Nature.com ಗೆ ಭೇಟಿ ನೀಡಿದ್ದಕ್ಕಾಗಿ ಧನ್ಯವಾದಗಳು. ನೀವು ಸೀಮಿತ CSS ಬೆಂಬಲದೊಂದಿಗೆ ಬ್ರೌಸರ್ ಆವೃತ್ತಿಯನ್ನು ಬಳಸುತ್ತಿದ್ದೀರಿ. ಉತ್ತಮ ಅನುಭವಕ್ಕಾಗಿ, ನೀವು ನವೀಕರಿಸಿದ ಬ್ರೌಸರ್ ಅನ್ನು ಬಳಸಬೇಕೆಂದು ನಾವು ಶಿಫಾರಸು ಮಾಡುತ್ತೇವೆ (ಅಥವಾ ಇಂಟರ್ನೆಟ್ ಎಕ್ಸ್‌ಪ್ಲೋರರ್‌ನಲ್ಲಿ ಹೊಂದಾಣಿಕೆ ಮೋಡ್ ಅನ್ನು ನಿಷ್ಕ್ರಿಯಗೊಳಿಸಿ). ಹೆಚ್ಚುವರಿಯಾಗಿ, ನಡೆಯುತ್ತಿರುವ ಬೆಂಬಲವನ್ನು ಖಚಿತಪಡಿಸಿಕೊಳ್ಳಲು, ನಾವು ಶೈಲಿಗಳು ಮತ್ತು ಜಾವಾಸ್ಕ್ರಿಪ್ಟ್ ಇಲ್ಲದೆ ಸೈಟ್ ಅನ್ನು ತೋರಿಸುತ್ತೇವೆ.
ಮೂರು ಸ್ಲೈಡ್‌ಗಳ ಕ್ಯಾರೋಸೆಲ್ ಅನ್ನು ಏಕಕಾಲದಲ್ಲಿ ಪ್ರದರ್ಶಿಸುತ್ತದೆ. ಒಂದೇ ಬಾರಿಗೆ ಮೂರು ಸ್ಲೈಡ್‌ಗಳ ಮೂಲಕ ಚಲಿಸಲು ಹಿಂದಿನ ಮತ್ತು ಮುಂದಿನ ಬಟನ್‌ಗಳನ್ನು ಬಳಸಿ, ಅಥವಾ ಒಂದೇ ಬಾರಿಗೆ ಮೂರು ಸ್ಲೈಡ್‌ಗಳ ಮೂಲಕ ಚಲಿಸಲು ಕೊನೆಯಲ್ಲಿರುವ ಸ್ಲೈಡರ್ ಬಟನ್‌ಗಳನ್ನು ಬಳಸಿ.
ಸೋಲ್-ಜೆಲ್ ವಿಧಾನದ ಮೂಲಕ ರಂಧ್ರವಿರುವ ಸಿಲಿಕಾ ಕಣಗಳನ್ನು ಕೆಲವು ಮಾರ್ಪಾಡುಗಳೊಂದಿಗೆ ತಯಾರಿಸಲಾಯಿತು, ಇದರಿಂದಾಗಿ ವಿಶಾಲ-ರಂಧ್ರ ಕಣಗಳನ್ನು ಪಡೆಯಲಾಯಿತು. ಈ ಕಣಗಳನ್ನು N-ಫೀನೈಲ್‌ಮಲೈಮೈಡ್-ಮೀಥೈಲ್ವಿನೈಲ್ ಐಸೊಸೈನೇಟ್ (PMI) ಮತ್ತು ಸ್ಟೈರೀನ್‌ನೊಂದಿಗೆ ರಿವರ್ಸ್ ಚೈನ್ ಟ್ರಾನ್ಸ್‌ಫರ್-ಫ್ರಾಗ್ಮೆಂಟೇಶನ್ (RAFT) ಪಾಲಿಮರೀಕರಣದ ಮೂಲಕ ಪಡೆಯಲಾಯಿತು ಮತ್ತು N-ಫೀನೈಲ್‌ಮಲೈಮೈಡ್ ಇಂಟರ್ಕಲೇಟೆಡ್ ಪಾಲಿಮೈಡ್‌ಗಳನ್ನು ಉತ್ಪಾದಿಸಲಾಯಿತು. ಸ್ಟೈರೀನ್ (PMP) ಸ್ಥಾಯಿ ಹಂತ. ಕಿರಿದಾದ ಬೋರ್ ಸ್ಟೇನ್‌ಲೆಸ್ ಸ್ಟೀಲ್ ಕಾಲಮ್‌ಗಳನ್ನು (100 × 1.8 ಮಿಮೀ ಒಳಗಿನ ವ್ಯಾಸ) ಸ್ಲರಿ ಪ್ಯಾಕಿಂಗ್‌ನೊಂದಿಗೆ ಪ್ಯಾಕ್ ಮಾಡಲಾಯಿತು. ಐದು ಪೆಪ್ಟೈಡ್‌ಗಳನ್ನು (ಗ್ಲೈ-ಟೈರ್, ಗ್ಲೈ-ಲ್ಯೂ-ಟೈರ್, ಗ್ಲೈ-ಗ್ಲೈ-ಟೈರ್-ಆರ್ಗ್, ಟೈರ್-ಐಲ್-ಗ್ಲೈ-ಸರ್-ಆರ್ಗ್, ಲ್ಯೂ ಅಮೈನೊ ಆಸಿಡ್ ಎನ್‌ಕೆಫಾಲಿನ್) ಒಳಗೊಂಡಿರುವ ಸಂಶ್ಲೇಷಿತ ಪೆಪ್ಟೈಡ್‌ಗಳ ಮಿಶ್ರಣವನ್ನು ಪ್ರತ್ಯೇಕಿಸಲು PMP ಕಾಲಮ್‌ನ ಕ್ರೊಮ್ಯಾಟೋಗ್ರಾಫಿಕ್ ಕಾರ್ಯಕ್ಷಮತೆಯನ್ನು ಮೌಲ್ಯಮಾಪನ ಮಾಡಲಾಯಿತು (HAS). ಸೂಕ್ತ ಎಲ್ಯುಷನ್ ಪರಿಸ್ಥಿತಿಗಳಲ್ಲಿ, ಪೆಪ್ಟೈಡ್‌ಗಳ ಮಿಶ್ರಣವನ್ನು ಹೊಂದಿರುವ ಪ್ಲೇಟ್‌ಗಳ ಸೈದ್ಧಾಂತಿಕ ಸಂಖ್ಯೆ 280,000 ಪ್ಲೇಟ್‌ಗಳು/ಚ.ಮೀ. ತಲುಪಿತು. ಅಭಿವೃದ್ಧಿಪಡಿಸಿದ ಕಾಲಮ್‌ನ ಬೇರ್ಪಡಿಕೆ ಕಾರ್ಯಕ್ಷಮತೆಯನ್ನು ವಾಣಿಜ್ಯ ಅಸೆಂಟಿಸ್ ಎಕ್ಸ್‌ಪ್ರೆಸ್ ಆರ್‌ಪಿ-ಅಮೈಡ್ ಕಾಲಮ್‌ನೊಂದಿಗೆ ಹೋಲಿಸಿದಾಗ, ಪಿಎಂಪಿ ಕಾಲಮ್‌ನ ಬೇರ್ಪಡಿಕೆ ದಕ್ಷತೆಯು ಬೇರ್ಪಡಿಕೆ ದಕ್ಷತೆ ಮತ್ತು ರೆಸಲ್ಯೂಶನ್ ವಿಷಯದಲ್ಲಿ ವಾಣಿಜ್ಯ ಕಾಲಮ್‌ಗಿಂತ ಉತ್ತಮವಾಗಿದೆ ಎಂದು ಗಮನಿಸಲಾಗಿದೆ.
ಇತ್ತೀಚಿನ ವರ್ಷಗಳಲ್ಲಿ ಬಯೋಫಾರ್ಮಾಸ್ಯುಟಿಕಲ್ ಉದ್ಯಮವು ಮಾರುಕಟ್ಟೆ ಪಾಲಿನಲ್ಲಿ ಗಮನಾರ್ಹ ಹೆಚ್ಚಳದೊಂದಿಗೆ ವಿಸ್ತರಿಸುತ್ತಿರುವ ಜಾಗತಿಕ ಮಾರುಕಟ್ಟೆಯಾಗಿದೆ. ಬಯೋಫಾರ್ಮಾಸ್ಯುಟಿಕಲ್ ಉದ್ಯಮದ ಸ್ಫೋಟಕ ಬೆಳವಣಿಗೆಯೊಂದಿಗೆ1,2,3 ಪೆಪ್ಟೈಡ್ ಮತ್ತು ಪ್ರೋಟೀನ್ ವಿಶ್ಲೇಷಣೆಗೆ ಹೆಚ್ಚಿನ ಅವಶ್ಯಕತೆಯಿದೆ. ಗುರಿ ಪೆಪ್ಟೈಡ್ ಜೊತೆಗೆ, ಪೆಪ್ಟೈಡ್ ಸಂಶ್ಲೇಷಣೆಯ ಸಮಯದಲ್ಲಿ ವಿವಿಧ ಕಲ್ಮಶಗಳು ರೂಪುಗೊಳ್ಳುತ್ತವೆ, ಆದ್ದರಿಂದ ಪೆಪ್ಟೈಡ್‌ನ ಅಪೇಕ್ಷಿತ ಶುದ್ಧತೆಯನ್ನು ಪಡೆಯಲು ಕ್ರೊಮ್ಯಾಟೋಗ್ರಾಫಿಕ್ ಶುದ್ಧೀಕರಣದ ಅಗತ್ಯವಿದೆ. ಒಂದೇ ಮಾದರಿಯಲ್ಲಿ ಹೆಚ್ಚಿನ ಸಂಖ್ಯೆಯ ಸಂಭಾವ್ಯವಾಗಿ ಪತ್ತೆಹಚ್ಚಬಹುದಾದ ಜಾತಿಗಳು ಇರುವುದರಿಂದ ದೇಹದ ದ್ರವಗಳು, ಅಂಗಾಂಶಗಳು ಮತ್ತು ಜೀವಕೋಶಗಳಲ್ಲಿನ ಪ್ರೋಟೀನ್‌ಗಳ ವಿಶ್ಲೇಷಣೆ ಮತ್ತು ಗುಣಲಕ್ಷಣವು ಅತ್ಯಂತ ಸವಾಲಿನ ಕೆಲಸವಾಗಿದೆ. ಪೆಪ್ಟೈಡ್‌ಗಳು ಮತ್ತು ಪ್ರೋಟೀನ್‌ಗಳನ್ನು ಅನುಕ್ರಮಗೊಳಿಸಲು ಮಾಸ್ ಸ್ಪೆಕ್ಟ್ರೋಮೆಟ್ರಿ ಪರಿಣಾಮಕಾರಿ ಸಾಧನವಾಗಿದ್ದರೂ, ಅಂತಹ ಮಾದರಿಗಳನ್ನು ನೇರವಾಗಿ ಮಾಸ್ ಸ್ಪೆಕ್ಟ್ರೋಮೀಟರ್‌ಗೆ ಪರಿಚಯಿಸಿದರೆ, ಬೇರ್ಪಡಿಕೆ ಅತೃಪ್ತಿಕರವಾಗಿರುತ್ತದೆ. MS ವಿಶ್ಲೇಷಣೆಯ ಮೊದಲು ದ್ರವ ಕ್ರೊಮ್ಯಾಟೋಗ್ರಫಿ (LC) ಮಾಡುವ ಮೂಲಕ ಈ ಸಮಸ್ಯೆಯನ್ನು ಪರಿಹರಿಸಬಹುದು, ಇದು ನಿರ್ದಿಷ್ಟ ಸಮಯದಲ್ಲಿ ಮಾಸ್ ಸ್ಪೆಕ್ಟ್ರೋಮೀಟರ್‌ಗೆ ಪ್ರವೇಶಿಸುವ ವಿಶ್ಲೇಷಕಗಳ ಪ್ರಮಾಣವನ್ನು ಕಡಿಮೆ ಮಾಡುತ್ತದೆ4,5,6. ಇದರ ಜೊತೆಗೆ, ದ್ರವ ಹಂತದ ಬೇರ್ಪಡಿಕೆಯ ಸಮಯದಲ್ಲಿ ವಿಶ್ಲೇಷಕಗಳು ಕಿರಿದಾದ ಪ್ರದೇಶದಲ್ಲಿ ಕೇಂದ್ರೀಕರಿಸಬಹುದು, ಇದರಿಂದಾಗಿ ಈ ವಿಶ್ಲೇಷಕಗಳನ್ನು ಕೇಂದ್ರೀಕರಿಸುತ್ತದೆ ಮತ್ತು MS ಪತ್ತೆಯ ಸೂಕ್ಷ್ಮತೆಯನ್ನು ಹೆಚ್ಚಿಸುತ್ತದೆ. ಕಳೆದ ದಶಕದಲ್ಲಿ ದ್ರವ ವರ್ಣರೇಖನ (LC) ಗಮನಾರ್ಹವಾಗಿ ಮುಂದುವರೆದಿದೆ ಮತ್ತು ಪ್ರೋಟಿಯೋಮಿಕ್ ವಿಶ್ಲೇಷಣೆಗೆ ವ್ಯಾಪಕವಾಗಿ ಬಳಸಲಾಗುವ ವಿಧಾನವಾಗಿದೆ7,8,9,10.
ಆಕ್ಟಾಡೆಸಿಲ್-ಮಾರ್ಪಡಿಸಿದ ಸಿಲಿಕಾ (ODS) ಅನ್ನು ಸ್ಥಿರ ಹಂತವಾಗಿ ಬಳಸಿಕೊಂಡು ಪೆಪ್ಟೈಡ್‌ಗಳ ಮಿಶ್ರಣಗಳನ್ನು ಶುದ್ಧೀಕರಿಸಲು ಮತ್ತು ಪ್ರತ್ಯೇಕಿಸಲು ರಿವರ್ಸ್-ಫೇಸ್ ಲಿಕ್ವಿಡ್ ಕ್ರೊಮ್ಯಾಟೋಗ್ರಫಿ (RP-LC) ಅನ್ನು ವ್ಯಾಪಕವಾಗಿ ಬಳಸಲಾಗುತ್ತದೆ11,12,13. ಆದಾಗ್ಯೂ, ಅವುಗಳ ಸಂಕೀರ್ಣ ರಚನೆ ಮತ್ತು ಆಂಫೋಟೆರಿಕ್ ಸ್ವಭಾವದಿಂದಾಗಿ,14,15 RP ಸ್ಥಾಯಿ ಹಂತಗಳು ಪೆಪ್ಟೈಡ್‌ಗಳು ಮತ್ತು ಪ್ರೋಟೀನ್‌ಗಳ ತೃಪ್ತಿದಾಯಕ ಪ್ರತ್ಯೇಕತೆಯನ್ನು ಒದಗಿಸಲು ಸಾಧ್ಯವಿಲ್ಲ. ಆದ್ದರಿಂದ, ಧ್ರುವೀಯ ಮತ್ತು ಧ್ರುವೀಯವಲ್ಲದ ತುಣುಕುಗಳೊಂದಿಗೆ ಪೆಪ್ಟೈಡ್‌ಗಳು ಮತ್ತು ಪ್ರೋಟೀನ್‌ಗಳ ವಿಶ್ಲೇಷಣೆಗೆ ಈ ವಿಶ್ಲೇಷಕಗಳನ್ನು ಸಂವಹನ ಮಾಡಲು ಮತ್ತು ಉಳಿಸಿಕೊಳ್ಳಲು ವಿಶೇಷವಾಗಿ ವಿನ್ಯಾಸಗೊಳಿಸಲಾದ ಸ್ಥಾಯಿ ಹಂತಗಳು ಬೇಕಾಗುತ್ತವೆ16. ಮಲ್ಟಿಮೋಡಲ್ ಸಂವಹನಗಳನ್ನು ನೀಡುವ ಮಿಶ್ರ ಕ್ರೊಮ್ಯಾಟೋಗ್ರಫಿ, ಪೆಪ್ಟೈಡ್‌ಗಳು, ಪ್ರೋಟೀನ್‌ಗಳು ಮತ್ತು ಇತರ ಸಂಕೀರ್ಣ ಮಿಶ್ರಣಗಳನ್ನು ಬೇರ್ಪಡಿಸಲು RP-LC ಗೆ ಪರ್ಯಾಯವಾಗಿರಬಹುದು. ಹಲವಾರು ಮಿಶ್ರ-ಮಾದರಿಯ ಸ್ಥಾಯಿ ಹಂತಗಳನ್ನು ತಯಾರಿಸಲಾಯಿತು ಮತ್ತು ಈ ಸ್ಥಾಯಿ ಹಂತಗಳಿಂದ ತುಂಬಿದ ಕಾಲಮ್‌ಗಳನ್ನು ಪೆಪ್ಟೈಡ್‌ಗಳು ಮತ್ತು ಪ್ರೋಟೀನ್‌ಗಳನ್ನು ಪ್ರತ್ಯೇಕಿಸಲು ಬಳಸಲಾಯಿತು17,18,19,20,21. ಧ್ರುವೀಯ ಮತ್ತು ಧ್ರುವೀಯವಲ್ಲದ ಗುಂಪುಗಳ ಉಪಸ್ಥಿತಿಯಿಂದಾಗಿ, ಮಿಶ್ರ ಮೋಡ್ ಸ್ಟೇಷನರಿ ಹಂತಗಳು (WAX/RPLC, HILIC/RPLC, ಪೋಲಾರ್ ಇಂಟರ್ಕಲೇಷನ್/RPLC) ಪೆಪ್ಟೈಡ್‌ಗಳು ಮತ್ತು ಪ್ರೋಟೀನ್‌ಗಳ ಪ್ರತ್ಯೇಕತೆಗೆ ಸೂಕ್ತವಾಗಿವೆ22,23,24,25,26,27,28. , ಕೋವೆಲೆಂಟ್ಲಿ ಬಂಧಿತ ಧ್ರುವ ಗುಂಪುಗಳೊಂದಿಗೆ ಧ್ರುವೀಯ ಇಂಟರ್ಕಲೇಟೆಡ್ ಸ್ಟೇಷನರಿ ಹಂತಗಳು ಧ್ರುವೀಯ ಮತ್ತು ಧ್ರುವೀಯವಲ್ಲದ ವಿಶ್ಲೇಷಕಗಳಿಗೆ ಉತ್ತಮ ಬೇರ್ಪಡಿಕೆ ಸಾಮರ್ಥ್ಯಗಳು ಮತ್ತು ವಿಶಿಷ್ಟ ಆಯ್ಕೆಗಳನ್ನು ತೋರಿಸುತ್ತವೆ ಏಕೆಂದರೆ ಬೇರ್ಪಡಿಕೆಯು ವಿಶ್ಲೇಷಕ ಮತ್ತು ಸ್ಥಾಯಿ ಹಂತದ ನಡುವಿನ ಪರಸ್ಪರ ಕ್ರಿಯೆಯನ್ನು ಅವಲಂಬಿಸಿರುತ್ತದೆ ಮಲ್ಟಿಮೋಡಲ್ ಸಂವಹನಗಳು 29,30,31,32. ಇತ್ತೀಚೆಗೆ, ಜಾಂಗ್ ಮತ್ತು ಇತರರು 30 ಪಾಲಿಮೈನ್‌ಗಳ ಬೆಹೆನೈಲ್-ಟರ್ಮಿನೇಟೆಡ್ ಸ್ಟೇಷನರಿ ಹಂತಗಳನ್ನು ಪಡೆದರು ಮತ್ತು ಹೈಡ್ರೋಕಾರ್ಬನ್‌ಗಳು, ಖಿನ್ನತೆ-ಶಮನಕಾರಿಗಳು, ಫ್ಲೇವನಾಯ್ಡ್‌ಗಳು, ನ್ಯೂಕ್ಲಿಯೊಸೈಡ್‌ಗಳು, ಈಸ್ಟ್ರೋಜೆನ್‌ಗಳು ಮತ್ತು ಕೆಲವು ಇತರ ವಿಶ್ಲೇಷಕಗಳನ್ನು ಯಶಸ್ವಿಯಾಗಿ ಬೇರ್ಪಡಿಸಿದರು. ಧ್ರುವ ಎಂಬೆಡೆಡ್ ಸ್ಟೇಷನರಿ ವಸ್ತುವು ಧ್ರುವೀಯ ಮತ್ತು ಧ್ರುವೀಯವಲ್ಲದ ಗುಂಪುಗಳನ್ನು ಹೊಂದಿದೆ, ಆದ್ದರಿಂದ ಇದನ್ನು ಪೆಪ್ಟೈಡ್‌ಗಳು ಮತ್ತು ಪ್ರೋಟೀನ್‌ಗಳನ್ನು ಹೈಡ್ರೋಫೋಬಿಕ್ ಮತ್ತು ಹೈಡ್ರೋಫಿಲಿಕ್ ಭಾಗಗಳಾಗಿ ಬೇರ್ಪಡಿಸಲು ಬಳಸಬಹುದು. ಪೋಲಾರ್ ಇನ್‌ಲೈನ್ ಕಾಲಮ್‌ಗಳು (ಉದಾ., ಅಮೈಡ್ ಇನ್‌ಲೈನ್ ಹೊಂದಿರುವ C18 ಕಾಲಮ್‌ಗಳು) ಅಸೆಂಟಿಸ್ ಎಕ್ಸ್‌ಪ್ರೆಸ್ RP-ಅಮೈಡ್ ಕಾಲಮ್‌ಗಳು ಎಂಬ ವ್ಯಾಪಾರ ಹೆಸರಿನಲ್ಲಿ ಲಭ್ಯವಿದೆ, ಆದರೆ ಈ ಕಾಲಮ್‌ಗಳನ್ನು ಅಮೈನ್ 33 ರ ವಿಶ್ಲೇಷಣೆಗೆ ಮಾತ್ರ ಬಳಸಲಾಗಿದೆ.
ಪ್ರಸ್ತುತ ಅಧ್ಯಯನದಲ್ಲಿ, ಪೆಪ್ಟೈಡ್ ಬೇರ್ಪಡಿಕೆ ಮತ್ತು ಟ್ರಿಪ್ಟಿಕ್ HSA ಸೀಳುವಿಕೆಗಾಗಿ ಧ್ರುವೀಯ ಎಂಬೆಡಿಂಗ್ ಸ್ಥಾಯಿ ಹಂತ (N-ಫೀನೈಲ್‌ಮಲೈಮೈಡ್, ಎಂಬೆಡಿಂಗ್ ಪಾಲಿಸ್ಟೈರೀನ್) ಅನ್ನು ತಯಾರಿಸಿ ಮೌಲ್ಯಮಾಪನ ಮಾಡಲಾಯಿತು. ಸ್ಥಾಯಿ ಹಂತವನ್ನು ತಯಾರಿಸಲು ಈ ಕೆಳಗಿನ ತಂತ್ರವನ್ನು ಬಳಸಲಾಯಿತು. ನಮ್ಮ ಹಿಂದಿನ ಪ್ರಕಟಣೆಗಳಲ್ಲಿ ವಿವರಿಸಿದ ಕಾರ್ಯವಿಧಾನಗಳ ಪ್ರಕಾರ ಸರಂಧ್ರ ಸಿಲಿಕಾ ಕಣಗಳನ್ನು ತಯಾರಿಸಲಾಯಿತು, ತಯಾರಿ ಯೋಜನೆಗಳು 31, 34, 35, 36, 37, 38, 39 ರಲ್ಲಿ ಕೆಲವು ಬದಲಾವಣೆಗಳೊಂದಿಗೆ. ಯೂರಿಯಾ, ಪಾಲಿಥಿಲೀನ್ ಗ್ಲೈಕಾಲ್ (PEG), TMOS ಮತ್ತು ಜಲೀಯ-ಅಸಿಟಿಕ್ ಆಮ್ಲದ ಅನುಪಾತಗಳನ್ನು ದೊಡ್ಡ ರಂಧ್ರದ ಗಾತ್ರಗಳೊಂದಿಗೆ ಸಿಲಿಕಾ ಕಣಗಳನ್ನು ಪಡೆಯಲು ಸರಿಹೊಂದಿಸಲಾಯಿತು. ಎರಡನೆಯದಾಗಿ, ಹೊಸ ಫೀನೈಲ್‌ಮಲೈಮೈಡ್-ಮೀಥೈಲ್‌ವಿನೈಲ್ ಐಸೊಸೈನೇಟ್ ಲಿಗಂಡ್ ಅನ್ನು ಸಂಶ್ಲೇಷಿಸಲಾಯಿತು ಮತ್ತು ಅದರ ಉತ್ಪನ್ನವಾದ ಸಿಲಿಕಾ ಕಣಗಳನ್ನು ಧ್ರುವೀಯ ಎಂಬೆಡೆಡ್ ಸ್ಥಾಯಿ ಹಂತಗಳನ್ನು ತಯಾರಿಸಲು ಬಳಸಲಾಯಿತು. ಪಡೆದ ಸ್ಥಾಯಿ ಹಂತವನ್ನು ಅತ್ಯುತ್ತಮವಾದ ಪ್ಯಾಕಿಂಗ್ ಯೋಜನೆಯ ಪ್ರಕಾರ ಸ್ಟೇನ್‌ಲೆಸ್ ಸ್ಟೀಲ್ ಕಾಲಮ್‌ಗೆ (ಒಳಗಿನ ವ್ಯಾಸ 100 × 1.8 ಮಿಮೀ) ಪ್ಯಾಕ್ ಮಾಡಲಾಯಿತು. ಕಾಲಮ್‌ನ ಪ್ಯಾಕಿಂಗ್‌ಗೆ ಯಾಂತ್ರಿಕ ಕಂಪನದಿಂದ ಸಹಾಯವಾಗುತ್ತದೆ ಇದರಿಂದ ಕಾಲಮ್‌ನೊಳಗೆ ಏಕರೂಪದ ಪದರವನ್ನು ಖಚಿತಪಡಿಸಿಕೊಳ್ಳಬಹುದು. ಪ್ಯಾಕ್ ಮಾಡಲಾದ ಕಾಲಮ್ ಅನ್ನು ಐದು ಪೆಪ್ಟೈಡ್‌ಗಳನ್ನು (ಗ್ಲೈ-ಟೈರ್, ಗ್ಲೈ-ಲ್ಯೂ-ಟೈರ್, ಗ್ಲೈ-ಗ್ಲೈ-ಟೈರ್-ಆರ್ಗ್, ಟೈರ್-ಐಲ್-ಗ್ಲೈ-ಸರ್-ಆರ್ಗ್, ಲ್ಯೂಸಿನ್-ಎನ್‌ಕೆಫಾಲಿನ್ ಪೆಪ್ಟೈಡ್) ಒಳಗೊಂಡಿರುವ ಪೆಪ್ಟೈಡ್‌ಗಳ ಮಿಶ್ರಣವನ್ನು ಬೇರ್ಪಡಿಸಲು ಮೌಲ್ಯಮಾಪನ ಮಾಡಲಾಯಿತು. ಮತ್ತು ಮಾನವ ಸೀರಮ್ ಅಲ್ಬುಮಿನ್ (HSA) ನ ಟ್ರಿಪ್ಟಿಕ್ ಹೈಡ್ರೊಲೈಸೇಟ್‌ಗಳು. ಪೆಪ್ಟೈಡ್ ಮಿಶ್ರಣ ಮತ್ತು HSA ಟ್ರಿಪ್ಟಿಕ್ ಡೈಜೆಸ್ಟ್ ಉತ್ತಮ ರೆಸಲ್ಯೂಶನ್ ಮತ್ತು ದಕ್ಷತೆಯೊಂದಿಗೆ ಬೇರ್ಪಟ್ಟಿರುವುದನ್ನು ಗಮನಿಸಲಾಯಿತು. PMP ಕಾಲಮ್‌ನ ಬೇರ್ಪಡಿಕೆ ದಕ್ಷತೆಯನ್ನು ಅಸೆಂಟಿಸ್ ಎಕ್ಸ್‌ಪ್ರೆಸ್ RP-ಅಮೈಡ್ ಕಾಲಮ್‌ಗೆ ಹೋಲಿಸಲಾಯಿತು. PMP ಕಾಲಮ್‌ನಲ್ಲಿ ಪೆಪ್ಟೈಡ್‌ಗಳು ಮತ್ತು ಪ್ರೋಟೀನ್‌ಗಳು ಉತ್ತಮ ರೆಸಲ್ಯೂಶನ್ ಮತ್ತು ಹೆಚ್ಚಿನ ಬೇರ್ಪಡಿಕೆ ದಕ್ಷತೆಯನ್ನು ಹೊಂದಿವೆ ಎಂದು ಗಮನಿಸಲಾಯಿತು ಮತ್ತು PMP ಕಾಲಮ್‌ನ ಬೇರ್ಪಡಿಕೆ ದಕ್ಷತೆಯು ಅಸೆಂಟಿಸ್ ಎಕ್ಸ್‌ಪ್ರೆಸ್ RP-ಅಮೈಡ್ ಕಾಲಮ್‌ಗಿಂತ ಹೆಚ್ಚಾಗಿದೆ ಎಂದು ಗಮನಿಸಲಾಯಿತು.
PEG (ಪಾಲಿಥಿಲೀನ್ ಗ್ಲೈಕಾಲ್), ಯೂರಿಯಾ, ಅಸಿಟಿಕ್ ಆಮ್ಲ, ಟ್ರೈಮೆಥಾಕ್ಸಿಆರ್ಥೊಸಿಲಿಕೇಟ್ (TMOS), ಟ್ರೈಮೀಥೈಲ್ಕ್ಲೋರೋಸಿಲೇನ್ (TMCS), ಟ್ರಿಪ್ಸಿನ್, ಹ್ಯೂಮನ್ ಸೀರಮ್ ಅಲ್ಬುಮಿನ್ (HSA), ಅಮೋನಿಯಂ ಕ್ಲೋರೈಡ್, ಯೂರಿಯಾ, ಹೆಕ್ಸಾಮೀಥೈಲ್ಮೆಥಾಕ್ರಿಲೋಯ್ಲ್ಡಿಸಿಲಾಜೇನ್ (HMDS), ಮೆಥಾಕ್ರಿಲೋಯ್ಲ್ ಕ್ಲೋರೈಡ್ (MC), ಸ್ಟೈರೀನ್, 4-ಹೈಡ್ರಾಕ್ಸಿ- TEMPO, ಬೆಂಜಾಯ್ಲ್ ಪೆರಾಕ್ಸೈಡ್ (BPO), HPLC ಗಾಗಿ ಅಸಿಟೋನಿಟ್ರೈಲ್ (ACN), ಮೀಥನಾಲ್, 2-ಪ್ರೊಪನಾಲ್ ಮತ್ತು ಅಸಿಟೋನ್. ಸಿಗ್ಮಾ-ಆಲ್ಡ್ರಿಚ್ ಕಂಪನಿ (ಸೇಂಟ್ ಲೂಯಿಸ್, ಮಿಸೌರಿ, USA).
ಯೂರಿಯಾ (8 ಗ್ರಾಂ), ಪಾಲಿಥಿಲೀನ್ ಗ್ಲೈಕಾಲ್ (8 ಗ್ರಾಂ) ಮತ್ತು 0.01 N ನ 8 ಮಿಲಿ. ಅಸಿಟಿಕ್ ಆಮ್ಲದ ಮಿಶ್ರಣವನ್ನು 10 ನಿಮಿಷಗಳ ಕಾಲ ಬೆರೆಸಿ, 24 ಮಿಲಿ TMOS ಅನ್ನು ಐಸ್-ಕೂಲಿಂಗ್ ಅಡಿಯಲ್ಲಿ ಸೇರಿಸಲಾಯಿತು. ಪ್ರತಿಕ್ರಿಯಾ ಮಿಶ್ರಣವನ್ನು 40°C ನಲ್ಲಿ 6 ಗಂಟೆಗಳ ಕಾಲ ಮತ್ತು ನಂತರ 120°C ನಲ್ಲಿ 8 ಗಂಟೆಗಳ ಕಾಲ ಸ್ಟೇನ್‌ಲೆಸ್ ಸ್ಟೀಲ್ ಆಟೋಕ್ಲೇವ್‌ನಲ್ಲಿ ಬಿಸಿ ಮಾಡಲಾಯಿತು. ನೀರನ್ನು ಡಿಕಾಂಟ್ ಮಾಡಿ ಮತ್ತು ಶೇಷವನ್ನು 70°C ನಲ್ಲಿ 12 ಗಂಟೆಗಳ ಕಾಲ ಒಣಗಿಸಲಾಯಿತು. ಒಣಗಿದ ಮೃದುವಾದ ಬ್ಲಾಕ್‌ಗಳನ್ನು ಸರಾಗವಾಗಿ ಪುಡಿಮಾಡಿ 550°C ನಲ್ಲಿ ಒಲೆಯಲ್ಲಿ 12 ಗಂಟೆಗಳ ಕಾಲ ಕ್ಯಾಲ್ಸಿನ್ ಮಾಡಲಾಯಿತು. ಕಣಗಳ ಗಾತ್ರಗಳು, ರಂಧ್ರದ ಗಾತ್ರ ಮತ್ತು ಮೇಲ್ಮೈ ವಿಸ್ತೀರ್ಣದ ಪುನರುತ್ಪಾದನಾ ಸಾಮರ್ಥ್ಯವನ್ನು ಪರೀಕ್ಷಿಸಲು ಮೂರು ಬ್ಯಾಚ್‌ಗಳನ್ನು ತಯಾರಿಸಲಾಯಿತು ಮತ್ತು ನಿರೂಪಿಸಲಾಯಿತು.
ಪಾಲಿಸ್ಟೈರೀನ್ ಸರಪಳಿಗಳಿಗೆ ಧ್ರುವೀಯ ಗುಂಪು ಮತ್ತು ಸ್ಥಾಯಿ ಹಂತ. ತಯಾರಿಕೆಯ ವಿಧಾನವನ್ನು ಕೆಳಗೆ ವಿವರಿಸಲಾಗಿದೆ.
ಎನ್-ಫೀನೈಲ್‌ಮಲೈಮೈಡ್ (200 ಮಿಗ್ರಾಂ) ಮತ್ತು ಮೀಥೈಲ್ ವಿನೈಲ್ ಐಸೋಸೈನೇಟ್ (100 ಮಿಗ್ರಾಂ) ಅನ್ನು ಜಲರಹಿತ ಟೊಲ್ಯೂನ್‌ನಲ್ಲಿ ಕರಗಿಸಿ, ನಂತರ 0.1 ಮಿಲಿ 2,2′-ಅಜೋಯಿಸೊಬ್ಯುಟಿರೊನಿಟ್ರೈಲ್ (AIBN) ಅನ್ನು ರಿಯಾಕ್ಷನ್ ಫ್ಲಾಸ್ಕ್‌ಗೆ ಸೇರಿಸಲಾಯಿತು ಮತ್ತು ಫಿನೈಲ್‌ಮಲೈಮೈಡ್ ಮತ್ತು ಮೀಥೈಲ್ ವಿನೈಲ್ ಐಸೋಸೈನೇಟ್ (PMCP) ನ ಕೋಪಾಲಿಮರ್ ಅನ್ನು ಪಡೆಯಲಾಯಿತು. ಮಿಶ್ರಣವನ್ನು 60°C ನಲ್ಲಿ 3 ಗಂಟೆಗಳ ಕಾಲ ಬಿಸಿ ಮಾಡಿ, ಫಿಲ್ಟರ್ ಮಾಡಿ 40°C ನಲ್ಲಿ 3 ಗಂಟೆಗಳ ಕಾಲ ಒಲೆಯಲ್ಲಿ ಒಣಗಿಸಲಾಯಿತು.
ಒಣಗಿದ ಸಿಲಿಕಾ ಕಣಗಳನ್ನು (2 ಗ್ರಾಂ) ಒಣ ಟೊಲುಯೀನ್ (100 ಮಿಲಿ) ನಲ್ಲಿ ಹರಡಿ, 500 ಮಿಲಿ ಸುತ್ತಿನ ಕೆಳಭಾಗದ ಫ್ಲಾಸ್ಕ್‌ನಲ್ಲಿ 10 ನಿಮಿಷಗಳ ಕಾಲ ಬೆರೆಸಿ ಸೋನಿಕೇಟ್ ಮಾಡಲಾಯಿತು. ಪಿಎಂಸಿಪಿ (10 ಮಿಗ್ರಾಂ) ಅನ್ನು ಟೊಲುಯೀನ್‌ನಲ್ಲಿ ಕರಗಿಸಿ, ಸೇರ್ಪಡೆ ಕೊಳವೆಯ ಮೂಲಕ ಪ್ರತಿಕ್ರಿಯಾ ಫ್ಲಾಸ್ಕ್‌ಗೆ ಹನಿ ಹನಿಯಾಗಿ ಸೇರಿಸಲಾಯಿತು. ಮಿಶ್ರಣವನ್ನು 100 ° C ನಲ್ಲಿ 8 ಗಂಟೆಗಳ ಕಾಲ ರಿಫ್ಲಕ್ಸ್ ಮಾಡಲಾಯಿತು, ಫಿಲ್ಟರ್ ಮಾಡಿ, ಅಸಿಟೋನ್‌ನಿಂದ ತೊಳೆದು 60 ° C ನಲ್ಲಿ 3 ಗಂಟೆಗಳ ಕಾಲ ಒಣಗಿಸಲಾಯಿತು. ನಂತರ, ಪಿಎಂಸಿಪಿ (100 ಗ್ರಾಂ) ಗೆ ಸಂಬಂಧಿಸಿದ ಸಿಲಿಕಾ ಕಣಗಳನ್ನು ಟೊಲುಯೀನ್ (200 ಮಿಲಿ) ನಲ್ಲಿ ಕರಗಿಸಲಾಯಿತು ಮತ್ತು 100 μl ಡೈಬ್ಯುಟೈಲ್ಟಿನ್ ಡೈಲಾರೇಟ್ ಉಪಸ್ಥಿತಿಯಲ್ಲಿ 4-ಹೈಡ್ರಾಕ್ಸಿ-ಟೆಂಪೊ (2 ಮಿಲಿ) ಅನ್ನು ಅದಕ್ಕೆ ಸೇರಿಸಲಾಯಿತು. ಮಿಶ್ರಣವನ್ನು 50 ° C ನಲ್ಲಿ 8 ಗಂಟೆಗಳ ಕಾಲ ಬೆರೆಸಿ, ಫಿಲ್ಟರ್ ಮಾಡಿ 50 ° C ನಲ್ಲಿ 3 ಗಂಟೆಗಳ ಕಾಲ ಒಣಗಿಸಲಾಯಿತು.
TEMPO-PMCP (1.5 ಗ್ರಾಂ) ಗೆ ಜೋಡಿಸಲಾದ ಸ್ಟೈರೀನ್ (1 ಮಿಲಿ), ಬೆಂಜಾಯ್ಲ್ ಪೆರಾಕ್ಸೈಡ್ BPO (0.5 ಮಿಲಿ) ಮತ್ತು ಸಿಲಿಕಾ ಕಣಗಳನ್ನು ಟೊಲ್ಯೂನ್‌ನಲ್ಲಿ ಹರಡಿ ಸಾರಜನಕದಿಂದ ಶುದ್ಧೀಕರಿಸಲಾಯಿತು. ಸ್ಟೈರೀನ್‌ನ ಪಾಲಿಮರೀಕರಣವನ್ನು 100 ° C ನಲ್ಲಿ 12 ಗಂಟೆಗಳ ಕಾಲ ನಡೆಸಲಾಯಿತು. ಪರಿಣಾಮವಾಗಿ ಉತ್ಪನ್ನವನ್ನು ಮೆಥನಾಲ್‌ನಿಂದ ತೊಳೆದು ರಾತ್ರಿಯಿಡೀ 60 ° C ನಲ್ಲಿ ಒಣಗಿಸಲಾಯಿತು. ಕ್ರಿಯೆಯ ಸಾಮಾನ್ಯ ಯೋಜನೆಯನ್ನು ಚಿತ್ರ 1 ರಲ್ಲಿ ತೋರಿಸಲಾಗಿದೆ.
10–3 ಟೋರ್‌ಗಿಂತ ಕಡಿಮೆ ಉಳಿದ ಒತ್ತಡವನ್ನು ಪಡೆಯುವವರೆಗೆ ಮಾದರಿಗಳನ್ನು 1 ಗಂಟೆಯವರೆಗೆ 393 K ನಲ್ಲಿ ಅನಿಲ ತೆಗೆಯಲಾಯಿತು. ಸಾಪೇಕ್ಷ ಒತ್ತಡ P/P0 = 0.99 ನಲ್ಲಿ ಹೀರಿಕೊಳ್ಳಲ್ಪಟ್ಟ N2 ಪ್ರಮಾಣವನ್ನು ಒಟ್ಟು ರಂಧ್ರದ ಪರಿಮಾಣವನ್ನು ನಿರ್ಧರಿಸಲು ಬಳಸಲಾಯಿತು. ಶುದ್ಧ ಮತ್ತು ಲಿಗಂಡ್-ಬೌಂಡ್ ಸಿಲಿಕಾ ಕಣಗಳ ರೂಪವಿಜ್ಞಾನವನ್ನು ಸ್ಕ್ಯಾನಿಂಗ್ ಎಲೆಕ್ಟ್ರಾನ್ ಮೈಕ್ರೋಸ್ಕೋಪ್ (ಹಿಟಾಚಿ ಹೈ ಟೆಕ್ನಾಲಜೀಸ್, ಟೋಕಿಯೊ, ಜಪಾನ್) ಬಳಸಿ ಪರೀಕ್ಷಿಸಲಾಯಿತು. ಕಾರ್ಬನ್ ಟೇಪ್ ಬಳಸಿ ಅಲ್ಯೂಮಿನಿಯಂ ರಾಡ್‌ಗಳ ಮೇಲೆ ಒಣ ಮಾದರಿಗಳನ್ನು (ಶುದ್ಧ ಸಿಲಿಕಾ ಮತ್ತು ಲಿಗಂಡ್ ಬೌಂಡ್ ಸಿಲಿಕಾ ಕಣಗಳು) ಇರಿಸಲಾಯಿತು. Q150T ಸ್ಪಟ್ಟರಿಂಗ್ ಸಾಧನವನ್ನು ಬಳಸಿಕೊಂಡು ಮಾದರಿಯ ಮೇಲೆ ಚಿನ್ನವನ್ನು ಠೇವಣಿ ಮಾಡಲಾಯಿತು ಮತ್ತು 5 nm ದಪ್ಪದ Au ಪದರವನ್ನು ಮಾದರಿಯ ಮೇಲೆ ಠೇವಣಿ ಮಾಡಲಾಯಿತು. ಇದು ಕಡಿಮೆ ವೋಲ್ಟೇಜ್ ಪ್ರಕ್ರಿಯೆಯ ದಕ್ಷತೆಯನ್ನು ಸುಧಾರಿಸುತ್ತದೆ ಮತ್ತು ಉತ್ತಮವಾದ ಶೀತ ಸಿಂಪರಣೆಯನ್ನು ಒದಗಿಸುತ್ತದೆ. ಥರ್ಮೋ ಎಲೆಕ್ಟ್ರಾನ್ (ವಾಲ್ಥಮ್, MA, USA) ಫ್ಲ್ಯಾಶ್ EA1112 ಧಾತುರೂಪದ ಸಂಯೋಜನೆ ವಿಶ್ಲೇಷಕವನ್ನು ಬಳಸಿಕೊಂಡು ಧಾತುರೂಪದ ವಿಶ್ಲೇಷಣೆಯನ್ನು ನಡೆಸಲಾಯಿತು. ಕಣದ ಗಾತ್ರದ ವಿತರಣೆಯನ್ನು ಪಡೆಯಲು ಮಾಲ್ವೆರ್ನ್ ಕಣ ಗಾತ್ರದ ವಿಶ್ಲೇಷಕ (ವೋರ್ಸೆಸ್ಟರ್‌ಶೈರ್, UK) ಮಾಸ್ಟರ್‌ಸೈಜರ್ 2000 ಅನ್ನು ಬಳಸಲಾಯಿತು. ಲೇಪಿತವಲ್ಲದ ಸಿಲಿಕಾ ಕಣಗಳು ಮತ್ತು ಲಿಗಂಡ್-ಬೌಂಡ್ ಸಿಲಿಕಾ ಕಣಗಳನ್ನು (ತಲಾ 5 ಮಿಗ್ರಾಂ) 5 ಮಿಲಿ ಐಸೊಪ್ರೊಪನಾಲ್‌ನಲ್ಲಿ ಹರಡಿ, 10 ನಿಮಿಷಗಳ ಕಾಲ ಸೋನಿಕೇಟ್ ಮಾಡಿ, 5 ನಿಮಿಷಗಳ ಕಾಲ ಅಲುಗಾಡಿಸಿ, ಮಾಸ್ಟರ್‌ಸೈಜರ್ ಆಪ್ಟಿಕಲ್ ಬೆಂಚ್ ಮೇಲೆ ಇರಿಸಲಾಯಿತು. ಥರ್ಮೋಗ್ರಾವಿಮೆಟ್ರಿಕ್ ವಿಶ್ಲೇಷಣೆಯನ್ನು 30 ರಿಂದ 800 °C ವರೆಗಿನ ತಾಪಮಾನದ ವ್ಯಾಪ್ತಿಯಲ್ಲಿ ನಿಮಿಷಕ್ಕೆ 5 °C ದರದಲ್ಲಿ ನಡೆಸಲಾಗುತ್ತದೆ.
ಗ್ಲಾಸ್ ಫೈಬರ್ ಲೈನ್ ಮಾಡಿದ ಕಿರಿದಾದ ಬೋರ್ ಸ್ಟೇನ್‌ಲೆಸ್ ಸ್ಟೀಲ್ ಕಾಲಮ್‌ಗಳನ್ನು ಉಲ್ಲೇಖ 31 ರಲ್ಲಿನಂತೆಯೇ ಅದೇ ವಿಧಾನವನ್ನು ಅನುಸರಿಸಿ ಸ್ಲರಿ ಫಿಲ್ಲಿಂಗ್ ವಿಧಾನದ ಮೂಲಕ ಪ್ಯಾಕ್ ಮಾಡಲಾಗಿದೆ. ಸ್ಟೇನ್‌ಲೆಸ್ ಸ್ಟೀಲ್ ಕಾಲಮ್ (ಗ್ಲಾಸ್ ಲೈನ್ ಮಾಡಿದ, ಐಡಿ 100 × 1 .8 ಮಿಮೀ) ಮತ್ತು 1 µm ಫ್ರಿಟ್ ಹೊಂದಿರುವ ಔಟ್‌ಲೆಟ್ ಅನ್ನು ಸ್ಲರಿ ಪ್ಯಾಕೇಜಿಂಗ್ ಯಂತ್ರಕ್ಕೆ (ಆಲ್ಟೆಕ್ ಡೀರ್‌ಫೀಲ್ಡ್, IL, USA) ಸಂಪರ್ಕಿಸಲಾಗಿದೆ. 1.2 ಮಿಲಿ ಮೆಥನಾಲ್‌ನಲ್ಲಿ 150 ಮಿಗ್ರಾಂ ಸ್ಥಾಯಿ ಹಂತವನ್ನು ಅಮಾನತುಗೊಳಿಸಿ ಜಲಾಶಯದ ಕಾಲಮ್‌ಗೆ ಫೀಡ್ ಮಾಡುವ ಮೂಲಕ ಸ್ಥಾಯಿ ಹಂತದ ಅಮಾನತು ತಯಾರಿಸಿ. ಮೆಥನಾಲ್ ಅನ್ನು ಸ್ಲರಿ ದ್ರಾವಕ ಮತ್ತು ನಿಯಂತ್ರಣ ದ್ರಾವಕವಾಗಿ ಬಳಸಲಾಯಿತು. 10 ನಿಮಿಷಗಳ ಕಾಲ 100 MP, 15 ನಿಮಿಷಗಳ ಕಾಲ 80 MP ಮತ್ತು 30 ನಿಮಿಷಗಳ ಕಾಲ 60 MP ಒತ್ತಡದ ಅನುಕ್ರಮವನ್ನು ಅನ್ವಯಿಸುವ ಮೂಲಕ ಕಾಲಮ್ ಅನ್ನು ಪ್ಯಾಕ್ ಮಾಡಿ. ಪ್ಯಾಕಿಂಗ್ ಪ್ರಕ್ರಿಯೆಯು ಏಕರೂಪದ ಕಾಲಮ್ ಪ್ಯಾಕಿಂಗ್ ಅನ್ನು ಖಚಿತಪಡಿಸಿಕೊಳ್ಳಲು ಯಾಂತ್ರಿಕ ಕಂಪನಕ್ಕಾಗಿ ಎರಡು ಗ್ಯಾಸ್ ಕ್ರೊಮ್ಯಾಟೋಗ್ರಫಿ ಕಾಲಮ್ ವೈಬ್ರೇಟರ್‌ಗಳನ್ನು (ಆಲ್ಟೆಕ್, ಡೀರ್‌ಫೀಲ್ಡ್, IL, USA) ಬಳಸಿತು. ಸ್ಲರಿ ಪ್ಯಾಕರ್ ಅನ್ನು ಮುಚ್ಚಿ ಮತ್ತು ಸ್ಟ್ರಿಂಗ್‌ಗೆ ಹಾನಿಯಾಗದಂತೆ ಒತ್ತಡವನ್ನು ನಿಧಾನವಾಗಿ ಬಿಡುಗಡೆ ಮಾಡಿ. ಕಾಲಮ್ ಅನ್ನು ಸ್ಲರಿ ನಳಿಕೆಯಿಂದ ಸಂಪರ್ಕ ಕಡಿತಗೊಳಿಸಲಾಯಿತು ಮತ್ತು ಇನ್ನೊಂದು ಫಿಟ್ಟಿಂಗ್ ಅನ್ನು ಇನ್ಲೆಟ್‌ಗೆ ಜೋಡಿಸಲಾಯಿತು ಮತ್ತು ಅದರ ಕಾರ್ಯಾಚರಣೆಯನ್ನು ಪರೀಕ್ಷಿಸಲು LC ವ್ಯವಸ್ಥೆಗೆ ಸಂಪರ್ಕಿಸಲಾಯಿತು.
LC ಪಂಪ್ (10AD ಶಿಮಾಡ್ಜು, ಜಪಾನ್), 50 nL ಇಂಜೆಕ್ಷನ್ ಲೂಪ್ (ವಾಲ್ಕೊ (USA) C14 W.05) ಹೊಂದಿರುವ ಸ್ಯಾಂಪ್ಲರ್, ಮೆಂಬರೇನ್ ಡಿಗ್ಯಾಸರ್ (ಶಿಮಾಡ್ಜು DGU-14A), ಮತ್ತು UV-VIS ಕ್ಯಾಪಿಲ್ಲರಿ ವಿಂಡೋವನ್ನು ಬಳಸಿಕೊಂಡು ಕಸ್ಟಮ್ MLC ಅನ್ನು ನಿರ್ಮಿಸಲಾಗಿದೆ. ಡಿಟೆಕ್ಟರ್ ಸಾಧನ (UV-2075) ಮತ್ತು ಎನಾಮೆಲ್ಡ್ ಮೈಕ್ರೋಕಾಲಮ್. ಹೆಚ್ಚುವರಿ ಕಾಲಮ್ ವಿಸ್ತರಣೆಯ ಪರಿಣಾಮವನ್ನು ಕಡಿಮೆ ಮಾಡಲು ಬಹಳ ಕಿರಿದಾದ ಮತ್ತು ಚಿಕ್ಕದಾದ ಸಂಪರ್ಕಿಸುವ ಟ್ಯೂಬ್‌ಗಳನ್ನು ಬಳಸಿ. ಕಾಲಮ್ ಅನ್ನು ತುಂಬಿದ ನಂತರ, 1/16″ ಕಡಿಮೆಗೊಳಿಸುವ ಜಂಕ್ಷನ್‌ನ ಔಟ್‌ಲೆಟ್‌ನಲ್ಲಿ ಕ್ಯಾಪಿಲ್ಲರಿ (50 µm ಐಡಿ 365) ಅನ್ನು ಸ್ಥಾಪಿಸಿ ಮತ್ತು ಕಡಿಮೆಗೊಳಿಸುವ ಜಂಕ್ಷನ್‌ನ ಕ್ಯಾಪಿಲ್ಲರಿ (50 µm) ಅನ್ನು ಸ್ಥಾಪಿಸಿ. ಮಲ್ಟಿಕ್ರೊ 2000 ಸಾಫ್ಟ್‌ವೇರ್ ಬಳಸಿ ಡೇಟಾ ಸಂಗ್ರಹಣೆ ಮತ್ತು ಕ್ರೊಮ್ಯಾಟೋಗ್ರಾಮ್ ಸಂಸ್ಕರಣೆಯನ್ನು ನಡೆಸಲಾಗುತ್ತದೆ. 254 nm ನಲ್ಲಿ, ವಿಷಯಗಳ ವಿಶ್ಲೇಷಕಗಳ UV ಹೀರಿಕೊಳ್ಳುವಿಕೆಯನ್ನು 0 ನಲ್ಲಿ ಮೇಲ್ವಿಚಾರಣೆ ಮಾಡಲಾಯಿತು. ಕ್ರೊಮ್ಯಾಟೋಗ್ರಾಫಿಕ್ ಡೇಟಾವನ್ನು OriginPro8 (ನಾರ್ಥಾಂಪ್ಟನ್, MA) ಬಳಸಿ ವಿಶ್ಲೇಷಿಸಲಾಗಿದೆ.
ಹ್ಯೂಮನ್ ಸೀರಮ್ ಅಲ್ಬುಮಿನ್, ಲೈಯೋಫಿಲೈಸ್ಡ್ ಪೌಡರ್, ≥ 96% (ಅಗರೋಸ್ ಜೆಲ್ ಎಲೆಕ್ಟ್ರೋಫೋರೆಸಿಸ್) 3 ಮಿಗ್ರಾಂ ಅನ್ನು ಟ್ರಿಪ್ಸಿನ್ (1.5 ಮಿಗ್ರಾಂ), 4.0 ಎಂ ಯೂರಿಯಾ (1 ಮಿಲಿ) ಮತ್ತು 0.2 ಎಂ ಅಮೋನಿಯಂ ಬೈಕಾರ್ಬನೇಟ್ (1 ಮಿಲಿ) ನೊಂದಿಗೆ ಬೆರೆಸಲಾಗುತ್ತದೆ. ದ್ರಾವಣವನ್ನು 10 ನಿಮಿಷಗಳ ಕಾಲ ಬೆರೆಸಿ 37 ° C ನಲ್ಲಿ 6 ಗಂಟೆಗಳ ಕಾಲ ನೀರಿನ ಸ್ನಾನದಲ್ಲಿ ಇಡಲಾಗುತ್ತದೆ, ನಂತರ 0.1% TFA ನ 1 ಮಿಲಿಯೊಂದಿಗೆ ತಣಿಸಲಾಗುತ್ತದೆ. ದ್ರಾವಣವನ್ನು ಫಿಲ್ಟರ್ ಮಾಡಿ 4 ° C ಗಿಂತ ಕಡಿಮೆ ತಾಪಮಾನದಲ್ಲಿ ಸಂಗ್ರಹಿಸಲಾಗುತ್ತದೆ.
PMP ಕಾಲಮ್‌ನಲ್ಲಿ ಪೆಪ್ಟೈಡ್‌ಗಳು ಮತ್ತು ಟ್ರಿಪ್ಟಿಕ್ ಡೈಜೆಸ್ಟ್ HSA ಗಳ ಮಿಶ್ರಣವನ್ನು ಬೇರ್ಪಡಿಸುವುದನ್ನು ಪ್ರತ್ಯೇಕವಾಗಿ ಮೌಲ್ಯಮಾಪನ ಮಾಡಲಾಯಿತು. PMP ಕಾಲಮ್‌ನಿಂದ ಬೇರ್ಪಡಿಸಲಾದ ಪೆಪ್ಟೈಡ್‌ಗಳು ಮತ್ತು HSA ಗಳ ಮಿಶ್ರಣದ ಟ್ರಿಪ್ಟಿಕ್ ಜಲವಿಚ್ಛೇದನೆಯನ್ನು ಪರಿಶೀಲಿಸಿ ಮತ್ತು ಫಲಿತಾಂಶಗಳನ್ನು ಅಸೆಂಟಿಸ್ ಎಕ್ಸ್‌ಪ್ರೆಸ್ RP-ಅಮೈಡ್ ಕಾಲಮ್‌ನೊಂದಿಗೆ ಹೋಲಿಕೆ ಮಾಡಿ. ಸೈದ್ಧಾಂತಿಕ ಫಲಕಗಳ ಸಂಖ್ಯೆಯನ್ನು ಈ ಕೆಳಗಿನ ಸಮೀಕರಣವನ್ನು ಬಳಸಿಕೊಂಡು ಲೆಕ್ಕಹಾಕಲಾಗುತ್ತದೆ:
ಶುದ್ಧ ಸಿಲಿಕಾ ಕಣಗಳು ಮತ್ತು ಲಿಗಂಡ್ ಬಂಧಿತ ಸಿಲಿಕಾ ಕಣಗಳ SEM ಚಿತ್ರಗಳನ್ನು ಚಿತ್ರ 2 ರಲ್ಲಿ ತೋರಿಸಲಾಗಿದೆ. ಶುದ್ಧ ಸಿಲಿಕಾ ಕಣಗಳ (A, B) SEM ಚಿತ್ರಗಳು ಗೋಳಾಕಾರದ ಆಕಾರವನ್ನು ತೋರಿಸುತ್ತವೆ, ಇದರಲ್ಲಿ ಕಣಗಳು ಉದ್ದವಾಗಿರುತ್ತವೆ ಅಥವಾ ನಮ್ಮ ಹಿಂದಿನ ಅಧ್ಯಯನಗಳಿಗೆ ಹೋಲಿಸಿದರೆ ಅನಿಯಮಿತ ಸಮ್ಮಿತಿಯನ್ನು ಹೊಂದಿರುತ್ತವೆ. ಲಿಗಂಡ್ (C, D) ನಿಂದ ಬಂಧಿಸಲ್ಪಟ್ಟ ಸಿಲಿಕಾ ಕಣಗಳ ಮೇಲ್ಮೈ ಶುದ್ಧ ಸಿಲಿಕಾ ಕಣಗಳಿಗಿಂತ ಮೃದುವಾಗಿರುತ್ತದೆ, ಇದು ಸಿಲಿಕಾ ಕಣಗಳ ಮೇಲ್ಮೈಯನ್ನು ಆವರಿಸಿರುವ ಪಾಲಿಸ್ಟೈರೀನ್ ಸರಪಳಿಗಳಿಂದಾಗಿರಬಹುದು.
ಶುದ್ಧ ಸಿಲಿಕಾ ಕಣಗಳ (A, B) ಮತ್ತು ಲಿಗಂಡ್ ಬೌಂಡ್ ಸಿಲಿಕಾ ಕಣಗಳ (C, D) ಎಲೆಕ್ಟ್ರಾನ್ ಮೈಕ್ರೋಗ್ರಾಫ್‌ಗಳನ್ನು ಸ್ಕ್ಯಾನ್ ಮಾಡಲಾಗುತ್ತಿದೆ.
ಶುದ್ಧ ಸಿಲಿಕಾ ಕಣಗಳು ಮತ್ತು ಲಿಗಂಡ್-ಬೌಂಡ್ ಸಿಲಿಕಾ ಕಣಗಳ ಕಣ ಗಾತ್ರದ ವಿತರಣೆಯನ್ನು ಚಿತ್ರ 2. 3(A) ರಲ್ಲಿ ತೋರಿಸಲಾಗಿದೆ. ರಾಸಾಯನಿಕ ಮಾರ್ಪಾಡಿನ ನಂತರ ಸಿಲಿಕಾ ಕಣದ ಗಾತ್ರ ಹೆಚ್ಚಾಗಿದೆ ಎಂದು ವಾಲ್ಯೂಮೆಟ್ರಿಕ್ ಕಣ ಗಾತ್ರದ ವಿತರಣಾ ವಕ್ರಾಕೃತಿಗಳು ತೋರಿಸಿವೆ (ಚಿತ್ರ 3A). ಪ್ರಸ್ತುತ ಅಧ್ಯಯನ ಮತ್ತು ಹಿಂದಿನ ಅಧ್ಯಯನದ ಸಿಲಿಕಾ ಕಣದ ಗಾತ್ರದ ವಿತರಣಾ ಡೇಟಾವನ್ನು ಕೋಷ್ಟಕ 1(A) ರಲ್ಲಿ ಹೋಲಿಸಲಾಗಿದೆ. PMP ಯ ವಾಲ್ಯೂಮೆಟ್ರಿಕ್ ಕಣದ ಗಾತ್ರ d(0.5) 3.36 µm ಆಗಿತ್ತು, ನಮ್ಮ ಹಿಂದಿನ ಅಧ್ಯಯನದಲ್ಲಿ (ಪಾಲಿಸ್ಟೈರೀನ್ ಬಂಧಿತ ಸಿಲಿಕಾ ಕಣಗಳು) 34 ad(0.5) ಮೌಲ್ಯದ 3.05 µm ಗೆ ಹೋಲಿಸಿದರೆ. ಪ್ರತಿಕ್ರಿಯಾ ಮಿಶ್ರಣದಲ್ಲಿ PEG, ಯೂರಿಯಾ, TMOS ಮತ್ತು ಅಸಿಟಿಕ್ ಆಮ್ಲದ ಅನುಪಾತದಲ್ಲಿನ ಬದಲಾವಣೆಯಿಂದಾಗಿ, ಈ ಬ್ಯಾಚ್‌ನ ಕಣ ಗಾತ್ರದ ವಿತರಣೆಯು ನಮ್ಮ ಹಿಂದಿನ ಅಧ್ಯಯನಕ್ಕೆ ಹೋಲಿಸಿದರೆ ಕಿರಿದಾಗಿದೆ. PMP ಹಂತದ ಕಣದ ಗಾತ್ರವು ನಾವು ಮೊದಲು ಅಧ್ಯಯನ ಮಾಡಿದ ಪಾಲಿಸ್ಟೈರೀನ್ ಬೌಂಡ್ ಸಿಲಿಕಾ ಕಣದ ಹಂತಕ್ಕಿಂತ ಸ್ವಲ್ಪ ದೊಡ್ಡದಾಗಿದೆ. ಇದರರ್ಥ ಸ್ಟೈರೀನ್‌ನೊಂದಿಗೆ ಸಿಲಿಕಾ ಕಣಗಳ ಮೇಲ್ಮೈ ಕ್ರಿಯಾತ್ಮಕೀಕರಣವು ಸಿಲಿಕಾ ಮೇಲ್ಮೈಯಲ್ಲಿ ಪಾಲಿಸ್ಟೈರೀನ್ ಪದರವನ್ನು (0.97 µm) ಮಾತ್ರ ಠೇವಣಿ ಮಾಡಿತು, ಆದರೆ PMP ಹಂತದಲ್ಲಿ ಪದರದ ದಪ್ಪವು 1.38 µm ಆಗಿತ್ತು.
ಶುದ್ಧ ಸಿಲಿಕಾ ಕಣಗಳು ಮತ್ತು ಲಿಗಂಡ್ ಬಂಧಿತ ಸಿಲಿಕಾ ಕಣಗಳ ಕಣ ಗಾತ್ರ ವಿತರಣೆ (A) ಮತ್ತು ರಂಧ್ರ ಗಾತ್ರ ವಿತರಣೆ (B).
ಈ ಅಧ್ಯಯನದಲ್ಲಿ ಬಳಸಲಾದ ಸಿಲಿಕಾ ಕಣಗಳ ರಂಧ್ರದ ಗಾತ್ರ, ರಂಧ್ರದ ಪ್ರಮಾಣ ಮತ್ತು ಮೇಲ್ಮೈ ವಿಸ್ತೀರ್ಣವನ್ನು ಕೋಷ್ಟಕ 1 (B) ನಲ್ಲಿ ತೋರಿಸಲಾಗಿದೆ. ಶುದ್ಧ ಸಿಲಿಕಾ ಕಣಗಳು ಮತ್ತು ಲಿಗಂಡ್-ಬೌಂಡ್ ಸಿಲಿಕಾ ಕಣಗಳ PSD ಪ್ರೊಫೈಲ್‌ಗಳನ್ನು ಚಿತ್ರ 3(B) ನಲ್ಲಿ ತೋರಿಸಲಾಗಿದೆ. ಫಲಿತಾಂಶಗಳನ್ನು ನಮ್ಮ ಹಿಂದಿನ ಅಧ್ಯಯನಕ್ಕೆ ಹೋಲಿಸಬಹುದು34. ಶುದ್ಧ ಮತ್ತು ಲಿಗಂಡ್-ಬೌಂಡ್ ಸಿಲಿಕಾ ಕಣಗಳ ರಂಧ್ರದ ಗಾತ್ರಗಳು ಕ್ರಮವಾಗಿ 310 Å ಮತ್ತು 241 Å ಆಗಿದ್ದು, ರಾಸಾಯನಿಕ ಮಾರ್ಪಾಡಿನ ನಂತರ, ಕೋಷ್ಟಕ 1 (B) ನಲ್ಲಿ ತೋರಿಸಿರುವಂತೆ ರಂಧ್ರದ ಗಾತ್ರವು 69 Å ರಷ್ಟು ಕಡಿಮೆಯಾಗಿದೆ ಮತ್ತು ಶಿಫ್ಟ್ ಕರ್ವ್ ಅನ್ನು ಚಿತ್ರದಲ್ಲಿ ತೋರಿಸಲಾಗಿದೆ ಎಂದು ಸೂಚಿಸುತ್ತದೆ. ಪ್ರಸ್ತುತ ಅಧ್ಯಯನದಲ್ಲಿ ಸಿಲಿಕಾ ಕಣಗಳ ನಿರ್ದಿಷ್ಟ ಮೇಲ್ಮೈ ವಿಸ್ತೀರ್ಣ 116 m2/g ಆಗಿದೆ, ಇದು ನಮ್ಮ ಹಿಂದಿನ ಅಧ್ಯಯನಕ್ಕೆ (124 m2/g) ಹೋಲಿಸಬಹುದು. ಕೋಷ್ಟಕ 1(B) ನಲ್ಲಿ ತೋರಿಸಿರುವಂತೆ, ರಾಸಾಯನಿಕ ಮಾರ್ಪಾಡಿನ ನಂತರ ಸಿಲಿಕಾ ಕಣಗಳ ಮೇಲ್ಮೈ ವಿಸ್ತೀರ್ಣ (m2/g) 116 m2/g ನಿಂದ 105 m2/g ಗೆ ಕಡಿಮೆಯಾಗಿದೆ.
ಸ್ಥಿರ ಹಂತದ ಧಾತುರೂಪದ ವಿಶ್ಲೇಷಣೆಯ ಫಲಿತಾಂಶಗಳನ್ನು ಕೋಷ್ಟಕ 2 ರಲ್ಲಿ ಪ್ರಸ್ತುತಪಡಿಸಲಾಗಿದೆ. ಪ್ರಸ್ತುತ ಸ್ಥಿರ ಹಂತದ ಇಂಗಾಲದ ಅಂಶವು 6.35% ಆಗಿದೆ, ಇದು ನಮ್ಮ ಹಿಂದಿನ ಅಧ್ಯಯನಕ್ಕಿಂತ ಕಡಿಮೆಯಾಗಿದೆ (ಪಾಲಿಸ್ಟೈರೀನ್‌ಗೆ ಸಂಬಂಧಿಸಿದ ಸಿಲಿಕಾ ಕಣಗಳು, ಕ್ರಮವಾಗಿ 7.93%35 ಮತ್ತು 10.21%) 42. ಪ್ರಸ್ತುತ ಸ್ಥಿರ ಹಂತದ ಇಂಗಾಲದ ಅಂಶವು ಕೆಳಗಿದೆ, ಏಕೆಂದರೆ SP ತಯಾರಿಕೆಯಲ್ಲಿ ಸ್ಟೈರೀನ್‌ಗೆ ಹೆಚ್ಚುವರಿಯಾಗಿ ಫಿನೈಲ್‌ಮಲೈಮೈಡ್ ಮೀಥೈಲ್ ವಿನೈಲ್ ಐಸೊಸೈನೇಟ್ (PCMP) ಮತ್ತು 4-ಹೈಡ್ರಾಕ್ಸಿ-TEMPO ನಂತಹ ಕೆಲವು ಧ್ರುವೀಯ ಲಿಗಂಡ್‌ಗಳನ್ನು ಬಳಸಲಾಗಿದೆ. ಪ್ರಸ್ತುತ ಸ್ಥಿರ ಹಂತದಲ್ಲಿ ಸಾರಜನಕದ ತೂಕದ ಶೇಕಡಾವಾರು ಪ್ರಮಾಣವು ಹಿಂದಿನ ಅಧ್ಯಯನಗಳಲ್ಲಿ 0.1735 ಮತ್ತು 0.85% ಕ್ಕೆ ಹೋಲಿಸಿದರೆ 2.21% ಆಗಿದೆ. ಇದರರ್ಥ ಪ್ರಸ್ತುತ ಸ್ಥಿರ ಹಂತವು ಫಿನೈಲ್‌ಮಲೈಮೈಡ್‌ನಿಂದಾಗಿ ಹೆಚ್ಚಿನ ತೂಕದ ಶೇಕಡಾವಾರು ಸಾರಜನಕವನ್ನು ಹೊಂದಿದೆ. ಅದೇ ರೀತಿ, ಉತ್ಪನ್ನಗಳು (4) ಮತ್ತು (5) ಕ್ರಮವಾಗಿ 2.7% ಮತ್ತು 2.9% ಇಂಗಾಲದ ಅಂಶವನ್ನು ಹೊಂದಿದ್ದರೆ, ಅಂತಿಮ ಉತ್ಪನ್ನ (6) 6.35% ಇಂಗಾಲದ ಅಂಶವನ್ನು ಹೊಂದಿದೆ, ಇದನ್ನು ಕೋಷ್ಟಕ 2 ರಲ್ಲಿ ತೋರಿಸಿರುವಂತೆ. ತೂಕ ನಷ್ಟವನ್ನು ಪರೀಕ್ಷಿಸಲು PMP ಯ ಸ್ಥಿರ ಹಂತದಲ್ಲಿ ಥರ್ಮೋಗ್ರಾವಿಮೆಟ್ರಿಕ್ ವಿಶ್ಲೇಷಣೆ (TGA) ಅನ್ನು ಬಳಸಲಾಯಿತು, ಮತ್ತು TGA ವಕ್ರರೇಖೆಯನ್ನು ಚಿತ್ರ 4 ರಲ್ಲಿ ತೋರಿಸಲಾಗಿದೆ. TGA ವಕ್ರರೇಖೆಯು 8.6% ತೂಕ ನಷ್ಟವನ್ನು ತೋರಿಸುತ್ತದೆ, ಇದು ಇಂಗಾಲದ ಅಂಶದೊಂದಿಗೆ (6.35%) ಉತ್ತಮ ಒಪ್ಪಂದದಲ್ಲಿದೆ, ಏಕೆಂದರೆ ಲಿಗಂಡ್‌ಗಳು C ಮಾತ್ರವಲ್ಲದೆ N, O ಮತ್ತು H ಅನ್ನು ಸಹ ಒಳಗೊಂಡಿರುತ್ತವೆ.
ಸಿಲಿಕಾ ಕಣಗಳ ಮೇಲ್ಮೈಯನ್ನು ಮಾರ್ಪಡಿಸಲು ಲಿಗಂಡ್ ಫಿನೈಲ್‌ಮಲೈಮೈಡ್-ಮೀಥೈಲ್ವಿನೈಲ್ ಐಸೋಸೈನೇಟ್ ಅನ್ನು ಅದರ ಧ್ರುವೀಯ ಫಿನೈಲ್‌ಮಲೈಮೈಡ್ ಮತ್ತು ವಿನೈಲಿಸೋಸೈನೇಟ್ ಗುಂಪುಗಳ ಕಾರಣದಿಂದಾಗಿ ಆಯ್ಕೆ ಮಾಡಲಾಯಿತು. ವಿನೈಲ್ ಐಸೋಸೈನೇಟ್ ಗುಂಪುಗಳು ಜೀವಂತ ರಾಡಿಕಲ್ ಪಾಲಿಮರೀಕರಣದ ಮೂಲಕ ಸ್ಟೈರೀನ್‌ನೊಂದಿಗೆ ಮತ್ತಷ್ಟು ಪ್ರತಿಕ್ರಿಯಿಸಬಹುದು. ಎರಡನೆಯ ಕಾರಣವೆಂದರೆ, ವಿಶ್ಲೇಷಕದೊಂದಿಗೆ ಮಧ್ಯಮ ಸಂವಹನಗಳನ್ನು ಹೊಂದಿರುವ ಮತ್ತು ವಿಶ್ಲೇಷಕ ಮತ್ತು ಸ್ಥಾಯಿ ಹಂತದ ನಡುವೆ ಬಲವಾದ ಸ್ಥಾಯೀವಿದ್ಯುತ್ತಿನ ಸಂವಹನಗಳಿಲ್ಲದ ಗುಂಪನ್ನು ಸೇರಿಸುವುದು, ಏಕೆಂದರೆ ಫಿನೈಲ್‌ಮಲೈಮೈಡ್ ಭಾಗವು ಸಾಮಾನ್ಯ pH ನಲ್ಲಿ ಯಾವುದೇ ವರ್ಚುವಲ್ ಚಾರ್ಜ್ ಅನ್ನು ಹೊಂದಿರುವುದಿಲ್ಲ. ಸ್ಥಾಯಿ ಹಂತದ ಧ್ರುವೀಯತೆಯನ್ನು ಸ್ಟೈರೀನ್‌ನ ಸೂಕ್ತ ಪ್ರಮಾಣ ಮತ್ತು ಮುಕ್ತ ರಾಡಿಕಲ್ ಪಾಲಿಮರೀಕರಣದ ಪ್ರತಿಕ್ರಿಯಾ ಸಮಯದಿಂದ ನಿಯಂತ್ರಿಸಬಹುದು. ಕ್ರಿಯೆಯ ಅಂತಿಮ ಹಂತ (ಮುಕ್ತ ರಾಡಿಕಲ್ ಪಾಲಿಮರೀಕರಣ) ನಿರ್ಣಾಯಕವಾಗಿದೆ ಏಕೆಂದರೆ ಇದು ಸ್ಥಾಯಿ ಹಂತದ ಧ್ರುವೀಯತೆಯನ್ನು ಬದಲಾಯಿಸುತ್ತದೆ. ಈ ಸ್ಥಾಯಿ ಹಂತಗಳಲ್ಲಿ ಇಂಗಾಲದ ಅಂಶವನ್ನು ಪರಿಶೀಲಿಸಲು ಧಾತುರೂಪದ ವಿಶ್ಲೇಷಣೆಯನ್ನು ನಡೆಸಲಾಯಿತು. ಸ್ಟೈರೀನ್ ಮತ್ತು ಪ್ರತಿಕ್ರಿಯಾ ಸಮಯವನ್ನು ಹೆಚ್ಚಿಸುವುದರಿಂದ ಸ್ಥಾಯಿ ಹಂತದ ಇಂಗಾಲದ ಅಂಶ ಹೆಚ್ಚಾಗುತ್ತದೆ ಮತ್ತು ಪ್ರತಿಯಾಗಿ. ಸ್ಟೈರೀನ್‌ನ ವಿಭಿನ್ನ ಸಾಂದ್ರತೆಗಳೊಂದಿಗೆ ತಯಾರಿಸಲಾದ SPಗಳು ವಿಭಿನ್ನ ಇಂಗಾಲದ ಹೊರೆಗಳನ್ನು ಹೊಂದಿರುತ್ತವೆ. ಅದೇ ರೀತಿ, ಈ ಸ್ಥಾಯಿ ಹಂತಗಳನ್ನು ಸ್ಟೇನ್‌ಲೆಸ್ ಸ್ಟೀಲ್ ಕಂಬಗಳ ಮೇಲೆ ಇರಿಸಲಾಯಿತು ಮತ್ತು ಅವುಗಳ ಕ್ರೊಮ್ಯಾಟೋಗ್ರಾಫಿಕ್ ಗುಣಲಕ್ಷಣಗಳನ್ನು (ಆಯ್ಕೆ, ರೆಸಲ್ಯೂಶನ್, N ಮೌಲ್ಯ, ಇತ್ಯಾದಿ) ಪರಿಶೀಲಿಸಲಾಯಿತು. ಈ ಪ್ರಯೋಗಗಳ ಆಧಾರದ ಮೇಲೆ, ನಿಯಂತ್ರಿತ ಧ್ರುವೀಯತೆ ಮತ್ತು ವಿಶ್ಲೇಷಕದ ಉತ್ತಮ ಧಾರಣವನ್ನು ಒದಗಿಸಲು PMP ಸ್ಥಾಯಿ ಹಂತದ ತಯಾರಿಕೆಗೆ ಅತ್ಯುತ್ತಮವಾದ ಸಂಯೋಜನೆಯನ್ನು ಆಯ್ಕೆ ಮಾಡಲಾಯಿತು.
ಮೊಬೈಲ್ ಹಂತದ ಸಾಮರ್ಥ್ಯವನ್ನು ಬಳಸಿಕೊಂಡು ಐದು ಪೆಪ್ಟೈಡ್‌ಗಳ ಮಿಶ್ರಣಗಳ (ಗ್ಲೈ-ಟೈರ್, ಗ್ಲೈ-ಲ್ಯೂ-ಟೈರ್, ಗ್ಲೈ-ಗ್ಲೈ-ಟೈರ್-ಆರ್ಗ್, ಟೈರ್-ಐಲ್-ಗ್ಲೈ-ಸರ್-ಆರ್ಗ್, ಲ್ಯೂಸಿನ್-ಎನ್‌ಕೆಫಾಲಿನ್) ವಿಶ್ಲೇಷಣೆಗಾಗಿ PMP ಕಾಲಮ್ ಅನ್ನು ಮೌಲ್ಯಮಾಪನ ಮಾಡಲಾಯಿತು. 80 µl/ನಿಮಿಷದ ಹರಿವಿನ ದರದಲ್ಲಿ 60/40 (v/v) ACN/ನೀರು (0.1% TFA). ಸೂಕ್ತ ಎಲ್ಯುಷನ್ ಪರಿಸ್ಥಿತಿಗಳಲ್ಲಿ (200,000 ಪ್ಲೇಟ್‌ಗಳು/ಮೀ), ಪ್ರತಿ ಕಾಲಮ್‌ಗೆ ಸೈದ್ಧಾಂತಿಕ ಪ್ಲೇಟ್‌ಗಳ ಸಂಖ್ಯೆ (N) 20,000 ± 100 ಆಗಿದೆ. ಮೂರು PMP ಕಾಲಮ್‌ಗಳಿಗೆ N ಮೌಲ್ಯಗಳನ್ನು ಕೋಷ್ಟಕ 3 ರಲ್ಲಿ ತೋರಿಸಲಾಗಿದೆ ಮತ್ತು ವರ್ಣತಂತುಗಳನ್ನು ಚಿತ್ರ 5A ನಲ್ಲಿ ತೋರಿಸಲಾಗಿದೆ. PMP ಕಾಲಮ್‌ನಲ್ಲಿ ಹೆಚ್ಚಿನ ಹರಿವಿನ ದರದಲ್ಲಿ (700 µl/ನಿಮಿಷ) ವೇಗದ ವಿಶ್ಲೇಷಣೆ, ಒಂದು ನಿಮಿಷದೊಳಗೆ ಐದು ಪೆಪ್ಟೈಡ್‌ಗಳನ್ನು ಹೊರತೆಗೆಯಲಾಯಿತು, ಪ್ರತಿ ಕಾಲಮ್‌ಗೆ 13,500 ± 330 ರ ಅತ್ಯುತ್ತಮ N ಮೌಲ್ಯ (100 x 1.8 mm ವ್ಯಾಸ), 135,000 ಪ್ಲೇಟ್‌ಗಳು/ಮೀ (ಚಿತ್ರ 5B) ಗೆ ಸಮಾನವಾಗಿರುತ್ತದೆ. ಪುನರುತ್ಪಾದನಾ ಸಾಮರ್ಥ್ಯವನ್ನು ಪರೀಕ್ಷಿಸಲು ಒಂದೇ ಗಾತ್ರದ ಮೂರು ಕಾಲಮ್‌ಗಳನ್ನು (ಒಳಗಿನ ವ್ಯಾಸ 100 x 1.8 mm) PMP ಸ್ಥಾಯಿ ಹಂತದ ಮೂರು ವಿಭಿನ್ನ ಬ್ಯಾಚ್‌ಗಳಿಂದ ತುಂಬಿಸಲಾಯಿತು. ಸೂಕ್ತ ಎಲ್ಯುಷನ್ ಪರಿಸ್ಥಿತಿಗಳು, ಸೈದ್ಧಾಂತಿಕ ಪ್ಲೇಟ್‌ಗಳ ಸಂಖ್ಯೆ N ಮತ್ತು ಧಾರಣ ಸಮಯವನ್ನು ಬಳಸಿಕೊಂಡು ಪ್ರತಿ ಕಾಲಮ್‌ನಲ್ಲಿ ಒಂದೇ ಪರೀಕ್ಷಾ ಮಿಶ್ರಣವನ್ನು ಬೇರ್ಪಡಿಸುವ ಮೂಲಕ ಪ್ರತಿ ಕಾಲಮ್‌ಗೆ ವಿಶ್ಲೇಷಕಗಳನ್ನು ದಾಖಲಿಸಲಾಯಿತು. PMP ಕಾಲಮ್‌ಗಳ ಪುನರುತ್ಪಾದನಾ ಸಾಮರ್ಥ್ಯವನ್ನು ಕೋಷ್ಟಕ 4 ರಲ್ಲಿ ತೋರಿಸಲಾಗಿದೆ. PMP ಕಾಲಮ್‌ನ ಪುನರುತ್ಪಾದನಾ ಸಾಮರ್ಥ್ಯವು ಕೋಷ್ಟಕ 3 ರಲ್ಲಿ ತೋರಿಸಿರುವಂತೆ ಬಹಳ ಕಡಿಮೆ %RSD ಮೌಲ್ಯಗಳೊಂದಿಗೆ ಚೆನ್ನಾಗಿ ಪರಸ್ಪರ ಸಂಬಂಧ ಹೊಂದಿದೆ.
PMP ಕಾಲಮ್ (B) ಮತ್ತು Ascentis Express RP-Amide ಕಾಲಮ್ (A) ನಲ್ಲಿ ಪೆಪ್ಟೈಡ್ ಮಿಶ್ರಣಗಳ ಪ್ರತ್ಯೇಕತೆ, ಮೊಬೈಲ್ ಹಂತ 60/40 ACN/H2O (TFA 0.1%), PMP ಕಾಲಮ್ ಆಯಾಮಗಳು (100 x 1.8 mm id), ವಿಶ್ಲೇಷಣೆ ಸಂಯುಕ್ತಗಳ ಹೊರಹೀರುವಿಕೆ ಕ್ರಮ: 1 (Gly-Tyr), 2 (Gly-Leu-Tyr), 3 (Gly-Gly-Tyr-Arg), 4 (Tyr-Ile-Gly-Ser-Arg) ಮತ್ತು 5 (ಲ್ಯೂಸಿಕ್ ಆಮ್ಲ ಎನ್‌ಕೆಫಾಲಿನ್).
HPLC ಮೂಲಕ ಮಾನವ ಸೀರಮ್ ಅಲ್ಬುಮಿನ್‌ನ ಟ್ರಿಪ್ಟಿಕ್ ಹೈಡ್ರೊಲೈಜೇಟ್ ಅನ್ನು ಬೇರ್ಪಡಿಸಲು PMP ಕಾಲಮ್ (ಒಳಗಿನ ವ್ಯಾಸ 100 x 1.8 ಮಿಮೀ) ಅನ್ನು ಮೌಲ್ಯಮಾಪನ ಮಾಡಲಾಯಿತು. ಚಿತ್ರ 6 ರಲ್ಲಿನ ಕ್ರೊಮ್ಯಾಟೋಗ್ರಾಮ್ ಮಾದರಿಗಳನ್ನು ಚೆನ್ನಾಗಿ ಬೇರ್ಪಡಿಸಲಾಗಿದೆ ಮತ್ತು ಉತ್ತಮ ರೆಸಲ್ಯೂಶನ್ ಹೊಂದಿದೆ ಎಂದು ತೋರಿಸುತ್ತದೆ. HSA ದ್ರಾವಣಗಳನ್ನು 100 μl/ನಿಮಿಷದ ಹರಿವಿನ ಪ್ರಮಾಣ, 70/30 ಅಸಿಟೋನಿಟ್ರೈಲ್/ನೀರಿನ ಮೊಬೈಲ್ ಹಂತ ಮತ್ತು 0.1% TFA ಬಳಸಿ ವಿಶ್ಲೇಷಿಸಲಾಗಿದೆ. ಕ್ರೊಮ್ಯಾಟೋಗ್ರಾಮ್‌ನಲ್ಲಿ (ಚಿತ್ರ 6) ತೋರಿಸಿರುವಂತೆ HSA ಯ ಸೀಳನ್ನು 17 ಶಿಖರಗಳಾಗಿ ವಿಂಗಡಿಸಲಾಗಿದೆ, ಇದು 17 ಪೆಪ್ಟೈಡ್‌ಗಳಿಗೆ ಅನುಗುಣವಾಗಿರುತ್ತದೆ. HSA ಹೈಡ್ರೊಲೈಜೇಟ್‌ನಿಂದ ಪ್ರತ್ಯೇಕ ಶಿಖರಗಳ ಬೇರ್ಪಡಿಕೆ ದಕ್ಷತೆಯನ್ನು ಲೆಕ್ಕಹಾಕಲಾಗಿದೆ ಮತ್ತು ಮೌಲ್ಯಗಳನ್ನು ಕೋಷ್ಟಕ 5 ರಲ್ಲಿ ತೋರಿಸಲಾಗಿದೆ.
HSA ಟ್ರಿಪ್ಟಿಕ್ ಹೈಡ್ರೊಲೈಸೇಟ್‌ಗಳನ್ನು PMP ಕಾಲಮ್ (ಒಳಗಿನ ವ್ಯಾಸ 100 x 1.8 ಮಿಮೀ), ಹರಿವಿನ ಪ್ರಮಾಣ (100 μl/ನಿಮಿಷ), ಮೊಬೈಲ್ ಹಂತ 60/40 ಅಸಿಟೋನಿಟ್ರೈಲ್/ನೀರು ಮತ್ತು 0.1% TFA ಮೇಲೆ ಬೇರ್ಪಡಿಸಲಾಯಿತು.
ಇಲ್ಲಿ L ಎಂಬುದು ಕಾಲಮ್ ಉದ್ದ, η ಎಂಬುದು ಮೊಬೈಲ್ ಹಂತದ ಸ್ನಿಗ್ಧತೆ, ΔP ಎಂಬುದು ಕಾಲಮ್‌ನ ಹಿಮ್ಮುಖ ಒತ್ತಡ, ಮತ್ತು u ಎಂಬುದು ಮೊಬೈಲ್ ಹಂತದ ರೇಖೀಯ ವೇಗ. PMP ಕಾಲಮ್‌ನ ಪ್ರವೇಶಸಾಧ್ಯತೆಯು 2.5 × 10–14 m2 ಆಗಿತ್ತು, ಹರಿವಿನ ಪ್ರಮಾಣ 25 µl/ನಿಮಿಷವಾಗಿತ್ತು, 60/40 v/v ಅನ್ನು ಬಳಸಲಾಯಿತು. ACN/ನೀರು. PMP ಕಾಲಮ್‌ನ ಪ್ರವೇಶಸಾಧ್ಯತೆಯು (ID 100 × 1.8 mm) ನಮ್ಮ ಹಿಂದಿನ Ref.34 ಅಧ್ಯಯನದಂತೆಯೇ ಇತ್ತು. ಮೇಲ್ನೋಟಕ್ಕೆ ಸರಂಧ್ರ ಕಣಗಳಿಂದ ತುಂಬಿದ ಕಾಲಮ್‌ನ ಪ್ರವೇಶಸಾಧ್ಯತೆಯು 1.7×10 .6 µm, 5 µm ಕಣಗಳಿಗೆ 2.5×10-14 m2 ಆಗಿದೆ43. ಆದ್ದರಿಂದ, PMP ಹಂತದ ಪ್ರವೇಶಸಾಧ್ಯತೆಯು 5 μm ಗಾತ್ರದೊಂದಿಗೆ ಕೋರ್-ಶೆಲ್ ಕಣಗಳ ಪ್ರವೇಶಸಾಧ್ಯತೆಗೆ ಹೋಲುತ್ತದೆ.
ಇಲ್ಲಿ Wx ಎಂಬುದು ಕ್ಲೋರೋಫಾರ್ಮ್ ತುಂಬಿದ ಕಾಲಮ್‌ನ ದ್ರವ್ಯರಾಶಿ, Wy ಎಂಬುದು ಮೆಥನಾಲ್ ತುಂಬಿದ ಕಾಲಮ್‌ನ ದ್ರವ್ಯರಾಶಿ ಮತ್ತು ρ ಎಂಬುದು ದ್ರಾವಕದ ಸಾಂದ್ರತೆಯಾಗಿದೆ. ಮೆಥನಾಲ್ (ρ = 0.7866) ಮತ್ತು ಕ್ಲೋರೋಫಾರ್ಮ್ (ρ = 1.484) ಸಾಂದ್ರತೆ. ಸಿಲಿಕಾ-C18 ಕಣ ಕಾಲಮ್ (100 × 1.8 mm ID)34 ಮತ್ತು ನಮ್ಮ ಹಿಂದೆ ಅಧ್ಯಯನ ಮಾಡಿದ C18-ಯೂರಿಯಾ31 ಕಾಲಮ್‌ನ ಒಟ್ಟು ಸರಂಧ್ರತೆಯು ಕ್ರಮವಾಗಿ 0.63 ಮತ್ತು 0.55 ಆಗಿತ್ತು. ಇದರರ್ಥ ಯೂರಿಯಾ ಲಿಗಂಡ್‌ಗಳ ಉಪಸ್ಥಿತಿಯು ಸ್ಥಿರ ಹಂತದ ಪ್ರವೇಶಸಾಧ್ಯತೆಯನ್ನು ಕಡಿಮೆ ಮಾಡುತ್ತದೆ. ಮತ್ತೊಂದೆಡೆ, PMP ಕಾಲಮ್‌ನ ಒಟ್ಟು ಸರಂಧ್ರತೆಯು (ಒಳಗಿನ ವ್ಯಾಸ 100 × 1.8 mm) 0.60 ಆಗಿದೆ. C18 ಬೌಂಡ್ ಸಿಲಿಕಾ ಕಣಗಳಿಂದ ತುಂಬಿದ ಕಾಲಮ್‌ಗಳಿಗಿಂತ PMP ಕಾಲಮ್‌ಗಳು ಕಡಿಮೆ ಪ್ರವೇಶಸಾಧ್ಯತೆಯನ್ನು ಹೊಂದಿವೆ ಏಕೆಂದರೆ C18 ಪ್ರಕಾರದ ಸ್ಥಾಯಿ ಹಂತಗಳಲ್ಲಿ C18 ಲಿಗಂಡ್‌ಗಳು ರೇಖೀಯ ಸರಪಳಿಗಳಲ್ಲಿ ಸಿಲಿಕಾ ಕಣಗಳಿಗೆ ಜೋಡಿಸಲ್ಪಟ್ಟಿರುತ್ತವೆ, ಆದರೆ ಪಾಲಿಸ್ಟೈರೀನ್ ಪ್ರಕಾರದ ಸ್ಥಾಯಿ ಹಂತಗಳಲ್ಲಿ ಕಣಗಳ ಸುತ್ತಲೂ ತುಲನಾತ್ಮಕವಾಗಿ ದಪ್ಪ ಪಾಲಿಮರ್ ರೂಪುಗೊಳ್ಳುತ್ತದೆ. ಪದರ A. ಒಂದು ವಿಶಿಷ್ಟ ಪ್ರಯೋಗದಲ್ಲಿ, ಕಾಲಮ್ ಸರಂಧ್ರತೆಯನ್ನು ಈ ಕೆಳಗಿನಂತೆ ಲೆಕ್ಕಹಾಕಲಾಗುತ್ತದೆ:
ಚಿತ್ರ 7A ನಲ್ಲಿ, B, PMP ಕಾಲಮ್ (id 100 x 1.8 mm) ಮತ್ತು Ascentis Express RP-Amide ಕಾಲಮ್ (id 100 x 1.8 mm) ಗಾಗಿ ವ್ಯಾನ್ ಡೀಮ್ಟರ್ ಪ್ಲಾಟ್‌ಗಳನ್ನು ಅದೇ ಎಲ್ಯುಷನ್ ಪರಿಸ್ಥಿತಿಗಳಲ್ಲಿ, ಎರಡೂ ಕಾಲಮ್‌ಗಳಲ್ಲಿ 60/40 ACN/H2O ಮತ್ತು 0 .1% TFA 20 µl/min ನಿಂದ 800 µl/min ವರೆಗೆ ತೋರಿಸುತ್ತದೆ. PMP ಕಾಲಮ್ ಮತ್ತು Ascentis Express RP-Amide ಕಾಲಮ್‌ಗೆ ಸೂಕ್ತ ಹರಿವಿನ ದರದಲ್ಲಿ (80 µl/min) ಕನಿಷ್ಠ HETP ಮೌಲ್ಯಗಳು ಕ್ರಮವಾಗಿ 2.6 µm ಮತ್ತು 3.9 µm ಆಗಿದ್ದವು. HETP ಮೌಲ್ಯಗಳು PMP ಕಾಲಮ್‌ನ (100 x 1.8 mm id) ಬೇರ್ಪಡಿಕೆ ದಕ್ಷತೆಯು ವಾಣಿಜ್ಯಿಕವಾಗಿ ಲಭ್ಯವಿರುವ Ascentis Express RP-Amide ಕಾಲಮ್ (100 x 1.8 mm id) ಗಿಂತ ಹೆಚ್ಚಿನದಾಗಿದೆ ಎಂದು ತೋರಿಸುತ್ತದೆ. ಚಿತ್ರ 7(A) ನಲ್ಲಿರುವ ವ್ಯಾನ್ ಡೀಮ್ಟರ್ ಗ್ರಾಫ್, ನಮ್ಮ ಹಿಂದಿನ ಅಧ್ಯಯನಕ್ಕೆ ಹೋಲಿಸಿದರೆ ಹೆಚ್ಚುತ್ತಿರುವ ಹರಿವಿನೊಂದಿಗೆ N ಮೌಲ್ಯದಲ್ಲಿನ ಇಳಿಕೆ ಗಮನಾರ್ಹವಾಗಿ ಹೆಚ್ಚಿಲ್ಲ ಎಂದು ತೋರಿಸುತ್ತದೆ. ಅಸೆಂಟಿಸ್ ಎಕ್ಸ್‌ಪ್ರೆಸ್ RP-ಅಮೈಡ್ ಕಾಲಮ್‌ಗೆ ಹೋಲಿಸಿದರೆ PMP ಕಾಲಮ್‌ನ ಹೆಚ್ಚಿನ ಬೇರ್ಪಡಿಕೆ ದಕ್ಷತೆ (id 100 × 1.8 mm) ಸುಧಾರಿತ ಕಣದ ಆಕಾರ ಮತ್ತು ಗಾತ್ರ ಮತ್ತು ಪ್ರಸ್ತುತ ಕೆಲಸದಲ್ಲಿ ಬಳಸಲಾಗುವ ಅತ್ಯಾಧುನಿಕ ಕಾಲಮ್ ಪ್ಯಾಕಿಂಗ್ ವಿಧಾನವನ್ನು ಆಧರಿಸಿದೆ34.
(A) 0.1% TFA ನೊಂದಿಗೆ 60/40 ACN/H2O ನಲ್ಲಿ PMP ಕಾಲಮ್ (id 100 x 1.8 mm) ನಲ್ಲಿ ಪಡೆದ ವ್ಯಾನ್ ಡೀಮ್ಟರ್ ಪ್ಲಾಟ್ (HETP vs. ಮೊಬೈಲ್ ಹಂತದ ರೇಖೀಯ ವೇಗ). (B) 0.1% TFA ನೊಂದಿಗೆ 60/40 ACN/H2O ನಲ್ಲಿ ಅಸೆಂಟಿಸ್ ಎಕ್ಸ್‌ಪ್ರೆಸ್ RP-ಅಮೈಡ್ ಕಾಲಮ್ (id 100 x 1.8 mm) ನಲ್ಲಿ ಪಡೆದ ವ್ಯಾನ್ ಡೀಮ್ಟರ್ ಪ್ಲಾಟ್ (HETP vs. ಮೊಬೈಲ್ ಹಂತದ ರೇಖೀಯ ವೇಗ).
ಹೆಚ್ಚಿನ ಕಾರ್ಯಕ್ಷಮತೆಯ ದ್ರವ ವರ್ಣರೇಖನದಲ್ಲಿ ಸಂಶ್ಲೇಷಿತ ಪೆಪ್ಟೈಡ್‌ಗಳು ಮತ್ತು ಮಾನವ ಸೀರಮ್ ಅಲ್ಬುಮಿನ್ (HSA) ನ ಟ್ರಿಪ್ಟಿಕ್ ಹೈಡ್ರೊಲೈಜೇಟ್‌ನ ಮಿಶ್ರಣವನ್ನು ಬೇರ್ಪಡಿಸಲು ಇಂಟರ್ಕಲೇಟೆಡ್ ಪಾಲಿಸ್ಟೈರೀನ್‌ನ ಧ್ರುವೀಯ ಸ್ಥಿರ ಹಂತವನ್ನು ತಯಾರಿಸಿ ಮೌಲ್ಯಮಾಪನ ಮಾಡಲಾಯಿತು. ಪೆಪ್ಟೈಡ್ ಮಿಶ್ರಣಗಳಿಗೆ PMP ಕಾಲಮ್‌ಗಳ ಕ್ರೊಮ್ಯಾಟೋಗ್ರಾಫಿಕ್ ಕಾರ್ಯಕ್ಷಮತೆಯು ಬೇರ್ಪಡಿಕೆ ದಕ್ಷತೆ ಮತ್ತು ರೆಸಲ್ಯೂಶನ್ ವಿಷಯದಲ್ಲಿ ಅತ್ಯುತ್ತಮವಾಗಿದೆ. PMP ಕಾಲಮ್‌ಗಳ ಸುಧಾರಿತ ಬೇರ್ಪಡಿಕೆ ದಕ್ಷತೆಯು ಸಿಲಿಕಾ ಕಣದ ಗಾತ್ರ ಮತ್ತು ರಂಧ್ರದ ಗಾತ್ರ, ಸ್ಥಾಯಿ ಹಂತಗಳ ನಿಯಂತ್ರಿತ ಸಂಶ್ಲೇಷಣೆ ಮತ್ತು ಸಂಕೀರ್ಣ ಕಾಲಮ್ ಪ್ಯಾಕಿಂಗ್ ವಸ್ತುಗಳಂತಹ ಹಲವಾರು ಕಾರಣಗಳಿಂದಾಗಿ. ಹೆಚ್ಚಿನ ಬೇರ್ಪಡಿಕೆ ದಕ್ಷತೆಯ ಜೊತೆಗೆ, ಈ ಸ್ಥಾಯಿ ಹಂತದ ಮತ್ತೊಂದು ಪ್ರಯೋಜನವೆಂದರೆ ಹೆಚ್ಚಿನ ಹರಿವಿನ ದರಗಳಲ್ಲಿ ಕಡಿಮೆ ಕಾಲಮ್ ಹಿಂಭಾಗದ ಒತ್ತಡ. PMP ಕಾಲಮ್‌ಗಳು ಹೆಚ್ಚು ಪುನರುತ್ಪಾದಿಸಬಹುದಾದವು ಮತ್ತು ಪೆಪ್ಟೈಡ್‌ಗಳ ಮಿಶ್ರಣಗಳನ್ನು ಮತ್ತು ವಿವಿಧ ಪ್ರೋಟೀನ್‌ಗಳ ಟ್ರಿಪ್ಟಿಕ್ ಜೀರ್ಣಕ್ರಿಯೆಯನ್ನು ವಿಶ್ಲೇಷಿಸಲು ಬಳಸಬಹುದು. ದ್ರವ ವರ್ಣರೇಖನದಲ್ಲಿ ನೈಸರ್ಗಿಕ ಉತ್ಪನ್ನಗಳಿಂದ ಜೈವಿಕ ಸಕ್ರಿಯ ಸಂಯುಕ್ತಗಳನ್ನು ಬೇರ್ಪಡಿಸಲು, ಔಷಧೀಯ ಸಸ್ಯಗಳ ಸಾರಗಳು ಮತ್ತು ಅಣಬೆಗಳಿಗಾಗಿ ನಾವು ಈ ಕಾಲಮ್ ಅನ್ನು ಬಳಸಲು ಉದ್ದೇಶಿಸಿದ್ದೇವೆ. ಭವಿಷ್ಯದಲ್ಲಿ, ಪ್ರೋಟೀನ್‌ಗಳು ಮತ್ತು ಮೊನೊಕ್ಲೋನಲ್ ಪ್ರತಿಕಾಯಗಳ ಬೇರ್ಪಡಿಕೆಗಾಗಿ PMP ಕಾಲಮ್‌ಗಳನ್ನು ಸಹ ಮೌಲ್ಯಮಾಪನ ಮಾಡಲಾಗುತ್ತದೆ.
ಫೀಲ್ಡ್, ಜೆಕೆ, ಯುರ್ಬಿ, ಎಮ್ಆರ್, ಲಾವ್, ಜೆ., ಥೋಗರ್ಸನ್, ಹೆಚ್. & ಪೀಟರ್ಸನ್, ಪಿ. ರಿವರ್ಸ್ಡ್ ಫೇಸ್ ಕ್ರೊಮ್ಯಾಟೋಗ್ರಫಿ ಪೆಪ್ಟೈಡ್ ಬೇರ್ಪಡಿಕೆ ವ್ಯವಸ್ಥೆಗಳ ತನಿಖೆ ಭಾಗ I: ಕಾಲಮ್ ಗುಣಲಕ್ಷಣಕ್ಕಾಗಿ ಪ್ರೋಟೋಕಾಲ್ ಅಭಿವೃದ್ಧಿ. ಫೀಲ್ಡ್, ಜೆಕೆ, ಯುರ್ಬಿ, ಎಮ್ಆರ್, ಲಾವ್, ಜೆ., ಥೋಗರ್ಸನ್, ಹೆಚ್. & ಪೀಟರ್ಸನ್, ಪಿ. ರಿವರ್ಸ್ಡ್ ಫೇಸ್ ಕ್ರೊಮ್ಯಾಟೋಗ್ರಫಿ ಪೆಪ್ಟೈಡ್ ಬೇರ್ಪಡಿಕೆ ವ್ಯವಸ್ಥೆಗಳ ತನಿಖೆ ಭಾಗ I: ಕಾಲಮ್ ಗುಣಲಕ್ಷಣಕ್ಕಾಗಿ ಪ್ರೋಟೋಕಾಲ್ ಅಭಿವೃದ್ಧಿ.ಫೀಲ್ಡ್, ಜೆಕೆ, ಒವೆರ್ಬಿ, ಎಮ್ಆರ್, ಲಾವ್, ಜೆ., ಟೋಗರ್ಸನ್, ಹೆಚ್., ಮತ್ತು ಪೀಟರ್ಸನ್, ಪಿ. ರಿವರ್ಸ್-ಫೇಸ್ ಕ್ರೊಮ್ಯಾಟೋಗ್ರಫಿಯಿಂದ ಪೆಪ್ಟೈಡ್ ಸೆಪರೇಷನ್ ಸಿಸ್ಟಮ್ಸ್ ಇನ್ವೆಸ್ಟಿಗೇಷನ್, ಭಾಗ I: ಕಾಲಮ್ ಕ್ಯಾರೆಕ್ಟರೈಸೇಶನ್‌ಗಾಗಿ ಪ್ರೋಟೋಕಾಲ್ ಅನ್ನು ಅಭಿವೃದ್ಧಿಪಡಿಸುವುದು. ಫೀಲ್ಡ್, ಜೆಕೆ, ಯುರ್ಬಿ, ಎಮ್ಆರ್, ಲಾವ್, ಜೆ., ಥೋಗರ್ಸನ್, ಹೆಚ್. & ಪೀಟರ್ಸನ್, ಪಿ. ರಿವರ್ಸ್ಡ್ ಫೇಸ್ ಕ್ರೊಮ್ಯಾಟೋಗ್ರಫಿ ಪೆಪ್ಟೈಡ್ ಬೇರ್ಪಡಿಕೆ ವ್ಯವಸ್ಥೆಗಳ ತನಿಖೆ ಭಾಗ I: ಕಾಲಮ್ ಗುಣಲಕ್ಷಣಗಳಿಗಾಗಿ ಪ್ರೋಟೋಕಾಲ್ ಅಭಿವೃದ್ಧಿ. ಫೀಲ್ಡ್, ಜೆಕೆ, ಯುರ್ಬಿ, ಎಮ್ಆರ್, ಲಾವ್, ಜೆ., ಥೋಗರ್ಸನ್, ಹೆಚ್. & ಪೀಟರ್ಸನ್, ಪಿ. ರಿವರ್ಸ್ಡ್ ಫೇಸ್ ಕ್ರೊಮ್ಯಾಟೋಗ್ರಫಿ ಪೆಪ್ಟೈಡ್ ಬೇರ್ಪಡಿಕೆ ವ್ಯವಸ್ಥೆಗಳ ತನಿಖೆ ಭಾಗ I: ಕಾಲಮ್ ಗುಣಲಕ್ಷಣಗಳಿಗಾಗಿ ಪ್ರೋಟೋಕಾಲ್ ಅಭಿವೃದ್ಧಿ.ಫೀಲ್ಡ್, ಜೆಕೆ, ಒವೆರ್ಬಿ, ಎಮ್ಆರ್, ಲಾವ್, ಜೆ., ಟೋಗರ್ಸನ್, ಹೆಚ್., ಮತ್ತು ಪೀಟರ್ಸನ್, ಪಿ. ರಿವರ್ಸ್-ಫೇಸ್ ಕ್ರೊಮ್ಯಾಟೋಗ್ರಫಿಯಿಂದ ಪೆಪ್ಟೈಡ್ ಸೆಪರೇಷನ್ ಸಿಸ್ಟಮ್ಸ್ ಇನ್ವೆಸ್ಟಿಗೇಷನ್, ಭಾಗ I: ಕಾಲಮ್ ಕ್ಯಾರೆಕ್ಟರೈಸೇಶನ್‌ಗಾಗಿ ಪ್ರೋಟೋಕಾಲ್ ಅನ್ನು ಅಭಿವೃದ್ಧಿಪಡಿಸುವುದು.J.色谱法。 1603,113-129。 https://doi.org/10.1016/j.chroma.2019.05.038(2019)。
ಗೊಮೆಜ್, ಬಿ. ಮತ್ತು ಇತರರು. ಸಾಂಕ್ರಾಮಿಕ ರೋಗಗಳ ಚಿಕಿತ್ಸೆಗಾಗಿ ಸುಧಾರಿತ ಸಕ್ರಿಯ ಪೆಪ್ಟೈಡ್‌ಗಳನ್ನು ರಚಿಸುವ ವಿಧಾನಗಳು. ಜೈವಿಕ ತಂತ್ರಜ್ಞಾನ. ಸಾಧನೆಗಳು 36(2), 415–429. https://doi.org/10.1016/j.biotechadv.2018.01.004 (2018).
ವ್ಲೀಘೆ, ಪಿ., ಲಿಸೊವ್ಸ್ಕಿ, ವಿ., ಮಾರ್ಟಿನೆಜ್, ಜೆ. & ಕ್ರೆಸ್ಟ್‌ಚಾಟಿಸ್ಕಿ, ಎಂ. ಸಿಂಥೆಟಿಕ್ ಥೆರಪ್ಯೂಟಿಕ್ ಪೆಪ್ಟೈಡ್‌ಗಳು: ವಿಜ್ಞಾನ ಮತ್ತು ಮಾರುಕಟ್ಟೆ. ವ್ಲೀಘೆ, ಪಿ., ಲಿಸೊವ್ಸ್ಕಿ, ವಿ., ಮಾರ್ಟಿನೆಜ್, ಜೆ. & ಕ್ರೆಸ್ಟ್‌ಚಾಟಿಸ್ಕಿ, ಎಂ. ಸಿಂಥೆಟಿಕ್ ಥೆರಪ್ಯೂಟಿಕ್ ಪೆಪ್ಟೈಡ್‌ಗಳು: ವಿಜ್ಞಾನ ಮತ್ತು ಮಾರುಕಟ್ಟೆ.ವ್ಲೀಜ್ ಪಿ, ಲಿಸೊವ್ಸ್ಕಿ ವಿ, ಮಾರ್ಟಿನೆಜ್ ಜೆ ಮತ್ತು ಕ್ರೆಸ್ಚಾಟಿಸ್ಕಿ ಎಂ. ಸಿಂಥೆಟಿಕ್ ಥೆರಪ್ಯೂಟಿಕ್ ಪೆಪ್ಟೈಡ್‌ಗಳು: ವಿಜ್ಞಾನ ಮತ್ತು ಮಾರುಕಟ್ಟೆ.ವ್ಲೀಜ್ ಪಿ, ಲಿಸೊವ್ಸ್ಕಿ ವಿ, ಮಾರ್ಟಿನೆಜ್ ಜೆ ಮತ್ತು ಖ್ರೆಸ್ಚಾಟ್ಸ್ಕಿ ಎಂ. ಸಂಶ್ಲೇಷಿತ ಚಿಕಿತ್ಸಕ ಪೆಪ್ಟೈಡ್‌ಗಳು: ವಿಜ್ಞಾನ ಮತ್ತು ಮಾರುಕಟ್ಟೆ. ಔಷಧ ಆವಿಷ್ಕಾರ. ಇಂದು 15 (1–2), 40–56. https://doi.org/10.1016/j.drudis.2009.10.009 (2010).
ಕ್ಸಿ, ಎಫ್., ಸ್ಮಿತ್, ಆರ್‌ಡಿ & ಶೆನ್, ವೈ. ಅಡ್ವಾನ್ಸ್ಡ್ ಪ್ರೋಟಿಯೋಮಿಕ್ ಲಿಕ್ವಿಡ್ ಕ್ರೊಮ್ಯಾಟೋಗ್ರಫಿ. ಕ್ಸಿ, ಎಫ್., ಸ್ಮಿತ್, ಆರ್‌ಡಿ & ಶೆನ್, ವೈ. ಅಡ್ವಾನ್ಸ್ಡ್ ಪ್ರೋಟಿಯೋಮಿಕ್ ಲಿಕ್ವಿಡ್ ಕ್ರೊಮ್ಯಾಟೋಗ್ರಫಿ.ಎಫ್., ಸ್ಮಿತ್ ಆರ್‌ಡಿ ಮತ್ತು ಶೆನ್ ಯು ಅವರನ್ನು ನೋಡಿ. ಸುಧಾರಿತ ಪ್ರೋಟಿಯೋಮಿಕ್ ದ್ರವ ವರ್ಣರೇಖನ. Xie, F., Smith, RD & Shen, Y. 高级蛋白质组液相色谱。 Xie, F., Smith, RD & Shen, Y. ಸುಧಾರಿತ ಪ್ರೋಟೀನ್ ಸಂಯೋಜನೆ 液相色谱。ಎಫ್., ಸ್ಮಿತ್ ಆರ್‌ಡಿ ಮತ್ತು ಶೆನ್ ಯು ಅವರನ್ನು ನೋಡಿ. ಸುಧಾರಿತ ಪ್ರೋಟಿಯೋಮಿಕ್ ದ್ರವ ವರ್ಣರೇಖನ.ಜೆ. ಕ್ರೊಮ್ಯಾಟೋಗ್ರಫಿ. ಎ 1261, 78–90 (2012).
ಲಿಯು, ಡಬ್ಲ್ಯೂ. ಮತ್ತು ಇತರರು. ಸುಧಾರಿತ ದ್ರವ ವರ್ಣತಂತುಶಾಸ್ತ್ರ-ದ್ರವ್ಯರಾಶಿ ವರ್ಣಪಟಲಮಾಪನವು ವಿಶಾಲ-ಆಧಾರಿತ ಚಯಾಪಚಯ ಮತ್ತು ಪ್ರೋಟಿಯೋಮಿಕ್ಸ್ ಅನ್ನು ಸಂಯೋಜಿಸಲು ಸಾಧ್ಯವಾಗುತ್ತದೆ. ಗುದದ್ವಾರ. ಚಿಮ್. ಆಕ್ಟಾ 1069, 89–97 (2019).
ಚೆಸ್ನಟ್, ಎಸ್‌ಎಂ & ಸಾಲಿಸ್‌ಬರಿ, ಜೆಜೆ ಔಷಧೀಯ ಅಭಿವೃದ್ಧಿಯಲ್ಲಿ ಯುಎಚ್‌ಪಿಎಲ್‌ಸಿಯ ಪಾತ್ರ. ಚೆಸ್ನಟ್, ಎಸ್‌ಎಂ & ಸಾಲಿಸ್‌ಬರಿ, ಜೆಜೆ ಔಷಧೀಯ ಅಭಿವೃದ್ಧಿಯಲ್ಲಿ ಯುಎಚ್‌ಪಿಎಲ್‌ಸಿಯ ಪಾತ್ರ.ಚೆಸ್ನಟ್, ಎಸ್.ಎಂ. ಮತ್ತು ಸಾಲಿಸ್ಬರಿ, ಜೆ.ಜೆ. ಔಷಧೀಯ ಅಭಿವೃದ್ಧಿಯಲ್ಲಿ ಯುಹೆಚ್‌ಪಿಎಲ್‌ಸಿಯ ಪಾತ್ರ.ಚೆಸ್ನಟ್, ಎಸ್‌ಎಂ ಮತ್ತು ಸಾಲಿಸ್‌ಬರಿ, ಜೆಜೆ ಔಷಧ ಅಭಿವೃದ್ಧಿಯಲ್ಲಿ ಯುಹೆಚ್‌ಪಿಎಲ್‌ಸಿಯ ಪಾತ್ರ. ಜೆ. ಸೆಪ್ಟೆಂಬರ್ ಸೈನ್ಸ್. 30(8), 1183–1190 (2007).
ವು, ಎನ್. & ಕ್ಲಾಸೆನ್, ಎಎಮ್ ವೇಗದ ಬೇರ್ಪಡಿಕೆಗಳಿಗಾಗಿ ಅಲ್ಟ್ರಾಹೈ ಪ್ರೆಶರ್ ಲಿಕ್ವಿಡ್ ಕ್ರೊಮ್ಯಾಟೋಗ್ರಫಿಯ ಮೂಲಭೂತ ಮತ್ತು ಪ್ರಾಯೋಗಿಕ ಅಂಶಗಳು. ವು, ಎನ್. & ಕ್ಲಾಸೆನ್, ಎಎಮ್ ವೇಗದ ಬೇರ್ಪಡಿಕೆಗಳಿಗಾಗಿ ಅಲ್ಟ್ರಾಹೈ ಪ್ರೆಶರ್ ಲಿಕ್ವಿಡ್ ಕ್ರೊಮ್ಯಾಟೋಗ್ರಫಿಯ ಮೂಲಭೂತ ಮತ್ತು ಪ್ರಾಯೋಗಿಕ ಅಂಶಗಳು.ವು, ಎನ್. ಮತ್ತು ಕ್ಲಾಸೆನ್, ಎಎಮ್. ಕ್ಷಿಪ್ರ ಬೇರ್ಪಡಿಕೆಗಾಗಿ ಹೆಚ್ಚಿನ ಒತ್ತಡದ ದ್ರವ ವರ್ಣರೇಖನದ ಮೂಲಭೂತ ಮತ್ತು ಪ್ರಾಯೋಗಿಕ ಅಂಶಗಳು. ವು, ಎನ್. ವು, ಎನ್. & ಕ್ಲಾಸೆನ್, ಎಎಮ್ ಕ್ಷಿಪ್ರ ಬೇರ್ಪಡಿಕೆಗಾಗಿ ಅಲ್ಟ್ರಾ-ಹೈ ಪ್ರೆಶರ್ ಲಿಕ್ವಿಡ್ ಕ್ರೊಮ್ಯಾಟೋಗ್ರಫಿಯ ಮೂಲಭೂತ ಮತ್ತು ಪ್ರಾಯೋಗಿಕ ಅಂಶಗಳು.ವು, ಎನ್. ಮತ್ತು ಕ್ಲಾಸೆನ್, ಎಎಮ್. ಕ್ಷಿಪ್ರ ಬೇರ್ಪಡಿಕೆಗಾಗಿ ಹೆಚ್ಚಿನ ಒತ್ತಡದ ದ್ರವ ವರ್ಣರೇಖನದ ಮೂಲಭೂತ ಮತ್ತು ಪ್ರಾಯೋಗಿಕ ಅಂಶಗಳು.ಜೆ. ಸೆಪ್ಟೆಂಬರ್ ಸೈನ್ಸ್. 30(8), 1167–1182. https://doi.org/10.1002/jssc.200700026 (2007).
ರೆನ್, ಎಸ್ಎ & ಟ್ಚೆಲಿಟ್ಚೆಫ್, ಪಿ. ಔಷಧೀಯ ಅಭಿವೃದ್ಧಿಯಲ್ಲಿ ಅಲ್ಟ್ರಾ-ಪರ್ಫಾರ್ಮೆನ್ಸ್ ಲಿಕ್ವಿಡ್ ಕ್ರೊಮ್ಯಾಟೋಗ್ರಫಿಯ ಬಳಕೆ. ರೆನ್, ಎಸ್ಎ & ಟ್ಚೆಲಿಟ್ಚೆಫ್, ಪಿ. ಔಷಧೀಯ ಅಭಿವೃದ್ಧಿಯಲ್ಲಿ ಅಲ್ಟ್ರಾ-ಪರ್ಫಾರ್ಮೆನ್ಸ್ ಲಿಕ್ವಿಡ್ ಕ್ರೊಮ್ಯಾಟೋಗ್ರಫಿಯ ಬಳಕೆ.ರೆನ್, ಎಸ್ಎ ಮತ್ತು ಚೆಲಿಸ್ಚೆಫ್, ಪಿ. ಔಷಧೀಯ ಅಭಿವೃದ್ಧಿಯಲ್ಲಿ ಅಲ್ಟ್ರಾ ಹೈ ಪರ್ಫಾರ್ಮೆನ್ಸ್ ಲಿಕ್ವಿಡ್ ಕ್ರೊಮ್ಯಾಟೋಗ್ರಫಿಯ ಬಳಕೆ. ರೆನ್, SA & Tchelitcheff, P. 超高效液相色谱在药物开发中的应用。 ರೆನ್, ಎಸ್ಎ & ಟ್ಚೆಲಿಟ್ಚೆಫ್, ಪಿ.ರೆನ್, ಎಸ್ಎ ಮತ್ತು ಚೆಲಿಸ್ಚೆಫ್, ಪಿ. ಔಷಧ ಅಭಿವೃದ್ಧಿಯಲ್ಲಿ ಅಲ್ಟ್ರಾ-ಪರ್ಫಾರ್ಮೆನ್ಸ್ ಲಿಕ್ವಿಡ್ ಕ್ರೊಮ್ಯಾಟೋಗ್ರಫಿಯ ಅಪ್ಲಿಕೇಶನ್.ಜೆ. ಕ್ರೊಮ್ಯಾಟೋಗ್ರಫಿ. 1119(1-2), 140-146. https://doi.org/10.1016/j.chroma.2006.02.052 (2006).
ಗು, ಎಚ್. ಮತ್ತು ಇತರರು. ಎಂಟರೊವೈರಸ್ 71 ರ ಪರಿಣಾಮಕಾರಿ ಶುದ್ಧೀಕರಣಕ್ಕಾಗಿ ಹೆಚ್ಚಿನ ಆಂತರಿಕ ಹಂತವನ್ನು ಹೊಂದಿರುವ ಎಣ್ಣೆ-ನೀರಿನ ಎಮಲ್ಷನ್‌ನಿಂದ ಪಡೆದ ಏಕಶಿಲೆಯ ಮ್ಯಾಕ್ರೋಪೋರಸ್ ಹೈಡ್ರೋಜೆಲ್. ರಾಸಾಯನಿಕ. ಯೋಜನೆ. ಜರ್ನಲ್ 401, 126051 (2020).
ಶಿ, ವೈ., ಕ್ಸಿಯಾಂಗ್, ಆರ್., ಹೊರ್ವಾತ್, ಸಿ. & ವಿಲ್ಕಿನ್ಸ್, ಜೆಎ ಪ್ರೋಟಿಯೋಮಿಕ್ಸ್‌ನಲ್ಲಿ ದ್ರವ ವರ್ಣರೇಖನದ ಪಾತ್ರ. ಶಿ, ವೈ., ಕ್ಸಿಯಾಂಗ್, ಆರ್., ಹೊರ್ವಾತ್, ಸಿ. & ವಿಲ್ಕಿನ್ಸ್, ಜೆಎ ಪ್ರೋಟಿಯೋಮಿಕ್ಸ್‌ನಲ್ಲಿ ದ್ರವ ವರ್ಣರೇಖನದ ಪಾತ್ರ.ಶಿ, ವೈ., ಕ್ಸಿಯಾಂಗ್, ಆರ್., ಹೊರ್ವಾತ್, ಸಿ. ಮತ್ತು ವಿಲ್ಕಿನ್ಸ್, ಜೆಎ ಪ್ರೋಟಿಯೋಮಿಕ್ಸ್‌ನಲ್ಲಿ ದ್ರವ ವರ್ಣರೇಖನದ ಪಾತ್ರ. ಶಿ, ವೈ., ಕ್ಸಿಯಾಂಗ್, ಆರ್., ಹೊರ್ವಾತ್, ಸಿ. & ವಿಲ್ಕಿನ್ಸ್, ಜೆಎ 液相色谱在蛋白质组学中的作用。 ಶಿ, ವೈ., ಕ್ಸಿಯಾಂಗ್, ಆರ್., ಹೊರ್ವಾತ್, ಸಿ. & ವಿಲ್ಕಿನ್ಸ್, ಜೆಎಶಿ, ವೈ., ಕ್ಸಿಯಾಂಗ್, ಆರ್., ಹೊರ್ವಾತ್, ಸಿ. ಮತ್ತು ವಿಲ್ಕಿನ್ಸ್, ಜೆಎ ಪ್ರೋಟಿಯೋಮಿಕ್ಸ್‌ನಲ್ಲಿ ದ್ರವ ವರ್ಣರೇಖನದ ಪಾತ್ರ.ಜೆ. ಕ್ರೊಮ್ಯಾಟೋಗ್ರಫಿ. ಎ 1053 (1-2), 27-36 (2004).
ಫೆಕೆಟೆ, ಎಸ್., ವುಟೆ, ಜೆ.-ಎಲ್. & ಗಿಲ್ಲಾರ್ಮ್, ಡಿ. ಚಿಕಿತ್ಸಕ ಪೆಪ್ಟೈಡ್‌ಗಳು ಮತ್ತು ಪ್ರೋಟೀನ್‌ಗಳ ಹಿಮ್ಮುಖ-ಹಂತದ ದ್ರವ ಕ್ರೊಮ್ಯಾಟೋಗ್ರಾಫಿಕ್ ಬೇರ್ಪಡಿಕೆಗಳಲ್ಲಿ ಹೊಸ ಪ್ರವೃತ್ತಿಗಳು: ಸಿದ್ಧಾಂತ ಮತ್ತು ಅನ್ವಯಿಕೆಗಳು. & ಗಿಲ್ಲಾರ್ಮ್, ಡಿ. ಚಿಕಿತ್ಸಕ ಪೆಪ್ಟೈಡ್‌ಗಳು ಮತ್ತು ಪ್ರೋಟೀನ್‌ಗಳ ಹಿಮ್ಮುಖ-ಹಂತದ ದ್ರವ ಕ್ರೊಮ್ಯಾಟೋಗ್ರಾಫಿಕ್ ಬೇರ್ಪಡಿಕೆಗಳಲ್ಲಿ ಹೊಸ ಪ್ರವೃತ್ತಿಗಳು: ಸಿದ್ಧಾಂತ ಮತ್ತು ಅನ್ವಯಿಕೆಗಳು. & ಗಿಲ್ಲರ್ಮೆ, D. ನೊವಿ ಟೆಂಡೆನಿಸ್ ಮತ್ತು ರಾಜ್ಡೆಲೆನಿ ಟೆರಾಪೆವ್ಟಿಚೆಸ್ಕಿ ಪೆಪ್ಟಿಡೋವ್ ಮತ್ತು ಬೆಲ್ಕೊವ್ ಸ್ ಪೋಮೊಸ್ ಜಿಡ್ಕೊಸ್ಟ್ನೋವ್ ಒಬ್ರಾಶೆನ್ನೊಯ್ ಫ್ಯಾಸೊಯ್: ಟೆಯೊರಿಯಾ ಮತ್ತು ಪ್ರಿಲೋಜೆನಿಯಾ. & ಗಿಲ್ಲಾರ್ಮ್, ಡಿ. ರಿವರ್ಸ್ ಫೇಸ್ ಲಿಕ್ವಿಡ್ ಕ್ರೊಮ್ಯಾಟೋಗ್ರಫಿಯಿಂದ ಚಿಕಿತ್ಸಕ ಪೆಪ್ಟೈಡ್‌ಗಳು ಮತ್ತು ಪ್ರೋಟೀನ್‌ಗಳ ಬೇರ್ಪಡಿಕೆಯಲ್ಲಿ ಹೊಸ ಪ್ರವೃತ್ತಿಗಳು: ಸಿದ್ಧಾಂತ ಮತ್ತು ಅನ್ವಯಿಕೆಗಳು. & ಗಿಲ್ಲಾರ್ಮೆ, ಡಿ. & ಗಿಲ್ಲಾರ್ಮ್, ಡಿ.ಮತ್ತು ಗಿಲ್ಲಾರ್ಮೆ, ಡಿ. ರಿವರ್ಸ್ ಫೇಸ್ ಲಿಕ್ವಿಡ್ ಕ್ರೊಮ್ಯಾಟೋಗ್ರಫಿಯಿಂದ ಚಿಕಿತ್ಸಕ ಪೆಪ್ಟೈಡ್‌ಗಳು ಮತ್ತು ಪ್ರೋಟೀನ್‌ಗಳ ಬೇರ್ಪಡಿಕೆಯಲ್ಲಿ ಹೊಸ ಪ್ರವೃತ್ತಿಗಳು: ಸಿದ್ಧಾಂತ ಮತ್ತು ಅನ್ವಯಿಕೆಗಳು.ಜೆ. ಫಾರ್ಮ್. ಬಯೋಮೆಡಿಕಲ್ ಸೈನ್ಸ್. ಗುದದ್ವಾರ. 69, 9–27 (2012).
ಗಿಲಾರ್, ಎಂ., ಒಲಿವೋವಾ, ಪಿ., ಡೇಲಿ, ಎಇ & ಗೆಬ್ಲರ್, ಜೆಸಿ ಮೊದಲ ಮತ್ತು ಎರಡನೆಯ ಬೇರ್ಪಡಿಕೆ ಆಯಾಮಗಳಲ್ಲಿ ವಿಭಿನ್ನ pH ಹೊಂದಿರುವ RP-RP-HPLC ವ್ಯವಸ್ಥೆಯನ್ನು ಬಳಸಿಕೊಂಡು ಪೆಪ್ಟೈಡ್‌ಗಳ ಎರಡು ಆಯಾಮದ ಬೇರ್ಪಡಿಕೆ. ಗಿಲಾರ್, ಎಂ., ಒಲಿವೋವಾ, ಪಿ., ಡೇಲಿ, ಎಇ & ಗೆಬ್ಲರ್, ಜೆಸಿ ಮೊದಲ ಮತ್ತು ಎರಡನೆಯ ಬೇರ್ಪಡಿಕೆ ಆಯಾಮಗಳಲ್ಲಿ ವಿಭಿನ್ನ pH ಹೊಂದಿರುವ RP-RP-HPLC ವ್ಯವಸ್ಥೆಯನ್ನು ಬಳಸಿಕೊಂಡು ಪೆಪ್ಟೈಡ್‌ಗಳ ಎರಡು ಆಯಾಮದ ಬೇರ್ಪಡಿಕೆ.ಗಿಲಾರ್ ಎಂ., ಒಲಿವೋವಾ ಪಿ., ಡಾಲಿ ಎಇ ಮತ್ತು ಗೆಬ್ಲರ್ ಜೆಕೆ ಮೊದಲ ಮತ್ತು ಎರಡನೆಯ ಬೇರ್ಪಡಿಕೆ ಆಯಾಮಗಳಲ್ಲಿ ವಿಭಿನ್ನ pH ಹೊಂದಿರುವ RP-RP-HPLC ವ್ಯವಸ್ಥೆಯನ್ನು ಬಳಸಿಕೊಂಡು ಪೆಪ್ಟೈಡ್‌ಗಳ ಎರಡು ಆಯಾಮದ ಬೇರ್ಪಡಿಕೆ.ಗಿಲಾರ್ ಎಂ., ಒಲಿವೋವಾ ಪಿ., ಡಾಲಿ ಎಇ ಮತ್ತು ಗೆಬ್ಲರ್ ಜೆಕೆ ಆರ್‌ಪಿ-ಆರ್‌ಪಿ-ಎಚ್‌ಪಿಎಲ್‌ಸಿ ವ್ಯವಸ್ಥೆಯನ್ನು ಬಳಸಿಕೊಂಡು ಮೊದಲ ಮತ್ತು ಎರಡನೆಯ ಬೇರ್ಪಡಿಕೆ ಆಯಾಮಗಳಲ್ಲಿ ವಿಭಿನ್ನ ಪಿಹೆಚ್ ಮೌಲ್ಯಗಳನ್ನು ಬಳಸಿಕೊಂಡು ಪೆಪ್ಟೈಡ್‌ಗಳ ಎರಡು ಆಯಾಮದ ಬೇರ್ಪಡಿಕೆ. ಜೆ. ಸೆಪ್ಟೆಂಬರ್ ಸೈನ್ಸ್. 28 (14), 1694–1703 (2005).
ಫೆಲ್ಲಿಟ್ಟಿ, ಎಸ್. ಮತ್ತು ಇತರರು. 2 µm ಗಿಂತ ಚಿಕ್ಕದಾದ ಸಂಪೂರ್ಣ ರಂಧ್ರವಿರುವ ಮತ್ತು ಮೇಲ್ಮೈ ರಂಧ್ರವಿರುವ C18 ಕಣಗಳಿಂದ ತುಂಬಿದ ಉನ್ನತ-ಕಾರ್ಯಕ್ಷಮತೆಯ ಕ್ರೊಮ್ಯಾಟೋಗ್ರಫಿ ಕಾಲಮ್‌ಗಳ ದ್ರವ್ಯರಾಶಿ ವರ್ಗಾವಣೆ ಮತ್ತು ಚಲನ ಗುಣಲಕ್ಷಣಗಳ ತನಿಖೆ. ಜೆ. ಸೆಪ್ಟೆಂಬರ್ ಸೈನ್ಸ್. 43 (9–10), 1737–1745 (2020).
ಪಿಯೋವೆಸಾನಾ, ಎಸ್. ಮತ್ತು ಇತರರು. ಸಸ್ಯ ಜೈವಿಕ ಸಕ್ರಿಯ ಪೆಪ್ಟೈಡ್‌ಗಳ ಪ್ರತ್ಯೇಕತೆ, ಗುರುತಿಸುವಿಕೆ ಮತ್ತು ಮೌಲ್ಯೀಕರಣದಲ್ಲಿನ ಇತ್ತೀಚಿನ ಪ್ರವೃತ್ತಿಗಳು ಮತ್ತು ವಿಶ್ಲೇಷಣಾತ್ಮಕ ಸವಾಲುಗಳು. ಗುದದ್ವಾರ. ಜೀವಿ ಗುದ. ರಾಸಾಯನಿಕ. 410(15), 3425-3444. https://doi.org/10.1007/s00216-018-0852-x (2018).
ಮುಲ್ಲರ್, ಜೆಬಿ ಮತ್ತು ಇತರರು. ಜೀವನದ ಸಾಮ್ರಾಜ್ಯದ ಪ್ರೋಟಿಯೊಮಿಕ್ ಭೂದೃಶ್ಯ. ನೇಚರ್ 582 (7813), 592–596. https://doi.org/10.1038/s41586-020-2402-x (2020).
ಡಿ ಲುಕಾ, ಕೆ. ಮತ್ತು ಇತರರು. ಪೂರ್ವಸಿದ್ಧತಾ ದ್ರವ ವರ್ಣರೇಖನದ ಮೂಲಕ ಚಿಕಿತ್ಸಕ ಪೆಪ್ಟೈಡ್‌ಗಳ ನಂತರದ ಚಿಕಿತ್ಸೆ. ಅಣುಗಳು (ಬಾಸೆಲ್, ಸ್ವಿಟ್ಜರ್‌ಲ್ಯಾಂಡ್) 26(15), 4688 (2021).
ಯಾಂಗ್, ವೈ. & ಗೆಂಗ್, ಎಕ್ಸ್. ಮಿಶ್ರ-ಮೋಡ್ ಕ್ರೊಮ್ಯಾಟೋಗ್ರಫಿ ಮತ್ತು ಬಯೋಪಾಲಿಮರ್‌ಗಳಿಗೆ ಅದರ ಅನ್ವಯಿಕೆಗಳು. ಯಾಂಗ್, ವೈ. & ಗೆಂಗ್, ಎಕ್ಸ್. ಮಿಶ್ರ-ಮೋಡ್ ಕ್ರೊಮ್ಯಾಟೋಗ್ರಫಿ ಮತ್ತು ಬಯೋಪಾಲಿಮರ್‌ಗಳಿಗೆ ಅದರ ಅನ್ವಯಿಕೆಗಳು.ಯಾಂಗ್, ಯು. ಮತ್ತು ಗೆಂಗ್, ಎಕ್ಸ್. ಮಿಶ್ರ ಮೋಡ್ ಕ್ರೊಮ್ಯಾಟೋಗ್ರಫಿ ಮತ್ತು ಬಯೋಪಾಲಿಮರ್‌ಗಳಿಗೆ ಅದರ ಅನ್ವಯಿಕೆ. ಯಾಂಗ್, Y. & ಗೆಂಗ್, X. 混合模式色谱及其在生物聚合物中的应用。 ಯಾಂಗ್, ವೈ. & ಗೆಂಗ್, ಎಕ್ಸ್. ಮಿಶ್ರ ಮೋಡ್ ಕ್ರೊಮ್ಯಾಟೋಗ್ರಫಿ ಮತ್ತು ಬಯೋಪಾಲಿಮರ್‌ಗಳಲ್ಲಿ ಅದರ ಅನ್ವಯಿಕೆ.ಯಾಂಗ್, ಯು. ಮತ್ತು ಜೀನ್, ಎಕ್ಸ್. ಮಿಶ್ರ ಮೋಡ್ ಕ್ರೊಮ್ಯಾಟೋಗ್ರಫಿ ಮತ್ತು ಬಯೋಪಾಲಿಮರ್‌ಗಳಿಗೆ ಅದರ ಅನ್ವಯಿಕೆ.ಜೆ. ಕ್ರೊಮ್ಯಾಟೋಗ್ರಫಿ. ಎ 1218(49), 8813–8825 (2011).