Bidestxistin û belavkirina xurekê taybetmendiyên berhevkirina xwarinê û dîroka jiyanê ya kêzikan yek dike. Ji bo telafîkirina kêmasiyên di xurdemeniyên taybetî de di qonaxên cûda yên jiyanê de, kêzik dikarin van xurdemeniyan bi rêya xwarina zêde bi dest bixin, mînakî, bi xwarina bi veşartinên movikdaran di pêvajoyek ku wekî golik tê zanîn. Xuyaye ku mêşhingiv Anopheles arabiani kêm xurek digire û ji ber vê yekê, ji bo hem metabolîzmê û hem jî ji bo hilberandinê hewceyê xurdemeniyan e. Armanca vê lêkolînê ew bû ku were nirxandin ka gelo ajîtasyona An. arabiensis li ser mîza çêlekan ji bo bidestxistina xurekê taybetmendiyên dîroka jiyanê baştir dike.
Piştrast bike ku ewle ye. arabiensis ji bêhna mîza çêlekan a teze, 24 saet, 72 saet û 168 saet kevin ve hat kişandin, û mêyên ku li mêvandar digeriyan û yên ku bi xwînê dihatin xwarin (48 saet piştî xwarina xwînê) di olfaktometreyek lûleya Y de hatin pîvandin, û mêyên ducanî ji bo ceribandina hêkdanê hatin nirxandin. Dûv re analîzek kîmyewî û elektrofîzyolojîk a hevbeş hate bikar anîn da ku pêkhateyên biyoaktîf di mîza çêlekan de di her çar çînên temenî de werin destnîşankirin. Têkelên sentetîk ên pêkhateyên biyoaktîf di ceribandinên lûleya Y û zeviyê de hatin nirxandin. Ji bo lêkolîna mîza çêlekan û pêkhateya wê ya sereke ya nîtrojen-tê de urea wekî xwarinên potansiyel ên pêvek ji bo vektorên malaryayê, parametreyên xwarinê û taybetmendiyên dîroka jiyanê hatin pîvandin. Rêjeya mêşhingivên mê û mîqdara mîza çêlekan û urea ya ku hatiye kişandin hatin nirxandin. Piştî xwarinê, mê ji bo zindîman, firîna bi girêdan û hilberandinê hatin nirxandin.
Li xwîn û xwarina mêvandar bigerin. Di lêkolînên laboratîf û meydanî de, Ereb ji bêhna xwezayî û sentetîk a mîza çêlekan a teze û pîr ve hatin kişandin. Mêyên ducanî li cihên hêkdanê ji bertekên mîza çêlekan re bêxem bûn. Mêyên ku li mêvandar digerin û xwînmijînin bi awayekî çalak mîza çêlekan û ureayê dimijin û van çavkaniyan li gorî danûstandinên dîroka jiyanê wekî fonksiyonek rewşa fîzyolojîk ji bo firîn, zindîman, an zayînê dabeş dikin.
Berhevkirin û belavkirina mîza çêlekan ji hêla Anopheles arabinis ve ji bo baştirkirina taybetmendiyên dîroka jiyanê. Xwarina zêde ya mîza çêlekan rasterast bi zêdekirina jiyana rojane û dendika vektoran bandorê li kapasîteya vektoran dike, û nerasterast bi guhertina çalakiya firînê û ji ber vê yekê divê di modelên pêşerojê de were hesibandin.
Bidestxistin û belavkirina xurekê taybetmendiyên berhevkirina xwarinê û dîroka jiyanê ya kêzikan yek dike [1,2,3]. Kêzik dikarin xwarinê hilbijêrin û bi dest bixin û li gorî hebûna xwarinê û hewcedariyên xurekê xwarina tezmînatê pêk bînin [1, 3]. Belavkirina xurekê bi pêvajoya dîroka jiyanê ve girêdayî ye û dibe ku bibe sedema hewcedariyên cûda ji bo kalîte û mîqdara parêzê di qonaxên jiyana cûda yên kêzikan de [1, 2]. Ji bo tezmînkirina kêmasiyên di xurekê taybetî de, kêzik dikarin van xurekê bi rêya xwarina zêde, wek mînak li ser heriyê, cûrbecûr pis û veşartinên movikdaran, û lewitan, pêvajoyek ku wekî golik tê zanîn, bi dest bixin [2]. Her çend cûrbecûr cureyên perperok û perperokan bi giranî têne vegotin jî, qulên avê di rêzên din ên kêzikan de jî çêdibin, û kişandina van celeb çavkaniyan û xwarina wan dikare bandorên girîng li ser tenduristî û taybetmendiyên din ên dîroka jiyanê bike [2, 4, 5, 6], 7]. Mêşhingiva malaryayê Anopheles gambiae sensu lato (sl) wekî mezinê 'kêmxwarin' derdikeve holê [8], ji ber vê yekê avdan dibe ku di taybetmendiyên dîroka jiyana wê de rolek girîng bilîze, lê ev tevger heta niha hatiye paşguhkirin. Bikaranîna ajîtasyonê wekî rêbazek ji bo zêdekirina wergirtina xurekê di vê wesayîta girîng de balê dikişîne ji ber ku ev dibe ku encamên girîng ên epîdemîolojîk hebin.
Wergirtina nîtrojenê di mêşhingivên mê yên mezin ên Anopheles de ji ber rezervên kaloriyên kêm ên ku ji qonaxa larvayê têne hilgirtin û karanîna nebaş a xwarina xwînê sînordar e [9]. Ann.gambiae sl ya mê bi gelemperî vê yekê bi zêdekirina xwarinên xwînê yên zêde telafî dike [10, 11], bi vî rengî bêtir mirovan dixe xetereya girtina nexweşiyê û mêşan dixe xetereya nêçîrvaniyê ya mezintir. Wekî din, mêş dikarin xwarina zêde ya pîsbûna vertebratan bikar bînin da ku pêkhateyên nîtrojenî bi dest bixin ku adaptasyon û manevraya firînê zêde dikin, wekî ku ji hêla kêzikên din ve hatî nîşandan [2]. Di vî warî de, kişandina xurt û cihêreng a yek ji cureyên xwişk û bira di nav An. Kompleksa cureyên sl yên Gambian, Anopheles arabinis, mîza ga ya teze û pîr [12,13,14], balkêş e. Anopheles arabinis di tercîhên mêvandarê xwe de firsendperest e û tê zanîn ku bi dewaran re têkildar e û xwe bi wan dixwe. Mîza ga çavkaniyek dewlemend e ku bi pêkhateyên nîtrojenî ye, û urea ji sedî 50-95ê nîtrojena giştî di mîza teze de pêk tîne [15, 16]. Her ku mîza çêlekan pîr dibe, mîkroorganîzma van çavkaniyan bikar tînin da ku di nav 24 demjimêran de tevliheviya pêkhateyên nîtrojenî kêm bikin [15]. Bi zêdebûna bilez a amonyakê re, ku bi kêmbûna nîtrojena organîk ve girêdayî ye, mîkroorganîzmayên alkalofîlîk (ku gelek ji wan pêkhateyên jehrîn ji bo mêşan çêdikin) geş dibin [15], ku dibe ku mê Ann.arabiensis bi tercîhî ji mîza 24 demjimêran an kêmtir temen re tê kişandin [13, 14].
Di vê lêkolînê de, li Ansên mêvandar û yên bi xwînxwar hatin gerîn. Di dema çerxa xwe ya yekem a gonadotropînê de, arabiensis ji bo bidestxistina pêkhateyên nîtrojenî, di nav de urea, bi tevlihevkirina mîzê hate nirxandin. Piştre, rêze ceribandin hatin kirin da ku were nirxandin ka mêşhingivên mê çawa vê çavkaniya xurekê ya potansiyel ji bo baştirkirina jiyanê, zayîn û lêgerîna xwarinê ya bêtir vediqetînin. Di dawiyê de, bêhna mîza ga ya teze û pîr hate nirxandin da ku were destnîşankirin ka ev nîşanên pêbawer ji bo Ansên mêvandar û yên bi xwînxwar peyda dikin. Di lêgerîna xwe ya ji bo vê çavkaniya xurekê ya potansiyel de, arabiensis têkiliyên kîmyewî yên li pişt balkêşiya cûda ya çavdêrîkirî keşf kir. Têkelên bêhna sentetîk ên pêkhateyên organîk ên bêserûber (VOC) ku di mîza 24 demjimêran a pîr de hatine destnîşankirin di bin şert û mercên zeviyê de bêtir hatin nirxandin, encamên ku di bin şert û mercên laboratîfê de hatine bidestxistin berfireh kirin û bandora bêhna mîza ga li ser rewşên cûda yên fîzyolojîk nîşan dan. Balkêşiya mêşan. Encamên ku hatine bidestxistin piştrast dikin ku An. arabiensis pêkhateyên nîtrojenî yên ku di mîza vertebratan de têne dîtin digire û belav dike da ku bandorê li taybetmendiyên dîroka jiyanê bike. Ev encam di çarçoveya encamên potansiyel ên epidemiolojîk de û ka ew çawa dikarin ji bo çavdêrî û kontrola vektorê werin bikar anîn têne nîqaş kirin.
Anopheles arabicans (cureya Dongola) di 25 ± 2 °C, 65 ± 5% RH û çerxek ronahî:tarî ya 12:12 demjimêran de hatin parastin. Larva di tepsiyên plastîk (20 cm × 18 cm × 7 cm) de hatin xwedîkirin ku bi ava distilkirî tijî bûn û xwarina masiyên Tetramin® (Tetra Werke, Melle, DE) dan wan. Pupa di qedehên 30 ml (Nolato Hertila, Åstorp, SE) de hatin berhevkirin û dûv re ji bo derketina holê ya mezinan hatin veguheztin qefesên Bugdorm (30 cm × 30 cm × 30 cm; MegaView Science, Taichung, Taywan). Ji mezinan re heta 4 rojan piştî derketinê (dpe) çareseriyek sukrozê ya 10% ad libitum hat dayîn, di wê gavê de mêyên ku li mêvandar digerin rasterast berî ceribandinê xwarin hat pêşkêş kirin, an jî berî ceribandinê bi şev bi ava distilkirî birçî man, wekî ku li jêr hatiye vegotin. Mêyên ku ji bo ceribandinên lûleya firînê hatin bikar anîn tenê 4-6 demjimêran bi av û... birçî man. libitum. Ji bo amadekirina mêşên xwînmij ji bo biyotestên paşîn, 4 mêyên dpe bi karanîna pergala xwarina parzûnê (Hemotek Discovery Workshops, Accrington, UK) xwîna miyên defibrotîk (Håtunalab, Bro, SE) hatin dayîn. Dûv re mêyên bi tevahî qerebalix hatin veguheztin qefesên takekesî û rasterast xwarin ji wan re hat dayîn, wekî ku li jêr tê vegotin, an jî 10% sukroz ad libitum ji bo 3 rojan berî ceribandinên ku li jêr têne vegotin. Mêyên paşîn ji bo biyotestên lûleya firînê hatin bikar anîn û ji bo laboratûarê hatin veguheztin, û dûv re 4-6 demjimêran berî ceribandinê ava distilkirî ad libitum hat dayîn.
Ceribandinên xwarinê ji bo pîvandina mîz û vexwarina urea di mêyên mezin ên An.Ereb de hatin bikar anîn. Ji mêyên ku li pey mêvandariyê digeriyan û yên ku bi xwînê dihatin xwarin re, parêzek ji %1 mîza çêlekê ya teze û pîr a şilkirî, cûrbecûr urea, û du kontrol (%10 sukroz û av) ji bo 48 demjimêran hat dayîn. Wekî din, rengê xwarinê (1 mg ml-1 ksîlen siyanûr FF; CAS 2650-17-1; Sigma-Aldrich, Stockholm, SE) li parêzê hat zêdekirin û di matrîksek 4 × 4 de di lûleyên mîkrosantrifûjê yên 250 µl de hat dayîn (Axygen Scientific, Union City, CA, US; Wêne 1A) Heta qiraxê tije bikin (~300 µl). Ji bo dûrketina ji pêşbaziya di navbera mêşan de û bandorên potansiyel ên rengê boyaxê, 10 mêşan di kaseyek Petri ya mezin de (bi qûtra 12 cm û bilindahiya 6 cm; Semadeni, Ostermundigen, CH; Wêne 1A) di tariyek tevahî de li 25 ± 2 cm °C û 65 ± 5% rêjeya têkildar bi cîh bikin. şilbûn. Ev ceribandin 5 heta 10 caran hatin dubarekirin. Piştî ku xwarin li wan hat danîn, mêş heta analîzek din di -20°C de hatin danîn.
Li mîza ga û urea ku ji hêla mêvandar û mêya xwînmij Anopheles arabianus ve hatî kişandin bigerin. Di ceribandina xwarinê de (A), mêşhingivên mê xwarinek ji mîza ga ya teze û pîr, cûrbecûr urea, sukroz (%10) û ava distîlekirî (H2O) pêk dihat, hat dayîn. Mêyên ku li mêvandar digerin (B) û yên ku bi xwînê têne xwarin (C) ji her parêzek din a ceribandî bêtir sukroz kişandin. Bala xwe bidinê ku mêyên ku li mêvandar digerin mîza ga ya 72 demjimêran ji mîza ga ya 168 demjimêran kêmtir kişandin (B). Naveroka nîtrojenê ya navînî (± devîasyona standard) ya mîzê di nav rûpelê de tê temsîl kirin. Mêyên ku li mêvandar digerin (D, F) û yên ku li xwînê dimijînin (E, G) urea bi awayekî girêdayî dozê digirin. Qebareyên navînî yên ku hatine kişandin (D, E) bi navên tîpên cûda ji hev pir cûda bûn (ANOVA-ya yekalî bi karanîna analîza post hoc ya Tukey; p < 0.05). Xetên çewtiyê çewtiya standard a navînî (BE) temsîl dikin. Xeta rasterast a xêzkirî xeta regresyona log-xêzik (F, G) temsîl dike.
Ji bo berdana xwarina mijandî, mêş bi awayekî ferdî di nav lûleyên mîkrosantrifûjê yên 1.5 ml de hatin danîn ku 230 µl ava distilkirî tê de hebûn û tevn bi karanîna pestlek yekcar bikarhatî û motorek bêkablo (VWR International, Lund, SE) hate parçekirin, dû re jî bi 10 krpm ji bo 10 hûrdeman hate santrifûjkirin. Sermayê (200 µl) hate veguheztin mîkroplakeyek 96-qulî (Sigma-Aldrich) û vegirtina (λ620) bi karanîna xwendevanek mîkroplakeyê ya li ser bingeha spektrofotometreyê (SPECTROStar® Nano, BMG Labtech, Ortenberg, DE) nm hate destnîşankirin. Wekî din, mêş di 1 ml ava distilkirî de hatin hûrkirin, 900 µl ji wê ji bo analîza spektrofotometrîk hate veguheztin kuvetekê (λ620 nm; UV 1800, Shimadzu, Kista, SE). Ji bo pîvandina wergirtina xwarinê, xêzek standard bi rêya şilkirina rêzefîlmî hate amadekirin da ku 0.2 µl heta 2.4 µl ji 1 mg ml-1 bide. ksîlen siyanûr. Piştre, dendika optîkî ya konsantrasyonên boyaxa naskirî ji bo destnîşankirina mîqdara xwarina ku her mêşhingiv dixwe hate bikar anîn.
Daneyên qebareyê bi karanîna analîza yekalî ya guherînê (ANOVA) hatin analîzkirin û piştre berawirdkirinên cot ên post hoc ên Tukey hatin kirin (JMP Pro, v14.0.0, SAS Institute Inc., Cary, NC, US, 1989–2007). Analîzên regresyona xêzik wergirtina ureayê ya girêdayî konsantrasyonê vegotin û bersivên di navbera mêşhingivên ku li mêvandar digerin û mêşhingivên ku xwînmij dikin de hatin berhev kirin (GraphPad Prism v8.0.0 ji bo Mac, GraphPad Software, San Diego, CA, US).
Nêzîkî 20 µl nimûneyên mîzê ji her koma temenî li ser Chromosorb® W/AW (10 mg 80/100 mesh, Sigma Aldrich) hatin girêdan û di kapsulên tenekeyî (8 mm × 5 mm) de hatin dorpêçkirin. Kapsul hatin danîn nav odeya şewitandinê ya analîzatorek CHNS/O (Flash 2000, Thermo Fisher Scientific, Waltham, MA, US) da ku li gorî protokola çêker naveroka nîtrojenê di mîza teze û pîr de were destnîşankirin. Nîtrojena giştî (g N l-1) li gorî konsantrasyonên urea yên naskirî yên ku wekî standardek têne bikar anîn hate hejmartin.
Ji bo nirxandina bandora parêzê li ser saxmayîna mêyên ku li mêvandar digerin û xwînmij in, mêş bi awayekî ferdî di nav taseyên Petri yên mezin de (12 cm di qûtra û 6 cm di bilindahiyê de; Semadeni) hatin danîn, ku qulikek bi torê di qapaxê de (3 cm di qûtra) bi Ji bo hewakirin û dabînkirina xwarinê.Parêz rasterast piştî 4 dpe hatin peyda kirin û di nav wan de 1% mîza çêlekê ya teze û pîr a şilkirî, çar konsantrasyonên urea, û du kontrol, 10% sukroz û av hebûn.Her parêz bi pîpetekê li ser tamponek diranan (DAB Dental AB, Upplands Väsby, SE) hate danîn ku di şîrîngehek 5 ml de (Thermo Fisher Scientific, Gothenburg, SE) hate pîpet kirin, piston hate derxistin, û li ser taseyek petri hate danîn (wêne 1).1A).Parêza xwe her roj biguherînin.Laboratuwarê wekî ku li jor hatî vegotin biparêzin.Mêşhingivên saxmayî rojê du caran hatin hejmartin, di heman demê de mêşhingivên mirî heya ku mêşhingiva dawîn bimire hatin avêtin (n = 40 ji bo her dermankirinê).Sazmayîna mêşhingivên ku bi parêzên cûrbecûr têne xwarin bi karanîna xêzên saxmayîna Kaplan-Meyer û testên log-rank hate analîz kirin. ji bo berawirdkirina berawirdkirinên belavbûna saxmayînê di navbera parêzan de (IBM SPSS Statistics 24.0.0.0).
Aşxaneyeke firîna mêşan a xwerû li ser bingeha Attisano et al.[17], ji panelên akrîlîk ên zelal ên 5 mm stûr (10 cm firehî x 10 cm dirêjî x 10 cm bilindî) bêyî panelên pêş û paş (Wêne 3: jor). Kombûneke pivot bi lûleyeke vertîkal ji stûneke kromatografiya gazê (0.25 mm id; 7.5 cm L) hatiye çêkirin ku seriyên wê bi derziyeke kêzikan ve hatine zeliqandin ku di navbera cotek magnetên neodymiumê de 9 cm ji hev dûr in, daliqandî ne. Lûleyeke horizontal a ji heman materyalê hatiye çêkirin (6.5 cm L) lûleya vertîkal duqat kir da ku milekî girêdayî û milekî ku perçeyek piçûk a folya aluminiumê wekî sînyalek qutkirina ronahiyê hildigire, çêbike.
Mêşên mê yên ku 24 demjimêran birçî mabûn, berî sînordarkirinê 30 deqîqe xwarina jorîn dan wan. Mêşên mê yên ku bi tevahî xwarine, dû re li ser qeşayê ji bo 2-3 deqîqeyan bi awayekî ferdî hatin anestezkirin û bi mûma hingiv (Joel Svenssons Vaxfabrik AB, Munka Ljungby, SE) bi pinên kêzikan ve hatin girêdan û dû re bi milên lûleyên horizontal ve hatin girêdan. Mîla Firînê. Zivirînên her firînê ji hêla tomarvanek daneyan a taybetî ve hatin tomar kirin, dûv re bi karanîna nermalava PC-Lab 2000™ (v4.01; Velleman, Gavere, BE) hatin hilanîn û nîşandan. Mîla firînê di odeyek bi avhewayê ve hatî rêve kirin (12 saet:12 saet, ronahî: tarî, 25 ± 2 °C, 65 ± 5% RH) hate danîn.
Ji bo dîtina şêweya çalakiya firînê, tevahiya mesafeya firînê (m) û hejmara giştî ya çalakiyên firîna li pey hev di saetekê de di nav 24 demjimêran de hatin hesabkirin. Wekî din, mesafeyên navînî yên ku ji hêla jinên ferdî ve hatine firîn di navbera dermanan de hatin berhev kirin û bi karanîna ANOVA-ya yekalî û analîza post hoc a Tukey (JMP Pro, v14.0.0, SAS Institute Inc.) hatin analîz kirin, ku tê de mesafeya navînî wekî guhêrbarek girêdayî hate hesibandin, lê dermankirin faktorek serbixwe ye. Wekî din, hejmara navînî ya geran bi zêdebûna 10 hûrdemî tê hesibandin.
Ji bo nirxandina bandora parêzê li ser performansa hilberînê ya An.arabiensis, şeş mê (4 dpe) piştî berhevkirina xwînê rasterast bo qefesên Bugdorm (30 cm × 30 cm × 30 cm) hatin veguhastin û dûv re xwarina ceribandinê ji bo 48 demjimêran wekî ku li jor hatî vegotin hat dayîn. Piştre parêz hatin derxistin û di roja sêyemîn de ji bo 48 demjimêran, her 24 demjimêran diguherin, qedehên hêkdanê (30 ml; Nolato Hertila) yên ku bi 20 ml ava distilkirî tije bûn, hatin dayîn. Her rêjîma xwarinê 20-50 caran dubare bikin. Hêk ji bo her qefesek ceribandinê hatin jimartin û tomar kirin. Bin-nimûneyên hêkan ji bo nirxandina mezinahiya navînî û guherîna dirêjahiya hêkên ferdî (n ≥ 200 di her parêzê de) bi karanîna mîkroskopa Dialux-20 (DM1000; Ernst Leitz Wetzlar, Wetzlar, DE) ku bi Kamera Leica (DFC) 320 R2 ve hatî sazkirin hatin bikar anîn; Leica Microsystems Ltd., DE). Hêkên mayî di odeyek bi kontrolkirina hewayê de di bin şert û mercên xwedîkirinê yên standard de ji bo 24 demjimêran hatin hilanîn, û nimûneyek ji larvayên qonaxa 1-emîn ên ku nû derketine holê (n ≥ 200 di her parêzê de) wekî ku li jor hatî vegotin hatin pîvandin. Hejmara hêkan û mezinahiya hêk û larvayan di navbera dermanan de û bi karanîna ANOVA-ya yekalî û analîza post hoc a Tukey (JMP Pro, v14.0.0, SAS Institute Inc.) hatin berhev kirin.
Madeyên firîlî yên serê ji mîza teze (1 saet piştî nimûnegirtinê), 24 saet, 72 saet û 168 saet pîr ji nimûneyên ji dewarên Zebu, nijadên Arsi hatine berhevkirin. Ji bo rehetiyê, nimûneyên mîzê serê sibê dema ku dewar hîn di ambarê de bûn hatine berhevkirin. Nimûneyên mîzê ji 10 kesan hatine berhevkirin û 100-200 ml ji her nimûneyekê di nav polîamîda 3 lîtreyî de bi qapax di bermîlên plastîk ên vînîl klorîd de hatine veguheztin nav kîsikên pijandinê yên polîamîd ên ferdî (Toppits Cofresco, Frischhalteprodukte GmbH û Co., Minden, DE). Madeyên firîlî yên serê ji her nimûneya mîza dewaran rasterast (teze) an jî piştî gihîştinê di germahiya odeyê de ji bo 24 saet, 72 saet û 168 saetan hatine berhevkirin, ango her nimûneya mîzê nûnerê her koma temenî bû.
Ji bo berhevkirina madeyên firîyayî yên ser-valahîyê, pergaleke çerxa girtî hat bikaranîn da ku herikîna gaza bi karbona çalakkirî ya fîltrekirî (100 ml min-1) bi rêya kîsikek polîamîdê ber bi stûna adsorpsiyonê ve ji bo 2.5 demjimêran bi karanîna pompa valahiyek dîyafragmê (KNF Neuberger, Freiburg, DE) were gerandin. Wekî kontrol, berhevkirina ser-valahîyê ji kîsikek polîamîdê ya vala hat kirin. Stûna adsorpsiyonê ji lûleya Teflonê (5.5 cm x 3 mm id) hat çêkirin ku 35 mg Porapak Q (50/80 mesh; Waters Associates, Milford, MA, US) di navbera pêvekên hirî yên cam de tê de hebû. Berî karanînê, stûn bi 1 ml n-heksanê ji nû ve distîlkirî (Merck, Darmstadt, DE) û 1 ml pentan (solventê pileya GC ya 99.0% paqij, Sigma Aldrich) hat şuştin. Madeyên firîyayî yên adsorbkirî bi 400 μl pentan hatin elutekirin. Berhevkirinên ser-valahîyê hatin komkirin û dûv re di -20°C de hatin hilanîn heya ku ji bo analîzên din werin bikar anîn.
Bersivên reftarî yên An-ê ku li mêvandar digere û xwîn dixwe. Ekstraktên firal ên serê ku ji mîza teze, 24-saetî, 72-saetî, û 168-saetî ya pîr hatine berhevkirin, ji bo ekstraktên firal ên ji mêşhingivên Arabidopsis bi karanîna olfaktometreyek lûleya camê ya rasterast hatin analîzkirin [18]. Ceribandin di ZT 13-15 de, dema herî lûtkeya çalakiya lêgerîna malê ya An, hatin kirin. Arab [19]. Olfaktometreyek lûleya camê (80 cm × 9.5 cm id) bi 3 ± 1 lx ronahiya sor ji jor ve hate ronîkirin. Herikîna hewayê ya fîltrekirî û şilkirî ya komirê (25 ± 2 °C, 65 ± 2% şilbûna nisbî) bi biyoceribandinê di 30 cm s-1 de derbas bû. Hewa di rêze ekranên torê yên pola zengarnegir re derbas dibe, herikînek lamînar û avahiyek pûmê ya yekreng diafirîne. Dispenserê tampona diranan (4 cm × 1 cm; L:D; DAB Dental AB), ji pêlek 5 cm li ser dawiya bayê ya olfaktometreyê daliqandî ye, bi guhertina stimulator her 5 xulekan. Ji bo analîzê, 10 μl ji her ekstrakta seriyê, ku 1:10 tê şilkirin, wekî stimulatorek hate bikar anîn. Mîqdarek wekhev a pentan wekî kontrol hate bikar anîn. Mêşên ku li mêvandar digeriyan an xwînmijandin 2-3 demjimêr berî destpêkirina ceribandinê di qefesên berdanê yên takekesî de hatin danîn. Qefesa berdanê li aliyê bayê yê olfaktometreyê hate danîn, û mêş ji bo 1 xulekan hatin hiştin ku xwe biguncînin, û dûv re valva perperok a qefesê ji bo berdanê hate vekirin. Kêşandina dermankirin an kontrolê wekî rêjeya mêşên ku di nav 5 xulekan de piştî berdanê bi çavkaniyê re ketin têkiliyê hate analîz kirin. Her ekstrakta pîs a seriyê û kontrol herî kêm 30 caran hate dubare kirin, û ji bo dûrketina ji bandorên her rojekê, di her roja ceribandinê de heman hejmar dermankirin û kontrol hatin ceribandin. Bersivên lêgerînê ji mêvandar û xwînxwar Ans.Setên seriyê yên Erebî li hember komên seriyê bi karanîna regresyona lojîstîkî ya nominal û dûv re berawirdkirinên cot ji bo rêjeyên ecêb hatin analîz kirin (JMP Pro, v14.0.0, SAS Enstîtuya Inc.).
Bersiva hêkdanê ya An. Ekstraktên serê ji mîza çêlekên teze û pîr di qefesên Bugdorm (30 cm × 30 cm × 30 cm; MegaView Science) de hatin analîzkirin. Qedehên plastîk (30 mL; Nolato Hertila) yên ku bi 20 mL ava distilkirî tije bûn, substrata hêkdanê peyda kirin û di quncikên dijberî yên qefesê de, 24 cm ji hev dûr, hatin danîn. Qedehên dermankirinê bi 10 μl ji her ekstrakta serê bi rêjeya 1:10 hatin sererastkirin. Ji bo sererastkirina qedeha kontrolê mîqdarek wekhev a pentan hate bikar anîn. Qedehên dermankirinê û kontrolê di navbera her ceribandinê de hatin guhertin da ku bandorên pozîsyonê kontrol bikin. Deh mêyên ku bi xwînê hatine xwedîkirin li ZT 9-11 hatin berdan nav qefesên ceribandinê û hêkên di qedehan de 24 demjimêr şûnda hatin jimartin. Formula ji bo hesabkirina endeksa hêkdanê ev e: (hejmara hêkên ku di qedeha dermankirinê de hatine danîn - hejmara hêkên ku di qedeha kontrolê de hatine danîn)/(hejmara giştî ya hêkên ku hatine danîn). Her dermankirin 8 caran hate dubarekirin.
Analîza kromatografiya gazê û tespîtkirina qaliba antenên elektronê (GC-EAD) ya An.arabiensis a mê wekî ku berê hatiye vegotin hate kirin [20]. Bi kurtasî, ekstraktên firal ên sernavê yên teze bi karanîna Agilent Technologies 6890 GC (Santa Clara, CA, US) ku bi stûnek HP-5 (30 m × 0.25 mm id, 0.25 μm stûriya fîlmê, Agilent Technologies) ve hatî sazkirin, hatin veqetandin. û mîza pîrbûyî. Hîdrojen wekî qonaxa mobîl bi rêjeya herikîna xêzikî ya navînî ya 45 cm s-1 hate bikar anîn. Her nimûne (2 μl) ji bo 30 saniyeyan di moda bêparkirinê de bi germahiya ketinê ya 225 °C hate derzîkirin. Germahiya firna GC ji 35 °C (ragirtina 3 hûrdeman) heta 300 °C (ragirtina 10 hûrdeman) di 10 °C min-1 de hate bernamekirin. Di parçekera ava rijandinê ya GC de, 4 psi nîtrojen hate zêdekirin û di xaçerêya Gerstel 3D/2 ya bi qebareya mirî ya kêm (Gerstel, Mülheim, DE) de di navbera detektora îyonîzasyona agir û EAD de 1:1 hate dabeş kirin. Kapîlara ava rijandinê ya GC ji bo EAD bi rêya xeta veguhastinê ya Gerstel ODP-2, ku germahiya firna GC plus 5 °C dişopîne, di nav lûleyek cam (10 cm × 8 mm) de hate derbas kirin, li wir bi hewaya şilkirî ya bi karbonê fîltrekirî (1.5 l min-1) hate tevlihev kirin. Anten hate danîn. 0.5 cm ji derketina lûleyê dûr e. Her mêşhingivek carekê dubare bû, û ji bo mêşhingivên ku li mêvandar digeriyan, herî kêm sê dubare li ser nimûneyên mîzê yên her temenî hatin kirin.
Nasîna pêkhateyên biyoaktîf di berhevokên serê mîza ga ya teze û pîr de bi karanîna GC-MS û spektrometreya girseyî ya hevbeş (GC-MS; 6890 GC û 5975 MS; Agilent Technologies) ji bo derxistina bersivên antenna di analîza GC-EAD de, ku di moda îyonîzasyona bandora elektronê de li 70 eV dixebite. GC bi stûnek kapîlar a silîkaya helandî ya bi pêçayî HP-5MS UI (60 m × 0.25 mm diametera hundurîn, 0.25 μm qalindahiya fîlmê) ve hatî saz kirin ku helyûm wekî qonaxa mobîl bi rêjeya herikîna xêzikî ya navînî 35 cm s-1 bikar tîne. Nimûneyek 2 μl bi karanîna heman mîhengên enjektorê û germahiya firnê wekî ji bo analîza GC-EAD hate derzî kirin. Tevlîhev li gorî dema ragirtinê (indeksa Kovát) û spektrumên girseyî yên wan li gorî pirtûkxaneya xwerû û pirtûkxaneya NIST14 (Agilent) hatin nas kirin. Tevlîhevên naskirî bi derzîkirina standardên rastîn hatin piştrast kirin (Pelê Zêde 1: Tabloya S2). Ji bo pîvandinê, heptyl acetate (10 ng, paqijiya kîmyewî ya 99.8%, Aldrich) wekî standardek derveyî hate derzîkirin.
Nirxandina bandora tevlîheviyek bêhnê ya sentetîk ku ji pêkhateyên biyoaktîf ên ku di mîza teze û pîr de hatine destnîşankirin pêk tê da ku Ans.arabiensis-a ku li mêvandar digere û xwînmijîne bikişîne, bi karanîna heman olfactometer û protokolê wekî jorîn. Tevliheviyên sentetîk pêkhate û rêjeyên pêkhateyan di ekstraktên serê tevlihev ên mîza teze, 24-saetî, 48-saetî, 72-saetî, û 168-saetî ya pîr de teqlîd kirin (Wêne 5D-G; Pelê Zêde 1: Tabloya S2). Ji bo analîzê, 10 μl ji şilkirina 1:100 a tevlîheviya bi tevahî sentetîk bikar bînin, bi rêjeya berdana giştî ya ji nêzîkî 140-2400 ng h-1, ji bo nirxandina balkêşiya ji bo mêşhingivên mêvandar û xwînmijîne. Piştre, ceribandin li ser tevliheviyên tevahî tê kirin, ku tê de tevliheviyên kêmker ên pêkhateyên yekane yên tevlîheviya tevahî têne rakirin. Bersivên lêgerînê ji mêvandar û xwînxwar Ans.Arab vs tevliheviyên sentetîk û kêmker bi karanîna regresyona lojîstîkî ya nominal û dûv re berawirdkirinên cot ji bo rêjeyên ecêb hatin analîz kirin (JMP Pro, v14.0.0, Enstîtuya SAS Inc.).
Ji bo nirxandina ka mîza çêlekan dikare wekî nîşana jîngeha mêvandar ji bo mêşhingivên malaryayê xizmet bike, mîza çêlekan a teze û pîr, ku wekî li jor hatî vegotin, û av, di nav kovîyên 3 lîtreyî yên torêkirî (100 ml) de hatin danîn û di nav dafikên mazûvan de hatin danîn. (Guhertoya BG-HDT; BioGents, Regensburg, DE). Deh dafik 50 m ji hev dûr li çêregehê, 400 m ji civaka gund (Silay, Etiyopya, 5°53´24´´N, 37°29´24´´E) û bêyî dewar, li ser erdên çêrandinê yên daîmî û gundan hatin danîn. Pênc dafik ji bo simulasyona hebûna mêvandar hatin germ kirin, di heman demê de pênc dafik bê germ hatin hiştin. Her cîhê dermankirinê her şev bi tevahî pênc şevan tê zivirandin. Hejmarên mêşhingivên ku di dafikên ku bi mîza temenên cûda hatine girtin de bi karanîna regresyona lojîstîkî bi belavkirina beta binomial (JMP Pro, v14.0.0, SAS Institute Inc.) hatin berhev kirin.
Li gundekî nêzîkî bajarê Maki, herêma Oromia, Etiyopya (8° 11′ 08″ N, 38° 81′ 70″ E; Wêne 6A). Lêkolîn di navbera nîvê Tebaxê û nîvê Îlonê de, berî rijandina salane ya bermayiyên hundirîn, digel demsala barana dirêj, hate kirin. Pênc cot xanî (20-50 m ji hev dûr) ku li derveyî gund bûn, ji bo lêkolînê hatin hilbijartin (Wêne 6A). Pîvanên ku ji bo hilbijartina xaniyan hatin bikar anîn ev bûn: destûr nehat dayîn ku heywan di xanî de bin, destûr nehat dayîn ku xwarin li hundur were çêkirin (bi kişandina darê agir an komirê) (bi kêmanî di dema ceribandinê de), û xanîyên ku herî zêde du niştecih hene, di nav dermanên ne-kêzikan de razên. di bin tora mêşan a dermankirî de. Destûra etîkî ji hêla Lijneya Nirxandina Etîka Lêkolîna Sazûmanî (IRB/022/2016) ya Fakulteya Zanistên Xwezayî (CNS-IRB), Zanîngeha Addis Ababa ve li gorî rêbernameyên ku ji hêla Danezana Komeleya Bijîşkî ya Cîhanê ya Helsînkî ve hatine danîn, hatiye dayîn. Razîbûna her serokê malbatê bi alîkariya karmendên dirêjkirina tenduristiyê hat wergirtin. Tevahiya pêvajoyê ji hêla rêveberiyên herêmî ve li ser asta navçe û taxê ('kebele') tê pejirandin. Sêwirana ceribandinê sêwirana çargoşeya Latînî ya 2 × 2 şopand, ku tê de tevliheviyên sentetîk û kontrol di şeva yekem de ji bo malên cotkirî hatin destnîşankirin û di şeva ceribandinê ya din de di navbera malan de hatin guhertin. Ev pêvajo deh caran hat dubarekirin. Wekî din, ji bo texmînkirina çalakiya mêşan di malên bijartî de, dafikên CDC hatin danîn ku pênc şevên li pey hev di destpêk, navîn û dawiya ceribandina zeviyê de di heman demê rojê de bixebitin.
Têkeleke sentetîk ku şeş pêkhateyên biyoaktîf dihewîne di heptanê de (97.0% solvent GC pola, Sigma Aldrich) hate çareserkirin û bi karanîna belavkerek fitîla pembûyê bi rêjeya 140 ng h-1 hate berdan [20]. Belavkera fitîlê hişt ku hemî pêkhate di tevahiya ceribandina 12 demjimêran de bi rêjeyên sabît werin berdan. Heptan wekî kontrol hate bikar anîn. Şûşe li kêleka xala têketina dafika sivik a Navendên Kontrol û Pêşîlêgirtina Nexweşiyan (CDC) hate daliqandin (John W. Hock Company, Gainesville, FL, US; Wêne 6A). Dafik 0.8 - 1 m li jor erdê, nêzîkî lingê nivînan hatin daliqandin, û dilxwazek di bin toreke mêşan a bê dermankirin de razabû û di navbera 18:00 û 06:30 de hate xebitandin. Mêşên ku li gorî zayend û rewşa fîzyolojîkî hatine girtin (bê xwarin, xwarin, nîv-ducanî û ducanî [21] paşê bi karanîna analîza reaksiyona zincîra polîmerazê (PCR) hatin kontrolkirin da ku cureyên ku bi morfolojîkî wekî A. gambiae sl hatine nas kirin werin nas kirin. Endamên kompleksê [23]. Di Di lêkolîna meydanî de, dafikên xanîyên cotkirî bi karanîna modelek lojîstîkî ya nominal hate analîzkirin, ku tê de kişandin guhêrbarê girêdayî bû û dermankirin (tevliheviya sentetîk li hember kontrolê) bandora sabît bû (JMP® 14.0. 0. SAS Institute Inc.). Li vir, em nirxên χ2 û p-yê ji testa rêjeya îhtîmalê radigihînin.
Binirxînin ka ew ewle ye. arabiensis karîbû mîzê, çavkaniya xwe ya sereke ya nîtrojenê, urea, bi xwarina rasterast, di nav 48 demjimêran de piştî dayîna (dpe) ji bo ceribandinên xwarina mêyên ku li mêvandar digerin û xwînxwar in, bi dest bixe (Wêne 1A). Hem mêyên ku li mêvandar digerin û hem jî mêyên ku xwînmijînin ji her parêzek din an avê pirtir sukroz kişandin (F(5,426) = 20.15, p < 0.0001 û F(5,299) = 56.00, p < 0.0001, bi rêzê ve; Wêne 1B,C). Wekî din, mêyên ku li mêvandar digerin di 72 demjimêran de li gorî mîzê di 168 demjimêran de kêmtir mîz xwarin (Wêne 1B). Dema ku parêzek ku urea tê de heye ji wan re hat pêşkêş kirin, mêyên ku li mêvandar digerin mîqdarek pir mezintir a urea bi 2.69 mM li gorî hemî konsantrasyonên din û avê kişandin, lê ji 10% sukrozê cuda nayê dîtin (F(10,813) = 15.72, p < 0.0001; Wêne 1D). Ev berevajî bersiva jinên ku bi xwînxwarinê dihatin xwarin bû, yên ku bi gelemperî xwarinên ku urea tê de hene ji avê pir zêdetir dimijin, her çend ji %10 kêmtir sukroz be jî (F(10,557) = 78.35, p < 0.0001; Wêne 1).1E). Wekî din, dema ku di navbera her du rewşên fîzyolojîk de tê berhev kirin, jinên flebotomîzekirî di kêmtirîn rêjeyên de ji jinên ku li mêvandar digerin bêtir urea dimijin, û van jinan di rêjeyên bilindtir de mîqdarên wekhev ên urea dimijin (F(1,953) = 78.82, p < 0.0001; Wêne 1F, G). Her çend wergirtina ji parêzek ku urea tê de heye xuya bû ku nirxên çêtirîn hene (Wêne 1D, E), jinên di her du rewşên fîzyolojîk de jî karîn mîqdara urea ya ku li seranserê rêza rêjeyên urea tê de hatiye mijandin bi awayekî log-linear biguherînin (Wêne 1F, G). ).Bi heman awayî, xuya ye ku mêş bi rêkxistina mîqdara mîza ku tê kişandin, vegirtina nîtrojenê kontrol dikin, ji ber ku mîqdara nîtrojenê di mîzê de di mîqdara ku tê kişandin de diyar dibe (Wêne 1B, C û B inset).
Ji bo nirxandina bandorên mîz û ureayê li ser saxmayîna mêşhingivên ku li mêvandar digerin û xwînmij in, mêyan mîza her çar temenî (teze, 24 saet, 72 saet, û 168 saet piştî danînê) û rêzek ji rêjeyên ureayê, û her weha ava distîlekirî û 10% sukroz wekî kontrol xizmet kir (Wêne 2A) wergirtin. Ev analîza saxmayînê nîşan da ku parêz bandorek girîng li ser saxmayîna giştî li mêşhingivên ku li mêvandar digerin (mîz: χ2 = 108.5, df = 5, p < 0.0001; urea: χ2 = 122.8, df = 5, p < 0.0001; Wêne 2B, C) û mêşhingivên ku bi xwîn têne xwarin (mîz: χ2 = 93.0, df = 5, p < 0.0001; urea: χ2 = 137.9, df = 5, p < 0.0001; Wêne 2D, E) kiriye. Di hemî ceribandinan de, mêyan xwarinek... Parêza mîz, urea û avê li gorî jinên ku bi parêza sukrozê hatine xwedîkirin, rêjeyên jiyanê yên pir kêmtir bûn (Wêne 2B-E). Jinên ku li pey mêvandar digeriyan û mîza teze û kevn dixwarin, rêjeyên jiyanê yên cuda nîşan dan, û yên ku mîza kevn a 72 demjimêran (p = 0.016) wan xwaribûn, îhtîmala jiyanê ya herî kêm hebû (Wêne 2B). Wekî din, jinên ku li pey mêvandar digeriyan û 135 mM urea ji komên kontrolê yên avê dirêjtir man (p < 0.04) (Wêne 2C). Li gorî avê, jinên ku bi mîza teze û mîza 24 demjimêran hatine xwedîkirin, dirêjtir man (p = 0.001 û p = 0.012, bi rêzê ve; Wêne 2D), di heman demê de jinên ku bi mîza 72 demjimêran hatine xwedîkirin ji yên ku bi mîza kurt a teze û mîza 24 demjimêran a pîr dixwarin, dirêjtir man (p < 0.0001 û p = 0.013, bi rêzê ve; Wêne 2D). Dema ku 135 mM urea ji wan re hat dayîn, jinên ku bi xwînê digeriyan ji hemî konsantrasyonên din ên urea û avê dirêjtir man (p < 0.013; Wêne 2E).
Saxlemîya mêyên Anopheles arabinis ên mêvandar û mêyên xwînmij ên ku bi mîza çêlekan û ureayê dixwin. Di biyoceribandinê de (A), mêyên mê xwarinek ji mîza çêlekan a teze û pîr, cûrbecûr ureayê, sukroz (10%) û ava distîlekirî (H2O) pêk dihat, hat dayîn. Saxlemîya mêyên mêyên ku bi mîza çêlekan (B, C) û mêyên xwînmij (D, E) dixwin her 12 saetan carekê dihat tomarkirin heta ku hemî mêyên ku bi mîzê (B, D) û ureayê (C, E) dixwin, û kontrol, Sukroz û av, mirin.
Mesafeya giştî û hejmara gerên ku di ceribandina firîna mîlê de di heyamek 24 demjimêran de hatine destnîşankirin, di navbera mêşhingivên ku li mêvandar digerin û mêşhingivên ku xwînmij dikin de cûda bû, ku bi tevahî çalakiya firînê kêmtir nîşan dan (Wêne 3). Mêşhingivên ku li mêvandar digerin ên ku mîza teze û pîr an jî sukroz û av didan, şêwazên firînê yên cihêreng nîşan dan (Wêne 3), mêyên ku bi mîza teze dixwin di sibehê de çalaktir bûn, lê yên ku bi mîzê 24 û 168 demjimêran dixwarin. Mêşhingivên ku bi mîzê dixwarin şêwazên firîna cûda nîşan dan û bi giranî rojane bûn. Mêşhingivên mê yên ku sukroz an mîza 72 demjimêran didan di tevahiya heyama 24 demjimêran de çalakî nîşan dan, lê mêyên ku av didan di nîvê heyamê de çalaktir bûn. Mêşhingivên ku bi sukroz didan di derengiya şevê û serê sibê de asta herî bilind a çalakiyê nîşan dan, lê yên ku mîza 72 demjimêran dixwarin di 24 demjimêran de kêmbûnek domdar a çalakiyê nîşan dan (Wêne 3).
Performansa firîna mêyên Anopheles arabinis ên xwînmij ên nêçîrvan ku bi mîza çêlekan û ureayê dixwin. Di ceribandina firîna mîhê de, mêyên mê yên ku bi mîza çêlekan a teze û pîr dixwin, bi konsantrasyonên cûrbecûr ên urea, sukroz (%10) û ava distîlekirî (H2O) bi milên horizontal û bi awayekî azad dizivirin ve hatin girêdan (jor). Ji bo mêyên mê yên ku li mêvandar digerin (çep) û xwînmij (rast), dûrahiya giştî û hejmara firînên di saetekê de ji bo her parêzê di heyamek 24 demjimêran de hatin tomar kirin (tarî: gewr; ronî: spî). Dûrahiya navînî û hejmara navînî ya êrîşan li rastê grafîka çalakiya sîrkadî têne nîşandan. Xetên çewtiyê xeletiya standard a navînî temsîl dikin. Analîza îstatîstîkî li nivîsê binêre.
Bi gelemperî, çalakiya firîna giştî ya mêyên ku li mêvandar digerin, di heyamek 24 demjimêran de şêwazek dişibihe mesafeya firînê şopand. Mesafeya firîna navînî ji hêla xwarina ku hatiye xwarin ve bi girîngî bandor bû (F(5, 138) = 28.27, p < 0.0001), û mêyên ku li mêvandar digerin 72 demjimêr mîz xwarin, li gorî hemî xwarinên din mesafeyên pir dirêjtir firîn (p < 0.0001), û mêşên ku bi sukrozê hatine xwedîkirin ji mêşên ku bi mîza teze (p = 0.022) û mîza 24 demjimêran a pîr (p = 0.022) hatine xwedîkirin dirêjtir firîn. Berevajî şêwaza çalakiya firînê ya ku ji hêla parêza mîzê ve hatî vegotin, mêyên ku li mêvandar digerin û bi ureayê hatine xwedîkirin, di heyamek 24 demjimêran de çalakiya firîna domdar nîşan dan, ku di nîvê duyemîn ê qonaxa tarî de gihîşt lûtkeyê (Wêne 3). Her çend şêwazên çalakiyê dişibin hev jî, mêyên ku li mêvandar digerin û bi ureayê hatine xwedîkirin, mesafeya firîna navînî li gorî konsantrasyona vegirtî bi girîngî zêde kirin (F(5, 138) = 1310.91, p < 0.0001). Mêyên ku li pey mêvandar digeriyan, bi her rêjeyek ureayê ji wan re dihat dayîn, ji mêyên ku bi av an jî bi sukrozê dihatin dayîn, dirêjtir firîn (p < 0.03).
Çalakiya firîna giştî ya mêşhingivên xwînmij li seranserê hemû xwarinan sabît bû û di nav 24 saetan de dom kir, û çalakiya mîzê di nîvê duyemîn ê serdema tarî de ji bo mêyên ku bi avê têne xwarin û her weha di mêyên teze û 24 demjimêran de zêde bû (wêne 3). Her çend xwarina mîzê bandorek girîng li ser mesafeya firîna navînî di mêyên ku bi xwîn têne xwarin de kir (F(5, 138) = 4.83, p = 0.0004), xwarina ureayê bi mîzên din û xwarinên kontrolê re bandor nekir (F(5, 138) = 1.36, p = 0.24).
Bandorên xwarina mîz û ureayê li ser parametreyên hilberînê di ceribandinên biyolojîk ên hêkdanînê de hatin nirxandin (Wêne 4A) û li gorî hejmara hêkên ku ji hêla her mêyê ve hatine danîn, mezinahiya hêkê, û larvayên qonaxa yekem a nû ji hêkan hatine derxistin hatin lêkolîn kirin. Hejmara hêkên ku hatine danîn. Mêyên Ereb ên ku bi mîzê hatine xwedîkirin li gorî parêzê diguherin (F(5,222) = 4.38, p = 0.0008; Wêne 4B). Mêyên ku mîz û xwîna 24 demjimêran xwarin, ji mêyên ku bi parêzên din ên mîzê hatine xwedîkirin pir zêdetir hêk danîn û dişibin yên ku bi sukrozê hatine xwedîkirin (Wêne 4B). Bi heman awayî, mezinahiya hêkên ku ji hêla mêyên ku bi mîzê hatine xwedîkirin ve hatine danîn li gorî parêzê diguhere (F(5, 209) = 12.85, p < 0.0001), bi mîza 24 demjimêran û sukrozê yên ku bi avê hatine xwedîkirin hêkên pir mezintir danîn, di heman demê de hêkên mêyên ku bi 168 demjimêran mîzê hatine xwedîkirin pir piçûktir bûn (Wêne 4C). Wekî din, parêza mîzê bandorek girîng li ser mezinahiya larvayê kiriye (F(5, 187) = 7.86, p < 0.0001), ku larvayên pir mezintir ji hêkên mêyên 24 û 72 demjimêran ên ku bi mîzê têne xwedîkirin derdikevin, ji hêkên ku ji larvayên hêkan têne danîn. Mêyên bi avê têne xwedîkirin û mêyên 168 demjimêran ên ku bi mîzê têne xwedîkirin (Wêne 4D).
Performansa hilberînê ya Anopheles arabinisên mê yên ku bi mîza çêlekan û ureayê dixwin. Mêşên mê yên ku bi xwînê têne xwedîkirin, berî ku di ceribandinên biyolojîk de werin danîn û substratên hêkan werin danîn (A), 48 demjimêran bi mîza çêlekan a teze û pîr, ureaya teze û pîr, rêjeyên cûrbecûr yên ureayê, sukroz (%10) û ava distilkirî (H2O) hatin xwedîkirin. Hejmara hêkan (B, E), mezinahiya hêkan (C, F) û mezinahiya larvayan (D, G) ji hêla xwarina ku hatiye dayîn ve bi girîngî bandor bûne (mîza çêlekan: BD; urea: EG). Navînîyên ji bo her parametreyê ku bi karanîna navên tîpên cûda hatine pîvandin ji hev pir cuda bûn (ANOVA-ya yekalî bi karanîna analîza post hoc ya Tukey; p < 0.05). Xetên çewtiyê çewtiya standard a navînîyê temsîl dikin.
Wek pêkhateya sereke ya nîtrojenî ya mîzê, urea, dema ku wekî parêzek ji bo jinên ku bi xwîn têne xwedîkirin tê dayîn, di hemî lêkolînan de bandorek girîng li ser parametreyên hilberînê dike. Hejmara hêkên ku ji hêla jinên ku bi urea hatine xwedîkirin, piştî xwarina xwînê, hatine danîn, li gorî rêjeya ureayê (F(11, 360) = 4.69; p < 0.0001), jinên ku bi rêjeya ureayê di navbera 134 µM û 1.34 mM de hatine xwedîkirin, hêkên bêtir danîn (Wêne 4E). Jinên ku bi rêjeya ureayê ya 134 µM an jî jortir hatine xwedîkirin, hêkên mezintir danîn ji jinên ku bi avê hatine xwedîkirin (F(10, 4245) = 36.7; p < 0.0001; Wêne 4F), û mezinahiya larvayê, her çend ji hêla rêjeya ureayê ya wekhev di dayikan de bandor dibe (F(10, 3305) = 37.9; p < 0.0001) bêtir guherbar bû (Wêne 4G).
Kêşkêşiya giştî ji bo ekstraktên firar ên serê mîza ga yên ku li mêvandar digerin. Arabiensis-a ku di olfaktometreya lûleya cam de hatî nirxandin (Wêne 5A) ji hêla temenê mîzê ve bi girîngî bandor bû (χ2 = 15.9, df = 4, p = 0.0032; Wêne 5B). Analîza post hoc nîşan da ku bêhna mîza kevn di 24 demjimêran de li gorî hemî dermankirinên din astên balkêşiyê yên pir bilindtir çêkiriye (72 demjimêr: p = 0.0060, 168 demjimêr: p = 0.012, pentane: p = 0.00070), Ji bilî bêhna mîza teze (p = 0.13; Wêne 5B). Her çend kişandina giştî ya mêşên xwînmij ji bo bêhna mîzê ne cûda bû (χ2 = 8.78, df = 4, p = 0.067; Wêne 5C), hat dîtin ku ev mê li gorî mîza 72 demjimêran a pîrbûyî ji bo ekstraktên firar ên serê mîzê bi girîngî balkêştir bûn li gorî komên kontrolê (p = 0.0066; Wêne 5C).
Bersivên reftarî li hember bêhnên mîza çêlekan ên xwezayî û sentetîk di lêgerîna Anopheles arabianus a mêvandar û xwînxwar de. Nexşeya olfaktometreya lûleya cam (A). Kêşandina ekstraktên firar ên sernavê ji mîza çêlekan a teze û pîr ber bi mêşhingivên mêvandar (B) û xwînmij (C). Reaksiyona tentakulê ya Lord An bibînin. Ekstraktên sernavê yên ji mîza çêlekan a teze (D), 24-saetî (E), 72-saetî (F), û 168-saetî (G) pîr veqetandî têne nîşandan. Şopên tespîtkirina antenên elektronê (EAD) guhertinên voltaja di bersiva pêkhateyên biyoaktîf ên di sernavê de nîşan didin ku ji kromatografiya gazê hatine derxistin û ji hêla detektorek îyonîzasyona agir (FID) ve hatine tespît kirin. Barika pîvanê amplîtuda bersivê (mV) li hember dema ragirtinê (s) temsîl dike. Taybetmendî û rêjeyên berdanê (µg h-1) yên pêkhateyên biyolojîkî yên çalak têne nîşandan. Stêrkek yekane (*) bersivek domdar a amplîtuda kêm nîşan dide. Stêrkên ducar (**) bersivên ne-hilberîner nîşan didin. Mêvandar (H) bibînin û An.arabiensis-a xwînmij (I) ji bo tevliheviyên sentetîk ên bêhnên mîza dewarên teze û pîr balkêşiyên cûda hene. Rêjeya navînî ya mêşhingivên ku ji navên tîpên cûda têne kişandin ji hev pir cûda bûn (ANOVA-ya yekalî bi karanîna analîza post hoc ya Tukey; p < 0.05). Xêzên çewtiyê çewtiya standard a pîvanê temsîl dikin.
Ann.arabiensis a mê, 72 saet û 120 saet piştî xwarina xwînê, di dema hêkdanê de, li gorî kontrolên pentanê, ji bo ekstraktên firar ên serê ji mîza çêlekê ya teze û pîr tercîhek nehatiye nîşandan (χ2 = 3.07, p > 0.05; Dosyaya zêde 1: Wêne S1).
Ji bo Ann.arabiensis a mê, analîzên GC-EAD û GC-MS heşt, şeş, sê û sê pêkhateyên biyoaktîf destnîşan kirin (Wêne 5D-G). Her çend cûdahî di hejmara pêkhateyên ku bersivên elektrofîzyolojîk derxistine de hatine dîtin jî, piraniya van pêkhateyan di her ekstrakta volatîl a serê cîhê de ku ji mîza teze û pîr hatî berhevkirin hebûn. Ji ber vê yekê, ji bo her ekstraktê, tenê pêkhateyên ku bersivek fîzyolojîk ji antenên mê yên li jor eşikê çêkirine di analîzên din de hatine zêdekirin.
Rêjeya berdana tevahî ya pêkhateyên biyoaktîf ên madeyên fişarbar di berhevoka serê de ji 29 µg h-1 di mîza teze de bo 242 µg h-1 di mîza 168 demjimêran a pîrbûyî de zêde bû, bi giranî ji ber zêdebûna p-kresol û m-formaldehyde. Fenol û her weha fenol. Berevajî vê, rêjeyên berdana pêkhateyên din, wek 2-sîkloheksen-1-on û dekanal, bi zêdebûna temenê mîzê re kêm bûn, ku ev yek bi kêmbûna çavdêrîkirî ya di şîdeta sînyalê (pirbûn) de di kromatogramê de (Wêne 5D)-panela çepê ya G) û bersivên fîzyolojîkî yên ji van pêkhateyan re (Wêne 5D-panela rastê ya G) re têkildar bû.
Bi tevayî, têkeliya sentetîk rêjeyek xwezayî ya wekhev a pêkhateyên biyoaktîf ên ku di ekstraktên firar ên serê mîza teze û pîr de hatine nasîn hebû (Wêne 5D-G) û di lêgerîna mêvandarek (χ2 = 8.15, df = 4, p = 0.083; Wêne 5H) an mêşhingivên xwînmij (χ2 = 4.91, df = 4, p = 0.30; Wêne 5I) de balkêşiyek girîng nîşan neda. Lêbelê, berawirdkirinên cot ên piştî hoc di navbera dermanan de nîşan dan ku mêşhingivên ku li mêvandar digerin ji bo têkeliya sentetîk a mîza 24 demjimêran a pîr bi girîngî balkêş bûn li gorî kontrolên pentane (p = 0.0086; Wêne 5H).
Ji bo nirxandina rola pêkhateyên takekesî di tevliheviyên sentetîk ên mîza 24 demjimêran de, şeş tevliheviyên derxistinê li hember tevliheviyên temam di ceribandina lûleya Y de hatin nirxandin, ku tê de pêkhateyên takekesî hatin rakirin. Ji bo mêşhingivên ku li mêvandar digerin, derxistina pêkhateyên takekesî ji tevliheviya temam bandorek girîng li ser bertekên reftarî kir (χ2 = 19.63, df = 6, p = 0.0032; Dosyaya Zêde 1: Wêne S2A), hemî tevliheviyên derxistinê ji tevliheviya bi tevahî piçûktir balkêştir bûn. Berevajî vê, rakirina pêkhateyên takekesî ji tevliheviya bi tevahî sentetîk bandor li bertekên reftarî yên mêşhingivên xwînmij nekir (χ2 = 11.38, df = 6, p = 0.077), ji bilî dekanal, ku di encamê de astên kêmtir li gorî tevliheviya temam Attraction çêbûn (p = 0.022; Dosyaya Zêde 1: Wêne S2B).
Li gundekî li Etiyopyayê ku endemîk malarya lê heye, bandora tevliheviyek sentetîk a mîza çêlekan a 24 demjimêran di kişandina mêşan de di şert û mercên zeviyê de ji bo deh şevan hate nirxandin (Wêne 6A). Bi tevahî 4,861 mêş hatin girtin û nas kirin, ku ji wan %45.7 Anthropus.gambiae sl, %18.9 Anopheles pharoensis û %35.4 Culex spp bûn. (Dosyaya zêde 1: Tabloya S1). Anopheles arabinis tenê endamê kompleksa cureyên An.Gambian e ku bi analîza PCR ve hatî nas kirin. Bi navînî, di şevekê de 320 mêş hatin girtin, di vê demê de dafikên bi tevliheviya sentetîk ji dafikên cotkirî yên bê tevlihev bêtir mêş girtin (χ2(0, 3196) = 170.0, p < 0.0001). Dafikên bê-tahm di her pênc şevên kontrolê de di destpêk, navîn û dawiya ceribandinê de hatin danîn. Di her cotek de hejmareke wekhev a mêşan hatin girtin. dafik, nîşan didin ku di navbera malan de cudahî tune ye (χ2(0, 1665) = 9 × 10-13, p > 0.05) û di dema lêkolînê de nifûs kêm nebûye. Li gorî dafikên kontrolê, hejmara mêşhingivên ku di dafikên ku têkeliya sentetîk tê de hene de hatine girtin bi girîngî zêde bûye: mêvandar digere (χ2(0, 2107) = 138.7, p < 0.0001), xwarina xwînê ya dawî (χ2(0, 650) = 32.2, p < 0.0001) û ducanî (χ2(0, 228) = 6.27, p = 0.0123; Dosyaya zêde 1: Tabloya S1). Ev di hejmara giştî ya mêşhingivên ku hatine girtin de jî diyar dibe: mêvandar digere > xwînmij > ducanî > nîv-ducanî > nêr.
Nirxandina zeviyê ya bandora tevliheviyek bêhna mîza çêlekê ya sentetîk a 24 demjimêran. Ceribandinên zeviyê li başûr-navendî ya Etiyopyayê (nexşe), nêzîkî bajarokê Maki (têxe nav), bi karanîna dafikek sivik a Navendên Kontrolkirina Nexweşiyan (CDC) (rast) di xaniyên cotkirî de, bi sêwirana çargoşeyî ya Latînî (wêneya hewayî) (A) hatin kirin. Fotodafikên CDC yên sentetîk ên bi bêhnê hatine kişandin, Anopheles arabesques ên mê (B) dikişînin û digirin, lê Anopheles farroes (C) nagirin, bi awayekî cûda, bandorek girêdayî rewşa fîzyolojîk. Wekî din, van dafikan hejmareke girîng a zêde ya mêşên Culex ên mêvandar girtin. (D) Li gorî kontrolê. Xêzên li milê çepê nîşana hilbijartina navînî ya mêşên ku di cotên dafikên bêhnxweş (kesk) û kontrolê (vekirî) de hatine girtin (N = 10) temsîl dikin, dema ku xetên li milê rastê nîşana hilbijartina navînî di cotên dafikên kontrolê de temsîl dikin (vekirî; N = 5). ). Stêrk astên girîngiya îstatîstîkî nîşan didin (*p = 0.01 û ***p < 0.0001)
Hersê cure di dafikên ku têkelên sentetîk tê de hebûn de bi awayên cuda hatin girtin. Di dema lêgerîna mêvandar de (χ2(1, 1345) = 71.7, p < 0.0001), xwarina bi xwînê (χ2(1, 517) = 16.7, p < 0.0001) û ducanîbûnê de (χ2(1, 180) = 6.11, p = 0.0134) .arabiensis di dafikê de asê ma û têkelê sentetîk berda (Wêne 6B), lê mîqdara An cuda nebû. Pharoensis di rewşên fîzyolojîk ên cûda de hatin dîtin (Wêne 6C). Ji bo Culex, tenê zêdebûnek girîng di hejmara mêşhingivên ku li mêvandar digerin de di dafikên ku bi têkelê sentetîk hatine xemilandin de hat dîtin (χ2(1,1319) = 12.6, p = 0.0004; Wêne 6D), li gorî dafikên kontrolê.
Dafikên mêşhingiv ên ku li derveyî mêşhingivên potansiyel di navbera cihên çêbûnê û civakên gundewarî yên Etiyopyayê de hatine bicihkirin, ji bo nirxandina ka mêşhingivên malaryayê bêhna mîza çêlekan wekî nîşanek jîngeha mêşhingiv bikar tînin, hatin bikar anîn. Di nebûna nîşanên mêşhingiv, germê de, û bi hebûna bêhna mîza çêlekan an bêyî wan, tu mêşhingiv nehatin girtin (Dosyaya Zêde 1: Wêne S3). Lêbelê, di hebûna germahiya bilind û bêhna mîza çêlekan de, mêşhingivên malaryayê yên mê hatin kişandin û girtin, her çend di hejmareke piçûk de bin jî, bêyî temenê mîzê (χ2(5, 25) = 2.29, p = 0.13; Dosyaya Zêde 1: Wêne S3). Berevajî vê, kontrolên avê mêşhingivên malaryayê di germahiyên bilind de negirtin (Dosyaya Zêde 1: Wêne S3).
Mêşên malaryayê bi rêya xwarina tezmînatê ya li ser mîza çêlekan (ango, gol) pêkhateyên nîtrojenê bi dest dixin û belav dikin da ku taybetmendiyên dîroka jiyanê, mîna kêzikên din, baştir bikin [2, 4, 24, 25, 26]. Mîza çêlekan çavkaniyek nûjenkirî ya bi hêsanî peyda dibe ku bi cihên bêhnvedanê yên vektorên malaryayê ve girêdayî ye, wek axurên çêlekan û nebatan bilind ên nêzîkî malên gundan û cihên hêkdanê. Mêşên mê vê çavkaniyê bi bêhnê dibînin û dikarin wergirtina pêkhateyên nîtrojenê di mîzê de, di nav de urea, pêkhateya sereke ya nîtrojenê di mîzê de, rêkûpêk bikin [15, 16]. Li gorî rewşa fîzyolojîk a mêşê, xurekên di mîzê de têne veqetandin da ku çalakiya firînê û saxmayîna mêşên mê yên ku li mêvandar digerin, û her weha saxmayîn û taybetmendiyên hilberandinê yên kesên ku bi xwînê têne xwedîkirin di dema çerxa gonadotropîk a yekem de zêde bikin. Ji ber vê yekê, tevlihevkirina mîzê rolek girîng a xwarinê dilîze ji bo vektorên malaryayê yên ku mîna mezinên kêmxwarin girtî ne [8], ji ber ku ew ji mêşên mê re şiyana bidestxistina pêkhateyên nîtrojenê yên girîng bi tevlêbûna xwarina kêm-rîsk peyda dike. Ev dîtin encamên epidemiolojîk ên girîng hene, ji ber ku mê temenê xwe dirêj dikin. bendewarî, çalakî û hilberîna hilberînê, ku hemî bandorê li kapasîteya vektor dikin. Wekî din, ev tevger dibe ku bibe hedefa bernameyên rêveberiya vektorê yên pêşerojê.