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혈소판풍부혈장/prp, 조직재생, 혈소판활성화, 포도당증식치료, 혈소판증식치료
이 기사를 다음과 같이 인용하십시오: Harrison TE, Bowler J, Reeves K, et al.(2022년 5월 17일) 혈소판 수 및 부피에 대한 포도당의 영향: 재생 의학에 대한 시사점.큐어 14(5): e25081.doi:10.7759/cureus.25081
혈소판 풍부 혈장(PRP) 및 고장성 포도당 용액은 일반적으로 재생 의학의 주사에 사용되며 때로는 함께 사용됩니다.혈소판 용해 및 활성화에 대한 고장성 포도당의 효과는 이전에 보고된 바 없습니다.우리는 PRP 및 전혈(WB)의 세포 부피뿐만 아니라 혈소판 및 적혈구 수에 대한 상승된 포도당 농도의 영향을 테스트했습니다.부분 용해와 일치하는 PRP 또는 전혈과 혼합된 모든 포도당 혼합물에서 혈소판 수의 급격한 부분적 감소가 발생했습니다. 처음 1분 ​​후, 혈소판 수는 안정적으로 유지되었으며, 이는 잔류 혈소판이 극단적(>2000 mOsm) 고장성 상태까지 빠르게 적응되었음을 시사합니다. 처음 1분 ​​후, 혈소판 수는 안정적으로 유지되었으며, 이는 잔류 혈소판이 극단적(>2000 mOsm) 고장성 상태까지 빠르게 적응되었음을 시사합니다. После первой минуты количество тромбоцитов оставалось стабильным, что указывает на быструю аккомодацию остаточных тромбоц итов до экстремального (>2000 мОсм) гипертонуса. 처음 1분 ​​후, 혈소판 수는 안정적으로 유지되었으며, 이는 잔류 혈소판이 극단적(>2000 mOsm) 고장성까지 빠르게 수용됨을 나타냅니다.第一分钟后，血小板计数保持稳定，表明残余血小板迅速适应极端（> 2000 mOsm）高渗状态。2000 mOsm) 높은 온도. После первой минуты количество тромбоцитов оставалось стабильным, что указывает на быструю адаптацию остаточных тромбоцит ов к экстремальному (>2000 мОсм) гиперосмолярному состоянию. 처음 1분 ​​후, 혈소판 수는 안정적으로 유지되었으며, 이는 잔류 혈소판이 극도의(>2000mOsm) 고삼투압 상태에 빠르게 적응했음을 나타냅니다.25% 이상의 포도당 농도는 혈소판 활성화의 초기 단계를 나타내는 평균 혈소판 부피(MPV)의 상당한 증가를 가져왔습니다.혈소판 용해 또는 활성화가 발생하는지 여부와 고장성 포도당 주사 단독 또는 PRP와 병용이 추가적인 임상적 이점을 제공할 수 있는지 여부를 결정하기 위해서는 추가 연구가 필요합니다.
1950년대에 미국의 외과의사 George Hackett은 힘줄과 인대에 증식 용액을 주입하여 많은 환자의 관절과 요통을 영구적으로 완화할 수 있음을 발견했습니다.토끼에 대한 그의 실험은 그가 증식 요법이라고 부르는 치료가 힘줄을 확대하고 강화시키는 원인이 된다는 것을 보여주었습니다.조직학적 연구는 이 과정에서 새로운 콜라겐이 생성됨을 확인했습니다[1].
처음 수십 년 동안 다양한 유통 솔루션이 시도되었습니다.1990년대까지 대부분의 의사들은 고농축 포도당이 가장 안전하고 효과적인 방법이라고 생각했습니다.그러나 작용 기전은 불분명하다.
Hackett의 연구 이후 20세기에는 임상 연구가 거의 이루어지지 않았습니다.그러나 2000년대에 요통 [2], 무릎 골관절염 [3] 및 외측 상과염 [4]의 치료를 위한 증식 요법의 여러 성공적인 임상 시험이 완료되었습니다.
조직 재생에는 줄기 세포의 참여가 필요합니다.따라서 고농도의 포도당은 어떻게든 줄기세포의 이동, 복제 및 분화를 유도해야 합니다.우리는 혈소판이 전달자 역할을 할 수 있고 높은 포도당 농도로 인해 혈소판이 사이토카인과 성장 인자를 방출하여 재생 과정, 특히 높은 포도당 농도 영역으로의 줄기 세포 이동을 촉진할 수 있다고 가정합니다.
혈소판 활성화는 항상 세포내 칼슘 증가에 선행합니다[5].Liu et al.2008년에 높은 ​​포도당 수치가 원형질막의 TRPC6(transient receptor potential canonical type 6) 채널의 활성을 증가시켜 칼슘 이온이 혈소판으로 유입되는 것을 보여주었습니다[6].또 다른 연구에서는 미세소관 변연부가 칼슘 이온에 노출되면 변연부의 이완, 팽창, 변형이 발생하여 디스크에서 구형으로 모양이 변하여 평균 혈소판 용적(MPV)이 발생하는 것으로 나타났습니다[7].
이 연구에서 우리의 가설은 혈소판이 고농도의 포도당에 노출되면 미세소관 변연부와 세포내 환경에 영향을 주어 MPV가 증가한다는 것입니다.
모든 참가자는 연구의 세부 사항을 설명하고 샘플을 받기 전에 정보에 입각한 동의서에 서명했습니다.이 연구에서는 헤마토크리트가 2% 이상인 PRP 샘플만 사용하여 적혈구(적혈구) 수와 평균 적혈구 부피(MCV)를 비교에 포함할 수 있었습니다.
이 연구는 4단계로 진행되었으며 첫 번째 단계는 PRP였으며 나머지 단계는 전혈이었습니다(표 1).이전에 설명한 바와 같이[8], 모든 상대 원심력(RCF, g-force)은 원심 주사기에 있는 혈액 컬럼의 중간점(Rmid, cm 단위)에서 계산되었습니다.우리는 혈소판 감작의 마커로 MPV를 사용하고 잠재적인 혈소판 용해의 지표로 혈소판 수를 사용하기로 결정했습니다. 둘 다 표준 혈액학 분석기에서 쉽게 측정할 수 있습니다.
첫 번째 단계에서 47명의 지원자가 혈액 샘플을 기증했습니다. 에틸렌디아민테트라아세트산(EDTA) 튜브 1개와 PRP 전혈 샘플 1개(구연산나트륨(NaCl, 3%)로 항응고 처리됨)(표 1).로커를 즉시 튜브에 넣습니다.EDTA 시료에 대해 CBC(complete blood count)를 3회 실시하고, CBC 분석을 위해 NaCl 시료를 3회 분석한 후, 위에서 설명한 다양한 방법으로 PRP를 제조하였다[8].모든 PRP 샘플은 900-1000g에서 원심 분리하여 준비했습니다.각 PRP 샘플을 볼텍스 믹서에서 5~10초 동안 혼합한 다음 5개의 0.5ml 분취량을 튜브로 나눕니다.
상승된 포도당 농도에 대한 혈소판 노출의 영향을 평가하기 위해 물에 0%, 5%, 12.5%, 25% 및 50% 포도당의 동량(0.5 ml)을 혈소판 샘플과 혼합하여 0%, 2.5%, 6.25%, 12.5% ​​및 25% 농도의 포도당 혼합물을 얻고 시험관 진탕기에서 15분 동안 튜브를 혼합하였다.각 혼합물의 TAC는 15분 후에 3회 분석하였다.혈소판 수(PLT), RBC 수, MCV 및 MPV는 각 튜브에 대해 평균을 내었고 평균 혈소판 수, RBC 수, MCV 및 MPV는 모든 PRP 샘플에 대해 계산되었습니다.
데이터 수집의 첫 번째 단계가 완료된 후 D50W를 추가한 후 PRP 혈소판의 혈소판 양이 크게 증가한 것을 확인했습니다.PRP 혈소판은 반드시 혈액의 모든 혈소판을 나타내는 것은 아니며 PRP 배지는 WB 배지와 다릅니다.따라서 D50W를 전혈에 첨가했을 때의 효과에 대한 2상 시험을 진행하기로 했다.
두 번째 라운드에서는 분석 섹션에 설명된 대로 첫 번째 시리즈의 결과를 기반으로 30개의 샘플 크기를 선택했습니다.이 시리즈에서 20명의 지원자가 혈액 샘플을 기증했습니다(표 1).전혈(1.8ml)을 3ml 주사기에 뽑고 0.2ml 40% NaCl로 항응고 처리했습니다.전혈 주사기를 볼텍스 믹서로 5초 동안 혼합하고 CBC를 3회 분석하였다.분석 후, 항응고 혈액을 5 ml 주사기에 담긴 50% 포도당 2 ml(최종 포도당 농도는 약 25%(D25))에 첨가하고 진탕관에 30분 동안 두었다. 30분 후 WB 주사기 내의 D25/CBC를 3회 분석하였다. 주사기당 혈소판 수, RBC 수, MCV 및 MPV를 평균화하고, 포도당 첨가 전후에 각 샘플에 대해 평균 PLT, RBC 수, MCV 및 MPV를 계산하였다. .
전혈 내 혈소판은 최소 침습적 주사로 인해 증식성 포도당 치료 시 고장성 포도당에 노출되는 경우가 많고 주사 직전에 PRP와 고장성 포도당을 병용하는 경우가 흔하지 않기 때문에 1장에서 WB와 고장성 포도당을 병용하여 연구하기로 하였다. 3단계 및 4단계.각 단계에서 20명의 지원자가 혈액 항응고제를 위해 7-8ml의 ACD-A(구연산 삼나트륨(22.0g/l), 구연산(8.0g/l) 및 포도당(24.5g/l), 용액 덱스트로스 구연산염 포함)을 기증했습니다(표 1).12.5% ​​이상의 포도당 혼합물만 MPV 증가와 관련된 역치 백분율을 결정하는 데 사용되었습니다.세 번째 단계에서는 1ml의 혈액을 시험관에 넣습니다.그런 다음 튜브에 30% 포도당, 40% 포도당 또는 50% 포도당 1ml를 추가하여 10초 동안 볼텍스 믹서에서 혈액을 혼합하여 각각 15%, 20% 및 25%의 최종 포도당 농도를 얻습니다.포도당 혈액 샘플은 혼합 직후 CBC에 대해 분석되었고 30분 동안 2분마다 반복되었습니다.
초기 혼합 중에 고장성 포도당과 WB 또는 PRP를 1:1로 추가하면 혈소판이 몇 초 동안 25% 이상의 농도에 노출됩니다.네 번째 단계에서는 최소 초기 피크 농도로 고장성 포도당의 효과를 평가하고 포도당 효과의 상한을 테스트하기 위해 D25W 또는 D50W에 소량의 혈액만 추가했습니다.D25W 또는 D50W 1ml를 튜브에 넣고 10초 동안 샘플을 vortexing하면서 WB 0.2ml를 추가합니다.이 경우 혈액은 3상에서와 같이 최종 농도보다 약 20% 높은 농도의 포도당에 노출되어 최종 포도당 농도가 20.8%와 41.6%가 되었습니다.혼합 샘플은 3단계에서와 동일한 시간 간격으로 분석되었습니다.
각 포도당 희석 시리즈의 첫 번째 단계에서 파일럿 연구에 적합한 샘플 크기인 30개의 샘플을 채취했습니다[9].각 단계(첫 번째 단계 포함)의 끝에서 한 모집단에서 연속 결과 변수의 평균을 추정하는 데 필요한 표본 크기를 결정하는 데 사용되는 공식을 사용하여 표본 크기의 적절성을 평가합니다.공식 n = Z2 x SD2 /E2.이 방정식에서 Z는 Z 점수, SD는 표준 편차, E는 원하는 오차입니다[10].우리의 알파는 0.05이며 Z 값은 1.96에 해당하고 오차는 5(퍼센트)로 예상됩니다.따라서 n = (1.962 x SD2)/52에 대해 해결합니다.그 결과 각 단계에 필요한 표본 크기가 실제 수집된 표본 수보다 작은 것으로 나타났습니다.
하나 이상의 포도당 농도를 사용하는 기간 1, 3 및 4 동안, 시간 0과 각 후속 시간(15분에서 1단계, 15분에서 3단계) 사이의 분수 변화를 비교하여 상이한 포도당 농도의 효과를 분석했습니다.15초에 4개, 그 다음에는 2분마다) 데이터가 Shapiro-Wilk 정규성 테스트에 의해 결정된 정규 분포를 따르지 않았기 때문에 Mann-Whitney U-테스트를 ​​사용하여 각 기간에 대한 변화율을 비교했습니다.첫 번째, 세 번째, 네 번째 단계(총 5개)에서 여러 그룹(5개)의 1:1 분석이 수행되었으므로 원하는 알파 값을 ≤0.01이 아닌 ≤0.05로 조정하기 위해 Bonferroni 보정을 수행했습니다.
모든 농도의 고장성 포도당에 의한 혈소판 수 감소 및 >12.5% ​​포도당 농도에서 PRP 혈소판의 MPV 증가: PRP 혈소판 수는 기준 전혈에 비해 농도가 1배에서 5배 증가했으며, 방법에 따라 다릅니다(도시되지 않음). 모든 농도의 고장성 포도당에 의한 혈소판 수 감소 및 >12.5% ​​덱스트로스 농도에서 PRP 혈소판의 MPV 증가: PRP 혈소판 수는 기준 전혈에 비해 농도가 1배에서 5배로 증가했으며, 방법에 따라 다릅니다(도시되지 않음). Уменьшение количества тромбоцитов при всех концентрациях гипертонической декстрозы и увеличение MPV в тромбоцитах PRP при ко нцентрации decстрозы > 12,5%: количество тромбоцитов PRP увеличилось в 1-5 раз по сравнению с исходной цельной кровью, в завис imoсти от метода (не показано). 모든 고장성 포도당 농도에서 혈소판 수 감소 및 >12.5% ​​덱스트로스 농도에서 PRP 혈소판의 MPV 증가: PRP 혈소판 수는 방법에 따라 기준선 전혈에 비해 1-5배 증가했습니다(표시되지 않음). ).에서> 12.5% ​​的葡萄糖浓度下，所有浓度的高渗葡萄糖降低血小板计数，PRP 血小板中MPV 增加：与基线全血相比，PRP 血小板计数从浓度的1 倍上升到5 倍，因方法而异（未描述）。 12.5% ​​이상의 포도당 농도에서 고농도의 포도당은 혈구 수를 감소시키고 PRP 혈액 MPV는 증가합니다. При концентрациях глюкозы >12,5% все концентрации гипертонической глюкозы снижали количество тромбоцитов, а MPV повышали в т romбоцитах PRP: количество тромбоцитов PRP увеличивалось от 1- до 5-кратных концентраций по сравнению с исходными концентрациям и цельной крови, в зависимости от метода (не описано). 포도당 농도 >12.5%에서 모든 고혈압 포도당 농도는 혈소판 수를 감소시키고 PRP 혈소판의 MPV를 증가시켰습니다.그림 1은 혈소판 수가 물에 희석한 후 거의 75% 감소했으며 기준선 PRP 및 부피에 대해 조정된 1:1 희석(부피 보정이 있는 1-k1)과 비교하여 다양한 포도당 농도로 15분 희석 후 20-30% 감소했음을 보여줍니다.k -1 번식).1 번식).
각 희석의 세포 수는 희석 전 원래 수의 분수로 표시됩니다.
MPV는 PRP 생산 중에 최소로 감소했으며, 물 또는 포도당(PRP 포도당 혼합물 25% 포함)에서 12.5%로 희석 농도를 추가로 변경하지 않고 50% 포도당 용액으로 희석한 후 20% 이상 증가했습니다(그림 .2).).대조적으로, 적혈구는 H2O 이외의 희석액에서 부피의 큰 변화를 나타내지 않았습니다.
각 희석에서 세포의 평균 부피는 희석 전 원래 부피의 백분율로 표시됩니다.
유사하지만 덜 현저한 혈소판 수 감소 및 CVR 증가가 50% 포도당에 노출된 BC에서 관찰되었습니다(25% 포도당으로 제제화).표 2는 50% 포도당으로 희석된 전혈의 세포 수와 세포 부피를 50% 포도당으로 희석된 1상 PRP 데이터와 비교합니다.RBC 수와 RBC MCV의 변화는 명확하지 않았으며 관심의 초점이 아니었습니다.
SD = 표준 편차, MD = 그룹 간 평균 차이, SE = 평균 차이의 표준 편차, RBC = 적혈구, PLT = 혈소판, PRP = 혈소판 풍부 혈장, WB = 전혈
D50W를 WB에 추가한 후 희석 조정된 혈소판 손실률은 D50W에서 PRP 희석의 17.8%(664±348 vs. 544±277)에 비해 7.7%(310±73 vs. 286±96)였습니다.MPV WB는 16.8%(10.1 ± 0.5에서 11.8 ± 0.6으로) 증가한 반면 MPV PRP는 26%(9.2 ± 0.8 대 11.6 ± 0.7) 증가했습니다. 혈소판 수 감소와 MPV 증가의 평균 차이는 PRP에서 훨씬 더 컸지만 WB 내의 혈소판 수 감소 변화는 거의 유의미했으며(310 ± 73에서 286 ± 96(-7.7%), p = .06) MPV의 증가는 유의미했습니다(10.1 ± 0.5에서 11.8 ± 0.6(+16.8) p < .001). 혈소판 수 감소와 MPV 증가의 평균 차이는 PRP에서 훨씬 더 컸지만 WB 내의 혈소판 수 감소 변화는 거의 유의미했으며(310 ± 73에서 286 ± 96(-7.7%), p = .06) MPV의 증가는 유의미했습니다(10.1 ± 0.5에서 11.8 ± 0.6(+16.8) p < .001).혈소판 수 감소와 CVR 증가의 평균 차이는 PRP에서 훨씬 더 컸지만 WB 내 혈소판 수 감소의 변화는 거의 유의했습니다(310 ± 73에서 286 ± 96(-7.7%); p = 0.06).увеличение MPV было значительным (от 10,1 ± 0,5 до 11,8 ± 0,6 (+16,8) p < 0,001). MPV의 증가는 유의미했습니다(10.1 ± 0.5에서 11.8 ± 0.6(+16.8) p < 0.001).尽管PRP 에서 血小板计数减少和MPV 增加方面的平均差异显着更大，但WB 内血小板计数减少的变化几乎是显着的(310 ± 73 286 ± 96(-7.7%), p = .06) 및 MPV의 10.1 ± 0.5 ± 11.8 ± 0.6(+16.8) p < .001).尽管 PRP 에서 血小板 计数 和 和 增加 方面 的 平均 差异 显着 大 ， 但 但 内血小板 计数 减少 的 几乎 是 显着 的 （ ((310 ± 73 ± 286 ± 96 (-7.7%) ; p = .06) 및 MPV의 성능(10.1 ± 0.5 ± 11.8 ± 0.6 (+16.8) p < .001).WB 내 혈소판 수 감소의 변화는 거의 유의미했지만(310 ± 73에서 286 ± 96(-7.7%), p = 0.06), PRP는 혈소판 수 감소와 MPV 증가의 평균 차이가 훨씬 더 컸습니다.그리고 MPV의 증가는 상당했습니다.(10,1 ± 0,5 ~ 11,8 ± 0,6 (+16,8) р < 0,001). (10.1 ± 0.5에서 11.8 ± 0.6(+16.8) p < 0.001).
MPV의 상당한 변화를 보기 위해서는 20% 포도당의 최종 농도가 필요했지만 MPV의 변화는 25%의 최종 농도에서 더 두드러졌습니다.혈소판 손실은 초기 감소 후 안정화되었습니다.우리는 CVR의 초기 급격한 감소를 주목했지만, CVR은 최종 포도당 농도 20% 및 15%에서 관찰된 CVR 수준보다 상당히 높은 25% 최종 포도당 농도에서 빠르게 회복되었습니다(그림 3 및 표 3의 왼쪽, 음영 상자).Bonferroni 보정이 0.01인 p-값 ≤ 알파를 나타냅니다.또한 0-15초의 초기 단계에서 관찰된 PLT 수의 초기 급격한 감소가 있었고, 그 후 안정적으로 유지되었습니다(15초에서 30분; 표 4의 왼쪽).
전혈에 다양한 농도의 포도당을 추가하면 MPV가 초기에 급격히 감소한 후 농도 의존적 ​​회복이 20% 이상 발생했습니다.범례는 희석 후 포도당 농도를 보여줍니다.D15, D20 및 D25는 1:1 희석으로 수행되었습니다.D21 및 D41은 1:5 희석으로 수행되었습니다.
표 4는 고장성 포도당에 희석했을 때 혈소판 수의 변화를 보여줍니다.우리는 1:1 희석과 1:5 희석에서 PLT 수치의 즉각적인 하락 사이의 용량 의존적 관계를 관찰했습니다.단일 그룹으로 1:1 희석을 1:5 희석과 비교하면, 1:1 그룹은 1:5 그룹 66±48,000(23%) 대 99±69,000(37%)보다 적은 혈소판 수의 즉각적인 감소를 보였습니다., p = 0.014) 1:5 그룹에서.첫 번째 측정 지점에서 초기 하락 후 혈소판은 안정화된 포도당의 백분율로 계산됩니다(그림 4).
전혈과 포도당을 1:1 비율로 첨가하면 혈소판 수가 약 25% 감소합니다.그러나 전혈을 1:5의 비율로 첨가했을 때 감소는 훨씬 더 컸습니다. 약 50%였습니다.
41% 포도당은 MPV를 25% 또는 21%보다 빠르고 극적으로 증가시켰습니다.MPV 결과는 그림 3에 나와 있습니다. 다른 모든 희석에서 50% 포도당을 첨가한 후 MPV의 즉각적인 초기 감소는 관찰되지 않았습니다.25% 포도당(최종 희석에서 포도당 농도 20.8%)을 사용할 때 MPV의 변화는 1:1 희석에서 20% 포도당의 변화와 비슷했습니다(그림 3).처음에는 MPV의 변화가 25%보다 41% 혼합 농도에서 더 컸지만, 16분 후 41%와 25% 사이의 MPV 차이는 더 이상 중요하지 않았습니다(표 3, 오른쪽).25% 포도당이 20.8%보다 더 효과적으로 MPV를 증가시킨 것도 흥미롭습니다.
이 체외 연구는 우리의 가설을 부분적으로 확인했습니다. 그것은 포도당 혼합물에 의한 잠재적인 부분 혈소판 용해, 극도의 고장성에 대한 혈소판의 신속한 수용, >25%의 고장성 포도당 농도에 대한 반응으로 MPV의 현저한 증가를 보여주었습니다. 그것은 포도당 혼합물에 의한 잠재적인 부분 혈소판 용해, 극도의 고장성에 대한 혈소판의 신속한 수용, >25%의 고장성 포도당 농도에 대한 반응으로 MPV의 현저한 증가를 보여주었습니다. On показал потенциальный частичный лизис тромбоцитов примесью декстрозы, быструю аккомодацию тромбоцитов до экстремальног о гипертонуса и значительное повышение MPV в ответ на гипертоническую концентрацию декстрозы > 25%. 이것은 덱스트로스에 의한 잠재적인 부분 혈소판 용해, 극도의 고장성 상태에 대한 신속한 혈소판 조절, 고장성 포도당 수치 >25%에 대한 반응으로 MPV의 상당한 증가를 보여주었습니다.它显示出通过葡萄糖混合物潜在的部分血小板溶解，血小板快速适应极端高渗，以及响应> 25% 浓度高的渗葡萄糖时MPV显着上升.它 显示 出 通过 葡萄糖 潜在 的 部分 血小板 溶解 血小板 快速 适应 极端 高渗 ， 以及 响应> 25% 浓度 高渗 葡萄糖 时 时 mpv 显着。。。。。 On показывает потенциальный частичный лизис тромбоцитов смесями с глюкозой, быструю adaptацию тромбоцитов к экстремальном у гипертонусу и значительное увеличение MPV в ответ на концентрацию гипертонической глюкозы > 25%. 그것은 포도당 혼합물에 의한 잠재적인 부분 혈소판 용해, 극도의 고장성에 대한 빠른 혈소판 적응 및 고장성 포도당>25%에 대한 반응으로 MPV의 상당한 증가를 보여줍니다.초기 증가는 41.6% 포도당 노출에서 최대였지만, MPV의 증가는 노출 후 약 20분 후에 25% 포도당 노출에 접근했습니다.
혈소판 농도는 포도당의 영향을 받습니다.우리는 포도당의 모든 희석에서 PLT의 양이 감소하는 것을 발견했습니다.PRP 시리즈의 H2O(0%) 희석액에서 혈소판 수의 급격한 감소는 삼투 용해와 관련이 있을 수 있습니다.또는 이것은 혈소판 응집으로 인한 아티팩트일 수 있지만 이는 이 희석에서 MPV 변화의 부족과 대조됩니다.이 발견은 일부 혈소판이 저삼투압에 매우 민감하다는 것을 의미합니다.
포도당의 모든 1:1 희석에서 PLT의 양은 심지어 D5W(252mOsm에서 저장성)까지 20-30% 감소했는데, 이는 PLT와 MPV 모두 농도가 3배 증가한 상태에서 변하지 않고 유지되었기 때문에 포도당의 특정 비삼투 효과를 나타낼 수 있습니다.포도당.D5W에서 D25W까지.실제로 PLT 농도는 삼투압이 증가함에 따라 약간 증가하는 경향이 있었습니다.
1:1과 1:5 희석 사이의 PLT 감소는 용해 효과가 초기 및 최종 포도당 농도에 따라 달라진다는 것을 의미합니다.초기 농도에만 의존한다면 1:1 농도 사이에서 PLT 감소의 차이를 볼 것으로 예상할 수 있습니다.하지만 우리는 그렇지 않습니다.용해 효과가 최종 포도당 농도에만 의존하는 경우 20% 1:1 희석과 20.8% 1:5 희석 사이에 큰 차이가 없을 것으로 예상됩니다.그러나 우리는 해냈습니다.
혈소판 용해로 인해 혈소판 손실이 발생하면 부분 용해물이 형성되고 이후 사이토카인과 성장인자가 세포외 환경으로 방출됩니다.여러 연구에서 혈소판 용해물이 증식 용액으로서 거의 PRP만큼 효과적이라는 것이 밝혀졌습니다[11].PRP 자체는 증식 치료를 위한 효과적인 해결책인 것으로 나타났습니다[12-14].
비활성 혈소판은 여러 내부 구조로 강화된 디스크 형태로 순환합니다.활성화되는 동안 더 구형 또는 아메바 모양을 취하여 부피가 증가합니다.부피의 증가는 표면적의 증가를 필요로 하며, 이는 열린 세뇨관 시스템(OCS)의 압출 및 막에 세포외 과립의 추가의 결과입니다.고장성 포도당에 의해 유도된 MPV의 증가가 이러한 메커니즘 중 하나 또는 둘 모두를 포함하는지 여부는 결정되어야 하지만 후자인 경우 MPV의 증가는 탈과립을 나타낼 것입니다.
이 연구는 PRP 또는 전혈 혈소판에서 고농도의 포도당에 노출되면 각각 25% 및 41.6%의 포도당 농도로 15분 이내에 MPV가 증가하는 것으로 나타났습니다.
혈소판 MPV의 증가는 칼슘 유입에 대한 반응으로 주변 미세소관 엉킴의 확장으로 인한 것일 수 있습니다.Liu et al.포도당은 혈소판 TRPC6 채널을 통해 칼슘 유입을 매개하는 것으로 나타났습니다[6].우리의 가설은 포도당이 미세소관 엉킴의 이완을 유도하여 MPV 및 혈소판 감작 및/또는 활성화를 증가시킨다는 것입니다.그러나 우리의 결과로 판단하면 이것은 이야기의 일부일뿐입니다.테스트에서 D25W 미만의 농도는 MPV를 증가시키지 않았습니다.우리가 12.5%에서 25% 사이의 포도당 농도에 대한 노출을 테스트하지 않았다는 점을 감안할 때, 우리의 1상 결과는 MPV의 증가로 이어지는 이 범위의 포도당 농도에 임계값이 있을 수 있음을 시사합니다.3단계와 4단계의 추가 테스트에서는 20-25% 포도당이 이에 대한 임계값인 것으로 나타났지만 그 이유는 명확하지 않습니다.
또한 원심분리 후 MPV가 ~9% 감소하는 것을 관찰했습니다.MPV의 이러한 감소가 원심분리기의 RBC 층에 갇혀 있는 더 크고 밀도가 높은 혈소판 때문인지는 확실하지 않습니다.이 관찰은 PRP 혈소판이 WB 혈소판의 더 작고 밀도가 낮은 하위 집합임을 의미할 수 있으므로 임상의에게 중요할 수 있습니다.
이전 연구에서 우리는 수동 방법에 의한 PRP 준비가 저렴하다는 것을 보여주었습니다[8].포도당이 조직 혈소판 또는 PRP를 민감하게 만들어 활성화에 더 민감하게 만들거나 PRP가 부분 용해 특성으로 생성되는 경우 재생을 향상시키고 치료의 필요성을 줄일 수 있습니다.따라서 PRP와 고농축 포도당의 조합은 PRP나 포도당 단독보다 더 비용 효율적일 수 있습니다.
우리 연구에는 몇 가지 단점이 있습니다.첫째, 여러 가지 방법으로 얻은 PRP를 사용합니다.이로 인해 상충되는 결과가 발생할 수 있습니다.둘째, 혈소판 활성화가 발생했는지 더 정확하게 판단하기 위해 샘플에 대한 생화학 분석을 수행할 수 없었습니다.우리는 알파 과립 탈과립의 정도 또는 존재를 더 잘 이해하기 위해 P-셀렉틴, 혈소판 인자 4, 단핵구 혈소판 응집체 또는 기타 혈소판 활성화 마커를 측정하고 싶지만 이것은 이 연구의 범위를 벗어납니다.셋째, 포도당에 노출된 혈소판의 MPV 증가가 미세소관 엉킴에 의한 영향인지 전자현미경이나 다른 방법으로 확인할 수 없었다.
WB 또는 PRP와 25% 포도당의 혼합물은 MPV를 증가시켜 혈소판 활성화의 시작 신호를 보냈지만 이 연구에서는 응집 또는 탈과립의 진행을 입증하지 못했습니다.고장성 포도당 혼합물은 혈소판 손실을 초래했으며, 아마도 용해 효과를 나타냅니다.혈소판의 부분적인 활성화 또는 용해는 혈소판 주입 후 조직 재생을 유발할 수 있습니다.이러한 변화가 어떤 임상적 결과를 초래할 수 있는지는 명확하지 않습니다.추가 연구는 활성화 또는 용해의 보다 정확한 측정을 입증했으며 WB 또는 PRP와 고장성 포도당 혼합물의 다양한 임상 효과를 평가했습니다.
포도당 증식 요법은 임상 연구를 빠르게 확장하고 지원하는 간단하고 저렴한 재생 요법입니다.이 연구는 확인되면 증식 치료의 재생 메커니즘의 일부를 이해하는 데 도움이 될 수 있는 생리학적 메커니즘을 제안합니다.
미국 캔자스시티 캔자스시티 의과대학 미주리 대학교 생의학 및 건강 정보학
인간 피험자: 이 연구의 모든 참가자는 동의하거나 동의하지 않았습니다.국제 세포 의학 협회는 ICMS-2017-003 승인을 발표했습니다.다음 프로토콜은 International Society for Cellular Medicine의 Institutional Review Board에서 추가로 사용하도록 승인되었습니다.동물 피험자: 모든 저자는 이 연구에 동물이나 조직이 포함되지 않았음을 확인했습니다.이해 상충: ICMJE 통일 공개 양식에 따라 모든 저자는 다음을 선언합니다. 지불/서비스 정보: 모든 저자는 제출된 작업에 대해 어떤 조직으로부터 재정 지원을 받지 않았음을 선언합니다.재정 관계: 모든 저자는 현재 또는 지난 3년 동안 제출된 작업에 관심이 있을 수 있는 조직과 재정 관계가 없음을 선언합니다.기타 관계: 모든 저자는 제출된 작업에 영향을 줄 수 있는 다른 관계나 활동이 없음을 선언합니다.
Harrison TE, Bowler J, Reeves K 외.(2022년 5월 17일) 혈소판 수 및 부피에 대한 포도당의 영향: 재생 의학에 대한 시사점.큐어 14(5): e25081.doi:10.7759/cureus.25081
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