အချို့သော LC ပြဿနာဖြေရှင်းခြင်းအကြောင်းအရာများသည် LC လက်တွေ့တွင် ပြဿနာများရှိနေသဖြင့် အချိန်နှင့်အမျှ တိုးတက်လာသည်နှင့်အမျှ LC လက်တွေ့တွင် ပြဿနာများရှိနေပါသည်။ LC စနစ်တွင် ပြဿနာများဖြစ်ပေါ်လာနိုင်ပြီး အထွတ်အထိပ်ပုံသဏ္ဍာန်တွင် ညံ့ဖျင်းစွာအဆုံးသတ်နိုင်သော နည်းလမ်းများစွာရှိပါသည်။ peak shape နှင့်ပတ်သက်သော ပြဿနာများပေါ်ပေါက်လာသောအခါ၊ ဤရလဒ်များအတွက် ဖြစ်နိုင်ခြေရှိသော အကြောင်းရင်းများစာရင်းတိုသည် ကျွန်ုပ်တို့၏ ပြဿနာဖြေရှင်းခြင်းအတွေ့အကြုံကို ရိုးရှင်းစေသည်။
ဤ “LC ပြဿနာဖြေရှင်းခြင်း” ကော်လံကိုရေးပြီး လစဉ်အကြောင်းအရာများအကြောင်းတွေးရသည်မှာ ပျော်စရာကောင်းပါသည်။ အချို့သောအကြောင်းအရာများသည် စတိုင်လ်မကျသောကြောင့် လစဉ်တိုင်း chromatography သုတေသနနယ်ပယ်တွင် အချို့သောအကြောင်းအရာများ သို့မဟုတ် အကြံဉာဏ်များသည် ခေတ်ဟောင်းနှင့် ပိုမိုကောင်းမွန်သော စိတ်ကူးစိတ်သန်းများဖြင့် အစားထိုးထားသောကြောင့် ပြဿနာဖြေရှင်းခြင်းနယ်ပယ်တွင်၊ ပထမပြဿနာဖြေရှင်းရေးဆောင်းပါးသည် ဤဂျာနယ် 8 (1 ကြိမ်ကတည်းက သက်ဆိုင်ရာ LC ဂျာနယ်တွင် 19 အချိန်ကတည်းက) ရှိနေဆဲဖြစ်သည်) .လွန်ခဲ့သည့်နှစ်အနည်းငယ်အတွင်း၊ ကျွန်ုပ်သည် အရည် chromatography (LC) ကို ထိခိုက်စေသည့် ခေတ်ပြိုင်လမ်းကြောင်းများပေါ်တွင် LC ပြဿနာဖြေရှင်းခြင်းကဏ္ဍများကို အာရုံစိုက်ထားပါသည် (ဥပမာ၊ ထိန်းထားမှုအပေါ် ဖိအားသက်ရောက်မှုကို ကျွန်ုပ်တို့နားလည်မှု၏ နှိုင်းယှဉ်ချက် [2] New Advances) ကျွန်ုပ်တို့၏ LC ရလဒ်များ၏ အဓိပ္ပာယ်ဖွင့်ဆိုချက်နှင့် ခေတ်မီ LC တူရိယာများဖြင့် ပြဿနာဖြေရှင်းနည်းကို ကျွန်ုပ်အာရုံစိုက်ခဲ့ပါသည်။ ဤလ 1 ရက် (20) ခုနှစ် ဒီဇင်ဘာလတွင် စတင်ခဲ့သော ကျွန်ုပ်၏စီးရီး (20) တွင် စတင်ခဲ့သည် LC ပြဿနာဖြေရှင်းခြင်း၏ "ဘဝနှင့်သေခြင်း" ခေါင်းစဉ်များ — ပြဿနာဖြေရှင်းပေးသူတိုင်းအတွက် ကောင်းမွန်သောဒြပ်စင်များသည် ကျွန်ုပ်တို့အသုံးပြုနေသည့်စနစ်၏အသက်အရွယ်ပင်ရှိပါစေ မရှိမဖြစ်လိုအပ်ပါသည်။ ဤစီးရီး၏အဓိကအကြောင်းအရာသည် LCGC ၏ကျော်ကြားသော “LC Troubleshooting Guide” wall chart (4) နှင့် အလွန်သက်ဆိုင်ပါသည်။ ဓာတ်ခွဲခန်းများစွာတွင်ဆွဲထားသော အတွဲများဖြစ်သည်။ ဤစီးရီး၏တတိယအပိုင်းကို အာရုံစိုက်ရန် peak လက္ခဏာများကို ရွေးချယ်ခဲ့သည်။ အထွတ်အထိပ်ပုံသဏ္ဍာန် အားနည်းခြင်း၏ ဖြစ်နိုင်ခြေ အကြောင်းရင်း 44 ခု! ဆောင်းပါးတစ်ပုဒ်တွင် ဤပြဿနာများအားလုံးကို အသေးစိတ် ထည့်သွင်းစဉ်းစား၍မရပါ၊ ထို့ကြောင့် ဤအကြောင်းအရာနှင့် ပတ်သက်၍ ဤပထမပိုင်း၌ ကျွန်တော် အများဆုံးတွေ့ရလေ့ရှိသော အကြောင်းအရာအချို့ကို အာရုံစိုက်ပါမည်။ လူငယ်နှင့် အသက်ကြီးသော LC အသုံးပြုသူများသည် ဤအရေးကြီးသော အကြောင်းအရာအတွက် အထောက်အကူဖြစ်စေမည့် အကြံပြုချက်များနှင့် သတိပေးချက်များကို တွေ့ရှိလိမ့်မည်ဟု မျှော်လင့်ပါသည်။
"ဘာမဆိုဖြစ်နိုင်သည်" ဖြင့် ပြဿနာဖြေရှင်းသည့်မေးခွန်းများကို တိုး၍ဖြေနေခြင်းဖြစ်သည်။ ဤအဖြေသည် အဓိပ္ပာယ်ရခက်သော လေ့လာတွေ့ရှိချက်များကို ထည့်သွင်းစဉ်းစားသည့်အခါ လွယ်ကူပုံပေါ်နိုင်သော်လည်း မကြာခဏ သင့်လျော်သည်ဟု ကျွန်ုပ်တွေ့မြင်ပါသည်။ အထွတ်အထိပ်ပုံသဏ္ဍာန်ညံ့ဖျင်းခြင်း၏ ဖြစ်နိုင်ခြေများစွာရှိသောကြောင့် ပြဿနာဖြစ်နိုင်သည်ကို ထည့်သွင်းစဉ်းစားသည့်အခါတွင် ပွင့်ပွင့်လင်းလင်းရှိရန် အရေးကြီးပြီး ကျွန်ုပ်တို့၏ပြဿနာဖြေရှင်းရေးကြိုးပမ်းအားထုတ်မှုများကို စတင်ရန် ဖြစ်နိုင်ခြေရှိသော အကြောင်းရင်းများကို ဦးစားပေးလုပ်ဆောင်နိုင်ရန် အရေးကြီးပါသည်။ ဤအချက်များကို အဓိကထားလုပ်ဆောင်ရန် အရေးကြီးပါသည်။
ပြဿနာဖြေရှင်းရေးလေ့ကျင့်ခန်းတိုင်းတွင် အဓိကခြေလှမ်းတစ်ခု—သို့သော်လည်း အဆင့်သတ်မှတ်မှုနည်းသည်ဟုထင်သည်—သည် ဖြေရှင်းရန်လိုအပ်သည့်ပြဿနာတစ်ခုရှိနေကြောင်း အသိအမှတ်ပြုခြင်းဖြစ်သည်။ ပြဿနာတစ်ခုရှိနေကြောင်းကို အသိအမှတ်ပြုခြင်းသည် ကိရိယာတွင်ဖြစ်ပျက်နေသည့်အရာများကို သီအိုရီ၊ လက်တွေ့ကျကျအသိပညာနှင့် အတွေ့အကြုံများဖြင့်ပုံဖော်ထားသည့် ကျွန်ုပ်တို့၏မျှော်လင့်ချက်များနှင့်မတူကြောင်း အသိအမှတ်ပြုခြင်း (5) ချောမွေ့သော မက်ထရစ်ပုံသဏ္ဍာန်၊ peakym ကဲ့သို့မဟုတ်ဘဲ ဤနေရာတွင်သာ ရည်ညွှန်းခြင်းဖြစ်သည် (အမှန်အားဖြင့် peakym ကို ချောမွေ့စွာရည်ညွှန်းပါသည်။ ffy၊ ဦးဆောင်အစွန်း၊ tailing စသည်ဖြင့်) နှင့် width တို့ဖြစ်သည်။ အမှန်တကယ် peak ပုံသဏ္ဍာန်အတွက် ကျွန်ုပ်တို့၏မျှော်လင့်ချက်များသည် ရိုးရှင်းပါသည်။ သီအိုရီ (၆) သည် အများစုတွင်၊ Feak ၏ chromatographic peak များသည် အချိုးညီညီဖြစ်သင့်ပြီး ပုံ 1a တွင်ပြထားသည့်အတိုင်း၊ ပုံ 1a တွင်ပြထားသည့်အတိုင်း ကျွန်ုပ်တို့သည် ရှုပ်ထွေးသောအနာဂတ်ဆောင်းပါးတွင်ဖော်ပြထားသည့်အတိုင်း peak width မှ နောက်ထပ်အကြောင်းအရာများကို ဆွေးနွေးပါမည်။ igure 1 သည် စောင့်ကြည့်လေ့လာနိုင်သည့် အခြားဖြစ်နိုင်ချေအချို့ကို ပြသသည်—တစ်နည်းအားဖြင့်၊ အချို့သောနည်းလမ်းများသည် မှားယွင်းသွားနိုင်သည်။ ဤအစီအစဥ်၏လက်ကျန်တွင်၊ ဤပုံသဏ္ဍာန်အမျိုးအစားများဆီသို့ ဦးတည်သွားစေနိုင်သည့် အခြေအနေအချို့ကို အချိန်ဖြုန်းပါမည်။
တခါတရံတွင် အထွတ်အထိပ်များကို ထုတ်ပစ်မည်ဟု မျှော်လင့်ရသည့် chromatogram တွင် လုံးဝမတွေ့ရပါ။ အပေါ်က နံရံဇယားက အထွတ်အထိပ်မရှိခြင်းကို ညွှန်ပြသည် (နမူနာတွင် ပစ်မှတ်ခွဲခြမ်းစိတ်ဖြာမှု အမှန်တကယ်ပါဝင်နေပါက ဆူညံသံအထက်တွင် မြင်နိုင်စေရန် ထောက်လှမ်းတုံ့ပြန်မှု လုံလောက်စေမည့် အာရုံစူးစိုက်မှုတွင် ပါဝင်သည်) သည် များသောအားဖြင့် တူရိယာပြဿနာအချို့ သို့မဟုတ် မှားယွင်းနေသော မိုဘိုင်းအဆင့်အခြေအနေများနှင့် ဆက်စပ်နေပါသည်။အထွတ်အထိပ်များ၊ အများအားဖြင့် အလွန် "အားနည်း")) ဤအမျိုးအစားရှိ ဖြစ်နိုင်ခြေရှိသော ပြဿနာများနှင့် ဖြေရှင်းနည်းများစာရင်းတိုကို ဇယား I တွင် တွေ့ရှိနိုင်ပါသည်။
အထက်တွင်ဖော်ပြခဲ့သည့်အတိုင်း၊ အထွတ်အထိပ်ချဲ့ထွင်ခြင်းအား မည်မျှသည်းခံသင့်သည်ဟူသောမေးခွန်းသည် အနာဂတ်ဆောင်းပါးတွင် ကျွန်ုပ်ဆွေးနွေးမည့် ရှုပ်ထွေးသောအကြောင်းအရာဖြစ်သည်။ ကျွန်ုပ်၏အတွေ့အကြုံမှာ အထွတ်အထိပ်ချဲ့ထွင်မှုသည် သိသာထင်ရှားသောအထွတ်အထိပ်ပုံသဏ္ဍာန်ပြောင်းလဲမှုကြောင့် မကြာခဏလိုက်ပါသွားလေ့ရှိပြီး peak tailing သည် pre-peak သို့မဟုတ် splitting ထက် ပို၍အဖြစ်များပါသည်။ သို့သော်လည်း၊ အနည်းငယ်ကွဲပြားသော proad ဖြစ်ရခြင်းမှာ အကြောင်းရင်းများဖြစ်သည်။
အဆိုပါပြဿနာများအားလုံးကို Troubleshooting LC ၏ယခင်ကိစ္စရပ်များတွင်အသေးစိတ်ဆွေးနွေးထားပြီးဖြစ်သည်၊ ဤအကြောင်းအရာများကိုစိတ်ဝင်စားသောစာဖတ်သူများသည်ဤပြဿနာများ၏ရင်းမြစ်နှင့်ဖြစ်နိုင်ချေရှိသောဖြေရှင်းနည်းများအတွက်အချက်အလက်များအတွက်ယခင်ဆောင်းပါးများကိုကိုးကားနိုင်ပါသည်။အသေးစိတ်အချက်များ။
Peak tailing၊ peak fronting, and splitting အားလုံးကို ဓာတု သို့မဟုတ် ရုပ်ပိုင်းဆိုင်ရာ ဖြစ်စဉ်များကြောင့် ဖြစ်ပေါ်စေနိုင်ပြီး၊ ကျွန်ုပ်တို့သည် ဓာတု သို့မဟုတ် ရုပ်ပိုင်းဆိုင်ရာ ပြဿနာကို ကိုင်တွယ်ဖြေရှင်းခြင်း ရှိ၊ မရှိအပေါ် မူတည်၍ ဤပြဿနာများအတွက် ဖြစ်နိုင်ခြေရှိသော ဖြေရှင်းနည်းများစာရင်းသည် ကျယ်ပြန့်စွာ ကွဲပြားပါသည်။ မကြာခဏဆိုသလို၊ မတူညီသော တောင်ထွတ်များကို chromatogram ဖြင့် နှိုင်းယှဉ်ခြင်းဖြင့်၊ တရားခံသည် မည်သည်၏ အရေးကြီးသော သဲလွန်စများကို ရှာတွေ့နိုင်ပါသည်။ အနည်းငယ်မျှသာ ရုပ်ပိုင်းဆိုင်ရာ ပုံသဏ္ဍာန်အများစုမှာ အထွတ်အထိပ် ဖြစ်ပါက၊ သို့မဟုတ် အချို့သော တောင်ထိပ်များကို ထိခိုက်စေသော်လည်း ကျန်အရာများမှာ ကောင်းမွန်သော်လည်း အကြောင်းရင်းမှာ ဓာတုဗေဒအရ ဖြစ်နိုင်ခြေများပါသည်။
Peak tailing ၏ ဓာတုအကြောင်းရင်းများသည် ဤနေရာတွင် အကျဉ်းချုံးဆွေးနွေးရန် ရှုပ်ထွေးလွန်းပါသည်။ စိတ်ပါဝင်စားသော စာဖတ်သူကို ပိုမိုနက်ရှိုင်းသော ဆွေးနွေးမှု (10) အတွက် “LC Troubleshooting” ၏ မကြာသေးမီက ပြဿနာကို ရည်ညွှန်းပါသည်။သို့သော် ကြိုးစားရန် လွယ်ကူသောအချက်မှာ ထိုးသွင်းထားသော ခွဲခြမ်းစိတ်ဖြာမှု၏ ထုထည်ကို လျှော့ချရန်နှင့် အထွတ်အထိပ်ပုံသဏ္ဍာန် တိုးတက်လာခြင်း ရှိမရှိကို ကြည့်ရှုပါ။ သို့ဆိုလျှင် ဤပြဿနာကို ဖြေရှင်းရန် သေးငယ်သော သဲလွန်စတစ်ခုဖြစ်သည်။ yte ထုထည်များ သို့မဟုတ် ခရိုမာတိုဂရပ်ဖစ်အခြေအနေများကို ပြောင်းလဲရမည်ဖြစ်ပြီး ပိုမိုကြီးမားသော အစုလိုက်အပြုံလိုက် ထိုးသွင်းထားခြင်းဖြင့်ပင် ကောင်းသော အထွတ်အထိပ်ပုံသဏ္ဍာန်များကို ရရှိနိုင်ပါသည်။
Peak tailing အတွက် ဖြစ်နိုင်ချေရှိသော ရုပ်ပိုင်းဆိုင်ရာ အကြောင်းရင်းများစွာလည်း ရှိပါသည်။ ဖြစ်နိုင်ခြေအသေးစိတ် ဆွေးနွေးချက်ကို စိတ်ဝင်စားသော စာဖတ်သူများသည် "LC Troubleshooting" (11) ၏ မကြာသေးမီက ပြဿနာကို ရည်ညွှန်းပါသည်။ peak tailing ၏ နောက်ထပ် အဖြစ်များသော ရုပ်ပိုင်းဆိုင်ရာ အကြောင်းရင်းတစ်ခုမှာ injector နှင့် detector အကြား ချိတ်ဆက်မှု ညံ့ဖျင်းခြင်း (12) ဖြစ်သည်။ လွန်ခဲ့သည့် သီတင်းပတ်က ကျွန်ုပ်တို့ တည်ဆောက်ထားသော အဆို့ရှင်အသစ်ဖြင့် တည်ဆောက်ထားသော ဥပမာကို လွန်ခဲ့သည့် ရက်သတ္တပတ်အနည်းငယ်က ကျွန်ုပ်တို့ ရရှိခဲ့သော ဆေးထိုးသည့်စနစ်က ပုံ 1d ​​တွင် ပြထားသည်။ ယခင်က အသုံးပြုခဲ့ပြီး၊ သံမဏိသွေးကြောမျှင်ပေါ်သို့ ပုံသွင်းထားသည့် ferrule နှင့်အတူ သေးငယ်သော volume injection loop တစ်ခုကို တပ်ဆင်ခဲ့သည်။ ကနဦး ပြဿနာအချို့ကို စမ်းသပ်ပြီးနောက်၊ ဆေးထိုးအဆို့ရှင် stator ရှိ port အတိမ်အနက်သည် ကျွန်ုပ်တို့အသုံးပြုခဲ့ဖူးသည်ထက် များစွာပိုမိုနက်ရှိုင်းကြောင်း သိရှိခဲ့ရပြီး port အောက်ခြေရှိ dead volume အများအပြားကို ဖြစ်ပေါ်စေပါသည်။ ဤပြဿနာကို အောက်ခြေရှိ ပေါက်တ်သေတ္တာ၏နောက်ထပ် volume ဖြင့် ဖယ်ရှားရန်အတွက် ထိုးသွင်းကွင်းကို အစားထိုးခြင်းဖြင့် အလွယ်တကူ ဖြေရှင်းနိုင်ပါသည်။
ပုံ 1e တွင်ပြထားသည့်အတိုင်း အထွတ်အထိပ်မျက်နှာစာများသည် ရုပ်ပိုင်းဆိုင်ရာ သို့မဟုတ် ဓာတုပြဿနာများကြောင့်လည်း ဖြစ်နိုင်သည်။ ဦးဆောင်အစွန်း၏ ဘုံရုပ်ပိုင်းဆိုင်ရာအကြောင်းအရင်းမှာ ကော်လံ၏အမှုန်များကို ကောင်းစွာထုပ်ပိုးခြင်းမရှိသောကြောင့် သို့မဟုတ် အမှုန်များသည် အချိန်ကြာလာသည်နှင့်အမျှ ပြန်လည်ဖွဲ့စည်းထားခြင်းဖြစ်သည်။ ဤရုပ်ပိုင်းဆိုင်ရာဖြစ်စဉ်ကြောင့် ဖြစ်ပေါ်လာသည့် အထွတ်အထိပ်အမြီးများကဲ့သို့ပင်၊ ဤအရာအား ပြင်ဆင်ရန် အကောင်းဆုံးနည်းလမ်းမှာ ကော်လံကို အစားထိုးရန်နှင့် ဆက်လက်လုပ်ဆောင်ရန်ဖြစ်သည်၊ Funda ဟုခေါ်သော ဓာတုဗေဒဆိုင်ရာမူလအစအတိုင်း ဆက်သွားခြင်းဖြစ်သည်။ ” retention conditions. စံပြ (လိုင်းယာ) အခြေအနေအောက်တွင်၊ stationary phase မှ ထိန်းသိမ်းထားသော ခွဲခြမ်းစိတ်ဖြာမှုပမာဏ (ထို့ကြောင့် retention factor) သည် column အတွင်းရှိ analyte ၏ အာရုံစူးစိုက်မှုနှင့် linearly ဆက်နွယ်နေပါသည်။ chromatographically၊ ဆိုလိုသည်မှာ ကော်လံထဲသို့ ထိုးသွင်းထားသော analytes ထုထည် တိုးလာသည်နှင့်အမျှ အထွတ်အထိပ်သည် ပိုမြင့်လာသည်၊ သို့သော် ptention သည် ပိုကျယ်သွားသည်မဟုတ်ပေ။ ဤဆက်ဆံရေးသည် ပိုကျယ်လာသည်နှင့်အမျှ ဆက်နွယ်မှုမှာ ပိုကျယ်လာသည်မဟုတ်ပေ။ ဒြပ်ထုကို ပိုမိုထိုးသွင်းပါသည်။ ထို့အပြင်၊ လမ်းကြောင်းမဟုတ်သောပုံသဏ္ဍာန်များသည် ခရိုမာတိုဂရပ်ဖစ်တောင်ထွတ်များ၏ပုံသဏ္ဍာန်ကို အဆုံးအဖြတ်ပေးကာ ထိပ် သို့မဟုတ် နောက်လိုက်အစွန်းများကို ဖြစ်ပေါ်စေပါသည်။ Peak tailing (10) ကိုဖြစ်စေသော အစုလိုက်အပြုံလိုက်ဝန်ပိုနှင့်အတူ၊ လိုင်းမဟုတ်သောထိန်းထားခြင်းကြောင့်ဖြစ်ရသည့် အထွတ်အထိပ်ကို ခွဲခြမ်းစိပ်ဖြာထားသည့် ခွဲခြမ်းစိတ်ဖြာမှုပမာဏကို လျှော့ချခြင်းဖြင့်လည်း စစ်ဆေးနိုင်သည်။ Peak ပုံသဏ္ဍာန်ကောင်းမွန်လာပါက၊ ဆေးထိုးသည့်အခြေအနေများထက် မပိုစေရပါ။ ဤအပြုအမူကို ကျင့်သုံးပါ။
တစ်ခါတစ်ရံတွင် ပုံ 1f တွင်ပြထားသည့်အတိုင်း "ခွဲခြမ်း" အထွတ်အထိပ်ဖြစ်ပုံရသည်ကို ကျွန်ုပ်တို့သတိပြုမိပါသည်။ ဤပြဿနာကိုဖြေရှင်းရာတွင် ပထမအဆင့်မှာ တစ်စိတ်တစ်ပိုင်းပေါင်းစပ်လိုက်ခြင်းကြောင့်ဖြစ်မဖြစ် ဆုံးဖြတ်ရန်ဖြစ်သည် (ဆိုလိုသည်မှာ ကွဲပြားသော်လည်း နီးနီးကပ်ကပ် eluting ဒြပ်ပေါင်းနှစ်ခုရှိနေခြင်း)။ အမှန်တကယ်ကွဲပြားသောခွဲခြမ်းစိတ်ဖြာချက်နှစ်ခုရှိလျှင် တစ်ပြိုင်နက်တည်း ချဲ့ထွင်ခြင်း (သို့) ၎င်းတို့၏ဖြေရှင်းနိုင်စွမ်းကို ပြန်လည်ရေတွက်ခြင်း သို့မဟုတ် ချဲ့ထွင်ခြင်းအတွက် ပိုမိုကောင်းမွန်သောအချက်ဖြစ်သည်။ "ခွဲခြမ်း" သည့် တောင်ထိပ်များသည် ရုပ်ပိုင်းဆိုင်ရာ စွမ်းဆောင်ရည်နှင့် သက်ဆိုင်သည်ဆိုသည်မှာ ကော်လံကိုယ်တိုင်နှင့် ဘာမှမဆိုင်ပါ။ မကြာခဏဆိုသလို၊ ဤဆုံးဖြတ်ချက်အတွက် အရေးကြီးဆုံးသဲလွန်စမှာ chromatogram ရှိ အထွတ်အထိပ်များအားလုံးသည် ခွဲထွက်ပုံသဏ္ဍာန်များ ပြသခြင်းရှိမရှိ သို့မဟုတ် တစ်ခု သို့မဟုတ် နှစ်ခုမျှသာဖြစ်သည်။ ၎င်းသည် တစ်ခု သို့မဟုတ် နှစ်ခုသာ ဖြစ်ပါက၊ ၎င်းသည် ပူးပေါင်းရွေးချယ်သည့် ပြဿနာဖြစ်နိုင်သည်။အထွတ်အထိပ်များအားလုံးကို ပိုင်းခြားထားလျှင် ၎င်းသည် ကော်လံကိုယ်တိုင်နှင့် ဆက်စပ်နိုင်ခြေများသော ရုပ်ပိုင်းဆိုင်ရာပြဿနာတစ်ခု ဖြစ်နိုင်သည်။
ကော်လံကိုယ်နှိုက်၏ ရုပ်ပိုင်းဆိုင်ရာ ဂုဏ်သတ္တိများနှင့် ဆက်စပ်သော ခွဲခြမ်းများသည် များသောအားဖြင့် တစ်စိတ်တစ်ပိုင်း ပိတ်ဆို့ထားသော ဝင်ပေါက် သို့မဟုတ် ထွက်ပေါက်အစွန်းကွက်များ သို့မဟုတ် ကော်လံရှိ အမှုန်များကို ပြန်လည်ဖွဲ့စည်းခြင်းကြောင့်ဖြစ်ပြီး၊ ကော်လံချန်နယ်ဖွဲ့စည်းခြင်း၏ အချို့နေရာများတွင် မိုဘိုင်းအဆင့်ထက် မိုဘိုင်းအဆင့်ကို ပိုမိုမြန်ဆန်စွာ စီးဆင်းစေပါသည်။ အခြားဒေသများတွင် (11) အချို့သော ပိတ်ဆို့နေသော ဖရစ်များကို တစ်ခါတစ်ရံ ကော်လံကိုပြောင်းပြန်လှန်ခြင်းဖြင့် ရှင်းလင်းနိုင်သည်။သို့သော်လည်း၊ ကျွန်ုပ်၏ အတွေ့အကြုံအရ၊ ၎င်းသည် ရေရှည်ဖြေရှင်းချက်ထက် ရေတိုရေတိုဖြစ်သည်။ အမှုန်များသည် ကော်လံအတွင်း ပြန်လည်ပေါင်းစည်းပါက ခေတ်မီကော်လံများနှင့် မကြာခဏ သေဆုံးတတ်သည်။ ဤအခြေအနေတွင်၊ ကော်လံကို အစားထိုးပြီး ရှေ့ဆက်ရန် အကောင်းဆုံးဖြစ်သည်။
ပုံ 1g ရှိ၊ ကျွန်ုပ်၏ကိုယ်ပိုင်ဓာတ်ခွဲခန်းရှိ မကြာသေးမီကဖြစ်ရပ်မှလည်း အထွတ်အထိပ်သည် တုံ့ပြန်မှုအကွာအဝေး၏အမြင့်ဆုံးသို့ရောက်ရှိသွားသည့်အတွက် အချက်ပြမှုသည် အလွန်မြင့်မားကြောင်း ညွှန်ပြပါသည်။ optical absorbance detectors (ဤအခြေအနေတွင် UV-vis) အတွက် ခွဲခြမ်းစိတ်ဖြာမှုအာရုံစူးစိုက်မှုအလွန်မြင့်မားလာသောအခါတွင်၊ ပိုင်းခြားစိတ်ဖြာချက်သည် အဆိုပါ detector ဆဲလ်များမှဖြတ်သန်းသွားသော အလင်းအများစုကို စုပ်ယူသွားပြီး၊ အလင်းအနည်းငယ်မျှသာရှိသော အခြေအနေများကို ဓါတ်ပုံမှမတွေ့ရှိနိုင်ပါ။ အလင်းနှင့် "မှောင်သောလျှပ်စီးကြောင်း" ကဲ့သို့သော၊ အသွင်အပြင်တွင် အချက်ပြမှုကို အလွန် "မပီမသ" ဖြစ်စေပြီး ခွဲခြမ်းစိတ်ဖြာမှုအာရုံစူးစိုက်မှုမှ ကင်းလွတ်စေသည်။ဒီလိုဖြစ်လာတဲ့အခါ၊ ခွဲခြမ်းစိတ်ဖြာမှုပမာဏကို လျှော့ချခြင်း- ဆေးထိုးပမာဏကို လျှော့ချခြင်း၊ နမူနာကို ဖျော့ခြင်း သို့မဟုတ် နှစ်မျိုးလုံးဖြင့် အလွယ်တကူ ဖြေရှင်းနိုင်သည် ။
chromatography ကျောင်းတွင်၊ ကျွန်ုပ်တို့သည် detector signal (ဆိုလိုသည်မှာ chromatogram ရှိ y-axis) ကို နမူနာရှိ ခွဲခြမ်းစိတ်ဖြာမှု အာရုံစူးစိုက်မှု၏ ညွှန်ပြချက်တစ်ခုအဖြစ် အသုံးပြုပါသည်။ ထို့ကြောင့် သုညအောက်ရှိ chromatogram တစ်ခုအား တွေ့ရခြင်းမှာ ထူးဆန်းပုံရသည်၊ ရိုးရှင်းသော အဓိပ္ပာယ်ဖွင့်ဆိုချက်မှာ ၎င်းသည် အနုတ်လက္ခဏာ ခွဲခြမ်းစိတ်ဖြာမှု အာရုံစူးစိုက်မှုအား ညွှန်ပြနေသောကြောင့်ဖြစ်သည်၊ ၎င်းသည် ရုပ်ပိုင်းဆိုင်ရာအရ မဖြစ်နိုင်ပေ။ ကျွန်ုပ်၏ အတွေ့အကြုံအရ၊ မကြာခဏဆိုသလို UV စုပ်ယူနိုင်မှု အမြင့်ဆုံးကို အသုံးပြုနေသည်)။
ဤကိစ္စတွင်၊ အနုတ်လက္ခဏာဆောင်သည့် အမြင့်ဆုံးဆိုသည်မှာ ရိုးရိုးရှင်းရှင်းပင်ဆိုလိုသည်မှာ ကော်လံမှထုတ်လွှတ်သော မော်လီကျူးများသည် အမြင့်ဆုံးအဆင့်မတိုင်မှီနှင့် ပြီးနောက် မိုဘိုင်းအဆင့်ထက် အလင်းနည်းနည်းကို စုပ်ယူနိုင်သည်။ ဥပမာအားဖြင့်၊ လှိုင်းအလျားအတော်လေးနိမ့်သော (<230 nm) နှင့် လှိုင်းအလျားတွင် အလင်းအများစုကို စုပ်ယူနိုင်သော မိုဘိုင်းအဆင့် ပေါင်းထည့်ပစ္စည်းများကို အသုံးပြုသည့်အခါ ၎င်းသည် ဖြစ်ပေါ်လာနိုင်သည်။ ဤကဲ့သို့သော အပိုပစ္စည်းများသည် မိုဘိုင်ဖဆနိတ် သို့မဟုတ် သတ္တုဓာတ်ကဲ့သို့သော သတ္တုဓာတ်များကဲ့သို့ အစိတ်အပိုင်းများဖြစ်သည်။ ne သည် ချိန်ညှိမျဉ်းကွေးကို ပြင်ဆင်ရန်နှင့် တိကျသော အရေအတွက်အချက်အလက်များကိုရရှိရန် အနုတ်အထွတ်အထိပ်များကို အမှန်တကယ်အသုံးပြုနိုင်သည်၊ ထို့ကြောင့် ၎င်းတို့ကိုရှောင်ရှားရန် အခြေခံအကြောင်းရင်းများမရှိပါ (ဤနည်းလမ်းကို တစ်ခါတစ်ရံ "indirect UV detection" ဟုရည်ညွှန်းသည်) (13)။သို့သော်၊ ကျွန်ုပ်တို့ အမှန်တကယ်ရှောင်ရှားလိုပါက၊ စုပ်ယူမှုရှာဖွေတွေ့ရှိမှုတွင်၊ မိုဘိုင်းစုပ်ယူမှုအဆင့်ထက် ကွဲပြားသောနည်းလမ်းကို အသုံးပြုရန် အကောင်းဆုံးဖြေရှင်းချက်မှာ လှိုင်းစုပ်ယူမှုကို ပိုမိုအသုံးပြုရန်ဖြစ်သည်။ မိုလ်ဘိုင်းအဆင့်၏ အလင်းကို ခွဲခြမ်းစိတ်ဖြာချက်များထက် နည်းအောင် စုပ်ယူနိုင်စေရန်။
နမူနာရှိ ခွဲခြမ်းစိတ်ဖြာမှုမှလွဲ၍ အခြားအစိတ်အပိုင်းများ၏ အလင်းယိုင်အညွှန်းကိန်း (RI) ထောက်လှမ်းမှုကို အသုံးပြုသည့်အခါတွင်လည်း အနုတ်လက္ခဏာပြသည့် အထွတ်အထိပ်များသည် မိုဘိုင်းအဆင့်၏ အလင်းယိုင်အညွှန်းကိန်းနှင့် ကွဲပြားပါသည်။ ၎င်းသည် UV-vis detection ဖြင့် ဖြစ်တတ်သော်လည်း၊ ဤအကျိုးသက်ရောက်မှုသည် RI ထောက်လှမ်းမှုတွင် အနည်းငယ်ပိုနီးစပ်သော ပါဝင်မှုနှစ်ခုလုံးတွင် သေးငယ်သော peak ကို နမူနာအားဖြင့် နှိုင်းယှဥ်နိုင်သည် ။ မိုဘိုင်းအဆင့်၏
LC ပြဿနာဖြေရှင်းခြင်း၏ အခြေခံအကြောင်းအရာ အပိုင်းသုံးတွင်၊ လေ့လာတွေ့ရှိထားသော အထွတ်အထိပ်ပုံသဏ္ဍာန်သည် မျှော်လင့်ထားသည့် သို့မဟုတ် ပုံမှန်အထွတ်အထိပ်ပုံသဏ္ဍာန်နှင့် ကွာခြားသည့် အခြေအနေများကို ဆွေးနွေးခဲ့သည်။ ထိုပြဿနာများ၏ ထိရောက်သောပြဿနာများကို ဖြေရှင်းခြင်းသည် မျှော်မှန်းထားသည့် peak ပုံသဏ္ဍာန်များ (သီအိုရီ သို့မဟုတ် ယခင်အတွေ့အကြုံအရ ရှိပြီးသားနည်းလမ်းများကို အခြေခံ၍) အသိပညာဖြင့် စတင်သည်၊ ထို့ကြောင့် အဆိုပါမျှော်လင့်ချက်များမှ သွေဖည်သွားသည်မှာ ထင်ရှားပါသည်။ Peak ပုံသဏ္ဍာန်ပြဿနာများသည် အမြီးပိုင်း၊ ကွဲပြားနိုင်သည့်အလားအလာများစွာရှိသည်။ ကျွန်တော်မကြာခဏတွေ့နေရသည့်အကြောင်းရင်းများ။ဤအသေးစိတ်အချက်အလက်များကိုသိခြင်းက ပြဿနာဖြေရှင်းခြင်းစတင်ရန် နေရာကောင်းတစ်ခုပေးစွမ်းသော်လည်း ဖြစ်နိုင်ခြေအားလုံးကို ဖမ်းဆုပ်မထားပါ။ ပိုမိုနက်ရှိုင်းသောအကြောင်းရင်းများနှင့် ဖြေရှင်းချက်များကို စိတ်ဝင်စားသောစာဖတ်သူများသည် LCGC “LC Troubleshooting Guide” နံရံကပ်ဇယားကို ကိုးကားနိုင်ပါသည်။
(၄) LCGC “LC ပြဿနာဖြေရှင်းခြင်းလမ်းညွှန်” နံရံကပ်ဇယား။https://www.chromatographyonline.com/view/troubleshooting-wallchart (2021)။
(၆) A. Felinger၊ Chromatography တွင် ဒေတာခွဲခြမ်းစိတ်ဖြာခြင်းနှင့် အချက်ပြလုပ်ဆောင်ခြင်း (Elsevier, New York, NY, 1998), စစ. ၄၃-၉၆။
(၈) Wahab MF, Dasgupta PK, Kadjo AF နှင့် Armstrong DW, Anal.Chim.Journal.Rev.907၊ 31–44 (2016)။https://doi.org/10.1016/j.aca.2015.11.043။