Mauruuru koe mo te toro ki Nature.com.Ko te putanga pūtirotiro e whakamahia ana e koe he iti te tautoko CSS.Mo te wheako pai rawa atu, e taunaki ana matou me whakamahi koe i tetahi kaitirotiro kua whakahoutia (me monohia ranei te Aratau Hototahi ki Internet Explorer).I tenei wa, hei whakarite i te tautoko tonu, ka tukuna e matou te waahi kaore he momo me te JavaScript.
Ko te Angustifolius lupine (NLL, Lupinus angustifolius L.) he tipu remu e whakamahia ana mo te hanga kai me te whakapai i te oneone.Ko te toronga o te NLL ki te ao, he maha nga harore pathogenic, tae atu ki te lupine anthracnose, ka puta te mate anthracnose kino.E rua nga alleles, ko Lanr1 me AnMan, he nui ake te aukati, kua whakamahia i roto i te whakatipuranga NLL, engari kei te noho mohio nga tikanga ngota ngota.I roto i tenei rangahau, i whakamahia nga tohu Lanr1 me AnMan hei tirotiro i nga tauira NLL Pakeha.Ko te whakamatautau i te kano kano i roto i te taiao whakahaere i whakapumau i te kaha o nga kaikoha whakatete e rua.I mahia te tohu tohu ira rereke ki runga i nga raina whakaraerae me nga raina ngawari.Ko te parenga anthracnose i hono ki te whakahua nui o nga kupu ontology ira "GO: 0006952 Whakautu Tiaki", "GO: 0055114 Redox Process", me te "GO: 0015979 Photosynthesis".I tua atu, ko te raina Lanr1 (83A: 476) i whakaatu i te reprogramming transcriptome nui tere i muri i te werohanga, ko etahi atu rarangi i whakaatu i te roa o tenei whakautu mo te 42 haora.Ko nga urupare parepare e hono ana ki nga ira TIR-NBS, CC-NBS-LRR me NBS-LRR, 10 nga pūmua e uru ana ki te pathogenesis, nga pūmua whakawhiti lipid, te endoglucan-1,3-β-glucosidase, nga pūmua pakitara o te glycine-taonga, me nga ira mai i te ara urupare o te hāora.Ko nga whakautu moata ki te 83A:476, tae atu ki te aukati i nga ira e pa ana ki te whakaahua, i taurite ki te whakamarutanga angitu i te wa o te tipu tipu o te koiora harore, e kii ana ma te kaitao e whakaoho te mate mate.Ko te tauhohenga o Mandeloop kua puhoi, penei i te toia whakapae katoa.
Ko te lupine whaiti-rau (NLL, Lupinus angustifolius L.) he totokore pūmua teitei i ahu mai i te uru o te rohe Mediterranean1,2.I tenei wa ka whakatipuhia hei kai ma te kararehe me te tangata.Ka kiia hoki he hamuti kaakaariki i roto i nga punaha hurihanga hua na te whakatikatika hauota na te huakita whakatika hauota symbiotic me te whakapai katoa o te hanganga oneone.Kua tere te mahi a NLL ki te whakatipu whare i te rautau kua hipa, kei raro tonu i te pehanga whakatipuranga nui3,4,5,6,7,8,9,10,11,12.Na te whanuitanga o te maara NLL, na te riiwhitanga o nga harore pathogenic i whakawhanake i nga kohanga ahuwhenua hou, ka puta mai nga mate whakakino hua hou. Ko te mea tino whakamiharo mo nga kaiahuwhenua lupine me nga kaiahuwhenua ko te ahua o te anthracnose, na te harore pathogenic, Colletotrichum lupini (Bondar) Nirenberg, Feiler & Hagedorn13. Ko te mea tino whakamiharo mo nga kaiahuwhenua lupine me nga kaiahuwhenua ko te ahua o te anthracnose, na te harore pathogenic, Colletotrichum lupini (Bondar) Nirenberg, Feiler & Hagedorn13. Наиболее примечательным для фермеров и селекционеров люпина было появление антракноза, вызванного памогенеров люпина было появление антракноза, вызванного памогенринборного памогенбриконски , Feiler & Hagedorn13. Ko te mea tino rongonui ki nga kaiahuwhenua lupine me nga kaiahuwhenua ko te puta mai o te anthracnose na te harore pathogenic Colletotrichum lupini (Bondar) Nirenberg, Feiler & Hagedorn13.对于羽扇豆农民和饲养者来说，最引人注目的是炭疽病的出现，它是由病原真菌 Nilerbergidor (Feedern Boiler) Lunenbergi (Feeder Boi)引起的.对于羽扇豆农民和饲养者来说，最引人注目的是炭疽病的出现，它是由病原真菌lu。 Наиболее поразительным для фермеров и селекционеров люпина является появление антракноза, вызываемогебрикомто прикломтор Nirenberg, Feiler & Hagedorn13. Ko te mea tino miharo ki nga kaiahuwhenua me nga kaiahuwhenua lupine ko te putanga mai o te anthracnose na te harore pathogenic Colletotrichum lupini (Bondar) Nirenberg, Feiler & Hagedorn13.Ko nga korero tuatahi mo te mate i ahu mai i Brazil me te United States, me nga tohu angamaheni ka puta i te tau 1912 me te 1929.Heoi, i muri tata ki te 30 tau, ka tohua te tukumate ko Colletotrichum gloeosporioides (Penz.) Penz. & Sacc., teleomorph Glomerella cingulata (Stoneman) Spauld. & Sacc., teleomorph Glomerella cingulata (Stoneman) Spauld. & Sacc., телеоморф Glomerella cingulata (Stoneman) Spauld. & Sacc., teleomorph o Glomerella cingulata (Stoneman) Spauld. & Sacc.，有目的形态的Glomerella cingulata (Stoneman) Spauld。 & Sacc.，有目的形态的Glomerella cingulata (Stoneman) Spauld。 & Sacc., Glomerella cingulata (Stoneman) Spauld в Целенаправленной морфологии. & Sacc., Glomerella cingulata (Stoneman) Spauld i roto i te Morphology i Whakatauhia. & H. Schrenk,. & H. Schrenk,.me H. Schrenk. & H.施伦克，。 & H.施伦克，。me H. Schlenk, .Ko nga tohu tohu mate tuatahi i mahia i waenganui o te rau tau 20000 i whakaatu etahi atete i roto i nga whakaurunga NLL me te lupine kowhai (L. luteus L.), engari ko nga whakaurunga lupine ma (L. albus L.) i whakamatauria he tino whakaraerae15,16.Kua whakaatuhia e nga rangahau ko te whakawhanaketanga o te anthracnose e pa ana ki te piki ake o te rerenga (te hau hau) me te mahana (i roto i te awhe o te 12-28 ° C), e arai ana ki te takahi i te aukati i nga teitei teitei17, 18. Ko te tikanga, ko te wa e hiahiatia ana mo te conidia ki te tipu me te mate ki te timata , e wha nga wa poto ake i te 24 ° C i raro i te 12 haora i raro i nga haora 12 ° C.No reira, na te whakamahanatanga o te ao kua horapa te mate anthracnose.Heoi, i kitea te mate i Parani (1982) me Ukraine (1983) hei tohu mo te riri e tata mai ana, engari ko te ahua kaore i arohia e te umanga lupine i taua wa20,21.I etahi tau i muri mai, ka horapa tenei mate kino puta noa i te ao, ka pa hoki ki nga whenua whakaputa lupine nui penei i Ahitereiria, Poroni me Tiamana22,23,24.Whai muri i te pakarutanga o te anthracnose i waenganui o te tekau tau 1990, na te nui o nga tirotirohanga i kitea te maha o nga kaikoha atete i roto i nga tauira NLL19.Ko te parenga NLL ki te anthracnose e whakahaeretia ana e rua nga momo rereke rereke ka kitea i roto i nga puna germplasm rereke: Lanr1 i roto i te tipu Tanjil me Wonga me AnMan i roto i te maara.Mandalay 25, 26. Ko enei alleles e whakakii ana i nga tohu ngota e tautoko ana i te kowhiringa o te germplasm ātete ki nga kaupapa whakatipu25,26,27,28,29,30.Ko te raina whakatipu atete 83A:476 e mau ana i te Lanr1 allele i whiti ki te raina mohoao ngawari P27255 kia whiwhi ai i te taupori RIL e wehe ana mo te aukati anthracnose, na reira i taea ai te tautapa i te waahi Lanr1 ki te chromosome NLL-1131, 32, 33. Aligners from an flanthnose mapworking framework. i kitea te waahi o nga alleles e toru i runga i te chromosome kotahi (NLL-11), engari he rereke nga waahi29,34,35.Heoi, na te iti o nga RIL me te nui o te tawhitinga ira i waenga i nga tohu me nga alleles e rite ana, karekau he whakatau pono e taea te whakatau mo o raatau ira o raro.I tetahi atu taha, he uaua te whakamahi i nga ira whakamuri i roto i nga lupins na te iti rawa o te kaha ki te whakaora, na te mea he uaua te raweke ira37.
Ko te whakawhanaketanga o te germplasm kainga e mau ana i te allele e hiahiatia ana i roto i te ahua homozygous, penei i te 83A: 476 (Lanr1) me Mandelup (AnMan), kua whakatuwheratia te tatau ki te ako i te aukati anthracnose i mua i te aroaro o nga huinga whakahē o nga alleles i roto i nga taupori mohoao.Ka taea e nga tikanga ngota.Whakatauritehia nga whakautu parepare i hangaia e nga momo momo momo.I arotakehia e tenei rangahau te urupare moata o te NLL ki te werohanga C. lupini.Tuatahi, i tirotirohia he roopu germplasm NLL Pakeha kei roto nga rarangi 215 ma te whakamahi i nga tohu rapoi e tohu ana i nga alleles Lanr1 me AnMan.Ka mahia te tohu tohu Anthracnose i runga i nga rarangi 50 NLL, i tohua i mua mo nga tohu mole, i raro i nga tikanga whakahaere.I runga i enei whakamatautau, e wha nga rarangi rereke i te parenga anthracnose me te Lanr1/AnMan allelic titonga i whiriwhiria mo te whakamaarama ira ira whakamaarama rereke ma te whakamahi i nga huarahi taapiri e rua: te raupapa RNA teitei me te ine ine PCR i te waa.
Ko te tirotiro i te huinga o te NLL germplasm (N = 215) me nga tohu Lanr1 (Anseq3 me Anseq4) me AnMan (Anseq4) me AnMan (AnManM1) i whakaatu ko te rarangi kotahi anake (95726, tata ki Salamanca-b) e whakanui ana i te "whakatete" allele mo nga tohu katoa, i te mea ko "8 nga tohu katoa o nga tohu" i kitea i roto i nga tohu katoa. .5%) raina.Tekau ma toru nga rarangi i whakaputa e rua nga tohu "atete" o te tohu Lanr1, a e 8 nga rarangi i whakaputa i nga tohu "atete" o Lanr1.tohu.Ko te "atete" allele o te tohu AnMan (Taapiri Taapiri S1).E rua nga rarangi he heterozygous mo te tohu Anseq3 me tetahi heterozygous mo te tohu AnManM1.E 42 nga rarangi (19.5%) i kawe i nga wahanga rereke o te Anseq3 me te Anseq4 alleles, e tohu ana i te auau nui o te whakakotahitanga i waenga i enei waahi e rua.Ko nga ahuatanga o te Anthracnose i raro i nga tikanga e whakahaerehia ana (Taapiri Taapiri S2) i whakaatu i te rereketanga o te parenga o nga momo ira i whakamatauria, i kitea i roto i te kaha o te anthracnose.Ko nga rereketanga i roto i nga kaute toharite i puta mai i te 1.8 (he kaha te atete) ki te 6.9 (te whakaraerae) me nga rereketanga o te taumaha o te tipu mai i te 0.62 (te ngawari) ki te 4.45 g (te aukati). He hononga nui i waenga i nga uara i kitea i roto i nga tukurua e rua o te whakamatautau (0.51 mo nga tohu mate mate, P = 0.00017 me 0.61 mo te taimaha o te tipu, P <0.0001) tae atu ki waenganui i enei waahanga e rua (- 0.59 me - 0.77, P <0.000). He nui te hononga i waenga i nga uara i kitea i roto i nga tukurua e rua o te whakamatautau (0.51 mo nga tohu mate mate, P = 0.00017 me 0.61 mo te taumaha tipu, P <0.0001) tae atu ki waenganui i enei tawhā e rua (-0.59 me -0.70, P <0.77, P <0.77). Выявлена ​​достоверная корреляция между значениями, наблюдаемыми в двух повторностях эксперимента (0,51 для бля, 0,51 для бля 0017 и 0,61 для массы растения, P <0,0001), а также между этими двумя параметрами (-0,59 и -0,77, Р < 0,0001). I kitea he hononga nui i waenga i nga uara i kitea i roto i nga tukurua e rua o te whakamatautau (0.51 mo nga tohu mate kino, P = 0.00017 me te 0.61 mo te taumaha tipu, P <0.0001), tae atu ki waenganui i enei tawhā e rua (- 0.59 me -0.77, P <0.0001)在两次重复实验中观察到的值之间存在显着相关性（疾病严重程度评分0，P0.00，P0.量为0.61，P <0.0001）以及这两个参数之间（- 0.59 ki te 0.77，P <0.0001).在 两 次 重复 实验 中 观察 的 值 之间 存在 相关性 （疾病 严重 程度 了 了 了 了 1 了 了. ， p = 0.00017 ， 植物 为 为 0.61 ， p <0.0001） 以及 两 个 参数 之间 （（（（- 0.0001） 以及 两 个 参数 之间 （（（（- 0.59 . 9 和- 0.77，P <0.0001). Наблюдалась значительная корреляция между значениями, наблюдаемыми в двух повторностях (оценка тяжести ва, и 0 за 0, 5 P 0,0 0 сса растения 0,61, P <0,0001), и между этими двумя параметрами (-0,59 и -0,0001) 0,77, P <0,0001. He nui te hononga i waenga i nga uara kua kitea i roto i te taarua (te tohu taumahatanga o te mate 0.51, P = 0.00017 me te taumaha tipu 0.61, P <0.0001) me waenga i enei tawhā e rua (-0.59 me -0 .0001) 0.77, P<0.0001 ).Ko nga tohu angamaheni ka kitea i roto i nga tipu whakaraerae ko te kinking me te korikori o te kakau he rite ki te hanganga "kopere a te hepara", whai muri mai ko nga whara porotītaha me nga sporozoites karaka/mawhero (Taupiri Fig. 1).Ko nga whakaurunga o Ahitereiria e mau ana i nga ira Lanr1 (83A:476 me Tanjil) me AnMan (Mandelup) he tino whakaahuru, 0.0331 me te 0.0036).Ko etahi o nga raina e mau ana i nga "atete" Lanr1 me / ranei AnMan alleles e whakaatu ana i nga tohu o te mate.
He mea whakamiharo, he iti nga rarangi NLL kaore he tohu tohu "aukati" i whakaatu i te taumata teitei o te parenga anthracnose (he whakataurite, teitei ake ranei mo nga momo momo Lanr1, AnMan ranei), penei i te Boregine (P uara <0.0001 mo nga tawhā e rua), Bojar (P uara <0.0001 mo te kaute me te 0.001 mo te piro me te 0.001 mo te uara P9-b5) kaute me te kore-nui mo te taumaha). He mea whakamiharo, he iti nga rarangi NLL kaore he tohu tohu "aukati" i whakaatu i te taumata teitei o te parenga anthracnose (he whakataurite, teitei ake ranei mo nga momo momo Lanr1, AnMan ranei), penei i te Boregine (P uara <0.0001 mo nga tawhā e rua), Bojar (P uara <0.0001 mo te kaute me te 0.001 mo te piro me te 0.001 mo te uara P9-b5) kaute me te kore-nui mo te taumaha). Интересно, что несколько линий NLL, лишенных какого-либо «резистентного» маркерного аллеля, показали высокний констраного у (сопоставимый или более высокий, чем для генотипов Lanr1 или AnMan), таких как Boregine (значение P <0,0001 для обои обоие (х парад, 0, Boregine) оценки и 0,001 для массы растения) me популяции B-549/79b (значение P <0,0001 для оценки и незначимо для массы). He mea whakamiharo, he maha nga rarangi NLL kaore he tohu tohu 'aukati' i whakaatu i te taumata teitei o te parenga ki te anthracnose (whakaritea ki runga ake ranei mo nga momo momo Lanr1, AnMan ranei), penei i te Boregine (P uara <0.0001 mo nga tawhā e rua ), Bojar (P uara <0.0001 mo te aromatawai me te 0.0001 mo te taumaha o te tipu me te 0.0001 mo te taumaha o te tipu 0.0009b) mo te aromatawai me te kore nui mo te taumaha).有趣的是，一些缺乏任何“抗性”标记等位基因的NLL 系显示出高水平的炭疽病抗他们一一一么一一一型相当或更高），例如Boregine（两个参数的P 值< 0.0001）、Bojar（P 值<得分为0.0001，住礍物礍片B-549/79b（得分P ‼< 0.0001，重量不显着）。 He mea whakamiharo ko etahi o nga punaha NLL kaore he tohu "antigenic" e whakaatu ana i te aukati whakapae teitei (he rite ki nga ira Lanr1, AnMan ranei teitei ake ranei), penei i te Boregine (e rua nga tawhā P <0.0001), Bojar (P uara <0.0001, te taumaha tipu 0.001) me te riaka B-549/79b (P00). Интересно, что некоторые линии NLL, лишенные каких-либо маркерных аллелей «резистентности», показали высокие уостраности внимые или выше, чем у генотипов Lanr1 ranei AnMan), такие как Boregine (значение P для обоих параметров <0,0001), Bojar (значение P 0,001 P 0,001) популяция B-549/79b (оценка P-значение <0,0001, масса незначительна). He mea whakamiharo, ko etahi rarangi NLL kaore he tohu tohu 'arohe' i whakaatu i nga taumata teitei o te aukati anthracnose (he rite ki te teitei ake ranei o Lanr1, AnMan genotypes ranei), penei i te Boregine (P uara mo nga tawhā e rua <0.0001), Bojar (P-value <0.0001, te taumaha tipu 0.0001, te uara o te tipu 0.0001) me te 0.0001. taimaha kore nui).Ko tenei ahuatanga e whakaatu ana te ahua o te puna ira ira hou mo te aukati, e whakamarama ana i te kore o te hononga i waenga i nga momo tohu tohu me nga tohu tohu mate (nga uara P mai i ~0.42 ki ~0.98).No reira, i whakaatuhia e te whakamatautau Kolmogorov-Smirnov ko nga raraunga mo te aukati anthracnose i tohatoha noa mo nga kaute (P-values ​​​​0.25 me 0.11) me te papatipu tipu (P-values ​​0.47 me 0.55), e kii ana ahau he nui ake nga alleles i te Lanr1 me te AnMan.
I runga i nga hua o te tirotiro i te aukati anthracnose, e 4 nga rarangi i tohua mo te tātaritanga tuhinga: 83A: 476, Boregine, Mandelup, me te Taupori 22660. I whakamatauria ano enei rarangi mo te aukati anthrax i roto i nga whakamatautau inoculation na te raupapa RNA, mena he rite tonu ki te whakamatautau o mua.Ko nga uara kaute e whai ake nei: Boregin (1.71 ± 1.39), 83A: 476 (2.09 ± 1.38), Mandelup (3.82 ± 1.42) me te taupori 22660 (6.11 ± 1.29 ).
Ko te kawa Illumina NovaSeq 6000 i tutuki i te toharite o te 40.5 Mread takirua mo ia tauira (29.7 ki te 54.4 Mreads) (Ripanga taapiri S3).Ko nga tohu tirohanga i roto i te raupapa tohutoro mai i te 75.5% ki te 88.6%.Ko te honohononga toharite o nga raraunga tatau panui i waenga i nga momo whakamatautau i waenga i nga tauira koiora mai i te 0.812 ki te 0.997 (te tikanga 0.959). Mai i nga ira e 35,170 i tātarihia, 2917 karekau he korero, ko etahi atu ira e 4785 i whakaatuhia i te taumata iti (te tikanga o te turanga <5). Mai i nga ira e 35,170 i tātarihia, 2917 karekau he korero, ko etahi atu ira e 4785 i whakaatuhia i te taumata iti (te tikanga o te turanga <5). Из 35 170 проанализированных генов 2917 не проявляли экспрессии, а остальные 4785 генов экспресировались проявляли экспрессии, а остальные 4785 генов экспресиронвались на темел е среднее <5). O nga ira 35,170 i tātarihia, 2917 karekau he korero, a ko nga ira e 4785 e toe ana i whakaatuhia ki te taumata iti (te tikanga <5).在分析的35,170 个基因中，2917 个没有表达，其他4785 个基因的表达可以忽略可以忽略不城。35,170 Из 35 170 проанализированных генов 2917 не экспрессировались, а остальные 4785 генов имели незначительнсубюба значение <5). O nga ira e 35,170 i tātarihia, 2917 kaore i whakaatuhia, a, ko te toenga o nga ira e 4785 he iti noa te korero (te tikanga <5).No reira, ko te maha o nga ira i whakaarohia kua whakaatuhia (te tikanga o te turanga ≥ 5) i te wa o te whakamatautau ko 27,468 (78.1%) (Ripanga taapiri S4).
Mai i te wa tuatahi, ko nga rarangi NLL katoa i whakautu ki te werohanga o C. lupini (te riaka Col-08) na roto i te reprogramming i te transcriptome (Ripanga 1), heoi, he nui nga rereketanga i kitea i waenga i nga rarangi.Na, ko te raina aukati 83A: 476 (e mau ana i te ira Lanr1) i whakaatu i te reprogramming transcriptome nui i te wa tuatahi (6 hpi) me te pikinga 31-69-fold i roto i te maha o nga ira taratahi ki runga me raro-whakaritea ki etahi atu waahi i tenei wa.I tua atu, he wa poto tenei tihi, na te mea i tino rerekee te korero o etahi ira i te wa tuarua (12 hpi).Ko te mea whakamiharo, ko Boregine, i whakaatu hoki i te taumata teitei o te aukati i roto i te whakamatautau graft, kaore i uru ki te reprogramming whakamohoatanga nui i te wa o te whakamatautau.Heoi, he rite tonu te maha o nga ira rerekee (DEG) mo Boregine me te 83A:476 i te 12 HPI.Ko te Mandelup me te taupori 22660 i whakaatu i nga tihi DEG i te wa whakamutunga (48 l/s), e tohu ana i te roanga o nga whakautu tiaki.
No te mea ko te 83A: 476 i tukuna te reprogramming nui i roto i te whakautu ki a C. lupini i te 6 HPI i whakaritea ki era atu rarangi katoa, ~ 91% o nga DEG i kitea i tenei wa he whakapapa-motuhake (Fig. 1).Heoi ano, he inaki etahi o nga whakautu moata i waenga i nga rarangi ako, i te mea ko te 68.5%, 50.9%, me te 52.6% DEG i Boregine, Mandelup, me te taupori 22660, i inaki ki era i kitea i te 83A:476 i etahi waahi o te waa.Heoi, ko enei DEG he hautanga iti noa iho (0.97–1.70%) o nga DEG katoa i kitea i tenei wa ma te whakamahi i te 83A:476.I tua atu, 11 DEGs mai i nga raina katoa i noho tahi i tenei wa (Taupiri Taapiri S4-S6), tae atu ki nga waahanga noa o nga urupare tiaki tipu: te pūmua whakawhiti lipid (TanjilG_32225), te enzyme endoglucan-1,3-β-glucoside (TanjilG_23384), e rua nga poroteina ahotea-inducible penei i te SAM22 (TanjilG1_22) 32352), me nga pūmua taiepa pūtau hangahanga e rua (TanjilG_19701 me TanjilG_19702).He nui hoki te inaki i nga whakautu tuhi i waenga i te 83A:476 me Boregine i te 24 HPI (katoa 16-38% DEG) me waenganui i Mandelup me te Taupori 22660 i te 48 HPI (katoa 14-20% DEG).
Ko te hoahoa Venn e whakaatu ana i te maha o nga ira rerekee (DEG) i roto i nga raina lupine whaiti (NLL) kua werohia ki te Colletotrichum lupini (te riaka Col-08 i whiwhi mai i nga mara lupine i Wierzhenice, Poland, 1999).Ko nga rarangi NLL i wetewetehia ko: 83A:476 (atete, e mau ana i te Lanr1 allele), Boregine (atete, te papamuri ira e kore e mohiotia), Mandelup (he kaha te atete, e mau ana i te AnMan allele) me te taupori 22660 (tino whakaraerae).Ko te whakapotonga hpi e tu ana mo nga haora i muri i te werohanga.Kua tangohia nga uara kore hei whakangawari i te kauwhata.
I tātarihia te huinga o nga ira ira i te 6 hpi mo te aroaro o nga rohe ira ira R canonical (Ripanga taapiri S7).I whakaatuhia e tenei rangahau te whakaurunga o nga ira aukati mate matarohia me nga rohe NBS-LRR anake i te 83A: 476.Ko tenei huinga he ira TIR-NBS-LRR kotahi (tanjilg_05042), e rima nga ira CC-NBS-LRR (tanjilg_06165, tanjilg_06162, tanjilg_22773, tanjilg_22640, me te tanjilg_16162), me te Four NBS-LR6, Tanjilg2, me te Four NBS-LR6, Tanjilg2, me te Four NBS-LR6, Tanjilg2. ) me te Wha NBS-Lrr (tanjilg_16162) me te Wha NBS-LRR (TANJILG_16162).Katoa o enei ira he rohe kakano kua whakaritea i roto i nga raupapa kua tiakina.I tua atu i nga ira rohe NBS-LRR, he maha nga RLL kinases i whakahohehia i te 6 hpi, ara kotahi i Boregine (TanjilG_19877), e rua i Mandelup (TanjilG_07141 me TanjilG_19877) me te taupori 22660 (TanjilG_09014 me TanjilG14) me te rua 723 i roto i te 68877.
Ko nga ira me nga korero tino rerekee i roto i te urupare ki te inoculation ki te C. lupini (te riaka Col-08) i tukuna ki te Gene Ontology (GO) tātaritanga whakarangatira (Taupiri S8). Ko te kupu tukanga koiora i tino whakahuahia ko te "GO: 0006952 whakautu tiaki" i puta i roto i te 6 i roto i te 16 (wa × raina) nga huinga me te nui o te hiranga (P uara <0.001) (Fig. 2). Ko te kupu tukanga koiora i tino whakahuahia ko te "GO: 0006952 whakautu tiaki" i puta i roto i te 6 i roto i te 16 (wa × raina) nga huinga me te nui o te hiranga (P uara <0.001) (Fig. 2). Наиболее часто чрезмерно представленным термином биологического процесса был «GO: 0006952 защитный отвитный отверт» 16 (время × линия) комбинаций с высокой значимостью (значение P <0,001) (рис. 2). Ko te kupu tukanga koiora i te nuinga o te wa ko te 'GO: 0006952 whakautu tiaki', i puta i roto i te 6 o te 16 (wa × whakapapa) nga huinga me te hiranga nui (P uara <0.001) (Fig. 2).最常被过度代表的生物过程术语是“GO:0006952 防御反应”，它出现在16 个（时间（时间）中一一一一一一一一一一一上具有高显着性（P 值< 0.001）（图2）。 Ko te kupu tukanga koiora e tino tohu ana ko “GO:0006952 whakautu parepare”, ka puta i roto i te 6 o nga huinga 16 (时间×线), he nui te hiranga (P uara <0.001) (图2). Наиболее часто чрезмерно представленным термином биологического процесса был «GO: 0006952 Defence Response», котовил 6 циля ий (время × линия) с высокой значимостью (значение P <0,001) (рис. 2). Ko 'GO:0006952 Defence Response' ko te kupu tukanga koiora e kaha ake ana, i puta i roto i te 6 o nga huinga 16 (waa × raina) me te hiranga nui (P uara <0.001) (Fig. 2).E rua nga wa i whakaatuhia tenei kupu i te 83A: 476 me Boregine (6 me 24 hpi) me tetahi wa i Mandelup me te Taupori 22660 (12 me te 6 hpi, ia).He hua tenei e tumanakohia ana, e whakaatu ana i te whakautu antifungal o nga raina aukati.I tua atu, i whakautu a 83A: 476 ki a C. lupini na roto i te tere o te whakauru i nga ira e pa ana ki te pakaru o te oxidative e tohuhia ana e te kupu "GO: 0055114 redox process", e tohu ana i te whakautu whakamarumaru motuhake, i te wa i whakaatu a Boregine i nga whakautu whakamarumaru motuhake, e pa ana ki te kupu 'GO'.:0006950 Te whakautu taumaha”.Ko te taupori 22660 i whakahohe i te whakautu whakapae whakapae e uru ana ki nga metabolites tuarua, e whakaatu ana i te maha o nga kupu "GO: 0016104 Tukanga o te biosynthesis triterpene" me te "GO: 0006722 Tukanga o te triterpene metabolism" (e rua nga kupu no te huinga o nga ira kotahi), me te whakaaro ki nga hua o te tauhohenga o te GO: 0016104 Ko te tauhohenga a Bondelup2 i waenga i te GO: 0006722. i tua atu, ko te tauhohenga moata 83A:476 (6 hpi) me te hohenga whakaroa Mandelup me te Taupori 22660 kei roto ko te kupu GO:0015979 'whakaahuatanga' me etahi atu tukanga koiora e pa ana.
Ko nga kupu ira ontology bioprocess i tohua i roto i te tuhipoka o nga ira rerekee i te wa o nga whakautu whakawhiti o te lupine kuiti (NLL) kua werohia ki te anthrax lupine (Col-08 riaka i whiwhi mai i nga mara lupine i Wierzhenice, Poland, i te tau 1999).Ko nga rarangi NLL i wetewetehia ko: 83A:476 (he atete, he kawe i te homozygous Lanr1 allele), Boregine (he atete, he papamuri ira e kore e mohiotia), Mandelup (he kaha te atete, he kawe i te homozygous AnMan allele) me te taupori 22660 (he ngawari).
I te mea ko tenei rangahau i whai ki te tautuhi i nga ira e whai waahi ana ki te aukati anthracnose, ko nga ira kua tohua ki nga kupu GO "GO: 0006952 Whakautu parepare" me te "GO: 0055114 Redox tukanga" i tātarihia me te tapahi i te mea ko te tikanga ≥ 30 me te iti rawa o te raina kotahi.× tohu i roto i te wa e whakakotahi ana i nga uara tauanga nui o te roko2 (whakarereketanga).Ko te maha o nga ira e tutuki ana i enei paearu ko te 65 mo GO:0006952 me te 524 mo GO:0055114.
83A:476 i whakaatu mai e rua nga tihi DEG kua tohuhia ki te kupu GO:0006952, ko te tuatahi ki te 6 ira mo ia inihi (64 nga ira, whakarunga me te whakararo ture) me te tuarua ki te 24 nga ira mo ia inihi (15 nga ira, ake ture anake).I whakaatu ano a Boregine ko GO:0006952 i eke ki runga i te wa kotahi, engari he iti ake te DEG (11 me te 8) me te whakahohenga hiahia.I whakaatuhia e Mandeloop nga tihi e rua o GO: 0006952 i te 12 me te 48 HPI, e rua e mau ana i nga ira 12 (ko te tuatahi me nga ira whakahohe, me te tuarua me nga ira aukati anake), i te mea ko te taupori 22660 i te 6 HPI (13 ira) he nui ake te mana o te piki piki.whakaritenga.Me tohu ko te 96.4% o GO: 0006952 DEG i roto i enei tihi he rite tonu te momo whakautu (ki runga, ki raro ranei), e tohu ana he nui te inaki i roto i nga whakautu whakamarumaru ahakoa nga rereketanga o te maha o nga ira e uru ana.Ko te roopu nui rawa atu o nga raupapa e pa ana ki te kupu GO:0006952 e whakawaehere ana i te Starvation Stress-Associated Message Protein 22 (SAM22-rite), no te akomanga 10 pathogenesis-associated protein (PR-10) clade pūmua me te latex pūmua matua.rite (MLP-rite) pūmua) pūmua (Fig. 3).He rereke nga roopu e rua i te ahua o te korero me te ahunga o te whakautu.Ko nga ira e whakawae ana i nga pūmua rite ki te SAM22 i whakaatu rite tonu me te nui o te whakaurunga i nga wa moata (6, 12 hpi ranei) me te kore urupare i te mutunga o te whakamatautau (48 hpi), i te wa i whakaatu nga pūmua rite MLP i te ruruku i te 6 hpi.hpi.83A:476 me Mandelup i te 48 hp/in, tata katoa nga tohu raraunga kaore i aro.I tua atu, ko nga rereketanga o nga korero korero o nga ira pūmua rite SAM22 i whai i te rerekeetanga o te parenga anthracnose, i te mea he maha ake nga rarangi aatete he nui ake nga wa e whakaawe ana i enei ira i nga ira ngawari ake.Ko tetahi atu ira LlR18A/B-rite PR-10 i whakaatu he ahua tino rite ki te ira pūmua rite SAM22.
Ko nga waahanga matua o te kupu tukanga koiora "GO: 0006952 Whakautu Tiaki" me nga tauira whakahuatanga o nga ira kaitono o te Lanr1 me AnMan alleles i tautuhia.Ko te tauine Log2 e tohu ana i nga uara o te log2 (whakarereketanga) i waenga i te werohanga (Colletotrichum lupini, riaka Col-08, i riro mai i nga mara lupine, Wizhenica, Poland, 1999) me te whakahaere (sham-inoculated) tipu i te wa ano.Ko nga raina lupine narrowleaf e whai ake nei i tātarihia: 83A:476 (he atete, e mau ana i te homozygous Lanr1 allele), Boregine (atete, te papamuri ira e kore e mohiotia), Mandelup (he kaha te atete, e mau ana i te homozygous AnMan allele), me te Taupori 22660 (he ngawari).
I tua atu, ko nga korero korero o nga ira kaitono RNA-seq Lanr1 (TanjilG_05042) me AnMan (TanjilG_12861) i aromatawaihia (Fig. 3).Ko te ira TanjilG_05042 i whakaatu i te whakautu nui (whakahohenga) i te 83A: 476 anake i te waahi tuatahi (6 hpi), i te mea he mea nui a TanjilG_12861 i Mandeloop i nga wa e rua anake: 6 hpi (whakature raro) me te 24 hpi (6 hpi).Me.).taea te whakarite)).
Ko nga ira tino kaha ake i roto i te kupu GO: 0055114 "te tukanga redox" ko nga ira e whakawae ana i nga pūmua cytochrome P450 me te peroxidase (Fig. 4).Mo nga tauira kua wehea mai i te 83A: 476 i te 6 HPI, ko nga uara morahi me te iti rawa o te log2 (whakarereketanga) (mo te 86.6% o nga ira) i kitea i waenga i nga tipu kua werohia me nga tipu whakahaere, e whakaatu ana i te whakautu nui o tenei momo momo ki te whakaraerae ira.83A: 476 i whakaatu te GO tino nui: 0055114 DEG i te 6 hpi (503 ira), ko te toenga o nga raina i te 48 hpi (Boregine, 31 ira; Mandelup, 85 ira; me te Taupori 22660, 78 ira)).I te nuinga o nga ira o te whanau GO:0055114, e rua nga momo urupare ki te werohanga (whakahohenga me te aukati) i kitea.He mea whakamiharo, tae atu ki te 97.6% o nga DEG i tautuhia mo te kupu GO: 0055114 i Mandelupe i te 48 hp Ko enei tirohanga e whakaatu ana, ahakoa te iti rawa o te tauine (arā, te maha o nga ira redox mutated, 85 ki te 503), he rite te tauira o te whakaroa o nga whakautu whakawhiti o te mandeloup4.3 ki te whakautu wawe4.I roto i te Boregine me te Taupori 22660, he iti ake tenei hononga ki te 51.6% me te 75.6%, ia.
Ko nga tauira o te whakapuaki i nga waahanga matua o te wa o te tukanga koiora "GO: 0055114 Redox process" i whakaatuhia.Ko te tauine Log2 e tohu ana i nga uara o te log2 (whakarereketanga) i waenga i te werohanga (Colletotrichum lupini, riaka Col-08, i riro mai i nga mara lupine, Wizhenica, Poland, 1999) me te whakahaere (sham-inoculated) tipu i te wa ano.Ko nga raina lupine narrowleaf e whai ake nei i tātarihia: 83A:476 (he atete, e mau ana i te homozygous Lanr1 allele), Boregine (atete, te papamuri ira e kore e mohiotia), Mandelup (he kaha te atete, e mau ana i te homozygous AnMan allele), me te Taupori 22660 (he ngawari).
83A:476 Ko nga whakautu whakawhiti ki te inoculation ki te C. lupini (te riaka Col-08) i uru atu ano ki te whakangau ruruku o nga ira e kiia ana ki te kupu GO:0015979 "whakaahua" me etahi atu tukanga koiora e pa ana (FIG. 5).Ko tenei huinga GO:0015979 DEG he 105 nga ira i tino pehia i te 6 hpi i te 83A:476.I roto i tenei waahanga, 37 nga ira i whakahekehia i Mandelup i te 48 HPI me te 35 i te wa kotahi i roto i te taupori 22660, tae atu ki te 19 DEGs noa ki nga momo momo e rua.Karekau he DEG e pa ana ki te kupu GO: 0015979 i tino whakahohehia i roto i tetahi huinga (raina x wa).
Ko nga tauira korero o nga waahanga matua o te wa o te tukanga koiora "GO: 0015979 Photosynthesis" i whakaatuhia.Ko te tauine Log2 e tohu ana i nga uara o te log2 (whakarereketanga) i waenga i te werohanga (Colletotrichum lupini, riaka Col-08, i riro mai i nga mara lupine, Wizhenica, Poland, 1999) me te whakahaere (sham-inoculated) tipu i te wa ano.Ko nga raina lupine narrowleaf e whai ake nei i tātarihia: 83A:476 (he atete, e mau ana i te homozygous Lanr1 allele), Boregine (atete, te papamuri ira e kore e mohiotia), Mandelup (he kaha te atete, e mau ana i te homozygous AnMan allele), me te Taupori 22660 (he ngawari).
I runga i nga hua o te wetewete korero rerekee me te mea kua uru ki nga urupare whakamarumaru ki nga harore pathogenic, i kowhiria tenei huinga o nga ira e whitu mo te inenga o nga korero korero ma te PCR-wa-tui (Ripanga Taapiri S9).
Ko te ira pūmua putative TanjilG_10657 i tino whakaawehia i roto i nga rarangi ako katoa me nga waahi o te waa i whakaritea ki te whakahaere (whakarite) tipu (Taupiri Taapiri S10, S11).I tua atu, ko te whakaaturanga korero o TanjilG_10657 i whakaatu i te piki haere i roto i te waa o te whakamatautau mo nga raina katoa.Ko te taupori 22660 i whakaatu i te tino aro nui o TanjilG_10657 ki te inoculation me te 114-fold activation me te taumata korero whanaungatanga teitei (4.4 ± 0.4) i te 24 HPI (Fig. 6a).Ko te ira pūmua PR10 LlR18A TanjilG_27015 i whakaatu hoki i te whakahohenga puta noa i nga rarangi katoa me nga waahi wa, me te hiranga tatauranga i te nuinga o nga tohu raraunga (Fig. 6b).He rite ki a TanjilG_10657, ko te taumata korero whanaungatanga teitei o TanjilG_27015 i kitea i roto i te 22660 taupori kua werohia i te 24 HPI (19.5 ± 2.4).Ko te ira endochitinase waikawa TanjilG_04706 i tino whakatikatika i nga rarangi katoa me nga waahi katoa engari mo te Boregine 6 hpi (Fig. 6c).I kaha te akiaki i te wa tuatahi (6 HPI) i te 83A:476 (ma te 10.5 nga wa) me te piki haere i etahi atu rarangi (ma te 6.6-7.5 nga wa).I te wa o te whakamatautau, i noho tonu te korero a TanjilG_04706 i nga taumata rite i roto i te 83A: 476 me Boregine, i te Mandelup me te Taupori 22660 ka tino piki ake, ka eke ki nga uara teitei (5.9 ± 1.5 me 6.2 ± 1.5, ia).Ko te ira endoglucan-1,3-β-glucosidase-like TanjilG_23384 i whakaatu i te whakahoahohe nui i nga waahi tuatahi e rua (6 me te 12 hpi) i nga rarangi katoa engari ko te taupori 22660 (Fig. 6d).Ko nga taumata korero whanaungatanga teitei o TanjilG_23384 i kitea i te wa tuarua (12 hpi) i Mandelup (2.7 ± 0.3) me te 83A: 476 (1.5 ± 0.1).I te 24 HPI, he iti noa te korero a TanjilG_23384 i nga rarangi ako katoa (mai i te 0.04 ± 0.009 ki te 0.44 ± 0.12).
Ko nga whakaaturanga korero o nga ira kua tohua (ag) ka whakaatuhia e te PCR ine.Ko nga nama 6, 12 me te 24 e tohu ana i nga haora i muri i te werohanga.I whakamahia nga ira LanDExH7 me LanTUB6 mo te whakatikatika me te LanTUB6 i whakamahia mo te whakatikatika i waenga-raupapa.Ko nga pae hapa e tohu ana i te rerekee paerewa i runga i nga tauira koiora e toru, ko ia te toharite o nga tauira hangarau e toru. Ko te hiranga tatauranga o nga rereketanga i roto i nga taumata korero i waenga i te werohanga (Colletotrichum lupini, strain Col-08, i whiwhi i te 1999 mai i te mara lupine i Wierzenica, Poland) me te mana whakahaere (whakawai-inoculated) kua tohua i runga ake i nga tohu raraunga (* P uara <0.05, ** P uara ≤ 0.01, *** P 0.01, *** P 0.01). Ko te hiranga tatauranga o nga rereketanga i roto i nga taumata korero i waenga i te werohanga (Colletotrichum lupini, strain Col-08, i whiwhi i te 1999 mai i te mara lupine i Wierzenica, Poland) me te mana whakahaere (whakawai-inoculated) kua tohua i runga ake i nga tohu raraunga (* P uara <0.05, ** P uara ≤ 0.01, *** P 0.01, *** P 0.01). Статистическая значимость различий в уровнях экспрессии между инокулированными (Colletotrichum lupini, штамм Col-08, получен в г.999 г. женице, Польша) и контрольными (ложно инокулированными) растениями отмечена над точками данных (*значение P, **, значение P, **, значение P < 0,005 P. P ≤ 0,001). Ko nga rereketanga nui o te tatauranga i roto i nga taumata korero i waenga i te werohanga (Colletotrichum lupini, riaka Col-08, i riro mai i te 1999 mai i te mara lupine i Wierzhenice, Poland) me nga tipu whakahaere (sham-inoculated) kei runga ake i nga tohu raraunga (*P uara <0.05, **P-uara ≤ 0.01, ≤ 0.01, ***P-0).接种（Colletotrichum lupini，Col-08株，1999年从波兰Wierzenica的羽扇豆田获得）和对照（模拟接种義耶和差异的统计学显着性标记在数据点上方（*P值< 0.05, **P ≤ 0.01, ***P ≤ 0.001).接种 （colletotrichum lupini ， color-08 株 ， 1999 年 波兰 波兰 wierzenica 的 羽扇 获得） 和 对照 （接秉 （接秉差异 的 统计学 显着性 标记 数据点 上方*p 值 <0.05, **P ≤ 0.01, ***P ≤ 0.001). Статистически значимые различия в уровнях экспрессии между инокулированными (Colletotrichum lupini, штамм Col-08, полученплий спо, полученпина спол. Польша, в 1999 г.) и контрольными (ложно инокулированными) растениями отмечены над точками данных (* з, ч-0,0ние данных (* з, ч-0,ние х5 ***P-значение ≤ 0,001). Ko nga rereketanga nui o te tatauranga i roto i nga taumata korero i waenga i te werohanga (Colletotrichum lupini, riaka Col-08, i riro mai i nga mara lupine i Verzhenice, Poland, i te tau 1999) me nga tipu whakahaere (sham-inoculated) kei runga ake i nga tohu raraunga (*P uara <0.05 , **P-value ≤ 0.01, ≤0-1).Ko nga rarangi NLL i tātarihia ko: 83A: 476 (atete, e mau ana i te homozygous Lanr1 allele), Mandelup (ahua whakaahuru, e mau ana i te homozygous AnMan allele), Boregine (atete, te papamuri ira e kore e mohiotia) me te taupori 22660 (whakaraerae).
Ko te ira kaitono a TanjilG_05042 i te waahi o Lanr1 i whakaatu he ahua rereke rereke mai i nga korero i puta mai i nga rangahau RNA-seq (Fig. 6e).I kitea te nui o te whakahohenga o tenei ira i Mandelup me te taupori 22660 (tae atu ki te 39.7 me te 11.7 nga wa, ka puta mai he ahua teitei o nga taumata korero (tae atu ki te 1.4 ± 0.14 me te 7.2 ± 1.3, ia).83A: 476 i whakaatu ano hoki i etahi whakatikatika o te ira TanjilG_05042 (tae atu ki te 3.8-fold), heoi, ko nga taumata whakahuatanga whanaungatanga i tutuki (0.044 ± 0.002) he neke atu i te 30-tiki te iti ake i era i kitea i Mandelup me te taupori 22660.i tātarihia e te qPCR i whakaatu i nga rereketanga nui i roto i nga taumata korero i waenga i nga momo momo ira i roto i nga momo kano kano (whakahaere), tae atu ki te rereketanga 58 i waenga i nga taupori 22660 me te 83A: 476, tae atu ki nga taupori 22660 me 22660. I tutuki te rereketanga e rua i waenga i a Boregine me Mandalup.
Ko te ira kaitono i te waahi o AnMan, TanjilG_12861, i whakahohehia hei whakautu ki te werohanga i te 83A: 476 me Mandelup, he koretake i roto i te taupori 22660, ka whakahekehia i Boregine (Fig. 6f).Ko te korero whanaunga o te ira TanjilG_12861 te mea teitei rawa atu i te 83A kua werohia: 476 (0.14±0.01).Ko te karaehe 17.4 kDa I te ira pūmua wiri werawera TanjilG_05080 HSP17.4 i whakaatu i te iti iho o nga taumata whakahuatanga whanaungatanga i roto i nga reanga katoa me nga wa i akohia (Fig. 6g).Ko te uara teitei i kitea i te 24 HPI i te taupori 22660 (0.14 ± 0.02, he pikinga e waru nga wa i te whakautu ki te werohanga).
Ko te whakatairitetanga o nga whakaaturanga korero ira (Fig. 7) i kitea he hononga nui i waenga i a TanjilG_10657 me etahi atu ira e wha: TanjilG_27015 (r = 0.89), TanjilG_05080 (r = 0.85), TanjilG_05042 (r = 0.80), me TanjilG6_9 (R = 0.80).Ko enei hua ka tohu pea i te whakahaere-tahi o enei ira i te wa e whakautu ana te parepare.Ko nga ira o TanjilG_12861 me TanjilG_23384 i whakaatu i nga korero korero rereke me te iti ake o nga uara o te whakarea whakareatanga o Pearson (mai i te 0.08 ki te 0.43 me te -0.19 ki te 0.28) ka whakaritea ki etahi atu ira.
I kitea nga hononga i waenga i nga whakaaturanga korero ira ma te whakamahi i te PCR ine.Ko nga raina lupine narrowleaf e whai ake nei i tātarihia: 83A:476 (he ātete, he kawe i te homozygous Lanr1 allele), Mandelup (he kaha te aukati, he kawe i te homozygous AnMan allele), Boregine (he ātete, he papamuri ira e kore e mohiotia), me te Taupori 22660 (he ngawari).E toru nga wa i tatauhia (6, 12 me te 24 haora i muri i te werohanga), tae atu ki te werohanga (Colletotrichum lupini, riaka Col-08, i riro mai i nga mara lupine i Wierzhenice, Poland, i te tau 1999) me te whakahaere (sham-inoculated) tipu.Ko te tauine e whakaatu ana i te uara o te tauritenga o Pearson.
I runga i nga raraunga i riro mai i te 6 horsepower mo ia inihi, i mahia te WGCNA i runga i te 9981 DEG i tautuhia ma te whakataurite i nga tipu kua werohia me te whakahaere ki te aro ki nga urupare whakamarumaru moata (Ripanga Tāpiri S12).E rua tekau ma rua nga momo ira (nga kapopuu) i kitea me nga korero korero (he pai, he kino ranei) i waenga i nga momo momo ira me nga momo momo whakamatautau. I te toharite, kei te heke haere nga taumata whakaputanga ira i runga i te raupapa 83A:476 > Mandelup > Boregine > Taupori 22660 (i nga momo rereke e rua, engari he kaha ake tenei ahuatanga i roto i nga tipu whakahaere). I te toharite, kei te heke haere nga taumata whakaputanga ira i runga i te raupapa 83A:476 > Mandelup > Boregine > Taupori 22660 (i nga momo rereke e rua, engari he kaha ake tenei ahuatanga i roto i nga tipu whakahaere). В среднем уровни экспрессии генов снижались в порядке 83A:476 > Mandelup > Boregine > Population 22660 (i roto i te в обоих вариантах, обнтакое, бальность контрольных растений). I te toharite, ka heke nga taumata whakaputanga ira i roto i te raupapa 83A:476 > Mandelup > Boregine > Taupori 22660 (i roto i nga momo rereke e rua, engari, he kaha ake tenei ahuatanga ki nga tipu whakahaere).平均而言，基因表达水平按83A:476 > Mandelup > Boregine > Taupori 22660 的顺序下降（然而，在两种变作在两种变住照植物中更强）。平均 而 言 ， 基因 水平 按 按 83a: 476> mandelup> boregine> taupori 22660 的 顺序 下降 （， 在 种 中 在 种 中中 更） . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . В среднем уровни экспрессии генов снижались в ряду 83A:476 > Mandelup > Boregine > Taupori 22660 рольных растений). I te toharite, i heke nga taumata whakaputa ira i roto i te raupapa 83A:476 > Mandelup > Boregine > Taupori 22660 (engari, i nga momo rereke e rua, he kaha ake tenei ahuatanga i roto i nga tipu whakahaere).Ko te kano kano i hua ake ai te whakatikatika o te whakaputanga ira, ina koa i roto i nga waahanga 18, 19, 14, 6 me 1 (i roto i te raupapa hekenga o te paanga), nga ture kino (hei tauira, nga waahanga 9 me te 20) me nga paanga koretake ranei (hei tauira 11, 22, 8 me 13).Te tātaritanga huanga mo te wahanga (Tāpiri Tāpiri S13) "Haere: Tauira (9).Ko te kaiwhakatairanga 18 (Fig. 8) i tohuhia ko te TanjilG_26536 te ira e whakawaehere ana i te PR-10-rite LlR18B pūmua, a ko te 9 concentrator i tohua ko te TanjilG_28955 te ira e whakawaehere ana i te punaha whakaahua II PsbQ pūmua.I kitea he ira aukati anthracnose kaitono Lanr1, TanjilG_05042, i roto i te kōwae 22 (Fig. 9) me te hono ki nga kupu "GO: 0044260 Cellular macromolecular metabolic process" me "GO: 0006355 Transcriptional regulation, DNA templating" e mau ana i te TanjilG_01212 hub.ka whakawaeheretia e te ira te tauwehe whakawhiti ahotea wera A-4a (HSFA4a).
Te wetewete whatunga taumaha o te whakapuaki-a-ira-a-ira o nga waahanga me nga kupu tukanga koiora kua tino whakaahuahia "GO: 0006952 Nga whakautu Tiaki".I whakangwarihia te hononga ki te whakaatu i nga ira e wha i tātarihia e te qPCR (TanjilG_04706, TanjilG_23384, TanjilG_10657 me TanjilG_27015).
Te wetewete i te whatunga taumahatanga o te whakaputanga-a-ira ira o tetahi kōwae me te kupu tukanga koiora nui rawa atu “GO: 0006355: Whakaritenga whakawhiti, te tauira DNA” me te kawe i te ira atete kaitono anthracnose Lanr1 TanjilG_05042.I whakangwarihia te hononga ki te wehe i te ira TanjilG_05042 me te ira o TanjilG_01212 te puku.
Ko te whakamaarama aatete anthracnose i kohia i Ahitereiria i whakaatu ko te nuinga o nga maara i tukuna i mua i te wa ka pangia;Ko Kalya, Coromup me Mandelup kua whakaahuahia he ahua whakaahuru, ko Wonga, Tanjil me 83A:476 kua kiia he tino atete26,27,31.he rite tonu te torere parenga, ko Lanr1 te ingoa, a ko Coromup me Mandelup he rereke rereke, ko AnMan10, 26, 39 te tohu, i te wa i tukuna e Kalya tetahi atu toera., Lanr2.Ko te tirotiro mo te parenga anthracnose i Tiamana i tohuhia he raina atete Bo7212 me tetahi allele kaitono i tua atu i a Lanr1, kua tohua ko LanrBo36.
I whakaatuhia e ta maatau rangahau he iti rawa te waa (mo te 6%) o te allele Lanr1 i roto i te germplasm whakamatauria.Ko tenei tirohanga e rite ana ki nga hua o te tirotiro i te germplasm o te Rawhiti o Europe ma te whakamahi i nga tohu Anseq3 me Anseq4, i whakaatu ko te Lanr1 allele kei roto i nga raina Belarusian e rua anake.Ko te tohu tenei ko te Lanr1 allele kaore ano kia whakamahia whanuitia e nga kaupapa whakatipu a-rohe, kaore i rite ki Ahitereiria, ko reira tetahi o nga tohu matua mo te whakatipuranga awhina-tohu.Ko tenei pea na te iti ake o te aukati e whakaratohia ana e te Lanr1 allele i roto i nga ahuatanga o te mara a te Pakeha i whakaritea ki te ripoata a Ahitereiria.I tua atu, ko nga rangahau mo te anthracnose i roto i nga waahi ua nui i Ahitereiria kua whakaatu ko nga urupare aukati i takawaengahia e te Lanr1 allele kaore pea e whai hua ki nga ahuatanga o te rangi e pai ana ki te tipu me te whanaketanga tere o te pathogen19,42.Ko te mea pono, i roto i te rangahau o tenei wa, i kitea ano etahi tohu o te anthracnose i roto i nga momo momo e mau ana i te Lanr1 allele, e kii ana ka ngaro te parenga i raro i nga tikanga tino pai mo te whanaketanga o C. lupini.I tua atu, ko nga whakamaoritanga pai teka mo te aroaro o nga tohu Anseq3 me Anseq4, e tata ana ki te 1 cM mai i te waahi o Lanr1, ka taea te 28,30,43.
I whakaatuhia e ta maatau rangahau ko te 83A: 476, e mau ana i te Lanr1 allele, i whakautu ki te C. lupini inoculation me te reprogramming transcriptome nui i te wa tuatahi i tātarihia (6 hpi), i te wa i Mandelup, e mau ana i te AnMan allele, i kitea nga urupare transcriptomic i muri mai.(mai i te 24 ki te 48 hp).Ko enei rereketanga o te waahi i roto i nga urupare tiaki e pa ana ki nga rereketanga o nga tohu mate, e whakaatu ana i te hiranga o te mohiotanga o te pathogen mo te whakautu angitu ki te aukati.Hei whakakino i te kiko o te tipu, me haere nga pua anthrax ki nga wahanga whanaketanga maha i runga i te mata o te kaihautu, tae atu ki te whakatipu, te wehenga pūtau, me te hanganga o te appressorium.Ko te taapiri he hanganga mate e piri ana ki te mata o te kaihautu me te whakauru ki roto i nga kopa o te ope.Na, ko nga puaa o C. gloeosporioides i roto i te tangohanga pea i whakaatu i te wehenga tuatahi o te karihi i muri i nga meneti 75-90 o te heki, te hanga o te ngongo iroriki i muri i te 90-120 meneti, me te whakakore i muri i nga haora 4 45.Ko te Mango C. gloeosporioides i whakaatu neke atu i te 40% te germination conidial i muri i te 3 haora o te incubation me te 20% te hanganga o nga apppressors i muri i te 4 haora.Ko te ira CAP20 e pa ana ki te kino o C. gloeosporioides i whakaatu i te mahi whakawhiti i roto i te conidia epiphyte-forming i muri i te 3.5 h incubation i roto i te wax mata awhekātō me te nui o te kukū o te pūmua CAP20 i muri i te 4 h 46 min.Waihoki, ko te mahi a te melanin biosynthesis ira i roto i te C. trifolii i whakaawehia i roto i te 2-haora heki i muri i te hanganga o te appressorium i muri i te 1 haora.Ko nga rangahau mo nga kopa rau kua kitea ko nga rōpere kua werohia ki te C. acutatum ka pehia tuatahi ki te 8 hpi, ko nga tōmato kua werohia ki te C. coccodes ka pehia tuatahi ki te 4 hpi48,49.he rite tonu ki te tauine wa o Colletotrichum spp.tukanga hopuhopu.Ko nga urupare whakamaarama tere ki te 83A:476 e whakaatu ana i te whai waahi o te atete tipu me nga ira ira-a-te-whakaoho (ETI) i roto i tenei rarangi, i te mea ko nga whakautu whakaroa a Mandelup e tautoko ana i te moroiti-hononga molecular pattern-triggered immunity (MTI) hypothesis 50. Nga whakautu wawe ki te 83A me Mandelup: 476Ko te inaki wahanga i waenganui i nga ira kua whakaritea ki runga, ki raro ranei i roto i te whakautu whakaroa e tautoko ana i tenei ariā, i te mea he maha nga wa e kiia ana ko te ETI he urupare MTI tere me te whakarei ake ka mutu i roto i te mate o te pūtau kua whakamaheretia i te waahi o te mate, e kiia ana ko te ru anaphylactic 51,52.
Ko te nuinga o nga ira e kii ana ki te kupu tino nui ko Gene Ontology GO:0006952 "Whakautu Whakautu" ko nga homologues 11 o te karere nohopuku i te ahotea 22 pūmua (he rite ki te SAM22) me nga mea nui e whitu o te latex protein-likes (MLPs).-rite pūmua 31, 34, 43 me 423 i whakaatu i te ritenga raupapa.Ko nga ira rite-SAM22 i whakaatu i te whakahoahoatanga nui ka roa ake, e whakaatu ana i te piki haere o te aukati anthracnose (83A:476 me Boregine).Heoi ano, i whakahekehia nga ira rite MLP anake i roto i nga raina e mau ana i te allele parenga kaitono (83A: 476/Lanr1 i te 6 hpi me te Mandelup/AnMan i te 24 hpi).Me tohu ko nga homologues-rite SAM22 katoa i tautuhia i ahu mai i te kahui ira e tata ana ki te 105 kb, ko nga ira rite MLP i ahu mai i nga rohe motuhake o te genome.I kitea ano te whakahoahoatanga o nga momo ira penei i te SAM22 i roto i ta maatau rangahau o mua mo te aukati NLL ki te werohanga Diaporthetoxica, e kii ana kei te uru ratou ki nga waahanga whakapae o te whakautu parepare.Ka tautokohia ano tenei whakatau e nga purongo mo te whakautu pai o nga ira-rite-SAM22 ki te whara, ki te maimoatanga ranei me te waikawa salicylic, nga kaiwhakangungu harore, te hauwai peroxide ranei.
Ko nga ira-a-MLP kua whakaatuhia ki te urupare ki nga momo taumahatanga abiotic me te koiora, tae atu ki nga mate harore huakita, huaketo me te pathogenic i roto i nga momo tipu maha55.Ko nga tohutohu mo te urupare ki etahi tauwhitinga i waenga i nga tipu me nga tukumate mai i te tino piki haere (arā, i te wa e pangia ana te miro ki te Verticillium dahliae) ki te tino heke (arā, i muri i te mate o te aporo me te Alternaria spp.)56,57.Kua kitea te hekenga nui o te ira MLP-rite 423 i te wa e parea ana te awhekātō ki te mate F. niger me te wa e pangia ana te aporo Botryosphaeria berengeriana f.cn.piricola and Alternaria alternata are apple pathotypes58,59.I tua atu, he iti ake te whakahuatanga o te ira aporo-aporo ki te ira MLP-rite 423, a he kaha ake te whakaraerae ki te mate harore59.Whai muri i te Fusarium oxysporum f, i pehia ano te ira MLP-rite 423 i roto i te germplasma piana noa.cn.Te mate pīni 60.
Ko etahi atu mema o te whanau PR-10 i tautuhia i roto i ta maatau rangahau RNA-seq ko nga ira LlR18A me te LlR18B hei whakautu ki te whakatikatika, me te ira (1 ira) kua whakahekehia ranei (3 ira) mo te lipid whakawhiti protein DIR1..I tua atu, ka whakanuia e WGCNA te ira LlR18B hei tari i roto i tenei waahanga, he tino whakaraerae ki te werohanga me te kawe i etahi ira whakautu whakamarumaru.Ko nga ira LlR18A me te LlR18B i uru ki roto i nga rau lupine kowhai hei whakautu ki nga huakita pathogenic, me nga kakau NLL i muri i te D. toxica inoculation, i te mea ko te homologue raihi o enei ira, RSOsPR10, i tere terehia e te mate harore pea kua uru ki roto i te jasmonic acid signaling non-protein pathway53, lipids signaling pathway53. e hiahiatia ana mo te tiimatanga o te aukati i riro mai i te punaha (SAR).Na te whakawhanaketanga o nga tauhohenga whakamarumaru, ka haria te pūmua DIR1 mai i te arotahi o te mate i roto i te phloem ki te kukume SAR i roto i nga whekau tawhiti.Ko te mea whakamiharo, ko te ira TanjilG_02313 DIR1 i tino whakaawehia i te wa tuatahi i nga rarangi 84A:476 me te Taupori 22660, engari he pai te whakawhanaketanga o te aukati anthracnose i te rarangi 84A:476 anake.Ka tohu pea tenei i etahi mahi iti o te ira DIR1 i roto i te NLL, i te mea ko nga toenga e toru o nga homologues i whakautu ki te inoculation anake i roto i te raina 83A:476 i te 6 hpi, a ko tenei whakautu i ahu whakararo.
I roto i ta maatau rangahau, ko nga waahanga e pa ana ki te tukanga koiora e kiia nei ko "GO: 0055114 Redox process" ko te pūmua cytochrome P450, te peroxidase, te waikawa linoleic 9S-/13S-lipoxygenase, me te 1-aminocyclopropane-1-carboxylic acid oxidase.I tua atu, ka tautuhia e to matou WGCNA te homologue HSFA4a hei tari e mau ana i nga waahanga penei i te kaitono ira aukati Lanr1 TanjilG_05042.Ko te HSFA4a tetahi waahanga o te ture e whakawhirinaki ana ki te redox o te tuhi karihi i roto i nga tipu.
Ko nga pūmua Cytochrome P450 he oxidoreductases e whakakorikori ana i te NADPH me/ranei i nga tauhohenga hydroxylation e whakawhirinaki ana ki te O2 i roto i te tuatahi me te tuarua o te whakawhitinga, tae atu ki te whakawhitinga o te xenobiotics, me nga homoni, nga waikawa ngako, nga sterols, nga waahanga pakitara o te pakitara, te biopolymers, me te biosynthesis o nga pūhui whakamarumaru 69. I roto i to maatau I roto i te rangahau P40d2. huringa piu) ki te 5.7 na te maha o nga homologues rerekee (37) me nga rereketanga o nga tauira whakautu i waenga i nga ira motuhake, e whakaatu ana i te whakahounga whakarunga..Ko te whakamahi i nga raraunga RNA-seq anake hei whakamarama i te mahi koiora putative o nga ira NLL i roto i taua whanau nui o te pūmua ka tino whakaaro.Engari, he mea tika kia mohio ko etahi ira cytochrome P450 e hono ana ki te kaha ake o te aukati ki nga harore pathogenic, huakita ranei, tae atu ki te koha ki nga tauhohenga mate mate69,70,71.
Ko te Class III peroxidases he maha nga enzyme tipu ka uru ki roto i te maha o nga momo tikanga metabolic i te wa e tipu ana te tipu me te whanaketanga, me te whakautu ki nga taumahatanga o te taiao penei i te tote, te tauraki, te kaha o te marama, me te whakaeke pathogen72.Ko nga peroxidases kei roto i te taunekeneke o etahi momo tipu me Anthracis, tae atu ki a Stylosanthes humilis me C. gloeosporioides, Lens culinaris me C. truncatum, Phaseolus vulgaris me C. lindemuthianum, Cucumis sativus me C. lagenarium73,74,75,76.He tere rawa te whakautu, i etahi wa i te 4 HPI, i mua i te kuhu o te harore ki te kiko o te tipu73.I whakautu ano te ira peroxidase ki te D. toxica NLL inoculation.I tua atu i a raatau mahi angamaheni ki te whakahaere i te pakaru o te oxidative, te whakakore ranei i te ahotea oxidative, ka taea e te peroxidases te whakararu i te tipu tukumate na roto i te hanga arai tinana i runga i te whakapakari i te pakitara o te pūtau i te wa o te whakakoi, te waahanga iti, te hono-whakawhitinga ranei o nga puhui motuhake.Ko tenei mahi ka taea te kii i roto i te silico ki te ira TanjilG_03329 e whakawaehere ana i te putative lignin-forming anion peroxidase i tino whakatikatikahia i roto i ta maatau ako i roto i te 83A: 476 raina aukati i te 6 HPI, engari kaore i roto i etahi atu riipene me nga waahi kaore i whakautu.
Ko te 9S-/13S-lipoxygenase o te waikawa linoleic te taahiraa tuatahi i roto i te ara oxidative o te koiora lipid78.He maha nga mahi a nga hua o tenei ara ki te whakamarumaru i nga tipu, tae atu ki te whakapakari i te pakitara o te pūtau na roto i te hanganga o nga putunga callose me te pectin, me te whakarite i te ahotea oxidative na roto i te hanga momo hāora tauhohe79,80,81,82,83.I roto i te rangahau o naianei, i whakarereketia te whakahuatanga o te waikawa linoleic 9S-/13S-lipoxygenase i roto i nga taumahatanga katoa, engari i roto i te taupori whakaraerae 22660, i kaha ake te whakatikatika i nga waa rereke, i nga riipene e mau ana i te Lanr1 me te AnMan allele, ka whakanui i te rereketanga o enei paparanga oxylipinx i waenga i nga tauhohenga tiaki o te oxylipinx.
Ko te homologue 1-aminocyclopropane-1-carboxylate oxidase (ACO) i tino whakatikahia (9 ira) i whakahekehia ranei (2 ira) i te wa e werohia ana ki te lupine.E rua nga rereke, ko enei whakautu katoa i puta i te 6 hp.i 83A:476.Ko te tauhohenga enzymatic i takawaengahia e nga pūmua ACO ko te mahi whakaiti tere i roto i te hanga ethylene, na reira ka tino whakaritea84.Ko te Ethylene he taiaki tipu he maha nga mahi ki te whakahaere i te whanaketanga o te tipu me te urupare ki nga ahuatanga ahotea abiotic me te koiora.Ko te whakaurunga o te tuhi ACO me te whakahohe i te ara tohu ethylene e whai waahi ana ki te whakanui ake i te parenga o te raihi ki te hemibiotrophic fungus oryzae oryzae ma te whakahaere i te hanga o nga momo hāora tauhohe me nga phytoalexins.He rite tonu te tukanga mate rau i kitea i waenga i a M. oryzae me C. lupini88,89, i runga i te papamuri o te nui o te whakatikatika o nga homologues ACO i roto i te rarangi 83A:476 i korerotia i roto i tenei rangahau, ka huri i te kaha ki te tuku i te aukati ki te NLL anthracnose Ethylene he hikoinga matua i roto i nga huarahi ngota.
I roto i te rangahau o naianei, i kitea te aukati nui o nga ira maha e pa ana ki te photosynthesis i te 6 hpi i te 83A:476 me te 48 hpi i Mandeloop me te taupori 22660.Ko te whānuitanga me te ahunga whakamua o enei huringa ka rite ki te taumata.I kitea te aukati anthracnose i tenei whakamatautau.Ina tata nei, kua purongohia te kaha me te moata o te aukati i nga tuhinga e pa ana ki te photosynthesis i roto i nga tauira maha o nga taunekeneke tipu-patogen, tae atu ki nga huakita pathogenic me te harore.Ko te tere (mai i te 2 HPI i roto i etahi taunekeneke) me te whakakore i nga ira o te ao e pa ana ki te photosynthesis hei whakautu ki te mate ka taea te whakaoho i te mate o te tipu i runga i te tohatoha o nga momo hāora urupare me o raatau taunekeneke ki te ara o te waikawa salicylic hei takawaenga i nga tauhohenga mate mate 90,94.
Hei whakamutunga, ko nga tikanga whakautu arai i whakaarohia mo te whakapapa tino kaha (83A:476) ko te whakamohiotanga tere o te tukumate e te ira R (tenei pea ko TIR-NBS-LRR TanjilG_05042) me te waikawa salicylic me te tohu ethylene, ka whai muri i te whakaturanga SAR tawhiti.Ko te mahi e tautokohia ana e te DIR-1 pūmua.Me tohu ko te wa biotrophic mo te mate C. lupini he tino poto (tata ki te 2 ra), ka whai i te tipu necrotic95.Ko te whakawhitinga i waenga i enei waahanga ka pa atu ki te necrosis me te whakaputanga o nga pūmua ethylene-inducible e mahi ana hei whakaoho mo nga tauhohenga hypersensitivity i roto i nga tipu manaaki.Na reira, ko te waahi mo te hopu angitu o C. lupini i te waahi biotrophic he tino whaiti.Ko te whakahoahoatanga o nga ira e hono ana ki te redox me te photosynthesis i kitea i te 83A: 476 i te 6 hpi e rite ana ki te ahunga whakamua o te hyphae harore me te whakaatu i te whanaketanga o te urupare tiaki angitu i te wahanga biotrophic.Ko nga whakautu whakawhiti a Mandelup me te taupori 22660 ka roa pea ki te hopu i te harore i mua i te huri ki te tipu necrotic, engari, ka kaha ake pea a Mandelup i te taupori 22660 na te mea ko te ture tere o te PR-10 pūmua e whakatairanga ana i te aukati whakapae.
Ko te ETI, i peia e te ira R canonical, ko te ahua he tikanga noa mo te aukati i te pini ki te anthracnose.No reira, i roto i te tauira legume Medicago truncatula, ko te aukati ki te anthracnose ka whakawhiwhia e te ira RCT1, he mema o te TIR-NBS-LRR97 tipu R ira karaehe.Ka whakawhiwhia ano hoki e tenei ira te parenga anthracnose whanui i roto i te alfalfa ina whakawhitia ki nga tipu whakaraerae.I roto i te pini noa (P. vulgaris), neke atu i te rua tekau ma rua nga ira aukati anthracnose kua kitea ki tenei ra.Ko etahi o enei ira ka kitea ki nga rohe karekau he ira R canonical, engari he maha atu kei nga tapa o nga chromosomes e mau ana i te huinga ira NBS-LRR, tae atu ki te TIR-NBS-LRRs99.I whakapumautia ano e te rangahau SSR-nui-a-ira te hononga o te ira NBS-LRR me te aukati anthracnose i roto i te pini noa.I kitea ano te ira R canonical i roto i te rohe ira tangata e mau ana i te waahi aukati anthracnose nui i roto i te lupine ma 101.
Ko ta maatau mahi e whakaatu ana ko te tauhohenga atete tonu, kua whakahohehia i te timatanga o te mate o te tipu (kaore i muri ake i te 12 hpi), he pai te tiaki i te lupine whaiti-rau mai i te anthracnose na te harore pathogenic Collelotrichum lupini.Ma te whakamahi i te raupapa whakaputanga teitei, i whakaatuhia e matou nga whakaaturanga korero rereke o nga ira aukati anthracnose i roto i nga tipu NLL i takawaenga e nga ira aukati Lanr1 me AnMan.Ko te wawao angitu ko te hoahoa i nga ira mo nga pūmua e uru ana ki te redox, photosynthesis, me te pathogenesis i roto i nga haora o te pa tuatahi o te tipu ki te tukumate.Ko nga tauhohenga whakamarumaru rite, engari kua roa te wa, he iti ake te whai hua ki te tiaki i nga tipu mai i nga mate.Ko te parenga anthrax i takawaenga e te ira Lanr1 he rite ki te urupare tere angamaheni o te ira R (te aukati-whakaoho i te mate), ko te ira AnMan te nuinga o te tuku urupare whakapae (te aukati i puta mai i te tauira ngota moroiti-hononga), e whakarato ana i te taumata o te oranga tonutanga.
Ko nga rarangi 215 NLL i whakamahia ki te tirotiro mo nga tohu anthracnose e 74 nga maara, 60 nga raina i whiwhi ma te whakawhiti me te whakatipu, e 5 nga mutants, me te 76 nga germplasms mohoao, taketake ranei.I ahu mai nga raina i nga whenua 17, ko te nuinga mai i Poroni (58), Spain (47), Tiamana (27), Ahitereiria (26), Russia (19), Belarus (7), Itari (5) me etahi atu rarangi.mai i nga whenua 10.Kei roto hoki i te huinga nga rarangi tohu tohu: 83A: 476, Tanjil, Wonga e mau ana i te Lanr1 allele, me Mandelup e mau ana i te AnMan allele.I whiwhihia nga raina mai i te Paarangi Rarangi Rauemi Ira Lupine a te Pakeha e tiakina ana e Poznań Plant Breeding Ltd., Wiatrowo, Poland (Ripanga Taapiri S1).
I tipu nga tipu i raro i nga tikanga whakahaere (photoperiod 16 haora, te pāmahana 25°C i te awatea me te 18°C ​​​​i te po).E rua nga tauira koiora i tātarihia.I wehea te DNA mai i nga rau e toru wiki te pakeke ma te whakamahi i te DNeasy Plant Mini Kit (Qiagen, Hilden, Germany) e ai ki te kawa.Ko te kounga me te kukū o te DNA taratahi i aromatawaihia e nga tikanga spectrophotometric (NanoDrop 2000; Thermo Fisher Scientific, Waltham, MA, USA).Ko te tohu AnManM1 e tohu ana i te ira aukati anthracnose AnMan (i takea mai i cv. Mandelup) me nga tohu Anseq3 me Anseq4 kei te taha o te ira Lanr1 (i takea mai i cv. Tanjil) i tātarihia 11,26,28.Ko nga Homozygotes mo te allele atete i tohua hei "1", he ngawari - he "0", me te heterozygotes - he 0.5.
I runga i nga hua o te tirotiro mo nga tohu AnManM1, AnSeq3 me AnSeq4 me te waatea o nga kakano mo nga whakamatautau whai muri whakamutunga, 50 nga rarangi NLL i tohua mo te tohu tohu mate anthracnose.I mahia te tātaritanga i roto i te kati kōtuhi e whakahaeretia ana e te rorohiko me te 14 haora te wa whakaahua me te awhe pāmahana 22°C i te awatea me te 19°C i te po.Ka rakurakuhia nga kakano (ka tapahia te koti kakano i tera taha o te embryo me te mata koi) i mua i te rui kia kore ai e moe te kakano na te mea he uaua rawa te koti kakano me te whakarite kia rite te whakatipuranga.I whakatipuhia nga tipu ki roto i nga kohua (11 × 11 × 21 cm) me te oneone maroke (TS-1 REC 085 Medium Basic, Klasmann-Deilmann Polska, Warsaw, Poland).I mahia te inoculation me te Colletotrichum lupini Col-08 riaka, i tupu i te tau 1999 mai i nga kakau o nga tipu lupine whaiti-rau i tupu i te mara i Verzhenitsa, Greater Poland (52° 27′ 42″ N 17° 04′ 05″ E ).Tikina he rohe.I whakatipuhia nga momo wehe i roto i te reo SNA i te 20° C. i raro i te marama pango mo te 21 ra hei whakapoapoa.E wha wiki i muri i te rui, ka tae nga tipu ki te waahi rau 4-6, ka mahia te werohanga ma te rehu me te aukati o te conidia i te kukū o te 0.5 x 106 conidia mo ia ml.I muri i te werohanga, ka noho nga tipu ki roto i te pouri mo te 24 haora i te haumākū tata ki te 98% me te mahana o te 25 ° C kia pai ai te tipu o te conidia me te tukanga mate.Ka tipuhia nga tipu i raro i te 14 haora i te wa poto i te 22°C te ra/19°C te po me te 70% haumuku.I mahia te tatauranga mate i te 22 ra i muri i te werohanga me te awhe mai i te 0 (immune) ki te 9 (tino whakaraerae) i runga i te ahua o te korenga ranei o nga whiu necrotic i runga i nga kakau me nga rau.I tua atu, i muri i te tohu, ka inehia te taumaha o nga tipu.Ko nga hononga i waenga i nga tohu tohu tohu me nga tohu tohu mate i tatauhia hei tohu tohu-rua-raupapa (kaore he tohu heterozygous i roto i te huinga o nga rarangi mo te tātaritanga o te tohu tohu mate anthracnose).