Argumenta quaedam LC fermentum numquam obsoletae sunt, sicut sunt quaestiones in LC usu, sicut instrumenti technicae artis melioris tempore. Multi modi sunt in quibus difficultates oriri possunt in systemate LC et in tenui culmine figurae. Cum quaestiones ad apicem figurae relatae oriuntur, brevis index causarum possibilium pro his proventibus adiuvat ad simpliciorem experientiam nostram sollicitudinem.
Suus 'fun scribebat hanc "LC Troubleshooting" columnam et de argumentis singulis mensibus cogitans, quia quaedam argumenta numquam e stilo exeunt. Dum in agro chromatographiae investigationes quaedam argumenta vel notiones obsolescunt, sicut recentioribus et melioribus ideis supersunt, in agro sollicitudinis, quia primi activitatis occupationes in hoc ephemeride (1).O LC Acta quaedam in hac ephemeride apparent). nonnullas LC Troubleshooting sectiones in contemporalibus trends afficiens liquidam chromatographiam ( LC) (exempli gratia relativa comparatio intellectus nostri effectus pressionis in retentione [2] Novae Proventus) Nostra interpretatio LC eventorum et quomodo troubleshoot cum modernis LC instrumentis. In huius mensis institutione continuam meam seriem (3), quae in mense Decembri anni 2021 incepit, quae incepta sunt "molestiae et vitae magnae mortis". surculus essentiales sunt, nulla materia aetatis systematis utimur. In core thema huius seriei valde pertinet ad clarissimum LCGC scriptor "LC Troubleshooting Guide" murum chart (4) pendentem in multis laboratoriis. Nam tertiam partem huius seriei volui intendere quaestiones ad apicem figurae seu apicem notarum. Incredibiliter, murus chartis enumerat 44 "causas potentiales", tam in multis laboratoriis. Nam tertiam partem huius seriei volui inspicere quaestiones ad apicem figurae vel apicem notarum. Incredibiliter, murus chart enumerat 44 varias potentiales causas, pauperis cacumen in hoc figura! Intendunt aliquos quos frequentius video. Spero iuvenes et senes LC utentes invenies apicibus utiles et commonitiones in hoc gravissimo argumento.
Magis me invenio magisque respondendo molestis quaestionibus cum "aliquid fieri potest". Haec responsio facile videri potest cum observationes difficiles interpretandi considerando, sed saepe opportunas. Multis possibilibus causae pauperculae figurae, magni momenti est ut aperta mens consideret quid sit quaestio, et posse prioritizare causas potentias inchoare conatus nostros sollicitudines, quae maxime possibilia sunt possibilia.
Clavis gradus in quavis sollicitudine exercitationis — sed unus, ut puto, otiosorum — agnoscit quaestionem esse solvendam. Agnoscens quaestionem saepe significat cognoscere quod id quod accidit instrumento differre ab exspectatione nostra, quae formatur per theoriam, scientiam empiricam, et experientiam (5). ) sed etiam ad latitudinem. Nostra exspectatio pro actuali cacumine figurae sunt simplices.Theoria (6) bene sustinet textbook expectationem quod, in pluribus, chromatographica cacumina debet esse symmetrica et conformis figurae distributionis Gaussian, ut ostenditur in Figura 1a. Quid exspectamus de culmine latitudinum magis implicatum est, et tractabimus hoc argumento in possibilibus aliis verbis, aliis modis, aliis modis figurarum figurarum Gaussian distributionis, ut ostenditur in Figura 1a. Quid exspectamus a cacumine latitudinum magis implicatum est, et tractabimus hoc argumento in possibilibus aliis verbis, aliis modis, aliis modis figurae figurae Gaussian distributionis, ut ostenditur in Figura 1a. . In reliquo huius pensionis tempore aliqua certa exempla rerum condiciones quae ad has figuras rationes ducere possunt tractabimus.
Aliquando cacumina omnino non observantur in chromatogrammo ubi expectantur ut elutedntur. Charta supra parietis indicat absentiam cacuminis (si quidem specimen continet scopo analyte in concentu, quod responsionem detectorem sufficientem ad videndum supra strepitum faceret) referri solet ad aliquod instrumentum exitus vel condiciones mobiles falsas (si omnino observatur).cacumina, plerumque nimis "infirma"). Brevis indicem quaestionum ac solutionum potentialium in hoc categoria reperiri potest in Tabula I.
Ut supra dictum est, quaestio de quanto cacumine dilatatio est toleranda antequam attentionem et operam figere conetur, est complexus locus quem in futuro articulo disputabo. Experientia est, quod significans apicem dilatationis saepe comitatur notabilis mutatio in cacumine figurae, et apicem tendentem est communius quam prae- cacumen vel cacumen. Sed nominate symmetriae sunt etiam ampliandae, quae causari potest paucis diversis rationibus;
Singulae hae quaestiones in praecedentibus quaestionibus Troubleshooting LC singillatim tractatae sunt, et lectores, quorum interest, ad hos superiores articulos referri possunt pro informationibus de causis radicibus et solutionibus potentialibus ad has quaestiones.More details.
Apicem tendentem, apicem frontem, et scindendi omnes causari possunt ex phaenomenis chemicis vel physicis, et index potentialum solutionum harum problematum late variat, secundum utrum agimus cum problematis chemicis vel physicis. Saepe, collatis in chromatogrammo diversi cacumina, magnas clues circa quae reus est invenire potes. Si omnes cacumina physica in uno formis, sed causa reliquae maxime similes sunt. denique causa chemica maxime probabilis est.
Causae chemicae apicem tendentium nimis implicatae sunt ut breviter hic disseramus. The interested lector is referred to the recent issue of "LC Troubleshooting" pro profundiore discussione (10). Attamen facile est experiri molem analytici injecti minuere et vide si apicem figurae melioris. Si ita, ergo hoc est bonum enucleatum, quod problema est "massa chromatum chromaticorum injecta". In hoc casu "massa chromatico onerare molem debet". condiciones mutandae sunt, ut figurae apicem bonum obtineri possint etiam in massas maiores injectas.
Multae sunt etiam rationes potentiales physicae ad apicem tailing. Lectores in accurata discussione possibilitatum referuntur ad aliam recentem quaestionem de "LC Troubleshooting" (11). Una ex communioribus corporis causis culminis tendentis est pauper nexus in puncto inter injectorem et detectorem (12). Extremum exemplum in Figura 1d ostenditur, quod in mea labrum aliquot hebdomadibus ante. In hoc casu novum volumen cum iniectione iniectionem iniectionem fecimus. ferrea quae in chalybem immaculatam capillarium formaverat. Post aliquot experimenta initialis fermentum, percepimus portum profundum in injectione valvae statoris multo profundiorem esse quam solebamus, unde in magno volumine mortuo in fundo portus. Hoc problema facile solvitur per iniectionem fasciam cum alio tubi reposito, ferrulam aptare possumus ad convenientem locum ad tollendum defuncti volumen.
Frontes apicem, sicut ea quae in Figura 1e ostensa sunt, etiam per problemata physica vel chemica causari possunt. Communis physicae causa primarii extremitatis est quod particulae cubile columnae non bene refertae, vel particulas in tempus reordinaverunt. Sicut cum apicem tendentem ex hoc physico phaenomeno causatur, optime figere hoc est reponere columnam et ire. Fundamentaliter, ori- mentum saepe oriatur a conditionibus chemicis (quas formas chemicas (speciales" retentiones (speciales "retentiones" formas chemicae (retentione" (speciales) "retentiones" (speciales" a conditiones chemicae retentionis oriuntur. , moles analyti in stadio stationario retenta (unde, retentio factor) linearly comparatur ad intentionem analyti in columna. Chromatographice, hoc significat, cum massa analyti in columnam injecta crescit, apicem altior fit, sed non latius. Haec relatio frangitur cum retentio morum non-linearibus additis, nonlinearibus, hoc significat quod, sicut massa analytici in columnam injecta crescit, apicem procerior fit, sed non latior. Haec relatio frangitur cum retentio morum non-linearibus additis, nonlinearibus modo, sed etiam ardui figuras non modo latius injectae figurae, sed etiam in injecta formarum culmina non modo latius, sed etiam in injecta figurarum formas altiores fiunt. Montium chromatographicorum, quae consequitur in ducens vel trailing margines. Sicut cum massa oneris causat apicem tendentem (10), apicem ducens per retentione nonlinearum causata etiam diagnosed potest reducendo injectam massam analyte. Si apicem figura melioratur, modus mutandus est ut qualitatem iniectio non excedat, quae primas acies facit, vel conditiones chromatographicas mutandae ad minuendam hanc agendi rationem.
Aliquando observamus quid apicem "discidi" esse videatur, ut in fig. 1 f. Primus gradus solvendi hanc quaestionem est determinare utrum apicem figurae ex co-elutionis partiali (s. e. praesentia duarum compositionum distinctorum sed arcte eluentium). Si in actu duo diversa analytes simul eludunt, tunc agitur de meliore earum resolutione (ex. gr., crescendo vel eliquando "retentione, retentione, retentione, retentione, retentione, retentione, retentione, retentione, crescendo, retentione, retentione, retentione, retentione, retentione, retentione, retentione, retentione, retentione, retentione, retentione, retentione, retentione vel multiplicatione apparenti, retentione, ut si duo diversae analytae diversae analytae proxime simul eludendo actualiter inter se eludendo existant, tunc in re melioranda physica (ex. gr. Saepe columnae huius sententiae maximae sensus est utrum omnes apices in chromatogrammi figuras scissuras exhibent, vel unum vel alterum tantum. Si unus vel alter iustus est, verisimile est exitus co-elutionis;si cacumina omnia finduntur, verisimile est exitus corporis, ad ipsam columnam maxime probabile.
Culmina ad physica ipsius columnae proprietates plerumque ex parte obstructa vel exitu frits, vel ordinatio particularum in columna, permittens tempus mobile velocius fluere quam tempus mobile in quibusdam locis agminis canalis formationis in aliis regionibus (11). Partialiter haesitque frit interdum per inversionem fluere per columnam purgari;tamen, in usu meo, hoc plerumque breve tempus magis quam diuturnum solutionis est. Hoc saepe perniciosum est cum modernis columnis si particulae intra columnam reciduntur. Hoc loco melius est reponere in columna et pergere.
Vertex in Figura 1g, etiam ex recenti instantia in meo lab suo, plerumque indicat signum tam altum esse ut ad summum finem responsionis range. Perveniret. Nam absorbance deprehensio optica (UV-vis in hoc casu), cum analyta retrahitur valde altus, analyte plus lucis trahit transeuntis per detectorem signorum cellulam, relicto minimo lumine ut detegatur. Sub his conditionibus et "detectio electrici in variis fontibus detegendae" analyte multum haurit luminis transeuntis per detectorem signorum cellam. obscurum currentem, faciens signum valde "quamquam" in specie et independentem analytici intentionem.Cum hoc incidit, problema saepe facile resolvi potest reducendo iniectionem voluminis analytici, reducendo infusionem voluminis, aut utrumque exemplum diluendo.
In schola chromatographia, signo detectoris (id est y-axis in chromatogrammate) utimur ut index analyti intentionis in sample. Ergo inconveniens videtur videre chromatogrammum signo infra zerum, sicut simplex interpretatio haec indicat intentionem negativam - quod utique non est possibile. In mea experientia, scopuli negativi saepissime detectores sunt (e.g., eg.
In this case, a negative peak simply means that the molecules eluting from the column absorb less light than the mobile phase itself immediately before and after the peak.This can occur, for example, when using relatively low detection wavelengths (<230 nm) and mobile phase additives that absorb most of the light at these wavelengths.Such additives can be mobile phase solvent components such as methanol or buffer components such as acetate or formate.One can actually use negative peaks to prepare a calibration curve and obtain accurate quantitative information, so there is no fundamental reason to avoid them per se (this method is sometimes referred to as “indirect UV detection”) (13).However, if we really want to avoid negative peaks altogether, in the case of absorbance detection, the best solution is to use a different detection wavelength so that the analyte absorbs more than the mobile phase, or change the composition of the mobile phase so that They absorb less light than analytes.
Negativae apices etiam apparent cum indice refractivo utens (RI) detectio cum index refractivus partium praeter analytum in sample, qualis est matrix solvens, differt a indice refractivo Phase mobilis. Hoc quoque fit cum detectione UV-vis, sed hic effectus tendit ad detectionem extenuandam respectu matricis. In utroque casu, negativa cacumina magis adaptari potest per compositionem figurae mobilis.
Parte tertia in basic themate LC fermentum, de condicionibus in quibus observata apicem figura differt ab exspectatione vel normali cacumine figura. Efficitiva sollicitudinis talis problematum cognitio incipit a exspectatione cacuminis figurarum (secundum theoriam seu priorum experientiam cum modis exsistentibus), ita deflexiones ab his exspectationibus sunt manifestae. Peak figura problemata multa habent varias causas potentiales (nimium saepe, etc.). Singula haec scientes locum praebet bonum ut fermentum sollicitudin committitur, sed possibilitates omnes non capit. Lectores in profundiore indicem causarum et solutionum referre possunt ad chart LCGC "LC Troubleshooting Guide" murum chart.
(4) LCGC "LC Troubleshooting Guide" murus chart. https://www.chromatographyonline.com/view/troubleshooting-wallchart (2021).
(6) A. Felinger, Data Analysis et Processus significans in Chromatographia (Elsevier, Novi Eboraci, NY, 1998), pp.
(8) Wahab MF, Dasgupta PK, Kadjo AF, Armstrong DW, Anal.Chim.Journal.Rev.907, 31–44 (2016).https://doi.org/10.1016/j.aca.2015.11.043.