Шим тэжээлийг олж авах, түгээх нь шавжны идэш тэжээл, амьдралын түүхийн шинж чанаруудыг нэгтгэдэг. Амьдралын янз бүрийн үе шатанд тодорхой шим тэжээлийн дутагдлыг нөхөхийн тулд шавжнууд эдгээр шим тэжээлийг нэмэлт тэжээлээр, жишээлбэл, сээр нуруутан амьтдын шүүрлээр хооллох замаар олж авдаг. Тиймээс шумуул нь Anopheles arabians, nutrianis, шумуулуудыг шаарддаг. бодисын солилцоо болон нөхөн үржихүйн аль алинд нь.Энэ судалгааны зорилго нь Ан. Үхрийн шээсэнд шим тэжээл авахын тулд arabiensis өдөөх нь амьдралын түүхийн шинж чанарыг сайжруулдаг.
Аюулгүй эсэхийг шалгаарай.Арабиенсис нь шинэхэн, 24, 72, 168 цагийн настай үхрийн шээсний үнэрт татагдаж, гэрийн тэжээвэр амьтдыг хайж, цусаар хооллодог (цусны дараах 48 цагийн дараа) эмүүдийг Y хэлбэрийн олфактометрээр хэмжиж, хээлтэй эмэнд химийн шинжилгээ хийлгэж, самнах химийн шинжилгээ хийлгэсэн. Бүх дөрвөн насны үнээний шээсэнд агуулагдах био идэвхит нэгдлүүдийг тодорхойлоход ашигладаг. Био идэвхит нэгдлүүдийн нийлэг хольцыг Y-хоолой болон хээрийн туршилтаар үнэлэв. Үхрийн шээс болон түүний гол азот агуулсан мочевиныг хумхаа өвчний тээгчийг нэмэлт тэжээл болгон судлахын тулд эмэгтэйчүүдийн шээсний хэмжээ, амьдралын түүхийн шинж чанарыг хэмжсэн. шингэсэн мочевиныг үнэлэв. Тэжээлийн дараа эмэгчин амьд үлдэх, уясан нислэг, үржих чадварыг үнэлэв.
Гэрийн тэжээвэр амьтдын цус, тэжээлийг эрэлхийл. Лабораторийн болон хээрийн судалгаагаар арабууд үхрийн шинэхэн, хөгширсөн шээсний байгалийн болон синтетик үнэрт татагддаг байв. Жирэмсэн эмэгтэйчүүд үржлийн газарт үхрийн шээсний хариу урвалд хайхрамжгүй ханддаг байв. Хост хайх, цус сорогч эмэгтэйчүүд үхрийн шээс, мочевиныг амьдралынхаа бүх үйл ажиллагааны дагуу идэвхтэй шингээж авдаг. нислэг, амьд үлдэх, үржихүйн физиологийн төлөв байдал.
Амьдралын түүхийн шинж чанарыг сайжруулахын тулд үхрийн шээсийг Anopheles arabinis олж авах, хуваарилах. Үхрийн шээсийг нэмэлтээр хооллох нь өдөр тутмын оршин тогтнох чадвар, векторын нягтыг нэмэгдүүлэх замаар векторын багтаамжийг шууд бусаар, нислэгийн үйл ажиллагааг өөрчлөх замаар шууд бусаар нөлөөлдөг тул ирээдүйн загварт анхаарч үзэх хэрэгтэй.
Шим тэжээлийг олж авах, түгээх нь шавжны идэш тэжээл, амьдралын түүхийн шинж чанаруудыг нэгтгэдэг [1,2,3]. Шавжнууд нь хүнсний олдоц, шим тэжээлийн хэрэгцээнд тулгуурлан хоол хүнс сонгох, олж авах, нөхөн тэжээл өгөх чадвартай байдаг [1, 3]. Шим тэжээлийн хуваарилалт нь амьдралын түүхийн үйл явцаас хамаардаг бөгөөд хоол тэжээлийн янз бүрийн үе шатанд хоол тэжээлийн чанар, тоо хэмжээний өөр өөр шаардлагад хүргэж болзошгүй юм. Шавжнууд тодорхой шим тэжээлийн дутагдлын улмаас эдгээр шим тэжээлийг шавар, сээр нуруутан амьтдын янз бүрийн ялгадас, шүүрэл, сэг зэм гэх мэт нэмэлт тэжээлээр олж авах боломжтой. Энэ үйл явц нь шалбааг [2]. Хэдийгээр эрвээхэй, эрвээхэйний төрөл бүрийн төрлийг голчлон тайлбарласан боловч усалгааны нүхнүүд нь бусад төрлийн тэжээл, тэжээлд ихээхэн нөлөө үзүүлдэг. эрүүл мэнд болон бусад амьдралын түүхийн шинж чанарууд [2, 4, 5, 6], 7]. Хумхаа шумуул Anopheles gambiae sensu lato (sl) нь "хоол тэжээлийн дутагдалтай" насанд хүрсэн [8] байдлаар гарч ирдэг тул усалгаа нь түүний амьдралын түүхэнд чухал үүрэг гүйцэтгэдэг байж болох ч энэ зан үйл нь тэжээллэг чанарыг нэмэгдүүлэхэд чухал ач холбогдолтой тээврийн хэрэгслийн хэрэглээг орхигдуулсаар байна. Энэ нь эпидемиологийн чухал үр дагаварт хүргэж болзошгүй тул анхаарал хандуулах хэрэгтэй.
Нас бие гүйцсэн эм Anopheles шумуулын авгалдайн үеийн илчлэгийн нөөц бага, цусны хоолыг үр ашиггүй ашигладаг зэргээс шалтгаалан азотын хэрэглээ хязгаарлагдмал байдаг [9].Эмэгтэй Ann.gambiae sl ихэвчлэн нэмэлт цусны хоолоор үүнийг нөхдөг [10, 11], улмаар олон хүнийг шумуул өвчнөөр өвчлөх эрсдэлтэй болгодог. махчин амьтан. Эсвэл шумуул нь дасан зохицох чадвар, нислэгийн маневрлах чадварыг сайжруулдаг азотын нэгдлүүдийг олж авахын тулд сээр нуруутан амьтдын ялгадсыг нэмэлт тэжээлээр тэжээж болно гэдгийг бусад шавжнууд [2] харуулж байна. Үүнтэй холбогдуулан Ан.Гамби, Арабын иж бүрдэл, шинэхэн шээсний иж бүрдэл доторх ах дүүгийн аль нэг зүйлийн хүчтэй бөгөөд тодорхой татагдаж байгааг харуулж байна. [12,13,14], сонирхолтой юм. Anopheles arabinis нь тэжээвэр амьтнаа илүүд үздэг бөгөөд үхэртэй нийлж, иддэгээрээ алдартай. Үхрийн шээс нь азотын нэгдлээр баялаг нөөц бөгөөд мочевин нь шинэ шээсний нийт азотын 50-95%-ийг эзэлдэг [15]. Эдгээр нөөц нь азотын нэгдлүүдийн нарийн төвөгтэй байдлыг 24 цагийн дотор багасгахад тусалдаг [15].Органик азотын бууралттай холбоотой аммиакийн хэмжээ хурдацтай нэмэгдэхийн хэрээр шүлтлэг бичил биетүүд (ихэнх нь шумуулд хортой нэгдлүүд үүсгэдэг) ургадаг [15] бөгөөд энэ нь эмэгтэй хүн байж болох юм. 14].
Энэхүү судалгаанд эзэн болон цусаар тэжээгддэг анусыг хайсан. Анхны гонадотропины мөчлөгийн үеэр arabiensis-ийг шээс холих замаар азотын нэгдлүүд, тэр дундаа мочевиныг олж авсан эсэхийг үнэлэв. Дараа нь эм шумуул энэ боломжит шим тэжээлийн нөөцийг хэрхэн хуваарилж, нөхөн үржихүй, нөхөн үржихүйн нөхөн төлжилтийг сайжруулах зорилгоор хэд хэдэн туршилт хийсэн. Эдгээр нь тэжээгч болон цусаар тэжээгддэг үхрийн шээсийг үнэлдэг. Энэхүү боломжит тэжээлийн нөөцийг хайж олохдоо arabiensis нь ажиглагдсан ялгаатай сонирхол татахуйц химийн хамаарлыг олж илрүүлсэн. 24 цагийн настай шээсэнд тодорхойлогдсон дэгдэмхий органик нэгдлүүдийн (VOCs) нийлэг үнэрийн хольцууд, хөдөлмөрийн хээрийн нөхцөлд илүү нягт нямбай үр дүнг гаргаж авсан. физиологийн янз бүрийн төлөв байдалд үхрийн шээсний үнэрийн нөлөө. шумуул татах.Гаруулсан үр дүн нь Ан. arabiensis нь амьдралын түүхийн шинж чанарт нөлөөлөхийн тулд сээр нуруутан амьтдын шээсэнд агуулагдах азотын нэгдлүүдийг олж авч, түгээдэг. Эдгээр үр дүнг эпидемиологийн болзошгүй үр дагавар, тэдгээрийг векторын тандалт, хяналтад хэрхэн ашиглах талаар авч үзнэ.
Anopheles arabicans (Dongola омог) нь 25 ± 2 ° C, 65 ± 5% RH, 12:12 цагийн гэрэл: харанхуй мөчлөгт хадгалагдсан. Авгалдайг нэрмэл усаар дүүргэсэн хуванцар саванд (20 см × 18 см × 7 см) өсгөж, Tetramin® загасны хоолоор тэжээсэн. 30 мл-ийн аяганд (Nolato Hertila, Åstorp, SE) хийж, дараа нь насанд хүрэгсэд гарч ирэхийг зөвшөөрөхийн тулд Bugdorm торонд (30 см × 30 см × 30 см; MegaView Science, Тайчунг, Тайвань) шилжүүлэн суулгана. Насанд хүрэгчдэд 10% сахарозын уусмалыг 10%-ийн сахарозын уусмалаар хооллолтоос хойш 4 хоногийн дараа (эмэгтэй хооллолт хийснээс хойш санал болгов) туршилтын өмнөхөн, эсвэл доор тайлбарласны дагуу туршилтын өмнө нэрмэл усаар шөнөжин өлсгөсөн. Нислэгийн хоолойн туршилтанд ашигласан эмэгчинүүдийг зөвхөн 4-6 цагийн турш усаар өлөн байлгасан. Дараагийн био шинжилгээнд цус сорох шумуул бэлтгэхийн тулд 4 dpe эмэгчинүүдэд дефибротик хонины цус (Håtek, тэжээлийн мембран) (BroHet, membran) ашиглан өгсөн. Discovery Workshops, Акрингтон, Их Британи). Дараа нь бүрэн бөглөрсөн эмэгчинүүдийг тус тусад нь торонд шилжүүлж, доор тайлбарласны дагуу шууд хооллолт, эсвэл доор тайлбарласан туршилт хийхээс 3 хоногийн өмнө 10%-ийн сахароз ad libitum өгсөн. Сүүлчийн эмэгчинүүдийг нислэгийн хоолойн био шинжилгээнд ашиглаж, лабораторид шилжүүлсэн бөгөөд дараа нь нэрмэл устай туршилтыг 46i цагийн өмнө хийсэн.
Арабын насанд хүрсэн эмэгтэйн шээс, мочевины хэрэглээг тодорхойлохын тулд тэжээлийн шинжилгээг ашигласан. Хост хайж буй болон цусаар хооллож буй эмэгтэйчүүдэд 1%-ийн шингэрүүлсэн шинэ болон хөгширсөн үхрийн шээс, янз бүрийн концентрацитай мочевин, хоёр хяналтын (10% сахароз, ус) агуулсан хоолны дэглэмийг 48 цагийн турш өгсөн. Үүнээс гадна хүнсний будагч бодис (1 мг 1 мг АСС) агуулсан. 2650-17-1; Sigma-Aldrich, Stockholm, SE) хоолны дэглэмд нэмж, 250 μl микроцентрифугийн хоолойд 4 × 4 матрицад нийлүүлсэн (Axygen Scientific, Union City, CA, US; Зураг 1A) Ирмэг хүртэл дүүргэх (~300-ийн өнгөний нөлөөнөөс зайлсхийх). Том Петрийн аяганд 10 шумуул (12 см диаметртэй, 6 см өндөр; Semadeni, Ostermundigen, CH; Зураг 1A) бүрэн харанхуйд 25 ± 2 см ° C, 65 ± 5% харьцангуй чийгшилтэй. Эдгээр туршилтыг 5-10 удаа давтан хийсэн. Шумуулыг хооллолтын дараа 0 ° C-д шинжилгээнд оруулав.
Anopheles arabianus-ийн эзэн болон цус сорогч эмэгчин шингэсэн үхрийн шээс, мочевин байгаа эсэхийг шалгаарай. Хооллох туршилтанд (A) эм шумуулыг үхрийн шинэ болон хөгширсөн шээс, янз бүрийн концентраци мочевин, сахароз (10%), нэрмэл ус (H2O) агуулсан хоолоор хангасан. Шинжилгээнд хамрагдсан. Ижил хайж буй эмэгтэйчүүд 72 цагийн үнээний шээсийг 168 цагийн үнээний шээс (B) -аас бага шингээж авсныг анхаарна уу. Шээсний нийт азотын дундаж агууламж (± стандарт хазайлт) нь дотогшлогддог. Хост хайх (D, F) ба цус сорох (E, G) эмэгчин нь мочевин (E-ээс хамааралтай эрэгтэй) эзэлхүүнтэй. өөр өөр үсгийн нэрүүд бие биенээсээ эрс ялгаатай байсан (Tukey's post hoc шинжилгээ ашиглан нэг талын ANOVA; p < 0.05). Алдааны мөр нь дундаж (BE) стандарт алдааг илэрхийлнэ. Шулуун тасархай шугам нь лог-шугаман регрессийн шугамыг (F, G) илэрхийлнэ.
Шингээсэн хоолоо гаргахын тулд шумуулыг тус тусад нь 230 мкл нэрмэл ус агуулсан 1.5 мл микроцентрифугийн хоолойд хийж, эд эсийг нэг удаагийн хорхой, утасгүй мотор (VWR International, Lund, SE) ашиглан тасалж, дараа нь 10 кrpm-т центрифуг хийж, 10 минутын турш центрифуг (хэт наалтыг 20 мкл) болгон шилжүүлэв. 96 цооногтой бичил хавтан (Сигма-Алдрих) ба шингээлтийг (λ620) спектрофотометрт суурилсан микроплит уншигч (SPECTROStar® Nano, BMG Labtech, Ortenberg, DE) nm ашиглан тодорхойлсон. Эсвэл шумуулыг 1 мл нэрмэл усанд нунтаглаж, 900 μ-ийн спектрометрт шилжүүлнэ. шинжилгээ (λ 620 нм; UV 1800, Shimadzu, Kista, SE). Хоолны хэрэглээг тодорхойлохын тулд 0.2 мкл-2.4 мкл 1 мг мл-1 ксилол цианид авахын тулд цуваа шингэрүүлэлтийн стандарт муруйг бэлтгэсэн. Дараа нь хүнсний будаг бүрийн оптик нягтыг ашиглан мэдэгдэж буй будгийн агууламжийг тодорхойлсон.
Эзлэхүүний өгөгдөлд нэг талын дисперсийн шинжилгээ (ANOVA) ашиглан дүн шинжилгээ хийж, дараа нь Tukey-ийн дараах хосоор харьцуулсан (JMP Pro, v14.0.0, SAS Institute Inc., Cary, NC, US, 1989–2007). Шугаман регрессийн шинжилгээнд цусан дахь мочевины хэрэглээ болон цусан дахь шүвтэрний хариу урвалын концентрацаас хамааралтайг тодорхойлсон. (Mac-д зориулсан GraphPad Prism v8.0.0, GraphPad Програм хангамж, Сан Диего, Калифорниа, АНУ).
Насны бүлэг тус бүрээс ойролцоогоор 20 мкл шээсний дээжийг Chromosorb® W/AW (10 мг 80/100 торон, Sigma Aldrich) дээр холбож, цагаан тугалга капсулд (8 мм × 5 мм) капсулд хийсэн. Капсулыг (CHNS/O2 анализатор) шатаах камерт оруулсан. Scientific, Waltham, MA, US) үйлдвэрлэгчийн протоколын дагуу шинэ болон хуучин шээсэнд агуулагдах азотын агууламжийг тодорхойлох. Нийт азотыг (g N l-1) стандарт болгон ашигласан мочевины мэдэгдэж буй концентрацид үндэслэн хэмжсэн.
Хоолны дэглэм нь эзэн хайж, цус сорогч эмэгтэйчүүдийн амьд үлдэхэд хэрхэн нөлөөлж байгааг үнэлэхийн тулд шумуулыг нэг бүрчлэн том Петрийн аяганд (12 см диаметртэй, 6 см өндөр; Семадени) байрлуулсан бөгөөд таган дээр нь торон бүрээстэй нүхтэй (3 см диаметртэй) агааржуулалт, хоол хүнс нийлүүлэхэд зориулагдсан. шээс, дөрвөн концентраци мочевин, хоёр хяналт, 10% сахароз ба ус. Хоолны дэглэм бүрийг шүдний тампон дээр (DAB Dental AB, Upplands Väsby, SE) соруулж, 5 мл-ийн тариурт (Thermo Fisher Scientific, Gothenburg, SE), бүлүүрийг авч, дээд талд нь байрлуулна. 1).1А).Өдөр бүр хоолны дэглэмээ өөрчил.Дээр дурдсанчлан лабораторийг сахих.Амьд үлдсэн шумуулыг өдөрт 2 удаа тоолж байхад үхсэн шумуулыг сүүлчийн шумуул үхтэл (нэг эмчилгээнд n=40) хаясан. Янз бүрийн хоолоор хооллосон шумуулын эсэн мэнд үлдэхэд Каплан-Мейерийн хоолны дэглэм ба амьд үлдсэн логсоны тархалтын харьцуулалтыг ашиглан статистик дүн шинжилгээ хийсэн. (IBM SPSS Statistics 24.0.0.0).
Attisano нар.[17] дээр суурилсан захиалгат шумуул нисдэг тээрэм, урд болон хойд хавтангүй 5 мм зузаан тунгалаг нийлэг хавтангаар (10 см өргөн x 10 см урт х 10 см өндөр) хийсэн (Зураг 3: дээд). зүү нь 9 см зайтай хос неодим соронзны хооронд өлгөөтэй байна. Ижил материалаар хийсэн хэвтээ хоолой (6.5 см L) босоо хоолойг хоёр хувааж, хөнгөн цагаан тугалган цаасны жижиг хэсгийг гэрлийг таслах дохио болгон зөөвөрлөсөн гар үүсгэв.
24 цагийн турш өлсгөлөнд нэрвэгдсэн эмэгчингүүдэд хязгаарлалт хийхээс 30 минутын өмнө дээрх хоолны дэглэмийг өгсөн. Бүрэн хооллосон эм шумуулыг тус бүрээр нь мөсөн дээр 2-3 минутын турш мэдээгүйжүүлж, лаагаар шавьжны тээглүүрт бэхэлсэн (Joel Svenssons Vaxfabrik AB, Munka Ljungby, Tizon of the Horseital) хоолой.Нисдэг тээрэм.Нислэг бүрийн эргэлтийг захиалгаар хийсэн өгөгдөл бүртгэгчээр бүртгэж, дараа нь PC-Lab 2000™ программ хангамж (v4.01; Velleman, Gavere, BE) ашиглан хадгалж, үзүүлэв. Нислэгийн тээрэмийг уур амьсгалын зохицуулалттай өрөөнд байрлуулсан (12 цаг:12 цаг, гэрэл: харанхуй, R ±5 °C, ±5%).
Нислэгийн үйл ажиллагааны хэв маягийг дүрслэн харуулахын тулд 24 цагийн турш ниссэн нийт зай (м) болон дараалсан нислэгийн нийт үйл ажиллагааны тоог нэг цагт тооцоолсон. Нэмж дурдахад эмэгтэй хүний ​​ниссэн дундаж зайг эмчилгээний явцад харьцуулж, нэг талын ANOVA болон Tukey-ийн дараах шинжилгээг (JMP Pro, v14.0.0) ашиглан шинжилсэн. бие даасан хүчин зүйл.Үүнээс гадна тойргийн дундаж тоог 10 минутын алхмаар тооцдог.
An.arabiensis-ийн нөхөн үржихүйн үйл ажиллагаанд хоолны дэглэмийн нөлөөллийг үнэлэхийн тулд зургаан эм (4 dpe) цус цуглуулсны дараа шууд Бугдормын торонд (30 см × 30 см × 30 см) шилжүүлж, дээр дурдсанчлан туршилтын хоолны дэглэмийг 48 цагийн турш хангасан. Дараа нь хоолны дэглэмийг хасч, өндөглөдөг аяганд (30 мл; Нолато Гертила 20 мл) 3 дахь өдөр дуссан усаар дүүргэв. 48 цаг, 24 цаг тутамд өөрчлөгдөнө. Хоолны дэглэм бүрийг 20-50 удаа давтана. Туршилтын тор бүрт өндөг тоолж, бүртгэв. Өндөгний дэд дээжийг Dialux-20 микроскоп (DM10DEzt, Wenst, Wenst0) ашиглан бие даасан өндөгний дундаж хэмжээ, уртын өөрчлөлтийг (н ≥ 200 хоолны дэглэм) үнэлэхэд ашигласан. Leica камер (DFC) 320 R2; Leica Microsystems Ltd., DE).Үлдсэн өндөгийг уур амьсгалын хяналттай өрөөнд стандарт үржүүлгийн нөхцөлд 24 цагийн турш байлгаж, дээр дурдсанчлан саяхан гарч ирсэн 1-р үеийн авгалдайн дэд дээжийг (хоолны дэглэм тутамд n ≥ 200) хэмжсэн. Өндөгний тоо, хэмжээг нэг өндөг, NOVA-ийн аргаар харьцуулсан. hoc шинжилгээ (JMP Pro, v14.0.0, SAS Institute Inc.).
Шинэхэн (түүвэр авсны дараа 1 цагийн дараа), 24 цаг, 72 цаг, 168 цагийн настай шээсний дэгдэмхий бодисыг Арси үүлдрийн Зебу үхэрээс цуглуулсан дээжээс цуглуулсан. Тохиромжтой болгох үүднээс өглөө эрт үхэр саравчинд байх үед шээсний дээж авсан. 3 литрийн багтаамжтай таглаатай полиамид саванд (Toppits Cofresco, Frischhalteprodukte GmbH and Co., Minden, DE) шилжсэн. Винил хлоридын хуванцар саванд хийнэ. Үхрийн шээсний дээж тус бүрээс толгойн хөндийн дэгдэмхий бодисыг шууд (шинэхэн) эсвэл боловсорч 7,2,8 цагийн температурт цуглуулсан. шээсний дээж бүр нь насны бүлэг тус бүрийн төлөөлөл байв.
Толгойн зайд дэгдэмхий бодисыг цуглуулахдаа идэвхижүүлсэн нүүрсээр шүүсэн хийн урсгалыг (100 мл мин-1) полиамид уутаар шингээх багана руу 2.5 цагийн турш эргэлдүүлэхийн тулд мембран вакуум насос (KNF Neuberger, Freiburg, DE) ашиглан битүү хэлхээтэй системийг ашигласан. баганыг шилэн хөвөн залгууруудын хооронд 35 мг Porapak Q (50/80 торон; Waters Associates, Милфорд, АНУ) агуулсан Teflon хоолойгоор (5.5 см х 3 мм хэмжээтэй) хийсэн. Ашиглахын өмнө баганыг 1 мл дахин нэрсэн n-hexane (Merck, Darmstadt) ба pure 9 ml 9 мл-ээр угаана. GC зэрэглэл, Сигма Олдрих).Сонгондсон дэгдэмхий бодисыг 400 мкл пентанаар шүүсэн. Толгойн зайны цуглуулгуудыг нэгтгэж, цаашдын шинжилгээнд ашиглах хүртэл -20°С-д хадгалсан.
Шинэхэн, 24, 72, 168 цагийн настай шээснээс цуглуулсан хост хайгч болон цус иддэг An.Headspace дэгдэмхий хандын зан үйлийн хариуг Арабидопсисын шумуулаас авсан дэгдэмхий хандыг шулуун шилэн хоолойн олфактометр [18] ашиглан шинжилсэн. гэр хайх үйл ажиллагаа.Араб [19].Шилэн хоолойн олфактометр (80 см × 9.5 см id) дээрээс 3 ± 1 lx улаан гэрлээр гэрэлтүүлэв. Нүүрсийг шүүж чийгшүүлсэн агаарын урсгал (25 ± 2 ° C, 65 ± 2% харьцангуй чийгшил) нь био шинжилгээнд 3 см-ийн цуврал нэвтрүүлсэн. зэвэрдэггүй ган торон тор, ламинар урсгал болон жигд чавганы бүтцийг бий болгодог. Олфактометрийн салхины үзүүрт 5 см-ийн ороомогоос дүүжлэгдсэн шүдний тампон түгээгч (4 см × 1 см; L: D; DAB Dental AB), өдөөгчийг 5 минут тутамд өөрчилдөг. Шинжилгээнд 10 мкл, 1 толгой тус бүрээс шингэрүүлсэн хандыг ашигласан. өдөөлт.Хяналтын хэрэгсэл болгон тэнцүү хэмжээний пентаныг ашигласан.Туршилт эхлэхээс 2-3 цагийн өмнө бие даасан эзэн хайж байгаа эсвэл цус сордог шумуулуудыг тус тусад нь ялгах торонд байрлуулж, суллах торыг олфактометрийн салхины доод талд байрлуулж, шумуулыг 1 минутын турш дасан зохицож, дараа нь цэврүүтэх хавхлагыг нээв. хяналтыг гаргаснаас хойш 5 минутын дотор эх үүсвэрт хүрсэн шумуулын эзлэх хувь хэмжээгээр шинжилсэн. Толгойн зайд дэгдэмхий бодисын ханд, хяналт тус бүрийг дор хаяж 30 удаа давтаж, аль нэг өдрийн нөлөөллөөс зайлсхийхийн тулд ижил тооны эмчилгээ, хяналтыг туршилтын өдөр бүр туршсан. Хост болон цусаар тэжээгддэг хүмүүсийн хариуг логистикийн хариултаар эрэлхийлэв. сондгой харьцааны хос хосолсон харьцуулалт (JMP Pro, v14.0.0, SAS Institute Inc.).
Ан-ийн үржлийн хариу үйлдэл. Шинэхэн болон хөгширсөн үхрийн шээсний толгойн хөндийн хандыг Бугдормын торонд (30 см × 30 см × 30 см; MegaView Science) шинжилэв. 20 мл нэрмэл усаар дүүргэсэн хуванцар аяганд (30 мл; Нолато Хертила) түрсээ шахаж, үржүүлгийн субстратын эсрэг талд 2 см байрлуулна. Тус тусад нь. Эмчилгээний аяганд толгойн зай тус бүрээс 10 мкл хандыг 1:10 харьцаагаар шингэлж тохируулсан. Хяналтын аягыг тохируулахын тулд тэнцүү хэмжээний пентаныг ашигласан. Туршилт бүрийн хооронд эмчилгээний болон хяналтын аягануудыг сольж, байрлалын нөлөөг хянах. Цусаар хооллосон 10 эмэгчнийг туршилтын торонд ZT 9-11 цагийн дараа гаргаж, өндөгний тооллогыг 4 цагийн дараа томъёолсон. өндөглөлтийн индекс нь: (эмчилгээний аяганд тавьсан өндөгний тоо – хяналтын аяганд тавьсан өндөгний тоо)/(өндөгний нийт тоо). Эмчилгээ бүрийг 8 удаа давтан хийсэн.
Эмэгтэй An.arabiensis-ийн хийн хроматограф болон электрон антенны загвар илрүүлэх (GC-EAD) шинжилгээг өмнө нь тайлбарласны дагуу гүйцэтгэсэн [20]. Товчхондоо, шинэ толгойн зайны дэгдэмхий хандыг HP-520,0 мм баганаар тоноглогдсон Agilent Technologies 6890 GC (Санта Клара, CA, АНУ) ашиглан тусгаарласан. мкм хальс зузаан, Agilent Technologies). болон хөгшрөлтийн шээс. Устөрөгчийг хөдөлгөөнт фаз болгон 45 см с-1 дундаж шугаман урсгалтай ашигласан. Дээж тус бүрийг (2 мкл) 225 ° C-ийн оролтын температуртай хуваагдалгүй горимд 30 секундын турш тарьсан. GC зуухны температурыг 35 ° C (3 минутын турш барих) -аас 30 ° C (минутаар 301 ° C хүртэл барих) хүртэл програмчилсан. GC ялгаруулагч, 4 psi азотыг нэмж, 1:1-ээр Gerstel 3D/2 бага үхсэн эзэлхүүнтэй хөндлөн (Gerstel, Mülheim, DE) дөл иончлолын детектор болон EAD хооронд хуваасан. EAD-д зориулсан GC хаягдлын хялгасан судсыг Gerstel ODP-2 °C-ийн температуртай шилэн хоолойгоор дамжуулсан. (10 см × 8 мм), нүүрстөрөгчөөр шүүсэн, чийгшүүлсэн агаартай холилдсон (1.5 л мин−1). Антенныг хоолойн гаралтын хэсгээс 0.5 см зайд байрлуулна. Тус бүр шумуул тус бүр нэг хуулбарыг эзэлдэг бөгөөд эзэн хайж буй шумуулын хувьд нас тус бүрийн шээсний дээж дээр дор хаяж гурван давталт хийсэн.
GC-EAD шинжилгээнд антенны хариу урвалыг илрүүлэхийн тулд хосолсон GC ба масс спектрометр (GC-MS; 6890 GC ба 5975 MS; Agilent Technologies) ашиглан шинэ болон хөгширсөн үхрийн шээсний толгойн хөндийн цуглуулгад биоидэвхтэй нэгдлүүдийг тодорхойлох нь GC7-0-д электрон нөлөөллийн ионжуулалтын горимд ажилладаг HPC5-ээр тоноглогдсон. Хөдөлгөөнт фаз болгон гелийг ашигласан UI-аар бүрсэн хайлуулсан цахиурын хялгасан багана (60 м × 0.25 мм дотоод диаметр, 0.25 μм зузаантай) дундаж шугаман урсгалын хурд нь 35 см с-1. 2 мкл дээжийг GCp-E-д үндэслэн тодорхойлсон ижил форсункийн тохиргоо болон зуухны температурыг ашиглан тарьсан. (Kovát индекс) болон массын спектрийг захиалгат номын сан болон NIST14 номын сан (Agilent)-тай харьцуулсан. Тодорхойлсон нэгдлүүдийг жинхэнэ стандартаар (Нэмэлт файл 1: Хүснэгт S2) тариулснаар баталгаажуулсан. Хэмжээ тогтоохын тулд гептил ацетат (10 нг, 99.8% химийн цэвэршилт, стандарт Aldrich)-ийг гадны стандартаар хийсэн.
Дээр дурдсантай ижил олфактометр болон протоколыг ашиглан шинэ болон хөгшрөлтийн шээсэнд агуулагдах био идэвхит нэгдлүүдээс бүрдсэн синтетик үнэрийн хольцын үр нөлөөг үнэлэх. 48 цаг, 72 цаг, 168 цагийн настай шээс (Зураг 5D-G; Нэмэлт файл 1: Хүснэгт S2). Шинжилгээнд 10 мкл 1:100 шингэрүүлсэн бүрэн синтетик хольцыг ашиглана. шумуул. Дараа нь туршилтыг бүрэн хольцын нэг нэгдлүүдийн хасах хольцыг устгасан бүрэн хольц дээр хийнэ. Хост болон цусаар тэжээгддэг Ans.Arab ба синтетик болон хасах хольцын хариултыг нэрлэсэн логистикийн регресс ашиглан шинжилж, дараа нь сондгой харьцааг хосоор нь харьцуулсан (JMP Inc.0, v14).
Үхрийн шээс нь хумхаа өвчний шумуулын амьдрах орчин болж чадах эсэхийг үнэлэхийн тулд дээр дурдсанчлан шинэхэн болон хөгширсөн үхрийн шээсийг цуглуулж, усыг 3 литрийн багтаамжтай хувингаар (100 мл) хийж, тэжээгч өгөөшний саванд хийсэн. (BG-HDT хувилбар; BioGents, Regensburg, DE). Тосгоны бүлгээс 400 м зайд (Силай, Этиоп, 5°53´24´´E, 37°29´24´´E) бэлчээрт 50 м зайд байрлуулсан 10 хавх ба байнгын дулаан, үржүүлгийн газарт үхэр ургуулсангүй. нэг хостын таван хавхыг халаахгүй орхисон. Эмчилгээний газар бүрийг шөнө бүр таван шөнө эргүүлнэ. Янз бүрийн насны шээсээр өгөгдсөн хавханд баригдсан шумуулын тоог логистик регрессийн тусламжтайгаар бета бином тархалттай харьцуулсан (JMP Pro, v14.0.0, SAS Institute Inc.).
Этиоп улсын Ороми мужийн Маки хотын ойролцоох хумхаа өвчний голомттой тосгонд (8° 11′ 08″ N, 38° 81′ 70″ E; Зураг 6A). Судалгааг 8-р сарын дундаас 9-р сарын дунд хооронд жил бүрийн байшин доторх борооны үлдэгдэл борооны өмнө хийсэн. Судалгаанд тосгоны захад байрлах (20-50 м-ийн зайтай) сонгосон (Зураг 6A). Байшинг сонгох шалгуур нь: байшинд ямар ч амьтан орохыг хориглосон, дотор хоол хийх (түлээ эсвэл нүүрс зурах) (наад зах нь туршилтын хугацаанд), мөн хамгийн ихдээ хоёр оршин суугчтай, унтдаг байшингууд. Эмчлэгдсэн шумуулын торны дор. Ёс зүйн зөвшөөрлийг Аддис Абабагийн Их Сургуулийн Байгалийн Шинжлэх Ухааны Факультетийн (CNS-IRB) Байгууллагын судалгааны ёс зүйн хяналтын зөвлөл (IRB/022/2016) Хельсинкийн Дэлхийн Анагаах Ухааны Нийгэмлэгийн Тунхаглалаас тогтоосон удирдамжийн дагуу олгосон. Өрхийн тэргүүн тус бүрээс тухайн орон нутгийн эрүүл мэндийн ажилтнуудаас зөвшилцлийг сунгах үйл явцын бүхэлд нь туслалцаатайгаар авсан. дүүрэг, тойргийн ('kebele') түвшний захиргаа. Туршилтын загвар нь 2 × 2 латин дөрвөлжин дизайны дагуу хийгдсэн бөгөөд эхний шөнө хосолсон байшинд нийлэг хольц болон удирдлагыг хуваарилж, дараагийн туршилтын шөнө байшин хооронд сольсон. Энэ процессыг арав дахин давтсан. Нэмж дурдахад, сонгогдсон таван байшинд шумуулын идэвхжлийг тооцоолохын тулд CDC-ийн эхлэлийг тавьсан. хээрийн туршилтын дунд болон төгсгөлд өдрийн нэгэн зэрэг.
Зургаан биоидэвхтэй нэгдлүүдийг агуулсан синтетик хольцыг гептанд уусгаж (97.0% уусгагч GC агуулгатай, Sigma Aldrich) 140 нг цаг-1-д хөвөн зулын савлагч [20] ашиглан гаргасан. Зулангийн түгээгч нь бүх нэгдлүүдийг 12 цагийн турш тогтмол хувь хэмжээгээр ялгаруулах боломжийг олгосон. Дараагийн туршилтанд гептаныг түдгэлзүүлэх зорилгоор ашигласан. Өвчнийг хянах, урьдчилан сэргийлэх төвүүд (CDC) гэрлийн хавх (John W. Hock Company, Gainesville, FL, US; Зураг 6A). Хавхнуудыг газраас 0.8 – 1 м өндөрт, орны хөлийн ойролцоо өлгөх ба сайн дурын ажилтан шумуулын торонд эмчилгээгүй унтсан бөгөөд 18:00-18:00 цагийн хооронд ажиллаж байжээ. физиологийн төлөв байдал (хоол тэжээлгүй, хооллож, хагас жирэмсэн, жирэмсэн [21] дараа нь полимеразын гинжин урвал (ПГУ) шинжилгээг ашиглан A. gambiae sl гэж тодорхойлогдсон морфологийн төрлийг тодорхойлохын тулд скрининг хийсэн. Цогцолборын гишүүд [23]. Хээрийн судалгаагаар хосолсон байшингуудын урхи барих, татах боломжтой логистик загвар ашиглан шинжилсэн. (Хяналтын эсрэг синтетик хольц) нь тогтмол нөлөөлөл байсан (JMP® 14.0. 0. SAS Institute Inc.) Энд бид магадлалын харьцааны тестээс χ2 ба p-утгуудыг мэдээлж байна.
Аюулгүй эсэхийг үнэлнэ үү.Arabiensis азотын гол эх үүсвэр болох мочевиныг шууд хооллох замаар 48 цагийн дотор тэжээгчийг хайж, цусаар хооллосон эмэгтэйг тэжээх туршилт (Зураг 1А). Хостыг хайж байгаа болон цус сордог эмэгчин хоёулаа бусад хоолны дэглэмээс илүү их хэмжээний ус шингээж авдаг (F = 6,5) 20.15, p < 0.0001 ба F(5,299) = 56.00, p < 0.0001, Зураг 1B,C).Цаашилбал, хост хайж буй эмэгчин 168 цагт шээстэй харьцуулахад 72 цагт бага шээсээр хооллодог (Зураг 1B хоолны дэглэмийг шингээж авдаг). Бусад бүх концентраци болон устай харьцуулахад 2.69 мм-ийн мочевин мэдэгдэхүйц их, харин 10% сахарозоос ялгагдахгүй (F(10,813) = 15.72, p < 0.0001; Зураг 1D). Энэ нь ихэвчлэн хоол хүнсэндээ их хэмжээгээр шингэдэг цусаар хооллодог эмэгтэйчүүдийн хариу урвалаас ялгаатай байв. 10%-иас бага сахароз (F(10,557) = 78.35, p < 0.0001; Зураг 1). Цаашилбал, физиологийн хоёр төлөвийг харьцуулж үзэхэд флеботомижсон эмэгчин нь хамгийн бага концентрацид эзэн хайж буй эмэгчинтэй харьцуулахад илүү их хэмжээний мочевиныг шингээж авсан ба эдгээр эмэгчин нь ижил концентрацитай ижил хэмжээгээр шингэсэн байна. (F(1,953)= 78.82, p < 0.0001; Зураг 1F, G). Мочевин агуулсан хоолны дэглэмийн хэрэглээ нь оновчтой утгатай мэт харагдаж байсан (Зураг 1D,E), физиологийн хоёр төлөвт байгаа эмэгтэйчүүд шингэсэн мочевины хэмжээг бүхэл бүтэн концентрацийн хүрээнд (F, 1, G-ийн графикаар) өөрчлөх боломжтой байв. ).Үүний нэгэн адил шумуул нь шээсэнд агуулагдах азотын хэмжээ шингэсэн хэмжээгээр тусгагдсан байдаг тул шингэсэн шээсний хэмжээг зохицуулах замаар азотын хэрэглээгээ хянадаг бололтой (Зураг 1B, C, B-ийн оруулга).
Шээс, мочевин нь эзэн хайж байгаа болон цус сордог шумуулын амьд үлдэхэд үзүүлэх нөлөөг үнэлэхийн тулд эмэгтэйчүүдийг дөрвөн насны (шинэхэн, 24 цаг, 72 цаг, 168 цагийн дараа) шээсээр хооллож, мочевины янз бүрийн концентраци, түүнчлэн нэрмэл ус, 10% сахарозын шинжилгээгээр хооллосон хооллолт нь хяналттай байсныг харуулсан. хост хайж буй эмэгтэйчүүдийн нийт амьд үлдэхэд чухал нөлөө үзүүлдэг (шээс: χ2 = 108.5, df = 5, p < 0.0001; мочевин: χ2 = 122.8, df = 5, p < 0.0001; Зураг 2B, C) болон цусаар хооллодог эмэгчин (д: f = χ9, p2ur) < 0.0001; мочевин: χ2 = 137.9, df = 5, p < 0.0001; Зураг 2D, E). Бүх туршилтуудад шээс, мочевин, усаар хооллосон эмэгтэйчүүд сахароз болон шинэхэн шээсээр хооллодог эмэгтэйчүүдээс хамаагүй бага байсан. 72 цагийн турш хуучирсан шээсээр хооллосон хүмүүс (p = 0.016) амьд үлдэх магадлал хамгийн багатай (Зураг 2B). Цаашилбал, 135 мМ мочевинээр хооллосон эзэгтэйчүүд усны хяналтаас илүү удаан амьд үлджээ (p <0.04), цэвэр усаар шээсэн эмэгтэйчүүд (Зураг 2B). 24 цагийн шээс илүү удаан хадгалагддаг (p = 0.001 ба p = 0.012; Зураг 2D), харин 72 цагийн шээсээр хооллодог эмэгтэйчүүд богино хугацаанд шинэ шээс болон 24 цагийн настай шээсээр хооллодог хүмүүсээс илүү удаан амьдардаг (p <0.0001 ба p = 0.01-р зураг, f13). mM мочевин, цусаар хооллодог эмэгчин мочевин ба усны бусад концентрациас илүү удаан амьд үлджээ (p <0.013; Зураг 2E).
Үхрийн шээс, мочевинаар хооллож буй эзэн ба цус сорох эм Anopheles arabinis-ийн амьд үлдэх байдал. Био шинжилгээнд (A) эм шумуулыг үхрийн шинэ болон хөгширсөн шээс, янз бүрийн концентрацитай мочевин, сахароз (10%), нэрмэл ус (H2O) агуулсан хоолоор хангасан. Шээс (B, D) ба мочевин (C, E) болон хяналт, сахароз, усаар хооллодог бүх эмэгчин үхэх хүртэл 12 цаг тутамд бүртгэгддэг.
Нислэгийн тээрмийн туршилтаар 24 цагийн турш тодорхойлсон нийт зай, тойргийн тоо нь хост хайгч болон цус сорох шумуулуудын хооронд ялгаатай байсан бөгөөд энэ нь нийт нислэгийн идэвхжил багатай байсан (Зураг 3). Шинэ болон хөгшрөлтийн шээс эсвэл сахароз, усаар хангадаг эзэн хайгч шумуулууд нь нислэгийн хэлбэрийг харуулсан (Зураг 3). Шээсээр хооллодог 24 ба 168 цагийн настай шумуулууд өөр өөр нислэг үйлддэг бөгөөд голчлон өдрийн цагаар амьдардаг байв. Сахароз буюу 72 цагийн шээсээр хангадаг эм шумуулууд 24 цагийн турш идэвхтэй байсан бол усаар хангадаг эмэгчин шумуулууд нь моквитозын дунд үед хамгийн их идэвхжилтэй байжээ. шөнө болон өглөө эрт, харин 72 цагийн настай шээсийг залгисан хүмүүсийн идэвхжил 24 цагийн турш тогтмол буурч байсан (Зураг 3).
Үхрийн шээс, мочевинаар хооллож буй анчин хайгч цус сорох эмэгтэй Anopheles arabinis-ийн нислэгийн гүйцэтгэл. Нислэгийн тээрмийн туршилтанд шинэ болон хөгширсөн үнээний шээс, янз бүрийн концентрацитай мочевин, сахароз (10%), нэрмэл ус (H2O)-аар тэжээгдсэн эм шумуулыг хэвтээ тэнхлэгт уясан. болон цус сорогч (баруун) эмэгчин, 24 цагийн турш хоолны дэглэм бүрийн нэг цагт нислэгийн нийт зай, тоог бүртгэсэн (харанхуй: саарал; цайвар: цагаан). Дундаж зай ба цохилтын дундаж тоог циркадийн үйл ажиллагааны графикийн баруун талд харуулав. Алдааны мөр нь дундаж утгын стандарт алдааг харуулж байна. Статистикийн шинжилгээ текстийг харна уу.
Ерөнхийдөө хост хайж буй эмэгтэйчүүдийн нийт нислэгийн үйл ажиллагаа нь 24 цагийн турш нислэгийн зайтай төстэй загвартай байсан. Нислэгийн дундаж зайд хоол хүнс хэрэглэсэн (F(5, 138) = 28.27, p < 0.0001) ихээхэн нөлөөлсөн ба хост хайж буй эмэгчин 72 цаг илүү урт шээсээр хооллосон (бусад хооллолттой харьцуулахад харьцангуй бага) 0.0001), сахарозоор хооллодог шумуулууд шинэхэн (p = 0.022) болон 24 цагийн настай шээсээр (p = 0.022) хооллодог шумуулуудаас илүү удаан нисдэг. Шээсний хоолны дэглэмээр тодорхойлсон нислэгийн үйл ажиллагааны загвараас ялгаатай нь мочевинаар тэжээгддэг хост хайж буй эмэгчинүүдийн нислэгийн хоёр дахь хугацаанд хагас жилийн хугацаанд нисдэг байв. харанхуй үе шат (Зураг. 3).Үйл ажиллагааны хэв маяг нь ижил төстэй байсан ч гэсэн мочевин тэжээсэн хост хайж буй эм шингэсэн концентраци (F(5, 138) = 1310.91, p <0.0001) хамааран нислэгийн дундаж зай ихээхэн нэмэгдсэн.
Цус сорогч шумуулын нийт нислэгийн идэвхжил нь бүх хоолны дэглэмийн дагуу 24 цагийн турш тогтвортой, тогтвортой байсан бөгөөд харанхуй үеийн хоёрдугаар хагаст усаар хооллосон эмэгчин, мөн шинэхэн, 24 цагийн настай эмэгчинүүдийн шээсний идэвхжил нэмэгддэг (зураг 3). Харин шээсний хооллолт цусаар хооллодог эмэгтэйчүүдийн нислэгийн дундаж зайд ихээхэн нөлөөлсөн (F = 8, p1.3) 0.0004), мочевины хоолны дэглэм байхгүй (F(5, 138) = 1.36, p = 0.24) .бусад шээс болон хяналтын хоолны дэглэмтэй (шинэхэн, p = 0.0091; 72 цаг, p = 0.0022; 168 цаг, p = 0.001; сахароз, p = 0.001; d07, p = 0.00. 0.036).
Шээс, мочевинаар хооллох нь нөхөн үржихүйн үзүүлэлтүүдэд үзүүлэх нөлөөг өндөглөдөг био шинжилгээнд (Зураг 4А) үнэлж, эм тус бүрийн өндөглөдөг өндөгний тоо, өндөгний хэмжээ, шинээр гарч ирсэн анхны авгалдай зэргийг харгалзан үзсэн. Өндөгний тоогоор. Шээсээр хооллодог Арабын эмэгчин (2 p =F24, p =F24) = 0.0008; Зураг 4B). 24 цагийн турш шээсээр хооллодог эмэгтэйчүүд бусад шээсээр хооллодог эмэгтэйчүүдээс хамаагүй их өндөглөдөг (Зураг 4B). Үүний нэгэн адил, шээсээр хооллодог эмэгтэйчүүдийн өндөгний хэмжээ өөр өөр байна (F = 8, p <1) 0.0001), 24 цагийн шээс болон сахарозоор хооллодог эмэгчин нь усаар хооллодог эмэгчинүүдээс хамаагүй том өндөглөдөг бол 168 цаг шээсээр хооллодог эмэгчинүүдийн өндөг мэдэгдэхүйц бага байсан (Зураг 4C). Үүнээс гадна шээсний хооллолт авгалдайны хэмжээ ихээхэн нөлөөлсөн (F(5) = 710, p<180.6). 24 ба 72 цагийн шээсээр хооллодог эмэгчинүүдийн өндөглөдөг өндөгнөөс гарч буй авгалдай нь өндөгний авгалдайнаас илүү том хэмжээтэй байна. Усаар хооллодог ба 168 цаг шээсээр хооллодог эмэгчин (Зураг 4D).
Үхрийн шээс, мочевинаар хооллож буй эм Anopheles arabinis-ийн нөхөн үржихүйн гүйцэтгэл. Цусаар хооллосон эм шумуулыг шинэ болон хөгшрөлттэй үнээний шээс, янз бүрийн концентраци мочевин, сахароз (10%), нэрмэл ус (H2O) зэргээс бүрдсэн хоолны дэглэмээр 48 цагийн турш био шинжилгээнд оруулахаас өмнө хооллосон (E-ийн тоо, өндөгний E-ийн тоо8). хэмжээ (C, F) болон авгалдайн хэмжээ (D, G)-д өгсөн хооллолт (үхрийн шээс: BD; мочевин: EG) ихээхэн нөлөөлсөн. Өөр өөр үсгийн нэр ашиглан хэмжсэн параметр бүрийн дундаж нь бие биенээсээ эрс ялгаатай байв (Тукейгийн дараах шинжилгээг ашиглан нэг талын ANOVA; p < 0.05). Алдааны талбар нь дундажийн стандарт алдааг илэрхийлнэ.
Шээсний азотын гол бүрэлдэхүүн хэсэг болох мочевин нь цусаар хооллодог эмэгтэйчүүдэд хоол хүнс болгон өгөхөд бүх судалгаанд нөхөн үржихүйн үзүүлэлтэд ихээхэн нөлөөлсөн. Цусан дахь хоол идсэний дараа мочевинаар хооллосон эмэгтэйчүүдийн өндөглөдөг өндөгний тоо нь мочевины агууламжаас хамаарч (F(11, 360) = 4.69; p<1140, эмэгчин шүвтэр). μM ба 1.34 mM илүү их өндөглөдөг (Зураг 4Д). 134 мкМ ба түүнээс дээш хэмжээний мочевины агууламжаар хооллодог эмэгчин нь усаар хооллодог эмэгчинүүдээс илүү том өндөглөдөг (F(10, 4245) = 36.7; p < 0.0001; Зураг 4F) (зураг 4F), мөн авгалдайны хэмжээ ижил хэмжээтэй (F1) нөлөөлдөг. 3305) = 37.9; p <0.0001) илүү их хувьсах шинж чанартай байсан (Зураг 4G).
Шилэн хоолойн олфактометр (Зураг 5А)-д үнэлэгдсэн arabiensis-д шээсний нас ихээхэн нөлөөлсөн (χ2 = 15.9, df = 4, p = 0.0032; Зураг 5B; Зураг. 5B). Шээсний дараах үеийн шинжилгээнээс харахад шээсний хэмжээ мэдэгдэхүйц өндөр байгааг харуулж байна. бусад бүх эмчилгээтэй харьцуулахад сэтгэл татам байдал (72 цаг: p = 0.0060, 168 цаг: p = 0.012, пентан: p = 0.00070), шинэхэн шээсний үнэрийг эс тооцвол (p = 0.13; Зураг 5B). Хэдийгээр цус сорох шумуулын нийт таталт нь шээсэнд тийм ч чухал биш байсан (χ8 = χ8). df = 4, p = 0.067; Зураг. 5C), эдгээр эмэгчин нь хяналттай харьцуулахад 72 цагийн настай шээстэй харьцуулахад толгойн зайны дэгдэмхий хандыг илүү их татдаг болохыг тогтоожээ (p = 0.0066; Зураг 5C).
Хөгшин ба цусаар тэжээгддэг Anopheles arabianus-ийг хайж олоход үхрийн шээсний байгалийн болон синтетик үнэрт үзүүлэх зан үйлийн хариу. Шилэн хоолойн олфактометрийн бүдүүвч (A). Хөгшин болон шинэ үхрийн шээснээс толгойн зайд дэгдэмхий хандыг (B) болон цус сорох (C) шумуулын хандыг татах. Шинэ (D), 24 цагийн (E), 72 цагийн (F), 168 цагийн (G) насжилттай үхрийн шээсийг харуулсан. Электрон антен илрүүлэх (EAD) ул мөр нь хийн хроматографаас ялгарсан толгойн зай дахь биоидэвхтэй нэгдлүүдийн хариуд хүчдэлийн өөрчлөлтийг харуулж, дөлийн хэмжигдэхүүнээр илрүүлдэг. (mV)-ийг хадгалах хугацаатай (s) харьцуулсан. Биологийн идэвхт нэгдлүүдийн шинж чанар, ялгарах хурдыг (μg h-1) харуулав. Нэг од (*) нь тогтмол бага далайцтай хариу үйлдэл үзүүлж байгааг харуулж байна. Давхар тэмдэгт (**) нь давтагдах боломжгүй хариу урвалыг заана. Хос (H) ба цус сорох (I) нь шинэхэн холимог болон синхрончлолын холимогийг олоорой. шээсний үнэр. Янз бүрийн үсгийн нэрэнд татагдсан шумуулын дундаж хувь бие биенээсээ эрс ялгаатай байв (Тукейгийн дараах шинжилгээг ашиглан нэг талын ANOVA; p < 0.05). Алдааны баар нь масштабын стандарт алдааг илэрхийлдэг.
Эмэгтэй Ann.arabiensis, цус идсэнээс хойш 72 цаг ба 120 цагийн дараа түрсээ шахах үед пентаны хяналттай харьцуулахад шинэ болон хөгширсөн үхрийн шээснээс толгойн зайд дэгдэмхий хандыг илүүд үзээгүй (χ2 = 3.07, p > 0.05; Нэмэлт файл 1: Зураг. S1).
Эмэгтэй Ann.arabiensis, GC-EAD болон GC-MS шинжилгээнд найм, зургаа, гурав, гурван биоидэвхтэй нэгдлүүдийг илрүүлсэн (Зураг 5D-G). Хэдийгээр электрофизиологийн хариу урвалыг үүсгэсэн нэгдлүүдийн тоо ялгаатай байсан ч эдгээр нэгдлүүдийн ихэнх нь шинэ болон хөгшрөлтөөс цуглуулсан дэгдэмхий хандыг толгойн зай бүрт агуулагдаж байсан. босгыг давсан эмэгтэй антеннуудыг цаашдын шинжилгээнд оруулсан болно.
Толгойн хөндийн цуглуулга дахь биоидэвхтэй нэгдлүүдийн нийт дэгдэмхий ялгарлын хэмжээ шинэ шээсэнд 29 мкг цаг-1 байсан бол 168 цагийн настай шээсэнд 242 мкг цаг-1 болж нэмэгдсэн нь голчлон р-крезол ба м-формальдегидийн нөлөөгөөр фенол, фенол ихэсдэг. Үүний эсрэгээр бусад нэгдлүүд, 1-кг, 2-ийн ялгаралт 168 цагийн шээсэнд 242 мкг цаг хүртэл нэмэгдсэн байна. decanal, шээсний нас нэмэгдэхийн хэрээр буурч, энэ нь хроматограмм дахь дохионы эрчим (элбэг дэлбэг байдал) ажиглагдсан бууралт (Зураг 5D) -G зүүн самбар) болон эдгээр нэгдлүүдийн физиологийн хариу урвал (Зураг 5D-G баруун самбар).
Ерөнхийдөө нийлэг хольц нь шинэ болон хөгшрөлтийн шээсний дэгдэмхий хандаас тодорхойлогддог био идэвхт нэгдлүүдийн байгалийн харьцаатай ижил төстэй байсан (Зураг 5D–G) бөгөөд хост хайхад төдийлөн сонирхол татдаггүй (χ2 = 8.15, df = 4, p = 0.083; цус сорох (Зураг 5H)) 4.91, df = 4, p = 0.30; Зураг. 5I). Гэсэн хэдий ч эмчилгээний дараа хосолсон харьцуулалт нь хост хайж буй шумуулууд нь пентантай хяналттай харьцуулахад 24 цагийн шээсний синтетик хольцыг ихээхэн татдаг болохыг харуулсан (p = 0.0086; Зураг).
24 цагийн настай шээсний нийлэг хольц дахь бие даасан бүрэлдэхүүн хэсгүүдийн үүргийг үнэлэхийн тулд бие даасан нэгдлүүдийг устгасан Y-хоолойн шинжилгээнд зургаан хасах хольцыг бүрэн хольцтой харьцуулан үнэлэв. Хостыг хайж буй шумуулын хувьд бүрэн хольцоос бие даасан нэгдлүүдийг хасах нь зан үйлийн хариу урвалд ихээхэн нөлөөлсөн (χ2, d =f = 06. файл 1: Зураг S2A), бүх хасах хольц нь бүрэн холилдсоноос жижиг хэмжээтэй харьцуулахад илүү сонирхол татахуйц байсан. Үүний эсрэгээр, бүрэн синтетик хольцоос бие даасан нэгдлүүдийг зайлуулах нь цус сорох шумуулын зан үйлийн хариу үйлдэлд нөлөөлсөнгүй (χ2 = 11.38, df = 6, p = 0.077). 0.022; Нэмэлт файл 1: Зураг S2B).
Этиопын хумхаа өвчний тархалттай тосгонд 24 цагийн үнээний шээсний синтетик хольц нь хээрийн нөхцөлд шумуул татахад хэр үр дүнтэй болохыг арван шөнийн турш үнэлэв (Зураг 6А). Нийт 4,861 шумуул барьж, илрүүлсний 45,7% нь га18% байсан. Anopheles pharoensis болон 35.4% нь Culex spp.(Нэмэлт файл 1: Хүснэгт S1). Anopheles arabinis нь ПГУ-ын шинжилгээгээр тогтоогдсон Ан.Гамбын зүйлийн цогцолборын цорын ганц гишүүн юм. Нэг шөнө дунджаар 320 шумуул баригдсан ба энэ хугацаанд синтетик хольцтой шумуул баригдсан ба энэ хугацаанд холимог шумуул (х2, χ0, χ0, χ0, χ0, χ0, χ0, χ2) баригдсан. 3196) = 170.0, p < 0.0001) .Сургуулийн эхэн, дунд, төгсгөлд хяналтын таван шөнө тус бүр дээр өгөөшгүй хавх тавьсан. Хос хавх бүрт ижил тооны шумуул баригдсан нь байшин хоорондын хазайлтгүй байгааг харуулж байна (χ2(0, p <0.016, p >19) 0.05) ба судалгааны хугацаанд популяцийн бууралт ажиглагдаагүй. Хяналтын хавхтай харьцуулахад синтетик хольц агуулсан хавханд баригдсан шумуулын тоо мэдэгдэхүйц нэмэгдсэн: эзэн хайж байсан (χ2(0, 2107) = 138.7, p < 0.0001), сүүлийн үед цусаар хооллосон (χ2(0, 0, 015) ба жирэмслэлт (χ2(0, 228) = 6.27, p = 0.0123; Нэмэлт файл 1: Хүснэгт S1). Энэ нь мөн баригдсан шумуулын нийт тоонд тусгагдсан болно: эзэн хайгч > цус сорогч > жирэмсэн > хагас жирэмсэн > эрэгтэй.
24 цагийн нийлэг үхрийн шээсний үнэрийн хольцын үр нөлөөний хээрийн үнэлгээ. Талбайн туршилтыг Этиопийн өмнөд хэсэгт, Маки хотын ойролцоо (газрын зураг) хийж, Өвчнийг хянах төвийн (CDC) гэрлийн хавхыг (баруун талд) хос байшинд, латин дүрс бүхий дөрвөлжин хэлбэртэйгээр хийсэн. CDC-ийн гэрэл зургийн хавхнууд нь эм Anopheles arabesques (B), харин Anopheles farroes (C) биш, физиологийн төлөвөөс хамааралтай нөлөө үзүүлдэг. Нэмж дурдахад, эдгээр урхинд агуулагдах Culex шумуулын тоо мэдэгдэхүйц нэмэгдсэн. хяналтын (нээлттэй) хавх (N = 10), баруун талд байгаа баар нь хос хяналтын хавх (нээлттэй; N = 5) дундаж сонголтын индексийг илэрхийлнэ. ).Од тэмдэг нь статистикийн ач холбогдлын түвшинг заана (*p = 0.01 ба ***p < 0.0001)
Гурван зүйлийг нийлэг хольц агуулсан хавханд өөр өөрөөр баригдсан. Хүлээн авагч (χ2(1, 1345) = 71.7, p < 0.0001), цусаар хооллох (χ2(1, 517) = 16.7, p < 0.0001) болон жирэмслэлт (χ2(1, p1, p1 = 6)) хайж байна. 0.0134) нь .arabiensis нийлэг хольцыг гаргаж байгаа хавханд баригдсан (Зураг 6В), харин Ан-ийн хэмжээ ялгаатай байсангүй. Физиологийн янз бүрийн төлөвт фаренсис илэрсэн (Зураг 6C). Culex-ийн хувьд зөвхөн синтетик хольцтой хольсон шавьжийг хайж буй шумуулын тоо мэдэгдэхүйц нэмэгдсэн байна. (χ2(1,1319) = 12.6, p = 0.0004; Зураг 6D), хяналтын хавхтай харьцуулахад.
Этиоп улсын нутаг дэвсгэр болон хөдөөгийн бүлгүүдийн хооронд байрлах боломжит эзэн өгөөшний урхинд хумхаа өвчний шумуул нь үхрийн шээсний үнэрийг эзэн амьдрах орчны дохио болгон ашиглаж байгаа эсэхийг үнэлэхэд ашигласан болно. Хотын дохио байхгүй, халуун, үнээний шээсний үнэртэй эсвэл үнэргүй үед шумуул баригдаагүй (Нэмэлт файл: 1, H-ийн өндөр температур). үнээний шээсний үнэр, эм хумхаа шумуулыг шээсний наснаас үл хамааран цөөн тоогоор ч гэсэн татаж, барьж авсан (χ2(5, 25) = 2.29, p = 0.13; Нэмэлт файл 1: Зураг S3). Үүний эсрэгээр усны хяналт нь хумхаа өвчний шумуулыг өндөр температурт барьж чадаагүй (A:dd3 Зураг).
Хумхаа өвчний шумуул нь үхрийн шээсээр (өөрөөр хэлбэл шалбааг) нөхөн тэжээх замаар азот агуулсан нэгдлүүдийг олж авч, тарааж, амьдралын түүхийг сайжруулахын тулд бусад шавьжтай адил юм [2, 4, 24, 25, 26]. Үхрийн шээс нь улаавтар, үхрийн ургамлуудтай нягт холбоотой байдаг нөхөн сэргээгдэх нөөц юм. Эм шумуул нь энэ нөөцийг үнэрээр нь тогтоодог бөгөөд шээсэнд агуулагдах азотын гол бүрэлдэхүүн хэсэг болох мочевин зэрэг шээсэнд агуулагдах азотын нэгдлүүдийг зохицуулах чадвартай байдаг [15, 16]. Эм шумуулын физиологийн төлөв байдлаас хамааран шээсний физиологийн идэвхжил, шээсний шим тэжээлийг сайжруулдаг. хост хайж буй эм шумуул, түүнчлэн цусаар хооллодог хүмүүсийн эхний гонадотроп мөчлөгийн үед амьд үлдэх, нөхөн үржихүйн шинж чанарууд. Иймээс шээсний хольц нь хоол тэжээлийн дутагдалд орсон насанд хүрэгчдийн адил хаалттай байдаг хумхаа өвчний тээгчдийн тэжээллэг чанарт чухал үүрэг гүйцэтгэдэг [8]. Энэ нь эмэгтэйчүүдийн дундаж наслалт, идэвхжил, нөхөн үржихүйн гарцыг нэмэгдүүлж байгаа нь векторын хүчин чадалд нөлөөлдөг тул тархвар судлалын чухал үр дагавартай. Цаашилбал, энэ зан үйл нь ирээдүйн векторын менежментийн хөтөлбөрүүдийн зорилт болж магадгүй юм.