Ny lohahevitra famahana olana amin'ny LC sasany dia tsy lany andro, satria misy olana amin'ny fampiharana LC, na dia mihamitombo aza ny teknolojian'ny fitaovana rehefa mandeha ny fotoana.Misy fomba maro izay mety hipoitra amin'ny rafitra LC ary miafara amin'ny endrika faran'izay ratsy.
Nahafinaritra ny nanoratra ity tsanganana “LC Troubleshooting” ity ary nieritreritra lohahevitra isam-bolana, satria misy lohahevitra tsy lany amin’ny endriny mihitsy. Raha eo amin’ny sehatry ny chromatography dia mikaroka lohahevitra na hevitra sasany lasa lany andro satria nosoloina hevitra vaovao sy tsara kokoa, eo amin’ny sehatry ny famahana olana, hatramin’ny nivoahan’ny lahatsoratra voalohany momba ny olana tamin’ity gazety ity (ny 3 taona lasa izay dia mbola misy ifandraisany amin’izany ny Gazety LC). Nifantoka tamin'ny fizarana LC Troubleshooting maromaro momba ny fironana ankehitriny misy fiantraikany amin'ny chromatography ranoka (LC) aho (ohatra, ny fampitahana amin'ny fahatakarantsika ny fiantraikan'ny tsindry amin'ny fihazonana [2] Fandrosoana Vaovao) Ny fandikana ny valin'ny LC sy ny fomba famahana olana amin'ny fitaovana LC maoderina. famahana olana — singa tena ilaina ho an'ny mpanakorontana rehetra dia tena ilaina, na firy taona na firy taona ny rafitra ampiasaintsika.Ny lohahevitra fototra amin'ity andiany ity dia tena manan-danja amin'ny tabilao rindrina malaza "LC Troubleshooting Guide" (4) mihantona amin'ny laboratoara maro ny LCGC. amin'ireo olana ireo amin'ny antsipiriany ao amin'ny lahatsoratra iray, ka amin'ity fizarana voalohany amin'ny lohahevitra ity dia hifantoka amin'ny sasany amin'ireo hitako matetika aho. Manantena aho fa ireo mpampiasa LC tanora sy antitra dia hahita torohevitra sy fampahatsiahivana mahasoa momba ity lohahevitra manan-danja ity.
Hitako fa mihamitombo hatrany ny famaliako ireo fanontaniana famahana olana amin'ny hoe "azo atao daholo ny zava-drehetra". Mety ho mora io valinteny io rehefa mandinika ny fandinihana izay sarotra adika, saingy hitako fa mety izany matetika. Miaraka amin'ny antony maro mety mahatonga ny endrika ratsy, dia zava-dehibe ny mitazona saina misokatra rehefa mandinika ny mety ho olana, ary afaka manao laharam-pahamehana ny antony mety hanombohana ny ezaka famahana olana, mifantoka amin'ireo zavatra mety hitranga indrindra.
Ny dingana lehibe amin'ny famahana olana rehetra - fa ny iray izay heveriko ho tsinontsinona - dia ny fanekena fa misy ny olana mila vahana. Tsotra ny andrandraintsika amin'ny endrika tampon'ny tena. Ny teoria (6) dia manohana tsara ny andrasana amin'ny boky fa amin'ny ankamaroan'ny toe-javatra, ny tampon'ny chromatographic dia tokony ho symmetrical ary mifanaraka amin'ny endriky ny fizarana Gaussian, araka ny aseho amin'ny sary 1a. e 1 dia mampiseho ny sasany amin'ireo zavatra hafa mety ho tsikaritra — amin'ny teny hafa, ny sasany amin'ireo fomba mety hitrangan'ny zavatra.
Indraindray ny tampon'isa dia tsy voamarika mihitsy ao amin'ny chromatograma izay antenaina ho eluted.Ny tabilao rindrina etsy ambony dia manondro fa ny tsy fisian'ny tampony (raha heverina fa ny santionany dia tena misy ny analyte kendrena amin'ny fifantohana izay tokony hahatonga ny valin'ny detector ho ampy hahitana azy eo ambonin'ny tabataba) dia matetika mifandray amin'ny olana sasany amin'ny fitaovana na toe-javatra tsy mety amin'ny finday (raha tsikaritra mihitsy).tampon'isa, matetika loatra “malemy”).Ny lisitry ny olana mety hitranga sy ny vahaolana amin'ity sokajy ity dia hita ao amin'ny tabilao I.
Araka ny voalaza tetsy ambony, ny fanontaniana hoe ohatrinona ny fanitarana tampony dia tokony handeferana alohan'ny hijerena sy hiezahana hanitsy azy io dia lohahevitra sarotra izay horesahiko amin'ny lahatsoratra ho avy. Ny zavatra niainako dia ny fanitarana tampony manan-danja dia matetika miaraka amin'ny fiovana lehibe amin'ny endrika tampony, ary ny tailing dia mahazatra kokoa noho ny mialoha ny tampony na ny fisarahana.
Ny tsirairay amin'ireo olana ireo dia noresahina tamin'ny antsipiriany tao amin'ny laharana teo aloha momba ny Famahana olana LC, ary ireo mpamaky liana amin'ireo lohahevitra ireo dia afaka mijery ireo lahatsoratra teo aloha ireo mba hahazoana fampahalalana momba ny fototry ny olana sy ny mety ho vahaolana amin'ireo olana ireo.antsipiriany bebe kokoa.
Mety ho vokatry ny trangan-javatra simika na ara-batana avokoa ny tailing ambony, ny tampon-dohany, ary ny fizarazarana, ary miovaova be ny lisitry ny vahaolana mety ho an'ireo olana ireo, miankina amin'ny hoe miatrika olana simika na ara-batana isika. voa, fa ny ambiny mijery tsara, ny antony dia tena simika.
Ny antony simika amin'ny tailing ambony dia sarotra loatra raha tsy resahina vetivety eto. Ny mpamaky liana dia resahina amin'ny laharana farany momba ny "LC Troubleshooting" ho an'ny fifanakalozan-kevitra lalindalina kokoa (10). na tsy maintsy ovaina ny fepetran'ny chromatographie mba hahazoana endrika tampony tsara na dia misy faobe lehibe kokoa aza.
Maro koa ny antony ara-batana mety hitranga amin'ny tailing ambony. Ireo mpamaky liana amin'ny fifanakalozan-kevitra amin'ny antsipiriany momba ny mety ho azo dia resahina amin'ny olana iray vao haingana momba ny "LC Troubleshooting" (11). Ny iray amin'ireo antony ara-batana mahazatra indrindra amin'ny tailing ambony dia ny fifandraisana ratsy eo amin'ny teboka eo amin'ny injector sy ny detector (12). teo aloha, ary nametraka ny boky kely tsindrona tadivavarana amin'ny ferrule izay efa novolavolaina teo amin'ny Stainless vy capillary.After sasany voalohany troubleshooting fanandramana, dia nahatsapa fa ny halalin'ny seranan-tsambo ao amin'ny tsindrona valva stator dia lalina kokoa noho ny mahazatra antsika, ka nahatonga ny maty boky be eo amin'ny farany ambany ny port.
Ny feta-peo toy ny aseho amin'ny sary 1e dia mety ho vokatry ny olana ara-batana na simika, ny fomba fiasa tsara indrindra dia ny fanoloana ny tsanganana sy ny sombin-tariby ary ny firafitry ny fiavian'ny simika matetika dia mipetaka matetika amin'ny fiantsoana ny "tsy linear" . Ny tsindrona, ny endriny tsy misy dia mamaritra ny endriky ny kromatika ao, ary ny fitrandrahana ny fitrandrahana an-tsokosoko (10) dia tsy maintsy ovaina ny fomba fiasa izay mahatonga ny sisin-doha izay mahatonga ny sisin-koditra, na ny toe-javatra kromatika dia tsy maintsy ovaina mba hanalefaka an'io fihetsika io.
Indraindray isika dia mahita izay toa tampon'ny "fizarana", araka ny aseho amin'ny sary 1f. Ny dingana voalohany amin'ny famahana ity olana ity dia ny famaritana raha ny endriky ny tendrony dia vokatry ny fiaraha-miombon'antoka amin'ny ampahany (izany hoe, ny fisian'ny singa roa miavaka nefa mifanakaiky). Ny ks dia mifandraika amin'ny Performance ara-batana dia tsy misy ifandraisany amin'ny tsanganana mihitsy.Matetika, ny tena zava-dehibe amin'ity fanapahan-kevitra ity dia ny hoe ny tampon'ny chromatograma rehetra dia mampiseho endrika mizarazara, na iray na roa fotsiny.raha mizara ny tampony rehetra, dia mety ho olana ara-batana izany, mety misy ifandraisany amin'ny tsanganana mihitsy.
Split tampon'isa mifandray amin'ny toetra ara-batana ny tsanganana ny tenany dia matetika noho ny ampahany voasakana inlet na fivoahana frits, na ny fandaminana indray ny poti ao amin'ny tsanganana, mamela ny finday dingana mikoriana haingana kokoa noho ny finday dingana amin'ny faritra sasany ny tsanganana fantsona fananganana .amin'ny faritra hafa (11).Ampahany clogged frit mety ho voadio indraindray amin'ny alalan'ny mamadika ny fikorianan'ny ny tsanganana;na izany aza, raha ny traikefako dia matetika vahaolana fohy izany fa tsy vahaolana maharitra.Matetika izany dia mahafaty amin'ny tsanganana maoderina raha toa ka mitambatra indray ao anatin'ny tsanganana ireo singa. Amin'izao fotoana izao dia tsara ny manolo ny tsanganana ary manohy.
Ny tampon'isa amin'ny sary 1g, koa avy amin'ny ohatra vao haingana tao amin'ny laboratoara manokana, dia matetika manondro fa ny famantarana dia avo dia avo ka tonga amin'ny faran'ny avo ny valin range. Ise, toy ny hazavana mirenireny sy ny "current maizimaizina", ka mahatonga ny famantarana ho "manjavozavo" ny endriny ary tsy miankina amin'ny fifantohana analyte.Rehefa mitranga izany, dia mora voavaha matetika ny olana amin'ny fampihenana ny habetsaky ny tsindrona amin'ny analyte - ny fampihenana ny habetsaky ny tsindrona, ny fanalefahana ny santionany, na ny roa.
Ao amin'ny sekoly chromatography, mampiasa ny famantarana detector (izany hoe, ny y-axis ao amin'ny chromatogram) ho toy ny famantarana ny analyte fifantohana ao amin'ny santionany. Noho izany dia toa hafahafa ny mahita ny chromatograma misy famantarana eo ambanin'ny zero, satria ny fandikana tsotra dia izany dia manondro ny ratsy analyte fifantohana - izay mazava ho azy fa tsy azo atao ara-batana.
Amin'ity tranga ity, ny tampony ratsy dia midika fotsiny fa ny molekiola mivoaka avy ao amin'ny tsanganana dia mandray hazavana kely kokoa noho ny dingan'ny finday avy hatrany alohan'ny sy aorian'ny tampony. Mety hitranga izany, ohatra, rehefa mampiasa ny halavan'ny onjam-pandrenesana ambany (<230 nm) sy ny additives mobile phase izay mitroka ny ankamaroan'ny hazavana amin'ireo halavan'ny onjam-peo ireo. libration curve ary mahazo vaovao quantitative marina, noho izany dia tsy misy antony fototra tokony hialana amin'izy ireo isaky ny se (ity fomba ity dia antsoina indraindray hoe "indirect UV detection") (13). Na izany aza, raha tena te hisoroka ny tampony ratsy isika, amin'ny trangan'ny absorbance detection, ny vahaolana tsara indrindra dia ny mampiasa onjam-pandrefesana hafa mba hahafahan'ny analyte amin'ny dingan'ny finday dia mitroka na mihoatra ny fatran'ny finday.
Mety hiseho ihany koa ny tendrony ratsy rehefa mampiasa ny famantarana refractive (RI) rehefa tsy mitovy ny mari-pamantarana refractive amin'ny singa hafa ankoatry ny analyte ao amin'ny santionany, toy ny solvent matrix, ary tsy mitovy amin'ny index refractive amin'ny dingana finday.
Ao amin'ny fizarana telo amin'ny lohahevitra fototra momba ny famahana olana LC, dia niresaka toe-javatra izay tsy mitovy amin'ny endrika tampony andrasana na ara-dalàna ny endriky ny tendrony voamarika. Matetika.Ny fahafantarana ireo tsipiriany ireo dia manome toerana tsara hanombohana famahana olana, fa tsy misambotra ny fahafaha-manao rehetra. Ireo mpamaky liana amin'ny lisitra lalindalina kokoa momba ny antony sy ny vahaolana dia afaka manondro ny tabilao rindrina LCGC "LC Troubleshooting Guide".
(4) tabilao rindrina "LC Troubleshooting Guide" LCGC.https://www.chromatographyonline.com/view/troubleshooting-wallchart (2021).
(6) A. Felinger, Data Analysis and Signal Processing in Chromatography (Elsevier, New York, NY, 1998), pp. 43-96.
(8) Wahab MF, Dasgupta PK, Kadjo AF ary Armstrong DW, Anal.Chim.Journal.Rev.907, 31–44 (2016).https://doi.org/10.1016/j.aca.2015.11.043.