पोषक तत्वांचे संपादन आणि वितरण हे कीटकांच्या चारा शोधण्याच्या आणि जीवनाच्या इतिहासाच्या वैशिष्ट्यांना एकत्रित करते. जीवनाच्या वेगवेगळ्या टप्प्यांवर विशिष्ट पोषक तत्वांमधील कमतरता भरून काढण्यासाठी, कीटक हे पोषक तत्व पूरक आहाराद्वारे मिळवू शकतात, उदाहरणार्थ, पुडल्स म्हणून ओळखल्या जाणाऱ्या प्रक्रियेत पृष्ठवंशीय स्रावांवर आहार देऊन. अ‍ॅनोफिलीस अरेबियानी हा डास कुपोषित असल्याचे दिसून येते आणि म्हणूनच त्याला चयापचय आणि पुनरुत्पादन दोन्हीसाठी पोषक तत्वांची आवश्यकता असते. या अभ्यासाचे उद्दिष्ट म्हणजे पोषक तत्वांच्या संपादनासाठी गोमूत्रावर अ‍ॅना. अरेबियानेसिस आंदोलन केल्याने जीवनाच्या इतिहासाची वैशिष्ट्ये सुधारतात का याचे मूल्यांकन करणे.
ते सुरक्षित आहे याची खात्री करा. अरेबियन्सिसला ताज्या, २४-तास, ७२-तास आणि १६८-तास जुन्या गोमूत्राच्या वासाने आकर्षित केले गेले आणि यजमान शोधणाऱ्या आणि रक्त पिणाऱ्या (४८-तास रक्त जेवणानंतर) मादींचे Y-ट्यूब ऑल्फॅक्टोमीटरमध्ये मोजमाप केले गेले आणि गर्भवती मादींचे स्पॉनिंग चाचणीसाठी मूल्यांकन केले गेले. त्यानंतर चारही वयोगटातील गोमूत्रातील बायोएक्टिव्ह संयुगे ओळखण्यासाठी एकत्रित रासायनिक आणि इलेक्ट्रोफिजियोलॉजिकल विश्लेषण वापरले गेले. Y-ट्यूब आणि फील्ड चाचण्यांमध्ये बायोएक्टिव्ह संयुगांच्या कृत्रिम मिश्रणांचे मूल्यांकन केले गेले. मलेरिया वाहकांसाठी संभाव्य पूरक आहार म्हणून गोमूत्र आणि त्याचे मुख्य नायट्रोजन-युक्त संयुग युरिया तपासण्यासाठी, आहार पॅरामीटर्स आणि जीवन इतिहास वैशिष्ट्ये मोजली गेली. मादी डासांचे प्रमाण आणि गोमूत्र आणि युरिया शोषले गेलेले प्रमाण मूल्यांकन केले गेले. आहार दिल्यानंतर, मादींचे जगणे, बांधलेले उड्डाण आणि पुनरुत्पादन यासाठी मूल्यांकन केले गेले.
यजमानाचे रक्त आणि पोषण शोधा. प्रयोगशाळेत आणि क्षेत्रीय अभ्यासात, अरब लोक ताज्या आणि जुन्या गोमूत्राच्या नैसर्गिक आणि कृत्रिम वासाकडे आकर्षित झाले. गर्भवती माद्या अंडी उगवण्याच्या ठिकाणी गोमूत्राच्या प्रतिसादांबद्दल उदासीन होत्या. यजमान शोधणाऱ्या आणि रक्त शोषणाऱ्या माद्या सक्रियपणे गोमूत्र आणि युरिया शोषून घेतात आणि जीवन-इतिहासाच्या व्यापारानुसार उड्डाण, जगणे किंवा पुनरुत्पादनासाठी शारीरिक स्थितीचे कार्य म्हणून या संसाधनांचे वाटप करतात.
अ‍ॅनोफिलिस अरेबिनिस जीवनाच्या इतिहासातील वैशिष्ट्यांमध्ये सुधारणा करण्यासाठी गोमूत्राचे संपादन आणि वितरण. गोमूत्राचे पूरक आहार दैनंदिन जगण्याची क्षमता आणि वेक्टर घनता वाढवून आणि अप्रत्यक्षपणे उड्डाण क्रियाकलाप बदलून थेट वेक्टर क्षमतेवर परिणाम करते आणि म्हणूनच भविष्यातील मॉडेल्समध्ये याचा विचार केला पाहिजे.
पोषक तत्वांचे संपादन आणि वितरण हे कीटकांच्या चारा आणि जीवन इतिहासाच्या वैशिष्ट्यांना एकत्रित करते [1,2,3]. कीटक अन्न निवडण्यास आणि प्राप्त करण्यास आणि अन्न उपलब्धता आणि पोषक तत्वांच्या गरजांवर आधारित भरपाई देणारे आहार देण्यास सक्षम असतात [1, 3]. पोषक तत्वांचे वितरण जीवन-इतिहास प्रक्रियेवर अवलंबून असते आणि कीटकांच्या जीवनाच्या वेगवेगळ्या टप्प्यांमध्ये आहाराच्या गुणवत्तेसाठी आणि प्रमाणासाठी वेगवेगळ्या आवश्यकता निर्माण करू शकते [1, 2]. विशिष्ट पोषक तत्वांमधील कमतरता भरून काढण्यासाठी, कीटक हे पोषक तत्व पूरक आहाराद्वारे मिळवू शकतात, जसे की चिखल, पृष्ठवंशी प्राण्यांचे विविध मलमूत्र आणि स्राव आणि कॅरियन, ज्याला डबके म्हणतात [2]. जरी फुलपाखरे आणि पतंगांच्या विविध प्रजातींचे प्रामुख्याने वर्णन केले असले तरी, इतर कीटकांच्या क्रमांमध्ये देखील पाण्याचे छिद्र आढळतात आणि या प्रकारच्या संसाधनांकडे आकर्षित होणे आणि त्यांना खाणे आरोग्यावर आणि इतर जीवन-इतिहासाच्या वैशिष्ट्यांवर लक्षणीय परिणाम करू शकते [2, 4, 5, 6],7]. मलेरिया डास अ‍ॅनोफिलिस गॅम्बिया सेन्सू लाटो (एसएल) 'कुपोषित' प्रौढ म्हणून उदयास येतो [8], म्हणून पाणी पिण्याची भूमिका बजावू शकते त्याच्या जीवनाच्या इतिहासातील वैशिष्ट्यांमध्ये महत्त्वाची भूमिका बजावते, परंतु आतापर्यंत या वर्तनाकडे दुर्लक्ष केले गेले आहे. या महत्त्वाच्या वाहनात पोषक तत्वांचे सेवन वाढवण्यासाठी आंदोलनाचा वापर लक्ष देण्यास पात्र आहे कारण याचे महत्त्वाचे साथीचे परिणाम होऊ शकतात.
प्रौढ मादी अ‍ॅनोफिलिस डासांमध्ये नायट्रोजनचे सेवन मर्यादित असते कारण लार्व्हा स्टेजपासून कमी कॅलरीजचा साठा आणि रक्ताच्या जेवणाचा अकार्यक्षम वापर होतो [9]. मादी अ‍ॅन.गॅम्बिया एसएल सामान्यत: पूरक रक्त जेवण देऊन याची भरपाई करते [10, 11], ज्यामुळे अधिक लोकांना रोगाचा संसर्ग होण्याचा धोका असतो आणि डासांना शिकार होण्याचा धोका जास्त असतो. पर्यायी म्हणून, डास कशेरुकी प्राण्यांच्या मलमूत्राच्या पूरक आहाराचा वापर करून नायट्रोजनयुक्त संयुगे मिळवू शकतात जे अनुकूलन आणि उड्डाण गतिशीलता वाढवतात, जसे की इतर कीटकांनी दाखवले आहे [2]. या संदर्भात, अ‍ॅनमधील भावंड प्रजातींपैकी एकाचे मजबूत आणि वेगळे आकर्षण. गॅम्बियन एसएल प्रजाती संकुल, अ‍ॅनोफिलिस अरबीनिस, ताजे आणि वृद्ध गोमूत्र [12,13,14], मनोरंजक आहे. अ‍ॅनोफिलिस अरबीनिस त्याच्या यजमान पसंतींमध्ये संधीसाधू आहे आणि गुरांशी संबंध जोडण्यासाठी आणि त्यांना खाण्यासाठी ओळखले जाते. गाय मूत्र हे नायट्रोजनयुक्त संयुगांनी समृद्ध असलेले संसाधन आहे, ताज्या मूत्रात एकूण नायट्रोजनपैकी 50-95% युरिया आहे. [15, 16]. गोमूत्राचे वय वाढत असताना, सूक्ष्मजीव या संसाधनांचा वापर करून 24 तासांच्या आत नायट्रोजनयुक्त संयुगांची जटिलता कमी करतात [15]. सेंद्रिय नायट्रोजनमध्ये घट झाल्यामुळे अमोनियामध्ये जलद वाढ होत असल्याने, अल्कालोफिलिक सूक्ष्मजीव (ज्यापैकी बरेच डासांसाठी विषारी संयुगे तयार करतात) वाढतात [15], जे मादी असू शकते. अँ.अराबिएन्सिस प्राधान्याने 24 तास किंवा त्यापेक्षा कमी वयाच्या मूत्राकडे आकर्षित होते [13, 14].
या अभ्यासात, यजमान आणि रक्ताने भरलेले Ans शोधण्यात आले. त्याच्या पहिल्या गोनाडोट्रोपिन चक्रादरम्यान, मूत्र मिश्रणाद्वारे युरियासह नायट्रोजनयुक्त संयुगे मिळविण्यासाठी अरबीएन्सिसचे मूल्यांकन करण्यात आले. पुढे, मादी डास हे संभाव्य पोषक संसाधन सुधारित जगण्यासाठी, पुनरुत्पादनासाठी आणि पुढील चारा शोधण्यासाठी कसे वाटप करतात याचे मूल्यांकन करण्यासाठी प्रयोगांची मालिका घेण्यात आली. शेवटी, ताज्या आणि वृद्ध गोमूत्राच्या वासाचे मूल्यांकन करण्यात आले जेणेकरून हे यजमान आणि रक्ताने भरलेले Ans साठी विश्वसनीय संकेत प्रदान करते का हे निश्चित केले जाईल. या संभाव्य पौष्टिक संसाधनाच्या शोधात, अरबीएन्सिसने निरीक्षण केलेल्या विभेदक आकर्षणामागील रासायनिक सहसंबंध शोधले. २४ तासांच्या वृद्ध मूत्रात ओळखल्या जाणाऱ्या अस्थिर सेंद्रिय संयुगे (VOCs) च्या कृत्रिम गंध मिश्रणांचे क्षेत्रीय परिस्थितीत अधिक मूल्यांकन करण्यात आले, प्रयोगशाळेच्या परिस्थितीत प्राप्त झालेल्या निकालांचा विस्तार केला आणि वेगवेगळ्या शारीरिक अवस्थांवर गोवंशीय मूत्राच्या वासाचा प्रभाव दर्शविला. डासांचे आकर्षण. प्राप्त झालेल्या निकालांनी पुष्टी केली की An. अरबीएन्सिस जीवन इतिहासाच्या वैशिष्ट्यांवर प्रभाव पाडण्यासाठी कशेरुकाच्या मूत्रात आढळणारे नायट्रोजनयुक्त संयुगे प्राप्त करते आणि वितरित करते. हे निकाल संभाव्य महामारीविषयक परिणामांच्या संदर्भात आणि वेक्टर देखरेख आणि नियंत्रणासाठी त्यांचा वापर कसा करता येईल या संदर्भात चर्चा केली आहेत.
अ‍ॅनोफिलिस अरेबिकन्स (डोंगोला स्ट्रेन) २५ ± २ °C, ६५ ± ५% RH आणि १२:१२ तास प्रकाश:गडद चक्रावर राखले गेले. लार्वे प्लास्टिकच्या ट्रेमध्ये (२० सेमी × १८ सेमी × ७ सेमी) डिस्टिल्ड वॉटरने भरून पाळले गेले आणि त्यांना टेट्रामिन® फिश फूड (टेट्रा वेर्के, मेले, डीई) दिले गेले. प्युपे ३० मिली कपमध्ये (नोलाटो हर्टिला, आस्टोर्प, एसई) गोळा केले गेले आणि नंतर प्रौढांना बाहेर काढण्यासाठी बगडॉर्म पिंजऱ्यात (३० सेमी × ३० सेमी × ३० सेमी; मेगाव्ह्यू सायन्स, ताइचुंग, तैवान) हलवले गेले. प्रौढांना उदयानंतर ४ दिवसांपर्यंत १०% सुक्रोज सोल्यूशन अॅड लिबिटम (डीपीई) देण्यात आले, ज्या वेळी यजमान शोधणाऱ्या मादींना प्रयोगापूर्वी लगेच आहार देण्यात आला किंवा प्रयोगापूर्वी डिस्टिल्ड वॉटरने रात्रभर उपाशी ठेवण्यात आले, जसे खाली वर्णन केले आहे. फ्लाइट ट्यूब प्रयोगांसाठी वापरल्या जाणाऱ्या महिलांना उपाशी ठेवण्यात आले. फक्त ४-६ तासांसाठी पाणी वापरून. त्यानंतरच्या बायोअसेसाठी रक्त शोषणाऱ्या डासांना तयार करण्यासाठी, ४ डीपीई माद्यांना मेम्ब्रेन फीडिंग सिस्टम (हेमोटेक डिस्कव्हरी वर्कशॉप्स, अ‍ॅक्रिंग्टन, यूके) वापरून डिफायब्रोटिक मेंढ्यांचे रक्त (हॅटुनालॅब, ब्रो, एसई) देण्यात आले. नंतर पूर्णपणे गर्दी असलेल्या माद्यांना वैयक्तिक पिंजऱ्यात स्थानांतरित करण्यात आले आणि खाली वर्णन केल्याप्रमाणे थेट आहार देण्यात आला, किंवा खाली वर्णन केलेल्या प्रयोगांपूर्वी ३ दिवसांसाठी १०% सुक्रोज अॅड लिबिटम देण्यात आला. नंतरच्या माद्यांना फ्लाइट ट्यूब बायोअसेसाठी वापरले गेले आणि प्रयोगशाळेत स्थानांतरित करण्यात आले आणि नंतर प्रयोगापूर्वी ४-६ तास डिस्टिल्ड वॉटर अॅड लिबिटम देण्यात आले.
प्रौढ अरब महिलांमध्ये मूत्र आणि युरियाचे सेवन मोजण्यासाठी आहार चाचण्यांचा वापर करण्यात आला. यजमान शोधणाऱ्या आणि रक्त पिणाऱ्या महिलांना ४८ तासांसाठी १% पातळ केलेले ताजे आणि वृद्ध गोमूत्र, युरियाचे विविध सांद्रता आणि दोन नियंत्रणे (१०% सुक्रोज आणि पाणी) असलेला आहार देण्यात आला. याव्यतिरिक्त, अन्न रंग (१ मिलीग्राम मिली-१ झायलीन सायनाइड एफएफ; सीएएस २६५०-१७-१; सिग्मा-अल्ड्रिच, स्टॉकहोम, एसई) आहारात जोडण्यात आला आणि २५० µl मायक्रोसेंट्रीफ्यूज ट्यूबमध्ये ४ × ४ मॅट्रिक्समध्ये पुरवण्यात आला (अ‍ॅक्सिजन सायंटिफिक, युनियन सिटी, सीए, यूएस; आकृती १ अ) काठावर भरा (~३०० µl). डासांमधील स्पर्धा आणि रंगाच्या रंगाचे संभाव्य परिणाम टाळण्यासाठी, १० डास एका मोठ्या पेट्री डिशमध्ये (१२ सेमी व्यासाचे आणि ६ सेमी उंचीचे; सेमाडेनी, ऑस्टरमुंडिजेन, सीएच; आकृती १ अ) २५ ± २ सेमी °C आणि ६५ ± ५% तापमानात पूर्ण अंधारात ठेवा. सापेक्ष आर्द्रता. हे प्रयोग ५ ते १० वेळा पुनरावृत्ती झाले. आहाराच्या संपर्कात आल्यानंतर, पुढील विश्लेषण होईपर्यंत डासांना -२० डिग्री सेल्सिअस तापमानावर ठेवण्यात आले.
यजमान आणि रक्त शोषक मादी अ‍ॅनोफिलिस अरेबियनस द्वारे शोषलेले गोवंश मूत्र आणि युरिया पहा. आहार चाचणी (A) मध्ये, मादी डासांना ताजे आणि जुने गोमूत्र, युरियाचे विविध सांद्रता, सुक्रोज (10%) आणि डिस्टिल्ड वॉटर (H2O) यांचा समावेश असलेला आहार देण्यात आला. यजमान शोधणाऱ्या (B) आणि रक्त शोषणाऱ्या (C) मादी चाचणी केलेल्या इतर कोणत्याही आहारापेक्षा जास्त सुक्रोज शोषून घेतात. लक्षात ठेवा की यजमान शोधणाऱ्या मादी 168-तासांच्या गोमूत्र (B) पेक्षा कमी 72-तासांचे गोमूत्र शोषून घेतात. मूत्रातील सरासरी एकूण नायट्रोजन सामग्री (± मानक विचलन) इनसेटमध्ये दर्शविली आहे. यजमान शोधणाऱ्या (D, F) आणि रक्त शोषणाऱ्या (E, G) मादी डोस-अवलंबित पद्धतीने युरिया घेतात. वेगवेगळ्या अक्षरांच्या नावांसह सरासरी इनहेल्ड व्हॉल्यूम (D, E) एकमेकांपासून लक्षणीयरीत्या भिन्न होते (टुकीच्या पोस्ट हॉक विश्लेषणाचा वापर करून एकतर्फी ANOVA; p < 0.05). त्रुटी बार सरासरी (BE) च्या मानक त्रुटी दर्शवतात. सरळ डॅश केलेली रेषा लॉग-रेषीय प्रतिगमन रेषेचे प्रतिनिधित्व करते. (एफ, जी)
शोषलेले अन्न सोडण्यासाठी, डासांना स्वतंत्रपणे १.५ मिली मायक्रोसेंट्रीफ्यूज ट्यूबमध्ये ठेवण्यात आले ज्यामध्ये २३० μl डिस्टिल्ड वॉटर होते आणि डिस्पोजेबल पेस्टल आणि कॉर्डलेस मोटर (VWR इंटरनॅशनल, लुंड, SE) वापरून ऊतींना विस्कळीत करण्यात आले, त्यानंतर १० केआरपीएमवर १० मिनिटांसाठी सेंट्रीफ्यूगेशन करण्यात आले. सुपरनॅटंट (२०० μl) ९६-वेल मायक्रोप्लेट (सिग्मा-अल्ड्रिच) मध्ये हस्तांतरित करण्यात आले आणि स्पेक्ट्रोफोटोमीटर-आधारित मायक्रोप्लेट रीडर (SPECTROStar® Nano, BMG Labtech, Ortenberg, DE) nm वापरून शोषकता (λ620) निश्चित करण्यात आली. पर्यायीरित्या, डासांना १ मिली डिस्टिल्ड पाण्यात ग्राउंड करण्यात आले, ज्यापैकी ९०० μl स्पेक्ट्रोफोटोमेट्रिक विश्लेषणासाठी क्युव्हेटमध्ये हस्तांतरित करण्यात आले (λ ६२० nm; UV १८००, Shimadzu, Kista, SE). आहारातील सेवनाचे प्रमाण निश्चित करण्यासाठी, ०.२ μl मिळविण्यासाठी सिरीयल डायल्युशनद्वारे एक मानक वक्र तयार करण्यात आला. १ मिलीग्राम मिली-१ झायलीन सायनाइडचे २.४ µl. त्यानंतर, प्रत्येक डासाने किती अन्न खाल्ले हे निश्चित करण्यासाठी ज्ञात रंगांच्या सांद्रतांची ऑप्टिकल घनता वापरली गेली.
व्हॉल्यूम डेटाचे विश्लेषण एकतर्फी विश्लेषण (ANOVA) वापरून केले गेले आणि त्यानंतर टुकीच्या पोस्ट हॉक पेअरवाइज तुलना (JMP Pro, v14.0.0, SAS इन्स्टिट्यूट इंक., कॅरी, NC, US, 1989–2007) केल्या गेल्या. रेषीय प्रतिगमन विश्लेषणात एकाग्रता-आधारित युरिया सेवनाचे वर्णन केले गेले आणि यजमान-शोधक आणि रक्त शोषक डासांमधील प्रतिसादांची तुलना केली गेली (Mac साठी GraphPad Prism v8.0.0, GraphPad Software, San Diego, CA, US).
प्रत्येक वयोगटातील अंदाजे २० μl मूत्र नमुने क्रोमोसॉर्ब® W/AW (१० मिग्रॅ ८०/१०० मेश, सिग्मा अल्ड्रिक) वर बांधले गेले आणि टिन कॅप्सूलमध्ये (८ मिमी × ५ मिमी) कॅप्सूल घातले गेले. उत्पादकाच्या प्रोटोकॉलनुसार ताज्या आणि जुन्या मूत्रात नायट्रोजनचे प्रमाण निश्चित करण्यासाठी CHNS/O विश्लेषक (फ्लॅश २०००, थर्मो फिशर सायंटिफिक, वॉल्थम, एमए, यूएस) च्या ज्वलन कक्षात कॅप्सूल घातले गेले. मानक म्हणून वापरल्या जाणाऱ्या ज्ञात युरिया सांद्रतेच्या आधारे एकूण नायट्रोजन (g N l-1) मोजण्यात आले.
आहाराचा यजमान शोधणाऱ्या आणि रक्त शोषणाऱ्या मादींच्या अस्तित्वावर होणाऱ्या परिणामाचे मूल्यांकन करण्यासाठी, डासांना स्वतंत्रपणे मोठ्या पेट्री डिशमध्ये (१२ सेमी व्यासाचे आणि ६ सेमी उंचीचे; सेमाडेनी) ठेवण्यात आले होते ज्यामध्ये झाकणात जाळीने झाकलेले छिद्र (३ सेमी व्यासाचे) होते आणि वायुवीजन आणि अन्न पुरवठ्यासाठी होते. आहार ४ डीपीई नंतर थेट देण्यात आला आणि त्यात १% पातळ केलेले ताजे आणि जुने गोमूत्र, युरियाचे चार सांद्रता आणि दोन नियंत्रणे, १०% सुक्रोज आणि पाणी समाविष्ट होते. प्रत्येक आहार ५ मिली सिरिंजमध्ये (थर्मो फिशर सायंटिफिक, गोथेनबर्ग, एसई) घालून डेंटल टॅम्पॉन (डीएबी डेंटल एबी, अपलँड्स व्हॅस्बी, एसई) वर पाईपेट करण्यात आला, प्लंजर काढून टाकण्यात आला आणि पेट्री डिशच्या वर ठेवण्यात आला (आकृती १).१अ). दररोज तुमचा आहार बदला. वर वर्णन केल्याप्रमाणे प्रयोगशाळेची देखभाल करा. जिवंत डासांची गणना दिवसातून दोनदा करण्यात आली, तर शेवटचा डास मरेपर्यंत मृत डास टाकून देण्यात आले (प्रति उपचार n = ४०). विविध आहारांवर खाल्लेल्या डासांच्या जगण्याचे सांख्यिकीय विश्लेषण वापरून केले गेले. आहारांमधील जगण्याच्या वितरणाची तुलना करण्यासाठी कॅप्लान-मेयर जगण्याचे वक्र आणि लॉग-रँक चाचण्या (IBM SPSS सांख्यिकी 24.0.0.0).
अ‍ॅटिसानो आणि इतर [17] वर आधारित एक कस्टम डास उडवण्याची गिरणी, जी ५ मिमी जाडीच्या पारदर्शक अ‍ॅक्रेलिक पॅनल्स (१० सेमी रुंद x १० सेमी लांब x १० सेमी उंच) पासून बनलेली आहे आणि पुढील आणि मागील पॅनल्सशिवाय (आकृती ३: वर) आहे. गॅस क्रोमॅटोग्राफी कॉलम (०.२५ मिमी आयडी; ७.५ सेमी एल) पासून बनवलेल्या उभ्या ट्यूबसह एक पिव्होट असेंब्ली, ज्याचे टोक ९ सेमी अंतरावर असलेल्या निओडायमियम चुंबकांच्या जोडीमध्ये लटकलेल्या कीटकांच्या सुईला चिकटलेले आहे. त्याच मटेरियलपासून बनवलेल्या एका आडव्या ट्यूबने (६.५ सेमी एल) उभ्या ट्यूबला दुभाजित केले आणि एक बांधलेला हात आणि एक हात बनवला ज्यामध्ये प्रकाश-व्यत्यय आणणारा सिग्नल म्हणून अॅल्युमिनियम फॉइलचा एक छोटा तुकडा होता.
२४ तास उपाशी राहिलेल्या मादींना प्रतिबंध करण्यापूर्वी ३० मिनिटे वरील आहार देण्यात आला. पूर्ण आहार दिलेल्या मादी डासांना नंतर बर्फावर २-३ मिनिटे वैयक्तिकरित्या भूल देण्यात आली आणि त्यांना मेणाच्या साहाय्याने कीटकांच्या पिनशी जोडले गेले (जोएल स्वेन्सन्स व्हॅक्सफॅब्रिक एबी, मुंका लजुंगबी, एसई) आणि नंतर त्यांना आडव्या नळ्यांच्या हातांना बांधले गेले. फ्लाइंग मिल. प्रत्येक फ्लाइटची क्रांती एका कस्टम-बिल्ट डेटा लॉगरद्वारे रेकॉर्ड केली गेली, नंतर पीसी-लॅब २०००™ सॉफ्टवेअर (v4.01; वेलेमन, गेव्हरे, बीई) वापरून संग्रहित आणि प्रदर्शित केली गेली. फ्लाइट मिल हवामान-नियमित खोलीत ठेवण्यात आली (१२ तास:१२ तास, प्रकाश: गडद, ​​२५ ± २ °C, ६५ ± ५% RH).
उड्डाण क्रियाकलापांचा नमुना पाहण्यासाठी, २४ तासांच्या कालावधीत प्रति तास एकूण उड्डाण अंतर (मी) आणि सलग उड्डाण क्रियाकलापांची एकूण संख्या मोजली गेली. याव्यतिरिक्त, वैयक्तिक महिलांनी उड्डाण केलेल्या सरासरी अंतरांची तुलना उपचारांमध्ये केली गेली आणि एक-मार्गी ANOVA आणि टुकीच्या पोस्ट हॉक विश्लेषण (JMP Pro, v14.0.0, SAS Institute Inc.) वापरून विश्लेषण केले गेले, जिथे सरासरी अंतर एक अवलंबित चल मानले गेले, तर उपचार हा एक स्वतंत्र घटक आहे. याव्यतिरिक्त, फेऱ्यांची सरासरी संख्या १०-मिनिटांच्या वाढीमध्ये मोजली जाते.
An.arabiensis च्या पुनरुत्पादन कार्यक्षमतेवर आहाराचा परिणाम तपासण्यासाठी, रक्त संकलनानंतर सहा मादी (४ dpe) थेट बगडॉर्म पिंजऱ्यात (३० सेमी × ३० सेमी × ३० सेमी) हलवण्यात आल्या आणि नंतर वर वर्णन केल्याप्रमाणे ४८ तासांसाठी प्रायोगिक आहार देण्यात आला. त्यानंतर आहार काढून टाकण्यात आला आणि २० मिली डिस्टिल्ड वॉटरने भरलेले स्पॉनिंग कप (३० मिली; नोलाटो हर्टिला) तिसऱ्या दिवशी ४८ तासांसाठी देण्यात आले, दर २४ तासांनी बदलले गेले. प्रत्येक आहार पद्धती २०-५० वेळा पुन्हा करा. प्रत्येक प्रायोगिक पिंजऱ्यासाठी अंडी मोजण्यात आली आणि रेकॉर्ड करण्यात आली. डायलक्स-२० मायक्रोस्कोप (DM१०००; अर्न्स्ट लीट्झ वेट्झलर, वेट्झलर, DE) वापरून वैयक्तिक अंड्यांच्या सरासरी आकार आणि लांबीतील फरक (n ≥ २०० प्रति आहार) मूल्यांकन करण्यासाठी अंड्यांच्या उपनमुन्यांचा वापर करण्यात आला. लाइका कॅमेरा (DFC) ३२० R२ ने सुसज्ज; लाइका मायक्रोसिस्टम्स लिमिटेड, डीई). उर्वरित अंडी २४ तासांसाठी मानक संगोपन परिस्थितीत हवामान-नियंत्रित खोलीत ठेवण्यात आली आणि वर वर्णन केल्याप्रमाणे अलीकडेच उदयास आलेल्या पहिल्या इन्स्टार अळ्यांचा उपनमुना (n ≥ २०० प्रति आहार) मोजण्यात आला. उपचारांमध्ये आणि एक-मार्गी ANOVA आणि टुकीच्या पोस्ट हॉक विश्लेषण (JMP Pro, v14.0.0, SAS इन्स्टिट्यूट इंक.) वापरून अंड्यांची संख्या आणि अंडी आणि अळ्यांचा आकार यांची तुलना करण्यात आली.
आर्सी जातीच्या झेबू गुरांमधून गोळा केलेल्या नमुन्यांमधून ताज्या (नमुना घेतल्यानंतर १ तास), २४ तास, ७२ तास आणि १६८ तासांच्या मूत्रातील हेडस्पेस अस्थिर पदार्थ गोळा करण्यात आले. सोयीसाठी, गायी गोठ्यात असताना सकाळी लवकर मूत्र नमुने गोळा करण्यात आले. १० व्यक्तींकडून मूत्र नमुने गोळा करण्यात आले आणि प्रत्येक नमुन्याचे १००-२०० मिली वैयक्तिक पॉलिमाइड बेकिंग बॅगमध्ये (टॉपिट्स कोफ्रेस्को, फ्रिशहाल्टेप्रोडुक्टे जीएमबीएच अँड कंपनी, मिंडेन, डीई) ३ लिटर पॉलिमाइडमध्ये झाकण असलेल्या व्हाइनिल क्लोराइड प्लास्टिक ड्रममध्ये हस्तांतरित करण्यात आले. प्रत्येक गोवंशीय मूत्र नमुन्यातील हेडस्पेस अस्थिर पदार्थ थेट (ताजे) किंवा परिपक्व झाल्यानंतर खोलीच्या तपमानावर २४ तास, ७२ तास आणि १६८ तासांसाठी गोळा केले गेले, म्हणजेच प्रत्येक मूत्र नमुना प्रत्येक वयोगटाचे प्रतिनिधित्व करत होता.
हेडस्पेस अस्थिर पदार्थांच्या संकलनासाठी, डायाफ्राम व्हॅक्यूम पंप (KNF न्यूबर्गर, फ्रीबर्ग, DE) वापरून पॉलीअमाइड बॅगमधून सक्रिय कार्बन-फिल्टर केलेला वायू प्रवाह (100 मिली मिन-1) 2.5 तासांसाठी शोषण स्तंभात प्रसारित करण्यासाठी बंद-लूप सिस्टमचा वापर केला गेला. नियंत्रण म्हणून, रिकाम्या पॉलिअमाइड बॅगमधून हेडस्पेस संकलन केले गेले. शोषण स्तंभ टेफ्लॉन ट्यूबिंग (5.5 सेमी x 3 मिमी आयडी) पासून बनवला गेला होता ज्यामध्ये काचेच्या लोकर प्लगमध्ये 35 मिलीग्राम पोरापाक क्यू (50/80 मेष; वॉटर्स असोसिएट्स, मिलफोर्ड, एमए, यूएस) होते. वापरण्यापूर्वी, स्तंभ 1 मिली रीडिस्टिल्ड एन-हेक्सेन (मर्क, डार्मस्टॅड, DE) आणि 1 मिली पेंटेन (99.0% शुद्ध सॉल्व्हेंट GC ग्रेड, सिग्मा अल्ड्रिक) ने फ्लश केला गेला. शोषित अस्थिर पदार्थांना 400 μl पेंटेनने एल्युट केले गेले. हेडस्पेस संग्रह एकत्रित केले गेले आणि नंतर पुढील विश्लेषणासाठी वापरल्या जाईपर्यंत -20°C वर साठवले गेले.
यजमान शोधणाऱ्या आणि रक्त खाणाऱ्या An. च्या वर्तणुकीशी संबंधित प्रतिक्रिया. ताज्या, २४-तास, ७२-तास आणि १६८-तास-वृद्ध मूत्रातून गोळा केलेल्या हेडस्पेस अस्थिर अर्कांचे विश्लेषण सरळ काचेच्या नळीच्या ओल्फॅक्टोमीटर [१८] वापरून अरबीडोप्सिस डासांच्या अस्थिर अर्कांसाठी करण्यात आले. हे प्रयोग ZT १३-१५ दरम्यान करण्यात आले, जो An च्या घर शोधण्याच्या क्रियाकलापाचा शिखर कालावधी होता. Arab [१९]. एका काचेच्या नळीच्या ओल्फॅक्टोमीटर (८० सेमी × ९.५ सेमी आयडी) ला वरून ३ ± १ lx लाल प्रकाशाने प्रकाशित करण्यात आले. कोळशाचा फिल्टर केलेला आणि आर्द्रीकृत हवा प्रवाह (२५ ± २ °C, ६५ ± २% सापेक्ष आर्द्रता) ३० सेमी s-१ वर बायोअसे पास करतो. स्टेनलेस स्टीलच्या जाळीच्या पडद्यांच्या मालिकेतून हवा जाते, ज्यामुळे लॅमिनर प्रवाह आणि एकसमान प्लम रचना तयार होते. दंत टॅम्पॉन डिस्पेंसर (४ सेमी × १ सेमी; L:D; DAB डेंटल AB), ५ सेमी कॉइलमधून निलंबित ओल्फॅक्टोमीटरचा वाऱ्याच्या दिशेने जाणारा टोक, दर ५ मिनिटांनी उत्तेजक बदलतो. विश्लेषणासाठी, प्रत्येक हेडस्पेस अर्कचे १० μl, १:१० पातळ केलेले, उत्तेजक म्हणून वापरले गेले. नियंत्रण म्हणून समान प्रमाणात पेंटेन वापरले गेले. प्रयोग सुरू होण्याच्या २-३ तास ​​आधी वैयक्तिक यजमान शोधणारे किंवा रक्त शोषणारे डास वैयक्तिक सोडण्याच्या पिंजऱ्यात ठेवण्यात आले. सोडण्याचा पिंजरा ओल्फॅक्टोमीटरच्या डाउनवाइंड बाजूला ठेवण्यात आला आणि डासांना १ मिनिटासाठी अनुकूल होऊ देण्यात आला आणि नंतर पिंजऱ्याचा बटरफ्लाय व्हॉल्व्ह सोडण्यासाठी उघडण्यात आला. सोडल्याच्या ५ मिनिटांत स्त्रोताच्या संपर्कात आलेल्या डासांच्या प्रमाणात उपचार किंवा नियंत्रणाकडे असलेले आकर्षण विश्लेषण केले गेले. प्रत्येक हेडस्पेस अस्थिर अर्क आणि नियंत्रणाची किमान ३० वेळा प्रतिकृती तयार करण्यात आली आणि कोणत्याही एका दिवसाचे परिणाम टाळण्यासाठी, प्रत्येक प्रायोगिक दिवशी समान संख्येने उपचार आणि नियंत्रणे तपासण्यात आली. यजमान आणि रक्त-पोषितांकडून प्रतिसाद मिळवा उत्तर. अरबी विरुद्ध हेडस्पेस सेटचे विश्लेषण नाममात्र लॉजिस्टिक रिग्रेशन वापरून केले गेले आणि त्यानंतर विषम साठी जोडीने तुलना केली गेली. गुणोत्तर (JMP Pro, v14.0.0, SAS Institute Inc.).
अॅनचा अंडी उगवण्याचा प्रतिसाद. ताज्या आणि जुन्या गोमूत्रातील हेडस्पेस अर्कांचे विश्लेषण बगडॉर्म पिंजऱ्यांमध्ये करण्यात आले (३० सेमी × ३० सेमी × ३० सेमी; मेगाव्ह्यू सायन्स). २० मिली डिस्टिल्ड वॉटरने भरलेले प्लास्टिक कप (३० मिली; नोलाटो हर्टिला) स्पॉनिंग सब्सट्रेट प्रदान करतात आणि पिंजऱ्याच्या विरुद्ध कोपऱ्यात २४ सेमी अंतरावर ठेवण्यात आले. १:१० च्या सौम्यतेवर प्रत्येक हेडस्पेस अर्कच्या १० μl सह उपचार कप समायोजित केले गेले. नियंत्रण कप समायोजित करण्यासाठी समान प्रमाणात पेंटेन वापरण्यात आले. स्थिती परिणाम नियंत्रित करण्यासाठी प्रत्येक प्रयोगात उपचार आणि नियंत्रण कपची देवाणघेवाण करण्यात आली. दहा रक्ताने पोसलेल्या मादींना ZT 9-11 वर प्रायोगिक पिंजऱ्यांमध्ये सोडण्यात आले आणि २४ तासांनंतर कपमधील अंडी मोजण्यात आली. स्पॉनिंग इंडेक्स मोजण्याचे सूत्र असे आहे: (ट्रीटमेंट कपमध्ये घातलेल्या अंड्यांची संख्या - कंट्रोल कपमध्ये घातलेल्या अंड्यांची संख्या)/(एकूण अंडी उगवण्याची संख्या). प्रत्येक उपचार ८ वेळा पुनरावृत्ती झाला.
पूर्वी वर्णन केल्याप्रमाणे [20] मादी An.arabiensis चे गॅस क्रोमॅटोग्राफिक आणि इलेक्ट्रॉन अँटेना पॅटर्न डिटेक्शन (GC-EAD) विश्लेषण केले गेले. थोडक्यात, ताजे हेडस्पेस अस्थिर अर्क HP-5 कॉलम (30 m × 0.25 mm id, 0.25 μm फिल्म जाडी, Agilent Technologies) ने सुसज्ज असलेल्या Agilent Technologies 6890 GC (Santa Clara, CA, US) वापरून वेगळे केले गेले. आणि मूत्र वृद्ध होणे. हायड्रोजनचा वापर ४५ सेमी से-१ च्या सरासरी रेषीय प्रवाह दरासह मोबाइल फेज म्हणून केला गेला. प्रत्येक नमुना (२ μl) २२५ °C च्या इनलेट तापमानासह स्प्लिटलेस मोडमध्ये ३० सेकंदांसाठी इंजेक्ट केला गेला. GC ओव्हन तापमान ३५ °C (३ मिनिट होल्ड) ते ३०० °C (१० मिनिट होल्ड) पर्यंत १० °C किमान-१ वर प्रोग्राम केले गेले. GC एफ्लुएंट स्प्लिटरमध्ये, ४ psi नायट्रोजन जोडले गेले आणि ज्वाला आयनीकरण डिटेक्टर आणि EAD दरम्यान Gerstel 3D/2 लो डेड व्हॉल्यूम क्रॉस (Gerstel, Mülheim, DE) मध्ये १:१ विभाजित केले गेले. EAD साठी GC एफ्लुएंट केशिका Gerstel ODP-2 ट्रान्सफर लाइनमधून एका काचेच्या नळीत (१० सेमी × ८ मिमी) पास केली गेली, जिथे ते कार्बन-फिल्टर केलेल्या, आर्द्र हवेत (१.५ लिटर) मिसळले गेले. किमान−१). अँटेना ट्यूबच्या आउटलेटपासून ०.५ सेमी अंतरावर ठेवण्यात आला होता. प्रत्येक डासाची एक प्रतिकृती होती आणि यजमान शोधणाऱ्या डासांसाठी, प्रत्येक वयोगटातील मूत्र नमुन्यांवर किमान तीन प्रतिकृती करण्यात आल्या.
७० eV वर इलेक्ट्रॉन इम्पॅक्ट आयनीकरण मोडमध्ये कार्यरत असलेल्या GC-EAD विश्लेषणात अँटेनल प्रतिसाद मिळविण्यासाठी एकत्रित GC आणि मास स्पेक्ट्रोमीटर (GC-MS; 6890 GC आणि 5975 MS; Agilent Technologies) वापरून ताज्या आणि वृद्ध गोवंशीय मूत्राच्या हेडस्पेस संग्रहात जैविक सक्रिय संयुगांची ओळख. GC मध्ये HP-5MS UI-लेपित फ्यूज्ड सिलिका केशिका स्तंभ (60 m × 0.25 mm आतील व्यास, 0.25 μm फिल्म जाडी) सुसज्ज होते जे हेलियमला ​​मोबाइल फेज म्हणून वापरत होते ज्याचा सरासरी रेषीय प्रवाह दर 35 सेमी s-1 होता. GC-EAD विश्लेषणासाठी समान इंजेक्टर सेटिंग्ज आणि ओव्हन तापमान वापरून 2 μl नमुना इंजेक्ट करण्यात आला. कस्टम लायब्ररी आणि NIST14 लायब्ररी (Agilent) च्या तुलनेत त्यांच्या धारणा वेळेवर (Kovát इंडेक्स) आणि मास स्पेक्ट्रावर आधारित संयुगे ओळखली गेली. प्रामाणिक मानके इंजेक्ट करून ओळखल्या जाणाऱ्या संयुगांची पुष्टी केली गेली (अतिरिक्त फाइल 1: टेबल S2). परिमाणीकरणासाठी, हेप्टाइल एसीटेट (१० एनजी, ९९.८% रासायनिक शुद्धता, अल्ड्रिच) बाह्य मानक म्हणून इंजेक्ट केले गेले.
ताज्या आणि जुन्या मूत्रात ओळखल्या जाणाऱ्या जैवक्रिय संयुगे असलेल्या कृत्रिम गंध मिश्रणाच्या प्रभावीतेचे मूल्यांकन करणे जे यजमान-शोधक आणि रक्त-शोषकांना आकर्षित करते Ans.arabiensis, वरीलप्रमाणेच ओल्फॅक्टोमीटर आणि प्रोटोकॉल वापरून. कृत्रिम मिश्रणांनी ताज्या, २४-तास, ४८-तास, ७२-तास आणि १६८-तास वयाच्या मूत्राच्या मिश्र हेडस्पेस अस्थिर अर्कांमध्ये संयुगांची रचना आणि प्रमाणांची नक्कल केली (आकृती ५D-G; अतिरिक्त फाइल १: टेबल S2). विश्लेषणासाठी, यजमान आणि रक्त-शोषक डासांच्या आकर्षणाचे मूल्यांकन करण्यासाठी, अंदाजे १४०-२४०० एनजीएच-१ पर्यंतच्या एकूण प्रकाशन दरासह, पूर्णपणे कृत्रिम मिश्रणाच्या १:१०० पातळीकरणाचे १० μl वापरा. ​​त्यानंतर, चाचणी पूर्ण मिश्रणांवर केली जाते, ज्यामध्ये संपूर्ण मिश्रणाच्या एकल संयुगांचे वजाबाकी मिश्रण काढून टाकले जाते. यजमान आणि रक्त-शोषकांकडून प्रतिसाद शोधा Ans.अरब विरुद्ध कृत्रिम आणि वजाबाकी मिश्रणांचे विश्लेषण नाममात्र लॉजिस्टिक रिग्रेशन वापरून केले गेले त्यानंतर विषम गुणोत्तरांसाठी जोडीनिहाय तुलना (JMP Pro, v14.0.0, SAS Institute Inc.).
मलेरिया डासांसाठी यजमान अधिवास संकेत म्हणून गोमूत्र काम करू शकते का याचे मूल्यांकन करण्यासाठी, वर वर्णन केल्याप्रमाणे गोळा केलेले ताजे आणि जुने गोमूत्र आणि पाणी जाळीदार ३ लिटर बादल्या (१०० मिली) मध्ये ठेवले गेले आणि यजमान आमिष सापळ्यांमध्ये ठेवले गेले. (BG-HDT आवृत्ती; बायोजेंट्स, रेजेन्सबर्ग, DE). गावातील समुदायापासून ४०० मीटर अंतरावर (सिले, इथिओपिया, ५°५३´२४´उत्तर, ३७°२९´२४´पूर्व) कुरणात ५० मीटर अंतरावर दहा सापळे लावले गेले आणि कायमस्वरूपी प्रजनन स्थळे आणि गावांमध्ये गुरेढोरे नव्हती. यजमानाच्या उपस्थितीचे अनुकरण करण्यासाठी पाच सापळे गरम केले गेले, तर पाच सापळे गरम न करता सोडले गेले. प्रत्येक उपचार स्थान एकूण पाच रात्री रात्री फिरवले जाते. वेगवेगळ्या वयोगटातील मूत्राने आमिष दाखवलेल्या सापळ्यांमध्ये पकडलेल्या डासांच्या संख्येची तुलना बीटा द्विपदी वितरणासह लॉजिस्टिक रिग्रेशन वापरून केली गेली (JMP Pro, v14.0.0, SAS Institute Inc.).
इथिओपियातील ओरोमिया प्रदेशातील माकी शहराजवळील एका मलेरियाग्रस्त गावात (८° ११' ०८" उत्तर, ३८° ८१' ७०" पूर्व; आकृती ६अ). हा अभ्यास ऑगस्टच्या मध्यापासून सप्टेंबरच्या मध्यापर्यंत वार्षिक घरातील अवशिष्ट फवारणी आणि दीर्घ पावसाळ्यापूर्वी करण्यात आला. गावाच्या बाहेरील बाजूस असलेल्या पाच जोड्या (२०-५० मीटर अंतरावर) घरांची निवड अभ्यासासाठी करण्यात आली (आकृती ६अ). घरे निवडण्यासाठी वापरले जाणारे निकष असे होते: घरात कोणत्याही प्राण्यांना परवानगी नाही, घरात स्वयंपाक करण्याची परवानगी नाही (लाकूड किंवा कोळसा ओढण्याची परवानगी नाही) (किमान चाचणी कालावधीत), आणि जास्तीत जास्त दोन रहिवासी असलेली घरे, कीटकनाशके नसलेल्या घरात झोपत आहेत. प्रक्रिया केलेल्या मच्छरदाणीखाली. हेलसिंकीच्या जागतिक वैद्यकीय संघटनेच्या घोषणेद्वारे स्थापित केलेल्या मार्गदर्शक तत्त्वांनुसार, आदिस अबाबा विद्यापीठाच्या नैसर्गिक विज्ञान संकाय (CNS-IRB) च्या संस्थात्मक संशोधन नीतिमत्ता पुनरावलोकन मंडळाने (IRB/022/2016) नैतिक मान्यता दिली आहे. आरोग्य विस्तार कर्मचाऱ्यांच्या मदतीने प्रत्येक कुटुंबप्रमुखाची संमती घेण्यात आली. जिल्हा आणि वॉर्ड ('केबेले') स्तरावर स्थानिक प्रशासनाने संपूर्ण प्रक्रियेला मान्यता दिली आहे. प्रायोगिक डिझाइनमध्ये 2 × 2 लॅटिन चौरस डिझाइनचा अवलंब करण्यात आला, ज्यामध्ये पहिल्या रात्री जोडलेल्या घरांना कृत्रिम मिश्रणे आणि नियंत्रणे नियुक्त करण्यात आली आणि पुढील प्रायोगिक रात्री घरांमध्ये अदलाबदल करण्यात आली. ही प्रक्रिया दहा वेळा पुनरावृत्ती करण्यात आली. याव्यतिरिक्त, निवडलेल्या घरांमध्ये डासांच्या क्रियाकलापांचा अंदाज घेण्यासाठी, दिवसाच्या एकाच वेळी फील्ड ट्रायलच्या सुरुवातीला, मध्यभागी आणि शेवटी सलग पाच रात्री सीडीसी सापळे चालवण्यासाठी सेट केले गेले.
सहा जैविकदृष्ट्या सक्रिय संयुगे असलेले एक कृत्रिम मिश्रण हेप्टेनमध्ये (97.0% सॉल्व्हेंट GC ग्रेड, सिग्मा अल्ड्रिक) विरघळवले गेले आणि कापसाच्या विक डिस्पेंसरचा वापर करून 140 एनजी एच-1 वर सोडले गेले [20]. विक डिस्पेंसरने 12 तासांच्या प्रयोगादरम्यान सर्व संयुगे स्थिर प्रमाणात सोडण्याची परवानगी दिली. नियंत्रण म्हणून हेप्टेनचा वापर केला गेला. रोग नियंत्रण आणि प्रतिबंध केंद्रांच्या (सीडीसी) प्रकाश सापळ्याच्या (जॉन डब्ल्यू. हॉक कंपनी, गेन्सविले, फ्लोरिडा, यूएस; आकृती 6A) प्रवेश बिंदूजवळ कुपी निलंबित करण्यात आली. सापळे जमिनीपासून 0.8 - 1 मीटर वर, बेडच्या पायथ्याजवळ लटकवले गेले आणि एक स्वयंसेवक उपचार न केलेल्या मच्छरदाणीखाली झोपला आणि 18:00 ते 06:30 दरम्यान चालवला गेला. लिंग आणि शारीरिक स्थितीनुसार पकडलेले डास (खालेले, खाऊ न घातलेले, अर्ध-गर्भवती आणि गर्भवती [21] नंतर पॉलिमरेज चेन रिअॅक्शन (PCR) विश्लेषण वापरून ए. गॅम्बिया एसएल म्हणून मॉर्फोलॉजिकल पद्धतीने ओळखल्या जाणाऱ्या प्रजाती ओळखण्यासाठी तपासले गेले. सदस्य कॉम्प्लेक्स [23]. फील्ड स्टडीमध्ये, पेअर केलेल्या घरांच्या ट्रॅप ट्रॅपिंगचे विश्लेषण नाममात्र लॉजिस्टिक फिट मॉडेल वापरून केले गेले, जिथे आकर्षण हे अवलंबित चल होते आणि उपचार (सिंथेटिक मिश्रण विरुद्ध नियंत्रण) हा निश्चित परिणाम होता (JMP® 14.0. 0. SAS इन्स्टिट्यूट इंक.). येथे, आम्ही संभाव्यता गुणोत्तर चाचणीमधून χ2 आणि p-मूल्ये नोंदवतो.
ते सुरक्षित आहे का याचे मूल्यांकन करा. ४ दिवसांच्या (dpe) यजमान-शोधक आणि रक्त-पोषक महिला आहार चाचण्यांनंतर ४८ तासांच्या आत, अरबिएन्सिस थेट आहार देऊन मूत्र, त्याचा मुख्य नायट्रोजन स्रोत, युरिया मिळवू शकला (आकृती १ अ). यजमान-शोधक आणि रक्त-पोषक दोन्ही मादी इतर कोणत्याही आहार किंवा पाण्यापेक्षा लक्षणीयरीत्या जास्त सुक्रोज शोषून घेतात (F(५,४२६) = २०.१५, p < ०.०००१ आणि F(५,२९९) = ५६.००, p < ०.०००१, अनुक्रमे; आकृती १ ब, क). शिवाय, यजमान-शोधक महिलांनी १६८ तासांच्या लघवीच्या तुलनेत ७२ तासांत लघवीत कमी खाल्ले (आकृती १ ब). युरिया असलेले आहार दिल्यावर, यजमान-शोधक महिलांनी इतर सर्व सांद्रता आणि पाण्याच्या तुलनेत २.६९ मिमी वर युरियाचे लक्षणीयरीत्या जास्त प्रमाण शोषले, तर १०% सुक्रोजपासून वेगळे करता येत नाही. (F(10,813) = 15.72, p < 0.0001; आकृती 1D). हे रक्त पिणाऱ्या महिलांच्या प्रतिसादाच्या विरुद्ध होते, ज्या सामान्यतः पाण्यापेक्षा लक्षणीयरीत्या जास्त युरियायुक्त आहार शोषून घेतात, जरी 10% पेक्षा कमी सुक्रोज (F(10,557) = 78.35, p < 0.0001; आकृती 1).1E). शिवाय, दोन शारीरिक अवस्थांमध्ये तुलना करताना, फ्लेबोटोमाइज्ड महिलांनी सर्वात कमी सांद्रतेवर यजमान-शोधणाऱ्या महिलांपेक्षा जास्त युरिया शोषले आणि या महिलांनी जास्त सांद्रतेवर समान प्रमाणात युरिया शोषले (F(1,953)= 78.82, p < 0.0001; आकृती 1F, G). युरियायुक्त आहारातून सेवन करताना इष्टतम मूल्ये असल्याचे दिसून आले (आकृती 1D,E), दोन्ही शारीरिक अवस्थांमधील महिला लॉग-रेषीय पद्धतीने युरिया सांद्रतेच्या संपूर्ण श्रेणीमध्ये शोषलेल्या युरियाचे प्रमाण नियंत्रित करण्यास सक्षम होत्या (आकृती 1F, G). ). त्याचप्रमाणे, मूत्रात नायट्रोजनचे प्रमाण शोषलेल्या प्रमाणात प्रतिबिंबित होते म्हणून, डास मूत्र शोषण्याचे प्रमाण नियंत्रित करून त्यांच्या नायट्रोजन शोषणावर नियंत्रण ठेवतात असे दिसते (आकृती 1B, C आणि B आतडे).
यजमान शोधणाऱ्या आणि रक्त शोषणाऱ्या डासांच्या जगण्यावर मूत्र आणि युरियाचा परिणाम मूल्यांकन करण्यासाठी, मादींना चारही वयोगटातील (ताजे, २४ तास, ७२ तास आणि १६८ तास जमा झाल्यानंतर) मूत्र आणि विविध प्रकारचे युरिया सांद्रता, तसेच डिस्टिल्ड वॉटर आणि १०% सुक्रोज नियंत्रण म्हणून दिले गेले (आकृती २अ). या जगण्याच्या विश्लेषणातून असे दिसून आले की यजमान शोधणाऱ्या मादींमध्ये (मूत्र: χ2 = १०८.५, df = ५, p < ०.०००१; युरिया: χ२ = १२२.८, df = ५, p < ०.०००१; आकृती २ब, क) आणि रक्त शोषणाऱ्या मादींमध्ये (मूत्र: χ२ = ९३.०, df = ५, p < ०.०००१; युरिया: χ२ = १३७.९, df = ५, p < ०.०००१; आकृती २D,E). सर्व प्रयोगांमध्ये, ज्या महिलांना मूत्र, युरिया आणि पाण्याचा आहार देण्यात आला होता, त्यांचा जगण्याचा दर सुक्रोज आहार देण्यात आलेल्या महिलांच्या तुलनेत लक्षणीयरीत्या कमी होता (आकृती २B-E). ताजे आणि शिळे मूत्र पाजलेल्या यजमान शोधणाऱ्या महिलांमध्ये जगण्याचा दर वेगवेगळा होता, ७२ तास शिळे मूत्र (p = ०.०१६) मिळालेल्या यजमान शोधणाऱ्या महिलांमध्ये जगण्याची शक्यता सर्वात कमी होती (आकृती २B). शिवाय, १३५ मिमी युरिया पाजलेल्या महिला पाण्याच्या नियंत्रणांपेक्षा जास्त काळ जगल्या (p < ०.०४) (आकृती २C). पाण्याच्या तुलनेत, ताजे मूत्र आणि २४ तास मूत्र पाजलेल्या महिला अनुक्रमे जास्त काळ जगल्या (p = ०.००१ आणि p = ०.०१२; आकृती २D), तर ७२ तास मूत्र पाजलेल्या महिलांना लहान ताजे मूत्र आणि २४ तास जुने मूत्र (p < ०.०००१ आणि p = ०.०१३, अनुक्रमे; आकृती २D). जेव्हा दिले जाते १३५ मिलीमीटर युरिया, रक्ताने भरलेल्या माद्या युरिया आणि पाण्याच्या इतर सर्व सांद्रतांपेक्षा जास्त काळ जगल्या (p < ०.०१३; आकृती २E).
गोमूत्र आणि युरिया खाणाऱ्या यजमान आणि रक्त शोषणाऱ्या मादी अ‍ॅनोफिलिस अरबिनिसचे अस्तित्व. बायोअसे (A) मध्ये, मादी डासांना ताजे आणि जुने गोमूत्र, युरियाचे विविध सांद्रता, सुक्रोज (10%) आणि डिस्टिल्ड वॉटर (H2O) यांचा समावेश असलेला आहार देण्यात आला. मूत्र (B, D) आणि युरिया (C, E) खाणाऱ्या सर्व मादी आणि सुक्रोज आणि पाणी नियंत्रणे मृत होईपर्यंत यजमान-शोधणाऱ्या (B, C) आणि रक्त शोषणाऱ्या (D, E) डासांचे अस्तित्व दर 12 तासांनी नोंदवले गेले.
२४ तासांच्या कालावधीत फ्लाइट मिल चाचणीमध्ये निश्चित केलेले एकूण अंतर आणि फेऱ्यांची संख्या यजमान शोधणाऱ्या आणि रक्त शोषणाऱ्या डासांमध्ये भिन्न होती, ज्यामुळे एकूणच कमी उड्डाण क्रियाकलाप दिसून आला (आकृती ३). ताजे आणि जुने मूत्र किंवा सुक्रोज आणि पाणी देणारे यजमान शोधणारे डास वेगळे उड्डाण नमुने दर्शवितात (आकृती ३), ताजे मूत्र खाणाऱ्या माद्या पहाटे अधिक सक्रिय असतात, तर २४ आणि १६८ तासांचे मूत्र खाणाऱ्या मादी वेगवेगळ्या उड्डाण नमुन्यांचे प्रदर्शन करतात आणि प्रामुख्याने दैनंदिन असतात. सुक्रोज किंवा ७२ तासांचे मूत्र खाणाऱ्या मादी डासांनी २४ तासांच्या कालावधीत संपूर्ण क्रियाकलाप दर्शविला, तर पाणी देणाऱ्या माद्या मध्यावधीत अधिक सक्रिय होत्या. सुक्रोज खाणाऱ्या डासांनी रात्री उशिरा आणि सकाळी लवकर क्रियाकलापांची सर्वोच्च पातळी दर्शविली, तर ७२ तासांचे मूत्र खाणाऱ्या डासांनी २४ तासांच्या कालावधीत क्रियाकलापांमध्ये सतत घट अनुभवली (आकृती ३).
शिकारी रक्त शोषक मादी अ‍ॅनोफिलिस अरबिनिसची उड्डाण कामगिरी गोमूत्र आणि युरिया खाणारी आहे. फ्लाइट मिल चाचणीमध्ये, ताज्या आणि जुन्या गोमूत्रावर खाणाऱ्या मादी डासांना, युरिया, सुक्रोज (१०%) आणि डिस्टिल्ड वॉटर (H2O) चे विविध सांद्रता आडव्या, मुक्तपणे फिरणाऱ्या हातांना (वर) जोडले गेले. यजमान शोधणाऱ्या (डावीकडे) आणि रक्त शोषणाऱ्या (उजवीकडे) मादींसाठी, २४ तासांच्या कालावधीत प्रत्येक आहारासाठी प्रति तास एकूण अंतर आणि उड्डाणांची संख्या नोंदवली गेली (गडद: राखाडी; हलका: पांढरा). सर्केडियन क्रियाकलाप आलेखाच्या उजवीकडे सरासरी अंतर आणि बाउट्सची सरासरी संख्या दर्शविली आहे. त्रुटी बार सरासरीच्या मानक त्रुटी दर्शवतात. सांख्यिकीय विश्लेषण मजकूर पहा
सर्वसाधारणपणे, यजमान शोधणाऱ्या महिलांची एकूण उड्डाण क्रियाकलाप २४ तासांच्या कालावधीत उड्डाण अंतरासारखीच होती. सरासरी उड्डाण अंतर आहाराने (F(5, 138) = 28.27, p < 0.0001) घेतल्याने लक्षणीयरीत्या प्रभावित झाले, आणि यजमान शोधणाऱ्या महिलांनी ७२ तास मूत्र सेवन केले, इतर सर्व आहारांच्या तुलनेत (p < 0.0001) लक्षणीयरीत्या जास्त अंतर उडवले, आणि सुक्रोज-पोषित डास ताज्या (p = 0.022) आणि २४ तासांच्या वयाच्या मूत्र (p = 0.022)-पोषित डासांपेक्षा जास्त वेळ उडले. मूत्र आहाराद्वारे वर्णन केलेल्या उड्डाण क्रियाकलाप पद्धतीच्या उलट, युरिया-पोषित यजमान शोधणाऱ्या महिलांनी २४ तासांच्या कालावधीत सतत उड्डाण क्रियाकलाप प्रदर्शित केला, जो गडद टप्प्याच्या दुसऱ्या सहामाहीत शिखरावर पोहोचला (आकृती ३). जरी क्रियाकलाप नमुने समान होते, तरी यजमान शोधणाऱ्या महिलांनी शोषलेल्या एकाग्रतेवर अवलंबून सरासरी उड्डाण अंतर लक्षणीयरीत्या वाढवले ​​(F(5, 138) = 1310.91, p < ०.०००१). यजमान शोधणाऱ्या महिलांना युरियाचे प्रमाण जास्त प्रमाणात दिले गेले, त्यांना पाणी किंवा सुक्रोज देणाऱ्या महिलांपेक्षा जास्त वेळ लागला (p < ०.०३).
रक्त शोषणाऱ्या डासांची एकूण उड्डाण क्रिया सर्व आहारांमध्ये २४ तासांपेक्षा जास्त काळ स्थिर आणि टिकून राहिली, गडद कालावधीच्या दुसऱ्या सहामाहीत पाणी पिणाऱ्या मादी तसेच ताजे आणि २४ तास वयाच्या मादींमध्ये लघवीची क्रिया वाढली (प्रतिमा ३). रक्त पिणाऱ्या मादींमध्ये मूत्र आहाराचा सरासरी उड्डाण अंतरावर लक्षणीय परिणाम झाला (F(5, 138) = 4.83, p = 0.0004), युरिया आहाराने (F(5, 138) = 1.36, p = 0.24) . इतर मूत्र आणि नियंत्रण आहारासह (ताजे, p = 0.0091; 72 तास, p = 0.0022; 168 तास, p = 0.001; सुक्रोज, p = 0.0017; dH2O, p = 0.036).
मूत्र आणि युरिया आहाराचा पुनरुत्पादन मापदंडांवर होणारा परिणाम अंडी देणाऱ्या बायोअसे (आकृती ४अ) मध्ये मूल्यांकन करण्यात आला आणि प्रत्येक मादीने घातलेल्या अंड्यांची संख्या, अंड्याचा आकार आणि नव्याने उबवलेल्या पहिल्या अंड्याच्या अळ्यांनुसार तपासण्यात आला. अंड्यांची संख्या. मूत्र खाणाऱ्या अरब मादी आहारानुसार बदलतात (F(5,222) = 4.38, p = 0.0008; आकृती ४ब). २४ तास मूत्र खाणाऱ्या मादी, रक्त खाणाऱ्या मादी इतर मूत्र खाणाऱ्या मादींपेक्षा लक्षणीयरीत्या जास्त अंडी देतात आणि सुक्रोज खाणाऱ्या मादींसारख्याच होत्या (आकृती ४ब). त्याचप्रमाणे, मूत्र खाणाऱ्या मादींनी घातलेल्या अंड्यांचा आकार आहारानुसार बदलतो (F(5, 209) = 12.85, p < 0.0001), २४ तास मूत्र खाणाऱ्या आणि सुक्रोज खाणाऱ्या मादी पाणी खाणाऱ्या मादींपेक्षा लक्षणीयरीत्या मोठी अंडी देतात, तर १६८ तास मूत्र खाणाऱ्या मादींची अंडी लक्षणीयरीत्या लहान होती (आकृती ४क). याव्यतिरिक्त, मूत्र खाणाऱ्या मादींनी अळ्यांवर लक्षणीय परिणाम केला आकार (F(5, 187) = 7.86, p < 0.0001), ज्यामध्ये 24- आणि 72-तासांच्या मूत्र-पोषित मादींनी घातलेल्या अंड्यांमधून अंड्यांच्या अंड्यांपेक्षा लक्षणीयरीत्या मोठ्या अळ्या बाहेर पडतात. पाणी-पोषित आणि 168-तास मूत्र-पोषित मादी (आकृती 4D).
गोमूत्र आणि युरिया खाणाऱ्या मादी अ‍ॅनोफिलिस अरेबिनिसची पुनरुत्पादक कार्यक्षमता. रक्त पिणाऱ्या मादी डासांना जैवअसेमध्ये ठेवण्यापूर्वी आणि अंडी घालणारे सब्सट्रेट्स मिळवण्यापूर्वी ४८ तासांसाठी ताजे आणि जुने गोमूत्र, युरियाचे विविध सांद्रता, सुक्रोज (१०%) आणि डिस्टिल्ड वॉटर (H2O) असलेले आहार देण्यात आले. ४८ तास (A). अंडी क्रमांक (B, E), अंड्याचा आकार (C, F) आणि अळ्यांचा आकार (D, G) प्रदान केलेल्या आहारामुळे लक्षणीयरीत्या प्रभावित झाला (गायीचे मूत्र: BD; युरिया: EG). वेगवेगळ्या अक्षरांच्या नावांचा वापर करून मोजलेल्या प्रत्येक पॅरामीटरसाठीचे साधन एकमेकांपासून लक्षणीयरीत्या वेगळे होते (टुकी यांच्या पोस्ट हॉक विश्लेषणाचा वापर करून एकतर्फी ANOVA; p < ०.०५). एरर बार सरासरीच्या मानक त्रुटी दर्शवतात.
मूत्रातील प्रमुख नायट्रोजनयुक्त घटक म्हणून, युरिया, जेव्हा रक्त पिणाऱ्या मादींना आहार म्हणून दिला जातो, तेव्हा सर्व अभ्यासांमध्ये पुनरुत्पादन मापदंडांवर लक्षणीय परिणाम होतो. रक्त पिल्यानंतर युरिया दिलेल्या मादींनी घातलेल्या अंड्यांची संख्या, युरियाच्या एकाग्रतेवर अवलंबून (F(11, 360) = 4.69; p < 0.0001), 134 µM आणि 1.34 mM दरम्यान युरियाच्या एकाग्रतेवर अवलंबून, जास्त अंडी देणाऱ्या मादी जास्त अंडी देतात (आकृती 4E). 134 µM किंवा त्याहून अधिक युरियाच्या एकाग्रतेवर आहार दिलेल्या मादी पाण्यावर आहार दिलेल्या मादींपेक्षा जास्त अंडी देतात (F(10, 4245) = 36.7; p < 0.0001; आकृती 4F), आणि अळ्यांचा आकार, जरी मातांमध्ये युरियाच्या समान सांद्रतेमुळे प्रभावित झाले (F(10, 3305) = 37.9; p < 0.0001) अधिक परिवर्तनशील होते (आकृती 4G).
यजमान शोधणाऱ्या गोवंशीय मूत्र हेडस्पेस अस्थिर अर्कांकडे एकूण आकर्षण. काचेच्या नळीतील ऑल्फॅक्टोमीटर (आकृती 5A) मध्ये मूल्यांकन केलेल्या अरबीएन्सिसवर मूत्र वयाचा (χ2 = 15.9, df = 4, p = 0.0032; आकृती 5B) लक्षणीय परिणाम झाला. पोस्ट हॉक विश्लेषणात असे दिसून आले की 24 तासांमध्ये शिळ्या मूत्राच्या वासामुळे इतर सर्व उपचारांच्या तुलनेत (72 तास: p = 0.0060, 168 तास: p = 0.012, पेंटेन: p = 0.00070) आकर्षणाचे प्रमाण लक्षणीयरीत्या जास्त होते, ताज्या मूत्राचा वास वगळता (p = 0.13; आकृती 5B). जरी रक्त शोषणाऱ्या डासांचे मूत्राच्या वासाकडे एकूण आकर्षण लक्षणीयरीत्या वेगळे नव्हते (χ2 = 8.78, df = 4, p = 0.067; आकृती 5C), या मादी 72 तासांच्या वयाच्या मूत्राच्या तुलनेत हेडस्पेस अस्थिर अर्कांकडे लक्षणीयरीत्या अधिक आकर्षक असल्याचे आढळले. नियंत्रणांच्या तुलनेत (p = 0.0066; आकृती 5C).
यजमान आणि रक्ताने भरलेल्या अ‍ॅनोफिलिस अरेबियनसच्या शोधात नैसर्गिक आणि कृत्रिम गोमूत्राच्या वासांना वर्तणुकीय प्रतिसाद. काचेच्या नळीतील ऑल्फॅक्टोमीटर (A) ची योजनाबद्ध. ताज्या आणि जुन्या गोमूत्रापासून यजमान (B) आणि रक्त शोषणाऱ्या (C) डासांकडे हेडस्पेस वाष्पशील अर्कांचे आकर्षण. लॉर्ड अ‍ॅनची टेंटॅकल प्रतिक्रिया शोधा. ताज्या (D), 24-तास (E), 72-तास (F) आणि 168-तास (G) जुन्या गोमूत्रापासून वेगळे केलेले हेडस्पेस अर्क दाखवले आहेत. इलेक्ट्रॉन अँटेना डिटेक्शन (EAD) ट्रेस गॅस क्रोमॅटोग्राफमधून बाहेर काढलेल्या आणि फ्लेम आयनीकरण डिटेक्टर (FID) द्वारे शोधलेल्या हेडस्पेसमधील बायोएक्टिव्ह संयुगांच्या प्रतिसादात व्होल्टेज बदल दर्शवितात. स्केल बार रिसेप्शन अॅम्प्लिट्यूड (mV) विरुद्ध रिटेन्शन टाइम (s) दर्शवितो. जैविक दृष्ट्या सक्रिय संयुगांचे गुणधर्म आणि रिलीज रेट (µg h-1) दाखवले आहेत. एकच तारा (**) एक सुसंगत कमी-मोठेपणा प्रतिसाद दर्शवितो. दुहेरी तारा (**) पुनरुत्पादन न करण्यायोग्य दर्शवितात प्रतिसाद. यजमान (H) आणि रक्त शोषक (I) शोधा. An.arabiansis ला ताज्या आणि जुन्या गोमूत्राच्या वासांच्या कृत्रिम मिश्रणासाठी वेगवेगळे आकर्षण आहे. वेगवेगळ्या अक्षरांच्या नावांकडे आकर्षित होणाऱ्या डासांचे सरासरी प्रमाण एकमेकांपासून लक्षणीयरीत्या वेगळे होते (टुकीच्या पोस्ट हॉक विश्लेषणाचा वापर करून एकतर्फी ANOVA; p < 0.05). त्रुटी बार स्केलच्या मानक त्रुटी दर्शवतात.
रक्ताच्या जेवणानंतर ७२ तास आणि १२० तासांनी, मादी Ann.arabiensis, अंडी उगवताना, पेंटेन नियंत्रणांच्या तुलनेत ताज्या आणि जुन्या गोमूत्रातून हेडस्पेस वाष्पशील अर्कांना प्राधान्य दिले गेले नाही (χ2 = 3.07, p > 0.05; अतिरिक्त फाइल १: आकृती S1).
महिला Ann.arabiensis साठी, GC-EAD आणि GC-MS विश्लेषणांनी आठ, सहा, तीन आणि तीन जैव सक्रिय संयुगे (आकृती 5D-G) ओळखले. जरी इलेक्ट्रोफिजियोलॉजिकल प्रतिसाद देणाऱ्या संयुगांच्या संख्येत फरक दिसून आला, तरी यापैकी बहुतेक संयुगे ताज्या आणि जुन्या मूत्रातून गोळा केलेल्या प्रत्येक हेडस्पेस अस्थिर अर्कामध्ये उपस्थित होते. म्हणून, प्रत्येक अर्कासाठी, केवळ उंबरठ्याच्या वर असलेल्या मादी अँटेनामधून शारीरिक प्रतिसाद निर्माण करणाऱ्या संयुगे पुढील विश्लेषणांमध्ये समाविष्ट करण्यात आली.
हेडस्पेस कलेक्शनमध्ये बायोएक्टिव्ह संयुगांचा एकूण अस्थिर प्रकाशन दर ताज्या मूत्रात २९ µg h-१ वरून १६८ तासांच्या मूत्रात २४२ µg h-१ पर्यंत वाढला, मुख्यतः p-cresol आणि m-formaldehyde Phenol तसेच फिनॉलमध्ये वाढ झाल्यामुळे. याउलट, २-सायक्लोहेक्सेन-१-वन आणि डेकॅनल सारख्या इतर संयुगांचे प्रकाशन दर वाढत्या मूत्र वयासह कमी झाले, जे क्रोमॅटोग्राम (आकृती ५D)-G डाव्या पॅनेल) मध्ये सिग्नल तीव्रतेत (प्रचुर प्रमाणात) घट आणि या संयुगांना शारीरिक प्रतिसादांमध्ये (आकृती ५D-G उजवा पॅनेल) दिसून आलेल्या घटशी संबंधित आहे.
एकंदरीत, कृत्रिम मिश्रणात ताज्या आणि जुन्या मूत्र हेडस्पेसेसच्या अस्थिर अर्कांमध्ये ओळखल्या जाणाऱ्या जैवक्रिय संयुगांचे समान नैसर्गिक गुणोत्तर होते (आकृती 5D–G) आणि यजमान (χ2 = 8.15, df = 4, p = 0.083; आकृती 5H) किंवा रक्त शोषक डासांच्या शोधात लक्षणीय आकर्षण निर्माण करणारे दिसून आले नाही (χ2 = 4.91, df = 4, p = 0.30; आकृती 5I). तथापि, उपचारांमधील पोस्ट हॉक जोडीनुसार तुलना दर्शविते की यजमान शोधणारे डास पेंटेन नियंत्रणांच्या तुलनेत 24-तास जुन्या मूत्राच्या कृत्रिम मिश्रणासाठी लक्षणीय आकर्षक होते (p = 0.0086; आकृती 5H).
२४-तास-वृद्ध मूत्राच्या कृत्रिम मिश्रणातील वैयक्तिक घटकांच्या भूमिकेचे मूल्यांकन करण्यासाठी, Y-ट्यूब परखात पूर्ण मिश्रणांविरुद्ध सहा वजाबाकी मिश्रणांचे मूल्यांकन केले गेले, ज्यामध्ये वैयक्तिक संयुगे काढून टाकण्यात आली. यजमान-शोधणाऱ्या डासांसाठी, संपूर्ण मिश्रणातून वैयक्तिक संयुगे वजा केल्याने वर्तणुकीच्या प्रतिसादांवर लक्षणीय परिणाम झाला (χ2 = 19.63, df = 6, p = 0.0032; अतिरिक्त फाइल १: आकृती S2A), सर्व वजाबाकी मिश्रणे पूर्णपणे मिश्रित पेक्षा लहान पेक्षा अधिक आकर्षक होती. याउलट, पूर्णपणे कृत्रिम मिश्रणातून वैयक्तिक संयुगे काढून टाकल्याने रक्त शोषणाऱ्या डासांच्या वर्तणुकीच्या प्रतिसादांवर परिणाम झाला नाही (χ2 = 11.38, df = 6, p = 0.077), डेकॅनलचा अपवाद वगळता, ज्यामुळे पूर्ण मिश्रणाच्या आकर्षणाच्या तुलनेत कमी पातळी निर्माण झाली (p = 0.022; अतिरिक्त फाइल १: आकृती S2B).
इथिओपियातील एका मलेरियाग्रस्त गावात, शेताच्या परिस्थितीत डासांना आकर्षित करण्यासाठी २४ तास गोमूत्राच्या कृत्रिम मिश्रणाची प्रभावीता दहा रात्रींसाठी मूल्यांकन करण्यात आली (आकृती ६अ). एकूण ४,८६१ डास पकडण्यात आले आणि ओळखले गेले, त्यापैकी ४५.७% अँथ्रोपस.गॅम्बिया एसएल, १८.९% अ‍ॅनोफिलिस फॅरोएन्सिस आणि ३५.४% क्युलेक्स एसपीपी होते. (अतिरिक्त फाइल १: टेबल एस१). अँनोफिलिस अरबिनिस हा अँ.गॅम्बियन प्रजातींच्या संकुलातील एकमेव सदस्य आहे जो पीसीआर विश्लेषणाद्वारे ओळखला जातो. सरासरी, प्रति रात्री ३२० डास पकडले गेले, ज्या दरम्यान कृत्रिम मिश्रणाच्या आमिषांसह वेळेच्या सापळ्यांनी मिश्रण नसलेल्या जोडलेल्या सापळ्यांपेक्षा जास्त डास पकडले (χ२(०, ३१९६) = १७०.०, पी < ०.०००१). चाचणीच्या सुरुवातीला, मध्यभागी आणि शेवटी पाच नियंत्रण रात्रींपैकी प्रत्येकावर नॉन-बेटेड सापळे लावण्यात आले. डासांची समान संख्या होती प्रत्येक जोडीच्या सापळ्यात पकडलेले, जे घरांमध्ये कोणताही पक्षपात नसल्याचे दर्शवते (χ2(0, 1665) = 9 × 10-13, p > 0.05) आणि अभ्यास कालावधीत लोकसंख्येत घट झाली नाही. नियंत्रण सापळ्यांच्या तुलनेत, कृत्रिम मिश्रण असलेल्या सापळ्यांमध्ये पकडलेल्या डासांची संख्या लक्षणीयरीत्या वाढली: यजमान शोधणारे (χ2(0, 2107) = 138.7, p < 0.0001), अलिकडचे रक्त सेवन करणारे (χ2(0, 650) = 32.2, p < 0.0001) आणि गर्भधारणा (χ2(0, 228) = 6.27, p = 0.0123; अतिरिक्त फाइल 1: टेबल S1). हे पकडलेल्या डासांच्या एकूण संख्येत देखील दिसून येते: यजमान शोधणारे > रक्त शोषणारे > गर्भवती > अर्ध-गर्भवती > नर.
२४ तासांच्या कृत्रिम गोमूत्र गंध मिश्रणाच्या परिणामकारकतेचे क्षेत्रीय मूल्यांकन. दक्षिण-मध्य इथिओपिया (नकाशा) मध्ये, माकी शहराजवळ (इन्सर्ट) शेतातील चाचण्या घेण्यात आल्या, ज्यामध्ये रोग नियंत्रण केंद्र (सीडीसी) प्रकाश सापळा (उजवीकडे) जोडलेल्या घरांमध्ये, लॅटिन चौरस डिझाइनसह (हवाई प्रतिमा) (अ) वापरण्यात आला. कृत्रिम गंध-आमिषित सीडीसी फोटोट्रॅप्स मादी अ‍ॅनोफिलिस अरेबेस्क (ब) आकर्षित करतात आणि कॅप्चर करतात, परंतु अ‍ॅनोफिलिस फॅरोज (क) नाहीत, वेगळ्या पद्धतीने, शारीरिक स्थिती-अवलंबित प्रभाव. याव्यतिरिक्त, या सापळ्यांनी यजमान क्युलेक्स डासांची लक्षणीय वाढलेली संख्या पकडली.(ड) नियंत्रणाशी तुलना केली. डावीकडील बार गंधयुक्त आमिष (हिरव्या) आणि नियंत्रण (खुल्या) सापळ्यांच्या जोड्यांमध्ये पकडलेल्या डासांच्या सरासरी निवड निर्देशांकाचे प्रतिनिधित्व करतात (एन = १०), तर उजवीकडील बार नियंत्रण सापळ्यांच्या जोड्यांमध्ये सरासरी निवड निर्देशांक दर्शवतात (ओपन; एन = ५). तारांकने सांख्यिकीय महत्त्व पातळी दर्शवतात (*पी = ०.०१ आणि ***पी < ०.०००१)
कृत्रिम मिश्रण असलेल्या सापळ्यांमध्ये या तीन प्रजाती वेगवेगळ्या प्रकारे पकडल्या गेल्या. यजमान (χ2(1, 1345) = 71.7, p < 0.0001), रक्त खाणे (χ2(1, 517) = 16.7, p < 0.0001) आणि गर्भधारणा (χ2(1, 180) = 6.11, p = 0.0134) शोधत असताना, कृत्रिम मिश्रण सोडणाऱ्या सापळ्यात .अराबियनिस अडकले होते (आकृती 6B), तर An चे प्रमाण वेगळे नव्हते. वेगवेगळ्या शारीरिक अवस्थेत फॅरोएन्सिस आढळले (आकृती 6C). क्युलेक्ससाठी, नियंत्रण सापळ्यांच्या तुलनेत कृत्रिम मिश्रणाने आमिष दाखवलेल्या सापळ्यांमध्ये यजमान शोधणाऱ्या डासांच्या संख्येत फक्त लक्षणीय वाढ आढळली (χ2(1,1319) = 12.6, p = 0.0004; आकृती 6D).
इथिओपियामधील प्रजनन स्थळे आणि ग्रामीण समुदायांमधील संभाव्य यजमानांच्या बाहेर असलेल्या यजमान आमिष सापळ्यांचा वापर मलेरिया डास यजमान निवासस्थानाचा संकेत म्हणून गोमूत्राचा वास वापरतात की नाही हे मूल्यांकन करण्यासाठी केला गेला. यजमान संकेत, उष्णता आणि गोमूत्राच्या वासासह किंवा त्याशिवाय, कोणतेही डास पकडले गेले नाहीत (अतिरिक्त फाइल 1: आकृती S3). तथापि, उच्च तापमान आणि गोमूत्राच्या वासाच्या उपस्थितीत, मादी मलेरिया डास आकर्षित झाले आणि पकडले गेले, जरी कमी संख्येने, मूत्र वयापासून स्वतंत्र (χ2(5, 25) = 2.29, p = 0.13; अतिरिक्त फाइल 1: आकृती S3). याउलट, उच्च तापमानात पाण्याच्या नियंत्रणांनी मलेरिया डास पकडले नाहीत (अतिरिक्त फाइल 1: आकृती S3).
मलेरिया डास इतर कीटकांप्रमाणेच [2, 4, 24, 25, 26] जीवन-इतिहास वैशिष्ट्ये वाढविण्यासाठी गोमूत्र (म्हणजेच, डबके) वर भरपाई देणारे खाद्य देऊन नायट्रोजनयुक्त संयुगे मिळवतात आणि वितरित करतात. गोमूत्र हे मलेरिया वाहकांसाठी विश्रांतीच्या ठिकाणांशी जवळून संबंधित असलेले सहज उपलब्ध अक्षय संसाधन आहे, जसे की ग्रामीण घरे आणि अंडी देणाऱ्या ठिकाणांजवळील गोठ्या आणि उंच वनस्पती. मादी डास वासाने हे संसाधन शोधतात आणि मूत्रातील नायट्रोजनयुक्त संयुगे शोषण्याचे नियमन करण्यास सक्षम असतात, ज्यामध्ये मूत्रातील प्रमुख नायट्रोजनयुक्त घटक युरियाचा समावेश आहे [15, 16]. मादी डासांच्या शारीरिक स्थितीवर अवलंबून, मूत्रातील पोषक तत्वे यजमान शोधणाऱ्या मादी डासांच्या उड्डाण क्रियाकलाप आणि जगण्याची क्षमता वाढविण्यासाठी तसेच पहिल्या गोनाडोट्रॉपिक चक्रादरम्यान रक्ताने भरलेल्या व्यक्तींच्या जगण्याची आणि पुनरुत्पादक वैशिष्ट्यांसाठी वाटप केली जातात. म्हणून, कुपोषित प्रौढांप्रमाणे बंद असलेल्या मलेरिया वाहकांसाठी मूत्र मिश्रण एक महत्त्वाची पौष्टिक भूमिका बजावते [8], कारण ते मादी डासांना कमी-जोखीम आहारात सहभागी होऊन महत्त्वाचे नायट्रोजनयुक्त संयुगे मिळविण्याची क्षमता प्रदान करते. या शोधात लक्षणीय आहे साथीच्या रोगांचे परिणाम, कारण महिलांचे आयुर्मान, क्रियाकलाप आणि पुनरुत्पादन उत्पादन वाढते, जे सर्व वेक्टर क्षमतेवर परिणाम करतात. शिवाय, हे वर्तन भविष्यातील वेक्टर व्यवस्थापन कार्यक्रमांचे लक्ष्य असू शकते.