ຂໍຂອບໃຈສຳລັບການເຂົ້າເບິ່ງ Nature.com. ເວີຊັນຂອງບຣາວເຊີທີ່ທ່ານກຳລັງໃຊ້ຢູ່ມີການຮອງຮັບ CSS. ສໍາລັບປະສົບການທີ່ດີທີ່ສຸດ, ພວກເຮົາແນະນຳໃຫ້ທ່ານໃຊ້ໂປຣແກຣມທ່ອງເວັບທີ່ອັບເດດແລ້ວ (ຫຼືປິດໂໝດຄວາມເຂົ້າກັນໄດ້ໃນ Internet Explorer). ໃນລະຫວ່າງນີ້, ເພື່ອຮັບປະກັນການສະໜັບສະໜູນຢ່າງຕໍ່ເນື່ອງ, ພວກເຮົາຈະສະແດງເວັບໄຊໂດຍບໍ່ມີຮູບແບບ ແລະ JavaScript.
particles silica porous ໄດ້ຖືກກະກຽມໂດຍວິທີການ sol-gel ທີ່ມີການດັດແກ້ບາງຢ່າງເພື່ອໃຫ້ໄດ້ particles macroporous. particles ເຫຼົ່ານີ້ໄດ້ຖືກ derivatized ເພີ່ມເຕີມ reversible fragmentation chain transfer (RAFT) polymerization ກັບ N-phenylmaleimide-methylvinylisocyanate (PMI) ແລະ styrene ເພື່ອກະກຽມ N-phenylmaleimide ສະຖານີສະແຕນເລດ (n-phenylmaleimide). (100 × 1.8 ມ. der ເງື່ອນໄຂ elution ທີ່ດີທີ່ສຸດ, ຈໍານວນແຜ່ນທາງທິດສະດີຂອງປະສົມ peptide ແມ່ນສູງເຖິງ 280,000 plates / m². ເມື່ອປຽບທຽບການປະຕິບັດການແຍກຂອງຖັນທີ່ພັດທະນາກັບຄໍລໍາ Ascentis Express RP-Amide ການຄ້າ, ສັງເກດເຫັນວ່າການປະຕິບັດການແຍກຂອງຖັນ PMP ແມ່ນດີກວ່າຖັນການຄ້າໃນແງ່ຂອງປະສິດທິພາບການແຍກແລະຄວາມລະອຽດ.
ໃນຊຸມປີມໍ່ໆມານີ້, ອຸດສາຫະກໍາຢາຊີວະພາບໄດ້ກາຍເປັນຕະຫຼາດໂລກທີ່ຂະຫຍາຍໃຫຍ່ຂື້ນໂດຍມີສ່ວນແບ່ງຕະຫຼາດເພີ່ມຂຶ້ນຢ່າງຫຼວງຫຼາຍ. ດ້ວຍການຂະຫຍາຍຕົວຂອງອຸດສາຫະກໍາຢາ biopharmaceutical1,2,3, ການວິເຄາະ peptides ແລະທາດໂປຼຕີນແມ່ນມີຄວາມປາດຖະຫນາສູງ. ນອກເຫນືອໄປຈາກ peptide ເປົ້າຫມາຍ, impurities ຈໍານວນຫຼາຍແມ່ນຜະລິດໃນລະຫວ່າງການສັງເຄາະ peptide, ດັ່ງນັ້ນຈຶ່ງຕ້ອງການການບໍລິສຸດຂອງ peptide. ແລະການກໍານົດລັກສະນະຂອງທາດໂປຼຕີນໃນນ້ໍາຂອງຮ່າງກາຍ, ເນື້ອເຍື່ອແລະຈຸລັງແມ່ນເປັນວຽກທີ່ທ້າທາຍທີ່ສຸດເນື່ອງຈາກຈໍານວນຊະນິດທີ່ມີທ່າແຮງທີ່ສາມາດກວດພົບໄດ້ໃນຕົວຢ່າງດຽວ. ເຖິງແມ່ນວ່າ mass spectrometry ເປັນເຄື່ອງມືທີ່ມີປະສິດທິພາບສໍາລັບການຈັດລໍາດັບ peptide ແລະທາດໂປຼຕີນ, ຖ້າຕົວຢ່າງດັ່ງກ່າວຖືກສີດເຂົ້າໄປໃນ spectrometer ມະຫາຊົນໃນຫນຶ່ງຜ່ານ, ການແຍກຕ່າງຫາກຈະບໍ່ເຫມາະສົມ. MS ການວິເຄາະບັນຫານີ້, ການວິເຄາະ mitig ອາດຈະຫຼຸດລົງກ່ອນ. ຈໍານວນຂອງການວິເຄາະທີ່ເຂົ້າໄປໃນ spectrometer ມະຫາຊົນໃນເວລາທີ່ກໍານົດໄວ້ 4,5,6. ນອກຈາກນັ້ນ, ໃນໄລຍະການແຍກທາດແຫຼວ, ການວິເຄາະສາມາດໄດ້ຮັບການສຸມໃສ່ໃນເຂດແຄບ, ດັ່ງນັ້ນການສຸມໃສ່ການວິເຄາະເຫຼົ່ານີ້ແລະການປັບປຸງ MS detection sensitivity.Liquid chromatography (LC) ໄດ້ກ້າວຫນ້າຢ່າງຫຼວງຫຼາຍໃນໄລຍະທົດສະວັດທີ່ຜ່ານມາແລະໄດ້ກາຍເປັນການວິເຄາະທີ່ນິຍົມ, 18.9 ເຕັກນິກການ proteom.
Reversed-phase liquid chromatography (RP-LC) ຖືກນໍາໃຊ້ຢ່າງກວ້າງຂວາງສໍາລັບການຊໍາລະລ້າງແລະການແຍກສ່ວນປະສົມຂອງ peptide ໂດຍໃຊ້ octadecyl-modified silica (ODS) ເປັນໄລຍະ stationary 11,12,13. ແນວໃດກໍ່ຕາມ, ໄລຍະ stationary RP ບໍ່ໄດ້ສະຫນອງການແຍກ peptides ທີ່ພໍໃຈແລະທາດໂປຼຕີນຈາກ octadecyl-modified silica (ODS). ຈໍາເປັນຕ້ອງໄດ້ວິເຄາະ peptides ແລະທາດໂປຼຕີນທີ່ມີ moieties ຂົ້ວໂລກແລະບໍ່ມີຂົ້ວໂລກເພື່ອປະຕິສໍາພັນກັບແລະຮັກສາ analytes16.Mixed-mode chromatography, ເຊິ່ງສະຫນອງການໂຕ້ຕອບ multimodal, ສາມາດເປັນທາງເລືອກຂອງ RP-LC ສໍາລັບການແຍກ peptides, ທາດໂປຼຕີນ, ແລະປະສົມສະລັບສັບຊ້ອນອື່ນໆ. ຫຼາຍໆ mix-mode stationary columns ແລະໄລຍະການແຍກທາດໂປຼຕີນແມ່ນໄດ້ຖືກກະກຽມ. 18,19,20,21.Mixed-mode stationary phases (WAX/RPLC, HILIC/RPLC, polar intercalation/RPLC) ແມ່ນເຫມາະສົມສໍາລັບການແຍກ peptide ແລະທາດໂປຼຕີນເນື່ອງຈາກມີຂອງທັງສອງ Polar ແລະບໍ່ມີຂົ້ວໂລກກຸ່ມ 22,23,24,25,26,27,28 .ການແຍກຕົວລະຫວ່າງກຸ່ມພະລັງງານ polars ທີ່ມີສະຫມໍ່າສະເຫມີທີ່ດີ ການຄັດເລືອກສໍາລັບການວິເຄາະຂົ້ວໂລກແລະບໍ່ມີຂົ້ວ, ເນື່ອງຈາກວ່າການແຍກແມ່ນຂຶ້ນກັບການໂຕ້ຕອບລະຫວ່າງການວິເຄາະແລະໄລຍະ stationary.Multimodal interactions 29, 30, 31, 32.Recently, Zhang et al.30 ກະກຽມໄລຍະ stationary polyamine dodecyl-terminated ແລະສົບຜົນສໍາເລັດແຍກ hydrocarbons, antidepressants, flavonoids, nucleosides, estrogens, ແລະການວິເຄາະອື່ນໆຈໍານວນຫນຶ່ງ. intercalator polar ມີທັງກຸ່ມຂົ້ວໂລກແລະບໍ່ມີຂົ້ວໂລກ, ສະນັ້ນມັນສາມາດຖືກນໍາໃຊ້ເພື່ອແຍກ peptides ແລະທາດໂປຼຕີນທີ່ມີທັງ hydrophobic column-polaremides ແລະ hydrophobic column-8. columns) ແມ່ນມີຢູ່ໃນການຄ້າພາຍໃຕ້ຊື່ການຄ້າ Ascentis Express RP-Amide ຖັນ, ແຕ່ຄໍລໍາເຫຼົ່ານີ້ຖືກນໍາໃຊ້ສໍາລັບການວິເຄາະຂອງ amine 33 ເທົ່ານັ້ນ.
ໃນການສຶກສາໃນປະຈຸບັນ, ໄລຍະ stationary ຝັງຢູ່ຂົ້ວໂລກ (N-phenylmaleimide-embedded polystyrene) ໄດ້ຖືກກະກຽມແລະການປະເມີນສໍາລັບການແຍກ peptides ແລະ trypsin digests ຂອງ HSA. ໄລຍະ stationary ໄດ້ຖືກກະກຽມໂດຍໃຊ້ຍຸດທະສາດດັ່ງຕໍ່ໄປນີ້. ອະນຸພາກ silica porous ໄດ້ຖືກກະກຽມຕາມຂັ້ນຕອນທີ່ໄດ້ລະບຸໄວ້ໃນການພິມເຜີຍແຜ່ທີ່ຜ່ານມາຂອງພວກເຮົາກັບ protocol PE ບາງ, ອັດຕາສ່ວນຂອງການກະກຽມຂອງ g. TMOS, ອາຊິດ acetic ນ້ໍາໄດ້ຖືກປັບເພື່ອກະກຽມອະນຸພາກຊິລິກາທີ່ມີຂະຫນາດ pore ຂະຫນາດໃຫຍ່. ອັນທີສອງ, ເປັນ ligand ໃຫມ່, phenylmaleimide-methyl vinyl isocyanate, ໄດ້ຖືກສັງເຄາະແລະນໍາໃຊ້ເພື່ອ derivatize particles silica ເພື່ອກະກຽມໄລຍະ stationary ຝັງຂົ້ວໂລກ. ໄລຍະ stationary ຜົນໄດ້ຮັບໄດ້ຖືກຫຸ້ມຫໍ່ເປັນຄໍລໍາ (10 ມມ. ສະແຕນເລດ) 10 ມມ. ການຫຸ້ມຫໍ່ຖັນແມ່ນໄດ້ຮັບການຊ່ວຍເຫຼືອດ້ວຍການສັ່ນສະເທືອນຂອງກົນຈັກເພື່ອຮັບປະກັນການນອນ homogeneous ໄດ້ຖືກສ້າງຕັ້ງຂຶ້ນພາຍໃນຖັນ.(Gly-Tyr, Gly-Leu-Tyr, Gly-Gly-Tyr-Arg, Tyr-Ile-Gly-Ser-Arg, Leucine Enkephalin) ແລະ Trypsin digest ຂອງ albumin serum ຂອງມະນຸດ (HAS).ສ່ວນປະສົມຂອງ peptide ແລະ trypsin digest ຂອງ HSA ໄດ້ຖືກສັງເກດເຫັນວ່າແຍກອອກດ້ວຍຄວາມລະອຽດແລະປະສິດທິພາບທີ່ດີ. ການປະຕິບັດຖັນ PMP ແມ່ນການແຍກສ່ວນຂອງຖັນ Express. eptides ແລະທາດໂປຼຕີນໄດ້ຖືກສັງເກດເຫັນວ່າໄດ້ຮັບການແກ້ໄຂໄດ້ດີແລະມີປະສິດທິພາບຢູ່ໃນຖັນ PMP, ເຊິ່ງມີປະສິດທິພາບຫຼາຍກ່ວາຖັນ Ascentis Express RP-Amide.
PEG (Polyethylene Glycol), Urea, Acetic Acid, Trimethoxy Orthosilicate (TMOS), Trimethyl Chlorosilane (TMCS), Trypsin, Human Serum Albumin (HSA), Ammonium Chloride, Urea, Hexane Methyldisilazane (HMDS), Methacryloyl Chloride (MC), Steyne, Styrene, Acetonitrile (ACN), Methanol, 2-Propanol, ແລະ Acetone ຊື້ຈາກ Sigma-Aldrich (St. Louis, MO, USA).
ສ່ວນປະສົມຂອງ urea (8 g), polyethylene glycol (8 g), ແລະ 8 mL ຂອງ 0.01 N acetic acid ໄດ້ຖືກ stirred ສໍາລັບ 10 ນາທີ, ແລະຫຼັງຈາກນັ້ນ 24 mL ຂອງ TMOS ໄດ້ຖືກຕື່ມໃສ່ໃນນັ້ນພາຍໃຕ້ສະພາບທີ່ເຢັນເປັນກ້ອນ. ປະສົມປະຕິກິລິຢາໄດ້ໃຫ້ຄວາມຮ້ອນທີ່ 40 ° C ສໍາລັບ 6 ຊົ່ວໂມງແລະຫຼັງຈາກນັ້ນຢູ່ທີ່ 120 ° C, ນ້ໍາສະແຕນເລດແຫ້ງແລະ 8 ຊົ່ວໂມງອັດຕະໂນມັດ. 70 ອົງສາ C ເປັນເວລາ 12 ຊົ່ວໂມງ. ມວນອ່ອນທີ່ແຫ້ງແມ່ນເປັນດິນກ້ຽງໃນເຕົາອົບແລະ calcined ທີ່ 550 ° C ເປັນເວລາ 12 ຊົ່ວໂມງ. ສາມຊຸດໄດ້ຖືກກະກຽມແລະມີລັກສະນະເພື່ອກວດກາເບິ່ງການສືບພັນຂອງອະນຸພາກ, ຂະຫນາດ pore ແລະພື້ນທີ່ຫນ້າດິນ.
ດ້ວຍການດັດແປງພື້ນຜິວຂອງອະນຸພາກຊິລິກາດ້ວຍ ligand phenylmaleimide-methylvinylisocyanate (PCMP) ທີ່ສັງເຄາະກ່ອນໜ້າດ້ວຍໂພລີເມີຊຽມດ້ວຍ styrene, ສານປະສົມທີ່ມີກຸ່ມຂົ້ວໂລກໄດ້ຖືກກະກຽມ.ໄລຍະສະຖານີສໍາລັບການລວບລວມແລະຕ່ອງໂສ້ polystyrene. ຂະບວນການກະກຽມແມ່ນໄດ້ອະທິບາຍຂ້າງລຸ່ມນີ້.
N-phenylmaleimide (200 mg) ແລະ methyl vinyl isocyanate (100 mg) ໄດ້ຖືກລະລາຍໃນ toluene ແຫ້ງ, ແລະ 0.1 mL ຂອງ 2,2′-azoisobutyronitrile (AIBN) ໄດ້ຖືກເພີ່ມໃສ່ກະເປົ໋າຕິກິຣິຍາເພື່ອກະກຽມ phenylmaleimide-methyl vinyl isocyanate CPPM ແລະ 0.1 mL ຂອງ 2,2′-azoisobutyronitrile (AIBN) ເຂົ້າໄປໃນກະຕຸກຕິກິຣິຍາເພື່ອກະກຽມ phenylmaleimide-methyl vinyl isocyanate CPPM. ຕາກໃຫ້ແຫ້ງໃນເຕົາອົບທີ່ 40 ອົງສາ C ເປັນເວລາ 3 ຊົ່ວໂມງ.
particles silica ແຫ້ງ (2 g) ໄດ້ຖືກກະແຈກກະຈາຍໃນ toluene ແຫ້ງ (100 mL), stirred ແລະ sonicated ໃນ 500 mL ກະຕຸກລຸ່ມເປັນມົນລະພິດສໍາລັບ 10 min.PMCP (10 mg) ໄດ້ຖືກລະລາຍໃນ toluene ແລະເພີ່ມ dropwise ກັບ flask ປະຕິກິລິຍາໂດຍຜ່ານ funnel ຫຼຸດລົງ. ປະສົມໄດ້ຖືກ refluxed ຢູ່ທີ່ 100 ° C ການກັ່ນຕອງແລະຕາກແດດໃຫ້ແຫ້ງ 6 ຊົ່ວໂມງ. 3 ຊົ່ວໂມງ. ຫຼັງຈາກນັ້ນ, ອະນຸພາກຊິລິກາທີ່ຜູກມັດ PMCP (100 g) ໄດ້ຖືກລະລາຍໃນ toluene (200 ml) ແລະ 4-hydroxy-TEMPO (2 mL) ໄດ້ຖືກຕື່ມໃສ່ໃນທີ່ປະທັບຂອງ 100 µL ຂອງ dibutyltin dilaurate ເປັນຕົວເລັ່ງ. ປະສົມໄດ້ຖືກ stirred ຢູ່ທີ່ 50 ° C ເປັນເວລາ 8 ຊົ່ວໂມງ, ການກັ່ນຕອງ 3 ຊົ່ວໂມງແລະແຫ້ງ.
Styrene (1 mL), benzoyl peroxide BPO (0.5 mL), ແລະອະນຸພາກຊິລິກາທີ່ຕິດຢູ່ TEMPO-PMCP (1.5 g) ຖືກກະແຈກກະຈາຍໃນ toluene ແລະ purified ດ້ວຍໄນໂຕຣເຈນ. ການໂພລີເມີໄຊຂອງ styrene ໄດ້ຖືກປະຕິບັດຢູ່ທີ່ 100 ° C ເປັນເວລາ 12 ຊົ່ວໂມງ. ຜະລິດຕະພັນທີ່ໄດ້ຮັບຜົນໄດ້ຖືກລ້າງດ້ວຍ methanol 60 ° C ແລະຕາກແດດໃຫ້ແຫ້ງ.
ຕົວຢ່າງໄດ້ຖືກ degassed ຢູ່ທີ່ 393 K ສໍາລັບ 1 ຊົ່ວໂມງເພື່ອໃຫ້ໄດ້ຄວາມກົດດັນທີ່ຕົກຄ້າງຫນ້ອຍກວ່າ 10-3 Torr. ປະລິມານຂອງ N2 adsorbed ຢູ່ທີ່ຄວາມກົດດັນພີ່ນ້ອງຂອງ P/P0 = 0.99 ໄດ້ຖືກນໍາໃຊ້ເພື່ອກໍານົດປະລິມານ pore ທັງຫມົດ. morphology ຂອງ particles ຊິລິກາເປົ່າແລະ ligand-bonded ໂຕກຽວໄດ້ຖືກກວດສອບດ້ວຍ micrologitas, ເຕັກໂນໂລຊີສູງຍີ່ປຸ່ນ, scans. (silica ເປົ່າແລະ ligand-bonded particles silica) ໄດ້ຖືກຈັດໃສ່ໃນຖັນອະລູມິນຽມໂດຍໃຊ້ tape carbon adhesive. Gold ໄດ້ຖືກ plated ເທິງຕົວຢ່າງໂດຍໃຊ້ sputter coater Q150T, ແລະຊັ້ນ 5 nm Au ໄດ້ຖືກຝາກໄວ້ໃນຕົວຢ່າງ. ນີ້ປັບປຸງປະສິດທິພາບຂະບວນການໂດຍນໍາໃຊ້ແຮງດັນຕ່ໍາແລະສະຫນອງເມັດພືດອັນດີ, sputtering ເຢັນ.A Thermo Electron 1 ອົງປະກອບຂອງ USA, MA 12 ອົງປະກອບການວິເຄາະ. al analysis.A Malvern (Worcestershire, UK) Mastersizer 2000 particles analyzer is used to get the particle size distribution.Naked silica particles and ligand-bonded silica particles (5 mg each) is dispersed in 5 mL of isopropanol, sonicated for 10 min, the 5 vortexisted Master vortexted and the Master vortexted. ປະຕິບັດໃນອັດຕາຂອງ 5 ° C ຕໍ່ນາທີໃນໄລຍະອຸນຫະພູມຂອງ 30 ຫາ 800 ° C.
ຖັນສະແຕນເລດທີ່ເຮັດດ້ວຍແກ້ວມີຂະໜາດ (100 × 1.8 ມມ id) ໄດ້ຖືກບັນຈຸໂດຍໃຊ້ວິທີການຫຸ້ມຫໍ່ slurry, ນໍາໃຊ້ຂັ້ນຕອນດຽວກັນທີ່ໃຊ້ໃນ Ref.31.A ຖັນສະແຕນເລດ (ເສັ້ນແກ້ວ, 100 × 1.8 ມມ id) ທີ່ມີເຕົ້າສຽບເຕົ້າສຽບທີ່ມີ frit 1 µm ໄດ້ເຊື່ອມຕໍ່ກັບເຄື່ອງຫຸ້ມຫໍ່ slurry (Alltech Deerfield, IL, USA).ກະກຽມ slurry ໄລຍະ stationary ໂດຍການລະງັບ 150 ມລກຂອງໄລຍະ stationary ໃນ 1.2 mL ຂອງ slurry ໄດ້ຖືກນໍາໃຊ້ເປັນຂອງ slurry. ເຊັ່ນດຽວກັນກັບຕົວລະລາຍຂອງ propelling. ຕື່ມໃສ່ຖັນຕາມລໍາດັບໂດຍນໍາໃຊ້ຄວາມກົດດັນຂອງ 100 MP ສໍາລັບ 10 ນາທີ, 80 MP ສໍາລັບ 15 ນາທີ, ແລະ 60 MP ສໍາລັບ 30 ນາທີ. ໃນລະຫວ່າງການຫຸ້ມຫໍ່, ການສັ່ນສະເທືອນກົນຈັກໄດ້ຖືກນໍາໃຊ້ກັບ shakers ຖັນ GC ສອງ (Alltech, Deerfield, IL, USA) ເພື່ອຮັບປະກັນການຫຸ້ມຫໍ່ຂອງຖັນຢ່າງຊ້າໆ. ເຊື່ອມຕໍ່ຖັນຈາກຫນ່ວຍບັນຈຸ slurry ແລະເຊື່ອມຕໍ່ fitting ອື່ນກັບ inlet ແລະລະບົບ LC ເພື່ອກວດກາເບິ່ງປະສິດທິພາບຂອງຕົນ.
ປັ໊ມ LC (10AD Shimadzu, ຍີ່ປຸ່ນ), ຫົວສີດ (Valco (USA) C14 W.05) ທີ່ມີ 50nL injection loop, membrane degasser (Shimadzu DGU-14A), ປ່ອງຢ້ຽມ capillary UV-VIS ໄດ້ຮັບການກໍ່ສ້າງພິເສດ µLC ອຸປະກອນເຄື່ອງກວດຈັບ (UV-2075) ແລະ glass-lined ຫຼາຍຜົນກະທົບຂອງສາຍທໍ່ microcolumns ເຊື່ອມຕໍ່ສັ້ນ. ຫຼັງຈາກການຫຸ້ມຫໍ່, capillaries (50 μm id 365 ແລະການຫຼຸດລົງຂອງ union capillaries (50 μm) ໄດ້ຖືກຕິດຕັ້ງຢູ່ທີ່ 1/16″ outlet ຂອງສະຫະພັນການຫຼຸດຜ່ອນການ. ການເກັບຂໍ້ມູນແລະການປຸງແຕ່ງ chromatographic ແມ່ນເຮັດໄດ້ໂດຍໃຊ້ຊອບແວ Multichro 2000. ການກວດສອບຢູ່ທີ່ 254 nm ການວິເຄາະໄດ້ຖືກທົດສອບສໍາລັບການດູດຊືມຂໍ້ມູນ UV 8.Pro.Chromat.
Albumin ຈາກ serum ຂອງມະນຸດ, ຜົງ lyophilized, ≥ 96% (agarose gel electrophoresis) 3 mg ປະສົມກັບ trypsin (1.5 mg), 4.0 M urea (1 mL), ແລະ 0.2 M ammonium bicarbonate (1 mL).ການແກ້ໄຂໄດ້ຖືກ stirred ສໍາລັບ 10 ນາທີແລະເກັບຮັກສາໄວ້ໃນອາບນ້ໍາທີ່ 370 ° F, 1 mL ສໍາລັບຊົ່ວໂມງ FA, 1 ມລ. ter ການແກ້ໄຂແລະເກັບຮັກສາໄວ້ຕ່ໍາກວ່າ 4 ° C.
ການແຍກສ່ວນປະສົມຂອງ peptide ແລະ HSA trypsin digests ໄດ້ຖືກປະເມີນແຍກຕ່າງຫາກຢູ່ໃນຖັນ PMP. ກວດເບິ່ງການແຍກສ່ວນປະສົມ peptide ແລະ trypsin digest ຂອງ HSA ໂດຍຖັນ PMP ແລະປຽບທຽບຜົນໄດ້ຮັບກັບຖັນ Ascentis Express RP-Amide. ຈໍານວນແຜ່ນທາງທິດສະດີແມ່ນຄິດໄລ່ດັ່ງຕໍ່ໄປນີ້:
ຮູບພາບ SEM ຂອງອະນຸພາກ silica ເປົ່າແລະອະນຸພາກ silica ຜູກມັດ ligand ແມ່ນສະແດງຢູ່ໃນຮູບ.2 .SEM ຮູບພາບຂອງອະນຸພາກຊິລິກາເປົ່າ (A, B) ສະແດງໃຫ້ເຫັນວ່າ, ກົງກັນຂ້າມກັບການສຶກສາທີ່ຜ່ານມາຂອງພວກເຮົາ, particles ເຫຼົ່ານີ້ແມ່ນ spherical ທີ່ອະນຸພາກໄດ້ຖືກຍືດຕົວຫຼືມີຄວາມສົມດຸນທີ່ບໍ່ສະຫມໍ່າສະເຫມີ. ດ້ານຂອງອະນຸພາກ silica ຜູກມັດ ligand (C, D) ແມ່ນ smoother ກ່ວາຂອງຕ່ອງໂສ້ຂອງ silica ເປົ່າ, ພື້ນຖານຂອງ particles silica. ອະນຸພາກ ica.
ການສະແກນຮູບພາບກ້ອງຈຸລະທັດເອເລັກໂຕຣນິກຂອງອະນຸພາກຊິລິກາເປົ່າ (A, B) ແລະອະນຸພາກຊິລິກາທີ່ຜູກມັດ ligand (C, D).
ການແຈກຢາຍຂະໜາດຂອງອະນຸພາກຂອງອະນຸພາກຊິລິກາເປົ່າ ແລະ ອະນຸພາກຊິລິກາທີ່ຜູກມັດດ້ວຍ ligand ແມ່ນສະແດງຢູ່ໃນຮູບທີ 3(A).ເສັ້ນໂຄ້ງການແຜ່ກະຈາຍຂະໜາດຂອງອະນຸພາກທີ່ອີງໃສ່ປະລິມານສະແດງໃຫ້ເຫັນວ່າຂະໜາດຂອງອະນຸພາກຊິລິກາເພີ່ມຂຶ້ນຫຼັງຈາກການປ່ຽນແປງທາງເຄມີ (ຮູບ 3A).ຂໍ້ມູນການແຜ່ກະຈາຍຂະໜາດຂອງອະນຸພາກຂອງອະນຸພາກຊິລິກາຈາກການສຶກສາເມື່ອປຽບທຽບກັບປະລິມານ 1, ຂະໜາດກ່ອນໜ້ານີ້ (ຂະໜາດ T). 5), ຂອງ PMP ແມ່ນ 3.36 μm, ເມື່ອທຽບກັບການສຶກສາທີ່ຜ່ານມາຂອງພວກເຮົາກັບ ad(0.5) ມູນຄ່າຂອງ 3.05 μm (polystyrene-bound silica particles) 34. batch ນີ້ມີການແຜ່ກະຈາຍຂະຫນາດອະນຸພາກແຄບກວ່າເມື່ອທຽບກັບການສຶກສາທີ່ຜ່ານມາຂອງພວກເຮົາເນື່ອງຈາກອັດຕາສ່ວນທີ່ແຕກຕ່າງກັນຂອງ PEG, urea, TMOS, ແລະປະຕິກິລິຍາຂອງທາດປະສົມຂອງອາຊິດ acetic ໄລຍະຂອງ polystyr ເລັກນ້ອຍ. ໄລຍະອະນຸພາກ silica ຜູກມັດທີ່ພວກເຮົາໄດ້ສຶກສາຜ່ານມາ. ນີ້ຫມາຍຄວາມວ່າການທໍາງານຂອງອະນຸພາກຊິລິກາທີ່ມີ styrene ພຽງແຕ່ຝາກຊັ້ນ polystyrene (0.97 µm) ເທິງຫນ້າດິນຊິລິກາ, ໃນຂະນະທີ່ໃນໄລຍະ PMP ຄວາມຫນາຂອງຊັ້ນແມ່ນ 1.38 µm.
ການແຜ່ກະຈາຍຂະໜາດຂອງອະນຸພາກ (A) ແລະການກະຈາຍຂະໜາດຂອງຮູຂຸມຂົນ (B) ຂອງອະນຸພາກຊິລິກາເປົ່າ ແລະອະນຸພາກຊິລິກາທີ່ຜູກມັດ ligand.
ຂະໜາດຂອງຮູຂຸມຂົນ, ບໍລິມາດຂອງຮູຂຸມຂົນ ແລະພື້ນທີ່ຂອງອະນຸພາກຊິລິກາຂອງການສຶກສາໃນປັດຈຸບັນແມ່ນໄດ້ລະບຸໄວ້ໃນຕາຕະລາງ 1(B).ໂປຣໄຟລ໌ PSD ຂອງອະນຸພາກຊິລິກາເປົ່າ ແລະອະນຸພາກຊິລິກາທີ່ຜູກມັດ ligand ແມ່ນສະແດງຢູ່ໃນຮູບທີ 3(B).ຜົນການປຽບທຽບກັບການສຶກສາທີ່ຜ່ານມາຂອງພວກເຮົາ. ຂະຫນາດ pore ຂອງ silica ເປົ່າ ແລະ particles 10 ຜູກມັດ, 2. ຂະຫນາດ pore ຫຼຸດລົງ 69 ຫຼັງຈາກການປ່ຽນແປງທາງເຄມີ, ດັ່ງທີ່ສະແດງຢູ່ໃນຕາຕະລາງ 1(B), ແລະການປ່ຽນແປງຂອງເສັ້ນໂຄ້ງແມ່ນສະແດງຢູ່ໃນຮູບທີ 3(B). ເຊັ່ນດຽວກັນ, ປະລິມານ pore ຂອງອະນຸພາກຊິລິກາຫຼຸດລົງຈາກ 0.67 ຫາ 0.58 cm3 / g ຫຼັງຈາກການດັດແປງທາງເຄມີ. ພື້ນທີ່ສະເພາະຂອງ silica / 16 g ຂອງການສຶກສາທີ່ຜ່ານມາຂອງພວກເຮົາແມ່ນການສຶກສາທີ່ຜ່ານມາ. (124 m2/g).ດັ່ງທີ່ສະແດງຢູ່ໃນຕາຕະລາງ 1(B), ພື້ນທີ່ຫນ້າດິນ (m2/g) ຂອງອະນຸພາກຊິລິກາຍັງຫຼຸດລົງຈາກ 116 m2/g ເປັນ 105 m2/g ຫຼັງຈາກການປ່ຽນແປງທາງເຄມີ.
ຜົນໄດ້ຮັບຂອງການວິເຄາະອົງປະກອບຂອງໄລຍະ stationary ແມ່ນສະແດງຢູ່ໃນຕາຕະລາງ 2.The carbon loading ຂອງໄລຍະ stationary ໃນປັດຈຸບັນແມ່ນ 6.35%, ເຊິ່ງຕ່ໍາກ່ວາການໂຫຼດຄາບອນຂອງການສຶກສາທີ່ຜ່ານມາຂອງພວກເຮົາ (polystyrene ຜູກມັດ particles silica, 7.93% 35 ແລະ 10.21%, ຕາມລໍາດັບ) 42. ເນື່ອງຈາກວ່າການໂຫຼດຄາບອນຂອງໄລຍະ stationary ໃນປະຈຸບັນ, lige ແລະການກະກຽມຕ່ໍາຂອງ SP ບາງ. s ເຊັ່ນ phenylmaleimide-methylvinylisocyanate (PCMP) ແລະ 4-hydroxy-TEMPO ຖືກນໍາໃຊ້. ນ້ໍາຫນັກໄນໂຕຣເຈນສ່ວນຮ້ອຍຂອງໄລຍະ stationary ໃນປັດຈຸບັນແມ່ນ 2.21%, ເມື່ອທຽບກັບ 0.1735 ແລະ 0.85% ໂດຍນ້ໍາຫນັກຂອງໄນໂຕຣເຈນໃນການສຶກສາທີ່ຜ່ານມາ, ຕາມລໍາດັບ. ນີ້ຫມາຍຄວາມວ່າ wt % ສະຖານີຂອງໄນໂຕຣເຈນແມ່ນສູງກວ່າຂອງຜະລິດຕະພັນໃນປະຈຸບັນຂອງ phenyl imlar (S carboni) ໃນໄລຍະການໂຫຼດ. ) ແລະ (5) ແມ່ນ 2.7% ແລະ 2.9%, ຕາມລໍາດັບ, ໃນຂະນະທີ່ການໂຫຼດຄາບອນຂອງຜະລິດຕະພັນສຸດທ້າຍ (6) ແມ່ນ 6,35%, ດັ່ງທີ່ສະແດງຢູ່ໃນຕາຕະລາງ 2. ການສູນເສຍນ້ໍາຫນັກໄດ້ຖືກກວດສອບດ້ວຍ PMP stationary phase, ແລະເສັ້ນໂຄ້ງ TGA ສະແດງໃຫ້ເຫັນໃນຮູບ 4. ເສັ້ນໂຄ້ງ TGA ສະແດງໃຫ້ເຫັນການສູນເສຍນ້ໍາຫນັກ 8.6%, ຄາບອນຍັງ 5% ເທົ່ານັ້ນ, ແລະ 6.5% ຂອງການໂຫຼດທີ່ດີ, ແລະ 6%. ຮ.
The phenylmaleimide-methylvinylisocyanate ligand ໄດ້ຖືກເລືອກສໍາລັບການດັດແປງພື້ນຜິວຂອງອະນຸພາກຊິລິກາເນື່ອງຈາກວ່າມັນມີກຸ່ມ phenylmaleimide ຂົ້ວໂລກແລະກຸ່ມ vinylisocyanate. ກຸ່ມ Vinyl isocyanate ສາມາດປະຕິກິລິຢາເພີ່ມເຕີມກັບ styrene ດ້ວຍການດໍາລົງຊີວິດຂອງ polymerization ຮາກ. ເຫດຜົນທີສອງແມ່ນການໃສ່ກຸ່ມທີ່ມີປະຕິສໍາພັນຂອງສະຖານີ electrostatic ປານກາງທີ່ບໍ່ມີຄວາມເຂັ້ມແຂງແລະປະຕິສໍາພັນລະຫວ່າງ analleyte. imide moiety ບໍ່ມີຄ່າ virtual ຢູ່ທີ່ pH ປົກກະຕິ. Polarity ຂອງໄລຍະ stationary ສາມາດຄວບຄຸມໄດ້ໂດຍປະລິມານທີ່ດີທີ່ສຸດຂອງ styrene ແລະເວລາຕິກິຣິຍາຂອງ polymerization ອະນຸມູນອິດສະລະ. ຂັ້ນຕອນສຸດທ້າຍຂອງຕິກິຣິຍາ (ໂພລີເມີຊຽມຟຣີ) ແມ່ນສໍາຄັນແລະສາມາດປ່ຽນ polarity ຂອງໄລຍະ stationary ໄດ້. ການວິເຄາະອົງປະກອບໄດ້ຖືກປະຕິບັດເພື່ອກວດກາເບິ່ງການໂຫຼດກາກບອນຂອງສະຖານີດັ່ງກ່າວໄດ້ເພີ່ມຂຶ້ນ styren ໄລຍະເວລາຂອງຕິກິຣິຍາ. ໄລຍະ ary ແລະໃນທາງກັບກັນ.SPs ທີ່ກະກຽມດ້ວຍຄວາມເຂັ້ມຂຸ້ນຂອງ styrene ມີການໂຫຼດຄາບອນທີ່ແຕກຕ່າງກັນ. ອີກເທື່ອຫນຶ່ງ, ໂຫຼດໄລຍະ stationary ເຫຼົ່ານີ້ເຂົ້າໄປໃນຖັນສະແຕນເລດແລະກວດເບິ່ງປະສິດທິພາບ chromatographic ຂອງເຂົາເຈົ້າ (ການຄັດເລືອກ, ຄວາມລະອຽດ, ຄ່າ N, ແລະອື່ນໆ). ອີງຕາມການທົດລອງເຫຼົ່ານີ້, ສູດທີ່ດີທີ່ສຸດໄດ້ຖືກຄັດເລືອກເພື່ອກະກຽມໄລຍະ stationary PMP ເພື່ອຮັບປະກັນການເກັບຮັກສາ polaryte ຄວບຄຸມແລະ analalyte ທີ່ດີ.
ຫ້າປະສົມ peptide (Gly-Tyr, Gly-Leu-Tyr, Gly-Gly-Tyr-Arg, Tyr-Ile-Gly-Ser-Arg, leucine enkephalin) ຍັງຖືກປະເມີນໂດຍໃຊ້ຖັນ PMP ໂດຍໃຊ້ໄລຍະມືຖື;60/40 (v/v) acetonitrile/water (0.1% TFA) ໃນອັດຕາການໄຫຼຂອງ 80 μL/ນາທີ. ພາຍໃຕ້ເງື່ອນໄຂທີ່ດີທີ່ສຸດຂອງ elution, ຈໍານວນແຜ່ນທິດສະດີ (N) ຕໍ່ຖັນ (100 × 1.8 ມມ id) ແມ່ນ 20,000 ± 100 ສາມຖັນ (200,000 T MP). ແລະ chromatograms ແມ່ນສະແດງຢູ່ໃນຮູບ 5A. ການວິເຄາະໄວໃນຖັນ PMP ທີ່ມີອັດຕາການໄຫຼສູງ (700 μL/ນາທີ), ຫ້າ peptides ຖືກ eluted ພາຍໃນຫນຶ່ງນາທີ, ຄ່າ N ແມ່ນດີຫຼາຍ, 13,500 ± 330 ຕໍ່ຖັນ (100 × 1.8 ມມ id), T 1050g, Correspondm to 1000g / 1.5mm. ຖັນຂະໜາດ entically (100 × 1.8 mm id) ໄດ້ຖືກບັນຈຸສາມຊຸດ PMP stationary ທີ່ແຕກຕ່າງກັນເພື່ອກວດສອບການສືບພັນ. ຄວາມເຂັ້ມຂຸ້ນຂອງການວິເຄາະສໍາລັບແຕ່ລະຄໍລໍາໄດ້ຖືກບັນທຶກໄວ້ໂດຍໃຊ້ເງື່ອນໄຂ elution ທີ່ດີທີ່ສຸດແລະຈໍານວນແຜ່ນທິດສະດີ N ແລະເວລາເກັບຮັກສາເພື່ອແຍກສ່ວນປະສົມການທົດສອບດຽວກັນໃນແຕ່ລະຖັນ. ຂໍ້ມູນການສືບພັນຂອງຄໍລໍາ PMP ທີ່ມີຄວາມສາມາດໃນການຜະລິດຄືນໃຫມ່ແມ່ນດີຫຼາຍ. % ຄ່າ RSD, ດັ່ງທີ່ສະແດງຢູ່ໃນຕາຕະລາງ 3.
ການແຍກປະສົມ peptide ໃນຖັນ PMP (B) ແລະຖັນ Ascentis Express RP-Amide (A);ໄລຍະມືຖື 60/40 ACN/H2O (TFA 0.1%), ຂະໜາດຖັນ PMP (100 × 1.8 mm id);analytical ລໍາດັບ elution ຂອງທາດປະສົມ: 1 (Gly-Tyr), 2 (Gly-Leu-Tyr), 3 (Gly-Gly-Tyr-Arg), 4 (Tyr-Ile-Gly-Ser-Arg) ແລະ 5 (leucine) ອາຊິດ enkephalin)).
ຖັນ PMP (100 × 1.8 ມມ id) ໄດ້ຖືກປະເມີນສໍາລັບການແຍກການຍ່ອຍສະຫຼາຍ tryptic ຂອງ albumin serum ຂອງມະນຸດໃນ chromatography ຂອງແຫຼວທີ່ມີປະສິດທິພາບສູງ. ໂຄມາໂຕແກຣມໃນຮູບ 6 ສະແດງໃຫ້ເຫັນວ່າຕົວຢ່າງໄດ້ຖືກແຍກອອກໄດ້ດີແລະຄວາມລະອຽດແມ່ນດີຫຼາຍ.HSA digests ໄດ້ຖືກວິເຄາະໂດຍໃຊ້ອັດຕາການໄຫຼຂອງ 100 µL/wateraceit/min, mobile phase 100 µL/min. s ສະແດງໃຫ້ເຫັນໃນ chromatogram (ຮູບ 6), ການຍ່ອຍອາຫານ HSA ໄດ້ຖືກແບ່ງອອກເປັນ 17 ສູງສຸດທີ່ສອດຄ້ອງກັນກັບ 17 peptides. ປະສິດທິພາບການແຍກຂອງແຕ່ລະຈຸດສູງສຸດໃນການຍ່ອຍອາຫານ HSA ໄດ້ຖືກຄິດໄລ່ແລະຄ່າແມ່ນໄດ້ຮັບໃນຕາຕະລາງ 5.
A tryptic digest ຂອງ HSA (100 × 1.8 mm id) ຖືກແຍກຢູ່ໃນຖັນ PMP;ອັດຕາການໄຫຼ (100 µL/ນາທີ), ໄລຍະມືຖື 60/40 acetonitrile/water ກັບ 0.1% TFA.
ບ່ອນທີ່ L ເປັນຄວາມຍາວຂອງຖັນ, η ແມ່ນຄວາມຫນືດຂອງໄລຍະມືຖື, ΔP ແມ່ນຄວາມກົດດັນກັບຄືນໄປບ່ອນຂອງຖັນ, ແລະ u ແມ່ນຄວາມໄວເສັ້ນຂອງໄລຍະມືຖື. ການ permeability ຂອງຖັນ PMP ແມ່ນ 2.5 × 10-14 m2, ອັດຕາການໄຫຼແມ່ນ 25 μL / ນາທີ, ແລະ 60/40 v / v / v ຖັນ ACN / ນ້ໍາແມ່ນ 10 MP. ຄ້າຍຄືກັນກັບການສຶກສາທີ່ຜ່ານມາຂອງພວກເຮົາ Ref.34.The permeability ຂອງຖັນ packed ມີອະນຸພາກ porous superficially ແມ່ນ: 1.7 × 10-15 ສໍາລັບ 1.3 μm particles, 3.1 × 10-15 ສໍາລັບ 1.7 μm particles, 5.2 × 10-15 particles form 2.2 m. particles 43. ດັ່ງນັ້ນ, permeability ຂອງໄລຍະ PMP ແມ່ນຄ້າຍຄືກັນກັບ 5 μm core-shell particles.
ບ່ອນທີ່ Wx ແມ່ນນໍ້າໜັກຂອງຖັນທີ່ບັນຈຸດ້ວຍ chloroform, Wy ແມ່ນນໍ້າໜັກຂອງຖັນທີ່ບັນຈຸດ້ວຍ methanol, ແລະ ρ ແມ່ນຄວາມໜາແໜ້ນຂອງຕົວລະລາຍ.ຄວາມໜາແໜ້ນຂອງ methanol (ρ = 0.7866) ແລະ chloroform (ρ = 1.484).ຄວາມ porosity ທັງໝົດຂອງ SILICA PARTICLES-10 mm.-108 columns. ຖັນ Urea 31 ທີ່ພວກເຮົາໄດ້ສຶກສາຜ່ານມາແມ່ນ 0.63 ແລະ 0.55 ຕາມລໍາດັບ. ນີ້ຫມາຍຄວາມວ່າການມີ urea ligands ຫຼຸດຜ່ອນການ permeability ຂອງໄລຍະ stationary. ໃນອີກດ້ານຫນຶ່ງ, porosity ທັງຫມົດຂອງຖັນ PMP (100 × 1.8 ມມ id) ແມ່ນ 0.60. ການ permeability ຂອງ particles ຕ່ໍາກວ່າ PMP ຖັນທີ່ມີ 1 CMP. C18-type stationary phases the C18 ligands are attached to the silica particles as linear chains , ໃນຂະນະທີ່ຢູ່ໃນໄລຍະ stationary ປະເພດ polystyrene, ຊັ້ນໂພລີເມີທີ່ຂ້ອນຂ້າງຫນາໄດ້ຖືກສ້າງຕັ້ງຂຶ້ນອ້ອມຮອບມັນ. ໃນການທົດລອງທົ່ວໄປ, porosity ຖັນແມ່ນຄິດໄລ່ເປັນ:
ຮູບ 7A,B ສະແດງຖັນ PMP (100 × 1.8 mm id) ແລະຖັນ Ascentis Express RP-Amide (100 × 1.8 mm id) ໂດຍໃຊ້ເງື່ອນໄຂ elution ດຽວກັນ (ເຊັ່ນ: 60/40 ACN/H2O ແລະ 0.1% TFA).) ຂອງດິນຕອນ Van Deemter.ທາດປະສົມ peptide ທີ່ເລືອກ (Gly-Tyr, Gly-Leu-Tyr, Gly-Gly-Tyr-Arg, Tyr-Ile-Gly-Ser-Arg, Leucine Enkephalin) ໄດ້ຖືກກະກຽມໃນ 20 µL/ ອັດຕາການໄຫຼຕໍ່າສຸດຂອງທັງສອງຖັນແມ່ນ 800 µL/ນາທີ. ຄ່າ HETP ສູງສຸດຂອງຖັນແມ່ນ 800 µMP (L/min). ຖັນ Express RP-Amide ແມ່ນ 2.6 µm ແລະ 3.9 µm, ຕາມລໍາດັບ. ຄ່າ HETP ຊີ້ໃຫ້ເຫັນວ່າປະສິດທິພາບການແຍກຂອງຖັນ PMP (100 × 1.8 mm id) ແມ່ນດີກ່ວາຖັນ Ascentis Express RP-Amide ທີ່ມີການຄ້າຫຼາຍ (100 × 1.8 mm. id ເພີ່ມຂຶ້ນ 7. ມູນຄ່າຂອງ van ບໍ່ໄດ້ຫຼຸດລົງ). ທີ່ສໍາຄັນເມື່ອທຽບກັບການສຶກສາທີ່ຜ່ານມາຂອງພວກເຮົາ. ປະສິດທິພາບການແຍກທີ່ສູງຂຶ້ນຂອງຖັນ PMP (100 × 1.8 ມມ id) ເມື່ອທຽບກັບຄໍລໍາ Ascentis Express RP-Amide ແມ່ນອີງໃສ່ການປັບປຸງຮູບຮ່າງຂອງອະນຸພາກ, ຂະຫນາດ, ແລະຂັ້ນຕອນການຫຸ້ມຫໍ່ຖັນສະລັບສັບຊ້ອນທີ່ໃຊ້ໃນ work34 ປະຈຸບັນ.
(A) van Deemter plot (HETP versus mobile phase linear velocity) ທີ່ໄດ້ຮັບໂດຍໃຊ້ຖັນ PMP (100 × 1.8 mm id) ໃນ 60/40 ACN/H2O ກັບ 0.1% TFA.(B) van Deemter plot (HETP versus mobile phase linear velocity) ໄດ້ຮັບໂດຍໃຊ້ຖັນ Ascentis Express 40 × RP10.0-10m. CN/H2O ກັບ 0.1% TFA.
ໄລຍະສະຖານີ polystyrene ຝັງຢູ່ຂົ້ວໂລກໄດ້ຖືກກະກຽມແລະການປະເມີນຜົນສໍາລັບການແຍກສານປະສົມ peptide ສັງເຄາະແລະການຍ່ອຍສະຫຼາຍ trypsin ຂອງ albumin serum ຂອງມະນຸດ (HAS) ໃນ chromatography ແຫຼວປະສິດທິພາບສູງ. ການປະຕິບັດ chromatographic ຂອງຖັນ PMP ສໍາລັບ peptide ປະສົມແມ່ນດີເລີດໃນປະສິດທິພາບການແຍກແລະການແກ້ໄຂ. ການປັບປຸງປະສິດທິພາບການແຍກຕົວຂອງ PMP ຂະຫນາດ, ຂະຫນາດຂອງ particles ເປັນເຫດຜົນ. , ການສັງເຄາະຄວບຄຸມຂອງໄລຍະ stationary, ແລະການຫຸ້ມຫໍ່ຖັນສະລັບສັບຊ້ອນ. ນອກຈາກປະສິດທິພາບການແຍກສູງ, ຄວາມກົດດັນກັບຄືນໄປບ່ອນຖັນຕ່ໍາໃນອັດຕາການໄຫຼສູງແມ່ນປະໂຫຍດອີກຢ່າງຫນຶ່ງຂອງໄລຍະ stationary ນີ້. ຖັນ PMP ສະແດງໃຫ້ເຫັນການສືບພັນທີ່ດີແລະສາມາດນໍາໃຊ້ສໍາລັບການວິເຄາະການປະສົມ peptide ແລະການຍ່ອຍອາຫານ trypsin ຂອງທາດໂປຼຕີນຕ່າງໆ. ພວກເຮົາຕັ້ງໃຈທີ່ຈະໃຊ້ຄໍລໍານີ້ສໍາລັບການແຍກສານສະກັດຈາກທໍາມະຊາດແລະສານສະກັດຈາກ fungal ທໍາມະຊາດ, peptides. ຖັນ MP ຍັງຈະໄດ້ຮັບການປະເມີນສໍາລັບການແຍກທາດໂປຼຕີນແລະພູມຕ້ານທານ monoclonal.
Field, JK, Euerby, MR, Lau, J., Thøgersen, H. & Petersson, P. ການຄົ້ນຄວ້າກ່ຽວກັບລະບົບການແຍກ Peptide ໂດຍ Reversed Phase Chromatography Part I: ການພັດທະນາ Column Characterization Protocol.J.Chromatography.1603, 113–129.https://doi.org/10.1016/j.chroma.2019.05.038 (2019).
Gomez, B. et al.ປັບປຸງ peptides ທີ່ມີການເຄື່ອນໄຫວທີ່ຖືກອອກແບບມາສໍາລັບການປິ່ນປົວພະຍາດຕິດຕໍ່.Biotechnology.Advanced.36(2), 415-429.https://doi.org/10.1016/j.biotechadv.2018.01.004 (2018).
Vlieghe, P., Lisowski, V., Martinez, J. & Khrestchatisky, M. Synthetic therapeutic peptides: science and the market.drug discovery.15 (1-2) today, 40-56.https://doi.org/10.1016/j.drudis.2009.10.10.
Xie, F., Smith, RD & Shen, Y. Advanced Proteomic Liquid Chromatography.J.Chromatography.A 1261, 78–90 (2012).
Liu, W. et al. Advanced chromatography-sspectrometry ຂອງແຫຼວ ຊ່ວຍໃຫ້ການລວມຕົວຂອງ metabolomics ເປົ້າໝາຍຢ່າງກວ້າງຂວາງ ແລະ proteomics.anus.Chim.Acta 1069, 89–97 (2019).
Chesnut, SM & Salisbury, JJ ບົດບາດຂອງ UHPLC ໃນການພັດທະນາຢາເສບຕິດ.J.Sep. Sci.30(8), 1183-1190 (2007).
Wu, N. & Clausen, AM ພື້ນຖານແລະພາກປະຕິບັດຂອງ chromatography ແຫຼວຄວາມກົດດັນສູງສຸດສໍາລັບການແຍກຕ່າງຫາກຢ່າງໄວວາ.J.Sep. Sci.30(8), 1167-1182.https://doi.org/10.1002/jssc.200700026 (2007).
Wren, SA & Tchelitcheff, P. ຄໍາຮ້ອງສະຫມັກຂອງ chromatography ແຫຼວທີ່ມີປະສິດທິພາບສູງໃນການພັດທະນາຢາ.Chromatography.1119(1-2), 140-146.https://doi.org/10.1016/j.chroma.2006.02.052 (2006).
Gu, H. et al.Monolithic macroporous hydrogels ກະກຽມຈາກ emulsions ໄລຍະພາຍໃນສູງຂອງນ້ໍາມັນໃນນ້ໍາສໍາລັບການຊໍາລະລ້າງປະສິດທິພາບຂອງ enteroviruses.Chemical.Britain.J.401, 126051 (2020).
Shi, Y., Xiang, R., Horváth, C. & Wilkins, JA ບົດບາດຂອງ chromatography ແຫຼວໃນ proteomics.J.Chromatography.A 1053(1-2), 27-36 (2004).
Fekete, S., Veuthey, J.-L.&Guillarme, D. ທ່າອ່ຽງທີ່ພົ້ນເດັ່ນຂື້ນໃນການແຍກທາດໂຄຣມາໂຕຼີຂອງແຫຼວໄລຍະປີ້ນກັນຂອງ peptides ແລະທາດໂປຼຕີນໃນການປິ່ນປົວ: ທິດສະດີ ແລະຄໍາຮ້ອງສະຫມັກ.J.Pharmacy.Biomedical Science.anus.69, 9-27 (2012).
Gilar, M., Olivova, P., Daly, AE & Gebler, JC ການແຍກ peptides ສອງມິຕິລະດັບໂດຍໃຊ້ລະບົບ RP-RP-HPLC ໂດຍໃຊ້ຄ່າ pH ທີ່ແຕກຕ່າງກັນໃນຂະຫນາດແຍກທໍາອິດແລະທີສອງ.J.Sep. Sci.28(14), 1694-1703 (2005).
Feletti, S. et al. ລັກສະນະການໂອນມະຫາຊົນແລະການປະຕິບັດ kinetic ຂອງຖັນ chromatographic ທີ່ມີປະສິດທິພາບສູງທີ່ບັນຈຸ C18 sub-2 μmຢ່າງເຕັມສ່ວນແລະອະນຸພາກ porous superficially ໄດ້ຖືກສືບສວນ.J.Sep. Sci.43 (9-10), 1737-1745 (2020).
Piovesana, S. et al. ແນວໂນ້ມທີ່ຜ່ານມາ ແລະສິ່ງທ້າທາຍໃນການວິເຄາະໃນການໂດດດ່ຽວ, ການກໍານົດ ແລະການກວດສອບຂອງພືດ bioactive peptides.anus.biological anus.Chemical.410(15), 3425–3444.https://doi.org/10.1007/s0018x2016.
Mueller, JB et al.ພູມສັນຖານ proteomic ຂອງອານາຈັກແຫ່ງຊີວິດ.Nature 582(7813), 592-596.https://doi.org/10.1038/s41586-020-2402-x (2020).
DeLuca, C. et al.Downstream processing of therapeutic peptides by preparative liquid chromatography.Molecule (Basel, Switzerland) 26(15), 4688(2021).
Yang, Y. & Geng, X. Mixed-mode chromatography ແລະການນໍາໃຊ້ຂອງມັນກັບ biopolymers.J.Chromatography.A 1218(49), 8813–8825 (2011).
Zhao, G., Dong, X.-Y.& Sun, Y. Ligands ສໍາລັບການປະສົມຂອງທາດໂປຼຕີນຈາກ chromatography: ຫຼັກການ, ລັກສະນະ, ແລະການອອກແບບ.J.Biotechnology.144(1), 3-11 (2009).