„Niekada neabejokite, kad maža mąstančių, atsidavusių piliečių grupė gali pakeisti pasaulį.Tiesą sakant, tai vienintelis ten.
Cureus misija yra pakeisti ilgalaikį medicinos leidybos modelį, kuriame mokslinių tyrimų pateikimas gali būti brangus, sudėtingas ir atimantis daug laiko.
Trombocitais turtinga plazma/prp, audinių regeneracija, trombocitų aktyvinimas, gliukozės proliferacinė terapija, trombocitai, proliferacinė terapija
Cituokite šį straipsnį kaip: Harrison TE, Bowler J, Reeves K ir kt.(2022 m. gegužės 17 d.) Gliukozės poveikis trombocitų skaičiui ir tūriui: poveikis regeneracinei medicinai.Gydymas 14(5): e25081.doi: 10.7759/cureus.25081
Trombocitais turtinga plazma (PRP) ir hipertoniniai gliukozės tirpalai dažniausiai naudojami injekcijoms regeneracinėje medicinoje, kartais kartu.Anksčiau nebuvo pranešta apie hipertoninės gliukozės poveikį trombocitų lizei ir aktyvacijai.Ištyrėme padidėjusios gliukozės koncentracijos poveikį trombocitų ir eritrocitų skaičiui, taip pat ląstelių tūriui PRP ir visame kraujyje (WB).Greitas dalinis trombocitų skaičiaus sumažėjimas įvyko su visais gliukozės mišiniais, sumaišytais su PRP arba visu krauju, o tai atitinka dalinę lizę. Po pirmos minutės trombocitų skaičius išliko stabilus, o tai rodo, kad liekamieji trombocitai greitai prisitaiko iki ekstremalaus (>2000 mOsm) hipertoniškumo. Po pirmos minutės trombocitų skaičius išliko stabilus, o tai rodo, kad liekamieji trombocitai greitai prisitaiko iki ekstremalaus (>2000 mOsm) hipertoniškumo. После первой минуты количество тромбоцитов оставалось стабильным, что указывает на быструю аккомоданыцитою аккомодацитов экстремального (>2000 мОсм) гипертонуса. Po pirmos minutės trombocitų skaičius išliko stabilus, o tai rodo greitą likusių trombocitų prisitaikymą iki ekstremalaus (> 2000 mOsm) hipertoniškumo.第一分钟后，血小板计数保持稳定，表明残余血小板迅速适应极端（> 2000 m（0m（2000 mOsm）高渗状态. После первой минуты количество тромбоцитов оставалось стабильным, что указывает на быструю адаптацитмокоствоцитою стремальному (>2000 мОсм) гиперосмолярному состоянию. Po pirmosios minutės trombocitų skaičius išliko stabilus, o tai rodo greitą likusių trombocitų prisitaikymą prie ekstremalios (> 2000 mOsm) hiperosmolinės būklės.Gliukozės koncentracija 25 % ir didesnė reikšmingai padidino vidutinį trombocitų tūrį (MPV), o tai rodo ankstyvą trombocitų aktyvacijos stadiją.Reikia atlikti tolesnius tyrimus, siekiant nustatyti, ar vyksta trombocitų lizė arba aktyvacija ir ar hipertoninė gliukozės injekcija atskirai arba kartu su PRP gali suteikti papildomos klinikinės naudos.
1950-aisiais amerikiečių chirurgas George'as Hackettas atrado, kad jis gali visam laikui palengvinti daugelio pacientų sąnarių ir nugaros skausmus, į sausgysles ir raiščius suleis proliferacinį tirpalą.Jo eksperimentai su triušiais parodė, kad gydymas, kurį jis pavadino proliferacine terapija, padidino ir sustiprėjo sausgysles.Histologiniai tyrimai patvirtino, kad šio proceso metu gaminasi naujas kolagenas [1].
Per pirmuosius kelis dešimtmečius buvo išbandyta daug įvairių platinimo sprendimų.Dešimtajame dešimtmetyje dauguma praktikų manė, kad didelės koncentracijos gliukozė yra saugiausias ir veiksmingiausias būdas.Tačiau veikimo mechanizmas lieka neaiškus.
Po Hacketto darbo XX amžiuje buvo atlikta nedaug klinikinių tyrimų.Tačiau 2000-aisiais susidomėjimas atsinaujino ir buvo baigti keli sėkmingi klinikiniai proliferacinės terapijos tyrimai nugaros skausmui [2], kelio osteoartritui [3] ir šoniniam epikondilitui gydyti [4].
Audinių regeneracijai reikalingas kamieninių ląstelių dalyvavimas.Todėl didelės gliukozės koncentracijos turi kažkaip paskatinti kamieninių ląstelių migraciją, replikaciją ir diferenciaciją.Manome, kad trombocitai gali veikti kaip pasiuntiniai ir kad dėl didelės gliukozės koncentracijos trombocitai gali išskirti citokinus ir augimo faktorius, taip skatinant regeneracinius procesus, ypač kamieninių ląstelių migraciją į sritis, kuriose yra didelė gliukozės koncentracija.
Trombocitų aktyvacija visada vyksta prieš padidėjusį kalcio kiekį ląstelėje [5].Liu ir kt.2008 m. parodė, kad didelis gliukozės kiekis padidina trumpalaikių receptorių potencialo kanoninio tipo 6 (TRPC6) kanalų aktyvumą plazmos membranoje, o tai lemia kalcio jonų antplūdį į trombocitus [6].Kitas tyrimas parodė, kad mikrovamzdelių kraštinės zonos veikimas kalcio jonais sukelia ribinės zonos atsipalaidavimą, išsiplėtimą ir deformaciją, o tai savo ruožtu sukelia disko formos pasikeitimą į sferinę, todėl susidaro vidutinis trombocitų tūris (MPV) [7].
Mūsų hipotezė šiame tyrime yra ta, kad didelės gliukozės koncentracijos trombocitų poveikis paveikia mikrotubulų kraštinę zoną ir tarpląstelinę aplinką, todėl padidėja MPV.
Visi dalyviai pasirašė informuoto sutikimo formą po to, kai buvo paaiškinta tyrimo informacija ir prieš gaudami mėginius.Šiame tyrime buvo naudojami tik PRP mėginiai, kurių hematokritas didesnis nei 2%, kad būtų galima palyginti eritrocitų (eritrocitų) skaičių ir vidutinį raudonųjų kraujo kūnelių (MCV) tūrį.
Tyrimas buvo atliktas keturiomis fazėmis, pirmoji fazė buvo PRP, o likusios fazės buvo viso kraujo (1 lentelė).Kaip aprašyta anksčiau [8], visos santykinės išcentrinės jėgos (RCF, g jėga) buvo apskaičiuotos nuo kraujo stulpelio vidurio taško (Rmid, cm) išcentriniame švirkšte.Mes pasirinkome naudoti MPV kaip trombocitų jautrinimo žymeklį ir trombocitų skaičių kaip galimo trombocitų lizės rodiklį, kuriuos abu galima lengvai išmatuoti standartiniais hematologijos analizatoriais.
Pirmajame etape 47 savanoriai paaukojo kraujo mėginius – vieną etilendiaminotetraacto rūgšties (EDTA) mėgintuvėlį ir vieną PRP viso kraujo mėginį (antikoaguliuotą natrio citratu (NaCl, 3%)) (1 lentelė).Nedelsdami įdėkite svirtį į vamzdelį.Visiškas kraujo tyrimas (CBC) buvo atliktas EDTA mėginiams trimis egzemplioriais, o NaCl mėginiai buvo tiriami trimis egzemplioriais CBC analizei, o tada PRP buvo paruoštas įvairiais aukščiau aprašytais metodais [8].Visi PRP mėginiai buvo paruošti centrifuguojant 900–1000 g.Kiekvieną PRP mėginį maišykite sūkuriniame maišytuve 5–10 sekundžių, tada padalykite penkias 0,5 ml alikvotas į mėgintuvėlius.
Norint įvertinti trombocitų ekspozicijos įtaką padidėjusiai gliukozės koncentracijai, vienodi kiekiai (0,5 ml) 0%, 5%, 12,5%, 25% ir 50% gliukozės vandenyje buvo sumaišyti su trombocitų mėginiais, kad būtų gauta 0%, 2,5% 6,25%, 12,5% ir 25% koncentracijos mėgintuvėlyje ir 1 min.Kiekvieno mišinio BLSK buvo analizuojamas trimis egzemplioriais po 15 min.Trombocitų skaičius (PLT), RBC skaičius, MCV ir MPV buvo apskaičiuotas kiekvienam mėgintuvėliui, o vidutinis trombocitų skaičius, eritrocitų skaičius, MCV ir MPV buvo apskaičiuotas visiems PRP mėginiams.
Pasibaigus pirmajam duomenų rinkimo etapui, pastebėjome reikšmingą PRP trombocitų trombocitų tūrio padidėjimą pridėjus D50W.PRP trombocitai nebūtinai atspindi visus trombocitus kraujyje, o PRP terpė skiriasi nuo WB terpės.Todėl nusprendėme atlikti antrojo etapo D50W įvedimo į kraują poveikio tyrimą.
Antrajam etapui pasirinkome 30 imties dydį, atsižvelgdami į pirmosios serijos rezultatus, kaip aprašyta analizės skyriuje.Šioje serijoje 20 savanorių paaukojo kraujo mėginius (1 lentelė).Visas kraujas (1,8 ml) buvo paimtas į 3 ml švirkštą ir antikoaguliuotas 0,2 ml 40% NaCl.Visas kraujo švirkštas buvo maišomas penkias sekundes sūkuriniu maišytuvu ir CBC buvo analizuojamas trimis egzemplioriais.Atlikus analizę, antikoaguliuotas kraujas buvo įpiltas į 2 ml 50% gliukozės 5 ml švirkšte (galutinė gliukozės koncentracija buvo maždaug 25% (D25) ir įdėta į kratymo mėgintuvėlį 30 minučių. Po 30 minučių D25/CBC WB švirkštuose buvo ištirta trimis egzemplioriais. Buvo tiriamas PMC skaičius, PV ir vidutinis trombocitų skaičius, MLT , RBC skaičius, MCV ir MPV buvo apskaičiuoti kiekvienam mėginiui prieš ir po gliukozės pridėjimo.
Kadangi proliferacinės gliukozės terapijos metu dėl minimaliai invazinės injekcijos kraujo trombocitai paprastai yra veikiami hipertoninės gliukozės ir nėra įprasta derinti PRP su hipertonine gliukoze prieš pat injekciją, nusprendėme tirti hipertoninę gliukozę kartu su WB 1 skyriuje. Trečias ir ketvirtas veiksmas.Kiekviename etape 20 savanorių paaukojo 7-8 ml ACD-A (rūgšties turinčio trinatrio citrato (22,0 g/l), citrinų rūgšties (8,0 g/l) ir gliukozės (24,5 g/l), dekstrozės citrato tirpalo) kraujo krešėjimą mažinantiems preparatams (1 lentelė).Norint nustatyti slenkstinį procentą, susijusį su MPV padidėjimu, buvo naudojami tik didesni nei 12,5% gliukozės mišiniai.Trečiajame etape į mėgintuvėlį įpilama 1 ml kraujo.Tada 10 sekundžių maišykite kraują sūkuriu maišytuvu, į mėgintuvėlį įpildami 1 ml 30 % gliukozės, 40 % gliukozės arba 50 % gliukozės, kad galutinė gliukozės koncentracija būtų atitinkamai 15 %, 20 % ir 25 %.Gliukozės kraujo mėginiai buvo analizuojami CBC iš karto po sumaišymo ir kartojami kas dvi minutes 30 minučių.
Pradinio maišymo metu, pridėjus 1:1 hipertoninės gliukozės ir WB arba PRP, trombocitų koncentracija kelias sekundes viršija 25 %.Ketvirtajame etape, norėdami įvertinti hipertoninės gliukozės poveikį esant minimalioms pradinėms didžiausioms koncentracijoms ir patikrinti viršutinę gliukozės poveikio ribą, į D25W arba D50W įpylėme tik nedidelį kiekį kraujo.Į mėgintuvėlį įpilkite 1 ml D25W arba D50W ir, maišydami mėginį 10 sekundžių, įpilkite 0,2 ml WB.Tokiais atvejais kraujas buvo veikiamas gliukozės, kurios koncentracija buvo maždaug 20 % didesnė už galutinę koncentraciją, o ne 50 % didesnė už galutinę koncentraciją, kaip 3 fazėje, todėl galutinė gliukozės koncentracija buvo 20,8 % ir 41,6 %.Mišrūs mėginiai buvo analizuojami tuo pačiu laiko intervalu, kaip ir 3 veiksme.
Pirmajame kiekvienos gliukozės praskiedimo serijos etape buvo paimta 30 mėginių, nes tai buvo tinkamas bandomojo tyrimo mėginio dydis [9].Kiekvienos fazės pabaigoje (įskaitant pirmąjį etapą) įvertinkite imties dydžio adekvatumą naudodami formulę, naudojamą imties dydžiui nustatyti, reikalingam nenutrūkstamo rezultato kintamojo vidurkiui įvertinti vienoje populiacijoje.Formulė n = Z2 x SD2 /E2.Šioje lygtyje Z yra Z balas, SD yra standartinis nuokrypis, o E yra norima paklaida [10].Mūsų alfa yra 0,05, o tai atitinka Z reikšmę 1,96, ir tikimės 5 paklaidos (procentais).Taigi išsprendžiame n = (1,962 x SD2)/52.Rezultatai parodė, kad kiekvienam etapui reikalingas imties dydis buvo mažesnis nei faktinis surinktas skaičius.
1, 3 ir 4 laikotarpiais, naudojant daugiau nei vieną gliukozės koncentraciją, skirtingų gliukozės koncentracijų poveikis buvo analizuojamas lyginant dalinį pokytį tarp 0 laiko ir kiekvieno vėlesnio laiko (1 fazė po 15 minučių, 3 laikotarpis po 15 minučių).ir keturis po 15 sekundžių, po to kas dvi minutes.) Kiekvieno laikotarpio kitimo rodikliai buvo lyginami naudojant Mann-Whitney U testą, nes duomenys neatitiko normalaus pasiskirstymo, kaip nustatyta Shapiro-Wilk normalumo testu.Kadangi pirmame, trečiame ir ketvirtame žingsniuose (iš viso penkios) buvo atlikta kelių grupių (penkių) analizė nuo 1 iki 1, buvo atlikta Bonferroni korekcija, kad norima alfa reikšmė būtų pakoreguota iki ≤0,01, bet ne ≤0,05.
Trombocitų skaičiaus sumažinimas esant visoms hipertoninės dekstrozės koncentracijoms ir PRP trombocitų MPV padidėjimas esant >12,5 % dekstrozės koncentracijai: PRP trombocitų skaičius padidėjo nuo vieno iki penkių kartų, palyginti su pradine viso kraujo koncentracija, kinta priklausomai nuo metodo (nepavaizduota). Trombocitų skaičiaus sumažinimas esant visoms hipertoninės dekstrozės koncentracijoms ir PRP trombocitų MPV padidėjimas esant >12,5% dekstrozės koncentracijai: PRP trombocitų skaičius padidėjo nuo vieno iki penkių kartų, palyginti su pradine viso kraujo koncentracija, kinta priklausomai nuo metodo (nepavaizduota). Уменьшение количества тромбоцитов при всех концентрациях гипертонической декстрозы и увеличение MPV вхпцитов ции декстрозы > 12,5 %: количество тромбоцитов PRP увеличилось в 1-5 раз по сравнению с имза исходной цельной да (ne показано). Sumažėjęs trombocitų skaičius esant visoms hipertoninėms dekstrozės koncentracijoms ir padidėjęs MPV PRP trombocituose esant >12,5% dekstrozės koncentracijai: PRP trombocitų skaičius padidėjo 1-5 kartus, palyginti su pradiniu viso kraujo kiekiu, priklausomai nuo metodo (neparodyta). ).在> 12,5 % 的葡萄糖浓度下，所有浓度的高渗葡萄糖降低血小板计数，PRP 血基线全血相比，PRP 血小板计数从浓度的1 倍上升到5 倍，因方法而异／讂未描 Esant >12,5% gliukozės koncentracijai, didelė gliukozės koncentracija sumažina kraujo skaičių, padidėja PRP kraujo MPV: lyginant su 与基线全血, PRP kiekis kraujyje padidėja nuo 1 iki 5 kartų, palyginti su koncentracija (neaprašyta). При концентрациях глюкозы >12,5% все концентрации гипертонической глюкозы снижали количество количество тромбо боцитах PRP: количество тромбоцитов PRP увеличивалось от 1- до 5-кратных концентраций по сравнентраций по сравненыныю по сравненыныю с цельной крови, в зависимости от метода (не описано ). Kai gliukozės koncentracija >12,5%, visos hipertenzinės gliukozės koncentracijos sumažino trombocitų skaičių ir padidino PRP trombocitų MPV: PRP trombocitų skaičius padidėjo 1–5 kartus, palyginti su pradine koncentracija visame kraujyje, priklausomai nuo metodo (kaip aprašyta ).1 paveiksle parodyta, kad trombocitų skaičius sumažėjo beveik 75 % po praskiedimo vandeniu ir 20–30 % po 15 minučių praskiedimo skirtingomis gliukozės koncentracijomis, palyginti su pradiniu PRP ir 1:1 praskiedimu, pakoreguotu pagal tūrį (1– k1 su tūrio korekcija).k -1 veisimas).1 veisimas).
Ląstelių skaičius kiekviename praskiedime išreiškiamas kaip pradinio skaičiaus prieš skiedimą dalis.
PRP gamybos metu MPV sumažėjo minimaliai, toliau nekeičiant skiedimo koncentracijų vandenyje ar gliukoze iki 12,5% (įskaitant 25% PRP gliukozės mišinius) ir padidėjo daugiau nei 20% atskiedus 50% gliukozės tirpalu (.2 pav.).).Priešingai, eritrocitų tūris reikšmingai nepasikeitė jokiu kitu skiedimu, išskyrus H2O.
Vidutinis kiekvieno skiedimo ląstelių tūris išreiškiamas procentais nuo pradinio tūrio prieš skiedimą.
Panašus, bet ne toks ryškus trombocitų skaičiaus sumažėjimas ir CVR padidėjimas buvo pastebėtas BC veikiant 50 % gliukozės (su 25 % gliukozės).2 lentelėje palyginamas ląstelių skaičius ir ląstelių tūris visame kraujyje, praskiestame 50 % dekstroze, su 1 fazės PRP duomenimis, praskiestu 50 % dekstroze.RBC skaičiaus ir RBC MCV pokyčiai nebuvo akivaizdūs ir nebuvo mūsų dėmesio centre.
SD = standartinis nuokrypis, MD = vidutinis skirtumas tarp grupių, SE = standartinis vidutinio skirtumo nuokrypis, RBC = eritrocitai, PLT = trombocitai, PRP = trombocitais turtinga plazma, WB = visas kraujas
Pridėjus D50W prie WB, trombocitų praradimas pagal praskiedimą procentais buvo 7,7 % (310±73, palyginti su 286±96), palyginti su 17,8% PRP praskiedimu D50W (664±348 ir 544±277).MPV WB padidėjo 16,8 % (nuo 10,1 ± 0,5 iki 11,8 ± 0,6), o MPV PRP padidėjo 26 % (9,2 ± 0,8 prieš 11,6 ± 0, 7). Nors vidutiniai trombocitų skaičiaus sumažėjimo ir MPV padidėjimo skirtumai buvo reikšmingai didesni naudojant PRP, trombocitų skaičiaus sumažėjimo pokyčiai WB buvo beveik reikšmingi (310 ± 73–286 ± 96 (-7,7 %); p = 0,06), o MPV padidėjimas buvo reikšmingas (10,1 ± 0,5–11,8 p) (+ 6,0 p.) (+6,0). Nors vidutiniai trombocitų skaičiaus sumažėjimo ir MPV padidėjimo skirtumai buvo reikšmingai didesni naudojant PRP, trombocitų skaičiaus sumažėjimo pokyčiai WB buvo beveik reikšmingi (310 ± 73–286 ± 96 (-7,7 %); p = 0,06), o MPV padidėjimas buvo reikšmingas (10,1 ± 0,5–11,8 p) (+ 6,0 p.) (+6,0).Nors vidutiniai trombocitų skaičiaus sumažėjimo ir CVR padidėjimo skirtumai buvo žymiai didesni naudojant PRP, trombocitų skaičiaus sumažėjimo pokyčiai WB buvo beveik reikšmingi (nuo 310 ± 73 iki 286 ± 96 (-7,7 %); p = 0,06).увеличение MPV было значительным (от 10,1 ± 0,5 до 11,8 ± 0,6 (+16,8) p < 0,001). MPV padidėjimas buvo reikšmingas (nuo 10,1 ± 0,5 iki 11,8 ± 0,6 (+16,8) p < 0,001).尽管PRP 在血小板计数减少和MPV 增加方面的平均差异显着更大，但, (几乎是显着的（310 ± 73 至 286 ± 96 (-7,7%)；p = 0,06）和MPV 的增加是显着的（.8 p. ±1.5 .8 p. ±1.5 ±10.5 001).尽管 PRP 在 血小板 计数 和 和 增加 方面 的 平均 差异 显着 大 ， 但 尡 冏的 几乎 是 显着 的 （（（310 ± 73 至 286 ± 96 (-7,7 %) ； p = .06）和MPV 的增加是暄 ±1 1 0.1 ± 1 ± 0,6 (+16,8) p < ,001）.Trombocitų skaičiaus sumažėjimo pokytis WB buvo beveik reikšmingas (nuo 310 ± 73 iki 286 ± 96 (-7,7%); p = 0,06), nors PRP vidutiniai skirtumai tarp trombocitų skaičiaus mažėjimo ir MPV padidėjimo buvo žymiai didesni.ir MPV padidėjimas buvo reikšmingas.(nuo 10,1 ± 0,5 iki 11,8 ± 0,6 (+16,8) р < 0,001). (nuo 10,1 ± 0,5 iki 11,8 ± 0,6 (+16,8) p < 0,001).
Norint pamatyti reikšmingą MPV pokytį, reikėjo galutinės 20% gliukozės koncentracijos, tačiau MPV pokytis buvo ryškesnis, kai galutinė koncentracija buvo 25%.Po pradinio sumažėjimo trombocitų praradimas stabilizavosi.Pastebėjome pradinį staigų CVR sumažėjimą, tačiau CVR greitai atsistatė esant 25 % galutinei gliukozės koncentracijai, kuri buvo žymiai didesnė nei CVR lygiai, pastebėti esant galutinėms 20 % ir 15 % gliukozės koncentracijoms (3 pav. ir 3 lentelės kairėje; tamsesni langeliai).nurodykite p reikšmes≤ alfa su Bonferroni korekcija 0,01).Taip pat buvo pradinis staigus PLT skaičiaus sumažėjimas, pastebėtas pradinėje 0–15 s fazėje, o vėliau išliko stabilus (nuo 15 s iki 30 min.; 4 lentelės kairėje).
Įvairių koncentracijų gliukozės pridėjimas į visą kraują lėmė pradinį greitą MPV sumažėjimą, o vėliau nuo koncentracijos priklausomą atsigavimą daugiau nei 20%.Legenda rodo gliukozės koncentraciją po praskiedimo.D15, D20 ir D25 buvo atlikti praskiedus santykiu 1:1.D21 ir D41 buvo atlikti praskiedus santykiu 1:5.
4 lentelėje parodytas trombocitų skaičiaus pokytis, praskiestas hipertonine gliukoze.Pastebėjome nuo dozės priklausomą ryšį tarp tiesioginio PLT skaičiaus sumažėjimo praskiedus 1:1 ir praskiedus santykiu 1:5.Lyginant 1:1 skiedimus kaip vieną grupę su 1:5 praskiedimais, 1:1 grupėje trombocitų skaičius iš karto sumažėjo mažiau nei 1:5 grupėje 66 ± 48 000 (23 %), palyginti su 99 ± 69 000 (37 %)., p = 0,014) 1:5 grupėje.Po pradinio kritimo pirmajame matavimo taške trombocitų skaičius, išreikštas gliukozės kiekiu, stabilizavosi (4 pav.).
Kai visas kraujas pridedamas prie gliukozės santykiu 1:1, trombocitų skaičius sumažėja maždaug 25%.Tačiau pridėjus viso kraujo santykiu 1:5, sumažėjimas buvo daug didesnis – apie 50%.
41% gliukozės padidino MPV greičiau ir dramatiškiau nei 25% arba 21%.MPV rezultatai parodyti 3 paveiksle. Visais kitais praskiedimais, pridėjus 50 % gliukozės, iš karto pradinis MPV sumažėjimas nepastebėtas.Naudojant 25 % gliukozės (galutinio praskiedimo gliukozės koncentracija 20,8 %), MPV pokytis buvo panašus į 20 % gliukozės pokytį praskiedus santykiu 1:1 (3 pav.).Nors MPV pokyčiai iš pradžių buvo didesni, kai mišri koncentracija buvo 41%, nei 25%, MPV skirtumas tarp 41% ir 25% po 16 minučių nebebuvo reikšmingas (3 lentelė, dešinėje).Įdomu ir tai, kad 25 % gliukozės MPV padidino efektyviau nei 20,8 %.
Šis in vitro tyrimas iš dalies patvirtino mūsų hipotezę. Tai parodė galimą dalinį trombocitų lizę dėl dekstrozės mišinio, greitą trombocitų prisitaikymą prie ekstremalaus hipertoniškumo ir reikšmingą MPV padidėjimą reaguojant į > 25 % hipertoninės dekstrozės koncentracijos. Tai parodė galimą dalinį trombocitų lizę dėl dekstrozės mišinio, greitą trombocitų prisitaikymą prie ekstremalaus hipertoniškumo ir reikšmingą MPV padidėjimą reaguojant į > 25 % hipertoninės dekstrozės koncentracijos. Он показал потенциальный частичный лизис тромбоцитов примесью декстрозы, быструю аккомодациальный аккомодациальный частичный лизис тромбоцитов примесью декстрозы, быструю аккомодациальный аккомодациальный частичный лизис тромбоцитов примесью декстрозы ртонуса и значительное повышение MPV в ответ на гипертоническую концентрацию декстрозы > 25%. Jis parodė galimą dalinį trombocitų lizę naudojant dekstrozę, greitą trombocitų prisitaikymą prie ekstremalaus hipertoniškumo ir reikšmingą MPV padidėjimą, reaguojant į hipertoninį dekstrozės kiekį > 25%.它显示出通过葡萄糖混合物潜在的部分血小板溶解，血小板快，血小板快速适应枘糖速适应枘竁% 浓度的高渗葡萄糖时MPV 显着上升.它 显示 出 通过 葡萄糖 潜在 的 部分 血小板 溶解 血小板 忼速 适庯 极 速 适庯 极应> 25% 浓度 高渗 葡萄糖 时 时 mpv 显着。。。。. Он показывает потенциальный частичный лизис тромбоцитов смесями с глюкозой, бымиструю адаптациальный адаптацию пертонусу и значительное увеличение MPV в ответ на концентрацию гипертонической глюкозы > 25%. Tai rodo galimą dalinį trombocitų lizę dėl gliukozės mišinių, greitą trombocitų prisitaikymą prie ekstremalaus hipertoniškumo ir reikšmingą MPV padidėjimą reaguojant į hipertoninę gliukozę > 25%.Pradinis padidėjimas buvo didžiausias esant 41,6 % gliukozės ekspozicijos, tačiau MPV padidėjimas priartėjo prie 25 % gliukozės ekspozicijos praėjus maždaug 20 minučių po ekspozicijos.
Trombocitų koncentracijai įtakos turi gliukozė.Pastebėjome, kad PLT kiekis sumažėjo visais gliukozės praskiedimais.Staigus trombocitų skaičiaus sumažėjimas PRP serijos H2O (0%) skiediniuose gali būti susijęs su osmosine lize.Arba tai gali būti artefaktas, kurį sukelia trombocitų susikaupimas, tačiau tai prieštarauja MPV pokyčiui esant tokiam praskiedimui.Šis atradimas reiškia, kad kai kurie trombocitai yra labai jautrūs hipoosmoliarumui.
Visuose gliukozės praskiedimuose santykiu 1:1 PLT kiekis sumažėjo 20-30%, net D5W (hipotoninis esant 252 mOsm), o tai gali rodyti specifinį neosmosinį gliukozės poveikį, nes tiek PLT, tiek MPV išliko nepakitę, padidėjus koncentracijai tris kartus.gliukozė.nuo D5W iki D25W.Tiesą sakant, PLT koncentracija šiek tiek didėjo didėjant osmoliarumui.
PLT sumažėjimas tarp 1:1 ir 1:5 praskiedimų reiškia, kad tirpimo efektas priklauso nuo pradinės ir galutinės gliukozės koncentracijos.Jei tai priklausytų tik nuo pradinės koncentracijos, būtų galima tikėtis, kad PLT sumažėjimas skirsis tarp 1:1 koncentracijų.Bet mes ne.Jeigu lizės efektas priklauso tik nuo galutinės gliukozės koncentracijos, tai didelio skirtumo tarp 20 % 1:1 ir 20,8 % 1:5 praskiedimo nesitikime.Ir vis dėlto mes tai padarėme.
Jei trombocitai netenka dėl trombocitų lizės, susidaro dalinis lizatas, po kurio citokinai ir augimo faktoriai išleidžiami į tarpląstelinę aplinką.Keletas tyrimų parodė, kad trombocitų lizatas yra beveik toks pat veiksmingas kaip PRP kaip proliferacijos tirpalas [11].Įrodyta, kad pats PRP yra veiksmingas sprendimas proliferacijos gydymui [12–14].
Neaktyvūs trombocitai cirkuliuoja disko pavidalu, sustiprinto keliomis vidinėmis struktūromis.Aktyvinimo metu jie įgauna labiau sferinę arba amebos formą, todėl padidėja jų tūris.Norint padidinti tūrį, reikia padidinti paviršiaus plotą, kuris yra atvirų kanalėlių sistemos (OCS) išspaudimo ir egzocitinių granulių pridėjimo prie membranos rezultatas.Dar reikia nustatyti, ar hipertoninės gliukozės sukeltas MPV padidėjimas apima vieną ar abu iš šių mechanizmų, tačiau jei pastarasis, MPV padidėjimas reikštų degranuliaciją.
Šis tyrimas parodė, kad dėl didelės gliukozės koncentracijos PRP arba viso kraujo trombocituose MPV padidėjo per 15 minučių, kai gliukozės koncentracija buvo atitinkamai 25% ir 41,6%.
Trombocitų MPV padidėjimas gali atsirasti dėl aplinkinių mikrovamzdelių išsiplėtimo, reaguojant į kalcio antplūdį.Liu ir kt.Įrodyta, kad gliukozė tarpininkauja kalcio antplūdžiui per trombocitų TRPC6 kanalą [6].Mūsų hipotezė yra ta, kad gliukozė skatina mikrotubulų raizginių atsipalaidavimą, todėl padidėja MPV ir trombocitų jautrinimas ir (arba) aktyvacija.Tačiau, sprendžiant iš mūsų rezultatų, tai tik dalis istorijos.Mūsų bandymų metu jokia koncentracija, mažesnė nei D25W, nepadidėjo MPV.Atsižvelgiant į tai, kad mes neištyrėme gliukozės koncentracijos nuo 12,5% iki 25%, mūsų 1 fazės rezultatai rodo, kad šiame gliukozės koncentracijos diapazone gali būti slenkstis, dėl kurio padidėja MPV.Tolesni tyrimai 3 ir 4 etapuose parodė, kad 20–25 % gliukozės yra tam slenkstis, tačiau lieka neaišku, kodėl.
Taip pat pastebėjome, kad po centrifugavimo MPV sumažėjo ~ 9%.Neaišku, ar šis MPV sumažėjimas atsirado dėl didesnių ir tankesnių trombocitų, įstrigusių centrifugos RBC sluoksnyje.Šis stebėjimas gali būti svarbus gydytojams, nes tai gali reikšti, kad PRP trombocitai yra mažesnis ir ne toks tankus WB trombocitų pogrupis.
Ankstesniame tyrime parodėme, kad PRP paruošimas rankiniais metodais yra nebrangus [8].Jei gliukozė jautrina audinių trombocitus arba PRP, todėl jie tampa jautresni aktyvacijai, arba jei PRP gaminamas iš dalies lizato savybių, tai gali sustiprinti regeneraciją ir sumažinti gydymo poreikį.Todėl PRP ir labai koncentruotos gliukozės derinys gali būti ekonomiškesnis nei vien PRP ar gliukozė.
Mūsų tyrimas turi keletą trūkumų.Pirma, mes naudojame PRP, gautą iš kelių skirtingų metodų.Tai gali sukelti prieštaringų rezultatų.Antra, mes negalėjome atlikti nė vieno mūsų mėginio biocheminės analizės, kad būtų galima tiksliau nustatyti, ar įvyko trombocitų aktyvacija.Norėtume išmatuoti P-selektiną, trombocitų faktorių 4, monocitinius trombocitų agregatus ar kitus trombocitų aktyvacijos žymenis, kad geriau suprastume alfa granulių degranuliacijos laipsnį ar buvimą, tačiau tai nepatenka į šio tyrimo sritį.Trečia, elektroniniu mikroskopu ar kitais metodais negalėjome patvirtinti, kad MPV padidėjimas gliukozės paveiktuose trombocituose atsirado dėl poveikio mikrotubulų raizginiams.
WB arba PRP mišiniai su 25% gliukozės padidino MPV, signalizuodami apie trombocitų aktyvacijos pradžią, nors šis tyrimas neparodė agregacijos ar degranuliacijos progresavimo.Dėl hipertoninio gliukozės mišinio neteko trombocitų, o tai gali būti lizinis poveikis.Dalinis trombocitų aktyvavimas arba lizė gali sukelti audinių regeneraciją po trombocitų injekcijos.Neaišku, kokias klinikines pasekmes gali sukelti šie pokyčiai.Tolesni tyrimai parodė tikslesnius aktyvacijos ar lizės matavimus ir įvertino skirtingus klinikinius hipertoninių gliukozės mišinių su WB arba PRP poveikius.
Gliukozės proliferacinė terapija yra paprasta ir nebrangi regeneracinė terapija, kuri sparčiai plečiasi ir remia klinikinius tyrimus.Šis tyrimas siūlo fiziologinį mechanizmą, kuris, jei pasitvirtins, galėtų padėti suprasti dalį proliferacinės terapijos regeneracinio mechanizmo.
Biomedicinos ir sveikatos informatika Misūrio universitete, Kanzaso miesto medicinos mokykloje, Kanzasas, JAV
Žmonės: visi šio tyrimo dalyviai davė arba nedavė sutikimą.Tarptautinė ląstelių medicinos draugija išdavė ICMS-2017-003 patvirtinimą.Šį protokolą patvirtino toliau naudoti Tarptautinės ląstelių medicinos draugijos Institucinė peržiūros taryba: Pavadinimas: Trombocitais turtingos plazmos vaistų išeigos apskaičiavimas, remiantis pradiniu CBC trombocitų skaičiumi.Gyvūnų subjektai: Visi autoriai patvirtino, kad šiame tyrime nebuvo įtraukti jokie gyvūnai ar audiniai.Interesų konfliktai: Pagal ICMJE vienodą atskleidimo formą visi autoriai deklaruoja: Mokėjimo/paslaugos informacija: Visi autoriai pareiškia, kad už pateiktą darbą negavo jokios organizacijos finansinės paramos.Finansiniai ryšiai: visi autoriai pareiškia, kad šiuo metu ar per pastaruosius trejus metus neturi finansinių ryšių su jokia organizacija, kuri galėtų būti suinteresuota pateiktu darbu.Kiti ryšiai: Visi autoriai pareiškia, kad nėra jokių kitų santykių ar veiklos, galinčių turėti įtakos pateiktam darbui.
Harrison TE, Bowler J, Reeves K ir kt.(2022 m. gegužės 17 d.) Gliukozės poveikis trombocitų skaičiui ir tūriui: poveikis regeneracinei medicinai.Gydymas 14(5): e25081.doi: 10.7759/cureus.25081
© Autorių teisės priklauso 2022 m. Harrison ir kt.Tai yra atviros prieigos straipsnis, platinamas pagal Creative Commons Attribution License CC-BY 4.0 sąlygas.Leidžiamas neribotas naudojimas, platinimas ir dauginimas bet kokia laikmena, jei nurodomas originalus autorius ir šaltinis.