Grazzi talli żort Nature.com.Il-verżjoni tal-browser li qed tuża għandha appoġġ limitat għal CSS.Għall-aħjar esperjenza, nirrakkomandaw li tuża browser aġġornat (jew tiddiżattiva l-Modalità ta' Kompatibbiltà fl-Internet Explorer).Sadanittant, biex niżguraw appoġġ kontinwu, aħna se nirrendu s-sit mingħajr stili u JavaScript.
Fsada mhux ikkontrollata hija waħda mill-kawżi ewlenin tal-mewt.Il-kisba ta 'emostasis rapida tiżgura s-sopravivenza tas-suġġett bħala l-ewwel għajnuna waqt il-ġlied, inċidenti tat-traffiku u operazzjonijiet ta' tnaqqis tal-mewt.Scaffold kompost rinfurzat bil-fibra nanoporuża (NFRCS) derivat minn kompożizzjoni sempliċi emostatika li tifforma film (HFFC) bħala fażi kontinwa tista 'tqajjem u ttejjeb l-emostasi.L-iżvilupp tal-NFRCS huwa bbażat fuq id-disinn tal-ġwienaħ tal-libellula.L-istruttura tal-ġwienaħ tal-libellula tikkonsisti minn ġwienaħ trasversali u lonġitudinali, u l-membrani tal-ġwienaħ huma konnessi ma 'xulxin biex iżommu l-integrità tal-mikrostruttura.HFFC jiksi b'mod uniformi l-wiċċ tal-fibra b'film ta 'ħxuna nanometru u jgħaqqad il-ħxuna tal-qoton imqassam b'mod każwali (Ct) (fażi mxerrda) biex tifforma struttura nanoporuża.Il-kombinazzjoni ta 'fażijiet kontinwi u mxerrda tnaqqas l-ispiża tal-prodott b'għaxar darbiet meta mqabbla ma' prodotti disponibbli kummerċjalment.NFRCS modifikati (tampini jew wristbands) jistgħu jintużaw f'varjetà ta 'applikazzjonijiet bijomediċi.Studji in vivo kkonkludew li s-Cp NFRCS żviluppat iqajjem u jsaħħaħ il-proċess tal-koagulazzjoni fis-sit tal-applikazzjoni.NFRCS jista 'jimmodula l-mikroambjent u jaġixxi fil-livell ċellulari minħabba l-istruttura nanoporuża tiegħu li tirriżulta f'fejqan aħjar tal-feriti fil-mudell tal-ferita tal-esċiżjoni.
Fsada mhux ikkontrollata waqt il-ġlieda, sitwazzjonijiet intraoperattivi u ta 'emerġenza jistgħu jkunu ta' theddida serja għall-ħajja tal-midruba1.Dawn il-kundizzjonijiet ikomplu jwasslu għal żieda ġenerali fir-reżistenza vaskulari periferali, li twassal għal xokk emorraġiku.Miżuri xierqa biex jikkontrollaw il-fsada waqt u wara l-kirurġija huma kkunsidrati potenzjalment ta' theddida għall-ħajja2,3.Ħsara lil bastimenti kbar twassal għal telf kbir ta' demm, li jirriżulta f'rata ta' mortalità ta' ≤ 50% fil-ġlieda u 31% waqt il-kirurġija1.Telf ta 'demm massiv iwassal għal tnaqqis fil-volum tal-ġisem, li jnaqqas il-produzzjoni kardijaka.Żieda fir-reżistenza vaskulari periferali totali u indeboliment progressiv tal-mikroċirkolazzjoni jwasslu għal ipoksja fl-organi li jsostnu l-ħajja.Xokk emorraġiku jista' jseħħ jekk il-kundizzjoni tkompli mingħajr intervent effettiv1,4,5.Kumplikazzjonijiet oħra jinkludu l-progressjoni ta 'ipotermja u aċidożi metabolika, kif ukoll disturb ta' koagulazzjoni li jimpedixxi l-proċess ta 'koagulazzjoni.Xokk emorraġiku sever huwa assoċjat ma 'riskju ogħla ta' mewt6,7,8.F'xokk ta' grad III (progressiv), it-trasfużjoni tad-demm hija essenzjali għas-sopravivenza tal-pazjent waqt il-morbidità u l-mortalità intraoperattiva u wara l-operazzjoni.Biex negħlbu s-sitwazzjonijiet kollha ta 'theddida għall-ħajja ta' hawn fuq, żviluppajna scaffold kompost rinfurzat bil-fibra nanoporuża (NFRCS) li tutilizza konċentrazzjoni minima ta 'polimeru (0.5%) bl-użu ta' taħlita ta 'polimeri emostatiċi solubbli fl-ilma.
Bl-użu ta 'rinforz tal-fibra, jistgħu jiġu żviluppati prodotti kost-effettivi.Il-fibri rranġati bl-addoċċ jixbħu l-istruttura ta 'ġwienaħ ta' dragonfly, ibbilanċjat mill-istrixxi orizzontali u vertikali fuq il-ġwienaħ.Il-vini trasversali u lonġitudinali tal-ġwienaħ jikkomunikaw mal-membrana tal-ġwienaħ (Fig. 1).NFRCS jikkonsisti f'Ct rinfurzat bħala sistema ta 'scaffold b'saħħa fiżika u mekkanika aħjar (Figura 1).Minħabba l-affordabbiltà u l-sengħa, il-kirurgi jippreferu jużaw gauges tal-ħajt tal-qoton (Ct) waqt operazzjonijiet u dressings. Għalhekk, meta wieħed iqis il-benefiċċji multipli tiegħu, inkluż> 90% ċelluloża kristallina (tagħti fit-titjib ta 'attività emostatika), Ct intuża bħala sistema skeletriċi ta' NFRCS9,10. Għalhekk, meta wieħed iqis il-benefiċċji multipli tiegħu, inkluż> 90% ċelluloża kristallina (tagħti fit-titjib ta 'attività emostatika), Ct intuża bħala sistema skeletriċi ta' NFRCS9,10. Следовательно, учитывая его многочисленные преимущества, в том числе > 90% кристалличесвесклой в повышении гемостатической активности), Ct использовали в качестве скелетной системы NFRCS9,10. Għalhekk, minħabba l-ħafna benefiċċji tagħha, inkluż> 90% ċelluloża kristallina (involuta f'attività emostatika miżjuda), Ct intuża bħala s-sistema skeletriċi NFRCS9,10.因此，考虑到它的多重益处，包括> 90% 的结晶纤维素（有助于增强止血滨止血滴止血滴 NF ，，，，，，） ,10 的骨架系统。因此，考虑到它的多重益处，包括> 90%Għalhekk, minħabba l-ħafna benefiċċji tiegħu, inkluż aktar minn 90% ċelluloża kristallina (jgħin biex ittejjeb l-attività emostatika), Ct intuża bħala scaffold għal NFRCS9,10.Ct kien miksi b'mod superfiċjali (kienet osservata formazzjoni ta 'film nano-ħxuna) u interkonnessa ma' kompożizzjoni emostatika li tifforma film (HFFC).HFFC jaġixxi bħal matrigel, li jżomm Ct imqiegħed bl-addoċċ flimkien.Id-disinn żviluppat jittrasmetti stress fi ħdan il-fażi mxerrda (fibri li jsaħħu).Huwa diffiċli li jinkisbu strutturi nanoporużi b'saħħa mekkanika tajba bl-użu ta 'konċentrazzjonijiet minimi ta' polimeru.Barra minn hekk, mhuwiex faċli li tippersonalizza forom differenti għal applikazzjonijiet bijomediċi differenti.
Il-figura turi dijagramma tad-disinn NFRCS ibbażat fuq l-istruttura tal-ġwienaħ tad-drabelfly (A).Din l-immaġni turi analoġija komparattiva ta 'l-istruttura tal-ġwienaħ ta' dragonfly (il-vini li jaqsmu u lonġitudinali tal-ġwienaħ huma interkonnessi) u fotomikrografija ta 'sezzjoni trasversali ta' Cp NFRCS (B).Rappreżentazzjoni skematika ta' NFRCS.
L-NFRCs ġew żviluppati bl-użu ta 'HFFC bħala fażi kontinwa biex jindirizzaw il-limitazzjonijiet ta' hawn fuq.HFFC huwa magħmul minn diversi polimeri emostatiċi li jiffurmaw film inkluż chitosan (bħala l-polimer emostatiku ewlieni) b'methylcellulose (MC), hydroxypropyl methylcellulose (HPMC 50 cp) u polyvinyl alcohol (PVA)) (125 kDa) bħala polimeru ta 'appoġġ li jippromwovi l-formazzjoni ta' trombus.formazzjoni.Iż-żieda ta 'polyvinylpyrrolidine K30 (PVP K30) tejbet il-kapaċità ta' assorbiment ta 'umdità ta' l-NFRCS.Polyethylene glycol 400 (PEG 400) ġie miżjud biex itejjeb il-crosslinking tal-polimeru f'taħlitiet ta 'polimeri magħqudin.Tliet kompożizzjonijiet emostatiċi HFFC differenti (Cm HFFC, Ch HFFC u Cp HFFC), jiġifieri chitosan b'MC (Cm), chitosan b'HPMC (Ch), u chitosan b'PVA (Cp), ġew applikati għal Ct.Diversi studji ta 'karatterizzazzjoni in vitro u in vivo ikkonfermaw l-attività emostatika u tal-fejqan tal-feriti ta' NFRCS.Materjali komposti offruti minn NFRCS jistgħu jintużaw biex jippersonalizzaw diversi forom ta 'armar biex jissodisfaw ħtiġijiet speċifiċi.
Barra minn hekk, NFRCS jista 'jiġi modifikat bħala faxxa jew roll biex tkopri ż-żona kollha tal-korriment tal-estremitajiet t'isfel u partijiet oħra tal-ġisem.Speċifikament għall-korrimenti tar-riġlejn tal-ġlieda kontra, id-disinn NFRCS iddisinjat jista 'jinbidel għal nofs driegħ jew riġel sħiħ (Figura Supplimentari S11).L-NFRCS jista 'jsir polz b'kolla tat-tessuti, li tista' tintuża biex twaqqaf il-fsada minn korrimenti severi tal-polz suwiċidali.L-għan ewlieni tagħna huwa li niżviluppaw NFRCS bl-inqas polimeru possibbli li jista 'jitwassal lil popolazzjoni kbira (taħt il-linja tal-faqar) u li jista' jitqiegħed f'kit tal-ewwel għajnuna.Sempliċi, effiċjenti u ekonomiku fid-disinn, NFRCS jibbenefika lill-komunitajiet lokali u jista 'jkollu impatt globali.
Chitosan (piż molekulari 80 kDa) u amaranth inxtraw minn Merck, l-Indja.Hydroxypropyl methylcellulose 50 Cp, polyethylene glycol 400 u methylcellulose inxtraw minn Loba Chemie Pvt.LLC, Mumbai.L-alkoħol tal-polivinil (piż molekulari 125 kDa) (87-90% idrolizzat) inxtara minn National Chemicals, Gujarat.Polyvinylpyrrolidine K30 inxtara minn Molychem, Mumbai, swabs sterili nxtraw minn Ramaraju Surgery Cotton Mills Ltd., Tamil Nadu, bl-ilma Milli Q (sistema ta 'purifikazzjoni tal-ilma Direct-Q3, Merck, Indja) bħala t-trasportatur.
NFRCS ġie żviluppat bl-użu ta 'metodu ta' lajofilizzazzjoni11,12.Il-kompożizzjonijiet kollha tal-HFFC (Tabella 1) ġew ippreparati bl-użu ta 'ħawwad mekkaniku.Ipprepara soluzzjoni ta' 0.5% ta' chitosan billi tuża 1% aċidu aċetiku fl-ilma billi tħawwad kontinwu fi 800 rpm fuq stirrer mekkaniku.Il-piż eżatt tal-polimeru mgħobbi indikat fit-Tabella 1 ġie miżjud mas-soluzzjoni ta 'chitosan u mħawwad sakemm inkisbet soluzzjoni ta' polimeru ċara.PVP K30 u PEG 400 ġew miżjuda mat-taħlita li tirriżulta fl-ammonti indikati fit-Tabella 1, u t-taħwid kompla sakemm inkisbet soluzzjoni ċara ta 'polimer viskuż.Il-banju li jirriżulta tas-soluzzjoni tal-polimeru ġie ivvibrat għal 60 minuta biex jitneħħew il-bżieżaq tal-arja maqbuda mit-taħlita tal-polimeru.Kif muri fil-Figura Supplimentari S1 (b), Ct tqassam b'mod uniformi f'kull bir ta 'pjanċa ta' 6-bir (moffa) supplimentata b'5 ml ta 'HFFC.
Il-pjanċa ta 'sitt birijiet ġiet ivvibrata għal 60 min biex tikseb tixrib u distribuzzjoni uniformi ta' HFFC fin-netwerk Ct.Imbagħad iffriża l-pjanċa ta 'sitt-bir f'-20 ° C għal 8-12-il siegħa.Il-pjanċi tal-friża ġew lajofilizzati għal 48 siegħa biex jinkisbu diversi formulazzjonijiet ta 'NFRCS.L-istess proċedura tintuża biex tipproduċi forom u strutturi differenti, bħal tampuni jew tampuni ċilindriċi, jew kwalunkwe forma oħra għal applikazzjonijiet differenti.
Chitosan miżun b'mod preċiż (80 kDa) (3%) huwa maħlul f'1% aċidu aċetiku bl-użu ta 'ħawwad manjetiku.Għas-soluzzjoni li tirriżulta ta 'chitosan ġie miżjud 1% PEG 400 u mħawwad għal 30 minuta.Ferra s-soluzzjoni li tirriżulta f'kontenitur kwadru jew rettangolari u ffriża f'-80 ° C għal 12-il siegħa.Kampjuni ffriżati ġew lajofilizzati għal 48 siegħa biex jiksbu Cs13 poruż.
L-NFRCS żviluppat kien soġġett għal esperimenti bl-użu ta ' l-ispettroskopija infra-aħmar tat-trasformazzjoni Fourier (FTIR) (Shimadzu 8400 s FTIR, Tokyo, Ġappun) biex tikkonferma l-kompatibilità kimika ta 'chitosan ma' polimeri oħra14,15.L-ispettri FTIR (wisa 'tal-medda spettrali minn 400 sa 4000 cm-1) tal-kampjuni ttestjati kollha nkisbu billi twettaq 32 skans.
Ir-rata ta 'assorbiment tad-demm (BAR) għall-formulazzjonijiet kollha ġiet evalwata bl-użu tal-metodu deskritt minn Chen et al.16 b'modifiki ħfief.L-NFRKs żviluppati tal-kompożizzjonijiet kollha ġew imnixxfa f'forn vakwu f'105 ° C matul il-lejl biex jitneħħa s-solvent residwu.30 mg NFRCS (piż tal-kampjun inizjali - W0) u 30 mg Ct (kontroll pożittiv) tqiegħdu f'platti separati li kien fihom taħlita minn qabel ta '3.8% ċitrat tas-sodju.F'intervalli ta' ħin predeterminati, jiġifieri 5, 10, 20, 30, 40 u 60 sekonda, l-NFRCS tneħħew u l-uċuħ tagħhom tnaddfu minn demm mhux assorbit billi tqiegħed il-kampjuni fuq Ct għal 30 sekonda.Il-piż finali tad-demm assorbit minn NFRCS 16 kien ikkunsidrat (W1) f'kull punt tal-ħin.Ikkalkula l-persentaġġ BAR billi tuża l-formula li ġejja:
Il-ħin tat-tagħqid tad-demm (BCT) kien iddeterminat kif irrappurtat minn Wang et al.17 .Il-ħin meħtieġ għad-demm sħiħ (demm tal-firien imħallat minn qabel ma '3.8% ċitrat tas-sodju) biex jagħqad fil-preżenza ta' NFRCS ġie kkalkulat bħala l-BCT tal-kampjun tat-test.Il-komponenti varji NFRCS (30 mg) tpoġġew f'kunjetti ta' 10 ml b'kamin u inkubati f'37°C.Demm (0.5 ml) ġie miżjud mal-kunjett u 0.3 ml ta '0.2 M CaCl2 ġew miżjuda biex jattiva l-koagulazzjoni tad-demm.Fl-aħħarnett, aqleb il-kunjett kull 15-il sekonda (sa 180°) sakemm tifforma embolu sod.Il-BCT tal-kampjun huwa stmat bin-numru ta 'flips vails17,18.Ibbażat fuq BCT, ġew magħżula żewġ kompożizzjonijiet ottimali minn NFRCS Cm, Ch u Cp għal aktar studji ta 'karatterizzazzjoni.
Il-BCT tal-kompożizzjonijiet Ch NFRCS u Cp NFRCS ġiet determinata bl-implimentazzjoni tal-metodu deskritt minn Li et al.19 .Poġġi 15 x 15 mm2 Ch NFRCS, Cp NFRCS, u Cs (kontroll pożittiv) f'dixxijiet Petri separati (37 °C).Demm li kien fih 3.8% ċitrat tas-sodju kien imħallat ma 0.2 M CaCl2 fi proporzjon ta 'volum ta' 10:1 biex jibda l-proċess tat-tagħqid tad-demm.20 µl ta' taħlita tad-demm tal-firien 0.2 M CaCl2 ġew applikati fuq il-wiċċ tal-kampjun u mqiegħda f'dixx Petri vojt.Il-kontroll kien demm imferra f'dixxijiet Petri vojta mingħajr Ct.F'intervalli fissi ta' 0, 3, u 5 minuti, waqqaf it-tagħqid billi żżid 10 ml ta' ilma dejonizzat (DI) mal-kampjun li jkun fih id-dixx mingħajr ma tfixkel l-embolu.Eritroċiti mhux koagulati (eritroċiti) jgħaddu minn emolisi fil-preżenza ta 'ilma dejonizzat u jirrilaxxaw l-emoglobina.L-emoglobina f'punti ta 'ħin differenti (HA(t)) ġiet imkejla f'540 nm (λmax emoglobina) bl-użu ta' spettrofotometru UV-Vis.L-assorbiment assolut tal-emoglobina (AH(0)) f'0 min ta' 20 µl ta' demm f'10 ml ta' ilma dejonizzat ittieħed bħala standard ta' referenza.L-assorbiment relattiv tal-emoglobina (RHA) tad-demm koagulat ġie kkalkulat mill-proporzjon HA(t)/HA(0) bl-użu tal-istess lott ta 'demm.
Bl-użu ta 'analizzatur tan-nisġa (Texture Pro CT V1.3 Build 15, Brookfield, USA), ġew determinati l-proprjetajiet adeżivi ta' NFRK għal tessut bil-ħsara.Agħfas dixx ċilindriku b'qiegħ miftuħ ma' ġewwa tal-ġilda tal-majjal (mingħajr is-saff tax-xaħam).Kampjuni (Ch NFRCS u Cp NFRCS) ġew applikati permezz ta 'kannula f'forom ċilindriċi biex joħolqu adeżjoni mal-ġilda tal-ħanżir.Wara inkubazzjoni ta '3 minuti f'temperatura tal-kamra (RT) (25 ° C.), is-saħħa adeżiva NFRCS ġiet irreġistrata b'rata kostanti ta' 0.5 mm/sek.
Il-karatteristika ewlenija tas-siġillanti kirurġiċi hija li żżid it-tagħqid tad-demm filwaqt li tnaqqas it-telf tad-demm.Il-koagulazzjoni mingħajr telf fl-NFRCS ġiet evalwata permezz ta' metodu ppubblikat qabel b'modifiki żgħar 19 .Agħmel tubu mikroċentrifugu (2 ml) (dijametru intern 10 mm) b'toqba ta' 8 × 5 mm2 fuq naħa waħda tat-tubu taċ-ċentrifuga (li tirrappreżenta ferita miftuħa).NFRCS jintuża biex jagħlaq il-ftuħ u t-tejp jintuża biex jissiġilla t-truf ta 'barra.Żid 20 µl ta' 0.2 M CaCl2 mat-tubu tal-mikroċentrifuga li jkun fih it-taħlita minn qabel ta' 3.8% ċitrat tas-sodju.Wara 10 minuti, it-tubi tal-mikroċentrifuga tneħħew mid-dixxijiet u ż-żieda fil-massa tad-dixxijiet ġiet iddeterminata minħabba l-ħruġ tad-demm mill-NFRK (n = 3).Telf tad-demm Ch NFRCS u Cp NFRCS tqabblu ma 'Cs.
L-integrità mxarrba ta 'NFRCS ġiet iddeterminata abbażi tal-metodu deskritt minn Mishra u Chaudhary21 b'modifiki minuri.Poġġi l-NFRCS f'kunjett Erlenmeyer ta' 100 ml b'50 ml ilma u dawwar għal 60 s mingħajr ma tifforma top.Spezzjoni viżwali u prijoritizzazzjoni tal-kampjuni għall-integrità fiżika bbażata fuq il-ġbir.
Is-saħħa ta' rbit ta' HFFC ma' Ct ġiet studjata bl-użu ta' metodi ppubblikati qabel b'modifiki minuri.L-integrità tal-kisi tal-wiċċ ġiet evalwata billi NFRK esponi għal mewġ akustiku (stimolu estern) fil-preżenza ta 'ilma milliQ (Ct).L-NFRCS Ch NFRCS u Cp NFRCS żviluppati tpoġġew f'tazza mimlija bl-ilma u sonicated għal 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, u 30 min, rispettivament.Wara t-tnixxif, id-differenza perċentwali bejn il-piż inizjali u finali ta 'l-NFRCS intużat biex tikkalkula t-telf perċentwali ta' materjal (HFFC).BCT in vitro appoġġja aktar is-saħħa tal-irbit jew it-telf tal-materjali tal-wiċċ.L-effiċjenza tal-irbit ta 'HFFC ma' Ct tipprovdi koagulazzjoni tad-demm u kisja elastika fuq il-wiċċ ta 'Ct22.
L-omoġeneità tal-NFRCS żviluppat ġiet iddeterminata mill-BCT ta 'kampjuni (30 mg) meħuda minn postijiet ġenerali magħżula b'mod każwali tal-NFRCS.Segwi l-proċedura BCT msemmija qabel biex tiddetermina l-konformità NFRCS.Il-prossimità bejn il-ħames kampjuni kollha tiżgura kopertura uniformi tal-wiċċ u depożizzjoni HFFC fil-malja Ct.
Iż-żona nominali ta' kuntatt mad-demm (NBCA) ġiet iddeterminata kif irrappurtat qabel b'xi modifiki.Ikkoagula d-demm billi tikklampja 20 µl ta’ demm bejn iż-żewġ uċuħ ta’ Ct, Ch NFRCS, Cp NFRCS u Cs.Wara siegħa, iż-żewġ partijiet tal-stent ġew separati u mkejla manwalment iż-żona tal-embolu.Il-valur medju ta 'tliet repetizzjonijiet kien ikkunsidrat NBCA NFRCS19.
Analiżi Dynamic Vapor Sorption (DVS) intużat biex tevalwa l-effettività ta 'NFRCS biex jassorbi l-ilma mill-ambjent estern jew mis-sit tal-ħsara responsabbli għall-bidu tal-koagulazzjoni.Id-DVS jevalwa jew jirreġistra l-assorbiment u t-telf tal-fwar f'kampjun gravimetrikament billi juża bilanċ ultra-sensittiv b'riżoluzzjoni tal-massa ta' ±0.1 µg.Pressjoni tal-fwar parzjali (umdità relattiva) hija ġġenerata minn kontrollur elettroniku tal-fluss tal-massa madwar il-kampjun billi tħallat gassijiet trasportaturi saturati u niexfa. Skont il-linji gwida tal-Farmakopea Ewropea, ibbażata fuq il-perċentwal tal-assorbiment tal-umdità mill-kampjuni, il-kampjuni ġew kategorizzati f'4 kategoriji (0-0.012% w/w− mhux igroskopiku, 0.2-2% w/w kemmxejn igroskopiku, 2-15% moderatament igroskopiku) u > 1.35% igroskopiku ħafna, u > 1. Skont il-linji gwida tal-Farmakopea Ewropea, ibbażati fuq il-perċentwal tal-assorbiment tal-umdità mill-kampjuni, il-kampjuni ġew kategorizzati f'4 kategoriji (0-0.012% w/w− mhux igroskopiku, 0.2-2% w/w kemmxejn igroskopiku, 2-15% moderatament igroskopiku) u > 1.35% igroskopiku ħafna, u > 1.Skont ir-rakkomandazzjonijiet tal-Farmakopea Ewropea, skont il-perċentwal tal-assorbiment tal-umdità mill-kampjuni, il-kampjuni ġew maqsuma f'4 kategoriji (0-0.012% w/w - mhux igroskopiku, 0.2-2% w/w kemmxejn igroskopiku, 2-15 %).% умеренно гигроскопичен и > 15% очень гигроскопичен)23. % moderatament igroskopiku u > 15% igroskopiku ħafna)23.根据欧洲药典指南，根据样品吸收水分的百分比，样品分为4 类（0-0.012% w/0.012% w/0.012% w/0.012% w/0.012% w/0. /w 轻微吸湿性、2-15 % 适度吸湿，> 15% 非常吸湿）23。根据 欧洲 药典 指南 ， 根据 吸收 水分 的 百分比 样品 分为 分为 分为 分为 分为 分 0.0.湿 性 、 、 、 、 0.2-2% W/w 轻微 、 2-15% 适度 吸湿 ，> 15 %非常吸湿）23。Skont ir-rakkomandazzjonijiet tal-Farmakopea Ewropea, il-kampjuni huma maqsuma f'4 klassijiet skont il-perċentwal tal-umdità assorbit mill-kampjun (0-0.012% bil-piż - mhux igroskopiku, 0.2-2% bil-piż kemmxejn igroskopiku, 2-15% bil-piż).% умеренно гигроскопичен, > 15 % очень гигроскопичен) 23. % moderatament igroskopiku, > 15% igroskopiku ħafna) 23.L-effiċjenza igroskopika ta 'NFCS X NFCS u TsN NFCS ġiet determinata fuq analizzatur DVS TA TGA Q5000 SA.Matul dan il-proċess, inkisbu run time, umdità relattiva (RH), u piż tal-kampjun f'ħin reali f'25 ° C24.Il-kontenut ta' umdità huwa kkalkulat b'analiżi preċiża tal-massa NFRCS bl-użu tal-ekwazzjoni li ġejja:
MC huwa umdità NFRCS.m1 – piż xott ta 'NSAIDs.m2 hija l-massa NFRCS f'ħin reali f'RH partikolari.
L-erja totali tal-wiċċ ġiet stmata bl-użu ta 'esperiment ta' adsorbiment tan-nitroġenu b'nitroġenu likwidu wara li tbattal il-kampjuni f'25 °C għal 10 h (< 7 × 10-3 Torr). L-erja totali tal-wiċċ ġiet stmata bl-użu ta 'esperiment ta' adsorbiment tan-nitroġenu b'nitroġenu likwidu wara li tbattal il-kampjuni f'25 °C għal 10 h (< 7 × 10-3 Torr). Общая площадь поверхности оценивалась с помощью эксперимента по адсорбции азотко по сперимента ожнения образцов при 25 °С в течение 10 ч (< 7 × 10–3 Торр). L-erja tal-wiċċ totali ġiet stmata bl-użu ta 'esperiment ta' adsorbiment tan-nitroġenu b'nitroġenu likwidu wara li l-kampjuni tbattlu f'25 ° C għal 10 h (< 7 × 10-3 Torr).在25°C 清空样品10 小时（< 7 × 10-3 Torr）后，使用液氮的氮吸附实验估计总表面总表。在 25°C Общая площадь поверхности оценивалась с использованием экспериментов по адсорбцод сорбцик писорбцик ле опорожнения образцов в течение 10 часов при 25°C (< 7 × 10-3 торр). L-erja totali tal-wiċċ ġiet stmata bl-użu ta 'esperimenti ta' adsorbiment tan-nitroġenu b'nitroġenu likwidu wara li l-kampjuni tbattlu għal 10 sigħat f'25 ° C (< 7 x 10-3 torr).L-erja totali tal-wiċċ, il-volum tal-pori u d-daqs tal-pori NFRCS ġew determinati bi Quantachrome minn NOVA 1000e, l-Awstrija bl-użu ta 'softwer RS ​​232.
Ipprepara 5% RBCs (salina bħala dilwent) mid-demm sħiħ.Imbagħad ittrasferixxi alikwott ta' HFFC (0.25 ml) għal pjanċa ta' 96-il bir u 5% massa RBC (0.1 ml).Inkuba t-taħlita f'37°C għal 40 minuta.Taħlita ta’ ċelluli ħomor tad-demm u serum kienet ikkunsidrata bħala kontroll pożittiv, u taħlita ta’ melħ u ċelluli ħomor tad-demm bħala kontroll negattiv.L-emagglutinazzjoni ġiet determinata skont l-iskala Stajitzky.L-iskali proposti huma kif ġej: + + + + aggregati granulari densi;+ + + pads tal-qiegħ lixxi bi truf mgħawweġ;+ + pads tal-qiegħ lixxi bi truf imqattgħin;+ ċrieki ħomor dojoq madwar it-truf tal-pads lixxi;– (negattiv) buttuna ħamra diskreta 12 fiċ-ċentru tal-bir t'isfel.
L-emokompatibilità tal-NFRCS ġiet studjata skont il-metodu tal-Organizzazzjoni Internazzjonali għall-Istandardizzazzjoni (ISO) (ISO10993-4, 1999)26,27.Il-metodu gravimetriku deskritt minn Singh et al.Saru modifiki żgħar biex tiġi vvalutata l-formazzjoni tat-trombu fil-preżenza ta 'jew fuq il-wiċċ ta' NFRCS.500 mg ta 'Cs, Ch NFRCS u Cp NFRCS ġew inkubati f'salina buffered phosphate (PBS) għal 24 siegħa f'37 ° C.Wara 24 siegħa, il-PBS tneħħa u NFRCS ġie ttrattat b'2 ml demm li kien fih 3.8% ċitrat tas-sodju.Fuq il-wiċċ ta' l-NFRCS, żid 0.04 ml ta' 0.1 M CaCl2 mal-kampjuni inkubati.Wara 45 minuta, ġew miżjuda 5 ml ta 'ilma distillat biex titwaqqaf il-koagulazzjoni.Demm koagulat fuq il-wiċċ ta 'NFRK ġie ttrattat b'soluzzjoni ta' formaldehyde 36-38%.L-emboli mwaħħla bil-formaldehyde ġew imnixxfa u miżuna.Il-perċentwal tat-trombożi ġie stmat billi kkalkola l-piż tal-ħġieġ mingħajr demm u kampjun (kontroll negattiv) u l-ħġieġ bid-demm (kontroll pożittiv).
Bħala konferma inizjali, il-kampjuni ġew viżwalizzati taħt mikroskopju ottiku biex jifhmu l-abbiltà tal-kisi tal-wiċċ HFFC, Ct interkonnessi, u netwerk Ct li jiffurmaw pori.Sezzjonijiet irqaq ta 'Ch u Cp minn NFRCS ġew mirquma b'xafra tal-iskalpell.Is-sezzjoni li tirriżulta tqiegħdet fuq slide tal-ħġieġ, mgħottija bi coverslip, u t-truf ġew iffissati bil-kolla.Is-slajds ippreparati ġew meqjusa taħt mikroskopju ottiku u ttieħdu ritratti b'ingrandimenti differenti.
Id-depożizzjoni tal-polimeru fin-netwerks Ct ġiet viżwalizzata bl-użu ta 'mikroskopija tal-fluworexxenza bbażata fuq il-metodu deskritt minn Rice et al.29. Il-kompożizzjoni HFFC użata għall-formulazzjoni tħallat ma 'żebgħa fluworexxenti (amaranth), u NFRCS (Ch & Cp) ġew ippreparati skont il-metodu msemmi qabel. Il-kompożizzjoni HFFC użata għall-formulazzjoni tħallat ma 'żebgħa fluworexxenti (amaranth), u NFRCS (Ch & Cp) ġew ippreparati skont il-metodu msemmi qabel.Il-kompożizzjoni HFFC użata għall-formulazzjoni tħallat ma 'żebgħa fluworexxenti (amaranth) u NFRCS (Ch u Cp) inkisbet skond il-metodu msemmi qabel.将用于配方的HFFC 组合物与荧光染料（苋菜）混合，并按照前面提到的料光染料（苋菜）混合，并按照前面提到的方光染料Ch &〉CNFCh将用于配方的HFFC 组合物与荧光染料（苋菜）混合，并按照前面提到的料光染料（苋菜）混合，并按照前面提到的方光染料Ch &〉CNFChIl-kompożizzjoni HFFC użata fil-formulazzjoni tħallat ma 'żebgħa fluworexxenti (Amaranth) u rċeviet NFRCS (Ch u Cp), kif issemma qabel.Sezzjonijiet irqaq ta 'NFRK inqatgħu mill-kampjuni miksuba, imqiegħda fuq slides tal-ħġieġ, u miksija bi cover slips.Osserva l-pjastri ppreparati taħt mikroskopju fluworexxenti billi tuża filtru aħdar (310-380 nm).L-immaġini ttieħdu b'ingrandiment ta '4x biex jifhmu r-relazzjonijiet Ct u d-depożizzjoni żejda tal-polimer fin-netwerk Ct.
It-topografija tal-wiċċ ta 'NFRCS Ch u Cp ġiet determinata bl-użu ta' mikroskopju tal-forza atomika (AFM) b'cantilever TESP ultra-sharp fil-mod tapping: 42 N/m, 320 kHz, ROC 2-5 nm, Bruker, Tajwan.Il-ħruxija tal-wiċċ ġiet iddeterminata permezz ta' root mean square (RMS) bl-użu ta' softwer (Scanning Probe Image Processor).Diversi postijiet NFRCS ġew mogħtija fuq immaġini 3D biex tiċċekkja l-uniformità tal-wiċċ.Id-devjazzjoni standard tal-punteġġ għal żona partikolari hija definita bħala l-ħruxija tal-wiċċ.L-ekwazzjoni RMS intużat biex tikkwantifika l-ħruxija tal-wiċċ ta 'NFRCS31.
Studji bbażati fuq FESEM saru bl-użu ta 'FESEM, SU8000, HI-0876-0003, Hitachi, Tokyo, biex jifhmu l-morfoloġija tal-wiċċ ta' Ch NFRCS u Cp NFRCS, li wrew BCT aħjar minn Cm NFRCS.L-istudju FESEM sar skond il-metodu deskritt minn Zhao et al.32 b'modifiki minuri.NFRCS 20 sa 30 mg Ch NFRCS u Cp NFRCS tħalltu minn qabel ma' 20 µl ta' 3.8% ċitrat tas-sodju mħallat minn qabel ma' demm tal-firien.20 μl ta '0.2 M CaCl2 ġew miżjuda mal-kampjuni ttrattati bid-demm biex tinbeda l-koagulazzjoni u l-kampjuni ġew inkubati f'temperatura tal-kamra għal 10 minuti.Barra minn hekk, eritroċiti żejda tneħħew mill-wiċċ NFRCS billi tlaħlaħ bis-salina.
Kampjuni sussegwenti ġew ittrattati b'0.1% glutaraldehyde u mbagħad imnixxfa f'forn ta 'arja sħuna f'37 ° C biex titneħħa l-umdità.Il-kampjuni mnixxfa ġew miksija u analizzati 32 .Immaġini oħra miksuba matul l-analiżi kienu formazzjoni ta 'emboli fuq il-wiċċ ta' fibri tal-qoton individwali, depożizzjoni ta 'polimeru bejn Ct, morfoloġija ta' eritroċiti (forma), integrità ta 'emboli, u morfoloġija ta' eritroċiti fil-preżenza ta 'NFRCS.Żoni NFRCS mhux ittrattati u żoni NFRCS trattati Ch u Cp inkubati bid-demm ġew skennjati għal joni elementali (sodju, potassju, nitroġenu, kalċju, manjesju, żingu, ram u selenju)33.Qabbel il-perċentwali tal-jone elementali bejn il-kampjuni ttrattati u mhux ittrattati biex tifhem l-akkumulazzjoni tal-jone elementali waqt il-formazzjoni tal-embolu u l-omoġenità tal-embolu.
Il-ħxuna tal-kisi tal-wiċċ Cp HFFC fuq il-wiċċ Ct ġiet iddeterminata bl-użu ta 'FESEM.Is-sezzjonijiet trasversali ta 'Cp NFRCS inqatgħu mill-qafas u miksija bi sputter.Il-kampjuni tal-kisi sputter li jirriżultaw ġew osservati minn FESEM u l-ħxuna tal-kisi tal-wiċċ ġiet imkejla 34, 35, 36.
Mikro-CT tar-raġġi X jipprovdi immaġni 3D mhux distruttiva b'riżoluzzjoni għolja u jippermettilek tistudja l-arranġament strutturali intern ta 'NFRK.Mikro-CT juża raġġ tar-raġġi-X li jgħaddi mill-kampjun biex jirreġistra l-koeffiċjent ta 'attenwazzjoni lineari lokali tar-raġġi-X fil-kampjun, li jgħin biex tinkiseb informazzjoni morfoloġika.Il-post intern ta 'Ct f'Cp NFRCS u Cp NFRCS ittrattat bid-demm ġie eżaminat minn mikro-CT biex tifhem l-effiċjenza ta' l-assorbiment u t-tagħqid tad-demm fil-preżenza ta 'NFRCS37,38,39.L-istrutturi 3D ta 'kampjuni Cp NFRCS trattati bid-demm u mhux ittrattati ġew rikostruwiti bl-użu ta' mikro-CT (V|tome|x S240, Phoenix, il-Ġermanja).Bl-użu tas-software VG STUDIO-MAX verżjoni 2.2, ittieħdu diversi immaġini tar-raġġi X minn angoli differenti (idealment kopertura ta '360 °) biex jiżviluppaw immaġini 3D għal NFRCS.Id-dejta tal-projezzjoni miġbura ġiet rikostitwita f'immaġini volumetriċi 3D bl-użu tas-softwer 3D ScanIP Academic sempliċi korrispondenti.
Barra minn hekk, biex tifhem id-distribuzzjoni tal-embolu, 20 µl ta 'demm ċitrat imħallat minn qabel u 20 µl ta' 0.2 M CaCl2 ġew miżjuda mal-NFRCS biex jinbeda t-tagħqid tad-demm.Il-kampjuni ppreparati jitħallew jibbies.Il-wiċċ NFRK ġie ttrattat b'0.5% glutaraldehyde u mnixxef f'forn ta 'arja sħuna f'30-40 ° C għal 30 min.L-embolu tad-demm iffurmat fuq l-NFRCS ġie skennjat, rikostruwit, u immaġni 3D tal-embolu tad-demm ġiet viżwalizzata.
Twettqu analiżi antibatteriċi fuq Cp NFRCS (l-aħjar meta mqabbla ma 'Ch NFRCS) bl-użu tal-metodu deskritt qabel b'modifiki minuri.L-attività antibatterika ta 'Cp NFRCS u Cp HFFC ġiet iddeterminata bl-użu ta' tliet mikro-organiżmi tat-test differenti [S.aureus (batterji gram-pożittivi), E.coli (batterji gram-negattivi) u Candida abjad (C.albicans)] li qed jikbru fuq agar f'platti Petri f'inkubatur.Inokula b'mod uniformi 50 ml tas-sospensjoni tal-kultura batterika dilwita f'konċentrazzjoni ta' 105-106 CFU ml-1 fuq il-medium agar.Ferra l-medium ġo dixx Petri u ħallieh jissolidifika.Saru bjar fuq il-wiċċ tal-pjanċa tal-agar biex jimtlew b'HFFC (3 bjar għal HFFC u 1 għal kontroll negattiv).Żid 200 µl HFFC fi 3 reċipjenti u 200 µl pH 7.4 PBS fir-4 bir.Fuq in-naħa l-oħra tad-dixx petri, poġġi diska Cp NFRCS ta’ 12 mm fuq l-agar solidifikat u xarrab b’PBS (pH 7.4).Il-pilloli ta' Ciprofloxacin, ampicillin u fluconazole huma kkunsidrati bħala standards ta' referenza għal Staphylococcus aureus, Escherichia coli u Candida albicans.Kejjel iż-żona ta 'inibizzjoni manwalment u ħu immaġni diġitali taż-żona ta' inibizzjoni.
Wara l-approvazzjoni etika istituzzjonali, l-istudju sar fil-Kulleġġ Mediku tal-Edukazzjoni u r-Riċerka Kasturba f'Manipal, Karnataka, fin-Nofsinhar tal-Indja.Il-protokoll sperimentali TEG in vitro ġie rivedut u approvat mill-Kumitat tal-Etika Istituzzjonali tal-Kulleġġ Mediku Kasturba, Manipal, Karnataka (IEC: 674/2020).Is-suġġetti ġew reklutati minn donaturi voluntiera tad-demm (b'età minn 18 sa 55) mill-bank tad-demm tal-isptar.Barra minn hekk, inkisbet formola ta’ kunsens infurmat mill-voluntiera għall-ġbir ta’ kampjuni tad-demm.TEG nattiv (N-TEG) ​​intuża biex jistudja l-effett tal-formulazzjoni Cp HFFC fuq demm sħiħ imħallat minn qabel ma 'ċitrat tas-sodju.N-TEG huwa rikonoxxut ħafna għar-rwol tiegħu fir-risuxxitazzjoni fil-punt tal-kura, li joħloq problemi għall-kliniċi minħabba l-potenzjal għal dewmien klinikament sinifikanti fir-riżultati (testijiet ta 'koagulazzjoni ta' rutina).Analiżi N-TEG saret bl-użu tad-demm sħiħ.Inkisbu kunsens infurmat u storja medika dettaljata mill-parteċipanti kollha.L-istudju ma kienx jinkludi parteċipanti b'kumplikazzjonijiet emostatiċi jew trombotiċi bħal tqala/wara t-twelid jew mard tal-fwied.Suġġetti li jieħdu mediċini li jaffettwaw il-kaskata tal-koagulazzjoni ġew esklużi wkoll mill-istudju.Testijiet bażiċi tal-laboratorju (emoglobina, ħin tal-protrombina, tromboplastina attivata u għadd tal-plejtlits) saru fuq il-parteċipanti kollha skont proċeduri standard.N-TEG jiddetermina l-viskoelastiċità tal-embolu tad-demm, l-istruttura inizjali tal-embolu, l-interazzjoni tal-partiċelli, it-tisħiħ tal-embolu, u l-liżi tal-embolu.L-analiżi N-TEG tipprovdi dejta grafika u numerika dwar l-effetti kollettivi ta 'diversi elementi ċellulari u plażma.Twettqet analiżi N-TEG fuq żewġ volumi differenti ta' Cp HFFC (10 µl u 50 µl).Bħala riżultat, 1 ml ta 'demm sħiħ b'aċidu ċitriku ġie miżjud ma' 10 μl ta 'Cp HFFC.Żid 1 ml (Cp HFFC + demm ċitrat), 340 µl demm imħallat għal 20 µl 0.2 M CaCl2 li jkun fih dixx TEG.Minn hemm 'il quddiem, dixxijiet TEG ġew mgħobbija f'TEG® 5000, US biex ikejlu R, K, angolu alfa, MA, G, CI, TPI, EPL, LY 30% tal-kampjuni tad-demm fil-preżenza ta' Cp HFFC41.
Il-protokoll tal-istudju in vivo ġie rivedut u approvat mill-Kumitat Istituzzjonali tal-Etika tal-Annimali (IAEC), l-Iskola tal-Mediċina ta 'Kasturba, l-Istitut Manipal ta' Edukazzjoni Għolja, Manipal (IAEC/KMC/69/2020).L-esperimenti kollha fuq l-annimali twettqu skont ir-rakkomandazzjonijiet tal-Kumitat għall-Kontroll u s-Superviżjoni tal-Esperimentazzjoni tal-Annimali (CPCSEA).L-istudji kollha in vivo NFRCS (2 × 2 cm2) saru fuq firien Wistar nisa (li jiżnu 200 sa 250 g).L-annimali kollha ġew akklimatizzati f'temperatura ta '24-26 ° C, l-annimali kellhom aċċess liberu għal ikel standard u ilma ad libitum.L-annimali kollha kienu maqsuma b'mod każwali fi gruppi differenti, kull grupp kien jikkonsisti fi tliet annimali.L-istudji kollha saru skont l-Istudji fuq l-Annimali: Rapport ta’ Esperimenti In Vivo 43 .Qabel l-istudju, l-annimali ġew anestetizzati permezz ta 'amministrazzjoni intraperitoneali (ip) ta' taħlita ta '20-50 mg ta' ketamina (għal kull 1 kg ta 'piż tal-ġisem) u 2-10 mg ta' xylazine (għal kull 1 kg ta 'piż tal-ġisem).Wara l-istudju, il-volum tal-fsada ġie kkalkulat billi tiġi evalwata d-differenza bejn il-piż inizjali u finali tal-kampjuni, il-valur medju miksub mit-tliet testijiet ittieħed bħala l-volum tal-fsada tal-kampjun.
Il-mudell ta 'amputazzjoni tad-denb tal-firien ġie implimentat biex jifhem il-potenzjal ta' NFRCS biex jimmodula l-fsada fi trawma, ġlieda jew inċident tat-traffiku (mudell ta 'korriment).Aqta '50% tad-denb b'xafra tal-iskalpell u poġġi fl-arja għal 15 s biex tiżgura fsada normali.Barra minn hekk, kampjuni tat-test tqiegħdu fuq id-denb ta 'far billi tiġi applikata pressjoni (Ct, Cs, Ch NFRCS u Cp NFRCS).Fsada u PCT ġew irrappurtati għal kampjuni tat-test (n ​​= 3)17,45.
L-effettività tal-kontroll tal-pressjoni NFRCS fil-ġlieda ġiet investigata fuq mudell tal-arterja femorali superfiċjali.L-arterja femorali tiġi esposta, tittaqqab b'trokar 24G, u dmija fi żmien 15-il sekonda.Wara li jiġi osservat fsada mhux ikkontrollata, il-kampjun tat-test jitqiegħed fis-sit tat-titqib bi pressjoni applikata.Immedjatament wara l-applikazzjoni tal-kampjun tat-test, il-ħin tat-tagħqid ġie rreġistrat u l-effiċjenza emostatika ġiet osservata għall-5 minuti li ġejjin.L-istess proċedura ġiet ripetuta b'Cs u Ct46.
Dowling et al.47 ippropona mudell ta 'korriment tal-fwied biex jevalwa l-potenzjal emostatiku ta' materjali emostatiċi fil-kuntest ta 'fsada intraoperattiva.BCT ġie rreġistrat għal kampjuni Ct (kontroll negattiv), qafas Cs (kontroll pożittiv), kampjuni Ch NFRCS, u kampjuni Cp NFRCS.Il-vena cava suprahepatic tal-far kienet esposta billi twettaq laparotomija medjan.Wara dan, il-parti distali tal-lobu tax-xellug inqatgħet b'imqass.Agħmel inċiżjoni fil-fwied b'xafra tal-iskalpell u ħalliha toħroġ id-demm għal ftit sekondi.Kampjuni tat-test Ch NFRCS u Cp NFRCS miżuna b'mod preċiż tpoġġew fuq il-wiċċ bil-ħsara mingħajr ebda pressjoni pożittiva u BCT ġie rreġistrat.Il-grupp ta 'kontroll (Ct) imbagħad applika pressjoni segwit minn Cs 30 s47 mingħajr ma kisser il-ħsara.
Twettqu assaġġi in vivo tal-fejqan tal-feriti bl-użu ta 'mudell ta' ferita ta 'excisional biex jevalwaw il-proprjetajiet tal-fejqan tal-feriti tal-NFRCSs żviluppati bbażati fuq polimeri.Mudelli ta 'feriti ta' esċiżjoni ġew magħżula u mwettqa skond metodi ppubblikati qabel b'modifiki minuri19,32,48.L-annimali kollha ġew anestetizzati kif deskritt qabel.Uża punch tal-bijopsija (12 mm) biex tagħmel inċiżjoni ċirkolari fil-fond fil-ġilda tad-dahar.Is-siti tal-feriti ppreparati kienu lebsin b'Cs (kontroll pożittiv), Ct (li jirrikonoxxu li l-pads tal-qoton jinterferixxu mal-fejqan), Ch NFRCS u Cp NFRCS (grupp sperimentali) u kontroll negattiv mingħajr ebda trattament.F'kull jum tal-istudju, l-erja tal-ferita ġiet imkejla fil-firien kollha.Uża kamera diġitali biex tieħu stampa taż-żona tal-ferita u ilbes dressing ġdid.Il-perċentwal tal-għeluq tal-ferita tkejjel bil-formula li ġejja:
Ibbażat fuq il-perċentwali tal-għeluq tal-ferita fit-12-il jum tal-istudju, il-ġilda tal-firien tal-aħjar grupp ġiet imneħħija ((Cp NFRCS) u l-grupp ta 'kontroll) u studjata bit-tbajja 'H & E u t-tbajja' trikromju ta' Masson. Ibbażat fuq il-perċentwali tal-għeluq tal-ferita fit-12-il jum tal-istudju, il-ġilda tal-firien tal-aħjar grupp ġiet imneħħija ((Cp NFRCS) u l-grupp ta 'kontroll) u studjata bit-tbajja 'H & E u t-tbajja' trikromju ta' Masson.Ibbażat fuq il-perċentwali tal-għeluq tal-ferita fit-12-il jum tal-istudju, il-ġilda tal-firien tal-aħjar grupp ((Cp NFRCS) u l-grupp ta 'kontroll) ġiet imnaqqsa u eżaminata bit-tbajja' b'ematoxylin-eosin u trikromju ta' Masson.根据研究第12天的伤口闭合百分比，切除最佳组((Cp NFRCS)和对照组)的大鼠百分比，切除最佳组((Cp NFRCS)和对照组)的大鼠百分比切除最佳组三色染色研究。根据研究第12天的伤口闭合百分比，切除最佳组((Cp NFRCS)和对照组)的大闭合百分比，切除最佳组((Cp NFRCS)和对照组)的大鼠百分比切除最佳组眳组）Il-firien fl-aħjar grupp ((Cp NFRCS) u gruppi ta 'kontroll) tneħħew għat-tbajja' ematossilina-eosina u t-tbajja tat-trikromju ta' Masson ibbażata fuq l-għeluq tal-ferita fil-mija fit-12-il jum tal-istudju.Il-proċedura tat-tbajja implimentata twettqet skont metodi deskritti qabel49,50.Fil-qosor, wara l-iffissar f'10% formalin, il-kampjuni ġew deidrati bl-użu ta 'serje ta' alkoħol gradati.Uża mikrotomu biex tikseb sezzjonijiet irqaq (5 µm ħxuna) tat-tessut imneħħi.Sezzjonijiet serjali irqaq tal-kontrolli u Cp NFRCS ġew ittrattati b'ematossilin u eosin biex jiġu studjati bidliet istopatoloġiċi.It-tebgħa trikroma ta 'Masson intużat biex tiskopri l-formazzjoni ta' fibri tal-kollaġen.Ir-riżultati miksuba ġew studjati bl-addoċċ minn patoloġisti.
L-istabbiltà tal-kampjuni Cp NFRCS ġiet studjata f'temperatura tal-kamra (25°C ± 2°C/60% RH ± 5%) għal 12-il xahar51.Cp NFRCS (kulur tal-wiċċ u tkabbir tal-mikrobi) ġie spezzjonat viżwalment u ttestjat għar-reżistenza għall-ilbies tat-tinja u BCT skont il-metodi ta 'hawn fuq deskritti fit-taqsima tal-Materjali u l-Metodi.
L-iskalabbiltà u r-riproduċibilità ta 'Cp NFRCS ġew eżaminati billi ppreparat Cp NFRCS b'daqs ta' 15 × 15 cm2.Barra minn hekk, kampjuni ta '30 mg (n = 5) ġew imneħħija minn diversi frazzjonijiet Cp NFRCS u l-BCT tal-kampjuni studjati ġiet evalwata kif deskritt qabel fit-taqsima Metodi.
Aħna ppruvajna niżviluppaw diversi forom u strutturi bl-użu ta 'kompożizzjonijiet Cp NFRCS għal diversi applikazzjonijiet bijomediċi.Forom jew konfigurazzjonijiet bħal dawn jinkludu tampuni konikali għal fsada mill-imnieħer, proċeduri dentali, u tampuni ċilindriċi għal fsada vaġinali.
Is-settijiet tad-dejta kollha huma espressi bħala medja ± devjazzjoni standard u ġew analizzati minn ANOVA bl-użu ta 'Prism 5.03 (GraphPad, San Diego, CA, USA) segwit mit-test ta' paraguni multipli ta 'Bonferroni (*p<0.05).
Il-proċeduri kollha mwettqa fi studji umani kienu skont l-istandards tal-Istitut u l-Kunsill Nazzjonali tar-Riċerka, kif ukoll id-Dikjarazzjoni ta 'Ħelsinki 1964 u l-emendi sussegwenti tagħha, jew standards etiċi simili.Il-parteċipanti kollha ġew infurmati dwar il-karatteristiċi tal-istudju u n-natura volontarja tiegħu.Id-dejta tal-parteċipanti tibqa' kunfidenzjali ladarba tinġabar.Il-protokoll sperimentali TEG in vitro ġie rivedut u approvat mill-Kumitat tal-Etika Istituzzjonali tal-Kulleġġ Mediku Kasturba, Manipal, Karnataka (IEC: 674/2020).Il-voluntiera ffirmaw il-kunsens infurmat biex jiġbru kampjuni tad-demm.
Il-proċeduri kollha mwettqa fi studji fuq l-annimali twettqu skont il-Fakultà tal-Mediċina ta’ Kastuba, l-Istitut Manipal tal-Edukazzjoni Għolja, Manipal (IAEC/KMC/69/2020).L-esperimenti kollha fuq l-annimali ddisinjati twettqu skont il-linji gwida tal-Kumitat għall-Kontroll u s-Superviżjoni tal-Esperimentazzjoni tal-Annimali (CPCSEA).L-awturi kollha jsegwu l-linji gwida ARRIVE.
L-ispettri FTIR tal-NFRCS kollha ġew analizzati u mqabbla mal-ispettru tal-chitosan muri fil-Figura 2A.Qċaċet spettrali karatteristiċi ta 'chitosan (irreġistrati) f'3437 ċm-1 (tiġbid OH u NH, jikkoinċidu), 2945 u 2897 ċm-1 (tiġbid CH), 1660 ċm-1 (razza NH2), 1589 ċm-1 (liwi N–H), 1157 ċm-sekondarja, 1157 ċm – 10 – stretch C–-10 (idrossiku) yl), 993 cm-1 (stretch CO, Bo-OH) 52.53.54.Tabella Supplimentari S1 turi l-valuri tal-ispettru tal-assorbiment tal-FTIR NFRCS għal chitosan (reporter), chitosan pur, Cm, Ch, u Cp.L-ispettri FTIR tal-NFRCS kollha (Cm, Ch u Cp) wrew l-istess meded ta 'assorbiment karatteristiċi bħal chitosan pur mingħajr ebda tibdil sinifikanti (Fig. 2A).Ir-riżultati tal-FTIR ikkonfermaw in-nuqqas ta' interazzjonijiet kimiċi jew fiżiċi bejn il-polimeri użati għall-iżvilupp tal-NFRCS, u jindikaw li l-polimeri użati huma inerti.
Karatterizzazzjoni in vitro ta' Cm NFRCS, Ch NFRCS, Cp NFRCS u Cs.(A) jirrappreżenta l-ispettri FTIR magħquda tal-kompożizzjonijiet ta 'chitosan u Cm NFRCS, Ch NFRCS u Cp NFRCS taħt kompressjoni.(B) a) Rata ta 'assorbiment tad-demm sħiħ ta' NFRCS Cm, Ch, Cp, u Cg (n = 3);Il-kampjuni Ct wrew BAR ogħla minħabba li t-tajjara għandha effiċjenza ogħla ta 'assorbiment;b) Demm wara l-assorbiment tad-demm Illustrazzjoni tal-kampjun assorbit.Rappreżentazzjoni grafika tal-BCT tal-kampjun tat-test C (Cp NFRCS kellu l-aħjar BCT (15 s, n = 3)). Id-dejta f'C, D, E, u G intweriet bħala medja ± SD, u l-vireg tal-iżball jirrappreżentaw SD, ***p < 0.0001. Id-dejta f'C, D, E, u G intweriet bħala medja ± SD, u l-vireg tal-iżball jirrappreżentaw SD, ***p < 0.0001. Данные в C, D, E и G представлены как среднее ± стандартное отклонение, а планки погрешноставлены как среднее ± стандартное отклонение, а планки погрешноставлены прешностей прешностей прешностей онение, ***p <0,0001. Id-dejta f'C, D, E, u G hija ppreżentata bħala medja ± devjazzjoni standard, u l-vireg ta 'żball jirrappreżentaw devjazzjoni standard, ***p<0.0001. C、D、E 和G 中的数据显示为平均值± SD，误差线代表SD，***p < 0.0001。 C、D、E 和G 中的数据显示为平均值± SD，误差线代表SD，***p < 0.0001。 Данные в C, D, E и G показаны как среднее значение ± стандартное отклонение, планки погрешносде погрешносте погрешностей е отклонение, ***p <0,0001. Id-dejta f'C, D, E, u G tidher bħala medja ± devjazzjoni standard, il-vireg tal-iżball jirrappreżentaw devjazzjoni standard, ***p<0.0001.