Misaotra anao nitsidika ny Nature.com.Ny dikan-teny navigateur ampiasainao dia manana fanohanana voafetra ho an'ny CSS. Ho an'ny traikefa tsara indrindra dia manoro hevitra anao izahay hampiasa navigateur nohavaozina (na vonoy ny fomba fampifanarahana amin'ny Internet Explorer).
Porous silica poti dia nomanina tamin'ny alalan'ny fomba sol-gel miaraka amin'ny fanovana sasany mba hahazoana macroporous poti. .8 mm id) dia nofonosina tamin'ny slurry packing.Evaluated PMP tsanganana fisarahana ny peptide fifangaroana ahitana dimy peptides (Gly-Tyr, Gly-Leu-Tyr, Gly-Gly-Tyr-Arg, Tyr-Ile-Gly-Ser-Arg, leucine enkephalin, leucine enkephalin) tsara indrindra amin'ny chromatorum serum digestion (leucine enkephalin) sy ny chromatorum serum digestion ny olombelona. Theoretical lovia isan'ny ny peptide mifangaro dia avo toy ny 280.000 takelaka / m². Ny fampitahana ny fisarahana ny zava-bita ny tsanganana mandroso amin'ny ara-barotra Ascentis Express RP-Amide tsanganana, dia hita fa ny fisarahana fampisehoana ny tsanganana PMP dia ambony noho ny ara-barotra tsanganana eo amin'ny fisarahana fahombiazana sy ny fanapahan-kevitra.
Tao anatin'ny taona vitsivitsy izay, ny indostrian'ny biopharmaceutical dia lasa tsena eran-tany miitatra miaraka amin'ny fitomboana be eo amin'ny tsenan'ny tsena. Ny ranon-javatra, ny tavy ary ny sela dia asa tena sarotra noho ny habetsahan'ny karazana mety ho hita ao anaty santionany iray. metatra amin'ny fotoana nomena4,5,6.Ankoatr'izay, mandritra ny fisarahana amin'ny dingan'ny rano, ny analytes dia afaka mifantoka amin'ny faritra tery, ka mampifantoka ireo analytes ireo ary manatsara ny fahatsapana MS.
Reversed-phase liquid chromatography (RP-LC) dia ampiasaina betsaka amin'ny fanadiovana sy fisarahana ny peptide mifangaro amin'ny fampiasana octadecyl-modified silica (ODS) ho toy ny stationary phase11,12,13. Na izany aza, RP stationary phases dia tsy manome fahafaham-po fisarahana ny peptides sy ny proteinina noho ny rafitra sarotra 14, philore tobin'ny peptide natao manokana ny 14, philore stationary manokana. famakafakana ny peptides sy ny proteinina misy moiety polar sy non-polar mba hifaneraserana sy hitazonana ireo analytes ireo16. Ny chromatography mixed-mode, izay manome fifandraisana multimodal, dia mety ho solon'ny RP-LC amin'ny fisarahana ny peptides, proteinina, ary fifangaroan-javatra sarotra hafa. 20,21.Mixed-mode stationary phases (WAX / RPLC, HILIC / RPLC, polar intercalation / RPLC) dia mety amin'ny peptide sy ny proteinina fisarahana noho ny fisian'ny vondrona polar sy non-polar22,23,24,25,26,27,28 .Toy izany koa, polar fatorana tsy manam-paharoa amin'ny fifantenana vondrona polar sy polar fatorana mifantina seha-pifaneraserana amin'ny polar sy tsy misy polar. ary ny analytes tsy polar, satria miankina amin'ny fifandraisana misy eo amin'ny analyte sy ny phase stationary ny fisarahana.Fifandraisana multimodal 29, 30, 31, 32. Vao haingana, Zhang et al.30 nanomana dodecyl-terminated polyamine phase stationary ary soa aman-tsara nisaraka hydrocarbons, antidepressants, flavonoids, nucleosides, estrogens, ary maro hafa analytes. Ny polar intercalator dia samy polar sy non-polar vondrona, noho izany dia azo ampiasaina mba hanasarahana ny peptides sy ny proteinina izay samy manana hydrophobic sy hydrophilic tsanganana C tsanganana (Polarina embedded C tsanganana 1. eo ambanin'ny anaran'ny varotra Ascentis Express RP-Amide tsanganana, fa ireo tsanganana ireo dia ampiasaina amin'ny fanadihadiana ny amine 33 ihany.
Ao amin'ny fianarana amin'izao fotoana izao, ny polar-nampidirina amin'ny stationary phase (N-phenylmaleimide-embedded polystyrene) dia nomanina sy nanombana ny fisarahana ny peptides sy ny trypsin digests ny HSA. mba hanomanana poti silica manana habe lehibe. Faharoa, ligand vaovao, phenylmaleimide-methyl vinyl isocyanate, no synthesized ary nampiasaina mba derivatize silica poti mba hanomanana polar mipetaka amin'ny dingana stationary. Ny tsanganana. Tombano ny fisarahan'ny tsanganana feno peptide mifangaro misy peptides dimy;(Gly-Tyr, Gly-Leu-Tyr, Gly-Gly-Tyr-Arg, Tyr-Ile-Gly-Ser-Arg, Leucine Enkephalin) ary Trypsin digest of human serum albumin (HAS) . .Ny peptides sy ny proteinina dia hita fa voavaha tsara sy mahomby amin'ny tsanganana PMP, izay mahomby kokoa noho ny tsanganana Ascentis Express RP-Amide.
PEG (Polyethylene Glycol), Urea, Acetic Acid, Trimethoxy Orthosilicate (TMOS), Trimethyl Chlorosilane (TMCS), Trypsin, Human Serum Albumin (HSA), Ammonium Chloride, Urea, Hexane Methyldisilazane (HMDS), Methacryloyl Chloride (MC-TEMP), Styrénée (MC-TEMP), Styrénée (MC-TEMP) trile (ACN), Methanol, 2-Propanol, ary Acetone novidina tao amin'ny Sigma-Aldrich (St. Louis, MO, Etazonia).
Ny fifangaroan'ny urea (8 g), polyethylene glycol (8 g), ary 8 mL amin'ny asidra acetic 0,01 N dia nesorina nandritra ny 10 minitra, ary avy eo dia nampiana 24 mL TMOS tao anatin'ny toe-javatra mangatsiaka mangatsiaka. 70 ° C nandritra ny ora 12. Ny faobe malefaka maina dia nototoina tany anaty lafaoro ary nokapohina tamin'ny 550 ° C nandritra ny ora 12. Ny andiany telo dia nomanina ary natokana ho an'ny fandinihana ny reproducibility amin'ny haben'ny ampahany, ny haben'ny pore ary ny faritra ambonin'ny tany.
Amin'ny alàlan'ny fanovàna ireo singa silica miaraka amin'ny ligand phenylmaleimide-methylvinylisocyanate (PCMP) efa nomanina mialoha, arahin'ny polymerization radial miaraka amin'ny styrene, dia nomanina ny fitambarana misy vondrona polar.Ny dingana tsy tapaka ho an'ny aggregate sy rojo polystyrène. Ny dingana fanomanana dia voalaza etsy ambany.
N-phenylmaleimide (200 mg) sy methyl vinyl isocyanate (100 mg) dia levona tamin'ny toluene maina, ary 0.1 mL ny 2,2′-azoisobutyronitrile (AIBN) dia nampiana tao amin'ny tavoahangin'ny fanehoan-kevitra mba hanomanana phenylmaleimide-methyl vinyl isocyanate copolymer (PMC 6 ora) ao amin'ny filtre 0.1 ° C. 40°C mandritra ny 3 ora.
Ny poti-silika maina (2 g) dia niparitaka tamin'ny toluene maina (100 mL), nihetsiketsika ary natsofoka tao anaty tavoahangy 500 mL boribory ambany nandritra ny 10 min. PMCP (10 mg) dia levona tamin'ny toluene ary nampiana dropwise tao amin'ny tavoahangy fanehoan-kevitra tamin'ny alàlan'ny fantsom-pandrefesana. ora. Avy eo, ny singa silica mifatotra amin'ny PMCP (100 g) dia levona amin'ny toluene (200 ml) ary 4-hydroxy-TEMPO (2 mL) dia nampiana teo anatrehan'ny 100 µL dibutyltin dilaurate ho toy ny catalyst. Ny fifangaroana dia nesorina tamin'ny 50 ° C nandritra ny 8 ora, voasivana ary maina.
Styrene (1 mL), benzoyl peroxyde BPO (0.5 mL), ary ny TEMPO-PMCP-apetaka silica particles (1.5 g) dia niparitaka tao amin'ny toluene ary nodiovina tamin'ny azota.
Ny santionany dia nesorina tao amin'ny 393 K nandritra ny ora 1 mba hahazoana tsindry sisa tavela amin'ny latsaky ny 10-3 Torr.Ny habetsahan'ny N2 adsorbed amin'ny tsindry havana P / P0 = 0.99 dia nampiasaina mba hamaritana ny totalin'ny pore. ded silica particles) dia napetraka teo amin'ny tsanganana aluminium mampiasa kasety karbonika adhesive. Nopetahana volamena teo amin'ireo santionany tamin'ny alalan'ny Q150T sputter coater, ary ny sosona 5 nm Au dia napetraka teo amin'ny santionany. Izany dia manatsara ny fahombiazan'ny dingana amin'ny fampiasana voly ambany ary manome voa tsara, mangatsiaka mangatsiaka. Mastersizer 2000 poti habe analyser dia nampiasaina mba hahazoana ny sombiny haben'ny fizarana. Niboridana silika poti sy ligan-mifatotra silika poti (5 mg tsirairay) dia niparitaka tao amin'ny 5 mL ny isopropanol, sonicated ny 10 min, vortexed 5 min, ary napetraka teo amin'ny Optical dabilio ny Mastersizer.Thermogravimetric isan-karazany ny 0 minitra ny mari-pana dia natao tamin'ny isan-karazany 0 °C ny mari-pana ny Mastersizer.
Ny tsanganana vy tsy misy tafo vita amin'ny fitaratra misy refy (100 × 1.8 mm id) dia nofonosina tamin'ny alàlan'ny fomba famonosana slurry, nampihatra ny fomba fiasa mitovy amin'ny ref.31. Nisy tsanganana vy tsy misy pentina (voapetaka amin'ny fitaratra, 100 × 1.8 mm id) miaraka amin'ny fametahana fivoahana misy frit 1 µm dia mifandray amin'ny packer slurry (Alltech Deerfield, IL, USA). Omano slurry phase stationary amin'ny fampiatoana 150 mg ny phase stationary amin'ny 1.2 mL amin'ny tsanganana methanol ampiasaina. ary koa ny solvent propelling. Fenoy ny tsanganana amin'ny alàlan'ny fanerena 100 MP mandritra ny 10 minitra, 80 MP mandritra ny 15 minitra, ary 60 MP mandritra ny 30 minitra. Nandritra ny famonosana, ny vibration mekanika dia nampiharina tamin'ny tsanganana roa GC shakers (Alltech, Deerfield, IL, USA) mba hiantohana ny fameperana fanamiana amin'ny tsanganana. tsanganana avy amin'ny singa famonosana slurry ary mampifandray fitaovana hafa amin'ny fidirana sy ny rafitra LC mba hijerena ny fahombiazany.
Ny paompy LC (10AD Shimadzu, Japon), injector (Valco (Etazonia) C14 W.05) miaraka amin'ny 50nL tsindrona loop, degasser membrane (Shimadzu DGU-14A), varavarankely kapilara UV-VIS dia natsangana manokana µLC fitaovana detector (UV-2075) ary fitaratra-lined microcolumns fampitomboana ny microcolumns sy ny tsanganana fohy mampifandray ny microcolumns fanampiny. ter packaging, capillaries (50 μm id 365 sy reducing union capillaries (50 μm) dia napetraka tao amin'ny 1/16 ″ outlet of the reducing union. Ny fanangonana angona sy ny fanodinana chromatography dia natao tamin'ny alàlan'ny rindrambaiko Multichro 2000. Ny fanaraha-maso amin'ny 254 nm Analytes dia nosedraina ho an'ny data otrik'aretina O UV.
Albumin avy amin'ny serum olombelona, ​​vovoka lyophilized, ≥ 96% (electrophoresis gel agarose) 3 mg mifangaro amin'ny trypsin (1.5 mg), 4.0 M urea (1 mL), ary 0.2 M ammonium bikarbonate (1 mL) .Ny vahaolana dia nesorina nandritra ny 10 minitra ary tehirizina tao anaty rano fandroana amin'ny 67,1 ° C amin'ny 67,1 ° C. Atsaharo ny vahaolana ary tehirizo ao ambanin'ny 4 ° C.
Ny fisarahana ny fangaro peptide sy ny digest HSA trypsin dia nodinihina manokana tamin'ny tsanganana PMP. Jereo ny fisarahana ny fangaro peptide sy ny fandevonan'ny trypsin ny HSA amin'ny tsanganana PMP ary ampitahao amin'ny tsanganana Ascentis Express RP-Amide ny valiny.
Ny sary SEM amin'ny poti-silika miboridana sy ny singa silika mifamatotra ligand dia aseho amin'ny sary.2 .Ny sary SEM amin'ny poti-silika miboridana (A, B) dia mampiseho fa, mifanohitra amin'ny fandinihana nataontsika teo aloha, ireo poti-javatra ireo dia boribory izay mivelatra ny poti-javatra na manana symmetrika tsy ara-dalàna.
Fikarohana sary mikraoskaopy elektrônika misy poti-silika miboridana (A, B) sy singa silika mifamatotra ligand (C, D).
Ny fizarana haben'ny poti amin'ny poti-silica miboridana sy ny singa silika mifamatotra ligand dia aseho ao amin'ny Figure 3 (A) . amin'ny fandalinana nataontsika teo aloha miaraka amin'ny sandan'ny ad(0.5) amin'ny 3.05 μm (potika silika polystyrene-mifatotra) 34. Ity andiany ity dia nanana fizarana habe tery kokoa raha oharina amin'ny fandinihanay teo aloha noho ny fiovaovan'ny PEG, urea, TMOS, ary asidra acetika ao amin'ny fifangaroan'ny fanehoan-kevitra. Ny styrene dia nametraka sosona polystyrène (0.97 µm) teo amin'ny tontolon'ny silika, fa tamin'ny dingana PMP kosa dia 1.38 µm ny hatevin'ny sosona.
Fizarana ny haben'ny sombin-javatra (A) sy ny haben'ny mason-tsivana (B) ny singa silika miboridana sy ny singa silika mifamatotra ligand.
Ny haben'ny pore, ny haben'ny pore ary ny velaran'ny singa silica amin'ny fandalinana ankehitriny dia omena ao amin'ny tabilao 1 (B). simika fanovana, araka ny hita ao amin'ny Table 1 (B), ary ny fiovan'ny curve dia aseho amin'ny sary. 3 (B) .Toy izany koa, ny mason-tsivana boky ny silica poti nihena avy amin'ny 0,67 ny 0,58 cm3/g taorian'ny simika fanovana. B), ny faritra ambonin'ny (m2 / g) ny silika poti dia nihena ihany koa ny 116 m2/g ho 105 m2/g taorian'ny simika fanovana.
Ny valin'ny famakafakana singa momba ny dingana mijanona dia aseho ao amin'ny tabilao 2. Ny enta-mavesatra karbônina amin'izao fotoana izao dia 6.35%, izay ambany noho ny enta-mavesatry ny karbaona tamin'ny fandinihanay teo aloha (polystyrene bonded silica particles, 7.93% 35 ary 10.21%, tsirairay avy) 42. Ny entana karbônina amin'ny fiomanana amin'izao fotoana izao amin'ny fiomanana SP amin'izao fotoana izao dia ambany ny fiomanana amin'ny popherène amin'izao fotoana izao. nylmaleimide-methylvinylisocyanate (PCMP) sy 4-hydroxy-TEMPO dia nampiasaina. Ny lanjan'ny azota isan-jaton'ny dingana tsy mijanona amin'izao fotoana izao dia 2.21%, raha oharina amin'ny 0.1735 sy 0.85% amin'ny lanjan'ny azota amin'ny fianarana teo aloha. dia 2.7% sy 2.9%, raha toa ka 6.35% ny entana karbaona amin'ny vokatra farany (6), araka ny hita ao amin'ny tabilao 2. Ny fihenan'ny lanjany dia nozahana tamin'ny PMP stationary phase, ary ny TGA curve dia aseho ao amin'ny Figure 4. Ny TGA curve dia mampiseho ny fihenan'ny 8.6%, izay mifanaraka tsara amin'ny 6.6% amin'ny karbônina, ary ny N.35 ihany koa dia mifanaraka amin'ny fifanekena tsara amin'ny karbônina.
Ny ligan'ny phenylmaleimide-methylvinylisocyanate dia nofinidy ho an'ny fiovan'ny silika amin'ny ety ivelany satria manana vondrona phenylmaleimide polar sy vondrona vinylisocyanate izy. Vinyl isocyanate groupe dia afaka mihetsika bebe kokoa amin'ny styrene amin'ny alàlan'ny polymerization radical velona. Ety dia tsy misy fiampangana virtoaly amin'ny pH ara-dalàna. Ny polarity ny phase stationary dia azo fehezina amin'ny habetsahan'ny styrene tsara indrindra sy ny fotoana fanehoan-kevitra amin'ny polymerization radika maimaim-poana. voaomana miaraka amin'ny fifantohana samihafa amin'ny styrene dia manana enta-mavesatra karbônina samihafa.Averina indray, ampidiro ao anaty tsanganana vy tsy misy pentina ireo dingana tsy mitongilana ireo ary jereo ny fahombiazan'izy ireo amin'ny chromatographique (selectivity, resolution, N value, sns.).
Ny fangaro peptide dimy (Gly-Tyr, Gly-Leu-Tyr, Gly-Gly-Tyr-Arg, Tyr-Ile-Gly-Ser-Arg, leucine enkephalin) dia nodinihina ihany koa tamin'ny alàlan'ny tsanganana PMP tamin'ny fampiasana dingana finday;60/40 (v / v) acetonitrile / rano (0,1% TFA) amin'ny tahan'ny 80 μL / min. Amin'ny toe-javatra elution tsara indrindra, ny laharan'ny takelaka teorika (N) isaky ny tsanganana (100 × 1.8 mm id) dia 20.000 ± 100 (200.000) ho an'ny tsanganana T3 / m². grama dia aseho ao amin'ny Figure 5A. Fandinihana haingana amin'ny tsanganana PMP amin'ny hafainganam-pandeha avo (700 μL / min), dimy peptides no eluted ao anatin'ny iray minitra, N soatoavina dia tena tsara, 13,500 ± 330 isaky ny tsanganana (100 × 1,8 mm id), mifanaraka amin'ny 135,000 tsanganana Tsangatsangana / mB (Figure 1 / mB id). × 1.8 mm id) dia feno telo samy hafa ny PMP tsy tapaka dingana mba hanamarinana ny reproducibility.Ny analyte fifantohana ho an'ny tsanganana tsirairay dia voarakitra amin'ny fampiasana ny tsara indrindra elution fepetra sy ny isan'ny teorika takelaka N sy ny fotoana fitehirizana mba hanasarahana ny mitovy fitsapana fifangaroan'ny tsirairay tsanganana.
Ny fisarahana ny fangaro peptide amin'ny tsanganana PMP (B) sy ny tsanganana Ascentis Express RP-Amide (A);dingana finday 60/40 ACN/H2O (TFA 0,1%), refy tsanganana PMP (100 × 1,8 mm id);analytical Ny filaharan'ny elution ny fitambarana: 1 (Gly-Tyr), 2 (Gly-Leu-Tyr), 3 (Gly-Gly-Tyr-Arg), 4 (Tyr-Ile-Gly-Ser-Arg) ary 5 (leucine) asidra enkephalin)).
Ny tsanganana PMP (100 × 1.8 mm id) dia nanombantombana ny fisarahana ny fandevonan-kanina tryptic ny albumin serum olombelona amin'ny chromatography ranon-javatra avo lenta. Ny chromatogram amin'ny sary 6 dia mampiseho fa ny santionany dia misaraka tsara ary ny vahaolana dia tsara. aseho ao amin'ny chromatogram (sary 6), ny fandevonan-kanina HSA dia nizara ho tampon'isa 17 mifanitsy amin'ny peptides 17. Ny fahombiazan'ny fisarahana amin'ny tendrony tsirairay ao amin'ny digest HSA dia nokajiana ary nomena ny sanda ao amin'ny tabilao 5.
Ny digest tryptic HSA (100 × 1.8 mm id) dia nisaraka tamin'ny tsanganana PMP;tahan'ny fikorianan'ny rano (100 µL/min), dingana finday 60/40 acetonitrile/rano misy 0,1% TFA.
izay L ny halavan'ny tsanganana, η dia ny viscosity ny dingana finday, ΔP ny tsanganana indray tsindry, ary u ny linear hafainganam-pandeha ny dingana finday. Ny permeability ny PMP tsanganana dia 2.5 × 10-14 m2, ny tahan'ny mikoriana dia 25 μL / min, ary 60/40 v / v / v tsanganana PMP dia nampiasaina ny tsanganana PMP / v 1.8 mm permeability 2.5 × 10-14 m2. mitovy amin'ny an'ny fandinihanay teo aloha Ref.34.Ny permeability ny tsanganana feno poti-pores superficially dia: 1.7 × 10-15 ho an'ny 1.3 μm poti, 3.1 × 10-15 ho an'ny 1.7 μm poti, 5.2 × 10-15 ary 2.5 × 2μm poti ho an'ny 10-2.5 μm. refore, ny permeability ny PMP dingana dia mitovy amin'ny 5 μm fototra akorandriaka poti.
izay ny Wx dia ny lanjan'ny tsanganana feno chloroform, ny Wy ny lanjan'ny tsanganana feno methanol, ary ny ρ dia ny hakitroky ny solvent. Ny hatevin'ny methanol (ρ = 0.7866) sy ny chloroform (ρ = 1.484). s 31 izay nianarantsika teo aloha dia 0.63 sy 0.55, tsirairay avy. Midika izany fa ny fisian'ny ligin'ny urea dia mampihena ny permeability ny phase stationary. Amin'ny lafiny iray, ny porosity totalin'ny tsanganana PMP (100 × 1.8 mm id) dia 0.60. Ny permeability ny PMP amin'ny tsanganana C1 dia ambany noho ny tsanganana C1-8. Ny ligy C18 dia mifamatotra amin'ny singa silica ho toy ny rojo tsipika, raha amin'ny dingana tsy tapaka amin'ny polystyrene, dia miforona manodidina azy ny sosona polymère A somary matevina.
Ny sary 7A,B dia mampiseho ny tsanganana PMP (100 × 1.8 mm id) sy ny tsanganana Ascentis Express RP-Amide (100 × 1.8 mm id) amin'ny fampiasana ny fepetra elution mitovy (izany hoe 60/40 ACN/H2O sy 0.1% TFA).) an'ny tetika van Deemter.Ny fangaro peptide voafantina (Gly-Tyr, Gly-Leu-Tyr, Gly-Gly-Tyr-Arg, Tyr-Ile-Gly-Ser-Arg, Leucine Enkephalin) dia nomanina tamin'ny 20 µL / Ny tahan'ny fikorianan'ny ambany indrindra ho an'ny tsanganana roa dia 800 µL/min. dia tsanganana Express RP-Amide dia 2.6 µm sy 3.9 µm, tsirairay avy. Ny soatoavina HETP dia manondro fa ny fahombiazan'ny fisarahana amin'ny tsanganana PMP (100 × 1.8 mm id) dia tsara kokoa noho ny tsanganana Ascentis Express RP-Amide azo alaina (100 × 1.8 mm ny sandany amin'ny fikorianan'ny N. manan-danja raha oharina amin'ny fianarana teo aloha.Ny fahombiazan'ny fisarahana ambony kokoa amin'ny tsanganana PMP (100 × 1.8 mm id) raha oharina amin'ny tsanganana Ascentis Express RP-Amide dia mifototra amin'ny fanatsarana ny endriky ny ampahany, ny habeny ary ny fomba famonosana tsanganana sarotra ampiasaina amin'ny asa ankehitriny34.
(A) van Deemter plot (HETP versus mobile phase linear velocity) azo tamin'ny alàlan'ny tsanganana PMP (100 × 1.8 mm id) ao amin'ny 60/40 ACN/H2O miaraka amin'ny 0.1% TFA.(B) van Deemter plot (HETP versus mobile phase linear velocity) azo tamin'ny alàlan'ny Ascentis Express RP-Amide / 0.0 id tsanganana (10 mm × 1.6 mmH2). O amin'ny 0,1% TFA.
Ny dingan'ny polystyrene miorina amin'ny polar dia nomanina sy nodinihina mba hanasarahana ny fangaro peptide synthetic sy ny fandevonan'ny trypsin ny albumin serum olombelona (HAS) amin'ny chromatography ranon-javatra avo lenta. nthesis ny dingana mijanona, ary sarotra tsanganana packing.Ankoatra ny avo fisarahana fahombiazana, ambany tsanganana indray ny tsindry amin'ny avo mikoriana tahan'ny dia iray hafa tombony amin'ity stationary phase.PMP tsanganana mampiseho reproducibility tsara ary azo ampiasaina ho an'ny fanadihadiana ny peptide fangaro sy trypsin fandevonan-kanina ny proteinina isan-karazany.We mikasa ny hampiasa ity tsanganana ho fisarahana ny voajanahary vokatra, biomedical chromographie ho avy zava-maniry sy fungal PMP ho avy ao amin'ny tsanganana chromographie ho avy. ho tombanana amin'ny fisarahana ny proteinina sy ny antibody monoclonal.
Field, JK, Euerby, MR, Lau, J., Thøgersen, H. & Petersson, P. Fikarohana momba ny Rafitra fanasarahana Peptide amin'ny alàlan'ny Chromatography Phase Mivadika Fizarana I: Fampandrosoana Protocol momba ny Tsanganana.J.Chromatography.1603, 113–129.https://doi.org/10.1016/j.chroma.2019.05.038 (2019).
Gomez, B. et al. Ny peptides mavitrika nohatsaraina natao ho an'ny fitsaboana ny areti-mifindra.
Vlieghe, P., Lisowski, V., Martinez, J. & Khrestchatisky, M. Synthetic therapeutic peptides: science and the market.drug discovery.15 (1-2) androany, 40-56.https://doi.org/10.1016/j.drudis.2009.10.009).
Xie, F., Smith, RD & Shen, Y. Advanced Proteomic Liquid Chromatography.J.Chromatography.A 1261, 78–90 (2012).
Liu, W. et al. Advanced chromatography-mass spectrometry dia ahafahan'ny fampidirana ireo metabolomika sy proteomics kendrena betsaka.anus.Chim.Acta 1069, 89-97 (2019).
Chesnut, SM & Salisbury, JJ Ny anjara asan'ny UHPLC amin'ny fampivoarana zava-mahadomelina.J.Sep. Sci.30(8), 1183-1190 (2007).
Wu, N. & Clausen, AM Lafiny fototra sy azo ampiharina amin'ny krômatôgrafia ranon-tsavony ultrahigh ho an'ny fisarahana haingana.J.Sep. Sci.30(8), 1167-1182.https://doi.org/10.1002/jssc.200700026 (2007).
Wren, SA & Tchelitcheff, P. Fampiharana ny chromatography ranon-javatra avo indrindra amin'ny fampivoarana zava-mahadomelina.J.Chromatography.1119(1-2), 140-146.https://doi.org/10.1016/j.chroma.2006.02.052 (2006).
Gu, H. et al. Monolithic macroporous hydrogels nomanina avy amin'ny emulsions avo lenta ao anaty rano ho an'ny fanadiovana mahomby ny enteroviruses.Chemical.Britain.J.401, 126051 (2020).
Shi, Y., Xiang, R., Horváth, C. & Wilkins, JA Ny anjara asan'ny chromatography ranoka amin'ny proteomika.J.Chromatography.A 1053(1-2), 27-36 (2004).
Fekete, S., Veuthey, J.-L. & Guillarme, D. Fironana mipoitra amin'ny fisarahan'ny chromatography ranon-javatra mivadika amin'ny peptides sy proteinina fitsaboana: teoria sy fampiharana.J.Pharmacy.Biomedical Science.anus.69, 9-27 (2012).
Gilar, M., Olivova, P., Daly, AE & Gebler, JC Fisarahan'ny peptide roa-dimensional mampiasa rafitra RP-RP-HPLC mampiasa sanda pH samihafa amin'ny refy fisarahana voalohany sy faharoa.J.Sep. Sci.28(14), 1694-1703 (2005).
Feletti, S. et al. Ny toetran'ny famindrana faobe sy ny fahombiazan'ny kinetika amin'ny tsanganana chromatographie mahomby avo lenta feno C18 sub-2 μm feno poti-porous feno sy ambony dia nohadihadiana.J.Sep. Sci.43 (9-10), 1737-1745 (2020).
Piovesana, S. et al. Ny fironana vao haingana sy ny fanamby analytical amin'ny fitokana-monina, ny famantarana ary ny fanamarinana ny peptides bioactive zavamaniry.anus.biological anus.Chemical.410 (15), 3425-3444.https://doi.org/10.1007/s00216-0218-08-x.
Mueller, JB et al. Ny tontolon'ny proteomika ny fanjakan'ny fiainana.Nature 582(7813), 592-596.https://doi.org/10.1038/s41586-020-2402-x (2020).
DeLuca, C. et al.Ny fanodinana ny peptides fitsaboana amin'ny alàlan'ny chromatography ranon-javatra fanomanana. Molecule (Basel, Switzerland) 26 (15), 4688 (2021).
Yang, Y. & Geng, X. Krômatôgrafia mitambatra sy ny fampiharana azy amin'ny biopolymers.J.Chromatography.A 1218(49), 8813–8825 (2011).
Zhao, G., Dong, X.-Y. & Sun, Y. Ligands for mixed-mode protein chromatography: principe, characterization, and design.J.Biotechnology.144(1), 3-11 (2009).