Pemerolehan dan pengedaran nutrien menyepadukan ciri-ciri mencari makan serangga dan sejarah hidup. Untuk mengimbangi kekurangan nutrien tertentu pada peringkat kehidupan yang berbeza, serangga boleh memperoleh nutrien ini melalui pemakanan tambahan, contohnya, dengan memakan rembesan vertebrata dalam proses yang dikenali sebagai lopak. Nyamuk Anopheles arabiani nampaknya dan, sama ada kekurangan nutrien ini, dan oleh itu, kajian memerlukan metabolisme semula dan, oleh itu, untuk kedua-duanya tidak berkhasiat.arabiensis agitasi pada air kencing lembu untuk pemerolehan nutrien meningkatkan ciri sejarah hidup.
Pastikan ia selamat.arabiensis tertarik dengan bau air kencing lembu yang segar, 24 jam, 72 jam dan 168 jam, dan betina pencari hos dan diberi makan darah (48 jam selepas makan darah) diukur dalam olfaktorometer tiub-Y, dan wanita hamil dinilai untuk analisis bioaktif air kencing yang digabungkan dan digunakan untuk analisis kimia air kencing bertelur bersama. empat kelas umur. Campuran sintetik sebatian bioaktif telah dinilai dalam tiub-Y dan ujian lapangan. Untuk menyiasat air kencing lembu dan urea sebatian yang mengandungi nitrogen utamanya sebagai diet tambahan yang berpotensi untuk vektor malaria, parameter pemakanan dan ciri sejarah hayat diukur. Perkadaran nyamuk betina dan jumlah air kencing lembu dan urea yang diserap, diserap semula dan diserap. duksi.
Cari darah dan makanan perumah.Dalam kajian makmal dan lapangan, orang Arab tertarik kepada bau semula jadi dan sintetik air kencing lembu yang segar dan tua. Wanita hamil tidak peduli terhadap tindak balas air kencing lembu di tapak pemijahan. Wanita pencari hos dan penghisap darah secara aktif menyerap air kencing lembu dan urea dan memperuntukkan sumber ini mengikut keadaan fizik, pengeluaran semula, atau kelangsungan hidup.
Pemerolehan dan pengedaran air kencing lembu Anopheles arabinis untuk ciri sejarah kehidupan yang lebih baik. Pemakanan tambahan air kencing lembu menjejaskan kapasiti vektor secara langsung dengan meningkatkan kemandirian harian dan kepadatan vektor, dan secara tidak langsung dengan mengubah aktiviti penerbangan dan oleh itu perlu dipertimbangkan dalam model akan datang.
Pemerolehan dan pengedaran nutrien menyepadukan ciri mencari makan serangga dan sejarah hidup [1,2,3]. Serangga dapat memilih dan memperoleh makanan dan melakukan pemakanan pampasan berdasarkan ketersediaan makanan dan keperluan nutrien [1, 3]. Pengagihan nutrien bergantung pada proses sejarah hayat dan mungkin membawa kepada keperluan yang berbeza untuk kualiti dan kuantiti diet dalam peringkat kehidupan yang berbeza, kekurangan nutrien serangga. boleh memperoleh nutrien ini melalui makanan tambahan, seperti lumpur, pelbagai najis dan rembesan vertebrata, dan bangkai, satu proses yang dikenali sebagai lopak [2]. Walaupun pelbagai spesies rama-rama dan rama-rama diterangkan terutamanya, lubang berair juga berlaku dalam pesanan serangga lain, dan tarikan kepada dan memberi makan kepada jenis sumber ini boleh memberi kesan yang ketara kepada kesihatan, 4, malaria, dan lain-lain. squito Anopheles gambiae sensu lato (sl) muncul sebagai orang dewasa yang 'kurang zat' [8], jadi penyiraman mungkin memainkan peranan penting dalam ciri sejarah hidupnya, tetapi tingkah laku ini setakat ini telah diabaikan .Penggunaan pergolakan sebagai cara untuk meningkatkan pengambilan nutrien dalam kenderaan penting ini memerlukan perhatian kerana ini mungkin mempunyai akibat epidemiologi yang penting.
Pengambilan nitrogen dalam nyamuk Anopheles betina dewasa adalah terhad disebabkan oleh rizab kalori yang rendah yang dibawa dari peringkat larva dan penggunaan makanan darah yang tidak cekap [9]. Ann.gambiae sl betina biasanya mengimbanginya dengan menambah makanan darah tambahan [10, 11], dengan itu meletakkan lebih ramai orang berisiko tinggi untuk dijangkiti penyakit mosquito dan mosquitative. boleh menggunakan makanan tambahan najis vertebrata untuk memperoleh sebatian nitrogen yang meningkatkan penyesuaian dan kebolehgerakan penerbangan, seperti yang ditunjukkan oleh serangga lain [2]. Dalam hal ini, daya tarikan yang kuat dan berbeza bagi salah satu spesies adik-beradik dalam An. Kompleks spesies Gambian sl, Anopheles arabinis, lembu segar dan tua dan air kencing lembu tua [12,13,14] dikenali sebagai air kencing perumah dan p. te dengan dan memberi makan kepada lembu.Air kencing lembu adalah sumber yang kaya dengan sebatian nitrogen, dengan urea menyumbang 50-95% daripada jumlah nitrogen dalam air kencing segar [15, 16]. Apabila air kencing lembu semakin tua, mikroorganisma menggunakan sumber ini untuk mengurangkan kerumitan sebatian nitrogen dalam masa 24 jam [15]. Dengan peningkatan pesat dalam nitrogen sebatian kalonik kepada mikroorganisma organik, yang dikaitkan dengan penurunan ammonia organik, yang dikaitkan dengan kemerosotan sebatian almaklonik organik, mikroorganisma. squitoes) berkembang maju [15], yang mungkin Ann.arabiensis betina lebih disukai tertarik kepada air kencing berumur 24 jam atau kurang [13, 14].
Dalam kajian ini, hos dan Ans yang diberi makan darah telah dicari. Semasa kitaran gonadotropin pertamanya, arabiensis telah dinilai untuk pemerolehan sebatian nitrogen, termasuk urea, dengan mencampurkan air kencing.Seterusnya, satu siri eksperimen telah dijalankan untuk menilai bagaimana nyamuk betina memperuntukkan sumber nutrien yang berpotensi ini untuk kemandirian yang lebih baik, pembiakan air kencing yang lebih baik. ini memberikan petunjuk yang boleh dipercayai untuk perumah dan An yang diberi makan darah. Dalam pencarian mereka untuk sumber pemakanan yang berpotensi ini, arabiensis menemui korelasi kimia di sebalik daya tarikan pembezaan yang diperhatikan. Campuran bau sintetik sebatian organik meruap (VOC) yang dikenal pasti dalam air kencing berumur 24 jam telah dinilai selanjutnya di bawah keadaan lapangan, memanjangkan keputusan yang diperoleh di bawah keadaan makmal dan menunjukkan kesan bau air kencing yang berbeza.Tarikan nyamuk.Hasil yang diperolehi mengesahkan bahawa An.arabiensis memperoleh dan mengedarkan sebatian nitrogen yang terdapat dalam air kencing vertebrata untuk mempengaruhi ciri sejarah kehidupan. Keputusan ini dibincangkan dalam konteks akibat epidemiologi yang berpotensi dan bagaimana ia boleh digunakan untuk pengawasan dan kawalan vektor.
Anopheles arabicans (Dongola strain) dikekalkan pada 25 ± 2 °C, 65 ± 5% RH dan 12:12 h cahaya: kitaran gelap. Larva diternak dalam dulang plastik (20 cm × 18 cm × 7 cm) diisi dengan air suling dan diberi makan Tetramin®, makanan ikan Tetramin®, Mengumpul 3 ml (Tetramin ® 0, Mellettra Herkes) dikumpul (Tetramin® 0, Mellettra Herkes). rtila, Åstorp, SE) dan kemudian dipindahkan ke sangkar Bugdorm (30 cm × 30 cm × 30 cm; Sains MegaView, Taichung, Taiwan) untuk membenarkan kemunculan dewasa. Orang dewasa dibekalkan dengan larutan sukrosa 10% secara ad libitum sehingga 4 hari selepas kemunculan (dpe), di mana pada masa itu, wanita yang mencari hos telah ditawarkan kepada diet lebih malam, di bawah eksperimen dengan serta-merta. jantan yang digunakan untuk uji kaji tiub penerbangan telah kebuluran hanya selama 4-6 jam dengan air ad libitum. Untuk menyediakan nyamuk penghisap darah untuk bioassay berikutnya, 4 dpe betina dibekalkan dengan darah biri-biri defibrotik (Håtunalab, Bro, SE) menggunakan sistem penyusuan membran (Bengkel Penemuan Hemotek, Accrington, UK1, yang kemudiannya diterangkan secara langsung sebagai sesak dan diet betina). % sukrosa ad libitum selama 3 hari sebelum eksperimen yang diterangkan di bawah. Betina yang terakhir digunakan untuk bioassay tiub penerbangan dan dipindahkan ke makmal, dan kemudian mempunyai air suling ad libitum selama 4-6 jam sebelum eksperimen.
Ujian pemakanan digunakan untuk mengukur penggunaan air kencing dan urea pada wanita An.Arab dewasa. Wanita yang mencari tuan rumah dan diberi makan darah telah disediakan diet yang mengandungi 1% air kencing lembu segar dan tua yang dicairkan, pelbagai kepekatan urea, dan dua kawalan (10% sukrosa dan air) selama 48 jam. Selain itu, pewarna makanan (1 mgSml-1 FF70ld-1 ; rich, Stockholm, SE) telah ditambahkan ke dalam diet dan dibekalkan dalam matriks 4 × 4 dalam tiub mikrosentrifuge 250 µl (Axygen Scientific, Union City, CA, AS; Rajah 1A) Isikan ke tepi (~300 µl). ketinggian; Semadeni, Ostermundigen, CH; Rajah 1A) dalam kegelapan sepenuhnya pada 25 ± 2 cm °C dan kelembapan relatif 65 ± 5%. Eksperimen ini diulang 5 hingga 10 kali. Selepas terdedah kepada diet, nyamuk diletakkan pada -20 °C sehingga analisis lanjut.
Cari air kencing lembu dan urea yang diserap oleh perumah dan Anopheles arabianus betina penghisap darah.Dalam percubaan memberi makan (A), nyamuk betina disediakan dengan diet yang terdiri daripada air kencing lembu segar dan tua, pelbagai kepekatan urea, sukrosa (10%) dan air suling (H2O). Pencari hos (B) dan pemberi makan darah tidak lebih banyak diserap oleh mana-mana diet perumah betina (C) yang diberi makan darah. ed 72 jam air kencing lembu kurang daripada 168 jam air kencing lembu (B). Purata jumlah kandungan nitrogen (± sisihan piawai) air kencing diwakili dalam inset. Wanita pencari hos (D, F) dan penghisap darah (E, G) mengambil urea dalam cara yang bergantung kepada dos. Purata isipadu sedutan (D, E) adalah berbeza secara signifikan dengan analisa post-hoV antara satu sama lain dengan huruf AN yang berbeza daripada satu sama lain. 0.05). Bar ralat mewakili ralat piawai bagi min (BE). Garis putus-putus lurus mewakili garis regresi linear log (F, G)
Untuk membebaskan makanan yang diserap, nyamuk diletakkan secara individu ke dalam 1.5 ml tiub mikrosentrifuge yang mengandungi 230 µl air suling dan tisu tersebut diganggu menggunakan alu pakai buang dan motor tanpa wayar (VWR International, Lund, SE), diikuti dengan sentrifugasi pada 10 krpm selama 10 minit . -Aldrich) dan penyerapan (λ620) ditentukan menggunakan pembaca plat mikro berasaskan spektrofotometer (SPECTROStar® Nano, BMG Labtech, Ortenberg, DE) nm).Sebagai alternatif, nyamuk dikisar dalam 1 ml air suling, 900 µl daripadanya dipindahkan ke kuvet (, λ 602m spektrofotometri nm). Untuk mengukur pengambilan diet, lengkung piawai telah disediakan melalui pencairan bersiri untuk menghasilkan 0.2 µl hingga 2.4 µl 1 mg ml-1 xilena sianida. Kemudian, ketumpatan optik kepekatan pewarna yang diketahui digunakan untuk menentukan jumlah makanan yang diserap oleh setiap nyamuk.
Data volum dianalisis menggunakan analisis varians sehala (ANOVA) diikuti dengan perbandingan berpasangan post hoc Tukey (JMP Pro, v14.0.0, SAS Institute Inc., Cary, NC, US, 1989–2007).Analisis regresi linear menerangkan pengambilan urea yang bergantung kepada kepekatan dan membandingkan tindak balas antara penghisap darah moraph0. , Perisian GraphPad, San Diego, CA, AS).
Kira-kira 20 µl sampel air kencing daripada setiap kumpulan umur diikat pada Chromosorb® W/AW (10 mg 80/100 mesh, Sigma Aldrich) dan dikapsulkan dalam kapsul timah (8 mm × 5 mm). Kapsul dimasukkan ke dalam kebuk pembakaran penganalisis CHNS/O (Flash 2000, kandungan Nitrogen ke Sham Ikan segar, penentu Flash 2000. dan air kencing berumur mengikut protokol pengilang. Jumlah nitrogen (g N l-1) dikira berdasarkan kepekatan urea yang diketahui digunakan sebagai piawai.
Untuk menilai kesan diet ke atas kelangsungan hidup wanita yang mencari perumah dan menghisap darah, nyamuk diletakkan secara individu di dalam cawan Petri yang besar (diameter 12 cm dan ketinggian 6 cm; Semadeni) dengan lubang yang dilitupi mesh pada penutup (diameter 3 cm) dengan Untuk pengudaraan dan bekalan makanan.Diet disediakan terus selepas 4 dpe dan dimasukkan dan 1% kepekatan 1 % air kencing dicairkan, dua dpe dan kawalan segar dicairkan. sukrosa dan air.Setiap diet disalurkan ke dalam tampon pergigian (DAB Dental AB, Upplands Väsby, SE) dimasukkan ke dalam picagari 5 ml (Thermo Fisher Scientific, Gothenburg, SE), pelocok dikeluarkan dan diletakkan di atas piring petri (rajah 1).1A).Tukar diet anda di atas makmal setiap hari. nyamuk dibuang sehingga nyamuk terakhir mati (n = 40 setiap rawatan).Kemandirian nyamuk yang diberi makan dengan pelbagai diet dianalisis secara statistik menggunakan lengkung kemandirian Kaplan-Meyer dan ujian peringkat log untuk membandingkan perbandingan taburan kemandirian antara diet (IBM SPSS Statistics 24.0.0.0).
Kilang terbang nyamuk tersuai berdasarkan Attisano et al.[17], diperbuat daripada panel akrilik jernih setebal 5 mm (10 cm lebar x 10 cm panjang x 10 cm tinggi) tanpa panel hadapan dan belakang (Rajah 3: atas). Himpunan pangsi dengan tiub menegak diperbuat daripada lajur kromatografi gas cm (0.25 mm id L yang perlu digantung di antara glukos 0.25 mm); 7. magnet neodymium dengan jarak 9 cm.Satu tiub mendatar yang diperbuat daripada bahan yang sama (6.5 cm L) membelah dua tiub menegak untuk membentuk lengan yang ditambat dan lengan yang membawa sekeping kecil kerajang aluminium sebagai isyarat gangguan cahaya.
Betina yang kebuluran 24 jam diberi diet di atas selama 30 minit sebelum dihalang. Nyamuk betina yang diberi makan sepenuhnya kemudian dibius secara individu di atas ais selama 2-3 minit dan dilekatkan pada pin serangga dengan lilin lebah (Joel Svenssons Vaxfabrik AB, Munka Ljungby, SE) dan kemudian diikat secara mendatar oleh tiub pengikat secara mendatar. -pencatat data terbina, kemudian disimpan dan dipaparkan menggunakan perisian PC-Lab 2000™ (v4.01; Velleman, Gavere, BE). Kilang penerbangan diletakkan di dalam bilik terkawal iklim (12 j:12 h, terang: gelap, 25 ± 2 °C, 65 ± 5% RH).
Untuk menggambarkan corak aktiviti penerbangan, jumlah jarak yang diterbangkan (m) dan jumlah bilangan aktiviti penerbangan berturut-turut dikira sejam dalam tempoh 24 jam. Di samping itu, jarak purata yang diterbangkan oleh individu perempuan dibandingkan merentasi rawatan dan dianalisis menggunakan ANOVA sehala dan analisis post hoc Tukey (JMP Pro, v14.0.0, purata jarak SAS, Addition Institute, Inc. yang boleh ubah dianggap sebagai rawatan purata SAS Institute, Inc.), di mana purata jarak SAS, Inc. pusingan dikira dalam kenaikan 10 minit.
Untuk menilai kesan diet ke atas prestasi pembiakan An.arabiensis, enam ekor betina (4 dpe) dipindahkan terus ke sangkar Bugdorm (30 cm × 30 cm × 30 cm) selepas pengumpulan darah dan kemudian menyediakan diet eksperimen selama 48 jam seperti yang diterangkan di atas. Diet kemudiannya dikeluarkan dan cawan pemijahan (30 ml; Nolato Hertila) diisi dengan air suling ketiga setiap 8 jam setiap 20 ml. 4 jam. Ulangi setiap rejimen pemakanan 20-50 kali. Telur dikira dan direkodkan untuk setiap sangkar eksperimen. Subsampel telur digunakan untuk menilai saiz min dan variasi panjang telur individu (n ≥ 200 setiap diet) menggunakan mikroskop Dialux-20 (DM1000; Ernst Leitz2 Wetzlar) (Kamera Wetzlar Wetz3, Ernst Leitz, DEica)Leica Microsystems Ltd., DE). Baki telur disimpan di dalam bilik terkawal iklim di bawah keadaan pemeliharaan standard selama 24 jam, dan subsampel larva instar pertama yang muncul baru-baru ini (n ≥ 200 setiap diet) diukur, seperti yang diterangkan di atas. Bilangan telur dan saiz telur dan larva telah dibandingkan antara rawatan AN 1-way, Provac 4 dan Tukey's. SAS Institute Inc.).
Meruap ruang kepala daripada air kencing segar (1 jam selepas pensampelan), 24 jam, 72 jam dan 168 jam telah dikumpul daripada sampel yang dikumpul daripada lembu Zebu, kaum Arsi. Untuk kemudahan, sampel air kencing dikumpul pada awal pagi manakala lembu masih berada di dalam kandang. Sampel air kencing dikumpul daripada 10 individu-2000 ml kepada setiap sampel pembakar poliamida dan 1000 ml poliamida. sco, Frischhalteprodukte GmbH and Co., Minden, DE) dalam 3 l poliamida dengan penutup Dalam dram plastik vinil klorida. Ruang kepala meruap daripada setiap sampel air kencing lembu dikumpul sama ada secara langsung (segar) atau selepas matang pada suhu bilik selama 24 jam, 72 jam dan 168 jam, iaitu setiap sampel air kencing mewakili setiap kumpulan umur.
Untuk pengumpulan meruap ruang kepala, sistem gelung tertutup digunakan untuk mengedarkan aliran gas ditapis karbon diaktifkan (100 ml min-1) melalui beg poliamida ke lajur penjerapan selama 2.5 jam dengan menggunakan pam vakum diafragma (KNF Neuberger, Freiburg, DE). 3 mm id) yang mengandungi 35 mg Porapak Q (50/80 mesh; Waters Associates, Milford, MA, US) antara palam bulu kaca. Sebelum digunakan, lajur telah dibilas dengan 1 ml disuling semula n-heksana (Merck, Darmstadt, DE) dan 1 ml pentana (99.0% pelarut terlarut GC00% pelarut terlarut GC 99.0%). daripada pentana.Koleksi ruang kepala dikumpulkan dan kemudian disimpan pada -20°C sehingga digunakan untuk analisis selanjutnya.
Tindak balas tingkah laku ekstrak meruap An.Headspace yang mencari perumah dan makan darah yang dikumpul daripada air kencing segar, 24-j, 72-j, dan 168-j dianalisis untuk ekstrak meruap daripada nyamuk Arabidopsis menggunakan olfactometer tiub kaca lurus [18]. Eksperimen telah dijalankan semasa aktiviti kaca ZT'9rab-15 peaking [13-15]. olfactometer tiub (80 cm × 9.5 cm id) telah disinari dengan 3 ± 1 lx cahaya merah dari atas. Aliran udara ditapis dan lembap arang (25 ± 2 °C, 65 ± 2% kelembapan relatif) melepasi bioassay pada 30 cm s-1. Udara dialirkan melalui siri aliran mesh keluli tahan karat dan aspennar yang seragam. (4 cm × 1 cm; L:D; DAB Dental AB), digantung daripada gegelung 5 cm pada hujung arah angin olfactometer, dengan perubahan perangsang setiap 5 minit. Untuk analisis, 10 μl setiap ekstrak ruang kepala, dicairkan 1:10, digunakan sebagai rangsangan. Jumlah pentane yang sama digunakan sebagai kawalan-pembebasan-perumah-perumah-perumah2. 3 jam sebelum permulaan eksperimen.Sangkar pelepas diletakkan di bahagian bawah angin olfactometer, dan nyamuk dibenarkan menyesuaikan diri selama 1 minit, dan kemudian injap rama-rama sangkar dibuka untuk dilepaskan. Tarikan kepada rawatan atau kawalan dianalisis sebagai perkadaran kesan nyamuk yang bersentuhan dengan sumbernya.E setiap 5 minit dilepaskan dan mengelak dilepaskan semula. mana-mana satu hari, bilangan rawatan dan kawalan yang sama telah diuji pada setiap hari percubaan. Dapatkan respons daripada hos dan set Ans. Arab berbanding ruang kepala dianalisis menggunakan regresi logistik nominal diikuti dengan perbandingan berpasangan untuk nisbah ganjil (JMP Pro, v14.0.0, SAS Institute Inc.).
Tindak balas pemijahan An. Ekstrak ruang kepala daripada air kencing lembu segar dan tua telah dianalisis dalam sangkar Bugdorm (30 cm × 30 cm × 30 cm; Sains MegaView). Cawan plastik (30 mL; Nolato Hertila) diisi dengan 20 mL air suling dengan syarat substrat pemijahan dan diletakkan di bahagian bertentang 20 cm cawan, dilaraskan di sudut 20 cm tre. μl setiap ekstrak ruang kepala pada pencairan 1:10. Jumlah pentana yang sama digunakan untuk melaraskan cawan kawalan. Cawan rawatan dan kawalan ditukar antara setiap eksperimen untuk mengawal kesan kedudukan. Sepuluh ekor betina yang diberi makan darah telah dilepaskan ke dalam sangkar eksperimen pada ZT 9-11 dan telur dalam cawan dikira 24 jam kemudian. Formula untuk pengiraan telur ialah: (indeks bilangan telur rawatan diletakkan di dalam cawan kawalan)/(jumlah bilangan telur yang diletakkan).Setiap rawatan diulang 8 kali.
Analisis kromatografi gas dan pengesanan corak antena elektron (GC-EAD) bagi An.arabiensis betina telah dilakukan seperti yang diterangkan sebelum ini [20]. Secara ringkas, ekstrak meruap ruang kepala segar dipisahkan menggunakan Agilent Technologies 6890 GC (Santa Clara, CA, AS) yang dilengkapi dengan lajur HP-5 (30 m × 0.25 mm ketebalan teknologi, Agilent id).dan air kencing yang menua.Hidrogen digunakan sebagai fasa mudah alih dengan kadar aliran linear purata 45 cm s-1.Setiap sampel (2 μl) disuntik selama 30 saat dalam mod tanpa belah dengan suhu masukan 225 °C. Suhu ketuhar GC telah diprogramkan daripada 35 °C (3 minit penahanan) kepada 300 °C penahanan min, 100 °C dalam perpecahan 100 °C (100 °C selama 100 °C). 4 psi nitrogen telah ditambah dan dipecahkan 1:1 dalam salib isipadu mati rendah Gerstel 3D/2 (Gerstel, Mülheim, DE) di antara pengesan pengionan nyalaan dan EAD. Kapilari efluen GC untuk EAD telah disalurkan melalui garisan pemindahan Gerstel ODP-2, yang menjejaki suhu ketuhar GC ditambah 5 °C, udara lembap (1 mm), ke dalam tiub kaca bercampur karbon (1 mm 0,000,000,000). 1.5 l min−1). Antena diletakkan 0.5 cm dari saluran keluar tiub. Setiap nyamuk individu menyumbang satu replika, dan untuk nyamuk yang mencari hos, sekurang-kurangnya tiga replika dilakukan pada sampel air kencing setiap umur.
Pengenalpastian sebatian bioaktif dalam koleksi ruang kepala bagi air kencing lembu segar dan tua menggunakan gabungan GC dan spektrometer jisim (GC-MS; 6890 GC dan 5975 MS; Agilent Technologies) untuk mendapatkan tindak balas antena dalam analisis GC-EAD, beroperasi dalam mod pengionan impak elektron pada 70 eV. GC5 bercabang silikon HP-6. Diameter dalam 0.25 mm, ketebalan filem 0.25 μm) menggunakan helium sebagai fasa mudah alih dengan kadar aliran linear purata 35 cm s-1. Sampel 2 μl disuntik menggunakan tetapan penyuntik dan suhu ketuhar yang sama seperti analisis GC-EAD. Kompaun telah dikenal pasti berdasarkan masa pengekalannya (pustaka Kovát s-1 tersuai) dan pustaka kompaun tersuai (Kovát s-1). disahkan dengan menyuntik piawaian tulen (Fail Tambahan 1: Jadual S2).Untuk kuantifikasi, heptyl acetate (10 ng, 99.8% ketulenan kimia, Aldrich) telah disuntik sebagai standard luaran.
Menilai keberkesanan campuran bau sintetik yang terdiri daripada sebatian bioaktif yang dikenal pasti dalam air kencing segar dan tua untuk menarik Ans.arabiensis yang mencari perumah dan menghisap darah, menggunakan olfactometer dan protokol yang sama seperti di atas. Campuran sintetik meniru komposisi dan perkadaran sebatian dalam ekstrak meruap ruang kepala bercampur segar, 24 jam, 728 jam, 728 jam, dan 4 jam 5D-G; Fail Tambahan 1: Jadual S2).Untuk analisis, gunakan 10 μl pencairan 1:100 bagi campuran sintetik sepenuhnya, dengan kadar pelepasan keseluruhan antara kira-kira 140-2400 ng h-1, untuk menilai daya tarikan kepada perumah dan nyamuk yang menghisap darah. Selepas itu, ujian dijalankan ke atas campuran yang lengkap daripada campuran perumah dan seek. campuran Ans.Arab vs sintetik dan tolak yang diberi makan darah telah dianalisis menggunakan regresi logistik nominal diikuti dengan perbandingan berpasangan untuk nisbah ganjil (JMP Pro, v14.0.0, SAS Institute Inc.).
Untuk menilai sama ada air kencing lembu boleh berfungsi sebagai isyarat habitat perumah untuk nyamuk malaria, air kencing lembu segar dan tua, yang dikumpul seperti yang diterangkan di atas, dan air diletakkan dalam baldi 3 l (100 ml) dan diletakkan dalam perangkap umpan perumah.(Versi BG-HDT; BioGents, Regensburg, DE). Sepuluh perangkap diletakkan pada jarak 50 m di padang rumput, 400 m dari komuniti kampung (Silay, Ethiopia, 5°53′24′′N, 37°29′24′′E) dan tiada lembu, di tempat pembiakan kekal dan kampung. Lima perangkap telah dipanaskan pada malam E yang diputarkan, manakala lima perangkap dipanaskan untuk diputarkan pada malam hari tanpa rawatan, manakala lima perangkap dipanaskan untuk diputarkan secara tidak sengaja, manakala lima perangkap dipanaskan untuk diputarkan secara tidak sengaja. sejumlah lima malam.Nombor nyamuk yang ditangkap dalam perangkap yang diumpan dengan air kencing yang berbeza umur dibandingkan menggunakan regresi logistik dengan taburan binomial beta (JMP Pro, v14.0.0, SAS Institute Inc.).
Di sebuah perkampungan endemik malaria berhampiran bandar Maki, wilayah Oromia, Ethiopia (8° 11′ 08″ N, 38° 81′ 70″ BT; Rajah 6A).Kajian ini dijalankan antara pertengahan Ogos dan pertengahan September sebelum penyemburan sisa dalaman tahunan, bersama-sama dengan musim hujan yang panjang. kajian (Rajah 6A).Kriteria yang digunakan untuk memilih rumah ialah: tiada haiwan dibenarkan di dalam rumah, tiada masakan dalaman (melukis kayu api atau arang) dibenarkan (sekurang-kurangnya semasa tempoh percubaan), dan rumah dengan maksimum dua penduduk, tidur dalam racun serangga.di bawah kelambu yang dirawat.Kelulusan etika telah diberikan oleh Lembaga Kajian Etika Penyelidikan Institusi (LHDN/022/2016) Fakulti Sains Semula Jadi (CNS-IRB), Universiti Addis Ababa, selaras dengan garis panduan yang ditetapkan oleh Pengisytiharan Persatuan Perubatan Dunia Helsinki. Persetujuan daripada setiap ketua isi rumah proses telah mendapat bantuan daripada kakitangan lanjutan proses di daerah. ('kebele') aras.Reka bentuk eksperimen mengikuti reka bentuk segi empat sama Latin 2 × 2, di mana campuran dan kawalan sintetik ditugaskan kepada rumah berpasangan pada malam pertama dan bertukar antara rumah pada malam percubaan seterusnya. Proses ini diulang sepuluh kali. Selain itu, untuk menganggarkan aktiviti nyamuk di rumah terpilih, perangkap CDC ditetapkan untuk menjalankan lima hari percubaan pada waktu tengah malam berturut-turut.
Campuran sintetik yang mengandungi enam sebatian bioaktif telah dilarutkan dalam heptana (97.0% pelarut gred GC, Sigma Aldrich) dan dilepaskan pada 140 ng h-1 menggunakan dispenser sumbu kapas [20]. Dispenser sumbu membenarkan semua sebatian dilepaskan dalam perkadaran malar sepanjang eksperimen 12 jam. Heptana digunakan sebagai titik masuk Pusat Kawalan yang terampai dan CDC di sebelahnya. perangkap cahaya (Syarikat John W. Hock, Gainesville, FL, AS; Rajah 6A). Perangkap itu digantung 0.8 – 1 m di atas tanah, berhampiran kaki katil, dan seorang sukarelawan tidur di bawah kelambu yang tidak dirawat dan dikendalikan antara 18:00 dan 06:30. Nyamuk ditangkap, status hamil dan separa fisiologi (tidak hamil dan separa 1) kemudiannya disaring menggunakan analisis tindak balas rantai polimerase (PCR) untuk mengenal pasti spesies yang dikenal pasti secara morfologi sebagai A. gambiae sl. Ahli kompleks [23]. Dalam kajian lapangan, perangkap rumah berpasangan dianalisis menggunakan model muat logistik nominal, di mana daya tarikan adalah pembolehubah bersandar dan rawatan (campuran sintetik vs kawalan) adalah kesan tetap (JMP. ® 14.0.0. SAS Institute Inc.).Di sini, kami melaporkan nilai χ2 dan p daripada ujian nisbah kemungkinan.
Nilaikan sama ada ia selamat.arabiensis dapat memperoleh air kencing, sumber nitrogen utamanya, urea, melalui pemakanan terus, dalam masa 48 jam selepas pentadbiran selama 4 hari selepas ujian (dpe) mencari perumah dan ujian penyusuan darah wanita (Rajah 1A). Kedua-dua wanita pencari perumah dan penghisap darah menyerap lebih banyak sukrosa (5, 0.0.2) dengan ketara (5, 0.2) <5, 0.02 (F 5, 0.2) daripada mana-mana diet atau air lain. 1 dan F(5,299) = 56.00, p < 0.0001, masing-masing; Rajah 1B, C). Tambahan pula, wanita pencari hos makan kurang dalam air kencing pada 72 jam berbanding air kencing pada 168 jam (Rajah 1B). Apabila ditawarkan diet yang mengandungi urea, wanita pencari hos lebih banyak berbanding dengan jumlah air M2 yang lain, manakala wanita lain yang mencari hos lebih banyak M2. tidak dapat dibezakan daripada 10% sukrosa (F(10,813) = 15.72, p < 0.0001; Rajah 1D). Ini adalah berbeza dengan tindak balas wanita yang diberi makan darah, yang biasanya menyerap lebih banyak diet yang mengandungi urea daripada air, walaupun kurang daripada 10% (10.0.8 = 5.7%). 001; Rajah 1).1E).Tambahan pula, apabila membandingkan antara kedua-dua keadaan fisiologi, betina phlebotomised menyerap lebih banyak urea daripada wanita mencari hos pada kepekatan terendah, dan betina ini menyerap jumlah urea yang sama pada kepekatan yang lebih tinggi (F(1,953)= 78.80, p < 0.82, p < 0.Rajah 1F, G). Walaupun pengambilan daripada diet yang mengandungi urea kelihatan mempunyai nilai optimum (Rajah 1D, E), wanita dalam kedua-dua keadaan fisiologi dapat memodulasi jumlah urea yang diserap ke atas keseluruhan julat kepekatan urea dalam fesyen log-linear (Rajah 1F, G).).Begitu juga, nyamuk kelihatan mengawal pengambilan nitrogennya dengan mengawal jumlah air kencing yang diserap, kerana jumlah nitrogen dalam air kencing dicerminkan dalam jumlah yang diserap (Rajah 1B, C dan B sisipan).
Untuk menilai kesan air kencing dan urea pada kelangsungan hidup nyamuk yang mencari tuan rumah dan menghisap darah, wanita diberi air kencing dari semua empat umur (segar, 24 jam, 72 jam, dan 168 jam selepas pemendapan) dan julat kepekatan urea, serta air suling dan 10% sukrosa berfungsi sebagai kawalan (Analisis kelangsungan hidup wanita secara keseluruhan menunjukkan kesan kelangsungan hidup ini (Rajah 2). : χ2 = 108.5, df = 5, p < 0.0001; urea: χ2 = 122.8, df = 5, p < 0.0001; Rajah 2B, C) dan betina yang diberi makan darah (urin: χ2 = 93.0, p 1 = 0.0, χ2 = 93.0, df = 0.0. , df = 5, p < 0.0001; Rajah 2D, E).Dalam semua eksperimen, wanita yang diberi diet air kencing, urea, dan air mempunyai kadar kemandirian yang jauh lebih rendah berbanding wanita yang diberi diet sukrosa (Rajah 2B-E). Wanita pencari hos yang diberi makan air kencing segar dan basi menunjukkan kadar kemandirian stamina yang berbeza72 = 6h. (Rajah 2B).Tambahan pula, betina pencari hos yang diberi makan urea 135 mM bertahan lebih lama daripada kawalan air (p <0.04) (Rajah 1).2C).Berbanding dengan air, wanita yang diberi makan dengan air kencing segar dan air kencing 24 jam bertahan lebih lama (masing-masing p = 0.001 dan p = 0.012; Rajah 2D), manakala wanita yang diberi air kencing 72 jam bertahan lebih lama daripada mereka yang diberi air kencing segar pendek wanita dan air kencing berumur 24 jam (p <0.00001; dan air kencing berumur 24 jam masing-masing (p <0.000. 135 mM urea, wanita yang diberi makan darah bertahan lebih lama daripada semua kepekatan urea dan air yang lain (p <0.013; Rajah 2E).
Kemandirian perumah dan Anopheles arabinis betina penghisap darah yang memakan air kencing lembu dan urea.Dalam bioassay (A), nyamuk betina diberikan diet yang terdiri daripada air kencing lembu segar dan tua, pelbagai kepekatan urea, sukrosa (10%) dan air suling (H2O). Kemandirian pencari perumah (B, C) dan nyamuk betina adalah rekod setiap jam sehingga nyamuk betina (Doe) dan E2. d pada air kencing (B, D) dan urea (C, E), dan kawalan, Sukrosa dan air, telah mati
Jumlah jarak dan bilangan pusingan yang ditentukan dalam ujian kilang penerbangan dalam tempoh 24 jam berbeza antara nyamuk pencari hos dan nyamuk penghisap darah, yang menunjukkan aktiviti penerbangan yang kurang secara keseluruhan (Rajah 3). Nyamuk pencari hos yang membekalkan air kencing segar dan tua atau sukrosa dan air menunjukkan corak penerbangan yang berbeza (Gamb. 3), dengan air kencing betina lebih aktif makan pada 14 jam dan 6 jam. Nyamuk yang memakan air kencing menunjukkan corak penerbangan yang berbeza dan terutamanya diurnal. Nyamuk betina yang membekalkan sukrosa atau air kencing 72 jam menunjukkan aktiviti sepanjang tempoh 24 jam, manakala nyamuk betina yang membekalkan air lebih aktif pada pertengahan tempoh. Nyamuk yang diberi sukrosa menunjukkan tahap aktiviti tertinggi pada lewat malam, manakala dan mereka yang merosot pada awal pagi 7 pagi mengalami aktiviti yang berterusan pada lewat malam. 24 jam (Rajah 3).
Prestasi penerbangan Anopheles arabinis betina penghisap darah yang mencari pemburu yang memakan air kencing lembu dan urea. Dalam ujian kilang penerbangan, nyamuk betina yang diberi makan air kencing lembu segar dan tua, pelbagai kepekatan urea, sukrosa (10%), dan air suling (H2O) telah ditambat pada lengan mendatar, bebas berputar dan betina (melihat ke atas dan ke kanan). bilangan penerbangan sejam untuk setiap diet dalam tempoh 24 jam telah direkodkan (gelap: kelabu; terang: putih). Purata jarak dan purata bilangan serangan ditunjukkan di sebelah kanan graf aktiviti sirkadian. Bar ralat mewakili ralat piawai bagi min. Analisis statistik lihat teks
Secara amnya, keseluruhan aktiviti penerbangan wanita pencari hos mengikut corak yang serupa dengan jarak penerbangan dalam tempoh 24 jam. Jarak penerbangan min terjejas dengan ketara oleh diet yang ditelan (F(5, 138) = 28.27, p <0.0001), dan wanita pencari hos menelan 72 jam jarak penerbangan dan air kencing yang jauh lebih jauh daripada semua diet yang ditelan <1 sep00. quitoes terbang lebih lama daripada nyamuk segar (p = 0.022) dan air kencing berumur 24 jam (p = 0.022). Berbeza dengan corak aktiviti penerbangan yang diterangkan oleh diet air kencing, betina pencari hos yang diberi urea mempamerkan aktiviti penerbangan yang berterusan dalam tempoh 24 jam, memuncak pada separuh kedua fasa perumah yang sama. urea meningkat dengan ketara jarak penerbangan purata bergantung kepada kepekatan yang diserap (F(5, 138) = 1310.91, p < 0.0001). Wanita pencari hos yang diberi makan sebarang kepekatan urea terbang lebih lama daripada wanita yang diberi makan sama ada air atau sukrosa (p < 0.03).
Keseluruhan aktiviti penerbangan nyamuk penghisap darah adalah stabil dan dikekalkan selama 24 jam merentasi semua diet, dengan peningkatan aktiviti air kencing semasa separuh kedua tempoh gelap bagi wanita yang diberi makan dengan air serta pada wanita yang diberi makan segar dan berumur 24 jam (imej 3). Manakala diet air kencing memberi kesan ketara kepada jarak penerbangan purata pada wanita yang diberi makan darah (F(5, 0.4) diet (F(5, 0.4). tidak (F(5, 138) = 1.36, p = 0.24) .dengan air kencing lain dan diet kawalan (segar, p = 0.0091; 72 jam, p = 0.0022; 168 jam, p = 0.001; sukrosa, p = 0.0017; dH2O, 3).
Kesan pengambilan air kencing dan urea ke atas parameter pembiakan dinilai dalam bioassay bertelur (Rajah 4A) dan disiasat mengikut bilangan telur yang dikeluarkan oleh setiap betina, saiz telur, dan larva instar pertama yang baru menetas. Bilangan telur yang bertelur.Betina Arab yang diberi makan air kencing berbeza mengikut diet (F = 40.0.82; F = 40.82; B). Betina diberi makan air kencing 24 jam, makanan darah bertelur dengan ketara lebih banyak berbanding wanita yang diberi diet air kencing yang lain dan serupa dengan mereka yang diberi sukrosa (Rajah 4B). Begitu juga, saiz telur yang dikeluarkan oleh wanita yang diberi air kencing berbeza mengikut diet (F(5, 209) = 12.85, p <0.0001 bertelur lebih besar berbanding jam betina bertelur lebih besar daripada 0.004 jam betina. betina yang diberi makan air, manakala telur betina yang diberi makan dengan 168 jam air kencing adalah jauh lebih kecil (Rajah 4C). Selain itu, diet air kencing memberi kesan ketara kepada saiz larva (F(5, 187) = 7.86, p < 0.0001), dengan larva yang jauh lebih besar muncul daripada telur betina berumur 24 jam dan larva daripada telur betina berumur 24 jam dan 7 jam. diberi makan dan betina yang diberi makan air kencing 168 jam (Rajah 4D).
Prestasi pembiakan Anopheles arabinis betina yang memakan air kencing lembu dan urea. Nyamuk betina yang diberi makan darah diberi diet yang terdiri daripada air kencing lembu segar dan tua, pelbagai kepekatan urea, sukrosa (10%), dan air suling (H2O) selama 48 jam sebelum dimasukkan ke dalam bioassays dan mendapatkan substrat bertelur48 (B), bersaiz telur (B) (48 jam bertelur). dan saiz larva (D, G) terjejas dengan ketara oleh diet yang disediakan (air kencing lembu: BD; urea: EG). Min bagi setiap parameter yang diukur menggunakan nama huruf yang berbeza adalah berbeza dengan ketara antara satu sama lain (ANOVA sehala menggunakan analisis post hoc Tukey; p <0.05). Bar ralat mewakili ralat piawai bagi min
Sebagai komponen nitrogen utama air kencing, urea, apabila disediakan sebagai diet kepada wanita yang diberi makan darah, mempengaruhi parameter pembiakan dengan ketara dalam semua kajian. Bilangan telur yang diletakkan oleh wanita yang diberi makan urea, selepas makan darah, bergantung kepada kepekatan urea (F(11, 360) = 4.69; p < 0.0001, kepekatan betina lebih 3 µM 3 µM 3 µM 3 betina yang diberi makan telur (Rajah 4E). Betina yang diberi kepekatan urea sebanyak 134 µM atau lebih tinggi bertelur lebih besar daripada betina yang diberi makan air (F(10, 4245) = 36.7; p < 0.0001; Rajah 4F), dan saiz larva, walaupun dipengaruhi oleh kepekatan urea yang sama pada induk, = 0.3 (10.0.3); (10.30). 1) adalah lebih berubah-ubah (Rajah 4G).
Daya tarikan keseluruhan kepada ekstrak meruap ruang kepala air kencing lembu yang mencari hos. Arabiensis yang dinilai dalam olfaktorometer tiub kaca (Rajah 5A) dipengaruhi dengan ketara oleh umur air kencing (χ2 = 15.9, df = 4, p = 0.0032; Rajah 5B). Analisis post hoc menunjukkan bahawa semua tahap bau air kencing yang lapuk = 724 jam yang lebih tinggi (berbanding 7 jam rawatan air kencing yang lebih tinggi: berbanding 724 jam yang lebih tinggi: rawatan bau air kencing yang lebih tinggi: 0.0060, 168 jam: p = 0.012, pentana: p = 0.00070), Kecuali bau air kencing segar (p = 0.13; Rajah 5B). Walaupun tarikan keseluruhan nyamuk penghisap darah terhadap bau air kencing tidak berbeza dengan ketara (χ2 = 8.78, χ2 = 8.78, betina). didapati lebih menarik untuk ekstrak meruap ruang kepala berbanding dengan air kencing berumur 72 jam berbanding kawalan (p = 0.0066; Rajah 5C).
Tindak balas tingkah laku terhadap bau air kencing lembu asli dan sintetik dalam mencari perumah dan diberi makan darah Anopheles arabianus. Skema olfaktorometer tiub kaca (A). Tarikan ekstrak meruap ruang kepala daripada air kencing lembu segar dan tua kepada nyamuk perumah (B) dan penghisap darah (C). Cari tindak balas tentacleHeadspace dari Lord isol-2hours (2) segar (2) -jam (F), dan air kencing lembu berumur 168 jam (G) ditunjukkan. Surih pengesanan antena elektron (EAD) menunjukkan perubahan voltan sebagai tindak balas kepada sebatian bioaktif dalam ruang kepala yang dicairkan daripada kromatografi gas dan dikesan oleh pengesan pengionan nyalaan (FID). Bar skala mewakili amplitud tindak balas (mV) berbanding sifat pengekalan aktif (h) berbanding dengan masa pengekalan dan pembebasan aktif (h). .Asterisk tunggal (*) menunjukkan tindak balas amplitud rendah yang konsisten.Asteris berganda (**) menunjukkan tindak balas yang tidak boleh dihasilkan semula.Cari perumah (H) dan penghisap darah (I) An.arabiensis mempunyai daya tarikan yang berbeza terhadap campuran sintetik bau air kencing lembu segar dan tua. Purata bahagian min bagi nyamuk yang berbeza antara satu sama lain dengan menggunakan huruf AN yang berbeza antara satu sama lain. analisis;p < 0.05). Bar ralat mewakili ralat piawai skala
Ann.arabiensis betina, 72 jam dan 120 jam selepas makan darah, semasa pemijahan, tiada keutamaan ditunjukkan untuk ekstrak meruap ruang kepala daripada air kencing lembu segar dan tua berbanding dengan kawalan pentana (χ2 = 3.07, p > 0.05; Fail tambahan 1: Rajah S1).
Bagi analisis Ann.arabiensis, GC-EAD dan GC-MS wanita mengenal pasti lapan, enam, tiga dan tiga sebatian bioaktif (Rajah 5D-G). Walaupun perbezaan dalam bilangan sebatian yang menimbulkan tindak balas elektrofisiologi diperhatikan, kebanyakan sebatian ini terdapat dalam setiap ekstrak meruap ruang kepala yang dikumpul daripada air kencing segar dan berumur. Oleh itu, hanya sebatian afisiologi bagi setiap air kencing yang telah berumur. dimasukkan ke dalam analisis selanjutnya.
Jumlah kadar pembebasan meruap sebatian bioaktif dalam koleksi ruang kepala meningkat daripada 29 µg h-1 dalam air kencing segar kepada 242 µg h-1 dalam air kencing berumur 168 jam, terutamanya disebabkan oleh p-cresol dan m-formaldehid Fenol meningkat serta fenol. Sebaliknya, kadar pembebasan 2 sebatian-siklon-1 air kencing, dan detoks detoks semakin berkurangan, seperti peningkatan kadar sebatian air kencing-siklon, dan detoks detoks. berkaitan dengan penurunan yang diperhatikan dalam intensiti isyarat (kelimpahan) dalam kromatogram (Rajah 5D)-G panel kiri) dan tindak balas fisiologi kepada sebatian ini (Rajah 5D-G panel kanan).
Secara keseluruhannya, campuran sintetik mempunyai nisbah semula jadi yang serupa bagi sebatian bioaktif yang dikenal pasti dalam ekstrak meruap ruang kepala air kencing segar dan tua (Rajah 5D–G) dan nampaknya tidak menimbulkan daya tarikan yang ketara dalam pencarian perumah (χ2 = 8.15, df = 4, p = 0.083; Rajah 5H) atau berhenti menghisap darah (χ2 = 8.15, df = 4, p = 0.083; rajah 5H, χ2 = χ2 = χ4 = χ2 = s = χ4 = f. 0.30; Rajah 5I).Walau bagaimanapun, perbandingan berpasangan post hoc antara rawatan menunjukkan bahawa nyamuk yang mencari perumah adalah ketara menarik kepada campuran sintetik air kencing berumur 24 jam berbanding dengan kawalan pentana (p = 0.0086; Rajah 5H).
Untuk menilai peranan komponen individu dalam campuran sintetik air kencing 24-jam, enam campuran subtractive dinilai terhadap campuran lengkap dalam ujian y-tiub, di mana sebatian individu telah dikeluarkan. Untuk nyamuk yang mencari tuan rumah, menolak Campuran lebih menarik daripada yang lebih kecil daripada bercampur sepenuhnya.
Di sebuah perkampungan endemik malaria di Ethiopia, keberkesanan campuran sintetik air kencing lembu 24 jam dalam menarik nyamuk di bawah keadaan padang dinilai selama sepuluh malam (Rajah 6A). Sebanyak 4,861 nyamuk telah ditangkap dan dikenal pasti, di mana 45.7% daripadanya adalah Anthropus.gambiae .9% , Anopheles.95% dan 1. lex spp.(Fail tambahan 1: Jadual S1).Anopheles arabinis ialah satu-satunya ahli kompleks spesies An.Gambian yang dikenal pasti melalui analisis PCR. Secara purata, 320 ekor nyamuk ditangkap setiap malam, di mana perangkap masa dengan umpan campuran sintetik menangkap lebih banyak nyamuk daripada perangkap berpasangan tanpa campuran (χ2(0, p.0.1) = 3196 perangkap telah ditetapkan pada setiap lima malam kawalan pada permulaan, tengah dan akhir percubaan. Bilangan nyamuk yang sama telah ditangkap dalam setiap pasang perangkap, menunjukkan tiada berat sebelah antara rumah (χ2(0, 1665) = 9 × 10-13, p > 0.05) dan tiada populasi yang merosot dalam perangkap sintetik, jika dibandingkan dengan perangkap yang ditangkap dalam tempoh kajian. meningkat dengan ketara: pencarian hos (χ2(0, 2107) = 138.7, p <0.0001), pemberian darah baru-baru ini (χ2(0, 650) = 32.2, p <0.0001) dan kehamilan (χ2(0, 228) = 6.27, p = 0.Fail tambahan 1: Jadual S1).Ini juga ditunjukkan dalam jumlah bilangan nyamuk yang ditangkap: hos yang mencari > menghisap darah > hamil > separuh hamil > jantan.
Penilaian lapangan terhadap keberkesanan campuran bau air kencing lembu sintetik 24 jam. Percubaan lapangan telah dijalankan di selatan-tengah Ethiopia (peta), berhampiran bandar Maki (sisipan), menggunakan perangkap cahaya Pusat Kawalan Penyakit (CDC) (kanan) di rumah berpasangan, dengan reka bentuk segi empat sama Latin (imej udara) (A). Synthetic odorsphelesBbaites fototrapi betina Anopheles Bbaites dan bukan CDC anotrapfera (CDC) yang ditangkap jauh. (C), dengan cara yang berbeza, kesan yang bergantung kepada keadaan fisiologi. Di samping itu, perangkap ini menangkap bilangan nyamuk Culex perumah yang meningkat dengan ketara.(D) Berbanding dengan kawalan. Bar di sebelah kiri mewakili indeks pemilihan purata nyamuk yang ditangkap dalam pasangan umpan bau (hijau) dan perangkap kawalan (terbuka) (N = 10) perangkap kawalan (N = 10) purata; 5).).Asteris menunjukkan tahap keertian statistik (*p = 0.01 dan ***p < 0.0001)
Ketiga-tiga spesies ditangkap secara berbeza dalam perangkap yang mengandungi campuran sintetik. Mencari perumah (χ2(1, 1345) = 71.7, p < 0.0001), pemberian darah (χ2(1, 517) = 16.7, p < 0.0001) dan kehamilan (χ2(1.40.10) dan kehamilan (χ2(1, = 6.10) a. s telah terperangkap dalam perangkap yang melepaskan campuran sintetik (Rajah 6B), manakala jumlah An tidak berbeza. Pharoensis dalam keadaan fisiologi yang berbeza ditemui (Rajah 6C). Bagi Culex, hanya peningkatan yang ketara dalam bilangan nyamuk yang mencari perumah ditemui dalam perangkap yang diumpan dengan campuran sintetik (χ2(1,0.0.13). ), berbanding dengan perangkap kawalan.
Perangkap umpan perumah yang terletak di luar perumah berpotensi antara tapak pembiakan dan komuniti luar bandar di Ethiopia digunakan untuk menilai sama ada nyamuk malaria menggunakan bau air kencing lembu sebagai isyarat habitat perumah. Jika tiada isyarat perumah, haba, dan dengan atau tanpa kehadiran bau air kencing lembu, tiada nyamuk ditangkap (Fail tambahan 1: Rajah S3). Walau bagaimanapun, moquited betina mempunyai bau yang tinggi, suhu dan air kencing. dan ditangkap, walaupun dalam jumlah kecil, bebas daripada umur air kencing (χ2(5, 25) = 2.29, p = 0.13; Fail tambahan 1: Rajah S3 ).Sebaliknya, kawalan air tidak menangkap nyamuk malaria pada suhu tinggi (Fail Tambahan 1: Rajah S3).
Nyamuk malaria memperoleh dan mengedarkan sebatian yang mengandungi nitrogen melalui pemakanan pampasan pada air kencing lembu (iaitu, lopak air) untuk meningkatkan ciri-ciri sejarah hidup, sama seperti serangga lain [2, 4, 24, 25, 26]. Air kencing lembu ialah sumber boleh diperbaharui yang mudah didapati dan berkait rapat dengan tapak perladangan yang berdekatan dengan tapak perladangan dan kawasan perkampungan yang berdekatan dengan vektor malaria. .Nyamuk betina mencari sumber ini melalui bau dan mampu mengawal selia pengambilan sebatian nitrogen dalam air kencing, termasuk urea, komponen nitrogen utama dalam air kencing [15, 16]. Bergantung kepada keadaan fisiologi nyamuk betina, nutrien dalam air kencing diperuntukkan untuk meningkatkan aktiviti penerbangan dan kemandirian nyamuk betina yang mencari hos dan sebagai produk semula jadi yang pertama dalam darah. Oleh itu, pencampuran air kencing memainkan peranan pemakanan yang penting untuk vektor malaria yang tertutup seperti orang dewasa yang kekurangan zat makanan [8], kerana ia menyediakan nyamuk betina dengan keupayaan untuk memperoleh sebatian nitrogen yang penting dengan melibatkan diri dalam pemakanan berisiko rendah. Penemuan ini mempunyai akibat epidemiologi yang ketara, apabila wanita meningkatkan jangka hayat, aktiviti dan hasil pembiakan mereka, yang kesemuanya boleh menjejaskan lebih banyak kapasiti vektor program masa hadapan ini.