Misaotra anao nitsidika ny Nature.com.Ny kinova browser ampiasainao dia manana fanohanana CSS voafetra.Mba hahazoana traikefa tsara indrindra, manoro hevitra anao izahay hampiasa navigateur nohavaozina (na esory ny Compatibility Mode amin'ny Internet Explorer).Mandritra izany fotoana izany, mba hiantohana ny fanohizana ny fanohanana, dia hanolotra ny tranokala tsy misy fomba sy JavaScript izahay.
Ny fahavokarana ny vorona dia miankina amin'ny fahafahany mitahiry tsirinaina ampy ho velona mandritra ny fotoana maharitra ao amin'ny tubule fitehirizana tsirinaina (SST).Mbola mampiady hevitra ny tena fomba idiran'ny spermatozoa, ipetrahany ary ivoahan'ny SST.Ny tsirinaina amin'ny akoho sharkasi dia nampiseho fironana ambony amin'ny agglutination, mamorona amboara filamentous finday misy sela maro.Noho ny fahasarotana amin'ny fijerena ny fihetsehana sy ny fitondran-tenan'ny spermatozoa ao amin'ny fantsona fallopian manjavozavo, dia nampiasa fitaovana microfluid miaraka amin'ny fizaràna microchannel mitovy amin'ny an'ny spermatozoa izahay mba handinihana ny fihanaky ny spermatozoa sy ny fihetsehana.Ity fanadihadiana ity dia miresaka momba ny fomba fiforonan'ny tsirinaina, ny fomba fihetsehan'izy ireo, ary ny mety ho anjara asany amin'ny fanitarana ny fonenan'ny tsirinaina ao amin'ny SST.Nanadihady ny hafainganam-pandehan'ny tsirinaina sy ny fihetsika rheolojika izahay rehefa niforona tao anatin'ny fantsona mikrofluida amin'ny alàlan'ny fanerena hydrostatika ny fikorianan'ny ranon-javatra (tapa-drivotra = 33 µm/s).Ny spermatozoa dia mirona milomano manohitra ny courant (rhéologie positive) ary mihena be ny hafainganam-pandehan'ny spermatozoon raha oharina amin'ny spermatozoa tokana.Voamarika fa mihodinkodina mihodinkodina sy mihamitombo ny halavany sy ny hateviny ny tsirinaina satria mihamaro ny tsirinaina tokana. Tsikaritra fa nanatona sy niraikitra teo amin'ny sisin'ny lakandrano microfluid ny tsirinaina mba tsy ho voafafa amin'ny hafainganam-pandehan'ny fluid > 33 µm/s. Tsikaritra fa nanatona sy niraikitra teo amin'ny sisin'ny lakandrano microfluid ny tsirinaina mba tsy ho voafafa amin'ny hafainganam-pandehan'ny fluid > 33 µm/s. Было замечено, что пучки сперматозоидов приближаются и прилипают к боковым стенкам микрофлюитодных каналботь скоростью потока жидкости> 33 мкм / с. Voamarika fa manatona sy miraikitra amin'ny rindrin'ny lakandrano mikraoba ny tsirinaina mba tsy ho voafafa amin'ny hafainganam-pandehan'ny ranon-javatra>33 µm/s.观察到精子束接近并粘附在微流体通道的侧壁上，以避免被流体流速> 33 µm/s。33 µm/s 扫过. Было замечено, что пучки сперматозоидов приближаются и прилипают к боковым стенкам микрожидкостного кабнала, м жидкости со скоростью > 33 мкм/с. Voamarika fa manatona sy miraikitra amin'ny rindrin'ny lakandrano mikraoba ny tsirinaina mba tsy ho voafaozin'ny fikorianan'ny fluid amin'ny>33 µm/s.Ny fitarafana sy ny fampitana ny mikraoskaopy elektrônika dia hita fa tohanan'ny fitaovana matevina be ny tsirinaina.Ny angon-drakitra azo dia mampiseho ny fivezivezena tsy manam-paharoa amin'ny spermatozoa akoho Sharkazi, ary koa ny fahafahan'ny spermatozoa mitambatra sy mamorona amboara finday, izay manampy amin'ny fahatakarana tsara kokoa ny fitahirizana spermatozoa maharitra ao amin'ny SMT.
Mba hahazoana fertilization amin'ny olombelona sy ny ankamaroan'ny biby, ny tsirinaina sy ny atody dia tsy maintsy tonga amin'ny fotoana mety.Noho izany, ny fanambadiana dia tsy maintsy atao alohan'ny na amin'ny fotoana ovulation.Amin'ny lafiny iray, ny biby mampinono sasany, toy ny alika, ary koa ny karazana tsy mamaly, toy ny bibikely, trondro, biby mandady, ary vorona, dia mitahiry tsirinaina ao amin'ny taovam-pananahany mandritra ny fotoana maharitra mandra-pahavonon'ny atodiny ho amin'ny fampiraisana azy (asynchronous fertilization 1).Ny vorona dia afaka mitazona ny viability ny spermatozoa afaka zezika atody mandritra ny 2-10 herinandro2.
Izany dia singa miavaka izay mampiavaka ny vorona amin'ny biby hafa, satria manome be dia be ny mety hisian'ny fampiraisana aorian'ny insemination tokana mandritra ny herinandro maromaro tsy misy fiarahana sy ovulation.Ny taova fitehirizana tsirinaina lehibe, antsoina hoe tubule fitehirizana tsirinaina (SST), dia hita ao amin'ny fonon'ny mucosa anatiny eo amin'ny fihaonan'ny uterovaginal.Hatramin'izao, tsy takatry ny saina tsara ny fomba idiran'ny tsirinaina, ny hipetrahany ary ny fivoahana ao amin'ny banky tsirinaina.Araka ny fanadihadiana teo aloha dia maro ny vinavina naroso, saingy tsy nisy voamarina na iray aza.
Forman4 dia nihevitra fa ny spermatozoa dia mitazona ny fonenany ao amin'ny lavaka SST amin'ny alàlan'ny hetsika oscillatory mitohy manohitra ny lalan'ny fikorianan'ny fluid amin'ny alàlan'ny fantsona proteinina ao amin'ny sela epithelial SST (rheology).Ny ATP dia lany noho ny hetsika tsy mitsaha-mitombo ilaina amin'ny fitazonana ny tsirinaina ao amin'ny SST lumen ary ny motility amin'ny farany dia mihena mandra-pivoakan'ny tsirinaina avy amin'ny bankin'ny spermia amin'ny alàlan'ny fikorianan'ny fluid ary manomboka dia vaovao midina amin'ny trompes utérine dia mampiakatra ny tsirinaina.Atody (Forman4).Ity maodely fitahirizana tsirinaina ity dia tohanan'ny fitiliana amin'ny alàlan'ny immunocytochemistry ny aquaporins 2, 3 ary 9 izay misy ao amin'ny sela epithelial SST.Hatramin'izao, tsy ampy ny fanadihadiana momba ny rhéologie ny tsirinaina akoho sy ny anjara asany amin'ny fitahirizana SST, ny fifantenana ny tsirinaina amin'ny fivaviana, ary ny fifaninanana tsirinaina.Ao amin'ny akoho, ny tsirinaina dia miditra ao amin'ny fivaviana aorian'ny firaisana ara-boajanahary, fa ny 80% amin'ny spermatozoa dia mivoaka avy ao amin'ny fivaviana fotoana fohy aorian'ny fanambadiana.Midika izany fa ny fivaviana no toerana voalohany hifidianana tsirinaina amin'ny vorona.Ankoatra izany, voalaza fa latsaky ny 1% ny spermatozoa zezika ao amin'ny fivaviana dia miafara amin'ny SSTs2.Ao amin'ny fampidirana artifisialy ny akoho ao amin'ny fivaviana, ny isan'ny spermatozoa tonga amin'ny SST dia mihamitombo 24 ora aorian'ny insemination.Hatreto, tsy mazava ny fomba fiasan'ny fifantenana ny tsirinaina mandritra ity dingana ity, ary ny fihetsehan'ny tsirinaina dia mety manana anjara toerana lehibe amin'ny fidiran'ny tsirinaina SST.Noho ny rindrina matevina sy manjavozavo amin'ny trompes utérine dia sarotra ny manara-maso mivantana ny fihetsehan'ny tsirinaina ao amin'ny trompes utérine dia mampitohy ny vorona.Noho izany, tsy ampy ny fahalalana fototra momba ny fiovan'ny spermatozoa amin'ny SST aorian'ny fampiraisana.
Ny rheology dia fantatra vao haingana ho toy ny singa manan-danja mifehy ny fitaterana tsirinaina amin'ny taovam-pananahana mampinono.Mifototra amin'ny fahafahan'ny spermatozoa mihetsiketsika mifindra monina mifanohitra amin'izany, Zaferani et al8 dia nampiasa rafitra microfluidic corra mba hanavahana tsimoramora ny spermatozoa mihetsiketsika avy amin'ny santionan'ny tsirinaina nosoratana.Ity karazana fanasokajiana tsirinaina ity dia tena ilaina amin'ny fitsaboana ny tsy fahampian-tsakafo ara-pitsaboana sy ny fikarohana klinika, ary aleo kokoa noho ny fomba nentim-paharazana izay mandany fotoana sy asa ary mety hanimba ny morphologie ny tsirinaina sy ny fahamendrehana ara-drafitra.Na izany aza, hatramin'izao, tsy mbola nisy fanadihadiana natao momba ny fiantraikan'ny tsiranoka avy amin'ny taovam-pananahana amin'ny akoho amin'ny fihetsehan'ny tsirinaina.
Na inona na inona fomba fitazonana ny tsirinaina voatahiry ao amin'ny SST, maro ny mpanadihady no nahatsikaritra fa ny spermatozoa mipetraka ao amin'ny SST amin'ny akoho 9, 10, papelika 2, ary vorontsiloza 11 dia manangana tsirinaina mitambatra.Ny mpanoratra dia manoro hevitra fa misy fifandraisana misy eo amin'io agglutination io sy ny fitehirizana maharitra ny spermatozoa ao amin'ny SST.
Tingari sy Lake12 dia nitatitra fa misy fifandraisana matanjaka eo amin'ny spermatozoa ao amin'ny glanda mandray tsirinaina amin'ny akoho ary manontany raha mitambatra amin'ny fomba mitovy amin'ny spermatozoa mampinono ny spermatozoa avian.Mino izy ireo fa ny fifandraisana lalina eo amin'ny tsirinaina ao amin'ny vas deferens dia mety noho ny adin-tsaina vokatry ny fisian'ny tsirinaina betsaka ao amin'ny toerana kely.
Rehefa manombantombana ny fitondran-tenan'ny spermatozoa amin'ny fitaratra mihantona vaovao, dia azo jerena ny famantarana mandalo amin'ny agglutination, indrindra eo amin'ny sisin'ny tsirinaina.Na izany aza, ny agglutination dia matetika voahelingelina noho ny hetsika fihodinana mifandray amin'ny hetsika mitohy, izay manazava ny toetra mandalo amin'ity tranga ity.Hitan'ny mpikaroka koa fa rehefa nampidirina tao amin'ny tsirinaina ilay diluent, dia nipoitra ireo fitambarana sela “tahaka ny kofehy”.
Ny fanandramana voalohany haka tahaka ny spermatozoon dia natao tamin'ny fanesorana tariby manify tamin'ny ranon-javatra mihantona, izay niafara tamin'ny vesikelin'ny tsirinaina lava mipoitra avy amin'ny tsirinaina.Ny spermatozoa dia nilahatra avy hatrany tamin'ny fomba mitovy tao anatin'ny vesicle, saingy nanjavona haingana ilay singa manontolo noho ny fetra 3D.Noho izany, mba handinihana ny agglutination spermatozoa, dia ilaina ny mandinika ny fihetsehana sy ny fitondran-tenan'ny spermatozoa mivantana ao amin'ny tubules fitehirizana tsirinaina mitoka-monina, izay sarotra tratrarina.Noho izany, ilaina ny manamboatra fitaovana manahaka ny spermatozoa mba hanohanana ny fandalinana ny fihetsehan'ny tsirinaina sy ny fitondran-tenan'ny agglutination.Nitatitra i Brillard et al13 fa 400–600 µm ny salan'ny halavan'ny tubule fitehirizana tsirinaina amin'ny akoho lehibe, fa ny SST sasany kosa mety mahatratra 2000 µm.Nozarain'i Mero sy Ogasawara14 ny fihary seminiferous ho tubule fitahirizana tsirinaina nitombo sy tsy nitombo, izay samy mitovy ny halavany (~ 500 µm) ary ny sakan'ny tendany (~ 38 µm), fa ny savaivony lumen amin'ny tubule dia 56.6 sy 56.6 µm.., tsirairay avy 11.2 μm, tsirairay avy.Ao amin'ny fandalinana amin'izao fotoana izao, dia nampiasa fitaovana microfluidic izahay miaraka amin'ny haben'ny fantsona 200 µm × 20 µm (W × H), izay ny fizaran-dàlana dia somary manakaiky ny an'ny SST amplified.Fanampin'izany, nodinihinay ny fihetsehan'ny tsirinaina sy ny fihetsika agglutination amin'ny fluid mikoriana, izay mifanaraka amin'ny petra-kevitr'i Foreman fa ny fluid novokarin'ny sela epithelial SST dia mitazona ny tsirinaina ao amin'ny lumen amin'ny lalana mifanohitra (rheolojika).
Ny tanjon'ity fanadihadiana ity dia ny handresy ireo olana amin'ny fijerena ny fihetsehan'ny spermatozoa ao amin'ny fantsona fallopian sy ny fisorohana ny fahasarotana amin'ny fandalinana ny rheology sy ny fitondran-tenan'ny spermatozoa amin'ny tontolo mavitrika.Nisy fitaovana microfluid iray nampiasaina izay mamorona fanerena hydrostatic mba hanahafana ny fihetsehan'ny tsirinaina ao amin'ny taovam-pananahana.
Rehefa nampidirina tao amin'ny fitaovana microchannel ny tsirinaina iray mitete (1:40) dia misy karazany roa ny fihetsehan'ny tsirinaina (tsirina mitoka-monina sy tsirinaina mifatotra).Fanampin'izany, ny spermatozoa dia nirona nilomano nanohitra ny riandrano (rheology positive; video 1, 2). Na dia manana hafainganam-pandeha ambany kokoa noho ny an'ny tsirinaina manirery (p <0.001) aza ny fatran'ny tsirinaina, dia nampitombo ny isan-jaton'ny tsirinaina mampiseho rheotaxis tsara izy ireo (p <0.001; Table 2). Na dia manana hafainganam-pandeha ambany kokoa noho ny an'ny tsirinaina manirery (p <0.001) aza ny fatran'ny tsirinaina, dia nampitombo ny isan-jaton'ny tsirinaina mampiseho rheotaxis tsara izy ireo (p <0.001; Table 2). Хотя пучки сперматозоидов имели более низкую скорость, чем у одиночныпх сперматозоидов (p < 0,001), осиность дов, демонстрирующих положительный реотаксис (p < 0,001; таблица 2). Na dia manana hafainganam-pandeha ambany kokoa noho ny an'ny spermatozoa tokana (p <0.001) aza ny amboara spermatozoa, dia nampitombo ny isan-jaton'ny spermatozoa mampiseho rheotaxis tsara izy ireo (p <0.001; Table 2).尽管精子束的速度低于孤独精子的速度（p < 0.001），但它们增加了显示阳性显示阳性流的示阳性流的示阳性流的示门<0.001；表2）.尽管 精子束 的 速度 低于 孤独 的 速度 （p <0.001） ， 但 增加 了 显示 阳性 显示 阳性 浔性（p <0.001； 2……..））））） Хотя скорость пучков сперматозоидов была ниже, чем у одиночных сперматозоидов (p < 0,001), они увеличирдил жительной реологией (p < 0,001; таблица 2). Na dia ambany noho ny an'ny spermatozoa tokana aza ny hafainganam-pandehan'ny tsirinaina (p <0,001), dia nampitombo ny isan-jaton'ny spermatozoa misy rheolojia tsara izy ireo (p <0,001; Table 2).Ny rheologie tsara ho an'ny spermatozoa tokana sy ny tufts dia tombanana eo amin'ny 53% sy 85% eo ho eo.
Voamarika fa ny spermatozoa amin'ny akoho sharkasi avy hatrany aorian'ny ejaculation dia mamorona amboara tsipika, ahitana olona am-polony.Mitombo ny halavany sy ny hateviny rehefa mandeha ny fotoana ary mety hijanona ao anaty vitro mandritra ny ora maromaro alohan'ny hilentika (video 3).Ireo fehezam-boninkazo ireo dia miendrika toy ny spermatozoa echidna izay miforona eo amin'ny faran'ny epididymis.Ny tsirinaina akoho Sharkashi dia hita fa manana fironana avo lenta amin'ny aglutinate ary mamorona fehezam-boninkazo tsy ampy iray minitra aorian'ny fanangonana.Ireo taratra ireo dia mavitrika ary afaka mifikitra amin'ny rindrina na zavatra static eo akaiky eo.Na dia mampihena ny hafainganam-pandehan'ny selan'ny tsirinaina aza ny amboara tsirinaina, dia mazava fa amin'ny macroscopique dia mampitombo ny linearity izy ireo.Ny halavan'ny amboara dia miovaova arakaraka ny isan'ny tsirinaina voaangona ao anaty amboara.Ny ampahany roa amin'ny amboara dia natokana: ny ampahany voalohany, anisan'izany ny loha malalaka amin'ny tsirinaina mitambatra, ary ny ampahany farany, anisan'izany ny rambony sy ny faran'ny tsirinaina manontolo.Amin'ny fampiasana fakan-tsary haingam-pandeha (950 fps), dia hita ao amin'ny ampahany voalohany amin'ny fonosana ny lohan'ny spermatozoa agglutinated maimaim-poana, tompon'andraikitra amin'ny fihetsehan'ny fehezam-boninkazo noho ny fihetsehan'izy ireo, mitarika ny sisa tavela ao anaty fonosana miaraka amin'ny hetsika helika (Video 4).Na izany aza, amin'ny volo lava, dia voamarika fa misy lohan'ny tsirinaina maimaim-poana miraikitra amin'ny vatana ary ny ampahany farany amin'ny volombava dia miasa toy ny vane manampy amin'ny fanosehana ny volo.
Na dia ao anatin'ny fikorianan'ny fluid miadana aza, ny tsirinaina dia mihetsika mifanindran-dàlana, na izany aza, manomboka mifanipaka sy mifikitra amin'izay rehetra mbola misy izy ireo, mba tsy ho voasakan'ny fikorianan'ny rivotra rehefa mitombo ny hafainganam-pandehan'ny rivotra.Miforona ny fehezam-boninkazo rehefa mifanakaiky ny selan'ny tsirinaina vitsivitsy, manomboka mihetsiketsika izy ireo ary mifamatotra, ary avy eo miraikitra amin'ny zavatra mipetaka.Ny sary 1 sy 2 dia mampiseho ny fifandraisan'ny tsirinaina, ka mamorona fihaonan'ny rambony.
Ny mpikaroka dia nampihatra fanerena hydrostatic mba hamoronana fikorianan'ny fluid ao amin'ny microchannel mba hianarana rheology sperm.Fantsona micro misy habe 200 µm × 20 µm (W × H) ary 3.6 µm ny halavany.Mampiasà fantsona mikro eo anelanelan'ny kaontenera misy syringe napetraka eo amin'ny farany.Ny fandokoana sakafo dia nampiasaina mba hahatonga ny fantsona ho hita kokoa.
Afatory amin'ny rindrina ny tariby mifampitohy sy ny kojakoja.Nalaina tamin'ny microscope contrast phase ilay horonan-tsary.Miaraka amin'ny sary tsirairay, ny microscopie contrast phase sy ny sarin-tsarintany dia aseho.(A) Ny fifandraisana eo amin'ny renirano roa dia manohitra ny fikorianan'ny helika (zana-tsipìka mena).(B) Ny fifandraisana eo amin'ny fantsona fantsona sy ny rindrin'ny fantsona (zana-tsipìka mena), miaraka amin'izay koa izy ireo dia mifandray amin'ny amboara roa hafa (zana-tsipìka mavo).(C) Manomboka mifandray amin'ny tsirairay (zana-tsipìka mena) ny tsirinaina ao amin'ny fantsona mikrofluida, ka mamorona amboara tsirinaina.(D) Fiforonan'ny tamba-jotra misy tsirinaina.
Rehefa nampidirina tao amin'ny fitaovana mikraoba ny tsirinaina voalevon'ny tsirinaina iray ary nisy fikorianan'ny rivotra, dia hita fa nanohitra ny lalan'ny fikorianan'ny tsirinaina.Mifanaraka tsara amin'ny rindrin'ny microchannels ireo fehezam-boninkazo, ary ny loha maimaim-poana amin'ny ampahany voalohany amin'ireo fehezam-boninkazo dia mifanentana tsara amin'izy ireo (video 5).Mifikitra amin’izay poti-javatra tsy mijanona eo amin’ny lalany ihany koa izy ireo, toy ny potipoti-javatra, mba tsy ho voafaohin’ny riandrano.Rehefa mandeha ny fotoana, dia lasa filamenta lava mifatotra amin'ny spermatozoa tokana sy volo fohy kokoa ireo savony ireo (Video 6).Rehefa manomboka mihena ny fikorianan'ny tsirinaina dia manomboka mamorona tambajotra misy tsirinaina (Video 7; sary 2).
Amin'ny hafainganam-pandeha ambony (V> 33 µm/s), dia mitombo ny fihetsehan'ny kofehy miolakolaka ho fiezahana hisambotra tsirinaina maromaro mamorona amboara tsara kokoa hanoherana ny herin'ny fikorianan'ny rano. Amin'ny hafainganam-pandeha ambony (V> 33 µm/s), dia mitombo ny fihetsehan'ny kofehy miolakolaka ho fiezahana hisambotra tsirinaina maromaro mamorona amboara tsara kokoa hanoherana ny herin'ny fikorianan'ny rano. При высокой скорости потока (V > 33 мкм/с) ерматозоидов, образующих пучки, которые лучше противостоят дрейфующей силе потока. Amin'ny tahan'ny fikorianan'ny rivotra (V> 33 µm/s), dia mitombo ny fihetsehan'ny helika amin'ny tady rehefa miezaka misambotra spermatozoa tsirairay izy ireo mandrafitra fehezam-boninkazo izay mahatohitra kokoa ny herin'ny fikorianan'ny rano.在高流速(V > 33 µm/s) 时，螺纹的螺旋运动增加，以试图捕捉许多形成束的单个，他們他们他们他們流动的漂移力。在 高 流速 (v> 33 µm/s) 时 ， 的 螺旋 运动 增加 ， 以 试图 许多 形成 束 单 个 运动 增加 ， 以 试图 许多 形成 束 单 与 耶和抵抗 的 漂移力 .. . . . . . При высоких скоростях потока (V > 33 мкм/с) бразующих пучки, чтобы лучше сопротивляться силам дрейфа потока. Amin'ny tahan'ny fikorianan'ny avo (V> 33 µm/s), dia mitombo ny fihetsehan'ny filamenta amin'ny fiezahana hisambotra spermatozoa tsirairay mandrafitra amboara mba hanoherana tsara kokoa ny herin'ny fikorianan'ny rano.Niezaka ihany koa izy ireo nampiditra fantsona mikro amin'ny rindrina.
Ny tsirinaina dia nofaritana ho vondron'ny lohan'ny tsirinaina sy ny rambony mihodinkodina amin'ny fampiasana mikroskopika maivana (LM).Ny tsirinaina miaraka amin'ny fitambarana isan-karazany dia fantatra ihany koa ho loha miolikolika sy aggregate sainam-be, rambon'ny tsirinaina maromaro mitambatra, lohan'ny tsirinaina miraikitra amin'ny rambo iray, ary lohan'ny tsirinaina misy nucleus miondrika toy ny nuclei mitambatra maro.microscopie electron transmission (TEM).Ny scanning electron microscopy (SEM) dia nampiseho fa ny amboara tsirinaina dia fitambaran'ny lohan'ny tsirinaina ary ny fitambaran'ny tsirinaina dia mampiseho tambajotra mipetaka amin'ny rambony nofonosina.
Ny morphologie sy ny ultrastructure ny spermatozoa, ny fiforonan'ny tombo-kase spermatozoa dia nodinihina tamin'ny alàlan'ny microscopy maivana (antsasaky ny fizarana), scanning electron microscopy (SEM) ary transmission electron microscopy (TEM), smear sperme dia nolokoina tamin'ny acridine orange ary nodinihina tamin'ny microscopy epifluorescence.
Ny fandokoana ny tsirinaina amin'ny voasary acridine (sary 3B) dia nampiseho fa ny lohan'ny tsirinaina dia niraikitra ary norakofana fitaovana miafina, izay nitarika ho amin'ny fiforonan'ny tavy lehibe (sary 3D).Ny fitambaran'ny tsirinaina dia ahitana fitambarana tsirinaina miaraka amin'ny tambajotra misy rambony miraikitra (sary 4A-C).Ny rambon'ny spermatozoa maro miraikitra (sary 4D).Tsiambaratelo (sary 4E,F) no nanarona ny lohan'ny amboara spermatozoa.
Fiforonan'ny tombo-kase amin'ny spermatozoa Amin'ny alàlan'ny microscopie contrast phase sy ny smear sperme voaloto amin'ny voasary acridine, dia hita fa miraikitra ny lohan'ny spermatozoa.(A) Ny fiforonan'ny tsirinaina voalohany dia manomboka amin'ny tsirinaina (boribory fotsy) ary tsirinaina telo (boribory mavo), miaraka amin'ny spiral manomboka amin'ny rambony ary miafara amin'ny lohany.(B) Photomicrograph amin'ny smear sperme voaloto amin'ny voasary acridine mampiseho ny lohan'ny tsirinaina miraikitra (zana-tsipìka).Manarona ny lohany ny fivoahana.Fanamafisana × 1000. (C) Fampivoarana taratra lehibe entina amin'ny alàlan'ny fikorianan'ny fantsona microfluid (mampiasa fakantsary haingam-pandeha amin'ny 950 fps).(D) Micrographs ny tsirinaina smear voaloto amin'ny acridine voasary makirana be dia be (zana-tsipìka).Fanabeazana: ×200.
Fikarohana mikrôgrafia elektrônika amin'ny taratra tsirinaina sy hosotry ny tsirinaina voaloto amin'ny voasary acridine.(A, B, D, E) dia mikraografy electron scanning loko nomerika an'ny spermatozoa, ary ny C sy F dia micrographs amin'ny smear acridine miloko volom-boasary mampiseho firaisan'ny spermatozoa maromaro mifono ny tranokala caudal.(AC) Aseho ho tambazotra misy rambony (zana-tsipìka) ny fitambaran'ny tsirinaina.(D) Fidiran'ny spermatozoa maromaro (miaraka amin'ny akora adhesive, tsipika mavokely, zana-tsipìka) mihodidina ny rambony.(E sy F) Ny lohan'ny tsirinaina (pointers) rakotra fitaovana adhesive (pointers).Ny spermatozoa dia namorona amboara misy rafitra mitovy amin'ny vortex (F).(C) ×400 sy (F) ×200 magnifications.
Amin'ny fampiasana mikroskopika elektronika fampitana, dia hitanay fa misy rambony (sary 6A, C), loha miraikitra amin'ny rambo (sary 6B) na loha miraikitra amin'ny rambony (sary 6D).Ny lohan'ny spermatozoa ao amin'ny fehezam-boninkazo dia miondrika, mampiseho amin'ny faritra roa nokleary (sary 6D).Ao amin'ny fehezam-boninkazo, ny spermatozoa dia manana loha miolikolika miaraka amin'ny faritra nokleary roa sy faritra maromaro maromaro (sary 5A).
mikrôgrafia elektronika loko nomerika mampiseho ny rambo mampitohy ao amin'ny amboaran'ny tsirinaina sy ny akora agglutinating mampifandray ny lohan'ny tsirinaina.(A) Rambon'ny spermatozoa be dia be.Mariho ny endriky ny rambony amin'ny vinavinan'ny portrait (zana-tsipìka) sy ny tontolon'ny (zana-tsipìka).(B) Ny lohan'ny tsirinaina dia mifandray amin'ny rambony (zana-tsipìka).(C) Miraikitra ny rambony (zana-tsipìka) maromaro.(D) Ny fitaovana agglutination (AS, manga) dia mampifandray lohan'ny tsirinaina efatra (volomparasy).
Ny mikraoskaopy elektrônika scanning dia nampiasaina mba hamantarana ny lohan'ny tsirinaina ao anatin'ireo amboara tsirinaina voarakotra amin'ny sekretera na membranes (sary 6B), izay manondro fa ny tsirinaina dia napetraka amin'ny fitaovana extracellular.Ny fitaovana agglutinated dia nifantoka tamin'ny lohan'ny tsirinaina (fivoriana toy ny lohan'ny jellyfish; Fig. 5B) ary nitarina lavitra, manome endrika mavo mamirapiratra eo ambanin'ny microscopy fluorescence rehefa voaloto amin'ny orange acridine (sary 6C).Ity akora ity dia hita mazava eo ambanin'ny mikraoskaopy scanning ary heverina ho binder.Ny fizarana semi-manify (sary 5C) sy ny fanosorana tsirinaina voaloto amin'ny volom-boasary acridine dia nampiseho andiana tsirinaina misy lohany feno hipoka sy rambony miolakolaka (sary 5D).
Photomicrographs isan-karazany mampiseho ny fitambaran'ny lohan'ny tsirinaina sy miforitra rambony mampiasa fomba isan-karazany.(A) mikrôgrafia elektronika fifindran'ny loko dizitaly miolikolika amin'ny amboara tsirinaina mampiseho lohan'ny tsirinaina mihodinkodina miaraka amin'ny nucleus roa (manga) ary ampahany maromaro (maitso).(B) mikrôgrafia elektronika mi-scan ny loko nomerika mampiseho andiana lohan'ny tsirinaina (zana-tsipìka) mitovitovy amin'ny jellyfish izay toa sarona.(C) Fizarana semi-manify mampiseho ny lohan'ny tsirinaina mitambatra (zana-tsipìka) sy ny rambony (zana-tsipìka).(D) Mikrografan'ny fanosorana tsirinaina voaloto amin'ny volom-boasary acridine mampiseho fitambaran'ny lohan'ny tsirinaina (zana-tsipìka) sy ny rambony miraikitra (zana-tsipìka).Mariho fa misy zavatra mipetaka (S) manarona ny lohan'ny spermatozoon.(D) × 1000 fampitomboana.
Amin'ny fampiasana microscopie electron transmission (sary 7A), dia voamarika ihany koa fa mihodinkodina ny lohan'ny tsirinaina ary manana endrika miolikolika ny nuclei, araka ny nohamafisin'ny smear spermia voaloto amin'ny orange acridine ary nodinihina tamin'ny microscopie fluorescence (sary 7B).
(A) mikrôgrafia elektronika fifindran'ny loko nomerika sy (B) Fisoronana tsirinaina voaloko volom-boasary acridine mampiseho ny loha mihodinkodina sy ny lohan'ny tsirinaina sy ny rambony (zana-tsipìka).(B) × 1000 fanitarana.
Ny fikarohana iray mahaliana dia ny fivondronan'ny tsirin'i Sharkazi mba hamorona amboara filamentous finday.Ny fananan'ireo fehezam-boninkazo ireo dia mamela antsika hahatakatra ny mety ho anjara asany amin'ny fandraisana sy fitehirizana ny spermatozoa ao amin'ny SST.
Aorian'ny fanambadiana dia miditra ao amin'ny fivaviana ny tsirinaina ary mandalo dingana fifantenana mahery vaika, ka tsy misy afa-tsy ny tsirinaina miditra ao amin'ny SST15,16.Hatramin'izao, tsy mazava ny fomba idiran'ny tsirinaina ao amin'ny SST.Ao amin'ny akoho amam-borona, ny spermatozoa dia voatahiry ao amin'ny SST mandritra ny 2 ka hatramin'ny 10 herinandro, arakaraka ny karazana6.Mbola mitohy ny resabe momba ny toetry ny tsirinaina mandritra ny fitahirizana ao amin’ny SST.Mihetsiketsika ve izy ireo sa miala sasatra?Raha lazaina amin'ny teny hafa, ahoana no ahafahan'ny selan'ny tsirinaina mitazona ny toerany ao amin'ny SST mandritra ny fotoana maharitra?
Forman4 dia nanoro hevitra fa ny trano fonenana sy ny fandroahana SST dia azo hazavaina amin'ny resaka motility tsirinaina.Ny mpanoratra dia mihevitra fa ny tsirinaina dia mitazona ny toerany amin'ny alàlan'ny filomanosana manohitra ny fikorianan'ny ranon-javatra noforonin'ny epithelium SST ary ny tsirinaina dia mivoaka avy ao amin'ny SST rehefa latsaka ambany ny hafainganam-pandehany noho ny tsy fahampian'ny angovo.Zaniboni5 dia nanamafy ny fisian'ny aquaporins 2, 3, ary 9 ao amin'ny ampahany apical amin'ny sela epithelial SST, izay mety hanohana ankolaka ny modely fitahirizana tsirinaina Foreman.Ao amin'ny fanadihadiana amin'izao fotoana izao dia hitanay fa efa ho ny antsasaky ny spermatozoa an'i Sharkashi dia mampiseho rheology tsara ao amin'ny fluid mikoriana, ary ny agglutinated sperm bundles dia mampitombo ny isan'ny spermatozoa mampiseho rheology tsara, na dia mampihena azy ireo aza ny agglutination.Tsy fantatra tsara ny fomba fandehanan'ny selan'ny tsirinaina miakatra amin'ny trompes utérine dia mampitohy an'ilay vorona.Ao amin'ny biby mampinono, ny fluid follicular chemoattracts spermatozoa.Na izany aza, ny chemoattractants dia inoana fa mitarika spermatozoa hanatona lavitra7.Noho izany, ny rafitra hafa dia tompon'andraikitra amin'ny fitaterana tsirinaina.Ny fahafahan'ny tsirinaina mitodika sy mikoriana amin'ny fluidin'ny trompes utérine dia voalaza fa antony lehibe amin'ny fikatsahana ny tsirinaina amin'ny totozy.Parker 17 dia nanoro hevitra fa ny spermatozoa dia miampita ny oviduct amin'ny alàlan'ny filomanosana manohitra ny korianan'ny ciliary amin'ny vorona sy ny biby mandady.Na dia tsy nasehon'ny andrana tamin'ny vorona aza izany, dia i Adolphi18 no voalohany nahita fa manome vokatra tsara ny tsirinaina avy amin'ny aviavy rehefa misy ranon-javatra manify eo anelanelan'ny fonony sy ny slide dia noforonina tamin'ny taratasy sivana.Rheolojia.Hino sy Yanagimachi [19] dia nametraka complexe ovarian-tubal-uterine totozy tao anaty peratra perfusion ary nanindrona ranomainty 1 µl tao amin'ny isthmus mba hijerena ny fikorianan'ny fluid ao amin'ny fantsona.Tsikaritr'izy ireo fa misy hetsika mihetsiketsika mihetsiketsika sy miala sasatra ao amin'ny trompes utérine dia mampitohy, izay ny baolina ranomainty rehetra dia tsy mitsaha-mifindra mankany amin'ny ampulla ny trompes utérine dia mampitohy.Ny mpanoratra dia manantitrantitra ny maha-zava-dehibe ny fikorianan'ny fluid tubal avy amin'ny ambany mankany amin'ny trompes utérine dia mampitohy ny tsirinaina sy ny fampiraisana.Brillard20 dia nitatitra fa amin'ny akoho sy ny vorontsiloza, ny spermatozoa dia mifindra monina amin'ny hetsika mavitrika avy amin'ny fidirana amin'ny fivaviana, izay itahirizana azy, mankany amin'ny fihaonan'ny utero-vaginal, izay misy azy ireo.Na izany aza, io hetsika io dia tsy ilaina eo anelanelan'ny fihaonan'ny uterovaginal sy ny infundibulum satria ny spermatozoa dia entina amin'ny fifindran'ny passive.Ny fahafantarana ireo tolo-kevitra teo aloha ireo sy ny vokatra azo tamin'ny fanadihadiana amin'izao fotoana izao, dia azo heverina fa ny fahafahan'ny spermatozoa hivezivezy any ambony (rheology) dia iray amin'ireo toetra iorenan'ny fizotry ny fifantenana.Izany no mamaritra ny fandehan'ny spermatozoa amin'ny fivaviana sy ny fidirany ao amin'ny CCT ho fitehirizana.Araka ny soso-kevitr'i Forman4, dia mety hanamora ny fizotry ny tsirinaina miditra ao amin'ny SST sy ny toeram-ponenany mandritra ny fotoana maharitra izany ary mivoaka rehefa manomboka mihena ny hafainganam-pandehany.
Amin'ny lafiny iray, ny Matsuzaki sy Sasanami 21 dia nanoro hevitra fa ny spermatozoa avian dia mandalo fiovan'ny motility avy amin'ny torimaso mankany amin'ny motility ao amin'ny trakta fananahana lahy sy vavy.Ny fanakanana ny fihetsehan'ny tsirinaina ao amin'ny SST dia natolotra mba hanazavana ny fotoana fitehirizana ny tsirinaina lava ary avy eo ny fanavaozana aorian'ny fialana amin'ny SST.Amin'ny toe-javatra hypoxic, Matsuzaki et al.1 dia nitatitra ny famokarana sy ny famoahana lactate ao amin'ny SST, izay mety hitarika amin'ny fanakanana ny fifindran'ny tsirinaina ao amin'ny mponina.Amin'ity tranga ity, ny maha-zava-dehibe ny rheology spermia dia hita taratra amin'ny fifantenana sy ny fandraisana ny spermatozoa, fa tsy amin'ny fitehirizana azy ireo.
Ny lamin'ny agglutination ny tsirinaina dia heverina ho fanazavana azo tsapain-tanana momba ny vanim-potoana fitehirizana lava ny tsirinaina ao amin'ny SST, satria io no fomba mahazatra amin'ny fihazonana tsirinaina amin'ny akoho2,22,23.Bakst et al.2 dia nanamarika fa ny ankamaroan'ny spermatozoa dia mifamatotra, mamorona fascicular aggregates, ary ny spermatozoa tokana dia zara raha hita ao amin'ny CCM papelika.Amin'ny lafiny iray, Wen et al.24 dia nahita spermatozoa miparitaka bebe kokoa ary vitsy kokoa ny spermatozoa ao amin'ny SST lumen amin'ny akoho.Miorina amin'ireo fandinihana ireo dia azo heverina fa tsy mitovy ny fironana amin'ny agglutination ny tsirinaina eo amin'ny vorona sy eo amin'ny spermatozoa amin'ny ejaculate iray ihany.Ankoatra izany, Van Krey et al.9 dia nanoro hevitra fa ny fisarahana kisendrasendra ny spermatozoa agglutinated dia tompon'andraikitra amin'ny fidiran'ny spermatozoa tsikelikely ao amin'ny lumen amin'ny fantsona fallopian.Araka io petra-kevitra io, ny spermatozoa manana fahafaha-manangona ambany kokoa dia tokony havoaka amin'ny SST aloha.Amin'ity toe-javatra ity, ny fahafahan'ny spermatozoa mivondrona dia mety hisy fiantraikany amin'ny vokatry ny fifaninanana tsirinaina amin'ny vorona maloto.Ankoatra izany, arakaraka ny ela ny tsirinaina agglutinated dissociates, ny lava kokoa ny fahavokarana no tazonina.
Na dia voamarika aza ny fivondronan'ny spermatozoa sy ny fivondronan'ny amboara amin'ny fanadihadiana maro2,22,24, dia tsy nofaritana amin'ny antsipiriany izy ireo noho ny fahasarotan'ny fandinihana kinematic ao anatin'ny SST.Betsaka ny ezaka natao mba hianarana ny fivondronan'ny tsirinaina in vitro.Ny fivondronana midadasika nefa mandalo dia hita rehefa nesorina ilay tariby manify tamin'ilay latsaka voa mihantona.Izany dia mitarika ho amin'ny zava-misy fa ny elongated bubble protrudes avy amin'ny indray mitete, maka tahaka ny seminal fihary.Noho ny fetran'ny 3D sy ny fotoana fanamainana mitete fohy dia rava haingana ny sakana manontolo9.Ao amin'ny fanadihadiana amin'izao fotoana izao, mampiasa akoho Sharkashi sy chips microfluidic, dia afaka namaritra ny fomba fiforonan'ireo voditongotra ireo sy ny fomba fihetsiny.Niforona avy hatrany taorian'ny fanangonana tsirinaina ny tsirinaina ary hita mihodinkodina, mampiseho rheolojia tsara rehefa misy ao anaty fikorianan'ny rano.Ankoatr'izay, rehefa jerena amin'ny macroscopique, dia hita fa mampitombo ny fizotry ny motility ny tsirinaina raha oharina amin'ny spermatozoa mitoka-monina.Midika izany fa mety hitranga alohan'ny fidiran'ny SST ny agglutination ny tsirinaina ary tsy voafetra amin'ny faritra kely ny famokarana tsirinaina noho ny adin-tsaina araka ny voalaza teo aloha (Tingari sy Lake12).Mandritra ny fiforonan'ny tsirinaina dia milomano miaraka amin'ny synchrony ny spermatozoa mandra-piforonany, avy eo mifamatotra ny rambony ary mijanona malalaka ny lohan'ny spermatozoon, fa ny rambony sy ny ampahany amin'ny spermatozoon dia miraikitra miaraka amin'ny zavatra mipetaka.Noho izany, ny lohan'ny ligamenta maimaim-poana dia tompon'andraikitra amin'ny hetsika, mitarika ny sisa amin'ny ligamenta.Rehefa nozahana tamin'ny mikraoskaopy elektrônika ireo amboara tsirinaina dia nahitana lohan'ny tsirinaina miraikitra rakotra akora mipetaka be dia be, izay nanoro fa ny lohan'ny tsirinaina dia niraikitra tao anaty amboara miala sasatra, izay mety ho nitranga rehefa tonga tao amin'ny toerana fitehirizana (SST).
Rehefa voaloton'ny voasary acridine ny fanosorana tsirinaina, dia hita eo ambanin'ny mikraoskaopy fluorescent ny fitaovana adhesive extracellular manodidina ny selan'ny tsirinaina.Io akora io dia mamela ny tsirinaina hifikitra sy hifikitra amin'ny faritra na poti-javatra manodidina mba tsy hivezivezy amin'ny fikorianan'ny manodidina.Noho izany, ny fandinihanay dia mampiseho ny anjara asan'ny adhesion ny spermatozoa amin'ny endriky ny fonosana finday.Ny fahafahan'izy ireo milomano manohitra ny riandrano ary mifikitra amin'ny faritra akaiky dia mamela ny tsirinaina hijanona ela kokoa ao amin'ny SST.
Rothschild25 dia nampiasa fakan-tsary hemocytometry mba handalinana ny fitsinjarana tsirinaina mitsingevana ny tsirinaina omby ao anatin'ny indray mitete fampiatoana, maka photomicrographs amin'ny alalan'ny fakan-tsary miaraka amin'ny axis optika mitsangana sy mitsivalana amin'ny mikraoskaopy.Ny valiny dia naneho fa ny spermatozoa dia voasariky ny efitr'ilay efitrano.Ny mpanoratra dia manoro hevitra fa mety misy fifandraisana hydrodynamic eo amin'ny tsirinaina sy ny ety ivelany.Raha raisina izany, miaraka amin'ny fahafahan'ny tsirinaina akoho Sharkashi mamorona vodi-kazo mipetaka, dia mety hampitombo ny mety hisian'ny tsirinaina hifikitra amin'ny rindrin'ny SST ary ho voatahiry mandritra ny fotoana maharitra.
Bccetti sy Afzeliu26 dia nitatitra fa ny glycocalyx sperm dia ilaina amin'ny fanekena ny gamete sy ny agglutination.Forman10 dia nanamarika fa ny hydrolysis ny α-glycosidic fatorana amin'ny glycoprotein-glycolipid coatings amin'ny fikarakarana ny tsirinaina avian amin'ny neuraminidase dia niteraka fihenan'ny fahavokarana tsy misy fiantraikany amin'ny fihetsehan'ny tsirinaina.Ny mpanoratra dia manoro hevitra fa ny fiantraikan'ny neuraminidase amin'ny glycocalyx dia manimba ny fisamborana tsirinaina amin'ny fihaonan'ny utero-vaginal, ka mampihena ny fahavokarana.Ny fandinihan'izy ireo dia tsy azo tsinontsinoavina fa ny fitsaboana neuraminidase dia mety hampihena ny fahafantarana ny tsirinaina sy ny oocyte.Hitan'i Forman sy Engel10 fa nihena ny fahavokarana rehefa nampidirina am-bava tamin'ny tsirinaina voatsabo tamin'ny neuraminidase ny akoho.Na izany aza, ny IVF miaraka amin'ny tsirinaina voatsabo neuraminidase dia tsy misy fiantraikany amin'ny fahavokarana raha oharina amin'ny akoho mifehy.Ny mpanoratra dia nanatsoaka hevitra fa ny fiovan'ny glycoprotein-glycolipid coating manodidina ny sperm membrane dia mampihena ny fahafahan'ny tsirinaina zezika amin'ny alàlan'ny fanimbana ny sequestration ny tsirinaina amin'ny fihaonan'ny utero-vaginal, izay nitombo ny fahaverezan'ny tsirinaina noho ny hafainganam-pandehan'ny utero-vaginal junction, fa tsy misy fiantraikany amin'ny tsirinaina sy ny fanekena atody.
Ao amin'ny vorontsiloza Bakst sy Bauchan 11 dia nahita vesicles kely sy sombintsombiny tao amin'ny lumen'ny SST ary nahita fa ny sasany amin'ireo granules ireo dia nitambatra tamin'ny sperm membrane.Ny mpanoratra dia manoro hevitra fa ireo fifandraisana ireo dia mety hitondra anjara biriky amin'ny fitehirizana maharitra ny spermatozoa ao amin'ny SST.Na izany aza, ny mpikaroka dia tsy nanondro ny loharanon'ireo singa ireo, na ny sela epithelial CCT, na novokarin'ny rafi-pananahana lahy, na novokarin'ny tsirinaina.Ary koa, ireo singa ireo dia tompon'andraikitra amin'ny agglutination.Grützner et al27 dia nitatitra fa ny sela epithelial epididymaly dia mamokatra sy manafina proteinina manokana izay ilaina amin'ny fiforonan'ny trakta seminera tokana.Ny mpanoratra ihany koa dia mitatitra fa ny fiparitahan'ireo fehezam-boninkazo ireo dia miankina amin'ny fifandraisan'ny proteinina epididymal.Hitan'i Nixon et al28 fa ny adnexa dia mamoaka proteinina, ny osteonectin asidra asidra;Ny SPARC dia mandray anjara amin'ny fiforonan'ny tsirinaina amin'ny echidnas sy platypuses fohy vava.Ny fiparitahan'ireo taratra ireo dia mifandray amin'ny fahaverezan'ity proteinina ity.
Ao amin'ny fanadihadiana amin'izao fotoana izao, ny fanadihadiana ultrastructural mampiasa microscopy elektronika dia nampiseho fa ny spermatozoa dia nifikitra tamin'ny fitaovana matevina be.Ireo akora ireo dia heverina ho tompon'andraikitra amin'ny agglutination izay mipoitra eo anelanelan'ny loha sy manodidina ny loha miraikitra, fa amin'ny fifantohana ambany kokoa ao amin'ny faritry ny rambony.Heverintsika fa io akora mampitambatra io dia mivoaka avy ao amin'ny rafi-pananahana lahy (epididymis na vas deferens) miaraka amin'ny tsirinaina, satria matetika isika no mahita tsirinaina misaraka amin'ny lymph sy plasma seminal mandritra ny ejaculation.Voalaza fa rehefa mandalo ao amin'ny epididymis sy vas deferens ny spermatozoa avian, dia mandalo fiovana mifandraika amin'ny fahamatorana izy ireo izay manohana ny fahafahany mamatotra proteinina sy mahazo glycoproteins mifandray amin'ny plasma lemma.Ny fikirizan'ireo proteinina ireo amin'ny membranes spermia mipetraka ao amin'ny SST dia manoro hevitra fa ireo proteinina ireo dia mety hisy fiantraikany amin'ny fahazoana ny fahamarinan-toeran'ny tsirinaina 30 ary mamaritra ny fahavokarany 31.Ahammad et al32 dia nitatitra fa ny spermatozoa azo avy amin'ny faritra samihafa amin'ny rafi-pananahana lahy (avy amin'ny testes ka hatrany amin'ny vas deferens distal) dia nampiseho fitomboana miandalana amin'ny fahavelomana eo ambanin'ny fepetra fitehirizana rano, na inona na inona hafanana fitehirizana, ary mitombo ihany koa ny fahafahan'ny akoho ao amin'ny trompes utérine dia mampitohy artifisialy.
Ny tsirinaina akoho Sharkashi dia manana toetra sy fiasa hafa noho ny karazana hafa toy ny echidnas, platypuses, totozy hazo, voalavo serfa, ary kisoa guinea.Ao amin'ny akoho sharkasi, ny fiforonan'ny amboara spermatozoa dia nampihena ny hafainganana milomano raha oharina amin'ny spermatozoa tokana.Na izany aza, ireo fehezam-boninkazo ireo dia nampitombo ny isan-jaton'ny spermatozoa rheolojika tsara ary nampitombo ny fahafahan'ny spermatozoa hiorina amin'ny tontolo mavitrika.Noho izany, ny valiny dia manamafy ny soso-kevitra teo aloha fa ny agglutination sperm ao amin'ny SST dia mifandray amin'ny fitehirizana spermia maharitra.Mihevitra ihany koa izahay fa mety hifehy ny tahan'ny fahaverezan'ny tsirinaina ao amin'ny SST ny firongatry ny tsirinaina, izay mety hanova ny vokatry ny fifaninanana tsirinaina.Araka io fiheverana io, ny spermatozoa manana fahafaha-manangona ambany dia mamoaka ny SST voalohany, raha ny spermatozoa manana fahaiza-manao agglutination ambony dia mamokatra ny ankamaroan'ny taranaka.Ny fiforonan'ny tsirinaina misy pore tokana dia mahasoa ary misy fiantraikany amin'ny tahan'ny ray aman-dreny sy ny zaza, saingy mampiasa fomba fiasa hafa.Ao amin'ny echidnas sy platypuses, ny spermatozoa dia mifanandrify amin'ny tsirairay mba hampitombo ny hafainganam-pandehan'ny taratra.Mihetsika avo telo heny noho ny tsirinaina tokana ny andiana echidna.Heverina fa ny fiforonan'ny tsirinaina toy izany ao amin'ny echidnas dia fampifanarahana amin'ny evolisiona mba hitazonana ny fanjakazakana, satria ny vehivavy dia mijangajanga ary matetika miray amin'ny lahy maromaro.Noho izany, ny spermatozoa avy amin'ny ejaculates samihafa dia mifaninana mafy amin'ny fampiraisana ny atody.
Ny spermatozoa agglutinated amin'ny akoho sharkasi dia mora jerena amin'ny fampiasana mikroskopika mifanohitra amin'ny dingana, izay heverina fa mahasoa satria mamela ny fandalinana mora ny fitondran'ny spermatozoa in vitro.Tsy mitovy ihany koa ny fomba fiasan'ny fiforonan'ny tsirinaina amin'ny akoho sharkasi raha oharina amin'ny hita amin'ny biby mampinono amin'ny placental izay maneho ny fitondran-tenan'ny tsirinaina miara-miasa toy ny totozy hazo, izay ahafahan'ny spermatozoa sasany tonga any amin'ny atody, manampy ny olona hafa mifandray amin'izy ireo hahatratra sy hanimba ny atodiny.mba hanaporofoana ny tenanao.fitondran-tena altruista.Fambolen-tena 34. Ohatra iray hafa amin'ny fitondran-tena miara-miasa amin'ny spermatozoa dia hita tamin'ny totozy serfa, izay nahafahan'ny spermatozoa nahafantatra sy nitambatra tamin'ny spermatozoa mifandray indrindra amin'ny fototarazo ary namorona vondrona fiaraha-miasa mba hampitombo ny hafainganam-pandehany raha oharina amin'ny spermatozoa tsy misy ifandraisany35.
Ny vokatra azo tamin'ity fanadihadiana ity dia tsy mifanohitra amin'ny teorian'i Foman momba ny fitahirizana maharitra ny spermatozoa ao amin'ny SWS.Ny mpikaroka dia mitatitra fa ny selan'ny tsirinaina dia manohy mihetsika ao amin'ny fikorianan'ny sela epithelial manarona ny SST mandritra ny fotoana maharitra, ary aorian'ny fe-potoana iray, dia lany ny fitehirizana angovo ao amin'ny selan'ny tsirinaina, ka mihena ny hafainganam-pandeha, izay mamela ny fandroahana ireo akora kely lanja molekiola.angovon'ny spermatozoa miaraka amin'ny fikorianan'ny fluid avy amin'ny lumen'ny SST Ny lavaky ny trompes utérine dia mampitohy.Ao amin'ny fanadihadiana amin'izao fotoana izao, dia nahatsikaritra izahay fa ny antsasaky ny tsirinaina tokana dia naneho ny fahaiza-milomano manohitra ny ranon-javatra mikoriana, ary ny firaiketan'izy ireo ao anaty fonosana dia nampitombo ny fahaizany mampiseho rheology tsara.Ankoatr'izay, ny angon-drakitray dia mifanaraka amin'ny an'ny Matsuzaki et al.1 izay nitatitra fa ny fitomboan'ny lactate secretion ao amin'ny SST dia mety hanakana ny fifindran'ny tsirinaina.Na izany aza, ny valiny dia mamaritra ny fiforonan'ny sperm motile ligaments sy ny fihetsik'izy ireo rheolojika amin'ny fisian'ny tontolo mavitrika ao anatin'ny microchannel amin'ny fikasana hanazava ny fitondran-tenany ao amin'ny SST.Ny fikarohana amin'ny ho avy dia mety hifantoka amin'ny famaritana ny singa simika sy ny niandohan'ny agglutinating agent, izay tsy isalasalana fa hanampy ny mpikaroka hamolavola fomba vaovao hitahirizana tsirinaina sy hampitombo ny faharetan'ny fahavokarana.
Dimy ambin'ny folo 30-herinandro tsy miboridana sharkasi lahy (homozygous dominant; Na Na) no voafidy ho mpanome tsirinaina tao amin'ny fianarana.Ny vorona dia nobeazina tao amin'ny toeram-piompiana akoho amam-borona fikarohana ao amin'ny Fakiolten'ny Fambolena, Oniversite Ashit, Governemanta Ashit, Ejipta.Ny vorona dia napetraka ao anaty tranom-borona tsirairay (30 x 40 x 40 cm), iharan'ny programa maivana (16 ora ny hazavana sy 8 ora ny haizina) ary nomena sakafo misy proteinina 160 g, 2800 kcal ny angovo azo havaozina, 35 g ny calcium tsirairay.5 grama ny phosphore misy isaky ny kilao ny sakafo.
Araka ny angon-drakitra 36, ​​37, ny tsirinaina dia nangonina avy amin'ny lehilahy tamin'ny fanorana kibo.Santionany tsirinaina miisa 45 no voaangona tamin’ny lehilahy 15 tao anatin’ny 3 andro.Ny tsirinaina (n = 15/andro) dia nolevonina avy hatrany 1: 1 (v: v) miaraka amin'ny Belsville Poultry Semen Diluent, izay misy potassium diphosphate (1,27 g), monosodium glutamate monohydrate (0,867 g), fructose (0,5 d) anhydrous sodium.acetate (0,43 g), tris(hydroxymethyl)aminomethane (0,195 g), potassium citrate monohydrate (0,064 g), potassium monophosphate (0,065 g), magnesium chloride (0,034 g) ary H2O (100 ml), pH = 7, 5, osmolarity 333 mOsm/kg.Nojerena teo ambany mikraoskaopy maivana aloha ny santionan'ny tsirinaina efa voadio mba hahazoana antoka tsara ny kalitaon'ny tsirinaina (hamandoana) ary avy eo tehirizina ao anaty rano fandroana amin'ny 37°C mandra-pampiasaina ao anatin'ny antsasak'adiny aorian'ny fanangonana.
Ny kinematics sy rheology ny spermatozoa dia nofaritana tamin'ny alalan'ny rafitra fitaovana microfluidic.Ny santionan'ny tsirinaina dia natsipy bebe kokoa tamin'ny 1:40 tao amin'ny Beltsville Avian Semen Diluent, nampidirina tao amin'ny fitaovana mikraoba (jereo eto ambany), ary ny mari-pamantarana kinetika dia nofaritana tamin'ny alàlan'ny rafitra Computerized Semen Analysis (CASA) izay novolavolaina teo aloha ho an'ny microfluidics characterization.momba ny fivezivezen'ny spermatozoa amin'ny haino aman-jery ranon-javatra (Department of Mechanical Engineering, Faculté of Engineering, Assiut University, Egypt).Ny plugin dia azo alaina ao amin'ny: http://www.assiutmicrofluidics.com/research/casa39.Ny hafainganam-pandehan'ny curve (VCL, μm / s), ny hafainganam-pandehan'ny linear (VSL, μm / s) ary ny hafainganam-pandeha antonony (VAP, μm / s) dia norefesina.Ny horonan-tsary momba ny spermatozoa dia nalaina tamin'ny fampiasana mikraoskaopy mifanohitra Optika XDS-3 (miaraka amin'ny tanjona 40x) mifandray amin'ny fakantsary Tucson ISH1000 amin'ny 30 fps mandritra ny 3 segondra.Ampiasao ny rindrankajy CASA mba hianarana faritra telo farafahakeliny ary zotra 500 tsirinaina isaky ny santionany.Ny horonan-tsary voarakitra dia nokarakaraina tamin'ny CASA vita an-trano.Ny famaritana ny motility ao amin'ny plug-in CASA dia mifototra amin'ny hafainganam-pandehan'ny tsirinaina raha oharina amin'ny tahan'ny fikorianan'ny rano, ary tsy ahitana ny mari-pamantarana hafa toy ny hetsika amin'ny lafiny iray, satria hita fa azo antoka kokoa amin'ny fikorianan'ny fluid izany.Ny hetsika rheolojika dia voalaza fa ny fihetsiky ny selan'ny tsirinaina manohitra ny lalan'ny fikorianan'ny fluid.Ny spermatozoa manana toetra rheolojika dia nozaraina tamin'ny isan'ny spermatozoa motile;Ny spermatozoa izay miala sasatra sy ny spermatozoa mihetsiketsika dia nesorina tamin'ny isa.
Ny akora simika rehetra ampiasaina dia azo avy amin'ny Elgomhoria Pharmaceuticals (Cairo, Egypt) raha tsy misy fanamarihana manokana.Ny fitaovana dia novokarina araka ny nofaritan'i El-sherry et al.40 miaraka amin'ny fanovana sasany.Ny fitaovana ampiasaina hanamboarana ny microchannels dia ahitana takelaka fitaratra (Howard Glass, Worcester, MA), SU-8-25 fanoherana ratsy (MicroChem, Newton, CA), alikaola diacetone (Sigma Aldrich, Steinheim, Germany), ary polyacetone.-184, Dow Corning, Midland, Michigan).Ny microchannels dia noforonina amin'ny fampiasana lithography malefaka.Voalohany, saron-tava fiarovana mazava miaraka amin'ny famolavolana microchannel irina dia natao pirinty tamin'ny mpanonta avo lenta (Prismatic, Cairo, Egypt ary Pacific Arts and Design, Markham, ON).Ny masters dia natao tamin'ny fampiasana takelaka fitaratra ho substrate.Ny takelaka dia nodiovina tamin'ny acetone, isopropanol ary rano deionized ary avy eo dia nofonosina tamin'ny sosona 20 µm SU8-25 tamin'ny alàlan'ny fametahana spin (3000 rpm, 1 min).Ny sosona SU-8 avy eo dia maina moramora (65 ° C, 2 min ary 95 ° C, 10 min) ary nipoitra tamin'ny taratra UV nandritra ny 50 s.Aorian'ny fipoahana dia manendasa amin'ny 65 ° C sy 95 ° C mandritra ny 1 min sy 4 min mba hampifandray ny sosona SU-8 mibaribary, arahin'ny fivoaran'ny alikaola diacetone mandritra ny 6.5 min.Mofomamy mafy ny waffles (200 ° C mandritra ny 15 min) mba hanamafisana bebe kokoa ny sosona SU-8.
Ny PDMS dia nomanina tamin'ny fampifangaroana ny monomer sy ny hardener amin'ny lanjan'ny 10: 1, avy eo dia nesorina tao anaty vacuum desiccator ary narotsaka teo amin'ny rafitra fototra SU-8.Ny PDMS dia nositranina tao anaty lafaoro (120 ° C, 30 min), avy eo dia nesorina ny fantsona, nisaraka tamin'ny tompony, ary nopotehina mba hahafahan'ireo fantsona mipetaka eo amin'ny fidirana sy ny fivoahan'ny microchannel.Farany, ny microchannels PDMS dia nifamatotra tanteraka tamin'ny slide microscope tamin'ny alàlan'ny processeur corona portable (Electro-Technic Products, Chicago, IL) araka ny voalaza any an-kafa.Ny microchannel ampiasaina amin'ity fanadihadiana ity dia mirefy 200 µm × 20 µm (W × H) ary 3,6 sm ny halavany.
Ny fikorianan'ny fluid ateraky ny fanerena hydrostatic ao anatin'ny microchannel dia tratra amin'ny fitazonana ny haavon'ny fluid ao amin'ny fitahirizana fidirana eo ambonin'ny fahasamihafan'ny haavony Δh39 ao amin'ny reservoir fivoahana (sary 1).
izay f dia ny coefficient ny friction, voafaritra ho f = C / Re ho laminar fikorianan'ny ao amin'ny fantsona mahitsizoro, izay C dia tsy miova arakaraka ny lafiny tahan'ny ny fantsona, L ny halavan'ny microchannel, Vav dia ny salan'isa velocity ao anatin'ny microchannel, Dh dia ny hydraulic savaivony ny fantsona, g - acceleration ny gravité.Amin'ny fampiasana an'io equation io dia azo kajy ny hafainganam-pandehan'ny fantsona amin'ny alàlan'ny equation manaraka: