕೆಯ ಪ್ರಕ್ರಿಯೆಯನ್ನು ಕೆಳಗೆ ವಿವರಿಸಲಾಗಿದೆ.
N-phenylmaleimide (200 mg) ಮತ್ತು ಮೀಥೈಲ್ ವಿನೈಲ್ ಐಸೊಸೈನೇಟ್ (100 mg) ಅನ್ನು ಒಣ ಟೊಲುಯೆನ್‌ನಲ್ಲಿ ಕರಗಿಸಲಾಗುತ್ತದೆ ಮತ್ತು 0.1 mL 2,2′-azoisobutyronitrile (AIBN) ಅನ್ನು ಪ್ರತಿಕ್ರಿಯೆಯ ಫ್ಲಾಸ್ಕ್‌ಗೆ ಸೇರಿಸಲಾಯಿತು. 3 ಗಂಟೆಗಳ ಕಾಲ, 3 ಗಂಟೆಗಳ ಕಾಲ 40 ° C ನಲ್ಲಿ ಒಲೆಯಲ್ಲಿ ಫಿಲ್ಟರ್ ಮಾಡಿ ಮತ್ತು ಒಣಗಿಸಿ.
ಒಣಗಿದ ಸಿಲಿಕಾ ಕಣಗಳನ್ನು (2 ಗ್ರಾಂ) ಡ್ರೈ ಟೊಲ್ಯೂನ್‌ನಲ್ಲಿ (100 ಎಂಎಲ್) ಹರಡಿ, 500 ಎಂಎಲ್ ಸುತ್ತಿನ ಕೆಳಭಾಗದ ಫ್ಲಾಸ್ಕ್‌ನಲ್ಲಿ 10 ನಿಮಿಷಗಳ ಕಾಲ ಬೆರೆಸಿ ಮತ್ತು ಸೋನಿಕೇಟ್ ಮಾಡಲಾಗುತ್ತದೆ. ಪಿಎಂಸಿಪಿ (10 ಮಿಗ್ರಾಂ) ಅನ್ನು ಟೊಲ್ಯೂನ್‌ನಲ್ಲಿ ಕರಗಿಸಲಾಗುತ್ತದೆ ಮತ್ತು ಡ್ರಾಪಿಂಗ್ ಫನೆಲ್ ಮೂಲಕ ರಿಯಾಕ್ಷನ್ ಫ್ಲಾಸ್ಕ್‌ಗೆ ಡ್ರಾಪ್‌ವೈಸ್‌ನಲ್ಲಿ ಸೇರಿಸಲಾಗುತ್ತದೆ. 3 ಗಂಟೆಗಳ ಕಾಲ 60 ° C. ನಂತರ, PMCP- ಬಂಧಿತ ಸಿಲಿಕಾ ಕಣಗಳನ್ನು (100 ಗ್ರಾಂ) ಟೊಲ್ಯೂನ್ (200 ಮಿಲಿ) ನಲ್ಲಿ ಕರಗಿಸಲಾಗುತ್ತದೆ ಮತ್ತು 4-ಹೈಡ್ರಾಕ್ಸಿ-TEMPO (2 mL) ಅನ್ನು 100 µL ಡೈಬ್ಯುಟೈಲ್ಟಿನ್ ಡೈಲೌರೇಟ್‌ನ ಉಪಸ್ಥಿತಿಯಲ್ಲಿ ವೇಗವರ್ಧಕವಾಗಿ ಸೇರಿಸಲಾಗುತ್ತದೆ.
ಸ್ಟೈರೀನ್ (1 mL), ಬೆಂಝಾಯ್ಲ್ ಪೆರಾಕ್ಸೈಡ್ BPO (0.5 mL), ಮತ್ತು TEMPO-PMCP ಲಗತ್ತಿಸಲಾದ ಸಿಲಿಕಾ ಕಣಗಳನ್ನು (1.5 ಗ್ರಾಂ) ಟೊಲ್ಯೂನ್‌ನಲ್ಲಿ ಹರಡಿ ಸಾರಜನಕದಿಂದ ಶುದ್ಧೀಕರಿಸಲಾಗುತ್ತದೆ. ಸ್ಟೈರೀನ್‌ನ ಪಾಲಿಮರೀಕರಣವನ್ನು 100 ° C ನಲ್ಲಿ ನಡೆಸಲಾಯಿತು. 12 ಗಂಟೆಗಳ ಕಾಲ ಉತ್ಪನ್ನವನ್ನು 6 ಕ್ಕಿಂತ ಹೆಚ್ಚು ° C ನಲ್ಲಿ ಒಣಗಿಸಲಾಗುತ್ತದೆ. ಚಿತ್ರ 1 ರಲ್ಲಿ.
10-3 ಟೋರ್‌ಗಿಂತ ಕಡಿಮೆ ಉಳಿದಿರುವ ಒತ್ತಡವನ್ನು ಪಡೆಯಲು ಮಾದರಿಗಳನ್ನು 1 ಗಂಟೆಗೆ 393 ಕೆ ನಲ್ಲಿ ಡಿಗ್ಯಾಸ್ ಮಾಡಲಾಗಿದೆ. P/P0 = 0.99 ರ ಸಾಪೇಕ್ಷ ಒತ್ತಡದಲ್ಲಿ ಹೀರಿಕೊಳ್ಳಲ್ಪಟ್ಟ N2 ಪ್ರಮಾಣವನ್ನು ಒಟ್ಟು ರಂಧ್ರದ ಪರಿಮಾಣವನ್ನು ನಿರ್ಧರಿಸಲು ಬಳಸಲಾಯಿತು. , ಜಪಾನ್).ಒಣಗಿದ ಮಾದರಿಗಳನ್ನು (ಬೇರ್ ಸಿಲಿಕಾ ಮತ್ತು ಲಿಗಂಡ್-ಬಂಧಿತ ಸಿಲಿಕಾ ಕಣಗಳು) ಅಂಟಿಕೊಳ್ಳುವ ಕಾರ್ಬನ್ ಟೇಪ್ ಬಳಸಿ ಅಲ್ಯೂಮಿನಿಯಂ ಕಾಲಮ್‌ನಲ್ಲಿ ಇರಿಸಲಾಗಿದೆ. Q150T ಸ್ಪಟರ್ ಕೋಟರ್ ಬಳಸಿ ಮಾದರಿಗಳ ಮೇಲೆ ಚಿನ್ನವನ್ನು ಲೇಪಿಸಲಾಗಿದೆ ಮತ್ತು 5 nm Au ಪದರವನ್ನು ಮಾದರಿಗಳ ಮೇಲೆ ಠೇವಣಿ ಮಾಡಲಾಗಿದೆ. ಥಾಮ್, MA, USA) Flash EA1112 ಧಾತುರೂಪದ ವಿಶ್ಲೇಷಕವನ್ನು ಧಾತುರೂಪದ ವಿಶ್ಲೇಷಣೆಗಾಗಿ ಬಳಸಲಾಯಿತು. A Malvern (Worcestershire, UK) Mastersizer 2000 ಕಣದ ಗಾತ್ರದ ವಿಶ್ಲೇಷಕವನ್ನು ಕಣದ ಗಾತ್ರದ ವಿತರಣೆಯನ್ನು ಪಡೆಯಲು ಬಳಸಲಾಯಿತು. ನೇಕೆಡ್ ಸಿಲಿಕಾ ಕಣಗಳು ಮತ್ತು ಲಿಗಾಂಡ್-ಬಂಧಿತ ಸಿಲಿಕಾ ಕಣಗಳು 5 ಮಿಗ್ರಾಂ 5 ಮಿಗ್ರಾಂ 5 ಮಿಗ್ರಾಂ 1 ಮಿ.ಗ್ರಾಂ. , 5 ನಿಮಿಷಗಳ ಕಾಲ ಸುಳಿಯಿತು ಮತ್ತು ಮಾಸ್ಟರ್‌ಸೈಜರ್‌ನ ಆಪ್ಟಿಕಲ್ ಬೆಂಚ್‌ನಲ್ಲಿ ಇರಿಸಲಾಗುತ್ತದೆ. 30 ರಿಂದ 800 °C ತಾಪಮಾನದ ವ್ಯಾಪ್ತಿಯಲ್ಲಿ ಪ್ರತಿ ನಿಮಿಷಕ್ಕೆ 5 °C ದರದಲ್ಲಿ ಥರ್ಮೋಗ್ರಾವಿಮೆಟ್ರಿಕ್ ವಿಶ್ಲೇಷಣೆಯನ್ನು ನಡೆಸಲಾಗುತ್ತದೆ.
ಗ್ಲಾಸ್-ಲೇನ್ಡ್ ಸ್ಟೇನ್‌ಲೆಸ್ ಸ್ಟೀಲ್ ಕಿರಿದಾದ-ಬೋರ್ ಆಯಾಮಗಳ ಕಾಲಮ್‌ಗಳನ್ನು (100 × 1.8 ಮಿಮೀ ಐಡಿ) ಸ್ಲರಿ ಪ್ಯಾಕಿಂಗ್ ವಿಧಾನವನ್ನು ಬಳಸಿಕೊಂಡು ಪ್ಯಾಕ್ ಮಾಡಲಾಗಿದೆ, ರೆಫ್‌ನಲ್ಲಿ ಬಳಸಿದ ಅದೇ ವಿಧಾನವನ್ನು ಅನ್ವಯಿಸುತ್ತದೆ.31.ಒಂದು ಸ್ಟೇನ್‌ಲೆಸ್ ಸ್ಟೀಲ್ ಕಾಲಮ್ (ಗ್ಲಾಸ್-ಲೇನ್ಡ್, 100 × 1.8 ಎಂಎಂ ಐಡಿ) 1 µm ಫ್ರಿಟ್ ಅನ್ನು ಹೊಂದಿರುವ ಔಟ್‌ಲೆಟ್ ಫಿಟ್ಟಿಂಗ್ ಅನ್ನು ಸ್ಲರಿ ಪ್ಯಾಕರ್‌ಗೆ ಸಂಪರ್ಕಿಸಲಾಗಿದೆ (ಆಲ್ಟೆಕ್ ಡೀರ್‌ಫೀಲ್ಡ್, IL, USA). ಸ್ಟೇಷನರಿ ಫೇಸ್ ಸ್ಲರಿಯನ್ನು ತಯಾರು ಮಾಡಿ 150 ಮಿಗ್ರಾಂನ ಸ್ಟೇಷನರಿ ಕಾಲಮ್‌ಗಿಂತ 150 ಮಿಗ್ರಾಂನ ಸ್ಟೋರೇಜ್‌ನಲ್ಲಿ ಎಂಎಲ್ 2 ಹಂತಕ್ಕೆ ಕಳುಹಿಸಿ. ಸ್ಲರಿ ದ್ರಾವಕ ಮತ್ತು ಪ್ರೊಪೆಲಿಂಗ್ ದ್ರಾವಕವಾಗಿ ಬಳಸಲಾಗುತ್ತದೆ. 10 ನಿಮಿಷಗಳ ಕಾಲ 100 ಎಂಪಿ, 15 ನಿಮಿಷಗಳಿಗೆ 80 ಎಂಪಿ ಮತ್ತು 30 ನಿಮಿಷಗಳ ಕಾಲ 60 ಎಂಪಿ ಒತ್ತಡವನ್ನು ಅನ್ವಯಿಸುವ ಮೂಲಕ ಕಾಲಮ್ ಅನ್ನು ಅನುಕ್ರಮವಾಗಿ ಭರ್ತಿ ಮಾಡಿ. ಪ್ಯಾಕಿಂಗ್ ಮಾಡುವಾಗ, ಯಾಂತ್ರಿಕ ಕಂಪನವನ್ನು ಎರಡು ಜಿಸಿ ಕಾಲಮ್ ಶೇಕರ್‌ಗಳೊಂದಿಗೆ ಅನ್ವಯಿಸಲಾಗುತ್ತದೆ (ಆಲ್ಟೆಕ್, ಡೀರ್‌ಫೀಲ್ಡ್) ನಿಧಾನವಾಗಿ ಪ್ಯಾಕ್ ಪ್ಯಾಕ್ ಮಾಡಿ sluni. ಕಾಲಮ್‌ನೊಳಗೆ ಯಾವುದೇ ಹಾನಿಯಾಗದಂತೆ ತಡೆಯಲು. ಸ್ಲರಿ ಪ್ಯಾಕಿಂಗ್ ಘಟಕದಿಂದ ಕಾಲಮ್ ಅನ್ನು ಡಿಸ್ಕನೆಕ್ಟ್ ಮಾಡಿ ಮತ್ತು ಅದರ ಕಾರ್ಯಕ್ಷಮತೆಯನ್ನು ಪರಿಶೀಲಿಸಲು ಇನ್ಲೆಟ್ ಮತ್ತು LC ಸಿಸ್ಟಮ್‌ಗೆ ಮತ್ತೊಂದು ಫಿಟ್ಟಿಂಗ್ ಅನ್ನು ಸಂಪರ್ಕಿಸಿ.
LC ಪಂಪ್ (10AD Shimadzu, ಜಪಾನ್), ಇಂಜೆಕ್ಟರ್ (Valco (USA) C14 W.05) ಜೊತೆಗೆ 50nL ಇಂಜೆಕ್ಷನ್ ಲೂಪ್, ಮೆಂಬರೇನ್ ಡಿಗ್ಯಾಸರ್ (Shimadzu DGU-14A), UV-VIS ಕ್ಯಾಪಿಲ್ಲರಿ ವಿಂಡೋವನ್ನು ನಿರ್ಮಿಸಲಾಗಿದೆ ವಿಶೇಷ µLC ಸಾಧನ ಡಿಟೆಕ್ಟರ್ (UV-2075 ಕಿರಿದಾದ ಗ್ಲಾಸ್ ಡಿಟೆಕ್ಟರ್ ಮತ್ತು ಗ್ಲಾಸ್ ಕಿರಿದಾದ µLC ಸಾಧನ ಡಿಟೆಕ್ಟರ್ (UV-2075) ಹೆಚ್ಚುವರಿ ಕಾಲಮ್ ಬ್ಯಾಂಡ್ ವಿಸ್ತರಣೆಯ ಪರಿಣಾಮವನ್ನು iz.ಪ್ಯಾಕೇಜಿಂಗ್ ನಂತರ, ಕ್ಯಾಪಿಲರೀಸ್ (50 μm id 365 ಮತ್ತು ಕಡಿಮೆಗೊಳಿಸುವ ಯೂನಿಯನ್ ಕ್ಯಾಪಿಲ್ಲರಿಗಳನ್ನು (50 μm) ಕಡಿಮೆಗೊಳಿಸುವ ಒಕ್ಕೂಟದ 1/16″ ಔಟ್‌ಲೆಟ್‌ನಲ್ಲಿ ಸ್ಥಾಪಿಸಲಾಗಿದೆ. Multichro 2000 2000 ಪರೀಕ್ಷಾ ಸಾಫ್ಟ್‌ವೇರ್‌ನಲ್ಲಿ Multichro 2000 ಅಬ್ಸಾರ್ಸಿಂಗ್ ಸಾಫ್ಟ್‌ವೇರ್‌ನಲ್ಲಿ ಡೇಟಾ ಸಂಗ್ರಹಣೆ ಮತ್ತು ಕ್ರೊಮ್ಯಾಟೋಗ್ರಾಫಿಕ್ ಸಂಸ್ಕರಣೆಯನ್ನು ಮಾಡಲಾಯಿತು. ಗ್ರಾಫಿಕ್ ಡೇಟಾವನ್ನು OriginPro8 (ನಾರ್ಥಾಂಪ್ಟನ್, MA) ಮೂಲಕ ವಿಶ್ಲೇಷಿಸಲಾಗಿದೆ.
ಹ್ಯೂಮನ್ ಸೀರಮ್‌ನಿಂದ ಅಲ್ಬುಮಿನ್, ಲೈಫೈಲೈಸ್ಡ್ ಪೌಡರ್, ≥ 96% (ಅಗರೋಸ್ ಜೆಲ್ ಎಲೆಕ್ಟ್ರೋಫೋರೆಸಿಸ್) 3 ಮಿಗ್ರಾಂ ಟ್ರಿಪ್ಸಿನ್ (1.5 ಮಿಗ್ರಾಂ), 4.0 ಎಂ ಯೂರಿಯಾ (1 ಎಂಎಲ್), ಮತ್ತು 0.2 ಎಂ ಅಮೋನಿಯಂ ಬೈಕಾರ್ಬನೇಟ್ (1 ಎಂಎಲ್) ನೊಂದಿಗೆ ಬೆರೆಸಲಾಗುತ್ತದೆ. ದ್ರಾವಣವನ್ನು 10 ನಿಮಿಷಗಳ ಕಾಲ ಬೆರೆಸಿ, 10 ನಿಮಿಷಗಳ ಕಾಲ 1 ° C 7 ಗಂಟೆಗಳ ಕಾಲ ನೀರಿನಲ್ಲಿ ಸ್ನಾನ ಮಾಡಿ, 3 ಗಂಟೆಗಳವರೆಗೆ 0 ಸಿ 7 ಗಂಟೆಗಳ ಕಾಲ ಸ್ನಾನದಲ್ಲಿ ಇರಿಸಲಾಗುತ್ತದೆ. 1% TFA. ದ್ರಾವಣವನ್ನು ಫಿಲ್ಟರ್ ಮಾಡಿ ಮತ್ತು 4 °C ಗಿಂತ ಕೆಳಗೆ ಸಂಗ್ರಹಿಸಿ.
ಪೆಪ್ಟೈಡ್ ಮಿಶ್ರಣಗಳು ಮತ್ತು HSA ಟ್ರಿಪ್ಸಿನ್ ಡೈಜೆಸ್ಟ್‌ಗಳ ಪ್ರತ್ಯೇಕತೆಯನ್ನು PMP ಕಾಲಮ್‌ಗಳಲ್ಲಿ ಪ್ರತ್ಯೇಕವಾಗಿ ಮೌಲ್ಯಮಾಪನ ಮಾಡಲಾಗಿದೆ. PMP ಕಾಲಮ್‌ನಿಂದ HSA ಯ ಪೆಪ್ಟೈಡ್ ಮಿಶ್ರಣ ಮತ್ತು ಟ್ರಿಪ್ಸಿನ್ ಡೈಜೆಸ್ಟ್ ಅನ್ನು ಪ್ರತ್ಯೇಕಿಸಿ ಮತ್ತು ಫಲಿತಾಂಶಗಳನ್ನು Ascentis Express RP-Amide ಕಾಲಮ್‌ಗೆ ಹೋಲಿಸಿ. ಸೈದ್ಧಾಂತಿಕ ಪ್ಲೇಟ್ ಸಂಖ್ಯೆಯನ್ನು ಈ ಕೆಳಗಿನಂತೆ ಲೆಕ್ಕಹಾಕಲಾಗುತ್ತದೆ:
ಬೇರ್ ಸಿಲಿಕಾ ಕಣಗಳು ಮತ್ತು ಲಿಗಂಡ್-ಬಂಧಿತ ಸಿಲಿಕಾ ಕಣಗಳ SEM ಚಿತ್ರಗಳನ್ನು FIG ನಲ್ಲಿ ತೋರಿಸಲಾಗಿದೆ.2 .ಬೇರ್ ಸಿಲಿಕಾ ಕಣಗಳ (A, B) SEM ಚಿತ್ರಗಳು, ನಮ್ಮ ಹಿಂದಿನ ಅಧ್ಯಯನಗಳಿಗೆ ವ್ಯತಿರಿಕ್ತವಾಗಿ, ಈ ಕಣಗಳು ಗೋಳಾಕಾರದಲ್ಲಿರುತ್ತವೆ, ಇದರಲ್ಲಿ ಕಣಗಳು ಉದ್ದವಾಗಿರುತ್ತವೆ ಅಥವಾ ಅನಿಯಮಿತ ಸಮ್ಮಿತಿಯನ್ನು ಹೊಂದಿರುತ್ತವೆ. ಲಿಗಂಡ್-ಬಂಧಿತ ಸಿಲಿಕಾ ಕಣಗಳ ಮೇಲ್ಮೈ (C, D) ನಯವಾಗಿರುತ್ತದೆ. ಸಿಲಿಕಾ ಕಣಗಳು.
ಬೇರ್ ಸಿಲಿಕಾ ಕಣಗಳು (A, B) ಮತ್ತು ಲಿಗಂಡ್-ಬಂಧಿತ ಸಿಲಿಕಾ ಕಣಗಳ (C, D) ಎಲೆಕ್ಟ್ರಾನ್ ಸೂಕ್ಷ್ಮದರ್ಶಕದ ಚಿತ್ರಗಳನ್ನು ಸ್ಕ್ಯಾನ್ ಮಾಡುವುದು.
ಬೇರ್ ಸಿಲಿಕಾ ಕಣಗಳು ಮತ್ತು ಲಿಗಂಡ್-ಬಂಧಿತ ಸಿಲಿಕಾ ಕಣಗಳ ಕಣದ ಗಾತ್ರದ ವಿತರಣೆಗಳನ್ನು ಚಿತ್ರ 3(A) ನಲ್ಲಿ ತೋರಿಸಲಾಗಿದೆ. ಸಂಪುಟ ಆಧಾರಿತ ಕಣಗಳ ಗಾತ್ರದ ವಿತರಣಾ ವಕ್ರಾಕೃತಿಗಳು ರಾಸಾಯನಿಕ ಮಾರ್ಪಾಡಿನ ನಂತರ ಸಿಲಿಕಾ ಕಣಗಳ ಗಾತ್ರವು ಹೆಚ್ಚಿದೆ ಎಂದು ತೋರಿಸಿದೆ (ಚಿತ್ರ 3A). ಕಣದ ಗಾತ್ರದ ವಿತರಣಾ ದತ್ತಾಂಶವು ಸಿಲಿಕಾ ಕಣಗಳ ಗಾತ್ರದ ವಿತರಣಾ ದತ್ತಾಂಶವನ್ನು ಪ್ರಸ್ತುತ ಅಧ್ಯಯನದಿಂದ ಹೋಲಿಸಬಹುದಾಗಿದೆ. .5), PMP ಯ 3.36 μm ಆಗಿದೆ, ನಮ್ಮ ಹಿಂದಿನ ಅಧ್ಯಯನಕ್ಕೆ ಹೋಲಿಸಿದರೆ ಜಾಹೀರಾತು(0.5) ಮೌಲ್ಯ 3.05 μm (ಪಾಲಿಸ್ಟೈರೀನ್-ಬೌಂಡ್ ಸಿಲಿಕಾ ಕಣಗಳು)34. ಈ ಬ್ಯಾಚ್ ನಮ್ಮ ಹಿಂದಿನ ಅಧ್ಯಯನಕ್ಕೆ ಹೋಲಿಸಿದರೆ ಕಿರಿದಾದ ಕಣದ ಗಾತ್ರದ ವಿತರಣೆಯನ್ನು ಹೊಂದಿದ್ದು, PEG, ಯೂರಿಯಾ ಮತ್ತು ಆಸಿಟಿಕ್ ಆಸಿಡ್‌ನ ಗಾತ್ರದ ಗಾತ್ರಕ್ಕಿಂತ ದೊಡ್ಡ ಗಾತ್ರದ PMP ಆಸಿಡ್ ಅಂಶವಾಗಿದೆ. ಪಾಲಿಸ್ಟೈರೀನ್-ಬೌಂಡ್ ಸಿಲಿಕಾ ಕಣದ ಹಂತವನ್ನು ನಾವು ಈ ಹಿಂದೆ ಅಧ್ಯಯನ ಮಾಡಿದ್ದೇವೆ. ಇದರರ್ಥ ಸ್ಟೈರೀನ್‌ನೊಂದಿಗೆ ಸಿಲಿಕಾ ಕಣಗಳ ಮೇಲ್ಮೈ ಕಾರ್ಯನಿರ್ವಹಣೆಯು ಸಿಲಿಕಾ ಮೇಲ್ಮೈಯಲ್ಲಿ ಪಾಲಿಸ್ಟೈರೀನ್ ಪದರವನ್ನು (0.97 µm) ಮಾತ್ರ ಇರಿಸುತ್ತದೆ, ಆದರೆ PMP ಹಂತದಲ್ಲಿ ಪದರದ ದಪ್ಪವು 1.38 µm ಆಗಿತ್ತು.
ಬೇರ್ ಸಿಲಿಕಾ ಕಣಗಳು ಮತ್ತು ಲಿಗಂಡ್-ಬೌಂಡ್ ಸಿಲಿಕಾ ಕಣಗಳ ಕಣದ ಗಾತ್ರ ವಿತರಣೆ (A) ಮತ್ತು ರಂಧ್ರ ಗಾತ್ರ ವಿತರಣೆ (B).
ಪ್ರಸ್ತುತ ಅಧ್ಯಯನದ ಸಿಲಿಕಾ ಕಣಗಳ ರಂಧ್ರದ ಗಾತ್ರ, ರಂಧ್ರದ ಪರಿಮಾಣ ಮತ್ತು ಮೇಲ್ಮೈ ವಿಸ್ತೀರ್ಣವನ್ನು ಟೇಬಲ್ 1 (B) ನಲ್ಲಿ ನೀಡಲಾಗಿದೆ. ಬೇರ್ ಸಿಲಿಕಾ ಕಣಗಳು ಮತ್ತು ಲಿಗಂಡ್-ಬಂಧಿತ ಸಿಲಿಕಾ ಕಣಗಳ PSD ಪ್ರೊಫೈಲ್ಗಳನ್ನು ಚಿತ್ರ 3 (B) ನಲ್ಲಿ ತೋರಿಸಲಾಗಿದೆ. ಫಲಿತಾಂಶಗಳು ನಮ್ಮ ಹಿಂದಿನ ಅಧ್ಯಯನಕ್ಕೆ ಹೋಲಿಸಬಹುದು. ಫಲಿತಾಂಶಗಳು ನಮ್ಮ ಹಿಂದಿನ ಅಧ್ಯಯನಕ್ಕೆ ಹೋಲಿಸಬಹುದು. ರಾಸಾಯನಿಕ ಮಾರ್ಪಾಡಿನ ನಂತರ ರಂಧ್ರದ ಗಾತ್ರವು 69 ರಷ್ಟು ಕಡಿಮೆಯಾಗುತ್ತದೆ, ಟೇಬಲ್ 1 (B) ನಲ್ಲಿ ತೋರಿಸಿರುವಂತೆ, ಮತ್ತು ವಕ್ರರೇಖೆಯ ಬದಲಾವಣೆಯನ್ನು ಚಿತ್ರ 3 (B) ನಲ್ಲಿ ತೋರಿಸಲಾಗಿದೆ .ಅಂತೆಯೇ, ರಾಸಾಯನಿಕ ಮಾರ್ಪಾಡಿನ ನಂತರ ಸಿಲಿಕಾ ಕಣಗಳ ರಂಧ್ರದ ಪರಿಮಾಣವು 0.67 ರಿಂದ 0.58 cm3/g ವರೆಗೆ ಕಡಿಮೆಯಾಗಿದೆ 4 m2/g).ಕೋಷ್ಟಕ 1(B) ನಲ್ಲಿ ತೋರಿಸಿರುವಂತೆ, ಸಿಲಿಕಾ ಕಣಗಳ ಮೇಲ್ಮೈ ವಿಸ್ತೀರ್ಣವೂ (m2/g) ರಾಸಾಯನಿಕ ಮಾರ್ಪಾಡಿನ ನಂತರ 116 m2/g ನಿಂದ 105 m2/g ಗೆ ಕಡಿಮೆಯಾಗಿದೆ.
ಸ್ಥಾಯಿ ಹಂತದ ಧಾತುರೂಪದ ವಿಶ್ಲೇಷಣೆಯ ಫಲಿತಾಂಶಗಳನ್ನು ಕೋಷ್ಟಕ 2 ರಲ್ಲಿ ತೋರಿಸಲಾಗಿದೆ. ಪ್ರಸ್ತುತ ಸ್ಥಾಯಿ ಹಂತದ ಇಂಗಾಲದ ಲೋಡಿಂಗ್ 6.35% ಆಗಿದೆ, ಇದು ನಮ್ಮ ಹಿಂದಿನ ಅಧ್ಯಯನದ ಇಂಗಾಲದ ಲೋಡಿಂಗ್‌ಗಿಂತ ಕಡಿಮೆಯಾಗಿದೆ (ಪಾಲಿಸ್ಟೈರೀನ್ ಬಂಧಿತ ಸಿಲಿಕಾ ಕಣಗಳು, ಕ್ರಮವಾಗಿ 7.93% 35 ಮತ್ತು 10.21%) ಸ್ಟೈರೀನ್, ಕೆಲವು ಧ್ರುವೀಯ ಲಿಗಂಡ್‌ಗಳಾದ ಫೀನೈಲ್ಮಲೈಮೈಡ್-ಮೀಥೈಲ್ವಿನೈಲಿಸೋಸೈನೇಟ್ (ಪಿಸಿಎಂಪಿ) ಮತ್ತು 4-ಹೈಡ್ರಾಕ್ಸಿ-ಟೆಂಪೋಗಳನ್ನು ಬಳಸಲಾಗಿದೆ. ಪ್ರಸ್ತುತ ಸ್ಥಾಯಿ ಹಂತದ ಸಾರಜನಕ ತೂಕವು 2.21% ಆಗಿದೆ, ಇದು 0.1735 ಮತ್ತು 0.85% ಕ್ಕೆ ಹೋಲಿಸಿದರೆ ಹಿಂದಿನ ಹಂತದ ನೈಟ್ರೋಜನ್ ತೂಕದ ಪ್ರಕಾರ ಈ ಹಿಂದಿನ ಹಂತದ ನೈಟ್ರೋಜನ್‌ನ ತೂಕದ ಪ್ರಕಾರ %. phenylmaleimide ಗೆ. ಅದೇ ರೀತಿ, ಉತ್ಪನ್ನಗಳ ಕಾರ್ಬನ್ ಲೋಡಿಂಗ್‌ಗಳು (4) ಮತ್ತು (5) ಅನುಕ್ರಮವಾಗಿ 2.7% ಮತ್ತು 2.9% ಆಗಿದ್ದರೆ, ಅಂತಿಮ ಉತ್ಪನ್ನದ (6) ಕಾರ್ಬನ್ ಲೋಡಿಂಗ್ 6.35% ಆಗಿತ್ತು, ಕೋಷ್ಟಕ 2 ರಲ್ಲಿ ತೋರಿಸಿರುವಂತೆ ತೂಕ ನಷ್ಟವನ್ನು PMP ಸ್ಥಾಯಿ ಹಂತದಲ್ಲಿ ಪರಿಶೀಲಿಸಲಾಗಿದೆ. ಮತ್ತು TGA ಕರ್ವ್ 8 ರಲ್ಲಿ ತೋರಿಸಿರುವ ತೂಕ ನಷ್ಟ ಕರ್ವ್ 8 ರಲ್ಲಿ ತೋರಿಸಲಾಗಿದೆ. ಕಾರ್ಬನ್ ಲೋಡಿಂಗ್ (6.35%) ನೊಂದಿಗೆ ಉತ್ತಮ ಒಪ್ಪಂದ ಏಕೆಂದರೆ ಲಿಗಂಡ್‌ಗಳು C ಮಾತ್ರವಲ್ಲದೆ N, O ಮತ್ತು H ಅನ್ನು ಒಳಗೊಂಡಿರುತ್ತವೆ.
ಫಿನೈಲ್ಮಲೈಮೈಡ್-ಮೀಥೈಲ್ವಿನೈಲಿಸೊಸೈನೇಟ್ ಲಿಗಂಡ್ ಅನ್ನು ಸಿಲಿಕಾ ಕಣಗಳ ಮೇಲ್ಮೈ ಮಾರ್ಪಾಡಿಗಾಗಿ ಆಯ್ಕೆಮಾಡಲಾಗಿದೆ ಏಕೆಂದರೆ ಇದು ಧ್ರುವೀಯ ಫಿನೈಲ್ಮಲೈಮೈಡ್ ಗುಂಪುಗಳು ಮತ್ತು ವಿನೈಲಿಸೋಸೈನೇಟ್ ಗುಂಪುಗಳನ್ನು ಹೊಂದಿದೆ. ವಿನೈಲ್ ಐಸೊಸೈನೇಟ್ ಗುಂಪುಗಳು ಜೀವಂತ ರಾಡಿಕಲ್ ಪಾಲಿಮರೀಕರಣದ ಮೂಲಕ ಸ್ಟೈರೀನ್‌ನೊಂದಿಗೆ ಮತ್ತಷ್ಟು ಪ್ರತಿಕ್ರಿಯಿಸುತ್ತವೆ ಸ್ಥಾಯಿ ಹಂತ, ಫಿನೈಲ್ಮಲೈಮೈಡ್ ಭಾಗವು ಸಾಮಾನ್ಯ pH ನಲ್ಲಿ ಯಾವುದೇ ವರ್ಚುವಲ್ ಚಾರ್ಜ್ ಅನ್ನು ಹೊಂದಿರುವುದಿಲ್ಲ. ಸ್ಥಾಯಿ ಹಂತದ ಧ್ರುವೀಯತೆಯನ್ನು ಅತ್ಯುತ್ತಮವಾದ ಸ್ಟೈರೀನ್ ಮತ್ತು ಸ್ವತಂತ್ರ ರಾಡಿಕಲ್ ಪಾಲಿಮರೀಕರಣದ ಪ್ರತಿಕ್ರಿಯೆಯ ಸಮಯದಿಂದ ನಿಯಂತ್ರಿಸಬಹುದು. ಪ್ರತಿಕ್ರಿಯೆಯ ಕೊನೆಯ ಹಂತವು (ಫ್ರೀ-ರಾಡಿಕಲ್ ಪಾಲಿಮರೀಕರಣ) ನಿರ್ಣಾಯಕವಾಗಿದೆ ಮತ್ತು ಇದು ಸ್ಥಾಯಿ ಹಂತದ ಧ್ರುವೀಯತೆಯನ್ನು ಬದಲಾಯಿಸಬಹುದು. ಸ್ಟೈರೀನ್ ಪ್ರಮಾಣ ಮತ್ತು ಪ್ರತಿಕ್ರಿಯೆಯ ಸಮಯವು ಸ್ಥಾಯಿ ಹಂತದ ಕಾರ್ಬನ್ ಲೋಡಿಂಗ್ ಅನ್ನು ಹೆಚ್ಚಿಸಿತು ಮತ್ತು ಪ್ರತಿಯಾಗಿ. ಸ್ಟೈರೀನ್‌ನ ವಿಭಿನ್ನ ಸಾಂದ್ರತೆಗಳೊಂದಿಗೆ ತಯಾರಾದ ಎಸ್‌ಪಿಗಳು ವಿಭಿನ್ನ ಇಂಗಾಲದ ಲೋಡಿಂಗ್‌ಗಳನ್ನು ಹೊಂದಿವೆ. ಮತ್ತೊಮ್ಮೆ, ಈ ಸ್ಥಾಯಿ ಹಂತಗಳನ್ನು ಸ್ಟೇನ್‌ಲೆಸ್ ಸ್ಟೀಲ್ ಕಾಲಮ್‌ಗಳಿಗೆ ಲೋಡ್ ಮಾಡಿ ಮತ್ತು ಅವುಗಳ ಕ್ರೊಮ್ಯಾಟೋಗ್ರಾಫಿಕ್ ಕಾರ್ಯಕ್ಷಮತೆಯನ್ನು ಪರಿಶೀಲಿಸಿ (ಆಯ್ಕೆ, ರೆಸಲ್ಯೂಶನ್, N ಮೌಲ್ಯ, ಇತ್ಯಾದಿಗಳನ್ನು ನಿಯಂತ್ರಿಸಲು ಹಂತ ಹಂತವಾಗಿ ಆಯ್ಕೆಮಾಡಲಾಗಿದೆ. ಧ್ರುವೀಯತೆ ಮತ್ತು ಉತ್ತಮ ವಿಶ್ಲೇಷಣಾತ್ಮಕ ಧಾರಣ.
ಐದು ಪೆಪ್ಟೈಡ್ ಮಿಶ್ರಣಗಳನ್ನು (ಗ್ಲೈ-ಟೈರ್, ಗ್ಲೈ-ಲಿಯು-ಟೈರ್, ಗ್ಲೈ-ಗ್ಲೈ-ಟೈರ್-ಆರ್ಗ್, ಟೈರ್-ಇಲ್-ಗ್ಲೈ-ಸರ್-ಆರ್ಗ್, ಲ್ಯೂಸಿನ್ ಎನ್ಕೆಫಾಲಿನ್) ಮೊಬೈಲ್ ಹಂತವನ್ನು ಬಳಸಿಕೊಂಡು PMP ಕಾಲಮ್ ಅನ್ನು ಬಳಸಿಕೊಂಡು ಮೌಲ್ಯಮಾಪನ ಮಾಡಲಾಯಿತು;60/40 (v/v) ಅಸಿಟೋನೈಟ್ರೈಲ್/ನೀರು (0.1% TFA) 80 μL/min ಹರಿವಿನ ದರದಲ್ಲಿ. ಸೂಕ್ತ ಎಲುಷನ್ ಪರಿಸ್ಥಿತಿಗಳಲ್ಲಿ, ಸೈದ್ಧಾಂತಿಕ ಪ್ಲೇಟ್ ಸಂಖ್ಯೆ (N) ಪ್ರತಿ ಕಾಲಮ್ (100 × 1.8 ಮಿಮೀ ಐಡಿ) 20,000 ± 100 ² ಕ್ಕೆ P ಪ್ಲೇಟ್ ಮೂರು ಮೌಲ್ಯವನ್ನು ನೀಡುತ್ತದೆ (2000 ± 100). MP ಕಾಲಮ್‌ಗಳು ಮತ್ತು ಕ್ರೊಮ್ಯಾಟೋಗ್ರಾಮ್‌ಗಳನ್ನು ಚಿತ್ರ 5A ಯಲ್ಲಿ ತೋರಿಸಲಾಗಿದೆ. PMP ಕಾಲಮ್‌ನಲ್ಲಿ ಹೆಚ್ಚಿನ ಹರಿವಿನ ದರದಲ್ಲಿ (700 μL/min) ವೇಗದ ವಿಶ್ಲೇಷಣೆ, ಒಂದು ನಿಮಿಷದೊಳಗೆ ಐದು ಪೆಪ್ಟೈಡ್‌ಗಳನ್ನು ಎಲಿಟ್ ಮಾಡಲಾಗಿದೆ, N ಮೌಲ್ಯಗಳು ತುಂಬಾ ಉತ್ತಮವಾಗಿವೆ, ಪ್ರತಿ ಕಾಲಮ್‌ಗೆ 13,500 ± 330 (100 × 1.8 mm ನಿಂದ 0 id ವರೆಗೆ) ಒಂದೇ ಗಾತ್ರದ ಕಾಲಮ್‌ಗಳು (100 × 1.8 ಮಿಮೀ ಐಡಿ) ಪುನರುತ್ಪಾದನೆಯನ್ನು ಪರಿಶೀಲಿಸಲು ಮೂರು ವಿಭಿನ್ನ ಪಿಎಂಪಿ ಸ್ಥಾಯಿ ಹಂತಗಳೊಂದಿಗೆ ಪ್ಯಾಕ್ ಮಾಡಲಾಗಿದೆ. ಪ್ರತಿ ಕಾಲಮ್‌ನ ವಿಶ್ಲೇಷಣಾ ಸಾಂದ್ರತೆಯನ್ನು ಸೂಕ್ತ ಎಲುಷನ್ ಪರಿಸ್ಥಿತಿಗಳು ಮತ್ತು ಸೈದ್ಧಾಂತಿಕ ಪ್ಲೇಟ್‌ಗಳ ಸಂಖ್ಯೆ N ಮತ್ತು ಧಾರಣ ಸಮಯವನ್ನು ಬಳಸಿ ದಾಖಲಿಸಲಾಗಿದೆ. ಕೋಷ್ಟಕ 3 ರಲ್ಲಿ ತೋರಿಸಿರುವಂತೆ, ಅತ್ಯಂತ ಕಡಿಮೆ %RSD ಮೌಲ್ಯಗಳೊಂದಿಗೆ ಚೆನ್ನಾಗಿ ಸಂಬಂಧಿಸಿದೆ.
PMP ಕಾಲಮ್ (B) ಮತ್ತು Ascentis Express RP-Amide ಕಾಲಮ್ (A) ನಲ್ಲಿ ಪೆಪ್ಟೈಡ್ ಮಿಶ್ರಣವನ್ನು ಬೇರ್ಪಡಿಸುವುದು;ಮೊಬೈಲ್ ಹಂತ 60/40 ACN/H2O (TFA 0.1%), PMP ಕಾಲಮ್ ಆಯಾಮಗಳು (100 × 1.8 mm id);ವಿಶ್ಲೇಷಣಾತ್ಮಕ ಸಂಯುಕ್ತಗಳ ಎಲುಷನ್ ಕ್ರಮ: 1 (ಗ್ಲೈ-ಟೈರ್), 2 (ಗ್ಲೈ-ಲಿಯು-ಟೈರ್), 3 (ಗ್ಲೈ-ಗ್ಲೈ-ಟೈರ್-ಆರ್ಗ್), 4 (ಟೈರ್-ಇಲ್-ಗ್ಲೈ-ಸರ್-ಆರ್ಗ್) ಮತ್ತು 5 (ಲ್ಯೂಸಿನ್) ಆಮ್ಲ ಎನ್ಕೆಫಾಲಿನ್)).
ಒಂದು PMP ಕಾಲಮ್ (100 × 1.8 mm id) ಮಾನವನ ಸೀರಮ್ ಅಲ್ಬುಮಿನ್‌ನ ಟ್ರಿಪ್ಟಿಕ್ ಡೈಜೆಸ್ಟ್‌ಗಳ ಬೇರ್ಪಡಿಕೆಗಾಗಿ ಹೆಚ್ಚಿನ ಕಾರ್ಯಕ್ಷಮತೆಯ ಲಿಕ್ವಿಡ್ ಕ್ರೊಮ್ಯಾಟೋಗ್ರಫಿಯಲ್ಲಿ ಮೌಲ್ಯಮಾಪನ ಮಾಡಲ್ಪಟ್ಟಿದೆ. ಚಿತ್ರ 6 ರಲ್ಲಿನ ಕ್ರೊಮ್ಯಾಟೋಗ್ರಾಮ್ ಮಾದರಿಯನ್ನು ಚೆನ್ನಾಗಿ ಬೇರ್ಪಡಿಸಲಾಗಿದೆ ಮತ್ತು ರೆಸಲ್ಯೂಶನ್ ತುಂಬಾ ಉತ್ತಮವಾಗಿದೆ ಎಂದು ತೋರಿಸುತ್ತದೆ. ಕ್ರೊಮ್ಯಾಟೋಗ್ರಾಮ್‌ನಲ್ಲಿ ತೋರಿಸಿರುವಂತೆ (ಚಿತ್ರ 6), HSA ಜೀರ್ಣಕ್ರಿಯೆಯನ್ನು 17 ಪೆಪ್ಟೈಡ್‌ಗಳಿಗೆ ಅನುಗುಣವಾಗಿ 17 ಶಿಖರಗಳಾಗಿ ವಿಭಜಿಸಲಾಗಿದೆ. HSA ಡೈಜೆಸ್ಟ್‌ನಲ್ಲಿನ ಪ್ರತಿ ಪೀಕ್‌ನ ಪ್ರತ್ಯೇಕತೆಯ ದಕ್ಷತೆಯನ್ನು ಲೆಕ್ಕಹಾಕಲಾಗಿದೆ ಮತ್ತು ಮೌಲ್ಯಗಳನ್ನು ಕೋಷ್ಟಕ 5 ರಲ್ಲಿ ನೀಡಲಾಗಿದೆ.
HSA (100 × 1.8 mm id) ಯ ಟ್ರಿಪ್ಟಿಕ್ ಡೈಜೆಸ್ಟ್ ಅನ್ನು PMP ಕಾಲಮ್‌ನಲ್ಲಿ ಬೇರ್ಪಡಿಸಲಾಗಿದೆ;ಹರಿವಿನ ಪ್ರಮಾಣ (100 µL/min), ಮೊಬೈಲ್ ಹಂತ 60/40 ಅಸಿಟೋನೈಟ್ರೈಲ್/ನೀರು 0.1% TFA.
ಇಲ್ಲಿ L ಎಂಬುದು ಕಾಲಮ್ ಉದ್ದ, η ಎಂಬುದು ಮೊಬೈಲ್ ಹಂತದ ಸ್ನಿಗ್ಧತೆ, ΔP ಎಂಬುದು ಕಾಲಮ್ ಹಿಂಬದಿಯ ಒತ್ತಡ, ಮತ್ತು u ಎಂಬುದು ಮೊಬೈಲ್ ಹಂತದ ರೇಖಾತ್ಮಕ ವೇಗವಾಗಿದೆ. PMP ಕಾಲಮ್‌ನ ಪ್ರವೇಶಸಾಧ್ಯತೆಯು 2.5 × 10-14 m2, ಹರಿವಿನ ಪ್ರಮಾಣವು 25 μL/min, ಮತ್ತು 60/40 v/v ಕಾಲಮ್ ಅನ್ನು ಬಳಸಲಾಗಿದೆ. 8 mm id) ನಮ್ಮ ಹಿಂದಿನ ಅಧ್ಯಯನದಂತೆಯೇ ಇತ್ತು Ref.34. ಮೇಲ್ನೋಟಕ್ಕೆ ಸರಂಧ್ರ ಕಣಗಳಿಂದ ಪ್ಯಾಕ್ ಮಾಡಲಾದ ಕಾಲಮ್‌ನ ಪ್ರವೇಶಸಾಧ್ಯತೆಯು: 1.3 μm ಕಣಗಳಿಗೆ 1.7 × 10-15, 1.7 μm ಕಣಗಳಿಗೆ 3.1 × 10-15, 1.7 μm ಕಣಗಳಿಗೆ 5.2 × 5 ಮತ್ತು 12 × 5.2 × ಕಣಗಳು 5 μm ಕಣಗಳಿಗೆ 43. ಆದ್ದರಿಂದ, PMP ಹಂತದ ಪ್ರವೇಶಸಾಧ್ಯತೆಯು 5 μm ಕೋರ್-ಶೆಲ್ ಕಣಗಳಂತೆಯೇ ಇರುತ್ತದೆ.
ಇಲ್ಲಿ Wx ಎಂಬುದು ಕ್ಲೋರೊಫಾರ್ಮ್‌ನೊಂದಿಗೆ ಪ್ಯಾಕ್ ಮಾಡಲಾದ ಕಾಲಮ್‌ನ ತೂಕ, Wy ಎಂಬುದು ಮೆಥನಾಲ್‌ನಿಂದ ಪ್ಯಾಕ್ ಮಾಡಲಾದ ಕಾಲಮ್‌ನ ತೂಕ, ಮತ್ತು ρ ಎಂಬುದು ದ್ರಾವಕದ ಸಾಂದ್ರತೆ. ಮೆಥನಾಲ್ (ρ = 0.7866) ಮತ್ತು ಕ್ಲೋರೊಫಾರ್ಮ್ (ρ = 1.484) ಸಾಂದ್ರತೆಗಳು (ρ = 1.484).ಸಿಲಿಕಾ 8 ಕಾಲಮ್‌ಗಳು (1.3 ಸಿಲಿಕಾ PARTIC 8 ಕಾಲಮ್‌ಗಳು × 3.10 ಮಿಮೀ) ನಾವು ಹಿಂದೆ ಅಧ್ಯಯನ ಮಾಡಿದ C18-ಯೂರಿಯಾ ಕಾಲಮ್‌ಗಳು 31 ಕ್ರಮವಾಗಿ 0.63 ಮತ್ತು 0.55. ಇದರರ್ಥ ಯೂರಿಯಾ ಲಿಗಂಡ್‌ಗಳ ಉಪಸ್ಥಿತಿಯು ಸ್ಥಾಯಿ ಹಂತದ ಪ್ರವೇಶಸಾಧ್ಯತೆಯನ್ನು ಕಡಿಮೆ ಮಾಡುತ್ತದೆ. ಮತ್ತೊಂದೆಡೆ, PMP ಕಾಲಮ್‌ನ ಒಟ್ಟು ಸರಂಧ್ರತೆ (100 × 1.8 mm id) 0.60 ಕಾಲಮ್ 1 ಪ್ಯಾಕ್ ಮಾಡಿದ CMP ಯೊಂದಿಗೆ PMP ಕಾಲಮ್ 1 ಕ್ಕಿಂತ ಕಡಿಮೆಯಾಗಿದೆ. C18-ರೀತಿಯ ಸ್ಥಾಯಿ ಹಂತಗಳಲ್ಲಿ C18 ಲಿಗಂಡ್‌ಗಳು ಸಿಲಿಕಾ ಕಣಗಳಿಗೆ ರೇಖೀಯ ಸರಪಳಿಗಳಾಗಿ ಜೋಡಿಸಲ್ಪಟ್ಟಿರುತ್ತವೆ, ಆದರೆ ಪಾಲಿಸ್ಟೈರೀನ್-ಮಾದರಿಯ ಸ್ಥಾಯಿ ಹಂತಗಳಲ್ಲಿ, ತುಲನಾತ್ಮಕವಾಗಿ ದಪ್ಪವಾದ ಪಾಲಿಮರ್ ಪದರವು ಅದರ ಸುತ್ತಲೂ ರೂಪುಗೊಳ್ಳುತ್ತದೆ. ಒಂದು ವಿಶಿಷ್ಟ ಪ್ರಯೋಗದಲ್ಲಿ, ಕಾಲಮ್ ಸರಂಧ್ರತೆಯನ್ನು ಹೀಗೆ ಲೆಕ್ಕಹಾಕಲಾಗುತ್ತದೆ:
ಚಿತ್ರ 7A,B PMP ಕಾಲಮ್ (100 × 1.8 mm id) ಮತ್ತು Ascentis Express RP-Amide ಕಾಲಮ್ (100 × 1.8 mm id) ಅನ್ನು ಅದೇ ಎಲುಷನ್ ಷರತ್ತುಗಳನ್ನು (ಅಂದರೆ, 60/40 ACN/H2O ಮತ್ತು 0.1% TFA) ಬಳಸಿ ತೋರಿಸುತ್ತದೆ.) ವ್ಯಾನ್ ಡೀಮ್ಟರ್ ಕಥಾವಸ್ತುವಿನ.ಆಯ್ದ ಪೆಪ್ಟೈಡ್ ಮಿಶ್ರಣಗಳನ್ನು (Gly-Tyr, Gly-Leu-Tyr, Gly-Gly-Tyr-Arg, Tyr-Ile-Gly-Ser-Arg, Leucine Enkephalin) 20 µL/ ನಲ್ಲಿ ಸಿದ್ಧಪಡಿಸಲಾಗಿದೆ. ಎರಡೂ ಕಾಲಮ್‌ಗಳಿಗೆ ಕನಿಷ್ಠ ಹರಿವಿನ ದರವು 800 µL µL/ನಿಮಿಷ. ) PMP ಕಾಲಮ್ ಮತ್ತು Ascentis ಎಕ್ಸ್‌ಪ್ರೆಸ್ RP-Amide ಕಾಲಮ್‌ಗಳು ಕ್ರಮವಾಗಿ 2.6 µm ಮತ್ತು 3.9 µm ಆಗಿದ್ದವು. HETP ಮೌಲ್ಯಗಳು PMP ಕಾಲಮ್‌ನ (100 × 1.8 mm id) ಪ್ರತ್ಯೇಕತೆಯ ದಕ್ಷತೆಯು ವಾಣಿಜ್ಯಿಕವಾಗಿ ಲಭ್ಯವಿರುವ Ascentis Express Demide ಕಾಲಮ್ × 1 RP-Am 0 ದಲ್ಲಿ PMP 8 ಕ್ಕಿಂತ ಉತ್ತಮವಾಗಿದೆ ಎಂದು ಸೂಚಿಸುತ್ತದೆ 7(A) ನಮ್ಮ ಹಿಂದಿನ ಅಧ್ಯಯನಕ್ಕೆ ಹೋಲಿಸಿದರೆ ಹೆಚ್ಚುತ್ತಿರುವ ಹರಿವಿನೊಂದಿಗೆ N ಮೌಲ್ಯದಲ್ಲಿನ ಇಳಿಕೆಯು ಗಮನಾರ್ಹವಾಗಿಲ್ಲ ಎಂದು ತೋರಿಸುತ್ತದೆ. Ascentis Express RP-Amide ಕಾಲಮ್‌ಗೆ ಹೋಲಿಸಿದರೆ PMP ಕಾಲಮ್‌ನ (100 × 1.8 mm id) ಹೆಚ್ಚಿನ ಪ್ರತ್ಯೇಕತೆಯ ದಕ್ಷತೆಯು ಪ್ರಸ್ತುತ ಕೆಲಸದಲ್ಲಿ ಬಳಸಲಾದ ಕಣದ ಆಕಾರ, ಗಾತ್ರ ಮತ್ತು ಸಂಕೀರ್ಣ ಕಾಲಮ್ ಪ್ಯಾಕಿಂಗ್ ಕಾರ್ಯವಿಧಾನಗಳಲ್ಲಿನ ಸುಧಾರಣೆಗಳನ್ನು ಆಧರಿಸಿದೆ.
(A) ವ್ಯಾನ್ ಡೀಮ್ಟರ್ ಪ್ಲಾಟ್ (HETP ವರ್ಸಸ್ ಮೊಬೈಲ್ ಫೇಸ್ ಲೀನಿಯರ್ ವೇಗ) 60/40 ACN/H2O ನಲ್ಲಿ 0.1% TFA ನೊಂದಿಗೆ PMP ಕಾಲಮ್ (100 × 1.8 mm id) ಬಳಸಿ ಪಡೆಯಲಾಗಿದೆ.(B) van Deemter ಪ್ಲಾಟ್ (HETP ವರ್ಸಸ್ ಮೊಬೈಲ್ ಫೇಸ್ ಲೀನಿಯರ್ ವೆಲಾಸಿಟಿ. HETP 1 ಎಂಎಂಐಡಿ 1 ಎಂಎಂಐಡಿ ಎಕ್ಸ್‌ಪ್ರೆಸ್ ಕಾಲಮ್ ಬಳಸಿ ಪಡೆಯಲಾಗಿದೆ. 0.1% TFA ಜೊತೆಗೆ 60/40 ACN/H2O ನಲ್ಲಿ.
ಸಿಂಥೆಟಿಕ್ ಪೆಪ್ಟೈಡ್ ಮಿಶ್ರಣಗಳು ಮತ್ತು ಹ್ಯೂಮನ್ ಸೀರಮ್ ಅಲ್ಬುಮಿನ್ (HAS) ಯ ಟ್ರಿಪ್ಸಿನ್ ಡೈಜೆಸ್ಟ್‌ಗಳ ಬೇರ್ಪಡಿಕೆಗಾಗಿ ಧ್ರುವ-ಎಂಬೆಡೆಡ್ ಪಾಲಿಸ್ಟೈರೀನ್ ಸ್ಟೇಷನರಿ ಹಂತವನ್ನು ತಯಾರಿಸಲಾಯಿತು ಮತ್ತು ಮೌಲ್ಯಮಾಪನ ಮಾಡಲಾಯಿತು. ಸಿಲಿಕಾ ಕಣಗಳು, ಸ್ಥಾಯಿ ಹಂತದ ನಿಯಂತ್ರಿತ ಸಂಶ್ಲೇಷಣೆ, ಮತ್ತು ಸಂಕೀರ್ಣ ಕಾಲಮ್ ಪ್ಯಾಕಿಂಗ್ ಲಿಕ್ವಿಡ್ ಕ್ರೊಮ್ಯಾಟೋಗ್ರಫಿಯಲ್ಲಿ ರು. ಭವಿಷ್ಯದಲ್ಲಿ, ಪ್ರೋಟೀನ್‌ಗಳು ಮತ್ತು ಮೊನೊಕ್ಲೋನಲ್ ಪ್ರತಿಕಾಯಗಳ ಪ್ರತ್ಯೇಕತೆಗಾಗಿ PMP ಕಾಲಮ್‌ಗಳನ್ನು ಸಹ ಮೌಲ್ಯಮಾಪನ ಮಾಡಲಾಗುತ್ತದೆ.
ಫೀಲ್ಡ್, JK, Euerby, MR, Lau, J., Thøgersen, H. & Petersson, P. ರಿವರ್ಸ್ಡ್ ಫೇಸ್ ಕ್ರೊಮ್ಯಾಟೋಗ್ರಫಿ ಭಾಗ I ಮೂಲಕ ಪೆಪ್ಟೈಡ್ ವಿಭಜನಾ ವ್ಯವಸ್ಥೆಗಳ ಮೇಲೆ ಸಂಶೋಧನೆ: ಕಾಲಮ್ ಕ್ಯಾರೆಕ್ಟರೈಸೇಶನ್ ಪ್ರೋಟೋಕಾಲ್ ಅಭಿವೃದ್ಧಿ.ಕ್ರೊಮ್ಯಾಟೋಗ್ರಫಿ.1603, 113–129.https://doi.org/10.1016/j.chroma.2019.05.038 (2019).
Gomez, B. et al.ಸಾಂಕ್ರಾಮಿಕ ರೋಗಗಳ ಚಿಕಿತ್ಸೆಗಾಗಿ ವಿನ್ಯಾಸಗೊಳಿಸಲಾದ ಸುಧಾರಿತ ಸಕ್ರಿಯ ಪೆಪ್ಟೈಡ್‌ಗಳು.Biotechnology.Advanced.36(2), 415-429.https://doi.org/10.1016/j.biotechadv.2018.01.004 (2018).
Vlieghe, P., Lisowski, V., Martinez, J. & Khrestchatisky, M. ಸಿಂಥೆಟಿಕ್ ಚಿಕಿತ್ಸಕ ಪೆಪ್ಟೈಡ್‌ಗಳು: ವಿಜ್ಞಾನ ಮತ್ತು ಮಾರುಕಟ್ಟೆ. ಡ್ರಗ್ ಡಿಸ್ಕವರಿ.15 (1-2) ಇಂದು, 40-56.https://doi.org/10.1016/j.009.1009.109.
Xie, F., Smith, RD & Shen, Y. ಅಡ್ವಾನ್ಸ್ಡ್ ಪ್ರೋಟಿಯೊಮಿಕ್ ಲಿಕ್ವಿಡ್ ಕ್ರೊಮ್ಯಾಟೋಗ್ರಫಿ.J.ಕ್ರೊಮ್ಯಾಟೋಗ್ರಫಿ.ಎ 1261, 78–90 (2012).
ಲಿಯು, ಡಬ್ಲ್ಯೂ. ಮತ್ತು ಇತರರು. ಸುಧಾರಿತ ಲಿಕ್ವಿಡ್ ಕ್ರೊಮ್ಯಾಟೋಗ್ರಫಿ-ಮಾಸ್ ಸ್ಪೆಕ್ಟ್ರೋಮೆಟ್ರಿಯು ವಿಶಾಲವಾಗಿ ಉದ್ದೇಶಿತ ಚಯಾಪಚಯ ಮತ್ತು ಪ್ರೋಟಿಯೊಮಿಕ್ಸ್.anus.Chim.Acta 1069, 89–97 (2019) ಸಂಯೋಜನೆಯನ್ನು ಸಕ್ರಿಯಗೊಳಿಸುತ್ತದೆ.
ಚೆಸ್ನಟ್, SM & ಸಾಲಿಸ್ಬರಿ, JJ ಔಷಧ ಅಭಿವೃದ್ಧಿಯಲ್ಲಿ UHPLC ಪಾತ್ರ.ಸೆ.30(8), 1183-1190 (2007).
ವೂ, ಎನ್.ಸೆಪ್ಟೆಂಬರ್. Sci.30(8), 1167-1182.https://doi.org/10.1002/jssc.200700026 (2007).
Wren, SA & Tchelitcheff, P. ಡ್ರಗ್ ಡೆವಲಪ್‌ಮೆಂಟ್‌ನಲ್ಲಿ ಅಲ್ಟ್ರಾ-ಹೈ ಪರ್ಫಾರ್ಮೆನ್ಸ್ ಲಿಕ್ವಿಡ್ ಕ್ರೊಮ್ಯಾಟೋಗ್ರಫಿ ಅಪ್ಲಿಕೇಶನ್.J.ಕ್ರೊಮ್ಯಾಟೋಗ್ರಫಿ.1119(1-2), 140-146.https://doi.org/10.1016/j.chroma.2006.02.052 (2006).
Gu, H. et al.ಎಂಟರೊವೈರಸ್‌ಗಳ ಸಮರ್ಥ ಶುದ್ಧೀಕರಣಕ್ಕಾಗಿ ತೈಲ-ನೀರಿನ ಹೆಚ್ಚಿನ ಆಂತರಿಕ ಹಂತದ ಎಮಲ್ಷನ್‌ಗಳಿಂದ ತಯಾರಾದ ಏಕಶಿಲೆಯ ಮ್ಯಾಕ್ರೋಪೊರಸ್ ಹೈಡ್ರೋಜೆಲ್‌ಗಳು.ಕೆಮಿಕಲ್.ಬ್ರಿಟನ್.ಜೆ.401, 126051 (2020).
ಶಿ, ವೈ., ಕ್ಸಿಯಾಂಗ್, ಆರ್., ಹೊರ್ವಾತ್, ಸಿ. & ವಿಲ್ಕಿನ್ಸ್, ಜೆಎ ಪ್ರೋಟಿಯೊಮಿಕ್ಸ್‌ನಲ್ಲಿ ದ್ರವ ವರ್ಣಲೇಖನದ ಪಾತ್ರ.ಜೆ.ಕ್ರೊಮ್ಯಾಟೋಗ್ರಫಿ.ಎ 1053(1-2), 27-36 (2004).
Fekete, S., Veuthey, J.-L.& Guillarme, D. ಚಿಕಿತ್ಸಕ ಪೆಪ್ಟೈಡ್‌ಗಳು ಮತ್ತು ಪ್ರೋಟೀನ್‌ಗಳ ವಿಲೋಮ-ಹಂತದ ಲಿಕ್ವಿಡ್ ಕ್ರೊಮ್ಯಾಟೋಗ್ರಫಿ ಬೇರ್ಪಡಿಕೆಗಳಲ್ಲಿ ಉದಯೋನ್ಮುಖ ಪ್ರವೃತ್ತಿಗಳು: ಸಿದ್ಧಾಂತ ಮತ್ತು ಅನ್ವಯಗಳು.J.Pharmacy.Biomedical Science.anus.69, 9-27 (2012).
Gilar, M., Olivova, P., Daly, AE & Gebler, JC ಮೊದಲ ಮತ್ತು ಎರಡನೇ ಪ್ರತ್ಯೇಕತೆಯ ಆಯಾಮಗಳಲ್ಲಿ ವಿಭಿನ್ನ pH ಮೌಲ್ಯಗಳನ್ನು ಬಳಸಿಕೊಂಡು RP-RP-HPLC ವ್ಯವಸ್ಥೆಯನ್ನು ಬಳಸಿಕೊಂಡು ಪೆಪ್ಟೈಡ್‌ಗಳ ಎರಡು ಆಯಾಮದ ಬೇರ್ಪಡಿಕೆ.ಸೆಪ್ಟೆಂಬರ್. Sci.28(14), 1694-1703 (2005).
ಫೆಲೆಟ್ಟಿ, ಎಸ್. ಎಟ್ ಆಲ್ಸೆಪ್ಟೆಂಬರ್. Sci.43 (9-10), 1737-1745 (2020).
Piovesana, S. et al. ಇತ್ತೀಚಿನ ಪ್ರವೃತ್ತಿಗಳು ಮತ್ತು ವಿಶ್ಲೇಷಣಾತ್ಮಕ ಸವಾಲುಗಳು ಪ್ರತ್ಯೇಕತೆ, ಗುರುತಿಸುವಿಕೆ ಮತ್ತು ಸಸ್ಯ ಬಯೋಆಕ್ಟಿವ್ peptides.anus.biological anus.Chemical.410(15), 3425–3444.https://doi.org/10.1007/020216018018016
ಮುಲ್ಲರ್, JB et al.The proteomic landscape of the Kingdom of life.Nature 582(7813), 592-596.https://doi.org/10.1038/s41586-020-2402-x (2020).
DeLuca, C. et al. ಪೂರ್ವಸಿದ್ಧತಾ ದ್ರವ ಕ್ರೊಮ್ಯಾಟೋಗ್ರಫಿ ಮೂಲಕ ಚಿಕಿತ್ಸಕ ಪೆಪ್ಟೈಡ್‌ಗಳ ಡೌನ್‌ಸ್ಟ್ರೀಮ್ ಸಂಸ್ಕರಣೆ. ಅಣು (ಬಾಸೆಲ್, ಸ್ವಿಟ್ಜರ್ಲೆಂಡ್) 26(15), 4688(2021).
ಯಾಂಗ್, ವೈಕ್ರೊಮ್ಯಾಟೋಗ್ರಫಿ.ಎ 1218(49), 8813–8825 (2011).
ಝಾವೋ, ಜಿ., ಡಾಂಗ್, ಎಕ್ಸ್.-ವೈ.& ಸನ್, ವೈ. ಲಿಗಾಂಡ್ಸ್ ಮಿಶ್ರ-ಮೋಡ್ ಪ್ರೊಟೀನ್ ಕ್ರೊಮ್ಯಾಟೋಗ್ರಫಿ: ತತ್ವ, ಗುಣಲಕ್ಷಣ ಮತ್ತು ವಿನ್ಯಾಸ.ಜೆ.ಜೈವಿಕ ತಂತ್ರಜ್ಞಾನ.144(1), 3-11 (2009).