Nature.com ကိုလာရောက်လည်ပတ်တဲ့အတွက် ကျေးဇူးတင်ပါတယ်။သင်အသုံးပြုနေသောဘရောက်ဆာဗားရှင်းတွင် CSS ပံ့ပိုးမှုအကန့်အသတ်ရှိသည်။အကောင်းဆုံးအတွေ့အကြုံအတွက်၊ အပ်ဒိတ်လုပ်ထားသောဘရောက်ဆာ (သို့မဟုတ် Internet Explorer တွင် လိုက်ဖက်ညီသောမုဒ်ကိုပိတ်ပါ) ကိုအသုံးပြုရန် ကျွန်ုပ်တို့အကြံပြုအပ်ပါသည်။ဤအတောအတွင်း၊ ဆက်လက်ပံ့ပိုးမှုသေချာစေရန်၊ ပုံစံများနှင့် JavaScript မပါဘဲ ဝဘ်ဆိုက်ကို တင်ဆက်ပါမည်။
Angustifolius lupine (NLL, Lupinus angustifolius L.) သည် အစားအစာ ထုတ်လုပ်မှုနှင့် မြေဆီလွှာ တိုးတက်မှုအတွက် အသုံးပြုသော ပဲပင် ဖြစ်သည်။သီးနှံတစ်ခုအနေဖြင့် NLL ၏ကမ္ဘာ့ချဲ့ထွင်မှုသည် ဆိုးရွားသော anthracnose ရောဂါဖြစ်စေသည့် lupine anthracnose အပါအဝင် ရောဂါဖြစ်စေသောမှိုအများအပြားကို ဆွဲဆောင်ခဲ့သည်။ခုခံအားတိုးမြှင့်ပေးသော Lanr1 နှင့် AnMan နှစ်ခုကို NLL မွေးမြူခြင်းတွင် အသုံးပြုခဲ့သော်လည်း နောက်ခံမော်လီကျူးယန္တရားများကို မသိရသေးပါ။ဤလေ့လာမှုတွင်၊ Lanr1 နှင့် AnMan အမှတ်အသားများကို ဥရောပ NLL နမူနာများကို စစ်ဆေးရန် အသုံးပြုခဲ့သည်။ထိန်းချုပ်ထားသော ပတ်ဝန်းကျင်တွင် ကာကွယ်ဆေးကို စမ်းသပ်ခြင်းသည် ခံနိုင်ရည်ရှိသော အလှူရှင်နှစ်ဦးစလုံး၏ ထိရောက်မှုကို အတည်ပြုခဲ့သည်။ကွဲပြားသော ဗီဇဖော်ပြမှု ပရိုဖိုင်ကို ကိုယ်စားပြုခံနိုင်ရည်ရှိသော မျဉ်းကြောင်းများဖြင့် ပြုလုပ်ခဲ့သည်။Anthracnose ခံနိုင်ရည်သည် “GO:0006952 Defense Response”၊ “GO:0055114 Redox Process” နှင့် “GO:0015979 Photosynthesis” တို့၏ မျိုးရိုးဗီဇဆိုင်ရာ သဘောတရားများကို လွန်ကဲစွာဖော်ပြခြင်းနှင့် ဆက်စပ်နေသည်။ထို့အပြင်၊ Lanr1(83A:476) လိုင်းသည် inoculation ပြီးနောက် လျင်မြန်စွာ သိသာထင်ရှားသော စာသားမှတ်တမ်းကို ပြန်လည်ပရိုဂရမ်ပြုလုပ်ခြင်းအား ပြသခဲ့ပြီး အခြားလိုင်းများသည် ဤတုံ့ပြန်မှုတွင် နှောင့်နှေးမှုကို 42 နာရီကြာ ပြသနေပါသည်။ကာကွယ်ရေးဆိုင်ရာ တုံ့ပြန်မှုများသည် TIR-NBS၊ CC-NBS-LRR နှင့် NBS-LRR မျိုးဗီဇများ၊ ရောဂါဖြစ်ပွားမှုတွင်ပါဝင်သော ပရိုတင်း 10 မျိုး၊ lipid လွှဲပြောင်းပရိုတင်းများ၊ endoglucan-1,3-β-glucosidase၊ glycine-ကြွယ်ဝသောဆဲလ်နံရံပရိုတိန်းများနှင့် အောက်ဆီဂျင်ဓာတ်ပြုမှုလမ်းကြောင်းမှ ဗီဇများနှင့် ဆက်စပ်လျက်ရှိသည်။83A:476 ၏ အစောပိုင်းတုံ့ပြန်မှုများသည် အလင်းပြန်ခြင်းဆိုင်ရာ မျိုးဗီဇများကို ဂရုတစိုက် နှိမ်နင်းခြင်း အပါအဝင်၊ မှိုဇီဝဗေဒ၏ အသီးအပွင့်ကြီးထွားမှုအဆင့်အတွင်း အောင်မြင်သောကာကွယ်မှုဖြင့် တိုက်ဆိုင်ပြီး effector သည် ကိုယ်ခံစွမ်းအားကို အစပျိုးပေးသည်ဟု အကြံပြုထားသည်။အလျားလိုက်ဆွဲခြင်းကဲ့သို့ Mandeloop တုံ့ပြန်မှုသည် နှေးကွေးသည်။
အရွက်ကျဉ်းသော lupine (NLL, Lupinus angustifolius L.) သည် မြေထဲပင်လယ်အနောက်ဘက် မြေထဲပင်လယ်ဒေသမှ ထွက်သည့် ပရိုတင်းဓာတ်မြင့်မားသော သီးနှံတစ်မျိုးဖြစ်သည်။လက်ရှိတွင် တိရစ္ဆာန်များနှင့် လူသားများအတွက် အစာအဖြစ် စိုက်ပျိုးလျက်ရှိသည်။symbiotic နိုက်ထရိုဂျင်ပြုပြင်ပေးသော ဘက်တီးရီးယားများနှင့် မြေဆီလွှာတည်ဆောက်မှု အလုံးစုံတိုးတက်ကောင်းမွန်လာမှုကြောင့် နိုက်ထရိုဂျင်ကို ပြုပြင်ပေးခြင်းကြောင့် သီးနှံလည်ပတ်မှုစနစ်တွင် အစိမ်းရောင်မြေဩဇာဟုလည်း ယူဆပါသည်။NLL သည် လွန်ခဲ့သည့်ရာစုနှစ်အတွင်း လျင်မြန်သောပြည်တွင်းမွေးမြူခြင်းလုပ်ငန်းစဉ်ကို ကြုံတွေ့ခဲ့ရပြီး မြင့်မားသောမျိုးပွားမှုဖိအားအောက်တွင် ရှိနေပါသေးသည်။NLL ၏ ကျယ်ကျယ်ပြန့်ပြန့် စိုက်ပျိုးမှုနှင့်အတူ၊ ရောဂါဖြစ်ပွားစေသော မှိုများ ဆက်တိုက်ဖြစ်ပေါ်ခြင်းသည် စိုက်ပျိုးရေးနယ်ပယ်သစ်များ ဖြစ်ပေါ်လာပြီး သီးနှံဖျက်ပိုးအသစ်များ ဖြစ်ပွားစေပါသည်။ lupine လယ်သမားများနှင့် မွေးမြူရေးသမားများအတွက် အထူးခြားဆုံးမှာ Colletotrichum lupini (Bondar) Nirenberg, Feiler & Hagedorn13 မှိုရောဂါကြောင့်ဖြစ်သော anthracnose အသွင်အပြင်ဖြစ်သည်။ lupine လယ်သမားများနှင့် မွေးမြူရေးသမားများအတွက် အထူးခြားဆုံးမှာ Colletotrichum lupini (Bondar) Nirenberg, Feiler & Hagedorn13 မှိုရောဂါကြောင့်ဖြစ်သော anthracnose အသွင်အပြင်ဖြစ်သည်။ Наиболее примечательным для фермеров и селекционеров люпина было появление антракноза, вызванногонтракноза, вызванного неванного ini (Bondar) Nirenberg၊ Feiler & Hagedorn13။ lupine လယ်သမားများနှင့် မွေးမြူရေးသမားများအတွက် အထင်ရှားဆုံးမှာ ရောဂါပိုးဖြစ်စေသော Colletotrichum lupini (Bondar) Nirenberg, Feiler & Hagedorn13 မှိုကြောင့်ဖြစ်သော anthracnose ပေါ်ပေါက်လာခြင်းဖြစ်သည်။对于羽扇豆农民和饲养者来说，最引人注目的是炭疽病的出现，它是由病来说，最引人注目的是炭疽病的出现，它是由病原真真菌35起的။အသံ Наиболее поразительным для фермеров и селекционеров люпина является появление антракноза, вызываепм Richum lupini (Bondar) Nirenberg၊ Feiler & Hagedorn13။ lupine လယ်သမားများနှင့် မွေးမြူရေးသမားများအတွက် အထူးခြားဆုံးမှာ Colletotrichum lupini (Bondar) Nirenberg, Feiler & Hagedorn13 မှိုရောဂါကြောင့်ဖြစ်သော anthracnose ပေါ်ပေါက်လာခြင်း ဖြစ်သည်။ရောဂါ၏အစောဆုံးအစီရင်ခံစာများသည် 1912 နှင့် 1929 အသီးသီးတွင်ပုံမှန်လက္ခဏာများပေါ်လာသဖြင့်ဘရာဇီးနှင့်အမေရိကန်တို့မှလာသည်။သို့သော်လည်း အနှစ် 30 ခန့်အကြာတွင် ရောဂါပိုးကို Colletotrichum gloeosporioides (Penz.) Penz အဖြစ် သတ်မှတ်ခဲ့သည်။ & Sacc.၊ teleomorph Glomerella cingulata (Stoneman) Spauld။ & Sacc.၊ teleomorph Glomerella cingulata (Stoneman) Spauld။ & Sacc., телеоморф Glomerella cingulata (Stoneman) Spauld။ & Sacc.၊ Glomerella cingulata (Stoneman) Spauld ၏ teleomorph & Sacc။ 有目的形态的Glomerella cingulata (Stoneman) Spauld။ & Sacc။ 有目的形态的Glomerella cingulata (Stoneman) Spauld။ & Sacc.၊ Glomerella cingulata (Stoneman) Spauld в Целенаправленной морфологии ။ & Sacc.၊ Glomerella cingulata (Stoneman) Spuld in Targeted Morphology & H. Schrenk, ။ & H. Schrenk, ။နှင့် H. Schrenk ။ & H.施伦克၊ & H.施伦克၊နှင့် H. Schlenk၊20 ရာစုအလယ်ပိုင်းတွင် ပြုလုပ်ခဲ့သော ပဏာမရောဂါ phenotyping သည် NLL နှင့် အဝါရောင် lupine (L. luteus L.) တွင် ခုခံမှုအချို့ကို ပြသခဲ့သည်၊ သို့သော် စမ်းသပ်ထားသော အဖြူရောင် lupine (L. albus L.) ဆက်စပ်မှုအားလုံးသည် အလွန်အန္တရာယ်များပါသည်။လေ့လာမှုများအရ anthracnose ကြီးထွားမှုသည် မိုးရွာသွန်းမှု (လေထုစိုထိုင်းဆ) နှင့် အပူချိန် (12-28°C အတွင်း) နှင့် ဆက်စပ်နေပြီး မြင့်မားသောအပူချိန် 17, 18 တွင် ခုခံမှုအား ချိုးဖောက်မှုဖြစ်စေသည်။ အမှန်တကယ်တွင်၊ conidia ပေါက်ရန်နှင့် ရောဂါစတင်ရန် လိုအပ်သည့်အချိန်သည် 24°C (16°C) အလယ်အလတ်အခြေအနေထက် လေးဆပိုတိုပါသည်။ထို့ကြောင့် လက်ရှိဖြစ်ပေါ်နေသော ကမ္ဘာကြီးပူနွေးလာမှုသည် anthracnose ပျံ့နှံ့မှုကို ဖြစ်စေသည်။သို့သော်၊ ပြင်သစ် (၁၉၈၂) နှင့် ယူကရိန်း (၁၉၈၃) တို့တွင် ရောဂါကို မကြာမီ ခြိမ်းခြောက်မှုတစ်ခုအဖြစ် တွေ့ရှိခဲ့သော်လည်း အချိန် 20၊21 တွင် lupine စက်မှုလုပ်ငန်းမှ လျစ်လျူရှုခဲ့သည်မှာ ထင်ရှားသည်။နှစ်အနည်းငယ်ကြာပြီးနောက်၊ ဤဆိုးရွားသောရောဂါသည် ကမ္ဘာတစ်ဝှမ်းသို့ ပျံ့နှံ့သွားပြီး ဩစတေးလျ၊ ပိုလန်နှင့် ဂျာမနီ ၂၂၊ ၂၃၊ ၂၄ ကဲ့သို့သော လူးပင်ထွက်သော နိုင်ငံကြီးများတွင်လည်း ထိခိုက်ခဲ့သည်။1990 ခုနှစ်များအလယ်ပိုင်းတွင် anthracnose ဖြစ်ပွားပြီးနောက်၊ ကျယ်ပြန့်သောစစ်ဆေးမှုသည် NLL19 နမူနာများတွင် ခံနိုင်ရည်ရှိသောအလှူရှင်များစွာကို ဖော်ထုတ်တွေ့ရှိခဲ့သည်။ကွဲပြားသော germplasm ရင်းမြစ်များတွင် တွေ့ရသော သီးခြား အသာစီးရနိုင်သော အယ်လီလီ (Anthracnose) ကို NLL ခံနိုင်ရည်သည်- မျိုးမျိုးတွင် Tanjil နှင့် Wonga နှင့် မျိုးရိုးရှိ AnMan တို့တွင် Lanr1 ကို ထိန်းချုပ်ထားသည်။မန္တလေး 25၊ 26။ ဤ alleles များသည် မျိုးပွားမှုအစီအစဉ်များတွင် ခံနိုင်ရည်ရှိသော ပိုးမွှားရွေးချယ်ခြင်းကို ပံ့ပိုးပေးသည့် မော်လီကျူးအမှတ်အသားများကို ဖြည့်စွက်ပေးပါသည်။Lanr1 allele ကိုသယ်ဆောင်လာသော 83A:476 သည် anthracnose ခံနိုင်ရည်အတွက် RIL လူဦးရေကို ခွဲထုတ်ထားသော ခံနိုင်ရည်ရှိသော လူဦးရေကိုရရှိရန် ဖြစ်ပေါ်လာနိုင်သော အရိုင်းမျဉ်း P27255 ဖြင့် ဖြတ်ကျော်ထားပါသည်။ ၎င်းသည် ချိတ်ဆက်မှုမှ flamracnose ခံနိုင်ရည်ရှိမှုဘောင်မှ သင်္ကေတအမှတ်အသားဖြင့် ချိန်ညှိခြင်း အလုပ်၊ NLL သည် တူညီသောခရိုမိုဆုန်း (NLL-11) တွင် allele သုံးခုလုံး၏တည်နေရာကိုဖော်ပြသော်လည်း မတူညီသောရာထူး ၂၉၊၃၄၊၃၅။သို့သော်လည်း၊ RIL အရေအတွက် အနည်းငယ်နှင့် အမှတ်အသားများနှင့် သက်ဆိုင်သော alleles များကြားတွင် မျိုးရိုးဗီဇအကွာအဝေး ကြီးမားသောကြောင့်၊ ၎င်းတို့၏ အရင်းခံဗီဇနှင့်ပတ်သက်၍ ယုံကြည်စိတ်ချရသော ကောက်ချက်မဆွဲနိုင်ပါ။အခြားတစ်ဖက်တွင်၊ lupins တွင် ပြောင်းပြန်မျိုးရိုးဗီဇကို အသုံးပြုခြင်းသည် ၎င်းတို့၏ မျိုးရိုးဗီဇဆိုင်ရာ ခြယ်လှယ်မှုကို ခက်ခဲစေသည့် ၎င်းတို့၏ ပြန်လည်မျိုးပွားနိုင်စွမ်း အလွန်နည်းပါးခြင်းကြောင့် ခက်ခဲသည်။
83A:476 (Lanr1) နှင့် Mandelup (AnMan) ကဲ့သို့သော မျိုးတူရိုးကျအခြေအနေတွင် လိုချင်သော allele သယ်ဆောင်လာသော ပိုးမွှားများ၏ ဖွံ့ဖြိုးတိုးတက်မှုသည် တောရိုင်းလူဦးရေတွင် ဆန့်ကျင်ဘက် alleles ပေါင်းစပ်မှုများရှိနေခြင်းအတွက် တံခါးဖွင့်ပေးလိုက်ပါသည်။မော်လီကျူးယန္တရားများဖြစ်နိုင်ခြေ။သီးခြားမျိုးရိုးဗီဇများမှ ထုတ်ပေးသော ကာကွယ်ရေးတုံ့ပြန်မှုများကို နှိုင်းယှဉ်ပါ။ဤလေ့လာမှုသည် C. lupini ကာကွယ်ဆေးထိုးခြင်းသို့ NLL ၏အစောပိုင်း transcriptome တုံ့ပြန်မှုကို အကဲဖြတ်သည်။ပထမဦးစွာ၊ လိုင်း 215 လိုင်းပါရှိသော European NLL ပိုးမွှားအကန့်ကို Lanr1 နှင့် AnMan alleles အမှတ်အသားပြုသော မော်လီကျူးအမှတ်အသားများကို အသုံးပြု၍ စစ်ဆေးခဲ့သည်။ထို့နောက်တွင် Anthracnose phenotyping ကို ထိန်းချုပ်ထားသော အခြေအနေအောက်တွင် မော်လီကျူးအမှတ်အသားများအတွက် ယခင်က ရွေးချယ်ထားသော NLL လိုင်း 50 တွင် လုပ်ဆောင်ခဲ့သည်။ဤစမ်းသပ်ချက်များအပေါ် အခြေခံ၍ anthracnose ခုခံမှုတွင် ကွဲပြားသည့် မျဉ်းလေးကြောင်းနှင့် Lanr1/AnMan allelic ဖွဲ့စည်းမှုအား ပေါင်းစပ်နည်းလမ်းနှစ်ခုဖြင့် ကွဲပြားသောကာကွယ်ရေးမျိုးဗီဇဖော်ပြမှု ပရိုဖိုင်ပြုလုပ်ရန်အတွက် ရွေးချယ်ခဲ့သည်- high-throughput RNA sequencing နှင့် real-time PCR quantification။
Lanr1 (Anseq3 နှင့် Anseq4) နှင့် AnMan (Anseq4) နှင့် AnMan (AnManM1) အမှတ်အသားများဖြင့် (N = 215) ကို စစ်ဆေးခြင်းမှ မျဉ်းတစ်ကြောင်းတည်းသာ (95726၊ Salamanca-b အနီး) သည် အချိုးအစားအားလုံးအတွက် “ခုခံမှု” allele ကို ချဲ့ထွင်နိုင်သော်လည်း “တွေ့ရှိရသော အချိုးအစားအားလုံးအတွက် 1” အမှတ်အသားများအားလုံးအတွက် 1 ” 58 (~73.5%) လိုင်းများ။Lanr1 အမှတ်အသား၏ “ခံနိုင်ရည်ရှိသော” အလီလီနှစ်ခုကို လိုင်းဆယ့်သုံးလိုင်းမှ ထုတ်လုပ်ခဲ့ပြီး လိုင်း ၈ လိုင်းသည် Lanr1 ၏ “ခံနိုင်ရည်ရှိသော” အလီလီများကို ထုတ်ပေးသည်။အမှတ်အသား။AnMan အမှတ်အသား (နောက်ဆက်တွဲဇယား S1) ၏ "ခုခံမှု" allele။Anseq3 အမှတ်အသားအတွက် မျဉ်းနှစ်ကြောင်းနှင့် AnManM1 အမှတ်အသားအတွက် ထပ်တူထပ်မျှဖြစ်သည်။42 လိုင်းများ (19.5%) သည် Anseq3 နှင့် Anseq4 alleles ၏ ဆန့်ကျင်ဘက်အဆင့်များကို သယ်ဆောင်သွားပြီး ဤ loci နှစ်ခုကြားတွင် ပြန်လည်ပေါင်းစည်းခြင်း၏ ကြိမ်နှုန်းမြင့်မားမှုကို ညွှန်ပြသည်။ထိန်းချုပ်ထားသောအခြေအနေများအောက်တွင် Anthracnose phenotypes များ (နောက်ဆက်တွဲဇယား S2) သည် anthracnose ၏ပြင်းထန်မှုတွင်ထင်ဟပ်ထားသည့်စမ်းသပ်ထားသောမျိုးရိုးဗီဇများ၏ခံနိုင်ရည်ကွဲပြားမှုကိုဖော်ပြသည်။ပျမ်းမျှရမှတ်များတွင် ကွာခြားချက်များသည် 1.8 (အတန်အသင့်ခံနိုင်ရည်ရှိ) မှ 6.9 (ဖြစ်ပေါ်နိုင်သည်) နှင့် အပင်အလေးချိန်ကွာခြားချက်များမှာ 0.62 (ဖြစ်နိုင်ချေ) မှ 4.45 ဂရမ် (ခံနိုင်ရည်) ရှိသည်။ စမ်းသပ်မှု၏ ထပ်တူကျမှု နှစ်ခုတွင် တွေ့ရှိရသော တန်ဖိုးများ (ရောဂါပြင်းထန်မှု ရမှတ်များအတွက် 0.51၊ အပင်အလေးချိန်အတွက် P = 0.00017 နှင့် 0.61၊ P < 0.0001) နှင့် အဆိုပါ ကန့်သတ်ဘောင်နှစ်ခုကြား (− 0.59 နှင့် − 0.77၊ P < 1) 0.000 တို့အကြား သိသိသာသာ ဆက်စပ်မှုရှိခဲ့သည်။ စမ်းသပ်မှု၏ ထပ်တူကျမှုနှစ်ခုတွင် မှတ်သားထားသော တန်ဖိုးများကြားတွင် သိသာထင်ရှားသော ဆက်စပ်မှုတစ်ခု (ရောဂါပြင်းထန်မှုရမှတ်များအတွက် 0.51၊ အပင်အလေးချိန်အတွက် P = 0.00017 နှင့် 0.61၊ P < 0.0001) နှင့် အဆိုပါ ကန့်သတ်ဘောင်နှစ်ခုကြား (− 0.59 နှင့် − 0.770 < 10) တို့ကြားတွင် ရှိခဲ့သည်။ Выявлена ​​достоверная корреляция между значениями, наблюдаемыми в двух повторностях эксперименталя (0,51 зенталя) ни, P = 0,00017 и 0,61 для массы растения, P < 0,0001), а также между этими двумя параметрами (-0,0,57) , 0,0,577 и (-0,0,59) . စမ်းသပ်မှု၏ ထပ်ခါတလဲလဲ နှစ်ကြိမ်တွင် မှတ်သားထားသော တန်ဖိုးများကြားတွင် သိသာထင်ရှားသော ဆက်စပ်မှုကို တွေ့ရှိခဲ့သည် (ရောဂါပြင်းထန်မှုရမှတ်များအတွက် 0.51၊ အပင်အလေးချိန်အတွက် P = 0.00017 နှင့် 0.61၊ P < 0.0001) နှင့် ဤဘောင်နှစ်ခုအကြား (- 0.59 နှင့် -0.77, P < 10)။在两次重复实验中观察到的值之间存在显着相关性（疾病严重程度评，分为0.51，閾疾病严重程度评，分为0.51，釤爉为0.51，010。 61，P < 0.0001）以及这两个参数之间（- 0.59和- 0.77，P < 0.0001)။在两次重复实验中观察的值之间存在相关性（疾病严重=程度，评刈0为。 5 分为。 00017，植物为为 0.61，p <0.0001) 以及两个参数之间（（（（- 0.59和– 0.59 5及两个参数之间（（- 0.59和– 0.59 5和– 9. 7– 9.– 9. .၀၀၀၁)။ Наблюдалась значительная корреляция между значениями, наблюдаемыми в двух повторностях (оценка тяжа00т 017 и масса растения 0,61, P <0,0001), и между этими двумя параметрами (-0,59 и -0,0001) 0,77, P <0,0001. ပွားခြင်းတွင် တွေ့ရှိရသော တန်ဖိုးများ (ရောဂါပြင်းထန်မှုရမှတ် 0.51၊ P = 0.00017 နှင့် အပင်အလေးချိန် 0.61၊ P < 0.0001) နှင့် ဤကန့်သတ်ဘောင်နှစ်ခုကြား (-0.59 နှင့် -0 .0001) 0.770 P.<0. ).ခံစားရနိုင်သောအပင်များတွင် တွေ့ရလေ့ရှိသော လက္ခဏာများမှာ "သိုးကျောင်းသား၏ဦးလေး" တည်ဆောက်ပုံနှင့် ဆင်တူသော ပင်စည်ကို လိမ်၍ လိမ်ခြင်း၊ နောက်တွင် လိမ္မော်ရောင်/ပန်းရောင် စပရိုရိုဇိုိုက်များပါရှိသော ဘဲဥပုံအနာများ (နောက်ဆက်တွဲ ပုံ ၁)။Lanr1 (83A:476 နှင့် Tanjil) နှင့် AnMan (Mandelup) ဗီဇများကို တော်ရုံတန်ရုံ ခံနိုင်ရည်ရှိပါသည်၊ 0.0331 နှင့် 0.0036) ပါရှိသော သြစတြေးလျ ချိတ်ဆက်မှုများ။“ခံနိုင်ရည်” Lanr1 နှင့်/သို့မဟုတ် AnMan alleles များပါရှိသည့် အချို့လိုင်းများသည် ရောဂါလက္ခဏာများပြသည်။
စိတ်ဝင်စားစရာမှာ၊ မည်သည့် “ခံနိုင်ရည်ရှိ” အမှတ်အသား allele မပါသော NLL လိုင်းအနည်းငယ်သည် anthracnose resistance ( Lanr1 သို့မဟုတ် AnMan genotypes များအတွက် နှိုင်းယှဉ်နိုင်သော သို့မဟုတ် မြင့်မားသည်) ဖြစ်သည့် Boregine (ကန့်သတ်ဘောင်နှစ်ခုလုံးအတွက် P တန်ဖိုး < 0.0001)၊ Bojar ( P value < 0.0001 for plant နှင့် 0.b အလေးချိန်အတွက် 0.009/ B တန်ဖိုး 0.009/ B) ရမှတ်အတွက် 1 နှင့် ကိုယ်အလေးချိန်အတွက် အရေးမပါပါ။) စိတ်ဝင်စားစရာမှာ၊ မည်သည့် “ခံနိုင်ရည်ရှိ” အမှတ်အသား allele မပါသော NLL လိုင်းအနည်းငယ်သည် anthracnose resistance ( Lanr1 သို့မဟုတ် AnMan genotypes များအတွက် နှိုင်းယှဉ်နိုင်သော သို့မဟုတ် မြင့်မားသည်) ဖြစ်သည့် Boregine (ကန့်သတ်ဘောင်နှစ်ခုလုံးအတွက် P တန်ဖိုး < 0.0001)၊ Bojar ( P value < 0.0001 for plant နှင့် 0.b အလေးချိန်အတွက် 0.009/ B တန်ဖိုး 0.009/ B) ရမှတ်အတွက် 1 နှင့် ကိုယ်အလေးချိန်အတွက် အရေးမပါပါ။) Интересно, что несколько линий NLL, лишенных какого-либо «резистентного» маркерного аллеля, показирики и к антракнозу (сопоставимый или более высокий, чем для генотипов Lanr1 или AnMan), таких как Boregine (значения 0 бачетр 0 jподачения P 10,0 ar (значение P < 0,0001 для оценки и 0,001 для массы растения) и популяции B-549/79b (знамчение P < 0,0001 целя для ссы)။ စိတ်ဝင်စားစရာကောင်းသည်မှာ၊ 'ခံနိုင်ရည်' အမှတ်အသား allele မပါရှိသော NLL လိုင်းအများအပြားသည် anthracnose ( Lanr1 သို့မဟုတ် AnMan မျိုးရိုးဗီဇအတွက် နှိုင်းယှဉ်နိုင်သော သို့မဟုတ် မြင့်မားသည်) ဖြစ်သည့် Boregine (ကန့်သတ်ဘောင်နှစ်ခုလုံးအတွက် P တန်ဖိုး < 0.0001 ), Bojar (P value < 0.0001 for 5.01/9) (အပင်တန်ဖိုး < 0.0001 နှင့် 9) (အပင်တန်ဖိုး < 0.0001 < 0.0001) အကဲဖြတ်ရန်အတွက် 0.0001 နှင့် ကိုယ်အလေးချိန်အတွက် သိသာထင်ရှားခြင်းမရှိပါ)။有趣的是，一些缺乏任何“抗性”标记等位基因的NLL 系显示出高水平的炭疽病抗渧因帎当或更高),例如Boregine(两个参数的P值< 0.0001)၊ Bojar (P 值<得分为0.0001，植物重量不徒姘0.0001)值< 0.0001，重量不显着）။ Boregine (ဘောင်နှစ်ခုလုံး P < 0.0001)၊ Bojar (P တန်ဖိုး < 0.0001၊ အပင်အလေးချိန် 0.001 5) နှင့် 0.09 B-တန်ဖိုး သိသိသာသာမဟုတ်) ကဲ့သို့သော "antigenic" အမှတ်အသားများမရှိသော NLL စနစ်အချို့သည် အလျားလိုက်ခံနိုင်ရည်ရှိခြင်း (Lanr1 သို့မဟုတ် AnMan ဗီဇနှင့်အထက်) နှင့် ညီမျှသည်)။ Интересно, что некоторые линии NLL, лишенные каких-либо маркерных аллелей «резистентности», показатлини вы антракнозу (сравнимые или выше, чем у генотипов Lanr1 или AnMan), такие как Boregine (значение P для обоих параметр0010), такие как Boregine (значение P для обоих параметр0000), масса растения 0,001) и популяция B-549/79b (оценка P-значение <0,0001, масса незначительна)။ စိတ်ဝင်စားစရာကောင်းသည်မှာ၊ 'ခုခံမှု' အမှတ်အသား alleles မပါရှိသော NLL လိုင်းများသည် anthracnose ခုခံမှုအဆင့်များ ( Lanr1 သို့မဟုတ် AnMan မျိုးရိုးဗီဇထက် နှိုင်းယှဉ်နိုင်သော သို့မဟုတ် မြင့်မားသည်) ဖြစ်သည့် Boregine (ကန့်သတ်ဘောင်နှစ်ခုလုံးအတွက် P တန်ဖိုး <0.0001), Bojar (P-value < 0.0001. B-904) (လူဦးရေ 900/9001, အလေးချိန် <0.0001.010) (အပင်အရေအတွက် <0.0001.010) .၀၀၀၁၊ ကိုယ်အလေးချိန် သိသိသာသာ)။ဤဖြစ်စဉ်သည် ခံနိုင်ရည်ရှိသော မျိုးရိုးဗီဇရင်းမြစ်တစ်ခု ဖြစ်နိုင်ခြေကို ညွှန်ပြပြီး အမှတ်အသားမျိုးရိုးဗီဇများနှင့် ရောဂါ ဖီနိုအမျိုးအစားများကြားတွင် ဆက်စပ်မှုမရှိခြင်း (P တန်ဖိုးများ ~0.42 မှ ~0.98) ကြား ဆက်စပ်မှုမရှိခြင်းကို ရှင်းပြသည်။ထို့ကြောင့်၊ Kolmogorov-Smirnov စမ်းသပ်မှုတွင် anthracnose ခံနိုင်ရည်ရှိမှုဆိုင်ရာ ဒေတာသည် ရမှတ်များ (P-values ​​0.25 နှင့် 0.11) နှင့် အပင်ထုထည် (P-values ​​0.47 နှင့် 0.55) အတွက် ခန့်မှန်းခြေအားဖြင့် ပုံမှန်အားဖြင့် ဖြန့်ဝေထားကြောင်း ပြသခဲ့သည်
anthracnose resistance စစ်ဆေးမှု၏ရလဒ်များအပေါ်အခြေခံ၍ စာသားမှတ်တမ်းခွဲခြမ်းစိတ်ဖြာမှု- 83A:476၊ Boregine၊ Mandelup နှင့် လူဦးရေ 22660 အတွက် လိုင်း 4 လိုင်းကို ရွေးချယ်ခဲ့သည်။ ၎င်းတို့သည် ယခင်စမ်းသပ်မှုတွင်ကဲ့သို့ပင် anthrax resistance အတွက် anthrax resistance အတွက် inoculation tests တွင် RNA sequencing ဖြင့် ၎င်းတို့ကို ယခင်စမ်းသပ်မှုတွင် တူညီကြောင်း ပေးထားသည်။ရမှတ်တန်ဖိုးများမှာ အောက်ပါအတိုင်းဖြစ်သည်- Boregin (1.71 ± 1.39), 83A: 476 (2.09 ± 1.38), Mandelup (3.82 ± 1.42) နှင့် လူဦးရေ 22660 (6.11 ± 1.29)။
Illumina NovaSeq 6000 ပရိုတိုကောသည် နမူနာတစ်ခုလျှင် ပျမ်းမျှ 40.5 Mread အတွဲများ (29.7 မှ 54.4 Mreads) (Supplementary Table S3) ကို ရရှိခဲ့သည်။ရည်ညွှန်းကိန်းစဉ်တွင် ချိန်ညှိမှုရမှတ်များသည် 75.5% မှ 88.6% အထိ ရှိပါသည်။ဇီဝပုံတူပွားများကြား စမ်းသပ်မှုမျိုးကွဲများကြားတွင် ဖတ်ရှုရေတွက်မှုဒေတာ၏ ပျမ်းမျှဆက်စပ်မှုမှာ 0.812 မှ 0.997 (ပျမ်းမျှ 0.959) ဖြစ်သည်။ ခွဲခြမ်းစိတ်ဖြာထားသော ဗီဇ ၃၅,၁၇၀ အနက်မှ ၂၉၁၇ ခုသည် ထုတ်ဖော်ပြောဆိုခြင်းမရှိကြောင်းနှင့် အခြားသော ဗီဇ ၄၇၈၅ ခုကို အသေးစိတ်အဆင့်တွင် ဖော်ပြခဲ့သည် (အခြေခံပျမ်းမျှ < 5)။ ခွဲခြမ်းစိတ်ဖြာထားသော ဗီဇ ၃၅,၁၇၀ အနက်မှ ၂၉၁၇ ခုသည် ထုတ်ဖော်ပြောဆိုခြင်းမရှိကြောင်းနှင့် အခြားသော ဗီဇ ၄၇၈၅ ခုကို အသေးစိတ်အဆင့်တွင် ဖော်ပြခဲ့သည် (အခြေခံပျမ်းမျှ < 5)။ Из 35 170 проанализированных генов 2917 не проявляли экспрессии, а остальные 4785 генов экспрельсир не (базовое среднее <5)။ ခွဲခြမ်းစိတ်ဖြာထားသော ဗီဇ ၃၅,၁၇၀ အနက်မှ ၂၉၁၇ ခုသည် ထုတ်ဖော်ပြောဆိုခြင်းမရှိကြောင်း၊ ကျန်ဗီဇ ၄၇၈၅ ခုကို အသေးစိတ်အဆင့်တွင် ဖော်ပြခဲ့သည် (အခြေခံပျမ်းမျှ <5)။在分析的35,170个基因中，2917 个没有表达，其他4785个基因的表达可以忽略不计（幇因的表达可以忽略不计（幇最））၃၅.၁၇၀ Из 35 170 проанализированных генов 2917 не экспрессировались, а остальные 4785 генов имели беэзнисьит реднее значение < 5). ခွဲခြမ်းစိတ်ဖြာထားသော ဗီဇ ၃၅,၁၇၀ အနက်မှ ၂၉၁၇ ခုကို ထုတ်ဖော်ပြောဆိုခြင်း မရှိခဲ့ဘဲ ကျန်ဗီဇ ၄၇၈၅ ခုတွင် အားနည်းသော ထုတ်ဖော်ပြောဆိုမှု (အခြေခံ ပျမ်းမျှ <5) ရှိသည်။ထို့ကြောင့် စမ်းသပ်မှုအတွင်း ဖော်ပြထားသည့် ဗီဇအရေအတွက် (အခြေခံပျမ်းမျှ ≥ 5) သည် 27,468 (78.1%) (နောက်ဆက်တွဲဇယား S4) ဖြစ်သည်။
ပထမအကြိမ်အမှတ်မှစ၍ NLL လိုင်းများအားလုံးသည် C. lupini (strain Col-08) ၏ inoculation ကို transcriptome (Table 1) ကို ပြန်လည်ပရိုဂရမ်ပြုလုပ်ခြင်းဖြင့် တုံ့ပြန်ခဲ့သည်၊ သို့သော်၊ လိုင်းများကြားတွင် သိသာထင်ရှားသော ခြားနားချက်များကို တွေ့ရှိခဲ့သည်။ထို့ကြောင့်၊ ခုခံမှုမျဉ်း 83A:476 (Lanr1 ဗီဇကို သယ်ဆောင်သည့်) သည် ဤအချိန်တွင် အခြားအချိန်အချက်များနှင့် နှိုင်းယှဉ်ပါက သီးခြားအချိန်မှတ်များထက် 31-69-ဆ တိုးလာကာ ပထမအကြိမ်အမှတ် (6 hpi) တွင် သိသာထင်ရှားသော စာသားမှတ်တမ်းကို ပြန်လည်ပရိုဂရမ်ပြုလုပ်ခြင်းကို ပြသခဲ့သည်။ထို့အပြင်၊ ဒုတိယအကြိမ်အမှတ် (12 hpi) တွင် ဗီဇအနည်းငယ်သာဖော်ပြမှုမှာ သိသာထင်ရှားစွာပြောင်းလဲနေသောကြောင့် ဤအထွတ်အထိပ်သည် တိုတောင်းပါသည်။စိတ်ဝင်စားစရာမှာ၊ လာဘ်စားသည့်စမ်းသပ်မှုတွင် ခုခံနိုင်စွမ်းမြင့်မားသည့် Boregine သည် စမ်းသပ်မှုအတွင်း ထိုသို့သော ကြီးမားသော စာသားပြန်လည်ရေးသားခြင်းအစီအစဉ်ကို မလုပ်ဆောင်ခဲ့ပေ။သို့သော်၊ ကွဲပြားစွာဖော်ပြသောမျိုးဗီဇ (DEG) အရေအတွက်သည် Boregine အတွက် တူညီပြီး 83A:476 သည် 12 HPI တွင် တူညီပါသည်။Mandelup နှင့် လူဦးရေ 22660 နှစ်ခုစလုံးသည် နောက်ဆုံးအကြိမ်အမှတ် (48 l/s) တွင် DEG အထွတ်အထိပ်ကိုပြသခဲ့သည်၊ ကာကွယ်ရေးတုံ့ပြန်မှုများတွင်နှောင့်နှေးမှုကိုပြသသည်။
83A:476 သည် အခြားလိုင်းအားလုံးနှင့် နှိုင်းယှဉ်ပါက C. lupini တွင် 6 HPI တွင် တုံ့ပြန်မှုတွင် ကြီးမားသော စာသားမှတ်တမ်းကို ပြန်လည်ပရိုဂရမ်ပြုလုပ်ခြင်းကို လုပ်ဆောင်နိုင်သောကြောင့်၊ ဤအချိန်တွင် တွေ့ရှိခဲ့သော DEGs များ၏ ~ 91% သည် မျိုးရိုးအလိုက် (ပုံ 1) ဖြစ်သည်။သို့သော်၊ Boregine၊ Mandelup နှင့် လူဦးရေ 22660 ရှိ 68.5%, 50.9% နှင့် 52.6% DEG တို့သည် လေ့လာမှုမျဥ်းများကြားတွင် အစောပိုင်းတုံ့ပြန်မှုများတွင် ထပ်နေလျှက်ရှိပါသည်။သို့သော်၊ ဤ DEG များသည် 83A:476 ကိုအသုံးပြု၍ လက်ရှိတွေ့ရှိထားသော DEG များအားလုံး၏ အနည်းငယ်မျှသာ (0.97–1.70%) မျှသာ ပါဝင်ပါသည်။ထို့အပြင်၊ ဤအချိန်တွင် မျဉ်းအားလုံးမှ DEG 11 ခု ပေါင်းစပ်ထားသည် (နောက်ဆက်တွဲဇယားများ S4-S6)၊ အပင်ခုခံမှုတုံ့ပြန်မှု၏ ဘုံအစိတ်အပိုင်းများ- lipid လွှဲပြောင်းပရိုတင်း (TanjilG_32225)၊ endoglucan-1,3-β-glucoside အင်ဇိုင်း (TanjilG_23384)၊ ဖိစီးမှု-TanjilG_32225G (Tanjil35G_2AM) နှင့် တူသော ပရိုတင်းနှစ်မျိုး _31531)၊ အခြေခံအစေးပရိုတင်း (TanjilG_32352) နှင့် glycine ကြွယ်ဝသော ဖွဲ့စည်းတည်ဆောက်ပုံဆဲလ်နံရံပရိုတိန်းနှစ်ခု (TanjilG_19701 နှင့် TanjilG_19702)။83A:476 နှင့် Boregine အကြား 24 HPI (စုစုပေါင်း 16-38% DEG) နှင့် Mandelup နှင့် လူဦးရေ 22660 အကြား 48 HPI (စုစုပေါင်း 14-20% DEG) အကြား စာသားမှတ်တမ်း တုံ့ပြန်မှုများတွင်လည်း အတော်လေးမြင့်မားသော ထပ်နေပါသည်။
Colletotrichum lupini (Wierzhenice၊ ပိုလန်၊ 1999၊ 1999) တွင် အရွက်ကျဉ်းသော lupine (NLL) လိုင်းများတွင် ကွဲပြားစွာဖော်ပြသော မျိုးဗီဇအရေအတွက် (DEG) ကိုပြသသည့် Venn ပုံကြမ်း။ခွဲခြမ်းစိတ်ဖြာထားသော NLL လိုင်းများသည်- 83A:476 (ခံနိုင်ရည်ရှိသော၊ Lanr1 allele ကိုသယ်ဆောင်သည့်), Boregine (ခံနိုင်ရည်ရှိသော၊ မျိုးရိုးဗီဇနောက်ခံကိုမသိသော), Mandelup (အတန်အသင့်ခံနိုင်ရည်ရှိသော၊ AnMan allele ကိုသယ်ဆောင်သည်) နှင့် လူဦးရေ 22660 (အလွန်ထိခိုက်နိုင်သည်)။အတိုကောက် Hpi သည် ကာကွယ်ဆေးထိုးပြီးနောက် နာရီပေါင်းများစွာကြာသည်။ဂရပ်ကို ရိုးရှင်းစေရန် သုညတန်ဖိုးများကို ဖယ်ရှားထားသည်။
6 hpi တွင် လွန်ကဲသော ဗီဇအစုံကို canonical R gene domains (နောက်ဆက်တွဲဇယား S7) ၏ရှေ့မှောက်တွင် ခွဲခြမ်းစိတ်ဖြာထားပါသည်။ဤလေ့လာမှုသည် 83A:476 တွင်သာ NBS-LRR ဒိုမိန်းများဖြင့် ဂန္ထဝင်ရောဂါခံနိုင်ရည်ရှိသောမျိုးဗီဇများ၏ စာသားမှတ်တမ်းသွင်းခြင်းကို ထုတ်ဖော်ပြသခဲ့သည်။ဤအစုတွင် TIR-NBS-LRR ဗီဇတစ်ခု (tanjilg_05042)၊ CC-NBS-LRR ဗီဇငါးခု (tanjilg_06165၊ tanjilg_06162၊ tanjilg_22773၊ tanjilg_22640၊ နှင့် tanjilg2-1616) နှင့် tanjilg_1616၊ NBS-LRRE လေးခု (tanjilg_16162) အပြင် Four NBS-Lrr (tanjilg_16162) နှင့် Four NBS-LRR (TANJILG_16162)။ဤမျိုးဗီဇအားလုံးတွင် ထိန်းသိမ်းထားသော အစီအစဥ်များဖြင့် စီစဉ်ထားသော canonical domain များရှိသည်။NBS-LRR ဒိုမိန်းဗီဇအပြင်၊ RLL kinases အများအပြားကို 6 hpi တွင် activated လုပ်ခဲ့ပြီး၊ အမည်ရ Boregine (TanjilG_19877) တွင် တစ်ခု၊ Mandelup (TanjilG_07141 နှင့် TanjilG_19877) နှင့် လူဦးရေ 22660 (TanjilG_19877) တွင်နှစ်ခု၊ ၇:၄၇၆။
C. lupini (strain Col-08) ဖြင့် ပိုးသွင်းခြင်းကို တုံ့ပြန်ရာတွင် သိသိသာသာ ပြောင်းလဲလာသော မျိုးဗီဇများကို Gene Ontology (GO) ကြွယ်ဝမှု ခွဲခြမ်းစိတ်ဖြာမှု (နောက်ဆက်တွဲ ဇယား S8) တွင် ထားရှိခဲ့ပါသည်။ ဇီဝဖြစ်စဉ်ဆိုင်ရာ အသုံးအနှုန်း အများစုမှာ လွန်ကဲစွာ ကိုယ်စားပြုသည့် အသုံးအနှုန်းမှာ "GO:0006952 ကာကွယ်ရေး တုံ့ပြန်မှု" ဖြစ်ပြီး 16 (အချိန် × မျဉ်း) ပေါင်း 6 ခုတွင် ထင်ရှားသော (P တန်ဖိုး < 0.001) (ပုံ. 2) ဖြစ်သည်။ ဇီဝဖြစ်စဉ်ဆိုင်ရာ အသုံးအနှုန်း အများစုမှာ လွန်ကဲစွာ ကိုယ်စားပြုသည့် အသုံးအနှုန်းမှာ "GO:0006952 ကာကွယ်ရေး တုံ့ပြန်မှု" ဖြစ်ပြီး 16 (အချိန် × မျဉ်း) ပေါင်း 6 ခုတွင် ထင်ရှားသော (P တန်ဖိုး < 0.001) (ပုံ. 2) ဖြစ်သည်။ Наиболее часто чрезмерно представленным термином биологического процесса был «GO: 0006952 зый всятный в 6 из 16 (время × линия) комбинаций с высокой значимостью (значение P <0,001) (рис. 2). ဇီဝဖြစ်စဉ်ဆိုင်ရာ အသုံးအနှုန်း အများစုမှာ 'GO:0006952 ကာကွယ်ရေး တုံ့ပြန်မှု'၊ 16 (အချိန် × မျိုးရိုးစဉ်ဆက်) ပေါင်းစပ်မှု 6 ခုတွင် ထင်ရှားသော အဓိပ္ပာယ်မြင့်မားသော (P တန်ဖိုး < 0.001) (ပုံ. 2)။最常被过度代表的生物过程术语是“GO: 0006952 防御反应”，它出现在16，个有（时痸×孻）高显着性（P值<0.001）（图2）။ ကိုယ်စားပြုဇီဝဖြစ်စဉ်အသုံးအနှုန်းအများဆုံးမှာ "GO:0006952 ကာကွယ်ရေးတုံ့ပြန်မှု" ဖြစ်ပြီး၊ အဓိပ္ပါယ်မြင့်မားသော (P တန်ဖိုး < 0.001) (图2) ပေါင်းစပ်မှု 16 ခုတွင် 6 ခုတွင်ပါရှိသည်။ " 6 комбинаций (время × линия) с высокой значимостью (значение P <0,001) (рис. 2). ဇီဝဖြစ်စဉ်ကို မကြာခဏ ကိုယ်စားပြုမှု လွန်ကဲစွာ ဖော်ပြခြင်းမှာ 'GO:0006952 ကာကွယ်ရေး တုံ့ပြန်မှု' ဖြစ်ပြီး၊ ပေါင်းစပ်မှု 16 ခု (အချိန် × မျဉ်း) တွင် ထင်ရှားသော အဓိပ္ပာယ် (P တန်ဖိုး < 0.001) (ပုံ 2)။ဤအသုံးအနှုန်းသည် 83A: 476 နှင့် Boregine (6 နှင့် 24 hpi) နှင့် Mandelup နှင့် လူဦးရေ 22660 (12 နှင့် 6 hpi အသီးသီး) တွင် တစ်ကြိမ်တွင် ဤအသုံးအနှုန်းကို ကျော်လွန်ဖော်ပြခဲ့သည်။၎င်းသည် ခံနိုင်ရည်ရှိသောလိုင်းများ၏ မှိုသတ်ဆေးတုံ့ပြန်မှုကို မီးမောင်းထိုးပြပြီး မျှော်လင့်ထားသည့်ရလဒ်တစ်ခုဖြစ်သည်။ထို့အပြင်၊ 83A:476 သည် "GO:0055114 redox လုပ်ငန်းစဉ်" ဟူသော ဝေါဟာရဖြင့် ကိုယ်စားပြုသော ဓာတ်တိုးဆန့်ကျင်မှုဖြစ်စဉ်နှင့် သက်ဆိုင်သော ဗီဇများကို လျင်မြန်စွာ လှုံ့ဆော်ပေးခြင်းဖြင့် C. lupini ကို တုံ့ပြန်ခဲ့ပြီး တိကျသောကာကွယ်ရေးတုံ့ပြန်မှုကို ညွှန်ပြကာ Boregine သည် 'GO' ဟူသော ဝေါဟာရနှင့် သက်ဆိုင်သည့် သီးခြားကာကွယ်ရေးတုံ့ပြန်မှုများကို ထုတ်ဖော်ပြသခဲ့သည်။:0006950 စိတ်ဖိစီးမှု တုံ့ပြန်မှု။လူဦးရေ 22660 သည် ဒုတိယ metabolites များပါ၀င်သော အလျားလိုက်ခုခံမှုတုံ့ပြန်မှုကို အသက်သွင်းခဲ့ပြီး "GO:0016104 triterpene biosynthesis လုပ်ငန်းစဉ်" နှင့် "GO:0006722 triterpene ဇီဝြဖစ်ပျက်မှုလုပ်ငန်းစဉ်" (ဝေါဟာရနှစ်ခုလုံးသည် တူညီသောဗီဇအစုတွင်သက်ဆိုင်သည်)၊ စည်းမျဥ်းစည်းမျဥ်းအရ GO: ကြွယ်ဝသောတုံ့ပြန်မှုနှင့် Boulation တို့၏ တည်ငြိမ်မှုကို ထည့်သွင်းတွက်ချက်ခြင်းဖြစ်သည်၊ 22660. ထို့အပြင်၊ အစောပိုင်းတုံ့ပြန်မှု 83A:476 (6 hpi) နှင့် နှောင့်နှေးနေသော တုံ့ပြန်မှု Mandelup နှင့် လူဦးရေ 22660 တွင် GO:0015979 'photosynthesis' ဟူသော အသုံးအနှုန်းနှင့် အခြားဆက်စပ်ဇီဝဖြစ်စဉ်များ ပါဝင်သည်။
ပိုလန်နိုင်ငံ၊ Wierzhenice၊ ပိုလန်နိုင်ငံ၊ Wierzhenice ရှိ lupine လယ်ကွင်းများမှ ရရှိသော anthrax lupine (NLL) ၏ အရွက်ကျဉ်းသော lupine (NLL) ၏ တုံ့ပြန်မှုများအတွင်း ကွဲပြားစွာဖော်ပြသော မျိုးဗီဇများ၏ မှတ်ချက်တွင် ရွေးချယ်ထားသော bioprocess gene ontology ဝေါဟာရများသည် လွန်စွာချဲ့ကားသည်။ခွဲခြမ်းစိတ်ဖြာထားသော NLL လိုင်းများသည်- 83A:476 (ခံနိုင်ရည်ရှိသော၊ မျိုးတူရိုးကျ Lanr1 allele)၊ Boregine (ခံနိုင်ရည်ရှိသော၊ အမည်မသိမျိုးရိုးဗီဇနောက်ခံ)၊ Mandelup (အတန်အသင့်ခံနိုင်ရည်ရှိသော၊ မျိုးတူရိုးကျဖြစ်သော AnMan allele) နှင့် လူဦးရေ 22660 (ဖြစ်ပေါ်နိုင်သည်)။
ဤလေ့လာမှုသည် anthracnose ခုခံမှုကို အထောက်အကူပြုသည့် မျိုးဗီဇများကို ခွဲခြားသတ်မှတ်ရန် ရည်ရွယ်သောကြောင့်၊ GO “GO: 0006952 Defensive responses” နှင့် “GO: 0055114 Redox လုပ်ငန်းစဉ်များ” ဟူသော ဝေါဟာရများအတွက် သတ်မှတ်ပေးထားသော ဗီဇများကို ဖြတ်တောက်ထားသော ခွဲခြမ်းစိတ်ဖြာမှုဖြင့် ခွဲခြမ်းစိတ်ဖြာထားသောကြောင့် အခြေခံစာကြောင်းအရ ≥ 30 သည် အနည်းဆုံး တစ်ကြောင်းဖြစ်သည်။အချိန်အတွင်း × အမှတ်သည် log2 (ခေါက်ပြောင်းလဲမှု) ၏ စာရင်းအင်းဆိုင်ရာ သိသာထင်ရှားသော တန်ဖိုးများကို ပေါင်းစပ်ထားသည်။ဤသတ်မှတ်ချက်များနှင့် ကိုက်ညီသော ဗီဇအရေအတွက်မှာ GO:0006952 အတွက် 65 ဖြစ်ပြီး GO:0055114 အတွက် 524 ဖြစ်သည်။
83A:476 သည် GO:0006952 ဟူသော အသုံးအနှုန်းဖြင့် မှတ်သားထားသော DEG အထွတ်အထိပ်နှစ်ခု၊ ပထမတစ်လက်မလျှင် ဗီဇ 6 မျိုး (ဗီဇ 64 မျိုး၊ အတက်နှင့်အဆင်း စည်းမျဉ်း) နှင့် ဒုတိယတစ်လက်မလျှင် ဗီဇ 24 မျိုး (ဗီဇ 15 ခု၊ စည်းမျဉ်းများသာ)။Boregine သည် GO:0006952 သည် တစ်ချိန်တည်းတွင် အထွတ်အထိပ်သို့ တက်သွားသော်လည်း DEG (11 နှင့် 8) နည်းပါးပြီး ဦးစားပေး အသက်သွင်းခြင်းကို ပြသခဲ့သည်။Mandeloop သည် 12 နှင့် 48 HPI တွင် GO:0006952 ၏အထွတ်အထိပ်နှစ်ခုကိုပြသခဲ့ပြီး ဗီဇ 12 ခု (ပထမတွင်အသက်ဝင်နေသောဗီဇများနှင့်ဒုတိယတစ်ခုသည်ဖိနှိပ်ထားသောဗီဇများပါရှိသော) တွင် 22660 တွင် HPI (13 မျိုးဗီဇ) တွင်ရှိသောလူဦးရေ 22660 သည်တိုးလာမှုအမြင့်ဆုံးဖြစ်သည်။စည်းမျဉ်း။ဤအထွတ်အထိပ်များရှိ GO:0006952 DEG ၏ 96.4% တွင် တူညီသောတုံ့ပြန်မှုအမျိုးအစား (အထက် သို့မဟုတ် အောက်) တွင် ဗီဇအရေအတွက် ကွာခြားမှုများရှိသော်လည်း ကာကွယ်ရေးတုံ့ပြန်မှုများတွင် သိသာထင်ရှားသောထပ်နေမှုကို ညွှန်ပြနေသင့်သည်။GO:0006952 ဟူသော အသုံးအနှုန်းနှင့် ဆက်စပ်သည့် အကြီးဆုံးအုပ်စုသည် ငတ်မွတ်ခေါင်းပါးမှုဆိုင်ရာ မက်ဆေ့ချ်ပရိုတင်း 22 (SAM22-like) ကို ကုဒ်နံပါတ် 10 ရောဂါဖြစ်ပွားစေသော ဆက်စပ်ပရိုတင်း (PR-10) ပရိုတင်းနှင့် အူတိုင်ပရိုတင်းအစေးတို့ ပါဝင်သည်။အလားတူ (MLP-like) ပရိုတင်း) ပရိုတင်း (ပုံ။ ၃)။အုပ်စုနှစ်စုသည် စကားအသုံးအနှုန်းနှင့် တုံ့ပြန်မှု၏ ဦးတည်ချက်တို့၌ ကွဲပြားသည်။SAM22 ကဲ့သို့သော ပရိုတိန်းများသည် အစောပိုင်းအချိန်မှတ်များ (6 သို့မဟုတ် 12 hpi) တွင် တသမတ်တည်းနှင့် သိသာထင်ရှားစွာ ကုဒ်လုပ်ထားသော မျိုးဗီဇများသည် စမ်းသပ်မှုအပြီး (48 hpi) တွင် တုံ့ပြန်မှုမရှိသော်လည်း MLP ကဲ့သို့သော ပရိုတိန်းများသည် 6 hpi တွင် ညှိနှိုင်းမှုကို ပြသနေပါသည်။hpi83A:476 နှင့် Mandelup 48 hp/in ရှိ၊ အခြားဒေတာအချက်များအားလုံးနီးပါးသည် တုံ့ပြန်မှုမရှိပါ။ထို့အပြင်၊ SAM22 ကဲ့သို့သော ပရိုတိန်းမျိုးဗီဇများ၏ ဖော်ပြမှုပရိုဖိုင်များတွင် ကွဲပြားမှုများသည် ခံနိုင်ရည်ရှိသော လိုင်းများတွင် အချိန်ပိုရနိုင်သော ဗီဇများထက် ဤဗီဇများကို သိသိသာသာ လှုံ့ဆော်ပေးသောကြောင့် ခံနိုင်ရည်ရှိသော လိုင်းများတွင် ကွဲပြားမှုကို သတိပြုမိသည်။အခြား LlR18A/B-like PR-10 ဗီဇသည် SAM22 ကဲ့သို့သော ပရိုတိန်းဗီဇနှင့် အလွန်ဆင်တူသော ဖော်ပြမှုပုံစံကို ပြသခဲ့သည်။
“GO:0006952 Defense Response” ဟူသော ဇီဝဖြစ်စဉ် ဝေါဟာရ၏ အဓိက အစိတ်အပိုင်းများနှင့် Lanr1 နှင့် AnMan alleles ၏ ကိုယ်စားလှယ် ဗီဇပုံစံများကို ဖော်ထုတ်ခဲ့သည်။Log2 စကေးသည် inoculated (Colletotrichum lupini၊ strain Col-08၊ lupine fields၊ Wizhenica၊ Poland၊ 1999) နှင့် control (sham-inoculated) အပင်များကြားတွင် log2 တန်ဖိုးများ (fold change) ကို ကိုယ်စားပြုသည်။အောက်ဖော်ပြပါ ရွက်ကျဉ်း lupine လိုင်းများကို ခွဲခြမ်းစိတ်ဖြာခဲ့သည်- 83A:476 (ခံနိုင်ရည်ရှိသော၊ တူညီသော Lanr1 allele ကို သယ်ဆောင်ခြင်း)၊ Boregine (ခံနိုင်ရည်ရှိသော၊ မျိုးရိုးဗီဇနောက်ခံကို မသိရှိနိုင်)၊ Mandelup (အတန်အသင့်ခံနိုင်ရည်ရှိပြီး တူညီသော AnMan allele) နှင့် လူဦးရေ 22660 (ဖြစ်ပေါ်နိုင်သည်)။
ထို့အပြင်၊ RNA-seq ကိုယ်စားလှယ်လောင်းမျိုးဗီဇ Lanr1 (TanjilG_05042) နှင့် AnMan (TanjilG_12861) တို့၏ ဖော်ပြချက်ပရိုဖိုင်များကို အကဲဖြတ်ခဲ့သည် (ပုံ။ ၃)။TanjilG_05042 ဗီဇသည် 83A:476 တွင် ပထမအကြိမ်အမှတ် (6 hpi) တွင်သာ သိသာထင်ရှားသော တုံ့ပြန်မှုကို ပြသခဲ့ပြီး TanjilG_12861 သည် Mandeloop တွင် အချိန်အချက်နှစ်ချက်ဖြစ်သည်- 6 hpi (ထိန်းချုပ်မှု) နှင့် 24 hpi (6 hpi) တွင်သာ သိသာထင်ရှားပါသည်။.)ချိန်ညှိနိုင်သည်။))
GO:0055114 "redox လုပ်ငန်းစဉ်" ဟူသော အသုံးအနှုန်းအရ လွန်ကဲစွာဖော်ပြသော မျိုးဗီဇများသည် cytochrome P450 ပရိုတိန်းများနှင့် peroxidase (ပုံ. 4) ကို ကုဒ်လုပ်ထားသော ဗီဇများဖြစ်သည်။6 HPI တွင် 83A:476 မှခွဲထုတ်ထားသောနမူနာများအတွက်၊ အများဆုံး သို့မဟုတ် အနိမ့်ဆုံး log2 (genes ၏ 86.6% အတွက်) တန်ဖိုးများ (မျိုးရိုးဗီဇများ၏ 86.6% အတွက်) ကို ယေဘူယျအားဖြင့် ပိုးမွှားများနှင့် ထိန်းချုပ်ထားသော အပင်များကြားတွင် ယေဘူယျအားဖြင့် တွေ့ရှိရပြီး ဤမျိုးဗီဇအမျိုးအစား၏ မြင့်မားသောတုံ့ပြန်မှုအား မီးမောင်းထိုးပြပါသည်။83A:476 တွင် အထူးခြားဆုံး GO: 0055114 DEG တွင် 6 hpi (503 မျိုးဗီဇ) ရှိပြီး ကျန်လိုင်းများ၏ 48 hpi (Boregine၊ 31 genes; Mandelup၊ 85 genes; နှင့် လူဦးရေ 22660၊ 78 genes))။GO:0055114 မိသားစု၏ မျိုးဗီဇအများစုတွင် ကာကွယ်ဆေးထိုးခြင်း (အသက်သွင်းခြင်းနှင့် တားဆီးခြင်း) တွင် တုံ့ပြန်မှုနှစ်မျိုးကို တွေ့ရှိခဲ့သည်။စိတ်ဝင်စားစရာကောင်းသည်မှာ၊ GO ဟူသောဝေါဟာရအတွက်သတ်မှတ်ထားသော 97.6% အထိသည် Mandelupe တွင် 48 hp ရှိသည့် Mandelupe တွင် ဤလေ့လာတွေ့ရှိချက်များအရ သိသိသာသာသေးငယ်သော်လည်း (ဆိုလိုသည်မှာ၊ ပြောင်းလဲထားသော redox genes အရေအတွက်၊ 85 နှင့် 503) ၏တုံ့ပြန်မှုပုံစံသည် 8 မှ mandelrace ၏ နှောင့်နှေးမှုပုံစံမှာ 8 မှ transcript နှင့်ဆင်တူသည်။ A:476။Boregine နှင့် လူဦးရေ 22660 တွင်၊ ဤပေါင်းစည်းမှုသည် 51.6% နှင့် 75.6% အသီးသီး နိမ့်ပါသည်။
“GO:0055114 Redox ဖြစ်စဉ်” ၏ ဇီဝဖြစ်စဉ် သက်တမ်း၏ အဓိက အစိတ်အပိုင်းများကို ဖော်ပြသည့် ပုံစံများကို ထုတ်ဖော်ခဲ့သည်။Log2 စကေးသည် inoculated (Colletotrichum lupini၊ strain Col-08၊ lupine fields၊ Wizhenica၊ Poland၊ 1999) နှင့် control (sham-inoculated) အပင်များကြားတွင် log2 တန်ဖိုးများ (fold change) ကို ကိုယ်စားပြုသည်။အောက်ဖော်ပြပါ ရွက်ကျဉ်း lupine လိုင်းများကို ခွဲခြမ်းစိတ်ဖြာခဲ့သည်- 83A:476 (ခံနိုင်ရည်ရှိသော၊ တူညီသော Lanr1 allele ကို သယ်ဆောင်ခြင်း)၊ Boregine (ခံနိုင်ရည်ရှိသော၊ မျိုးရိုးဗီဇနောက်ခံကို မသိရှိနိုင်)၊ Mandelup (အတန်အသင့်ခံနိုင်ရည်ရှိပြီး တူညီသော AnMan allele) နှင့် လူဦးရေ 22660 (ဖြစ်ပေါ်နိုင်သည်)။
83A:476 C. lupini (strain Col-08) ဖြင့် inoculation အတွက် စာသားမှတ်တမ်း တုံ့ပြန်မှုများတွင် GO:0015979 “photosynthesis” ဟူသော အသုံးအနှုန်းအရ GO:0015979 “photosynthesis” နှင့် အခြားဆက်စပ်ဇီဝဖြစ်စဉ်များ (ပုံ။ 5) ပါဝင်သည်။ဤ GO:0015979 DEG အစုံတွင် 83A:476 တွင် 6 hpi တွင် သိသိသာသာဖိနှိပ်ခံရသော ဗီဇ 105 ခုပါရှိသည်။ဤအုပ်စုခွဲတွင်၊ Mandelup တွင် 48 HPI နှင့် 35 တို့တွင် ဗီဇ 37 မျိုးကိုလည်း 22660 လူဦးရေတွင် တစ်ချိန်တည်းအမှတ်ပေးထားပြီး၊ အမျိုးအစားနှစ်မျိုးလုံးတွင်တွေ့ရလေ့ရှိသော 19 DEGs အပါအဝင်၊GO: 0015979 ဟူသော အသုံးအနှုန်းနှင့် သက်ဆိုင်သည့် မည်သည့် DEG မျှ ပေါင်းစပ်မှု (လိုင်း x အချိန်) တွင် သိသာထင်ရှားစွာ အသက်သွင်းမထားပါ။
“GO:0015979 Photosynthesis” ဇီဝဖြစ်စဉ်သက်တမ်း၏ အဓိကအစိတ်အပိုင်းများ၏ ဖော်ပြမှုပုံစံများကို ထုတ်ဖော်ပြသခဲ့သည်။Log2 စကေးသည် inoculated (Colletotrichum lupini၊ strain Col-08၊ lupine fields၊ Wizhenica၊ Poland၊ 1999) နှင့် control (sham-inoculated) အပင်များကြားတွင် log2 တန်ဖိုးများ (fold change) ကို ကိုယ်စားပြုသည်။အောက်ဖော်ပြပါ ရွက်ကျဉ်း lupine လိုင်းများကို ခွဲခြမ်းစိတ်ဖြာခဲ့သည်- 83A:476 (ခံနိုင်ရည်ရှိသော၊ တူညီသော Lanr1 allele ကို သယ်ဆောင်ခြင်း)၊ Boregine (ခံနိုင်ရည်ရှိသော၊ မျိုးရိုးဗီဇနောက်ခံကို မသိရှိနိုင်)၊ Mandelup (အတန်အသင့်ခံနိုင်ရည်ရှိပြီး တူညီသော AnMan allele) နှင့် လူဦးရေ 22660 (ဖြစ်ပေါ်နိုင်သည်)။
ကွဲပြားသောအသုံးအနှုန်းခွဲခြမ်းစိတ်ဖြာမှု၏ရလဒ်များနှင့်ရောဂါဖြစ်ပွားစေသောမှိုဆန့်ကျင်ရေးကာကွယ်ရေးတုံ့ပြန်မှုများတွင်ပါ ၀ င်သည်ဟုယူဆရသော၊ ဤဗီဇခုနစ်ခုကို အချိန်နှင့်တပြေးညီ PCR (နောက်ဆက်တွဲဇယား S9) ဖြင့်ဖော်ပြခြင်းပရိုဖိုင်များကိုအရေအတွက်တိုင်းတာရန်အတွက်ရွေးချယ်ခဲ့သည်။
Putative ပရိုတိန်းဗီဇ TanjilG_10657 အား ထိန်းချုပ်မှု (အတုခိုး) အပင်များ (နောက်ဆက်တွဲဇယား S10၊ S11) နှင့် နှိုင်းယှဉ်လေ့လာထားသော လိုင်းများနှင့် အချိန်မှတ်များအားလုံးတွင် သိသာထင်ရှားစွာ လှုံ့ဆော်ပေးပါသည်။ထို့အပြင်၊ TanjilG_10657 ၏ စကားရပ်ပရိုဖိုင်သည် လိုင်းအားလုံးအတွက် စမ်းသပ်မှုတစ်လျှောက် တိုးများလာကြောင်း ပြသခဲ့သည်။လူဦးရေ 22660 သည် TanjilG_10657 ၏ အမြင့်ဆုံး sensitivity ကို 114-fold activation ဖြင့် inoculation နှင့် 24 HPI (ပုံ. 6a) တွင် အမြင့်ဆုံးဆွေမျိုးဖော်ပြမှုအဆင့် (4.4 ± 0.4) ကိုပြသခဲ့သည်။PR10 LlR18A ပရိုတိန်းဗီဇ TanjilG_27015 သည် ဒေတာအချက်အများစုတွင် ကိန်းဂဏန်းအချက်အလတ်များ (ပုံ. 6b) ဖြင့် လိုင်းများနှင့် အချိန်မှတ်များအားလုံးတွင် အသက်သွင်းခြင်းကို ပြသခဲ့သည်။TanjilG_10657 နှင့် ဆင်တူသည်၊ TanjilG_27015 ၏ အမြင့်ဆုံး နှိုင်းရအသုံးအနှုန်းအဆင့်ကို 22660 မှ 24 HPI (19.5 ± 2.4) တွင် inoculated လူဦးရေတွင် တွေ့ရှိရပါသည်။အက်ဆစ် endochitinase ဗီဇ TanjilG_04706 သည် Boregine 6 hpi (ပုံ. 6c) မှလွဲ၍ လိုင်းအားလုံးနှင့် အချိန်တိုင်းတွင် သိသိသာသာ ထိန်းညှိပေးခဲ့သည်။၎င်းကို ပထမအကြိမ်အမှတ် (6 HPI) တွင် 83A:476 (10.5 ကြိမ်) ဖြင့် ပြင်းပြင်းထန်ထန် လှုံ့ဆော်ခဲ့ပြီး အခြားလိုင်းများတွင် (6.6-7.5 ကြိမ်) တိုးလာခဲ့သည်။စမ်းသပ်မှုအတွင်း TanjilG_04706 ၏အသုံးအနှုန်းသည် 83A:476 နှင့် Boregine တွင် အလားတူအဆင့်တွင်ရှိနေခဲ့ပြီး Mandelup နှင့် လူဦးရေ 22660 တွင် သိသိသာသာတိုးလာကာ အတော်လေးမြင့်မားသောတန်ဖိုးများ (5.9 ± 1.5 နှင့် 6.2 ± 1.5 အသီးသီး) သို့ရောက်ရှိခဲ့သည်။endoglucan-1,3-β-glucosidase-like gene TanjilG_23384 သည် လူဦးရေ 22660 မှလွဲ၍ လိုင်းအားလုံးတွင် ပထမအကြိမ်အမှတ် (6 နှင့် 12 hpi) တွင် တက်ကြွမှုကို ပြသခဲ့သည်။Mandelup (2.7 ± 0.3) နှင့် 83A:476 (1.5 ± 0.1) တွင် ဒုတိယအကြိမ်အဖြစ် TanjilG_23384 ၏ အမြင့်ဆုံး နှိုင်းရအသုံးအနှုန်းအဆင့်ကို လေ့လာတွေ့ရှိခဲ့သည်။24 HPI တွင်၊ TanjilG_23384 ဖော်ပြချက်သည် လေ့လာထားသော လိုင်းများအားလုံးတွင် အတော်လေးနည်းသည် (0.04 ± 0.009 မှ 0.44 ± 0.12)။
အရေအတွက် PCR မှဖော်ပြသော ရွေးချယ်ထားသော မျိုးဗီဇ (ag) ၏ ဖော်ပြချက်ပရိုဖိုင်များ။နံပါတ် 6၊ 12 နှင့် 24 တို့သည် ကာကွယ်ဆေးထိုးပြီးနောက် နာရီကိုကိုယ်စားပြုသည်။LanDExH7 နှင့် LanTUB6 ဗီဇများကို ပုံမှန်ပြုလုပ်ရန် အသုံးပြုခဲ့ပြီး LanTUB6 ကို စီးရီးအချင်းချင်း ချိန်ညှိခြင်းအတွက် အသုံးပြုခဲ့သည်။အမှားအယွင်းဘားများသည် ဇီဝဗေဒပုံတူပွားသုံးမျိုးအပေါ်အခြေခံသည့် စံသွေဖည်မှုကို ကိုယ်စားပြုသည်၊ တစ်ခုစီသည် ပျမ်းမျှနည်းပညာပုံတူပွားသုံးမျိုး၏ ပျမ်းမျှဖြစ်သည်။ ပိုးသတ်ထားသော (Colletotrichum lupini၊ strain Col-08၊ 1999 ခုနှစ်တွင်ရရှိသော Wierzenica၊ ပိုလန်နိုင်ငံ၊ ပိုလန်ရှိ lupine field မှရရှိသော) နှင့် control (mock-inoculated) အပင်များအကြား ကိန်းဂဏန်းအချက်အချာကျသော ကွာခြားချက်များကို ဒေတာအမှတ်များ (*P value < 0.05၊ **P value < 0.05၊ **P value ≤ 0.05) အထက်တွင် မှတ်သားထားသည်။ ပိုးသတ်ထားသော (Colletotrichum lupini၊ strain Col-08၊ 1999 ခုနှစ်တွင်ရရှိသော Wierzenica၊ ပိုလန်နိုင်ငံ၊ ပိုလန်ရှိ lupine field မှရရှိသော) နှင့် control (mock-inoculated) အပင်များအကြား ကိန်းဂဏန်းအချက်အချာကျသော ကွာခြားချက်များကို ဒေတာအမှတ်များ (*P value < 0.05၊ **P value < 0.05၊ **P value ≤ 0.05) အထက်တွင် မှတ်သားထားသည်။ Статистическая значимость различий в уровнях экспрессии между инокулированными (Colletotrichum lupini, штамм Col-08 9 в г. я люпина в Верженице, Польша) и контрольными (ложно инокулированными) растениями отмечена начаче тончнеми да (0. ние P ≤ 0,01, ***значение P ≤ 0,001)။ ပိုးသတ်ထားသော (Colletotrichum lupini၊ strain Col-08၊ 1999 ခုနှစ်တွင် ရရှိသော Wierzhenice၊ ပိုလန်) နှင့် ထိန်းချုပ်မှု (sham-inoculated) အပင်များကြားတွင် ကိန်းဂဏန်းအချက်အလတ်များ (*P တန်ဖိုး < 0.05၊ **P-value ≤ 0.01)၊接种(Colletotrichum lupini၊ Col-08株၊ 1999年从波兰Wierzenica的羽扇豆田获得)和对照（模拟接种）植徹物统计学显着性标记在数据点上方 (*P值< 0.05၊ **P 值≤ 0.01၊ ***P 值≤ 0.001)။接种 (colletotrichum lupini၊ color-08株၊ 1999 年波兰波兰 wierzenica的羽扇获得) 和对照（接种平植年植年植的统计学显着性标记数据点 上方*p 值 <0.05၊ **P ≤ 0.01၊ ***P ≤ 0.001)။ Статистически значимые различия в уровнях экспрессии между инокулированными (Colletotrichum lupini, штамнпличойсм Col-08၊ в Верженице, Польша, в 1999 г.) и контрольными (ложно инокулированными) растениями отмечены <нд точаним (0нд точанимин) ** -значение ≤ 0,01, ***P-значение ≤ 0,001)။ ပိုးသတ်ထားသော (Colletotrichum lupini၊ strain Col-08၊ 1999 ခုနှစ်တွင် Verzhenice၊ ပိုလန်နိုင်ငံ၊ ပိုလန်ရှိ lupine စိုက်ခင်းများမှရရှိသော) နှင့် ထိန်းချုပ်မှု (sham-inoculated) အပင်များကြားတွင် ကိန်းဂဏန်းအချက်အလတ်များ (*P တန်ဖိုး < 0.05 ၊ **P-value ≤ 0.01 ***) အကြားတွင် ကိန်းဂဏန်းအချက်အလက်များအရ သိသာထင်ရှားသော ကွာခြားချက်များကို မှတ်သားထားသည်။ခွဲခြမ်းစိတ်ဖြာထားသော NLL လိုင်းများသည်- 83A:476 (ခံနိုင်ရည်ရှိသော၊ homozygous Lanr1 allele)၊ Mandelup (အတန်အသင့်ခံနိုင်ရည်ရှိသော၊ homozygous AnMan allele)၊ Boregine (ခံနိုင်ရည်ရှိသော၊ အမည်မသိမျိုးရိုးဗီဇနောက်ခံ) နှင့် လူဦးရေ 22660 (ဖြစ်ပေါ်နိုင်သည်)။
Lanr1 locus ရှိ ကိုယ်စားလှယ်လောင်း gene TanjilG_05042 သည် RNA-seq လေ့လာမှုများမှ ရရှိသော ပရိုဖိုင်များမှ သိသိသာသာ ကွဲပြားသော ထုတ်ဖော်ပြောဆိုမှုပုံစံကို ပြသခဲ့သည် (ပုံ။ 6e)။Mandelup နှင့် လူဦးရေ 22660 (39.7 နှင့် 11.7 ကြိမ် အသီးသီး) တွင် ဤမျိုးဗီဇ၏ သိသာထင်ရှားစွာ အသက်သွင်းခြင်းကို တွေ့ရှိခဲ့သည် (1.4 ± 0.14 နှင့် 7.2 ± 1.3 အသီးသီး) ကိုဖြစ်ပေါ်စေသည်။83A:476 သည် TanjilG_05042 မျိုးရိုးဗီဇ (၃.၈ ဆအထိ) ကန့်သတ်ချက်အချို့ကိုလည်း ဖော်ပြခဲ့ပြီး၊ သို့သော်၊ ရရှိခဲ့သော ဆက်စပ်ဖော်ပြမှုအဆင့် (0.044 ± 0.002) သည် Mandelup နှင့် 22660 လူဦးရေထက် အဆ 30 ကျော် လျော့နည်းခဲ့သည်။qPCR မှ ခွဲခြမ်းစိတ်ဖြာထားသော ပုံစံတူ ကာကွယ်ဆေးထိုးထားသော (ထိန်းချုပ်မှု) မျိုးကွဲများရှိ မျိုးရိုးဗီဇများကြားတွင် သိသာထင်ရှားသော ကွာခြားချက်များကို ပြသခဲ့ပြီး လူဦးရေ 22660 နှင့် 83A:476 အကြား 58 ဆ ခြားနားသွားကာ လူဦးရေ 22660 နှင့် 22660 အကြား ခြားနားချက်မှာ Boregine နှင့် Mandal.up အကြား နှစ်ဆကွာခြားမှုကို ရရှိခဲ့ပါသည်။
AnMan locus၊ TanjilG_12861 တွင် 83A:476 တွင် ကာကွယ်ဆေးထိုးခြင်းကို တုံ့ပြန်သည့်အနေဖြင့် Mandelup သည် ကြားနေဖြစ်ပြီး 22660 လူဦးရေတွင် ကြားနေဖြစ်ပြီး Boregine (ပုံ. 6f) တွင် ကန့်သတ်ထားသည်။TanjilG_12861 gene ၏ နှိုင်းရအသုံးအနှုန်းသည် inoculated 83A: 476 (0.14±0.01) တွင် အမြင့်ဆုံးဖြစ်သည်။17.4 kDa အတန်းအစား I အပူရှော့တိုက်ပရိုတိန်းဗီဇ TanjilG_05080 HSP17.4 သည် လေ့လာခဲ့သော မျိုးကွဲများနှင့် အချိန်မှတ်များအားလုံးတွင် နှိုင်းရဖော်ပြမှုအဆင့်ကို ပြသခဲ့သည် (ပုံ။ 6g)။22660 လူဦးရေတွင် 24 HPI တွင် အမြင့်ဆုံးတန်ဖိုး (0.14 ± 0.02၊ ကာကွယ်ဆေးထိုးရန် တုံ့ပြန်မှု ရှစ်ဆတိုးလာသည်)။
ဗီဇဖော်ပြမှုပရိုဖိုင်များကို နှိုင်းယှဉ်ခြင်း (ပုံ။ 7) သည် TanjilG_10657 နှင့် အခြားမျိုးဗီဇလေးခုကြားတွင် မြင့်မားသောဆက်စပ်မှုကို ဖော်ပြသည်- TanjilG_27015 (r = 0.89), TanjilG_05080 (r = 0.85), TanjilG_05042 (r = 0.7042) (r = 0.7080)၊ထိုသို့သောရလဒ်များသည် ခုခံကာကွယ်မှုတုံ့ပြန်မှုများအတွင်း ဤမျိုးဗီဇများ ပူးပေါင်းထိန်းညှိမှုကို ညွှန်ပြနိုင်သည်။TanjilG_12861 နှင့် TanjilG_23384 ဗီဇများသည် အခြားမျိုးဗီဇများနှင့် နှိုင်းယှဉ်ပါက Pearson ဆက်စပ်ဖော်ကိန်းတန်ဖိုးများ (0.08 မှ 0.43 နှင့် -0.19 မှ 0.28 အသီးသီး) နိမ့်သောဖော်ပြချက်ပရိုဖိုင်များကို ပြသထားသည်။
ပမာဏ PCR ကို အသုံးပြု၍ မျိုးဗီဇဖော်ပြမှုပရိုဖိုင်များအကြား ဆက်စပ်မှုများကို ရှာဖွေတွေ့ရှိခဲ့သည်။အောက်ဖော်ပြပါ ရွက်ကျဉ်း lupine လိုင်းများကို ခွဲခြမ်းစိတ်ဖြာထားသည်- 83A:476 (ခံနိုင်ရည်ရှိသော၊ homozygous Lanr1 allele)၊ Mandelup (အတန်အသင့်ခံနိုင်ရည်ရှိသော၊ homozygous AnMan allele)၊ Boregine (ခံနိုင်ရည်ရှိ၊ မျိုးရိုးဗီဇနောက်ခံမသိ) နှင့် လူဦးရေ 22660 (ဖြစ်ပေါ်နိုင်သည်)။အချိန်အချက်သုံးချက်ကို တွက်ချက်ပြီး (6၊ 12 နှင့် 24 နာရီအကြာ)၊ ပိုးသတ်ထားသော (Colletotrichum lupini၊ strain Col-08၊ 1999 ခုနှစ်တွင် ပိုလန်နိုင်ငံ၊ Wierzhenice၊ ပိုလန်ရှိ lupine စိုက်ခင်းများမှရရှိသော) နှင့် ထိန်းချုပ်မှု (sham-inoculated) အပင်များ အပါအဝင်။စကေးသည် Pearson ဆက်စပ်ဆက်စပ်ကိန်း၏တန်ဖိုးကိုပြသသည်။
တစ်လက်မလျှင် မြင်းကောင်ရေ 6 ကောင်အား ရရှိသော အချက်အလက်အပေါ် အခြေခံ၍ WGCNA သည် အစောပိုင်း ကာကွယ်ရေး တုံ့ပြန်မှုများကို အာရုံစိုက်ရန် (နောက်ဆက်တွဲ ဇယား S12) ကို နှိုင်းယှဉ်ပြီး 9981 DEG တွင် ဖော်ထုတ်ထားသော ပိုးမွှားများနှင့် ထိန်းချုပ်ထားသော အပင်များကို နှိုင်းယှဉ်ဖော်ထုတ်ခဲ့သည်။မျိုးဗီဇအမျိုးအစားများနှင့် စမ်းသပ်မှုမျိုးကွဲများကြား ဆက်နွယ်နေသော (အပြုသဘော သို့မဟုတ် အနုတ်လက္ခဏာ) ဖော်ပြချက်ပရိုဖိုင်များနှင့်အတူ ဗီဇ module (22) ခုကို တွေ့ရှိခဲ့သည်။ ပျမ်းမျှအားဖြင့်၊ မျိုးရိုးဗီဇဖော်ပြမှုအဆင့်သည် 83A:476 > Mandelup > Boregine > လူဦးရေ 22660 (သို့သော် နှစ်မျိုးလုံးတွင်၊ ဤလမ်းကြောင်းသည် ထိန်းချုပ်မှုအပင်များတွင် ပိုမိုအားကောင်းသည်)။ ပျမ်းမျှအားဖြင့်၊ မျိုးရိုးဗီဇဖော်ပြမှုအဆင့်သည် 83A:476 > Mandelup > Boregine > လူဦးရေ 22660 (သို့သော် နှစ်မျိုးလုံးတွင်၊ ဤလမ်းကြောင်းသည် ထိန်းချုပ်မှုအပင်များတွင် ပိုမိုအားကောင်းသည်)။ В среднем уровни экспрессии генов снижались в порядке 83A:476 > Mandelup > Boregine > လူဦးရေ 22660 ( в обоих вариантак , о нариантак , о днех вариантах , о нариантах сильнее у контрольных растений)။ ပျမ်းမျှအားဖြင့်၊ မျိုးရိုးဗီဇဖော်ပြမှုအဆင့်များသည် အစီအစဉ် 83A:476 > Mandelup > Boregine > လူဦးရေ 22660 (သို့သော် မျိုးကွဲနှစ်မျိုးလုံးတွင်၊ ဤလမ်းကြောင်းသည် ထိန်းချုပ်မှုအပင်များတွင် ပိုမိုအားကောင်းသည်)။平均而言，基因表达水平按83A:476 > Mandelup > Boregine > လူဦးရေ 22660 的顺序下降（然而在，两种叶体俭物中更强)။平均而言，基因水平按按 83a: 476> mandelup> boregine> လူဦးရေ 22660 的 顺序下降（，在种更渭迧，在种更渭过，在种更渭这， . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . В среднем уровни экспрессии генов снижались в ряду 83A:476 > Mandelup > Boregine > လူဦးရေ 22660 (однако в обоих вариятат ах ее у контрольных растений)။ ပျမ်းမျှအားဖြင့်၊ စီးရီး 83A:476 > Mandelup > Boregine > လူဦးရေ 22660 တွင် ဗီဇဖော်ပြမှုအဆင့်များ လျော့ကျသွားသည် (သို့သော် နှစ်မျိုးလုံးတွင်၊ ဤလမ်းကြောင်းသည် ထိန်းချုပ်မှုအပင်များတွင် ပိုအားကောင်းသည်)။ကာကွယ်ဆေးထိုးခြင်းသည် အထူးသဖြင့် module 18၊ 19၊ 14၊ 6 နှင့် 1 (အကျိုးသက်ရောက်မှုမှကြီးစဉ်ငယ်လိုက်)၊ အနုတ်လက္ခဏာစည်းမျဉ်းများ (ဥပမာ- modules 9 နှင့် 20) သို့မဟုတ် ကြားနေအကျိုးသက်ရောက်မှုများ (ဥပမာ- module 11၊ 22၊ 8 နှင့် 13) တွင် ဗီဇဖော်ပြမှုကို မြှင့်တင်ပေးပါသည်။GO ဝေါဟာရ ကြွယ်ဝမှု ခွဲခြမ်းစိတ်ဖြာမှု (နောက်ဆက်တွဲ ဇယား S13) သည် qPCR (TanjilG_04706၊ TanjilG_23384၊ TanjilG_5 ကဲ့သို့ အများအပြားအဖြစ် ခွဲခြမ်းစိပ်ဖြာထားသော မျိုးဗီဇများ အပါအဝင် အများဆုံး အသက်ဝင်စေသည့် ပမာဏ 18) အတွက် "GO: 0006952 အကာအကွယ် တုံ့ပြန်မှုများ" ကို ဖော်ပြခဲ့သည်။ photosynthesis modules (၉)ခု။Module 18 concentrator (ပုံ. 8) ကို PR-10-like LlR18B ပရိုတင်းကို ကုဒ်လုပ်သည့် TanjilG_26536 gene အဖြစ် သတ်မှတ်ခဲ့ပြီး module 9 concentrator ကို TanjilG_28955 gene encoding the photosystem II PsbQ protein အဖြစ် ဖော်ထုတ်ခဲ့သည်။ကိုယ်စားလှယ်လောင်း anthracnose ခံနိုင်ရည်ရှိသော gene Lanr1, TanjilG_05042 ကို module 22 (ပုံ. 9) တွင်တွေ့ရှိခဲ့ပြီး "GO:0044260 Cellular macromolecular metabolic processes" နှင့် "GO:0006355 transcriptional regulation, DNA templateing" ဟူသော ဝေါဟာရများနှင့် ဆက်စပ်နေသည်။0121260 Cellular macromolecular metabolic processes"မျိုးဗီဇသည် heat stress transcription factor A-4a (HSFA4a) ကို ကုဒ်လုပ်သည်။
“GO: 0006952 ကာကွယ်ရေးဆိုင်ရာ တုံ့ပြန်မှုများ” ကို ကိုယ်စားပြုလွန်းသော ဇီဝဖြစ်စဉ်ဆိုင်ရာ အသုံးအနှုန်းများဖြင့် မော်ဂျူးများ၏ ဗီဇပူးတွဲဖော်ပြမှုကို အလေးချိန်ခွဲခြမ်းစိတ်ဖြာခြင်းqPCR (TanjilG_04706၊ TanjilG_23384၊ TanjilG_10657 နှင့် TanjilG_27015) မှ ခွဲခြမ်းစိပ်ဖြာထားသော ဗီဇလေးခုကို မီးမောင်းထိုးပြရန် Ligation ကို ရိုးရှင်းအောင် ပြုလုပ်ထားပါသည်။
“GO: 0006355: ကူးယူခြင်းဆိုင်ရာ စည်းမျဉ်း၊ DNA ပုံစံထုတ်ခြင်း” နှင့် ကိုယ်စားလှယ်လောင်း anthracnose ခံနိုင်ရည်ရှိသော မျိုးဗီဇ Lanr1 TanjilG_05042 ပါ၀င်သည့် မော်ဂျူးတစ်ခု၏ ဗီဇပူးတွဲဖော်ပြမှုကို အလေးချိန်ခွဲခြမ်းစိတ်ဖြာခြင်း။Ligation သည် TanjilG_05042 gene နှင့် Central TanjilG_01212 gene ကိုခွဲထုတ်ရန် ရိုးရှင်းပါသည်။
ဩစတေးလျတွင် ကောက်ယူထားသော Anthracnose ခံနိုင်ရည်ရှိမှု စစ်ဆေးမှုအရ အစောပိုင်းထွက်ရှိသော မျိုးစေ့အများစုသည် ခံနိုင်ရည်ရှိကြောင်း ပြသခဲ့သည်။Kalya၊ Coromup နှင့် Mandelup တို့ကို တော်ရုံတန်ရုံ ခံနိုင်ရည်ရှိကြောင်း ဖော်ပြထားပြီး Wonga၊ Tanjil နှင့် 83A:476 တို့ကို အလွန်ခံနိုင်ရည်ရှိသော 26,27,31 ဟု ဖော်ပြထားပါသည်။တူညီသောခုခံမှု allele၊ သတ်မှတ်ထားသော Lanr1၊ Coromup နှင့် Mandelup တွင် မတူညီသော allele တစ်ခုရှိသည်၊ သတ်မှတ်ထားသော AnMan10၊ 26၊ 39၊ Kalya သည် မတူညီသော allele ကိုဖြတ်သန်းနေစဉ်။, Lanr2.ဂျာမနီတွင် anthracnose ခံနိုင်ရည်ရှိခြင်းအတွက် စစ်ဆေးခြင်းမှ LanrBo36 ဟုသတ်မှတ်ထားသော Lanr1 မှလွဲ၍ အခြားကိုယ်စားလှယ်လောင်း allele ဖြင့် ခံနိုင်ရည်ရှိသော Bo7212 လိုင်းကို ဖော်ထုတ်နိုင်ခဲ့သည်။
ကျွန်ုပ်တို့၏လေ့လာမှုသည် စမ်းသပ်ထားသော ပိုးမွှားတွင် Lanr1 allele ၏ အလွန်နိမ့်သောကြိမ်နှုန်း (6%) ခန့်ကို ဖော်ပြခဲ့သည်။ဤလေ့လာတွေ့ရှိချက်သည် Anseq3 နှင့် Anseq4 အမှတ်အသားများကို အသုံးပြု၍ အရှေ့ဥရောပပိုးမွှားများကို စစ်ဆေးခြင်း၏ ရလဒ်များနှင့် ကိုက်ညီပြီး Lanr1 allele သည် ဘီလာရုစီယမ်မျဉ်းနှစ်ခုတွင်သာ ရှိနေကြောင်းပြသခဲ့သည်။ဩစတေးလျနိုင်ငံတွင် ကဲ့သို့ပင် Lanr1 allele ကို ဒေသတွင်း မွေးမြူရေးအစီအစဉ်များတွင် တွင်ကျယ်စွာ အသုံးမပြုနိုင်သေးကြောင်း သက်သေပြနေပါသည်။၎င်းသည် ဩစတေးလျအစီရင်ခံစာနှင့် နှိုင်းယှဉ်ပါက ဥရောပနယ်ပယ်အခြေအနေများတွင် Lanr1 allele မှ ပံ့ပိုးပေးသော ခုခံမှုအဆင့် နိမ့်ခြင်းကြောင့် ဖြစ်နိုင်သည်။ထို့အပြင်၊ ဩစတေးလျရှိ မိုးရွာသွန်းမှုမြင့်မားသောနေရာများတွင် anthracnose ၏လေ့လာမှုများက Lanr1 allele မှ ခုခံမှုတုံ့ပြန်မှုများသည် ရောဂါပိုး 19,42 ၏ကြီးထွားမှုနှင့် လျင်မြန်စွာဖွံ့ဖြိုးတိုးတက်မှုကို လိုလားသည့် ရာသီဥတုအခြေအနေများတွင် ထိရောက်မှုမရှိကြောင်း ပြသခဲ့သည်။တကယ်တော့၊ ယခုလေ့လာမှုတွင် Lanr1 allele သယ်ဆောင်သည့် မျိုးရိုးဗီဇများတွင် anthracnose ၏လက္ခဏာအချို့ကိုလည်း တွေ့ရှိခဲ့ပြီး C. lupini ၏ဖွံ့ဖြိုးတိုးတက်မှုအတွက် အကောင်းဆုံးအခြေအနေများအောက်တွင် ခုခံမှုပျောက်ကွယ်သွားနိုင်ကြောင်း အကြံပြုထားသည်။ထို့အပြင်၊ Lanr1 နေရာမှ ခန့်မှန်းခြေ 1 cM အကွာတွင်ရှိသော Anseq3 နှင့် Anseq4 အမှတ်အသားများ ရှိနေခြင်းအတွက် မှားယွင်းသော အပြုသဘော အဓိပ္ပာယ်ဖွင့်ဆိုချက်များသည် 28,30,43 ဖြစ်နိုင်သည်။
Lanr1 allele ကို သယ်ဆောင်လာသော 83A:476 သည် ပထမအကြိမ်ခွဲခြမ်းစိတ်ဖြာသည့်အချိန်အမှတ် (6 hpi) တွင် အကြီးစား transcriptome reprogramming ဖြင့် C. lupini inoculation ကို တုံ့ပြန်ခဲ့ကြောင်း Mandelup တွင်ပြသခဲ့ပြီး Mandelup တွင် AnMan allele ၊ transcriptomic responses များကို နောက်ပိုင်းများစွာတွင်တွေ့ရှိရပါသည်။(24 မှ ​​48 ကောင်ရေ)။ကာကွယ်ရေးတုံ့ပြန်မှုများတွင် ယာယီပြောင်းလဲမှုများသည် ရောဂါလက္ခဏာများကွဲပြားမှုများနှင့် ဆက်နွှယ်နေပြီး ခုခံအားအောင်မြင်သောတုံ့ပြန်မှုအတွက် အစောပိုင်းရောဂါပိုးများသိရှိနိုင်မှု၏အရေးကြီးမှုကို မီးမောင်းထိုးပြသည်။အပင်တစ်သျှူးများကို ကူးစက်ရန်အတွက် anthrax ပိုးမွှားများသည် အပင်ပေါက်ခြင်း၊ ဆဲလ်ခွဲခြင်းနှင့် appressorium ဖွဲ့စည်းခြင်းအပါအဝင် အိမ်ရှင်မျက်နှာပြင်ပေါ်ရှိ ကြီးထွားမှုအဆင့်များစွာကို ဖြတ်သန်းရမည်ဖြစ်သည်။appendage သည် host ၏မျက်နှာပြင်တွင်တွယ်ကပ်ပြီး host တစ်ရှူးများအတွင်းသို့ထိုးဖောက်ဝင်ရောက်မှုကိုလွယ်ကူချောမွေ့စေသည့်ကူးစက်မှုဖွဲ့စည်းပုံတစ်ခုဖြစ်သည်။ထို့ကြောင့် ပဲစေ့ထုတ်တွင် C. gloeosporioides ၏ spores များသည် ပေါက်ဖွားပြီးနောက် 75-90 မိနစ်အကြာတွင် နျူကလိယ၏ ပထမပိုင်းခွဲမှုကို ပြသသည်၊ 90-120 မိနစ်အကြာတွင် ပိုးမွှားပြွန်တစ်ခုဖွဲ့စည်းခြင်းနှင့် 4 နာရီ 45 အကြာတွင် နှိမ်နင်းမှုကို ပြသခဲ့သည်။သရက်သီး C. gloeosporioides သည် ပေါက်ဖွားပြီး ၃ နာရီအကြာတွင် အစေ့အဆံ 40% ကျော်နှင့် 4 နာရီအကြာတွင် စုပ်ထုတ်ခြင်း 20% ခန့်ကို ပြသခဲ့သည်။C. gloeosporioides ၏ ဗိုင်းရပ်စ်ပိုးနှင့်ဆက်စပ်နေသော CAP20 ဗီဇသည် ထောပတ်သီးပေါ်ရှိ 3.5 နာရီကြာပေါက်ပြီးနောက် 4 နာရီ 46 မိနစ်အကြာတွင် CAP20 ပရိုတိန်းပါဝင်မှုမြင့်မားသောမျက်နှာပြင်ဖယောင်းတွင်ပေါက်ဖွားပြီးနောက် epiphyte-forming conidia တွင် transcriptional လှုပ်ရှားမှုကိုပြသခဲ့သည်။အလားတူပင်၊ C. trifolii ရှိ melanin biosynthesis genes ၏လုပ်ဆောင်မှုကို 2 နာရီကြာပေါက်ဖွားပြီးနောက် 1 နာရီအကြာတွင် appressorium ဖွဲ့စည်းခြင်းဖြင့်လှုံ့ဆော်ခဲ့သည်။အရွက်တစ်ရှူးများကို လေ့လာချက်များအရ C. acutatum ဖြင့် ပေါင်းထားသော စတော်ဘယ်ရီသီးများသည် 8 hpi တွင် ပထမဆုံး နှိမ်နင်းခဲ့ကြောင်း၊ C. coccodes ဖြင့် ဖော်ထားသော ခရမ်းချဉ်သီးများသည် 4 hpi 48,49 တွင် ပထမဆုံး နှိမ်နင်းခဲ့ကြောင်း တွေ့ရှိရပါသည်။Colletotrichum spp ၏ အချိန်အတိုင်းအတာနှင့် အလွန်ကိုက်ညီသည်။ကူးစက်မှုဖြစ်စဉ်။83A:476 အတွက် လျင်မြန်သော ကာကွယ်ရေး တုံ့ပြန်မှုများသည် ဤလိုင်းတွင် အပင်ခံနိုင်ရည်နှင့် effector-triggered immunity (ETI) မျိုးဗီဇများ ပါဝင်နေကြောင်း အကြံပြုထားပြီး Mandelup ၏ နှောင့်နှေးသည့် တုံ့ပြန်မှုများသည် micro-sociated molecular pattern-triggered immunity (MTI) အယူအဆ 50. 83A နှင့် Mandel ၏ အစောပိုင်း တုံ့ပြန်မှုများ: 47.6နှောင့်နှေးနေသောတုံ့ပြန်မှုတွင် အတက် သို့မဟုတ် ထိန်းညှိထားသော မျိုးဗီဇများကြား တစ်စိတ်တစ်ပိုင်း ထပ်နေခြင်းသည် ETI ကို အရှိန်မြှင့်ပြီး မြှင့်တင်ထားသော MTI တုံ့ပြန်မှုဟု မကြာခဏ ယူဆသောကြောင့်၊ anaphylactic shock 51,52 ဟုသိကြသော ကူးစက်ခံရသည့်နေရာ၌ ပရိုဂရမ်လုပ်ထားသော ဆဲလ်သေခြင်းကို အဆုံးစွန်စေသော ETI ကို ပံ့ပိုးပေးပါသည်။
Gene Ontology GO:0006952 "Defense Response" ဟူသော ဝေါဟာရကို ကိုယ်စားပြုလွန်းသည့် မျိုးဗီဇအများစုသည် စိတ်ဖိစီးမှုဖြစ်စေသော အစာရှောင်ခြင်းသတင်းစကား 22 ပရိုတင်း (SAM22 နှင့် ဆင်တူသည်) နှင့် အဓိကအစေးပရိုတိန်းနှင့်တူသော (MLPs) ခုနစ်မျိုးတို့ဖြစ်သည်။31၊ 34၊ 43 နှင့် 423 ကဲ့သို့သော ပရိုတိန်းများသည် အစီအစဥ်တူညီမှုကို ပြသသည်။SAM22 ကဲ့သို့သော မျိုးဗီဇများက ပိုကြာရှည်စွာ လှုပ်ရှားနိုင်စွမ်းကို ပြသခဲ့ပြီး anthracnose ခုခံမှုအဆင့် (83A:476 နှင့် Boregine) တိုးလာမှုကို ပြသခဲ့သည်။သို့သော်၊ MLP ကဲ့သို့သော မျိုးဗီဇများသည် ကိုယ်စားလှယ်ခုခံမှု allele (83A:476/Lanr1 တွင် 6 hpi နှင့် Mandelup/AnMan တွင် 24 hpi) ဖြင့်သာ ကန့်သတ်ထားပါသည်။မှတ်သားထားသင့်သည်မှာ SAM22 ကဲ့သို့သော မျိုးတူရိုးတူတူများ အားလုံးသည် ခန့်မှန်းခြေအားဖြင့် 105 kb ရှိသော မျိုးရိုးဗီဇအစုအဝေးမှ ဆင်းသက်လာပြီး MLP ကဲ့သို့သော မျိုးဗီဇများသည် ဂျီနိုမ်၏ သီးခြားဒေသများမှ ဆင်းသက်လာကြောင်း သတိပြုသင့်သည်။Diaporthetoxica inoculation ကို NLL ခုခံမှုဆိုင်ရာ ကျွန်ုပ်တို့၏ယခင်လေ့လာမှုတွင် ထိုကဲ့သို့သော SAM22 ကဲ့သို့သော မျိုးဗီဇများ၏ ညှိနှိုင်းလုပ်ဆောင်မှုကို တွေ့ရှိခဲ့ပြီး ၎င်းတို့သည် ကာကွယ်ရေးတုံ့ပြန်မှု၏ အလျားလိုက်အစိတ်အပိုင်းများတွင်ပါ၀င်ကြောင်း အကြံပြုထားသည်။ဆာလစ်ဆီလစ်အက်ဆစ်၊ မှိုသတ်ဆေးများ သို့မဟုတ် ဟိုက်ဒရိုဂျင်ပါအောက်ဆိုဒ်ဖြင့် ထိခိုက်ဒဏ်ရာရခြင်း သို့မဟုတ် ကုသခြင်းအတွက် အပြုသဘောဆောင်သော SAM22 ကဲ့သို့သော ဗီဇများ၏ တုံ့ပြန်မှုအစီရင်ခံစာများကလည်း ဤကောက်ချက်ကို ထောက်ခံပါသည်။
MLP ကဲ့သို့သော မျိုးဗီဇများသည် အပင်မျိုးစိတ်များစွာရှိ ဘက်တီးရီးယား၊ ဗိုင်းရပ်စ်နှင့် ရောဂါဖြစ်စေနိုင်သော မှိုပိုးကူးစက်မှုများအပါအဝင် ဇီဝဗေဒဆိုင်ရာဖိအားများနှင့် ဇီဝဗေဒဆိုင်ရာဖိအားများကို တုံ့ပြန်ကြောင်းပြသထားသည်။အပင်နှင့် ရောဂါပိုးမွှားများကြား အပြန်အလှန် တုံ့ပြန်မှုဆိုင်ရာ တုံ့ပြန်မှု လမ်းညွှန်ချက်များသည် ပြင်းထန်စွာ တိုးလာသည် (ဆိုလိုသည်မှာ Verticillium dahliae နှင့် ချည်ပိုးဝင်စဉ်) မှ သိသာစွာ လျော့ကျလာသည် (ဆိုလိုသည်မှာ Alternaria spp.) 56,57 မှ ပန်းသီးပင် ပိုးဝင်ပြီးနောက် သိသိသာသာ လျော့ကျသွားသည်။MLP-like 423 မျိုးဗီဇကို သိသိသာသာ နှိမ့်ချခြင်းအား ထောပတ်သီးမှ F. niger ပိုးဝင်ခြင်းနှင့် ပန်းသီးပင် Botryosphaeria berengeriana f ပိုးဝင်စဉ်အတွင်း သိသိသာသာ နှိမ့်ချခြင်းကို တွေ့ရှိခဲ့သည်။cnpiricola နှင့် Alternaria alternata များသည် ပန်းသီးရောဂါအမျိုးအစား 58,59 ဖြစ်သည်။ထို့အပြင်၊ MLP-like 423 မျိုးဗီဇကို လွန်ကဲစွာဖော်ပြသော ပန်းသီး calli သည် ခုခံနိုင်မှုဆိုင်ရာ ဗီဇဖော်ပြမှု နည်းပါးပြီး မှိုပိုးကူးစက်မှု 59 တွင် ပိုမိုဖြစ်ပွားနိုင်ချေရှိသည်။Fusarium oxysporum f ပြီးနောက်၊ MLP-like 423 မျိုးဗီဇကိုလည်း ခံနိုင်ရည်ရှိသော ပဲပင်ပေါက်ပွားမှုတွင် ဖိနှိပ်ထားသည်။cnပဲပင်ပိုး ၆၀။
ကျွန်ုပ်တို့၏ RNA-seq လေ့လာမှုတွင်ဖော်ထုတ်ထားသော PR-10 မိသားစု၏အခြားအဖွဲ့ဝင်များသည် lipid လွှဲပြောင်းပရိုတိန်းအတွက် DIR1 ကိုတုံ့ပြန်ရန်အတွက် LlR18A နှင့် LlR18B ဗီဇများအပြင် ထိန်းညှိထားသော (1 gene) သို့မဟုတ် lipid လွှဲပြောင်းပရိုတိန်းအတွက် ကန့်သတ်ထားသော (3 ဗီဇ) ဗီဇများဖြစ်သည်။.ထို့အပြင်၊ WGCNA သည် ကာကွယ်ဆေးထိုးရန် အလွန်ထိခိုက်လွယ်ပြီး အကာအကွယ်တုံ့ပြန်မှုမျိုးဗီဇများစွာကို သယ်ဆောင်ပေးသည့် ဤ module တွင် အချက်အချာအဖြစ် LlR18B ဗီဇကို မီးမောင်းထိုးပြထားသည်။LlR18A နှင့် LlR18B ဗီဇများကို ရောဂါပိုးဖြစ်စေသော ဘက်တီးရီးယားများကို တုံ့ပြန်ရန်အတွက် အဝါရောင် lupine အရွက်များအပြင် D. toxica inoculation ပြီးနောက် NLL ပင်စည်များတွင် လှုံ့ဆော်ပေးခဲ့ပြီး၊ RSOsPR10 ၏ ဆန်မျိုးရိုးဗီဇသည် jasmonic acidpe26 လမ်းကြောင်းတွင် ပါ၀င်သည်ဟု ယူဆရသော မှိုပိုးကူးစက်မှု လျင်မြန်စွာဖြစ်ပေါ်လာပါသည်။ systemic acquired resistance (SAR) စတင်ခြင်းအတွက် လိုအပ်သော lipid သယ်ယူပို့ဆောင်ရေး ပရိုတင်းများ။အကာအကွယ်တုံ့ပြန်မှုများ ဖွံ့ဖြိုးတိုးတက်လာသည်နှင့်အမျှ၊ DIR1 ပရိုတင်းကို အဝေးမှကိုယ်တွင်းအင်္ဂါများအတွင်း SAR လှုံ့ဆော်ရန်အတွက် phloem မှတဆင့် ကူးစက်မှု၏အာရုံမှ သယ်ယူပို့ဆောင်သည်။စိတ်ဝင်စားစရာမှာ TanjilG_02313 DIR1 ဗီဇကို မျဉ်း 84A:476 နှင့် လူဦးရေ 22660 တို့တွင် ပထမအကြိမ်အမှတ်တွင် သိသာထင်ရှားစွာ လှုံ့ဆော်ပေးခဲ့သော်လည်း anthracnose resistance သည် မျဉ်း 84A:476 တွင်သာ အောင်မြင်ခဲ့သည်။ကျန်ရှိသော homologue သုံးခုသည် 83A:476 line တွင် 6 hpi တွင်သာ inoculation ကိုတုံ့ပြန်သောကြောင့် NLL ရှိ DIR1 ဗီဇ၏ လုပ်ဆောင်ချက်ခွဲအချို့ကို ညွှန်ပြနိုင်ပြီး၊ ဤတုံ့ပြန်မှုသည် အောက်ဘက်သို့ ဦးတည်ထားသည်။
ကျွန်ုပ်တို့၏လေ့လာမှုတွင်၊ "GO:0055114 Redox ဖြစ်စဉ်" ဟုခေါ်သော ဇီဝဖြစ်စဉ်နှင့် သက်ဆိုင်သည့် အသုံးအများဆုံး အစိတ်အပိုင်းများမှာ cytochrome P450 ပရိုတင်း၊ peroxidase၊ linoleic acid 9S-/13S-lipoxygenase နှင့် 1-aminocyclopropane-1-carboxylic acid oxidase တို့ဖြစ်သည်။ထို့အပြင်၊ ကျွန်ုပ်တို့၏ WGCNA သည် HSFA4a homologue ကို Lanr1 ခုခံမှုဗီဇ ကိုယ်စားလှယ် TanjilG_05042 ကဲ့သို့သော မော်ဂျူးများကို သယ်ဆောင်သည့်အချက်အချာအဖြစ် သတ်မှတ်သည်။HSFA4a သည် အပင်များတွင် နျူကလီးယား ကူးယူခြင်း၏ redox-မူတည်သော စည်းမျဉ်း၏ အစိတ်အပိုင်းတစ်ခုဖြစ်သည်။
Cytochrome P450 ပရိုတိန်းများသည် NADPH နှင့်/သို့မဟုတ် O2-မူတည်သော hydroxylation တုံ့ပြန်မှုများတွင် xenobiotics ၏ဇီဝြဖစ်ပျက်မှု၊ ဟော်မုန်းများ၊ ဖက်တီးအက်ဆစ်များ၊ sterols၊ ဆဲလ်နံရံအစိတ်အပိုင်းများ၊ ဇီဝပိုလီမာများနှင့် အကာအကွယ်ဒြပ်ပေါင်းများ chrome ၏ဇီဝပေါင်းစပ်လုပ်ဆောင်မှုကို လျှော့ချပေးသည့် oxidoreductases များသည် ကျွန်ုပ်တို့၏လေ့လာမှုတွင် အပင်၏ v 69 မှ chrome ၏လုပ်ဆောင်နိုင်စွမ်းကို လျော့နည်းစေပါသည်။ 10.6 log2 (ခေါက်ပြောင်းလဲမှု) မှ 5.7 သို့ ပြောင်းလဲထားသော homologues အများအပြား (37) နှင့် တိကျသောဗီဇများကြားတွင် တုံ့ပြန်မှုပုံစံများ ကွဲပြားမှုများကြောင့်၊ အထက်သို့ပြန်လည်ပြင်ဆင်မှုကို ထင်ဟပ်စေသည်။.ဤကဲ့သို့သောကြီးမားသောပရိုတိန်းမျိုးရိုးရှိ NLL မျိုးဗီဇများ၏ putative ဇီဝဗေဒဆိုင်ရာလုပ်ဆောင်မှုကိုရှင်းလင်းရန် RNA-seq ဒေတာကိုသာအသုံးပြုခြင်းသည်အလွန်မှန်းဆနိုင်သည်။သို့ရာတွင်၊ အချို့သော cytochrome P450 မျိုးဗီဇများသည် ဓာတ်မတည့်မှုတုံ့ပြန်မှု 69,70,71 အပါအဝင် ရောဂါဖြစ်စေနိုင်သော မှို သို့မဟုတ် ဘက်တီးရီးယားများကို ခုခံနိုင်စွမ်းတိုးလာခြင်းနှင့် ဆက်စပ်နေကြောင်း သတိပြုသင့်သည်။
Class III peroxidases များသည် အပင်ကြီးထွားမှုနှင့် ဖွံ့ဖြိုးတိုးတက်မှုအတွင်း ကျယ်ပြန့်သော ဇီဝဖြစ်စဉ်ဖြစ်စဉ်များတွင် ပါဝင်သည့် ဘက်စုံသုံး အပင်အင်ဇိုင်းများအပြင် ဆားငန်မှု၊ မိုးခေါင်မှု၊ အလင်းရောင်ပြင်းထန်မှုနှင့် ရောဂါပိုးတိုက်ခိုက်မှု72 ကဲ့သို့သော သဘာဝပတ်ဝန်းကျင်ဆိုင်ရာ ဖိစီးမှုများကို တုံ့ပြန်ရန်အတွက် ဖြစ်သည်။Peroxidases သည် Stylosanthes humilis နှင့် C. gloeosporioides၊ Lens culinaris နှင့် C. truncatum၊ Phaseolus vulgaris နှင့် C. lindemuthianum၊ Cucumis sativus နှင့် C. lagenarium73,74,75,76 အပါအဝင် အပင်မျိုးစိတ်ပေါင်းများစွာ၏ Anthracis နှင့် အပြန်အလှန်အကျိုးသက်ရောက်မှုတွင် ပါဝင်ပါသည်။အပင်တစ်သျှူး 73 မှိုမ၀င်ရောက်မီ တစ်ခါတစ်ရံ 4 HPI တွင်ပင် တုံ့ပြန်မှုသည် အလွန်လျင်မြန်သည်။peroxidase gene သည် D. toxica NLL inoculation ကို တုံ့ပြန်သည်။oxidative burst ကို ထိန်းညှိရန် သို့မဟုတ် oxidative stress များကို ဖယ်ရှားရန် ၎င်းတို့၏ ပုံမှန်လုပ်ဆောင်မှုများအပြင်၊ peroxidases များသည် ဆဲလ်နံရံအားဖြည့်တင်းမှုအပေါ် အခြေခံ၍ အတားအဆီးများဖန်တီးခြင်းဖြင့် peroxidases သည် ရောဂါပိုးများကြီးထွားမှုကို အနှောင့်အယှက်ဖြစ်စေနိုင်သည်။ဤလုပ်ဆောင်ချက်ကို 83A:476 ခံနိုင်ရည်ရှိ 6 HPI တွင် ကျွန်ုပ်တို့လေ့လာမှုတွင် သိသာထင်ရှားစွာ ထိန်းညှိပေးထားသည့် putative lignin-forming anion peroxidase ကို ကုဒ်လုပ်ထားသည့် TanjilG_03329 ဗီဇကြောင့် ဆီလီကိုတွင် သတ်မှတ်ဖော်ပြနိုင်သည်၊ သို့သော် တုံ့ပြန်ခြင်းမရှိသော အခြားမျိုးစိတ်များနှင့် အချိန်အချက်များတွင် မဟုတ်ပါ။
linoleic acid ၏ 9S-/13S-lipoxygenase သည် lipid biosynthesis78 ၏ ဓာတ်တိုးလမ်းကြောင်း၏ ပထမအဆင့်ဖြစ်သည်။ဤလမ်းကြောင်း၏ထုတ်ကုန်များသည် callose နှင့် pectin အနည်အနှစ်များဖွဲ့စည်းခြင်းမှတဆင့်ဆဲလ်နံရံကိုအားကောင်းစေခြင်းနှင့်ဓာတ်ပြုအောက်စီဂျင်မျိုးစိတ်များထုတ်လုပ်ခြင်းမှတဆင့် oxidative stress ကိုထိန်းညှိခြင်းအပါအဝင် အပင်ကာကွယ်ရေးတွင် လုပ်ဆောင်ချက်များစွာပါရှိသည်။လက်ရှိလေ့လာမှုတွင်၊ linoleic acid 9S-/13S-lipoxygenase ၏အသုံးအနှုန်းသည် မျိုးစိတ်အားလုံးတွင် ပြောင်းလဲသွားသော်လည်း ခံစားရနိုင်သောလူဦးရေ 22660 တွင်၊ စည်းမျဥ်းစည်းကမ်းများသည် မတူညီသောအချိန်များတွင် အောင်နိုင်ခဲ့ပြီး Lanr1 နှင့် AnMan allele တို့ကို ခံနိုင်ရည်ရှိသောမျိုးကွဲများတွင် သယ်ဆောင်လာချိန်တွင် ၎င်းသည် အမျိုးအစားကွဲပြားသော oxylipinhrogen ကိုကာကွယ်ပေးသည့်အလွှာတွင် အလေးပေးထားသည်။
1-aminocyclopropane-1-carboxylate oxidase (ACO) homologue ကို lupine ဖြင့် ဖော်စပ်ထားသောအခါတွင် သိသိသာသာ ထိန်းညှိထားသော (ဗီဇ 9 ခု) သို့မဟုတ် ထိန်းညှိထားသော (ဗီဇ 2 ခု) ကို လျှော့ချထားသည်။ခြွင်းချက်နှစ်ခုဖြင့်၊ ဤတုံ့ပြန်မှုအားလုံးသည် မြင်းကောင်ရေ 6 တွင် ဖြစ်ပေါ်ခဲ့သည်။83A:476 တွင်။ACO ပရိုတင်းများမှ ကြားဝင်ဆောင်ရွက်ပေးသော အင်ဇိုင်းတုံ့ပြန်မှုသည် အီသလင်းထုတ်လုပ်မှုတွင် နှုန်းကန့်သတ်သည့်အဆင့်ဖြစ်ပြီး ထို့ကြောင့် အလွန်ထိန်းချုပ်ထားသည်။Ethylene သည် အပင်ကြီးထွားမှုကို ထိန်းညှိပေးပြီး abiotic နှင့် biotic stress အခြေအနေများကို တုံ့ပြန်ရာတွင် အမျိုးမျိုးသောအခန်းကဏ္ဍမှပါဝင်သည့် အပင်ဟော်မုန်းဖြစ်သည်။ACO ကူးယူဖော်ပြခြင်းနှင့် အီသီလင်းအချက်ပြခြင်းလမ်းကြောင်းကို အသက်သွင်းခြင်းသည် ဓာတ်ပြုအောက်ဆီဂျင်မျိုးစိတ်များနှင့် phytoalexins ထုတ်လုပ်မှုကို ထိန်းညှိခြင်းဖြင့် hemibiotrophic မှို oryzae oryzae သို့ ဆန်၏ခုခံမှုကို တိုးမြှင့်ရာတွင် ပါဝင်ပါသည်။ဤလေ့လာမှုတွင်ဖော်ပြထားသော 83A:476 လိုင်းရှိ ACO homologues ၏သိသာထင်ရှားသောပြင်ဆင်မှုတစ်ခု၏နောက်ခံမြင်ကွင်းကိုဆန့်ကျင်သည့် M. oryzae နှင့် C. lupini88,89 ကြားတွင်တွေ့ရသောအလွန်ဆင်တူသောအရွက်ပိုးဝင်ခြင်းလုပ်ငန်းစဉ်သည် NLL anthracnose Ethylene ကိုအချက်ပြသည့်ဗဟိုခြေလှမ်းတစ်ခုဖြစ်သည်။
လက်ရှိလေ့လာမှုတွင်၊ အလင်းပြန်ခြင်းဆိုင်ရာ ဗီဇအများအပြားကို 83A:476 တွင် 6 hpi တွင် 6 hpi နှင့် Mandeloop တွင် 48 hpi နှင့် လူဦးရေ 22660 တွင် တွေ့ရှိခဲ့သည်။ဤပြောင်းလဲမှုများ၏ အတိုင်းအတာနှင့် တိုးတက်မှုသည် အဆင့်နှင့် အချိုးကျပါသည်။ဤစမ်းသပ်မှုတွင် Anthracnose ခံနိုင်ရည်အား တွေ့ရှိခဲ့သည်။မကြာသေးမီက၊ ဓါတ်ပြုခြင်းဆိုင်ရာ စာသားမှတ်တမ်းများကို ပြင်းထန်ပြီး စောစီးစွာ ဖိနှိပ်ခြင်းအား ရောဂါပိုးဖြစ်စေသော ဘက်တီးရီးယားနှင့် မှိုများအပါအဝင် အပင်-ရောဂါဖြစ်ပွားစေသော အပြန်အလှန်တုံ့ပြန်မှုပုံစံများစွာတွင် အစီရင်ခံထားပါသည်။အလျင်စလို (အချို့သောအပြန်အလှန်တုံ့ပြန်မှုများတွင် 2 HPI မှ) နှင့် ရောဂါပိုးကူးစက်မှုကိုတုံ့ပြန်ရာတွင် photosynthesis နှင့်ဆက်စပ်သောကမ္ဘာလုံးဆိုင်ရာဗီဇများကိုဖိနှိပ်ခြင်းသည် ဓာတ်ပြုအောက်ဆီဂျင်မျိုးစိတ်များ၏ဖြန့်ကျက်မှုနှင့် ဓာတ်မတည့်မှုတုံ့ပြန်မှု 90,94 တို့ကို ပြေလည်အောင်ဖြေရှင်းရန် salicylic acid လမ်းကြောင်းနှင့် ၎င်းတို့၏အပြန်အလှန်အပြန်အလှန်တုံ့ပြန်မှုအပေါ်အခြေခံ၍ အပင်ကိုယ်ခံစွမ်းအားကိုစတင်စေသည်။
နိဂုံးချုပ်အားဖြင့်၊ ခံနိုင်ရည်အရှိဆုံး မျိုးရိုး (83A:476) အတွက် အဆိုပြုထားသော ကာကွယ်ရေး တုံ့ပြန်မှု ယန္တရားများတွင် R gene (ဟု ယူဆရနိုင်သည် TIR-NBS-LRR TanjilG_05042) နှင့် ဓာတ်မတည့်မှု တုံ့ပြန်မှု- mediated salicylic acid နှင့် ethylene အချက်ပြခြင်းတို့ ပါဝင်သည်။လုပ်ဆောင်ချက်ကို DIR-1 ပရိုတင်းမှ ပံ့ပိုးပေးသည်။C. lupini ပိုးဝင်ခြင်းအတွက် biotrophic ကာလသည် အလွန်တိုတောင်းသည် (ခန့်မှန်းခြေအားဖြင့် 2 ရက်)၊ နောက်တွင် necrotic growth95 ဖြင့် သတိပြုသင့်သည်။ဤအဆင့်များကြားအကူးအပြောင်းသည် အိမ်ရှင်အပင်များရှိ အာရုံမခံနိုင်သောတုံ့ပြန်မှုများအတွက် အစပျိုးများအဖြစ် လုပ်ဆောင်သည့် ethylene-inducible ပရိုတင်းများ၏ဖော်ပြမှုနှင့် ဆက်စပ်မှုရှိနိုင်သည်။ထို့ကြောင့်၊ biotrophic အဆင့်တွင် C. lupini ကို အောင်မြင်စွာ ဖမ်းယူရန် အချိန်ပြတင်းပေါက်သည် အလွန်ကျဉ်းမြောင်းပါသည်။83A:476 တွင် 6 hpi တွင်တွေ့ရှိရသော redox နှင့် photosynthesis နှင့်ဆက်စပ်သော မျိုးဗီဇများ၏ ပြန်လည်ပရိုဂရမ်ပြန်လည်ရေးဆွဲခြင်းသည် မှိုပိုးဟိုက်ဖီးယား၏တိုးတက်မှုနှင့်ကိုက်ညီပြီး biotrophic အဆင့်တွင် အောင်မြင်သောကာကွယ်မှုတုံ့ပြန်မှု၏ဖွံ့ဖြိုးတိုးတက်မှုကို ညွှန်ပြသည်။Mandelup နှင့် လူဦးရေ 22660 တို့၏ transscriptomic တုံ့ပြန်မှုများသည် necrotic ကြီးထွားမှုသို့မပြောင်းမီ မှိုများကိုဖမ်းယူရန် အလွန်နှောင့်နှေးနိုင်သော်လည်း Mandelup သည် PR-10 ပရိုတင်း၏အတော်လေးမြန်သောစည်းမျဉ်းသည် အလျားလိုက်ခုခံမှုကို အားပေးသောကြောင့် Mandelup သည် 22660 လူဦးရေထက် ပိုမိုထိရောက်နိုင်သည်။
Canonical R gene မှ မောင်းနှင်သော ETI သည် anthracnose ကို ပဲတောင့်ခံနိုင်ရည်အတွက် ဘုံ ယန္တရားတစ်ခု ဖြစ်ပုံရသည်။ထို့ကြောင့်၊ ပဲစင်းငုံပုံစံ Medicago truncatula တွင်၊ anthracnose ကိုခံနိုင်ရည်အား TIR-NBS-LRR97 အပင် R gene class ၏အဖွဲ့ဝင်ဖြစ်သော RCT1 ဗီဇမှအပ်နှင်းထားသည်။ဤမျိုးဗီဇသည် အယ်လ်ဖါဖာတွင် ဖြစ်ပေါ်နိုင်သော ကျယ်ပြန့်သောရောင်စဉ်တန်း anthracnose ခုခံမှုကိုလည်း ပေးစွမ်းနိုင်သည်။သာမာန်ပဲ (P. vulgaris) တွင် ယနေ့အထိ anthracnose resistance genes နှစ်ဒါဇင်ကျော်ကို ဖော်ထုတ်ထားသည်။ဤဗီဇအချို့ကို Canonical R genes ကင်းမဲ့သောဒေသများတွင် တွေ့ရသော်လည်း အခြားအများအပြားမှာ TIR-NBS-LRRs99 အပါအဝင် NBS-LRR gene cluster ကိုသယ်ဆောင်သည့် ခရိုမိုဆုန်းများ၏အနားတွင် တည်ရှိပါသည်။ဂျီနိုမ်ကျယ်ပြန့်သော SSR လေ့လာမှုသည် သာမာန်ပဲတွင် အန်ထရပ်နိုစ်ခုခံမှုနှင့်အတူ NBS-LRR ဗီဇ၏ ဆက်စပ်မှုကိုလည်း အတည်ပြုခဲ့သည်။canonical R gene ကို အဖြူရောင် lupine 101 တွင် အဓိက anthracnose ခံနိုင်ရည်ရှိသော နေရာများကို သယ်ဆောင်သည့် genomic ဒေသတွင်လည်း တွေ့ရှိခဲ့သည်။
အပင်ပိုးဝင်ခြင်း၏အစောပိုင်းအဆင့်တွင် (ဖြစ်နိုင်ရင် 12 hpi ထက်နောက်မကျစေဘဲ) တွင်အသက်သွင်းထားသော ချက်ချင်းခုခံမှုတုံ့ပြန်မှုသည် Collelotrichum lupini မှိုကြောင့်ဖြစ်သော ကျဉ်းမြောင်းသောအရွက် lupine ကို ထိထိရောက်ရောက်ကာကွယ်ပေးကြောင်း ကျွန်ုပ်တို့၏အလုပ်ကပြသသည်။မြင့်မားသော သွင်းအားစု စီစစ်ခြင်းကို အသုံးပြု၍ Lanr1 နှင့် AnMan ခံနိုင်ရည်ရှိသော ဗီဇများဖြင့် NLL အပင်များတွင် anthracnose ခံနိုင်ရည်ရှိသော ဗီဇ၏ ကွဲပြားသော ဖော်ပြချက် ပရိုဖိုင်များကို ကျွန်ုပ်တို့ သရုပ်ပြခဲ့သည်။အောင်မြင်သော ကာကွယ်ရေးတွင် အပင်၏ ပထမဆုံး ရောဂါပိုးနှင့် ထိတွေ့ပြီး နာရီပိုင်းအတွင်း redox၊ photosynthesis နှင့် pathogenesis ပါ၀င်သော ပရိုတင်းများအတွက် မျိုးဗီဇကို ဂရုတစိုက် ဒီဇိုင်းထုတ်ခြင်း ပါဝင်သည်။အလားတူ အကာအကွယ် တုံ့ပြန်မှုများ ဖြစ်သော်လည်း အချိန်မီ နှောင့်နှေးပါက အပင်များကို ရောဂါများမှ ကာကွယ်ရာတွင် ထိရောက်မှု နည်းပါးပါသည်။Lanr1 ဗီဇမှ ဖျန်ဖြေပေးထားသော Anthrax ခုခံမှုသည် R gene ၏ ပုံမှန် လျင်မြန်သော တုံ့ပြန်မှု (effector-triggered immunity) နှင့် ဆင်တူပြီး AnMan ဗီဇသည် အလျားလိုက် တုံ့ပြန်မှု အများဆုံး ဖြစ်နိုင်သည် ( microbe-ဆက်စပ် မော်လီကျူးပုံစံ ဖြင့် အစပျိုးထားသော ကိုယ်ခံစွမ်းအား) သည် အလယ်အလတ် အဆင့်ကို ထောက်ပံ့ပေးသည်။
Anthracnose အမှတ်အသားများကို စီစစ်ရာတွင် အသုံးပြုသည့် 215 NLL လိုင်းများတွင် မျိုးဗီဇ 74 မျိုး၊ ဖြတ်ခြင်း သို့မဟုတ် မွေးမြူခြင်းမှ ရရှိသော လိုင်း 60 ၊ မျိုးပြောင်း 5 မျိုး နှင့် တောရိုင်း သို့မဟုတ် မူရင်းပိုးမွှား 76 ခုတို့ ပါဝင်သည်။အဓိကအားဖြင့် ပိုလန် (၅၈) နိုင်ငံ၊ စပိန် (၄၇) နိုင်ငံ၊ ဂျာမနီ (၂၇)၊ သြစတြေးလျ (၂၆)၊ ရုရှား (၁၉)၊ ဘီလာရုစ် (၇)၊ အီတလီ (၅) နှင့် အခြားလိုင်းများမှ နိုင်ငံပေါင်း (၁၇) နိုင်ငံမှ လာပါသည်။နိုင်ငံပေါင်း 10 မှဤအစုံတွင် ရည်ညွှန်းခံနိုင်ရည်ရှိသောလိုင်းများပါ၀င်သည်- 83A:476၊ Tanjil၊ Lanr1 allele သယ်ဆောင်သော Wonga နှင့် AnMan allele ကိုသယ်ဆောင်သည့် Mandelup တို့ပါဝင်သည်။လိုင်းများကို Poznań Plant Breeding Ltd., Wiatrowo, Poland (နောက်ဆက်တွဲဇယား S1) မှ ထိန်းသိမ်းထားသော European Lupine မျိုးရိုးဗီဇအရင်းအမြစ်ဒေတာဘေ့စ်မှ ရရှိခဲ့ခြင်းဖြစ်သည်။
အပင်များကို ထိန်းချုပ်ထားသော အခြေအနေအောက်တွင် စိုက်ပျိုးထားပါသည် (ဓာတ်ပုံရာသီ ၁၆ နာရီ၊ နေ့အပူချိန် 25 ဒီဂရီစင်တီဂရိတ်နှင့် ညအချိန်တွင် 18 ဒီဂရီစင်တီဂရိတ်)။ဇီဝပုံစံတူနှစ်မျိုးကို ခွဲခြမ်းစိတ်ဖြာခဲ့သည်။ပရိုတိုကောအရ DNeasy Plant Mini Kit (Qiagen၊ Hilden၊ Germany) ကိုအသုံးပြု၍ သုံးပတ်သားအရွယ်အရွက်များမှ DNA ကိုခွဲထုတ်ခဲ့သည်။သီးခြား DNA ၏ အရည်အသွေးနှင့် အာရုံစူးစိုက်မှုကို spectrophotometric နည်းလမ်းများ (NanoDrop 2000; Thermo Fisher Scientific၊ Waltham, MA, USA) ဖြင့် အကဲဖြတ်ခဲ့သည်။AnManM1 အမှတ်အသားသည် anthracnose ခုခံမှုဗီဇ AnMan (cv. Mandelup မှဆင်းသက်လာသည်) နှင့် gene Lanr1 (cv. Tanjil မှဆင်းသက်လာသော) အမှတ်အသားများ Anseq3 နှင့် Anseq4 တို့ကို 11,26,28 တွင်ခွဲခြမ်းစိတ်ဖြာထားသည်။ခံနိုင်ရည်ရှိသော allele အတွက် Homozygotes ကို "1" အဖြစ်၊ ခံစားရနိုင်သော - "0" အဖြစ်၊ နှင့် heterozygotes - 0.5 အဖြစ် အမှတ်ပေးထားပါသည်။
AnManM1၊ AnSeq3 နှင့် AnSeq4 အမှတ်အသားများအတွက် စစ်ဆေးမှုရလဒ်များနှင့် နောက်ဆုံးနောက်ဆက်တွဲစမ်းသပ်မှုများအတွက် မျိုးစေ့များရရှိနိုင်မှုအပေါ် အခြေခံ၍ anthracnose resistance phenotyping အတွက် 50 NLL လိုင်းများကို ရွေးချယ်ခဲ့သည်။ခွဲခြမ်းစိတ်ဖြာမှုကို နေ့အချိန်တွင် အပူချိန် 22°C နှင့် ညအချိန်တွင် 19°C ရှိသော 14 နာရီ photoperiod ဖြင့် ကွန်ပျူတာထိန်းချုပ်ထားသော ဖန်လုံအိမ်တွင် ထပ်တူပြုလုပ်ထားသည်။အစေ့အဆံသည် မာကျောလွန်းပြီး ညီညွှတ်မှုသေချာစေရန် မျိုးစေ့မကြဲမီ အစေ့များကို ခြစ်ထုတ်ခြင်း (သန္ဓေသားလောင်း၏ တစ်ဖက်ခြမ်းရှိ အစေ့အဆံကို ချွန်ထက်သောဓားဖြင့် ဖြတ်တောက်ခြင်း) သည် မျိုးစေ့မကြဲမီတွင် အစေ့အဆံများ မာကျောပြီး ညီညွှတ်မှုသေချာစေရန်အတွက် မျိုးစေ့မကြဲမီတွင် အစေ့များကို ခြစ်ထားပါ။အပင်များကို ပိုးမွှားမြေဆီလွှာ (TS-1 REC 085 Medium Basic၊ Klasmann-Deilmann Polska၊ Warsaw၊ Poland) ဖြင့် အိုး(၁၁ × ၁၁ × ၂၁ စင်တီမီတာ) တွင် စိုက်ပျိုးခဲ့ပါသည်။ပိုလန်နိုင်ငံ၊ Verzhenitsa၊ Greater Poland (52° 27′ 42″ N 17° 04′ 05″ E) ကွင်းပြင်တွင် စိုက်ပျိုးထားသော အရွက်ကျဉ်း lupine အပင်များ၏ ပင်စည်များမှ Colletotrichum lupini Col-08 မျိုးစိတ်ဖြင့် ပေါက်ဖွားခြင်းဖြစ်သည်။ဧရိယာတစ်ခုရယူပါ။အထီးကျန်များကို SNA အလတ်စားတွင် 20°C. အနက်ရောင်အလင်းအောက်တွင် 21 ရက်ကြာ မွေးမြူထားကာ အမှုန်အမွှားများကို ဖြစ်ပေါ်စေသည်။မျိုးစေ့ကြဲပြီး လေးပတ်အကြာတွင် အပင်များသည် အရွက် 4-6 ရွက်အဆင့်သို့ရောက်ရှိသောအခါ 0.5 x 106 conidia per ml တွင် conidia suspension ဖြင့်ပက်ဖြန်းခြင်းဖြင့် inoculation ကိုလုပ်ဆောင်သည်။စိုက်ပျိုးပြီးနောက် အပင်များကို စိုထိုင်းဆ ၉၈% နှင့် အပူချိန် ၂၅ ဒီဂရီစင်တီဂရိတ်တွင် ၂၄ နာရီ အမှောင်ထဲတွင် ထားရှိကာ ကွန်နီဒီးယား၏ အပေါက်နှင့် ပိုးဝင်ခြင်းလုပ်ငန်းစဉ်ကို လွယ်ကူချောမွေ့စေပါသည်။ထို့နောက် အပင်များကို 22°C နေ့ / 19°C ညတွင် 14 နာရီ photoperiod အောက်တွင် စိုက်ပျိုးပြီး 70% စိုထိုင်းဆ။ပိုးဝင်ပြီး ၂၂ ရက်အကြာတွင် ရောဂါရမှတ်ကို 0 (ခုခံအား) မှ 9 အထိ (အလွန်ဖြစ်ပေါ်နိုင်သည်) သည် ပင်စည်နှင့် အရွက်များပေါ်ရှိ ဒဏ်ရာများရှိနေခြင်း သို့မဟုတ် မရှိခြင်းအပေါ် မူတည်၍ ရောဂါရမှတ်ကို ရရှိသည်။ထို့အပြင် အမှတ်ပေးပြီးနောက် အပင်များ၏ အလေးချိန်ကို တိုင်းတာခဲ့ပါသည်။အမှတ်အသား genotypes နှင့် ရောဂါ phenotypes အကြား ဆက်စပ်မှုများကို အမှတ်နှစ်ဆင့် ဆက်နွယ်မှုများ ( anthracnose resistance phenotype ကိုခွဲခြမ်းစိတ်ဖြာရန်အတွက် မျဉ်းများထဲတွင် ကွဲကွဲပြားပြား အမှတ်အသားများ မရှိခြင်း) အဖြစ် တွက်ချက်ထားပါသည်။