Javascript учурда браузериңизде өчүрүлгөн. Бул веб-сайттын кээ бир функциялары JavaScript өчүрүлгөндө иштебейт.
Өзүңүздүн конкреттүү маалыматыңыз жана кызыктырган дары-дармекиңиз менен катталыңыз, биз сиз берген маалыматты биздин кеңири маалымат базасындагы макалалар менен дал келтиребиз жана дароо PDF көчүрмөсүн электрондук почта аркылуу жөнөтөбүз.
作者 Stella S, Vitale SR, Martorana F, Massimino M, Pavone G, Lanzafame K, Bianca S, Barone C, Gorgone C, Fichera M, Manzella L
Стефания Стелла, 1,2 Сильвия Рита Витале, 1,2 Федерика Марторана, 1,2 Микеле Массимино, 1,2 Джулиана Павоне, 3 Катя Ланзафаме, 3 Себастьяно Бианка, 4 Чиара Бароне, 5 Кристина Горгоне, 6 Марко Фичералина12, Эксперт Фичералиал12, Медицина, Катания университети, Катания, 95123, Италия;2 Эксперименталдык онкология жана гематология борбору, AOU Policlinico “G.Rodolico – San Marco”, Катания, 95123, Италия;3 Медициналык онкология, АОУ Поликлинико «Г.Родолико – Сан-Марко”, Катания, 95123, Италия;4 Медициналык генетика, ARNAS Garibaldi, Катания, 95123, Италия;5 Medicine Genetics, ASP, Syracuse, 96100, Италия;6 Биомедициналык жана биотехнологиялык илимдер бөлүмү, Катания университети, Медициналык генетика, Катания, Италия, 95123;7Oasi изилдөө институту-IRCCS, Троина, 94018, Италия Байланыш: Стефания Стелла, тел +39 095 378 1946, электрондук почта [email protected];[email protected] Максаты: BRCA1 жана BRCA2деги урук линиясынын мутациялары жана аныкталган эмчек рагы (BC), энелик без (OC) жана башка рактын өмүр бою коркунучу менен байланышкан. BRCA генин тестирлөө жеке тобокелдикти баалоо үчүн, ошондой эле дени сак ташуучуларда алдын алуу ыкмаларын табуу жана рак менен ооругандарды дарылоо ыкмаларын тандоо үчүн ачкыч болуп саналат. Сицилиянын үй-бүлөлөрүндө BRCA патогендик варианттары бар, өзгөчө Сицилиянын чыгышындагы популяцияларды бутага алган изилдөөлөр жетишсиз. Биздин изилдөөбүздүн максаты Сицилиянын чыгышындагы BC пациенттеринин когортундагы BRCA патогендик урук линиясынын өзгөрүшүнүн таралышын жана таралышын изилдөө жана алардын BC өзгөчөлүгү менен байланышын баалоо болду. ЖЫЙЫНТЫКТАР: Жалпысынан, 35 бейтапта (9%) BRCA патогендик варианты бар, BRCA1де 17 (49%) жана BRCA2де 18 (51%). BRCA1 өзгөрүүлөрү үч эсе терс BC бейтаптарында кеңири таралган, ал эми BRCA2 мутациялары luminal, ал эми BRCA2 мутациялары көбүрөөк кездешет. жана пролиферативдик индекс.Тыянактар: Биздин жыйынтыктар чыгыш Сицилиядан келген BC бейтаптарындагы BRCA мутациялык абалына сереп салып берет жана тукум куучулук BC.Overall менен ооругандарды аныктоодо NGS анализинин ролун тастыктайт.
Эмчек рагы (BC) дүйнө жүзү боюнча эң кеңири таралган залалдуу оору жана аялдардагы эң өлүмгө алып келген рак болуп саналат. BC прогнозун жана клиникалык жүрүм-турумун аныктаган биологиялык өзгөчөлүктөр убакыттын өтүшү менен кеңири изилденген жана жарым-жартылай ачыкталган. Чындыгында, учурда бир нече суррогат маркерлер БКны ар кандай молекулярдык субтиптерге классификациялоо үчүн колдонулат. Алар адамдык өсүү факторлору (рецепторлор) жана эстроген (рецепторлор) болуп саналат. же 2 (HER2) күчөтүү, пролиферация индекси Ki-67 жана шишик даражасы (G).2 Бул өзгөрмөлөрдүн айкалышы төмөнкү BC категорияларын аныктады: 1) ER жана/же PgR экспрессиясын көрсөткөн Luminal шишиктер, BCs 75% түзөт. Бул шишик андан ары Luminal A болуп бөлүндү, качан Luminal жана BHER260 төмөн болгондо, терс 20%га барабар же андан жогору болгон жана пролиферация индексине карабастан HER2 күчөшү болгон учурда;2) ER жана PgR терс, бирок HER2 күчөшүн көрсөткөн HER2+ шишиктери. Бул топ бардык эмчек шишиктеринин 10% түзөт;3) ER жана PgR экспрессиясын жана HER2 күчөшүн көрсөтпөгөн Triple-терс эмчек рагы (TNBC), эмчек рактарынын болжол менен 15% түзөт.2-4
Бул BC түрчөлөрүнүн арасында шишик даражасы жана пролиферация индекси шишиктин агрессивдүүлүгү жана прогнозу менен түздөн-түз жана өз алдынча байланышкан кесилиштүү биомаркерлерди билдирет.5,6
Жогоруда айтылган биологиялык өзгөчөлүктөрдөн тышкары, акыркы бир нече жыл ичинде БКнын өнүгүшүнө алып келген тукум кууган генетикалык өзгөрүүлөрдүн ролу барган сайын маанилүү болуп калды.7 Эмчектин 10 шишигинин 1 спецификалык гендердеги урук линиясынын өзгөрүшүнөн улам тукум куушат.8 180,000ден ашык аялдарды камтыган эки чоң эпидемиологиялык изилдөө. BRCA2, CHK2, PALB2, RAD51C жана RAD51D) негизинен тукум куума BC үчүн жооптуу. Бул гендердин арасында BRCA1 жана BRCA2 (мындан ары BRCA1/2) эмчек шишиктеринин өнүгүшү менен эң күчтүү корреляцияны көрсөттү. энелик без, простата, уйку бези, колоректалдык жана меланома, анын ичинде.
Белгилей кетчү нерсе, акыркы басылма BC коркунучу PV түрүнөн көз каранды деп болжолдойт. Чындыгында, патогендик кыскартуучу варианттарга салыштырмалуу, жаркыраган missense варианттары, айрыкча BRCA1 генинде, BC коркунучунун төмөндөшү менен байланышкан, айрыкча улгайган аялдарда.15
BRCA1 же BRCA2 PV болушу ар кандай биологиялык жана клиникопатологиялык өзгөчөлүктөр менен байланышкан.16,17 BRCA1 менен байланышкан BCs клиникалык жактан агрессивдүү, начар дифференцияланган жана жогорку пролиферативдик болуп саналат. Бул шишиктер адатта үч эсе терс жана эрте башталышы менен мүнөздөлөт. жана өзгөрүлмө пролиферативдик индекстер. Бул шишиктер В люменинде көбүрөөк кездешет жана көбүнчө улгайган кишилерде кездешет.16-18 Баса, BRCA1 жана BRCA2 мутациялары атайын дарылоого, анын ичинде платина туздарына жана поли(ADP-рибоза) полимераза ингибиторлору (PARPi) сыяктуу максаттуу дарыларга сезгичтикти жогорулатат.19,
Акыркы бир нече жыл ичинде, кийинки муундун секвенирлөөнүн (NGS) клиникалык практикада ишке ашырылышы BC бейтаптарынын санынын көбөйүшүнө рак сезгичтик синдромдорунун, анын ичинде BRCA1/2.21 менен бирге, үй-бүлөлүк тарыхка, демографиялык жана клиникалык патологиялык мүнөздөмөлөрдү аныктоонун так критерийлерине негизделген аныктамаларга молекулярдык тесттен өтүүгө мүмкүндүк берди. Бул контекстте BRCA1/2 скринингинде географиялык региондор боюнча айырмачылыктарды көрсөткөн далилдер топтолууда.24–27 Сицилиянын батышында BC когорты жөнүндө отчеттор бар болсо да, Сицилиянын чыгыш калкында BRCA1/2 скрининги боюнча азыраак маалыматтар бар.28,29
Биз бул жерде Сицилиянын чыгышындагы BC бейтаптарындагы урук линиясынын BRCA1/2 скринингинин натыйжаларын сүрөттөп, BRCA1 же BRCA2 мутацияларынын болушун бул шишиктердин негизги клиникопатологиялык өзгөчөлүктөрү менен байланыштырабыз.
Катаниядагы Сан-Марко поликлинико госпиталындагы "Эксперименталдык онкология жана гематология борборунда" ретроспективдүү изилдөө жүргүзүлдү. 2017-жылдын январынан 2021-жылдын мартына чейин эмчек жана энелик бези, меланома, уйку бези же простата безинин рак оорусуна чалдыккан жалпы 455 бейтап биздин тестирлөөчү геностук диагностикага жөнөтүлгөн. анын изилдөөсү Хельсинки Декларациясына ылайык жүргүзүлдү жана бардык катышуучулар молекулярдык анализге чейин жазуу жүзүндөгү макулдук беришти.
BC гистологиялык жана биологиялык мүнөздөмөлөрү (ER, PgR, HER2 статусу, Ki-67, жана класс) негизги биопсия же хирургиялык үлгүлөр боюнча бааланган, бир гана агрессивдүү шишик компоненттерин эске алуу менен, BCs төмөнкүдөй классификацияланды: luminal A (ER+ жана/же PgR+, HER2-, Ki-%R, HER2-, Ki-+0, PgR+, 60%, HER2-, Ki-67≥20%), luminal B-HER2+ (ER жана/же PgR+, HER2+), HER2+ (ER жана PgR-, HER2+) же үч эсе терс (ER жана PgR-, HER2-).
BRCA1 жана BRCA2 мутациясынын абалын баалоодон мурун, онкологду, генетикти жана психологду камтыган мультидисциплинардык команда BRCA1 жана/же BRCA1 бар экендигин аныктоо үчүн ар бир пациентке шишик генетикасы боюнча консультация өткөрдү.же BRCA2 генинде PV коркунучу жогору болгон адамдар. Пациентти тандоо Италиянын медициналык онкология коомунун (AIOM) көрсөтмөлөрүнө жана жергиликтүү Сицилия сунуштарына ылайык аткарылган.(ii) BC менен эркектер;(iii) BC жана OC барлар;(iv) BC <36 жашта, TNBC <60 жашта, же эки тараптуу BC <50 жашта аялдар;(v) BC <50 жыл жана эң аз дегенде бир биринчи даражадагы тууганы: (а) BC < 50 жыл;(б) ар кандай курактагы муциндүү эмес жана чек арасыз ОК;(в) эки тараптуу BC;(г) эркек BC;(е) уйку безинин рагы;(е) простата безинин рагы;(vi) эки же андан ашык жеке тарыхы BC > 50 жыл жана үй-бүлөлүк тарыхы BC, OC же уйку безинин рагы бири-бирине биринчи даражадагы туугандар (анын ичинде ал биринчи даражадагы тууганы болгон туугандары);(vii) ОКтун жеке тарыхы жана жок дегенде бир биринчи даражадагы тууганы: (а) BC <50 жыл;(б) УОК;(в) эки тараптуу BC;(г) эркек BC;(vii) жогорку даражадагы сероздук ОК бар аял.
Ар бир пациенттен 20 мл перифериялык кан үлгүсү алынды жана EDTA түтүкчөлөрүнө (BD Biosciences) чогултулду. Геномдук ДНК QIAsymphony DSP DNA Midi изоляциялык комплектинин (QIAGEN, Хилден, Италия) жардамы менен 0,7 мл толук кан үлгүлөрүнөн бөлүнүп алынган. , Waltham, MA, USA) Сандык аныктоону жүргүзүңүз.Максатты байытуу жана китепкананы даярдоо Oncomine™ BRCA Research Assay Chef тарабынан аткарылып, Ion AmpliSeq™ Chef Reagents DL8 комплектине жүктөөгө даяр, өндүрүүчүнүн көрсөтмөлөрүнө ылайык китепкананы автоматташтырылган даярдоо үчүн. Комплект бардык BRCA1 жана бардык BRCA1 жана изилдөө үчүн колдонула турган эки мультиплекстүү ПТР праймер бассейнинен турат (NMCA_003N) (NMCA_003) гендер. Кыскача, ар бир суюлтулган үлгүдөгү ДНКнын 15 мкл (10 нг) китепкананы даярдоо үчүн штрих-коддуу пластинкаларга кошулду жана бардык реагенттер жана сарпталуучу материалдар Ion Chef™ аспабына жүктөлдү. Андан соң Ion Chef™ аспабында автоматташтырылган китепкананы даярдоо жана штрих-коддуу үлгү китепканасын бириктирүү аткарылды. tific, Waltham, MA, USA). Fisher Scientific).Маалыматтарды талдоо Amplicon Suite (SmartSeq srl) жана Ion Reporter Software тарабынан аткарылган.
Бардык вариант номенклатурасы онлайн режиминде жеткиликтүү (HGVS, http://www.hgvs.org/mutnomen) Адам геномунун өзгөрүү консорциумунун учурдагы көрсөтмөлөрүнө баш ийди. BRCA1/2 варианттарынын клиникалык мааниси Эл аралык ENIGMA консорциумунун классификациясын колдонуу менен аныкталган (Evidence-Based Germensline Network for Interpreting All Consultium.cons/ ARUP, BRCAEXCHANGE, ClinVar, IARC_LOVD жана UMD сыяктуу ар кандай маалымат базаларын камтыйт. Классификация тобокелдиктин беш категориясын камтыйт: зыянсыз (I категория), ыктымалдуу зыянсыз (II категория), белгисиз маанидеги вариант (VUS, III категория), ыктымал патогендик (IV категория), ошондой эле патогендик V категориядагы протеиндик функцияга, ошондой эле патогендик V категориясынын протеиндик структурасына таасири. 30 маалымат базасына жетүү менен.32
Ар бир VUSга потенциалдуу клиникалык маани берүү үчүн төмөнкү эсептөөчү протеинди болжолдоо алгоритмдери колдонулган: MUTATION TASTER, 33 PROVEAN-SIFT (http://provean.jcvi.org/index.php), POLYPHEN-2 (http:// /genetics.bwh.harvard.edu//genetics.bwh.harvard.edu/http://pph2hd.Gv. u/agvgd_input.php).1 жана 2-класс катары классификацияланган варианттар жапайы тип деп эсептелген.
Сэнгер секвенциясы ар бир патогендик варианттын бар экендигин тастыктады. Кыскача айтканда, BRCA1 жана BRCA2 ген шилтеме ырааттуулугун колдонуу менен ар бир табылган вариант үчүн атайын праймерлердин жуптары иштелип чыккан (NG_005905.2, NM_007294.3 жана NG_012772.3, NM_030 тарабынан аткарылган, PC5 тарабынан сыйланган). гер секвенирование.
BRCA1/2 гени үчүн терс сыналган бейтаптар өндүрүүчүнүн көрсөтмөлөрүнө ылайык, чоң геномдук кайра түзүмдөрдүн (LGR) бар экендигин баалоо үчүн мультиплекстик лигацияга көз каранды зондду күчөтүү (MLPA) менен сыналган. Кыскача айтканда, ДНК үлгүлөрү денатуратталган жана 60 BRCA1 жана BRCA2 генине болжолдуу түрдө ар бир спецификалык нуклеонду аныктоо үчүн колдонулат. ПЦР ампликондорунун уникалдуу топтомунан турган long.Probe күчөтүү продуктулары, андан кийин капиллярдык электрофорез жана Cofalyser.Net программалык камсыздоосу тарабынан тиешелүү партияга тиешелүү Cofalyser таблицалары (www.mrcholland.com) менен бирге талдоого алынган.
Тандалган клиникопатологиялык өзгөрмөлөр (гистологиялык даража жана Ki-67% пролиферация индекси) BRCA1/2 PV бар болушу менен байланышкан, Prism программалык камсыздоосу v. 8.4 Фишердин так тестинин жардамы менен эсептелген, p-бааны <0.05 маанилүү деп эсептейт.
2017-жылдын январынан 2021-жылдын мартына чейин 455 бейтап урук линиясынын BRCA1/2 мутациясына скринингден өткөн. Мутация тести Поликлинико ооруканасынын Эксперименталдык онкология жана гематология борборунда жүргүзүлгөн. Сицилия көрсөтмөсүнө ылайык (http://www.gurs.regione. Gennaio 2020), Родоликосу Катания – Сан-Марко” жалпысынан 389 бейтап эмчек рагы, 37 энелик бездин рагы, 16 уйку безинин рагы, 8 простата рагы жана 5 меланома болгон.Оорулуулардын рак түрүнө жараша бөлүштүрүлүшү жана анализдин натыйжалары 1-сүрөттө көрсөтүлгөн.
1-сүрөттө изилдөөгө жалпы көз карашты көрсөткөн агым диаграммасы көрсөтүлгөн. Эмчек, меланома, уйку бези, простата же жумуртка безинин шишиктери бар бейтаптар BRCA1 жана BRCA2 гендериндеги мутацияларга сыналган.
Аббревиатуралар: PVs, патогендик вариант;VUS, белгисиз маанидеги вариант;WT, жапайы типтеги BRCA1/2 ырааттуулугу.
Биз изилдөөлөрүбүздү көкүрөк рагы когорттарына тандадык. Бейтаптардын орточо жашы 49 жашта (диапазон 23-89) жана негизинен аялдар (n=376 же 97%) болгон.
Бул субъекттердин 64 (17%) BRCA1/2 мутацияга ээ болгон жана баары аял болгон. Отуз бешинде (9%) PV жана 29да (7,5%) VUS бар. BRCA2де (1 жана 2-сүрөттөр). LGR MLPA анализинде болгон эмес.
Сүрөт 2. эмчек рагы менен ооруган 389 бейтаптын BRCA1 жана BRCA2 мутацияларынын анализи. (A) 389 эмчек рагы менен ооруган бейтаптарда патогендик варианттардын (PV) (кызыл), белгисиз маанидеги варианттарынын (VUS) (кызгылт сары) жана WT (көк) бөлүштүрүлүшү;(B) 389 эмчек рагы менен ооруган бейтаптар Отуз беш (9%) BRCA1 / 2 патогендик Variantlar (PVs) болгон .Алардын арасында, 17 (48,6%) BRCA1 PV алып жүрүүчүлөр (кочкул кызыл) жана 18 (51,4%) BRCA2 (ачык кызыл) болгон;(C) 389 субъекттердин 29 (7,5%) VUS, 5 (17,2%) BRCA1 гени (кара кызгылт сары) жана 24 (82,8%) BRCA2 гени (ачык кызгылт сары) алып жүрүшкөн.
Аббревиатуралар: PVs, патогендик вариант;VUS, белгисиз маанидеги вариант;WT, жапайы типтеги BRCA1/2 ырааттуулугу.
Биз кийинки BRCA1 / 2 PV.The бөлүштүрүү 2 (5,7%) luminal A, 15 (42,9%) luminal B, 3 (8,6%) luminal B-HER2+, 2 (5,7%) HER2+ жана 13 (5,7%), HER2+ жана 13 (37,7%) камтыган PV.The бөлүштүрүү менен ооруган бейтаптарда BC молекулярдык түрчөлөрүнүн таралышын изилдеген (37,5%) HER2+ жана 13 (37,32%), TCA15 mon. 9,4%) luminal B BC, 2 (11,8%) HER2+ оорусу жана 10 (58,8%) TNBC. BRCA1 мутациялары жок шишиктер luminal A же luminal B-HER2+ болгон (3-сүрөт). B-HER2+, 3 (16,7%) TNBC жана 2 (11,1%) luminal A (Figure 3) болгон .No HER2+ шишиктер бул группада болгон. Ошентип, BRCA1 мутациялары TNBC бейтаптарында кеңири таралган, ал эми BRCA2 өзгөртүүлөр люмен B адамдарда басымдуулук кылат.
Figure 3 BRCA1 жана BRCA2 патогендик варианттары бар бейтаптарда эмчек рагы субтиптеринин таралышы. BRCA1- (кочкул кызыл) жана BRCA2- (ачык кызыл) PVs молекулярдык түрчөлөрүнүн арасында бөлүштүрүлүшүн көрсөткөн гистограммалар. Ар бир кутучанын ичинде билдирилген сандар BRCA21 жана эмчек рагы менен ооругандардын пайызын билдирет.
Аббревиатуралар: PVs, патогендик вариант;HER2+, адамдын эпидермалдык өсүү фактору рецептор 2 оң;TNBC, үч терс эмчек рагы.
Кийинчерээк, биз BRCA1 жана BRCA2 PVтердин түрүн жана генинин локализациясын бааладык. BRCA1 PVде биз 7 бир нуклеотиддик вариантты (SNV), 6 жок кылууну, 3 кайталоону жана 1 киргизүүнү байкадык. Бир гана мутация (c.5522delG) BRCA15тин эң кеңири таралган жаңы ачылышын билдирет. delCTAAT.Бул өзгөртүү BRCA1 15 экзонундагы беш нуклеотиддин (CTAAT) жок кылынышын камтыйт, натыйжада 1679-кодондо тирозин аминокислотасынын лейцин менен алмаштырылышына алып келет, жана кодондун алдын ала альтернативалуу токтотуу кодону менен котормо рамкасынын алмашуусунан улам эртерээк протеиндин кыскарышына алып келет. сплайс сайтынын консенсус аймагы (c.4357+1G>T) (1-таблица).
BRCA2 PV боюнча, биз 6 жок кылууну, 6 SNV жана 2 кайталоону байкадык. Табылган өзгөрүүлөрдүн бири да жаңы эмес. Биздин популяцияда үч мутация кайталанган, c.428dup жана c.8487+1G>A 3 субъектте байкалган, андан кийин c.5851_5854delAG4 учурларында c.5851_5854delAG2 кайталанган. BRCA2нин 5-экзонунда, кесилген, функционалдык эмес протеинди коддоо болжолдонууда. c.8487+1G>A мутация BRCA2 интрон 19нун интрондук аймагында пайда болот (± 1,2) жана сплайсинг консенсус ырааттуулугуна таасирин тийгизет, натыйжада c.8487+1G>A мутациясы сплайсингдин ырааттуулугуна таасирин тийгизет, натыйжада c.8487 абнормалуу сплайсация же abnormalic патогенге алып келет. BRCA2 генинин 10 коддоочу экзонундагы 5851ден 5854кө чейинки нуклеотиддердин позицияларынан 4-нуклеотиддин жок кылынышына байланыштуу жана болжолдонгон альтернативалуу токтотуу кодону (p.S1951WfsTer) менен котормонун кадрдык жылышына алып келет). 4 Биринчи мутация BRCA2 7 экзонундагы аденозинди (A) гуанинди (G) камтыган нуклеотид менен алмаштырууну камтыйт, натыйжада валин 211-кодондо изолейцинге өзгөрөт, изолейцин Амино-кислота өтө окшош касиеттерге ээ аминокислота. BRCA2 коддоочу гендин 13 боюнча. c.7008-2A>T өзгөрүүсү ар кандай узундуктагы бир нече транскрипттерди жаратышы мүмкүн. Мындан тышкары, BRCA2 PVs тобунда 18 өзгөрүүнүн 4ү (22,2%) интрондук болгон.
Биз андан кийин BRCA1 / 2 зыяндуу мутацияларды функционалдык домендерде жана протеин-байланыштуу аймактарда картага түшүрдүк (4-сүрөт). BRCA1 генинде, PV 50% эмчек рагы кластердик аймакта (BCCR) жайгашкан, ал эми мутациялардын 22% энелик бездин рагы кластердик аймагында (OCCR) жайгашкан (сүрөт. PVBRCA3 варианты 4A5-жылы). CR аймак жана мутациялардын 42,8% OCCR (сүрөт. 4B) жайгашкан .Кийинки, биз BRCA1 жана BRCA2 белок домендердин ичинде PV жайгашкан баа.For BRCA1 белок, биз укурук үч PVs табылган жана орогуч катушкалар домендерди, жана эки мутациялар BRCTA доменине (сүрөт. BRCA2 үчүн кайталап, протеиндер үчүн). 3 intronic жана 3 экзондук өзгөрүүлөр oligo / олигосахарид-байланыштуу (OB) жана мунара (T) домендерди (Figure 4B) аныкталган.
4-сүрөт BRCA1 жана BRCA2 белокторунун схемалык өкүлчүлүгү жана патогендик варианттардын локализациясы. Бул көрсөткүч эмчек рагы менен ооруган бейтаптарда BRCA1 (A) жана BRCA2 (B) патогендик варианттарынын бөлүштүрүлүшүн көрсөтөт. Экзондук мутациялар көк түстө, ал эми интрондук варианттар кызгылт сары түстө көрсөтүлгөн. Бардын бийиктиги учурлардын санын жана алардын BRCABR белоктун доменин билдирет. протеин цикл доменин (RING) жана ядролук локализациянын ырааттуулугун (NLS), спиралдоо доменин, SQ/TQ кластердик доменин (SCD) жана BRCA1 C-терминал доменин (BRCT) камтыйт. (B) BRCA2 протеининде сегиз BRC кайталануучу, ДНКны байланыштыруучу домен бар, спираль домени (Helicalsa-байланыштуу домен), үч бурчтуу домен (Helcclesa-binolide) мунара домени (T) жана C тарабында NLS. Эмчек рагы кластердик аймагы (BCCR) жана энелик бездин рагы кластердик аймагы (OCCR) деп аталган аймактар ​​ылдыйда көрсөтүлгөн.*Токтоочу кодондорду аныктаган мутацияларды билдирет.
Биз андан кийин BRCA1 / 2 PV.Complete клиникалык жазуулар 181 BRCA1 / 2-терс бейтаптар (эмес алып жүрүүчүлөр) жана бардык ташыгычтар (n = 35) үчүн жеткиликтүү болгон болушу менен байланышта болушу мүмкүн BC clicopathological өзгөчөлүктөрүн изилдеп .Шиктер таралышынын ылдамдыгы жана класстын ортосунда корреляция бар болчу.
Биз Ki-67нин бөлүштүрүлүшүн биздин когорттун медианасынын негизинде эсептедик (25%, диапазону <10-90%). Ki-67 < 25% болгон субъекттер "төмөн Ki-67" деп аныкталды, ал эми ≥ 25% маанилери бар адамдар "жогорку Ki-67" деп табылды. ташыгычтар (сүр. 5А).
5-сүрөт Ki-67нин BRCA1 жана BRCA2 PV бар жана аларсыз эмчек рагы менен ооруган аялдарда класстын бөлүштүрүлүшү менен корреляциясы. (A) BRCA1 (18) же BRCA2 (17) PV бейтаптарына каршы 181 BC бейтаптарындагы Ki-67 орточо маанилерин көрсөткөн кутуча графиги. BRCA1 жана BRCA2 мутациясынын статусуна ылайык гистологиялык класс топтору (G2 жана G3) (WT субъекттери, BRCA1 жана BRCA2 PVs алып жүрүүчүлөр).
Ошо сыяктуу эле, биз шишик даражасы BRCA1 / 2 PV катышуусу менен байланышы бар-жоктугун карап чыктык. G1 BC биздин популяцияда жок болгондуктан, биз бейтаптарды эки топко бөлдүк (G2 же G3). Ki-67 натыйжаларына ылайык, талдоо шишик классы менен BRCA1 пропорционалдуу GBR1 автомобилинин жогорку мутациялары менен салыштырганда статистикалык жактан маанилүү корреляцияны аныктады. riers (p<0,005) (Figure 5B).
ДНК секвенирлөө технологиясынын жетишкендиктери BRCA1/2 генетикалык тестирлөөдө болуп көрбөгөндөй жетишкендиктерге жол ачты, бул рактын үй-бүлөлүк тарыхы бар бейтаптар үчүн өтө маанилүү. Бүгүнкү күнгө чейин, болжол менен 20.000 BRCA1/2 варианттары аныкталып, Американын Медициналык генетика коомунун 35 жана EN5CA3BR мутация системасы боюнча классификацияланган. географиялык аймактарда кеңири өзгөрүп турат.37 Италиянын ичинде BRCA1/2 PV көрсөткүчү 8%дан 37%га чейин өзгөрүп, өлкө ичиндеги ар түрдүүлүктү көрсөткөн.38,39 Калкынын саны дээрлик 5 миллионго жеткен Сицилия Италияда калктын саны боюнча бешинчи ири аймак. аралдын бир бөлүгү.
Биздин изилдөөбүз чыгыш Сицилияда BC бейтаптарындагы BRCA1/2 PV оорусуна байланыштуу алгачкы баяндамалардын бири.
BC 389 бейтапты сынап жатканда, 9% BRCA1/2 PVs алып, BRCA1 жана BRCA2 ортосунда бирдей бөлүштүрүлгөн. Бул жыйынтыктар италиялык калкта мурда билдирилгендерге дал келет.28 Кызыктуусу, биздин топтун 3% (13/389) эркектер болгон. мутация коркунучу.Бирок, бул адамдардын эч кимиси BRCA1/2 PV иштеп чыккан, ошондуктан алар PALB2, RAD51C жана D сыяктуу азыраак таралган мутациялардын болушун жокко чыгаруу үчүн андан аркы молекулярдык анализге талапкер болушкан. Белгисиз маанидеги варианттар BRCA2 VUS предмети болгон субъекттердин 7% ында алынган.
BC MOLecular субтитрлерин талашып-тартышканда, Мутант аялдарга бөлүштүрүлө баштасак, биз TNBC жана BRCA1 PV ортосундагы белгилүү бирикмелерди (58,8%) менен бөлүштү.
Андан кийин биз BRCA1/2 PV түрүнө жана жайгашкан жерине көңүл бурабыз. Биздин когортто эң кеңири таралган BRCA1 PV c.5035_5039delCTAAT болгон. Бирок Incorvaia et although.Сицилия когортунда бул вариантты сүрөттөгөн эмес, башка авторлор аны BRCA1 PV.34 урук линиясы катары билдиришкен. Биздин когортада бир нече BRCA1 PV табылган – мис. c.181T>G, c.514del, c.3253dupA жана c.5266dupC – бул эки мутация байкалган, SBR218. >G жана c.5266dupC) көбүнчө Чыгыш жана Борбордук Европадагы (Польша, Чехия), Словениялык, Австриялык, Венгриялык, Беларусь жана Германиядагы Ашкенази жүйүттөрүндө кездешет, 44,45 жана Америка Кошмо Штаттары менен Аргентинада жакында эле "кайталануучу урук линиясынын варианты" катары аныкталган. Палермо жана Мессинадагы Сицилия. Кызыктуусу, ал тургай Incorvaia et al.Катаниядагы кээ бир үй-бүлөлөрдө c.3253dupA варианты табылган.28 Эң өкүлү BRCA2 PVs болуп c.428dup, c.5851_5854delAGTT жана c.8487+1G>A интрондук варианты болуп саналат, алар Палермодогу бейтапта 28 c.428558 үй-бүлөдө байкалган. Сицилиянын түндүк-батышында, негизинен Трапани жана Палермо аймактарында, ал эми c.5851_5854delAGTT PV Сицилиянын түндүк-батышындагы үй чарбаларында байкалган. 8487+1G>A варианты Мессина, Палермо жана Кальтаниссеттадан келген субъекттерде көбүрөөк кездешкен.28 Rebbeck et al.мурда Колумбиядагы c.5851_5854delAGTT өзгөрүүсүн сүрөттөгөн.37 Дагы бир BRCA2 PV, c.631+1G>A, Сицилиядан (Агригенто, Сиракуза жана Рагуса) келген BC жана OC бейтаптарында табылган.28 Баса, биз эки BRCA2 жана c.-1G>08 вариантынын (BRCA2 c.-3A06) жанаша жашоосун байкадык. 34,46 Бул BRCA2 uble мутациялары чындыгында италиялык аймакта көп байкалат жана мессенжер РНКнын сплайсингине таасир этүүчү жана BRCA2 протеининин иштебей калышына алып келген мөөнөтүнөн мурда токтотуу кодондорун киргизери аныкталды.47,48
Биз ошондой эле протеиндик домендердин жана гендердин болжолдуу OCCR жана BCCR аймактарында BRCA1 жана BRCA2 PVs картасын түздүк. Бул аймактар ​​Реббек et al.тиешелүүлүгүнө жараша жумурткалык жана эмчек рагын өнүктүрүү үчүн коркунучтуу аймактар ​​катары.49 Бирок, урук линиясынын варианттарынын жайгашкан жери менен эмчек же энелик бездин рагы коркунучунун ортосундагы байланышка байланыштуу далилдер талаштуу бойдон калууда.28,50-52 Биздин популяцияда BRCA1 PVs негизинен BCCR чөлкөмүндө жайгашкан, ал эми BRCA2 PVHге чейинки аймактарда табылган жок. болжолдуу OCCR жана BCCR аймактарынын жана BC өзгөчөлүктөрүнүн ортосундагы байланыш. Бул BRCA1/2 мутациялары бар бейтаптардын чектелген санына байланыштуу болушу мүмкүн. Белок доменинин көз карашынан алганда, BRCA1 PVs бүт протеин боюнча бөлүштүрүлөт жана BRCA2 өзгөртүүлөрү артыкчылыктуу BRC кайталоо доменинде кездешет.
Акыр-аягы, биз BC клиникопатологиялык өзгөчөлүктөрүн BRCA1/2 PV менен корреляцияладык. Бейтаптардын чектелген санына байланыштуу биз Ki-67 менен шишик даражасынын ортосунда олуттуу корреляцияны гана таптык. Ki-67ди баалоо жана чечмелөө бир аз талаштуу бойдон калса да, пролиферациянын жогорку деңгээли оорунун кайталануу тобокелдигинин көбөйүшү менен байланышта экени анык. жогорку" жана "төмөн" Ki-67 20% түзөт. Бирок, бул босого биздин BRCA1/2 мутациясынын бейтап популяциясына тиешелүү эмес, анын орточо Ki-67 мааниси 25%. Ки-67нин жогорку көрсөткүчтөрүнүн бул тенденциясы биздин luminal B жана TNBC когортторубуздун таралышы менен түшүндүрүлөт. 7 кесүү (25-30%), алардын prognosis.53,54 ылайык бейтаптарды жакшы stratify мүмкүн Биздин талдоо жыйынтыгы боюнча, олуттуу корреляция калыштуу эмес. жогорку Ki-67 жана класстар жана BRCA1 PV.Чындыгында болушу ортосунда пайда болот, BRCA1 байланышкан шишик TNBC мүнөздүү болуп саналат, көбүрөөк экспонат1617.
Жыйынтыктап айтканда, бул изилдөө Сицилиянын чыгышындагы BC когортундагы BRCA1/2 мутациясынын абалы жөнүндө отчет берет. Жалпысынан алганда, биздин жыйынтыктар мутациянын таралышы жана клиникалык патологиялык өзгөчөлүктөрү жагынан да мурда болгон далилдер менен шайкеш келет. BRCA1/2-мутанттык BC-ге каршы талдоо сыяктуу чоңураак популяцияларда жүргүзүлгөн изилдөөлөр, BCPV-мутанттуу бейтаптардын мультипликативдик катышуусун баалоо үчүн кеңейтилген. BRCA1/2ге караганда айырмаланган жана азыраак кездешет.
Биз бейтаптар шишигинин үлгүлөрүн изилдөө максатында анонимдүү түрдө чыгарууга негизделген макулдукка кол коюшканын ырастадык. Бардык пациенттер Хельсинки Декларациясына ылайык жазуу жүзүндөгү маалымдалган макулдукка кол коюшту. AOU Policlinico “G.Rodolico – S.Marco” саясатына ылайык, бул изилдөө этикалык кароодон бошотулган, анткени BRCA1/2 жазуу жүзүндө талдоо жүргүзгөн. ошондой эле алардын маалыматтарын изилдөө максаттарында пайдаланууга макулдук берет.
Профессор Паоло Вигнериге Этика боюнча комитеттин суроосу боюнча эмчек рагы менен ооруган бейтаптарга жардам көрсөткөндүгү үчүн ыраазычылык билдиребиз.
Федерика Марторана Иституто Джентили, Эли Лилли, Новартис, Пфайзерден гонорарларды билдирди. Башка авторлор бул эмгекте кызыкчылыктардын кагылышуусу жок деп жарыялашпайт.
1. Sung H, Ferlay J, Siegel RL, et al. Global Cancer Statistics 2020: GLOBOCAN дүйнө жүзү боюнча 185 өлкөдө 36 рактын оорусун жана өлүмүн болжолдойт.CA Cancer J Clin.2021;71(3):209-249.ca3632.doi: