«Tvil aldri på at en liten gruppe omtenksomme, dedikerte borgere kan forandre verden.Faktisk er det den eneste der.»
Cureus' oppgave er å endre den langvarige modellen for medisinsk publisering, der forskningsinnsending kan være dyrt, komplekst og tidkrevende.
Blodplaterikt plasma/prp, vevsregenerering, blodplateaktivering, glukoseproliferativ terapi, blodplater, proliferativ terapi
Siter denne artikkelen som: Harrison TE, Bowler J, Reeves K, et al.(17. mai 2022) Effekten av glukose på antall blodplater og volum: implikasjoner for regenerativ medisin.Cure 14(5): e25081.doi:10.7759/cureus.25081
Blodplaterikt plasma (PRP) og hypertoniske glukoseløsninger brukes ofte til injeksjon i regenerativ medisin, noen ganger sammen.Effekten av hypertonisk glukose på blodplatelyse og aktivering er ikke tidligere rapportert.Vi testet effekten av forhøyede glukosekonsentrasjoner på antall blodplater og erytrocytter, samt cellevolum i PRP og fullblod (WB).En rask delvis reduksjon i antall blodplater skjedde med alle glukoseblandinger blandet med PRP eller fullblod, i samsvar med delvis lyse. Etter det første minuttet forble blodplateantallet stabilt, noe som tyder på en rask akkommodasjon av gjenværende blodplater til ekstrem (>2000 mOsm) hypertonisitet. Etter det første minuttet forble blodplateantallet stabilt, noe som tyder på en rask akkommodasjon av gjenværende blodplater til ekstrem (>2000 mOsm) hypertonisitet. После первой минуты количество тромбоцитов оставалось стабильным, что указывает на быструю аккомоцитов до экстремального (>2000 мОсм) гипертонуса. Etter det første minuttet forble blodplateantallet stabilt, noe som indikerer en rask akkommodasjon av gjenværende blodplater til ekstrem (>2000 mOsm) hypertonisitet.第一分钟后，血小板计数保持稳定，表明残余血小板迅速适应极端（阁s.2000 m2000 mOsm）高渗状态. После первой минуты количество тромбоцитов оставалось стабильным, что указывает на быструю адаптациц экстремальному (>2000 мОсм) гиперосмолярному состоянию. Etter det første minuttet forble blodplateantallet stabilt, noe som indikerer en rask tilpasning av gjenværende blodplater til den ekstreme (>2000 mOsm) hyperosmolare tilstanden.Glukosekonsentrasjoner på 25 % og over resulterte i en signifikant økning i gjennomsnittlig blodplatevolum (MPV), noe som indikerer et tidlig stadium av blodplateaktivering.Ytterligere studier er nødvendig for å fastslå om blodplatelyse eller aktivering forekommer og om hypertonisk glukoseinjeksjon alene eller i kombinasjon med PRP kan gi ytterligere klinisk fordel.
På 1950-tallet oppdaget den amerikanske kirurgen George Hackett at han permanent kunne lindre ledd- og ryggsmerter hos mange pasienter ved å injisere en proliferativ løsning i sener og leddbånd.Forsøkene hans på kaniner viste at behandlingen, som han kalte proliferativ terapi, fikk senene til å forstørre og styrke.Histologiske studier har bekreftet at nytt kollagen produseres under denne prosessen [1].
I løpet av de første tiårene ble mange forskjellige distribusjonsløsninger prøvd.På 1990-tallet anså de fleste utøvere høye konsentrasjoner av glukose for å være den sikreste og mest effektive metoden.Virkningsmekanismen er imidlertid fortsatt uklar.
Få kliniske studier ble utført på 1900-tallet etter Hacketts arbeid.Imidlertid var det på 2000-tallet fornyet interesse og flere vellykkede kliniske studier av proliferativ terapi ble fullført for behandling av korsryggsmerter [2], artrose i kneet [3] og lateral epikondylitt [4].
Regenerering av vev krever deltakelse av stamceller.Derfor må høye konsentrasjoner av glukose på en eller annen måte indusere migrasjon, replikasjon og differensiering av stamceller.Vi antar at blodplater kan fungere som budbringere og at høye glukosekonsentrasjoner kan føre til at blodplater frigjør cytokiner og vekstfaktorer, og dermed fremme regenerative prosesser, spesielt stamcellemigrasjon til områder med høye glukosekonsentrasjoner.
Blodplateaktivering går alltid foran en økning i intracellulært kalsium [5].Liu et al.i 2008 viste at høye glukosenivåer øker aktiviteten til transient receptor potential canonical type 6 (TRPC6) kanaler i plasmamembranen, noe som fører til en tilstrømning av kalsiumioner til blodplater [6].En annen studie viste at eksponering av mikrotubulus marginalsone for kalsiumioner forårsaker relaksasjon, ekspansjon og deformasjon av marginalsonen, som igjen forårsaker en endring i form fra skive til sfærisk, noe som resulterer i gjennomsnittlig blodplatevolum (MPV) [7].
Vår hypotese i denne studien er at eksponering av blodplater for høye konsentrasjoner av glukose påvirker mikrotubulus marginale sone og intracellulære miljø, noe som fører til en økning i MPV.
Alle deltakerne signerte et informert samtykkeskjema etter at detaljene i studien ble forklart og før de mottok prøvene.I denne studien ble bare PRP-prøver med en hematokrit større enn 2 % brukt slik at erytrocytt (erytrocytt) og gjennomsnittlig korpuskulært volum av røde blodlegemer (MCV) kunne inkluderes for sammenligning.
Studien ble utført i fire faser, den første fasen var PRP og de resterende fasene var fullblod (tabell 1).Som beskrevet tidligere [8] ble alle relative sentrifugalkrefter (RCF, g-kraft) beregnet fra midtpunktet (Rmid, i cm) av blodsøylen i sentrifugalsprøyten.Vi valgte å bruke MPV som en markør for blodplatesensibilisering og blodplateantall som en indikator på potensiell blodplatelyse, som begge enkelt kan måles på standard hematologianalysatorer.
I den første fasen ga 47 frivillige blodprøver – ett rør med etylendiamintetraeddiksyre (EDTA) og en PRP-fullblodprøve (antikoagulert med natriumsitrat (NaCl, 3%)) (tabell 1).Plasser vippen i røret umiddelbart.Fullstendig blodtelling (CBC) ble utført på EDTA-prøver i triplikat, og NaCl-prøver ble analysert i triplikat for CBC-analyse, og deretter ble PRP fremstilt ved ulike metoder beskrevet ovenfor [8].Alle PRP-prøver ble fremstilt ved sentrifugering ved 900–1000 g.Bland hver PRP-prøve på en vortex-mikser i 5–10 sekunder, og del deretter fem 0,5 ml alikvoter i rør.
For å evaluere effekten av blodplateeksponering på forhøyede glukosekonsentrasjoner, ble like mengder (0,5 ml) av 0 %, 5 %, 12,5 %, 25 % og 50 % glukose i vann blandet med blodplateprøver for å oppnå 0 %, 2,5 % 6,25 %, 12,5 % glukose-konsentrasjon av et glass og 25 % glukose i et prøveglass og 25 % glukose i et glass. minutter.TAC for hver blanding ble analysert i tre eksemplarer etter 15 minutter.Blodplatetall (PLT), RBC-tall, MCV og MPV ble beregnet for hvert rør, og gjennomsnittlig antall blodplater, RBC-tall, MCV og MPV ble beregnet for alle PRP-prøver.
Etter at den første fasen av datainnsamlingen var fullført, la vi merke til en betydelig økning i blodplatevolum i PRP-blodplater etter tilsetning av D50W.PRP-blodplater representerer ikke nødvendigvis alle blodplater i blodet, og PRP-medium skiller seg fra WB-medium.Derfor bestemte vi oss for å gjennomføre en andre fase-testing av effekten av å tilsette D50W til fullblod.
For andre runde valgte vi en prøvestørrelse på 30 basert på resultatene fra den første serien, som beskrevet i avsnittet Analyse.I denne serien ga 20 frivillige blodprøver (tabell 1).Fullblod (1,8 ml) ble trukket inn i en 3 ml sprøyte og antikoagulert med 0,2 ml 40 % NaCl.Helblodssprøyten ble blandet i fem sekunder med en virvelmikser og CBC ble analysert i tre eksemplarer.Etter analyse ble antikoagulert blod tilsatt 2 ml 50 % glukose i en 5 ml sprøyte (endelig glukosekonsentrasjon var ca. 25 % (D25) og plassert i et rysterør i 30 minutter. Etter 30 minutter ble D25/CBC i WB-sprøyter analysert i tre eksemplarer. Gjennomsnittlig antall blodplater, MP-tall, RBC-tall, PV-tall, RBC-tall, og RBC-tall, PV-tall, og RBC-antall, ble målt etter 30 minutter. , MCV og MPV ble beregnet for hver prøve før og etter tilsetning av glukose.
Fordi blodplater i fullblod ofte eksponeres for hypertonisk glukose under proliferativ glukosebehandling på grunn av minimalt invasiv injeksjon, og det ikke er vanlig å kombinere PRP med hypertonisk glukose rett før injeksjon, bestemte vi oss for å studere hypertonisk glukose i kombinasjon med WB i seksjon 1. Trinn tre og fire.På hvert trinn donerte 20 frivillige 7-8 ml ACD-A (syre som inneholder trinatriumcitrat (22,0 g/l), sitronsyre (8,0 g/l) og glukose (24,5 g/l), dekstrosecitratløsning) for blodantikoagulanter (tabell 1).Bare blandinger av glukose over 12,5 % ble brukt til å bestemme terskelprosenten forbundet med en økning i MPV.På det tredje trinnet legges 1 ml blod i et reagensrør.Bland deretter blodet på en virvelmikser i 10 sekunder ved å tilsette 1 ml 30 % glukose, 40 % glukose eller 50 % glukose til røret for å oppnå en endelig glukosekonsentrasjon på henholdsvis 15 %, 20 % og 25 %.Glukoseblodprøver ble analysert for CBC umiddelbart etter blanding og gjentatt hvert annet minutt i 30 minutter.
Under innledende blanding utsetter tilsetning av 1:1 hypertonisk glukose og WB eller PRP blodplater for konsentrasjoner over 25 % i flere sekunder.I det fjerde trinnet, for å evaluere effekten av hypertonisk glukose med minimale innledende toppkonsentrasjoner og teste den øvre grensen for effekten av glukose, tilsatte vi bare en liten mengde blod til D25W eller D50W.Plasser 1 ml D25W eller D50W i et rør og tilsett 0,2 ml WB mens du virvler prøven i 10 sekunder.I disse tilfellene ble blodet eksponert for glukose i en konsentrasjon omtrent 20 % over sluttkonsentrasjonen, i stedet for 50 % over sluttkonsentrasjonen som i fase 3, noe som resulterte i endelige glukosekonsentrasjoner på 20,8 % og 41,6 %.Blandede prøver ble analysert med samme tidsintervall som i trinn 3.
I det første trinnet i hver glukosefortynningsserie ble det tatt 30 prøver da dette var passende prøvestørrelse for pilotstudien [9].På slutten av hver fase (inkludert den første fasen), evaluer tilstrekkeligheten til prøvestørrelsen ved å bruke formelen som brukes til å bestemme prøvestørrelsen som trengs for å estimere gjennomsnittet av den kontinuerlige utfallsvariabelen i én populasjon.Formel n = Z2 x SD2 /E2.I denne ligningen er Z Z-skåren, SD er standardavviket, og E er ønsket feil [10].Vår alfa er 0,05, som tilsvarer en Z-verdi på 1,96, og vi forventer en feil på 5 (i prosent).Derfor løser vi for n = (1,962 x SD2)/52.Resultatene viste at prøvestørrelsen som kreves for hvert trinn var mindre enn det faktiske antallet som ble samlet inn.
I løpet av periode 1, 3 og 4 ved bruk av mer enn én glukosekonsentrasjon ble effekten av ulike glukosekonsentrasjoner analysert ved å sammenligne fraksjonsendringen mellom tid 0 og hver påfølgende tid (fase 1 etter 15 minutter, periode 3 etter 15 minutter).og fire ved 15 sekunder, deretter hvert annet minutt.) Endringshastigheter for hver tidsperiode ble sammenlignet ved bruk av Mann-Whitney U-test fordi dataene ikke fulgte en normalfordeling som bestemt av Shapiro-Wilk normalitetstesten.Siden en 1-til-1-analyse av flere grupper (fem) ble utført i første, tredje og fjerde trinn (fem totalt), ble det utført en Bonferroni-korreksjon for å justere ønsket alfaverdi til ≤0,01 men ikke ≤0,05.
Reduksjon av antall blodplater med alle konsentrasjoner av hypertonisk dekstrose og en økning i MPV i PRP-blodplater ved >12,5 % dekstrosekonsentrasjon: Antall PRP-plater steg fra én til fem ganger konsentrasjonen sammenlignet med fullblod ved baseline, varierende med metoden (ikke avbildet). Reduksjon av antall blodplater med alle konsentrasjoner av hypertonisk dekstrose og en økning i MPV i PRP-blodplater ved >12,5 % dekstrosekonsentrasjon: Antall PRP-blodplater steg fra én til fem ganger konsentrasjonen sammenlignet med fullblod ved baseline, varierende med metoden (ikke avbildet). Уменьшение количества тромбоцитов при всех концентрациях гипертонической декстрозы и увеличение MPV процоц в RP рации декстрозы > 12,5%: количество тромбоцитов PRP увеличилось в 1-5 раз по сравнению с исходной цельвиз исходной цель етода (не показано). Redusert antall blodplater ved alle hypertone dekstrosekonsentrasjoner og økt MPV i PRP-blodplater ved >12,5 % dekstrosekonsentrasjon: PRP-blodplateantallet økte 1-5 ganger sammenlignet med baseline fullblod, avhengig av metode (ikke vist). ).在> 12,5 % 的葡萄糖浓度下，所有浓度的高渗葡萄糖降低血小板计数:MPV线全血相比，PRP 血小板计数从浓度的1 倍上升到5 倍，因方法而异（未／艏 Ved >12,5 % glukosekonsentrasjon reduserer den høye konsentrasjonen av glukose blodtellingen, PRP-blod-MPV øker: sammenlignet med 与基线全血, øker PRP-blodtellingen fra 1 til 5 ganger konsentrasjonen (ikke beskrevet). При концентрациях глюкозы >12,5% все концентрации гипертонической глюкозы снижали количество MP, тромбоцитах PRP: количество тромбоцитов PRP увеличивалось от 1- til 5-кратных концентраций по сравсниц и цельной крови, в зависимости от метода (nе описано ). Ved glukosekonsentrasjoner >12,5 % reduserte alle hypertensive glukosekonsentrasjoner antall blodplater og økte MPV i PRP-blodplater: Antall PRP-plater økte 1- til 5 ganger sammenlignet med baseline fullblodkonsentrasjoner, avhengig av metoden (som beskrevet).Figur 1 viser at antall blodplater sank med nesten 75 % etter fortynning i vann og med 20-30 % etter 15 minutters fortynning med ulike konsentrasjoner av glukose sammenlignet med baseline PRP og en 1:1 fortynning justert for volum (1- k1 med volumkorreksjon).k -1 avl).1 avl).
Antall celler i hver fortynning uttrykkes som en brøkdel av det opprinnelige antallet før fortynning.
MPV sank minimalt under PRP-produksjon, uten ytterligere endring i fortynningskonsentrasjoner til 12,5 % i vann eller glukose (inkludert 25 % PRP-glukoseblandinger) og økte med mer enn 20 % etter fortynning i 50 % glukoseløsning (fig. .2).).Derimot viste erytrocytter ingen signifikant endring i volum ved noen annen fortynning enn H2O.
Gjennomsnittlig volum av celler i hver fortynning uttrykkes som en prosentandel av det opprinnelige volumet før fortynning.
En lignende, men mindre uttalt reduksjon i antall blodplater og økning i CVR ble observert hos BC eksponert for 50 % glukose (for å formulere med 25 % glukose).Tabell 2 sammenligner celletall og cellevolum i fullblod fortynnet i 50 % dekstrose med fase 1 PRP-data fortynnet i 50 % dekstrose.Endringer i RBC-tall og RBC MCV var ikke åpenbare og var ikke i fokus for vår oppmerksomhet.
SD = standardavvik, MD = gjennomsnittlig forskjell mellom grupper, SE = standardavvik for gjennomsnittlig forskjell, RBC = erytrocytter, PLT = blodplater, PRP = blodplaterikt plasma, WB = fullblod
Etter tilsetning av D50W til WB, var prosentvis fortynningsjustert blodplatetap 7,7 % (310±73 vs. 286±96) sammenlignet med 17,8 % for PRP-fortynning i D50W (664±348 vs. 544±277).MPV WB økte med 16,8 % (fra 10,1 ± 0,5 til 11,8 ± 0,6), mens MPV PRP økte med 26 % (9,2 ± 0,8 vs. 11,6 ± 0,7). Selv om de gjennomsnittlige forskjellene i både blodplatereduksjon og MPV-økning var signifikant mer med PRP, var endringene i blodplatereduksjon innen WB nesten signifikante (310 ± 73 til 286 ± 96 (-7,7 %); p = 0,06) og økningen i MPV var signifikant (10,1 ± 0,5 til 11,0) <+1,08 p (+1,0) p. Selv om de gjennomsnittlige forskjellene i både blodplatereduksjon og MPV-økning var signifikant mer med PRP, var endringene i blodplatereduksjon innen WB nesten signifikante (310 ± 73 til 286 ± 96 (-7,7 %); p = 0,06) og økningen i MPV var signifikant (10,1 ± 0,5 til 11,0) <+1,08 p (+1,0) p.Selv om de gjennomsnittlige forskjellene i både blodplatereduksjon og CVR-økning var signifikant større med PRP, var endringer i blodplate-nedgang innenfor WB nesten signifikante (310 ± 73 til 286 ± 96 (-7,7 %); p = 0,06).увеличение MPV было значительным (от 10,1 ± 0,5 til 11,8 ± 0,6 (+16,8) p < 0,001). økningen i MPV var signifikant (fra 10,1 ± 0,5 til 11,8 ± 0,6 (+16,8) p < 0,001).尽管PRP 在血小板计数减少和MPV 增加方面的平均差异显着更大，但WB 内谄叏几乎是显着的（310 ± 73 至286 ± 96 (-7,7%)；p = ,06）和MPV 的增加是显着的（10,51 刈10,51 ± 10,51 ± 10,51 ± 10,51 ± 001）.尽管 PRP.的 几乎 是 显着 的 （（（310 ± 73 至 286 ± 96 (-7.7%) ； p = .06）和MPV 的增加睈睯昚1.（1. ± 0,6 (+16,8) p < 0,001）.Endringen i blodplatereduksjon innenfor WB var nesten signifikant (fra 310 ± 73 til 286 ± 96 (-7,7 %); p = 0,06), selv om PRP hadde signifikant større gjennomsnittlige forskjeller i blodplate-nedgang og MPV-økning.og økningen i MPV var betydelig.(от 10,1 ± 0,5 til 11,8 ± 0,6 (+16,8) р < 0,001). (fra 10,1 ± 0,5 til 11,8 ± 0,6 (+16,8) p < 0,001).
En endelig konsentrasjon på 20 % glukose var nødvendig for å se en signifikant endring i MPV, men endringen i MPV var mer uttalt ved sluttkonsentrasjonen på 25 %.Blodplatetap stabiliserte seg etter den første nedgangen.Vi noterte en initial kraftig nedgang i CVR, men CVR ble raskt gjenopprettet ved den endelige glukosekonsentrasjonen på 25 %, som var betydelig høyere enn CVR-nivåene som ble observert ved de endelige glukosekonsentrasjonene på 20 % og 15 % (fig. 3 og til venstre for tabell 3; skraverte bokser).angi p-verdier ≤ alfa med en Bonferroni-korreksjon på 0,01).Det var også et første kraftig fall i antall PLT, observert i startfasen på 0-15 s, og forble deretter stabilt (fra 15 s til 30 min; til venstre for tabell 4).
Tilsetning av ulike konsentrasjoner av glukose til fullblod resulterte i en initial rask reduksjon i MPV etterfulgt av en konsentrasjonsavhengig utvinning på mer enn 20 %.Legenden viser konsentrasjonen av glukose etter fortynning.D15, D20 og D25 ble utført i en 1:1 fortynning.D21 og D41 ble utført i en 1:5 fortynning.
Tabell 4 viser endringen i antall blodplater ved fortynning i hypertonisk glukose.Vi observerte et doseavhengig forhold mellom det umiddelbare fallet i PLT-tall ved 1:1-fortynningen og ved 1:5-fortynningen.Ved å sammenligne 1:1-fortynningene som en enkelt gruppe med 1:5-fortynningene, hadde 1:1-gruppen en umiddelbar reduksjon i blodplateantall mindre enn 1:5-gruppen 66±48 000 (23 %) versus 99±69 000 (37 %)., p = 0,014) i 1:5-gruppen.Etter et innledende fall ved det første målepunktet, teller blodplater som en prosentandel av stabilisert glukose (fig. 4).
Når fullblod tilsettes glukose i forholdet 1:1, reduseres blodplateantallet med ca. 25 %.Men når fullblod ble tilsatt i forholdet 1:5, var reduksjonen mye større – omtrent 50 %.
41 % glukose økte MPV raskere og mer dramatisk enn 25 % eller 21 %.MPV-resultater er vist i figur 3. Ved alle andre fortynninger ble det ikke observert noen umiddelbar initial reduksjon i MPV etter tilsetning av 50 % glukose.Ved bruk av 25 % glukose (glukosekonsentrasjon 20,8 % ved den endelige fortynningen), var endringen i MPV sammenlignbar med endringen i 20 % glukose ved en 1:1 fortynning (fig. 3).Selv om endringer i MPV opprinnelig var større ved 41 % blandet konsentrasjon enn ved 25 %, var forskjellen i MPV mellom 41 % og 25 % etter 16 minutter ikke lenger signifikant (tabell 3, til høyre).Det er også interessant at 25 % glukose økte MPV mer effektivt enn 20,8 %.
Denne in vitro-studien bekreftet delvis vår hypotese. Den viste potensiell delvis blodplatelyse ved dekstroseblanding, en rask akkommodasjon av blodplater til ekstrem hypertonisitet, og en signifikant økning i MPV som respons på > 25 % konsentrasjoner av hypertonisk dekstrose. Den viste potensiell delvis blodplatelyse ved dekstroseblanding, en rask akkommodasjon av blodplater til ekstrem hypertonisitet, og en signifikant økning i MPV som respons på > 25 % konsentrasjoner av hypertonisk dekstrose. Он показал потенциальный частичный лизис тромбоцитов примесью декстрозы, быструю аккомогодацицом тром пертонуса и значительное повышение MPV в ответ på гипертоническую концентрацию декстрозы > 25 %. Den viste potensiell partiell blodplatelyse med dekstrose, rask blodplateakkommodasjon til ekstrem hypertonisitet og en signifikant økning i MPV som respons på hypertone dekstrosenivåer >25 %.它显示出通过葡萄糖混合物潜在的部分血小板溶解，血小板快速逓适应极童它显示出通过葡萄糖混合物潜在的部分血小板溶解，血小板快速逓适应极竌2> % 浓度的高渗葡萄糖时MPV 显着上升。它 显示 出 通过 葡萄糖 潜在 的 部分 血小板 溶解 血小板 快速 适庯 极珌应> 25 % 浓度 高渗 葡萄糖 时 时 mpv 显着。。。。。 Он показывает потенциальный частичный лизис тромбоцитов смесями с глюкозой, быструю адаптацитов маптаци гипертонусу и значительное увеличение MPV в ответ на концентрацию гипертонической глюкозы > 25%. Den viser potensiell delvis blodplatelyse av glukoseblandinger, rask blodplatetilpasning til ekstrem hypertonisitet og en signifikant økning i MPV som respons på hypertonisk glukose >25 %.Den første økningen var maksimal ved 41,6 % glukoseeksponering, men økningen i MPV nærmet seg 25 % glukoseeksponering omtrent 20 minutter etter eksponering.
Konsentrasjonen av blodplater påvirkes av glukose.Vi la merke til at mengden PLT sank ved alle fortynninger av glukose.Et kraftig fall i antall blodplater i H2O (0 %) fortynninger av PRP-serien kan være assosiert med osmotisk lysis.Alternativt kan dette være en artefakt forårsaket av blodplateklumping, men dette er i motsetning til mangelen på MPV-endring ved denne fortynningen.Dette funnet betyr at noen blodplater er svært følsomme for hypoosmolaritet.
I alle 1:1 fortynninger av glukose reduserte mengden PLT med 20-30 %, selv med D5W (hypotonisk ved 252 mOsm), noe som kan indikere en spesifikk ikke-osmotisk effekt av glukose, siden både PLT og MPV forble uendret ved en tre ganger økning i konsentrasjonen.glukose.fra D5W til D25W.Faktisk hadde PLT-konsentrasjoner en tendens til å øke litt med økende osmolaritet.
Nedgangen i PLT mellom 1:1 og 1:5 fortynninger betyr at oppløsningseffekten avhenger av initial og endelig glukosekonsentrasjon.Hvis det bare var avhengig av den initiale konsentrasjonen, ville man forvente å se en forskjell i PLT-reduksjon mellom 1:1-konsentrasjoner.Men det gjør vi ikke.Hvis lyseringseffekten kun avhenger av den endelige glukosekonsentrasjonen, forventer vi ikke stor forskjell mellom en 20 % 1:1 fortynning og en 20,8 % 1:5 fortynning.Og likevel gjorde vi det.
Dersom blodplatetap oppstår på grunn av blodplatelyse, dannes et delvis lysat, hvoretter cytokiner og vekstfaktorer frigjøres til det ekstracellulære miljøet.Flere studier har vist at blodplatelysat er nesten like effektivt som PRP som en spredningsløsning [11].PRP i seg selv har vist seg å være en effektiv løsning for behandling av spredning [12-14].
Inaktive blodplater sirkulerer i form av en skive forsterket med flere interne strukturer.Under aktivering får de en mer sfærisk eller amøbeform, noe som resulterer i en økning i volum.Økningen i volum krever en økning i overflateareal, som er et resultat av ekstrudering av det åpne rørsystemet (OCS) og tilsetning av eksocytiske granuler til membranen.Det gjenstår å bestemme om økningen i MPV indusert av hypertonisk glukose involverer en eller begge disse mekanismene, men hvis sistnevnte, vil en økning i MPV indikere degranulering.
Denne studien viste at eksponering for høye konsentrasjoner av glukose på PRP eller helblodplater resulterte i en økning i MPV innen 15 minutter med en glukosekonsentrasjon på henholdsvis 25 % og 41,6 %.
Økningen i blodplate-MPV kan skyldes dilatasjon av de omkringliggende mikrotubuli-flokene som respons på kalsiumtilstrømning.Liu et al.Glukose har vist seg å mediere kalsiumtilstrømning gjennom blodplate-TRPC6-kanalen [6].Vår hypotese er at glukose induserer avslapning av mikrotubuli-floker, noe som fører til en økning i MPV og blodplatesensibilisering og/eller aktivering.Men å dømme etter resultatene våre, er dette bare en del av historien.I våre tester resulterte ingen konsentrasjon under D25W i en økning i MPV.Gitt at vi ikke har testet eksponering for glukosekonsentrasjoner mellom 12,5 % og 25 %, tyder våre fase 1-resultater på at det kan være en terskel i dette området av glukosekonsentrasjoner som fører til en økning i MPV.Ytterligere testing i trinn 3 og 4 viste at 20-25 % glukose ser ut til å være terskelen for dette, men det er fortsatt uklart hvorfor.
Vi observerte også en ~9% reduksjon i MPV etter sentrifugering.Det er ikke klart om denne nedgangen i MPV skyldes større og tettere blodplater fanget i RBC-laget i sentrifugen.Denne observasjonen kan være viktig for klinikere siden den kan innebære at PRP-blodplater er en mindre og mindre tett undergruppe av WB-blodplater.
I en tidligere studie viste vi at PRP-fremstilling med manuelle metoder er billig [8].Hvis glukose sensibiliserer vevsplater eller PRP, noe som gjør dem mer mottakelige for aktivering, eller hvis PRP produseres med partielle lysategenskaper, kan dette forbedre regenerering og redusere behovet for terapi.Derfor kan kombinasjonen av PRP og høykonsentrert glukose være mer kostnadseffektiv enn PRP eller glukose alene.
Vår studie har flere mangler.Først bruker vi PRP hentet fra flere forskjellige metoder.Dette kan føre til motstridende resultater.For det andre var vi ikke i stand til å utføre en biokjemisk analyse av noen av prøvene våre for mer nøyaktig å fastslå om blodplateaktivering hadde skjedd.Vi ønsker å måle P-selektin, blodplatefaktor 4, monocytiske blodplateaggregater eller andre markører for blodplateaktivering for bedre å forstå graden eller tilstedeværelsen av alfagranulatdegranulering, men dette ligger utenfor denne studien.For det tredje var vi ikke i stand til å bekrefte ved elektronmikroskopi eller andre metoder at økningen i MPV i glukoseeksponerte blodplater skyldtes effekten på mikrotubulus floker.
Blandinger av WB eller PRP med 25 % glukose økte MPV, noe som signaliserte begynnelsen av blodplateaktivering, selv om denne studien ikke viste progresjon av aggregering eller degranulering.Den hypertone glukoseblandingen resulterte i blodplatetap, som muligens representerer en lytisk effekt.Delvis aktivering eller lysis av blodplater kan forårsake vevsregenerering etter blodplateinjeksjon.Det er ikke klart hvilke kliniske konsekvenser disse endringene kan føre til.Ytterligere studier har vist mer nøyaktige målinger av aktivering eller lysis og har evaluert de forskjellige kliniske effektene av hypertone glukoseblandinger med WB eller PRP.
Glukoseproliferativ terapi er en enkel og rimelig regenerativ terapi som raskt utvides og støtter klinisk forskning.Denne studien foreslår en fysiologisk mekanisme som, hvis bekreftet, kan hjelpe oss å forstå en del av den regenerative mekanismen til proliferativ terapi.
Biomedisinsk og helseinformatikk ved University of Missouri, Kansas City School of Medicine, Kansas City, USA
Mennesker: Alle deltakerne i denne studien ga eller ga ikke samtykke.International Society for Cellular Medicine har utstedt ICMS-2017-003-godkjenning.Følgende protokoll er godkjent for videre bruk av Institutional Review Board of the International Society for Cellular Medicine: Tittel: Beregning av blodplaterikt plasmamedikamentutbytte basert på baseline CBC-platetall.Dyrepersoner: Alle forfattere bekreftet at ingen dyr eller vev var involvert i denne studien.Interessekonflikter: I samsvar med ICMJE Uniform Disclosure Form, erklærer alle forfattere følgende: Betalings-/tjenesteinformasjon: Alle forfattere erklærer at de ikke har mottatt økonomisk støtte fra noen organisasjon for det innsendte arbeidet.Økonomiske forhold: Alle forfattere erklærer at de for øyeblikket eller i løpet av de siste tre årene ikke har økonomiske forhold til noen organisasjon som kan være interessert i det innsendte arbeidet.Andre relasjoner: Alle forfattere erklærer at det ikke er andre relasjoner eller aktiviteter som kan påvirke det innsendte arbeidet.
Harrison TE, Bowler J, Reeves K et al.(17. mai 2022) Effekten av glukose på antall blodplater og volum: implikasjoner for regenerativ medisin.Cure 14(5): e25081.doi:10.7759/cureus.25081
© Copyright 2022 Harrison et al.Dette er en artikkel med åpen tilgang distribuert under vilkårene i Creative Commons Attribution License CC-BY 4.0.Ubegrenset bruk, distribusjon og reproduksjon i ethvert medium er tillatt, forutsatt at den opprinnelige forfatteren og kilden er kreditert.