Spas ji bo serdana Nature.com.Guhertoya geroka ku hûn bikar tînin piştgirîya CSS-ê sînordar e.Ji bo ezmûna çêtirîn, em pêşniyar dikin ku hûn gerokek nûvekirî bikar bînin (an jî Moda Lihevhatinê ya di Internet Explorer de neçalak bikin).Di vê navberê de, ji bo misogerkirina piştgirîya domdar, em ê malperê bê şêwaz û JavaScript pêşkêş bikin.
Zewaciya çûkan bi şiyana wan ve girêdayî ye ku bi têra xwe spermê zindî ji bo demek dirêj di lûleyên hilanîna spermê (SST) de hilînin.Mekanîzmaya rastîn a ku spermatozoa têkevin, tê de dimînin û ji SST-ê derdikevin, nakokî dimîne.Spermê mirîşkên şarkasi meyleke bilind a aglutinasyonê nîşan da, girêkên filamento yên mobîl ku gelek şan tê de hene, ava kirin.Ji ber dijwariya çavdêrîkirina livîn û tevgera spermatozoayan di lûleya falopî ya nezelal de, me amûrek mîkrofluîdî ya bi beşa mîkrokanalê ya mîna ya spermatozoayan bikar anî da ku lihevkirin û tevgera spermatozoayan lêkolîn bike.Vê lêkolînê nîqaş dike ka çîpên spermê çawa çêdibin, ew çawa tevdigerin, û rola wan a gengaz di dirêjkirina rûniştina spermê de di SST de.Me leza spermê û tevgera rheolojîk lêkolîn kir dema ku herikîna şilavê di nav kanalek mîkrofluîdîk de ji hêla zexta hîdrostatîk ve hatî çêkirin (rêjeya herikînê = 33 μm / s).Spermatozoa mêldarê avjeniyê li dijî herê ye (rheolojiya erênî) û leza spermatozoonê li gorî spermatozoa yekane pir kêm dibe.Tê dîtin ku spermên spermê bi spiral tevdigerin û ji ber ku bêtir spermên yekane têne berhev kirin, dirêjî û qalindî zêde dibin. Tevliheviyên spermê hatin dîtin ku nêzîk dibin û li kêlekên kanalên mîkrofluîdîk digirin da ku bi leza herikîna şilavê > 33 μm/s nekevin. Tevliheviyên spermê hatin dîtin ku nêzîk dibin û li kêlekên kanalên mîkrofluîdîk digirin da ku bi leza herikîna şilavê > 33 μm/s nekevin. Bыlo zamecheno, что пучки сперматозоидов близуаются и прилипают на bokovыm стенкам микрофлюидных каналов, чтобы избежать сметания со скоростью потока жидкости> 33 mkm/s. Hatiye dîtin ku sperm berikên spermê nêzîk dibin û bi dîwarên kêlekê yên kanalên mîkrofluîdîk ve girêdayî ne da ku bi leza herikîna şilavê > 33 μm/s neçin.观察到精子束接近并粘附在微流体通道的侧壁上，以避免被流体流速> 33 μm/s33 µm/s 扫过. Bыlo zamecheno, что пучки сперматозоидов близуаются и прилипают к боковым стенкам микрожидкостного канала, чтобы избежать сметания потоком жидкости со блискустью > 33 mkm/s. Hate dîtin ku spermê girêkên spermê nêzîk dibin û bi dîwarên kêlekê yên kanala mîkrofluîdîk ve girêdayî ne da ku ji herikîna şilê ya >33 μm/s dûr nekevin.Mîkroskopiya elektronîkî ya şopandin û veguheztinê diyar kir ku girêkên spermê ji hêla materyalê pir zirav ve têne piştgirî kirin.Daneyên ku hatine bidestxistin tevgera bêhempa ya spermatozoa mirîşkê ya Sharkazi, û hem jî kapasîteya spermatozoayan a aglutînasyon û avakirina bendikên mobîl destnîşan dikin, ku ev yek dibe alîkar ku têgihiştinek çêtir a hilanîna dirêj-dirêj a spermatozoa di SMT de.
Ji bo ku mirov û piraniya heywanan bigihêje fertilîzasyonê, divê sperm û hêk di wextê rast de bigihîjin cihê fertilîzasyonê.Ji ber vê yekê, hevjînî divê berî an di dema ovulation de pêk were.Ji aliyê din ve, hin mamik, mîna kûçikan, û her weha cureyên ne mamik, mîna kêzik, masî, kêzik û çûk, spermê di organên xwe yên zayînê de ji bo demeke dirêj diparêzin heya ku hêkên wan ji bo fertilasyonê amade bin (fertilîzasyona asînkron 1 ).Çûk dikarin 2-10 hefteyan jîndarbûna spermatozoayên ku dikarin hêkan zibil bikin biparêzin2.
Ev taybetmendiyek bêhempa ye ku çûkan ji heywanên din cuda dike, ji ber ku ew îhtîmalek mezin a fertilîzasyonê peyda dike piştî çend hefteyekê bêyî hevgirtin û ovulation hevdemî.Organa hilanîna spermê ya sereke, ku jê re tubula hilanînê ya spermê (SST) tê gotin, di pelikên mukozên hundurîn ên li hevberdana uterovaginal de cih digire.Heya nuha, mekanîzmayên ku sperm dikevin, rûniştin û derketina banka spermê bi tevahî nehatine fam kirin.Li ser bingeha lêkolînên berê, gelek hîpotez derketine pêş, lê yek ji wan nehatiye pejirandin.
Forman4 hîpotez kir ku spermatozoa rûniştina xwe di valahiya SST-ê de bi tevgera ossilatorî ya domdar a li dijî rêça herikîna şilavê di nav kanalên proteîn ên ku li ser şaneyên epîteliya SST-ê (rheolojî) de ne, diparêzin.ATP ji ber çalakiya domdar a flagellarê ya ku ji bo girtina spermê di lumena SST-ê de hewce dike kêm dibe û tevger di dawiyê de kêm dibe heya ku sperm ji hêla herikîna şilê ve ji banka spermê têne derxistin û rêwîtiyek nû di lûleya fallopî ya hilkişîn de dest pê dike da ku spermê fertilîze bike.Hêk (Forman4).Ev modela hilanîna spermê ji hêla vedîtina bi immunocytochemistry aquaporins 2, 3 û 9 ve di hucreyên epîteliya SST de têne piştgirî kirin.Heya nuha, lêkolînên li ser rheolojiya semenê mirîşkê û rola wê di hilanîna SST, hilbijartina spermê vajînalê, û pêşbaziya spermê de kêm in.Di mirîşkan de sperm piştî hevjîna xwezayî derbasî vajînayê dibe, lê ji %80ê spermatozoayan di demeke kin de piştî hevjînê ji vajînayê têne derxistin.Ev destnîşan dike ku vajîna cihê bingehîn e ji bo hilbijartina spermê di çûkan de.Wekî din, hate ragihandin ku ji% 1 kêmtir spermatozoayên ku di vajînayê de têne fertilîzekirin di SSTs2 de diqede.Di mêzîna sûnî ya çiçikên di vajînayê de, hejmara spermatozoayên ku digihêjin SST-ê 24 saetan piştî çandiniyê zêde dibe.Heya nuha, mekanîzmaya hilbijartina spermê di vê pêvajoyê de ne diyar e, û tevgera spermê dibe ku di hilgirtina spermê SST de rolek girîng bilîze.Ji ber dîwarên stûr û nezelal ên lûleyên fallopîan, zehmet e ku rasterast livîna spermê di lûleyên felopî yên çûkan de were şopandin.Ji ber vê yekê, em ne zanîna bingehîn a ku spermatozoa piştî fertilîzasyonê çawa derbasî SST dibe.
Rheolojî di van demên dawî de wekî faktorek girîng a ku veguheztina spermê di genîtaliya mammalan de kontrol dike hate nas kirin.Li ser bingeha şiyana spermatozoayên bizav ku bi berevajî koç bikin, Zaferani et al8 pergalek mîkrofluîdîk a corra bikar anîn da ku bi pasîf spermatozoayên tevgerî ji nimûneyên semenê yên pênûskirî veqetînin.Ev celeb celebkirina spermê ji bo dermankirina nefermîtiya bijîjkî û lêkolîna klînîkî pêdivî ye, û li ser rêbazên kevneşopî yên ku dem û kedê giran in û dikarin morfolojiya spermê û yekbûna avahîsaziyê xirab bikin tê tercîh kirin.Lêbelê, heya îro, li ser bandora derzên organên genîtal ên mirîşkan li ser tevgera spermê ti lêkolîn nehatine kirin.
Tevî mekanîzmaya ku spermê di SST-ê de hilanîn diparêze, gelek lêkolîneran dît ku spermatozoayên niştecîh di SST-ya mirîşkan 9, 10, qiloç 2, û mîran 11 de serê-bi- serî agglutîne dikin da ku spermên agglutinated ava bikin.Nivîskar pêşniyar dikin ku têkiliyek di navbera vê aglutinasyonê û hilanîna dirêj-dirêj a spermatozoa di SST de heye.
Tingari û Lake12 têkiliyek xurt di navbera spermatozoayên di girêza spermê wergir ên mirîşkê de ragihandin û pirsîn ka spermatozoa çivîkan bi heman rengî wekî spermatozoayên mammalan tevdigere.Ew bawer dikin ku girêdanên kûr ên di navbera spermê di vas deferens de dibe ku ji ber stresê be ku ji ber hebûna hejmareke mezin a spermê di cîhek piçûk de çêdibe.
Dema nirxandina tevgera spermatozoayan li ser slaytên cam ên daleqandî yên nû, nîşanên demkî yên agglutinasyonê têne dîtin, nemaze li peravên dilopên semenê.Lêbelê, agglutinasyon bi gelemperî ji hêla çalakiya zivirî ya bi tevgera domdar ve girêdayî bû, ku cewhera derbasbûyî ya vê diyardeyê rave dike.Lekolînwanan her weha pê hesiyan ku dema ku diluent li semenê hate zêdekirin, berhevokên hucreyê yên dirêjkirî yên "mîna têlan" xuya bûn.
Hewldanên destpêkê yên ji bo teqlîdkirina spermatozoonê bi derxistina têlekî tenik ji dilopek daleqandî hatin çêkirin, ku di encamê de vezîkulek mîna spermê dirêjkirî ji dilopa semenê derket.Spermatozoa tavilê bi rengek paralel di hundurê vezîkulê de rêz kirin, lê ji ber sînorkirina 3D-ê tevahî yekîne zû winda bû.Ji ber vê yekê, ji bo lêkolîna agglutinasyona spermatozoayan, pêdivî ye ku meriv liv û tevgera spermatozoa rasterast di tubulên hilanîna spermê yên veqetandî de were şopandin, ku gihîştina wê dijwar e.Ji ber vê yekê, pêdivî ye ku amûrek ku spermatozoa dişibîne pêşde bibe da ku piştgirî bide lêkolînên li ser tevgera spermê û tevgera agglutinasyonê.Brillard et al13 ragihand ku dirêjahiya navînî ya lûleyên hilanîna spermê di çîçikên mezin de 400-600 μm ye, lê hin SST dikarin bi qasî 2000 μm dirêj bin.Mero û Ogasawara14 rijên semînîferan li tubulên hilanîna spermê yên mezinbûyî û ne-mezinbûyî dabeş kirin, ku her du jî bi dirêjî (~ 500 μm) û firehiya stûyê (~ 38 μm) yek bûn, lê navîniya lûmenê ya tubulan 56,6 û 56,6 μm bû.., bi rêzê ve 11,2 μm.Di lêkolîna heyî de, me amûrek mîkrofluîdîk bi mezinahiya kanalek 200 μm × 20 μm (W × H) bikar anî, ku beşa xaça wê hinekî nêzikî ya SST-ya zêdekirî ye.Wekî din, me tevgera spermê û tevgera agglutinasyonê ya di şilava diherike de lêkolîn kir, ku bi hîpoteza Foreman re hevaheng e ku şilava ku ji hêla hucreyên epîteliya SST ve hatî hilberandin spermê di lumenê de bi rêgezek berevajî (rheolojîkî) digire.
Armanca vê lêkolînê ew bû ku pirsgirêkên çavdêriya tevgera spermatozoayan di lûleya fallopian de derbas bike û ji zehmetiyên lêkolîna rheolojî û tevgera spermatozoa di hawîrdorek dînamîkî de dûr bixe.Amûrek mîkrofluîdî hate bikar anîn ku zexta hîdrostatîk diafirîne da ku tevgera spermê di organên genîtal ên mirîşkê de simule bike.
Dema ku dilopek nimûneya spermê ya rijandin (1:40) di cîhaza mîkrokanalê de hate barkirin, du celeb tevgera spermê dikare were nas kirin (spermê veqetandî û spermê girêdayî).Digel vê yekê, spermatozoa meyla avjeniyê li hember herikê dikir (rheolojiya erênî; vîdyoya 1, 2). Her çend pêlên spermê ji ya spermê tenêtiyê kêmtir bûn (p <0.001), wan rêjeya spermê ku rheotaxis erênî nîşan dide zêde kir (p <0.001; Tablo 2). Her çend pêlên spermê ji ya spermê tenêtiyê kêmtir bûn (p <0.001), wan rêjeya spermê ku rheotaxis erênî nîşan dide zêde kir (p <0.001; Tablo 2). Spermatozoidov, ji ber vê yekê, ji ber vê yekê, ji ber vê yekê, ji ber vê yekê, ji ber vê yekê, ji ber vê yekê, ji ber vê yekê, ji bo spermatozoid (p < 0,001); Her çend pêlên spermatozoayan ji ya spermatozoayên yekane lezek kêmtirîn (p <0,001) hebû, wan rêjeya spermatozoayên ku rheotaxis erênî nîşan didin zêde kir (p <0,001; Tablo 2).尽管精子束的速度低于孤独精子的速度（p < 0.001），但它们增加了显独精子的速度（p分比（p < 0,001；表2）.尽管 精子束 的 速度 低于 孤独 的 速度 （p <0.001） ， 但 增加 了 显独 阾羳分比 (p <0.001 ； 2……..) Xotya скорость пучков сперматозоидов была ниже, чем у сперматозоидов (p < 0,001), lê zêdeyî rêjeya spermatozoids poложительной реологией (p < 0,001; tab 2). Her çend leza spermatozoayan ji ya spermatozoa yekane kêmtir be jî (p <0,001), wan rêjeya spermatozoayan bi reolojiya erênî zêde kir (p <0,001; Tablo 2).Rheolojiya erênî ya ji bo spermatozoa yekane û tuftan bi rêzê bi qasî% 53 û 85% tê texmîn kirin.
Hate dîtin ku spermatozoa mirîşkên şarkasî yekser piştî ejakulasyonê girêkên xêzik ên ku ji dehan kesan pêk tên, çêdikin.Van tîrêjan bi demê re dirêjî û qalindahî zêde dibin û dibe ku çend demjimêran berî belavbûnê di vitro de bimînin (vîdyo 3).Ev girêkên filamentous mîna spermatozoa echidna ne ku li dawiya epididymis pêk tê.Hat dîtin ku semenê mirîşka Sharkashi xwedan meylek zêde ye ku di nav yek hûrdeman de piştî berhevkirinê xwedan meyla agglutînasyonê ye û girêkek retîkulasyonê çêdike.Van tîrêjên dînamîk in û dikarin li her dîwarên nêzîk an tiştên statîk bikevin.Her çend girêkên spermê leza xaneyên spermê kêm bikin jî, diyar e ku bi makroskopî xêziya wan zêde dikin.Li gor hejmara spermayên ku di koman de tên berhevkirin, dirêjiya koman diguhere.Du beşên pakêtê hatin veqetandin: beşa destpêkê, di nav de serê azad a spermaya agglutinated, û beşa termînalê, tevî dûvik û tevahiya dawiya dûr a spermê.Bi karanîna kamerayek bilez (950 fps), serê belaş ên spermatozoayên agglutînekirî di beşa destpêkê ya pakêtê de hatin dîtin, ku ji ber tevgera wan a ossîllasyonê berpirsiyariya tevgera girikê ye, yên mayî bi tevgerek helîkî di nav pakêtê de dikişîne (Vîdyo 4).Lêbelê, di tûfên dirêj de, hate dîtin ku hin serên spermê yên belaş ên ku bi laş ve girêdayî ne û beşa termînalê ya tîrêjê wekî fêkiyan tevdigerin da ku arîkariya tîrêjê bikin.
Dema ku di herikîna hêdî ya şilavê de, girêkên spermê paralel bi hev re dimeşin, lêbelê, ew dest bi hevûdu dikin û li her tiştê ku sekinî ye disekinin, da ku her ku leza herikînê zêde dibe ji hêla herikîna heyî ve neyên şûştin.Dema ku çend şaneyên spermê nêzîkî hev dibin, kulm çêdibin, ew bi hevdemî dest bi tevgerê dikin û li dora hev dipêçin, û dûv re li maddeyek asê dikevin.Wêneyên 1 û 2 nîşan didin ka sperm çawa nêzikî hev dibin, dema ku dûvik li dora hev diqelibin hevdu çêdikin.
Lekolînwanan zexta hîdrostatîk sepandin da ku herikîna şilavê di mîkrokanalekê de biafirîne da ku rheolojiya spermê lêkolîn bike.Mîkrokanalek bi mezinahiya 200 μm × 20 μm (W × H) û dirêjahiya 3.6 μm hate bikar anîn.Mîkrokanalên di navbera konteyneran de bi şiringeyên ku li dawiyan hatine bicihkirin bikar bînin.Rengê xwarinê hate bikar anîn da ku kanal bêtir xuyang bibin.
Kablo û aksesûarên bi dîwêr ve girêdin.Vîdyo bi mîkroskopek berevajî qonaxa hatiye kişandin.Bi her wêneyê re, mîkroskopiya dijberiya qonaxê û wêneyên nexşeyê têne pêşkêş kirin.(A) Têkiliya di navbera du çeman de ji ber tevgera helîkî (tîra sor) li hember herikînê li ber xwe dide.(B) Têkiliya di navbera lûkê û dîwarê kanalê de (tîrên sor), di heman demê de ew bi du bendikên din (tîrên zer) ve girêdayî ne.(C) Pelên spermê yên di kanala mîkrofluîdîk de dest bi girêdana bi hev re dikin (tîrên sor), tevnek spermê çêdikin.(D) Çêkirina toreke spermê.
Dema ku dilopek spermek hûrkirî di nav amûra mîkrofluîdîk de hate barkirin û herikînek çê bû, hate dîtin ku tîrêjê spermê li dijî rêgezên herikînê tevdigere.Pîvan bi hûrgulî li hember dîwarên mîkrokanalan, û serê belaş ên di beşa destpêkê ya kulman de bi hev re li hember wan disekinin (vîdyo 5).Ew di heman demê de li her perçeyên rawestayî yên di riya xwe de, mîna bermayiyan, disekinin da ku li hember hejandina herikê bisekinin.Bi demê re, ev tîrêj dibin fîlamanên dirêj ku spermatozoayên din ên yekane û tûçikên kurttir digirin (Vîdyo 6).Gava ku herik hêdî hêdî dest pê dike, xetên dirêj ên spermê dest pê dikin tora xetên spermê çêdikin (Vîdyo 7; Wêne 2).
Di leza herikîna bilind de (V > 33 µm/s), tevgerên spiral ên têlan zêde dibin wekî hewildanek ji bo girtina gelek spermên kesane yên ku çêdikin li hember hêza hilkişîna herikê çêtir li ber xwe didin. Di leza herikîna bilind de (V > 33 µm/s), tevgerên spiral ên têlan zêde dibin wekî hewildanek ji bo girtina gelek spermên kesane yên ku çêdikin li hember hêza hilkişîna herikê çêtir li ber xwe didin. Ji ber vê çendê (V > 33 mkm/s) . Di rêjeyên herikîna bilind de (V > 33 µm/s), tevgerên helîkî yên zincîreyan zêde dibin ji ber ku ew hewl didin ku gelek spermatozoayên takekesî bigirin ku çêlekên ku çêtir dikarin li hember hêza hilkişînê ya herikê bisekinin.在高流速(V > 33 µm/s)地抵抗流动的漂移力.在 高 流速 (v> 33 µm/s) 时 ， 的 螺旋 运动 试加地 抵抗 的 漂移力。。.. Pîvana nêzîkê (V > 33 mkm/s) спиральное движение нитей увеличивается в попытке захватить множество отдельных сперматозоидов, образующих пучки, чтось сопротивя лучитя сила. Di rêjeyên herikîna bilind de (V > 33 µm/s), tevgera helîkî ya fîlan zêde dibe di hewildanek ku gelek spermatozoayên takekesî yên ku çêlekên xwe çêdikin bigire da ku çêtir li hember hêzên dakêşanê yên herikê bisekinin.Di heman demê de wan hewl da ku mîkrokanalan bi dîwaran ve girêbidin.
Pelên spermê bi karanîna mîkroskopa ronahiyê (LM) wekî komikên serê spermê û dûvikên kulîlk hatine nas kirin.Komên spermê yên ku bi tevheviyên cihêreng hene jî wekî serên ziravkirî û berhevokên flagellar, çend dûvikên spermê yên hevgirtî, serê spermê bi dûvikek ve girêdayî, û serê spermê bi navokên xwar ve wekî navokên pir hevgirtî hatine nas kirin.mîkroskopiya elektronîkî ya veguhestinê (TEM).Mîkroskopiya elektronîkî ya şopandinê (SEM) destnîşan kir ku çîpên spermê ji serên spermê girtî ne û tevheviyên spermê toreyek pêvekirî ya dûvikên pêçandî nîşan didin.
Morfolojî û ultrastruktura spermatozoayan, pêkhatina girêkên spermatozoayan bi mîkroskopa ronahiyê (nîv beş), mîkroskopiya elektronê ya şopandinê (SEM) û mîkroskopiya elektronê ya veguheztinê (TEM) hatin lêkolîn kirin, smeqeyên spermê bi porteqala acridine hatin boyaxkirin û bi karanîna epifluores microscopy ve hatin lêkolîn kirin.
Neqişandina spermê bi porteqala acridine (Hêl. 3B) nîşan da ku serê spermê bi hev ve zeliqandî ne û bi maddeyên veşartî hatine pêçandin, ku ev yek bûye sedema çêbûna tîrên mezin (Hêl. 3D).Pelên spermê ji berhevokên spermê yên bi tevnek dûvikên pêvekirî pêk dihat (Hêjîra 4A-C).Pelên spermê ji dûvikên gelek spermatozoayên ku li hev asê mane pêk tên (Hêl. 4D).Veşartî (Wêne. 4E,F) serê girêkên spermatozoayan pêça.
Çêbûna girêka spermatozoayan Bi bikaranîna mîkroskopiya berevajî ya qonaxê û spermayên ku bi porteqala acridine vegirtî, nîşan da ku serê spermatozoayan bi hev ve girêdide.(A) Çêbûna zû ya spermê bi spermek (xeleka spî) û sê spermê (xeleka zer) dest pê dike, ku spiral ji dûvikê dest pê dike û li serî diqede.(B) Fotomikrografa spermek spermê ku bi porteqala acridine hatî xemilandin ku serên spermê yên girêdayî (tîrên) nîşan dide.Derketin serê(an) digire.Mezinbûn × 1000. (C) Pêşxistina tîrêjek mezin a ku bi herikînê di kanalek mîkrofluîdîk de tê veguheztin (bi karanîna kamerayek bilez a bi 950 fps).(D) Mîkrografa spermek ku bi porteqala acridine hatiye xemilandin ku tîrên (tîrên) mezin nîşan dide.Mezinbûn: × 200.
Mîkrografa elektronîk a tîrêjek spermê û smearek spermê ya ku bi porteqala acrîdîn hatiye rengkirin.(A, B, D, E) mîkrografên elektronîkî yên spermatozoayan pîskirina rengîn a dîjîtal in, û C û F mîkrografên smêlên spermê yên bi porteqalî yên acrîdîn in ku girêdana gelek spermatozoayan ku tevna caudal dipêçin nîşan didin.(AC) Kombûna spermê wekî tora dûvikên pêvekirî (tîrên) têne xuyang kirin.(D) Girêdana çend spermatozoayan (bi maddeya zeliqandî, xêza pembe, tîr) li dora dûvikê dipêçin.(E û F) Berhevokên serê spermê (nîşanker) ku bi maddeya zeliqandî (nîşanker) hatine nixumandin.Spermatozoa bi çend strukturên mîna vortexê (F) girêk çêkirine.(C) × 400 û (F) × 200 mezinkirin.
Bi karanîna mîkroskopiya elektronîkî ya veguheztinê, me dît ku girêkên spermê dûvikên girêdayî bûn (Wêne. 6A, C), serên bi dûvikan ve girêdayî bûn (Wêne. 6B), an seriyên bi dûvikan ve girêdayî bûn (Hêjî. 6D).Serên spermatozoayên di girêkê de xêzkirî ne, di beşa du herêmên nukleerî de (Hêl. 6D).Di girêka birînê de, spermatozoa bi du herêmên nukleerî û gelek deverên alavan serê xwe yê zivirî hebû (Wêne. 5A).
Mîkrografa elektronîkî ya rengîn a dîjîtal ku dûvikên girêdanê yên di bendika spermê de û materyalê agglutînasyonê ku serê spermê girêdide nîşan dide.(A) Dûvê pêvekirî ya hejmareke mezin a spermatozoayan.Bala xwe bidinê ka dûvik hem di pêşnûmeyên portreyê (tîr) û hem jî di perestgehê (tîr) de xuya dike.(B) Serê (tîra) spermê bi dûvikê (tîrê) ve girêdayî ye.(C) Çend dûvikên spermê (tîrên) pêvekirî ne.(D) Materyalên aglutinasyonê (AS, şîn) çar serê spermê (binefşî) girêdide.
Mîkroskopiya elektronîkî ya şopandinê hate bikar anîn da ku serê spermê di nav spermên ku bi derz an perde hatine nixumandin (Wêne 6B) were tesbît kirin, ku destnîşan dike ku girêkên spermê ji hêla materyalê derveyî hucreyê ve hatine girêdan.Madeya agglutînîkirî di serê spermê de (civîna mîna serê jellyfish; Fig. 5B) hate komkirin û ji dûr ve hate berfireh kirin, dema ku bi porteqala acridine (Hêjî. 6C) were xemilandin, di binê mîkroskopiya floransê de xuyangek zer a spehî dide.Ev madde di bin mîkroskopa şopandinê de bi zelalî tê xuyang kirin û wekî girêdanek tê hesibandin.Beşên nîv-tenik (Wêne. 5C) û spermayên ku bi porteqala acridine hatine xêzkirin, girêkên spermê yên ku serên bi qelsî û dûvikên çîçandî tê de hene nîşan didin.
Fotomikrografên cihêreng ku bi awayên cûrbecûr berhevbûna serê spermê û dûvikên pêçandî nîşan didin.(A) Mîkrografa elektronîkî ya veguheztina rengîn a dîjîtal a cross-beş a girêkek spermê ku serê spermê girêk bi navokek du-beş (şîn) û çend beşên flagelar (kesk) nîşan dide.(B) Mîkrografa elektronîkî ya şopandina rengîn a dîjîtal ku komek serikên spermê yên mîna jelyfish-ê (tîrên) ku xuya dikin ku hatine pêçan nîşan dide.(C) Beşa nîv-tenik ku serên spermê yên hevgirtî (tîr) û dûvikên kelandî (tîr) nîşan dide.(D) Mîkrografa spermek ku bi porteqala acridine hatiye xêzkirin ku berhevokên serê spermê (tîrên) û dûvikên pêgirtî (tîran) nîşan dide.Bala xwe bidinê ku maddeyek asê (S) serê spermatozoonê digire.(D) × 1000 mezinkirin.
Bi karanîna mîkroskopiya elektronîkî ya veguheztinê (Hêl. 7A), her weha hate destnîşan kirin ku serê spermê zivirî û navok xwediyê şeklê spiral bûn, wekî ku bi spermê ku bi porteqala acridine hatî xemilandin û bi karanîna mîkroskopiya floransê ve hatî vekolîn hate piştrast kirin (Hêl. 7B).
(A) Mîkrografa elektronîkî ya veguheztina rengîn a dîjîtal û (B) sperma bi porteqalî ya Acridine ku serên pêçandî û girêdana ser û dûvikên spermê (tîrên) nîşan dide.(B) × 1000 mezinkirin.
Vedîtinek balkêş ev e ku spermaya Sharkazi kom dibe ku girêkên filamentous ên mobîl çêbike.Taybetmendiyên van koman dihêlin ku em rola wan a gengaz di hilgirtin û hilanîna spermatozoa di SST de fam bikin.
Piştî zewacê, sperm dikeve nav vajînayê û pêvajoyek hilbijartî ya tund derbas dibe, di encamê de tenê hejmarek sînorkirî ya spermê dikevin SST15,16.Heya nuha, mekanîzmayên ku sperm têkevin û ji SST derdikevin ne diyar in.Di mirîşkan de, spermatozoa li SST-ê ji bo demek dirêjkirî ji 2 heta 10 hefteyan, li gorî celebê têne hilanîn6.Nakokî di derbarê rewşa semenê ya di dema hilanînê de di SST de dimîne.Ma ew di tevgerê de ne an di rihetiyê de ne?Bi gotinek din, hucreyên spermê çawa di nav SST-ê de ewqas dirêj pozîsyona xwe diparêzin?
Forman4 pêşniyar kir ku rûniştina SST û derxistinê dikare di warê tevgera spermê de were ravekirin.Nivîskar hîpotez dikin ku sperm bi avjeniya li hember herikîna şilavê ya ku ji hêla epîteliya SST ve hatî afirandin, pozîsyona xwe diparêze û ku sperm ji SST têne derxistin dema ku leza wan dakeve binê xala ku tê de ji ber kêmbûna enerjiyê dest bi paş ve diçin.Zaniboni5 hebûna aquaporins 2, 3, û 9 di beşa apîkî ya hucreyên epîteliya SST de piştrast kir, ku dibe ku nerasterast piştgirî bide modela hilanîna spermê ya Foreman.Di lêkolîna heyî de, me dît ku hema hema nîvê spermatozoayên Sharkashi di şilava diherike de rheolojiya erênî nîşan dide, û ku spermayên agglutînekirî hejmara spermatozoayên ku reolojiya erênî nîşan didin zêde dikin, her çend agglutinasyon wan hêdî dike.Çawa xaneyên spermê berbi lûleya falopî ya çûkan ve diçin cihê fertilîzasyonê bi tevahî nayê zanîn.Di mammalan de, şilava folîkular spermatozoayan dikşîne.Lêbelê, chemoattractants tê bawer kirin ku spermatozoa rasterast ji dûr ve nêzîk dibin7.Ji ber vê yekê, mekanîzmayên din ji bo veguhestina spermê berpirsiyar in.Hat ragihandin ku şiyana spermê ku li hember şilava lûleya fallopianê ya ku piştî zewacê hatî berdan rêve bibe û biherike, faktorek sereke ye di hedefgirtina spermê di mişkan de.Parker 17 pêşniyar kir ku spermatozoa bi avjenîkirina li hember herika ciliary a di nav çûk û zozanan de zozanan derbas bikin.Her çend ew bi ceribandinî di çûkan de nehatibe xuyang kirin jî, Adolphi18 yekem bû ku dît ku sperma balindeyan encamên erênî dide dema ku bi qatek kaxezek parzûnê di navbera çîçek û şemitokê de qatek zirav a şilê çêdibe.Rheology.Hino û Yanagimachi [19] kompleksa hêkdank-lûl-zikê mişkê di zengila perfuzyonê de danîn û 1 μl înk li îstmusê kirin da ku herikîna şilavê di lûleyên fallopîan de bibînin.Wan di lûleya fallopîan de tevgerek pir çalak a girêkbûn û rihetbûnê dît, ku tê de hemî topên mîkrokê bi domdarî ber bi ampula lûleya fallopî ve diçûn.Nivîskar ji bo bilindkirina spermê û fertilîzasyonê balê dikişînin ser girîngiya herikîna tîrêjê ya tubal ji jêr berbi lûleyên fallopî yên jorîn.Brillard20 ragihand ku di mirîşk û mîran de, spermatozoa bi tevgerek çalak ji deriyê vajînalê, cihê ku lê têne hilanîn, berbi hevbendiya utero-vagînal ve, ku lê têne hilanîn, koç dikin.Lêbelê, ev tevger di navbera girêdana uterovaginal û infundibulum de ne hewce ye ji ber ku spermatozoa bi veguheztina pasîf ve têne veguheztin.Bi zanîna van pêşnîyarên berê û encamên ku di lêkolîna heyî de hatine bidestxistin, meriv dikare were texmîn kirin ku şiyana spermatozoa ku ber bi jor ve biçe (rheolojî) yek ji wan taybetmendiyên ku pêvajoya hilbijartinê li ser bingeha wê ye.Ev derbasbûna spermatozoayan ji vajînayê û ketina wan a CCT-ê ji bo hilanînê diyar dike.Wekî ku Forman4 pêşniyar kir, ev jî dibe ku pêvajoya spermê ku ji bo demek dirêj bikeve nav SST û jîngeha wê hêsan bike û dûv re gava ku leza wan dest bi hêdîbûnê dike derkeve.
Ji aliyek din ve, Matsuzaki û Sasanami 21 pêşniyar kirin ku spermatozoa balindeyan di riyên zayînê yên nêr û mê de ji xewê berbi tevgerê ve diçin.Astengkirina tevgera spermê niştecîh di SST de hate pêşniyar kirin ku dema hilanîna dirêj a spermê û dûv re jî nûbûn piştî derketina SST-ê rave bike.Di bin şert û mercên hîpoksîk de, Matsuzaki et al.1 hilberandin û serbestberdana zêde ya lactate di SST de ragihand, ku dibe sedema astengkirina tevgera spermê niştecîh.Di vê rewşê de, girîngiya rheolojiya spermê di hilbijartin û vegirtina spermatozoa de, û ne di hilanîna wan de tê xuyang kirin.
Nimûneya agglutinasyona spermê ji bo dema hilanîna dirêj a spermê di SST de ravekek maqûl tê hesibandin, ji ber ku ev şêwazek hevpar a ragirtina spermê di mirîşkan de ye2,22,23.Bakst et al.2 dît ku piraniya spermatozoayan bi hevûdu ve girêdidin, berhevokên fasîkular çêdikin, û spermatozoa yekane kêm kêm di quail CCM de têne dîtin.Ji aliyê din ve, Wen et al.24 bêtir spermatozoayên belavbûyî û kêmtir spermatozoa di lumena SST de di mirîşkan de dîtin.Li ser bingeha van çavdêriyan, meriv dikare were texmîn kirin ku meyla agglutînasyona spermê di navbera çûkan û di navbera spermatozoayên di heman ejakulê de cûda dibe.Wekî din, Van Krey et al.9 pêşniyar kir ku veqetandina rasthatî ya spermatozoayên agglutinated berpirsiyariya ketina hêdî ya spermatozoayan di nav lumena lûleya fallopî de ye.Li gorî vê hîpotezê, spermatozoayên bi kapasîteya agglutînasyonê kêmtir divê pêşî ji SST werin derxistin.Di vê çarçoveyê de, şiyana spermatozoayan a aglutînasyonê dibe ku bibe faktorek ku bandorê li encamên pêşbaziya spermê li çûkên qirêj dike.Digel vê yekê, her ku spermê agglutînekirî ji hev veqete, ew qas dirêjtir zayînî tê domandin.
Her çend di gelek lêkolînan de kombûn û kombûna spermatozoayan di nav pakêtan de hatine dîtin2,22,24, ji ber tevliheviya çavdêriya wan a kînematîk di nav SST de ew bi hûrgulî nehatine vegotin.Gelek hewldan hatine kirin ku li ser agglutinasyona spermê di in vitro de lêkolîn bikin.Dema ku têla tenik ji dilopa tovê daliqandî hate rakirin, kombûnek berfireh lê demkî hate dîtin.Ev rê li ber vê yekê vedike ku kulîlkek dirêjkirî ji dilopê derdixe, mêşa seminal teqlîd dike.Ji ber tixûbên 3D û demên zuwakirina dilopê yên kurt, tevahiya blokê zû têk çû9.Di lêkolîna heyî de, bi karanîna mirîşkên Sharkashi û çîpên mîkrofluîdî, me karî diyar bikin ka ev tûf çawa çêdibin û ew çawa tevdigerin.Komên spermê tavilê piştî berhevkirina semenê çêdibin û hate dîtin ku bi spiral tevdigerin, dema ku di herikînê de hebe reolojiya erênî nîşan dide.Wekî din, dema ku bi makroskopî têne dîtin, girêkên spermê hatine dîtin ku li gorî spermatozoayên veqetandî rêzika tevgerê zêde dikin.Ev pêşniyar dike ku agglutinasyona spermê dibe ku berî ketina SST-ê çêbibe û ku hilberîna spermê ji ber stresê wekî ku berê hate pêşniyar kirin bi herêmek piçûk ve ne sînordar e (Tingari û Lake12).Di dema çêbûna tuftê de spermatozoa bi hevdemî avjeniyê dikin heta ku hevdû çêdikin, paşê dûvikên wan li hev dikevin û serê spermatozoon azad dimîne, lê dûv û beşa dûr a spermatozoan bi maddeyek zeliqandî ve li hev dikevin.Ji ber vê yekê, serê azad a ligament ji tevgerê berpirsiyar e, ligamentê mayî dikişîne.Mîkroskopiya elektronîkî ya pişkên spermê serên spermê yên pêvekirî yên ku bi gelek materyalên zeliqandî ve hatine nixumandin nîşan da, û destnîşan kir ku serê spermê di girêkên bêhnvedanê de hatine girêdan, ku dibe ku piştî gihîştina cîhê hilanînê (SST) çêbûbe.
Dema ku smearek spermê bi porteqala acridine were reng kirin, maddeya zeliqandî ya derveyî hucreyê li dora şaneyên spermê di bin mîkroskopa floransent de tê dîtin.Ev madde dihêle ku girêkên spermê bi her rûkal an perçeyên derdorê ve girêdayî bin û bi herikîna derdorê ve biherikin.Ji ber vê yekê, çavdêriyên me rola adhesionê ya spermatozoa di forma pêlên mobîl de nîşan dide.Kapasîteya wan a avjenîkirina li dijî herikînê û girtina li ser rûyên nêzîk dihêle ku sperm dirêjtir di SST de bimîne.
Rothschild25 kamerayek hemocytometrî bikar anî da ku li ser belavkirina herikîn a semenê gayan di dilopek suspensionê de lêkolîn bike, fotomikrografan bi kamerayek hem bi eksê optîka vertîkal û hem jî horizontî ya mîkroskopê digire.Encaman nîşan da ku spermatozoa ber bi rûyê odeyê ve dikşîne.Nivîskar pêşniyar dikin ku dibe ku di navbera sperm û rûxê de têkiliyên hîdrodînamîkî hebin.Vê yekê bihesibîne, ligel şiyana semenê çiçikên Sharkashi ku tîrêjên zeliqandî çêbike, dibe ku îhtîmala ku semen bi dîwarê SST ve girêdayî be û ji bo demên dirêj were hilanîn zêde bike.
Bccetti û Afzeliu26 ragihandin ku glycocalyx spermê ji bo naskirina gamete û aglutinasyonê hewce ye.Forman10 dît ku hîdrolîzkirina bendên α-glycosidic di pêlên glycoprotein-glycolipid de bi dermankirina semenê aviyan bi neuraminidase re dibe sedema kêmbûna zayiniyê bêyî ku bandorê li tevgera spermê bike.Nivîskar pêşniyar dikin ku bandora neuraminidase li ser glycocalyx veqetandina spermê li hevbendiya utero-vajînal xera dike, bi vî rengî zayiniyê kêm dike.Çavdêriyên wan nikarin îhtîmala ku tedawiya neuraminidase dikare naskirina sperm û oocyte kêm bike paşguh bike.Forman û Engel10 dît ku dema ku mirîşk bi semenên ku bi neuraminidase ve têne derman kirin intravagînal têne çandin, zayînî kêm dibe.Lêbelê, IVF bi spermê dermankirî bi neuraminidase re li gorî mirîşkên kontrolê bandor li zayînê nekir.Nivîskar gihîştin wê encamê ku guhertinên di xêzkirina glycoprotein-glycolipid de li dora parzûna spermê şiyana spermê ya ji nû ve fertilîzasyonê kêm dike bi xerakirina veqetandina spermê li hevbenda utero-vajînal, ku di encamê de windabûna spermê zêde dike ji ber leza leza zik-vajînal, lê bandor nake.
Li tirkan Bakst û Bauchan 11 di lûmena SST de vezîkulên piçûk û perçeyên parzûnê dîtin û dîtin ku hin ji van granulan bi parzûna spermê re li hev ketine.Nivîskar pêşniyar dikin ku ev têkilî dibe ku beşdarî hilanîna dirêj-dirêj a spermatozoa di SST de bibin.Lêbelê, lêkolîneran çavkaniya van perçeyan diyar nekirin, ka ew ji hêla şaneyên epîteliya CCT ve têne derxistin, ji hêla pergala hilberîna zilam ve têne hilberandin û derxistin, an ji hêla spermê bixwe ve têne hilberandin.Di heman demê de, ev pirçik ji aglutinasyonê berpirsiyar in.Grützner et al27 ragihand ku hucreyên epîteliya epididymal proteînek taybetî hildiberînin û derdixin ku ji bo damezrandina rêçikên semînal ên yek-porî hewce ye.Nivîskar her weha radigihînin ku belavbûna van koman bi têkiliya proteînên epididymal ve girêdayî ye.Nixon et al28 dît ku adnexa proteînek derdixe, ango osteonectin-a asîdî ya dewlemend-cysteine;SPARC di pêkhatina spermê de di echidnas û platîpusên kurt-kurt de beşdar e.Belavbûna van tîrêjan bi windabûna vê proteînê ve girêdayî ye.
Di lêkolîna heyî de, analîza ultrastruktural bi karanîna mîkroskopiya elektronîkî nîşan da ku spermatozoa bi hejmareke mezin ji materyalê zirav ve girêdayî ye.Tê texmîn kirin ku ev maddeyên hanê berpirsiyar in ji aglutinasyona ku di navbera û li dora serên pêgirtî de diqewime, lê di nav deverên dûvikê de bi hûrguliyên kêmtir.Em texmîn dikin ku ev maddeya agglutînasyonê ji pergala zayînê ya mêran (epididymis an vas deferens) digel semenê tê derxistin, ji ber ku em pir caran di dema ejakulasyonê de semenê ji lîmfê û plazmaya semînal vediqetînin.Hate ragihandin ku her ku spermatozoa zozanan di epididymis û vas deferens re derbas dibin, ew di bin guherînên girêdayî mazinbûnê de ne ku piştgirî didin kapasîteya wan a girêdana proteînan û bidestxistina glycoproteinên girêdayî lemmaya plazmayê.Berdewamiya van proteînan li ser parzûnên spermê yên niştecîh ên di SST de destnîşan dike ku ev proteîn dikarin bandorê li bidestxistina aramiya parzûna spermê bikin 30 û berberiya wan diyar bikin 31 .Ahammad et al32 ragihand ku spermatozoayên ku ji beşên cûrbecûr yên pergala hilberandina nêr (ji testîkan heya vas deferensên dûr) hatine wergirtin di şert û mercên hilanîna şilavê de, bêyî ku germahiya hilanînê hebe, zêdebûnek pêşkeftî ya zindîbûnê nîşan dide, û zindîbûna di mirîşkan de jî di lûleyên fallopîan de piştî çandina sûnî zêde dibe.
Tûçikên spermê mirîşkê yên Sharkashi ji celebên din ên wekî echidnas, platypus, mişkên dar, mişkên ker, û berazên guinea xwedî taybetmendî û fonksiyonên cûda ne.Di mirîşkên şarkasî de, çêbûna girikên spermatozoayan leza avjeniya wan li gorî spermatozoa yekane kêm kir.Lêbelê, van koman rêjeya spermatozoayên rheolojîkî yên erênî zêde kir û şiyana spermatozoayan zêde kir ku xwe di hawîrdorek dînamîkî de aram bike.Bi vî rengî, encamên me pêşniyara berê piştrast dikin ku agglutinasyona spermê di SST de bi hilanîna spermê dirêj-dirêj ve girêdayî ye.Em di heman demê de hîpotez dikin ku meyla spermê ji bo çêkirina tufkan dibe ku rêjeya windabûna spermê di SST de kontrol bike, ku dibe ku encama pêşbaziya spermê biguhezîne.Li gorî vê texmînê, spermatozoayên bi kapasîteya agglutînasyonê ya kêm pêşî SST berdidin, dema ku spermatozoayên bi kapasîteya agglutînasyonê ya bilind piraniya nebatan çêdikin.Çêkirina girêkên spermê yek-porek sûdmend e û bandorê li rêjeya dêûbav-zarok dike, lê mekanîzmayek cûda bikar tîne.Di echidnas û platypusan de, spermatozoa bi hevûdu re paralel têne rêz kirin da ku leza pêşûya tîrêjê zêde bikin.Komên echidnas bi qasî sê caran zûtir ji spermatozoa yekane diçin.Tê bawer kirin ku çêbûna spermên weha di echidnas de adaptasyonek evolutionerî ye ji bo domandina serdestiyê, ji ber ku jin bêhêz in û bi gelemperî bi çend nêr re hevjîn dikin.Ji ber vê yekê, spermatozoayên ji ejakulên cihêreng ji bo fertilîzasyona hêkê bi dijwarî pêşbaziyê dikin.
Spermatozoa agglutînekirî ya mirîşkên şarkasi hêsan e ku bi karanîna mîkroskopa berevajî ya qonaxê, ku bi avantaj tê hesibandin ji ber ku ew dihêle xwendina hêsan a tevgera spermatozoa in vitro were dîtin.Mekanîzmaya ku bi çêkirina tûfê spermê ve hilberîna di mirîşkên şarkasi de pêşve dike jî ji ya ku di hin memikdarên placental de tê dîtin cûda ye ku tevgerên spermê yên hevkar ên wekî mişkên daristanê temsîl dikin, ku hin spermatozoa digihîjin hêkan, alîkariya kesên din ên têkildar dikin ku bigihîjin hêkên xwe û zirarê bidin wan.xwe îspat bike.tevgera altruîst.Xwe-fertilîzasyon 34. Nimûneyek din a tevgerên hevkariyê yên di spermatozoa de di mişkên ker de hat dîtin, ku spermatozoa karîbûn spermatozoayên herî bi genetîkî ve girêdayî nas bikin û li hev bikin û komên hevkar ava bikin da ku leza xwe li gorî spermatozoayên negirêdayî zêde bikin35.
Encamên ku di vê lêkolînê de hatine bidestxistin li dijî teoriya Foman ya hilanîna dirêj-dirêj a spermatozoayan li SWS nabin.Lekolînwan radigihînin ku hucreyên spermê di herikîna şaneyên epîtelyal ên ku SST-ê de vedişêrin ji bo demek dirêj ve diherikin, û piştî demek diyarkirî, depoyên enerjiyê yên şaneyên spermê kêm dibin, di encamê de leza kêm dibe, ku rê dide derxistina maddeyên giraniya molekulî ya piçûk.enerjiya spermatozoayan bi herikîna şilê ji lumena SST Valahiya lûleya fallopîan.Di lêkolîna heyî de, me dît ku nîvê spermê yekane şiyana avjeniyê li hember şilavên diherikin nîşan da, û adhezîbûna wan a di girêkê de şiyana wan a nîşandana rheolojiya erênî zêde kir.Wekî din, daneyên me bi yên Matsuzaki et al.1 yê ku ragihand ku di SST de zêdebûna laktatê dibe ku tevgera spermê niştecîh asteng bike.Lêbelê, encamên me damezrandina lîgamentên tevgerê yên spermê û tevgera wan a rheolojîk di hebûna hawîrdorek dînamîkî de di hundurê mîkrokanal de di hewildanek ji bo ronîkirina tevgera wan di SST de vedibêjin.Lêkolîna pêşerojê dibe ku balê bikişîne ser destnîşankirina pêkhateya kîmyewî û eslê agglutînasyonê, ku bê guman dê ji lêkolîneran re bibe alîkar ku rêyên nû ji bo hilanîna semenê şil û zêdekirina dirêjahiya zayînê pêşve bibin.
Di lêkolînê de 15 şêrkasî nêr stûyê tazî (homozygot serdest; Na Na) 30 hefteyî wek donatorên spermê hatin hilbijartin.Çûk li Farma Çûkên Lêkolînê ya Fakulteya Çandiniyê ya Zanîngeha Aşit, Walîtiya Aşit, Misrê hatin çandin.Çûk di qefesên takekesî de (30 x 40 x 40 cm) hatin bicihkirin, bernameyeke ronahiyê (16 saet ronî û 8 saet tarî) hatin bicihkirin û bi parêzek ku tê de 160 g proteîna xav, 2800 kcal enerjiya ku tê metabolîzekirin, her yek 35 g kalsiyûm tê de, hatin xwarin.5 gram fosfora berdest her kîloyek parêzê.
Li gorî daneyên 36, 37, semen ji mêran bi masajkirina zikê hatî berhev kirin.Di nava 3 rojan de ji 15 mêran bi giştî 45 nimûneyên semenê hatin girtin.Semen (n = 15/roj) tavilê 1:1 (v:v) bi Belsville Poultry Semen Diluent, ku tê de dîfosfat potassium (1,27 g), monosodyum glutamate monohydrate (0,867 g), fructose (0,5 d) sodyûmê bêhîd dihewîne, hate rijandin.acetate (0,43 g), tris(hydroksymethyl)aminomethane (0,195 g), potassium sitrate monohydrate (0,064 g), potassium monophosphate (0,065 g), klorîdê magnesium (0,034 g) û H2O (100 ml, 3mg, pH = 5,3mg, pH 3mg, 5,3mg, pH = 100 ml)Nimûneyên semenê yên dilopkirî pêşî di bin mîkroskopa ronahiyê de hatin lêkolîn kirin da ku qalîteya semenê (şerm) baş were piştrast kirin û dûv re di hemamek avê de di germahiya 37 °C de hate hilanîn heya ku di nav nîv saetê de piştî berhevkirinê were bikar anîn.
Kînematîk û rheolojiya spermatozoayan bi karanîna pergalek amûrên mîkrofluîdîk têne vegotin.Nimûneyên semenê di 1:40 de li Beltsville Avian Semen Diluent, di nav amûrek mîkrofluîdîk de hate barkirin (li jêr binêre), û pîvanên kînetîk bi karanîna pergalek Analîza Semenê ya Komputerkirî (CASA) ku berê ji bo taybetmendiya mîkrofluîdîkê hatî pêşve xistin hate destnîşankirin.li ser tevgera spermatozoa di medyaya şil de (Beşa Endezyariya Mekanîkî, Fakulteya Endezyariyê, Zanîngeha Assiut, Misir).Pêvek dikare li ser dakêşin: http://www.assiutmicrofluidics.com/research/casa39.Leza kevroşkê (VCL, μm/s), leza xêzik (VSL, μm/s) û leza rêjeya navîn (VAP, μm/s) hatin pîvandin.Vîdyoyên spermatozoayan bi karanîna mîkroskopa berevajî ya qonaxa Optika XDS-3 (bi objektîf 40x) ve girêdayî bi kamerayek Tucson ISH1000 ve bi 30 fps ji bo 3 s.Nermalava CASA bikar bînin da ku bi kêmî ve sê deveran û 500 trajektorên spermê her nimûne bixwînin.Vîdyoya tomarkirî bi karanîna CASA-ya xwemalî hate hilberandin.Di pêveka CASA de pênaseya tevgerê li ser bingeha leza avjeniya spermê li gorî rêjeya herikînê ye, û pîvanên din ên wekî tevgera aliyek-alî nagire, ji ber ku ev di herikîna şilavê de pêbawertir tê dîtin.Tevgera rheolojîk wekî tevgera şaneyên spermê li dijî arasteya herikîna şilê tê binavkirin.Spermatozoayên xwedî taybetiyên rheolojîk bi hejmara spermatozoayên herikbar hatin dabeşkirin;spermatozoayên ku di rihetiyê de bûn û spermatozoayên ku bi awayekî konvektîf tevdigerin ji hejmartinê hatin derxistin.
Hemî kîmyewiyên ku hatine bikar anîn ji Elgomhoria Pharmaceuticals (Qahîre, Misir) hatine wergirtin heya ku wekî din neyê destnîşan kirin.Amûr wekî ku ji hêla El-sherry et al ve hatî destnîşan kirin hate çêkirin.40 bi hin guhertinan.Materyalên ku ji bo çêkirina mîkrokanalan têne bikar anîn lewheyên cam (Howard Glass, Worcester, MA), berxwedana neyînî ya SU-8-25 (MicroChem, Newton, CA), alkola diaceton (Sigma Aldrich, Steinheim, Almanya), û polyacetone hene.-184, Dow Corning, Midland, Michigan).Mîkrokanal bi karanîna lîtografiya nerm têne çêkirin.Pêşîn, maskek rûyê parastinê ya zelal a bi sêwirana mîkrokanala xwestî li ser çaperek bi rezîliya bilind hate çap kirin (Prismatic, Qahîre, Huner û Sêwirana Misir û Pasîfîkê, Markham, ON).Mamoste bi karanîna plakên cam wekî substrat hatine çêkirin.Peldan di nav aceton, îsopropanol û ava deionîzekirî de hatin paqij kirin û dûv re bi qatek 20 μm ya SU8-25 ji hêla rijandin (3000 rpm, 1 hûrdem) ve hatin pêçan.Dûv re qatên SU-8 bi nermî hatin zuwa kirin (65°C, 2 hûrdem û 95°C, 10 hûrdem) û ji bo 50 seqeyan li ber tîrêjên UV hatin rûxandin.Piştî vegirtinê di 65°C û 95°C de 1 hûrdem û 4 hûrdeman bişewitînin da ku qatên SU-8 yên eşkerekirî bi hev ve girêdin, li dûv wê jî 6,5 hûrdeman di alkola diacetonê de pêşvebirin.Vaflan bi dijwarî bipijin (200°C ji bo 15 hûrdeman) da ku tebeqeya SU-8 bêtir zexm bike.
PDMS bi tevlîhevkirina monomer û hişkkerê di rêjeya giraniya 10:1 de hate amadekirin, dûv re di desiccatorek valahiyê de hate bêgaz kirin û rijand ser çarçoweya sereke ya SU-8.PDMS di tendûrek (120 ° C, 30 hûrdem) de hate sax kirin, dûv re kanal hatin qut kirin, ji masterê veqetandin, û qut kirin da ku rê bidin ku lûle li ketina û derketina mîkrokanalê werin girêdan.Di dawiyê de, mîkrokanalên PDMS bi domdarî bi slaytên mîkroskopê ve bi karanîna pêvajoyek korona ya portable (Berhemên Electro-Technic, Chicago, IL) wekî ku li cîhek din hatî destnîşan kirin ve hatin girêdan.Mîkrokanala ku di vê lêkolînê de hatî bikar anîn 200 μm × 20 μm (W × H) û 3,6 cm dirêj e.
Herikîna şilavê ya ku ji hêla zexta hîdrostatîk a li hundurê mîkrokanalê ve hatî çêkirin bi domandina asta şilavê ya di depoya ketina hundurê de li jor cûdahiya bilindahiyê Δh39 di depoya derketinê de tê bidestxistin (Hêjî. 1).
li cihê ku f hevbera kêşanê ye, ji bo herikîna lamînar a di kanalek çargoşe de wekî f = C/Re tê pênase kirin, ku C li gorî rêjeya dîmenê ya kanalê domdar e, L dirêjahiya mîkrokanalê ye, Vav leza navîn a di hundurê mîkrokanê de ye, Dh pîvana hîdrolîk a kanalê ye, g - lezkirina gravê.Bi karanîna vê hevkêşeyê, leza kanala navîn dikare bi karanîna hevkêşeya jêrîn were hesibandin: