Javascript bħalissa huwa diżattivat fil-browser tiegħek. Xi karatteristiċi ta' dan il-websajt ma jaħdmux meta javascript ikun diżattivat.
Irreġistra bid-dettalji speċifiċi tiegħek u d-droga speċifika ta’ interess u aħna nqabblu l-informazzjoni li tipprovdi ma’ artikli fid-database estensiva tagħna u nibgħatulek kopja PDF minnufih.
作者 Stella S, Vitale SR, Martorana F, Massimino M, Pavone G, Lanzafame K, Bianca S, Barone C, Gorgone C, Fichera M, Manzella L
Stefania Stella, 1,2 Silvia Rita Vitale, 1,2 Federica Martorana, 1,2 Michele Massimino, 1,2 Giuliana Pavone, 3 Katia Lanzafame, 3 Sebastiano Bianca, 4 Chiara Barone, 5 Cristina Gorgone, 6 Marco Fichera, 6, 7 Livia Manzella, 7 Livia Manzella1, 21, Dipartiment tal-Kalinika tal-Mediċina1, 21 Ex Catania, Università ta’ Catania L-Italja;2 Ċentru għall-Onkoloġija u l-Ematoloġija Sperimentali, AOU Policlinico “G.Rodolico – San Marco”, Catania , 95123, l-Italja;3 Onkoloġija Medika, AOU Policlinico “G.Rodolico – San Marco”, Catania, 95123, l-Italja;4 Ġenetika Medika, ARNAS Garibaldi, Katanja, 95123, l-Italja;5 Ġenetika tal-Mediċina, ASP, Sirakuża, 96100, l-Italja;6 Dipartiment tax-Xjenzi Bijomediċi u Bijoteknoloġija, Università ta' Katanja, Ġenetika Medika, Katanja, l-Italja, 95123;7Oasi Research Institute-IRCCS, Troina, 94018, Italja Komunikazzjonijiet: Stefania Stella, tel +39 095 378 1946, email [email protected];[email protetta] Għan: Mutazzjonijiet tal-linja ġerminali f'BRCA1 u BRCA2 u kanċer tas-sider stabbilit (BC), ovarju (OC) u oħrajn assoċjati ma' riskju ta' kanċer tul il-ħajja. L-ittestjar għall-ġene BRCA huwa essenzjali biex jiġi vvalutat ir-riskju individwali, kif ukoll biex jinstabu metodi ta' prevenzjoni f'trasportaturi b'saħħithom u jfasslu trattamenti f'pazjenti bil-kanċer. varjanti ġeniċi fil-familji Sqallin, studji mmirati speċifikament lejn il-popolazzjonijiet fil-Lvant ta' Sqallija huma nieqsa. L-għan tal-istudju tagħna kien li jinvestiga l-inċidenza u d-distribuzzjoni ta 'alterazzjonijiet ġerminali patoġeniċi BRCA f'koorti ta' pazjenti BC mill-Lvant ta 'Sqallija u biex tevalwa l-assoċjazzjoni tagħhom ma' karatteristiċi speċifiċi tal-BC bl-użu ta 'sekwenzjar tal-ġenerazzjoni li jmiss. %) kellhom varjant patoġeniku BRCA, 17 (49%) f'BRCA1 u 18 (51%) f'BRCA2. Alterazzjonijiet BRCA1 huma prevalenti f'pazjenti BC triple-negattivi, filwaqt li mutazzjonijiet BRCA2 huma aktar komuni f'pazjenti BC luminali. pazjenti mill-Lvant ta 'Sqallija u jikkonfermaw ir-rwol tal-analiżi NGS fl-identifikazzjoni ta' pazjenti b'BC ereditarju. B'mod ġenerali, din id-dejta hija konsistenti ma 'evidenza preċedenti li tappoġġja screening BRCA għall-prevenzjoni u t-trattament xieraq tal-kanċer f'ġarriera ta' mutazzjoni.
Il-kanċer tas-sider (BC) huwa l-aktar tumuri malinn komuni madwar id-dinja u l-aktar kanċer fatali fin-nisa.1 Il-karatteristiċi bijoloġiċi li jiddeterminaw il-pronjosi tal-BC u l-imġieba klinika ġew studjati b’mod estensiv u parzjalment spjegati maż-żmien. Fil-fatt, bosta markaturi surrogati huma attwalment użati biex jikklassifikaw BC f’sottotipi molekulari differenti. indiċi ta’ proliferazzjoni Ki-67 u grad tat-tumur (G).2 Il-kombinazzjoni ta’ dawn il-varjabbli identifikat il-kategoriji BC li ġejjin: 1) Tumuri Luminali, li juru espressjoni ER u/jew PgR, kienu jammontaw għal 75% tal-BCs. zjoni, irrispettivament mill-indiċi ta' proliferazzjoni;2) Tumuri HER2+ li huma ER u PgR negattivi iżda juru amplifikazzjoni HER2. Dan il-grupp jammonta għal 10% tat-tumuri kollha tas-sider;3) Kanċer tas-sider triple-negattiv (TNBC), li ma jurix espressjoni ER u PgR u amplifikazzjoni HER2, jammonta għal madwar 15% tal-kanċer tas-sider.2-4
Fost dawn is-sottotipi BC, il-grad tat-tumur u l-indiċi tal-proliferazzjoni jirrappreżentaw bijomarkaturi trasversali li huma assoċjati direttament u indipendentement mal-aggressività u l-pronjosi tat-tumur.5,6
Minbarra l-karatteristiċi bijoloġiċi msemmija hawn fuq, ir-rwol ta 'alterazzjonijiet ġenetiċi li jintirtu li jwasslu għall-iżvilupp tal-BC sar dejjem aktar importanti matul l-aħħar ftit snin.7 Madwar 1 minn kull 10 tumuri tas-sider jintirtu minħabba alterazzjonijiet tal-linja ġerminali f'ġeni speċifiċi.8 Żewġ studji epidemjoloġiċi kbar li jinvolvu aktar minn 180,000 mara, K2, PALB2, RAD51C, u RAD51D) primarjament responsabbli għal ereditarji BC. Fost dawn il-ġeni, BRCA1 u BRCA2 (minn hawn 'il quddiem imsejħa BRCA1/2) wrew l-aktar korrelazzjoni b'saħħitha mal-iżvilupp ta' tumuri tas-sider. tic, kolorettali, u melanoma. Mill-età ta’ 13 sa 80 sena, l-inċidenza kumulattiva ta’ BC hija 72% f’nisa b’varjant patoġeniku (PV) BRCA1 u 69% f’nisa b’PVB BRCA2.14
Notevolment, pubblikazzjoni riċenti tissuġġerixxi li r-riskju BC jiddependi fuq it-tip ta 'PV. Fil-fatt, meta mqabbla ma' varjanti truncating patoġeniċi, varjanti missense evidenti, speċjalment fil-ġene BRCA1, huma assoċjati ma 'riskju mnaqqas ta' BC, speċjalment f'nisa anzjani.15
Il-preżenza ta 'BRCA1 jew BRCA2 PV kienet assoċjata ma' karatteristiċi bijoloġiċi u klinikopatoloġiċi differenti.16,17 BCs assoċjati ma 'BRCA1 għandhom tendenza li jkunu klinikament aggressivi, differenzjati ħażin, u proliferattivi ħafna. Dawn it-tumuri huma ġeneralment negattivi triplu u għandhom età bikrija ta' bidu. n B u normalment iseħħu f’adulti anzjani.16-18 Notevolment, mutazzjonijiet f’BRCA1 u BRCA2 iżidu s-sensittività għal trattamenti speċifiċi, inklużi melħ tal-platinu u mediċini mmirati bħal inibituri tal-poli (ADP-ribose) polymerase (PARPi).19,20.
Matul dawn l-aħħar ftit snin, l-implimentazzjoni tas-sekwenzjar tal-ġenerazzjoni li jmiss (NGS) fil-prattika klinika ppermettiet li numru dejjem jikber ta 'pazjenti BC jgħaddu minn testijiet molekulari għal sindromi ta' suxxettibilità għall-kanċer, inklużi BRCA1/2.21 Fl-istess ħin, definizzjonijiet ibbażati fuq kriterji preċiżi dwar storja tal-familja, karatteristiċi demografiċi u klinikopatoloġiċi biex jidentifikaw aħjar l-individwi. 1/2 screening f’popolazzjonijiet speċifiċi, li jenfasizza d-differenzi bejn ir-reġjuni ġeografiċi.24–27 Għalkemm hemm rapporti dwar il-koorti BC fil-punent ta’ Sqallija, hemm inqas dejta disponibbli dwar l-iskrinjar BRCA1/2 fil-popolazzjoni tal-Lvant ta’ Sqallija.28,29.
Hawnhekk niddeskrivu r-riżultati tal-iskrining tal-linja ġerminali BRCA1/2 f'pazjenti BC mill-Lvant ta 'Sqallija, aktar jikkorrelataw il-preżenza ta' mutazzjonijiet BRCA1 jew BRCA2 mal-karatteristiċi klinikopatoloġiċi ewlenin ta 'dawn it-tumuri.
Sar studju retrospettiv fiċ-“Ċentru għall-Onkoloġija u l-Ematoloġija Sperimentali” fl-Isptar Policlinico.Rodolico – San Marco f’Katanja. Minn Jannar 2017 sa Marzu 2021, total ta’ 455 pazjent b’kanċer tas-sider u tal-ovarji, melanoma, frixa jew tal-prostata ġew riferuti lill-laboratorju dijanjostiku tal-BRCA. , u l-parteċipanti kollha pprovdew kunsens infurmat bil-miktub qabel l-analiżi molekulari.
Karatteristiċi istoloġiċi u bijoloġiċi (ER, PgR, status HER2, Ki-67, u grad) ta' BC ġew evalwati fuq bijopsija ewlenija jew kampjuni kirurġiċi, meta jitqiesu biss komponenti aggressivi tat-tumur. Abbażi ta' dawn il-karatteristiċi, BCs ġew ikklassifikati kif ġej: luminal A (ER+ u/jew PgR+, HER+, HER-672-2-, ER-672-, 2-ER, 2-2, 2, 2, 2, 2, 2, 2, 2, 2, 2, 2, 2, 2, 2, 3, 2, 3, 3, 3, 4 ou 5). -, Ki-67≥20%), luminali B-HER2+ (ER u/jew PgR+, HER2+), HER2+ (ER u PgR-, HER2+) jew negattiv triplu (ER u PgR-, HER2-).
Qabel ma vvaluta l-istatus tal-mutazzjoni BRCA1 u BRCA2, tim multidixxiplinarju inkluż onkologu, ġenetiku, u psikologu wettaq konsultazzjoni dwar il-ġenetika tat-tumur għal kull pazjent biex jiddetermina l-preżenza ta 'BRCA1 u/jew BRCA1.jew individwi b’riskju għoli ta’ PV fil-ġene BRCA2.L-għażla tal-pazjent saret skont il-linji gwida tas-Soċjetà Taljana tal-Onkoloġija Medika (AIOM) u r-rakkomandazzjonijiet Sqallin lokali.30,31 Dawn il-kriterji jinkludu: (i) storja familjari ta’ varjanti patoġeniċi magħrufa fil-ġeni ta’ suxxettibbiltà (eż., BRCA1, BRCA2, TP53, PTEN);(ii) irġiel b'BC;(iii) dawk b'BC u OC;(iv) nisa b'BC <36 sena, TNBC <60 sena, jew BC bilaterali <50 sena;(v) storja medika personali ta' BC <50 sena u mill-inqas qarib wieħed ta' l-ewwel grad: (a) BC < 50 sena;(b) OC mhux muċinużi u non-borderline ta' kwalunkwe età;(c) BC bilaterali;(d) BC maskili;(e) kanċer tal-frixa;(f) kanċer tal-prostata;(vi) żewġ storja personali jew aktar ta' BC > 50 sena u storja familjari ta' BC, OC, jew kanċer tal-frixa għal qraba li huma qraba ta' l-ewwel grad ma' xulxin (inklużi qraba li magħhom hija qraba ta' l-ewwel grad);(vii) Storja personali ta' OC u mill-inqas qarib wieħed tal-ewwel grad: (a) BC <50 sena;(b) NOC;(c) BC bilaterali;(d) BC maskili;(vii) mara b'OC seruża ta' grad għoli.
Kampjun tad-demm periferali ta '20 ml kien miksub minn kull pazjent u miġbur f'tubi EDTA (BD Biosciences). Id-DNA ġenomiku kien iżolat minn 0.7 ml kampjuni tad-demm sħiħ bl-użu tal-qIAsymphony DSP DNA MIDI Kit Kit Kit (Qiagen, Hilden, l-Italja) skond l-istruzzjonijiet tal-manifattur u għadda mill-Qubit® 3.0 fluworometri Wettaq kwantifikazzjoni.L-arrikkiment fil-mira u l-preparazzjoni tal-librerija jitwettqu mill-Oncomine™ BRCA Research Assay Chef, lest biex jitgħabba fil-Kit tar-Reaġenti Ion AmpliSeq™ Chef DL8 għall-preparazzjoni awtomatizzata tal-librerija skont l-istruzzjonijiet tal-manifattur. Ġew miżjuda 15 µL ta' kull kampjun tad-DNA dilwit (10 ng) ma' pjanċi tal-barcode għall-preparazzjoni tal-librerija u r-reaġenti u l-konsumabbli kollha ġew mgħobbija fuq l-istrument Ion Chef™. skond l-istruzzjonijiet tal-manifattur. Fl-aħħarnett, il-libreriji huma kkombinati fi proporzjonijiet ekwimolari f'tubi tal-kampjuni tal-librerija Ion Chef™ (tubi bil-barcode) u mgħobbija fuq l-istrument Ion Chef™. Is-sekwenzjar sar bl-użu ta 'strument Ion Torrent S5 (Thermo Fisher Scientific) (Thermo Fisher Scientific) bl-użu ta' Ion 510 Fisher Scientific (Thermo Fisher Scientific) analiżi (Thermo Fisher Scientific) saret permezz ta' analiżi ThermoDQSmart (ThermoDuite Scientific). srl) u Ion Reporter Software.
In-nomenklatura tal-varjanti kollha segwiet il-linji gwida attwali tal-Konsorzju tal-Varjazzjoni tal-Ġenoma Uman, disponibbli onlajn (HGVS, http://www.hgvs.org/mutnomen).Is-sinifikat kliniku tal-varjanti BRCA1/2 ġie definit bl-użu tal-klassifikazzjoni tal-Konsorzju Internazzjonali ENIGMA (Netwerk Ibbażat fuq Evidenza għall-Interpretazzjoni tal-Germline Mutant Alleles/Britters, konsultazzjoni bħas-database tal-ARCA, BRCA1 differenti u konsulenza differenti, BRCA1/2). CHANGE , ClinVar, IARC_LOVD, u UMD.Il-klassifikazzjoni tinkludi ħames kategoriji ta 'riskju distinti: beninni (kategorija I), probabbli beninni (kategorija II), varjant ta' sinifikat inċert (VUS, kategorija III), patoġeniċi probabbli (kategorija IV), u patoġeniċi (kategorija V).
Biex jiġi assenjat sinifikat kliniku potenzjali għal kull VUS, intużaw l-algoritmi ta' tbassir tal-proteini komputazzjonali li ġejjin: MUTATION TASTER, 33 PROVEAN-SIFT (http://provean.jcvi.org/index.php), POLYPHEN-2 (http:///genetics.bwh.harvard.edu/pph2/) u Align-GVGD (http:///genetics.bwh.harvard.edu/pph2/) u Align-GVGD (http://provean.jcvi.org/index.php). ariants klassifikati bħala klassi 1 u 2 kienu kkunsidrati tat-tip selvaġġ.
Is-sekwenzjar ta 'Sanger ikkonferma l-preżenza ta' kull varjant patoġeniku. Fil-qosor, par primers speċifiċi ġew iddisinjati għal kull varjant misjub bl-użu tas-sekwenzi ta 'referenza tal-ġeni BRCA1 u BRCA2 (NG_005905.2, NM_007294.3 u NG_012772.3, NM_0000059, NM_0000059, NM_0000059, rispettivament). .
Pazjenti li ttestjaw negattivi għall-ġene BRCA1/2 ġew ittestjati permezz ta 'amplifikazzjoni tas-sonda dipendenti mill-ligament multiplex (MLPA) skont l-istruzzjonijiet tal-manifattur biex tiġi vvalutata l-preżenza ta' riarranġament ġenomic kbir (LGR). Fil-qosor, kampjuni tad-DNA huma żnaturati u sa 60 BRCA1 u BRCA2 sondi speċifiċi tal-ġene huma użati, kull sequence sequence tul ta 'prondi60 speċifiċi ta' DNA tikkonsisti tul ta 'prorogati60. ing ta 'sett uniku ta' amplicons PCR, imbagħad ġew analizzati permezz ta 'elettroforeżi kapillari u permezz ta' softwer Cofalyser.Net flimkien mat-tabelli Cofalyser xierqa speċifiċi għall-lott (www.mrcholland.com).
Varjabbli klinikopatoloġiċi magħżula (grad istoloġiku u indiċi ta 'proliferazzjoni Ki-67%) kienu assoċjati mal-preżenza ta' BRCA1/2 PV, ikkalkulat bl-użu tas-softwer Prism v. 8.4 bl-użu tat-test eżatt ta 'Fisher billi wieħed jassumi li l-valur p <0.05 huwa sinifikanti.
Bejn Jannar 2017 u Marzu 2021, 455 pazjent ġew skrinjati għal mutazzjonijiet BRCA1/2 tal-linja ġerminali.Testjar tal-mutazzjoni sar fiċ-Ċentru tal-Onkoloġija u l-Ematoloġija Sperimentali tal-Isptar Policlinico.Skond il-linja gwida Sqallija (http://www.gurs.regione.sicilia.it/Indicep1. dolico of Catania – San Marco” globalment, 389 pazjent Kien hemm kanċer tas-sider, 37 kanċer tal-ovarji, 16 kanċer tal-frixa, 8 kanċer tal-prostata u 5 melanoma.Id-distribuzzjoni tal-pazjenti skont it-tip tal-kanċer u r-riżultati tal-analiżi tidher fil-Figura 1.
Il-Figura 1 turi flow chart li turi ħarsa ġenerali lejn l-istudju. Pazjenti b'tumuri tas-sider, melanoma, frixa, tal-prostata jew tal-ovarji ġew ittestjati għal mutazzjonijiet fil-ġeni BRCA1 u BRCA2.
Abbrevjazzjonijiet: PVs, varjant patoġeniku;VUS, varjant ta' sinifikat inċert;WT, sekwenza BRCA1/2 tat-tip selvaġġ.
Aħna ffokajna b'mod selettiv l-istudji tagħna fuq il-koorti tal-kanċer tas-sider. Il-pazjenti kellhom età medjana ta '49 sena (medda 23-89) u kienu fil-biċċa l-kbira nisa (n=376, jew 97%).
Minn dawn is-suġġetti, 64 (17%) kellhom mutazzjonijiet BRCA1/2 u kienu kollha nisa. Ħamsa u tletin (9%) kellhom PV u 29 (7.5%) kellhom VUS.Sbatax (48.6%) mill-35 varjant patoġeniku seħħew f’BRCA1 u 18 (51.4%) f’BRCA2, filwaqt li 5.2281.7%) f’BRCA2 (BRCA2) u f’BRCA2 seħħew. 2 (Figuri 1 u 2).LGR ma kienx preżenti fl-analiżi MLPA.
Figura 2. Analiżi tal-mutazzjonijiet BRCA1 u BRCA2 f'389 pazjent bil-kanċer tas-sider. (A) Distribuzzjoni ta 'varjanti patoġeniċi (PV) (aħmar), varjanti ta' sinifikat inċert (VUS) (oranġjo), u WT (blu) f'389 pazjent bil-kanċer tas-sider;(B) 389 pazjent bil-kanċer tas-sider Ħamsa u tletin (9%) kellhom varjanti patoġeniċi (PVs) BRCA1/2. Fost dawn, 17 (48.6%) kienu trasportaturi BRCA1 PV (aħmar skur) u 18 (51.4%) kienu trasportaturi BRCA2 (aħmar ċar);(C) 29 (7.5%) minn 389 suġġett kellhom VUS, 5 (17.2%) ġeni BRCA1 (oranġjo skur) u 24 (82.8%) ġeni BRCA2 (oranġjo ċar).
Abbrevjazzjonijiet: PVs, varjant patoġeniku;VUS, varjant ta' sinifikat inċert;WT, sekwenza BRCA1/2 tat-tip selvaġġ.
Wara investigajna l-prevalenza tas-sottotipi molekulari tal-BC f'pazjenti b'BRCA1/2 PV. Id-distribuzzjoni inkludiet 2 (5.7%) luminali A, 15 (42.9%) luminali B, 3 (8.6%) luminali B-HER2+, 2 (5.7%) HER2+ u 13 (37.1%) pazjenti TNBC (Fost pazjenti BBC pożittivi, RCA15-). 1.8%) kellhom marda HER2+, u 10 (58.8%) kellhom TNBC.Tumuri mingħajr mutazzjonijiet BRCA1 kienu jew luminali A jew luminali B-HER2+ (Figura 3). Fis-sottogrupp pożittiv BRCA2, 10 (55.6%) tumuri kienu luminali B, 3 (16.7%) kienu luminali B-HER1. Figura 3). L-ebda tumuri HER2+ ma kienu preżenti f'dan il-grupp. Għalhekk, mutazzjonijiet BRCA1 huma prevalenti f'pazjenti TNBC, filwaqt li alterazzjonijiet BRCA2 huma predominanti f'individwi tal-lumen B.
Figura 3 Prevalenza ta 'sottotipi ta' kanċer tas-sider f'pazjenti b'varjanti patoġeniċi f'BRCA1 u BRCA2. Istogrammi li juru d-distribuzzjoni ta 'PVs BRCA1- (aħmar skur) u BRCA2- (aħmar ċar) fost sottotipi molekulari ta' pazjenti bil-kanċer tas-sider. Numri rrappurtati f'kull kaxxa jirrappreżentaw il-perċentwal ta 'pazjenti b'BRCA1 u BRCA2 subtip ta' kanċer tas-sider għal kull PV.
Abbrevjazzjonijiet: PVs, varjant patoġeniku;HER2+, riċettur tal-fattur tat-tkabbir epidermali uman 2 pożittiv;TNBC, kanċer tas-sider triplu negattiv.
Sussegwentement, ivvalutajna t-tip u l-lokalizzazzjoni tal-ġeni ta 'BRCA1 u BRCA2 PVs.Fi BRCA1 PV, osservajna 7 varjanti ta' nukleotidi wieħed (SNVs), 6 tħassir, 3 duplikazzjonijiet u inserzjoni 1. Mutazzjoni waħda biss (c.5522delG) tirrappreżenta skoperta ġdida. TAAT.Din l-alterazzjoni tinvolvi tħassir ta’ ħames nukleotidi (CTAAT) f’BRCA1 exon 15, li tirriżulta fis-sostituzzjoni tal-amino acid leucine b’tyrosine f’codon 1679, u minħabba tibdil ta’ traduzzjoni b’kodon ta’ waqfien alternattiv previst jwassal għal truncation prematur tal-proteini. reġjun tal-Istati Uniti (c.4357+1G>T) (Tabella 1).
Rigward BRCA2 PV, osservajna 6 tħassir, 6 SNVs u 2 duplikazzjonijiet.L-ebda tibdil misjuba mhu ġdid.Tliet mutazzjonijiet reġgħu seħħew fil-popolazzjoni tagħna, c.428dup u c.8487+1G>A osservati fi 3 suġġetti, segwiti minn c.5851_5854_5854delAGTT ex. alterazzjoni f'żewġ każijiet C. fuq 5 ta 'BRCA2, mbassra li tikkodifika proteina maqtugħa, mhux funzjonali.Il-mutazzjoni c.8487 + 1G> A sseħħ fir-reġjun introniku ta' BRCA2 intron 19 (± 1,2) u taffettwa s-sekwenza tal-kunsens tat-tgħaqqid, li tirriżulta fi splicing mibdul li jirriżulta f'passaġġ anormali jew assenti ta 'proteina anormali jew assenti għal proteina anormali jew assenti. tħassir tan-nukleotidi mill-pożizzjonijiet tan-nukleotidi 5851 sa 5854 fil-kodifikazzjoni exon 10 tal-ġene BRCA2 u tirriżulta fi frameshift translazzjonali b'kodon ta' waqfien alternattiv previst (p.S1951WfsTer).Notevolment, kif irrappurtat qabel, iż-żewġ alterazzjonijiet ġew misjuba ċ.631G>A u l-ewwel mutazzjoni fl-istess pazjent. sostituzzjoni ta 'adenosine (A) f'BRCA2 exon 7 ma' guanine (G) li jkun fih nukleotide li jirriżulta f'bidla ta 'valine għal isoleucine f'codon 211, isoleucine Amino acid huwa aċidu amminiku bi proprjetajiet simili ħafna. Din il-bidla taffettwa t-twaħħil normali tal-mRNA. ding BRCA2.Il-bidla c.7008-2A>T tista 'tiġġenera traskrizzjonijiet multipli ta' tulijiet differenti. Barra minn hekk, fil-grupp ta 'PVs BRCA2, 4 minn 18-il bidla (22.2%) kienu intrronic.
Aħna mbagħad immappjati mutazzjonijiet ta 'ħsara BRCA1 / 2 f'oqsma funzjonali u reġjuni li jorbtu mal-proteini (Fig. 4). Fil-ġene BRCA1, 50% tal-PVs kienu jinsabu fir-reġjun cluster tal-kanċer tas-sider (BCCR), filwaqt li 22% tal-mutazzjonijiet kienu jinsabu fir-reġjun cluster tal-kanċer tal-ovarji (OCCR) (Fig. 4A ). .8% tal-mutazzjonijiet kienu jinsabu fl-OCCR (Fig. 4B). Sussegwentement, ivvalutajna l-post tal-PV fi ħdan id-dominji tal-proteini BRCA1 u BRCA2. Għall-proteina BRCA1, sibna tliet PVs fil-loop u oqsma coiled coil, u żewġ mutazzjonijiet fid-dominju BRCT (Fig. 4A). bidliet eżoniċi ġew skoperti fid-dominji tal-oligo/oligosaccharide-binding (OB) u t-torri (T) (Figura 4B).
Figura 4 Rappreżentazzjoni skematika ta 'proteini BRCA1 u BRCA2 u lokalizzazzjoni ta' varjanti patoġeniċi. Din il-figura turi d-distribuzzjoni ta 'varjanti patoġeniċi BRCA1 (A) u BRCA2 (B) f'pazjenti b'kanċer tas-sider. dominju loop (RING) u sekwenza ta' lokalizzazzjoni nukleari (NLS), domain coiled-coil, domain cluster SQ/TQ (SCD), u dominju BRCA1 C-terminal (BRCT). ), u NLS fuq in-naħa C.Oqsma msejħa Breast Cancer Cluster Region (BCCR) u Ovarian Cancer Cluster Region (OCCR) huma murija fil-qiegħ.* Jirrappreżenta mutazzjonijiet li jiddeterminaw kodoni ta 'waqfien.
Imbagħad investigajna karatteristiċi klinikopatoloġiċi tal-BC li jistgħu jikkorrelataw mal-preżenza ta 'BRCA1/2 PV.Reġistri kliniċi kompleti kienu disponibbli għal 181 pazjent BRCA1/2-negattiv (mhux trasportaturi) u trasportaturi kollha (n = 35).Kien hemm korrelazzjoni bejn ir-rata ta' proliferazzjoni tat-tumur u l-grad.
Aħna kkalkulajna d-distribuzzjoni ta’ Ki-67 ibbażata fuq il-medjan tal-koorti tagħna (25%, medda <10-90%). ers (Fig. 5A).
Figura 5 Korrelazzjoni ta' Ki-67 mad-distribuzzjoni tal-grad f'nisa b'kanċer tas-sider bi u mingħajr BRCA1 u BRCA2 PVs. gruppi (G2 u G3) skond l-istatus ta' mutazzjoni BRCA1 u BRCA2 (suġġetti WT, trasportaturi BRCA1 u BRCA2 PVs).
Bl-istess mod, aħna eżaminajna jekk il-grad tat-tumur kienx korrelatat mal-preżenza ta 'BRCA1/2 PV. Peress li G1 BC kien assenti fil-popolazzjoni tagħna, qsamna l-pazjenti f'żewġ gruppi (G2 jew G3). ure 5B ).
Avvanzi fit-teknoloġija tas-sekwenzjar tad-DNA ppermettew avvanzi bla preċedent fl-ittestjar ġenetiku BRCA1/2, b'implikazzjonijiet kruċjali għal pazjenti bi storja familjari ta 'kanċer. Sal-lum, madwar 20.000 varjant BRCA1/2 ġew identifikati u kklassifikati skont is-Soċjetà Amerikana tal-Ġenetika Medika 35 u s-sistema ENIGMA. ir-rata ta’ BRCA1/2 PVs varjat minn 8% sa 37%, li turi varjabbiltà wiesgħa ġewwa l-pajjiż.38,39 B’popolazzjoni ta’ kważi 5 miljuni, Sqallija hija l-ħames l-akbar reġjun fl-Italja f’termini tan-numru ta’ abitanti.
L-istudju tagħna huwa wieħed mill-ewwel rapporti dwar l-inċidenza ta’ BRCA1/2 PV f’pazjenti BC fil-Lvant ta’ Sqallija.28 Aħna ffukajna l-analiżi tagħna fuq BC, peress li din hija bil-bosta l-aktar marda komuni fil-koorti tagħna.
Meta ttestjaw 389 pazjent BC, 9% ġarrew BRCA1/2 PVs, imqassma indaqs bejn BRCA1 u BRCA2. Dawn ir-riżultati huma konsistenti ma 'dawk irrappurtati qabel fil-popolazzjoni Taljana.28 Interessanti, 3% (13/389) tal-koorti tagħna kienu maskili. , ħadd minn dawn l-irġiel ma żviluppa BRCA1/2 PV, għalhekk kienu kandidati għal aktar analiżi molekulari biex jeskludu l-preżenza ta’ mutazzjonijiet inqas komuni bħal PALB2, RAD51C u D, fost oħrajn.Varjanti ta’ sinifikat inċert ġew irkuprati f’7% tas-suġġetti li fihom BRCA2 VUS kien evidenti.Anke dan ir-riżultat huwa konsistenti ma’ evidenza preeżistenti.428,41.
Meta analiznajna d-distribuzzjoni ta’ sottotipi molekulari BC f’nisa mutanti BRCA1/2, ikkonfermajna assoċjazzjonijiet magħrufa bejn TNBC u BRCA1 PV (58.8%) u bejn luminal B BC u BRCA2 PV (55.6%).
Aħna mbagħad niffukaw fuq it-tip u l-post tal-BRCA1/2 PV.Fil-koorti tagħna, l-aktar komuni BRCA1 PV kien c.5035_5039delCTAAT.Although Incorvaia et al.ma ddeskrivewx dan il-varjant fil-koorti Sqalli tagħhom, awturi oħra rrappurtawha bħala germline BRCA1 PV.34 Diversi BRCA1 PVs instabu fil-koorti tagħna – eż. c.181T>G, c.514del, c.3253dupA u c.5266dupC – li ġew osservati fi Sqallija, tnejn. 266dupC) huma komunement misjuba fil-Lhud Ashkenazi tal-Ewropa tal-Lvant u Ċentrali (Polonja, Ċeka), Sloven, Awstrijak, Ungeriż, Belarussu u Ġermaniż), 44,45 u, fl-Istati Uniti u l-Arġentina, kien definit reċentement bħala "varjant ġerminali rikorrenti" f'pazjenti Taljani b'BC u OC. Il-34c. , anke Incorvaia et al.sabet il-varjant c.3253dupA f'xi familji f'Catania.28 Il-PVs BRCA2 l-aktar rappreżentattivi huma c.428dup, c.5851_5854delAGTT u l-varjant intronic c.8487+1G>A, li ġew irrappurtati f'aktar dettall 28 f'pazjent f'Palermo b'c.428dup f'Palermo ma 'c.428dup, c.428duppunent tad-dar f'C. Sqallija, prinċipalment fir-reġjuni ta’ Trapani u Palermo, filwaqt li c.5851_5854delAGTT PV kien osservat fid-djar fil-majjistral ta’ Sqallija.Il-varjant 8487+1G>A kien aktar komuni f’suġġetti minn Messina, Palermo, u Caltanissetta.28 Rebbeck et al.preċedentement iddeskriviet l-alterazzjoni c.5851_5854delAGTT fil-Kolombja.37 BRCA2 PV ieħor, c.631+1G>A, instab f’pazjenti BC u OC minn Sqallija (Agrigento, Siracusa u Ragusa).28 Notevolment, osservajna l-koeżistenza ta’ żewġ varjanti BRCA2 (BRCA2 1G>A) li aħna nassumu l-istess pazjent fl-A1700>A , 6 , 6 3 d biex jiġu segregati fil-mod cis, kif irrappurtat qabel hekk.34,46 Dawn il-mutazzjonijiet uble BRCA2 huma tabilħaqq osservati ta 'spiss fir-reġjun Taljan u nstabu li jintroduċu kodoni ta' waqfien prematur, li jaffettwaw it-twaħħil tal-RNA messaġġier u jikkawżaw il-falliment tal-proteina BRCA2.47,48
Aħna mmappajna wkoll BRCA1 u BRCA2 PVs f'reġjuni putattivi OCCR u BCCR ta 'dominji tal-proteini u ġeni. Dawn ir-reġjuni ġew deskritti minn Rebbeck et al.bħala żoni ta’ riskju għall-iżvilupp tal-kanċer tal-ovarji u tas-sider, rispettivament.49 Madankollu, l-evidenza dwar l-assoċjazzjoni bejn il-post tal-varjanti tal-linja ġerminali u r-riskju tal-kanċer tas-sider jew tal-ovarji tibqa’ kontroversjali.28,50-52 Fil-popolazzjoni tagħna, il-PVs BRCA1 kienu lokalizzati b’mod predominanti fir-reġjun tal-BCCR, filwaqt li l-PVs BRCA2 kienu lokalizzati b’mod predominanti fir-reġjun tal-OCCR u r-reġjun OCCR. u l-karatteristiċi tal-BC.Dan jista 'jkun minħabba n-numru limitat ta' pazjenti b'mutazzjonijiet BRCA1/2.Mill-perspettiva tad-dominju tal-proteini, il-PVs BRCA1 huma mqassma tul il-proteina kollha, u l-alterazzjonijiet BRCA2 jinstabu preferenzjali fid-dominju ripetut BRC.
Fl-aħħarnett, ikkorrelajna karatteristiċi klinikopatoloġiċi tal-BC ma 'BRCA1/2 PV. Minħabba n-numru limitat ta' pazjenti inklużi, sibna biss korrelazzjoni sinifikanti bejn Ki-67 u l-grad tat-tumur. 20%.Madankollu, dan il-limitu ma japplikax għall-popolazzjoni tagħna ta' pazjenti b'mutazzjoni BRCA1/2, li għandha valur medjan ta' Ki-67 ta' 25%.Din it-tendenza f'rati għoljin ta' Ki-67 tista' tiġi spjegata mill-prevalenza fil-koorti luminali B u TNBC tagħna, li minnhom ftit tumuri luminali A kienu preżenti. 53,54 Mir-riżultati tal-analiżi tagħna, korrelazzjoni sinifikanti mhix sorprendenti.Tiġri bejn Ki-67 għolja u gradi u l-preżenza ta 'BRCA1 PV.Fil-fatt, tumuri relatati ma' BRCA1 huma tipiċi ta 'TNBC u juru karatteristiċi aktar aggressivi.16,17
Bħala konklużjoni, dan l-istudju jipprovdi rapport dwar l-istatus mutazzjonali ta 'BRCA1/2 f'koorti BC mill-Lvant ta' Sqallija. B'mod ġenerali, is-sejbiet tagħna huma konsistenti ma 'evidenza preeżistenti, kemm f'termini ta' prevalenza ta 'mutazzjoni u karatteristiċi klinikopatoloġiċi f'BC. frekwenti minn BRCA1/2.Dan se jippermetti l-identifikazzjoni u l-ġestjoni xierqa tan-numru dejjem jikber ta 'suġġetti f'riskju akbar ta' kanċer minħabba mutazzjonijiet ġenetiċi.
Aħna kkonfermajna li l-pazjenti ffirmaw il-kunsens infurmat biex jirrilaxxaw il-kampjuni tat-tumur tagħhom b'mod anonimu għal skopijiet ta 'riċerka. Il-pazjenti kollha ffirmaw kunsens infurmat bil-miktub skont id-Dikjarazzjoni ta' Ħelsinki. .
Nirringrazzjaw lill-Prof Paolo Vigneri għall-għajnuna tiegħu fil-kura ta’ pazjenti bil-kanċer tas-sider kif mitlub mill-Kumitat tal-Etika.
Federica Martorana tirrapporta onorarja mill-Istituto Gentili, Eli Lilly, Novartis, Pfizer.L-awturi l-oħra jiddikjaraw l-ebda kunflitt ta 'interess f'dan ix-xogħol.
1. Sung H, Ferlay J, Siegel RL, et al.Global Cancer Statistics 2020: GLOBOCAN jistma l-inċidenza u l-mortalità ta’ 36 kanċer f’185 pajjiż madwar id-dinja.CA Cancer J Clin.2021;71(3):209-249.doi: 10.33226/caac.212