Grazzi talli żort Nature.com. Il-verżjoni tal-browser li qed tuża għandha appoġġ limitat għas-CSS. Għall-aħjar esperjenza, nirrakkomandaw li tuża browser aġġornat (jew tiddiżattiva l-Modalità ta' Kompatibilità fl-Internet Explorer). Sadanittant, biex niżguraw appoġġ kontinwu, se nirrendu s-sit mingħajr stili u JavaScript.
Fsada mhux ikkontrollata hija waħda mill-kawżi ewlenin tal-mewt. Il-kisba ta' emostasi rapida tiżgura s-sopravivenza tas-suġġett bħala l-ewwel għajnuna waqt ġlied, inċidenti tat-traffiku, u operazzjonijiet ta' tnaqqis tal-imwiet. Armar kompost rinforzat bil-fibra nanoporuża (NFRCS) derivat minn kompożizzjoni sempliċi emostatika li tifforma film (HFFC) bħala fażi kontinwa jista' jqanqal u jtejjeb l-emostasi. L-iżvilupp tal-NFRCS huwa bbażat fuq id-disinn tal-ġwienaħ tal-mazzarell. L-istruttura tal-ġwienaħ tal-mazzarell tikkonsisti minn ġwienaħ trasversali u lonġitudinali, u l-membrani tal-ġwienaħ huma konnessi ma' xulxin biex iżommu l-integrità tal-mikrostruttura. L-HFFC jiksi b'mod uniformi l-wiċċ tal-fibra b'film ta' ħxuna nanometrika u jgħaqqad il-ħxuna tal-qoton (Ct) imqassma b'mod każwali (fażi mxerrda) biex jifforma struttura nanoporuża. Il-kombinazzjoni ta' fażijiet kontinwi u mxerrda tnaqqas l-ispiża tal-prodott b'għaxar darbiet meta mqabbla mal-prodotti disponibbli kummerċjalment. NFRCS modifikati (tampuni jew faxex tal-polz) jistgħu jintużaw f'varjetà ta' applikazzjonijiet bijomediċi. Studji in vivo kkonkludew li s-Cp NFRCS żviluppat jattiva u jtejjeb il-proċess ta' koagulazzjoni fis-sit tal-applikazzjoni. L-NFRCS jista' jimmodula l-mikroambjent u jaġixxi fil-livell ċellulari minħabba l-istruttura nanoporuża tiegħu li tirriżulta f'fejqan aħjar tal-feriti fil-mudell tal-ferita ta' esċiżjoni.
Fsada mhux ikkontrollata waqt ġlied, sitwazzjonijiet intraoperattivi u ta’ emerġenza tista’ toħloq theddida serja għall-ħajja tal-feruti1. Dawn il-kundizzjonijiet iwasslu wkoll għal żieda ġenerali fir-reżistenza vaskulari periferali, li twassal għal xokk emorraġiku. Miżuri xierqa biex tiġi kkontrollata l-fsada waqt u wara l-kirurġija huma kkunsidrati potenzjalment ta’ theddida għall-ħajja2,3. Ħsara lill-vini l-kbar twassal għal telf massiv ta’ demm, li jirriżulta f’rata ta’ mortalità ta’ ≤ 50% fil-ġlied u 31% waqt il-kirurġija1. Telf massiv ta’ demm iwassal għal tnaqqis fil-volum tal-ġisem, li jnaqqas l-output kardijaku. Żieda fir-reżistenza vaskulari periferali totali u indeboliment progressiv tal-mikroċirkolazzjoni jwasslu għal ipoksja fl-organi li jsostnu l-ħajja. Jista’ jseħħ xokk emorraġiku jekk il-kundizzjoni tkompli mingħajr intervent effettiv1,4,5. Kumplikazzjonijiet oħra jinkludu l-progressjoni tal-ipotermja u l-aċidożi metabolika, kif ukoll disturb tal-koagulazzjoni li jfixkel il-proċess tal-koagulazzjoni. Xokk emorraġiku sever huwa assoċjat ma’ riskju ogħla ta’ mewt6,7,8. Fix-xokk ta’ grad III (progressiv), it-trasfużjoni tad-demm hija essenzjali għas-sopravivenza tal-pazjent waqt il-morbidità u l-mortalità intraoperattiva u postoperattiva. Biex negħlbu s-sitwazzjonijiet kollha ta' theddida għall-ħajja msemmija hawn fuq, żviluppajna scaffold kompost rinforzat bil-fibra nanoporuża (NFRCS) li juża konċentrazzjoni minima ta' polimeru (0.5%) bl-użu ta' taħlita ta' polimeri emostatiċi li jinħallu fl-ilma.
Bl-użu ta' rinfurzar tal-fibra, jistgħu jiġu żviluppati prodotti kosteffettivi. Il-fibri rranġati b'mod każwali jixbħu l-istruttura ta' ġwienaħ ta' mazzarell, ibbilanċjati mill-istrixxi orizzontali u vertikali fuq il-ġwienaħ. Il-vini trasversali u lonġitudinali tal-ġwienaħ jikkomunikaw mal-membrana tal-ġwienaħ (Fig. 1). L-NFRCS jikkonsisti minn Ct rinforzat bħala sistema ta' scaffolding b'saħħa fiżika u mekkanika aħjar (Figura 1). Minħabba l-affordabbiltà u s-sengħa, il-kirurgi jippreferu jużaw gauges tal-ħajt tal-qoton (Ct) waqt l-operazzjonijiet u l-faxex. Għalhekk, meta wieħed iqis il-benefiċċji multipli tagħha, inkluż > 90% ċelluloża kristallina (li tikkontribwixxi għat-titjib tal-attività emostatika), Ct intużat bħala sistema skeletali ta' NFRCS9,10. Għalhekk, meta wieħed iqis il-benefiċċji multipli tagħha, inkluż > 90% ċelluloża kristallina (li tikkontribwixxi għat-titjib tal-attività emostatika), Ct intużat bħala sistema skeletali ta' NFRCS9,10. Следовательно, учитывая его многочисленные преимущества, в том числе > 90% кристалличесесклой (участвует в повышении гемостатической активности), Ct использовали в качестве скелетной скелетной скелетной сис9CS,10 N. Għalhekk, minħabba l-ħafna benefiċċji tagħha, inkluż >90% ċelluloża kristallina (involuta f'attività emostatika miżjuda), Ct intużat bħala s-sistema skeletrika NFRCS9,10.因此，考虑到它的多重益处，包括> 90% 的结晶纤维素（有助于增强止血滴止血滴，，被用作NFRCS9,10 的骨架系统。因此，考虑到它的多重益处，包括> 90%Għalhekk, minħabba l-ħafna benefiċċji tagħha, inkluż aktar minn 90% ċelluloża kristallina (tgħin biex ittejjeb l-attività emostatika), Ct intużat bħala scaffold għall-NFRCS9,10.Is-Ct kien miksi superfiċjalment (ġiet osservata formazzjoni ta' film nano-oħxon) u interkonness ma' kompożizzjoni emostatika li tifforma film (HFFC). L-HFFC jaġixxi bħal matrigel, u jżomm is-Ct imqiegħed flimkien b'mod każwali. Id-disinn żviluppat jittrażmetti l-istress fil-fażi mxerrda (fibri ta' rinfurzar). Huwa diffiċli li jinkisbu strutturi nanoporużi b'saħħa mekkanika tajba bl-użu ta' konċentrazzjonijiet minimi ta' polimeri. Barra minn hekk, mhux faċli li jiġu personalizzati forom differenti għal applikazzjonijiet bijomediċi differenti.
Il-figura turi dijagramma tad-disinn tal-NFRCS ibbażat fuq l-istruttura tal-ġwienaħ tal-mazzarell (A). Din l-immaġni turi analoġija komparattiva tal-istruttura tal-ġwienaħ ta' mazzarell (il-vini li jintersekaw u lonġitudinali tal-ġwienaħ huma interkonnessi) u mikrofotografu trasversali ta' Cp NFRCS (B). Rappreżentazzjoni skematika tal-NFRCS.
L-NFRCs ġew żviluppati bl-użu tal-HFFC bħala fażi kontinwa biex jindirizzaw il-limitazzjonijiet ta' hawn fuq. L-HFFC huwa magħmul minn diversi polimeri emostatiċi li jiffurmaw film inkluż il-kitosan (bħala l-polimeru emostatiku ewlieni) bil-metilċelluloża (MC), l-idrossipropilmetilċelluloża (HPMC 50 cp) u l-alkoħol poliviniliku (PVA) (125 kDa) bħala polimeru ta' appoġġ li jippromwovi l-formazzjoni ta' trombu. Iż-żieda ta' polivinilpirrolidina K30 (PVP K30) tejbet il-kapaċità ta' assorbiment tal-umdità tal-NFRCs. Il-polietilen glikol 400 (PEG 400) ġie miżjud biex itejjeb ir-rabta inkroċjata tal-polimeri f'taħlitiet ta' polimeri magħqudin. Tliet kompożizzjonijiet emostatiċi differenti ta' HFFC (Cm HFFC, Ch HFFC u Cp HFFC), jiġifieri l-kitosan bil-MC (Cm), il-kitosan bl-HPMC (Ch), u l-kitosan bil-PVA (Cp), ġew applikati għal Ct. Diversi studji ta' karatterizzazzjoni in vitro u in vivo kkonfermaw l-attività emostatika u ta' fejqan tal-feriti tal-NFRCs. Materjali komposti offruti minn NFRCS jistgħu jintużaw biex jiġu personalizzati diversi forom ta' armar biex jissodisfaw bżonnijiet speċifiċi.
Barra minn hekk, l-NFRCS jistgħu jiġu modifikati bħala faxxa jew romblu biex ikopru ż-żona kollha tal-korriment tal-estremitajiet t'isfel u partijiet oħra tal-ġisem. Speċifikament għal korrimenti fir-riġlejn tal-ġlied, id-disinn tal-NFRCS iddisinjat jista' jinbidel għal nofs driegħ jew riġel sħiħ (Figura Supplimentari S11). L-NFRCS jista' jsir faxxa tal-polz b'kolla tat-tessut, li tista' tintuża biex twaqqaf il-fsada minn korrimenti suwiċidali severi fil-polz. L-għan ewlieni tagħna huwa li niżviluppaw NFRCS bl-inqas polimeru possibbli li jista' jitwassal lil popolazzjoni kbira (taħt il-linja tal-faqar) u li jista' jitqiegħed f'kit tal-ewwel għajnuna. Sempliċi, effiċjenti, u ekonomiku fid-disinn, l-NFRCS huwa ta' benefiċċju għall-komunitajiet lokali u jista' jkollu impatt globali.
Il-kitosan (piż molekulari 80 kDa) u l-amaranth inxtraw minn Merck, l-Indja. L-idrossipropilmetilċellulosa 50 Cp, il-polietilen glikol 400 u l-metilċellulosa nxtraw minn Loba Chemie Pvt. LLC, Mumbai. L-alkoħol poliviniliku (piż molekulari 125 kDa) (87-90% idrolizzat) inxtara minn National Chemicals, Gujarat. Il-polivinilpirrolidina K30 inxtrat minn Molychem, Mumbai, u swabs sterili nxtraw minn Ramaraju Surgery Cotton Mills Ltd., Tamil Nadu, bl-ilma Milli Q (sistema ta' purifikazzjoni tal-ilma Direct-Q3, Merck, l-Indja) bħala t-trasportatur.
L-NFRCS ġie żviluppat bl-użu ta' metodu ta' liofilizzazzjoni11,12. Il-kompożizzjonijiet kollha tal-HFFC (Tabella 1) ġew ippreparati bl-użu ta' stirrer mekkaniku. Ipprepara soluzzjoni ta' 0.5% ta' chitosan bl-użu ta' 1% aċidu aċetiku fl-ilma billi tħawwad kontinwament b'800 rpm fuq stirrer mekkaniku. Il-piż eżatt tal-polimeru mgħobbi indikat fit-Tabella 1 ġie miżjud mas-soluzzjoni tal-chitosan u tħawwad sakemm inkisbet soluzzjoni ċara tal-polimeru. PVP K30 u PEG 400 ġew miżjuda mat-taħlita li rriżultat fl-ammonti indikati fit-Tabella 1, u t-tħawwid kompla sakemm inkisbet soluzzjoni ċara tal-polimeru viskuż. Il-banju li rriżulta tas-soluzzjoni tal-polimeru ġie sonikatu għal 60 minuta biex jitneħħew il-bżieżaq tal-arja maqbuda mit-taħlita tal-polimeru. Kif muri fil-Figura Supplimentari S1(b), Ct kien imqassam b'mod uniformi f'kull bir ta' pjanċa (moffa) ta' 6 bjar supplimentata b'5 ml ta' HFFC.
Il-pjanċa ta' sitt bjar ġiet sonikkata għal 60 minuta biex tinkiseb tixrib u distribuzzjoni uniformi tal-HFFC fin-netwerk Ct. Imbagħad iffriża l-pjanċa ta' sitt bjar f'-20°C għal 8-12-il siegħa. Il-pjanċi tal-iffriżar ġew lijofilizzati għal 48 siegħa biex jinkisbu diversi formulazzjonijiet ta' NFRCS. L-istess proċedura tintuża biex tipproduċi forom u strutturi differenti, bħal tampuni jew tampuni ċilindriċi, jew kwalunkwe għamla oħra għal applikazzjonijiet differenti.
Kitosan (80 kDa) (3%) miżun b'mod preċiż jinħall f'1% aċidu aċetiku bl-użu ta' stirrer manjetiku. Mas-soluzzjoni li tirriżulta ta' chitosan żdied 1% PEG 400 u tħawwad għal 30 minuta. Ferra s-soluzzjoni li tirriżulta f'kontenitur kwadru jew rettangolari u ffriżah f'-80°C għal 12-il siegħa. Il-kampjuni ffriżati ġew lijofilizzati għal 48 siegħa biex jinkiseb Cs13 poruż.
L-NFRCS żviluppat ġie soġġett għal esperimenti bl-użu ta' spettroskopija infra-ħamra bit-trasformazzjoni ta' Fourier (FTIR) (Shimadzu 8400 s FTIR, Tokyo, il-Ġappun) biex tiġi kkonfermata l-kompatibilità kimika tal-kitosan ma' polimeri oħra14,15. L-ispettri FTIR (il-wisa' tal-medda spettrali minn 400 sa 4000 cm-1) tal-kampjuni kollha ttestjati nkisbu billi twettqu 32 skan.
Ir-rata ta' assorbiment tad-demm (BAR) għall-formulazzjonijiet kollha ġiet evalwata bl-użu tal-metodu deskritt minn Chen et al. 16 b'modifiki żgħar. L-NFRKs żviluppati tal-kompożizzjonijiet kollha ġew imnixxfa f'forn bil-vakwu f'105°C matul il-lejl biex jitneħħa s-solvent residwu. 30 mg NFRCS (piż inizjali tal-kampjun – W0) u 30 mg Ct (kontroll pożittiv) tqiegħdu fi platti separati li fihom taħlita minn qabel ta' 3.8% sodium citrate. F'intervalli ta' ħin predeterminati, jiġifieri 5, 10, 20, 30, 40 u 60 sekonda, l-NFRCs tneħħew u l-uċuħ tagħhom tnaddfu mid-demm mhux assorbit billi l-kampjuni tqiegħdu fuq Ct għal 30 sekonda. Il-piż finali tad-demm assorbit mill-NFRCs 16 ġie kkunsidrat (W1) f'kull punt ta' żmien. Ikkalkula l-perċentwal tal-BAR bl-użu tal-formula li ġejja:
Il-ħin tat-tagħqid tad-demm (BCT) ġie determinat kif irrappurtat minn Wang et al. 17. Il-ħin meħtieġ biex id-demm sħiħ (demm tal-firien imħallat minn qabel ma' 3.8% sodium citrate) jagħqad fil-preżenza ta' NFRCS ġie kkalkulat bħala l-BCT tal-kampjun tat-test. Il-komponenti varji tal-NFRCS (30 mg) tqiegħdu fi kunjetti b'tapp bil-kamin ta' 10 ml u ġew inkubati f'temperatura ta' 37°C. Demm (0.5 ml) ġie miżjud mal-kunjett u 0.3 ml ta' 0.2 M CaCl2 ġie miżjud biex jattiva l-koagulazzjoni tad-demm. Fl-aħħarnett, aqleb il-kunjett kull 15-il sekonda (sa 180°) sakemm jifforma embolu sod. Il-BCT tal-kampjun huwa stmat bin-numru ta' flips vails17,18. Abbażi tal-BCT, żewġ kompożizzjonijiet ottimali mill-NFRCS Cm, Ch u Cp intgħażlu għal aktar studji ta' karatterizzazzjoni.
Il-BCT tal-kompożizzjonijiet Ch NFRCS u Cp NFRCS ġie determinat billi ġie implimentat il-metodu deskritt minn Li et al. 19. Poġġi 15 x 15 mm2 Ch NFRCS, Cp NFRCS, u Cs (kontroll pożittiv) fi platti Petri separati (37 °C). Demm li fih 3.8% sodium citrate tħallat ma' 0.2 M CaCl2 fi proporzjon ta' volum ta' 10:1 biex jibda l-proċess tat-tagħqid tad-demm. 20 µl ta' taħlita ta' demm tal-firien 0.2 M CaCl2 ġew applikati fuq il-wiċċ tal-kampjun u mqiegħda fi platt Petri vojt. Il-kontroll kien demm imferra' fi platti Petri vojta mingħajr Ct. F'intervalli fissi ta' 0, 3, u 5 minuti, waqqaf it-tagħqid billi żżid 10 ml ta' ilma dejonizzat (DI) mal-kampjun li fih il-platt mingħajr ma tfixkel it-tagħqid. Eritroċiti mhux koagulati (eritroċiti) jgħaddu minn emoliżi fil-preżenza ta' ilma dejonizzat u jirrilaxxaw l-emoglobina. L-emoglobina f'punti ta' ħin differenti (HA(t)) ġiet imkejla f'540 nm (λmax emoglobina) bl-użu ta' spettrofotometru UV-Vis. L-assorbiment assolut tal-emoglobina (AH(0)) f'0 min ta' 20 µl ta' demm f'10 ml ta' ilma dejonizzat ittieħed bħala standard ta' referenza. L-assorbiment relattiv tal-emoglobina (RHA) ta' demm koagulat ġie kkalkulat mill-proporzjon HA(t)/HA(0) bl-użu tal-istess lott ta' demm.
Bl-użu ta' analizzatur tan-nisġa (Texture Pro CT V1.3 Build 15, Brookfield, USA), ġew determinati l-proprjetajiet adeżivi tal-NFRK mat-tessut bil-ħsara. Agħfas dixx ċilindriku b'qiegħ miftuħ kontra n-naħa ta' ġewwa tal-ġilda tal-majjal (mingħajr is-saff tax-xaħam). Kampjuni (Ch NFRCS u Cp NFRCS) ġew applikati permezz ta' kannula f'forom ċilindriċi biex joħolqu adeżjoni mal-ġilda tal-majjal. Wara inkubazzjoni ta' 3 minuti f'temperatura tal-kamra (RT) (25°C.), is-saħħa tal-adeżiv tal-NFRCS ġiet irreġistrata b'rata kostanti ta' 0.5 mm/sek.
Il-karatteristika ewlenija tas-siġillanti kirurġiċi hija li żżid it-tagħqid tad-demm filwaqt li tnaqqas it-telf tad-demm. Il-koagulazzjoni mingħajr telf fl-NFRCS ġiet evalwata bl-użu ta' metodu ppubblikat qabel b'modifiki żgħar 19. Agħmel tubu ta' mikroċentrifuga (2 ml) (dijametru ta' ġewwa 10 mm) b'toqba ta' 8 × 5 mm2 fuq naħa waħda tat-tubu taċ-ċentrifuga (li tirrappreżenta ferita miftuħa). L-NFRCS jintuża biex jagħlaq il-ftuħ u tejp jintuża biex jissiġilla t-truf ta' barra. Żid 20 µl ta' 0.2 M CaCl2 mat-tubu tal-mikroċentrifuga li fih it-taħlita minn qabel taċ-ċitrat tas-sodju ta' 3.8%. Wara 10 minuti, it-tubi tal-mikroċentrifuga tneħħew mill-platti u ż-żieda fil-massa tal-platti ġiet determinata minħabba l-ħruġ tad-demm mill-NFRK (n = 3). Telf ta' demm Ch NFRCS u Cp NFRCS tqabblu ma' Cs.
L-integrità mxarrba tal-NFRCS ġiet determinata abbażi tal-metodu deskritt minn Mishra u Chaudhary21 b'modifiki żgħar. Poġġi l-NFRCS fi flask Erlenmeyer ta' 100 ml b'50 ml ilma u ħawwad għal 60 sekonda mingħajr ma tifforma għatu. Spezzjoni viżwali u prijoritizzazzjoni tal-kampjuni għall-integrità fiżika bbażata fuq il-ġbir.
Is-saħħa tal-irbit tal-HFFC ma' Ct ġiet studjata bl-użu ta' metodi ppubblikati qabel b'modifiki żgħar. L-integrità tal-kisi tal-wiċċ ġiet ivvalutata billi l-NFRK ġie espost għal mewġ akustiku (stimolu estern) fil-preżenza ta' ilma milliQ (Ct). L-NFRCS Ch NFRCS u Cp NFRCS żviluppati tqiegħdu f'beaker mimli bl-ilma u sonikati għal 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, u 30 minuta, rispettivament. Wara t-tnixxif, id-differenza perċentwali bejn il-piż inizjali u finali tal-NFRCS intużat biex tikkalkula l-perċentwal ta' telf ta' materjal (HFFC). Il-BCT in vitro appoġġja aktar is-saħħa tal-irbit jew it-telf ta' materjali tal-wiċċ. L-effiċjenza tal-irbit tal-HFFC ma' Ct tipprovdi koagulazzjoni tad-demm u kisi elastiku fuq il-wiċċ ta' Ct22.
L-omoġenjità tal-NFRCS żviluppat ġiet determinata mill-BCT ta' kampjuni (30 mg) meħuda minn postijiet ġenerali tal-NFRCS magħżula b'mod każwali. Segwi l-proċedura BCT imsemmija qabel biex tiddetermina l-konformità mal-NFRCS. Il-prossimità bejn il-ħames kampjuni kollha tiżgura kopertura uniformi tal-wiċċ u depożizzjoni tal-HFFC fix-xibka Ct.
Iż-żona nominali ta' kuntatt mad-demm (NBCA) ġiet determinata kif irrappurtat qabel b'xi modifiki. Id-demm ġie kkoagulat billi jiġu kklampjati 20 µl ta' demm bejn iż-żewġ uċuħ ta' Ct, Ch NFRCS, Cp NFRCS u Cs. Wara siegħa, iż-żewġ partijiet tal-istent ġew separati u ż-żona tat-tagħqid ġiet imkejla manwalment. Il-valur medju ta' tliet repetizzjonijiet ġie kkunsidrat bħala NBCA NFRCS19.
L-analiżi tad-Dynamic Vapor Sorption (DVS) intużat biex tevalwa l-effettività tal-NFRCS biex tassorbi l-ilma mill-ambjent estern jew mis-sit tal-ħsara responsabbli għall-bidu tal-koagulazzjoni. Id-DVS tevalwa jew tirreġistra l-assorbiment u t-telf tal-fwar f'kampjun gravimetrikament bl-użu ta' bilanċ ultra-sensittiv b'riżoluzzjoni tal-massa ta' ±0.1 µg. Pressjoni parzjali tal-fwar (umdità relattiva) hija ġġenerata minn kontrollur elettroniku tal-fluss tal-massa madwar il-kampjun billi jitħalltu gassijiet trasportaturi saturati u niexfa. Skont il-linji gwida tal-Farmakopea Ewropea, abbażi tal-perċentwal ta' assorbiment ta' umdità mill-kampjuni, il-kampjuni ġew kategorizzati f'4 kategoriji (0–0.012% w/w− mhux igroskopiku, 0.2–2% w/w kemxejn igroskopiku, 2–15% moderatament igroskopiku, u > 15% igroskopiku ħafna)23. Skont il-linji gwida tal-Farmakopea Ewropea, abbażi tal-perċentwal ta' assorbiment ta' umdità mill-kampjuni, il-kampjuni ġew kategorizzati f'4 kategoriji (0–0.012% w/w− mhux igroskopiku, 0.2–2% w/w kemxejn igroskopiku, 2–15% moderatament igroskopiku, u > 15% igroskopiku ħafna)23.Skont ir-rakkomandazzjonijiet tal-Farmakopea Ewropea, skont il-perċentwal ta' assorbiment ta' umdità mill-kampjuni, il-kampjuni ġew maqsuma f'4 kategoriji (0–0.012% w/w – mhux igroskopiku, 0.2–2% w/w kemxejn igroskopiku, 2–ħmistax%).% умеренно гигроскопичен и > 15% очень гигроскопичен)23. % moderatament igroskopiku u > 15% igroskopiku ħafna)23.根据欧洲药典指南，根据样品吸收水分的百分比，样品分为4 类（0-0.012% w/w-w/w非吸湿性、0.2-2% w/w 轻微吸湿性、2-15% 适度吸湿，> 15% 非常吸湿）23。根据 欧洲 药典 指南 ， 根据 吸收 水分 的 百分比 样品 分为 分为 分为 分为 分为 （01（（0. W/w- 吸湿 性 、 、 、 、 0.2-2% W/w 轻微 、 2-15% 适度 吸湿 ，> 15 %非常吸湿）23〿）Skont ir-rakkomandazzjonijiet tal-Farmakopea Ewropea, il-kampjuni huma maqsuma f'4 klassijiet skont il-perċentwal ta' umdità assorbita mill-kampjun (0-0.012% bil-piż – mhux igroskopiku, 0.2-2% bil-piż kemxejn igroskopiku, 2-15% bil-piż).% умеренно гигроскопичен, > 15 % очень гигроскопичен) 23. % moderatament igroskopiku, > 15% igroskopiku ħafna) 23.L-effiċjenza igroskopika ta' NFCS X NFCS u TsN NFCS ġiet determinata fuq analizzatur DVS TA TGA Q5000 SA. Matul dan il-proċess, inkisbu l-ħin tat-tħaddim, l-umdità relattiva (RH), u l-piż tal-kampjun f'ħin reali f'25°C24. Il-kontenut ta' umdità huwa kkalkulat permezz ta' analiżi preċiża tal-massa NFRCS bl-użu tal-ekwazzjoni li ġejja:
MC hija l-umdità tal-NFRCS. m1 – piż niexef tal-NSAIDs. m2 hija l-massa tal-NFRCS f'ħin reali f'RH partikolari.
L-erja tal-wiċċ totali ġiet stmata bl-użu ta' esperiment ta' adsorbiment tan-nitroġenu bin-nitroġenu likwidu wara li l-kampjuni tbattlu f'25 °C għal 10 sigħat (< 7 × 10–3 Torr). L-erja tal-wiċċ totali ġiet stmata bl-użu ta' esperiment ta' adsorbiment tan-nitroġenu bin-nitroġenu likwidu wara li l-kampjuni tbattlu f'25 °C għal 10 sigħat (< 7 × 10–3 Torr). Общая площадь поверхности оценивалась с помощью эксперимента по адсорбции аззотка по мощью опорожнения образцов при 25 °С в течение 10 ч (< 7 × 10–3 Торр). L-erja tal-wiċċ totali ġiet stmata bl-użu ta' esperiment ta' adsorbiment tan-nitroġenu b'nitroġenu likwidu wara li l-kampjuni tbattlu f'25°C għal 10 sigħat (< 7 × 10–3 Torr).在25°C 清空样品10 小时（< 7 × 10-3 Torr）后，使用液氮的氮吸附实验估计总表面总表。在 25°C Общая площадь поверхности оценивалась с использованием экспериментов по адсорбцоди бцоди мазованием азотом после опорожнения образцов в течение 10 часов при 25°C (< 7 × 10-3 торр). L-erja tal-wiċċ totali ġiet stmata bl-użu ta' esperimenti ta' adsorbiment tan-nitroġenu bin-nitroġenu likwidu wara li l-kampjuni tbattlu għal 10 sigħat f'25°C (< 7 x 10-3 torr).L-erja tal-wiċċ totali, il-volum tal-pori u d-daqs tal-pori NFRCS ġew determinati b'Quantachrome minn NOVA 1000e, l-Awstrija bl-użu tas-softwer RS ​​232.
Ipprepara 5% RBCs (salina bħala dilwent) minn demm sħiħ. Imbagħad ittrasferixxi alikwot ta' HFFC (0.25 ml) għal pjanċa ta' 96-bir u 5% massa RBC (0.1 ml). Inkuba t-taħlita f'37°C għal 40 minuta. Taħlita ta' ċelluli ħomor tad-demm u serum ġiet ikkunsidrata bħala kontroll pożittiv, u taħlita ta' salina u ċelluli ħomor tad-demm bħala kontroll negattiv. L-emagglutinazzjoni ġiet determinata skont l-iskala Stajitzky. L-iskali proposti huma kif ġej: + + + + aggregati granulari densi; + + + kuxxinetti tal-qiegħ lixxi bi truf mgħawġa; + + kuxxinetti tal-qiegħ lixxi bi truf imqattgħin; + ċrieki ħomor dojoq madwar it-truf tal-kuxxinetti lixxi; – (negattiv) buttuna ħamra diskreta 12 fiċ-ċentru tal-bir t'isfel.
L-emokompatibilità tal-NFRCS ġiet studjata skont il-metodu tal-Organizzazzjoni Internazzjonali għall-Istandardizzazzjoni (ISO) (ISO10993-4, 1999)26,27. Il-metodu gravimetriku deskritt minn Singh et al. Saru modifiki żgħar biex tiġi vvalutata l-formazzjoni tat-trombu fil-preżenza ta' jew fuq il-wiċċ tal-NFRCS. 500 mg ta' Cs, Ch NFRCS u Cp NFRCS ġew inkubati f'salina b'buffer tal-fosfat (PBS) għal 24 siegħa f'temperatura ta' 37°C. Wara 24 siegħa, il-PBS tneħħa u l-NFRCS ġie ttrattat b'2 ml ta' demm li kien fih 3.8% ċitrat tas-sodju. Fuq il-wiċċ tal-NFRCS, żid 0.04 ml ta' 0.1 M CaCl2 mal-kampjuni inkubati. Wara 45 minuta, żdiedu 5 ml ta' ilma distillat biex titwaqqaf il-koagulazzjoni. Id-demm koagulat fuq il-wiċċ tal-NFRK ġie ttrattat b'soluzzjoni ta' formaldehyde ta' 36-38%. L-emboli ffissati bil-formaldehyde tnixxfu u żżnu. Il-perċentwal ta' trombożi ġie stmat billi ġie kkalkulat il-piż tal-ħġieġ mingħajr demm u kampjun (kontroll negattiv) u l-ħġieġ bid-demm (kontroll pożittiv).
Bħala konferma inizjali, il-kampjuni ġew viżwalizzati taħt mikroskopju ottiku biex tinftiehem il-kapaċità tal-kisi tal-wiċċ HFFC, Ct interkonness, u n-netwerk Ct li jiffurmaw pori. Sezzjonijiet irqaq ta' Ch u Cp minn NFRCS ġew mirquma b'xafra ta' skalpell. Is-sezzjoni li rriżultat tqiegħdet fuq slide tal-ħġieġ, mgħottija b'coverslip, u t-truf ġew imwaħħla bil-kolla. Is-slajds ippreparati ġew osservati taħt mikroskopju ottiku u ttieħdu ritratti b'ingrandimenti differenti.
Id-depożizzjoni tal-polimeru fin-netwerks tas-Ct ġiet viżwalizzata bl-użu ta' mikroskopija tal-fluworexxenza bbażata fuq il-metodu deskritt minn Rice et al.29. Il-kompożizzjoni tal-HFFC użata għall-formulazzjoni tħalltet ma' żebgħa fluworexxenti (amaranth), u l-NFRCS (Ch & Cp) ġew ippreparati skont il-metodu msemmi qabel. Il-kompożizzjoni tal-HFFC użata għall-formulazzjoni tħalltet ma' żebgħa fluworexxenti (amaranth), u l-NFRCS (Ch & Cp) ġew ippreparati skont il-metodu msemmi qabel.Il-kompożizzjoni tal-HFFC użata għall-formulazzjoni tħalltet ma' żebgħa fluworexxenti (amaranth) u l-NFRCS (Ch u Cp) inkiseb skont il-metodu msemmi qabel.将用于配方的HFFC 组合物与荧光染料（苋菜）混合，并按照前面提到的料光染料（苋菜）混合，并按照前面提到的斶法到的方法CNF Cp）。将用于配方的HFFC 组合物与荧光染料（苋菜）混合，并按照前面提到的料光染料（苋菜）混合，并按照前面提到的斶法到的方法CNF Cp）。Il-kompożizzjoni tal-HFFC użata fil-formulazzjoni tħalltet ma' żebgħa fluworexxenti (Amaranth) u rċeviet NFRCS (Ch u Cp), kif imsemmi qabel.Sezzjonijiet irqaq ta' NFRK inqatgħu mill-kampjuni miksuba, tqiegħdu fuq slajds tal-ħġieġ, u ġew mgħottija b'cover slips. Osserva s-slajds ippreparati taħt mikroskopju fluworexxenti bl-użu ta' filtru aħdar (310-380 nm). L-immaġnijiet ittieħdu b'ingrandiment ta' 4x biex jinftiehmu r-relazzjonijiet tas-Ct u d-depożizzjoni żejda tal-polimeru fin-netwerk tas-Ct.
It-topografija tal-wiċċ tal-NFRCS Ch u Cp ġiet determinata bl-użu ta' mikroskopju tal-forza atomika (AFM) b'cantilever TESP ultra-jaqta' fil-modalità tapping: 42 N/m, 320 kHz, ROC 2-5 nm, Bruker, Tajwan. Il-ħruxija tal-wiċċ ġiet determinata permezz tal-għerq medju kwadratiku (RMS) bl-użu ta' softwer (Scanning Probe Image Processor). Diversi postijiet tal-NFRCS ġew irrenduti fuq immaġini 3D biex tiġi vverifikata l-uniformità tal-wiċċ. Id-devjazzjoni standard tal-punteġġ għal żona partikolari hija definita bħala l-ħruxija tal-wiċċ. L-ekwazzjoni RMS intużat biex tikkwantifika l-ħruxija tal-wiċċ tal-NFRCS31.
Studji bbażati fuq FESEM twettqu bl-użu ta' FESEM, SU8000, HI-0876-0003, Hitachi, Tokyo, biex tinftiehem il-morfoloġija tal-wiċċ ta' Ch NFRCS u Cp NFRCS, li wrew BCT aħjar minn Cm NFRCS. L-istudju FESEM twettaq skont il-metodu deskritt minn Zhao et al. 32 b'modifiki żgħar. NFRCS 20 sa 30 mg Ch NFRCS u Cp NFRCS ġew imħallta minn qabel ma' 20 µl ta' 3.8% sodium citrate imħallat minn qabel mad-demm tal-firien. 20 μl ta' 0.2 M CaCl2 ġew miżjuda mal-kampjuni ttrattati bid-demm biex tinbeda l-koagulazzjoni u l-kampjuni ġew inkubati f'temperatura tal-kamra għal 10 minuti. Barra minn hekk, l-eritroċiti żejda tneħħew mill-wiċċ tal-NFRCS billi tlaħalħu b'salina.
Kampjuni sussegwenti ġew ittrattati b'0.1% glutaraldehyde u mbagħad imnixxfa f'forn tal-arja sħuna f'37°C biex titneħħa l-umdità. Il-kampjuni mnixxfa ġew miksija u analizzati 32. Immaġni oħra miksuba matul l-analiżi kienu l-formazzjoni ta' embolu fuq il-wiċċ ta' fibri individwali tal-qoton, id-depożizzjoni tal-polimeru bejn Ct, il-morfoloġija tal-eritroċiti (il-forma), l-integrità tal-embolu, u l-morfoloġija tal-eritroċiti fil-preżenza ta' NFRCS. Żoni NFRCS mhux ittrattati u żoni NFRCS ittrattati b'Ch u Cp inkubati bid-demm ġew skanjati għal joni elementali (sodju, potassju, nitroġenu, kalċju, manjesju, żingu, ram u selenju) 33. Qabbel il-perċentwali tal-joni elementali bejn kampjuni ttrattati u mhux ittrattati biex tifhem l-akkumulazzjoni tal-joni elementali waqt il-formazzjoni tal-embolu u l-omoġeneità tal-embolu.
Il-ħxuna tal-kisi tal-wiċċ Cp HFFC fuq il-wiċċ Ct ġiet determinata bl-użu tal-FESEM. Is-sezzjonijiet trasversali tas-Cp NFRCS inqatgħu mill-qafas u ġew miksija bl-isputtering. Il-kampjuni tal-kisi bl-isputtering li rriżultaw ġew osservati permezz tal-FESEM u l-ħxuna tal-kisi tal-wiċċ ġiet imkejla 34, 35, 36.
Il-mikro-CT bir-raġġi-X jipprovdi immaġini 3D mhux distruttivi b'riżoluzzjoni għolja u jippermettilek tistudja l-arranġament strutturali intern tal-NFRK. Il-mikro-CT juża raġġ tar-raġġi-X li jgħaddi mill-kampjun biex jirreġistra l-koeffiċjent lokali ta' attenwazzjoni lineari tar-raġġi-X fil-kampjun, li jgħin biex tinkiseb informazzjoni morfoloġika. Il-post intern tas-Ct f'Cp NFRCS u Cp NFRCS ittrattati bid-demm ġie eżaminat permezz ta' mikro-CT biex tinftiehem l-effiċjenza tal-assorbiment u t-tagħqid tad-demm fil-preżenza ta' NFRCS37,38,39. L-istrutturi 3D tal-kampjuni Cp NFRCS ittrattati bid-demm u mhux ittrattati ġew rikostruwiti bl-użu tal-mikro-CT (V|tome|x S240, Phoenix, il-Ġermanja). Bl-użu tas-softwer VG STUDIO-MAX verżjoni 2.2, ittieħdu diversi immaġini bir-raġġi-X minn angoli differenti (idealment kopertura ta' 360°) biex jiżviluppaw immaġini 3D għall-NFRCS. Id-dejta tal-projezzjoni miġbura ġiet rikostruwita f'immaġini volumetriċi 3D bl-użu tas-softwer sempliċi 3D ScanIP Academic korrispondenti.
Barra minn hekk, biex tinftiehem id-distribuzzjoni tat-tagħqid tad-demm, 20 µl ta’ demm ċitrat imħallat minn qabel u 20 µl ta’ 0.2 M CaCl2 ġew miżjuda mal-NFRCS biex jibdew it-tagħqid tad-demm. Il-kampjuni ppreparati jitħallew jibbiesu. Il-wiċċ tal-NFRK ġie ttrattat b’0.5% glutaraldehyde u mnixxef f’forn tal-arja sħuna f’temperatura ta’ 30–40°C għal 30 minuta. It-tagħqid tad-demm iffurmat fuq l-NFRCS ġie skenjat, rikostruwit, u ġiet viżwalizzata immaġni 3D tat-tagħqid tad-demm.
Saru assays antibatteriċi fuq Cp NFRCS (l-aħjar meta mqabbel ma' Ch NFRCS) bl-użu tal-metodu deskritt qabel b'modifiki żgħar. L-attività antibatterika ta' Cp NFRCS u Cp HFFC ġiet determinata bl-użu ta' tliet mikro-organiżmi tat-test differenti [S.aureus (batterji gram-pożittivi), E.coli (batterji gram-negattivi) u Candida bajda (C.albicans)] li qed jikbru fuq agar fi platti Petri f'inkubatur. Inokula b'mod uniformi 50 ml tas-sospensjoni dilwita tal-kultura batterika f'konċentrazzjoni ta' 105-106 CFU ml-1 fuq il-mezz tal-agar. Ferra l-mezz ġo platt Petri u ħallih jissolidifika. Saru bjar fuq il-wiċċ tal-pjanċa tal-agar biex jimtlew bl-HFFC (3 bjar għall-HFFC u 1 għall-kontroll negattiv). Żid 200 µl HFFC ma' 3 bjar u 200 µl pH 7.4 PBS mar-4 bjar. Fuq in-naħa l-oħra tad-dixx Petri, poġġi diska Cp NFRCS ta' 12 mm fuq l-agar solidifikat u xarrabha bil-PBS (pH 7.4). Il-pilloli ta' ciprofloxacin, ampicillin u fluconazole huma kkunsidrati bħala standards ta' referenza għal Staphylococcus aureus, Escherichia coli u Candida albicans. Kejjel iż-żona ta' inibizzjoni manwalment u ħu immaġni diġitali taż-żona ta' inibizzjoni.
Wara l-approvazzjoni etika istituzzjonali, l-istudju twettaq fil-Kasturba Medical College of Education and Research f'Manipal, Karnataka, fin-nofsinhar tal-Indja. Il-protokoll sperimentali in vitro TEG ġie rivedut u approvat mill-Kumitat tal-Etika Istituzzjonali tal-Kasturba Medical College, Manipal, Karnataka (IEC: 674/2020). Is-suġġetti ġew reklutati minn donaturi tad-demm volontarji (ta' bejn it-18 u l-55 sena) mill-bank tad-demm tal-isptar. Barra minn hekk, inkisbet formola ta' kunsens infurmat mingħand il-voluntiera għall-ġbir ta' kampjuni tad-demm. TEG Nattiv (N-TEG) ​​​​intuża biex jistudja l-effett tal-formulazzjoni Cp HFFC fuq demm sħiħ imħallat minn qabel ma' sodium citrate. N-TEG huwa rikonoxxut b'mod wiesa' għar-rwol tiegħu fir-risuxxitazzjoni fil-punt tal-kura, li toħloq problemi għall-kliniċisti minħabba l-potenzjal għal dewmien klinikament sinifikanti fir-riżultati (testijiet ta' koagulazzjoni ta' rutina). L-analiżi N-TEG twettqet bl-użu ta' demm sħiħ. Inkiseb kunsens infurmat u storja medika dettaljata mill-parteċipanti kollha. L-istudju ma inkludax parteċipanti b'kumplikazzjonijiet emostatiċi jew trombotiċi bħal tqala/wara t-twelid jew mard tal-fwied. Suġġetti li kienu qed jieħdu mediċini li jaffettwaw il-kaskata tal-koagulazzjoni ġew esklużi wkoll mill-istudju. Testijiet bażiċi tal-laboratorju (emoglobina, ħin tal-protrombina, tromboplastina attivata u għadd tal-plejtlits) twettqu fuq il-parteċipanti kollha skont proċeduri standard. L-N-TEG jiddetermina l-viskoelastiċità tat-tagħqid tad-demm, l-istruttura inizjali tat-tagħqid, l-interazzjoni tal-partiċelli, it-tisħiħ tat-tagħqid, u l-liżi tat-tagħqid. L-analiżi tal-N-TEG tipprovdi dejta grafika u numerika dwar l-effetti kollettivi ta' diversi elementi ċellulari u plażma. L-analiżi tal-N-TEG twettqet fuq żewġ volumi differenti ta' Cp HFFC (10 µl u 50 µl). Bħala riżultat, 1 ml ta' demm sħiħ b'aċidu ċitriku ġie miżjud ma' 10 μl ta' Cp HFFC. Żid 1 ml (Cp HFFC + demm ċitrat), 340 µl demm imħallat ma' 20 µl 0.2 M CaCl2 li fih dixx TEG. Wara dan, il-platti TEG ġew mgħobbija fit-TEG® 5000, US biex jitkejlu R, K, l-angolu alfa, MA, G, CI, TPI, EPL, LY 30% tal-kampjuni tad-demm fil-preżenza ta' Cp HFFC41.
Il-protokoll tal-istudju in vivo ġie rivedut u approvat mill-Kumitat Istituzzjonali tal-Etika tal-Annimali (IAEC), l-Iskola tal-Mediċina Kasturba, l-Istitut tal-Edukazzjoni Ogħla ta' Manipal, Manipal (IAEC/KMC/69/2020). L-esperimenti kollha fuq l-annimali twettqu skont ir-rakkomandazzjonijiet tal-Kumitat għall-Kontroll u s-Superviżjoni tal-Sperimentazzjoni fuq l-Annimali (CPCSEA). L-istudji kollha in vivo tal-NFRCS (2 × 2 cm2) twettqu fuq firien nisa Wistar (li jiżnu bejn 200 u 250 g). L-annimali kollha ġew akklimatizzati f'temperatura ta' 24-26°C, u kellhom aċċess liberu għal ikel u ilma standard ad libitum. L-annimali kollha ġew maqsuma b'mod każwali fi gruppi differenti, kull grupp kien jikkonsisti fi tliet annimali. L-istudji kollha twettqu skont l-Istudji fuq l-Annimali: Rapport ta' Esperimenti In Vivo 43. Qabel l-istudju, l-annimali ġew anestetizzati permezz ta' amministrazzjoni intraperitoneali (ip) ta' taħlita ta' 20-50 mg ta' ketamina (għal kull 1 kg ta' piż tal-ġisem) u 2-10 mg ta' xylazine (għal kull 1 kg ta' piż tal-ġisem). Wara l-istudju, il-volum ta' fsada ġie kkalkulat billi ġiet evalwata d-differenza bejn il-piż inizjali u finali tal-kampjuni, u l-valur medju miksub mit-tliet testijiet ittieħed bħala l-volum ta' fsada tal-kampjun.
Il-mudell tal-amputazzjoni tad-denb tal-firien ġie implimentat biex jifhem il-potenzjal tal-NFRCS biex jimmodula l-fsada fi trawma, ġlied, jew inċident tat-traffiku (mudell ta' korriment). Aqta' 50% tad-denb b'xafra ta' skalpell u poġġih fl-arja għal 15-il sekonda biex tiżgura fsada normali. Barra minn hekk, kampjuni tat-test tqiegħdu fuq id-denb ta' far billi ġiet applikata pressjoni (Ct, Cs, Ch NFRCS u Cp NFRCS). Fsada u PCT ġew irrappurtati għall-kampjuni tat-test (n = 3)17,45.
L-effettività tal-kontroll tal-pressjoni tal-NFRCS fil-ġlied ġiet investigata fuq mudell tal-arterja femorali superfiċjali. L-arterja femorali tiġi esposta, tittaqqab b'trocar ta' 24G, u tinħareġ demm fi żmien 15-il sekonda. Wara li tiġi osservata demm mhux ikkontrollat, il-kampjun tat-test jitqiegħed fis-sit tat-titqib bil-pressjoni applikata. Immedjatament wara l-applikazzjoni tal-kampjun tat-test, il-ħin tat-tagħqid ġie rreġistrat u l-effiċjenza emostatika ġiet osservata għall-5 minuti ta' wara. L-istess proċedura ġiet ripetuta b'Cs u Ct46.
Dowling et al. 47 ipproponew mudell ta' ħsara fil-fwied biex jivvalutaw il-potenzjal emostatiku ta' materjali emostatiċi fil-kuntest ta' fsada intraoperattiva. Il-BCT ġiet irreġistrata għal kampjuni Ct (kontroll negattiv), qafas Cs (kontroll pożittiv), kampjuni Ch NFRCS, u kampjuni Cp NFRCS. Il-vina cava supraepatika tal-firien ġiet esposta billi twettqet laparotomija medjana. Wara dan, il-parti distali tal-lobu tax-xellug inqatgħet b'imqass. Agħmel inċiżjoni fil-fwied b'xafra ta' skalpell u ħalliha toħroġ id-demm għal ftit sekondi. Kampjuni tat-test Ch NFRCS u Cp NFRCS miżuna b'mod preċiż tqiegħdu fuq il-wiċċ bil-ħsara mingħajr ebda pressjoni pożittiva u l-BCT ġiet irreġistrata. Il-grupp ta' kontroll (Ct) imbagħad applika pressjoni segwita minn Cs 30 s47 mingħajr ma kiser il-ħsara.
Twettqu testijiet tal-fejqan tal-feriti in vivo bl-użu ta' mudell ta' ferita esċiżjoniali biex jiġu evalwati l-proprjetajiet tal-fejqan tal-feriti tal-NFRCSs ibbażati fuq il-polimeru żviluppati. Mudelli ta' feriti esċiżjoniali ntgħażlu u twettqu skont metodi ppubblikati qabel b'modifiki żgħar19,32,48. L-annimali kollha ġew anestetizzati kif deskritt qabel. Uża punch tal-bijopsija (12 mm) biex tagħmel inċiżjoni ċirkolari fonda fil-ġilda tad-dahar. Is-siti tal-feriti ppreparati ġew imlibbsa b'Cs (kontroll pożittiv), Ct (b'rikonoxximent li l-kuxxinetti tal-qoton jinterferixxu mal-fejqan), Ch NFRCS u Cp NFRCS (grupp sperimentali) u kontroll negattiv mingħajr ebda trattament. F'kull jum tal-istudju, iż-żona tal-ferita tkejlet fil-firien kollha. Uża kamera diġitali biex tieħu ritratt taż-żona tal-ferita u poġġi faxxa ġdida. Il-perċentwal tal-għeluq tal-ferita tkejjel bil-formula li ġejja:
Abbażi tal-perċentwal ta' għeluq tal-feriti fit-12-il jum tal-istudju, il-ġilda tal-firien tal-aħjar grupp ġiet eċiża ((Cp NFRCS) u l-grupp ta' kontroll) u studjata permezz ta' tebgħa H&E u tebgħa tat-trichrome ta' Masson. Abbażi tal-perċentwal ta' għeluq tal-feriti fit-12-il jum tal-istudju, il-ġilda tal-firien tal-aħjar grupp ġiet eċiża ((Cp NFRCS) u l-grupp ta' kontroll) u studjata permezz ta' tebgħa H&E u tebgħa tat-trichrome ta' Masson.Abbażi tal-perċentwal ta' għeluq tal-feriti fit-12-il jum tal-istudju, il-ġilda tal-firien tal-aħjar grupp ((Cp NFRCS) u l-grupp ta' kontroll) ġiet eċiżata u eżaminata permezz ta' tebgħa b'ematoxylin-eosin u Masson's trichrome.根据研究第12天的伤口闭合百分比，切除最佳组((Cp NFRCS)和对照组)的大鼠皮肤，进行H&E染色和Masson三色染色研究。根据研究第12天的伤口闭合百分比，切除最佳组((Cp NFRCS)和对照组)的大鼠皮肤，进行H&E染色和眳组）Il-firien fl-aqwa grupp ((Cp NFRCS) u l-gruppi ta' kontroll) ġew eċiżi għat-tebgħa b'ematoxylin-eosin u t-tebgħa bit-trichrome ta' Masson ibbażata fuq il-perċentwal ta' għeluq tal-ferita fil-jum 12 tal-istudju.Il-proċedura ta' tebgħa implimentata twettqet skont il-metodi deskritti qabel49,50. Fil-qosor, wara l-iffissar f'10% formalin, il-kampjuni ġew deidratati bl-użu ta' serje ta' alkoħol gradati. Uża mikrotomu biex tikseb sezzjonijiet irqaq (5 µm ħxuna) tat-tessut eċiż. Sezzjonijiet serjali rqaq ta' kontrolli u Cp NFRCS ġew ittrattati b'ematoxylin u eosin biex jiġu studjati l-bidliet istopatoloġiċi. It-tebgħa tat-trichrome ta' Masson intużat biex tiskopri l-formazzjoni ta' fibrilli tal-kollaġen. Ir-riżultati miksuba ġew studjati bl-addoċċ minn patoloġisti.
L-istabbiltà tal-kampjuni tas-Cp NFRCS ġiet studjata f'temperatura tal-kamra (25°C ± 2°C/60% RH ± 5%) għal 12-il xahar51. Is-Cp NFRCS (tibdil fil-kulur tal-wiċċ u tkabbir mikrobjali) ġie spezzjonat viżwalment u ttestjat għar-reżistenza għall-użu minħabba t-tinjiet u l-BCT skont il-metodi ta' hawn fuq deskritti fit-taqsima tal-Materjali u l-Metodi.
L-iskalabbiltà u r-riproduċibbiltà ta' Cp NFRCS ġew eżaminati billi ġew ippreparati Cp NFRCS b'daqs ta' 15×15 cm2. Barra minn hekk, kampjuni ta' 30 mg (n = 5) ġew eċiżi minn diversi frazzjonijiet ta' Cp NFRCS u l-BCT tal-kampjuni studjati ġiet evalwata kif deskritt qabel fit-taqsima tal-Metodi.
Ippruvajna niżviluppaw diversi forom u strutturi bl-użu ta' kompożizzjonijiet Cp NFRCS għal diversi applikazzjonijiet bijomediċi. Tali forom jew konfigurazzjonijiet jinkludu swabs koniċi għal fsada mill-imnieħer, proċeduri dentali, u swabs ċilindriċi għal fsada vaġinali.
Is-settijiet tad-dejta kollha huma espressi bħala medja ± devjazzjoni standard u ġew analizzati permezz ta' ANOVA bl-użu ta' Prism 5.03 (GraphPad, San Diego, CA, USA) segwit mit-test ta' tqabbil multiplu ta' Bonferroni (*p<0.05).
Il-proċeduri kollha mwettqa fi studji fuq il-bniedem kienu skont l-istandards tal-Istitut u l-Kunsill Nazzjonali tar-Riċerka, kif ukoll id-Dikjarazzjoni ta' Ħelsinki tal-1964 u l-emendi sussegwenti tagħha, jew standards etiċi simili. Il-parteċipanti kollha ġew infurmati dwar il-karatteristiċi tal-istudju u n-natura volontarja tiegħu. Id-dejta tal-parteċipanti tibqa' kunfidenzjali ladarba tinġabar. Il-protokoll sperimentali in vitro TEG ġie rivedut u approvat mill-Kumitat tal-Etika Istituzzjonali tal-Kulleġġ Mediku ta' Kasturba, Manipal, Karnataka (IEC: 674/2020). Il-voluntiera ffirmaw kunsens infurmat biex jiġbru kampjuni tad-demm.
Il-proċeduri kollha mwettqa fl-istudji fuq l-annimali twettqu skont il-Fakultà tal-Mediċina Kastuba, Istitut tal-Edukazzjoni Ogħla ta' Manipal, Manipal (IAEC/KMC/69/2020). L-esperimenti kollha ddisinjati fuq l-annimali twettqu skont il-linji gwida tal-Kumitat għall-Kontroll u s-Superviżjoni tal-Esperimentazzjoni fuq l-Annimali (CPCSEA). L-awturi kollha jsegwu l-linji gwida tal-ARRIVE.
L-ispettri FTIR tal-NFRCS kollha ġew analizzati u mqabbla mal-ispettru tal-kitosan muri fil-Figura 2A. Il-qċaċet spettrali karatteristiċi tal-kitosan (irreġistrati) fi 3437 cm-1 (tiġbid ta' OH u NH, sovrappożizzjoni), 2945 u 2897 cm-1 (tiġbid ta' CH), 1660 cm-1 (razza NH2), 1589 cm-1 (liwi N–H), 1157 cm-1 (tiġbid tal-pont O-), 1067 cm-1 (tiġbid C–O, idrossiliku sekondarju), 993 cm-1 (tiġbid CO, Bo-OH) 52.53.54. It-Tabella Supplimentari S1 turi l-valuri tal-ispettru tal-assorbiment tal-NFRCS FTIR għall-kitosan (reporter), kitosan pur, Cm, Ch, u Cp. L-ispettri FTIR tal-NFRCS kollha (Cm, Ch u Cp) urew l-istess meded ta' assorbiment karatteristiċi bħall-kitosan pur mingħajr ebda bidla sinifikanti (Fig. 2A). Ir-riżultati tal-FTIR ikkonfermaw in-nuqqas ta' interazzjonijiet kimiċi jew fiżiċi bejn il-polimeri użati biex jiżviluppaw l-NFRCS, u dan jindika li l-polimeri użati huma inerti.
Karatterizzazzjoni in vitro ta' Cm NFRCS, Ch NFRCS, Cp NFRCS u Cs. (A) tirrappreżenta l-ispettri FTIR ikkombinati tal-kompożizzjonijiet tal-kitosan u Cm NFRCS, Ch NFRCS u Cp NFRCS taħt kompressjoni. (B) a) Rata ta' assorbiment tad-demm sħiħ ta' NFRCS Cm, Ch, Cp, u Cg (n = 3); Il-kampjuni Ct urew BAR ogħla għaliex it-tajjar tal-qoton għandu effiċjenza ta' assorbiment ogħla; b) Demm wara l-assorbiment tad-demm Illustrazzjoni tal-kampjun assorbit. Rappreżentazzjoni grafika tal-BCT tal-kampjun tat-test C (Cp NFRCS kellu l-aħjar BCT (15 s, n = 3)). Id-dejta f'C, D, E, u G intweriet bħala medja ± SD, u l-vireg tal-iżball jirrappreżentaw SD, ***p < 0.0001. Id-dejta f'C, D, E, u G intweriet bħala medja ± SD, u l-vireg tal-iżball jirrappreżentaw SD, ***p < 0.0001. Данные в C, D, E и G представлены как среднее ± стандартное отклонение, а планки погрешноставлены как среднее ± стандартное отклонение, а планки погрешностей прешностей прешностета отклонение, ***p <0,0001. Id-dejta f'C, D, E, u G hija ppreżentata bħala medja ± devjazzjoni standard, u l-vireg tal-iżball jirrappreżentaw devjazzjoni standard, ***p<0.0001. C、D、E 和G 中的数据显示为平均值± SD，误差线代表SD，***p < 0.0001。 C、D、E 和G 中的数据显示为平均值± SD，误差线代表SD，***p < 0.0001。 Данные в C, D, E и G показаны как среднее значение ± стандартное отклонение, планки погрешностей погрешностей стандартное отклонение, ***p <0,0001. Id-dejta f'C, D, E, u G hija murija bħala medja ± devjazzjoni standard, il-vireg tal-iżball jirrappreżentaw id-devjazzjoni standard, ***p<0.0001.