Gratias tibi pro adire Nature.com.The browser version you are using has limited support for CSS.For the best experience, praecipimus ut vos utor navigatro renovato (vel modus compatibilitas in Internet Explorer averte). Interea, ut continua subsidia curent, locum sine stylis et JavaScript ostendemus.
Particulae silicae rarae per methodum sol-gel comparatae cum quibusdam modificationibus ad particulas macroporosas obtinendas. Hae particulae derivatae sunt per convertibilem additionem ruptionis catenae translationis (RAFT) polymerizationem cum N-phenylmaleimide-methylvinylisocyanate (PMI) et styrene ad praeparandum N-phenylmaleimide intercalationem polystyrenam (P × intercalationem polystyrenam . ) a slurry packing refertae. PMP columna separatio peptidis mixtionis quinque peptidum constantium (Gly-Tyr, Gly-Leu-Tyr, Gly-Gly-Tyr-Arg, Tyr-Ile-Gly-Ser-Arg, leucine enkephalin) chromatographica perficiendi (Gly-Tyr, Gly-Leu-Tyr, Gly-Gly-Tyr-Arg, Tyr-Ile-Gly-Ser-Arg, leucine enkephalin) chromatographica perficiendi) et trypsin conditionum digestionis theoreticae (optimae serum humanarum). alta ad 280,000 plates/m². Comparando separationem perficiendi columnae evolutae cum columna Ascentis Express RP-Amide commercialis, animadversum est separationem columnae PMP perficiendi superiorem esse columnae commercialis secundum efficientiam et solutionem separationis.
Nuper industria biopharmaceutica dilatatio mercatum globalis cum substantiali incremento mercatus communicavit. Cum explosivo incremento industriae biopharmaceuticae 1,2,3, analysis peptidum et servo magnopere desideratur. Praeterquam ad scopum peptidis, multae spurcitiae generantur in synthesi peptide, chromatographica purificatione exigente ad obtinendas analyses et qualitates et analyses valde desideratae. magnus numerus potentiae speciei detectabilis in uno sample. Etsi massa spectrometriae efficax est instrumentum pro peptide et interdum sequencia, si talia exemplaria in spectrometri massae in uno transeunte injiciantur, separatio non erit idealis. Haec quaestio mitigari potest per effectum deducendi liquidum chromatographiam (LC) separationis ante analysim MS, quae addito numero analytarum in analytis, intrantibus liquidis, in liquido. tes in angustiis regionum versari possunt, ita ut haec analytica et meliori MS deprehensio sensibilitatem constringat. Liquid chromatographia (LC) signanter in praeteritum decennium profecit et popularis ars facta est in analysis proteomica 7,8,9,10.
Phase liquida chromatographia (RP-LC) late adhibetur pro purificatione et separatione mixturae peptidis utentes silicae octadecyl-mutatae (ODS) sicut phases stationarii 11, 12, 13. Phase stationarias RP stationarias non praebent satis- separationem peptidum et servo ob earum complexam structuram et amphiphilicam naturam 14,15. Propterea, speciali ratione analyses cum peparidis stationariis ac non-stationariis designantur. Inter se occurrunt et retinent has analytes16.Mixed-modus chromatographiae, quae multimodas interationes praebet, jocus esse potest cum RP-LC ad separationem peptidum, proteins, et alia mixtura complexa. Aliquot gradus mixti-modus stationarii praeparati sunt, et columnae his incrementis refertae adhibitae sunt ad disiunctiones peptidas et interdum interditiones (21,18,/LC, RP, 20,/W. calation/RPLC) aptae sunt ad separationes peptidis et interdum propter praesentiam tam polaris quam non polaris 22,23,24,25,26,27,28. Similiter, stadiis intercalatis polaris stationariis cum covalenter compagibus polaris connexis potentiam bonam et singularem electionem pro analytis polaris et non polaris, separatio pendet a analytis et commercio.Interationes multimodales 29, 30, 31, 32. Recenter, Zhang et al.30 paravit periodum dodecyl-terminatam polyaminum stationarium et hydrocarbonum, antidepressantium, flavonoidum, nucleosidum, estrogensum, et plura alia analytica praeparavit. Intercalator polaris tam polaris quam non polaris circulos habet, unde adhiberi potest ad separandos peptidas et proteinas quae tam hydrophobicas quam nucleosides, nucleosides, estrogenses, et alia plura. Ascensis columnis Express RP-Amide, sed hae columnae pro analysi amine 33 tantum adhibentur.
In studio currenti, tempus stationarium polar-embeded (polystyrene N-phenylmaleimide-embededed) praeparatum et aestimatum ad separationem peptidum et trypsin digestorum HSA. Stativa periodus praeparata est utens his consiliis. Particulae silicae silicae paratae sunt secundum processum in nostra priore publicatione cum aliquibus modificationibus ad praeparationem protocol. Adaequatum ad parandas particulas silicas cum magna magnitudine pororum. Secunda, nova ligandi, phenylmaleimide-methyl vinyl isocyanatum, summatim perstringitur et adhibita est ad particulas silicas derivandas ad praeparandum phases stabilis polaris infixa. Phase stationaria inde in columna ferro immaculata conferta (100 × 1.8 mm id) usus est ad sarcinam fabricandam cum machinatione machinali fabricando. . Aestimate columnae distantiam mixturam peptidis mixturam quinque peptidis constantem;(Gly-Tyr, Gly-Leu-Tyr, Gly-Gly-Tyr-Arg, Tyr-Ile-Gly-Ser-Arg, Leucine Enkephalin) et Trypsin digestum seri generis humani albumin (HAS). Peptide mixtura et trypsin digestionis HSA cum bene resolutione et efficacitate separatae observabantur. Separatio munerum et columellarum cum Ascentiis expressa. bene resolutam et efficacem in columna PMP, quae efficacior erat quam columna Ascensis Express RP-Amide.
PEG (Polyethylene Glycol), Urea, Acidum aceticum, Trimethoxy Orthosilicate (TMOS), Trimethyl Chlorosilane (TMCS), Trypsin, Humanum Serum Albumin (HSA), Ammonium Chloride, Urea, Hexane Methyldisilazane (HMDS), Methacryloyl Chloride (MC), Styrene, 4-HP.P.O.. ACN), Methanol, 2-Propanol, et Acetone emptus a Sigma-Aldrich (St. Louis, MO, USA).
Mixtura ureae (8 g), polyethylenae glycol (8 g), et 8 mL of 0.01 N acetici acetici commota est per 10 minuta, ac deinde 24 mL of TMOS adiecta est sub conditionibus glaciei-frigidis. Mixtura reactio in 40°C calefacta est per 6 horas et deinde ad 120°C per 8 horas in ferro immaculato autoclave. et combusti ad 550°C ad 12 horas. Tres batches paratae et notatae sunt ad reproducibilitatem in magnitudine particulae, magnitudine et superficiei porum examinandam.
Per modificationem superficiei particularum silicae cum ligando phenylmaleimide-methylvinylisocyanate (PCMP) superficiali modificatione cum styrene polymerizatione radiali secuta est, globus polaris continens compositionem praeparatus est.Tempus stationarium pro aggregatis et catenis polystyrenis. Processus praeparationis infra describitur.
N-phenylmaleimide (200 mg) et yl vinyl isocyanatum (100 mg) in sicco toluene dissolutum, et 0.1 mL ex 2,2′-azoisobutyronitrili (AIBN) addita est reactioni uasis ad parandum phenylmaleimide-methyl vinyl isocyanatum copolymum (PMCP).
Particulae silicae siccatae (2 g) in sicco toluene dispersae (100 mL), commotae et sonicatae in lagenae fundo 500 mL rotundae pro 10 min.PMCP (10 mg) in toluene dissolutae sunt et additae guttatim ad reactionem lagenae per stillicidium funiculi. Mixtura refluxta in 100°C per 8 horas eliquata et lota cum acetone et particula in toluenno 60°C pro 3 horis silica et toluena (C ) dissoluta sunt. 200 ml) et 4-hydroxy-TEMPO (2 mL) coram 100 µL dibutyltin dibutyltinae dilatatae catalystinae addita est. Mixtura per 50°C per 8 horas commota est, percolata et siccata in 50°C pro 3 horis.
Styrene (1 mL), benzoyl peroxidum BPO (0.5 mL), et TEMPO-PMCP-particulae silicae appositae (1.5 g) in toluene dispersae et per nitrogenum purgatae sunt. Polymerizationis styrenae ad 100°C per 12 horas peracta est. Productum consequens methanolum lotum et siccatum in 60°C altiore schemate ostenditur.
Exemplaria in 393 K hora 1 delapsae sunt ut pressionem residua plus quam 10-3 obtineat Torr. Moles N2 ad pressionem relativam P/P0 = 0,99 adsortam ad totalem pororum voluminis determinandam adhibita est. morphologia partium silicarum nudae et ligandi-contentatae cum microscopio electronico (Hitachi High Technologies) Silicae Silicae (Hitachi High Technologies) Silicae silicae (Hitachi High technologiae) silicae, silicae et ligand-conjunctae particulis silicis inspectis examinata est. in columna aluminii utens adhaesivae carbonis tape. Aurum patella in speciminibus utens Q150T putris tunicae, et 5 nm Au stratum in samples depositum erat. Haec processus efficientiam auget utens humilis voltages et tenuis granum, frigidum putris praebet. A Thermo Electron (Waltham, MA, USA) Mico EA1112 analysris elementaris pro elementis analysris MM EA1112. usus est ad magnitudinem particulae distributionis. Naked silicae particulae et ligandi-coniunctae particulae silicae (5 mg inter se) dispersae sunt in 5 mL of isopropanol, sonicatae per 10 min, vortex pro 5 min, et in scamno opticorum Magistri positi. Analysis gravimetrica fiebat ad ratem 5 °C per minutum super latitudinem temperaturarum 30 ad 800 °C.
Inactum vitreum inactum in columnas dimensionum ferro angusto-borto (100 1,8 mm id) refertae sunt utentes slurry sarcinarum methodo, adhibitis eadem ratione adhibitis in Ref.31. A columna ferrea immaculata (vitriculum, 100 × 1.8 mm id) cum exitu congruenti continens 1 µm frit connexum cum slurry packer (Alltech Deerfield, IL, USA). Praeparate stationem slurriam suspendendo 150 mg e stationariis in 1.2 mL methanoli et mitte ad columnam repositam solvendo.Methanol pressione adhibita quam solvendo. of 100 MP pro 10 minuta, 80 MP pro 15 minuta, et 60 MP pro 30 minutis. Per sarcina, vibratio mechanica applicata cum duabus GC columnarum quassatoribus (Alltech, Deerfield, IL, USA) ut columnae aequabilis sarcina. Claudite slurry packentem et pressionem lente dimittere ne quid detrimenti in columna. Disiungat columnam ab slurry stipatione unitatem et connectere aliam et connectere aliam et connectere aliam slurry sarcinam et connectere aliam slurry sarcinam et pressionem tarde dimittere ne quid damni in columna.
An LC sentinam (10AD Shimadzu, Iaponia), injector (Valco (USA) C14 W.05) cum 50nL injectione ansa, membrana degasser (Shimadzu DGU-14A), fenestra capillaria UV-VIS constructa est Specialis µLC fabrica detectoris (UV-2075) et microcolumnarum vitrearum. Utere coagmentatione valde angusta et brevi ligamine, membrana degasser (Shimadzu DGU-14A), fenestra capillaria UV-VIS constructa Specialis µLC fabrica detector (UV-2075) et microcolumnarum vitrearum. 50 µm) in 1/16″ exitum reducendae unionis institutae sunt. Data collectio et processus chromatographicus per Multichro 2000 programmatum fiebat. Vigilantia 254 nm Analytae pro UV absorbance probati sunt. Nota chromatographica ab OriginPro8 (Northampton, MA).
Albuminum ex Sero humano, puluere lyophiliso, ≥ 96% (agarose gel electrophoresis) 3 mg cum trypsino mixtum (1.5 mg), 4.0 M ureae (1 mL), et 0.2 M ammonium bicarbonatum (1 mL). Solutio per 10 minuta excitata et in aqua lavacri 37°C per 6 horas retenta, deinde cum 1 mL.Fil 0.1% solutionis exstinguitur et infra 4% C.F 0.1%.
Separatio mixtorum peptidum et HSA trypsin digesta in PMP columnis seorsim aestimata sunt. Reprehendere separationem mixtionis peptidis et trypsin digestionis HSA per columnam PMP et proventus Ascentis Express RP-Amide column comparare. Lamina theoretica numerus sic computatur:
SEM imagines nudae particulis silicae et particulis silicae ligando-connexis in Fig.2 .SEM imagines nudae particularum silicarum (A, B) ostendunt, contraque nostris prioribus studiis has particulas sphaericas esse in quibus particulae elongatae sunt vel symmetriarum irregulares habent. Superficies particularum silicarum ligandi-connexarum (C, D) nitidiorem esse quam nudae parti- cularum silicarum, quae ob tunicam polystyrenae catenis in catenis silicae debentur.
Microscopium electronicum intuens imagines nudarum particularum silicarum (A, B) et particulas silicas ligando-connexas (C, D).
Magnitudo particulae distributiones parti- cularum silicarum nudae et ligandi-connexae particularum silicarum in Figura 3(A). Volumen substructio particulae magnitudo curvarum distributio ostendit magnitudinem particularum silicarum post modificationem chemica auctam (Fig. 3A). Particulae magnitudinis datae particulorum silicarum e studio currenti et studio praecedente comparantur in Tabula 1(A). µm (0.0.5), magnitudine praecedente, d. 5) Valor 3.05 µm (particularum silicarum polystyrenum ligatum) 34. Haec massa angustior particulae magnitudinis distributio comparata ad studium nostrum praecedens ob varias rationes PEG, ureae, TMOS et acetici in reactione mixtionis. Particulae magnitudines PMP phase paulo maior est quam illa particula polystyrene-constricta silicae significatae superficies- sationis significatae, quam prius intendimus. iacuit (0.97 µm) in superficie silica, cum in PMP crassitudo iacuit 1.38 µm.
Magnitudo particularis distributio (A) et magnitudo porum distributio (B) partium silicarum nudarum et particularum silicarum ligando ligatorum.
Magnitudo pororum, porum volubilis et superficies partium silicarum studiorum currentium in Tabula 1(B).PsD perfiles nudarum particularum silicarum et particularum silicarum ligand-connexae in Figura 3(B). Eventus comparabiles sunt cum priori studio. Pororum magnitudinum nudae et ligandi ligatae particulae silicae sunt 1 310 et 241, et respective magnitudo, quae per modum 69 pororum ostensa est (B). in Fig. 3(B) .Similiter porum volumen particularum silicarum ab 0.67 ad 0.58 cm3/g post modificationem chemica decrevit. Area superficiei particularum silicarum nunc quaesitarum est 116 m2/g, quod comparabile est cum priori studio (124 m2/g).
Eventus analysi elementi stationarii in Tabula monstrantur 2. Oneratione carbo e stationariis Phase currentis est 6.35%, quae minor est quam onerationis carbonis superioris studiorum nostrorum (particularum silicarum polystyrene religata, 7.93%35 et 10.21%, respective) 42. Carbo oneratio huius temporis stationarii talis est humilis, Quia in praeparatione pharyngis-male-malendendes-melandelvi. PCMP) et 4-hydroxy-TEMPO adhibita sunt. Nitrogenium pondus cento phaselus stationarii currentis est 2.21%, comparatum ad 0.1735 et 0.85% pondus nitrogeni in studiis praecedentibus, respective. Hoc significat wt% nitrogenii altiorem in periodo stationario currenti ob phenylmaleimide.Similiter comparatur ad 0.1735 et 0.85% pondus nitrogenium in studiis praecedentibus, respective. Hoc significat quod wt% nitrogenii altior est in periodo stationario currenti ob phenylmaleimide. Similiter, cum carbo 2. onerationes 6.35% et 5.% carbonis onerationes 7% 35% et 5. In Tabula 2. Pondus damnum cum PMP stationariis phase coercitum est, et curva TGA in Figura ostenditur 4. Curva TGA pondus damnum 8.6% ostendit, quod in bene convenit cum oneratione carbonis (6.35%), quia ligandas non solum C, sed etiam N, O et H continent.
Phenylmaleimide-methylvinylisocyanatum ligandi ad superficiem modificationem particularum silicarum electa est quia coetus polar phenylmaleimidos et coetus vinylisocyanatus habet. Vinyl isocyanatus coetus ulterius agere potest cum styrene vivendo polymerizationem radicalem. Altera ratio est inserere coetum qui habet modicam commercium cum valido analytico, commercio et nulla analytica cum styrene vivo radicali polymerizatione. ty non habet virtualem crimen in normali pH. Polaritas stationarii phaselus ab optimal moles styrenarum et reactionis tempus liberae radicalis polymerizationis tempus coerceri potest. Novissimus gradus reactionis (polymerization gratis-radicalis) est critica et potest mutare polaritatem Phase stationarii. Analysis elementalis facta est ad reprimendam carbo carbonis onerationis et incrementi stationis incrementa. Hoc observatum est, quod carbo carbonis et incrementi stationis tempus auget. Quod observatum est, quod est in discrimine ac potest mutare polaritatem phase. s cum diversis concentratione styrenae comparatae diversas habent loadings carbonis. Iterum, has stationarias augmenta in columnas chalybe immaculatas oneras et eorum chromatographicam observantiam reprehendo (delectu, resolutione, N valore, etc.). Ex his experimentis, formula optimizata est electa ad praeparandam PMP stationarium tempus ad moderandam vertibilitatem et bonam analytem retentionis.
Mixturae peptidis quinque (Gly-Tyr, Gly-Leu-Tyr, Gly-Gly-Tyr-Arg, Tyr-Ile-Gly-Ser-Arg, leucine enkephalin) aestimabantur utentes columnae PMP utentes tempore mobili;60/40 (v/v) acetonitrile/aqua (0.1% TFA) ad profluentem rate 80 μL/min. Sub meliorem elutionem conditionum, lamina theorica numerus (N) per columnam (100 × 1.8 mm id) est 20000 ± 100 (200,000 plates/m²).Tabula 3 dat valorem N pro tribus PMP columnis et chromatogrammis µm P (F) s. peptides intra unum minutum eluctabantur, N valores valde bonae erant, 13,500 ± 330 per columnam (100 × 1.8 mm id), respondet 135,000 plates/m (Figura 5B). Tres columnae numero magnitudines (100 × 1.8 mm id) refertae erant tribus diversis sortibus PMP stationariis ad reproducibilitatem reprimendam. Reproducibilitas datae ad PMP columnarum in Tabula 4. Reproducibilitas columnae PMP bene correlates cum valoribus vilissimis %RSD, ut patet in Tabula III.
Separatio peptidis mixtionis in columna PMP (B) et Ascentis expressae RP-Amide columnae (A);mobile tempus 60/40 ACN/H2O (TFA 0.1%), PMP dimensiones columnae (100 × 1.8 mm id);analytica Ellutionis ordo compositorum: 1 (Gly-Tyr), 2 (Gly-Leu-Tyr), 3 (Gly-Gly-Tyr-Arg), 4 (Tyr-Ile-Gly-Ser-Arg) et 5 (leucine) acidum enkephalin).
A PMP columna (100 × 1.8 mm id) aestimata est ad separationem digestorum trypticorum humanorum seri albumin in alta perficiendi liquoris chromatographiae. Chromatogramma in figura VI ostendit specimen bene separatum et resolutio valde bona. HSA digesta sunt utentes fluxus rate 100 µL/min, mobilis periodus 70/30 acetonitrili/aquae et 0,1% in TFA. chromatogrammo/aqua et 0.1% ostensum est. cacumina correspondentia 17 peptides.The separation of efficienting of each apici in HSA digest was calculi and values ​​are given in Table 5 .
Digestum trypticum HSA (100 1.8 mm id) divisum est in columna PMP;rate fluunt (100 µL/min), phase mobile 60/40 acetonitrile/ aqua cum 0.1% TFA.
ubi L est columna longitudo, η viscositas mobilis Phase, ΔP est columna pressio dorsi, et u velocitas linearis paschalis mobilis. Permeabilitas columnae PMP erat 2.5 × 10-14 m2, rate fluxus erat 25 μL/min, et 60/40 v/v ACN/aqua adhibita est. Permeabilitas columnae PMP permeabilitas erat 2.5 × 10-14 m2, cursus cursus erat 25 μL/min, et 60/40 v/v ACN/aqua usus est. Permeabilitas columnae PMP permeabilitas erat 2.5 × 10-14 m2 cum particulis superficialiter raris est: 1.7 × 10-15 pro 1.3 µm particulis, 3.1 × 10-15 pro 1.7 µm particulis, 5.2 × 10-15 et 2.5 × 10-14 m2 pro 2.6 µm particulis Pro 5 µm particulis 43. Ergo permeabilitas PMP periodi similis est cum 5 µm coriculi particulis.
ubi Wx est pondus columnae chloroformi refertae, Vaga est pondus columnae methanolo refertae, et ρ densitas solvent. Densitates methanoli (ρ = 0,7866) et chloroformes (ρ = 1.484). Tota porositas SILICA-C18 0. 31- . praesentia ligandi ureae reducit permeabilitatem Phase stationarii. Ex altera parte, porositas totalis columnae PMP (100 × 1.8 mm id) est 0.60. Permeabilitas columnarum PMP minor est quam columnarum silicarum silicarum C18-connexarum permeabilitas, quia in C18-type catenis stationariis (C 18 mm id) est 0.60. Permeabilitas columnarum PMP minor est quam columnarum cum particulis silicarum C18-connexis refertum propterea quod in C18-type catenis stationariis, dum C18 ligands lineares in stadiis relativorum adnexa sunt, in polyty- dibus mer tabulatum circa illud formatur. In experimento typico, columna porositas computata est:
Figura 7A,B ostendunt columnam PMP (100 × 1.8 mm id) et Ascensis Express RP-Amide columnam (100 × 1.8 mm id) iisdem conditionibus elutionis utentes (id est, 60/40 ACN/H2O et 0,1% TFA).) of the van Deemter plot.Mixturae peptidarum selectae (Gly-Tyr, Gly-Leu-Tyr, Gly-Gly-Tyr-Arg, Tyr-Ile-Gly-Ser-Arg, Leucine Enkephalin) paratae erant in 20 µL/ Minimum profluentia rate utriusque columnae est 800 µL/min. Valores minimae HETP apud columnas optimas fluunt rate (80 µL/minus) paratae erant in 20 µL/ 3.9 µm, respective. The HETP valores indicant separationem efficientiam columnae PMP (100 × 1.8 mm id) multo melius quam commercium in promptu Ascensis Express RP-Amide columnae (100 × 1.8 mm id). Van Deemter insidias in Fig. 7(A) ostendit diminutionem in N valore cum incremento increbrescente (100 RP ) altioris altioris studiorum. -Amide columna sistitur emendationibus particulae figurae, magnitudinis, columnae implicatae in processu stipendiorum adhibitorum in opere currenti 34 .
(A) van Deemter machinatio (HETP versus velocitatis mobilis periodi linearis) nactus per columnam PMP (100 1.8 mm id) in 60/40 ACN/H2O cum 0.1% TFA. (B) van Deemter insidias (HETP versus velocitatem mobilem linearem) utens ascentis Express RP-Amide columna consecutus (100 × 1.8 mm id) in 60/O cum ACN/H.
Polystyrenum stationarium polaris-embededed phase was prepared and aestimated for separation of synthetica mixturas peptide and trypsin digests of human seri albumin (HAS) in alta perficiendi liquidi chromatographia. Chromatographica observantia columnarum PMP pro peptide mixtura praestantissima est in divisione efficientiae et resolutionis. Melior separatio peractio PMP columnarum talis est propter varietatem statio et rationum, et moderatio syntheticarum silicarum quantitatum quantitatum, quantitatum silicarum. , et complexa columnae packing. Praeter altam separationem efficientiam, humilis columnae retro pressio ad altum fluens rates aliud commodum est huius stationis phase.PMP columnae exhibent bonam reproducibilitatem et adhiberi potest pro analysi peptidum mixtionum et trypsin digestionis diversorum proteins. Intendimus hac columna ad separationem rerum naturalium, compositionum bioactivarum ex plantis medicinalibus et dapibus fungalis. es.
Field, JK, Euerby, MR, Lau, J., Thøgersen, H. & Petersson, P. Research de Peptide Separatio Systems Reversed Phase Chromatography Part I: Development of a Column Characterization Protocol.J.Chromatography.1603, 113-129.https://doi.org/10.1016/j.chroma.2019.05.038 (2019).
Gomez, B. et al.Improved peptides activae ad curationem morborum infectiosorum destinata.Biotechnology.Advanced.36(2), 415-429.https://doi.org/10.1016/j.biotechadv.2018.01.004 (2018).
Vlieghe, P., Lisowski, V., Martinez, J. & Khrestchatisky, M. Synthetica therapeutica peptides: scientia et mercatus.drug discovery.15 (1-2) hodie, 40-56.https://doi.org/10.1016/j.drudis.2009.10.009 (2010).
Xie, F., Smith, RD & Sen, Y. Provectus Proteomic Liquid Chromatography.J.Chromatography.A 1261, 78–90 (2012).
Liu, W. et al.Advanced liquid chromatographia-massa spectrometriae incorporationem latis metabolomicis et proteomicis.
Chesnut, SM & Salisbury, JJ Munus UHPLC in medicamento development.Sep. Sci.30(8), 1183-1190 (2007).
Wu, N. & Clausen, AM aspectus fundamentales et practicas ultrahigh pressionis liquidae chromatographiae pro celeri separationibus.Sep. Sci.30(8), 1167-1182.https://doi.org/10.1002/jssc.200700026 (2007).
Wren, SA & Tchelitcheff, P. Applicatio ultra-altae operationis liquidae chromatographiae in medicamento development.Chromatography.1119(1-2), 140-146.https://doi.org/10.1016/j.chroma.2006.02.052 (2006).
Gu, H. et al.Monolithicae hydrogelae macroporae praeparatae ex oleo-in-aqua altae emulsiones internae periodi ad purificationem enterovirorum efficientes.Chemical.Britain.J.401, 126051 (2020).
Shi, Y., Xiang, R., Horváth, C. & Wilkins, J.Chromatography.A 1053(1-2), 27-36 (2004).
Fekete, S., Veuthey, J.-L.& Guillarme, D. Declinationes in chromatographia liquida transverso-phase separationes therapeuticae peptidum et servo: theoriae et applicationes.Pharmacy.Biometrical Science.anus.69, 9-27 (2012).
Gilar, M., Olivova, P., Daly, AE & Gebler, JC Disiunctio dimensiva peptidum utens systema RP-HPLC diversis pH valores in dimensionibus prima et secunda separationis utens.Sep. Sci.28 (14), 1694-1703 (2005).
Feletti, S. et al. Massa translatio notarum et in motu summorum efficientiae chromatographicarum columnarum quae refertae sunt cum C18 sub-2 µm particulis raris plene et superficialiter exploratae sunt.J.Sep. Sci.43 (9-10), 1737-1745 (2020).
Piovesana, S. et al.Recent trends et provocationes analyticae in solitudine, identificatio et sanatio plantae bioactivae peptides.anus.biologicus anus.Chemical.410(15), 3425–3444. https://doi.org/10.1007/s00216-018-0852-x (2018).
Mueller, JB et al. The proteomic landscape of the kingdom of life.Nature 582(7813), 592-596. https://doi.org/10.1038/s41586-020-2402-x (2020).
DeLuca, C. et al.Downstream processus peptidum therapeuticae per chromatographiam liquidam praeparativam. Molecule (Basel, Helvetia) 26 (15), 4688(2021).
Yang, Y. & Geng, X. Modus mixtus chromatographiae ejusque applicatio ad biopolymers.Chromatography.A 1218(49), 8813–8825 (2011).
Zhao, G., Dong, X.-Y., Sol, Y. Ligandes pro mixto-modo interdum chromatographia: principium, characterizationem et design.J.Biotechnology.144(1), 3-11 (2009).