Nature.com ला भेट दिल्याबद्दल धन्यवाद.तुम्ही वापरत असलेल्या ब्राउझर आवृत्तीमध्ये मर्यादित CSS सपोर्ट आहे.सर्वोत्तम अनुभवासाठी, आम्ही शिफारस करतो की तुम्ही अद्ययावत ब्राउझर वापरा (किंवा इंटरनेट एक्सप्लोररमध्ये सुसंगतता मोड अक्षम करा).दरम्यान, सतत समर्थन सुनिश्चित करण्यासाठी, आम्ही साइटला शैली आणि JavaScript शिवाय रेंडर करू.
अनियंत्रित रक्तस्त्राव हे मृत्यूच्या प्रमुख कारणांपैकी एक आहे.जलद हेमोस्टॅसिस साध्य केल्याने लढाई, वाहतूक अपघात आणि मृत्यू कमी करण्याच्या ऑपरेशन्स दरम्यान प्रथमोपचार म्हणून या विषयाचे अस्तित्व सुनिश्चित होते.नॅनोपोरस फायबर-रीइन्फोर्स्ड कंपोझिट स्कॅफोल्ड (NFRCS) एक साध्या हेमोस्टॅटिक फिल्म-फॉर्मिंग कंपोझिशन (HFFC) पासून मिळवलेले एक सतत टप्पा म्हणून हेमोस्टॅसिस ट्रिगर आणि वाढवू शकते.NFRCS चा विकास ड्रॅगनफ्लायच्या पंखांच्या रचनेवर आधारित आहे.ड्रॅगनफ्लायच्या पंखांच्या संरचनेत ट्रान्सव्हर्स आणि रेखांशाचा पंख असतात आणि सूक्ष्म संरचनाची अखंडता राखण्यासाठी पंखांचे पडदा एकमेकांशी जोडलेले असतात.HFFC नॅनोमीटर जाडीच्या फिल्मसह फायबरच्या पृष्ठभागावर एकसमान कोट करते आणि नॅनोपोरस संरचना तयार करण्यासाठी यादृच्छिकपणे वितरित कापसाच्या जाडी (Ct) (विखुरलेल्या टप्प्याला) जोडते.सतत आणि विखुरलेल्या टप्प्यांचे संयोजन व्यावसायिकरित्या उपलब्ध उत्पादनांच्या तुलनेत उत्पादनाची किंमत दहा पट कमी करते.सुधारित NFRCS (टॅम्पन्स किंवा रिस्टबँड) विविध बायोमेडिकल ऍप्लिकेशन्समध्ये वापरले जाऊ शकतात.विवो अभ्यासात असा निष्कर्ष काढला आहे की विकसित Cp NFRCS अनुप्रयोगाच्या ठिकाणी कोग्युलेशन प्रक्रिया ट्रिगर करते आणि वाढवते.एनएफआरसीएस सूक्ष्म वातावरणात सुधारणा करू शकते आणि सेल्युलर स्तरावर त्याच्या नॅनोपोरस रचनेमुळे कार्य करू शकते परिणामी एक्सिजन जखमेच्या मॉडेलमध्ये जखमेच्या चांगल्या प्रकारे उपचार होऊ शकतात.
लढाई दरम्यान अनियंत्रित रक्तस्त्राव, इंट्राऑपरेटिव्ह आणि आपत्कालीन परिस्थितीत जखमींच्या जीवनास गंभीर धोका निर्माण होऊ शकतो.या परिस्थितींमुळे परिधीय संवहनी प्रतिकारामध्ये एकूण वाढ होते, ज्यामुळे रक्तस्रावाचा धक्का बसतो.शस्त्रक्रियेदरम्यान आणि नंतर रक्तस्त्राव नियंत्रित करण्यासाठी योग्य उपायांना संभाव्य जीवघेणा 2,3 मानले जाते.मोठ्या वाहिन्यांना झालेल्या नुकसानीमुळे मोठ्या प्रमाणात रक्त कमी होते, परिणामी मृत्यू दर ≤ 50% लढाईत आणि 31% शस्त्रक्रियेदरम्यान होतो.मोठ्या प्रमाणात रक्त कमी झाल्यामुळे शरीराचे प्रमाण कमी होते, ज्यामुळे हृदयाचे उत्पादन कमी होते.एकूण परिधीय संवहनी प्रतिकार वाढणे आणि मायक्रोक्रिक्युलेशनची प्रगतीशील कमजोरी यामुळे जीवन-समर्थन अवयवांमध्ये हायपोक्सिया होतो.जर ही स्थिती प्रभावी हस्तक्षेपाशिवाय चालू राहिली तर रक्तस्रावी शॉक येऊ शकतो.1,4,5.इतर गुंतागुंतांमध्ये हायपोथर्मिया आणि चयापचयाशी ऍसिडोसिसची प्रगती, तसेच कोग्युलेशन डिसऑर्डरचा समावेश आहे जो कोग्युलेशन प्रक्रियेत अडथळा आणतो.गंभीर रक्तस्रावी शॉक मृत्यूच्या उच्च जोखमीशी संबंधित आहे 6,7,8.ग्रेड III (प्रोग्रेसिव्ह) शॉकमध्ये, इंट्राऑपरेटिव्ह आणि पोस्टऑपरेटिव्ह विकृती आणि मृत्यूदरम्यान रुग्णाच्या जगण्यासाठी रक्त संक्रमण आवश्यक आहे.वरील सर्व जीवघेण्या परिस्थितींवर मात करण्यासाठी, आम्ही नॅनोपोरस फायबर-रीइन्फोर्स्ड कंपोझिट स्कॅफोल्ड (NFRCS) विकसित केले आहे जे पाण्यात विरघळणारे हेमोस्टॅटिक पॉलिमरच्या मिश्रणाचा वापर करून किमान पॉलिमर एकाग्रता (0.5%) वापरते.
फायबर मजबुतीकरण वापरून, किफायतशीर उत्पादने विकसित केली जाऊ शकतात.यादृच्छिकपणे मांडलेले तंतू ड्रॅगनफ्लायच्या पंखांच्या संरचनेसारखे दिसतात, पंखांवरील आडव्या आणि उभ्या पट्ट्यांमुळे संतुलित असतात.पंखांच्या आडवा आणि अनुदैर्ध्य शिरा पंखांच्या पडद्याशी संवाद साधतात (चित्र 1).NFRCS मध्ये उत्तम भौतिक आणि यांत्रिक सामर्थ्य असलेली स्कॅफोल्ड प्रणाली म्हणून प्रबलित Ct समाविष्ट आहे (आकृती 1).परवडणारी क्षमता आणि कारागिरीमुळे, सर्जन ऑपरेशन्स आणि ड्रेसिंग दरम्यान कॉटन थ्रेड गेज (Ct) वापरण्यास प्राधान्य देतात. म्हणून, 90% स्फटिकासारखे सेल्युलोज (हेमोस्टॅटिक क्रियाकलाप वाढवते) यासह त्याचे अनेक फायदे लक्षात घेऊन, Ct चा वापर NFRCS9,10 च्या कंकाल प्रणाली म्हणून केला गेला. म्हणून, 90% स्फटिकासारखे सेल्युलोज (हेमोस्टॅटिक क्रियाकलाप वाढवते) यासह त्याचे अनेक फायदे लक्षात घेऊन, Ct चा वापर NFRCS9,10 च्या कंकाल प्रणाली म्हणून केला गेला. Следовательно, учитывая его многочисленные преимущества, в том числе > ९०% кристаллической целюлозы (участвествует в ивности), Ct использовали в качестве скелетной системы NFRCS9,10. त्यामुळे, >90% क्रिस्टलीय सेल्युलोज (वाढीव हेमोस्टॅटिक क्रियाकलापांमध्ये गुंतलेले) सह, त्याचे अनेक फायदे लक्षात घेऊन, Ct चा वापर NFRCS स्केलेटल सिस्टम 9,10 म्हणून केला गेला.因此，考虑到它的多重益处，包括> ९०%系统.因此,考虑到它的多重益处，包括> ९०%म्हणून, 90% पेक्षा जास्त क्रिस्टलीय सेल्युलोज (हेमोस्टॅटिक क्रियाकलाप वाढविण्यास मदत करते) सह त्याचे अनेक फायदे लक्षात घेऊन, Ct चा वापर NFRCS9,10 साठी स्कॅफोल्ड म्हणून केला गेला.Ct वरवरचे लेपित होते (नॅनो-जाड फिल्म निर्मितीचे निरीक्षण केले गेले होते) आणि हेमोस्टॅटिक फिल्म-फॉर्मिंग कंपोझिशन (HFFC) सह एकमेकांशी जोडलेले होते.HFFC मॅट्रिजेल सारखे कार्य करते, यादृच्छिकपणे Ct एकत्र ठेवते.विकसित डिझाईन विखुरलेल्या अवस्थेत तणाव पसरवते (मजबूत करणारे तंतू).कमीतकमी पॉलिमर सांद्रता वापरून चांगल्या यांत्रिक शक्तीसह नॅनोपोरस संरचना प्राप्त करणे कठीण आहे.याशिवाय, विविध बायोमेडिकल ऍप्लिकेशन्ससाठी वेगवेगळे साचे सानुकूलित करणे सोपे नाही.
आकृती ड्रॅगनफ्लाय विंग स्ट्रक्चर (A) वर आधारित NFRCS डिझाइनचे आकृती दर्शवते.ही प्रतिमा ड्रॅगनफ्लायच्या पंखांच्या संरचनेची तुलनात्मक साधर्म्य दाखवते (विंगच्या छेदनबिंदू आणि अनुदैर्ध्य शिरा एकमेकांशी जोडलेल्या असतात) आणि Cp NFRCS (B) चे क्रॉस-सेक्शनल फोटोमिक्रोग्राफ दाखवते.NFRCS चे योजनाबद्ध प्रतिनिधित्व.
वरील मर्यादांचे निराकरण करण्यासाठी सतत टप्पा म्हणून HFFC वापरून NFRCs विकसित केले गेले.HFFC विविध फिल्म-फॉर्मिंग हेमोस्टॅटिक पॉलिमर बनलेले आहे ज्यात चिटोसन (मुख्य हेमोस्टॅटिक पॉलिमर म्हणून), मिथाइलसेल्युलोज (MC), हायड्रॉक्सीप्रोपाइल मिथाइलसेल्युलोज (HPMC 50 cp) आणि पॉलीव्हिनिल अल्कोहोल (PVA) (125 kDa) हे सपोर्ट पॉलिमर म्हणून बनलेले आहे जे सपोर्ट पॉलिमर फॉर्म थ्रोला प्रोत्साहन देते.निर्मिती.पॉलीविनाइलपायरोलिडाइन के30 (पीव्हीपी के30) जोडल्याने NFRCS ची आर्द्रता शोषण्याची क्षमता सुधारली.पॉलीथिलीन ग्लायकॉल 400 (PEG 400) बॉन्डेड पॉलिमर मिश्रणांमध्ये पॉलिमर क्रॉसलिंकिंग सुधारण्यासाठी जोडले गेले.तीन भिन्न HFFC हेमोस्टॅटिक रचना (Cm HFFC, Ch HFFC आणि Cp HFFC), म्हणजे MC (Cm) सह chitosan, HPMC (Ch) सह chitosan आणि PVA (Cp) सह chitosan, Ct वर लागू केले गेले.विविध इन विट्रो आणि इन व्हिव्हो कॅरेक्टरायझेशन अभ्यासांनी NFRCS च्या हेमोस्टॅटिक आणि जखमेच्या उपचारांच्या क्रियाकलापांची पुष्टी केली आहे.NFRCS द्वारे ऑफर केलेले संमिश्र साहित्य विशिष्ट गरजा पूर्ण करण्यासाठी विविध प्रकारचे मचान सानुकूलित करण्यासाठी वापरले जाऊ शकते.
याशिवाय, खालच्या अंगांचे संपूर्ण दुखापत क्षेत्र आणि शरीराच्या इतर भागांना झाकण्यासाठी पट्टी किंवा रोल म्हणून NFRCS मध्ये बदल केले जाऊ शकतात.विशेषत: लढाऊ अवयवांच्या दुखापतींसाठी, डिझाइन केलेले NFRCS डिझाइन अर्धा हात किंवा पूर्ण पाय (पूरक आकृती S11) मध्ये बदलले जाऊ शकते.एनएफआरसीएसला टिश्यू ग्लूसह रिस्टबँड बनवले जाऊ शकते, ज्याचा उपयोग मनगटाच्या गंभीर दुखापतींपासून रक्तस्त्राव थांबवण्यासाठी केला जाऊ शकतो.आमचे मुख्य उद्दिष्ट शक्य तितक्या कमी पॉलिमरसह NFRCS विकसित करणे आहे जे मोठ्या लोकसंख्येपर्यंत (दारिद्रय रेषेखालील) वितरित केले जाऊ शकते आणि ते प्रथमोपचार किटमध्ये ठेवले जाऊ शकते.डिझाइनमध्ये साधे, कार्यक्षम आणि किफायतशीर, NFRCS स्थानिक समुदायांना लाभ देते आणि जागतिक प्रभाव टाकू शकते.
चिटोसन (आण्विक वजन 80 kDa) आणि राजगिरा मर्क, भारत येथून खरेदी केले गेले.हायड्रॉक्सीप्रोपील मिथाइलसेल्युलोज ५० सीपी, पॉलिथिलीन ग्लायकॉल ४०० आणि मिथाइलसेल्युलोज लोबा केमी प्रा.एलएलसी, मुंबई.पॉलिव्हिनाईल अल्कोहोल (आण्विक वजन 125 kDa) (87-90% हायड्रोलायझ्ड) नॅशनल केमिकल्स, गुजरातमधून खरेदी केले गेले.Polyvinylpyrrolidine K30 हे मॉलिकेम, मुंबई येथून खरेदी केले गेले, वाहक म्हणून मिलि क्यू वॉटर (डायरेक्ट-क्यू3 वॉटर प्युरिफिकेशन सिस्टम, मर्क, भारत) सह, तामिळनाडूच्या रामराजू सर्जरी कॉटन मिल्स लि. कडून निर्जंतुकीकरण स्वॅब खरेदी केले गेले.
NFRCS 11,12 लायोफिलायझेशन पद्धत वापरून विकसित केले गेले.सर्व HFFC रचना (तक्ता 1) यांत्रिक स्टिरर वापरून तयार केल्या होत्या.यांत्रिक ढवळत 800 rpm वर सतत ढवळत पाण्यात 1% ऍसिटिक ऍसिड वापरून चिटोसनचे 0.5% द्रावण तयार करा.तक्ता 1 मध्ये दर्शविलेल्या लोड केलेल्या पॉलिमरचे अचूक वजन चिटोसन द्रावणात जोडले गेले आणि स्पष्ट पॉलिमर द्रावण मिळेपर्यंत ढवळले.PVP K30 आणि PEG 400 हे टेबल 1 मध्ये दर्शविलेल्या प्रमाणात परिणामी मिश्रणात जोडले गेले आणि स्पष्ट चिकट पॉलिमर द्रावण मिळेपर्यंत ढवळत राहिल्या.पॉलिमर सोल्यूशनचे परिणामी बाथ पॉलिमर मिश्रणातून अडकलेले हवेचे फुगे काढून टाकण्यासाठी 60 मिनिटांसाठी सोनिकेटेड होते.पूरक आकृती S1(b) मध्ये दर्शविल्याप्रमाणे, 5 मिली HFFC सह पूरक असलेल्या 6-वेल प्लेट (मोल्ड) च्या प्रत्येक विहिरीमध्ये Ct समान रीतीने वितरित केले गेले.
सीटी नेटवर्कमध्ये एचएफएफसीचे एकसमान ओले आणि वितरण प्राप्त करण्यासाठी सहा-विहीर प्लेटला 60 मिनिटांसाठी सॉनिक केले गेले.नंतर सहा-विहीर प्लेट -20 डिग्री सेल्सियसवर 8-12 तासांसाठी गोठवा.NFRCS चे विविध फॉर्म्युलेशन मिळविण्यासाठी फ्रीज प्लेट्स 48 तासांसाठी लायफिलाइज केल्या गेल्या.समान प्रक्रिया विविध आकार आणि संरचना तयार करण्यासाठी वापरली जाते, जसे की टॅम्पन्स किंवा दंडगोलाकार टॅम्पन्स किंवा भिन्न अनुप्रयोगांसाठी इतर कोणताही आकार.
चुंबकीय स्टिरर वापरून अचूक वजन केलेले चिटोसन (80 kDa) (3%) 1% एसिटिक ऍसिडमध्ये विरघळले जाते.चिटोसनच्या परिणामी द्रावणात 1% PEG 400 जोडले गेले आणि 30 मिनिटे ढवळले.परिणामी द्रावण एका चौरस किंवा आयताकृती कंटेनरमध्ये घाला आणि -80 डिग्री सेल्सिअस तापमानात 12 तास गोठवा.सच्छिद्र Cs13 मिळविण्यासाठी गोठलेले नमुने 48 तासांसाठी लायफिलाइज केले गेले.
विकसित NFRCS वर फुरियर ट्रान्सफॉर्म इन्फ्रारेड स्पेक्ट्रोस्कोपी (FTIR) (Shimadzu 8400 s FTIR, Tokyo, Japan) चा वापर करून इतर पॉलिमर 14,15 सह chitosan च्या रासायनिक सुसंगततेची पुष्टी करण्यासाठी प्रयोग केले गेले.सर्व चाचणी केलेल्या नमुन्यांपैकी FTIR स्पेक्ट्रा (स्पेक्ट्रल श्रेणीची रुंदी 400 ते 4000 cm-1) 32 स्कॅन करून मिळवली गेली.
चेन एट अल यांनी वर्णन केलेल्या पद्धतीचा वापर करून सर्व फॉर्म्युलेशनसाठी रक्त शोषण दर (BAR) चे मूल्यांकन केले गेले.16 किरकोळ बदलांसह.अवशिष्ट सॉल्व्हेंट काढून टाकण्यासाठी सर्व रचनांचे विकसित NFRK रात्रभर 105°C तापमानावर व्हॅक्यूम ओव्हनमध्ये वाळवले गेले.30 mg NFRCS (प्रारंभिक नमुना वजन - W0) आणि 30 mg Ct (पॉझिटिव्ह कंट्रोल) 3.8% सोडियम सायट्रेटचे प्रिमिक्स असलेल्या वेगळ्या डिशमध्ये ठेवले होते.पूर्वनिर्धारित वेळेच्या अंतराने, म्हणजे 5, 10, 20, 30, 40 आणि 60 सेकंद, NFRCS काढून टाकण्यात आले आणि 30 सेकंदांसाठी Ct वर नमुने ठेवून त्यांचे पृष्ठभाग शोषून न घेतलेल्या रक्तापासून स्वच्छ केले गेले.प्रत्येक वेळी NFRCS 16 द्वारे शोषलेल्या रक्ताचे अंतिम वजन (W1) मानले गेले.खालील सूत्र वापरून BAR टक्केवारीची गणना करा:
वांग एट अल यांनी नोंदवल्याप्रमाणे रक्त गोठण्याची वेळ (BCT) निर्धारित केली गेली.१७ .NFRCS च्या उपस्थितीत संपूर्ण रक्त (3.8% सोडियम सायट्रेट मिसळलेले उंदराचे रक्त) गुठळ्या होण्यासाठी लागणारा वेळ चाचणी नमुन्याचा BCT म्हणून मोजला गेला.विविध NFRCS घटक (30 मिग्रॅ) 10 मिली स्क्रू कॅपच्या कुपीमध्ये ठेवले आणि 37 डिग्री सेल्सिअस तापमानात उबवले गेले.रक्त (0.5 मिली) शीशीमध्ये जोडले गेले आणि रक्त गोठणे सक्रिय करण्यासाठी 0.2 M CaCl2 चे 0.3 मिली जोडले गेले.शेवटी, एक घट्ट गठ्ठा तयार होईपर्यंत प्रत्येक 15 सेकंदांनी (180° पर्यंत) कुपी उलटा.नमुन्याच्या बीसीटीचा अंदाज 17,18 फ्लिप व्हॅलच्या संख्येने केला जातो.BCT वर आधारित, NFRCS Cm, Ch आणि Cp मधील दोन इष्टतम रचना पुढील व्यक्तिचित्रण अभ्यासासाठी निवडल्या गेल्या.
Ch NFRCS आणि Cp NFRCS रचनांचे BCT Li et al द्वारे वर्णन केलेल्या पद्धतीची अंमलबजावणी करून निर्धारित केले गेले.१९ .15 x 15 mm2 Ch NFRCS, Cp NFRCS आणि Cs (पॉझिटिव्ह कंट्रोल) वेगळ्या पेट्री डिशमध्ये (37 °C) ठेवा.रक्त गोठण्याची प्रक्रिया सुरू करण्यासाठी 3.8% सोडियम सायट्रेट असलेले रक्त 0.2 M CaCl2 मध्ये 10:1 व्हॉल्यूमच्या प्रमाणात मिसळले गेले.0.2 M CaCl2 उंदराच्या रक्ताच्या मिश्रणाचे 20 μl नमुन्याच्या पृष्ठभागावर लावले गेले आणि रिकाम्या पेट्री डिशमध्ये ठेवले.नियंत्रण सीटीशिवाय रिकाम्या पेट्री डिशेसमध्ये रक्त ओतले गेले.0, 3 आणि 5 मिनिटांच्या निश्चित अंतराने, गठ्ठ्याला त्रास न देता डिश असलेल्या नमुन्यात 10 मिली डीआयोनाइज्ड (डीआय) पाणी घालून गोठणे थांबवा.विआयनीकृत पाण्याच्या उपस्थितीत अनकोग्युलेटेड एरिथ्रोसाइट्स (एरिथ्रोसाइट्स) हेमोलिसिस करतात आणि हिमोग्लोबिन सोडतात.UV-Vis स्पेक्ट्रोफोटोमीटर वापरून वेगवेगळ्या टाइम पॉइंट्सवर हिमोग्लोबिन (HA(t)) 540 nm (λmax हिमोग्लोबिन) मोजले गेले.10 मिली डीआयोनाइज्ड पाण्यात 20 μl रक्ताच्या 0 मिनिटांमध्ये हिमोग्लोबिन (AH(0)) चे परिपूर्ण शोषण संदर्भ मानक म्हणून घेतले गेले.रक्ताच्या समान बॅचचा वापर करून HA(t)/HA(0) या गुणोत्तरावरून गोठलेल्या रक्ताचे सापेक्ष हिमोग्लोबिन अपटेक (RHA) मोजले गेले.
टेक्सचर विश्लेषक (टेक्श्चर प्रो सीटी V1.3 बिल्ड 15, ब्रुकफील्ड, यूएसए) वापरून, खराब झालेल्या ऊतींना NFRK चे चिकट गुणधर्म निर्धारित केले गेले.डुकराचे मांस त्वचेच्या आतील बाजूस (चरबीच्या थराशिवाय) उघड्या तळाचा दंडगोलाकार डिश दाबा.नमुने (Ch NFRCS आणि Cp NFRCS) डुकराच्या त्वचेला चिकटून तयार करण्यासाठी कॅन्युलाद्वारे दंडगोलाकार साच्यात लावले गेले.खोलीच्या तपमानावर (RT) (25° C.) 3 मिनिटांच्या उष्मायनानंतर, NFRCS चिकटण्याची ताकद 0.5 मिमी/सेकंद स्थिर दराने नोंदवली गेली.
सर्जिकल सीलंटचे मुख्य वैशिष्ट्य म्हणजे रक्त कमी होणे कमी करताना रक्त गोठणे वाढवणे.NFRCS मधील लॉसलेस कोग्युलेशनचे मूल्यमापन पूर्वी प्रकाशित केलेल्या पद्धतीचा वापर करून किंचित बदल करून केले गेले 19.सेंट्रीफ्यूज ट्यूबच्या एका बाजूला 8 × 5 मिमी 2 छिद्र असलेली मायक्रोसेन्ट्रीफ्यूज ट्यूब (2 मिली) (आतील व्यास 10 मिमी) बनवा (खुल्या जखमेचे प्रतिनिधित्व करा).उघडणे बंद करण्यासाठी NFRCS चा वापर केला जातो आणि बाहेरील कडा सील करण्यासाठी टेपचा वापर केला जातो.3.8% सोडियम सायट्रेट प्रिमिक्स असलेल्या मायक्रोसेन्ट्रीफ्यूज ट्यूबमध्ये 0.2 M CaCl2 चे 20 μl जोडा.10 मिनिटांनंतर, डिशमधून मायक्रोसेन्ट्रीफ्यूज नलिका काढल्या गेल्या आणि NFRK (n = 3) मधून रक्त बाहेर पडल्यामुळे डिशच्या वस्तुमानात वाढ निश्चित केली गेली.रक्त कमी होणे Ch NFRCS आणि Cp NFRCS Cs शी तुलना केली गेली.
मिश्रा आणि चौधरी21 यांनी किरकोळ बदलांसह वर्णन केलेल्या पद्धतीच्या आधारे NFRCS ची ओले अखंडता निश्चित केली गेली.NFRCS ला 100 मिली एर्लेनमेयर फ्लास्कमध्ये 50 मिली पाण्याने ठेवा आणि वरचा भाग न बनवता 60 सेकंद फिरवा.संकलनावर आधारित भौतिक अखंडतेसाठी नमुन्यांची व्हिज्युअल तपासणी आणि प्राधान्य.
HFFC ते Ct ची बंधनकारक शक्ती किरकोळ बदलांसह पूर्वी प्रकाशित केलेल्या पद्धती वापरून अभ्यासली गेली.मिलिक्यू वॉटर (सीटी) च्या उपस्थितीत एनएफआरकेला ध्वनिक लहरींना (बाह्य उत्तेजना) उघड करून पृष्ठभाग कोटिंग अखंडतेचे मूल्यांकन केले गेले.विकसित NFRCS Ch NFRCS आणि Cp NFRCS पाण्याने भरलेल्या बीकरमध्ये ठेवले होते आणि अनुक्रमे 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10 आणि 30 मिनिटांसाठी सोनिकेटेड होते.कोरडे झाल्यानंतर, NFRCS च्या प्रारंभिक आणि अंतिम वजनातील टक्केवारीतील फरक सामग्रीच्या नुकसानाची टक्केवारी (HFFC) मोजण्यासाठी वापरला गेला.इन विट्रो BCT ने पुढे बाइंडिंग स्ट्रेंथ किंवा पृष्ठभागाच्या सामग्रीच्या नुकसानास समर्थन दिले.Ct ला HFFC बंधनकारक करण्याची कार्यक्षमता रक्त गोठणे आणि Ct22 च्या पृष्ठभागावर एक लवचिक कोटिंग प्रदान करते.
विकसित NFRCS ची एकसंधता NFRCS च्या यादृच्छिकपणे निवडलेल्या सामान्य स्थानांमधून घेतलेल्या नमुन्यांच्या BCT (30 mg) द्वारे निर्धारित केली गेली.NFRCS अनुपालन निश्चित करण्यासाठी पूर्वी नमूद केलेल्या BCT प्रक्रियेचे अनुसरण करा.सर्व पाच नमुन्यांमधील समीपता एकसमान पृष्ठभाग कव्हरेज आणि Ct जाळीमध्ये HFFC जमा करणे सुनिश्चित करते.
नाममात्र रक्त संपर्क क्षेत्र (NBCA) पूर्वी काही सुधारणांसह निर्धारित केले गेले होते.Ct, Ch NFRCS, Cp NFRCS आणि Cs च्या दोन पृष्ठभागांमध्ये 20 μl रक्त क्लॅम्प करून रक्त गोठवा.1 तासानंतर, स्टेंटचे दोन भाग वेगळे केले गेले आणि क्लॉटचे क्षेत्र मॅन्युअली मोजले गेले.तीन पुनरावृत्तीचे सरासरी मूल्य NBCA NFRCS19 मानले गेले.
डायनॅमिक व्हेपर सॉर्प्शन (DVS) विश्लेषणाचा वापर एनएफआरसीएसच्या परिणामकारकतेचे मूल्यमापन करण्यासाठी बाह्य वातावरणातून किंवा कोग्युलेशन सुरू करण्यासाठी जबाबदार असलेल्या दुखापतीच्या ठिकाणाहून पाणी शोषून घेण्यासाठी केला गेला.DVS ±0.1 µg च्या वस्तुमान रिझोल्यूशनसह अल्ट्रा-सेन्सिटिव्ह बॅलन्स वापरून गुरुत्वाकर्षणाद्वारे नमुन्यातील बाष्प शोषण आणि तोटा यांचे मूल्यांकन किंवा नोंद करते.संतृप्त आणि कोरड्या वाहक वायूंचे मिश्रण करून नमुन्याभोवती इलेक्ट्रॉनिक मास फ्लो कंट्रोलरद्वारे आंशिक बाष्प दाब (सापेक्ष आर्द्रता) तयार केला जातो. युरोपियन फार्माकोपिया मार्गदर्शक तत्त्वांनुसार, नमुन्यांद्वारे ओलावा शोषणाच्या टक्केवारीच्या आधारावर, नमुने 4 श्रेणींमध्ये वर्गीकृत केले गेले (0-0.012% w/w− नॉन-हायग्रोस्कोपिक, 0.2-2% w/w किंचित हायग्रोस्कोपिक, 2-15% माफक प्रमाणात हायग्रोस्कोपिक, 2-15% माफक प्रमाणात हायग्रोस्कोपिक> 5% हायग्रोस्कोपिक). युरोपियन फार्माकोपिया मार्गदर्शक तत्त्वांनुसार, नमुन्यांद्वारे ओलावा शोषणाच्या टक्केवारीच्या आधारावर, नमुने 4 श्रेणींमध्ये वर्गीकृत केले गेले (0-0.012% w/w− नॉन-हायग्रोस्कोपिक, 0.2-2% w/w किंचित हायग्रोस्कोपिक, 2-15% माफक प्रमाणात, 2-15% माफक प्रमाणात हायग्रो 3% आणि हायग्रो 3%.युरोपियन फार्माकोपियाच्या शिफारशींनुसार, नमुन्यांद्वारे आर्द्रता शोषणाच्या टक्केवारीनुसार, नमुने 4 श्रेणींमध्ये विभागले गेले (0-0.012% w/w – नॉन-हायग्रोस्कोपिक, 0.2-2% w/w किंचित हायग्रोस्कोपिक, 2-%).% умеренно гигроскопичен и > 15% очень гигроскопичен)23. % मध्यम हायग्रोस्कोपिक आणि > 15% अतिशय हायग्रोस्कोपिक)23.根据欧洲药典指南,根据样品吸收水分的百分比，样品分为4 类（0-0.012% w/w- 湀 2 % 湀 典指 %微吸湿性、2-15% 适度吸湿，> 15% 非常吸湿）23.根据 欧洲 药典 指南 ， 根据 吸收 水分 的 百分比 样品 分为 分为 分为 分为 分为 分为 类 %0/分为 类性 、 、 、 0.2-2% W/w 轻微 、 2-15% 适度 吸湿 ，> 15 %非常吸湿）23.युरोपियन फार्माकोपियाच्या शिफारशींनुसार, नमुन्याद्वारे शोषलेल्या आर्द्रतेच्या टक्केवारीनुसार नमुने 4 वर्गांमध्ये विभागले गेले आहेत (0-0.012% वजनाने - नॉन-हायग्रोस्कोपिक, 0.2-2% वजनाने किंचित हायग्रोस्कोपिक, 2-15% वजनाने).% умеренно гигроскопичен, > 15 % очень гигроскопичен) 23. % मध्यम हायग्रोस्कोपिक, > 15% अतिशय हायग्रोस्कोपिक) 23.NFCS X NFCS आणि TsN NFCS ची हायग्रोस्कोपिक कार्यक्षमता DVS TA TGA Q5000 SA विश्लेषकावर निर्धारित केली गेली.या प्रक्रियेदरम्यान, धावण्याची वेळ, सापेक्ष आर्द्रता (RH), आणि 25°C24 वर रिअल-टाइम नमुना वजन प्राप्त झाले.खालील समीकरण वापरून अचूक NFRCS वस्तुमान विश्लेषणाद्वारे ओलावा सामग्री मोजली जाते:
MC म्हणजे NFRCS आर्द्रता.m1 - NSAIDs चे कोरडे वजन.m2 हे दिलेल्या RH वर रिअल-टाइम NFRCS वस्तुमान आहे.
10 तास (< 7 × 10-3 टॉर) साठी 25 °C वर नमुने रिकामे केल्यानंतर द्रव नायट्रोजनसह नायट्रोजन शोषण प्रयोग वापरून एकूण पृष्ठभागाच्या क्षेत्राचा अंदाज लावला गेला. 10 तास (< 7 × 10-3 टॉर) साठी 25 °C वर नमुने रिकामे केल्यानंतर द्रव नायट्रोजनसह नायट्रोजन शोषण प्रयोग वापरून एकूण पृष्ठभागाच्या क्षेत्राचा अंदाज लावला गेला. Общая площадь поверхности оценивалась с помощью эксперимента по адсорбции азота жидким азотом Соверхности оценивалась с помощью эксперимента ние 10 ч (< 7 × 10–3 Торр). 10 तास (< 7 × 10–3 टॉर) साठी 25°C वर नमुने रिकामे केल्यानंतर द्रव नायट्रोजनसह नायट्रोजन शोषण प्रयोग वापरून एकूण पृष्ठभागाच्या क्षेत्राचा अंदाज लावला गेला.25°C 清空样品10 小时（< 7 × 10-3 Torr）后，使用液氮的氮吸附实验估计总表面积.25°C वर Общая площадь поверхности оценивалась с использованием экспериментов по адсорбции азота жидким азотом посенивалась опользованием экспериментов 0 часов при 25°C (< 7 × 10-3 торр). 25°C (<7 x 10-3 torr) वर नमुने 10 तास रिकामे केल्यानंतर द्रव नायट्रोजनसह नायट्रोजन शोषण प्रयोग वापरून एकूण पृष्ठभागाच्या क्षेत्राचा अंदाज लावला गेला.RS 232 सॉफ्टवेअर वापरून NOVA 1000e, ऑस्ट्रिया येथील क्वांटाक्रोमसह एकूण पृष्ठभागाचे क्षेत्रफळ, छिद्राचे प्रमाण आणि NFRCS छिद्र आकार निर्धारित केले गेले.
संपूर्ण रक्तातून 5% आरबीसी (मिश्रित म्हणून खारट) तयार करा.नंतर HFFC (0.25 ml) चे अलिकट 96-वेल प्लेटमध्ये आणि 5% RBC वस्तुमान (0.1 ml) मध्ये हस्तांतरित करा.मिश्रण 37 डिग्री सेल्सिअस तापमानात 40 मिनिटे ठेवा.लाल रक्तपेशी आणि सीरम यांचे मिश्रण सकारात्मक नियंत्रण मानले जाते आणि सलाईन आणि लाल रक्तपेशींचे मिश्रण नकारात्मक नियंत्रण मानले जाते.हेमॅग्लुटिनेशन स्टॅजित्स्की स्केलनुसार निर्धारित केले गेले.प्रस्तावित स्केल खालीलप्रमाणे आहेत: + + + + दाट दाणेदार समुच्चय;+ + + वक्र कडा असलेले गुळगुळीत तळ पॅड;+ + फाटलेल्या कडा असलेले गुळगुळीत तळ पॅड;+ गुळगुळीत पॅडच्या कडाभोवती अरुंद लाल रिंग;- खालच्या विहिरीच्या मध्यभागी (ऋण) स्वतंत्र लाल बटण 12.
इंटरनॅशनल ऑर्गनायझेशन फॉर स्टँडर्डायझेशन (ISO) (ISO10993-4, 1999)26,27 च्या पद्धतीनुसार NFRCS च्या hemocompatibility चा अभ्यास करण्यात आला.सिंग इत्यादींनी वर्णन केलेली गुरुत्वाकर्षण पद्धत.NFRCS च्या उपस्थितीत किंवा पृष्ठभागावर थ्रोम्बस निर्मितीचे मूल्यांकन करण्यासाठी किरकोळ बदल करण्यात आले.500 मिग्रॅ Cs, Ch NFRCS आणि Cp NFRCS फॉस्फेट बफर सलाईन (PBS) मध्ये 24 तास 37°C तापमानात उबवले होते.24 तासांनंतर, PBS काढून टाकण्यात आले आणि NFRCS 3.8% सोडियम सायट्रेट असलेल्या 2 मिली रक्ताने उपचार केले गेले.NFRCS च्या पृष्ठभागावर, उष्मायन केलेल्या नमुन्यांमध्ये 0.1 M CaCl2 चे 0.04 मिली.45 मिनिटांनंतर, कोग्युलेशन थांबविण्यासाठी 5 मिली डिस्टिल्ड वॉटर जोडले गेले.NFRK च्या पृष्ठभागावर जमा झालेल्या रक्तावर 36-38% फॉर्मल्डिहाइड द्रावणाने उपचार केले गेले.फॉर्मल्डिहाइडसह निश्चित केलेल्या गुठळ्या वाळल्या आणि वजन केले गेले.रक्त आणि नमुन्याशिवाय काचेचे वजन (नकारात्मक नियंत्रण) आणि रक्तासह (सकारात्मक नियंत्रण) ग्लासचे वजन मोजून थ्रोम्बोसिसची टक्केवारी मोजली गेली.
प्रारंभिक पुष्टीकरण म्हणून, HFFC पृष्ठभाग कोटिंग, Ct एकमेकांशी जोडलेले आणि छिद्र तयार करण्यासाठी Ct नेटवर्कची क्षमता समजून घेण्यासाठी नमुने ऑप्टिकल सूक्ष्मदर्शकाखाली दृश्यमान करण्यात आले.NFRCS मधील Ch आणि Cp चे पातळ भाग स्केलपेल ब्लेडने ट्रिम केले गेले.परिणामी विभाग एका काचेच्या स्लाइडवर ठेवण्यात आला होता, कव्हरस्लिपने झाकलेला होता आणि कडा गोंदाने निश्चित केल्या होत्या.तयार केलेल्या स्लाइड्स ऑप्टिकल मायक्रोस्कोपखाली पाहिल्या गेल्या आणि वेगवेगळ्या मॅग्निफिकेशन्सवर छायाचित्रे घेण्यात आली.
राइस एट अल.२९ द्वारे वर्णन केलेल्या पद्धतीवर आधारित फ्लूरोसेन्स मायक्रोस्कोपी वापरून सीटी नेटवर्क्समधील पॉलिमर डिपॉझिशन दृश्यमान करण्यात आले. फॉर्म्युलेशनसाठी वापरलेली HFFC रचना फ्लोरोसेंट डाई (राजगिरणी) मध्ये मिसळली गेली आणि NFRCS (Ch & Cp) पूर्वी नमूद केलेल्या पद्धतीनुसार तयार केली गेली. फॉर्म्युलेशनसाठी वापरलेली HFFC रचना फ्लोरोसेंट डाई (राजगिरणी) मध्ये मिसळली गेली आणि NFRCS (Ch & Cp) पूर्वी नमूद केलेल्या पद्धतीनुसार तयार केली गेली.फॉर्म्युलेशनसाठी वापरलेली HFFC रचना फ्लोरोसेंट डाई (राजगिरणी) आणि NFRCS (Ch आणि Cp) मध्ये मिसळून पूर्वी नमूद केलेल्या पद्धतीनुसार प्राप्त केली गेली.将用于配方的HFFC 组合物与荧光染料（苋菜）混合，并按照前面提到的方法制制。将用于配方的HFFC 组合物与荧光染料（苋菜）混合，并按照前面提到的方法制制。फॉर्म्युलेशनमध्ये वापरलेली HFFC रचना फ्लोरोसेंट डाई (अमरंथ) मध्ये मिसळली गेली आणि आधी नमूद केल्याप्रमाणे NFRCS (Ch आणि Cp) प्राप्त केली.NFRK चे पातळ भाग प्राप्त नमुन्यांमधून कापले गेले, काचेच्या स्लाइड्सवर ठेवले गेले आणि कव्हर स्लिप्सने झाकले गेले.हिरवा फिल्टर (310-380 nm) वापरून फ्लोरोसेंट सूक्ष्मदर्शकाखाली तयार केलेल्या स्लाइड्सचे निरीक्षण करा.Ct नेटवर्कमध्ये Ct संबंध आणि अतिरिक्त पॉलिमर डिपॉझिशन समजून घेण्यासाठी 4x मॅग्निफिकेशनवर प्रतिमा घेतल्या गेल्या.
टॅपिंग मोडमध्ये अल्ट्रा-शार्प टीईएसपी कॅन्टीलिव्हरसह अणू शक्ती सूक्ष्मदर्शक (AFM) वापरून NFRCS Ch आणि Cp ची पृष्ठभागाची स्थलाकृति निश्चित केली गेली: 42 N/m, 320 kHz, ROC 2-5 nm, Bruker, Taiwan.सॉफ्टवेअर (स्कॅनिंग प्रोब इमेज प्रोसेसर) वापरून रूट मीन स्क्वेअर (RMS) द्वारे पृष्ठभागाची उग्रता निश्चित केली गेली.पृष्ठभागाची एकसमानता तपासण्यासाठी 3D प्रतिमांवर विविध NFRCS स्थाने प्रस्तुत केली गेली.दिलेल्या क्षेत्रासाठी गुणांचे मानक विचलन पृष्ठभाग खडबडीत म्हणून परिभाषित केले आहे.RMS समीकरणाचा वापर NFRCS31 च्या पृष्ठभागावरील खडबडीतपणा मोजण्यासाठी केला गेला.
Ch NFRCS आणि Cp NFRCS चे पृष्ठभाग आकारविज्ञान समजून घेण्यासाठी FESEM, SU8000, HI-0876-0003, Hitachi, Tokyo चा वापर करून FESEM-आधारित अभ्यास केले गेले, ज्याने Cm NFRCS पेक्षा चांगले BCT दर्शविले.झाओ एट अल यांनी वर्णन केलेल्या पद्धतीनुसार FESEM अभ्यास केला गेला.32 किरकोळ बदलांसह.NFRCS 20 ते 30 mg Ch NFRCS आणि Cp NFRCS 20 μl 3.8% सोडियम साइट्रेट उंदराच्या रक्तात प्रिमिक्स केले होते.रक्त-उपचार केलेल्या नमुन्यांमध्ये 0.2 M CaCl2 चे 20 μl गोठणे सुरू करण्यासाठी जोडले गेले आणि नमुने 10 मिनिटांसाठी खोलीच्या तपमानावर उबवले गेले.याव्यतिरिक्त, सलाईनने स्वच्छ धुवून एनएफआरसीएस पृष्ठभागावरून जास्तीचे एरिथ्रोसाइट्स काढले गेले.
त्यानंतरच्या नमुन्यांवर 0.1% ग्लुटाराल्डिहाइडने उपचार केले गेले आणि नंतर ओलावा काढून टाकण्यासाठी गरम हवेच्या ओव्हनमध्ये 37 डिग्री सेल्सिअसवर वाळवले गेले.वाळलेल्या नमुन्यांना लेपित केले गेले आणि 32 चे विश्लेषण केले गेले.विश्लेषणादरम्यान प्राप्त झालेल्या इतर प्रतिमांमध्ये वैयक्तिक कापूस तंतूंच्या पृष्ठभागावर गुठळ्या तयार होणे, Ct दरम्यान पॉलिमर जमा होणे, एरिथ्रोसाइट मॉर्फोलॉजी (आकार), क्लॉट इंटिग्रिटी आणि एनएफआरसीएसच्या उपस्थितीत एरिथ्रोसाइट मॉर्फोलॉजी होते.उपचार न केलेले NFRCS क्षेत्रे आणि Ch आणि Cp उपचारित NFRCS भागात रक्ताने उष्मायन केले गेले आहे ते प्राथमिक आयन (सोडियम, पोटॅशियम, नायट्रोजन, कॅल्शियम, मॅग्नेशियम, जस्त, तांबे आणि सेलेनियम) 33 साठी स्कॅन केले गेले.गठ्ठा निर्मिती आणि गुठळ्या एकजिनसीपणा दरम्यान मूलभूत आयन संचय समजून घेण्यासाठी उपचार केलेल्या आणि उपचार न केलेल्या नमुन्यांमधील मूलभूत आयन टक्केवारीची तुलना करा.
Ct पृष्ठभागावरील Cp HFFC पृष्ठभागाच्या कोटिंगची जाडी FESEM वापरून निर्धारित केली गेली.Cp NFRCS चे क्रॉस सेक्शन फ्रेमवर्कमधून कापले गेले आणि स्पटर लेपित केले गेले.परिणामी स्पटर कोटिंगचे नमुने FESEM द्वारे पाहण्यात आले आणि पृष्ठभागाच्या कोटिंगची जाडी 34, 35, 36 मोजली गेली.
एक्स-रे मायक्रो-सीटी उच्च-रिझोल्यूशन 3D नॉन-डिस्ट्रक्टिव्ह इमेजिंग प्रदान करते आणि आपल्याला NFRK च्या अंतर्गत संरचनात्मक व्यवस्थेचा अभ्यास करण्यास अनुमती देते.मायक्रो-सीटी नमुन्यातील क्ष-किरणांचे स्थानिक रेखीय क्षीणन गुणांक रेकॉर्ड करण्यासाठी नमुन्यातून जाणारा क्ष-किरण बीम वापरतो, ज्यामुळे आकृतीविषयक माहिती मिळण्यास मदत होते.NFRCS37,38,39 च्या उपस्थितीत शोषण कार्यक्षमता आणि रक्त गोठणे समजून घेण्यासाठी Cp NFRCS आणि रक्त-उपचारित Cp NFRCS मधील Ct चे अंतर्गत स्थान सूक्ष्म-CT द्वारे तपासले गेले.मायक्रो-सीटी (V|tome|x S240, Phoenix, Germany) वापरून रक्त-उपचार केलेल्या आणि उपचार न केलेल्या Cp NFRCS नमुन्यांची 3D संरचना पुनर्रचना करण्यात आली.VG STUDIO-MAX सॉफ्टवेअर आवृत्ती 2.2 वापरून, NFRCS साठी 3D प्रतिमा विकसित करण्यासाठी वेगवेगळ्या कोनातून (आदर्श 360° कव्हरेज) अनेक क्ष-किरण प्रतिमा घेण्यात आल्या.संकलित प्रोजेक्शन डेटा संबंधित साध्या 3D ScanIP शैक्षणिक सॉफ्टवेअरचा वापर करून 3D व्हॉल्यूमेट्रिक प्रतिमांमध्ये पुनर्रचना करण्यात आला.
याव्यतिरिक्त, रक्ताच्या गुठळ्याचे वितरण समजून घेण्यासाठी, रक्त गोठण्यास सुरुवात करण्यासाठी 20 μl प्रिमिक्स्ड साइटेटेड रक्त आणि 0.2 M CaCl2 चे 20 μl NFRCS मध्ये जोडले गेले.तयार केलेले नमुने कडक होण्यासाठी सोडले जातात.NFRK पृष्ठभागावर 0.5% ग्लुटाराल्डिहाइडने उपचार केले गेले आणि 30-40°C तापमानात 30 मिनिटांसाठी गरम हवेच्या ओव्हनमध्ये वाळवले गेले.NFRCS वर तयार झालेली रक्ताची गुठळी स्कॅन केली गेली, पुनर्रचना केली गेली आणि रक्ताच्या गुठळ्याची 3D प्रतिमा व्हिज्युअलाइज केली गेली.
किरकोळ बदलांसह पूर्वी वर्णन केलेल्या पद्धतीचा वापर करून Cp NFRCS (Ch NFRCS च्या तुलनेत सर्वोत्तम) वर बॅक्टेरियाच्या वाढीस प्रतिबंध करणारा पदार्थ तपासणी केली गेली.Cp NFRCS आणि Cp HFFC ची बॅक्टेरियाच्या वाढीस प्रतिबंध करणारा पदार्थ क्रियाकलाप तीन भिन्न चाचणी सूक्ष्मजीव [S.aureus (ग्राम-पॉझिटिव्ह बॅक्टेरिया), E.coli (ग्राम-नकारात्मक जीवाणू) आणि पांढरा Candida (C.albicans)] एका इनक्यूबेटरमध्ये पेट्री डिशमध्ये आगरवर वाढणारा वापरून निर्धारित केला गेला.105-106 CFU ml-1 च्या एकाग्रतेमध्ये 50 मिली पातळ केलेले बॅक्टेरियल कल्चर सस्पेंशन आगर माध्यमावर एकसमान टोचणे.पेट्री डिशमध्ये मध्यम घाला आणि ते घट्ट होऊ द्या.एचएफएफसी (एचएफएफसीसाठी 3 विहिरी आणि नकारात्मक नियंत्रणासाठी 1) भरण्यासाठी आगर प्लेटच्या पृष्ठभागावर विहिरी तयार केल्या होत्या.3 विहिरींमध्ये 200 μl HFFC आणि चौथ्या विहिरीला 200 μl pH 7.4 PBS जोडा.पेट्री डिशच्या दुसर्‍या बाजूला, 12 मिमी Cp NFRCS डिस्क सॉलिड केलेल्या आगरवर ठेवा आणि PBS (pH 7.4) ने ओलावा.सिप्रोफ्लोक्सासिन, एम्पिसिलिन आणि फ्लुकोनाझोल गोळ्या स्टॅफिलोकोकस ऑरियस, एस्चेरिचिया कोली आणि कॅन्डिडा अल्बिकन्ससाठी संदर्भ मानक मानले जातात.प्रतिबंधाचे क्षेत्र व्यक्तिचलितपणे मोजा आणि निषेधाच्या क्षेत्राची डिजिटल प्रतिमा घ्या.
संस्थात्मक नैतिक मान्यतेनंतर, दक्षिण भारतातील कर्नाटकातील मणिपाल येथील कस्तुरबा मेडिकल कॉलेज ऑफ एज्युकेशन अँड रिसर्च येथे हा अभ्यास करण्यात आला.इन विट्रो TEG प्रायोगिक प्रोटोकॉलचे कस्तुरबा मेडिकल कॉलेज, मणिपाल, कर्नाटक (IEC: 674/2020) च्या संस्थात्मक नीतिशास्त्र समितीने पुनरावलोकन केले आणि मंजूर केले.रुग्णालयाच्या रक्तपेढीतून स्वयंसेवक रक्तदात्यांकडून (वय 18 ते 55) विषयांची भरती करण्यात आली.याव्यतिरिक्त, रक्ताचे नमुने गोळा करण्यासाठी स्वयंसेवकांकडून एक माहितीपूर्ण संमती फॉर्म प्राप्त करण्यात आला.नेटिव्ह TEG (N-TEG) ​​चा वापर सोडियम सायट्रेटसह प्रिमिक्स केलेल्या संपूर्ण रक्तावर Cp HFFC फॉर्म्युलेशनच्या प्रभावाचा अभ्यास करण्यासाठी केला गेला.पॉइंट-ऑफ-केअर रिसुसिटेशनमधील भूमिकेसाठी N-TEG व्यापकपणे ओळखले जाते, जे परिणामांमध्ये वैद्यकीयदृष्ट्या महत्त्वपूर्ण विलंब (नियमित कोग्युलेशन चाचण्या) संभाव्यतेमुळे डॉक्टरांसाठी समस्या निर्माण करते.संपूर्ण रक्त वापरून N-TEG विश्लेषण केले गेले.सर्व सहभागींकडून सूचित संमती आणि तपशीलवार वैद्यकीय इतिहास प्राप्त केला गेला.अभ्यासामध्ये हेमोस्टॅटिक किंवा थ्रोम्बोटिक गुंतागुंत असलेल्या सहभागींचा समावेश नाही जसे की गर्भधारणा/प्रसवोत्तर किंवा यकृत रोग.कोग्युलेशन कॅस्केडवर परिणाम करणारी औषधे घेणारे विषय देखील अभ्यासातून वगळण्यात आले होते.मूलभूत प्रयोगशाळा चाचण्या (हिमोग्लोबिन, प्रोथ्रोम्बिन वेळ, सक्रिय थ्रोम्बोप्लास्टिन आणि प्लेटलेट संख्या) मानक प्रक्रियेनुसार सर्व सहभागींवर केल्या गेल्या.N-TEG रक्ताच्या गुठळ्या व्हिस्कोइलास्टिकिटी, प्रारंभिक गुठळ्याची रचना, कण परस्परसंवाद, क्लोट मजबूत करणे आणि क्लॉट लिसिस निर्धारित करते.N-TEG विश्लेषण अनेक सेल्युलर घटक आणि प्लाझ्मा यांच्या एकत्रित परिणामांवर ग्राफिकल आणि संख्यात्मक डेटा प्रदान करते.N-TEG विश्लेषण Cp HFFC (10 µl आणि 50 µl) च्या दोन भिन्न खंडांवर केले गेले.परिणामी, सायट्रिक ऍसिडसह 1 मिली संपूर्ण रक्त Cp HFFC च्या 10 μl मध्ये जोडले गेले.TEG डिश असलेल्या 20 μl 0.2 M CaCl2 मध्ये 1 मिली (Cp HFFC + citrated रक्त), 340 μl मिश्रित रक्त जोडा.त्यानंतर, Cp HFFC41 च्या उपस्थितीत R, K, अल्फा अँगल, MA, G, CI, TPI, EPL, LY 30% रक्त नमुने मोजण्यासाठी TEG डिशेस TEG® 5000, US मध्ये लोड केले गेले.
इन्स्टिट्यूशनल अॅनिमल एथिक्स कमिटी (IAEC), कस्तुरबा स्कूल ऑफ मेडिसिन, मणिपाल इन्स्टिट्यूट ऑफ हायर एज्युकेशन, मणिपाल (IAEC/KMC/69/2020) द्वारे इन व्हिव्हो स्टडी प्रोटोकॉलचे पुनरावलोकन केले गेले आणि मंजूर केले गेले.प्राणी प्रयोग नियंत्रण आणि पर्यवेक्षण (CPCSEA) समितीच्या शिफारशींनुसार सर्व प्राण्यांचे प्रयोग केले गेले.सर्व विवो NFRCS अभ्यास (2 × 2 cm2) मादी विस्टार उंदरांवर (200 ते 250 ग्रॅम वजनाचे) केले गेले.सर्व प्राणी 24-26 डिग्री सेल्सिअस तापमानात अनुकूल झाले होते, प्राण्यांना मानक अन्न आणि पाणी अ‍ॅड लिबिटममध्ये विनामूल्य प्रवेश होता.सर्व प्राणी यादृच्छिकपणे वेगवेगळ्या गटांमध्ये विभागले गेले होते, प्रत्येक गटात तीन प्राणी होते.सर्व अभ्यास प्राण्यांच्या अभ्यासानुसार केले गेले: व्हिवो प्रयोगांचा अहवाल 43 .अभ्यासापूर्वी, प्राण्यांना इंट्रापेरिटोनियल (आयपी) 20-50 मिलीग्राम केटामाइन (प्रति 1 किलो शरीराच्या वजनाच्या) आणि 2-10 मिलीग्राम झायलाझिन (शरीराच्या वजनाच्या प्रति 1 किलो) मिश्रणाने भूल दिली गेली.अभ्यासानंतर, नमुन्यांच्या प्रारंभिक आणि अंतिम वजनातील फरकाचे मूल्यांकन करून रक्तस्त्राव प्रमाण मोजले गेले, तीन चाचण्यांमधून मिळालेले सरासरी मूल्य नमुन्याचे रक्तस्त्राव प्रमाण म्हणून घेतले गेले.
ट्रॉमा, कॉम्बॅट किंवा ट्रॅफिक अपघात (इजा मॉडेल) मध्ये रक्तस्त्राव नियंत्रित करण्यासाठी NFRCS ची क्षमता समजून घेण्यासाठी उंदराच्या शेपटीचे विच्छेदन मॉडेल लागू केले गेले.स्केलपेल ब्लेडने शेपटीचा 50% भाग कापून घ्या आणि सामान्य रक्तस्त्राव सुनिश्चित करण्यासाठी 15 सेकंद हवेत ठेवा.याव्यतिरिक्त, दाब (Ct, Cs, Ch NFRCS आणि Cp NFRCS) लागू करून चाचणीचे नमुने उंदराच्या शेपटीवर ठेवण्यात आले.रक्तस्त्राव आणि पीसीटी चाचणी नमुन्यांसाठी नोंदवले गेले (n = 3)17,45.
युद्धातील NFRCS दाब नियंत्रणाची परिणामकारकता वरवरच्या फेमोरल धमनीच्या मॉडेलवर तपासली गेली.फेमोरल धमनी उघडकीस येते, 24G ट्रोकारने पंक्चर होते आणि 15 सेकंदात रक्तस्त्राव होतो.अनियंत्रित रक्तस्त्राव पाहिल्यानंतर, चाचणीचा नमुना दबाव टाकून पंचर साइटवर ठेवला जातो.चाचणी नमुना लागू केल्यानंतर लगेच, रक्त गोठण्याची वेळ नोंदवली गेली आणि पुढील 5 मिनिटांसाठी हेमोस्टॅटिक कार्यक्षमता दिसून आली.हीच प्रक्रिया Cs आणि Ct46 सह पुनरावृत्ती झाली.
Dowling et al.इंट्राऑपरेटिव्ह रक्तस्रावाच्या संदर्भात हेमोस्टॅटिक सामग्रीच्या हेमोस्टॅटिक संभाव्यतेचे मूल्यांकन करण्यासाठी 47 ने यकृताच्या दुखापतीचे मॉडेल प्रस्तावित केले.Ct नमुने (नकारात्मक नियंत्रण), Cs फ्रेमवर्क (पॉझिटिव्ह कंट्रोल), Ch NFRCS नमुने आणि Cp NFRCS नमुन्यांसाठी BCT नोंदवले गेले.उंदराचा सुप्राहेपॅटिक व्हेना कावा मध्यक लॅपरोटॉमी करून उघड झाला.त्यानंतर, डाव्या लोबचा दूरचा भाग कात्रीने कापला गेला.स्केलपेल ब्लेडने यकृतामध्ये एक चीरा बनवा आणि काही सेकंदांसाठी रक्तस्राव होऊ द्या.अचूक वजन केलेले Ch NFRCS आणि Cp NFRCS चाचणीचे नमुने खराब झालेल्या पृष्ठभागावर कोणत्याही सकारात्मक दाबाशिवाय ठेवण्यात आले आणि BCT ची नोंद करण्यात आली.नियंत्रण गटाने (Ct) नंतर दाब लागू केला आणि त्यानंतर Cs 30 s47 दुखापत न होता.
विकसित पॉलिमर-आधारित NFRCSs च्या जखमेच्या उपचारांच्या गुणधर्मांचे मूल्यमापन करण्यासाठी व्हिव्हो जखमेच्या उपचारांसाठी एक्सिसिनल जखमेच्या मॉडेलचा वापर करून केले गेले.19,32,48 किरकोळ बदलांसह पूर्वी प्रकाशित केलेल्या पद्धतींनुसार एक्सिसिशनल जखमांचे मॉडेल निवडले गेले आणि केले गेले.पूर्वी वर्णन केल्याप्रमाणे सर्व प्राण्यांना भूल देण्यात आली.पाठीच्या त्वचेत गोलाकार खोल चीरा करण्यासाठी बायोप्सी पंच (12 मिमी) वापरा.तयार केलेल्या जखमेच्या ठिकाणी Cs (सकारात्मक नियंत्रण), Ct (कापूस पॅड बरे होण्यात व्यत्यय आणतात हे ओळखून), Ch NFRCS आणि Cp NFRCS (प्रायोगिक गट) आणि कोणत्याही उपचाराशिवाय नकारात्मक नियंत्रण घातले होते.अभ्यासाच्या प्रत्येक दिवशी, जखमेचे क्षेत्र सर्व उंदरांमध्ये मोजले गेले.जखमेच्या भागाचे छायाचित्र घेण्यासाठी आणि नवीन ड्रेसिंग घालण्यासाठी डिजिटल कॅमेरा वापरा.जखमेच्या बंद होण्याची टक्केवारी खालील सूत्राद्वारे मोजली गेली:
अभ्यासाच्या 12 व्या दिवशी जखमेच्या बंद होण्याच्या टक्केवारीवर आधारित, सर्वोत्कृष्ट गटाच्या उंदराच्या त्वचेला (Cp NFRCS) आणि नियंत्रण गट) काढून टाकण्यात आले आणि H&E स्टेनिंग आणि मॅसनच्या ट्रायक्रोम स्टेनिंगद्वारे अभ्यास केला गेला. अभ्यासाच्या 12 व्या दिवशी जखमेच्या बंद होण्याच्या टक्केवारीवर आधारित, सर्वोत्कृष्ट गटाच्या उंदराच्या त्वचेला (Cp NFRCS) आणि नियंत्रण गट) काढून टाकण्यात आले आणि H&E स्टेनिंग आणि मॅसनच्या ट्रायक्रोम स्टेनिंगद्वारे अभ्यास केला गेला.अभ्यासाच्या 12 व्या दिवशी जखमेच्या बंद होण्याच्या टक्केवारीच्या आधारावर, सर्वोत्कृष्ट गट (Cp NFRCS) आणि नियंत्रण गट) उंदरांच्या त्वचेवर हेमॅटॉक्सिलिन-इओसिन आणि मॅसन ट्रायक्रोमने डाग पडून त्याची तपासणी केली गेली.根据研究第12天的伤口闭合百分比，切除最佳组((Cp NFRCS)和对照组)的大鼠皮肤 Ma&Mason貉貉貓皮肤,H进据染色研究.根据研究第12天的伤口闭合百分比，切除最佳组((Cp NFRCS)和对照组)的大鼠皮肤貓有有有有闭皮肤，这据研究第सर्वोत्कृष्ट गटातील (Cp NFRCS) आणि नियंत्रण गटातील उंदीर हेमॅटॉक्सिलिन-इओसिन स्टेनिंग आणि मॅसनच्या ट्रायक्रोम स्टेनिंगसाठी अभ्यासाच्या 12 व्या दिवशी जखमेच्या टक्केवारीच्या आधारावर काढून टाकण्यात आले.अंमलात आणलेली स्टेनिंग प्रक्रिया पूर्वी वर्णन केलेल्या पद्धती 49,50 नुसार चालविली गेली.थोडक्यात, 10% फॉर्मेलिनमध्ये निश्चित केल्यानंतर, नमुने श्रेणीबद्ध अल्कोहोलच्या मालिकेचा वापर करून निर्जलीकरण केले गेले.काढलेल्या ऊतींचे पातळ भाग (5 µm जाड) मिळविण्यासाठी मायक्रोटोम वापरा.हिस्टोपॅथॉलॉजिकल बदलांचा अभ्यास करण्यासाठी नियंत्रणांचे पातळ अनुक्रमिक विभाग आणि Cp NFRCS वर हेमॅटॉक्सिलिन आणि इओसिनने उपचार केले गेले.कोलेजन फायब्रिल्सची निर्मिती शोधण्यासाठी मॅसनचा ट्रायक्रोम डाग वापरला गेला.प्राप्त परिणामांचा पॅथॉलॉजिस्टने आंधळेपणाने अभ्यास केला.
Cp NFRCS नमुन्यांची स्थिरता खोलीच्या तपमानावर (25°C ± 2°C/60% RH ± 5%) 12 महिने 51 साठी अभ्यासली गेली.Cp NFRCS (पृष्ठभागाचा रंग बदलणे आणि सूक्ष्मजीव वाढ) ची दृष्यदृष्ट्या तपासणी करण्यात आली आणि फोल्ड वेअर रेझिस्टन्स आणि BCT साठी सामग्री आणि पद्धती विभागात वर्णन केलेल्या वरील पद्धतींनुसार चाचणी केली गेली.
Cp NFRCS ची स्केलेबिलिटी आणि पुनरुत्पादकता 15×15 cm2 आकारासह Cp NFRCS तयार करून तपासली गेली.याव्यतिरिक्त, विविध Cp NFRCS अंशांमधून 30 mg नमुने (n = 5) काढून टाकण्यात आले आणि अभ्यास केलेल्या नमुन्यांच्या BCT चे पद्धती विभागामध्ये आधी वर्णन केल्याप्रमाणे मूल्यमापन केले गेले.
आम्ही विविध बायोमेडिकल अनुप्रयोगांसाठी Cp NFRCS रचना वापरून विविध आकार आणि संरचना विकसित करण्याचा प्रयत्न केला आहे.अशा आकार किंवा कॉन्फिगरेशनमध्ये नाकातील रक्तस्रावासाठी शंकूच्या आकाराचे स्वॅब, दंत प्रक्रिया आणि योनीतून रक्तस्त्राव करण्यासाठी दंडगोलाकार स्वॅबचा समावेश होतो.
सर्व डेटा संच सरासरी ± मानक विचलन म्हणून व्यक्त केले जातात आणि प्रिझम 5.03 (GraphPad, San Diego, CA, USA) चा वापर करून ANOVA द्वारे विश्लेषण केले गेले आणि त्यानंतर Bonferroni च्या एकाधिक तुलना चाचणी (*p<0.05).
मानवी अभ्यासामध्ये केलेल्या सर्व प्रक्रिया संस्था आणि राष्ट्रीय संशोधन परिषदेच्या मानकांनुसार तसेच हेलसिंकी 1964 च्या घोषणा आणि त्यानंतरच्या सुधारणा किंवा तत्सम नैतिक मानकांनुसार होत्या.सर्व सहभागींना अभ्यासाची वैशिष्ट्ये आणि त्याच्या ऐच्छिक स्वरूपाबद्दल माहिती देण्यात आली.एकदा संकलित केल्यानंतर सहभागी डेटा गोपनीय राहतो.इन विट्रो TEG प्रायोगिक प्रोटोकॉलचे कस्तुरबा मेडिकल कॉलेज, मणिपाल, कर्नाटक (IEC: 674/2020) च्या संस्थात्मक नीतिशास्त्र समितीने पुनरावलोकन केले आणि मंजूर केले.रक्ताचे नमुने गोळा करण्यासाठी स्वयंसेवकांनी सूचित संमतीवर स्वाक्षरी केली.
कस्तुबा फॅकल्टी ऑफ मेडिसिन, मणिपाल इन्स्टिट्यूट ऑफ हायर एज्युकेशन, मणिपाल (IAEC/KMC/69/2020) नुसार प्राण्यांच्या अभ्यासात केलेल्या सर्व प्रक्रिया पार पाडल्या गेल्या.प्राणी प्रयोग नियंत्रण आणि पर्यवेक्षण समिती (CPCSEA) च्या मार्गदर्शक तत्त्वांनुसार डिझाइन केलेले सर्व प्राणी प्रयोग आयोजित केले गेले.सर्व लेखक ARRIVE मार्गदर्शक तत्त्वांचे पालन करतात.
सर्व NFRCS च्या FTIR स्पेक्ट्राचे विश्लेषण केले गेले आणि आकृती 2A मध्ये दर्शविलेल्या चिटोसन स्पेक्ट्रमशी तुलना केली.3437 cm-1 (OH आणि NH स्ट्रेचिंग, ओव्हरलॅप), 2945 आणि 2897 cm-1 (CH stretching), 1660 cm-1 (NH2 स्ट्रेचिंग), 1589 cm-1 (NH2 स्ट्रेन), 1589 cm-1 (N1H1-15 सेमी), ओएच-1-1पुल, ओएच-1-पुल 7 सेमी-1 (स्ट्रेच C–O, दुय्यम हायड्रॉक्सिल), 993 सेमी-1 (स्ट्रेच CO, Bo-OH) 52.53.54.पूरक तक्ता S1 चिटोसन (रिपोर्टर), शुद्ध चिटोसन, Cm, Ch, आणि Cp साठी FTIR NFRCS शोषण स्पेक्ट्रम मूल्ये दर्शविते.सर्व NFRCS (Cm, Ch आणि Cp) च्या FTIR स्पेक्ट्राने कोणतेही महत्त्वपूर्ण बदल न करता (Fig. 2A) शुद्ध chitosan सारखे समान वैशिष्ट्यपूर्ण शोषण बँड दर्शविले.FTIR परिणामांनी NFRCS विकसित करण्यासाठी वापरल्या जाणार्‍या पॉलिमरमधील रासायनिक किंवा भौतिक परस्परसंवादाच्या अनुपस्थितीची पुष्टी केली आहे, हे दर्शविते की वापरलेले पॉलिमर निष्क्रिय आहेत.
Cm NFRCS, Ch NFRCS, Cp NFRCS आणि Cs चे इन विट्रो वैशिष्ट्यीकरण.(A) chitosan आणि Cm NFRCS, Ch NFRCS आणि Cp NFRCS च्या कम्प्रेशन अंतर्गत एकत्रित FTIR स्पेक्ट्राचे प्रतिनिधित्व करते.(ब) अ) NFRCS Cm, Ch, Cp, आणि Cg (n = 3) चे संपूर्ण रक्त शोषण दर;Ct नमुन्यांमध्ये उच्च BAR दिसला कारण कापूस पुसण्याची क्षमता जास्त असते;b) रक्त शोषणानंतरचे रक्त शोषलेल्या नमुन्याचे चित्रण.चाचणी नमुना C च्या BCT चे ग्राफिकल प्रतिनिधित्व (Cp NFRCS मध्ये सर्वोत्तम BCT होते (15 s, n = 3)). C, D, E, आणि G मधील डेटा सरासरी ± SD म्हणून दर्शविला गेला आणि एरर बार SD, ***p < 0.0001 दर्शवितात. C, D, E, आणि G मधील डेटा सरासरी ± SD म्हणून दर्शविला गेला आणि एरर बार SD, ***p < 0.0001 दर्शवितात. Данные в C, D, E и G представлены как среднее ± стандартное отклонение, а планки погрешностей представляют представляют стандартное , ***0p. C, D, E, आणि G मधील डेटा सरासरी ± मानक विचलन म्हणून सादर केला जातो आणि त्रुटी पट्ट्या मानक विचलन दर्शवतात, ***p<0.0001. C、D、E 和G 中的数据显示为平均值± SD,误差线代表SD,***p <0.0001. C、D、E 和G 中的数据显示为平均值± SD,误差线代表SD,***p <0.0001. Данные в C, D, E и G показаны как среднее значение ± стандартное отклонение, планки погрешностей представляют стандартное отклонение, ***p <0,0001. C, D, E, आणि G मधील डेटा सरासरी ± मानक विचलन म्हणून दर्शविला जातो, त्रुटी पट्ट्या मानक विचलन दर्शवतात, ***p<0.0001.