Hin mijarên çareserkirina pirsgirêka LC-ê qet ne ji mêj ve ne, ji ber ku di pratîka LC-yê de pirsgirêk hene, tevî ku teknolojiya amûrê bi demê re baştir dibe. Gelek rê hene ku pirsgirêk dikarin di pergalek LC-yê de derkevin û di şeklê lûtkeyê de biqedin. Dema ku pirsgirêkên têkildarî şeklê lûtkeyê derdikevin, navnîşek kurt a sedemên mimkun ji bo van encaman dibe alîkar ku ezmûna meya çareserkirina pirsgirêkan hêsan bike.
Ji nivîsandina vê stûna "Çareserkirina Pirsgirêkan LC" û her meh fikirîna li ser mijaran kêfxweş bû, ji ber ku hin mijar qet ji şêwazê dernakevin. Dema ku di warê lêkolîna kromatografiyê de hin mijar an raman kevnar dibin, ji ber ku di warê çareserkirina pirsgirêkan de ji hêla ramanên nû û çêtir ve têne veguheztin, ji ber ku yekem gotara çareserkirina pirsgirêkan di vê kovarê de di 11-ê de xuya bû (8) di van çend salên borî de, min bala xwe daye çend beşên Çareserkirina LC-yê li ser meylên hevdem ên ku bandorê li kromatografiya şil dikin (LC) (mînak, danberheva nisbî ya têgihîştina me ya bandora zextê li ser ragirtinê [2] Pêşketinên Nû) Şirovekirina me ya encamên LC û çawaniya çareserkirina pirsgirêkan bi amûrên nûjen ên LC-yê re. û mirin" mijarên çareserkirina pirsgirêka LC-ê - hêmanên ku ji bo her pirsgirêkek çareserkerek pir girîng in, bêyî ku temenê pergala ku em bikar tînin girîng in. Mijara bingehîn a vê rêzê bi tabloya dîwarê ya navdar (4) ya LCGC ya navdar "Rêbera Pirsgirêkan LC" ya ku di gelek laboratuaran de daliqandî ye, pir têkildar e. an jî şiklê lûtkeyê! Em nikarin di gotarekê de van mijaran bi hûrgulî binirxînin, ji ber vê yekê di vê beşa yekem a li ser mijarê de, ez ê li ser hin ji yên ku ez pir caran dibînim bisekinim. Ez hêvî dikim ku bikarhênerên LC yên ciwan û pîr dê li ser vê mijara girîng hin şîret û bîranînên alîkar bibînin.
Ez dibînim ku her ku diçe pirsên çareserkirinê bi "her tişt mimkun e" dibersivînim. Dibe ku ev bersiv hêsan xuya bike dema ku çavdêriyên ku şirovekirina wan zehmet e, lê ez pir caran minasib dibînim. Ligel gelek sedemên mimkun ên şiklê lûtkeya nebaş, girîng e ku meriv hişê xwe vekirî bihêle dema ku pirsgirêk çi dibe bila bibe, û meriv bikaribe pêşî li sedemên potansiyel bigire da ku dest bi xebatên xwe yên çareserkirinê bikin.
Di her temrînek çareserkirinê de gaveke bingehîn - lê ya ku ez difikirim ku kêm tê nirxandin - naskirina pirsgirêkek heye ku divê were çareser kirin. Naskirina ku pirsgirêkek heye bi gelemperî tê vê wateyê ku tiştê ku diqewime amûrê ji hêviyên me cûda ye, yên ku ji hêla teorî, zanîna ezmûnî, û ezmûnê ve têne çêkirin (5). , gemarî, qeraxa pêşeng, dûvik û hwd.), lê di heman demê de bi firehiyê jî. Hêviyên me yên ji bo şeklê lûtkeyê yê rastîn hêsan in. Teoriya (6) baş piştgirî dide hêviya pirtûka dersê ku, di pir rewşan de, lûtkeyên kromatografiyê divê simetrîk bin û li gorî şeklê belavkirina Gaussian bin, wekî ku di jimareya 1a de tê xuyang kirin, mijarek berfirehtir e ku em ê ji vê gotara pewexttir behs bikin. şikilên lûtkeyê di Xiflteya 1 de hin îmkanên din ên ku dikarin werin dîtin nîşan didin - bi gotinek din, hin awayên ku tişt dikarin xelet biçin. Di mayî ya vê beşê de, em ê wextê xwe bidin nîqaşkirina hin mînakên taybetî yên rewşên ku dikarin bibin sedema van celebên şiklê.
Carinan lûtk di kromatograma ku tê çaverêkirin ku werin şuştin bi tevahî nayên dîtin. Nexşeya dîwarê jorîn destnîşan dike ku nebûna lûtkeyê (bihesibînin ku nimûne bi rastî analîza mebestê di konsantasyonek ku divê bersiva dedektorê têra dîtina wê li jor dengî bike) bi gelemperî bi hin pirsgirêka amûrê an şert û mercên nerast ên qonaxa mobîl ve girêdayî ye (eger bi tevahî were dîtin).lûtke, bi gelemperî pir "qels").Lîsteyek kurt a pirsgirêkên potansiyel û çareseriyên di vê kategoriyê de di tabloya I de têne dîtin.
Wekî ku li jor hatî behs kirin, berî ku bala xwe bidinê û hewl bidin ku wê rast bikin, pirsa çiqas firehbûna lûtkeyê divê were çespandin mijarek tevlihev e ku ez ê di gotarek pêşerojê de nîqaş bikim. Tecrûbeya min ev e ku firehbûna lûtkeyê ya girîng bi gelemperî bi guherînek girîng di şeklê lûtkeyê de pêk tê, û dûvika lûtkeyê ji berî lûtkeyê an perçebûnê gelemperîtir e.
Her yek ji van pirsgirêkan di hejmarên berê yên Troubleshooting LC de bi hûrgulî hatine nîqaş kirin, û xwendevanên ku bi van mijaran re eleqedar dibin dikarin ji bo agahdariya li ser sedemên bingehîn û çareseriyên potansiyel ên van pirsgirêkan serî li van gotarên berê bidin.Zêdetir hûrgulî.
Dûvçûna lûtkeyê, pêşîya lûtkeyê, û perçebûn hemî dikarin ji ber diyardeyên kîmyewî an fizîkî bibin sedema, û navnîşa çareseriyên potansiyel ên van pirsgirêkan pir diguhere, li gorî ka em bi pirsgirêkek kîmyewî an fizîkî re mijûl dibin. .Eger tenê yek an çend lûtk bikevin bin bandorê, lê yên mayî baş xuya bikin, sedem bi îhtîmaleke mezin kîmyewî ye.
Sedemên kîmyewî yên dûvika lûtkeyê pir tevlihev in ku meriv li vir bi kurtî were nîqaş kirin. Xwendevanê eleqedar ji bo nîqaşek kûrtir serî li hejmara dawî ya "Çêkirina Pirsgirêkên LC" dide (10). Lêbelê, tiştek hêsan e ku meriv biceribîne ev e ku meriv girseya analîza derzîkirî kêm bike û bibîne ka şiklê lûtkeyê baştir dibe. Ger wusa be, wê hingê ev pirsgirêkek baş e ku "di rewşek piçûk de divê ev pirsgirêk bi hûrgulî were dîtin." girseyên te, an jî şert û mercên kromatografiyê divê werin guheztin da ku şeklên lûtkeyê yên baş jî bi girseyên mezin ên ku têne derzî kirin jî werin bidestxistin.
Di heman demê de gelek sedemên fizîkî yên potansiyel ji bo dûvika lûtkeyê jî hene. Xwendevanên ku bi nîqaşek berfireh a li ser îhtîmalan eleqedar dibin, têne ser mijarek din a vê dawîyê ya "Çareserkirina Pirsgirêkan LC" (11). Yek ji sedemên laşî yên gelemperî yên dûvika lûtkeyê têkiliyek nebaş e li xalek di navbera derzîker û dedektorê de (12). valvaya ku me berê bikar neanîbû, û lûleke derzîlêdanê ya piçûk a bi fêkiyek ku li ser kapileyek pola zengarnegir hatî çêkirin saz kir. Piştî hin ceribandinên destpêkê yên çareserkirina pirsgirêkan, me fêm kir ku kûrahiya portê di statora valbaya derzîlêdanê de ji ya ku em bikar dianîn pir kûrtir bû, di encamê de cildek mirî ya mezin di binê portê de ji nû ve tê çareser kirin. li pozîsyona guncan bizivirin da ku hêjmara mirî li binê portê ji holê rakin.
Pêşiyên lûtkeyê yên mîna yên ku di jimar 1e de têne xuyang kirin jî dikarin ji ber pirsgirêkên laşî an kîmyewî bibin sedem. Sedemek laşî ya hevpar a qeraxa pêşeng ev e ku nivîna parçikê ya stûnê baş negirtî ye, an jî ku pirtik bi demê re ji nû ve organîze bûne. Mîna dûvika lûtkeyê ya ku ji ber vê diyardeya laşî pêk tê, awayê herî baş ji bo rastkirina vê yekê ew e ku stûnê biguhezîne û bi eslê xwe yê kîmyewî bidomîne. ” şert û mercên ragirtinê. Di şert û mercên îdeal (xêzik) de, mîqdara analîta ku ji hêla qonaxa rawestayî ve tê girtin (ji ber vê yekê, faktora ragirtinê) bi xêzikî ve girêdayî ye bi giraniya analîtê ya di stûnê de. Ji hêla kromatografiyê ve, ev tê vê wateyê ku her ku girseya analîtê ku di stûnê de tê derzîkirin, zêde dibe, lûtke bilindtir dibe, lê dema ku ragirtin berfirehtir nabe. ji ber ku girseyek zêdetir tê derzîkirin. Ji bilî vê, şeklên nehêlî şeklê lûtkeyên kromatografiyê diyar dikin, û di encamê de qeraxên pêşeng an paşverû çêdibin. Çawa ku bi bargiraniya girseyê ya ku dibe sedema dûvika lûtkeyê (10), pêşengiya lûtkeyê ya ku ji ber girtina nehêlî çêdibe jî bi kêmkirina girseya analîtê ya derzîkirî dikare were teşhîs kirin. Divê şert û mercên grafîkî werin guhertin da ku vê tevgerê kêm bikin.
Carinan em dibînin ku lûtkeya "perçebûyî" ye, wek ku di jimar 1f de tê nîşandan. Di çareserkirina vê pirsgirêkê de gava yekem ew e ku em diyar bikin ka şiklê lûtkeyê ji ber hev-helandina qismî ye (ango hebûna du pêkhateyên cihê lê ji nêzik ve diherike). lûtkeyên parçebûyî bi fizîkî ve girêdayî ne Performansa bi stûnê bi xwe re ti têkiliya wê tune. Gelek caran, nîşana herî girîng a vê biryarê ev e ku hemî lûtkeyên di pêşangehê de şeklên perçebûyî nîşan didin, an tenê yek an du. Ger ew tenê yek an du be, dibe ku ew pirsgirêkek hev-hilandinê ye;heke hemî lûtk perçe bibin, dibe ku ew pirsgirêkek laşî ye, bi îhtîmalek mezin bi stûnê bixwe ve girêdayî ye.
Pişkên perçebûyî yên ku bi taybetmendiyên laşî yên stûnê ve girêdayî ne, bi gelemperî ji ber fêkiyên têketin an derketinê yên qismî astengkirî ne, an jî ji nû ve organîzekirina perçeyên di stûnê de ne, ku dihêle qonaxa mobîl ji qonaxa mobîl li hin deverên avakirina kanala stûnê zûtir biherike .li herêmên din (11) .lê belê, li gorî ezmûna min, ev bi gelemperî çareseriyek demkurt e û ne çareseriyek demdirêj e. Ev pir caran bi stûnên nûjen re kujer e heke pirtik di hundurê stûnê de ji nû ve werin berhev kirin. Di vê xalê de, çêtir e ku meriv stûnê biguhezîne û bidomîne.
Di jimar 1g de lûtkeya lûtkeyê, di heman demê de ji mînakek vê dawîyê ya di laboratûara min de, bi gelemperî destnîşan dike ku sînyal ew qas bilind e ku gihîştiye dawiya bilind a rêza bersivê. Ji bo detektorên vegirtinê yên optîkî (di vê rewşê de UV-vis), dema ku giraniya analîtê pir zêde be, analît piraniya ronahiya ku di nav herikîna dedektorê re derbas dibe vedigire, ronahiya elektrîkê ya pir hindik ji hucreya ronahiya elektrîkê vediqetîne. Ew ji hêla çavkaniyên cihêreng ên dengî ve tê bandor kirin, wek ronahiya bêserûber û "herikîna tarî", ku sînyala di xuyangê de pir "teqlîdî" dike û ji berhevkirina analîtê serbixwe ye.Dema ku ev diqewime, pirsgirêk bi gelemperî bi kêmkirina qebareya derzîlêdanê ya analyte-kêmkirina qebareya derzîlêdanê, paqijkirina nimûneyê, an her du jî bi hêsanî dikare were çareser kirin.
Di dibistana kromatografiyê de, em sînyala detektorê (ango, y-xebata di kromatogramê de) wekî nîşana berhevdana analîtê ya di nimûneyê de bikar tînin. Ji ber vê yekê ecêb xuya dike ku meriv kromatogramek bi îşaretek di binê sifirê de bibîne, ji ber ku şiroveya sade ev e ku ev giraniya analîtek neyînî nîşan dide - ku bê guman ne gengaz e, dema ku ezmûnên min pir neyînî bi kar tînin. vis).
Di vê rewşê de, lûtkeya neyînî bi hêsanî tê vê wateyê ku molekulên ku ji stûnê derdikevin ji qonaxa mobîl kêmtir ronahiyê yekser berî û piştî lûtkeyê distînin. Ev dikare çêbibe, wek nimûne, dema ku dirêjahiya pêlên bi kêmasî (<230 nm) û pêvekên qonaxa mobîl ên ku piraniya ronahiyê di van dirêjahiya pêlan de vedigirin bikar bînin. dikare bi rastî lûtkeyên neyînî bikar bîne ji bo amadekirina lûtkeya kalibrasyonê û bidestxistina agahdariya mîqdar ya rast, ji ber vê yekê sedemek bingehîn tune ku meriv xwe ji wan dûr bixe (ev rêbaz carinan wekî "teşhîsa UV-ya nerasterast" tê binav kirin) (13). Lêbelê, heke em bi rastî dixwazin ji lûtkeyên neyînî bi tevahî dûr bikevin, di mijara tespîtkirina vegirtinê de, baştirîn çareserî ev e ku meriv qonaxek bi vî rengî ya veguheztina mobîl bikar bîne, da ku qonaxa veguheztinê ji wavel bêtir biguhezîne. Ew ji analîzan kêmtir ronahiyê digirin.
Di heman demê de lûtkeyên negatîf dikarin di dema karanîna tespîtkirina nîşana refraksiyonê (RI) de jî diyar bibin dema ku nîşana refraksiyonê ya pêkhateyên ji bilî analîza di nimûneyê de, wek matrixa çareserker, ji nîşaneya refraksiyonê ya qonaxa mobîl cûda ye. Ev yek bi tespîtkirina UV-visê re jî çêdibe, lê ev bandor dibe ku ji hêla RI-yê ve bêtir kêm bibe. trix ji ya qonaxa mobîl.
Di beşa sêyem de li ser mijara bingehîn a çareserkirina pirsgirêka LC, min li ser rewşên ku tê de şiklê lûtkeya çavdêrîkirî ji şeklê lûtkeya bendewarî an normal cûda dibe nîqaş kir. Çareserkirina bandorker a pirsgirêkên weha bi zanîna şêwazên lûtkeya çaverêkirî (li ser bingeha teoriyê an ezmûna berê ya bi rêbazên heyî re) dest pê dike, ji ber vê yekê dûrketina ji van hêviyan diyar in. sedemên ku ez pir caran dibînim. Zanîna van hûrguliyan cîhek baş peyda dike ji bo destpêkirina çareserkirina pirsgirêkan, lê hemî îhtîmalan nagire. Xwendevanên ku bi navnîşek kûrtir a sedem û çareseriyan re eleqedar dibin dikarin serî li nexşeya dîwarê LCGC "Rêberdana Pirsgirêkan LC" bidin.
(4) Nexşeya dîwarê "Rêbera Çareserkirina LC" ya LCGC.https://www.chromatographyonline.com/view/troubleshooting-wallchart (2021).
(6) A. Felinger, Analysis Data and Signal Processing in Chromatography (Elsevier, New York, NY, 1998), rûpel 43-96.
(8) Wahab MF, Dasgupta PK, Kadjo AF û Armstrong DW, Anal.Chim.Journal.Rev.907, 31–44 (2016).https://doi.org/10.1016/j.aca.2015.11.043.