“Qatt ma tiddubita li grupp żgħir ta’ ċittadini maħsubin u dedikati jistgħu jbiddlu d-dinja.Fil-fatt, huwa l-uniku wieħed hemm.”
Il-missjoni ta 'Cureus hija li jibdel il-mudell ilu ta' pubblikazzjoni medika, li fih is-sottomissjoni ta 'riċerka tista' tkun għalja, kumplessa u tieħu ħafna ħin.
Plażma/prp b'ħafna plejtlits, riġenerazzjoni tat-tessuti, attivazzjoni tal-plejtlits, terapija proliferattiva tal-glukożju, plejtlits, terapija proliferattiva
Aċċita dan l-artikolu bħala: Harrison TE, Bowler J, Reeves K, et al.(17 ta 'Mejju 2022) L-effett tal-glukożju fuq l-għadd u l-volum tal-plejtlits: implikazzjonijiet għall-mediċina riġenerattiva.Vulkanizzar 14(5): e25081.doi:10.7759/cureus.25081
Plażma b'ħafna platelets (PRP) u soluzzjonijiet ta 'glukożju ipertoniku huma komunement użati għall-injezzjoni fil-mediċina riġenerattiva, xi kultant flimkien.L-effett tal-glukożju ipertoniku fuq il-liżi u l-attivazzjoni tal-plejtlits ma ġiex irrappurtat qabel.Aħna ttestjajna l-effett ta 'konċentrazzjonijiet elevati ta' glukożju fuq l-għadd tal-plejtlits u l-eritroċiti, kif ukoll il-volumi taċ-ċelluli fil-PRP u fid-demm sħiħ (WB).Tnaqqis parzjali rapidu fl-għadd tal-plejtlits seħħ bit-taħlitiet kollha ta' glukożju mħallta ma' PRP jew demm sħiħ, konsistenti ma' liżi parzjali. Wara l-ewwel minuta, l-għadd tal-plejtlits baqa' stabbli, li jissuġġerixxi akkomodazzjoni rapida tal-plejtlits residwi għal ipertoniċità estrema (>2000 mOsm). Wara l-ewwel minuta, l-għadd tal-plejtlits baqa' stabbli, li jissuġġerixxi akkomodazzjoni rapida tal-plejtlits residwi għal ipertoniċità estrema (>2000 mOsm). После первой минуты количество тромбоцитов оставалось стабильным, что указывает на ставалось стабильным, что указывает на стамбоцитов боцитов очных тромбоцитов до экстремального (>2000 мОсм) гипертонуса. Wara l-ewwel minuta, l-għadd tal-plejtlits baqa' stabbli, li jindika akkomodazzjoni rapida tal-plejtlits residwi għal ipertoniċità estrema (>2000 mOsm).第一分钟后，血小板计数保持稳定，表明残余血小板迅速适应极端（> 2000 m.2000 mOsm）高渗状态。 После первой минуты количество тромбоцитов оставалось стабильным, что указывает на зывает на зывает на боцитов оставалось чных тромбоцитов к экстремальному (>2000 мОсм) гиперосмолярному состоянию. Wara l-ewwel minuta, l-għadd tal-plejtlits baqa 'stabbli, li jindika adattament rapidu tal-plejtlits residwi għall-istat iperosmolari estrem (> 2000 mOsm).Konċentrazzjonijiet ta' glucose ta' 25% u aktar irriżultaw f'żieda sinifikanti fil-volum medju tal-plejtlits (MPV), li jindika stadju bikri ta' attivazzjoni tal-plejtlits.Huma meħtieġa aktar studji biex jiġi ddeterminat jekk isseħħx liżi jew attivazzjoni tal-plejtlits u jekk injezzjoni ta’ glukożju ipertoniku waħdu jew flimkien ma’ PRP tistax tipprovdi benefiċċju kliniku addizzjonali.
Fis-snin ħamsin, il-kirurgu Amerikan George Hackett skopra li jista’ jtaffi b’mod permanenti l-uġigħ fil-ġogi u fid-dahar f’ħafna pazjenti billi jinjetta soluzzjoni proliferattiva fl-għeruq u l-ligamenti.L-esperimenti tiegħu fuq il-fniek urew li t-trattament, li huwa sejjaħ terapija proliferattiva, wassal biex l-għeruq jitkabbru u jissaħħu.Studji istoloġiċi kkonfermaw li matul dan il-proċess jiġi prodott kollaġen ġdid [1].
Matul l-ewwel ftit deċennji, ġew ippruvati ħafna soluzzjonijiet ta 'distribuzzjoni differenti.Sas-snin disgħin, il-biċċa l-kbira tal-prattikanti qiesu konċentrazzjonijiet għoljin ta 'glukożju bħala l-aktar metodu sikur u effettiv.Madankollu, il-mekkaniżmu ta 'azzjoni għadu mhux ċar.
Ftit studji kliniċi saru fis-seklu 20 wara x-xogħol ta' Hackett.Madankollu, fis-snin 2000 kien hemm interess imġedded u tlestew bosta provi kliniċi ta 'suċċess ta' terapija proliferattiva għat-trattament ta 'uġigħ fid-dahar baxx [2], osteoartrite ta' l-irkoppa [3], u epikondilite laterali [4].
Ir-riġenerazzjoni tat-tessuti teħtieġ il-parteċipazzjoni taċ-ċelloli staminali.Għalhekk, konċentrazzjonijiet għoljin ta 'glukożju għandhom b'xi mod jinduċu migrazzjoni, replikazzjoni, u differenzjazzjoni taċ-ċelloli staminali.Aħna ipoteżi li l-plejtlits jistgħu jaġixxu bħala messaġġiera u li konċentrazzjonijiet għoljin ta 'glukożju jistgħu jikkawżaw li l-plejtlits jirrilaxxaw ċitokini u fatturi ta' tkabbir, u b'hekk jippromwovu proċessi riġenerattivi, speċjalment il-migrazzjoni taċ-ċelluli staminali għal żoni ta 'konċentrazzjonijiet għoljin ta' glukożju.
L-attivazzjoni tal-plejtlits dejjem tippreċedi żieda fil-kalċju intraċellulari [5].Liu et al.fl-2008 wera li livelli għoljin ta 'glukożju jżidu l-attività ta' kanali tat-tip kanoniku tat-tip 6 (TRPC6) ta 'riċettur transitorju potenzjali fil-membrana tal-plażma, li jwassal għal influss ta' joni tal-kalċju fil-plejtlits [6].Studju ieħor wera li l-espożizzjoni taż-żona marġinali tal-mikrotubuli għal joni tal-kalċju tikkawża rilassament, espansjoni u deformazzjoni taż-żona marġinali, li mbagħad tikkawża bidla fil-forma minn diska għal sferika, li tirriżulta f'volum medju tal-plejtlits (MPV) [7].
L-ipoteżi tagħna f'dan l-istudju hija li l-esponiment tal-plejtlits għal konċentrazzjonijiet għoljin ta 'glukosju jaffettwa ż-żona marġinali tal-mikrotubuli u l-ambjent intraċellulari, li jwassal għal żieda fl-MPV.
Il-parteċipanti kollha ffirmaw formola ta' kunsens infurmat wara li d-dettalji tal-istudju ġew spjegati u qabel ma rċevew il-kampjuni.F'dan l-istudju, intużaw biss kampjuni PRP b'ematokrit akbar minn 2% sabiex l-għadd ta' eritroċiti (eritroċiti) u l-volum corpuscular medju taċ-ċelluli ħomor tad-demm (MCV) setgħu jiġu inklużi għal tqabbil.
L-istudju sar f'erba' fażijiet, l-ewwel fażi kienet PRP u l-fażijiet li kien fadal kienu demm sħiħ (Tabella 1).Kif deskritt qabel [8], il-forzi ċentrifugali relattivi kollha (RCF, g-force) ġew ikkalkulati mill-punt tan-nofs (Rmid, f'ċm) tal-kolonna tad-demm fis-siringa ċentrifugali.Aħna għażilna li nużaw l-MPV bħala markatur tas-sensitizzazzjoni tal-plejtlits u l-għadd tal-plejtlits bħala indikatur tal-lisi potenzjali tal-plejtlits, li t-tnejn jistgħu jitkejlu faċilment fuq analizzaturi tal-ematoloġija standard.
Fl-ewwel fażi, 47 voluntier taw kampjuni tad-demm — tubu wieħed ta 'ethylenediaminetetraacetic acid (EDTA) u kampjun wieħed ta' demm sħiħ PRP (anticoagulat b'ċitrat tas-sodju (NaCl, 3%)) (Tabella 1).Poġġi l-rocker fit-tubu immedjatament.L-għadd sħiħ tad-demm (CBC) sar fuq kampjuni EDTA fi tliet kopji, u kampjuni ta 'NaCl ġew analizzati fi tliet kopji għall-analiżi CBC, u mbagħad PRP ġie ppreparat b'diversi metodi deskritti hawn fuq [8].Il-kampjuni PRP kollha ġew ippreparati permezz ta 'ċentrifugazzjoni f'900-1000 g.Ħallat kull kampjun PRP fuq vortex mixer għal 5–10 sekondi, imbagħad jaqsam ħames alikwoti ta’ 0.5 ml f’tubi.
Biex jiġi evalwat l-effett tal-esponiment tal-plejtlits fuq konċentrazzjonijiet elevati ta’ glukożju, ammonti ugwali (0.5 ml) ta’ 0%, 5%, 12.5%, 25%, u 50% glukosju fl-ilma tħalltu ma’ kampjuni ta’ plejtlits biex jinkisbu 0%, 2.5% 6.25%, 12.5%, 12.5%, 12.5%, 12.5%, 25%, u taħlita ta’ konċentrazzjoni ta’ tubu tat-test għal taħlita ta’ glucose shaker fuq 25 minuti. .It-TAC ta' kull taħlita ġiet analizzata fi tliet kopji wara 15-il minuta.L-għadd tal-plejtlits (PLT), l-għadd tal-RBC, l-MCV u l-MPV ġew ikkalkulati għal kull tubu, u l-għadd medju tal-plejtlits, l-għadd tal-RBC, l-MCV u l-MPV ġew ikkalkulati għall-kampjuni PRP kollha.
Wara li tlestiet l-ewwel fażi tal-ġbir tad-dejta, innutajna żieda sinifikanti fil-volum tal-plejtlits fil-plejtlits PRP wara ż-żieda ta 'D50W.Il-plejtlits PRP mhux bilfors jirrappreżentaw il-plejtlits kollha fid-demm, u l-medja PRP hija differenti mill-medja WB.Għalhekk, iddeċidejna li nagħmlu prova tat-tieni fażi tal-effett taż-żieda ta 'D50W mad-demm sħiħ.
Għat-tieni rawnd, għażilna daqs tal-kampjun ta '30 ibbażat fuq ir-riżultati mill-ewwel serje, kif deskritt fit-taqsima Analiżi.F'din is-serje, 20 voluntier taw kampjuni tad-demm (Tabella 1).Demm sħiħ (1.8 ml) inġibed f'siringa ta' 3 ml u ġie antikoagulat b'0.2 ml 40% NaCl.Is-siringa tad-demm sħiħa tħallat għal ħames sekondi b'vortex mixer u s-CBC ġie analizzat fi tliet kopji.Wara l-analiżi, demm antikoagulat ġie miżjud ma '2 ml ta' 50% glukożju f'siringa ta '5 ml (il-konċentrazzjoni finali ta' glukożju kienet ta 'madwar 25% (D25) u mqiegħda f'tubu ta' ħawwad għal 30 minuta. Wara 30 minuta, D25/CBC f'siringi WB ġew analizzati fi tliet kopji. Għadd medju ta 'plejtlits, RBC, RBC, PLTV, medja ta' siringi għadd, MCV, u MPV ġew ikkalkulati għal kull kampjun qabel u wara ż-żieda tal-glukożju.
Minħabba li l-plejtlits fid-demm sħiħ huma komunement esposti għal glukożju ipertoniku waqt terapija proliferattiva ta 'glukożju minħabba injezzjoni minimament invażiva, u mhuwiex komuni li tgħaqqad PRP ma' glukożju ipertoniku eżatt qabel l-injezzjoni, iddeċidejna li nistudjaw glukożju ipertoniku flimkien ma 'WB f'Sezzjoni 1. Pass Tlieta u erbgħa.F'kull stadju, 20 voluntier taw 7-8 ml ta 'ACD-A (aċidu li fih ċitrat tat-trisodju (22.0 g/l), aċidu ċitriku (8.0 g/l) u glukożju (24.5 g/l), soluzzjoni ta' destrożju ċitrat) għal antikoagulanti tad-demm (Tabella 1).Intużaw biss taħlitiet ta 'glukożju akbar minn 12.5% ​​biex jiddeterminaw il-perċentwali tal-limitu assoċjat ma' żieda fl-MPV.Fit-tielet stadju, 1 ml ta 'demm jitqiegħed f'tubu tat-test.Imbagħad ħallat id-demm fuq vortex mixer għal 10 sekondi billi żżid 1 ml ta '30% glukosju, 40% glukosju, jew 50% glukosju mat-tubu biex tikseb konċentrazzjoni finali ta' glukosju ta '15%, 20%, u 25%, rispettivament.Kampjuni tad-demm tal-glukożju ġew analizzati għal CBC immedjatament wara t-taħlit u ripetuti kull żewġ minuti għal 30 minuta.
Waqt it-taħlit inizjali, iż-żieda ta '1:1 glucose ipertoniku u WB jew PRP jesponi l-plejtlits għal konċentrazzjonijiet 'il fuq minn 25% għal diversi sekondi.Fir-raba 'pass, biex nevalwaw l-effett tal-glukosju ipertoniku b'konċentrazzjonijiet minimi inizjali u tittestja l-limitu ta' fuq tal-effett tal-glukosju, aħna żidna biss ammont żgħir ta 'demm għal D25W jew D50W.Poġġi 1 ml ta' D25W jew D50W f'tubu u żid 0.2 ml ta' WB waqt li tħawwad il-kampjun għal 10 sekondi.F'dawn il-każijiet, id-demm kien espost għall-glukożju f'konċentrazzjoni ta' madwar 20% 'l fuq mill-konċentrazzjoni finali, aktar milli 50% 'l fuq mill-konċentrazzjoni finali bħal fil-Fażi 3, li jirriżulta f'konċentrazzjonijiet finali ta' glukożju ta '20.8% u 41.6%.Kampjuni mħallta ġew analizzati fl-istess intervall ta 'ħin bħal fil-pass 3.
Fl-ewwel pass ta' kull serje ta' dilwizzjoni tal-glukożju, ittieħdu 30 kampjun peress li dan kien id-daqs tal-kampjun xieraq għall-istudju pilota [9].Fl-aħħar ta’ kull fażi (inkluża l-ewwel fażi), evalwa l-adegwatezza tad-daqs tal-kampjun billi tuża l-formula użata biex tiddetermina d-daqs tal-kampjun meħtieġ biex tiġi stmata l-medja tal-varjabbli tar-riżultat kontinwu f’popolazzjoni waħda.Formula n = Z2 x SD2 /E2.F'din l-ekwazzjoni, Z hija l-punteġġ Z, SD hija d-devjazzjoni standard, u E hija l-iżball mixtieq [10].L-alfa tagħna huwa 0.05, li jikkorrispondi għal valur Z ta '1.96, u nistennew żball ta' 5 (f'mija).Għalhekk insolvu għal n = (1.962 x SD2)/52.Ir-riżultati wrew li d-daqs tal-kampjun meħtieġ għal kull stadju kien iżgħar min-numru attwali miġbur.
Matul il-perjodi 1, 3 u 4 bl-użu ta 'aktar minn konċentrazzjoni waħda ta' glukosju, l-effett ta 'konċentrazzjonijiet differenti ta' glukosju ġie analizzat billi tqabbel il-bidla frazzjonali bejn il-ħin 0 u kull ħin sussegwenti (fażi 1 fi 15-il minuta, perjodu 3 fi 15-il minuta).u erbgħa fi 15-il sekonda, imbagħad kull żewġ minuti.) Ir-rati tal-bidla għal kull perjodu ta 'żmien tqabblu bl-użu tat-test U Mann-Whitney minħabba li d-dejta ma segwietx distribuzzjoni normali kif determinat mit-test ta' normalità Shapiro-Wilk.Peress li saret analiżi 1-to-1 ta 'diversi gruppi (ħamsa) fl-ewwel, it-tielet u r-raba' stadji (ħamsa b'kollox), saret korrezzjoni Bonferroni biex taġġusta l-valur alfa mixtieq għal ≤0.01 iżda mhux ≤0.05.
Tnaqqis tal-għadd tal-plejtlits bil-konċentrazzjonijiet kollha ta’ destrożju ipertoniku u żieda fl-MPV fil-plejtlits PRP f’konċentrazzjoni ta’ >12.5% ​​tad-destrożju: L-għadd tal-plejtlits PRP żdied minn waħda sa ħames darbiet il-konċentrazzjoni meta mqabbla mal-linja bażi tad-demm sħiħ, li jvarja skont il-metodu (mhux murija). Tnaqqis tal-għadd tal-plejtlits bil-konċentrazzjonijiet kollha ta 'destrożju ipertoniku u żieda fl-MPV fil-plejtlits PRP f'> 12.5% ​​konċentrazzjoni ta' plejtlits: L-għadd tal-plejtlits PRP żdied minn waħda sa ħames darbiet il-konċentrazzjoni meta mqabbla mal-linja bażi tad-demm sħiħ, li jvarja skond il-metodu (mhux murija). Уменьшение количества тромбоцитов при всех концентрациях гипертонической декстроцитов при всех концентрациях гипертонической декстроцитов декстроцитов при цитах PRP при концентрации декстрозы > 12,5%: количество тромбоцитов PRP увеличилось в соличество тромбоцитов PRP увеличилось в сра ни 5 в срачество тромбоцитов PRP ой цельной кровью, в зависимости от метода (не показано). Tnaqqis fl-għadd tal-plejtlits fil-konċentrazzjonijiet kollha ta' destrożju ipertoniku u żieda fl-MPV fil-plejtlits PRP f'konċentrazzjoni ta '>12.5% ​​ta' destrożju: L-għadd tal-plejtlits PRP żdied 1-5 darbiet meta mqabbel mal-linja bażi tad-demm sħiħ, skont il-metodu (mhux muri). ).在> 12.5% ​​的葡萄糖浓度下，所有浓度的高渗葡萄糖降低血小板计数，所有浓度的高渗葡萄糖降低血小板计数，中度度下 PRP 掝 VMP：线全血相比，PRP 血小板计数从浓度的1 倍上升到5 倍，因方法而异（未揉述述比 F'konċentrazzjoni ta '>12.5% ​​​​glukosju, il-konċentrazzjoni għolja ta' glukosju tnaqqas l-għadd tad-demm, PRP tad-demm MPV jiżdied: meta mqabbel ma '与基线全血, l-għadd tad-demm PRP jiżdied minn 1 sa 5 darbiet dak tal-konċentrazzjoni (mhux deskritt). При концентрациях глюкозы >12,5% все концентрации гипертонической глюкозы снижтали снижтали ксолиточ кортонической MPV повышали в тромбоцитах PRP: количество тромбоцитов PRP увеличивалось от 1- до 5-кратнац вистрнац пий ю с исходными концентрациями цельной крови, в зависимости от метода (не описано ). F'konċentrazzjonijiet ta' glukożju >12.5%, il-konċentrazzjonijiet kollha ta' glukożju bi pressjoni għolja naqsu l-għadd tal-plejtlits u żiedu l-MPV fil-plejtlits PRP: L-għadd tal-plejtlits PRP żdied minn 1 sa 5 darbiet meta mqabbel mal-konċentrazzjonijiet bażi tad-demm sħiħ, skont il-metodu (kif deskritt).Il-Figura 1 turi li n-numru ta 'plejtlits naqas bi kważi 75% wara dilwizzjoni fl-ilma u b'20-30% wara 15-il minuta ta' dilwizzjoni b'konċentrazzjonijiet differenti ta 'glukożju meta mqabbla mal-linja bażi PRP u dilwizzjoni 1:1 aġġustata għall-volum (1- k1 b'korrezzjoni tal-volum).k -1 tnissil).1 tnissil).
In-numru ta' ċelluli f'kull dilwizzjoni huwa espress bħala frazzjoni tan-numru oriġinali qabel id-dilwizzjoni.
MPV naqas minimament matul il-produzzjoni PRP, mingħajr aktar bidla fil-konċentrazzjonijiet ta 'dilwizzjoni għal 12.5% ​​​​f'ilma jew glukosju (inklużi 25% taħlitiet ta' glukosju PRP) u żdied b'aktar minn 20% wara dilwizzjoni f'soluzzjoni ta 'glukosju 50% (Fig. .2).).B'kuntrast, l-eritroċiti ma wrew l-ebda bidla sinifikanti fil-volum fi kwalunkwe dilwizzjoni għajr H2O.
Il-volum medju ta' ċelluli f'kull dilwizzjoni huwa espress bħala perċentwal tal-volum oriġinali qabel id-dilwizzjoni.
Tnaqqis simili iżda inqas evidenti fl-għadd tal-plejtlits u żieda fis-CVR kienu osservati f'BC espost għal 50% glukożju (biex jifformula b'25% glukożju).Tabella 2 tqabbel in-numri taċ-ċelluli u l-volumi taċ-ċelluli fid-demm sħiħ dilwit f'50% dextrose ma' data PRP tal-fażi 1 dilwit f'50% dextrose.Bidliet fl-għadd RBC u RBC MCV ma kinux ovvji u ma kinux il-fokus tal-attenzjoni tagħna.
SD = devjazzjoni standard, MD = differenza medja bejn il-gruppi, SE = devjazzjoni standard tad-differenza medja, RBC = eritroċiti, PLT = plejtlits, PRP = plażma b'ħafna plejtlits, WB = demm sħiħ
Wara li żiedet D50W ma 'WB, il-perċentwali ta' telf ta 'plejtlits aġġustat għad-dilwizzjoni kien 7.7% (310±73 vs. 286±96) meta mqabbel ma' 17.8% għal dilwizzjoni PRP f'D50W (664±348 vs. 544±277).MPV WB żdied b'16.8% (minn 10.1 ± 0.5 għal 11.8 ± 0.6), filwaqt li MPV PRP żdied b'26% (9.2 ± 0.8 vs 11.6 ± 0. 7). Għalkemm id-differenzi medji kemm fit-tnaqqis tal-għadd tal-plejtlits kif ukoll fiż-żieda tal-MPV kienu sinifikament aktar ma 'PRP, il-bidliet fit-tnaqqis tal-għadd tal-plejtlits fi ħdan WB kienu kważi sinifikanti (310 ± 73 sa 286 ± 96 (-7.7%); p = .06) u ż-żieda fl-MPV kienet sinifikanti (10.1 ± 0.5 għal 11.8 ± 0.6 (+16.8) p <.001). Għalkemm id-differenzi medji kemm fit-tnaqqis tal-għadd tal-plejtlits kif ukoll fiż-żieda tal-MPV kienu sinifikament aktar ma 'PRP, il-bidliet fit-tnaqqis tal-għadd tal-plejtlits fi ħdan WB kienu kważi sinifikanti (310 ± 73 sa 286 ± 96 (-7.7%); p = .06) u ż-żieda fl-MPV kienet sinifikanti (10.1 ± 0.5 għal 11.8 ± 0.6 (+16.8) p <.001).Għalkemm id-differenzi medji kemm fit-tnaqqis tal-għadd tal-plejtlits kif ukoll fiż-żieda tas-CVR kienu akbar b'mod sinifikanti bi PRP, bidliet fit-tnaqqis tal-għadd tal-plejtlits fi ħdan WB kienu kważi sinifikanti (310 ± 73 sa 286 ± 96 (-7.7%); p = 0.06).увеличение MPV было значительным (от 10,1 ± 0,5 до 11,8 ± 0,6 (+16,8) p < 0,001). iż-żieda fl-MPV kienet sinifikanti (minn 10.1 ± 0.5 sa 11.8 ± 0.6 (+16.8) p < 0.001).尽管PRP 在血小板计数减少和MPV 增加方面的平均差异显着更大，但WB 内血尡氏的平均差异显着更大，但WB 内血尡氏的小几乎是显着的（310 ± 73 至286 ± 96 (-7.7%)；p = .06）和MPV 的增加是显着的（10.1 ± 1.0.1 ± 6.0.1 ± 1.0.1 ± . 001）。尽管 PRP 在 血小板 计数 和 和 增加 方面 的 平均 差异 显着 大 ， 但 但 冡 氅 氏的 几乎 是 显着 的 （（（310 ± 73 至 286 ± 96 (-7.7%) ； p = .06）和MPV 的增加是1增加是昚1.（1.（1.±1. ± 0.6 (+16.8) p < .001）。Il-bidla fit-tnaqqis tal-għadd tal-plejtlits fi ħdan il-WB kienet kważi sinifikanti (minn 310 ± 73 sa 286 ± 96 (-7.7%); p = 0.06), għalkemm PRP kellu differenzi medji ferm akbar fit-tnaqqis tal-għadd tal-plejtlits u żieda fl-MPV.u ż-żieda fl-MPV kienet sinifikanti.(от 10,1 ± 0,5 до 11,8 ± 0,6 (+16,8) р < 0,001). (minn 10.1 ± 0.5 sa 11.8 ± 0.6 (+16.8) p < 0.001).
Konċentrazzjoni finali ta '20% glukożju kienet meħtieġa biex tara bidla sinifikanti fl-MPV, iżda l-bidla fl-MPV kienet aktar evidenti fil-konċentrazzjoni finali ta' 25%.It-telf tal-plejtlits stabbilizzat wara t-tnaqqis inizjali.Aħna nnutaw tnaqqis qawwi inizjali fis-CVR, madankollu, CVR ġiet restawrata malajr fil-konċentrazzjoni finali ta 'glukożju ta' 25%, li kienet ogħla b'mod sinifikanti mil-livelli ta 'CVR osservati fil-konċentrazzjonijiet finali ta' glukożju ta '20% u 15% (Fig. 3 u fuq ix-xellug tat-Tabella 3; kaxxi sfumati).indika p-valuri ≤ alfa b'korrezzjoni Bonferroni ta '0.01).Kien hemm ukoll tnaqqis qawwi inizjali fin-numru ta 'PLT, osservat fil-fażi inizjali ta' 0-15 s, u mbagħad baqa 'stabbli (minn 15 s sa 30 min; xellug tat-tabella 4).
Iż-żieda ta’ diversi konċentrazzjonijiet ta’ glukożju mad-demm sħiħ irriżulta fi tnaqqis rapidu inizjali fl-MPV segwit minn irkupru dipendenti fuq il-konċentrazzjoni ta’ aktar minn 20%.Il-leġġenda turi l-konċentrazzjoni tal-glukożju wara d-dilwizzjoni.D15, D20 u D25 twettqu f'dilwizzjoni 1:1.D21 u D41 twettqu f'dilwizzjoni ta' 1:5.
Tabella 4 turi l-bidla fl-għadd tal-plejtlits meta dilwit fil-glukożju ipertoniku.Aħna osservajna relazzjoni dipendenti fuq id-doża bejn it-tnaqqis immedjat fin-numri PLT fid-dilwizzjoni 1:1 u fid-dilwizzjoni 1:5.Meta tqabbel id-dilwizzjonijiet 1:1 bħala grupp wieħed mad-dilwizzjonijiet 1:5, il-grupp 1:1 kellu tnaqqis immedjat fl-għadd tal-plejtlits inqas mill-grupp 1:5 66±48,000 (23%) kontra 99±69,000 (37%)., p = 0.014) fil-grupp 1:5.Wara waqgħa inizjali fl-ewwel punt ta 'kejl, l-għadd tal-plejtlits bħala perċentwali ta' glukożju stabbilizzat (Fig. 4).
Meta demm sħiħ jiġi miżjud mal-glukożju fi proporzjon 1:1, l-għadd tal-plejtlits jitnaqqas b'madwar 25%.Madankollu, meta d-demm sħiħ ġie miżjud fi proporzjon ta '1:5, it-tnaqqis kien ħafna akbar - madwar 50%.
41% glukożju żied l-MPV aktar malajr u b'mod aktar drammatiku minn 25% jew 21%.Ir-riżultati tal-MPV huma murija fil-Figura 3. Fid-dilwizzjonijiet l-oħra kollha, l-ebda tnaqqis inizjali immedjat fl-MPV ma kien osservat wara ż-żieda ta '50% glukożju.Meta tuża 25% glukosju (konċentrazzjoni ta 'glukosju 20.8% fid-dilwizzjoni finali), il-bidla fl-MPV kienet komparabbli mal-bidla f'20% glukosju f'dilwizzjoni 1:1 (Fig. 3).Għalkemm il-bidliet fl-MPV kienu inizjalment akbar fil-konċentrazzjoni mħallta ta '41% milli f'25%, id-differenza fl-MPV bejn 41% u 25% wara 16-il minuta ma kinitx għadha sinifikanti (Tabella 3, dritt).Huwa wkoll interessanti li 25% glukożju żied l-MPV b'mod aktar effettiv minn 20.8%.
Dan l-istudju in vitro ikkonferma parzjalment l-ipoteżi tagħna. Wera liżi potenzjali tal-plejtlits parzjali permezz ta 'taħlita ta' destrożju, akkomodazzjoni rapida ta 'plejtlits għal ipertoniċità estrema, u żieda sinifikanti fl-MPV b'reazzjoni għal > 25% konċentrazzjonijiet ta' destrożju ipertoniku. Wera liżi potenzjali tal-plejtlits parzjali permezz ta 'taħlita ta' destrożju, akkomodazzjoni rapida ta 'plejtlits għal ipertoniċità estrema, u żieda sinifikanti fl-MPV b'reazzjoni għal > 25% konċentrazzjonijiet ta' destrożju ipertoniku. Он показал потенциальный частичный лизис тромбоцитов примесью декстрозы, быструю датрцитов примесью декстрозы, быструю датрцитов в до экстремального гипертонуса и значительное повышение MPV в ответ на гипертоничеструц нко 2 значительное повышение MPV 5%. Wera liżi tal-plejtlits parzjali potenzjali b'destrożju, akkomodazzjoni rapida tal-plejtlits għal ipertoniċità estrema, u żieda sinifikanti fl-MPV b'reazzjoni għal livelli ta 'destrożju ipertoniku > 25%.它显示出通过葡萄糖混合物潜在的部分血小板溶解，血小板快速适应极潜在的部分血小板溶解，血小板快速适应极潜在的部分血小板溶解，血小板快速适应极潜应极渫应极渫应极渫25 % 浓度的高渗葡萄糖时MPV 显着上升。它 显示 出 通过 葡萄糖 潜在 的 部分 血小板 溶解 血小板 快速 适应 在 的 部分 血小板 溶解 血小板 快速 适应 在 适庯 垫 枫 枫 枎应> 25% 浓度 高渗 葡萄糖 时 时 mpv 显着。。。。。 Он показывает потенциаальный частичный лзис тромбоци xitana пертонусу и значительное увеличение mpv в в т в в н н к \ концентрацию гпертонической глюкозы> 25%. Juri liżi potenzjali tal-plejtlits parzjali minn taħlitiet ta' glukożju, adattament rapidu tal-plejtlits għal ipertoniċità estrema, u żieda sinifikanti fl-MPV b'reazzjoni għal glukożju ipertoniku > 25%.Iż-żieda inizjali kienet massima b'espożizzjoni ta' 41.6% għall-glukosju, iżda ż-żieda fl-MPV resqet lejn esponiment għal 25% għal glukożju madwar 20 minuta wara l-espożizzjoni.
Il-konċentrazzjoni tal-plejtlits hija affettwata mill-glukożju.Aħna ndunat li l-ammont ta 'PLT naqas fid-dilwizzjonijiet kollha ta' glukożju.Tnaqqis qawwi fin-numru ta' plejtlits f'dilwizzjonijiet ta' H2O (0%) tas-serje PRP jista' jkun assoċjat ma' liżi osmotika.Alternattivament, dan jista 'jkun artifact ikkawżat minn clumping tal-plejtlits, iżda dan huwa f'kuntrast man-nuqqas ta' bidla MPV f'din id-dilwizzjoni.Din is-sejba tfisser li xi plejtlits huma sensittivi ħafna għall-ipoosmolarità.
Fid-dilwizzjonijiet kollha ta '1:1 ta' glukożju, l-ammont ta 'PLT naqas b'20-30%, anke b'D5W (ipotoniku f'252 mOsm), li jista' jindika effett speċifiku mhux osmotiku ta 'glukożju, peress li kemm PLT kif ukoll MPV baqgħu mhux mibdula f'żieda ta' tliet darbiet fil-konċentrazzjoni.glukożju.minn D5W għal D25W.Fil-fatt, il-konċentrazzjonijiet tal-PLT kellhom it-tendenza li jiżdiedu kemmxejn maż-żieda fl-osmolarità.
It-tnaqqis fil-PLT bejn dilwizzjonijiet 1:1 u 1:5 ifisser li l-effett ta 'dissoluzzjoni jiddependi fuq il-konċentrazzjoni inizjali u finali tal-glukożju.Jekk tiddependi biss fuq il-konċentrazzjoni inizjali, allura wieħed jistenna li jara differenza fit-tnaqqis tal-PLT bejn konċentrazzjonijiet 1:1.Imma aħna ma.Jekk l-effett tal-liżi jiddependi biss fuq il-konċentrazzjoni finali tal-glukożju, allura ma nistennewx ħafna differenza bejn dilwizzjoni ta '20% 1:1 u dilwizzjoni ta' 20.8% 1:5.U madankollu għamilna dan.
Jekk it-telf tal-plejtlits iseħħ minħabba l-lisi tal-plejtlits, jiġi ffurmat lisat parzjali, u warajh iċ-ċitokini u l-fatturi tat-tkabbir jiġu rilaxxati fl-ambjent extraċellulari.Diversi studji wrew li lisat tal-plejtlits huwa kważi effettiv daqs il-PRP daqs soluzzjoni ta 'proliferazzjoni [11].PRP innifsu intwera li huwa soluzzjoni effettiva għat-trattament tal-proliferazzjoni [12-14].
Il-plejtlits inattivi jiċċirkolaw fil-forma ta 'diska rinfurzata b'diversi strutturi interni.Waqt l-attivazzjoni, jieħdu forma aktar sferika jew ameba, li tirriżulta f'żieda fil-volum.Iż-żieda fil-volum teħtieġ żieda fl-erja tal-wiċċ, li hija r-riżultat tal-estrużjoni tas-sistema tat-tubuli miftuħa (OCS) u ż-żieda ta 'granuli eżoċitiċi mal-membrana.Għad irid jiġi determinat jekk iż-żieda fl-MPV indotta minn glukosju ipertoniku tinvolvix wieħed jew it-tnejn minn dawn il-mekkaniżmi, iżda jekk dan tal-aħħar, allura żieda fl-MPV tindika degranulazzjoni.
Dan l-istudju wera li l-espożizzjoni għal konċentrazzjonijiet għoljin ta 'glukożju fuq PRP jew plejtlits tad-demm sħiħ irriżulta f'żieda fl-MPV fi żmien 15-il minuta b'konċentrazzjoni ta' glukożju ta '25% u 41.6%, rispettivament.
Iż-żieda fl-MPV tal-plejtlits tista' tkun dovuta għad-dilatazzjoni tat-tħabbil tal-mikrotubuli tal-madwar b'reazzjoni għall-influss tal-kalċju.Liu et al.Intwera li l-glukożju jimmedja l-influss tal-kalċju permezz tal-kanal TRPC6 tal-plejtlets [6].L-ipoteżi tagħna hija li l-glukożju jinduċi r-rilassament tat-tħabbil tal-mikrotubuli, li jwassal għal żieda fis-sensitizzazzjoni u/jew attivazzjoni tal-MPV u tal-plejtlets.Madankollu, meta wieħed jiġġudika mir-riżultati tagħna, din hija biss parti mill-istorja.Fit-testijiet tagħna, l-ebda konċentrazzjoni taħt D25W ma rriżultat f'żieda fl-MPV.Minħabba li ma ttestjajniex l-espożizzjoni għal konċentrazzjonijiet ta 'glukosju bejn 12.5% ​​u 25%, ir-riżultati tal-fażi 1 tagħna jissuġġerixxu li jista' jkun hemm limitu f'din il-firxa ta 'konċentrazzjonijiet ta' glukożju li jwassal għal żieda fl-MPV.Ittestjar ulterjuri fl-istadji 3 u 4 wera li 20-25% glukożju jidher li huwa l-limitu għal dan, iżda għadu mhux ċar għaliex.
Aħna osservajna wkoll tnaqqis ta '~9% fl-MPV wara ċ-ċentrifugazzjoni.Mhux ċar jekk dan it-tnaqqis fl-MPV huwiex dovut għal plejtlits akbar u aktar densi maqbuda fis-saff RBC taċ-ċentrifuga.Din l-osservazzjoni tista' tkun importanti għall-kliniċi peress li tista' timplika li l-plejtlits PRP huma subsett iżgħar u inqas dens ta' plejtlits WB.
Fi studju preċedenti, urejna li l-preparazzjoni tal-PRP b'metodi manwali hija rħisa [8].Jekk il-glukożju jissensitizza l-plejtlits tat-tessuti jew il-PRP, u jagħmilhom aktar suxxettibbli għall-attivazzjoni, jew jekk il-PRP jiġi prodott bi proprjetajiet parzjali lisati, dan jista 'jtejjeb ir-riġenerazzjoni u jnaqqas il-ħtieġa għal terapija.Għalhekk, il-kombinazzjoni ta 'PRP u glukożju kkonċentrat ħafna tista' tkun aktar kosteffettiva minn PRP jew glukożju waħdu.
L-istudju tagħna għandu diversi nuqqasijiet.L-ewwel, nużaw PRP miksub minn diversi metodi differenti.Dan jista' jwassal għal riżultati konfliġġenti.It-tieni, ma stajniex nagħmlu analiżi bijokimika ta 'kwalunkwe kampjuni tagħna biex niddeterminaw b'mod aktar preċiż jekk l-attivazzjoni tal-plejtlits kinitx seħħet.Nixtiequ nkejlu P-selectin, fattur tal-plejtlits 4, aggregati tal-plejtlits monoċitiċi, jew markaturi oħra ta 'attivazzjoni tal-plejtlets biex nifhmu aħjar il-grad jew il-preżenza ta' degranulazzjoni tal-granuli alfa, iżda dan huwa lil hinn mill-ambitu ta 'dan l-istudju.It-tielet, ma stajniex nikkonfermaw bil-mikroskopija elettronika jew metodi oħra li ż-żieda fl-MPV fil-plejtlits esposti għall-glukożju kienet dovuta għall-effett fuq it-tħabbil tal-mikrotubuli.
Taħlitiet ta’ WB jew PRP b’25% ta’ glukożju żiedu l-MPV, li jindika l-bidu tal-attivazzjoni tal-plejtlits, għalkemm dan l-istudju ma weriex progressjoni ta’ aggregazzjoni jew degranulazzjoni.It-taħlita ta' glukożju ipertoniku rriżultat f'telf ta' plejtlits, li possibbilment tirrappreżenta effett litiku.Attivazzjoni parzjali jew liżi tal-plejtlits jistgħu jikkawżaw riġenerazzjoni tat-tessuti wara injezzjoni tal-plejtlits.Mhux ċar liema konsegwenzi kliniċi jistgħu jwasslu għal dawn il-bidliet.Studji ulterjuri wrew kejl aktar preċiż ta 'attivazzjoni jew liżi u evalwaw l-effetti kliniċi differenti ta' taħlitiet ta 'glukożju ipertoniku b'WB jew PRP.
It-terapija proliferattiva tal-glukożju hija terapija riġenerattiva sempliċi u rħas li qed tespandi malajr u tappoġġja r-riċerka klinika.Dan l-istudju jissuġġerixxi mekkaniżmu fiżjoloġiku li, jekk jiġi kkonfermat, jista 'jgħinna nifhmu parti mill-mekkaniżmu riġenerattiv tat-terapija proliferattiva.
Bijomedika u Informatika tas-Saħħa fl-Università ta 'Missouri, Kansas City School of Medicine, Kansas City, USA
Suġġetti Umani: Il-parteċipanti kollha f'dan l-istudju taw jew ma tawx il-kunsens.Is-Soċjetà Internazzjonali għall-Mediċina Ċellulari ħarġet l-approvazzjoni ICMS-2017-003.Il-protokoll li ġej ġie approvat għal aktar użu mill-Bord ta' Reviżjoni Istituzzjonali tas-Soċjetà Internazzjonali għall-Mediċina Ċellulari: Titolu: Kalkolu tar-rendiment tal-mediċina fil-plażma b'ħafna plejtlits ibbażat fuq l-għadd tal-plejtlits CBC tal-linja bażi.Suġġetti tal-Annimali: L-awturi kollha kkonfermaw li l-ebda annimal jew tessuti ma kienu involuti f'dan l-istudju.Kunflitti ta' Interess: Skont il-Formola ta' Żvelar Uniformi tal-ICMJE, l-awturi kollha jiddikjaraw dan li ġej: Informazzjoni dwar il-ħlas/servizz: L-awturi kollha jiddikjaraw li ma rċevewx appoġġ finanzjarju minn xi organizzazzjoni għax-xogħol sottomess.Relazzjonijiet Finanzjarji: L-awturi kollha jiddikjaraw li bħalissa jew fl-aħħar tliet snin m'għandhomx relazzjonijiet finanzjarji ma' kwalunkwe organizzazzjoni li tista' tkun interessata fix-xogħol sottomess.Relazzjonijiet Oħra: L-awturi kollha jiddikjaraw li m'hemm l-ebda relazzjonijiet jew attivitajiet oħra li jistgħu jaffettwaw ix-xogħol sottomess.
Harrison TE, Bowler J, Reeves K et al.(17 ta 'Mejju 2022) L-effett tal-glukożju fuq l-għadd u l-volum tal-plejtlits: implikazzjonijiet għall-mediċina riġenerattiva.Vulkanizzar 14(5): e25081.doi:10.7759/cureus.25081
© Copyright 2022 Harrison et al.Dan huwa artiklu ta' aċċess miftuħ imqassam taħt it-termini tal-Liċenzja ta' Attribuzzjoni Creative Commons CC-BY 4.0.Użu, distribuzzjoni u riproduzzjoni illimitati fi kwalunkwe mezz huma permessi, sakemm l-awtur oriġinali u s-sors jiġu kkreditati.