ചില LC ട്രബിൾഷൂട്ടിംഗ് വിഷയങ്ങൾ കാലഹരണപ്പെട്ടതല്ല, കാരണം ഇൻസ്ട്രുമെന്റ് ടെക്നോളജി കാലക്രമേണ മെച്ചപ്പെടുമ്പോഴും LC പ്രാക്ടീസിൽ പ്രശ്നങ്ങളുണ്ട്. LC സിസ്റ്റത്തിൽ പ്രശ്നങ്ങൾ ഉണ്ടാകാനും മോശം പീക്ക് ആകൃതിയിൽ അവസാനിക്കാനും നിരവധി മാർഗങ്ങളുണ്ട്. പീക്ക് ആകൃതിയുമായി ബന്ധപ്പെട്ട പ്രശ്നങ്ങൾ ഉണ്ടാകുമ്പോൾ, ഈ ഫലങ്ങളുടെ ഒരു ചെറിയ ലിസ്റ്റ് ഞങ്ങളുടെ ട്രബിൾഷൂട്ടിംഗ് അനുഭവം ലളിതമാക്കാൻ സഹായിക്കുന്നു.
ഈ "LC ട്രബിൾഷൂട്ടിംഗ്" കോളം എഴുതുന്നതും ഓരോ മാസവും വിഷയങ്ങളെക്കുറിച്ച് ചിന്തിക്കുന്നതും രസകരമാണ്, കാരണം ചില വിഷയങ്ങൾ ഒരിക്കലും ശൈലിയിൽ നിന്ന് പുറത്തുപോകില്ല. ക്രോമാറ്റോഗ്രാഫി മേഖലയിൽ ഗവേഷണം ചെയ്യുമ്പോൾ ചില വിഷയങ്ങളോ ആശയങ്ങളോ കാലഹരണപ്പെട്ടതായി മാറുന്നു, കാരണം അവ ട്രബിൾഷൂട്ടിംഗ് മേഖലയിൽ, പുതിയതും മികച്ചതുമായ ആശയങ്ങളാൽ അവ മാറ്റിസ്ഥാപിക്കപ്പെടുന്നു. (1).കഴിഞ്ഞ കുറച്ച് വർഷങ്ങളായി, ലിക്വിഡ് ക്രോമാറ്റോഗ്രാഫിയെ (എൽസി) ബാധിക്കുന്ന സമകാലിക പ്രവണതകളെക്കുറിച്ച് ഞാൻ നിരവധി LC ട്രബിൾഷൂട്ടിംഗ് വിഭാഗങ്ങൾ കേന്ദ്രീകരിച്ചു (ഉദാഹരണത്തിന്, നിലനിർത്തുന്നതിലെ സമ്മർദ്ദത്തിന്റെ ഫലത്തെക്കുറിച്ചുള്ള നമ്മുടെ ധാരണയുടെ ആപേക്ഷിക താരതമ്യം [2] പുതിയ പുരോഗതികൾ) LC ഫലങ്ങളുടെ വ്യാഖ്യാനവും ആധുനിക LC ഉപകരണങ്ങൾ ഉപയോഗിച്ച് എങ്ങനെ ട്രബിൾഷൂട്ട് ചെയ്യാം എന്നതും ഈ മാസം, 2'm2 സീരീസ് ഇൻസ്റ്റോൾ ചെയ്യുന്നതും, ഈ മാസം, LC ട്രബിൾഷൂട്ടിംഗിന്റെ ചില "ജീവിതവും മരണവും" വിഷയങ്ങളിൽ ശ്രദ്ധ കേന്ദ്രീകരിക്കുന്നു — ഏത് ട്രബിൾഷൂട്ടറിനും അത്യന്താപേക്ഷിതമായ ഘടകങ്ങൾ പ്രധാനമാണ്, നമ്മൾ ഉപയോഗിക്കുന്ന സിസ്റ്റത്തിന്റെ പ്രായം പരിഗണിക്കാതെ തന്നെ. ഈ സീരീസിന്റെ പ്രധാന വിഷയം LCGC യുടെ പ്രശസ്തമായ "LC ട്രബിൾഷൂട്ടിംഗ് ഗൈഡ്" മതിൽ ചാർട്ടിന് (4) വളരെ പ്രസക്തമാണ്. 44 വ്യത്യസ്‌തമായ പീക്ക് ആകൃതിയുടെ കാരണങ്ങളെ വാൾ ചാർട്ട് പട്ടികപ്പെടുത്തുന്നു! ഈ പ്രശ്‌നങ്ങളെല്ലാം നമുക്ക് ഒരു ലേഖനത്തിൽ വിശദമായി പരിഗണിക്കാൻ കഴിയില്ല, അതിനാൽ ഈ വിഷയത്തിലെ ആദ്യ ഗഡുവിൽ, ഞാൻ ഏറ്റവും കൂടുതൽ കാണുന്ന ചിലതിൽ ഞാൻ ശ്രദ്ധ കേന്ദ്രീകരിക്കും. ഈ സുപ്രധാന വിഷയത്തിൽ ചില സഹായകരമായ നുറുങ്ങുകളും ഓർമ്മപ്പെടുത്തലുകളും യുവാക്കളും പ്രായമായ LC ഉപയോക്താക്കൾക്കും കണ്ടെത്തുമെന്ന് ഞാൻ പ്രതീക്ഷിക്കുന്നു.
പ്രശ്‌നപരിഹാര ചോദ്യങ്ങൾക്ക് "എന്തും സാധ്യമാണ്" എന്ന മറുപടിയാണ് ഞാൻ കൂടുതലായി നൽകുന്നത്. വ്യാഖ്യാനിക്കാൻ ബുദ്ധിമുട്ടുള്ള നിരീക്ഷണങ്ങൾ പരിഗണിക്കുമ്പോൾ ഈ പ്രതികരണം എളുപ്പമാണെന്ന് തോന്നിയേക്കാം, പക്ഷേ പലപ്പോഴും ഇത് ഉചിതമാണെന്ന് ഞാൻ കരുതുന്നു. മോശം പീക്ക് ആകൃതിയുടെ സാധ്യമായ നിരവധി കാരണങ്ങളാൽ, പ്രശ്നം എന്തായിരിക്കുമെന്ന് പരിഗണിക്കുമ്പോൾ തുറന്ന മനസ്സ് ഉണ്ടായിരിക്കേണ്ടത് പ്രധാനമാണ്.
ഏതൊരു ട്രബിൾഷൂട്ടിംഗ് അഭ്യാസത്തിലെയും ഒരു പ്രധാന ഘട്ടം - എന്നാൽ കുറച്ചുകാണിച്ചതാണെന്ന് ഞാൻ കരുതുന്ന ഒന്ന് - പരിഹരിക്കപ്പെടേണ്ട ഒരു പ്രശ്‌നമുണ്ടെന്ന് തിരിച്ചറിയുക എന്നതാണ്. ഒരു പ്രശ്‌നമുണ്ടെന്ന് തിരിച്ചറിയുക എന്നത് പലപ്പോഴും അർത്ഥമാക്കുന്നത് ഉപകരണത്തിന് സംഭവിക്കുന്നത് സിദ്ധാന്തം, അനുഭവജ്ഞാനം, അനുഭവം എന്നിവയാൽ രൂപപ്പെട്ട നമ്മുടെ പ്രതീക്ഷകളിൽ നിന്ന് വ്യത്യസ്തമാണെന്ന് തിരിച്ചറിയുക എന്നതാണ് (5). ഫ്ലഫി, ലീഡിംഗ് എഡ്ജ്, ടെയ്‌ലിംഗ് മുതലായവ), മാത്രമല്ല വീതിയിലും. യഥാർത്ഥ പീക്ക് ആകൃതിയെക്കുറിച്ചുള്ള ഞങ്ങളുടെ പ്രതീക്ഷകൾ ലളിതമാണ്. മിക്ക കേസുകളിലും, ക്രോമാറ്റോഗ്രാഫിക് കൊടുമുടികൾ സമമിതിയുള്ളതും ഗൗസിയൻ വിതരണത്തിന്റെ ആകൃതിയുമായി പൊരുത്തപ്പെടുന്നതുമായ പാഠപുസ്തക പ്രതീക്ഷയെ സിദ്ധാന്തം (6) നന്നായി പിന്തുണയ്ക്കുന്നു. ചിത്രം 1-ൽ കാണാവുന്ന മറ്റ് ചില സാധ്യതകൾ കാണിക്കുന്നു-മറ്റൊരു വിധത്തിൽ പറഞ്ഞാൽ, ചില വഴികൾ തെറ്റായി പോകാം. ഈ ഇൻസ്‌റ്റാൾമെന്റിന്റെ ബാക്കി ഭാഗങ്ങളിൽ, ഈ രൂപ തരങ്ങളിലേക്ക് നയിച്ചേക്കാവുന്ന സാഹചര്യങ്ങളുടെ ചില പ്രത്യേക ഉദാഹരണങ്ങൾ ചർച്ച ചെയ്യാൻ ഞങ്ങൾ സമയം ചെലവഴിക്കും.
ക്രോമറ്റോഗ്രാമിൽ ചിലപ്പോൾ കൊടുമുടികൾ ഒഴിവാക്കപ്പെടുമെന്ന് പ്രതീക്ഷിക്കപ്പെടുന്നില്ല. മുകളിലെ മതിൽ ചാർട്ട് സൂചിപ്പിക്കുന്നത്, ഒരു കൊടുമുടിയുടെ അഭാവം (സാമ്പിളിൽ യഥാർത്ഥത്തിൽ ടാർഗെറ്റ് അനലിറ്റ് അടങ്ങിയിട്ടുണ്ട്, അത് ശബ്ദത്തിന് മുകളിൽ കാണുന്നതിന് ഡിറ്റക്ടർ പ്രതികരണം മതിയാകും) സാധാരണയായി ചില ഉപകരണ പ്രശ്‌നങ്ങളോ തെറ്റായ മൊബൈൽ ഫേസ് അവസ്ഥകളുമായോ ബന്ധപ്പെട്ടിരിക്കുന്നു (എല്ലാം നിരീക്ഷിക്കുകയാണെങ്കിൽ).കൊടുമുടികൾ, സാധാരണയായി വളരെ "ദുർബലമാണ്").ഈ വിഭാഗത്തിലെ സാധ്യമായ പ്രശ്നങ്ങളുടെയും പരിഹാരങ്ങളുടെയും ഒരു ചെറിയ ലിസ്റ്റ് പട്ടിക I-ൽ കാണാം.
മുകളിൽ സൂചിപ്പിച്ചതുപോലെ, ശ്രദ്ധിച്ച് പരിഹരിക്കാൻ ശ്രമിക്കുന്നതിന് മുമ്പ് എത്രമാത്രം പീക്ക് ബ്രോഡനിംഗ് സഹിക്കണം എന്ന ചോദ്യം ഭാവിയിലെ ഒരു ലേഖനത്തിൽ ഞാൻ ചർച്ച ചെയ്യുന്ന ഒരു സങ്കീർണ്ണമായ വിഷയമാണ്. എന്റെ അനുഭവം കാര്യമായ പീക്ക് ബ്രോഡനിംഗ് പലപ്പോഴും പീക്ക് ആകൃതിയിൽ കാര്യമായ മാറ്റത്തോടൊപ്പമാണ്, കൂടാതെ പീക്ക് ടെയിലിംഗ് പ്രീ-പീക്ക് അല്ലെങ്കിൽ പിളർപ്പിനെ അപേക്ഷിച്ച് സാധാരണമാണ്.
ഈ പ്രശ്‌നങ്ങൾ ഓരോന്നും ട്രബിൾഷൂട്ടിംഗ് LC-യുടെ മുൻ ലക്കങ്ങളിൽ വിശദമായി ചർച്ച ചെയ്തിട്ടുണ്ട്, ഈ വിഷയങ്ങളിൽ താൽപ്പര്യമുള്ള വായനക്കാർക്ക് ഈ പ്രശ്‌നങ്ങളുടെ മൂലകാരണങ്ങളെയും സാധ്യതയുള്ള പരിഹാരങ്ങളെയും കുറിച്ചുള്ള വിവരങ്ങൾക്ക് ഈ മുൻ ലേഖനങ്ങൾ റഫർ ചെയ്യാം.കൂടുതൽ വിശദാംശങ്ങൾ.
പീക്ക് ടെയ്‌ലിംഗ്, പീക്ക് ഫ്രണ്ടിംഗ്, സ്‌പ്ലിറ്റിംഗ് എന്നിവയെല്ലാം കെമിക്കൽ അല്ലെങ്കിൽ ഫിസിക്കൽ പ്രതിഭാസങ്ങളാൽ സംഭവിക്കാം, ഈ പ്രശ്‌നങ്ങൾക്കുള്ള സാധ്യതയുള്ള പരിഹാരങ്ങളുടെ പട്ടിക നമ്മൾ കൈകാര്യം ചെയ്യുന്നത് രാസപരമോ ശാരീരികമോ ആയ പ്രശ്‌നമാണോ എന്നതിനെ ആശ്രയിച്ച് പരക്കെ വ്യത്യാസപ്പെടുന്നു. പലപ്പോഴും, ഒരു ക്രോമാറ്റോഗ്രാമിലെ വ്യത്യസ്ത കൊടുമുടികൾ താരതമ്യം ചെയ്യുന്നതിലൂടെ, നിങ്ങൾക്ക് പ്രധാനപ്പെട്ട സൂചനകൾ കണ്ടെത്താനാകും. ചില കൊടുമുടികളെ ബാധിച്ചു, പക്ഷേ ബാക്കിയുള്ളവ നന്നായി കാണപ്പെടുന്നു, കാരണം മിക്കവാറും രാസവസ്തുവാണ്.
പീക്ക് ടെയിലിംഗിന്റെ രാസ കാരണങ്ങൾ ഇവിടെ സംക്ഷിപ്തമായി ചർച്ച ചെയ്യാൻ കഴിയാത്തത്ര സങ്കീർണ്ണമാണ്. കൂടുതൽ ആഴത്തിലുള്ള ചർച്ചയ്ക്കായി (10) താൽപ്പര്യമുള്ള വായനക്കാരനെ "എൽസി ട്രബിൾഷൂട്ടിംഗിന്റെ" സമീപകാല ലക്കത്തിലേക്ക് റഫർ ചെയ്യുന്നു. എന്നിരുന്നാലും, കുത്തിവയ്ക്കപ്പെട്ട അനലിറ്റിന്റെ പിണ്ഡം കുറയ്ക്കുകയും പീക്ക് ആകൃതി മെച്ചപ്പെടുന്നുണ്ടോ എന്ന് നോക്കുകയും ചെയ്യുക എന്നതാണ് എളുപ്പമുള്ള ഒരു കാര്യം. ചെറിയ വിശകലന പിണ്ഡങ്ങൾ അല്ലെങ്കിൽ ക്രോമാറ്റോഗ്രാഫിക് അവസ്ഥകൾ മാറ്റണം, അതിലൂടെ വലിയ പിണ്ഡം കുത്തിവച്ചാലും നല്ല പീക്ക് ആകൃതികൾ ലഭിക്കും.
പീക്ക് ടെയിലിംഗിന് നിരവധി ശാരീരിക കാരണങ്ങളുണ്ട്. സാധ്യതകളെക്കുറിച്ചുള്ള വിശദമായ ചർച്ചയിൽ താൽപ്പര്യമുള്ള വായനക്കാരെ "LC ട്രബിൾഷൂട്ടിംഗിന്റെ" (11) മറ്റൊരു സമീപകാല ലക്കത്തിലേക്ക് പരാമർശിക്കുന്നു. ഞങ്ങൾ മുമ്പ് ഉപയോഗിക്കാത്ത ഇഞ്ചക്ഷൻ വാൽവ്, സ്റ്റെയിൻലെസ്സ് സ്റ്റീൽ കാപ്പിലറിയിൽ രൂപപ്പെടുത്തിയ ഒരു ഫെറൂൾ ഉപയോഗിച്ച് ഒരു ചെറിയ വോളിയം ഇഞ്ചക്ഷൻ ലൂപ്പ് ഇൻസ്റ്റാൾ ചെയ്തു. ചില പ്രാഥമിക ട്രബിൾഷൂട്ടിംഗ് പരീക്ഷണങ്ങൾക്ക് ശേഷം, ഇഞ്ചക്ഷൻ വാൽവ് സ്റ്റേറ്ററിലെ പോർട്ട് ഡെപ്ത് നമ്മൾ ഉപയോഗിച്ചതിനേക്കാൾ വളരെ ആഴമേറിയതാണെന്ന് ഞങ്ങൾ മനസ്സിലാക്കി. പോർട്ടിന്റെ താഴെയുള്ള ഡെഡ് വോളിയം ഇല്ലാതാക്കാൻ ഫെറൂളിനെ ശരിയായ സ്ഥാനത്തേക്ക് ക്രമീകരിക്കാൻ കഴിയും.
ചിത്രം 1e-ൽ കാണിച്ചിരിക്കുന്നതുപോലുള്ള പീക്ക് ഫ്രണ്ടുകൾ ശാരീരികമോ രാസപരമോ ആയ പ്രശ്‌നങ്ങളാലും ഉണ്ടാകാം. നിരയുടെ കണികകൾ നന്നായി പാക്ക് ചെയ്യാത്തതോ കാലക്രമേണ കണങ്ങൾ പുനഃസംഘടിപ്പിച്ചതോ ആണ് മുൻവശത്തെ ഒരു പൊതു കാരണം. അനുയോജ്യമായ (ലീനിയർ) സാഹചര്യങ്ങളിൽ, സ്റ്റേഷണറി ഫേസ് (അതിനാൽ, നിലനിർത്തൽ ഘടകം) നിലനിറുത്തുന്ന അനലിറ്റിന്റെ അളവ് നിരയിലെ അനലൈറ്റിന്റെ സാന്ദ്രതയുമായി രേഖീയമായി ബന്ധപ്പെട്ടിരിക്കുന്നു. കൂടുതൽ പിണ്ഡം കുത്തിവയ്ക്കുന്നതിനനുസരിച്ച് വിശാലമാണ്. കൂടാതെ, രേഖീയമല്ലാത്ത ആകൃതികൾ ക്രോമാറ്റോഗ്രാഫിക് കൊടുമുടികളുടെ ആകൃതി നിർണ്ണയിക്കുന്നു, അതിന്റെ ഫലമായി മുൻനിര അല്ലെങ്കിൽ പിന്നിൽ അരികുകൾ ഉണ്ടാകുന്നു. പീക്ക് ടെയ്‌ലിംഗിന് കാരണമാകുന്ന മാസ് ഓവർലോഡ് (10), രേഖീയമല്ലാത്ത നിലനിർത്തൽ മൂലമുണ്ടാകുന്ന പീക്ക് ലീഡ് എന്നിവയും കുത്തിവച്ച വിശകലനത്തിന്റെ പിണ്ഡം കുറയ്ക്കുന്നതിലൂടെ രോഗനിർണയം നടത്താം. ഈ സ്വഭാവം കുറയ്ക്കുന്നതിന് matographic വ്യവസ്ഥകൾ മാറ്റേണ്ടതുണ്ട്.
ചിത്രം 1f-ൽ കാണിച്ചിരിക്കുന്നതുപോലെ, ചിലപ്പോഴൊക്കെ നമ്മൾ "സ്പ്ലിറ്റ്" പീക്ക് ആയി കാണപ്പെടുന്നത് നിരീക്ഷിക്കുന്നു. ഈ പ്രശ്നം പരിഹരിക്കുന്നതിനുള്ള ആദ്യ പടി, പീക്ക് ആകൃതി ഭാഗിക കോ-ഇല്യൂഷൻ മൂലമാണോ എന്ന് നിർണ്ണയിക്കുക എന്നതാണ് (അതായത്, രണ്ട് വ്യതിരിക്തവും എന്നാൽ അടുത്തറിയുന്നതുമായ സംയുക്തങ്ങളുടെ സാന്നിധ്യം). യഥാർത്ഥത്തിൽ രണ്ട് വ്യത്യസ്ത വിശകലനങ്ങൾ ഉണ്ടെങ്കിൽ, അവയുടെ ദൃഢത വർദ്ധിപ്പിക്കുക. പ്രത്യക്ഷമായ "സ്പ്ലിറ്റ്" കൊടുമുടികൾ ഫിസിക്കൽ പെർഫോമൻസുമായി ബന്ധപ്പെട്ടിരിക്കുന്നു. കോളവുമായി തന്നെ ഒരു ബന്ധവുമില്ല. പലപ്പോഴും, ഈ തീരുമാനത്തിലെ ഏറ്റവും പ്രധാനപ്പെട്ട സൂചന ക്രോമാറ്റോഗ്രാമിലെ എല്ലാ കൊടുമുടികളും പിളർപ്പ് രൂപങ്ങൾ കാണിക്കുന്നുണ്ടോ, ഒന്നോ രണ്ടോ ആണോ എന്നതാണ്. ഇത് ഒന്നോ രണ്ടോ ആണെങ്കിൽ, ഇത് ഒരു സഹ-എലൂഷൻ പ്രശ്നമാണ്;എല്ലാ കൊടുമുടികളും വിഭജിക്കുകയാണെങ്കിൽ, അത് ഒരു ഭൗതിക പ്രശ്നമായിരിക്കാം, മിക്കവാറും കോളവുമായി ബന്ധപ്പെട്ടതാണ്.
നിരയുടെ ഭൗതിക ഗുണങ്ങളുമായി ബന്ധപ്പെട്ട സ്പ്ലിറ്റ് പീക്കുകൾ സാധാരണയായി ഭാഗികമായി തടഞ്ഞ ഇൻലെറ്റ് അല്ലെങ്കിൽ ഔട്ട്‌ലെറ്റ് ഫ്രിറ്റുകൾ, അല്ലെങ്കിൽ നിരയിലെ കണങ്ങളുടെ പുനഃസംഘടന, കോളം ചാനൽ രൂപീകരണത്തിന്റെ ചില മേഖലകളിൽ മൊബൈൽ ഘട്ടത്തെക്കാൾ വേഗത്തിൽ ഒഴുകാൻ മൊബൈൽ ഘട്ടത്തെ അനുവദിക്കുന്നു.എന്നിരുന്നാലും, എന്റെ അനുഭവത്തിൽ, ഇത് സാധാരണയായി ഒരു ദീർഘകാല പരിഹാരത്തേക്കാൾ ഹ്രസ്വകാലമാണ്. നിരയ്ക്കുള്ളിൽ കണികകൾ വീണ്ടും കൂടിച്ചേർന്നാൽ, ആധുനിക നിരകളിൽ ഇത് പലപ്പോഴും മാരകമാണ്. ഈ ഘട്ടത്തിൽ, കോളം മാറ്റി തുടരുന്നതാണ് നല്ലത്.
ചിത്രം 1g-ലെ ഏറ്റവും ഉയർന്നത്, എന്റെ സ്വന്തം ലാബിലെ സമീപകാല സംഭവങ്ങളിൽ നിന്ന്, സിഗ്നൽ വളരെ ഉയർന്നതാണ്, അത് പ്രതികരണ ശ്രേണിയുടെ ഉയർന്ന അറ്റത്ത് എത്തിയിരിക്കുന്നു എന്നാണ്. ഒപ്റ്റിക്കൽ അബ്സോർബൻസ് ഡിറ്റക്ടറുകൾക്ക് (UV-vis ഈ സാഹചര്യത്തിൽ), അനലൈറ്റ് സാന്ദ്രത വളരെ കൂടുതലായിരിക്കുമ്പോൾ, അനലിറ്റ് ഈ ഡിറ്റക്ടർ സെല്ലിലൂടെ കടന്നുപോകുന്ന പ്രകാശത്തിന്റെ ഭൂരിഭാഗവും ആഗിരണം ചെയ്യുന്നു. സ്‌ട്രേ ലൈറ്റ്, "ഡാർക്ക് കറന്റ്" എന്നിങ്ങനെയുള്ള ശബ്ദത്തിന്റെ വിവിധ സ്രോതസ്സുകളാൽ സ്വാധീനിക്കപ്പെടുന്നു, ഇത് സിഗ്നലിനെ കാഴ്ചയിൽ വളരെ "അവ്യക്തവും" വിശകലന കേന്ദ്രീകരണത്തിൽ നിന്ന് സ്വതന്ത്രവുമാക്കുന്നു.ഇത് സംഭവിക്കുമ്പോൾ, അനലിറ്റിന്റെ ഇഞ്ചക്ഷൻ വോളിയം കുറയ്ക്കുന്നതിലൂടെ പ്രശ്നം എളുപ്പത്തിൽ പരിഹരിക്കാനാകും - കുത്തിവയ്പ്പിന്റെ അളവ് കുറയ്ക്കുക, സാമ്പിൾ നേർപ്പിക്കുക, അല്ലെങ്കിൽ രണ്ടും.
ക്രോമാറ്റോഗ്രാഫി സ്കൂളിൽ, CAMBLE- ലെ അനലിറ്റ് സാന്ദ്രതയുടെ ഇൻഡിക്കേറ്ററായി ഞങ്ങൾ ഡിറ്റക്ടർ സിഗ്നൽ (അതായത്, y- ആക്സിസ് ഉപയോഗിക്കുന്നു), ഇത് സീറോഗ്രാം മുതൽ ഒരു ക്രോമാറ്റം കാണുന്നത്, ഇത് ഒരു നെഗറ്റീവ് വിശകലന കേന്ദ്രീകരണത്തെ സൂചിപ്പിക്കുന്നു. , യുവി-റൈറ്റ്).
ഈ സാഹചര്യത്തിൽ, നെഗറ്റീവായ പീക്ക് എന്നതുകൊണ്ട് അർത്ഥമാക്കുന്നത് കോളത്തിൽ നിന്ന് പുറത്തേക്ക് വരുന്ന തന്മാത്രകൾ പീക്കിന് മുമ്പും ശേഷവും മൊബൈൽ ഘട്ടത്തേക്കാൾ കുറച്ച് പ്രകാശം ആഗിരണം ചെയ്യുന്നു എന്നാണ്. ഉദാഹരണത്തിന്, താരതമ്യേന കുറഞ്ഞ ഡിറ്റക്ഷൻ തരംഗദൈർഘ്യങ്ങളും (<230 nm) മൊബൈൽ ഫേസ് അഡിറ്റീവുകളും ഉപയോഗിക്കുമ്പോൾ ഇത് സംഭവിക്കാം. ഒരു കാലിബ്രേഷൻ കർവ് തയ്യാറാക്കുന്നതിനും കൃത്യമായ അളവ് വിവരങ്ങൾ നേടുന്നതിനും നിങ്ങൾക്ക് യഥാർത്ഥത്തിൽ നെഗറ്റീവ് പീക്കുകൾ ഉപയോഗിക്കാൻ കഴിയും, അതിനാൽ അവ സ്വയം ഒഴിവാക്കാൻ അടിസ്ഥാന കാരണങ്ങളൊന്നുമില്ല (ഈ രീതിയെ ചിലപ്പോൾ "പരോക്ഷ UV കണ്ടെത്തൽ" എന്ന് വിളിക്കാറുണ്ട്) (13). എന്നിരുന്നാലും, നെഗറ്റീവ് കൊടുമുടികൾ പൂർണ്ണമായും ഒഴിവാക്കാൻ ഞങ്ങൾ ആഗ്രഹിക്കുന്നുവെങ്കിൽ, ആഗിരണം ചെയ്യുന്നതിലും, വ്യത്യസ്ത തരംഗങ്ങൾ കണ്ടെത്തുന്നതാണ് നല്ലത്. മൊബൈൽ ഘട്ടത്തിന്റെ ഘടന, അതിനാൽ അവ വിശകലനങ്ങളേക്കാൾ കുറഞ്ഞ പ്രകാശം ആഗിരണം ചെയ്യുന്നു.
റിഫ്രാക്റ്റീവ് ഇൻഡക്സ് (RI) ഡിറ്റക്ഷൻ ഉപയോഗിക്കുമ്പോൾ നെഗറ്റീവ് പീക്കുകൾ ദൃശ്യമാകാം, സാമ്പിളിലെ അനലൈറ്റ് ഒഴികെയുള്ള ഘടകങ്ങളുടെ റിഫ്രാക്റ്റീവ് സൂചിക, സോൾവെന്റ് മാട്രിക്സ്, മൊബൈൽ ഫേസിന്റെ റിഫ്രാക്റ്റീവ് ഇൻഡക്സിൽ നിന്ന് വ്യത്യസ്തമാണ്. യുവി-വിസ് ഡിറ്റക്ഷനിലും ഇത് സംഭവിക്കുന്നു, എന്നാൽ ഈ പ്രഭാവം സാമ്പിൾ സൂക്ഷ്മമായി പൊരുത്തപ്പെടുന്നു. മൊബൈൽ ഘട്ടത്തിലേക്കുള്ള മാട്രിക്സ്.
LC ട്രബിൾഷൂട്ടിംഗിന്റെ അടിസ്ഥാന വിഷയത്തെക്കുറിച്ചുള്ള മൂന്നാം ഭാഗത്തിൽ, നിരീക്ഷിച്ച പീക്ക് ആകൃതി പ്രതീക്ഷിച്ചതോ സാധാരണ പീക്ക് ആകൃതിയിൽ നിന്ന് വ്യത്യസ്തമോ ആയ സാഹചര്യങ്ങൾ ഞാൻ ചർച്ച ചെയ്തു. അത്തരം പ്രശ്നങ്ങളുടെ ഫലപ്രദമായ ട്രബിൾഷൂട്ടിംഗ് ആരംഭിക്കുന്നത് പ്രതീക്ഷിക്കുന്ന പീക്ക് ആകൃതികളെക്കുറിച്ചുള്ള അറിവോടെയാണ് (സിദ്ധാന്തത്തിന്റെ അടിസ്ഥാനത്തിലോ നിലവിലുള്ള രീതികളിലുള്ള മുൻ പരിചയത്തിലോ), അതിനാൽ ഈ പ്രതീക്ഷകളിൽ നിന്നുള്ള വ്യതിയാനങ്ങൾ വ്യക്തമാണ്. ഞാൻ പലപ്പോഴും കാണുന്ന കാരണങ്ങൾ. ഈ വിശദാംശങ്ങൾ അറിയുന്നത് ട്രബിൾഷൂട്ടിംഗ് ആരംഭിക്കാൻ ഒരു നല്ല സ്ഥലം നൽകുന്നു, പക്ഷേ എല്ലാ സാധ്യതകളും ഉൾക്കൊള്ളുന്നില്ല. കാരണങ്ങളുടെയും പരിഹാരങ്ങളുടെയും കൂടുതൽ ആഴത്തിലുള്ള പട്ടികയിൽ താൽപ്പര്യമുള്ള വായനക്കാർക്ക് LCGC "LC ട്രബിൾഷൂട്ടിംഗ് ഗൈഡ്" വാൾ ചാർട്ട് റഫർ ചെയ്യാം.
(4) LCGC "LC ട്രബിൾഷൂട്ടിംഗ് ഗൈഡ്" വാൾ ചാർട്ട്.https://www.chromatographyonline.com/view/troubleshooting-wallchart (2021).
(6) എ. ഫെലിംഗർ, ഡാറ്റാ അനാലിസിസ് ആൻഡ് സിഗ്നൽ പ്രോസസ്സിംഗ് ഇൻ ക്രോമാറ്റോഗ്രഫി (എൽസെവിയർ, ന്യൂയോർക്ക്, NY, 1998), പേജ്. 43-96.
(8) വഹാബ് MF, ദാസ്ഗുപ്ത PK, Kadjo AF, ആംസ്ട്രോങ് DW, Anal.Chim.Journal.Rev.907, 31-44 (2016).https://doi.org/10.1016/j.aca.2015.11.043.