Javascript одоогоор таны хөтөч дээр идэвхгүй байна. Javascript идэвхгүй болсон үед энэ вэб сайтын зарим функц ажиллахгүй.
Өөрийн дэлгэрэнгүй мэдээлэл, сонирхож буй эмийн талаар бүртгүүлээрэй, бид таны өгсөн мэдээллийг манай өргөн хүрээний мэдээллийн санд байгаа нийтлэлүүдтэй тааруулж, PDF хуулбарыг шууд имэйлээр илгээх болно.
Жүжигчин: Стелла С, Витале СР, Марторана Ф, Массимино М, Павоне Г, Ланзафаме К, Бианка С, Барон С, Горгоне С, Фичера М, Манзелла Л
Стефания Стелла, 1,2 Силвиа Рита Витале, 1,2 Федерика Марторана, 1,2 Мишель Массимино, 1,2 Жулиана Павоне, 3 Катя Ланзафаме, 3 Себастьяно Бианка, 4 Чиара Бароне, 5 Кристина Горгоне, 6 Марко Фичера Лизэла12, Марко Фичерали12, Анагаах ухаан, Катаниагийн Их Сургууль, Катаниа, 95123, Итали; 2 Туршилтын Хавдар судлал, Гематологийн төв, AOU Policlinico “G.Rodolico – San Marco”, Катания, 95123, Итали;3 Эмнэлгийн онкологи, AOU Policlinico “Г.Родолико – Сан Марко”, Катания, 95123, Итали;4 Анагаах ухааны генетик, ARNAS Garibaldi, Катаниа, 95123, Итали;5 Medicine Genetics, ASP, Syracuse, 96100, Итали;6 Катаниагийн их сургуулийн Биоанагаах ухаан, биотехнологийн шинжлэх ухааны тэнхим, Анагаах ухааны генетик, Катаниа, Итали, 95123;7Oasi Research Institute-IRCCS, Troina, 94018, Итали Харилцаа холбоо: Стефаниа Стелла, утас +39 095 378 1946, имэйл [имэйлээр хамгаалагдсан];[имэйлээр хамгаалагдсан] Зорилго: BRCA1 ба BRCA2 дахь үр хөврөлийн мутаци ба хөхний хорт хавдар (BC), өндгөвч (OC) болон бусад төрлийн хорт хавдар тусах эрсдэлтэй холбоотой. BRCA генийн шинжилгээ нь хувь хүний ​​эрсдлийг үнэлэх, түүнчлэн эрүүл тээгчээс урьдчилан сэргийлэх аргыг хайж олох, хорт хавдраар өвчлөгсдөд тохирсон эмчилгээ хийх гол түлхүүр юм. Сицилийн гэр бүлд BRCA-ийн эмгэг төрүүлэгч хувилбарууд байдаг, ялангуяа зүүн Сицилийн популяцид чиглэсэн судалгаа дутмаг байна. Бидний судалгааны зорилго нь Сицилийн зүүн хэсгийн BC-тэй өвчтөнүүдийн бүлэгт BRCA-ийн эмгэг төрүүлэгч үр хөврөлийн өөрчлөлтийн тархалт, тархалтыг судалж, тэдгээрийн цаашдын үүсэлтэй BC-ийн өвөрмөц шинж чанаруудтай холбоотой эсэхийг үнэлэх явдал байв. ҮР ДҮН: Нийт 35 өвчтөнд (9%) BRCA-ийн эмгэг төрүүлэгч хувилбар, BRCA1-д 17 (49%), BRCA2-д 18 (51%). BRCA1-ийн өөрчлөлт нь гурвалсан сөрөг BC-тэй өвчтөнүүдэд зонхилон тохиолддог бол BRCA2 мутаци нь гэрэлтэгч, BRCA-тай харьцуулахад өндөр хэлбэрийн BRCA-тай харьцуулахад илүү их тохиолддог. болон пролифератив индекс. Дүгнэлт: Бидний олдворууд нь зүүн Сицилийн МЭӨ өвчтнүүдийн BRCA мутацийн төлөв байдлын тоймыг өгч, удамшлын BC-тэй өвчтөнүүдийг тодорхойлоход NGS шинжилгээний үүргийг баталж байна. Ерөнхийдөө эдгээр өгөгдөл нь мутац тээгчдийн хорт хавдраас урьдчилан сэргийлэх, эмчлэхэд чиглэсэн BRCA скринингийг дэмжсэн өмнөх нотлох баримтуудтай нийцэж байна.
Хөхний хорт хавдар (BC) нь дэлхий даяар хамгийн түгээмэл хорт хавдар бөгөөд эмэгтэйчүүдийн хамгийн үхэлд хүргэдэг хорт хавдар юм.1 BC-ийн прогноз болон эмнэлзүйн зан төлөвийг тодорхойлдог биологийн шинж чанаруудыг цаг хугацааны явцад нарийвчлан судалж, хэсэгчлэн тодруулсан. Үнэн хэрэгтээ одоогийн байдлаар хэд хэдэн орлуулагч маркерууд BC-ийг өөр өөр молекулын дэд төрөлд ангилахад ашиглагдаж байна. Эдгээр нь хүний ​​​​рецептор, эстроген рецептор (эстроген, эстроген) юм. эсвэл 2 (HER2) олшруулалт, тархалтын индекс Ki-67 болон хавдрын зэрэг (G).2 Эдгээр хувьсагчийн хослол нь дараах BC ангиллыг тодорхойлсон: 1) ER ба/эсвэл PgR илэрхийлэлийг харуулсан гэрлийн хөндийн хавдар нь BC-ийн 75%-ийг эзэлдэг. Эдгээр хавдар нь Luminal A-д хуваагдаж, Luminal A, Ki-HER2, B-аас доош байвал Ki-6,6-аас доош байвал хавдар. тархалтын индексээс үл хамааран HER2-ийн олшруулалт 20% -тай тэнцүү буюу түүнээс дээш байсан;2) ER ба PgR сөрөг боловч HER2 олшрох шинжтэй HER2+ хавдар. Энэ бүлэг нь хөхний бүх хавдрын 10%-ийг эзэлдэг;3) Гурвалсан сөрөг хөхний хорт хавдар (TNBC) нь ER болон PgR илэрхийлэл, HER2 олшролтыг харуулдаггүй бөгөөд хөхний хорт хавдрын 15 орчим хувийг эзэлдэг.2-4
Эдгээр МЭӨ дэд хэвшинжүүдийн дотроос хавдрын зэрэг болон тархалтын индекс нь хавдрын түрэмгий байдал, прогнозтой шууд бөгөөд бие даасан хамааралтай хөндлөн огтлолын биомаркеруудыг төлөөлдөг.5,6
Дээр дурдсан биологийн онцлогоос гадна BC-ийн хөгжилд хүргэж буй удамшлын удамшлын өөрчлөлтийн үүрэг сүүлийн хэдэн жилд улам бүр чухал болж байна.7 Хөхний 10 хавдар тутмын 1 нь өвөрмөц генийн үр хөврөлийн өөрчлөлтөөс болж удамшдаг.8 Сүүлийн үед 180,000 гаруй эмэгтэйчүүдийг хамарсан тархвар судлалын хоёр том судалгаанд (ABR1, ABR1, 180,000 гаруй эмэгтэйчүүдийг илрүүлсэн). BRCA2, CHK2, PALB2, RAD51C, RAD51D) нь удамшлын BC-ийг голчлон хариуцдаг. Эдгээр генүүдийн дотроос BRCA1 ба BRCA2 (цаашид BRCA1/2 гэх) нь хөхний хавдрын хөгжилтэй хамгийн хүчтэй хамааралтай болохыг харуулсан. өндгөвч, түрүү булчирхай, нойр булчирхай, бүдүүн гэдэсний болон меланома зэрэг эртний өвчнүүд. 13-80 нас хүртэл BRCA1-ийн эмгэг төрүүлэгч хувилбар (PV)-тэй эмэгтэйчүүдэд BC-ийн хуримтлагдах тохиолдол 72%, BRCA2 PV-тэй эмэгтэйчүүдэд 69% байдаг.14
Сүүлийн үеийн хэвлэлд BC эрсдэл нь PV-ийн төрлөөс хамаардаг болохыг харуулж байна. Үнэн хэрэгтээ эмгэг төрүүлэгч тайрах хувилбаруудтай харьцуулахад, ялангуяа BRCA1 генийн тод алдаатай хувилбарууд нь ялангуяа өндөр настай эмэгтэйчүүдэд BC-ийн эрсдэлийг бууруулдагтай холбоотой байдаг.15
BRCA1 эсвэл BRCA2 PV байгаа нь биологийн болон клиникопатологийн өөр өөр шинж чанартай холбоотой байв.16,17 BRCA1-тэй холбоотой BC-үүд нь эмнэлзүйн хувьд түрэмгий, ялгарах чадвар муутай, өндөр пролифератив шинж чанартай байдаг. Эдгээр хавдар нь ихэвчлэн гурвалсан сөрөг шинж чанартай бөгөөд эрт эхэлдэг. Хавдар нь ихэвчлэн BRCA-ийн дарангуйлалтай байдаг. болон хувьсах пролифератив индексүүд.Эдгээр хавдар нь В хөндийд илүү түгээмэл байдаг ба ихэвчлэн өндөр настай хүмүүст тохиолддог.16-18 BRCA1 ба BRCA2-ийн мутаци нь цагаан алтны давс, поли(ADP-рибоз) полимеразын дарангуйлагч (PARPi) зэрэг зорилтот эм зэрэг тусгай эмчилгээнд мэдрэмтгий байдлыг нэмэгдүүлдэг.19,22
Сүүлийн хэдэн жилийн хугацаанд эмнэлзүйн практикт дараагийн үеийн дараалал (NGS)-ийг хэрэгжүүлснээр BRCA1/2.21 зэрэг хорт хавдрын мэдрэмтгий байдлын хам шинжийн молекулын шинжилгээнд хамрагдах BC-тэй өвчтөнүүдийн тоог нэмэгдүүлэх боломжийг олгож байна. Үүний зэрэгцээ гэр бүлийн түүх, хүн ам зүй, эмнэлзүйн шинж чанарыг илүү сайн тодорхойлохын тулд тодорхой шалгуурт үндэслэсэн тодорхойлолтууд122. Энэ хүрээнд тодорхой популяцид BRCA1/2 скрининг хийхэд газарзүйн бүс нутгуудын ялгааг харуулсан нотлох баримтууд хуримтлагдаж байна.24–27 Баруун Сицилийн МЭӨ когортын тухай мэдээллүүд байгаа ч Сицилийн зүүн хэсгийн хүн амд BRCA1/2-ын скринингийн талаарх мэдээлэл цөөн байна.28,29
Бид энд Сицилийн зүүн нутгийн МЭӨ-ний өвчтөнүүдэд үр хөврөлийн BRCA1/2 скринингийн үр дүнг тайлбарлаж, BRCA1 эсвэл BRCA2 мутаци байгаа нь эдгээр хавдрын гол клиникопатологийн шинж чанаруудтай уялдуулах болно.
Катани улсын Родолико-Сан Марко хотын Поликлинико эмнэлгийн "Туршилтын хавдар судлал, цус судлалын төв"-д ретроспектив судалгаа хийсэн. 2017 оны 1-р сараас 2021 оны 3-р сар хүртэл манай хөхний болон өндгөвч, меланома, нойр булчирхай, түрүү булчирхайн хорт хавдартай нийт 455 өвчтөнийг ХБНТ-ийн шинжилгээнд шилжүүлсэн. Түүний судалгаа Хельсинкийн тунхаглалын дагуу хийгдсэн бөгөөд бүх оролцогчид молекулын шинжилгээ хийхийн өмнө бичгээр мэдээлэл өгсөн зөвшөөрөл өгсөн.
МЭӨ-ийн гистологи, биологийн шинж чанарыг (ER, PgR, HER2 төлөв, Ki-67, ба зэрэг) үндсэн биопси эсвэл мэс заслын дээж дээр зөвхөн хавдрын түрэмгий бүрэлдэхүүн хэсгүүдийг харгалзан үнэлэв. Эдгээр шинж чанарт үндэслэн BCs-ийг дараах байдлаар ангилав: гэрэлтэгч A (ER+ ба/эсвэл PgR+, HER2-% ба HER2-%, B+R, PgR+, PgR+, B<2/0, HER2-, Ki-67≥20%), гэрлийн B-HER2+ (ER ба/эсвэл PgR+, HER2+), HER2+ (ER ба PgR-, HER2+) эсвэл гурвалсан сөрөг (ER ба PgR-, HER2-).
BRCA1 ба BRCA2 мутацийн статусыг үнэлэхийн өмнө хавдар судлаач, генетикч, сэтгэл зүйч зэрэг олон талт баг өвчтөн бүрт BRCA1 ба/эсвэл BRCA1 байгаа эсэхийг тодорхойлохын тулд хавдрын генетикийн зөвлөгөөг явуулсан.эсвэл BRCA2 генд PV-ийн эрсдэл өндөртэй хүмүүс. Өвчтөнийг Италийн Анагаах ухааны онкологийн нийгэмлэгийн (AIOM) удирдамж болон орон нутгийн Сицилийн зөвлөмжийн дагуу сонгосон.30,31 Эдгээр шалгуурт: (i) мэдрэмтгий байдлын ген дэх эмгэг төрүүлэгч хувилбаруудын гэр бүлийн түүх (жишээлбэл, BRCA1, BRCA5TP, EN);(ii) BC-тэй эрэгтэй;(iii) BC болон OC-тэй хүмүүс;(iv) BC<36, TNBC<60, эсвэл хоёр талын BC<50 жилтэй эмэгтэйчүүд;(v) МЭӨ 50 жилээс доошгүй хувийн өвчний түүх, нэгээс доошгүй нэгдүгээр зэргийн хамаатан садан: (а) МЭӨ<50 жил;(б) ямар ч насны салстын бус ба хилийн бус ОК;(в) хоёр талын МЭӨ;(г) эрэгтэй МЭӨ;(д) нойр булчирхайн хорт хавдар;(е) түрүү булчирхайн хорт хавдар;(vi) хоёр ба түүнээс дээш хувийн түүх, МЭӨ-өөс дээш 50 жил, гэр бүлийн түүх, бие биетэйгээ нэгдүгээр зэрэглэлийн хамаатан садан (түүний нэгдүгээр зэрэглэлийн хамаатан садан болох хамаатан садан) нь МЭӨ, OC, эсвэл нойр булчирхайн хорт хавдартай байх;(vii) OC-ийн хувийн түүх ба хамгийн багадаа нэг нэгдүгээр зэргийн хамаатан садан: (a) МЭӨ <50 жил;(б) ҮОХ;(в) хоёр талын МЭӨ;(г) эрэгтэй МЭӨ;(vii) өндөр зэрэглэлийн сероз ОК-тэй эмэгтэй.
Өвчтөн бүрээс 20 мл захын цусны дээж авч, EDTA хуруу шилэнд (BD Biosciences) цуглуулсан. Геномын ДНХ-ийг QIAsymphony DSP DNA Midi тусгаарлах иж бүрдэл (QIAGEN, Хилден, Итали) ашиглан 0.7 мл цусны дээжээс үйлдвэрлэгчийн зааврын дагуу ялгасан. , Waltham, MA, USA) Тоо хэмжээ хийх.Зорилтот баяжуулалт болон номын сангийн бэлтгэлийг Oncomine™ BRCA Research Assay Chef гүйцэтгэдэг бөгөөд үйлдвэрлэгчийн зааврын дагуу автоматжуулсан номын сан бэлтгэхэд зориулагдсан Ion AmpliSeq™ Chef Reagents DL8 иж бүрдэлд ачаалахад бэлэн байна. Энэхүү иж бүрдэл нь бүх BRCA1 ба бүх BRCA1 (NM30_002)-ийг судлахад ашиглах боломжтой хоёр мультиплекс ПГУ праймерын сангаас бүрдэнэ (NMCA_0500) Товчхондоо, шингэрүүлсэн дээж тус бүрээс 15 мкл ДНХ (10 нг)-ийг номын сангийн бэлтгэхийн тулд бар кодтой ялтсуудад нэмж, бүх урвалж болон хэрэглэгдэхүүнийг Ion Chef™ хэрэгсэлд ачааллаа. ​​Дараа нь Ion Chef™ багаж дээр номын сангийн автоматаар бэлтгэх, бар кодтой дээжийн санг нэгтгэх ажлыг гүйцэтгэв. Дараа нь бэлтгэсэн libraries-ийн тоог F3000 хэмжигчээр үнэлэв. tific, Waltham, MA, USA) үйлдвэрлэгчийн зааврын дагуу. Эцэст нь, сангуудыг Ion Chef™ номын сангийн дээжний хоолойд (бар кодтой хоолой) ижил молярын харьцаагаар нэгтгэж, Ion Chef™ хэрэгсэлд ачаална. Дарааллыг Ion Torrent S5 (Thermo Fisher Scientificmo5) ашиглан гүйцэтгэсэн. Fisher Scientific).Өгөгдлийн шинжилгээг Amplicon Suite (SmartSeq srl) болон Ion Reporter Software программууд хийсэн.
Бүх хувилбарын нэршил нь Хүний генийн өөрчлөлтийн консорциумын одоогийн удирдамжийг (HGVS, http://www.hgvs.org/mutnomen) дагаж мөрддөг. BRCA1/2 хувилбаруудын эмнэлзүйн ач холбогдлыг Олон улсын ENIGMA консорциумын ангиллыг ашиглан тодорхойлсон (Evidence-Based Germline Network for Interpretantium Germorg, https://consulting All Consulting.con). ARUP, BRCAEXCHANGE, ClinVar, IARC_LOVD, UMD гэх мэт өөр өөр мэдээллийн сангууд. Ангилал нь хоргүй (I ангилал), хоргүй (II ангилал), тодорхойгүй ач холбогдолтой хувилбар (VUS, ангилал III), эмгэг төрүүлэх магадлалтай (IV ангилал), эмгэг төрүүлэгч (IV ангилал) болон эмгэг төрүүлэгч уургийн бүтцэд үзүүлэх мутатив нөлөө (V категорийн шинж чанар) зэрэг эрсдэлийн таван ангиллыг агуулдаг. 30 мэдээллийн санд хандах боломжтой.32
VUS бүрт эмнэлзүйн боломжит ач холбогдлыг тодорхойлохын тулд дараах тооцооллын уургийн урьдчилан таамаглах алгоритмуудыг ашигласан: MUTATION TASTER, 33 PROVEAN-SIFT (http://provean.jcvi.org/index.php), POLYPHEN-2 (http:// /genetics.bwh.harvard.edu//genetics.bwh.harvard.edu/http://pph-Dug.Gv) u/agvgd_input.php).1 ба 2-р зэрэглэлийн хувилбаруудыг зэрлэг төрөл гэж үзсэн.
Сэнгерийн дараалал нь эмгэг төрүүлэгч хувилбар бүр байгаа эсэхийг баталгаажуулсан. Товчхондоо, BRCA1 ба BRCA2 генийн лавлагааны дарааллыг (NG_005905.2, NM_007294.3 болон NG_012772.3, NM_030-д нийцүүлэн гүйцэтгэсэн) ашиглан илрүүлсэн хувилбар бүрт хос тусгай праймерыг зохион бүтээсэн. гэрийн дараалал.
BRCA1/2 генийн хувьд сөрөг гарсан өвчтөнүүдийг үйлдвэрлэгчийн зааврын дагуу геномын томоохон өөрчлөлт (LGR) байгаа эсэхийг үнэлэхийн тулд олон талт холбогчоос хамааралтай датчик олшруулалт (MLPA)-аар туршсан. Товчхондоо, ДНХ-ийн дээжүүд денатуратлагдсан бөгөөд ойролцоогоор 60 хүртэлх BRCA1 болон BRCA2 генийг тодорхой DNA60-д ашигладаг. Урт. ПГУ-ын amplicons-ийн өвөрмөц багцаас бүрдэх датчик олшруулах бүтээгдэхүүнийг дараа нь капилляр электрофорез болон Cofalyser.Net программ хангамжаар багцад хамаарах Cofalyser хүснэгтүүдтэй (www.mrcholland.com) хамт шинжлэв.
Сонгогдсон клиникопатологийн хувьсагчид (гистологийн зэрэг ба Ki-67% пролиферацийн индекс) BRCA1/2 PV байгаатай холбоотой байсан ба Prism программ хангамжийн v. 8.4-ийг ашиглан Фишерийн нарийн тестийг ашиглан p-утга <0.05 чухал ач холбогдолтой гэж үзсэн.
2017 оны 1-р сараас 2021 оны 3-р сарын хооронд 455 өвчтөнд үр хөврөлийн BRCA1/2 мутацийг илрүүлэх шинжилгээнд хамруулсан. Мутацийн шинжилгээг Поликлинико эмнэлгийн Туршилтын хавдар судлал, гематологийн төвд хийсэн. Сицилийн удирдамжийн дагуу (http://www.gurs.regione. Gennaio 2020), Rodolico of Catania – San Marco” нийт 389 өвчтөнд Хөхний хорт хавдар, 37 өндгөвчний хорт хавдар, 16 нойр булчирхайн хорт хавдар, 8 түрүү булчирхайн хорт хавдар, 5 меланома туссан.Хорт хавдрын төрлөөр өвчтөнүүдийн хуваарилалт, шинжилгээний үр дүнг Зураг 1-д үзүүлэв.
Зураг 1-д судалгааны тоймыг харуулсан урсгалын диаграммыг үзүүлэв. Хөх, меланома, нойр булчирхай, түрүү булчирхай, өндгөвчний хавдартай өвчтөнүүдэд BRCA1 болон BRCA2 генийн мутаци байгаа эсэхийг шалгасан.
Товчлол: PVs, эмгэг төрүүлэгч хувилбар;VUS, тодорхойгүй ач холбогдолтой хувилбар;WT, зэрлэг төрлийн BRCA1/2 дараалал.
Бид судалгаагаа хөхний хорт хавдраар өвчилсөн бүлэгт анхаарлаа хандуулсан. Өвчтөнүүдийн дундаж нас 49 (23-89) ба голчлон эмэгтэйчүүд (n=376 буюу 97%) байв.
Эдгээрийн 64 (17%) нь BRCA1/2 мутацитай байсан ба бүгд эмэгтэй хүн байна. Гучин тав (9%) нь PV, 29 (7.5%) нь VUS-тай. Эмгэг төрүүлэгч 35 хувилбарын 17 (48.6%) нь BRCA1-д, 18 (51.4%) нь BRCA2-д, 18 (51.4%) нь BRCA2-д (%), 182-д (%18) тохиолдсон. BRCA2-д (Зураг 1 ба 2). MLPA шинжилгээнд LGR байхгүй байсан.
Зураг 2. Хөхний хорт хавдартай 389 өвчтөнд BRCA1 ба BRCA2 мутацийн шинжилгээ.(A) Хөхний хорт хавдартай 389 өвчтөнд эмгэг төрүүлэгч хувилбаруудын тархалт (PV) (улаан), тодорхойгүй ач холбогдолтой хувилбарууд (VUS) (улбар шар), WT (цэнхэр);(B) Хөхний хорт хавдартай 389 өвчтөн Гучин тав (9%) нь BRCA1/2 эмгэг төрүүлэгч хувилбарууд (PVs) байсан. Тэдний 17 (48.6%) нь BRCA1 PV тээгч (хар улаан), 18 (51.4%) нь BRCA2 (цайвар улаан) тээгч байсан;(C) 389 субъектийн 29 (7.5%) нь VUS, 5 (17.2%) нь BRCA1 ген (хар улбар шар), 24 (82.8%) BRCA2 (цайвар улбар шар) гентэй.
Товчлол: PVs, эмгэг төрүүлэгч хувилбар;VUS, тодорхойгүй ач холбогдолтой хувилбар;WT, зэрлэг төрлийн BRCA1/2 дараалал.
Дараа нь бид BRCA1/2 PV-тэй өвчтөнүүдэд BC молекулын дэд хэвшинжийн тархалтыг судалсан. Тархалт нь 2 (5.7%) гэрэлтэгч A, 15 (42.9%) гэрэлтэгч B, 3 (8.6%) гэрэлтэгч B-HER2+, 2 (5.7%) HER2+, 13 (37.7%) HER2+, TCA-13, 13 (37.1%) (37.37%), TCA11. 9.4% нь гэрлийн B BC, 2 (11.8%) нь HER2+, 10 (58.8%) нь TNBC-тэй. BRCA1 мутацигүй хавдар нь гэрэлтэгч А эсвэл гэрлийн B-HER2+ байсан (Зураг 3). BRCA2 эерэг дэд бүлэгт 10 luminal (% 67) (% luminal65). B-HER2+, 3 (16.7%) TNBC, 2 (11.1%) нь гэрэлтэгч A (Зураг 3). Энэ бүлэгт HER2+ хавдар илрээгүй. Иймээс TNBC-тэй өвчтөнүүдэд BRCA1 мутаци зонхилж, харин В люмен хүмүүст BRCA2-ийн өөрчлөлтүүд давамгайлж байна.
Зураг 3 BRCA1 ба BRCA2-ийн эмгэг төрүүлэгч хувилбартай өвчтөнүүдэд хөхний хорт хавдрын дэд хэв шинжийн тархалт. Хөхний хорт хавдартай өвчтөнүүдийн молекулын дэд төрлүүдийн дунд BRCA1- (хар улаан) ба BRCA2- (цайвар улаан) PV-ийн тархалтыг харуулсан гистограмм. Хайрцаг тус бүрийн дотор өгөгдсөн тоо нь BRCA1 болон BRCAPV дэд төрөл тус бүрийн хөхний хорт хавдартай өвчтөнүүдийн хувийг илэрхийлнэ.
Товчлол: PVs, эмгэг төрүүлэгч хувилбар;HER2+, хүний ​​эпидермисийн өсөлтийн хүчин зүйлийн рецептор 2 эерэг;TNBC, гурав дахин сөрөг хөхний хорт хавдар.
Дараа нь бид BRCA1 ба BRCA2 PV-ийн төрөл, генийн байршлыг үнэлэв. BRCA1 PV-д бид 7 дан нуклеотидын хувилбар (SNVs), 6 устгал, 3 давхардал, 1 оруулгыг ажигласан. Зөвхөн нэг мутаци (c.5522delG) нь шинэ нээлт юм. delCTAAT. Энэ өөрчлөлт нь BRCA1 экзон 15 дахь таван нуклеотид (CTAAT) устгагдсантай холбоотой бөгөөд 1679-р кодон дахь амин хүчлийн лейцинийг тирозиноор орлуулах ба орчуулгын тогтолцооны өөрчлөлтийн улмаас урьдчилан таамагласан зогсолтын кодон нь дутуу PV тасрахад хүргэдэг. залгах талбайн зөвшилцлийн бүс (c.4357+1G>T) (Хүснэгт 1).
BRCA2 PV-ийн тухайд бид 6 устгалт, 6 SNV, 2 давхардал ажиглагдсан. Олдсон өөрчлөлтүүдийн аль нь ч шинэлэг биш байна. Манай популяцид c.428dup ба c.8487+1G>A 3 хүн ажиглагдсан ба дараа нь c.5851_5854delAG2-д c.5851_5854delAG2 дахин давтагдсан. BRCA2-ийн 5-р экзонд, тайрсан, функциональ бус уургийг кодлохоор таамаглаж байна. c.8487+1G>A мутаци нь BRCA2 интрон 19-ийн интрон бүсэд (± 1,2) тохиолдож, залгах зөвшилцлийн дараалалд нөлөөлж, залгаас нь өөрчлөгдсөн эсвэл хэвийн бус уургийн 585 АГ-д хүргэдэг. Энэ нь BRCA2 генийн кодлогч экзон 10 дахь нуклеотидын 5851-ээс 5854 хүртэлх байрлалаас 4 нуклеотид устгагдсантай холбоотой бөгөөд урьдчилан таамагласан өөр зогсоох кодон (p.S1951WfsTer) бүхий орчуулгын хүрээний шилжилтийг бий болгодог. Анхааралтай, өмнө нь мэдээлснээр өвчтөнд c>1G>A83-д ижил өөрчлөлт гарсан байна. 4 Эхний мутаци нь BRCA2 экзон 7 дахь аденозин (A)-ыг гуанин (G) агуулсан нуклеотидээр сольж, кодон 211-д валиныг изолейцин болгон өөрчилдөг, изолейцин Амин хүчил нь маш төстэй шинж чанартай амин хүчил юм. Энэ өөрчлөлт нь хэвийн мРНХ-д нөлөөлдөг ба хоёр дахь хувилбар нь Т-ийн давхар хавсарсан хэсэгт нөлөөлдөг. BRCA2-г кодлодог генийн 13-д. c.7008-2A>T өөрчлөлт нь өөр өөр урттай олон транскрипт үүсгэж болно. Цаашилбал, BRCA2 PV-ийн бүлэгт 18 өөрчлөлтийн 4 нь (22.2%) нь дотоод шинжтэй байсан.
Дараа нь бид функциональ домэйн болон уураг холбох бүс нутагт BRCA1/2 хортой мутацийн зураглалыг хийсэн (Зураг 4). BRCA1 генийн хувьд PV-ийн 50% нь хөхний хорт хавдрын кластерийн бүсэд (BCCR) байрлаж байсан бол мутацийн 22% нь өндгөвчний хорт хавдрын кластерийн бүсэд (OCCR) байршсан байна (Зураг. PVBRCA3-ын 4A7 хувилбарт). CR бүс ба мутацийн 42.8% нь OCCR-д байршсан (Зураг 4B). Дараа нь бид BRCA1 ба BRCA2 уургийн домэйн доторх PV-ийн байршлыг үнэлэв. BRCA1 уургийн хувьд бид гогцоо болон ороомог ороомгийн домэйнд гурван PV-ийг, мөн BRCT-ийн домэйн дэх хоёр мутацийг BRCT4-т давтах уургийн хувьд (Зураг 4B, maPV4-д уургийн BCA2-д давтана) олсон. Олиго/олигосахарид холбох (OB) ба цамхаг (T) домэйнд 3 интрон, 3 экзон өөрчлөлт илэрсэн (Зураг 4Б).
Зураг 4 BRCA1 ба BRCA2 уургуудын бүдүүвч дүрслэл ба эмгэг төрүүлэгч хувилбаруудын нутагшуулалт. Энэ зураг нь хөхний хорт хавдартай өвчтөнүүдийн эмгэг төрүүлэгч BRCA1 (A) ба BRCA2 (B) хувилбаруудын тархалтыг харуулж байна. Экзоник мутацуудыг цэнхэр өнгөөр, харин интрон хувилбаруудыг улбар шар өнгөөр ​​харуулсан. Барын өндөр нь тохиолдлын тоо болон мэдээлэгдсэн BRCABR уураг (BRCA21) ба тэдгээрийн домэйн уураг юм. уураг нь гогцооны домэйн (RING) ба цөмийн локалчлалын дараалал (NLS), ороомог ороомог, SQ/TQ кластер домэйн (SCD) болон BRCA1 C-терминал домэйн (BRCT) агуулдаг.(B) BRCA2 уураг нь найман BRC давталт, ДНХ-тэй холбогч домэйн, мушгиа домэйн (helical/folding domen), oligonuda (heliccles-binholide) oligonudehar) агуулдаг. цамхаг домэйн (T), болон C тал дахь NLS. Хөхний хорт хавдрын кластерийн бүс (BCCR) болон өндгөвчний хорт хавдрын кластерийн бүс (OCCR) гэж нэрлэгддэг бүсүүдийг доор харуулав.* Зогсоох кодонуудыг тодорхойлдог мутацуудыг төлөөлдөг.
Дараа нь бид BRCA1/2 PV байгаатай холбоотой байж болох МЭӨ-ийн клиникопатологийн шинж чанарыг судалсан. BRCA1/2 сөрөг 181 өвчтөнд (нөөх тээгч бус) болон бүх тээгч (n = 35) эмнэлзүйн бүрэн бүртгэлийг авах боломжтой байсан. Хавдрын тархалтын түвшин болон зэрэглэл хоорондын хамаарал байсан.
Бид Ki-67-ийн тархалтыг манай бүлгийн медиан (25%, хүрээ <10-90%) дээр үндэслэн тооцсон. Ki-67 < 25% -тай хүмүүсийг "бага Ki-67" гэж тодорхойлсон бол ≥ 25% утгатай хүмүүсийг "өндөр Ki-67" гэж тодорхойлсон. тээвэрлэгчид (Зураг 5А).
Зураг 5 BRCA1 ба BRCA2 PVs-тэй болон байхгүй хөхний хорт хавдартай эмэгтэйчүүдийн зэрэглэлийн тархалттай Ki-67-ийн хамаарал.(A) BC-ийн тээгч бус 181 өвчтөнд BRCA1 (18) эсвэл BRCA2 (17) PV өвчтөнд дундаж Ki-67 утгыг харуулсан хайрцагны график. BRCA1 ба BRCA2 мутацийн төлөвийн дагуу гистологийн зэрэглэлийн бүлгүүд (G2 ба G3) (WT субъектууд, BRCA1 ба BRCA2 PVs тээвэрлэгчид).
Үүний нэгэн адил бид хавдрын зэрэг нь BRCA1/2 PV-тэй хамааралтай эсэхийг судалсан. Манай популяцид G1 BC байхгүй байсан тул бид өвчтөнүүдийг хоёр бүлэгт (G2 эсвэл G3) хуваасан. Ki-67-ийн үр дүнтэй нийцүүлэн шинжилгээ нь хавдрын зэрэг болон BRCA1-ийн өндөр мутацитай GBR1-ийн мутацитай харьцуулахад статистикийн ач холбогдолтой хамаарлыг илрүүлсэн. riers (p<0.005) (Зураг 5B).
ДНХ-ийн дараалал тогтоох технологийн дэвшил нь BRCA1/2 генетикийн шинжилгээнд урьд өмнө байгаагүй ахиц дэвшил авчирсан бөгөөд энэ нь гэр бүлийн хорт хавдартай өвчтөнүүдэд чухал ач холбогдолтой юм. Өнөөдрийг хүртэл BRCA1/2-ийн 20,000 орчим хувилбарыг Америкийн Анагаах Ухааны Генетикийн Нийгэмлэг 35 болон EN5CA3BR мутацийн системийн дагуу ангилж, ангилсан байна. Газарзүйн бүс нутгуудад харилцан адилгүй байдаг.37 Италид BRCA1/2 PV-ийн хувь хэмжээ 8%-аас 37% хооронд хэлбэлзэж, улс хоорондын өргөн хэлбэлзлийг харуулсан.38,39 Бараг 5 сая хүн амтай Сицили нь оршин суугчдынхаа тоогоор Италийн тав дахь том бүс нутаг юм. арлын хэсэг.
Бидний судалгаа бол Сицилийн зүүн хэсгийн BC-тэй өвчтөнүүдэд BRCA1/2 PV-ийн тохиолдлын талаархи анхны тайлангийн нэг юм.28 Энэ нь манай бүлэгт хамгийн түгээмэл тохиолддог өвчин тул бид шинжилгээндээ BC-д анхаарлаа хандуулсан.
МЭӨ 389 өвчтөнийг туршихад 9% нь BRCA1/2 PVs тээж, BRCA1 болон BRCA2 хооронд жигд тархсан байна. Эдгээр үр дүн нь Италийн популяцид өмнө нь мэдээлэгдсэнтэй нийцэж байна.28 Сонирхолтой нь манай бүлгийн 3% (13/389) нь эрэгтэй байсан. Энэ үзүүлэлт нь эрэгтэйчүүдийн хөхний хорт хавдрын хувьд хүлээгдэж буй хэмжээнээс өндөр байна. мутацийн эрсдэл. Гэсэн хэдий ч эдгээр эрчүүдийн хэн нь ч BRCA1/2 PV-ийг хөгжүүлээгүй тул PALB2, RAD51C, D зэрэг ховор тохиолддог мутаци байгаа эсэхийг үгүйсгэхийн тулд цаашдын молекулын шинжилгээнд нэр дэвшсэн. BRCA2 VUS-ийн өмнөх үр дүн нь тодорхойгүй ач холбогдолтой хувилбаруудыг 7% -д нь олж авсан.
BRCA1 / 2 мутант эмэгтэйчүүдэд BC Molecular Mubtypes-ийг тараах үед бид TNBC болон BRCA1-ийн хоорондох холбоосууд ба BRCA1 ба BRCA2 PV (55.8%).
Дараа нь бид BRCA1/2 PV-ийн төрөл, байршилд анхаарлаа хандуулдаг. Манай бүлэгт хамгийн түгээмэл BRCA1 PV нь c.5035_5039delCTAAT байсан. Хэдийгээр Incorvaia et al.Сицилийн бүлэгт энэ хувилбарыг тайлбарлаагүй, бусад зохиогчид үүнийг үр хөврөлийн BRCA1 PV гэж мэдээлсэн.34 Манай бүлэгт хэд хэдэн BRCA1 PV-ууд олдсон - жишээлбэл c.181T>G, c.514del, c.3253dupA ба c.5266dupC - эдгээр нь SBR21c. >G ба c.5266dupC) нь ихэвчлэн Зүүн болон Төв Европын Ашкенази еврейчүүд (Польш, Чех), Словен, Австри, Унгар, Беларусь, Герман), 44,45 байдаг ба АНУ, Аргентинд саяхан "давтагдах үр хөврөлийн хувилбар" гэж тодорхойлсон байдаг. Палермо болон Мессина дахь Сицили. Сонирхолтой нь бүр Incorvaia et al.Катани дахь зарим гэр бүлд c.3253dupA хувилбарыг олсон.28 Хамгийн их төлөөлөлтэй BRCA2 PV-ууд нь c.428dup, c.5851_5854delAGTT ба интрон хувилбар c.8487+1G>A бөгөөд эдгээрийг Палермо хотын нэгэн өвчтөнд c.428875-д c.428855-д ажиглагдсан c.4287+1G>A гэж мэдээлсэн байна. Сицилийн баруун хойд хэсэгт, гол төлөв Трапани, Палермо мужуудад, харин c.5851_5854delAGTT PV баруун хойд Сицилийн өрхүүдэд ажиглагдсан. 8487+1G>A хувилбар нь Мессина, Палермо, Кальтаниссеттагийн хүмүүст илүү түгээмэл байсан.28 Rebbeck et al.Колумб дахь c.5851_5854delAGTT өөрчлөлтийг өмнө нь тайлбарласан.37 Өөр нэг BRCA2 PV, c.631+1G>A нь Сицилийн (Агригенто, Сиракуса, Рагуса) BC болон OC-тэй өвчтөнүүдэд илэрсэн.28 Бид BRCA2 ба c.1G>206 (BRCA2 c.108) хоёр хувилбар зэрэгцэн оршиж байгааг анзаарсан. Өмнө нь мэдээлснээр cis горимд тусгаарлагдсан гэж бидний таамаглаж байсан ижил өвчтөнд.34,46 Эдгээр BRCA2 uble мутаци нь Италийн бүс нутагт үнэхээр байнга ажиглагддаг бөгөөд элч РНХ-ийн залгалтад нөлөөлж, BRCA2 уургийг бүтэлгүйтүүлэхэд эрт зогсоох кодонуудыг нэвтрүүлдэг нь тогтоогдсон.47,48
Бид мөн уургийн домэйн болон генийн OCCR ба BCCR бүсүүдэд BRCA1 ба BRCA2 PV-ийн зураглалыг хийсэн. Эдгээр мужуудыг Реббек нар тодорхойлсон.өндгөвч болон хөхний хорт хавдар тусах эрсдэлт бүс нутаг гэж.49 Гэсэн хэдий ч үр хөврөлийн хувилбаруудын байршил болон хөхний болон өндгөвчний хорт хавдрын эрсдэлийн хоорондын хамаарлын талаарх нотолгоо маргаантай хэвээр байна.28,50-52 Манай хүн амын дунд BRCA1 PV нь BCCR бүсэд голчлон байрлаж байсан бол BRCA2-ийн өмнөх PVH-ийн аль ч бүс нутагт байршдаггүй байсан. OCCR ба BCCR бүсүүд болон МЭӨ-ийн онцлогуудын хоорондын хамаарал. Энэ нь BRCA1/2 мутацитай өвчтөнүүдийн тоо хязгаарлагдмал байгаатай холбоотой байж болох юм. Уургийн хүрээний үүднээс авч үзвэл BRCA1 PV-ууд бүхэлдээ уургийн дагуу тархаж, BRCA2-ийн өөрчлөлтүүд нь BRC давталтын домэйнд илүү ажиглагддаг.
Эцэст нь бид МЭӨ клиникопатологийн шинж чанарыг BRCA1/2 PV-тэй харьцуулсан. Хязгаарлагдмал тооны өвчтөнүүдийн улмаас бид зөвхөн Ki-67 болон хавдрын зэрэг хооронд мэдэгдэхүйц хамаарал байгааг олж мэдсэн. Хэдийгээр Ки-67-ийн үнэлгээ, тайлбар нь бага зэрэг маргаантай хэвээр байгаа ч үржлийн өндөр хувь нь өвчний дахин давтагдах эрсдэлийг нэмэгдүүлж, дахин давтагдах хугацаа буурахтай холбоотой байх нь гарцаагүй. өндөр" ба "бага" Ki-67 нь 20% байна. Гэсэн хэдий ч энэ босго нь манай BRCA1/2 мутацитай өвчтөний популяцид хамаарахгүй бөгөөд энэ нь Ki-67-ийн дундаж утга нь 25% байна. Ki-67-ийн түвшин өндөр байгаа энэ хандлагыг манай гэрлийн B болон TNBC когортуудын тархалтаар тайлбарлаж болно. 7 хязгаар (25-30%) нь өвчтөнүүдийг прогнозынх нь дагуу илүү сайн давхаргажуулж чадна.53,54 Бидний шинжилгээний үр дүнгээс харахад мэдэгдэхүйц хамаарал нь гайхмаар зүйл биш юм. Өндөр Ki-67 болон зэрэглэл, BRCA1 PV-ийн хооронд тохиолддог. Үнэндээ BRCA1-тэй холбоотой хавдар нь TNBC-ийн ердийн шинж чанартай бөгөөд илүү хүчтэй шинж чанартай байдаг17.
Дүгнэж хэлэхэд, энэхүү судалгаа нь зүүн Сицилийн МЭӨ когорт дахь BRCA1/2-ийн мутацийн төлөв байдлын тухай тайланг өгдөг. Ерөнхийдөө бидний олж мэдсэн зүйл нь мутацийн тархалт болон МЭӨ-ийн клиникопатологийн шинж чанарын аль алинд нь урьд өмнө байгаа нотлох баримтуудтай нийцэж байна. BRCA1/2-мутантын олон популяциудад илүү олон судалгаа хийж, олон тооны BCPV-ийн шинжилгээг ашиглан BCPV-ийн мутацын шинжилгээг өргөжүүлсэн байна. Эдгээр нь BRCA1/2-ээс ялгаатай бөгөөд бага давтамжтай байдаг. Энэ нь удамшлын мутацийн улмаас хорт хавдар тусах эрсдэл нэмэгдэж буй субъектуудын тоог тодорхойлж, зөв ​​удирдах боломжийг олгоно.
Судалгааны зорилгоор хавдрын дээжийг нэрээ нууцлан гаргах зөвшөөрлийг өвчтөнүүд гарын үсэг зурсан болохыг бид баталж байна. Бүх өвчтөнүүд Хельсинкийн тунхаглалын дагуу бичгээр мэдээлэл өгсөн зөвшөөрөлд гарын үсэг зурсан. AOU Policlinico “G.Rodolico – S.Marco” бодлогын дагуу энэ судалгааг ёс зүйн хяналтаас чөлөөлсөн тул BRCA1/-ын дагуу бүх өвчтөнд шинжилгээ хийлгэж, бичгээр өгсөн. s мөн тэдний өгөгдлийг судалгааны зорилгоор ашиглахыг зөвшөөрч байна.
Бид Ёс зүйн хорооны хүсэлтийн дагуу хөхний хорт хавдартай өвчтөнүүдийн тусламж үйлчилгээнд туслалцаа үзүүлсэн профессор Паоло Вигнерид баярлалаа.
Федерика Марторана Istituto Gentili, Eli Lilly, Novartis, Pfizer нарын нэр хүндийн талаар мэдээлж байна. Бусад зохиогчид энэ ажилд ашиг сонирхлын зөрчилгүй гэж мэдэгдээгүй.
1. Sung H, Ferlay J, Siegel RL, et al. Global Cancer Statistics 2020: GLOBOCAN нь дэлхийн 185 оронд 36 хорт хавдрын өвчлөл, нас баралтыг тооцоолжээ.CA Cancer J Clin.2021;71(3):209-249.ca362.doi: