Nature.com भ्रमण गर्नुभएकोमा धन्यवाद।तपाईंले प्रयोग गरिरहनुभएको ब्राउजर संस्करणमा सीमित CSS समर्थन छ।उत्तम अनुभवको लागि, हामी तपाईंलाई अपडेट गरिएको ब्राउजर प्रयोग गर्न सिफारिस गर्छौं (वा इन्टरनेट एक्सप्लोररमा अनुकूलता मोड असक्षम गर्नुहोस्)।यस बीचमा, निरन्तर समर्थन सुनिश्चित गर्न, हामी शैली र जाभास्क्रिप्ट बिना साइट रेन्डर गर्नेछौं।
अनियन्त्रित रक्तस्राव मृत्युको प्रमुख कारणहरू मध्ये एक हो।द्रुत हेमोस्टेसिस प्राप्त गर्नाले लडाई, ट्राफिक दुर्घटनाहरू, र मृत्यु घटाउने कार्यहरूमा पहिलो सहायताको रूपमा विषयको अस्तित्व सुनिश्चित गर्दछ।न्यानोपोरस फाइबर-रिइन्फोर्स्ड कम्पोजिट स्क्याफोल्ड (NFRCS) एक साधारण हेमोस्टेटिक फिल्म-फर्मिङ कम्पोजिसन (HFFC) बाट व्युत्पन्न एक निरन्तर चरणको रूपमा हेमोस्टेसिस ट्रिगर र बढाउन सक्छ।NFRCS को विकास ड्र्यागनफ्लाइको पखेटाको डिजाइनमा आधारित छ।ड्र्यागनफ्लाइ पखेटाको संरचनामा अनुप्रस्थ र अनुदैर्ध्य पखेटाहरू हुन्छन्, र माइक्रोस्ट्रक्चरको अखण्डता कायम राख्न पखेटा झिल्लीहरू एकअर्कासँग जोडिएका हुन्छन्।HFFC ले फाइबरको सतहलाई नैनोमिटर मोटाईको फिल्मसँग समान रूपमा कोट गर्दछ र अनियमित रूपमा वितरित कपास मोटाई (Ct) (छरिएको चरण) लाई न्यानोपोरस संरचना बनाउनको लागि जडान गर्दछ।निरन्तर र फैलिएको चरणहरूको संयोजनले व्यावसायिक रूपमा उपलब्ध उत्पादनहरूको तुलनामा उत्पादनको लागत दस गुणा घटाउँछ।परिमार्जित NFRCS (ट्याम्पोन वा रिस्टब्यान्ड) विभिन्न बायोमेडिकल अनुप्रयोगहरूमा प्रयोग गर्न सकिन्छ।भिभो अध्ययनहरूले निष्कर्ष निकालेका छन् कि विकसित Cp NFRCS ले अनुप्रयोगको साइटमा कोगुलेसन प्रक्रिया ट्रिगर गर्दछ र बढाउँछ।NFRCS ले सूक्ष्म वातावरणलाई परिमार्जन गर्न सक्छ र यसको न्यानोपोरस संरचनाको कारण सेलुलर स्तरमा कार्य गर्न सक्छ जसले एक्साइजन घाउ मोडेलमा राम्रो घाउ निको हुन्छ।
लडाईको समयमा अनियन्त्रित रक्तस्राव, इन्ट्राअपरेटिभ र आपतकालीन अवस्थामा घाइतेको जीवनमा गम्भीर खतरा हुन सक्छ।यी अवस्थाहरूले थप परिधीय भास्कुलर प्रतिरोधमा समग्र वृद्धि निम्त्याउँछ, जसले हेमोरेजिक झटका निम्त्याउँछ।शल्यक्रियाको समयमा र पछि रक्तस्राव नियन्त्रण गर्न उपयुक्त उपायहरू सम्भावित जीवन-धम्कीको रूपमा मानिन्छ 2,3।ठूला भाँडाहरूलाई क्षति पुर्‍याउँदा ठूलो मात्रामा रगतको हानि हुन्छ, जसको परिणामस्वरूप मृत्यु दर ≤ 50% लडाईमा र 31% शल्यक्रियाको समयमा हुन्छ।ठूलो मात्रामा रगतको कमीले शरीरको मात्रा घटाउँछ, जसले कार्डियक आउटपुट घटाउँछ।कुल परिधीय भास्कुलर प्रतिरोधमा वृद्धि र माइक्रोसर्क्युलेसनको प्रगतिशील हानिले जीवन-समर्थन अंगहरूमा हाइपोक्सिया निम्त्याउँछ।यदि अवस्था प्रभावकारी हस्तक्षेप बिना जारी रह्यो भने हेमोरेजिक झटका हुन सक्छ 1,4,5।अन्य जटिलताहरूमा हाइपोथर्मिया र मेटाबोलिक एसिडोसिसको प्रगति समावेश छ, साथसाथै कोगुलेसन डिसअर्डर जसले कोगुलेसन प्रक्रियामा बाधा पुर्‍याउँछ।गम्भीर हेमोरेजिक झटका मृत्युको उच्च जोखिमसँग सम्बन्धित छ 6,7,8।ग्रेड III (प्रोग्रेसिभ) झटकामा, इन्ट्राअपरेटिभ र पोस्टपोरेटिभ बिरामीता र मृत्युदरको समयमा बिरामीको बाँच्नको लागि रगत ट्रान्सफ्युजन आवश्यक हुन्छ।माथिका सबै जीवन-खतरनाक अवस्थाहरूलाई पार गर्न, हामीले न्यानोपोरस फाइबर-प्रबलित कम्पोजिट स्क्याफोल्ड (NFRCS) को विकास गरेका छौं जसले पानीमा घुलनशील हेमोस्टेटिक पोलिमरहरूको संयोजन प्रयोग गरेर न्यूनतम बहुलक एकाग्रता (०.५%) प्रयोग गर्दछ।
फाइबर सुदृढीकरणको प्रयोगको साथ, लागत-प्रभावी उत्पादनहरू विकास गर्न सकिन्छ।अनियमित रूपमा व्यवस्थित फाइबरहरू ड्र्यागनफ्लाइको पखेटाको संरचनासँग मिल्दोजुल्दो छ, पखेटाहरूमा तेर्सो र ठाडो पट्टीहरूद्वारा सन्तुलित।पखेटाको अनुप्रस्थ र अनुदैर्ध्य नसहरूले पखेटा झिल्लीसँग सञ्चार गर्दछ (चित्र 1)।NFRCS ले राम्रो भौतिक र मेकानिकल बल (चित्र 1) को साथ मचान प्रणालीको रूपमा प्रबलित Ct समावेश गर्दछ।किफायती र शिल्प कौशलको कारण, शल्यचिकित्सकहरूले अपरेशन र ड्रेसिङको समयमा कपास थ्रेड गेजहरू (Ct) प्रयोग गर्न रुचाउँछन्। तसर्थ, यसको बहु फाइदाहरू विचार गर्दै, > 90% क्रिस्टलीय सेल्युलोज (हेमोस्टेटिक गतिविधिको वृद्धिमा प्रदान गर्दछ), Ct लाई NFRCS9,10 को कंकाल प्रणालीको रूपमा प्रयोग गरिएको थियो। तसर्थ, यसको बहु फाइदाहरू विचार गर्दै, > 90% क्रिस्टलीय सेल्युलोज (हेमोस्टेटिक गतिविधिको वृद्धिमा प्रदान गर्दछ), Ct लाई NFRCS9,10 को कंकाल प्रणालीको रूपमा प्रयोग गरिएको थियो। Следовательно, учитывая его многочисленные преимущества, в том числе > ९०% кристаллической целюлюлозы (участвествует в ивности), Ct использовали в качестве скелетной системы NFRCS9,10। तसर्थ, यसका धेरै फाइदाहरू दिइयो, जसमा> 90% क्रिस्टलीय सेल्युलोज (बढि हेमोस्टेटिक गतिविधिमा संलग्न), Ct लाई NFRCS कंकाल प्रणाली 9,10 को रूपमा प्रयोग गरिएको थियो।因此,考虑到它的多重益处，包括> ९०%系统।因此,考虑到它的多重益处，包括> ९०%तसर्थ, यसको धेरै फाइदाहरू दिईएको छ, जसमा 90% भन्दा बढी क्रिस्टलीय सेल्युलोज (हेमोस्टेटिक गतिविधि बढाउन मद्दत गर्दछ), Ct लाई NFRCS9,10 को लागि मचानको रूपमा प्रयोग गरिएको थियो।Ct सतही रूपमा लेपित थियो (न्यानो-बाक्लो फिल्म गठन अवलोकन गरिएको थियो) र हेमोस्टेटिक फिल्म-फर्मिङ कम्पोजिसन (HFFC) सँग आपसमा जोडिएको थियो।HFFC ले एक matrigel जस्तै कार्य गर्दछ, अनियमित रूपमा Ct सँगै राखेर।विकसित डिजाइनले फैलिएको चरण (रिफोर्सिङ फाइबर्स) भित्र तनाव फैलाउँछ।न्यूनतम पोलिमर सांद्रता प्रयोग गरेर राम्रो मेकानिकल बलको साथ न्यानोपोरस संरचनाहरू प्राप्त गर्न गाह्रो छ।थप रूपमा, विभिन्न बायोमेडिकल अनुप्रयोगहरूको लागि विभिन्न मोल्डहरू अनुकूलित गर्न सजिलो छैन।
चित्रले ड्र्यागनफ्लाइ पखेटा संरचना (A) मा आधारित NFRCS डिजाइनको रेखाचित्र देखाउँछ।यो छविले ड्र्यागनफ्लाइको पखेटाको संरचनाको तुलनात्मक समानता देखाउँछ (पखेटाको छेउछाउ र अनुदैर्ध्य नसाहरू आपसमा जोडिएका छन्) र Cp NFRCS (B) को क्रस-सेक्शनल फोटोमाइक्रोग्राफ।NFRCS को योजनाबद्ध प्रतिनिधित्व।
माथिका सीमितताहरूलाई सम्बोधन गर्न निरन्तर चरणको रूपमा HFFC प्रयोग गरी NFRCs विकास गरिएको थियो।HFFC विभिन्न फिल्म बनाउने हेमोस्टेटिक पोलिमरहरू मिलेर बनेको छ जसमा chitosan (मुख्य हेमोस्टेटिक पोलिमरको रूपमा) methylcellulose (MC), hydroxypropyl methylcellulose (HPMC 50 cp) र polyvinyl अल्कोहल (PVA) (125 kDa) एक सपोर्ट पोलिमरको रूपमा छ जसले थ्रोलाई बढावा दिन्छ।गठन।Polyvinylpyrrolidine K30 (PVP K30) को थपले NFRCS को नमी अवशोषण क्षमतामा सुधार गर्यो।Polyethylene glycol 400 (PEG 400) जोडिएको पोलिमर मिश्रणहरूमा पोलिमर क्रसलिङ्किङ सुधार गर्न थपिएको थियो।तीन फरक HFFC हेमोस्टेटिक रचनाहरू (Cm HFFC, Ch HFFC र Cp HFFC), अर्थात् MC (Cm) सँग chitosan, HPMC (Ch) सँग chitosan र PVA (Cp) सँग chitosan, Ct मा लागू गरियो।विभिन्न इन भिट्रो र इन भिभो क्यारेक्टराइजेशन अध्ययनहरूले NFRCS को हेमोस्टेटिक र घाउ निको पार्ने गतिविधिको पुष्टि गरेको छ।NFRCS द्वारा प्रस्तावित कम्पोजिट सामग्रीहरू विशेष आवश्यकताहरू पूरा गर्न विभिन्न प्रकारका मचानहरू अनुकूलित गर्न प्रयोग गर्न सकिन्छ।
थप रूपमा, NFRCS लाई पट्टी वा रोलको रूपमा परिमार्जन गर्न सकिन्छ जुन तल्लो भागको सम्पूर्ण चोट क्षेत्र र शरीरको अन्य भागहरू ढाक्न सकिन्छ।विशेष गरी लडाई अंग चोटहरूको लागि, डिजाइन गरिएको NFRCS डिजाइन आधा हात वा पूरा खुट्टा (पूरक चित्र S11) मा परिवर्तन गर्न सकिन्छ।NFRCS लाई टिस्यु ग्लुको साथ नाडीब्यान्डमा बनाउन सकिन्छ, जुन गम्भीर आत्मघाती नाडीको चोटबाट रक्तस्राव रोक्न प्रयोग गर्न सकिन्छ।हाम्रो मुख्य लक्ष्य भनेको सकेसम्म थोरै पोलिमर भएको NFRCS विकास गर्नु हो जुन ठूलो जनसङ्ख्या (गरिबी रेखामुनि) मा डेलिभर गर्न सकिन्छ र यसलाई प्राथमिक उपचार किटमा राख्न सकिन्छ।डिजाइनमा सरल, कुशल र किफायती, NFRCS ले स्थानीय समुदायहरूलाई फाइदा पुर्‍याउँछ र विश्वव्यापी प्रभाव पार्न सक्छ।
चिटोसन (आणविक तौल ८० kDa) र अमारन्थ मर्क, भारतबाट खरिद गरिएको थियो।लोबा केमी प्रालिबाट ​​हाइड्रोक्सीप्रोपाइल मिथाइलसेलुलोज ५० सीपी, पोलिथिन ग्लाइकोल ४०० र मिथाइलसेलुलोज खरिद गरिएको थियो ।LLC, मुम्बई।पोलिभिनिल अल्कोहल (आणविक तौल १२५ केडीए) (८७-९०% हाइड्रोलाइज्ड) नेशनल केमिकल्स, गुजरातबाट खरिद गरिएको थियो।Polyvinylpyrrolidine K30 Molychem, मुम्बईबाट खरिद गरिएको थियो, बाँझ स्वाबहरू रामराजू सर्जरी कपास मिल्स लिमिटेड, तमिलनाडुबाट, Milli Q वाटर (Direct-Q3 पानी शुद्धीकरण प्रणाली, Merck, India) वाहकको रूपमा खरिद गरिएको थियो।
NFRCS एक lyophilization विधि 11,12 प्रयोग गरेर विकसित गरिएको थियो।सबै HFFC रचनाहरू (तालिका 1) मेकानिकल stirrer प्रयोग गरेर तयार गरिएको थियो।मेकानिकल स्टिररमा ८०० आरपीएममा निरन्तर हल्लाउँदै पानीमा १% एसिटिक एसिड प्रयोग गरी चिटोसनको ०.५% घोल तयार गर्नुहोस्।तालिका 1 मा संकेत गरिएको लोड गरिएको पोलिमरको सही वजन chitosan समाधानमा थपियो र स्पष्ट बहुलक समाधान प्राप्त नभएसम्म हलचल गरियो।PVP K30 र PEG 400 नतिजा मिश्रणमा तालिका 1 मा संकेत गरिएको मात्रामा थपिएको थियो, र स्पष्ट चिपचिपा पोलिमर समाधान प्राप्त नभएसम्म हलचल जारी राखिएको थियो।पोलिमर समाधानको नतिजा स्नानलाई पोलिमर मिश्रणबाट फसेको हावा बुलबुले हटाउन 60 मिनेटको लागि सोनिक गरिएको थियो।पूरक चित्र S1(b) मा देखाइए अनुसार, Ct 6-वेल प्लेट (मोल्ड) को प्रत्येक इनारमा 5 ml HFFC को साथमा समान रूपमा वितरण गरिएको थियो।
Ct नेटवर्कमा HFFC को एकसमान भिजाउने र वितरण प्राप्त गर्न छ-कुवाको प्लेट 60 मिनेटको लागि सोनिक गरिएको थियो।त्यसपछि 8-12 घण्टाको लागि -20 डिग्री सेल्सियसमा छ-कुवा प्लेट फ्रिज गर्नुहोस्।NFRCS को विभिन्न ढाँचाहरू प्राप्त गर्न फ्रिज प्लेटहरू 48 घण्टाको लागि lyophilized गरियो।एउटै प्रक्रिया विभिन्न आकार र संरचनाहरू उत्पादन गर्न प्रयोग गरिन्छ, जस्तै ट्याम्पोन वा बेलनाकार ट्याम्पोन, वा विभिन्न अनुप्रयोगहरूको लागि कुनै अन्य आकार।
सही तौल गरिएको चिटोसन (80 kDa) (3%) चुम्बकीय उत्तेजक प्रयोग गरेर 1% एसिटिक एसिडमा भंग हुन्छ।चिटोसनको नतिजा समाधानमा 1% PEG 400 थपियो र 30 मिनेटको लागि हलचल गरियो।नतिजाको समाधानलाई वर्ग वा आयताकार कन्टेनरमा हाल्नुहोस् र -80 डिग्री सेल्सियसमा 12 घण्टाको लागि फ्रिज गर्नुहोस्।जमे भएका नमूनाहरू झरझरा Cs13 प्राप्त गर्न 48 घण्टाको लागि lyophilized गरियो।
विकसित NFRCS अन्य पोलिमरहरू 14,15 सँग chitosan को रासायनिक अनुकूलता पुष्टि गर्न फोरियर ट्रान्सफर्म इन्फ्रारेड स्पेक्ट्रोस्कोपी (FTIR) (Shimadzu 8400 s FTIR, Tokyo, Japan) को प्रयोग गरी प्रयोग गरिएको थियो।FTIR स्पेक्ट्रा (400 देखि 4000 cm-1 सम्म स्पेक्ट्रल दायराको चौडाइ) सबै परीक्षण नमूनाहरू 32 स्क्यानहरू प्रदर्शन गरेर प्राप्त गरियो।
सबै सूत्रहरूको लागि रगत अवशोषण दर (BAR) चेन एट अल द्वारा वर्णन गरिएको विधि प्रयोग गरेर मूल्याङ्कन गरिएको थियो।16 थोरै परिमार्जन संग।अवशिष्ट विलायक हटाउनका लागि सबै रचनाहरूको विकसित एनएफआरकेहरूलाई रातभर 105 डिग्री सेल्सियसमा भ्याकुम ओभनमा सुकाइयो।30 mg NFRCS (प्रारम्भिक नमूना वजन - W0) र 30 mg Ct (सकारात्मक नियन्त्रण) 3.8% सोडियम साइट्रेटको प्रिमिक्स भएको छुट्टै भाँडामा राखिएको थियो।पूर्वनिर्धारित समय अन्तरालहरूमा, अर्थात् 5, 10, 20, 30, 40 र 60 सेकेन्डमा, NFRCS हटाइयो र 30 सेकेन्डको लागि Ct मा नमूनाहरू राखेर तिनीहरूको सतहहरू अवशोषित रगतबाट सफा गरियो।NFRCS 16 द्वारा अवशोषित रगतको अन्तिम वजनलाई प्रत्येक समय बिन्दुमा (W1) मानिन्थ्यो।निम्न सूत्र प्रयोग गरेर BAR प्रतिशत गणना गर्नुहोस्:
वाङ एट अल द्वारा रिपोर्ट गरे अनुसार रगत जम्ने समय (BCT) निर्धारण गरिएको थियो।१७.NFRCS को उपस्थितिमा पूरै रगत (3.8% सोडियम साइट्रेटको साथ प्रिमिक्स गरिएको मुसाको रगत) जम्नको लागि आवश्यक समय परीक्षण नमूनाको BCT को रूपमा गणना गरिएको थियो।विभिन्न NFRCS कम्पोनेन्टहरू (30 मिलीग्राम) 10 मिलीलीटर स्क्रू क्याप भालहरूमा राखिएको थियो र 37 डिग्री सेल्सियसमा इन्क्युबेटेड थियो।रगत (0.5 ml) शीशीमा थपियो र 0.2 M CaCl2 को 0.3 ml रगत जमघट सक्रिय गर्न थपियो।अन्तमा, प्रत्येक 15 सेकेन्डमा (180 ° सम्म) शीशीलाई पल्टाउनुहोस् जबसम्म कडा क्लट बन्दैन।नमूनाको BCT फ्लिप vails को संख्या 17,18 द्वारा अनुमान गरिएको छ।BCT मा आधारित, NFRCS Cm, Ch र Cp बाट दुई इष्टतम रचनाहरू थप विशेषता अध्ययनको लागि चयन गरियो।
Ch NFRCS र Cp NFRCS रचनाहरूको BCT Li et al द्वारा वर्णन गरिएको विधि लागू गरेर निर्धारण गरिएको थियो।१९।15 x 15 mm2 Ch NFRCS, Cp NFRCS, र Cs (सकारात्मक नियन्त्रण) लाई छुट्टै पेट्री डिश (37 °C) मा राख्नुहोस्।3.8% सोडियम साइट्रेट भएको रगतलाई 0.2 M CaCl2 सँग 10:1 भोल्युमको अनुपातमा रगत जम्ने प्रक्रिया सुरु गर्न मिलाइएको थियो।0.2 M CaCl2 मुसाको रगत मिश्रणको 20 μl नमूना सतहमा लागू गरियो र खाली पेट्री डिशमा राखियो।नियन्त्रण Ct बिना खाली पेट्री भाँडा मा रगत खन्यायो।0, 3, र 5 मिनेटको निश्चित अन्तरालमा, क्लटलाई बाधा नपुऱ्याई डिश समावेश गरिएको नमूनामा 10 एमएल डियोनाइज्ड (DI) पानी थपेर क्लटिङ रोक्नुहोस्।अनकोगुलेटेड एरिथ्रोसाइट्स (एरिथ्रोसाइट्स) डियोनाइज्ड पानीको उपस्थितिमा हेमोलाइसिसबाट गुज्रिन्छ र हेमोग्लोबिन छोड्छ।विभिन्न समय बिन्दुहरूमा हेमोग्लोबिन (HA(t)) मापन गरिएको थियो 540 nm (λmax hemoglobin) UV-Vis स्पेक्ट्रोफोटोमिटर प्रयोग गरेर।हेमोग्लोबिन (AH(0)) को 0 मिनेटमा 20 μl रगतको 10 ml deionized पानीमा पूर्ण अवशोषणलाई सन्दर्भ मानकको रूपमा लिइयो।रगतको एउटै ब्याच प्रयोग गरेर HA(t)/HA(0) अनुपातबाट जमेको रगतको सापेक्ष हेमोग्लोबिन अपटेक (RHA) गणना गरिएको थियो।
बनावट विश्लेषक प्रयोग गरेर (टेक्स्चर प्रो CT V1.3 Build 15, Brookfield, USA), क्षतिग्रस्त टिश्युमा NFRK को टाँसने गुणहरू निर्धारण गरियो।सुँगुरको छालाको भित्री भागमा (बोसोको तह बिना) खुला तल्लो बेलनाकार डिश थिच्नुहोस्।नमूनाहरू (Ch NFRCS र Cp NFRCS) सुँगुरको छालामा आसंजन सिर्जना गर्न क्यानुला मार्फत बेलनाकार मोल्डहरूमा लागू गरियो।कोठाको तापक्रम (RT) (25° C.) मा 3 मिनेट इन्क्युबेशन पछि, NFRCS टाँस्ने शक्ति 0.5 मिमी/सेकेन्डको स्थिर दरमा रेकर्ड गरियो।
सर्जिकल सीलेन्टको मुख्य विशेषता रगतको कमीलाई कम गर्दा रगत जम्ने क्षमता बढाउनु हो।NFRCS मा हानिरहित कोगुलेसनलाई थोरै परिमार्जनहरू 19 संग पहिले प्रकाशित विधि प्रयोग गरेर मूल्याङ्कन गरिएको थियो।सेन्ट्रीफ्यूज ट्यूबको एक छेउमा 8 × 5 mm2 प्वाल भएको (खुला घाउको प्रतिनिधित्व गर्ने) माइक्रोसेन्ट्रीफ्यूज ट्यूब (2 एमएल) (भित्री व्यास 10 मिमी) बनाउनुहोस्।NFRCS खोल्ने बन्द गर्न प्रयोग गरिन्छ र बाहिरी किनाराहरू बन्द गर्न टेप प्रयोग गरिन्छ।3.8% सोडियम साइट्रेट प्रिमिक्स भएको माइक्रोसेन्ट्रिफ्युज ट्यूबमा 0.2 M CaCl2 को 20 μl थप्नुहोस्।10 मिनेट पछि, माइक्रोसेन्ट्रीफ्यूज ट्यूबहरू भाँडाहरूबाट हटाइयो र NFRK (n = 3) बाट रगतको बहावको कारणले भाँडाको द्रव्यमानमा वृद्धि निर्धारण गरिएको थियो।रगत हानि Ch NFRCS र Cp NFRCS Cs सँग तुलना गरिएको थियो।
NFRCS को गीला अखण्डता मिश्र र चौधरी21 द्वारा वर्णन गरिएको विधिको आधारमा सानो परिमार्जन सहित निर्धारण गरिएको थियो।NFRCS लाई 100 ml Erlenmeyer फ्लास्कमा 50 ml पानीको साथ राख्नुहोस् र माथि नबनाइ 60 सेकेन्डसम्म घुमाउनुहोस्।सङ्कलनमा आधारित भौतिक अखण्डताका लागि नमूनाहरूको दृश्य निरीक्षण र प्राथमिकता।
HFFC को Ct सम्मको बाध्यकारी शक्तिलाई सानो परिमार्जनको साथ अघिल्लो प्रकाशित विधिहरू प्रयोग गरेर अध्ययन गरिएको थियो।सतह कोटिंग अखंडता NFRK लाई milliQ पानी (Ct) को उपस्थितिमा ध्वनिक तरंगहरू (बाह्य उत्तेजना) लाई उजागर गरेर मूल्याङ्कन गरिएको थियो।विकसित NFRCS Ch NFRCS र Cp NFRCS पानीले भरिएको बीकरमा राखिएको थियो र क्रमशः 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, र 30 मिनेटको लागि sonicated थियो।सुकेपछि, सामग्रीको प्रतिशत हानि (HFFC) गणना गर्न NFRCS को प्रारम्भिक र अन्तिम वजन बीचको प्रतिशत भिन्नता प्रयोग गरियो।इन भिट्रो BCT ले बाध्यकारी बल वा सतह सामग्रीको हानिलाई थप समर्थन गर्‍यो।Ct मा HFFC बाइन्डिङको दक्षताले Ct22 को सतहमा रगत जम्ने र लोचदार कोटिंग प्रदान गर्दछ।
विकसित NFRCS को एकरूपता NFRCS को अनियमित रूपमा चयन गरिएका सामान्य स्थानहरूबाट लिइएको नमूनाहरूको BCT (30 mg) द्वारा निर्धारण गरिएको थियो।NFRCS अनुपालन निर्धारण गर्न पहिले उल्लेख गरिएको BCT प्रक्रियाको पालना गर्नुहोस्।सबै पाँच नमूनाहरू बीचको निकटताले समान सतह कभरेज र Ct जालमा HFFC जम्मा सुनिश्चित गर्दछ।
नाममात्र रक्त सम्पर्क क्षेत्र (NBCA) पहिले केहि परिमार्जन संग रिपोर्ट गरिएको रूपमा निर्धारित गरिएको थियो।Ct, Ch NFRCS, Cp NFRCS र Cs को दुई सतहहरू बीच 20 μl रगत क्ल्याम्प गरेर रगत जम्मा गर्नुहोस्।१ घण्टा पछि, स्टेन्टका दुई भागहरू छुट्याइयो र म्यानुअल रूपमा क्लटको क्षेत्रफल मापन गरियो।तीन पुनरावृत्तिको औसत मानलाई NBCA NFRCS19 मानिन्थ्यो।
डायनामिक भाप सोर्पशन (DVS) विश्लेषण NFRCS को प्रभावकारिता मूल्याङ्कन गर्न प्रयोग गरिएको थियो बाह्य वातावरण वा जमघट सुरु गर्न जिम्मेवार चोट साइटबाट पानी अवशोषित गर्न।DVS ले ±0.1 µg को मास रिजोल्युसनको साथ अल्ट्रा-सेन्सेटिभ ब्यालेन्स प्रयोग गरेर नमूनामा वाष्प ग्रहण र हानिको मूल्यांकन वा रेकर्ड गर्दछ।एक आंशिक वाष्प दबाव (सापेक्ष आर्द्रता) नमूना वरिपरि इलेक्ट्रोनिक मास फ्लो कन्ट्रोलर द्वारा संतृप्त र सुख्खा वाहक ग्यासहरू मिश्रण गरेर उत्पन्न हुन्छ। युरोपेली फार्माकोपिया दिशानिर्देशहरू अनुसार, नमूनाहरूद्वारा ओसिलो अपटेकको प्रतिशतको आधारमा, नमूनाहरूलाई 4 वर्गहरूमा वर्गीकृत गरिएको थियो (0-0.012% w/w− गैर-हाइग्रोस्कोपिक, 0.2-2% w/w थोडा हाइग्रोस्कोपिक, 2-15% मध्यम रूपमा हाइग्रोस्कोपिक, 2-15% मध्यम रूपमा हाइग्रोस्कोपिक> 5%)। युरोपेली फार्माकोपिया दिशानिर्देशहरू अनुसार, नमूनाहरूद्वारा ओसिलो अपटेकको प्रतिशतको आधारमा, नमूनाहरूलाई 4 कोटीहरूमा वर्गीकृत गरिएको थियो (0-0.012% w/w− गैर-हाइग्रोस्कोपिक, 0.2-2% w/w अलिकति हाइग्रोस्कोपिक, 2-15% मध्यम रूपमा हाइग्रोस्कोपिक %5% हाइग्रोस्कोपिक)।युरोपेली फार्माकोपियाका सिफारिसहरू अनुसार, नमूनाहरूद्वारा नमी अवशोषणको प्रतिशतको आधारमा, नमूनाहरूलाई 4 वर्गहरूमा विभाजन गरिएको थियो (0-0.012% w/w – गैर-हाइग्रोस्कोपिक, 0.2-2% w/w थोरै हाइग्रोस्कोपिक, 2- %)।% умеренно гигроскопичен и > 15% очень гигроскопичен)23. % मध्यम हाइग्रोस्कोपिक र 15% धेरै हाइग्रोस्कोपिक) 23।根据欧洲药典指南,根据样品吸收水分的百分比,样品分为4 类（0-0.012% w/w- 湀典指南微吸湿性、2-15% 适度吸湿，> 15% 非常吸湿）23।根据 欧洲 药典 指南 , 根据 吸收 水分 的 百分比 样品 分为 分为 分为 分为 分为 分为 类 %0/分为 ﹻ性 、 、 、 0.2-2% W/w 轻微 、 2-15% 适度 吸湿 ，> 15 % 非常吸湿）23।युरोपेली फार्माकोपियाको सिफारिसहरू अनुसार, नमूनाहरू नमूनाद्वारा अवशोषित नमीको प्रतिशतको आधारमा 4 वर्गहरूमा विभाजन गरिएको छ (0-0.012% तौल द्वारा - गैर-हाइग्रोस्कोपिक, 0.2-2% वजनले थोरै हाइग्रोस्कोपिक, 2-15% वजन द्वारा)।% умеренно гигроскопичен, > 15 % очень гигроскопичен) 23. % मध्यम हाइग्रोस्कोपिक, > 15% धेरै हाइग्रोस्कोपिक) 23।NFCS X NFCS र TsN NFCS को हाइग्रोस्कोपिक दक्षता एक विश्लेषक DVS TA TGA Q5000 SA मा निर्धारण गरिएको थियो।यस प्रक्रियाको क्रममा, रन टाइम, सापेक्षिक आर्द्रता (RH), र 25°C24 मा वास्तविक-समय नमूना वजन प्राप्त गरियो।नमी सामग्री निम्न समीकरण प्रयोग गरेर सही NFRCS मास विश्लेषण द्वारा गणना गरिन्छ:
MC NFRCS आर्द्रता हो।m1 - NSAIDs को सुख्खा वजन।m2 दिइएको RH मा वास्तविक-समय NFRCS मास हो।
10 घन्टा (< 7 × 10–3 Torr) को लागि 25 ° C मा नमूनाहरू खाली गरेपछि तरल नाइट्रोजनको साथ नाइट्रोजन शोषण प्रयोग प्रयोग गरेर कुल सतह क्षेत्र अनुमान गरिएको थियो। 10 घन्टा (< 7 × 10–3 Torr) को लागि 25 ° C मा नमूनाहरू खाली गरेपछि तरल नाइट्रोजनको साथ नाइट्रोजन शोषण प्रयोग प्रयोग गरेर कुल सतह क्षेत्र अनुमान गरिएको थियो। Общая площадь поверхности оценивалась с помощью эксперимента по адсорбции азота жидким азотом ° Совербожение ние 10 ч (< 7 × 10–3 TOR)। 10 घन्टा (<7 × 10–3 Torr) को लागि नमूनाहरू 25°C मा खाली गरिसकेपछि तरल नाइट्रोजनको साथ नाइट्रोजन शोषण प्रयोग प्रयोग गरेर कुल सतह क्षेत्र अनुमान गरिएको थियो।25°C 清空样品10 小时（< 7 × 10-3 Torr）后，使用液氮的氮吸附实验估计总表面积।25 डिग्री सेल्सियसमा Общая площадь поверхности оценивалась с использованием экспериментов по адсорбции азота жидким азотом посенивалованием 0 छासोभ 25 डिग्री सेल्सियस (< 7 × 10-3 торр)। 25°C (<7 x 10-3 torr) मा 10 घण्टाको लागि नमूनाहरू खाली गरिसकेपछि तरल नाइट्रोजनको साथ नाइट्रोजन शोषण प्रयोगहरू प्रयोग गरेर कुल सतह क्षेत्र अनुमान गरिएको थियो।कुल सतह क्षेत्र, छिद्र भोल्युम र NFRCS छिद्र आकार RS 232 सफ्टवेयर प्रयोग गरेर NOVA 1000e, अस्ट्रियाबाट Quantachrome मार्फत निर्धारण गरिएको थियो।
पूरै रगतबाट ५% आरबीसी (सलाईन पातलो) बनाउनुहोस्।त्यसपछि HFFC (0.25 ml) को एक aliquot लाई 96-वेल प्लेट र 5% RBC मास (0.1 ml) मा स्थानान्तरण गर्नुहोस्।40 मिनेटको लागि 37 डिग्री सेल्सियसमा मिश्रण इन्क्युब्याट गर्नुहोस्।रातो रक्त कोशिका र सीरमको मिश्रणलाई सकारात्मक नियन्त्रणको रूपमा मानिन्छ, र नुन र रातो रक्त कोशिकाको मिश्रणलाई नकारात्मक नियन्त्रणको रूपमा मानिन्छ।Hemagglutination Stajitzky स्केल अनुसार निर्धारित गरिएको थियो।प्रस्तावित स्केलहरू निम्नानुसार छन्: + + + + घन दानेदार समुच्चय;+ + + घुमाउरो किनारहरू संग चिकनी तल प्याड;+ + च्यातिएको किनाराहरूसँग चिल्लो तल्लो प्याडहरू;+ चिल्लो प्याडको छेउमा साँघुरो रातो घेराहरू;- (नकारात्मक) तल्लो कुवाको बीचमा अलग रातो बटन 12।
NFRCS को hemocompatibility मानकीकरण (ISO) (ISO10993-4, 1999) 26,27 को विधि अनुसार अध्ययन गरिएको थियो।सिंह एट अल द्वारा वर्णित गुरुत्वाकर्षण विधि।NFRCS को उपस्थितिमा वा सतहमा थ्रोम्बस गठनको मूल्याङ्कन गर्न सानो परिमार्जन गरिएको थियो।500 मिलीग्राम Cs, Ch NFRCS र Cp NFRCS लाई 37 डिग्री सेल्सियसमा 24 घण्टाको लागि फस्फेट बफर गरिएको सलाइन (PBS) मा इन्क्युबेटेड गरियो।24 घण्टा पछि, PBS हटाइयो र NFRCS को 3.8% सोडियम साइट्रेट युक्त 2 मिली रगत संग उपचार गरियो।NFRCS को सतहमा, इन्क्युबेटेड नमूनाहरूमा 0.1 M CaCl2 को 0.04 ml थप्नुहोस्।45 मिनेट पछि, जमघट रोक्नको लागि 5 मिलीलीटर डिस्टिल्ड पानी थपियो।NFRK को सतहमा जमेको रगतलाई 36-38% formaldehyde घोलले उपचार गरियो।फोर्मल्डिहाइडसँग फिक्स गरिएको क्लटहरू सुकाइयो र तौलियो।रगत बिनाको गिलासको तौल र नमूना (नकारात्मक नियन्त्रण) र रगत भएको गिलास (सकारात्मक नियन्त्रण) गणना गरेर थ्रोम्बोसिसको प्रतिशत अनुमान गरिएको थियो।
प्रारम्भिक पुष्टिकरणको रूपमा, नमूनाहरूलाई अप्टिकल माइक्रोस्कोप अन्तर्गत HFFC सतह कोटिंग, Ct एक अर्कासँग जोडिएको, र Ct नेटवर्कको छिद्रहरू बनाउनको क्षमता बुझ्नको लागि दृश्य गरिएको थियो।NFRCS बाट Ch र Cp को पातलो खण्डहरू स्केलपेल ब्लेडले काटिएको थियो।नतिजा खण्ड एक गिलास स्लाइडमा राखिएको थियो, कभरस्लिपले ढाकिएको थियो, र किनारहरू गोंदको साथ तय गरिएको थियो।तयार गरिएका स्लाइडहरूलाई अप्टिकल माइक्रोस्कोप अन्तर्गत हेरिएको थियो र विभिन्न म्याग्निफिकेसनहरूमा फोटोहरू खिचिएको थियो।
राइस एट अल.२९ द्वारा वर्णन गरिएको विधिको आधारमा फ्लोरोसेन्स माइक्रोस्कोपी प्रयोग गरेर सीटी नेटवर्कहरूमा पोलिमर डिपोजिसनको कल्पना गरिएको थियो। ढाँचाको लागि प्रयोग गरिएको HFFC कम्पोजिसनलाई फ्लोरोसेन्ट डाई (अमरन्थ) सँग मिसाइएको थियो र NFRCS (Ch & Cp) पहिले उल्लेख गरिएको विधि अनुसार तयार गरिएको थियो। ढाँचाको लागि प्रयोग गरिएको HFFC कम्पोजिसनलाई फ्लोरोसेन्ट डाई (अमरन्थ) सँग मिसाइएको थियो र NFRCS (Ch & Cp) पहिले उल्लेख गरिएको विधि अनुसार तयार गरिएको थियो।सूत्रीकरणको लागि प्रयोग गरिएको HFFC संरचनालाई फ्लोरोसेन्ट डाई (अमरन्थ) र NFRCS (Ch र Cp) पहिले उल्लेख गरिएको विधि अनुसार मिलाइएको थियो।将用于配方的HFFC 组合物与荧光染料（苋菜）混合，并按照前面提到的方法制制。将用于配方的HFFC 组合物与荧光染料（苋菜）混合，并按照前面提到的方法制制。सूत्रमा प्रयोग गरिएको HFFC कम्पोजिसनलाई फ्लोरोसेन्ट डाई (अमरन्थ) सँग मिसाएर NFRCS (Ch र Cp) प्राप्त गरिएको थियो, जसरी पहिले उल्लेख गरिएको थियो।NFRK को पातलो खण्डहरू प्राप्त नमूनाहरूबाट काटिएको थियो, गिलास स्लाइडहरूमा राखिएको थियो, र कभर स्लिपहरूले ढाकिएको थियो।हरियो फिल्टर (310-380 nm) प्रयोग गरी फ्लोरोसेन्ट माइक्रोस्कोप मुनि तयार गरिएका स्लाइडहरूलाई अवलोकन गर्नुहोस्।छविहरू 4x म्याग्निफिकेसनमा Ct सम्बन्धहरू र Ct नेटवर्कमा अतिरिक्त पोलिमर डिपोजिसन बुझ्नको लागि लिइयो।
NFRCS Ch र Cp को सतह टोपोग्राफी ट्यापिङ मोडमा अल्ट्रा-शार्प TESP क्यान्टिलभरको साथ परमाणु बल माइक्रोस्कोप (AFM) प्रयोग गरी निर्धारण गरिएको थियो: 42 N/m, 320 kHz, ROC 2-5 nm, Bruker, Taiwan।सफ्टवेयर (स्क्यानिङ प्रोब इमेज प्रोसेसर) को प्रयोग गरेर रूट मीन स्क्वायर (RMS) द्वारा सतहको नरमपन निर्धारण गरिएको थियो।सतह एकरूपता जाँच गर्न विभिन्न NFRCS स्थानहरू 3D छविहरूमा रेन्डर गरिएको थियो।दिइएको क्षेत्रको लागि स्कोरको मानक विचलनलाई सतहको खुर्दापनको रूपमा परिभाषित गरिएको छ।RMS समीकरण NFRCS31 को सतह खुरदना परिमाण गर्न प्रयोग गरिएको थियो।
FESEM-आधारित अध्ययनहरू FESEM, SU8000, HI-0876-0003, Hitachi, Tokyo को प्रयोग गरी Ch NFRCS र Cp NFRCS को सतह आकारविज्ञान बुझ्नको लागि गरिएको थियो, जसले Cm NFRCS भन्दा राम्रो BCT देखाएको थियो।FESEM अध्ययन Zhao et al द्वारा वर्णन गरिएको विधि अनुसार गरिएको थियो।32 मा सानो परिमार्जन संग।NFRCS 20 देखि 30 mg Ch NFRCS र Cp NFRCS को 20 μl 3.8% सोडियम साइट्रेट मुसाको रगतमा प्रिमिक्स गरिएको थियो।०.२ M CaCl2 को 20 μl रगत-उपचार गरिएको नमूनाहरूमा जमघट सुरु गर्न थपियो र नमूनाहरू 10 मिनेटको लागि कोठाको तापक्रममा इन्क्युबेटेड गरियो।थप रूपमा, एनएफआरसीएस सतहबाट नुनले कुल्ला गरेर अतिरिक्त एरिथ्रोसाइटहरू हटाइयो।
त्यसपछिका नमूनाहरूलाई ०.१% ग्लुटाराल्डिहाइडसँग उपचार गरियो र त्यसपछि चिस्यान हटाउन ३७ डिग्री सेल्सियसमा तातो हावामा सुकाइयो।सुकेको नमूनाहरू लेपित र 32 विश्लेषण गरियो।विश्लेषणको क्रममा प्राप्त गरिएका अन्य छविहरू व्यक्तिगत कपास फाइबरको सतहमा क्लट गठन, Ct, एरिथ्रोसाइट मोर्फोलोजी (आकार), क्लट इन्टिग्रिटी, र एनएफआरसीएसको उपस्थितिमा एरिथ्रोसाइट मोर्फोलजी बीचको पोलिमर डिपोजिसन थिए।उपचार नगरिएका NFRCS क्षेत्रहरू र Ch र Cp उपचार गरिएका NFRCS क्षेत्रहरू रगतले इन्क्युबेटेड तत्वहरू (सोडियम, पोटासियम, नाइट्रोजन, क्याल्सियम, म्याग्नेसियम, जिंक, तामा र सेलेनियम) को लागि स्क्यान गरियो।क्लट गठन र क्लट एकरूपताको समयमा मौलिक आयन संचय बुझ्नको लागि उपचार गरिएको र उपचार नगरिएको नमूनाहरू बीचको मौलिक आयन प्रतिशतहरू तुलना गर्नुहोस्।
Ct सतहमा Cp HFFC सतह कोटिंगको मोटाई FESEM प्रयोग गरी निर्धारण गरिएको थियो।Cp NFRCS को क्रस खण्डहरू फ्रेमवर्कबाट काटिएका थिए र स्पटर लेपित थिए।फलस्वरूप स्पटर कोटिंग नमूनाहरू FESEM द्वारा अवलोकन गरिएको थियो र सतह कोटिंगको मोटाई 34, 35, 36 मापन गरिएको थियो।
एक्स-रे माइक्रो-CT ले उच्च-रिजोल्युसन 3D गैर-विनाशकारी इमेजिङ प्रदान गर्दछ र तपाईंलाई NFRK को आन्तरिक संरचनात्मक व्यवस्था अध्ययन गर्न अनुमति दिन्छ।माइक्रो-CT ले नमूनामा रहेको एक्स-रेहरूको स्थानीय रैखिक क्षीणता गुणांक रेकर्ड गर्न नमूनाबाट गुज्रिरहेको एक्स-रे बीम प्रयोग गर्छ, जसले मोर्फोलजिकल जानकारी प्राप्त गर्न मद्दत गर्छ।Cp NFRCS मा Ct को आन्तरिक स्थान र रक्त-उपचार Cp NFRCS NFRCS37,38,39 को उपस्थितिमा अवशोषण क्षमता र रगत जम्ने कुरा बुझ्न माइक्रो-CT द्वारा जाँच गरियो।रक्त-उपचार र उपचार नगरिएको Cp NFRCS नमूनाहरूको 3D संरचनाहरू माइक्रो-CT (V|tome|x S240, Phoenix, Germany) को प्रयोग गरेर पुनर्निर्माण गरियो।VG STUDIO-MAX सफ्टवेयर संस्करण 2.2 को प्रयोग गरेर, NFRCS का लागि 3D छविहरू विकास गर्न विभिन्न कोणहरू (आदर्श रूपमा 360° कभरेज) बाट धेरै एक्स-रे छविहरू लिइयो।सङ्कलन गरिएको प्रक्षेपण डेटालाई समान साधारण 3D स्क्यानआईपी एकेडेमिक सफ्टवेयर प्रयोग गरेर 3D भोल्युमेट्रिक छविहरूमा पुनर्निर्माण गरिएको थियो।
थप रूपमा, क्लटको वितरण बुझ्नको लागि, रगत जम्ने प्रक्रिया सुरु गर्न एनएफआरसीएसमा 20 μl प्रिमिक्स्ड साइटेटेड रगत र 20 μl 0.2 M CaCl2 थपियो।तयार नमूनाहरू कडा गर्न छोडिन्छ।NFRK सतहलाई ०.५% ग्लुटाराल्डिहाइडद्वारा उपचार गरियो र ३० मिनेटको लागि ३०–४० डिग्री सेल्सियसमा तातो हावामा सुकाइयो।NFRCS मा बनाइएको रगतको थक्का स्क्यान गरिएको थियो, पुन: निर्माण गरिएको थियो, र रगतको थक्काको 3D छवि देखाइएको थियो।
एन्टिब्याक्टेरियल assays Cp NFRCS मा प्रदर्शन गरिएको थियो (Ch NFRCS को तुलनामा) माइन्टर परिमार्जन संग पहिले वर्णन गरिएको विधि प्रयोग गरेर।Cp NFRCS र Cp HFFC को एन्टिब्याक्टेरियल गतिविधि तीन फरक परीक्षण सूक्ष्मजीवहरू [S.aureus (ग्राम-पोजिटिभ ब्याक्टेरिया), E.coli (ग्राम-नेगेटिभ ब्याक्टेरिया) र सेतो क्यान्डिडा (C.albicans)] एक इनक्यूबेटरमा पेट्री डिशहरूमा अगरमा बढ्दै गएर निर्धारण गरिएको थियो।105-106 CFU ml-1 को एकाग्रतामा 50 ml पातलो ब्याक्टेरियल कल्चर सस्पेन्सनलाई एगर मिडियममा समान रूपमा खोप्नुहोस्।मध्यमलाई पेट्री डिशमा हाल्नुहोस् र यसलाई बलियो बनाउनुहोस्।अगर प्लेटको सतहमा इनारहरू HFFC (HFFC का लागि 3 र नकारात्मक नियन्त्रणको लागि 1) भर्नका लागि बनाइएका थिए।200 μl HFFC 3 इनारमा र 200 μl pH 7.4 PBS चौथो इनारमा थप्नुहोस्।पेट्री डिशको अर्को छेउमा, ठोस आगरमा 12 मिमी Cp NFRCS डिस्क राख्नुहोस् र PBS (pH 7.4) ले ओसिलो गर्नुहोस्।Ciprofloxacin, ampicillin र fluconazole ट्याब्लेटहरू Staphylococcus aureus, Escherichia coli र Candida albicans को लागि सन्दर्भ मानक मानिन्छ।म्यानुअल रूपमा निषेध क्षेत्र मापन गर्नुहोस् र निषेध क्षेत्रको डिजिटल छवि लिनुहोस्।
संस्थागत नैतिक अनुमोदन पछि, यो अध्ययन दक्षिणी भारतको कर्नाटकको मणिपालको कस्तुरबा मेडिकल कलेज अफ एजुकेशन एण्ड रिसर्चमा गरिएको थियो।इन भिट्रो TEG प्रयोगात्मक प्रोटोकल कस्तुरबा मेडिकल कलेज, मणिपाल, कर्नाटक (IEC: 674/2020) को संस्थागत आचार समिति द्वारा समीक्षा र अनुमोदन गरिएको छ।अस्पतालको ब्लड बैंकबाट स्वयम्सेवी रक्तदाताहरू (१८ देखि ५५ वर्षका) बाट विषयहरू भर्ती गरिएको थियो।थप रूपमा, रगतको नमूना सङ्कलनका लागि स्वयंसेवकहरूबाट सूचित सहमति फारम प्राप्त गरिएको थियो।नेटिभ TEG (N-TEG) ​​सोडियम साइट्रेटको साथ प्रिमिक्स गरिएको सम्पूर्ण रगतमा Cp HFFC सूत्रीकरणको प्रभाव अध्ययन गर्न प्रयोग गरिएको थियो।N-TEG को बिन्दु-अफ-केयर पुनरुत्थानमा यसको भूमिकाको लागि व्यापक रूपमा मान्यता प्राप्त छ, जसले परिणामहरूमा चिकित्सकीय रूपमा महत्त्वपूर्ण ढिलाइको सम्भावनाको कारणले चिकित्सकहरूको लागि समस्याहरू सिर्जना गर्दछ (नियमित कोगुलेसन परीक्षणहरू)।N-TEG विश्लेषण सम्पूर्ण रगत प्रयोग गरी गरिएको थियो।सूचित सहमति र विस्तृत चिकित्सा इतिहास सबै सहभागीहरूबाट प्राप्त गरियो।अध्ययनमा हेमोस्टेटिक वा थ्रोम्बोटिक जटिलताहरू जस्तै गर्भावस्था / प्रसवोत्तर वा कलेजो रोग भएका सहभागीहरूलाई समावेश गरिएको थिएन।कोगुलेसन क्यास्केडलाई असर गर्ने ड्रग्स लिने विषयहरू पनि अध्ययनबाट बहिष्कृत गरियो।आधारभूत प्रयोगशाला परीक्षणहरू (हेमोग्लोबिन, प्रोथ्रोम्बिन समय, सक्रिय थ्रोम्बोप्लास्टिन र प्लेटलेट गणना) मानक प्रक्रियाहरू अनुसार सबै सहभागीहरूमा प्रदर्शन गरियो।N-TEG ले ब्लड क्लट भिस्कोइलास्टिकिटी, प्रारम्भिक क्लट संरचना, कण अन्तरक्रिया, क्लट सुदृढीकरण, र क्लट लिसिस निर्धारण गर्दछ।N-TEG विश्लेषणले धेरै सेलुलर तत्वहरू र प्लाज्माको सामूहिक प्रभावहरूमा ग्राफिकल र संख्यात्मक डेटा प्रदान गर्दछ।N-TEG विश्लेषण Cp HFFC (10 μl र 50 μl) को दुई फरक मात्रामा प्रदर्शन गरिएको थियो।नतिजाको रूपमा, साइट्रिक एसिडको साथ सम्पूर्ण रगतको 1 मिलीलीटर Cp HFFC को 10 μl मा थपियो।TEG डिश भएको 20 μl 0.2 M CaCl2 मा 1 ml (Cp HFFC + citrated blood), 340 μl मिश्रित रगत थप्नुहोस्।त्यसपछि, Cp HFFC41 को उपस्थितिमा R, K, अल्फा कोण, MA, G, CI, TPI, EPL, LY 30% रगत नमूनाहरू मापन गर्न TEG 5000, US मा TEG डिशहरू लोड गरियो।
इन भिवो अध्ययन प्रोटोकल संस्थागत पशु नैतिकता समिति (IAEC), कस्तुरबा स्कूल अफ मेडिसिन, मणिपाल उच्च शिक्षा संस्थान, मणिपाल (IAEC/KMC/69/2020) द्वारा समीक्षा र अनुमोदन गरिएको थियो।सबै पशु प्रयोगहरू पशु प्रयोगको नियन्त्रण र सुपरिवेक्षण (CPCSEA) को लागि समितिको सिफारिसहरू अनुसार प्रदर्शन गरिएको थियो।सबै भिभो NFRCS अध्ययनहरू (2 × 2 cm2) महिला Wistar मुसा (200 देखि 250 ग्राम तौल) मा प्रदर्शन गरिएको थियो।सबै जनावरहरू 24-26 डिग्री सेल्सियसको तापक्रममा अनुकूल थिए, जनावरहरूलाई मानक खाना र पानी विज्ञापन लिबिटममा निःशुल्क पहुँच थियो।सबै जनावरहरूलाई अनियमित रूपमा विभिन्न समूहहरूमा विभाजित गरिएको थियो, प्रत्येक समूहमा तीनवटा जनावरहरू थिए।सबै अध्ययनहरू एनिमल स्टडीज: इन भिवो प्रयोगहरू 43 को रिपोर्ट अनुसार गरिएको थियो।अध्ययन गर्नु अघि, जनावरहरूलाई 20-50 मिलीग्राम केटामाइन (प्रति 1 किलोग्राम शरीरको वजन) र 2-10 मिलीग्राम जाइलाजिन (प्रति 1 किलोग्राम शरीरको वजन) को मिश्रणको इन्ट्रापेरिटोनियल (आईपी) प्रशासनद्वारा एनेस्थेटाइज गरिएको थियो।अध्ययन पछि, नमूनाहरूको प्रारम्भिक र अन्तिम वजन बीचको भिन्नता मूल्याङ्कन गरेर रगतको मात्रा गणना गरिएको थियो, तीनवटा परीक्षणबाट प्राप्त औसत मूल्य नमूनाको रक्तस्राव मात्राको रूपमा लिइयो।
आघात, लडाई, वा ट्राफिक दुर्घटना (चोट मोडेल) मा रक्तस्राव परिमार्जन गर्न NFRCS को क्षमता बुझ्नको लागि मुसाको पुच्छर विच्छेदन मोडेल लागू गरिएको थियो।50% पुच्छरलाई स्केलपेल ब्लेडले काट्नुहोस् र सामान्य रक्तस्राव सुनिश्चित गर्न 15 सेकेन्डसम्म हावामा राख्नुहोस्।थप रूपमा, परीक्षण नमूनाहरू दबाब (Ct, Cs, Ch NFRCS र Cp NFRCS) लागू गरेर मुसाको पुच्छरमा राखिएको थियो।रक्तस्राव र PCT परीक्षण नमूनाहरूको लागि रिपोर्ट गरिएको थियो (n = 3) 17,45।
लडाईमा NFRCS दबाब नियन्त्रणको प्रभावकारिता सतही फेमोरल धमनीको मोडेलमा अनुसन्धान गरिएको थियो।फेमोरल धमनी खुला हुन्छ, 24G ट्रोकारको साथ पञ्चर हुन्छ, र 15 सेकेन्ड भित्र रगत बग्छ।अनियन्त्रित रक्तस्राव देखेपछि, परीक्षण नमूनालाई दबाबको साथ पंचर साइटमा राखिन्छ।परीक्षण नमूनाको आवेदन पछि तुरुन्तै, क्लोटिंग समय रेकर्ड गरियो र अर्को 5 मिनेटको लागि हेमोस्टेटिक दक्षता अवलोकन गरियो।उही प्रक्रिया Cs र Ct46 सँग दोहोर्याइएको थियो।
Dowling et al।47 ले कलेजोको चोटपटकको मोडेल प्रस्तावित गर्‍यो intraoperative रक्तस्राव को सन्दर्भमा hemostatic सामग्री को hemostatic क्षमता को आकलन गर्न।BCT Ct नमूनाहरू (नकारात्मक नियन्त्रण), Cs फ्रेमवर्क (सकारात्मक नियन्त्रण), Ch NFRCS नमूनाहरू, र Cp NFRCS नमूनाहरूको लागि रेकर्ड गरिएको थियो।मुसाको suprahepatic vena cava लाई मिडियन ल्याप्रोटोमी गरेर पर्दाफास गरियो।त्यस पछि, बायाँ लोबको टाढाको भाग कैंचीले काटियो।कलेजोमा स्क्याल्पेल ब्लेडले चीरा बनाउनुहोस् र केहि सेकेन्डको लागि रगत बगाउन दिनुहोस्।सही तौल गरिएको Ch NFRCS र Cp NFRCS परीक्षण नमूनाहरू क्षतिग्रस्त सतहमा कुनै पनि सकारात्मक दबाव बिना राखिएको थियो र BCT रेकर्ड गरिएको थियो।नियन्त्रण समूह (Ct) ले त्यसपछि दबाब लागू गर्‍यो र त्यसपछि Cs 30 s47 चोट नछोडी।
Vivo मा घाउ निको पार्ने assays विकसित पोलिमर-आधारित NFRCSs को घाउ निको पार्ने गुणहरू मूल्याङ्कन गर्न एक्सिसनल घाउ मोडेल प्रयोग गरी प्रदर्शन गरियो।excisional घाउहरूको मोडेलहरू चयन गरियो र सानो परिमार्जनहरू 19,32,48 संग अघिल्लो प्रकाशित विधिहरू अनुसार प्रदर्शन गरियो।पहिले वर्णन गरिए अनुसार सबै जनावरहरूलाई एनेस्थेटाइज गरिएको थियो।पछाडिको छालामा गोलाकार गहिरो चीरा बनाउन बायोप्सी पंच (१२ मिमी) प्रयोग गर्नुहोस्।तयार घाउ साइटहरू Cs (सकारात्मक नियन्त्रण), Ct (कटन प्याडहरू निकोमा हस्तक्षेप गर्दछ भनेर पहिचान गर्दै), Ch NFRCS र Cp NFRCS (प्रयोगात्मक समूह) र कुनै उपचार बिना नकारात्मक नियन्त्रणको साथ ड्रेस गरिएको थियो।अध्ययनको प्रत्येक दिनमा, सबै मुसाहरूमा घाउको क्षेत्र मापन गरिएको थियो।घाउ भएको ठाउँको तस्वीर लिन र नयाँ ड्रेसिङ लगाउन डिजिटल क्यामेरा प्रयोग गर्नुहोस्।घाउ बन्दको प्रतिशत निम्न सूत्र द्वारा मापन गरिएको थियो:
अध्ययनको 12 औं दिनमा घाउ बन्द भएको प्रतिशतको आधारमा, उत्कृष्ट समूहको मुसाको छाला (Cp NFRCS) र नियन्त्रण समूह) एक्साइज गरिएको थियो र H&E स्टेनिङ र मेसनको ट्राइक्रोम स्टेनिङद्वारा अध्ययन गरिएको थियो। अध्ययनको 12 औं दिनमा घाउ बन्द भएको प्रतिशतको आधारमा, उत्कृष्ट समूहको मुसाको छाला (Cp NFRCS) र नियन्त्रण समूह) एक्साइज गरिएको थियो र H&E स्टेनिङ र मेसनको ट्राइक्रोम स्टेनिङद्वारा अध्ययन गरिएको थियो।अध्ययनको १२ औं दिनमा घाउ बन्द भएको प्रतिशतको आधारमा, उत्कृष्ट समूह (सीपी एनएफआरसीएस) र नियन्त्रण समूह) को मुसाको छालालाई हेमेटोक्सिलिन-इओसिन र म्यासन ट्राइक्रोमले दाग लगाएर एक्साइज गरिएको थियो।根据研究第12天的伤口闭合百分比，切除最佳组((Cp NFRCS)和对照组)的大鼠皮衤,H貓据s三有有闭染色研究।根据研究第12天的伤口闭合百分比，切除最佳组((Cp NFRCS)和对照组)的大鼠皮肤貓有有有有闭अध्ययनको 12 दिनमा प्रतिशत घाउ क्लोजरको आधारमा सर्वश्रेष्ठ समूह (सीपी एनएफआरसीएस) र नियन्त्रण समूहहरूमा मुसाहरू हेमेटोक्सिलिन-इओसिन दाग र मेसनको ट्राइक्रोम दागको लागि एक्साइज गरिएको थियो।लागू गरिएको दाग प्रक्रिया पहिले वर्णन गरिएका विधिहरू 49,50 अनुसार गरिएको थियो।छोटकरीमा, 10% फर्मालिनमा फिक्सेशन पछि, नमूनाहरू श्रेणीबद्ध अल्कोहलहरूको श्रृंखला प्रयोग गरेर निर्जलीकरण गरियो।एक्साइज्ड टिस्युको पातलो खण्डहरू (5 µm बाक्लो) प्राप्त गर्न माइक्रोटोम प्रयोग गर्नुहोस्।हिस्टोप्याथोलोजिकल परिवर्तनहरू अध्ययन गर्न नियन्त्रणहरू र Cp NFRCS को पातलो क्रमिक खण्डहरू हेमेटोक्सिलिन र इओसिनसँग उपचार गरियो।मेसनको ट्राइक्रोम दाग कोलेजन फाइब्रिल्सको गठन पत्ता लगाउन प्रयोग गरिएको थियो।प्राप्त नतिजाहरू रोगविज्ञानीहरूले अन्धाधुन्ध अध्ययन गरेका थिए।
Cp NFRCS नमूनाहरूको स्थिरता 12 महिनाको लागि कोठाको तापमान (25°C ± 2°C/60% RH ± 5%) मा अध्ययन गरिएको थियो।Cp NFRCS (सतह विरूपण र माइक्रोबियल वृद्धि) सामग्री र विधिहरू खण्डमा उल्लिखित माथिका विधिहरू अनुसार फोल्ड वेयर प्रतिरोध र BCT को लागि दृश्यात्मक रूपमा निरीक्षण र परीक्षण गरियो।
Cp NFRCS को स्केलेबिलिटी र प्रजनन क्षमता 15×15 cm2 को आकारको साथ Cp NFRCS तयार गरेर जाँच गरिएको थियो।थप रूपमा, 30 मिलीग्राम नमूनाहरू (n = 5) विभिन्न Cp NFRCS अंशहरूबाट निकालिएको थियो र अध्ययन गरिएका नमूनाहरूको BCT विधिहरू खण्डमा पहिले वर्णन गरिए अनुसार मूल्याङ्कन गरिएको थियो।
हामीले विभिन्न बायोमेडिकल अनुप्रयोगहरूको लागि Cp NFRCS रचनाहरू प्रयोग गरेर विभिन्न आकार र संरचनाहरू विकास गर्ने प्रयास गरेका छौं।त्यस्ता आकारहरू वा कन्फिगरेसनहरूमा नाकको रगतको लागि कोनिकल स्वाबहरू, दन्त प्रक्रियाहरू, र योनिबाट रक्तस्रावको लागि बेलनाकार स्वाबहरू समावेश छन्।
सबै डेटा सेटहरू औसत ± मानक विचलनको रूपमा व्यक्त गरिएका छन् र प्रिज्म 5.03 (GraphPad, San Diego, CA, USA) को प्रयोग गरेर ANOVA द्वारा विश्लेषण गरिएको छ त्यसपछि Bonferroni को बहु तुलना परीक्षण (*p <0.05)।
मानव अध्ययनहरूमा गरिएका सबै प्रक्रियाहरू संस्थान र राष्ट्रिय अनुसन्धान परिषद्को मापदण्डहरू, साथै हेलसिंकी 1964 को घोषणा र त्यसपछिका संशोधनहरू, वा समान नैतिक मापदण्डहरू अनुसार थिए।सबै सहभागीहरूलाई अध्ययनका विशेषताहरू र यसको स्वैच्छिक प्रकृतिको बारेमा जानकारी दिइएको थियो।सहभागी डाटा एक पटक एकत्रित भएपछि गोप्य रहन्छ।इन भिट्रो TEG प्रयोगात्मक प्रोटोकल कस्तुरबा मेडिकल कलेज, मणिपाल, कर्नाटक (IEC: 674/2020) को संस्थागत आचार समिति द्वारा समीक्षा र अनुमोदन गरिएको छ।स्वयंसेवकहरूले रगतको नमूना सङ्कलन गर्न सूचित सहमतिमा हस्ताक्षर गरे।
पशु अध्ययनहरूमा प्रदर्शन गरिएका सबै प्रक्रियाहरू चिकित्साको कस्तुबा संकाय, मणिपाल उच्च शिक्षा संस्थान, मणिपाल (IAEC/KMC/69/2020) अनुसार गरिएको थियो।डिजाइन गरिएका सबै पशु प्रयोगहरू पशु प्रयोगको नियन्त्रण र सुपरिवेक्षण (CPCSEA) को लागि समितिको दिशानिर्देशहरू अनुसार सञ्चालन गरिएको थियो।सबै लेखकहरूले ARRIVE दिशानिर्देशहरू पालना गर्छन्।
सबै NFRCS को FTIR स्पेक्ट्रा विश्लेषण गरियो र चित्र 2A मा देखाइएको chitosan स्पेक्ट्रम संग तुलना गरियो।3437 सेमी-1 (OH र NH स्ट्रेचिङ, ओभरल्याप), 2945 र 2897 cm-1 (CH stretching), 1660 cm-1 (NH2 स्ट्रेन), 1589 cm-1 (NH2 स्ट्रेन), 1589 सेमी-1 (N-1010 सेमी), ओएच-10 15 सेमी, ओभरल्याप 7 सेमी-1 (स्ट्रेच C–O, सेकेन्डरी हाइड्रोक्सिल), 993 सेमी-1 (स्ट्रेच CO, Bo-OH) 52.53.54।पूरक तालिका S1 ले chitosan (रिपोर्टर), शुद्ध chitosan, Cm, Ch, र Cp को लागि FTIR NFRCS अवशोषण स्पेक्ट्रम मानहरू देखाउँछ।सबै NFRCS (Cm, Ch र Cp) को FTIR स्पेक्ट्राले कुनै पनि महत्त्वपूर्ण परिवर्तनहरू बिना नै शुद्ध चिटोसनको रूपमा एउटै विशेषता अवशोषण ब्यान्डहरू देखायो (चित्र 2A)।FTIR नतिजाहरूले NFRCS को विकास गर्न प्रयोग गरिएका पोलिमरहरू बीच रासायनिक वा भौतिक अन्तरक्रियाको अनुपस्थिति पुष्टि गर्‍यो, यसले संकेत गर्दछ कि प्रयोग गरिएका पोलिमरहरू निष्क्रिय छन्।
Cm NFRCS, Ch NFRCS, Cp NFRCS र Cs को भिट्रो विशेषता।(A) कम्प्रेसन अन्तर्गत chitosan र Cm NFRCS, Ch NFRCS र Cp NFRCS को रचनाहरूको संयुक्त FTIR स्पेक्ट्रा प्रतिनिधित्व गर्दछ।(B) a) NFRCS Cm, Ch, Cp, र Cg (n = 3) को सम्पूर्ण रगत अपटेक दर;Ct नमूनाहरूले उच्च BAR देखाए किनभने कपास स्वाबको उच्च अवशोषण दक्षता हुन्छ;ख) रगत अवशोषण पछि रगत अवशोषित नमूनाको चित्रण।परीक्षण नमूना C को BCT को ग्राफिकल प्रतिनिधित्व (Cp NFRCS सँग उत्तम BCT थियो (15 s, n = 3))। C, D, E, र G मा डेटा औसत ± SD को रूपमा देखाइएको थियो, र त्रुटि पट्टीहरूले SD, ***p <0.0001 को प्रतिनिधित्व गर्दछ। C, D, E, र G मा डेटा औसत ± SD को रूपमा देखाइएको थियो, र त्रुटि पट्टीहरूले SD, ***p <0.0001 को प्रतिनिधित्व गर्दछ। C, D, E и G представлены как среднее ± стандартное отклонение, а планки погрешностей представляют представляют стандартное , *** C, D, E, र G मा डेटा औसत ± मानक विचलनको रूपमा प्रस्तुत गरिन्छ, र त्रुटि पट्टीहरूले मानक विचलन, ***p <0.0001 प्रतिनिधित्व गर्दछ। C、D、E 和G 中的数据显示为平均值± SD,误差线代表SD,***p <0.0001। C、D、E 和G 中的数据显示为平均值± SD,误差线代表SD,***p <0.0001। Данные в C, D, E и G показаны как среднее значение ± стандартное отклонение, планки погрешностей представляют стандартное отклонение, ***p <0,0001. C, D, E, र G मा डेटा औसत ± मानक विचलनको रूपमा देखाइन्छ, त्रुटि पट्टीहरूले मानक विचलन, ***p <0.0001 प्रतिनिधित्व गर्दछ।