“Twijfel er nooit aan dat een kleine groep bedachtzame, toegewijde burgers de wereld kan veranderen.Sterker nog, het is de enige die er is.”
De missie van Cureus is om het aloude model van medisch publiceren te veranderen, waarin het indienen van onderzoek duur, complex en tijdrovend kan zijn.
Bloedplaatjesrijk plasma/prp, weefselregeneratie, activering van bloedplaatjes, glucoseproliferatieve therapie, bloedplaatjes, proliferatieve therapie
Citeer dit artikel als: Harrison TE, Bowler J, Reeves K, et al.(17 mei 2022) Het effect van glucose op het aantal bloedplaatjes en het volume: implicaties voor regeneratieve geneeskunde.Behandeling 14(5): e25081.doi:10.7759/cureus.25081
Bloedplaatjesrijk plasma (PRP) en hypertone glucose-oplossingen worden vaak gebruikt voor injectie in de regeneratieve geneeskunde, soms samen.Het effect van hypertone glucose op de lysis en activering van bloedplaatjes is niet eerder gemeld.We testten het effect van verhoogde glucoseconcentraties op het aantal bloedplaatjes en erytrocyten, evenals celvolumes in PRP en volbloed (WB).Een snelle gedeeltelijke afname van het aantal bloedplaatjes trad op bij alle glucosemengsels gemengd met PRP of volbloed, consistent met gedeeltelijke lysis. Na de eerste minuut bleef het aantal bloedplaatjes stabiel, wat wijst op een snelle accommodatie van resterende bloedplaatjes tot extreme (> 2000 mOsm) hypertoniciteit. Na de eerste minuut bleef het aantal bloedplaatjes stabiel, wat wijst op een snelle accommodatie van resterende bloedplaatjes tot extreme (> 2000 mOsm) hypertoniciteit. Als u de kosten van het gebruik van uw apparaat wilt wijzigen, moet u ervoor zorgen dat het product op de juiste manier wordt gebruikt de machine is niet geschikt voor gebruik in de lucht (>2000 m²). Na de eerste minuut bleef het aantal bloedplaatjes stabiel, wat wijst op een snelle accommodatie van de resterende bloedplaatjes tot extreme (> 2000 mOsm) hypertoniciteit.。。2000 mOsm Als u de kosten van het gebruik van uw apparaat wilt wijzigen, moet u ervoor zorgen dat het product op de juiste manier wordt gebruikt u kunt een aanvraag indienen voor een onderhoudscontract (>2000 m²) . Na de eerste minuut bleef het aantal bloedplaatjes stabiel, wat wijst op een snelle aanpassing van de resterende bloedplaatjes aan de extreme (> 2000 mOsm) hyperosmolaire toestand.Glucoseconcentraties van 25% en hoger resulteerden in een significante toename van het gemiddelde bloedplaatjesvolume (MPV), wat wijst op een vroeg stadium van bloedplaatjesactivering.Verdere studies zijn nodig om te bepalen of lysis of activatie van bloedplaatjes optreedt en of hypertone glucose-injectie alleen of in combinatie met PRP extra klinisch voordeel kan opleveren.
In de jaren vijftig ontdekte de Amerikaanse chirurg George Hackett dat hij bij veel patiënten gewrichts- en rugpijn blijvend kon verlichten door een proliferatieve oplossing in pezen en ligamenten te injecteren.Zijn experimenten met konijnen toonden aan dat de behandeling, die hij proliferatieve therapie noemde, ervoor zorgde dat de pezen groter en sterker werden.Histologische studies hebben bevestigd dat tijdens dit proces nieuw collageen wordt aangemaakt [1].
Tijdens de eerste decennia werden veel verschillende distributieoplossingen uitgeprobeerd.Tegen de jaren negentig beschouwden de meeste beoefenaars hoge glucoseconcentraties als de veiligste en meest effectieve methode.Het werkingsmechanisme blijft echter onduidelijk.
Er zijn in de 20e eeuw maar weinig klinische onderzoeken uitgevoerd naar aanleiding van het werk van Hackett.In de jaren 2000 was er echter hernieuwde belangstelling en werden verschillende succesvolle klinische onderzoeken naar proliferatieve therapie voltooid voor de behandeling van lage rugpijn [2], artrose van de knie [3] en laterale epicondylitis [4].
Weefselregeneratie vereist de deelname van stamcellen.Daarom moeten hoge glucoseconcentraties op de een of andere manier migratie, replicatie en differentiatie van stamcellen veroorzaken.We veronderstellen dat bloedplaatjes kunnen fungeren als boodschappers en dat hoge glucoseconcentraties ervoor kunnen zorgen dat bloedplaatjes cytokines en groeifactoren afgeven, waardoor regeneratieve processen worden bevorderd, met name stamcelmigratie naar gebieden met hoge glucoseconcentraties.
Activering van bloedplaatjes gaat altijd vooraf aan een toename van intracellulair calcium [5].Liu et al.in 2008 toonden aan dat hoge glucosespiegels de activiteit van transient receptor potential canonical type 6 (TRPC6) kanalen in het plasmamembraan verhogen, wat leidt tot een instroom van calciumionen in de bloedplaatjes [6].Een andere studie toonde aan dat blootstelling van de marginale zone van de microtubuli aan calciumionen ontspanning, uitzetting en vervorming van de marginale zone veroorzaakt, wat op zijn beurt een verandering in vorm veroorzaakt van schijf naar bolvormig, resulterend in gemiddeld bloedplaatjesvolume (MPV) [7].
Onze hypothese in deze studie is dat blootstelling van bloedplaatjes aan hoge glucoseconcentraties de marginale zone van de microtubuli en de intracellulaire omgeving beïnvloedt, wat leidt tot een toename van MPV.
Alle deelnemers ondertekenden een formulier voor geïnformeerde toestemming nadat de details van het onderzoek waren uitgelegd en voordat ze de monsters ontvingen.In deze studie werden alleen PRP-monsters met een hematocriet van meer dan 2% gebruikt, zodat het aantal erytrocyten (erytrocyten) en het gemiddelde corpusculaire volume van rode bloedcellen (MCV) ter vergelijking konden worden opgenomen.
De studie werd uitgevoerd in vier fasen, de eerste fase was PRP en de overige fasen waren volbloed (Tabel 1).Zoals eerder beschreven [8], werden alle relatieve middelpuntvliedende krachten (RCF, g-kracht) berekend vanaf het middelpunt (Rmid, in cm) van de bloedkolom in de centrifugaalspuit.We kozen ervoor om MPV te gebruiken als een marker van sensibilisatie van bloedplaatjes en het aantal bloedplaatjes als een indicator van mogelijke lysis van bloedplaatjes, die beide gemakkelijk kunnen worden gemeten op standaard hematologieanalysatoren.
In de eerste fase doneerden 47 vrijwilligers bloedmonsters: één tube ethyleendiaminetetra-azijnzuur (EDTA) en één PRP-volbloedmonster (ontstold met natriumcitraat (NaCl, 3%)) (tabel 1).Plaats de rocker direct in de tube.Volledige bloedtelling (CBC) werd in drievoud uitgevoerd op EDTA-monsters en NaCl-monsters werden in drievoud geanalyseerd voor CBC-analyse, en vervolgens werd PRP bereid volgens verschillende hierboven beschreven methoden [8].Alle PRP-monsters werden bereid door centrifugatie bij 900-1000 g.Meng elk PRP-monster gedurende 5-10 seconden op een vortexmenger en verdeel vervolgens vijf aliquots van 0,5 ml in buisjes.
Om het effect van bloedplaatjesblootstelling op verhoogde glucoseconcentraties te evalueren, werden gelijke hoeveelheden (0,5 ml) van 0%, 5%, 12,5%, 25% en 50% glucose in water gemengd met bloedplaatjesmonsters om 0%, 2,5% 6,25%, 12,5% ​​en 25% concentraties van het glucosemengsel te verkrijgen en meng de buisjes op een reageerbuisschudder gedurende 15 minuten.De TAC van elk mengsel werd na 15 minuten in drievoud geanalyseerd.Aantal bloedplaatjes (PLT), aantal RBC's, MCV en MPV werden gemiddeld voor elke buis, en het gemiddelde aantal bloedplaatjes, aantal RBC's, MCV en MPV werden berekend voor alle PRP-monsters.
Nadat de eerste fase van de gegevensverzameling was voltooid, zagen we een significante toename van het bloedplaatjesvolume in PRP-bloedplaatjes na toevoeging van D50W.PRP-bloedplaatjes vertegenwoordigen niet noodzakelijkerwijs alle bloedplaatjes in het bloed en PRP-medium verschilt van WB-medium.Daarom hebben we besloten een tweede fasestudie uit te voeren naar het effect van toevoeging van D50W aan volbloed.
Voor de tweede ronde kozen we een steekproefomvang van 30 op basis van de resultaten van de eerste reeks, zoals beschreven in de sectie Analyse.In deze serie hebben 20 vrijwilligers bloedmonsters gedoneerd (tabel 1).Volbloed (1,8 ml) werd in een injectiespuit van 3 ml getrokken en ontstold met 0,2 ml 40% NaCl.De volbloedspuit werd gedurende vijf seconden gemengd met een vortexmenger en de CBC werd in drievoud geanalyseerd.Na analyse werd ontstold bloed toegevoegd aan 2 ml 50% glucose in een spuit van 5 ml (uiteindelijke glucoseconcentratie was ongeveer 25% (D25) en gedurende 30 minuten in een schudbuis geplaatst. Na 30 minuten werden D25/CBC in WB-spuiten in drievoud geanalyseerd. Aantal bloedplaatjes, RBC-telling, MCV en MPV per injectiespuit werden gemiddeld, en gemiddelde PLT, RBC-telling, MCV en MPV werden berekend voor elk monster voor en na toevoeging van glucose.
Omdat bloedplaatjes in volbloed vaak worden blootgesteld aan hypertone glucose tijdens proliferatieve glucosetherapie als gevolg van minimaal invasieve injectie, en het niet gebruikelijk is om PRP te combineren met hypertone glucose vlak voor injectie, hebben we besloten hypertone glucose te bestuderen in combinatie met WB in sectie 1. Stap drie en vier.In elk stadium doneerden 20 vrijwilligers 7-8 ml ACD-A (zuur met trinatriumcitraat (22,0 g/l), citroenzuur (8,0 g/l) en glucose (24,5 g/l), oplossing dextrosecitraat) voor bloedverdunners (Tabel 1).Alleen mengsels van glucose van meer dan 12,5% werden gebruikt om het drempelpercentage te bepalen dat gepaard gaat met een toename van MPV.In de derde fase wordt 1 ml bloed in een reageerbuis geplaatst.Meng vervolgens het bloed gedurende 10 seconden op een vortexmenger door 1 ml 30% glucose, 40% glucose of 50% glucose aan de buis toe te voegen om een ​​uiteindelijke glucoseconcentratie van respectievelijk 15%, 20% en 25% te verkrijgen.Glucosebloedmonsters werden onmiddellijk na het mengen op CBC geanalyseerd en gedurende 30 minuten om de twee minuten herhaald.
Tijdens de eerste menging stelt de toevoeging van 1:1 hypertone glucose en WB of PRP de bloedplaatjes gedurende enkele seconden bloot aan concentraties van meer dan 25%.In de vierde stap, om het effect van hypertone glucose met minimale initiële piekconcentraties te evalueren en de bovengrens van het effect van glucose te testen, voegden we slechts een kleine hoeveelheid bloed toe aan D25W of D50W.Plaats 1 ml D25W of D50W in een buis en voeg 0,2 ml WB toe terwijl u het monster gedurende 10 seconden vortexen.In deze gevallen werd het bloed blootgesteld aan glucose in een concentratie van ongeveer 20% boven de uiteindelijke concentratie, in plaats van 50% boven de uiteindelijke concentratie zoals in fase 3, wat resulteerde in uiteindelijke glucoseconcentraties van 20,8% en 41,6%.Gemengde monsters werden geanalyseerd met hetzelfde tijdsinterval als in stap 3.
In de eerste stap van elke glucoseverdunningsreeks werden 30 monsters genomen aangezien dit de geschikte steekproefomvang was voor de pilootstudie [9].Evalueer aan het einde van elke fase (inclusief de eerste fase) de toereikendheid van de steekproefomvang met behulp van de formule die is gebruikt om de steekproefomvang te bepalen die nodig is om het gemiddelde van de continue uitkomstvariabele in één populatie te schatten.Formule n = Z2 x SD2 /E2.In deze vergelijking is Z de Z-score, SD is de standaarddeviatie en E is de gewenste fout [10].Onze alfa is 0,05, wat overeenkomt met een Z-waarde van 1,96, en we verwachten een fout van 5 (in procenten).Daarom lossen we op voor n = (1,962 x SD2)/52.De resultaten toonden aan dat de vereiste steekproefomvang voor elke fase kleiner was dan het werkelijk verzamelde aantal.
Tijdens perioden 1, 3 en 4 met meer dan één glucoseconcentratie werd het effect van verschillende glucoseconcentraties geanalyseerd door de fractionele verandering tussen tijdstip 0 en elke volgende tijd (fase 1 op 15 minuten, periode 3 op 15 minuten) te vergelijken.en vier om de 15 seconden, daarna om de twee minuten.) Veranderingspercentages voor elke tijdsperiode werden vergeleken met behulp van de Mann-Whitney U-test omdat de gegevens geen normale verdeling volgden zoals bepaald door de Shapiro-Wilk normaliteitstest.Omdat in de eerste, derde en vierde stap (vijf in totaal) een 1-op-1-analyse van meerdere groepen (vijf) is uitgevoerd, is een Bonferroni-correctie uitgevoerd om de gewenste alfawaarde op ≤0,01 maar niet ≤0,05 te brengen.
Vermindering van het aantal bloedplaatjes met alle concentraties van hypertone dextrose en een toename van het MPV in PRP-bloedplaatjes bij >12,5% dextroseconcentratie: het aantal PRP-bloedplaatjes steeg van één tot vijf keer de concentratie in vergelijking met volbloed bij aanvang, variërend per methode (niet afgebeeld). Vermindering van het aantal bloedplaatjes met alle concentraties van hypertone dextrose en een toename van MPV in PRP-bloedplaatjes bij >12,5% dextroseconcentratie: het aantal PRP-bloedplaatjes steeg van één tot vijf keer de concentratie in vergelijking met volbloed bij aanvang, variërend per methode (niet afgebeeld). Het is belangrijk om de kosten van het onderhoud van de wasmachine en de stroomvoorziening te verhogen meer MPV in PRP-programma's met meer dan 12,5%: meer dan 12,5% van het aantal PRP-klanten van 1 tot 5 minuten nadat u het apparaat hebt gebruikt, in de richting van het apparaat (niet van toepassing). Verlaagd aantal bloedplaatjes bij alle hypertone dextroseconcentraties en verhoogd MPV in PRP-bloedplaatjes bij >12,5% dextroseconcentratie: PRP-bloedplaatjes nam 1-5 keer toe in vergelijking met volbloed bij aanvang, afhankelijk van de methode (niet getoond). ).Voor> 12,5% van de kosten, de kosten van het gebruik van de PRP, de MPV-status: 与基线全血相比，PRP 血小板计数从浓度的1 倍上升到5 倍，因方法而异（未描述）。 Bij een glucoseconcentratie van> 12,5% verlaagt de hoge glucoseconcentratie het bloedbeeld, de PRP-bloed-MPV neemt toe: vergeleken met 与基线全血 neemt het PRP-bloedbeeld toe van 1 tot 5 keer die van de concentratie (niet beschreven). Meer verkoopcijfers >12,5% van het aantal nieuwe klanten van de ene MPV naar de andere PRP: een PRP-versie van 1- д of 5-jarigen van de 5-jarigen van de 5-jarigen met verschillende soorten voedsel, in de vorm van van de waarheid (niet van toepassing). Bij glucoseconcentraties >12,5% verlaagden alle hypertensieve glucoseconcentraties het aantal bloedplaatjes en verhoogden het MPV in PRP-bloedplaatjes: het aantal PRP-bloedplaatjes nam 1- tot 5-voudig toe in vergelijking met de baseline volbloedconcentraties, afhankelijk van de methode (zoals beschreven).Figuur 1 laat zien dat het aantal bloedplaatjes afnam met bijna 75% na verdunning in water en met 20-30% na 15 minuten verdunnen met verschillende glucoseconcentraties in vergelijking met baseline PRP en een 1:1 verdunning gecorrigeerd voor volume (1-k1 met volumecorrectie).k -1 kweek).1 kweek).
Het aantal cellen in elke verdunning wordt uitgedrukt als een fractie van het oorspronkelijke aantal vóór verdunning.
MPV daalde minimaal tijdens PRP-productie, zonder verdere verandering in verdunningsconcentraties tot 12,5% ​​in water of glucose (inclusief 25% PRP-glucosemengsels) en nam toe met meer dan 20% na verdunning in 50% glucose-oplossing (Fig. .2).).Daarentegen vertoonden erytrocyten geen significante verandering in volume bij enige andere verdunning dan H2O.
Het gemiddelde celvolume in elke verdunning wordt uitgedrukt als een percentage van het oorspronkelijke volume vóór verdunning.
Een vergelijkbare maar minder uitgesproken vermindering van het aantal bloedplaatjes en een toename van de CVR werden waargenomen bij BC dat werd blootgesteld aan 50% glucose (te formuleren met 25% glucose).Tabel 2 vergelijkt celaantallen en celvolumes in volbloed verdund in 50% dextrose met fase 1 PRP-gegevens verdund in 50% dextrose.Veranderingen in RBC-telling en RBC MCV waren niet duidelijk en waren niet de focus van onze aandacht.
SD = standaarddeviatie, MD = gemiddeld verschil tussen groepen, SE = standaarddeviatie van gemiddeld verschil, RBC = erytrocyten, PLT = bloedplaatjes, PRP = bloedplaatjesrijk plasma, WB = volbloed
Na toevoeging van D50W aan WB was het percentage voor verdunning gecorrigeerd bloedplaatjesverlies 7,7% (310 ± 73 vs. 286 ± 96) vergeleken met 17,8% voor PRP-verdunning in D50W (664 ± 348 vs. 544 ± 277).MPV WB nam toe met 16,8% (van 10,1 ± 0,5 naar 11,8 ± 0,6), terwijl MPV PRP toenam met 26% (9,2 ± 0,8 vs. 11,6 ± 0,7). Hoewel de gemiddelde verschillen in zowel de vermindering van het aantal bloedplaatjes als de toename van het MPV significant groter waren bij PRP, waren de veranderingen in de vermindering van het aantal bloedplaatjes binnen WB bijna significant (310 ± 73 tot 286 ± 96 (-7,7%); p = 0,06) en de toename in MPV was significant (10,1 ± 0,5 tot 11,8 ± 0,6 (+16,8) p < .001). Hoewel de gemiddelde verschillen in zowel de vermindering van het aantal bloedplaatjes als de toename van het MPV significant groter waren bij PRP, waren de veranderingen in de vermindering van het aantal bloedplaatjes binnen WB bijna significant (310 ± 73 tot 286 ± 96 (-7,7%); p = 0,06) en de toename in MPV was significant (10,1 ± 0,5 tot 11,8 ± 0,6 (+16,8) p < .001).Hoewel de gemiddelde verschillen in zowel de afname van het aantal bloedplaatjes als de CVR-toename significant groter waren met PRP, waren de veranderingen in de afname van het aantal bloedplaatjes binnen WB bijna significant (310 ± 73 tot 286 ± 96 (-7,7%); p = 0,06).de MPV heeft een hogere waarde (van 10,1 ± 0,5 tot 11,8 ± 0,6 (+16,8) p < 0,001). de toename in MPV was significant (van 10,1 ± 0,5 tot 11,8 ± 0,6 (+16,8) p < 0,001).尽管PRP en WB 310 ± 73 至286 ± 96 (-7,7%)；p = 0,06） en MPV-kaart (10,1 ± 0,5 到11,8 ± 0,6 (+16,8) p < 0,001） 。尽管 PRP 在 血小板 计数 和 和 增加 方面 的 平均 差异 显着 大, 但 但 内血小板 计数 减少（（(310 ± 73 至 286 ± 96 (-7.7%) ； p = .06） en MPV 的增加是显着的（10.1 ± 0.5 到11.8 ± 0. 6 (+16,8) p < .001）。De verandering in de vermindering van het aantal bloedplaatjes binnen de WB was bijna significant (van 310 ± 73 tot 286 ± 96 (-7,7%); p = 0,06), hoewel PRP significant grotere gemiddelde verschillen had in de daling van het aantal bloedplaatjes en de toename van het aantal bloedplaatjes.en de toename van MPV was aanzienlijk.(van 10,1 ± 0,5 tot 11,8 ± 0,6 (+16,8) р < 0,001). (van 10,1 ± 0,5 tot 11,8 ± 0,6 (+16,8) p < 0,001).
Een eindconcentratie van 20% glucose was nodig om een ​​significante verandering in MPV te zien, maar de verandering in MPV was meer uitgesproken bij de eindconcentratie van 25%.Het verlies van bloedplaatjes stabiliseerde zich na de aanvankelijke daling.We zagen een aanvankelijke scherpe daling van de CVR, maar de CVR herstelde snel bij de 25% uiteindelijke glucoseconcentratie, wat significant hoger was dan de CVR-waarden die werden waargenomen bij de uiteindelijke glucoseconcentraties van 20% en 15% (Fig. 3 en links van Tabel 3; gearceerde vakken).geven p-waarden ≤ alfa aan met een Bonferroni-correctie van 0,01).Er was ook een aanvankelijke scherpe daling van het aantal PLT, waargenomen in de beginfase van 0-15 s, en bleef daarna stabiel (van 15 s naar 30 min; links van tabel 4).
De toevoeging van verschillende glucoseconcentraties aan volbloed resulteerde in een aanvankelijk snelle afname van MPV, gevolgd door een concentratieafhankelijk herstel van meer dan 20%.De legenda toont de glucoseconcentratie na verdunning.D15, D20 en D25 werden uitgevoerd in een 1:1 verdunning.D21 en D41 werden uitgevoerd bij een verdunning van 1:5.
Tabel 4 toont de verandering in het aantal bloedplaatjes bij verdunning in hypertone glucose.We observeerden een dosisafhankelijke relatie tussen de onmiddellijke daling van de PLT-cijfers bij de 1:1 verdunning en bij de 1:5 verdunning.Vergelijking van de 1:1 verdunningen als een enkele groep met de 1:5 verdunningen, had de 1:1 groep een onmiddellijke afname van het aantal bloedplaatjes minder dan de 1:5 groep 66 ± 48.000 (23%) versus 99 ± 69.000 (37%)., p = 0,014) in de 1:5-groep.Na een eerste daling op het eerste meetpunt stabiliseerde het aantal bloedplaatjes als percentage glucose (fig. 4).
Wanneer volbloed wordt toegevoegd aan glucose in een verhouding van 1:1, wordt het aantal bloedplaatjes met ongeveer 25% verminderd.Wanneer echter volbloed werd toegevoegd in een verhouding van 1:5, was de reductie veel groter – ongeveer 50%.
41% glucose verhoogde MPV sneller en dramatischer dan 25% of 21%.MPV-resultaten worden getoond in Figuur 3. Bij alle andere verdunningen werd geen onmiddellijke initiële afname in MPV waargenomen na toevoeging van 50% glucose.Bij gebruik van 25% glucose (glucoseconcentratie 20,8% bij de uiteindelijke verdunning) was de verandering in MPV vergelijkbaar met de verandering in 20% glucose bij een 1:1 verdunning (fig. 3).Hoewel veranderingen in MPV aanvankelijk groter waren bij de gemengde concentratie van 41% dan bij 25%, was het verschil in MPV tussen 41% en 25% na 16 minuten niet langer significant (Tabel 3, rechts).Het is ook interessant dat 25% glucose MPV effectiever verhoogde dan 20,8%.
Deze in vitro studie bevestigde onze hypothese gedeeltelijk. Het vertoonde een mogelijke gedeeltelijke lysis van bloedplaatjes door toevoeging van dextrose, een snelle accommodatie van bloedplaatjes tot extreme hypertoniciteit en een significante stijging van MPV als reactie op > 25% concentraties van hypertone dextrose. Het vertoonde een mogelijke gedeeltelijke lysis van bloedplaatjes door toevoeging van dextrose, een snelle accommodatie van bloedplaatjes tot extreme hypertoniciteit en een significante stijging van MPV als reactie op > 25% concentraties van hypertone dextrose. Wat is de beste manier om de kosten van het programma te wijzigen? het downloaden van een MPV-apparaat en het downloaden van MPV naar een ander apparaat gemiddelde opbrengst > 25%. Het vertoonde mogelijke gedeeltelijke bloedplaatjeslysis met dextrose, snelle accommodatie van bloedplaatjes tot extreme hypertoniciteit en een significante toename van MPV als reactie op hypertone dextroseniveaus> 25%.25 % 浓度的高渗葡萄糖时MPV 显着上升。Wat is het probleem? Meer dan 25% Als u een van de beste manieren vindt om uw telefoon te gebruiken, moet u ervoor zorgen dat het downloaden van een MPV-apparaat en het downloaden van MPV's op een voertuig stijgingspercentage > 25%. Het vertoont mogelijke gedeeltelijke bloedplaatjeslysis door glucosemengsels, snelle aanpassing van bloedplaatjes aan extreme hypertoniciteit en een significante toename van MPV als reactie op hypertone glucose> 25%.De initiële toename was maximaal bij 41,6% glucoseblootstelling, maar de toename in MPV benaderde 25% glucoseblootstelling ongeveer 20 minuten na blootstelling.
De concentratie van bloedplaatjes wordt beïnvloed door glucose.We merkten dat de hoeveelheid PLT afnam bij alle verdunningen van glucose.Een scherpe daling van het aantal bloedplaatjes in H2O (0%) verdunningen van de PRP-serie kan in verband worden gebracht met osmotische lysis.Als alternatief kan dit een artefact zijn dat wordt veroorzaakt door klontering van bloedplaatjes, maar dit staat in contrast met het ontbreken van MPV-verandering bij deze verdunning.Deze bevinding betekent dat sommige bloedplaatjes erg gevoelig zijn voor hypoosmolariteit.
In alle 1:1 verdunningen van glucose daalde de hoeveelheid PLT met 20-30%, zelfs met D5W (hypotonisch bij 252 mOsm), wat kan wijzen op een specifiek niet-osmotisch effect van glucose, aangezien zowel PLT als MPV onveranderd bleven bij een drievoudige toename in concentratie.glucose.van D5W tot D25W.PLT-concentraties hadden zelfs de neiging iets toe te nemen met toenemende osmolariteit.
De afname van PLT tussen 1:1 en 1:5 verdunningen betekent dat het oplossingseffect afhangt van de begin- en eindglucoseconcentratie.Als het alleen afhing van de initiële concentratie, dan zou men een verschil in PLT-reductie verwachten tussen 1:1-concentraties.Maar dat doen we niet.Als het lysis-effect alleen afhangt van de uiteindelijke glucoseconcentratie, dan verwachten we niet veel verschil tussen een 20% 1:1 verdunning en een 20,8% 1:5 verdunning.En toch hebben we het gedaan.
Als bloedplaatjesverlies optreedt als gevolg van bloedplaatjeslysis, wordt een gedeeltelijk lysaat gevormd, waarna cytokines en groeifactoren vrijkomen in de extracellulaire omgeving.Verschillende onderzoeken hebben aangetoond dat bloedplaatjeslysaat bijna net zo effectief is als PRP als proliferatie-oplossing [11].Van PRP zelf is aangetoond dat het een effectieve oplossing is voor de behandeling van proliferatie [12-14].
Inactieve bloedplaatjes circuleren in de vorm van een schijf versterkt met verschillende interne structuren.Tijdens activering nemen ze een meer bolvormige of amoebevorm aan, wat resulteert in een toename van het volume.De toename van het volume vereist een toename van het oppervlak, wat het resultaat is van de extrusie van het open tubulussysteem (OCS) en de toevoeging van exocytische korrels aan het membraan.Het moet nog worden bepaald of de toename van MPV geïnduceerd door hypertone glucose een of beide van deze mechanismen omvat, maar als het laatste het geval is, dan zou een toename van MPV op degranulatie wijzen.
Deze studie toonde aan dat blootstelling aan hoge glucoseconcentraties op PRP of volbloedplaatjes binnen 15 minuten resulteerde in een toename van MPV met een glucoseconcentratie van respectievelijk 25% en 41,6%.
De toename van MPV van bloedplaatjes kan te wijten zijn aan dilatatie van de omliggende microtubulus-klitten als reactie op calciuminstroom.Liu et al.Van glucose is aangetoond dat het de calciuminstroom door het bloedplaatjes TRPC6-kanaal medieert [6].Onze hypothese is dat glucose relaxatie van microtubulus-klitten induceert, wat leidt tot een toename van MPV en sensibilisatie en/of activatie van bloedplaatjes.Afgaande op onze resultaten is dit echter slechts een deel van het verhaal.In onze tests resulteerde geen enkele concentratie lager dan D25W in een toename van MPV.Aangezien we de blootstelling aan glucoseconcentraties tussen 12,5% en 25% niet hebben getest, suggereren onze fase 1-resultaten dat er mogelijk een drempel is in dit bereik van glucoseconcentraties die leidt tot een toename van MPV.Verder testen in fase 3 en 4 toonde aan dat 20-25% glucose hiervoor de drempel lijkt te zijn, maar het blijft onduidelijk waarom.
We zagen ook een afname van ~9% in MPV na centrifugeren.Het is niet duidelijk of deze afname in MPV het gevolg is van grotere en dichtere bloedplaatjes die vastzitten in de RBC-laag van de centrifuge.Deze observatie kan belangrijk zijn voor clinici, omdat het kan impliceren dat PRP-bloedplaatjes een kleinere en minder dichte subset van WB-bloedplaatjes zijn.
In een eerdere studie hebben we aangetoond dat PRP-bereiding met handmatige methoden niet duur is [8].Als glucose weefselbloedplaatjes of PRP sensibiliseert, waardoor ze vatbaarder worden voor activering, of als PRP wordt geproduceerd met gedeeltelijke lysaateigenschappen, kan dit de regeneratie bevorderen en de noodzaak van therapie verminderen.Daarom kan de combinatie van PRP en sterk geconcentreerde glucose kosteneffectiever zijn dan alleen PRP of glucose.
Ons onderzoek heeft verschillende tekortkomingen.Ten eerste gebruiken we PRP verkregen uit verschillende methoden.Dit kan tot tegenstrijdige resultaten leiden.Ten tweede waren we niet in staat om een ​​biochemische analyse van een van onze monsters uit te voeren om nauwkeuriger te bepalen of activering van bloedplaatjes had plaatsgevonden.We zouden graag P-selectine, bloedplaatjesfactor 4, monocytische bloedplaatjesaggregaten of andere markers van bloedplaatjesactivering willen meten om de mate of aanwezigheid van degranulatie van alfakorrels beter te begrijpen, maar dit valt buiten het bestek van dit onderzoek.Ten derde konden we met elektronenmicroscopie of andere methoden niet bevestigen dat de toename van MPV in aan glucose blootgestelde bloedplaatjes te wijten was aan het effect op microtubuli-klitten.
Mengsels van WB of PRP met 25% glucose verhoogden MPV, wat het begin van bloedplaatjesactivering signaleerde, hoewel deze studie geen progressie van aggregatie of degranulatie aantoonde.Het hypertone glucosemengsel resulteerde in verlies van bloedplaatjes, wat mogelijk een lytisch effect vertegenwoordigt.Gedeeltelijke activatie of lysis van bloedplaatjes kan weefselregeneratie veroorzaken na injectie van bloedplaatjes.Het is niet duidelijk tot welke klinische gevolgen deze veranderingen kunnen leiden.Verdere studies hebben nauwkeurigere metingen van activering of lysis aangetoond en hebben de verschillende klinische effecten van hypertone glucosemengsels met WB of PRP geëvalueerd.
Glucose proliferatieve therapie is een eenvoudige en goedkope regeneratieve therapie die zich snel uitbreidt en klinisch onderzoek ondersteunt.Deze studie suggereert een fysiologisch mechanisme dat, indien bevestigd, ons zou kunnen helpen een deel van het regeneratieve mechanisme van proliferatieve therapie te begrijpen.
Biomedische en gezondheidsinformatica aan de Universiteit van Missouri, Kansas City School of Medicine, Kansas City, VS
Menselijke proefpersonen: Alle deelnemers aan dit onderzoek gaven wel of geen toestemming.De International Society for Cellular Medicine heeft ICMS-2017-003-goedkeuring verleend.Het volgende protocol is goedgekeurd voor verder gebruik door de Institutional Review Board van de International Society for Cellular Medicine: Titel: Berekening van bloedplaatjesrijk plasmageneesmiddelopbrengst op basis van basislijn aantal CBC-bloedplaatjes.Dierproefpersonen: Alle auteurs bevestigden dat er geen dieren of weefsels bij deze studie betrokken waren.Belangenconflicten: In overeenstemming met het ICMJE Uniform Disclosure Form verklaren alle auteurs het volgende: Informatie over betaling/service: Alle auteurs verklaren dat ze van geen enkele organisatie financiële steun hebben ontvangen voor het ingediende werk.Financiële relaties: Alle auteurs verklaren dat ze momenteel of in de afgelopen drie jaar geen financiële relaties hebben met organisaties die mogelijk geïnteresseerd zijn in het ingediende werk.Andere relaties: Alle auteurs verklaren dat er geen andere relaties of activiteiten zijn die het ingezonden werk kunnen beïnvloeden.
Harrison TE, Bowler J, Reeves K et al.(17 mei 2022) Het effect van glucose op het aantal bloedplaatjes en het volume: implicaties voor regeneratieve geneeskunde.Behandeling 14(5): e25081.doi:10.7759/cureus.25081
© Copyright 2022 Harrison et al.Dit is een open access-artikel dat wordt verspreid onder de voorwaarden van de Creative Commons Attribution License CC-BY 4.0.Onbeperkt gebruik, distributie en reproductie in elk medium is toegestaan, op voorwaarde dat de oorspronkelijke auteur en bron worden vermeld.