Nature.com ကိုလာရောက်လည်ပတ်တဲ့အတွက် ကျေးဇူးတင်ပါတယ်။သင်အသုံးပြုနေသောဘရောက်ဆာဗားရှင်းတွင် CSS ပံ့ပိုးမှုအကန့်အသတ်ရှိသည်။အကောင်းဆုံးအတွေ့အကြုံအတွက်၊ အပ်ဒိတ်လုပ်ထားသောဘရောက်ဆာ (သို့မဟုတ် Internet Explorer တွင် လိုက်ဖက်ညီသောမုဒ်ကိုပိတ်ပါ) ကိုအသုံးပြုရန် ကျွန်ုပ်တို့အကြံပြုအပ်ပါသည်။ဤအတောအတွင်း၊ ဆက်လက်ပံ့ပိုးမှုသေချာစေရန်၊ ပုံစံများနှင့် JavaScript မပါဘဲ ဝဘ်ဆိုက်ကို တင်ဆက်ပါမည်။
ထိန်းမရသောသွေးထွက်ခြင်းသည် သေဆုံးခြင်း၏ အဓိကအကြောင်းရင်းတစ်ခုဖြစ်သည်။လျင်မြန်သော သွေးခြေဥခြင်းကို ရရှိခြင်းသည် တိုက်ပွဲ၊ ယာဉ်မတော်တဆမှုနှင့် သေဆုံးမှုလျှော့ချရေး လုပ်ငန်းများတွင် ရှေးဦးသူနာပြုစုခြင်းအဖြစ် ဘာသာရပ်၏ ရှင်သန်မှုကို သေချာစေသည်။စဉ်ဆက်မပြတ်အဆင့်အဖြစ် ရိုးရိုး hemostatic film-forming composition (HFFC) မှဆင်းသက်လာသော နာနိုပရိုဖိုက်ဘာ-အားဖြည့်ပေါင်းစပ်ထားသော Scaffold (NFRCS) သည် သွေးခဲခြင်းကို အစပျိုးနိုင်ပြီး တိုးမြှင့်နိုင်သည်။NFRCS ၏ ဖွံ့ဖြိုးတိုးတက်မှုသည် ပုစဉ်းပျံတောင်ပံ၏ ဒီဇိုင်းကို အခြေခံထားသည်။ပုစဉ်းပျံတောင်ပံဖွဲ့စည်းပုံတွင် အလျားလိုက်နှင့် အလျားလိုက်အတောင်များ ပါဝင်ပြီး microstructure ၏ ခိုင်မာမှုကို ထိန်းသိမ်းရန် တောင်ပံအမြှေးပါးများသည် တစ်ခုနှင့်တစ်ခု ချိတ်ဆက်ထားသည်။HFFC သည် ဖိုက်ဘာမျက်နှာပြင်ကို နာနိုမီတာအထူ ဖလင်ဖြင့် ညီညီစွာ ဖုံးအုပ်ထားပြီး နာနိုပိုဆန်သော ဖွဲ့စည်းတည်ဆောက်ပုံအဖြစ် ကျပန်းဖြန့်ဝေထားသော ဝါဂွမ်းအထူ (Ct) (ကွဲလွဲနေသောအဆင့်) ကို ချိတ်ဆက်ပေးသည်။စဉ်ဆက်မပြတ်နှင့် ပြန့်ကျဲနေသော အဆင့်များ ပေါင်းစပ်ခြင်းသည် စီးပွားဖြစ်ရရှိနိုင်သော ထုတ်ကုန်များနှင့် နှိုင်းယှဉ်ပါက ထုတ်ကုန်၏ ကုန်ကျစရိတ်ကို ဆယ်ဆ လျော့နည်းစေသည်။ပြုပြင်ထားသော NFRCS (tampons သို့မဟုတ် လက်ပတ်များ) ကို ဇီဝဆေးပညာဆိုင်ရာ အသုံးချပရိုဂရမ်အမျိုးမျိုးတွင် အသုံးပြုနိုင်ပါသည်။Vivo လေ့လာမှုများတွင် တီထွင်ထားသော Cp NFRCS သည် အပလီကေးရှင်း၏ site တွင် coagulation ဖြစ်စဉ်ကို အစပျိုးပြီး အားကောင်းစေသည်ဟု ကောက်ချက်ချထားသည်။NFRCS သည် ခွဲစိတ်မှုပုံစံတွင် အနာကျက်ခြင်းကို ပိုမိုကောင်းမွန်စေသည့် ၎င်း၏ နာနိုပိုဆန်သောဖွဲ့စည်းပုံကြောင့် သေးငယ်သောပတ်ဝန်းကျင်ကို ပြုပြင်ပြောင်းလဲနိုင်ပြီး ဆဲလ်လူလာအဆင့်တွင် လုပ်ဆောင်နိုင်သည်။
တိုက်ပွဲအတွင်း၊ ခွဲစိတ်ကုသမှုနှင့် အရေးပေါ်အခြေအနေများတွင် မထိန်းချုပ်နိုင်သော သွေးထွက်လွန်မှုသည် ဒဏ်ရာရရှိသူများ၏ အသက်ကို ဆိုးရွားစွာ ခြိမ်းခြောက်မှုဖြစ်စေနိုင်သည် ၁။ဤအခြေအနေများသည် သွေးကြောဆိုင်ရာ ခုခံအား အလုံးစုံ တိုးမြင့်လာကာ သွေးယိုစိမ့်မှု ဖြစ်စေသည်။ခွဲစိတ်မှုအတွင်းနှင့် ခွဲစိတ်ပြီးနောက် သွေးထွက်ခြင်းကို ထိန်းချုပ်ရန် သင့်လျော်သောအစီအမံများကို အသက်အန္တရာယ်ဖြစ်စေနိုင်သည် ၂၊၃။ကြီးမားသောရေယာဉ်များပျက်စီးခြင်းကြောင့် ကြီးမားသောသွေးဆုံးရှုံးမှုကိုဖြစ်ပေါ်စေပြီး တိုက်ပွဲတွင်သေဆုံးမှုနှုန်း ≤ 50% နှင့် ခွဲစိတ်မှုအတွင်း 31% 1.ကြီးမားသော သွေးဆုံးရှုံးမှုသည် နှလုံးထုတ်လွှတ်မှုကို လျော့နည်းစေသည့် ခန္ဓာကိုယ်ထုထည်ကို ကျဆင်းစေသည်။စုစုပေါင်းအစွန်သွေးကြောခုခံမှုတိုးလာခြင်းနှင့် microcirculation ၏တိုးတက်မှုနှုန်းချို့ယွင်းခြင်းသည်အသက်ကိုထောက်ပံ့သောအင်္ဂါများတွင် hypoxia ကိုဖြစ်ပေါ်စေသည်။ထိရောက်သော စွက်ဖက်မှု 1,4,5 မရှိဘဲ အခြေအနေ ဆက်လက်ရှိနေပါက သွေးယိုစိမ့်မှု ဖြစ်ပေါ်နိုင်သည်။အခြားနောက်ဆက်တွဲပြဿနာများတွင် အပူချိန်နိမ့်ကျခြင်းနှင့် ဇီဝဖြစ်စဉ်အက်ဆစ်ဓာတ်တိုးလာခြင်းအပြင် သွေးခဲခြင်းဖြစ်စဉ်ကို ဟန့်တားသော သွေးခဲခြင်းဆိုင်ရာရောဂါတို့ ပါဝင်ပါသည်။ပြင်းထန်သော သွေးလွန်ချောက်ချားမှုသည် သေဆုံးနိုင်ခြေ 6,7,8 နှင့် ဆက်စပ်နေသည်။အဆင့် III (တိုးတက်မှု) ရှော့ခ်တွင်၊ ခွဲစိတ်ကုသမှုခံယူခြင်းနှင့် ခွဲစိတ်ပြီးနောက်ပိုင်း နာမကျန်းမှုနှင့် သေဆုံးမှုအတွင်း လူနာအသက်ရှင်နိုင်ရေးအတွက် သွေးသွင်းခြင်းသည် မရှိမဖြစ်လိုအပ်ပါသည်။အထက်ဖော်ပြပါ အသက်အန္တရာယ်ရှိသော အခြေအနေများကို ကျော်လွှားနိုင်ရန်၊ ရေတွင်ပျော်ဝင်နိုင်သော hemostatic ပိုလီမာများပေါင်းစပ်အသုံးပြု၍ အနည်းဆုံးပေါ်လီမာအာရုံစူးစိုက်မှု (0.5%) ကိုအသုံးပြုသည့် နာနိုပိုလိုဖိုက်ဘာ-အားဖြည့်ပေါင်းစပ်ထားသော Scaffold (NFRCS) ကို တီထွင်ထားပါသည်။
အမျှင်ဓာတ်အားဖြည့်အသုံးပြုခြင်းဖြင့် ကုန်ကျစရိတ်သက်သာသော ထုတ်ကုန်များကို တီထွင်နိုင်မည်ဖြစ်သည်။ကျပန်းစီစဉ်ထားသော အမျှင်များသည် အတောင်ပံပေါ်ရှိ အလျားလိုက်နှင့် ဒေါင်လိုက်အစင်းကြောင်းများဖြင့် ဟန်ချက်ညီသော ပုစဉ်းပျံတောင်ပံများ၏ ဖွဲ့စည်းပုံနှင့် ဆင်တူသည်။တောင်ပံ၏အလျားလိုက်နှင့် အလျားလိုက်သွေးပြန်ကြောများသည် တောင်ပံအမြှေးပါးနှင့် ဆက်သွယ်သည် (ပုံ။ ၁)။NFRCS တွင် ပိုမိုကောင်းမွန်သော ရုပ်ပိုင်းဆိုင်ရာနှင့် စက်ပိုင်းဆိုင်ရာ ကြံ့ခိုင်မှုရှိသော Scaffold System အဖြစ် အားဖြည့်ထားသော Ct ပါ၀င်သည် (ပုံ 1)။တတ်နိုင်မှုနှင့် လက်မှုပညာကြောင့် ခွဲစိတ်ဆရာဝန်များသည် ခွဲစိတ်ခန်းနှင့် အဝတ်အစားများအတွင်း ချည်ချည်ကြိုး (Ct) ကို အသုံးပြုလိုကြသည်။ ထို့ကြောင့်၊ > 90% ပုံဆောင်ခဲဆဲလ်လူလိုစ (90% ပုံဆောင်ခဲဆဲလ်လူလိုစ) အပါအဝင် ၎င်း၏အကျိုးကျေးဇူးများစွာကို ထည့်သွင်းစဉ်းစားခြင်းဖြင့် Ct ကို NFRCS9,10 ၏ အရိုးစုစနစ်အဖြစ် အသုံးပြုခဲ့သည်။ ထို့ကြောင့်၊ > 90% ပုံဆောင်ခဲဆဲလ်လူလိုစ (90% ပုံဆောင်ခဲဆဲလ်လူလိုစ) အပါအဝင် ၎င်း၏အကျိုးကျေးဇူးများစွာကို ထည့်သွင်းစဉ်းစားခြင်းဖြင့် Ct ကို NFRCS9,10 ၏ အရိုးစုစနစ်အဖြစ် အသုံးပြုခဲ့သည်။ Следовательно, учитывая его многочисленные преимущества, в том числе > 90% кристаллической целислой целисло мостатической активности), Ct использовали в качестве скелетной системы NFRCS9,10။ ထို့ကြောင့်၊ >90% ပုံဆောင်ခဲဆဲလ်လူလိုစ့် (သွေးပြန်ကြောလှုပ်ရှားမှုတွင်ပါ၀င်သည်) အပါအဝင် ၎င်း၏အကျိုးကျေးဇူးများစွာကိုပေး၍ Ct ကို NFRCS အရိုးစုစနစ်9,10 အဖြစ်အသုံးပြုခဲ့သည်။因此, 考虑到的的多重益处> 90% 的结晶纤维素结晶结晶结晶结晶结晶结晶结晶结晶结晶结晶纤维素纤维素结晶 (有助于增强止血活性), ct 被用作 nfrcs9.10 的的的的။因此，考虑到它的多重益处，包括> 90%ထို့ကြောင့်၊ 90% ပုံဆောင်ခဲဆဲလ်လူလိုစ့် (သွေးပြန်ကြောလှုပ်ရှားမှုကို မြှင့်တင်ပေးသည်) အပါအဝင် ၎င်း၏များစွာသောအကျိုးကျေးဇူးများကိုပေး၍ Ct ကို NFRCS9,10 အတွက် Scaffold အဖြစ်အသုံးပြုခဲ့သည်။Ct ကို အပေါ်ယံအကာဖြင့် ဖုံးအုပ်ထားသည် (နာနို-အထူ ဖလင်ဖွဲ့စည်းမှုကို သတိပြုမိသည်) နှင့် သွေးပြန်ကြောဖွဲ့စည်းမှု ဖွဲ့စည်းမှု (HFFC) နှင့် အပြန်အလှန် ချိတ်ဆက်ထားသည်။HFFC သည် မက်ထရီဂျယ်ကဲ့သို့ လုပ်ဆောင်သည်၊ ကျပန်း Ct ကို အတူတကွ ကိုင်ဆောင်ထားသည်။တီထွင်ထားသော ဒီဇိုင်းသည် ပြန့်ကျဲနေသော အဆင့် (အမျှင်များကို အားဖြည့်ပေးသည်) အတွင်း ဖိအားကို ပေးပို့သည်။ပိုလီမာပါဝင်မှု အနည်းဆုံးဖြင့် ကောင်းသော စက်ပိုင်းဆိုင်ရာ ခိုင်ခံ့မှုရှိသော နာနိုပိုဆန် အဆောက်အဦများ ရရှိရန် ခက်ခဲသည်။ထို့အပြင်၊ မတူညီသောဇီဝဆေးပညာဆိုင်ရာအသုံးချမှုများအတွက် မတူညီသောမှိုများကို စိတ်ကြိုက်ပြင်ဆင်ရန် မလွယ်ကူပါ။
ပုံတွင် ပုစဉ်းပျံတောင်ပံတည်ဆောက်ပုံ (A) ကိုအခြေခံ၍ NFRCS ဒီဇိုင်းပုံတစ်ပုံကို ပြထားသည်။ဤပုံသည် ပုစဉ်းတစ်ကောင်၏ တောင်ပံဖွဲ့စည်းပုံ၏ နှိုင်းယှဥ်ပုံ (အတောင်ပံ၏ ဖြတ်ပိုင်းနှင့် အရှည်လိုက် သွေးကြောများ အပြန်အလှန်ချိတ်ဆက်ထားသည်) နှင့် Cp NFRCS (B) ၏ အပိုင်းလိုက်ဓာတ်ပုံမိုက်ခရိုဂရပ်ဖ်ကို ပြသထားသည်။NFRCS ၏ သရုပ်ဖော်ပုံ
NFRC များသည် အထက်ဖော်ပြပါ ကန့်သတ်ချက်များကို ဖြေရှင်းရန် စဉ်ဆက်မပြတ် အဆင့်အဖြစ် HFFC ကို အသုံးပြု၍ တီထွင်ခဲ့သည်။HFFC တွင် ချီတိုဆန် (ပင်မ hemostatic ပိုလီမာအဖြစ်) အပါအဝင် အမျိုးမျိုးသော ဖလင်ဖြင့်ဖွဲ့စည်းထားသော သွေးပြန်ကြောပိုလီမာများဖြင့် ပေါင်းစပ်ဖွဲ့စည်းထားသည်၊ဖွဲ့စည်းခြင်း။polyvinylpyrrolidine K30 (PVP K30) သည် NFRCS ၏ အစိုဓာတ်စုပ်ယူမှုစွမ်းရည်ကို တိုးတက်စေသည်။Polyethylene glycol 400 (PEG 400) ကို ချည်နှောင်ထားသော ပေါ်လီမာရောစပ်မှုများတွင် ပိုလီမာဖြတ်ကျော်ချိတ်ဆက်ခြင်းကို ပိုမိုကောင်းမွန်စေရန် ထည့်သွင်းထားပါသည်။မတူညီသော HFFC သွေးပြန်ကြောဖွဲ့စည်းမှုသုံးမျိုး (Cm HFFC၊ Ch HFFC နှင့် Cp HFFC)၊ အမည်ရ MC (Cm နှင့် Chitosan)၊ HPMC (Ch) နှင့် chitosan နှင့် PVA (Cp) နှင့်အတူ chitosan ကို Ct သို့ အသုံးချခဲ့သည်။vitro နှင့် vivo characterization အမျိုးမျိုးသောလေ့လာမှုများက NFRCS ၏ hemostatic နှင့်အနာကိုကုသခြင်းလုပ်ဆောင်မှုကိုအတည်ပြုခဲ့သည်။NFRCS မှ ပံ့ပိုးပေးသော ပေါင်းစပ်ပစ္စည်းများကို သီးခြားလိုအပ်ချက်များပြည့်မီရန် ငြမ်းပုံစံအမျိုးမျိုးကို စိတ်ကြိုက်ပြင်ဆင်နိုင်သည်။
ထို့အပြင်၊ NFRCS သည် အောက်ပိုင်းနှင့် ခန္ဓာကိုယ်၏ အခြားအစိတ်အပိုင်းများ၏ ဒဏ်ရာဧရိယာတစ်ခုလုံးကို ဖုံးအုပ်ရန် ပတ်တီး သို့မဟုတ် လိပ်အဖြစ် ပြုပြင်နိုင်သည်။အထူးသဖြင့် တိုက်ခိုက်ရေးခြေလက်ဒဏ်ရာများအတွက် ဒီဇိုင်းထုတ်ထားသည့် NFRCS ဒီဇိုင်းကို လက်တစ်ခြမ်း သို့မဟုတ် ခြေတစ်ဖက်အပြည့် (နောက်ဆက်တွဲပုံ S11) သို့ ပြောင်းလဲနိုင်သည်။NFRCS ကို ပြင်းထန်စွာသတ်သေသော လက်ကောက်ဝတ်ဒဏ်ရာများမှ သွေးထွက်ခြင်းကိုရပ်တန့်ရန် တစ်ရှူးကော်ဖြင့် လက်ပတ်အဖြစ် ပြုလုပ်နိုင်သည်။ကျွန်ုပ်တို့၏ အဓိကပန်းတိုင်မှာ လူဦးရေများပြားသော (ဆင်းရဲမွဲတေမှုမျဉ်းအောက်) နှင့် ရှေးဦးသူနာပြုစုနည်းတွင် ထည့်ထားနိုင်သော ပေါ်လီမာအနည်းငယ်သာရှိသော NFRCS ကို တီထွင်ရန်ဖြစ်သည်။ဒီဇိုင်းတွင် ရိုးရှင်းသော၊ ထိရောက်ပြီး ချွေတာသော၊ NFRCS သည် ဒေသခံလူထုကို အကျိုးပြုပြီး ကမ္ဘာလုံးဆိုင်ရာ အကျိုးသက်ရောက်မှုရှိနိုင်ပါသည်။
Chitosan (မော်လီကျူးအလေးချိန် 80 kDa) နှင့် amaranth ကို အိန္ဒိယနိုင်ငံ Merck မှ ဝယ်ယူခဲ့သည်။Hydroxypropyl methylcellulose 50 Cp၊ polyethylene glycol 400 နှင့် methylcellulose ကို Loba Chemie Pvt မှ ဝယ်ယူခဲ့သည်။LLC၊ မွမ်ဘိုင်း။ပိုလီဗီနိုင်အယ်လ်ကိုဟော (မော်လီကျူးအလေးချိန် 125 kDa) (87-90% ဟိုက်ဒရောလစ်ပြုလုပ်ထားသော) ကို အမျိုးသား ဓာတုဗေဒပစ္စည်းများ၊ ဂူဂျာရတ်မှ ဝယ်ယူခဲ့သည်။Polyvinylpyrrolidine K30 ကို Molychem၊ Mumbai မှဝယ်ယူခဲ့သည်၊ ပိုးမွှားဆေးများကို Ramaraju Surgery Cotton Mills Ltd.၊ Tamil Nadu၊ Milli Q water (Direct-Q3 ရေသန့်စင်စနစ်၊ Merck၊ India) ဖြင့် ဝယ်ယူခဲ့သည်။
NFRCS ကို lyophilization နည်းလမ်း ၁၁၊၁၂ ကို အသုံးပြု၍ တီထွင်ခဲ့သည်။HFFC ဖွဲ့စည်းမှုအားလုံး (ဇယား 1) သည် စက်ပိုင်းဆိုင်ရာမွှေစက်ကို အသုံးပြု၍ ပြင်ဆင်ခဲ့သည်။စက်မွှေစက်ပေါ်တွင် 800 rpm တွင် အဆက်မပြတ်မွှေခြင်းဖြင့် ရေထဲတွင် 1% acetic acid ကိုအသုံးပြု၍ chitosan ၏ 0.5% ပျော်ရည်ကို ပြင်ဆင်ပါ။ဇယား 1 တွင်ဖော်ပြထားသော တင်ဆောင်ထားသော ပိုလီမာ၏အတိအကျအလေးချိန်ကို chitosan ဖြေရှင်းချက်ထဲသို့ထည့်ကာ ကြည်လင်သောပိုလီမာဖြေရှင်းချက်ရရှိသည်အထိ မွှေပေးပါ။PVP K30 နှင့် PEG 400 ကို ဇယား 1 တွင် ဖော်ပြထားသော ပမာဏဖြင့် ရလာသော အရောအနှောသို့ ပေါင်းထည့်ကာ ကြည်လင်ပျစ်သော ပိုလီမာဖြေရှင်းချက်ရရှိသည်အထိ မွှေပေးပါ။ပေါ်လီမာအရောအနှောမှ ပိတ်မိနေသော လေပူဖောင်းများကို ဖယ်ရှားရန် ပေါ်လီမာဖြေရှင်းချက်၏ ရလာဒ်ရေချိုးခန်းကို မိနစ် 60 ကြာ အသံသွင်းထားသည်။Supplementary Figure S1(b) တွင် ပြထားသည့်အတိုင်း Ct အား HFFC 5 ml ဖြင့် ဖြည့်စွက်ထားသော 6 well plate (mould) တစ်ခုစီတွင် Ct ကို အညီအမျှ ဖြန့်ဝေထားပါသည်။
ရေတွင်းခြောက်တွင်းကို Ct ကွန်ရက်တွင် တစ်ပြေးညီစိုစွတ်ပြီး HFFC ဖြန့်ဖြူးမှုရရှိရန် မိနစ် 60 ကြာ အသံသွင်းထားသည်။ထို့နောက် ရေတွင်းခြောက်ပန်းကန်ကို -20°C တွင် 8-12 နာရီကြာ အေးခဲထားပါ။NFRCS ၏ ဖော်မြူလာအမျိုးမျိုးကို ရရှိရန်အတွက် အေးခဲထားသောပြားများကို 48 နာရီကြာ lyophilized လုပ်ထားသည်။တူညီသောလုပ်ထုံးလုပ်နည်းကို tampons သို့မဟုတ် cylindrical tampons များ သို့မဟုတ် မတူညီသောအပလီကေးရှင်းများအတွက် အခြားပုံသဏ္ဍာန်တစ်ခုခုကို ထုတ်လုပ်ရန် အသုံးပြုပါသည်။
တိကျစွာချိန်တွယ်ထားသော ချီတိုဆန် (80 kDa) (3%) ကို သံလိုက်မွှေစက်ဖြင့် 1% acetic acid တွင် ပျော်ဝင်ပါသည်။ရလာတဲ့ chitosan ရဲ့ အဖြေအတွက် 1% PEG 400 ကို ထည့်ပြီး မိနစ် 30 မွှေပေးပါ။ရလာတဲ့အဖြေကို စတုရန်းပုံ ဒါမှမဟုတ် စတုဂံပုံးထဲကို လောင်းထည့်ပြီး -80°C မှာ 12 နာရီကြာ အေးခဲထားပါ။porous Cs13 ရရှိရန် အေးခဲထားသောနမူနာများကို 48 နာရီကြာ lyophilized လုပ်ခဲ့သည်။
တီထွင်ထားသော NFRCS သည် အခြားပိုလီမာများ 14,15 နှင့် chitosan ၏ဓာတုသဟဇာတဖြစ်မှုကိုအတည်ပြုရန် Fourier transform infrared spectroscopy (FTIR) (Shimadzu 8400s FTIR၊ Tokyo, Japan) ကိုအသုံးပြု၍ စမ်းသပ်မှုများပြုလုပ်ခဲ့ပါသည်။စမ်းသပ်ထားသောနမူနာအားလုံး၏ FTIR ရောင်စဉ်တန်း (ရောင်စဉ်တန်းအကွာအဝေး၏ အကျယ်အဝန်း 400 မှ 4000 စင်တီမီတာ-1) ကို 32 စကင်န်ပြုလုပ်ခြင်းဖြင့် ရရှိခဲ့သည်။
ဖော်မြူလာအားလုံးအတွက် သွေးစုပ်ယူမှုနှုန်း (BAR) ကို Chen et al မှ ဖော်ပြထားသော နည်းလမ်းကို အသုံးပြု၍ အကဲဖြတ်ခဲ့ပါသည်။16 အနည်းငယ်ပြုပြင်မွမ်းမံမှုနှင့်အတူ။ပေါင်းစပ်ဖွဲ့စည်းမှုအားလုံး၏ NFRKs များကို 105°C တွင် လေဟာနယ်မီးဖိုတွင် ညတွင်းချင်း အခြောက်လှန်းထားပြီး ကျန်ရှိသောအညစ်အကြေးများကို ဖယ်ရှားရန်။30 mg NFRCS (နမူနာအလေးချိန် – W0) နှင့် 30 mg Ct (အပြုသဘောဆောင်သော ထိန်းချုပ်မှု) ကို 3.8% ဆိုဒီယမ် citrate ၏ အကြိုရောစပ်ပါရှိသော သီးခြားပန်းကန်များတွင် ထားခဲ့သည်။ကြိုတင်သတ်မှတ်ထားသော အချိန်အပိုင်းအခြားများဖြစ်သည့် 5၊ 10၊ 20၊ 30၊ 40 နှင့် 60 စက္ကန့်များတွင် NFRCS ကို ဖယ်ရှားပြီး နမူနာများကို Ct ပေါ်တွင် စက္ကန့် 30 ထားခြင်းဖြင့် ၎င်းတို့၏ မျက်နှာပြင်များကို စုပ်ယူခြင်းမရှိသော သွေးများကို သန့်စင်စေသည်။NFRCS 16 မှစုပ်ယူသောသွေး၏နောက်ဆုံးအလေးချိန်အား အကြိမ်တိုင်းအမှတ် (W1) အဖြစ်သတ်မှတ်သည်။အောက်ပါဖော်မြူလာကို အသုံးပြု၍ BAR ရာခိုင်နှုန်းကို တွက်ချက်ပါ။
Wang et al မှအစီရင်ခံသည်အတိုင်းသွေးခဲချိန် (BCT) ကိုဆုံးဖြတ်ခဲ့သည်။၁၇။NFRCS ၏ရှေ့မှောက်တွင်သွေးခဲရန်သွေးတစ်ခုလုံး (ကြွက်သွေး 3.8% ဆိုဒီယမ် citrate နှင့်ကြိုတင်ပေါင်းစပ်ထားသော) လိုအပ်သောအချိန်ကိုစမ်းသပ်နမူနာ၏ BCT အဖြစ်တွက်ချက်သည်။အမျိုးမျိုးသော NFRCS အစိတ်အပိုင်းများ (30 မီလီဂရမ်) ကို 10 ml ဝက်အူပုလင်းများတွင် ထည့်ထားပြီး ၃၇ ဒီဂရီစင်တီဂရိတ်တွင် ဖုတ်ထားသည်။သွေး (0.5 မီလီလီတာ) ကို ဖန်ပုလင်းထဲသို့ ထည့်လိုက်ပြီး 0.2 မီလီမီတာ CaCl2 ၏ 0.3 မီလီလီတာ ကို သွေးခဲစေပါသည်။နောက်ဆုံးတွင်၊ ဖန်ပုလင်းကို 15 စက္ကန့်တိုင်း (180° အထိ) ခိုင်မာသောသွေးခဲများဖြစ်လာသည်အထိ ပြောင်းပြန်လှန်ပါ။နမူနာ၏ BCT ကို flips vails17,18 အရေအတွက်ဖြင့် ခန့်မှန်းသည်။BCT ကိုအခြေခံ၍ NFRCS Cm၊ Ch နှင့် Cp တို့မှ အကောင်းဆုံးပေါင်းစပ်မှုနှစ်ခုကို နောက်ထပ် စရိုက်လက္ခဏာလေ့လာမှုများအတွက် ရွေးချယ်ခဲ့သည်။
Ch NFRCS နှင့် Cp NFRCS ပေါင်းစပ်မှုများ၏ BCT ကို Li et al မှဖော်ပြထားသောနည်းလမ်းကိုအကောင်အထည်ဖော်ခြင်းဖြင့်ဆုံးဖြတ်ခဲ့သည်။၁၉။15 x 15 mm2 Ch NFRCS၊ Cp NFRCS နှင့် Cs (အပြုသဘောဆောင်သော ထိန်းချုပ်မှု) ကို သီးခြား Petri ပန်းကန်များ (37°C) တွင် ထားပါ။သွေးခဲခြင်းလုပ်ငန်းစဉ်စတင်ရန် 3.8% ဆိုဒီယမ် citrate ပါရှိသော သွေးကို 0.2 M CaCl2 နှင့် 10:1 ထုထည်အချိုးတွင် ရောစပ်ထားသည်။0.2 M CaCl2 ကြွက်သွေး၏ 20 µl ကိုနမူနာမျက်နှာပြင်တွင် အသုံးချပြီး Petri ပန်းကန်အလွတ်တစ်လုံးတွင် ထည့်ထားသည်။ထိန်းချုပ်မှုသည် Ct မပါဘဲ Petri ပန်းကန်အလွတ်ထဲသို့သွေးများသွန်းလောင်းခဲ့သည်။သတ်မှတ်ထားသော 0၊ 3 နှင့် 5 မိနစ်ကြားကာလတွင်၊ သွေးခဲခြင်းကိုမနှောင့်ယှက်ဘဲ ပန်းကန်နမူနာတွင် ပါဝင်သော ရေ 10 ml of deionized (DI) ကိုထည့်ခြင်းဖြင့် သွေးခဲခြင်းကိုရပ်တန့်ပါ။Uncoagulated erythrocytes (erythrocytes) သည် deionized water ၏ရှေ့မှောက်တွင် hemolysis ကိုခံယူပြီး hemoglobin ကိုထုတ်လွှတ်သည်။မတူညီသောအချိန်အမှတ်များ (HA(t)) တွင် ဟေမိုဂလိုဘင်ကို UV-Vis spectrophotometer ဖြင့် 540 nm (λmax ဟေမိုဂလိုဘင်) ဖြင့် တိုင်းတာခဲ့သည်။deionized water 10 ml တွင် သွေး၏ 20 µl ၏ 0 မိနစ်တွင် ဟေမိုဂလိုဘင် (AH(0)) ၏ အကြွင်းမဲ့စုပ်ယူမှုကို ရည်ညွှန်းစံအဖြစ် သတ်မှတ်သည်။တူညီသောသွေးသုတ်ကိုအသုံးပြု၍ HA(t)/HA(0) အချိုးအစား ဟေမိုဂလိုဘင် စုပ်ယူမှု (RHA) ကို တွက်ချက်ထားသည်။
Texture Analyzer (Texture Pro CT V1.3 Build 15၊ Brookfield, USA) ကို အသုံးပြု၍ ပျက်စီးနေသော တစ်ရှူးများအတွက် NFRK ၏ ကပ်ခွာဂုဏ်သတ္တိများကို ဆုံးဖြတ်ခဲ့သည်။ဝက်သားအရေခွံ (အဆီအလွှာမပါဘဲ) အတွင်းဘက်တွင် အဖွင့်-အောက်ခြေ ကျည်ကာပန်းကန်ကို ဖိပါ။နမူနာများ (Ch NFRCS နှင့် Cp NFRCS) ကို ဝက်၏အရေပြားနှင့် ကပ်တွယ်မှုဖန်တီးရန် cannula မှတစ်ဆင့် ဆလင်ဒါပုံစံမှိုများထဲသို့ အသုံးချခဲ့သည်။အခန်းအပူချိန် (RT) (25°C.) တွင် 3 မိနစ်ကြာ ပေါက်ဖွားပြီးနောက် NFRCS ကပ်ခွာအား 0.5 mm/sec တွင် အဆက်မပြတ်နှုန်းဖြင့် မှတ်တမ်းတင်ခဲ့ပါသည်။
ခွဲစိတ်ခန်းသုံး အဆိပ်အတောက်များ ၏ အဓိကအင်္ဂါရပ်မှာ သွေးဆုံးရှုံးမှုကို လျော့ကျစေပြီး သွေးခဲမှုကို တိုးမြင့်စေခြင်း ဖြစ်သည်။NFRCS တွင် Lossless coagulation ကို အနည်းငယ် ပြုပြင်မွမ်းမံမှု 19 ဖြင့် ယခင်က ထုတ်ပြန်ထားသော နည်းလမ်းကို အသုံးပြု၍ အကဲဖြတ်ခဲ့ပါသည်။centrifuge tube ၏တစ်ဖက်တွင် 8 × 5 mm2 အပေါက်ဖြင့် microcentrifuge tube (2 ml) (အတွင်းပိုင်းအချင်း 10 mm) ပြုလုပ်ပါ။NFRCS ကို အဖွင့်အပိတ်လုပ်ရန် အသုံးပြုပြီး အပြင်ဘက်အစွန်းများကို တံဆိပ်ခတ်ရန် တိပ်ကို အသုံးပြုသည်။3.8% ဆိုဒီယမ် citrate premix ပါရှိသော microcentrifuge ပြွန်ထဲသို့ 0.2 M CaCl2 ၏ 20 µl ကို ထည့်ပါ။10 မိနစ်အကြာတွင်၊ ပန်းကန်များမှ microcentrifuge ပြွန်များကိုဖယ်ရှားပြီး NFRK (n = 3) မှသွေးများထွက်ခြင်းကြောင့်ပန်းကန်များ၏ဒြပ်ထုတိုးလာမှုကိုဆုံးဖြတ်ခဲ့သည်။သွေးဆုံးရှုံးမှု Ch NFRCS နှင့် Cp NFRCS ကို Cs နှင့် နှိုင်းယှဉ်ခဲ့သည်။
Mishra နှင့် Chaudhary21 မှအသေးစိတ်မွမ်းမံပြင်ဆင်မှုများဖြင့်ဖော်ပြထားသောနည်းလမ်းအပေါ်အခြေခံ၍ NFRCS ၏စိုစွတ်သောသမာဓိကိုဆုံးဖြတ်ခဲ့သည်။NFRCS ကို ရေ 50 မီလီလီတာဖြင့် 100 ml Erlenmeyer ဘူးထဲတွင် ထည့်ပြီး အပေါ်မှ မဖွဲ့စည်းဘဲ 60 စက္ကန့်ကြာ မွှေပေးပါ။စုစည်းမှုအပေါ် အခြေခံ၍ ရုပ်ပိုင်းဆိုင်ရာသမာဓိအတွက် နမူနာများကို အမြင်အာရုံစစ်ဆေးခြင်းနှင့် ဦးစားပေးဆောင်ရွက်ခြင်း။
HFFC နှင့် Ct ၏ ချိတ်ဆွဲအားကောင်းမှုကို အသေးအမွှားမွမ်းမံမှုများဖြင့် ယခင်ကထုတ်ဝေသည့်နည်းလမ်းများကို အသုံးပြု၍ လေ့လာခဲ့သည်။NFRK ကို acoustic waves (ပြင်ပလှုံ့ဆော်မှု) ကို milliQ ရေ (Ct) တွင် ထိတွေ့ခြင်းဖြင့် မျက်နှာပြင်အပေါ်ယံပိုင်း ကြံ့ခိုင်မှုကို အကဲဖြတ်ပါသည်။တီထွင်ထားသည့် NFRCS Ch NFRCS နှင့် Cp NFRCS ကို ရေအပြည့်ထည့်ထားသော ကရားတစ်ခုထဲတွင် ထားရှိကာ 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, နှင့် 30 မိနစ် အသီးသီးရှိသည်။အခြောက်ခံပြီးနောက်၊ NFRCS ၏ ကနဦးနှင့် နောက်ဆုံးအလေးချိန်အကြား ရာခိုင်နှုန်းကွာခြားချက်ကို တွက်ချက်ရန်အတွက် ပစ္စည်းဆုံးရှုံးမှု ရာခိုင်နှုန်း (HFFC) ကို အသုံးပြုခဲ့သည်။In vitro BCT သည် ပေါင်းစည်းခြင်းအား သို့မဟုတ် မျက်နှာပြင်ပစ္စည်းများ ဆုံးရှုံးခြင်းကို ထပ်မံပံ့ပိုးပေးပါသည်။Ct နှင့် HFFC ချိတ်တွယ်ခြင်း၏ ထိရောက်မှုသည် သွေးခဲခြင်းနှင့် Ct22 ၏မျက်နှာပြင်ပေါ်ရှိ elastic coating ကိုပေးသည်။
NFRCS ၏ ကျပန်းရွေးချယ်ထားသော ယေဘူယျတည်နေရာများမှ ရယူထားသော နမူနာများ (30 mg) ၏ BCT မှ တူညီသော တူညီမှုကို ဆုံးဖြတ်သည်။NFRCS လိုက်နာမှုကို ဆုံးဖြတ်ရန် ယခင်ကဖော်ပြထားသော BCT လုပ်ထုံးလုပ်နည်းကို လိုက်နာပါ။နမူနာငါးခုစလုံးကြားရှိ နီးကပ်မှုသည် တူညီသောမျက်နှာပြင်လွှမ်းခြုံမှုနှင့် Ct mesh တွင် HFFC စုဆောင်းမှုကို သေချာစေသည်။
အမည်ခံသွေးအဆက်အသွယ်ဧရိယာ (NBCA) ကို ပြုပြင်မွမ်းမံမှုအချို့ဖြင့် ယခင်က အစီရင်ခံထားသည့်အတိုင်း ဆုံးဖြတ်ခဲ့သည်။Ct၊ Ch NFRCS၊ Cp NFRCS နှင့် Cs ၏ မျက်နှာပြင်နှစ်ခုကြားရှိ သွေး 20 µl ကို ချည်နှောင်ခြင်းဖြင့် သွေးကို coagulate လုပ်ပါ။1 နာရီကြာပြီးနောက်၊ stent ၏အစိတ်အပိုင်းနှစ်ခုကိုခွဲထုတ်ပြီးသွေးခဲ၏ဧရိယာကိုလက်ဖြင့်တိုင်းတာသည်။ထပ်ခါတလဲလဲ သုံးကြိမ်၏ ပျမ်းမျှတန်ဖိုးကို NBCA NFRCS19 အဖြစ် သတ်မှတ်ခဲ့သည်။
Dynamic Vapor Sorption (DVS) ခွဲခြမ်းစိတ်ဖြာမှုကို ပြင်ပပတ်ဝန်းကျင်မှ ရေစုပ်ယူရန် သို့မဟုတ် သွေးကြောပေါက်ခြင်းအတွက် တာဝန်ရှိသည့် ဒဏ်ရာနေရာမှ NFRCS ၏ ထိရောက်မှုကို အကဲဖြတ်ရန် အသုံးပြုပါသည်။DVS သည် ထုထည်ကြည်လင်ပြတ်သားမှု ±0.1 µg ရှိသော ultra-sensitive ချိန်ခွင်လျှာကို အသုံးပြု၍ နမူနာတစ်ခုတွင် အငွေ့စုပ်ယူမှုနှင့် ဆုံးရှုံးမှုကို အကဲဖြတ်ခြင်း သို့မဟုတ် မှတ်တမ်းတင်သည်။တစ်စိတ်တစ်ပိုင်းအငွေ့ဖိအား (နှိုင်းရစိုထိုင်းဆ) ကို နမူနာတစ်ဝိုက်ရှိ အီလက်ထရွန်နစ်အစုလိုက်အပြုံလိုက် စီးဆင်းမှု ထိန်းချုပ်သည့်ကိရိယာမှ ပြည့်ဝဆီနှင့် ခြောက်သွေ့သော သယ်ဆောင်သူဓာတ်ငွေ့များကို ရောစပ်ပေးသည်။ European Pharmacopeia လမ်းညွှန်ချက်များအရ နမူနာများမှ အစိုဓာတ် စုပ်ယူမှု ရာခိုင်နှုန်းအပေါ် အခြေခံ၍ နမူနာများကို အမျိုးအစား 4 မျိုး (0–0.012% w/w− hygroscopic မဟုတ်သော၊ 0.2–2% w/w အနည်းငယ် hygroscopic၊ 2–15% အလယ်အလတ် hygroscopic.5%၊ နှင့် > 135% hygroscopic အလွန်) European Pharmacopeia လမ်းညွှန်ချက်များအရ နမူနာများမှ အစိုဓာတ်စုပ်ယူမှု ရာခိုင်နှုန်းအပေါ်အခြေခံ၍ နမူနာများကို အမျိုးအစား 4 ခုအဖြစ် အမျိုးအစားခွဲခဲ့သည် (0–0.012% w/w− hygroscopic မဟုတ်သော၊ 0.2–2% w/w အနည်းငယ် hygroscopic၊ 2–15% အလယ်အလတ် hygroscopic.15%၊ > 2-15% အလွန်အမင်း hygroscopic.15%)၊နမူနာများမှ အစိုဓာတ်စုပ်ယူမှု ရာခိုင်နှုန်းပေါ်မူတည်၍ ဥရောပဆေးဆိုင်၏ အကြံပြုချက်များအရ၊ နမူနာများကို အမျိုးအစား 4 မျိုး (0–0.012% w/w – hygroscopic မဟုတ်သော၊ 0.2–2% w/w အနည်းငယ် hygroscopic၊ 2– ဆယ့်ငါး%)။%умеренно гигроскопичен и > 15% очень гигроскопичен)၂၃။ % အလယ်အလတ် hygroscopic နှင့် > 15% အလွန် hygroscopic) 23။根据欧洲药典指南，根据样品吸收水分的百分比，样品分为4类（0-0.012% w/w- 分比、2样品分为4类（0-0.012% w/w- 靿吽、吸湿性、2-15%适度吸湿，>15%非常吸湿）၂၃။根据欧洲药典指南，根据吸收水分的百分比样品分为分为分为（百分比样品分为分为分为縀吧（2-00） 、 、 、 、 0.2-2% W/w 轻微、 2-15% 适度吸湿 ，> 15%非常吸湿）23။European Pharmacopoeia ၏ အကြံပြုချက်များအရ၊ နမူနာများကို နမူနာအားဖြင့် စုပ်ယူသော အစိုဓာတ်ရာခိုင်နှုန်းပေါ်မူတည်၍ (၄-၀.၀၁၂% အလေးချိန် - hygroscopic မဟုတ်သော၊ အလေးချိန်အားဖြင့် 0.2-2%၊ အလေးချိန်အားဖြင့် 2-15%)။% умеренно гигроскопичен, > 15 % очень гигроскопичен) 23။ % အလယ်အလတ် hygroscopic၊ > 15% very hygroscopic) ၂၃။NFCS X NFCS နှင့် TsN NFCS ၏ hygroscopic efficiency ကို DVS TA TGA Q5000 SA ခွဲခြမ်းစိတ်ဖြာမှုတွင် ဆုံးဖြတ်ခဲ့သည်။ဤလုပ်ငန်းစဉ်အတွင်း၊ လည်ပတ်ချိန်၊ နှိုင်းရစိုထိုင်းဆ (RH) နှင့် 25°C24 တွင် အချိန်နှင့်တပြေးညီ နမူနာအလေးချိန်ကို ရရှိခဲ့သည်။အောက်ဖော်ပြပါ ညီမျှခြင်းကို အသုံးပြု၍ တိကျသော NFRCS အစုလိုက်အပြုံလိုက် ခွဲခြမ်းစိတ်ဖြာခြင်းဖြင့် အစိုဓာတ်ပါဝင်မှုကို တွက်ချက်သည်-
MC သည် NFRCS စိုထိုင်းဆဖြစ်သည်။m1 - NSAIDs ၏ခြောက်သွေ့သောအလေးချိန်။m2 သည် ပေးထားသော RH တွင် အချိန်နှင့်တပြေးညီ NFRCS ဒြပ်ထုဖြစ်သည်။
နမူနာများကို 25°C တွင် 10 နာရီကြာ (< 7 × 10–3 Torr ) သန့်စင်ပြီးနောက် အရည်နိုက်ထရိုဂျင်စုပ်ယူမှုစမ်းသပ်မှုဖြင့် မျက်နှာပြင်စုစုပေါင်းဧရိယာကို ခန့်မှန်းတွက်ချက်ထားပါသည်။ နမူနာများကို 25°C တွင် 10 နာရီကြာ (< 7 × 10–3 Torr ) သန့်စင်ပြီးနောက် အရည်နိုက်ထရိုဂျင်စုပ်ယူမှုစမ်းသပ်မှုဖြင့် မျက်နှာပြင်စုစုပေါင်းဧရိယာကို ခန့်မှန်းတွက်ချက်ထားပါသည်။ Общая площадь поверхности оценивалась с помощью эксперимента по адсорбции азота жидким азовом посперижоле °С в течение 10 ч (< 7 × 10–3 Торр)။ နမူနာများအား 25°C တွင် 10 နာရီကြာ (< 7 × 10–3 Torr) တွင် ကင်းစင်ပြီးနောက် နိုက်ထရိုဂျင်စုပ်ယူမှု စမ်းသပ်မှုဖြင့် မျက်နှာပြင် စုစုပေါင်း ဧရိယာကို ခန့်မှန်းတွက်ချက်ထားပါသည်။在25°C 清空样品10小时（< 7 × 10-3 Torr）后，使用液氮的氮吸附实验估计总表面积。တွင် 25°C Общая площадь поверхности оценивалась с использованием экспериментов по адсорбции азота жидким азованием экспериментов по адсорбции азота жидким азорним по течение 10 часов при 25°C (< 7 × 10-3 торр)။ နမူနာများကို 25°C (< 7 x 10-3 torr) တွင် 10 နာရီကြာ ကင်းစင်ပြီးနောက် နိုက်ထရိုဂျင် စုပ်ယူမှု စမ်းသပ်မှုဖြင့် မျက်နှာပြင် စုစုပေါင်း ဧရိယာကို ခန့်မှန်းတွက်ချက်ထားပါသည်။စုစုပေါင်းမျက်နှာပြင်ဧရိယာ၊ ချွေးပေါက်ထုထည်နှင့် NFRCS ချွေးပေါက်အရွယ်အစားကို RS 232 ဆော့ဖ်ဝဲလ်အသုံးပြု၍ Austria NOVA 1000e မှ Quantachrome ဖြင့် ဆုံးဖြတ်ခဲ့သည်။
သွေးတစ်ခုလုံးမှ 5% RBCs (saline as diluent) ကို ပြင်ဆင်ပါ။ထို့နောက် HFFC (0.25 ml) ကို 96 ရေတွင်းပန်းကန်နှင့် 5% RBC ထုထည် (0.1 ml) သို့ လွှဲပြောင်းပါ။အရောအနှောကို ၃၇ ဒီဂရီစင်တီဂရိတ်တွင် မိနစ် ၄၀ ကြာ ဖုတ်ပါ။သွေးနီဥများနှင့် သွေးရည်ကြည် ရောနှောခြင်းကို အပြုသဘောဆောင်သော ထိန်းချုပ်မှုအဖြစ် သတ်မှတ်ပြီး ဆားရည်နှင့် သွေးနီဥများ ရောနှောခြင်းကို အနုတ်လက္ခဏာ ထိန်းချုပ်မှုအဖြစ် သတ်မှတ်ခဲ့သည်။Hemagglutination ကို Stajitzky စကေးအရ သတ်မှတ်သည်။အဆိုပြုထားသော စကေးများသည် အောက်ပါအတိုင်းဖြစ်သည်- + + + + သိပ်သည်းသော သေးငယ်သော စုစည်းမှုများ;+ + + အောက်ခြေ pads များသည် ကွေးထားသော အစွန်းများ၊+ စုတ်ပြဲသောအစွန်းများဖြင့် အောက်ခြေအပြားများ+ ချောမွေ့သော pads များ၏အစွန်းတစ်ဝိုက်တွင်ကျဉ်းမြောင်းသောအနီရောင်ကွင်းများ၊- (အနုတ်လက္ခဏာ) အောက်ပိုင်း အလယ်ဗဟိုတွင် အနီရောင်ခလုတ် 12 ခုရှိသည်။
NFRCS ၏ hemocompatibility ကို International Organization for Standardization (ISO) (ISO10993-4၊ 1999) 26,27 ၏နည်းလမ်းအရ လေ့လာခဲ့သည်။Singh et al မှဖော်ပြသော gravimetric နည်းလမ်း။NFRCS ၏ မျက်နှာပြင် သို့မဟုတ် မျက်နှာပြင်ပေါ်တွင် thrombus ဖွဲ့စည်းမှုကို အကဲဖြတ်ရန် အသေးစား ပြုပြင်မွမ်းမံမှုများ ပြုလုပ်ထားသည်။500 mg of Cs, Ch NFRCS နှင့် Cp NFRCS ကို 37°C တွင် phosphate buffered saline (PBS) တွင် 24 နာရီကြာ ပေါက်ဖွားခဲ့သည်။24 နာရီအကြာတွင်၊ PBS ကိုဖယ်ရှားပြီး NFRCS သည် 3.8% ဆိုဒီယမ် citrate ပါရှိသောသွေး 2 ml ဖြင့်ကုသသည်။NFRCS ၏မျက်နှာပြင်ပေါ်တွင် 0.1 M CaCl2 ၏ 0.04 ml ကို ပေါက်ဖွားသောနမူနာများသို့ ထည့်ပါ။၄၅ မိနစ်ကြာပြီးနောက်၊ ပေါင်းခံရေ 5 မီလီလီတာထည့်ကာ သွေးခဲခြင်းကို ရပ်တန့်စေပါသည်။NFRK ၏မျက်နှာပြင်ပေါ်ရှိစေသောသွေးကို 36-38% formaldehyde ဖြေရှင်းချက်ဖြင့်ကုသသည်။ဖော်မယ်လ်ဒီဟိုက်ဖြင့် ပြုပြင်ထားသော သွေးခဲများကို အခြောက်ခံကာ ချိန်တွယ်သည်။သွေးနှင့်နမူနာမပါဘဲ ဖန်ခွက်၏အလေးချိန် (အနုတ်လက္ခဏာထိန်းချုပ်မှု) နှင့် သွေးပါသောဖန်ခွက် (အပြုသဘောထိန်းချုပ်မှု) တို့ကို တွက်ချက်ခြင်းဖြင့် သွေးခဲခြင်း၏ရာခိုင်နှုန်းကို ခန့်မှန်းထားသည်။
ကနဦးအတည်ပြုချက်အနေဖြင့်၊ နမူနာများကို HFFC မျက်နှာပြင်အပေါ်ယံလွှာ၏စွမ်းရည်၊ Ct အပြန်အလှန်ချိတ်ဆက်မှုနှင့် Ct ကွန်ရက်ကို ချွေးပေါက်များဖွဲ့စည်းနိုင်မှုကို နားလည်ရန် အလင်းအဏုကြည့်မှန်ဘီလူးအောက်တွင် မြင်တွေ့ရသည်။NFRCS မှ Ch နှင့် Cp ၏ပါးလွှာသောအပိုင်းများကို ဦးရေပြားဓါးဖြင့် ညှပ်ထားသည်။ရရှိလာသောအပိုင်းကို ကာဗာစလစ်ဖြင့် ဖုံးအုပ်ထားသော ဖန်ဆလိုက်ပေါ်တွင် ထားရှိကာ အစွန်းများကို ကော်ဖြင့် ပြုပြင်ထားသည်။ပြင်ဆင်ထားသော ဆလိုက်များကို အလင်းအဏုကြည့်မှန်ဘီလူးဖြင့် ကြည့်ရှုပြီး ဓာတ်ပုံများကို မတူညီသော ချဲ့ထွင်မှုဖြင့် ရိုက်ကူးထားသည်။
Rice et al.29 မှဖော်ပြထားသောနည်းလမ်းကိုအခြေခံ၍ Ct ကွန်ရက်များတွင် ပေါ်လီမာစုဆောင်းခြင်းကို fluorescence microscopy ကိုအသုံးပြု၍ ပုံဖော်ထားပါသည်။ ဖော်မြူလာအတွက် အသုံးပြုသည့် HFFC ပါဝင်မှုကို ချောင်းဆိုးဆေး (amaranth) နှင့် ရောစပ်ထားပြီး NFRCS (Ch & Cp) ကို ယခင်က ဖော်ပြထားသည့် နည်းလမ်းအတိုင်း ပြင်ဆင်ခဲ့သည်။ ဖော်မြူလာအတွက် အသုံးပြုသည့် HFFC ပါဝင်မှုကို ချောင်းဆိုးဆေး (amaranth) နှင့် ရောစပ်ထားပြီး NFRCS (Ch & Cp) ကို ယခင်က ဖော်ပြထားသည့် နည်းလမ်းအတိုင်း ပြင်ဆင်ခဲ့သည်။ဖော်မြူလာအတွက် အသုံးပြုသည့် HFFC ပေါင်းစပ်မှုကို ချောင်းဆိုးဆေး (amaranth) နှင့် ရောစပ်ပြီး NFRCS (Ch နှင့် Cp) ကို ယခင်က ဖော်ပြထားသည့် နည်းလမ်းအတိုင်း ရရှိခဲ့သည်။将用于配方的HFFC 组合物与荧光染料（苋菜）混合，并按照前面提到的方法制制备。将用于配方的HFFC 组合物与荧光染料（苋菜）混合，并按照前面提到的方法制制备。ဖော်မြူလာတွင် အသုံးပြုသည့် HFFC ပါဝင်မှုကို ချောင်းဆိုးဆေး (Amaranth) နှင့် ရောစပ်ပြီး အစောပိုင်းတွင် ဖော်ပြထားသည့်အတိုင်း NFRCS (Ch နှင့် Cp) ကို ရရှိခဲ့သည်။NFRK ၏ ပါးလွှာသော အပိုင်းများကို ရရှိထားသော နမူနာများမှ ဖြတ်တောက်ပြီး ဖန်ဆလိုက်များပေါ်တွင် တင်ကာ အဖုံးစလစ်များဖြင့် ဖုံးအုပ်ထားသည်။အစိမ်းရောင်စစ်ထုတ်စက် (310-380 nm) ကို အသုံးပြု၍ ချောင်းအဏုကြည့်မှန်ဘီလူးအောက်တွင် ပြင်ဆင်ထားသော ဆလိုက်များကို ကြည့်ရှုပါ။Ct ဆက်ဆံရေးနှင့် Ct ကွန်ရက်အတွင်း ပိုလျှံနေသော ပိုလီမာ စုဆောင်းမှုကို နားလည်ရန် 4x ချဲ့ထွင်မှုဖြင့် ပုံများကို ရိုက်ကူးထားသည်။
NFRCS Ch နှင့် Cp ၏ မျက်နှာပြင် မြေမျက်နှာသွင်ပြင်ကို နှိပ်မုဒ်တွင် 42 N/m၊ 320 kHz၊ ROC 2-5 nm၊ Bruker၊ ထိုင်ဝမ်၊ဆော့ဖ်ဝဲ (Scanning Probe Image Processor) ကို အသုံးပြု၍ မျက်နှာပြင်ကြမ်းတမ်းမှုကို အရင်းအနှီးစတုရန်း (RMS) မှ ဆုံးဖြတ်သည်။မျက်နှာပြင်တူညီမှုရှိမရှိစစ်ဆေးရန် အမျိုးမျိုးသော NFRCS တည်နေရာများကို 3D ရုပ်ပုံများတွင် ပြန်ဆိုထားသည်။ပေးထားသောဧရိယာအတွက် ရမှတ်၏စံသွေဖည်မှုကို မျက်နှာပြင်ကြမ်းတမ်းမှုအဖြစ် သတ်မှတ်သည်။RMS ညီမျှခြင်းအား NFRCS31 ၏ မျက်နှာပြင်ကြမ်းတမ်းမှုကို တွက်ချက်ရန် အသုံးပြုခဲ့သည်။
FESEM အခြေပြုလေ့လာမှုများသည် Cm NFRCS ထက် BCT ထက် ပိုမိုကောင်းမွန်ကြောင်းပြသသည့် Ch NFRCS နှင့် Cp NFRCS တို့၏ မျက်နှာပြင်ပုံသဏ္ဍာန်ကို နားလည်ရန် FESEM၊ SU8000၊ HI-0876-0003၊ Hitachi၊ တိုကျို၊ တိုကျိုကို အသုံးပြု၍ လုပ်ဆောင်ခဲ့သည်။FESEM လေ့လာမှုအား Zhao et al မှဖော်ပြသည့်နည်းလမ်းအတိုင်းပြုလုပ်ခဲ့သည်။32 အသေးစားမွမ်းမံမှုများနှင့်အတူ။NFRCS 20 မှ 30 mg Ch NFRCS နှင့် Cp NFRCS တို့ကို ကြွက်သွေးဖြင့် ရောစပ်ထားသော ဆိုဒီယမ် စီတီးထရိတ် 20 µl ၏ 20 µl နှင့် ရောစပ်ထားသည်။သွေးခဲနမူနာများ စတင်ရန်အတွက် 0.2 M CaCl2 ၏ 20 μl ကို ပေါင်းထည့်ခဲ့ပြီး နမူနာများကို အခန်းအပူချိန်တွင် 10 မိနစ်ကြာ ပေါက်ဖွားခဲ့သည်။ထို့အပြင်၊ ဆားရည်ဖြင့် ဆေးကြောခြင်းဖြင့် NFRCS မျက်နှာပြင်မှ ပိုလျှံနေသော erythrocytes များကို ဖယ်ရှားခဲ့သည်။
နောက်ဆက်တွဲနမူနာများကို 0.1% glutaraldehyde ဖြင့်ကုသပြီး အစိုဓာတ်ကိုဖယ်ရှားရန်အတွက် 37°C တွင် ပူသောလေအေးမီးဖိုတွင် အခြောက်ခံခဲ့သည်။အခြောက်လှန်းသောနမူနာများကို အုပ်ပြီး 32 .ခွဲခြမ်းစိတ်ဖြာမှုအတွင်း ရရှိသော အခြားပုံများသည် ချည်မျှင်တစ်ခုချင်းစီ၏ မျက်နှာပြင်ပေါ်တွင် သွေးခဲဖွဲ့စည်းခြင်း၊ Ct၊ erythrocyte morphology (ပုံသဏ္ဍာန်)၊ သွေးခဲခိုင်မာမှုနှင့် NFRCS အကြားရှိ erythrocyte morphology တို့ဖြစ်သည်။မကုသရသေးသော NFRCS ဧရိယာများနှင့် Ch နှင့် Cp သည် သွေးဖြင့်ပေါက်ဖွားသော NFRCS ဧရိယာများကို ကုသပြီး ဒြပ်စင်အိုင်းယွန်းများ (ဆိုဒီယမ်၊ ပိုတက်စီယမ်၊ နိုက်ထရိုဂျင်၊ ကယ်လ်စီယမ်၊ မဂ္ဂနီဆီယမ်၊ ဇင့်၊ ကြေးနီနှင့် ဆီလီနီယမ်) 33 ကို စကန်ဖတ်ပါသည်။သွေးခဲဖွဲ့စည်းစဉ်အတွင်း ဒြပ်စင်အိုင်းယွန်းစုပုံခြင်းနှင့် သွေးခဲတစ်သားတည်းဖြစ်တည်မှုကို နားလည်ရန် ကုသပြီးမကုသရသေးသောနမူနာများကြားတွင် ဒြပ်စင်အိုင်းယွန်းရာခိုင်နှုန်းကို နှိုင်းယှဉ်ပါ။
Ct မျက်နှာပြင်ပေါ်ရှိ Cp HFFC မျက်နှာပြင်အပေါ်ယံအထူကို FESEM ကိုအသုံးပြု၍ ဆုံးဖြတ်ခဲ့သည်။Cp NFRCS ၏ဖြတ်ပိုင်းအပိုင်းများကို framework မှဖြတ်တောက်ပြီး sputter coated ။ထွက်ပေါ်လာသော sputter coating နမူနာများကို FESEM မှ လေ့လာတွေ့ရှိခဲ့ပြီး မျက်နှာပြင်အပေါ်ယံလွှာ၏ အထူကို 34 , 35 , 36 ဖြင့် တိုင်းတာခဲ့သည်။
X-ray micro-CT သည် မြင့်မားသော ကြည်လင်ပြတ်သားမှုရှိသော 3D ပုံရိပ်ကို ထောက်ပံ့ပေးပြီး NFRK ၏ အတွင်းပိုင်းဖွဲ့စည်းပုံဆိုင်ရာ အစီအစဉ်ကို လေ့လာနိုင်စေပါသည်။Micro-CT သည် နမူနာအတွင်း ဖြတ်သန်းသွားသော X-ray အလင်းတန်းကို အသုံးပြု၍ နမူနာအတွင်းရှိ X-rays ၏ ဒေသန္တရ အစွန်းအထင်းလျှော့ကျသော ကိန်းဂဏာန်းကို မှတ်တမ်းတင်ရန်အတွက်၊ ၎င်းသည် morphological အချက်အလက်များကို ရရှိရန် ကူညီပေးသည်။Cp NFRCS တွင် Ct ၏အတွင်းပိုင်းတည်နေရာနှင့် NFRCS37,38,39 တွင်စုပ်ယူမှုထိရောက်မှုနှင့်သွေးခဲခြင်းကိုနားလည်ရန် micro-CT ဖြင့်စစ်ဆေးခဲ့သည်။သွေးဖြင့် ကုသပြီး မကုသရသေးသော Cp NFRCS နမူနာများ၏ 3D ဖွဲ့စည်းပုံများကို micro-CT (V|tome|x S240၊ Phoenix၊ Germany) ဖြင့် ပြန်လည်တည်ဆောက်ထားပါသည်။VG STUDIO-MAX ဆော့ဖ်ဝဲလ်ဗားရှင်း 2.2 ကိုအသုံးပြု၍ NFRCS အတွက် 3D ရုပ်ပုံများကို ဖွံ့ဖြိုးတိုးတက်စေရန်အတွက် မတူညီသောရှုထောင့်များမှ X-ray ပုံများစွာကို (အကောင်းဆုံးအားဖြင့် 360° လွှမ်းခြုံနိုင်သည်) မှ ရိုက်ကူးခဲ့သည်။စုဆောင်းထားသော ပရိုဂရမ်ဒေတာကို သက်ဆိုင်ရာ ရိုးရှင်းသော 3D ScanIP Academic software ကို အသုံးပြု၍ 3D ထုထည်ပုံများအဖြစ် ပြန်လည်တည်ဆောက်ထားပါသည်။
ထို့အပြင် သွေးခဲ၏ ပျံ့နှံ့မှုကို နားလည်ရန်၊ သွေးခဲမှုစတင်ရန် NFRCS တွင် ကြိုတင်ရောစပ်ထားသော citrated သွေး 20 µl နှင့် 0.2 M CaCl2 ၏ 20 µl ကို NFRCS သို့ ပေါင်းထည့်ခဲ့သည်။ပြင်ဆင်ထားသော နမူနာများကို ခိုင်မာစေရန် ချန်ထားခဲ့ပါ။NFRK မျက်နှာပြင်ကို 0.5% glutaraldehyde ဖြင့် ကုသပြီး 30 မိနစ်မှ 40°C ဖြင့် လေပူမီးဖိုတွင် အခြောက်ခံထားသည်။NFRCS တွင် ဖြစ်ပေါ်လာသော သွေးခဲကို စကန်ဖတ်ကာ ပြန်လည်တည်ဆောက်ပြီး 3D ဓါတ်ပုံအား မြင်ယောင်လာသည်။
ယခင်ကဖော်ပြထားသည့်နည်းလမ်းကို အသေးစားပြုပြင်မွမ်းမံမှုများဖြင့် Cp NFRCS (Ch NFRCS နှင့် နှိုင်းယှဉ်လျှင် အကောင်းဆုံး) ဘက်တီးရီးယားပိုးသတ်ဆေး စစ်ဆေးမှုများကို ပြုလုပ်ခဲ့သည်။Cp NFRCS နှင့် Cp HFFC ၏ ဆန့်ကျင်ဘက်တီးရီးယား လုပ်ဆောင်ချက်ကို စမ်းသပ်သည့် သေးငယ်သော ဇီဝရုပ်သုံးမျိုး [S.aureus (gram-positive bacteria), E.coli (gram-negative bacteria) နှင့် white Candida (C.albicans)] incubator တစ်ခုရှိ Petri ပန်းကန်များတွင် agar တွင် ပေါက်နေသော agar များပေါ်တွင် ပေါက်နေပါသည်။105-106 CFU ml-1 ၏ ပြင်းအား 105-106 CFU ml-1 တွင် အရောအနှောရှိသော ဘက်တီးရီးယား ယဉ်ကျေးမှုဆိုင်းငံ့၏ 50 ml ကို တစ်ပုံစံတည်း ပေါင်းထည့်ပါ။အလတ်စားကို Petri ပန်းကန်တစ်ခုထဲသို့ လောင်းထည့်ပြီး ခိုင်မာအောင်ထားပါ။HFFC (HFFC အတွက် ရေတွင်း ၃ တွင်း နှင့် အနှုတ်ထိန်းချုပ်မှု အတွက် ၁ တွင်း) ဖြင့် ဖြည့်ရန် ကျောက်ကျောပန်းကန်၏ မျက်နှာပြင်ပေါ်တွင် ရေတွင်းများကို ပြုလုပ်ထားသည်။ရေတွင်း 3 တွင်းတွင် 200 µl HFFC နှင့် 200 µl pH 7.4 PBS ကို 4th well တွင်ထည့်ပါ။petri ပန်းကန်၏အခြားတစ်ဖက်တွင်၊ ခိုင်မာသော agar ပေါ်တွင် 12 mm Cp NFRCS ဒစ်ကိုချထားပြီး PBS (pH 7.4) ဖြင့် စိုစွတ်ပါ။Ciprofloxacin၊ ampicillin နှင့် fluconazole ဆေးပြားများကို Staphylococcus aureus၊ Escherichia coli နှင့် Candida albicans အတွက် ရည်ညွှန်းစံနှုန်းအဖြစ် သတ်မှတ်သည်။ဟန့်တားခြင်းဇုန်ကို ကိုယ်တိုင်တိုင်းတာပြီး ဟန့်တားခြင်းဇုန်၏ ဒစ်ဂျစ်တယ်ပုံတစ်ပုံကို ယူပါ။
အဖွဲ့အစည်းဆိုင်ရာကျင့်ဝတ်ဆိုင်ရာခွင့်ပြုချက်ရပြီးနောက်၊ လေ့လာမှုအား အိန္ဒိယနိုင်ငံတောင်ပိုင်း၊ Manipal၊ Karnataka ရှိ Kasturba Medical College of Education and Research တွင် ပြုလုပ်ခဲ့ပါသည်။in vitro TEG စမ်းသပ်မှု ပရိုတိုကောကို Kasturba ဆေးဘက်ဆိုင်ရာကောလိပ်၊ Manipal၊ Karnataka (IEC: 674/2020) ၏ Institutional Ethics Committee မှ ပြန်လည်သုံးသပ်ပြီး အတည်ပြုထားသည်။စေတနာ့ဝန်ထမ်း သွေးလှူရှင်များ (အသက် ၁၈ နှစ်မှ ၅၅ နှစ်) ကို ဆေးရုံသွေးလှူဘဏ်မှ ဘာသာရပ်များ ခေါ်ယူခဲ့သည်။ထို့အပြင် သွေးနမူနာများ စုဆောင်းရန်အတွက် စေတနာ့ဝန်ထမ်းများထံမှ အကြောင်းကြားထားသော သဘောတူညီချက်ကို ရယူခဲ့ပါသည်။Native TEG (N-TEG) ​​ကို ဆိုဒီယမ် citrate နှင့် ရောထားသော သွေးတစ်ခုလုံးအပေါ် Cp HFFC ဖော်မြူလာ၏ အကျိုးသက်ရောက်မှုကို လေ့လာရန် အသုံးပြုခဲ့သည်။N-TEG သည် ဆေးခန်းမှ ရလဒ်များ သိသာထင်ရှားစွာ နှောင့်နှေးခြင်း (ပုံမှန် သွေးခဲစစ်ဆေးမှုများ) ကြောင့် ဆေးခန်းသမားများအတွက် ပြဿနာများ ဖန်တီးပေးသည့် ပြုစုစောင့်ရှောက်မှုတွင် ၎င်း၏အခန်းကဏ္ဍအတွက် ကျယ်ပြန့်စွာ အသိအမှတ်ပြုထားသည်။N-TEG ခွဲခြမ်းစိတ်ဖြာမှုကို သွေးတစ်ခုလုံးဖြင့် ပြုလုပ်ခဲ့သည်။ပါဝင်သူအားလုံးထံမှ အကြောင်းကြားထားသော သဘောတူညီချက်နှင့် အသေးစိတ် ဆေးမှတ်တမ်းကို ရယူခဲ့ပါသည်။လေ့လာမှုတွင် ကိုယ်ဝန်ဆောင်/မီးဖွားပြီးနောက် သို့မဟုတ် အသည်းရောဂါများကဲ့သို့ သွေးပြန်ကြောတက်ခြင်း သို့မဟုတ် သွေးပြန်ကြောဆိုင်ရာ နောက်ဆက်တွဲပြဿနာများ ပါဝင်သူများ မပါဝင်ပါ။coagulation cascade ကို ထိခိုက်စေသော ဆေးဝါးများကို သောက်သုံးနေသော ဘာသာရပ်များကိုလည်း လေ့လာမှုမှ ဖယ်ထုတ်ထားသည်။အခြေခံဓာတ်ခွဲခန်းစစ်ဆေးမှုများ (ဟေမိုဂလိုဘင်၊ ပရိုစရိုဘင်အချိန်၊ သွင်းထားသော thromboplastin နှင့် platelet အရေအတွက်) သည် ပါဝင်သူအားလုံးကို စံလုပ်ထုံးလုပ်နည်းများနှင့်အညီ ပြုလုပ်ခဲ့သည်။N-TEG သည် သွေးခဲ viscoelasticity၊ ကနဦးသွေးခဲဖွဲ့စည်းပုံ၊ အမှုန်များ အပြန်အလှန်တုံ့ပြန်မှု၊ သွေးခဲအားကောင်းမှုနှင့် သွေးခဲခြင်းတို့ကို ဆုံးဖြတ်သည်။N-TEG ခွဲခြမ်းစိတ်ဖြာမှုသည် ဆဲလ်လူလာဒြပ်စင်များနှင့် ပလာစမာများ၏ စုပေါင်းသက်ရောက်မှုအပေါ် ဂရပ်ဖစ်နှင့် ဂဏန်းအချက်အလက်များကို ပေးဆောင်သည်။N-TEG ခွဲခြမ်းစိတ်ဖြာခြင်းကို Cp HFFC (10 µl နှင့် 50 µl) ၏ မတူညီသော volumes နှစ်ခုတွင် လုပ်ဆောင်ခဲ့သည်။ရလဒ်အနေဖြင့် citric acid ပါသောသွေး 1 ml ကို Cp HFFC ၏ 10 μl သို့ထည့်ခဲ့သည်။1 ml (Cp HFFC + citrated သွေး) 340 µl ရောစပ်ထားသောသွေး TEG ပန်းကန် 20 µl 0.2 M CaCl2 သို့ ထည့်ပါ။ထို့နောက် R, K, alpha angle, MA, G, CI, TPI, EPL, LY 30% သွေးနမူနာများကို Cp HFFC41 ၏ရှေ့မှောက်တွင်တိုင်းတာရန် TEG® 5000၊ US သို့ TEG ပန်းကန်များကို US တွင်တင်ခဲ့သည်။
in vivo လေ့လာမှု protocol ကို Institutional Animal Ethics Committee (IAEC), Kasturba School of Medicine, Manipal Institute of Higher Education, Manipal (IAEC/KMC/69/2020) မှ ပြန်လည်သုံးသပ်ပြီး အတည်ပြုခဲ့ပါသည်။တိရစ္ဆာန်စမ်းသပ်မှုအားလုံးကို ထိန်းချုပ်ရေးနှင့် ကြီးကြပ်ရေးကော်မတီ (CPCSEA) ၏ အကြံပြုချက်များနှင့်အညီ လုပ်ဆောင်ခဲ့ပါသည်။vivo NFRCS လေ့လာမှုအားလုံး (2 × 2 cm2) သည် အမျိုးသမီး Wistar ကြွက်များ (အလေးချိန် 200 မှ 250 ဂရမ်) ကို ပြုလုပ်ခဲ့သည်။တိရစ္ဆာန်အားလုံးသည် အပူချိန် 24-26°C တွင် နေသားတကျဖြစ်အောင် ပြုလုပ်ထားပြီး၊ တိရစ္ဆာန်များသည် ပုံမှန်အစားအစာနှင့် ရေကို အခမဲ့သုံးစွဲခွင့်ရှိသည်။တိရိစ္ဆာန်များအားလုံးကို ကွဲပြားသောအုပ်စုများအဖြစ် ကျပန်းခွဲ၍ အုပ်စုတစ်ခုစီတွင် တိရစ္ဆာန်သုံးကောင်ပါဝင်ပါသည်။လေ့လာမှုအားလုံးကို Animal Studies- Vivo Experiments 43 တွင် အစီရင်ခံစာနှင့်အညီ လုပ်ဆောင်ခဲ့သည်။လေ့လာမှုမပြုမီတွင် တိရစ္ဆာန်များကို အတွင်းပိုင်းအတွင်းပိုင်း (ip) ကီတာမင်း 20-50 မီလီဂရမ် (ခန္ဓာကိုယ်အလေးချိန် 1 ကီလိုဂရမ်လျှင်) နှင့် xylazine 2-10 မီလီဂရမ် (ခန္ဓာကိုယ်အလေးချိန် 1 ကီလိုဂရမ်လျှင်) ပေါင်းစပ်မှုဖြင့် မေ့ဆေးပေးခဲ့သည်။လေ့လာမှုပြီးနောက်၊ နမူနာများ၏ ကနဦးနှင့် နောက်ဆုံးအလေးချိန်အကြား ကွာခြားချက်ကို အကဲဖြတ်ခြင်းဖြင့် သွေးထွက်နှုန်းကို တွက်ချက်ကာ စမ်းသပ်မှုသုံးခုမှရရှိသော ပျမ်းမျှတန်ဖိုးကို နမူနာ၏သွေးထွက်ပမာဏအဖြစ် ယူဆောင်သွားခဲ့သည်။
ဒဏ်ရာ၊ တိုက်ပွဲ သို့မဟုတ် ယာဉ်မတော်တဆမှု (ဒဏ်ရာပုံစံ) တွင် သွေးထွက်ခြင်းကို ထိန်းညှိရန် NFRCS ၏ အလားအလာကို နားလည်ရန် ကြွက်အမြီးဖြတ်ထုတ်ခြင်းပုံစံကို အကောင်အထည်ဖော်ခဲ့သည်။ပုံမှန်သွေးထွက်ကြောင်းသေချာစေရန် အမြီး၏ 50% ကို ဦးရေပြားဓါးဖြင့်ဖြတ်ပြီး လေထဲတွင် ၁၅ စက္ကန့်ကြာအောင်ထားပါ။ထို့အပြင်၊ ဖိအား (Ct၊ Cs၊ Ch NFRCS နှင့် Cp NFRCS) တို့ကို အသုံးပြုခြင်းဖြင့် စမ်းသပ်နမူနာများကို ကြွက်တစ်ကောင်၏ အမြီးတွင် ထားရှိခဲ့သည်။သွေးထွက်ခြင်းနှင့် PCT ကိုစမ်းသပ်နမူနာ (n = 3)17,45 အတွက်အစီရင်ခံခဲ့သည်။
တိုက်ပွဲတွင် NFRCS ဖိအားထိန်းချုပ်မှု၏ ထိရောက်မှုကို အပေါ်ယံ femoral သွေးလွှတ်ကြော၏ ပုံစံတစ်ခုပေါ်တွင် စူးစမ်းလေ့လာခဲ့သည်။femoral artery သည် 24G trocar ဖြင့် ထိုးထွင်းခံရပြီး 15 စက္ကန့်အတွင်း သွေးထွက်သည်။အထိန်းအကွပ်မဲ့သွေးထွက်ခြင်းကို သတိပြုမိပြီးနောက်၊ စမ်းသပ်မှုနမူနာကို ဖိအားဖြင့် ထိုးဖေါက်သည့်နေရာ၌ နေရာချထားသည်။စမ်းသပ်နမူနာကို အသုံးချပြီးနောက် ချက်ချင်းပင် သွေးခဲချိန်ကို မှတ်တမ်းတင်ခဲ့ပြီး နောက် 5 မိနစ်ကြာတွင် hemostatic ထိရောက်မှုကို တွေ့ရှိခဲ့သည်။အလားတူလုပ်ငန်းစဉ်ကို Cs နှင့် Ct46 ဖြင့် ထပ်ခါတလဲလဲ ပြုလုပ်ခဲ့သည်။
Dowling et al ။47 ခွဲစိတ်ပြီးသွေးထွက်ခြင်း၏အခြေအနေတွင် ခွဲစိတ်မှုအတွင်း သွေးထွက်ခြင်းဆိုင်ရာ ဆက်စပ်ပစ္စည်းများ၏ hemostatic ပစ္စည်းများ၏ hemostatic ဖြစ်နိုင်ချေကို အကဲဖြတ်ရန် အသည်းဒဏ်ရာပုံစံကို အဆိုပြုခဲ့သည်။BCT ကို Ct နမူနာ (အနုတ်လက္ခဏာ ထိန်းချုပ်မှု)၊ Cs မူဘောင် (အပြုသဘော ထိန်းချုပ်မှု)၊ Ch NFRCS နမူနာများနှင့် Cp NFRCS နမူနာများအတွက် မှတ်တမ်းတင်ထားပါသည်။ကြွက်၏ suprahepatic vena cava ကို ပျမ်းမျှ laparotomy ပြုလုပ်ခြင်းဖြင့် ဖော်ထုတ်ခဲ့သည်။အဲဒီနောက် ဘယ်ဘက်အမြှေးရဲ့ အစွန်းပိုင်းကို ကတ်ကြေးနဲ့ ဖြတ်ပစ်လိုက်တယ်။ဦးရေပြားဓါးဖြင့် အသည်းကိုခွဲစိတ်ပြီး စက္ကန့်အနည်းငယ်ကြာ သွေးထွက်ပါစေ။Ch NFRCS နှင့် Cp NFRCS စမ်းသပ်မှုနမူနာများကို အပြုသဘောဆောင်သောဖိအားမရှိဘဲ ပျက်စီးနေသောမျက်နှာပြင်ပေါ်တွင် တိကျစွာချိန်တွယ်ထားပြီး BCT ကို မှတ်တမ်းတင်ထားသည်။ထို့နောက် ထိန်းချုပ်မှုအုပ်စု (Ct) သည် ဒဏ်ရာကိုမချိုးဘဲ Cs 30 s47 ဖြင့် ဖိအားသက်ရောက်သည်။
Vivo တွင် ပေါ်လီမာအခြေခံ NFRCSs ၏ အနာကျက်ခြင်း ဂုဏ်သတ္တိများကို အကဲဖြတ်ရန် ခွဲစိတ်မှုပုံစံကို အသုံးပြု၍ ဒဏ်ရာအနာကျက်ခြင်းဆိုင်ရာ စစ်ဆေးမှုများကို ပြုလုပ်ခဲ့သည်။ခွဲစိတ်ပြုပြင်ထားသော ဒဏ်ရာပုံစံများကို အသေးစိပ်မွမ်းမံပြင်ဆင်မှု 19,32,48 ဖြင့် ယခင်ထုတ်ဝေခဲ့သော နည်းလမ်းများနှင့်အညီ လုပ်ဆောင်ခဲ့သည်။ယခင်က ဖော်ပြထားသည့်အတိုင်း တိရစ္ဆာန်အားလုံးကို မေ့ဆေးပေးခဲ့သည်။နောက်ကျောအရေပြားတွင် စက်ဝိုင်းပုံနက်သော ခွဲစိတ်မှုပြုလုပ်ရန် အသားစဥ်ဖောက်စက် (12 မီလီမီတာ) ကို အသုံးပြုပါ။ပြင်ဆင်ထားသော ဒဏ်ရာနေရာများကို Cs (အပြုသဘောဆောင်သောထိန်းချုပ်မှု)၊ Ct (ဝါဂွမ်းအပြားများသည် အနာကျက်ခြင်းကို အနှောင့်အယှက်ဖြစ်စေကြောင်း အသိအမှတ်ပြုခြင်း)၊ Ch NFRCS နှင့် Cp NFRCS (စမ်းသပ်အုပ်စု) နှင့် ကုသမှုမပါဘဲ အနုတ်လက္ခဏာထိန်းချုပ်မှုတို့ကို ၀တ်ဆင်ထားသည်။လေ့လာမှု၏နေ့ရက်တိုင်းတွင်၊ အနာ၏ဧရိယာကို ကြွက်များအားလုံးတွင် တိုင်းတာခဲ့သည်။ဒဏ်ရာဧရိယာကို ဓာတ်ပုံရိုက်ပြီး အဝတ်အစားအသစ်ဝတ်ရန် ဒစ်ဂျစ်တယ်ကင်မရာကို အသုံးပြုပါ။ဒဏ်ရာအပိတ်ရာခိုင်နှုန်းကို အောက်ပါပုံသေနည်းများဖြင့် တိုင်းတာသည်-
လေ့လာမှု၏ 12 ရက်မြောက်နေ့တွင် ဒဏ်ရာပိတ်သွားသည့် ရာခိုင်နှုန်းအပေါ် အခြေခံ၍ အကောင်းဆုံးအုပ်စု၏ ကြွက်အရေပြားကို ဖယ်ရှားခဲ့သည် ((Cp NFRCS) နှင့် ထိန်းချုပ်မှုအဖွဲ့) နှင့် H&E စွန်းထင်းခြင်းနှင့် Masson ၏ trichrome စွန်းထင်းခြင်းတို့ဖြင့် လေ့လာခဲ့သည်။ လေ့လာမှု၏ 12 ရက်မြောက်နေ့တွင် ဒဏ်ရာပိတ်သွားသည့် ရာခိုင်နှုန်းအပေါ် အခြေခံ၍ အကောင်းဆုံးအုပ်စု၏ ကြွက်အရေပြားကို ဖယ်ရှားခဲ့သည် ((Cp NFRCS) နှင့် ထိန်းချုပ်မှုအဖွဲ့) နှင့် H&E စွန်းထင်းခြင်းနှင့် Masson ၏ trichrome စွန်းထင်းခြင်းတို့ဖြင့် လေ့လာခဲ့သည်။လေ့လာမှု၏ 12 ရက်မြောက်နေ့တွင် ဒဏ်ရာပိတ်သွားသည့် ရာခိုင်နှုန်းအပေါ်အခြေခံ၍ အကောင်းဆုံးအုပ်စု ((Cp NFRCS) နှင့် ထိန်းချုပ်မှုအဖွဲ့) ၏ ကြွက်များ၏အရေပြားကို hematoxylin-eosin နှင့် Masson's trichrome တို့ဖြင့် စွန်းထင်းစေခြင်းဖြင့် စစ်ဆေးခဲ့သည်။根据研究第12天的伤口闭合百分比，切除最佳组((Cp NFRCS)和对照组)的大韉牚肤，进行色研究။根据研究第12天的伤口闭合百分比，切除最佳组((Cp NFRCS)和对照组)的大韠牚肤，进術)အကောင်းဆုံးအုပ်စု ((Cp NFRCS) နှင့် ထိန်းချုပ်မှုအဖွဲ့များ) မှ ကြွက်များကို hematoxylin-eosin staining နှင့် Masson ၏ trichrome စွန်းထင်းခြင်းအတွက် လေ့လာမှု၏ 12 ရက်မြောက်နေ့တွင် ဒဏ်ရာပိတ်သွားခြင်းအပေါ် အခြေခံ၍ ဖယ်ရှားခဲ့သည်။အကောင်အထည်ဖော်ခဲ့သော လိမ်းဆေးလုပ်ထုံးလုပ်နည်းကို ယခင်ဖော်ပြထားသည့် နည်းလမ်းများအတိုင်း 49,50 ဖြင့် ဆောင်ရွက်ခဲ့ပါသည်။အတိုချုပ်အားဖြင့်၊ ဖော်မလင် ၁၀ ရာခိုင်နှုန်းကို ပြုပြင်ပြီးနောက်၊ နမူနာများကို အဆင့်လိုက်အယ်လ်ကိုဟောစီးရီးများသုံးပြီး ရေဓာတ်ခန်းခြောက်သွားခဲ့သည်။exciseed တစ်ရှူး၏ပါးလွှာသောအပိုင်းများ (5 µm အထူ) ရရှိရန် microtome ကိုသုံးပါ။ထိန်းချုပ်မှု၏ ပါးလွှာသော အမှတ်စဉ်အပိုင်းများနှင့် Cp NFRCS တို့သည် histopathological ပြောင်းလဲမှုများကို လေ့လာရန်အတွက် hematoxylin နှင့် eosin တို့ဖြင့် ကုသခဲ့ပါသည်။Masson ၏ trichrome အစွန်းအထင်းကို collagen fibrils များဖွဲ့စည်းခြင်းကိုသိရှိရန်အသုံးပြုခဲ့သည်။ရရှိသောရလဒ်များကို ရောဂါဗေဒပညာရှင်များက မျက်စိစုံမှိတ် လေ့လာခဲ့ကြသည်။
Cp NFRCS နမူနာများ၏ တည်ငြိမ်မှုကို 12 လကြာ အခန်းအပူချိန် (25°C ± 2°C/60% RH ± 5%) တွင် လေ့လာခဲ့သည်။Cp NFRCS (မျက်နှာပြင်အရောင်ပြောင်းခြင်းနှင့် အဏုဇီဝကြီးထွားမှု) ကို ပစ္စည်းများနှင့် နည်းလမ်းများကဏ္ဍတွင် ဖော်ပြထားသော အထက်ဖော်ပြပါနည်းလမ်းများအတိုင်း ခေါက်ဝတ်ဆင်မှုခံနိုင်ရည်နှင့် BCT အတွက် အမြင်အာရုံကို စစ်ဆေးပြီး စမ်းသပ်ခဲ့ပါသည်။
Cp NFRCS ၏ အရွယ်အစား 15×15 cm2 ကို ပြင်ဆင်ခြင်းဖြင့် Cp NFRCS ၏ ကြီးထွားနိုင်မှုနှင့် မျိုးပွားနိုင်မှုကို စစ်ဆေးခဲ့သည်။ထို့အပြင်၊ 30 မီလီဂရမ်နမူနာများ (n=5) ကို Cp NFRCS အပိုင်းအစများမှ excise လုပ်ပြီး လေ့လာထားသောနမူနာများ၏ BCT ကို Methods ကဏ္ဍတွင် အစောပိုင်းတွင်ဖော်ပြထားသည့်အတိုင်း အကဲဖြတ်ခဲ့ပါသည်။
ကျွန်ုပ်တို့သည် ဇီဝဆေးပညာဆိုင်ရာအသုံးချပရိုဂရမ်အမျိုးမျိုးအတွက် Cp NFRCS ပေါင်းစပ်မှုများကို အသုံးပြု၍ အမျိုးမျိုးသော ပုံသဏ္ဍာန်များနှင့် ဖွဲ့စည်းပုံများကို တီထွင်ရန် ကြိုးပမ်းထားပါသည်။ထိုကဲ့သို့သော ပုံသဏ္ဍာန်များ သို့မဟုတ် ဖွဲ့စည်းမှုပုံစံများတွင် နှာခေါင်းသွေးယိုခြင်းအတွက် conical swab များ၊ သွားဘက်ဆိုင်ရာလုပ်ငန်းစဉ်များနှင့် မိန်းမကိုယ်မှသွေးထွက်ခြင်းအတွက် cylindrical swab များပါဝင်သည်။
ဒေတာအစုံအားလုံးကို ပျမ်းမျှ ± စံသွေဖည်မှုအဖြစ် ဖော်ပြပြီး Prism 5.03 (GraphPad, San Diego, CA, USA) ကို အသုံးပြု၍ ANOVA မှ ခွဲခြမ်းစိတ်ဖြာပြီး Bonferroni ၏ မျိုးစုံသော နှိုင်းယှဉ်စမ်းသပ်မှု (*p<0.05) ဖြင့် ဆန်းစစ်ခဲ့သည်။
လူသားလေ့လာမှုတွင် လုပ်ဆောင်ခဲ့သော လုပ်ထုံးလုပ်နည်းအားလုံးသည် အင်စတီကျုနှင့် အမျိုးသား သုတေသနကောင်စီ၏ စံချိန်စံညွှန်းများနှင့် အညီဖြစ်ပြီး၊ Helsinki 1964 ၏ ကြေညာစာတမ်းနှင့် ၎င်း၏ နောက်ဆက်တွဲ ပြင်ဆင်ချက်များ သို့မဟုတ် အလားတူ ကျင့်ဝတ်စံနှုန်းများနှင့်အညီ ဖြစ်သည်။ပါဝင်သူအားလုံးကို လေ့လာမှု၏အင်္ဂါရပ်များနှင့် ၎င်း၏ဆန္ဒအလျောက် သဘောသဘာဝအကြောင်း အသိပေးခဲ့သည်။ပါဝင်သူဒေတာကို စုဆောင်းပြီးသည်နှင့် လျှို့ဝှက်ထားဆဲဖြစ်သည်။in vitro TEG စမ်းသပ်မှု ပရိုတိုကောကို Kasturba ဆေးဘက်ဆိုင်ရာကောလိပ်၊ Manipal၊ Karnataka (IEC: 674/2020) ၏ Institutional Ethics Committee မှ ပြန်လည်သုံးသပ်ပြီး အတည်ပြုထားသည်။စေတနာ့ဝန်ထမ်းများသည် သွေးနမူနာများ စုဆောင်းရန် အသိပေးသဘောတူညီချက်ကို လက်မှတ်ရေးထိုးခဲ့ကြသည်။
တိရစ္ဆာန်လေ့လာမှုတွင် လုပ်ဆောင်ခဲ့သော လုပ်ထုံးလုပ်နည်းအားလုံးကို Kastuba ဆေးပညာ၊ Manipal အဆင့်မြင့်ပညာရေး၊ Manipal (IAEC/KMC/69/2020) နှင့်အညီ ဆောင်ရွက်ခဲ့ပါသည်။တိရိစ္ဆာန်စမ်းသပ်မှုအားလုံးကို တိရစ္ဆာန်စမ်းသပ်ထိန်းချုပ်ရေးနှင့် ကြီးကြပ်ရေးကော်မတီ (CPCSEA) ၏ လမ်းညွှန်ချက်များနှင့်အညီ ပြုလုပ်ခဲ့ပါသည်။စာရေးသူအားလုံး ARRIVE လမ်းညွှန်ချက်များကို လိုက်နာပါ။
NFRCS အားလုံး၏ FTIR ရောင်စဉ်ကို ပုံ 2A တွင်ပြသထားသည့် chitosan spectrum နှင့် နှိုင်းယှဉ်ခဲ့သည်။3437 စင်တီမီတာ-1 (OH နှင့် NH ဆန့်ထုတ်ခြင်း၊ ထပ်နေခြင်း၊ 2945 နှင့် 2897 စင်တီမီတာ-1 (CH stretching)၊ 1660 cm-1 (NH2 strain)၊ 1589 cm-1 (N–H ကွေးညွှတ်ခြင်း)၊ -115 (115 cm)၊ , secondary hydroxyl), 993 cm-1 (stretch CO, Bo-OH) 52.53.54 ။နောက်ဆက်တွဲဇယား S1 သည် chitosan (သတင်းထောက်) အတွက် FTIR NFRCS စုပ်ယူမှုဆိုင်ရာ ရောင်စဉ်တန်ဖိုးများကို ပြသသည်၊ သန့်စင်သော chitosan၊ Cm၊ Ch နှင့် Cp။NFRCS (Cm၊ Ch နှင့် Cp) အားလုံး၏ FTIR ရောင်စဉ်သည် သိသာထင်ရှားသောပြောင်းလဲမှုမရှိဘဲ သန့်စင်သော chitosan ကဲ့သို့ တူညီသောဝိသေသစုပ်ယူမှုလှိုင်းများကိုပြသခဲ့သည် (ပုံ 2A)။FTIR ရလဒ်များသည် NFRCS ဖွံ့ဖြိုးတိုးတက်ရန်အတွက် အသုံးပြုသော ပိုလီမာများကြားတွင် ဓာတု သို့မဟုတ် ရုပ်ပိုင်းဆိုင်ရာ အပြန်အလှန်တုံ့ပြန်မှုများ မရှိခြင်းကို အတည်ပြုခဲ့ပြီး အသုံးပြုထားသော ပိုလီမာများသည် အားနည်းနေကြောင်း ညွှန်ပြသည်။
Cm NFRCS၊ Ch NFRCS၊ Cp NFRCS နှင့် Cs တို့၏ vitro လက္ခဏာရပ်။(က) ဖိသိပ်မှုအောက်တွင် chitosan နှင့် Cm NFRCS၊ Ch NFRCS နှင့် Cp NFRCS တို့၏ ပေါင်းစပ်ပါဝင်မှုများ၏ FTIR ရောင်စဉ်ကို ကိုယ်စားပြုသည်။(ခ) က) သွေးတစ်ခုလုံး စုပ်ယူမှုနှုန်း NFRCS Cm၊ Ch၊ Cp နှင့် Cg (n=3);Cotton swab သည် စုပ်ယူမှုပိုမိုမြင့်မားသောကြောင့်၊ Ct နမူနာများသည် ပိုမိုမြင့်မားသော BAR ကိုပြသခဲ့သည်၊b) သွေးစုပ်ယူပြီးနောက်သွေးစုပ်ယူနမူနာ၏ပုံဥပမာ။စမ်းသပ်နမူနာ C ၏ BCT ၏ ဂရပ်ဖစ်ကိုယ်စားပြုမှု (Cp NFRCS တွင် အကောင်းဆုံး BCT (15 s၊ n = 3))။ C၊ D၊ E၊ နှင့် G တို့တွင် ဒေတာကို ± SD အဖြစ် ပြသထားပြီး အမှားအယွင်းဘားများသည် SD၊ ***p < 0.0001 ကို ကိုယ်စားပြုသည်။ C၊ D၊ E၊ နှင့် G တို့တွင် ဒေတာကို ± SD အဖြစ် ပြသထားပြီး အမှားအယွင်းဘားများသည် SD၊ ***p < 0.0001 ကို ကိုယ်စားပြုသည်။ Данные в C, D, E နှင့် G представлены как среднее ± стандартное отклонение, а планки погрешностей прледста , ***p <0,0001။ C၊ D၊ E နှင့် G တို့တွင် ဒေတာကို ပျမ်းမျှ ± စံသွေဖည်မှုအဖြစ် တင်ပြထားပြီး အမှားအယွင်းဘားများသည် စံသွေဖည်မှုကို ကိုယ်စားပြုသည်၊ ***p<0.0001။ C、D、E 和G 中的数据显示为平均值± SD，误差线代表SD，***p < 0.0001။ C、D、E 和G 中的数据显示为平均值± SD，误差线代表SD，***p < 0.0001။ Данные в C, D, E နှင့် G показаны как среднее значение ± стандартное отклонение, планки погрешностей прлеядста е, ***p <0,0001။ C၊ D၊ E နှင့် G တွင် ဒေတာကို ပျမ်းမျှ ± စံသွေဖည်မှုအဖြစ် ပြသည်၊ အမှားဘားများသည် စံသွေဖည်မှုကို ကိုယ်စားပြုသည်၊ ***p<0.0001။