د مغذي موادو ترلاسه کول او ویش د حشراتو د خوړو او د ژوند د تاریخ ځانګړتیاوې سره یوځای کوي. د ژوند په مختلفو مرحلو کې د ځانګړو مغذي موادو د کمښت د جبرانولو لپاره، حشرات کولی شي دا مغذي مواد د اضافي تغذیې له لارې ترلاسه کړي، د بیلګې په توګه، د پوډل په نوم پیژندل شوي پروسې کې د فقاریه حیواناتو د ترشحاتو په خوړلو سره. د غوماشو انافیلس عربیاني داسې ښکاري چې خوارځواکي وي او له همدې امله د میټابولیزم او تکثیر دواړو لپاره مغذي موادو ته اړتیا لري. د دې څیړنې موخه دا وه چې ارزونه وکړي چې ایا د مغذي موادو د ترلاسه کولو لپاره د غوا د پیشاب په اړه د ان عربینس حرکت د ژوند تاریخ ځانګړتیاوې ښه کوي.
ډاډ ترلاسه کړئ چې دا خوندي دی. arabiensis د تازه، ۲۴ ساعته، ۷۲ ساعته، او ۱۶۸ ساعته زاړه غوا د پیشاب بوی ته متوجه شو، او کوربه غوښتونکي او وینه خوړل شوي (۴۸ ساعته د وینې وروسته خواړه) میرمنې په Y-ټیوب olfactometer کې اندازه شوې، او امیندواره میرمنې د زیږون ازموینې لپاره ارزول شوې. بیا د ټولو څلورو عمر لرونکو ټولګیو کې د غوا په پیشاب کې د بایو فعال مرکباتو پیژندلو لپاره ګډ کیمیاوي او الیکټروفیزیولوژیکي تحلیل کارول شوی. د بایو فعال مرکباتو مصنوعي مخلوط په Y-ټیوب او ساحوي آزموینو کې ارزول شوي. د ملاریا ویکتورونو لپاره د احتمالي اضافي رژیم په توګه د غوا پیشاب او د هغې اصلي نایتروجن لرونکي مرکب یوریا د څیړنې لپاره، د تغذیې پیرامیټرې او د ژوند تاریخ ځانګړتیاوې اندازه شوې. د ښځینه مچیو تناسب او د غوا د پیشاب او یوریا جذب شوي مقدار ارزول شوی. د تغذیې وروسته، ښځینه د ژوندي پاتې کیدو، تړل شوي الوتنې، او تکثیر لپاره ارزول شوې.
د کوربه د وینې او تغذیې په لټه کې شئ. په لابراتوار او ساحوي مطالعاتو کې، عربان د تازه او زړو غواګانو د پیشاب طبیعي او مصنوعي بوی ته متوجه شول. امیندواره میرمنې د زیږون په ځایونو کې د غواګانو د پیشاب غبرګونونو ته بې پروا وې. کوربه او وینه څښونکې میرمنې په فعاله توګه د غوا پیشاب او یوریا جذبوي او دا سرچینې د ژوند تاریخ د سوداګرۍ له مخې د الوتنې، ژوندي پاتې کیدو یا تکثیر لپاره د فزیولوژیکي حالت د فعالیت په توګه تخصیص کوي.
د ژوند د تاریخ ځانګړتیاوو د ښه والي لپاره د غوا د پیشاب ترلاسه کول او ویش. د غوا د پیشاب اضافي تغذیه د ورځني ژوندي پاتې کیدو او ویکتور کثافت زیاتولو سره په مستقیم ډول د ویکتور ظرفیت اغیزه کوي، او په غیر مستقیم ډول د الوتنې فعالیت بدلولو سره او له همدې امله باید په راتلونکي ماډلونو کې په پام کې ونیول شي.
د مغذي موادو ترلاسه کول او ویش د حشراتو د خوراک او د ژوند د تاریخ ځانګړتیاوې سره یوځای کوي [1,2,3]. حشرات کولی شي خواړه غوره کړي او ترلاسه کړي او د خوړو د شتون او مغذي موادو اړتیاو پراساس جبرانونکي تغذیه ترسره کړي [1,3]. د مغذي موادو ویش د ژوند د تاریخ پروسې پورې اړه لري او ممکن د حشراتو د ژوند په مختلفو مرحلو کې د خوړو کیفیت او مقدار لپاره مختلف اړتیاوې رامینځته کړي [1,2]. د ځانګړو مغذي موادو د کمښتونو د جبرانولو لپاره، حشرات کولی شي دا غذايي مواد د اضافي تغذیې له لارې ترلاسه کړي، لکه د خټو، د فقاریه حیواناتو د مختلفو فاضله موادو او رطوبتونو، او مردار، یوه پروسه چې د ډډونو په نوم پیژندل کیږي [2]. که څه هم د تیتلی او پتنګ ډولونو ډولونه په عمده توګه تشریح شوي، د اوبو سوري په نورو حشراتو کې هم پیښیږي، او د دې ډول سرچینو ته جذب او تغذیه کولی شي په روغتیا او د ژوند د تاریخ نورو ځانګړتیاو باندې د پام وړ اغیزې ولري [2, 4, 5, 6],7]. د ملاریا مچۍ انافیلس ګامبی سینسو لاټو (sl) د 'خوارځواکۍ' بالغ په توګه راڅرګندیږي [8]، نو اوبه ورکول ممکن رول ولوبوي د خپل ژوند د تاریخ ځانګړتیاوو کې مهم رول لوبوي، مګر دا چلند تر اوسه پورې له پامه غورځول شوی دی. په دې مهم موټر کې د مغذي موادو د زیاتوالي لپاره د یوې وسیلې په توګه د حرکت کارول د پاملرنې وړ دي ځکه چې دا ممکن مهم ایپیډیمولوژیکي پایلې ولري.
د لویو ښځینه انوفیلس مچیو کې د نایتروجن اخیستل محدود دي ځکه چې د لاروا له مرحلې څخه لیږدول شوي کم کالوري زیرمې او د وینې خواړو غیر موثر کارول [9]. ښځینه Ann.gambiae sl معمولا د اضافي وینې خواړو سره د ضمیمه کولو له لارې د دې لپاره تاوان ورکوي [10، 11]، په دې توګه ډیر خلک د ناروغۍ د اخته کیدو خطر سره مخ کوي او مچیو د ښکار ډیر خطر سره مخ کوي. په بدیل سره، مچۍ کولی شي د فقاریه څارویو د فاضله موادو اضافي تغذیه وکاروي ترڅو نایتروجني مرکبات ترلاسه کړي چې د تطابق او الوتنې حرکت ته وده ورکوي، لکه څنګه چې د نورو حشراتو لخوا ښودل شوي [2]. پدې برخه کې، د An. د ګمبیان sl ډولونو پیچلي، انوفیلس عربینیس، تازه او زاړه غوا پیشاب [12،13،14] دننه د وروڼو ډولونو څخه د یو قوي او جلا جذب په زړه پورې دی. انوفیلس عربینیس په خپلو کوربه غوره توبونو کې فرصت طلبه دی او د غواګانو سره د ملګرتیا او تغذیه کولو لپاره پیژندل کیږي. د غوا پیشاب د نایتروجني مرکباتو بډایه سرچینه ده، چې یوریا په تازه پیشاب کې د ټول نایتروجن 50-95٪ جوړوي. [15، 16]. لکه څنګه چې د غوا پیشاب عمر لري، مایکرو ارګانیزمونه د 24 ساعتونو دننه د نایتروجن مرکباتو پیچلتیا کمولو لپاره دا سرچینې کاروي [15]. د امونیا د چټک زیاتوالي سره، چې د عضوي نایتروجن کمښت سره تړاو لري، الکالوفیلیک مایکرو ارګانیزمونه (چې ډیری یې د مچیو لپاره زهرجن مرکبات تولیدوي) وده کوي [15]، کوم چې ممکن ښځینه وي Ann.arabiensis په غوره توګه د 24 ساعتونو یا لږ عمر لرونکي پیشاب ته متوجه کیږي [13، 14].
په دې څیړنه کې، کوربه او د وینې تغذیه شوي Ans وپلټل شول. د خپل لومړي ګوناډوټروپین دورې په جریان کې، د ادرار مخلوط کولو له لارې د نایتروجن مرکباتو، په شمول د یوریا د ترلاسه کولو لپاره د عربینسس ارزونه وشوه. بیا، د تجربو لړۍ ترسره شوه ترڅو ارزونه وشي چې څنګه ښځینه مچۍ د ښه ژوندي پاتې کیدو، تکثیر او نور خوراک لپاره دا احتمالي مغذي سرچینه تخصیص کوي. په نهایت کې، د تازه او زړو غواګانو د پیشاب بوی ارزول شو ترڅو معلومه شي چې ایا دا د کوربه او وینې تغذیه شوي Ans لپاره د باور وړ نښې چمتو کوي. د دې احتمالي تغذیې سرچینې په لټه کې، عربینسس د لیدل شوي توپیر لرونکي جذابیت تر شا کیمیاوي اړیکې وموندلې. د 24 ساعتونو عمر لرونکي ادرار کې پیژندل شوي د بې ثباته عضوي مرکباتو (VOCs) مصنوعي بوی مخلوطونه د ساحې شرایطو لاندې نور ارزول شوي، د لابراتوار شرایطو لاندې ترلاسه شوي پایلې پراخوي او د غواګانو د ادرار بوی په مختلفو فزیولوژیکي حالتونو اغیزه ښیې. د مچیو جذب. ترلاسه شوي پایلې تاییدوي چې An. عربینسس د ژوند تاریخ ځانګړتیاو باندې د اغیزې کولو لپاره د فقراتي ادرار کې موندل شوي نایتروجن مرکبات ترلاسه کوي او توزیع کوي. دا پایلې د احتمالي ایپیډیمولوژیکي پایلو په شرایطو کې بحث شوي او دا چې څنګه دوی د ویکتور څارنې او کنټرول لپاره کارول کیدی شي.
انافیلز عربیکان (ډونګولا سټرین) په ۲۵ ± ۲ درجو سانتي ګراد، ۶۵ ± ۵٪ RH او ۱۲:۱۲ ساعته رڼا: تیاره دوره کې ساتل شوي وو. لاروا په پلاستيکي ټریونو (۲۰ سانتي متره × ۱۸ سانتي متره × ۷ سانتي متره) کې چې د اوبو سره ډک شوي وو روزل شوي وو او د Tetramin® کبانو خواړه ورکړل شوي وو (ټیټرا ورک، میل، DE). پوپا په ۳۰ ملی لیتره پیالو کې راټول شوي وو (نولاتو هیرټیلا، آسټرپ، SE) او بیا د بګډورم پنجرو ته لیږدول شوي وو (۳۰ سانتي متره × ۳۰ سانتي متره × ۳۰ سانتي متره؛ میګا ویو ساینس، تایچنګ، تایوان) ترڅو د لویانو ظهور ته اجازه ورکړي. لویانو ته د ظهور وروسته تر ۴ ورځو پورې د ۱۰٪ سوکروز محلول اډ لیبیتم چمتو شوی و (dpe)، په کوم ځای کې کوربه غوښتونکې میرمنې د تجربې دمخه سمدلاسه خواړه وړاندې شوي وو، یا د تجربې دمخه د شپې د تشو اوبو سره وږي شوي وو، لکه څنګه چې لاندې تشریح شوي. د الوتنې ټیوب تجربو لپاره کارول شوې میرمنې د لوږې لپاره وږې وې یوازې ۴-۶ ساعته د اوبو سره. د راتلونکو بایوسای لپاره د وینې څښونکي مچیو چمتو کولو لپاره، ۴ dpe ښځینه د غشا تغذیه کولو سیسټم (هیموټیک ډیسکوري ورکشاپونه، اکرینګټن، انګلستان) په کارولو سره د ډیفایبرټیک پسونو وینه (هاتونالاب، برو، SE) سره چمتو شوې. بیا په بشپړ ډول ګڼه ګوڼه میرمنې انفرادي پنجرو ته لیږدول شوې او په مستقیم ډول خواړه ورکړل شوي، لکه څنګه چې لاندې تشریح شوي، یا د لاندې تشریح شوي تجربو څخه د 3 ورځو لپاره 10٪ سوکروز اډ لیبیتم. وروستۍ میرمنې د الوتنې ټیوب بایوسای لپاره کارول شوې او لابراتوار ته لیږدول شوې، او بیا د تجربې څخه دمخه د 4-6 ساعتونو لپاره د اوبو ډکول ورکړل شوي.
د بالغو عربي ښځو د پیشاب او یوریا مصرف اندازه کولو لپاره د تغذیې معاینې کارول شوې. کوربه غوښتونکو او وینه خوړونکو میرمنو ته د 48 ساعتونو لپاره د 1٪ منحل شوي تازه او زړو غوا پیشاب، د یوریا مختلف غلظت، او دوه کنټرولونه (10٪ سوکروز او اوبه) لرونکی خواړه ورکړل شول. برسېره پردې، د خوړو رنګ ورکول (1 mg ml-1 xylene cyanide FF; CAS 2650-17-1; Sigma-Aldrich, Stockholm, SE) په رژیم کې اضافه شول او په 250 µl مایکرو سینټرفیوج ټیوبونو کې په 4 × 4 میټریکس کې چمتو شول (Axygen Scientific, Union City, CA, US; شکل 1A) څنډې ته ډک کړئ (~300 µl). د مچیو او د رنګ رنګ احتمالي اغیزو ترمنځ د سیالۍ څخه د مخنیوي لپاره، 10 مچۍ په یوه لوی پیټري ډش کې ځای په ځای کړئ (12 سانتي متره قطر او 6 سانتي متره لوړوالی؛ Semadeni, Ostermundigen, CH; شکل 1A) په بشپړ تیاره کې په 25 ± 2 سانتي متره °C او 65 ± 5٪ نسبي کې. رطوبت. دا تجربې له ۵ څخه تر ۱۰ ځله تکرار شوې. د خوړو سره د تماس وروسته، مچان د نورو تحلیلونو پورې په -۲۰ درجو سانتي ګراد کې کیښودل شول.
د غواګانو پیشاب او یوریا وګورئ چې د کوربه او وینې څښونکي ښځینه انوفیلس عربیانوس لخوا جذب شوي. د تغذیې په آزموینې (A) کې، ښځینه مچیو ته د تازه او زړو غواګانو پیشاب، د یوریا مختلف غلظت، سوکروز (10٪)، او تش شوي اوبه (H2O) څخه جوړ شوی رژیم ورکړل شو. کوربه غوښتونکي (B) او د وینې څښونکي (C) میرمنې د نورو ازمول شوي رژیم په پرتله ډیر سوکروز جذب کړل. په یاد ولرئ چې کوربه غوښتونکي میرمنې د 168 ساعتونو غوا پیشاب (B) څخه کم د 72 ساعتونو غوا پیشاب جذب کړ. د پیشاب اوسط ټول نایتروجن مینځپانګه (± معیاري انحراف) په انسیټ کې ښودل شوی. کوربه غوښتونکي (D، F) او د وینې څښونکي (E، G) میرمنې یوریا په خوراک پورې تړلي ډول اخلي. د تنفس شوي اوسط حجم (D، E) د مختلف تورو نومونو سره د یو بل څخه د پام وړ توپیر درلود (یو طرفه ANOVA د توکي پوسټ هاک تحلیل په کارولو سره؛ p < 0.05). د غلطۍ بارونه د اوسط (BE) معیاري تېروتنه استازیتوب کوي. مستقیم ډیش شوی کرښه د لاګ لاین ریګریشن لاین استازیتوب کوي (ف، ج)
د جذب شوي خواړو د خوشې کولو لپاره، مچان په انفرادي ډول د 1.5 ملی لیتر مایکرو سینټرفیوج ټیوبونو کې ځای په ځای شوي وو چې 230 µl د اوبو ډکول پکې شامل وو او نسج د یو ځلیدونکي پیسټل او بې تار موټرو (VWR انټرنیشنل، لونډ، SE) په کارولو سره ګډوډ شو، وروسته د 10 دقیقو لپاره په 10 krpm کې سنټرفیوګیشن وشو. سوپرناټینټ (200 µl) د 96 څاه مایکروپلیټ (سیګما-الډریچ) ته لیږدول شوی او جذب (λ620) د سپیکٹروفوټومیټر پر بنسټ مایکروپلیټ لوستونکي (SPECTROStar® Nano، BMG Labtech، Ortenberg، DE) nm په کارولو سره ټاکل شوی و. په بدیل سره، مچان د 1 ملی لیتر ډیسټل شوي اوبو کې مینځل شوي وو، چې 900 µl یې د سپیکٹروفوټومیټریک تحلیل لپاره کیویټ ته لیږدول شوي وو (λ 620 nm؛ UV 1800، Shimadzu، Kista، SE). د غذایی مصرف اندازه کولو لپاره، د سیریل ډیلیشن لخوا یو معیاري منحنی چمتو شو ترڅو 0.2 µl تولید کړي. د ۱ ملی ګرامه ملی لیتر-۱ زایلین سیانایډ ۲.۴ µl. بیا، د پیژندل شوي رنګ غلظت نظری کثافت د هر مچ لخوا خوړل شوي خواړو مقدار ټاکلو لپاره کارول شوی و.
د حجم معلومات د تغیراتو د یو اړخیز تحلیل (ANOVA) په کارولو سره تحلیل شول چې وروسته د ټوکی د پوسټ هاک جوړه پرتله کول (JMP Pro, v14.0.0, SAS انسټیټیوټ انکارپوریشن, Cary, NC, US, 1989–2007). د خطي ریګریشن تحلیلونو د غلظت پورې تړلي یوریا مصرف تشریح کړ او د کوربه غوښتونکیو او د وینې څښونکي مچیو ترمنځ پرتله شوي ځوابونه (د میک لپاره ګراف پیډ پریزم v8.0.0، ګراف پیډ سافټویر، سان ډیاګو، CA، US).
د هر عمر ګروپ څخه د پیشاب نږدې 20 µl نمونې په Chromosorb® W/AW (10 mg 80/100 میش، Sigma Aldrich) پورې تړل شوي او په ټین کیپسولونو کې پوښل شوي (8 mm × 5 mm). کیپسولونه د CHNS/O تحلیل کونکي (Flash 2000، Thermo Fisher Scientific، Waltham، MA، US) د احتراق چیمبر ته داخل شوي ترڅو د تولید کونکي پروتوکول سره سم په تازه او زاړه پیشاب کې د نایتروجن مینځپانګه معلومه کړي. ټول نایتروجن (g N l-1) د یوریا پیژندل شوي غلظت پراساس اندازه شوی چې د معیار په توګه کارول کیږي.
د کوربه توب او د وینې څښونکو ښځینه ژوندي پاتې کیدو باندې د رژیم اغیزې ارزولو لپاره، مچان په انفرادي ډول په لویو پیټري لوښو کې ځای پر ځای شوي وو (12 سانتي متره قطر او 6 سانتي متره لوړوالی؛ سیماډیني) د پوښ په جال پوښل شوي سوري سره (3 سانتي متره قطر) د هوا ورکولو او خواړو رسولو لپاره. خواړه په مستقیم ډول د 4 dpe وروسته چمتو شوي وو او پکې 1٪ منحل شوي تازه او زاړه غوا پیشاب، د یوریا څلور غلظت، او دوه کنټرولونه، 10٪ سوکروز او اوبه شاملې وې. هر خواړه د غاښونو ټیمپون (DAB Dental AB، Upplands Väsby، SE) ته د 5 ملی لیتر سرنج (Thermo Fisher Scientific، Gothenburg، SE) کې داخل شوي، پلنجر لرې شوی، او د پیټري لوښو په سر کې ځای پر ځای شوی و (شکل 1).1A). هره ورځ خپل خواړه بدل کړئ. لابراتوار لکه څنګه چې پورته تشریح شوی وساتئ. ژوندي پاتې شوي مچان په ورځ کې دوه ځله شمیرل شوي، پداسې حال کې چې مړه شوي مچان تر هغه وخته پورې پریښودل شوي چې وروستی مچان مړ شي (n = 40 په هر درملنه کې). په مختلفو رژیمونو کې تغذیه شوي مچانو ژوندي پاتې کیدل په احصایوي ډول تحلیل شوي و. د کاپلان-مایر د بقا منحني او د لاګ-رینک ازموینې ترڅو د رژیمونو ترمنځ د بقا ویش پرتله کول (IBM SPSS احصایې 24.0.0.0).
د Attisano et al.[17] پر بنسټ د مچیو د الوتلو یو دودیز ماشین، چې د 5 ملي میتر ضخامت روښانه اکریلیک تختو (10 سانتي متره پراخ x 10 سانتي متره اوږد x 10 سانتي متره لوړ) څخه جوړ شوی، پرته له مخکینۍ او شا تختو څخه (انځور 3: پورته). د ګاز کروماتګرافي ستنې (0.25 ملي میتر id؛ 7.5 سانتي متره L) څخه جوړ شوی عمودی ټیوب سره د محور اسمبلۍ چې پایونه یې د حشراتو ستنې سره تړل شوي دي چې د نیوډیمیم مقناطیسونو د یوې جوړې ترمنځ د 9 سانتي مترو په فاصله کې ځړول شوي دي. د ورته موادو څخه جوړ شوی افقی ټیوب (6.5 سانتي متره L) عمودی ټیوب دوه برخې کړ ترڅو یو تړل شوی لاس او یو لاس جوړ کړي چې د رڼا د مداخلې سیګنال په توګه د المونیم ورق یوه کوچنۍ ټوټه لیږدوي.
د ۲۴ ساعتونو لوږې لرونکو ښځو ته د بندیز څخه مخکې د ۳۰ دقیقو لپاره پورته خواړه ورکړل شول. بشپړ تغذیه شوي ښځینه مچۍ بیا په انفرادي ډول د ۲-۳ دقیقو لپاره په یخ کې بې هوښه شوې او د موم سره د حشراتو پنونو سره وصل شوې (جویل سوینسن ویکسفابریک AB، مونکا لجونګبي، SE) او بیا د افقي ټیوبونو لاسونو سره وتړل شوې. د الوتنې مل. په هره الوتنه کې انقلابونه د ګمرک جوړ شوي ډیټا لاګر لخوا ثبت شوي، بیا د PC-Lab 2000™ سافټویر (v4.01؛ ویلمن، ګاور، BE) په کارولو سره زیرمه او ښودل شوي. د الوتنې مل د اقلیم تنظیم شوي خونه کې ځای په ځای شوی و (۱۲ ساعته:۱۲ ساعته، رڼا: تیاره، ۲۵ ± ۲ °C، ۶۵ ± ۵٪ RH).
د الوتنې د فعالیت د نمونې د لیدلو لپاره، د الوتنې ټول واټن (m) او د پرله پسې الوتنې فعالیتونو ټولټال شمیر د 24 ساعتونو په موده کې په هر ساعت کې محاسبه شو. برسېره پردې، د انفرادي میرمنو لخوا الوتنې اوسط واټنونه د درملنې په اوږدو کې پرتله شوي او د یو اړخیز ANOVA او د توکي د پوسټ هاک تحلیل (JMP Pro, v14.0.0, SAS انسټیټیوټ انکارپوریشن) په کارولو سره تحلیل شوي، چیرې چې اوسط واټن یو انحصاري متغیر ګڼل کیده، پداسې حال کې چې درملنه یو خپلواک فکتور دی. سربیره پردې، د پړاوونو اوسط شمیر په 10 دقیقو زیاتوالي کې محاسبه کیږي.
د انارابینسيس د تولیدي فعالیت په اړه د رژیم اغیزې ارزولو لپاره، شپږ ښځینه (۴ dpe) د وینې راټولولو وروسته په مستقیم ډول د بګډورم پنجرو ته لیږدول شوې (۳۰ سانتي متره × ۳۰ سانتي متره × ۳۰ سانتي متره) او بیا د ۴۸ ساعتونو لپاره تجربوي خواړه ورکړل شول لکه څنګه چې پورته تشریح شوي. بیا خواړه لرې شول او د سپونینګ پیالې (۳۰ ملی لیتر؛ نولاټو هیرټیلا) د ۲۰ ملی لیتره اوبو سره ډکې شوې چې د ۴۸ ساعتونو لپاره په دریمه ورځ چمتو شوې، چې هر ۲۴ ساعته بدلیږي. د هر رژیم رژیم ۲۰-۵۰ ځله تکرار کړئ. د هرې تجربوي پنجرې لپاره هګۍ شمیرل شوي او ثبت شوي. د هګیو فرعي نمونې د ډیالکس-۲۰ مایکروسکوپ (DM1000؛ ارنسټ لیټز ویټزلر، ویټزلر، DE) په کارولو سره د انفرادي هګیو د اوسط اندازې او اوږدوالي توپیر ارزولو لپاره کارول شوې (n ≥ په هر رژیم کې ۲۰۰) چې د لییکا کیمره (DFC) ۳۲۰ R۲ سره سمبال دي؛ لایکا مایکروسیسټمز لمیټډ، ډی ای). پاتې هګۍ د اقلیم کنټرول شوي خونه کې د معیاري پالنې شرایطو لاندې د 24 ساعتونو لپاره ساتل شوې وې، او د دې وروستیو کې راڅرګند شوي لومړي انسټارم لاروا فرعي نمونه (n ≥ 200 په هر رژیم کې) اندازه شوې، لکه څنګه چې پورته تشریح شوي. د هګیو شمیر او د هګیو او لاروا اندازه د درملنې او د یو اړخیز ANOVA او د توکي د پوسټ هاک تحلیل (JMP Pro، v14.0.0، SAS انسټیټیوټ انکارپوریشن) ترمنځ پرتله شوې.
د زیبو غواګانو، ارسي نسلونو څخه راټول شوي نمونو څخه د تازه (۱ ساعت وروسته نمونې اخیستلو)، ۲۴ ساعته، ۷۲ ساعته او ۱۶۸ ساعته عمر لرونکي پیشاب څخه د سر فضا بې ثباته مواد راټول شوي. د اسانتیا لپاره، د پیشاب نمونې سهار وختي راټولې شوې پداسې حال کې چې غواګانې لاهم په ګودام کې وې. د پیشاب نمونې د ۱۰ کسانو څخه راټولې شوې او د هرې نمونې ۱۰۰-۲۰۰ ملی لیتره د انفرادي پولیامایډ بیکینګ کڅوړو (Toppits Cofresco, Frischhalteprodukte GmbH and Co., Minden, DE) ته د ۳ لیتره پولیامایډ سره د وینیل کلورایډ پلاستيکي ډرمونو کې لیږدول شوي. د هر غوا د پیشاب نمونې څخه د سر فضا بې ثباته مواد یا مستقیم (تازه) یا د پخیدو وروسته د خونې په حرارت کې د ۲۴ ساعتونو، ۷۲ ساعتونو او ۱۶۸ ساعتونو لپاره راټول شوي، یعنې د هر پیشاب نمونه د هر عمر ګروپ استازیتوب کوي.
د سر فضا د بې ثباته موادو د راټولولو لپاره، د تړل شوي لوپ سیسټم څخه کار اخیستل شوی و ترڅو د فعال کاربن فلټر شوي ګاز جریان (100 ملی لیتره دقیقه -1) د پولیامایډ کڅوړې له لارې د جذب کالم ته د 2.5 ساعتونو لپاره د ډایفرام ویکیوم پمپ (KNF نیوبرګر، فریبرګ، DE) په کارولو سره گردش وکړي. د کنټرول په توګه، د سر فضا راټولول د خالي پولیامایډ کڅوړې څخه ترسره شو. د جذب کالم د ټیفلون ټیوب (5.5 سانتي متره x 3 ملي میتر id) څخه جوړ شوی و چې پکې 35 ملی ګرامه پوراپاک Q (50/80 میش؛ واټرز ایسوسی ایټس، میلفورډ، MA، US) د شیشې وړۍ پلګونو ترمنځ شامل و. د کارولو دمخه، کالم د 1 ملی لیتر بیا استخراج شوي n-hexane (Merck، Darmstadt، DE) او 1 ملی لیتر پینټین (99.0٪ خالص محلول GC درجې، سیګما الډریچ) سره فلش شوی و. جذب شوي بې ثباته مواد د 400 μl پینټین سره ایلیټ شوي وو. د سر فضا ټولګه راټوله شوه او بیا په -20 درجو سانتي ګراد کې زیرمه شوه تر هغه چې د نورو تحلیل لپاره وکارول شي.
د کوربه لټون او د وینې خوړلو چلند غبرګونونه. د تازه، 24-h، 72-h، او 168-h-aged ادرار څخه راټول شوي د سر ځای بې ثباته استخراجونه د مستقیم شیشې ټیوب olfactometer [18] په کارولو سره د عربیډوپسس مچیو څخه د بې ثباته استخراج لپاره تحلیل شوي. تجربې د ZT 13-15 په جریان کې ترسره شوې، د ان د کور لټون فعالیت لوړ دوره. عرب [19]. د شیشې ټیوب olfactometer (80 cm × 9.5 cm id) د پورته څخه د 3 ± 1 lx سره سره رڼا سره روښانه شوی. د چارکول فلټر شوی او رطوبت شوی هوا جریان (25 ± 2 °C، 65 ± 2٪ نسبي رطوبت) د 30 cm s-1 کې بایوسای تیر کړ. هوا د سټینلیس سټیل میش سکرینونو لړۍ څخه تیریږي، د لامینر جریان او یونیفورم پلم جوړښت رامینځته کوي. د غاښونو ټیمپون ډسپنسر (4 cm × 1 cm; L:D; DAB غاښونو AB)، د 5 سانتي مترو کویل څخه ځړول شوی د ولفاکټومیټر د باد لوري پای، د محرک بدلون سره په هرو 5 دقیقو کې. د تحلیل لپاره، د هر سر فضا استخراج 10 μl، 1:10 حل شوی، د محرک په توګه کارول شوی و. د کنټرول په توګه د پنټین مساوي مقدار کارول شوی و. د تجربې له پیل څخه 2-3 ساعته دمخه انفرادي کوربه غوښتونکي یا د وینې څښونکي مچۍ په انفرادي خوشې کولو پنجرو کې ځای په ځای شوي وو. د خوشې کولو پنجره د ولفاکټومیټر په ښکته باد اړخ کې کیښودل شوه، او مچیو ته اجازه ورکړل شوه چې د 1 دقیقو لپاره عادت شي، او بیا د پنجرې تیتلی والو د خوشې کولو لپاره خلاص شو. د درملنې یا کنټرول لپاره جذب د هغو مچیو تناسب په توګه تحلیل شو چې د خوشې کیدو 5 دقیقو کې د سرچینې سره تماس کې راغلل. د هر سر فضا بې ثباته استخراج او کنټرول لږترلږه 30 ځله تکرار شو، او د هرې یوې ورځې د اغیزو څخه د مخنیوي لپاره، په هره تجربه ورځ کې ورته شمیر درملنې او کنټرولونه ازمول شوي. د کوربه او وینې تغذیه شوي ځوابونو غوښتنه وکړئ. عربي د سر فضا سیټونو په مقابل کې د نامتو لوژستیک ریګریشن په کارولو سره تحلیل شوي چې د عجیب تناسب لپاره د جوړه وار پرتله کولو وروسته تعقیب شوي. (JMP Pro، v14.0.0، SAS انسټیټیوټ انکارپوریشن).
د ان د هګۍ اچولو غبرګون. د تازه او زړو غواګانو د پیشاب څخه د سر ځای استخراج د بګډورم پنجرو کې تحلیل شو (30 سانتي متره × 30 سانتي متره × 30 سانتي متره؛ میګا ویو ساینس). پلاستيکي پیالې (30 ملی لیتر؛ نولاټو هیرټیلا) د 20 ملی لیتره اوبو سره ډکې شوې چې د هګۍ اچولو سبسټریټ چمتو کړ او د پنجرې په مخالف کونجونو کې ځای په ځای شول، 24 سانتي متره لرې. د درملنې پیالې د هر هګۍ استخراج 10 μl سره په 1:10 کمولو کې تنظیم شوې. د کنټرول پیالې تنظیم کولو لپاره د پینټین مساوي مقدار کارول شوی و. د موقعیت اغیزو کنټرول لپاره د هرې تجربې ترمنځ درملنه او کنټرول پیالې تبادله شوې. لس وینې تغذیه شوې میرمنې په ZT 9-11 کې تجربوي پنجرو ته خوشې شوې او په پیالو کې هګۍ 24 ساعته وروسته شمیرل شوې. د هګۍ اچولو شاخص محاسبه کولو فورمول دا دی: (د درملنې پیالې کې د هګیو شمیر - د کنټرول پیالې کې د هګیو شمیر)/(د هګیو اچولو ټول شمیر). هر درملنه 8 ځله تکرار شوه.
د ښځینه ان.ارابیینسس د ګاز کروماتګرافیک او الکترون انټینا نمونې کشف (GC-EAD) تحلیل لکه څنګه چې مخکې تشریح شوی و ترسره شو [20]. په لنډه توګه، تازه سر ځای بې ثباته استخراجونه د Agilent Technologies 6890 GC (سانټا کلارا، CA، US) په کارولو سره جلا شوي چې د HP-5 کالم (30 m × 0.25 mm id، 0.25 μm فلم ضخامت، Agilent Technologies) سره سمبال شوي. او د ادرار عمر. هایدروجن د ګرځنده مرحلې په توګه کارول شوی و چې د اوسط خطي جریان کچه یې 45 سانتي متره s-1 وه. هر نمونه (2 μl) د 30 ثانیو لپاره د 225 °C د داخلي تودوخې سره په ویشل شوي حالت کې انجیکشن شوې وه. د GC تنور تودوخه د 35 °C (3 دقیقې هولډ) څخه تر 300 °C (10 دقیقې هولډ) پورې په 10 °C دقیقه-1 کې پروګرام شوې وه. د GC د فاضله موادو په ویشونکي کې، د نایتروجن 4 psi اضافه شوه او د شعلې ایونیزیشن کشف کونکي او EAD ترمنځ په ګیرسټل 3D/2 ټیټ مړ حجم کراس (ګیرسټل، مولهیم، DE) کې 1:1 ویشل شوې وه. د EAD لپاره د GC فاضله موادو کیپلیري د ګیرسټل ODP-2 لیږد لاین له لارې تیر شو، کوم چې د GC تنور تودوخه د 5 °C جمع تعقیبوي، په شیشې ټیوب (10 سانتي متره × 8 ملي میتر) کې، چیرې چې دا د کاربن فلټر شوي، رطوبت شوي هوا (1.5 l min−1) سره مخلوط شوی و. انتن د ټیوب له وتلو څخه 0.5 سانتي متره لرې ځای پر ځای شوی و. هر انفرادي مچۍ د یو نقل لپاره حساب شوی و، او د کوربه لټوونکو مچیو لپاره، لږترلږه درې نقلونه د هر عمر د پیشاب نمونو باندې ترسره شوي.
د تازه او زړو غواګانو د پیشاب د سر فضا راټولولو کې د بایو فعال مرکباتو پیژندنه د ګډ GC او ډله ایز سپیکٹرومیټر (GC-MS؛ 6890 GC او 5975 MS؛ Agilent ټیکنالوژۍ) په کارولو سره د GC-EAD تحلیل کې د انټینال غبرګونونو د راپارولو لپاره، چې په 70 eV کې د الکترون اغیزې ایونیزیشن حالت کې کار کوي. GC د HP-5MS UI-coated فیوز شوي سیلیکا کیپلیري کالم (60 m × 0.25 mm داخلي قطر، 0.25 μm فلم ضخامت) سره سمبال شوی و چې هیلیم د ګرځنده مرحلې په توګه کاروي چې د 35 سانتي مترو s-1 اوسط خطي جریان کچه لري. د 2 μl نمونه د GC-EAD تحلیل لپاره د ورته انجیکټر ترتیباتو او د تنور تودوخې په کارولو سره انجیکشن شوې وه. مرکبات د دوی د ساتلو وخت (Kovát شاخص) او ډله ایز سپیکٹرا پراساس د دودیز کتابتون او NIST14 کتابتون (Agilent) په پرتله پیژندل شوي. پیژندل شوي مرکبات د مستند معیارونو انجیکشن کولو سره تایید شوي (اضافي فایل 1: جدول S2). د مقدار کولو لپاره، هیپټیل اسټیټ (۱۰ نانو ګرامه، ۹۹.۸٪ کیمیاوي پاکوالی، الډریچ) د بهرني معیار په توګه داخل شو.
د مصنوعي بوی مخلوط د اغیزمنتیا ارزونه چې په تازه او زاړه پیشاب کې پیژندل شوي بایو فعال مرکبات لري ترڅو کوربه غوښتونکي او وینه څښونکي جذب کړي Ans.arabiensis، د پورته ورته olfactometer او پروتوکول په کارولو سره. مصنوعي مرکبونو د تازه، 24-ساعت، 48-ساعت، 72-ساعت، او 168-ساعت عمر لرونکي پیشاب مخلوط هیډ سپیس بې ثباته استخراجونو کې د مرکباتو ترکیب او تناسب تقلید کړ (شکل 5D-G؛ اضافي فایل 1: جدول S2). د تحلیل لپاره، د بشپړ مصنوعي مخلوط د 1:100 کمولو 10 μl وکاروئ، د ټولیز خوشې کولو کچه د نږدې 140-2400 ng h-1 پورې وي، د کوربه او وینه څښونکي مچیو لپاره د جذابیت ارزولو لپاره. له هغې وروسته، ازموینه په بشپړ مخلوطونو کې ترسره کیږي، په کوم کې چې د بشپړ مخلوط د واحد مرکبونو تخفیفي مخلوطونه لرې کیږي. د کوربه او وینې څښونکي څخه ځوابونه وغواړئ Ans.عرب او مصنوعي او تخفیفي مخلوطونه د نومول شوي لوژستیک ریګریشن په کارولو سره تحلیل شوي چې وروسته تعقیب شوي د طاق تناسبونو لپاره جوړه وار پرتله کول (JMP Pro, v14.0.0, SAS Institute Inc.).
د دې ارزولو لپاره چې ایا د غوا پیشاب د ملاریا مچیو لپاره د کوربه استوګنځای په توګه کار کولی شي، تازه او زاړه غوا پیشاب، لکه څنګه چې پورته تشریح شوي، راټول شوي، او اوبه د 3 لیټرو بالټونو (100 ملی لیتر) په جال شوي بالټونو کې ځای په ځای شوي او د کوربه بیت جالونو کې ځای په ځای شوي. (BG-HDT نسخه؛ بایو جینټس، ریګینسبرګ، DE). لس جالونه په څړځایونو کې د 50 مترو په فاصله کې ځای پر ځای شوي، د کلي ټولنې څخه 400 متره لرې (سیلي، ایتوپیا، 5°53'24'N، 37°29'24'E) او هیڅ غواګانې نه، په دایمي نسلګیرۍ ځایونو او کلیو کې. پنځه جالونه د کوربه شتون تقلید کولو لپاره ګرم شوي، پداسې حال کې چې پنځه جالونه غیر ګرم پریښودل شوي. د درملنې هر ځای د پنځو شپو لپاره په شپه کې ګرځول کیږي. د مختلفو عمرونو د پیشاب سره په ځړول شوي جالونو کې نیول شوي د مچیو شمیر د بیټا دوه نومیال ویش سره د لوژستیک ریګریشن په کارولو سره پرتله شوي (JMP Pro, v14.0.0, SAS Institute Inc.).
د ایتوپیا د اورومیا سیمې د ماکي ښار ته نږدې د ملاریا په یوه کلي کې (۸° ۱۱′ ۰۸″ شمال، ۳۸° ۸۱′ ۷۰″ ختیځ؛ شکل ۶A). دا څیړنه د اګست د نیمایي او د سپتمبر د نیمایي ترمنځ د کلني داخلي پاتې شونو سپری کولو دمخه ترسره شوه، د اوږدې باراني موسم سره یوځای. د کلي په څنډه کې موقعیت لرونکي پنځه جوړې کورونه (۲۰-۵۰ متره واټن) د مطالعې لپاره غوره شوي (شکل ۶A). د کورونو د غوره کولو لپاره کارول شوي معیارونه دا وو: په کور کې هیڅ څاروي ته اجازه نشته، د کور دننه پخلی (د لرګیو یا سکرو ایستل) ته اجازه نه وه (لږترلږه د آزموینې دورې په جریان کې)، او هغه کورونه چې اعظمي حد یې دوه اوسیدونکي لري، په غیر حشره وژونکو درملو کې خوب کوي. د درملنې شوي مچیو جال لاندې. اخلاقي منظوري د طبیعي علومو پوهنځي (CNS-IRB)، ادیس ابابا پوهنتون د اداري څیړنې اخلاقو بیاکتنې بورډ (IRB/022/2016) لخوا د هیلسنکي د نړیوال طبي ټولنې اعلامیې لخوا رامینځته شوي لارښوونو سره سم ورکړل شوې ده. د کورنۍ د هر مشر رضایت د روغتیا د پراختیا کارمندانو په مرسته ترلاسه شو. ټوله پروسه د ولسوالۍ او وارډ ('کیبیل') په کچه د سیمه ایزو ادارو لخوا تایید شوې. تجربوي ډیزاین د 2 × 2 لاتین مربع ډیزاین تعقیب کړ، په کوم کې چې مصنوعي مخلوط او کنټرولونه په لومړۍ شپه جوړه کورونو ته ګمارل شوي او په راتلونکې تجربوي شپه کې د کورونو ترمنځ تبادله شوي. دا پروسه لس ځله تکرار شوه. سربیره پردې، په ټاکل شویو کورونو کې د مچیو فعالیت اټکل کولو لپاره، د CDC جالونه د ورځې په ورته وخت کې د ساحې د آزموینې په پیل، مینځ او پای کې پنځه پرله پسې شپې چلولو لپاره ټاکل شوي وو.
یو مصنوعي مخلوط چې شپږ بایو اکټیو مرکبات لري په هیپټین (97.0٪ محلول GC درجې، سیګما الډریچ) کې حل شو او د کاټن ویکټ ډسپنسر [20] په کارولو سره په 140 ng h-1 کې خوشې شو. ویکټ ډسپنسر ټولو مرکباتو ته اجازه ورکړه چې د 12 ساعتونو تجربې په اوږدو کې په دوامداره تناسب کې خوشې شي. هیپټین د کنټرول په توګه کارول کیده. شیشه د ناروغیو کنټرول او مخنیوي مرکزونو (CDC) د رڼا جال (جان ډبلیو هاک شرکت، ګینیسویل، FL، متحده ایالاتو؛ شکل 6A) د ننوتلو نقطې ته نږدې ځړول شوې وه. جالونه د ځمکې څخه 0.8 - 1 متر پورته، د بستر د پښو سره نږدې ځړول شوي وو، او یو رضاکار د غیر درملنې شوي مچیو جال لاندې ویده شو او د 18:00 او 06:30 ترمنځ عملیات وشول. هغه مچۍ چې د جنس او ​​فزیولوژیکي حالت لخوا نیول شوي (نه تغذیه شوي، تغذیه شوي، نیم امیندواره، او امیندواره [21] وروسته د پولیمیریز چین عکس العمل (PCR) تحلیل په کارولو سره سکرین شوي ترڅو هغه ډولونه وپیژندل شي چې مورفولوژیکي پلوه د A. gambiae sl په توګه پیژندل شوي. د کمپلیکس غړي [23]. په ساحوي مطالعه کې، د جوړو کورونو د جالونو ځړول د نومول شوي لوژستیکي فټ ماډل په کارولو سره تحلیل شوي، چیرې چې جذابیت انحصاري متغیر و او درملنه (مصنوعي مخلوط د کنټرول په مقابل کې) ثابت اغیز و (JMP® 14.0. 0. SAS انسټیټیوټ انکارپوریشن). دلته، موږ د احتمال تناسب ازموینې څخه د χ2 او p-ارزښتونو راپور ورکوو.
ارزونه وکړئ چې ایا دا خوندي دی. ارابینسیس وکولی شو چې د مستقیم تغذیه کولو له لارې پیشاب، د هغې اصلي نایتروجن سرچینه، یوریا، د 48 ساعتونو په اوږدو کې د 4 ورځو وروسته (dpe) کوربه غوښتونکي او د وینې څښونکي ښځینه تغذیه کولو آزموینو لپاره ترلاسه کړي (شکل 1A). کوربه غوښتونکي او د وینې څښونکي میرمنې دواړه د نورو رژیمونو یا اوبو په پرتله د پام وړ ډیر سوکروز جذب کړي (F(5,426) = 20.15، p < 0.0001 او F(5,299) = 56.00، p < 0.0001، په ترتیب سره؛ شکل 1B، C). سربیره پردې، کوربه غوښتونکي میرمنې په 168 ساعتونو کې د پیشاب په پرتله په 72 ساعتونو کې په پیشاب کې لږ خواړه وخوړل (شکل 1B). کله چې یوریا لرونکی رژیم وړاندې شي، کوربه غوښتونکي میرمنې د نورو ټولو غلظت او اوبو په پرتله په 2.69 ملي میتر کې د یوریا خورا لوی مقدار جذب کړ، پداسې حال کې چې د 10٪ سوکروز څخه توپیر نلري. (F(10,813) = 15.72، p < 0.0001؛ شکل 1D). دا د وینې تغذیه کونکو میرمنو د غبرګون سره توپیر درلود، کوم چې معمولا د اوبو په پرتله د یوریا لرونکي رژیمونو کې د پام وړ ډیر جذب کوي، که څه هم د 10٪ څخه د پام وړ کم سوکروز (F(10,557) = 78.35، p < 0.0001؛ شکل 1).1E). سربیره پردې، کله چې د دوو فزیولوژیکي حالتونو ترمنځ پرتله کول، فلیبوټومیز شوي میرمنو د کوربه غوښتونکو میرمنو په پرتله په ټیټ غلظت کې ډیر یوریا جذب کړ، او دې میرمنو په لوړ غلظت کې ورته مقدار یوریا جذب کړ (F(1,953) = 78.82، p < 0.0001؛ شکل 1F، G). پداسې حال کې چې د یوریا لرونکي رژیم څخه اخیستل غوره ارزښتونه لري (شکل 1D، E)، په دواړو فزیولوژیکي حالتونو کې میرمنې د دې توان درلود چې د یوریا غلظت په ټوله لړۍ کې جذب شوي یوریا اندازه تعدیل کړي په لاګ-لینر فیشن کې (شکل 1F، G). ). په ورته ډول، داسې ښکاري چې مچان د جذب شوي ادرار مقدار تنظیمولو سره د خپل نایتروجن جذب کنټرولوي، ځکه چې په ادرار کې د نایتروجن مقدار د جذب شوي مقدار کې منعکس کیږي (شکل 1B، C او B حشرات).
د کوربه توب او د وینې څښونکو مچیو د ژوندي پاتې کیدو په اړه د پیشاب او یوریا اغیزې ارزولو لپاره، میرمنو ته د ټولو څلورو عمرونو پیشاب ورکړل شو (تازه، 24 ساعته، 72 ساعته، او 168 ساعته وروسته له زیرمه کولو) او د یوریا غلظت لړۍ، او همدارنګه د تشو اوبو او 10٪ سوکروز د کنټرول په توګه کارول کیده (شکل 2A). د بقا دې تحلیل ښودلې چې رژیم د کوربه توب غوښتونکو میرمنو په ټولیز بقا باندې د پام وړ اغیزه درلوده (پیشاب: χ2 = 108.5، df = 5، p < 0.0001؛ یوریا: χ2 = 122.8، df = 5، p < 0.0001؛ شکل 2B، C) او د وینې څښونکو میرمنو (پیشاب: χ2 = 93.0، df = 5، p < 0.0001؛ یوریا: χ2 = 137.9، df = 5، p < 0.0001؛ شکل 2D،E). په ټولو تجربو کې، هغه میرمنې چې د پیشاب، یوریا او اوبو رژیم یې خوړلی و د هغو میرمنو په پرتله چې د سوکروز رژیم یې خوړلی و د ژوندي پاتې کیدو کچه یې د پام وړ ټیټه وه (شکل 2B-E). هغه میرمنې چې تازه او زاړه پیشاب یې خوړلی و د ژوندي پاتې کیدو مختلفې کچې یې ښودلې، هغه میرمنې چې د 72 ساعتونو زاړه پیشاب (p = 0.016) تغذیه شوي د ژوندي پاتې کیدو ترټولو ټیټ احتمال لري (شکل 2B). سربیره پردې، هغه میرمنې چې د 135 ملي میتر یوریا تغذیه شوي د اوبو کنټرولونو څخه ډیر ژوندي پاتې شوې (p < 0.04) (شکل 2C). د اوبو سره پرتله کول، هغه میرمنې چې تازه پیشاب او 24 ساعته پیشاب سره تغذیه شوي د اوږدې مودې لپاره ژوندي پاتې شوې (p = 0.001 او p = 0.012، په ترتیب سره؛ شکل 2D)، پداسې حال کې چې هغه میرمنې چې د 72 ساعتونو پیشاب سره تغذیه شوي د هغو میرمنو په پرتله ډیر ژوندي پاتې شوې چې د میرمنو لنډ تازه پیشاب او 24 ساعته زاړه پیشاب (p < 0.0001 او p = 0.013، په ترتیب سره؛ شکل 2D). کله چې تغذیه شي د وینې تغذیه کونکو میرمنو ۱۳۵ ملي میتر یوریا د یوریا او اوبو د نورو ټولو غلظتونو په پرتله ډیر وخت ژوندي پاتې شول (p < 0.013؛ شکل ۲E).
د کوربه او وینه څښونکي ښځینه انوفیلس عربینز ژوندي پاتې کیدل چې د غوا په پیشاب او یوریا تغذیه کوي. په بایو ایسي (A) کې، ښځینه مچیو ته د تازه او زړو غوا په پیشاب، د یوریا، سوکروز (10٪) او د اوبو (H2O) مختلفو غلظتونو څخه جوړ شوی خواړه ورکړل شول. د کوربه غوښتونکو (B، C) او د وینې څښونکي (D، E) مچیو ژوندي پاتې کیدل په هرو 12 ساعتونو کې ثبت شوي تر هغه چې ټولې ښځینه پیشاب (B، D) او یوریا (C، E) تغذیه کړي، او کنټرولونه، سوکروز او اوبه، مړه شي.
د الوتنې د ماشین په ازموینه کې د ۲۴ ساعتونو په موده کې ټاکل شوي ټول واټن او د پړاوونو شمیر د کوربه غوښتونکو او وینې څښونکو مچیو ترمنځ توپیر درلود، کوم چې په ټولیز ډول د الوتنې فعالیت کم ښودلی (انځور ۳). کوربه غوښتونکو مچیو چې تازه او زاړه پیشاب یا سوکروز او اوبه چمتو کولې د الوتنې جلا نمونې ښودلې (انځور ۳)، ښځینه یې د تازه پیشاب په خوړلو سره د سهار په وخت کې ډیرې فعالې وې، پداسې حال کې چې هغه چې د ۲۴ او ۱۶۸ ساعتونو عمر لرونکي مچیو چې د پیشاب په خوړلو سره تغذیه کولې د الوتنې مختلف نمونې ښودلې او په عمده توګه ورځني وې. ښځینه غوماشې چې سوکروز یا ۷۲ ساعته پیشاب چمتو کاوه د ۲۴ ساعتونو په اوږدو کې فعالیت ښودلی، پداسې حال کې چې هغه ښځې چې اوبه چمتو کولې د منځنۍ دورې په جریان کې ډیرې فعالې وې. هغه غوماشې چې د سوکروز په خوړلو سره تغذیه شوي د شپې ناوخته او سهار وختي د فعالیت لوړه کچه ښودلې، پداسې حال کې چې هغه چې د ۷۲ ساعتونو عمر لرونکي پیشاب یې خوړلی د ۲۴ ساعتونو په اوږدو کې په فعالیت کې دوامداره کمښت تجربه کړی (انځور ۳).
د ښکاریانو د وینې څښونکې ښځینه انوفیلس عربین د الوتنې فعالیت چې د غوا په پیشاب او یوریا تغذیه کوي. د الوتنې د ماشین په ازموینه کې، ښځینه مچۍ چې د غوا په تازه او زړو پیشاب تغذیه کوي، د یوریا، سوکروز (10٪)، او تشې اوبه (H2O) مختلف غلظتونه په افقي، آزاده توګه څرخیدونکي لاسونو (پورته) سره تړل شوي. د کوربه غوښتونکو (کیڼ) او د وینې څښونکې (ښي) ښځینه وو لپاره، د 24 ساعتونو په موده کې د هر رژیم لپاره په هر ساعت کې ټول واټن او د الوتنو شمیر ثبت شوی (تیاره: خړ؛ رڼا: سپین). د سرکاډین فعالیت ګراف ښي خوا ته اوسط واټن او د بریدونو اوسط شمیر ښودل شوی. د غلطۍ بارونه د اوسط معیاري تېروتنه استازیتوب کوي. احصایوي تحلیل متن وګورئ
په عمومي توګه، د کوربه غوښتونکو میرمنو د الوتنې ټولیز فعالیت د 24 ساعتونو په موده کې د الوتنې واټن سره ورته نمونه تعقیب کړه. د الوتنې منځنۍ فاصله د خوړل شوي رژیم لخوا د پام وړ اغیزمنه شوه (F(5, 138) = 28.27, p < 0.0001)، او کوربه غوښتونکو میرمنو د 72 ساعتونو ادرار خوړلو سره د نورو ټولو رژیمونو په پرتله د پام وړ اوږد واټن الوتنه وکړه (p < 0.0001)، او سوکروز تغذیه شوي مچیو د تازه (p = 0.022) او 24 ساعتونو عمر لرونکي ادرار (p = 0.022) تغذیه شوي مچیو په پرتله اوږده الوتنه وکړه. د پیشاب رژیم لخوا تشریح شوي د الوتنې فعالیت نمونې برعکس، د یوریا تغذیه شوي کوربه غوښتونکو میرمنو د 24 ساعتونو په موده کې دوامداره الوتنه فعالیت ښودلی، د تیاره مرحلې په دویمه نیمایي کې لوړ شو (شکل 3). که څه هم د فعالیت نمونې ورته وې، کوربه غوښتونکو میرمنو یوریا تغذیه کړې د جذب شوي غلظت پورې اړه لري د الوتنې اوسط واټن د پام وړ لوړ کړ (F(5, 138) = 1310.91, p < 0.0001). کوربه توب غوښتونکو میرمنو د یوریا هر ډول غلظت سره تغذیه کړې د هغو میرمنو په پرتله چې اوبه یا سکروز یې خوړلي ډیر وخت تیر کړ (p < 0.03).
د وینې څښونکو مچیو د الوتنې ټولیز فعالیت په ټولو رژیمونو کې د ۲۴ ساعتونو لپاره مستحکم او دوام درلود، د تیاره دورې په دویمه نیمایي کې د هغو میرمنو لپاره چې په اوبو تغذیه شوي او همدارنګه په تازه او ۲۴ ساعتونو کې تغذیه شوي میرمنو کې د ادرار فعالیت زیات شوی (انځور ۳). پداسې حال کې چې د ادرار رژیم د وینې تغذیه کونکو میرمنو کې د الوتنې اوسط واټن د پام وړ اغیزمن کړی (F(5, 138) = 4.83, p = 0.0004)، د یوریا رژیم د نورو ادرار او کنټرول رژیم سره (F(5, 138) = 1.36, p = 0.24) نه دی کړی (تازه، p = 0.0091; 72 ساعته, p = 0.0022; 168 ساعته, p = 0.001; سوکروز, p = 0.0017; dH2O, p = 0.036).
د هګیو اچولو بایوسای (شکل 4A) کې د پیشاب او یوریا تغذیه کولو اغیزې د زیږون پیرامیټرو باندې ارزول شوي او د هرې ښځینه لخوا د ایښودل شوي هګیو شمیر، د هګۍ اندازې، او نوي هګۍ شوي لومړي انسټار لاروا لخوا د ایښودل شوي هګیو شمیر سره سم تحقیق شوي. د ایښودل شوي هګیو شمیر. پیشاب شوي عربي میرمنې د رژیم له مخې توپیر لري (F(5,222) = 4.38، p = 0.0008؛ شکل 4B). هغه میرمنې چې 24 ساعته پیشاب تغذیه کوي، د وینې خواړه د هغو میرمنو په پرتله چې د نورو پیشاب رژیمونو لخوا تغذیه شوي د پام وړ ډیرې هګۍ اچوي او د هغو میرمنو سره ورته وې چې سوکروز تغذیه شوي (شکل 4B). په ورته ډول، د پیشاب شوي میرمنو لخوا د ایښودل شوي هګیو اندازه د رژیم له مخې توپیر لري (F(5, 209) = 12.85، p < 0.0001)، د 24 ساعته پیشاب او سوکروز تغذیه شوي میرمنو سره چې د اوبو تغذیه شوي میرمنو په پرتله د پام وړ لویې هګۍ اچوي، پداسې حال کې چې د 168 ساعتونو پیشاب سره تغذیه شوي میرمنې د پام وړ کوچنۍ وې (شکل 4C). سربیره پردې، د پیشاب رژیم د لاروا په پام وړ اغیزه کړې اندازه (F(5, 187) = 7.86, p < 0.0001)، د پام وړ لوی لاروا د 24 او 72 ساعتونو عمر لرونکو پیشاب لرونکو میرمنو لخوا د هګیو اچولو څخه راپورته کیږي د هغو هګیو په پرتله چې د هګیو لاروا څخه اچول شوي. اوبه ورکول شوي او 168 ساعته پیشاب لرونکو میرمنو (شکل 4D).
د ښځینه انوفیلس عربینز د تولید فعالیت د غوا په پیشاب او یوریا تغذیه کوي. د وینې تغذیه شوي ښځینه مچیو ته د بایوسای کې ځای په ځای کولو او د هګیو اچولو فرعي برخې ترلاسه کولو دمخه د 48 ساعتونو لپاره د تازه او زړو غوا پیشاب، د یوریا مختلف غلظت، سوکروز (10٪)، او تش شوي اوبو (H2O) څخه جوړ شوي خواړه ورکړل شول 48 ساعته (A). د هګۍ شمیره (B، E)، د هګۍ اندازه (C، F) او د لاروا اندازه (D، G) د چمتو شوي رژیم لخوا د پام وړ اغیزمن شوي (د غوا پیشاب: BD؛ یوریا: EG). د هر پیرامیټر لپاره معنی چې د مختلف تورو نومونو په کارولو سره اندازه کیږي د یو بل څخه د پام وړ توپیر درلود (یو طرفه ANOVA د توکي د پوسټ هاک تحلیل په کارولو سره؛ p < 0.05). د غلطۍ بارونه د اوسط معیاري غلطۍ استازیتوب کوي
د پیشاب د نایتروجن لرونکي برخې په توګه، یوریا، کله چې د وینې تغذیه کونکو میرمنو ته د رژیم په توګه ورکړل شي، په ټولو مطالعاتو کې د زیږون پیرامیټرو باندې د پام وړ اغیزه وکړه. د وینې خواړو وروسته د یوریا خوړلو میرمنو لخوا د هګیو اچولو شمیر، د یوریا غلظت پورې اړه لري (F(11, 360) = 4.69; p < 0.0001)، د 134 µM او 1.34 mM ترمنځ د یوریا غلظت تغذیه کونکو میرمنو ډیرې هګۍ اچولې (شکل 4E). هغه میرمنې چې د 134 µM یا پورته د یوریا غلظت تغذیه کوي د هغو میرمنو په پرتله لویې هګۍ اچوي چې د اوبو خوړلو سره تغذیه شوي (F(10, 4245) = 36.7; p < 0.0001; شکل 4F)، او د لاروا اندازه، که څه هم په میندو کې د یوریا ورته غلظت لخوا اغیزمن شوي (F(10, 3305) = 37.9; p < 0.0001) ډیر متغیر و (شکل 4G).
د کوربه توب غوښتونکي غواګانو د پیشاب د سر فضا بې ثباته استخراج لپاره په ټولیزه توګه جذابیت. د شیشې ټیوب اولفیکټومیټر (انځور 5A) کې ارزول شوی عربینسس د ادرار عمر (χ2 = 15.9، df = 4، p = 0.0032؛ شکل 5B) لخوا د پام وړ اغیزمن شوی. د هاک وروسته تحلیل ښودلې چې په 24 ساعتونو کې د زاړه پیشاب بوی د نورو ټولو درملنو په پرتله د پام وړ لوړې کچې جذابیت لامل شوی (72 ساعته: p = 0.0060، 168 ساعته: p = 0.012، پینټین: p = 0.00070)، د تازه پیشاب د بوی پرته (p = 0.13؛ شکل 5B). که څه هم د وینې څښونکي مچیو د پیشاب بوی ته عمومي جذابیت د پام وړ توپیر نه درلود (χ2 = 8.78، df = 4، p = 0.067؛ شکل 5C)، دا ښځینه د ادرار د بوی په پرتله د سر فضا بې ثباته استخراج لپاره د پام وړ ډیر جذاب وموندل شوې. د کنټرولونو په پرتله (p = 0.0066؛ شکل 5C).
د کوربه او وینې څښونکي انافیلس عربیانوس په لټون کې د غوا د پیشاب طبیعي او مصنوعي بویونو ته د چلند غبرګونونه. د شیشې ټیوب اولفیکټومیټر (A) سکیماتیک. د تازه او زړو غوا پیشاب څخه کوربه (B) او د وینې څښونکي (C) مچیو ته د سر ځای بې ثباته استخراجونو جذب. د لارډ ان د ټینټیکل عکس العمل ومومئ. د سر ځای استخراجونه د تازه (D)، 24-ساعت (E)، 72-ساعت (F)، او 168-ساعت (G) عمر لرونکي غوا پیشاب څخه جلا شوي ښودل شوي. د الکترون انټینا کشف (EAD) نښې د ګاز کروماتګراف څخه ایستل شوي او د شعلې ایونیزیشن کشف کونکي (FID) لخوا کشف شوي په سر ځای کې د بایو فعال مرکباتو په ځواب کې د ولټاژ بدلونونه ښیې. د پیمانه بار د ساتلو وخت (s) په مقابل کې د غبرګون طول (mV) استازیتوب کوي. د بیولوژیکي فعال مرکباتو ملکیتونه او د خوشې کولو نرخونه (µg h-1) ښودل شوي. یو واحد ستوری (**) د دوامداره ټیټ طول البلد غبرګون په ګوته کوي. دوه ګونی ستوری (**) په ګوته کوي نه تولیدیدونکي ځوابونه. کوربه (H) او د وینې څښونکي (I) ومومئ. An.arabiensis د تازه او زړو غواګانو د پیشاب بوی مصنوعي مخلوطونو ته مختلف اپیلونه لري. د مختلفو تورو نومونو ته د متوجه مچیو اوسط تناسب د یو بل څخه د پام وړ توپیر درلود (یو طرفه ANOVA د توکي د پوسټ هاک تحلیل په کارولو سره؛ p < 0.05). د تېروتنې بارونه د پیمانه معیاري تېروتنه استازیتوب کوي
ښځینه Ann.arabiensis، د وینې له خوړلو څخه ۷۲ ساعته او ۱۲۰ ساعته وروسته، د هګیو د زیږون پرمهال، د پنټین کنټرولونو په پرتله د تازه او زړو غواګانو د پیشاب څخه د سر فضا بې ثباته استخراج لپاره هیڅ غوره توب نه دی ښودل شوی (χ2 = 3.07، p > 0.05؛ اضافي فایل ۱: شکل S1).
د ښځینه Ann.arabiensis لپاره، د GC-EAD او GC-MS تحلیلونو اته، شپږ، درې او درې بایو اکټیو مرکبات پیژندلي (شکل 5D-G). که څه هم د هغو مرکباتو په شمیر کې توپیرونه لیدل شوي چې د الکترو فزیولوژیکي غبرګونونو لامل شوي، ډیری دا مرکبات د تازه او زاړه پیشاب څخه راټول شوي هر سر ځای بې ثباته استخراج کې شتون درلود. له همدې امله، د هر استخراج لپاره، یوازې هغه مرکبات چې د حد څخه پورته د ښځینه انټینا څخه فزیولوژیکي غبرګون تولیدوي په نورو تحلیلونو کې شامل شوي.
د سر فضا په ټولګه کې د بایو اکټیو مرکباتو د بې ثباته خوشې کیدو کچه په تازه پیشاب کې له 29 µg h-1 څخه په 168 ساعتونو عمر لرونکي پیشاب کې 242 µg h-1 ته لوړه شوه، چې په عمده توګه د p-cresol او m-formaldehyde فینول د زیاتوالي او همدارنګه د فینول له امله ده. برعکس، د نورو مرکباتو د خوشې کیدو کچه، لکه 2-cyclohexen-1-one او decanal، د پیشاب د عمر د زیاتوالي سره کمه شوه، کوم چې د کروماتګرام (انځور 5D)-G چپ پینل) کې د سیګنال شدت (کثرت) کې د لیدل شوي کمښت او د دې مرکباتو ته د فزیولوژیکي غبرګونونو سره تړاو لري (انځور 5D-G ښي پینل).
په ټولیز ډول، مصنوعي مخلوط د بایو فعال مرکباتو ورته طبیعي تناسب درلود چې د تازه او زړو پیشاب سر ځایونو (انځور 5D-G) د بې ثباته استخراجونو کې پیژندل شوي او داسې نه ښکاري چې د کوربه (χ2 = 8.15، df = 4، p = 0.083؛ شکل 5H) یا د وینې څښونکي مچیو (χ2 = 4.91، df = 4، p = 0.30؛ شکل 5I) په لټون کې د پام وړ اپیل رامینځته کړي. په هرصورت، د درملنې ترمنځ د دوه اړخیزه پرتله کولو ښودلې چې کوربه غوښتونکي مچۍ د پینټین کنټرولونو په پرتله د 24 ساعتونو عمر لرونکي پیشاب مصنوعي مخلوط ته د پام وړ زړه راښکونکي وو (p = 0.0086؛ شکل 5H).
د 24-h-aged ادرار په مصنوعي مخلوط کې د انفرادي اجزاو رول ارزولو لپاره، د Y-ټیوب ازموینې کې د بشپړ مخلوطونو په وړاندې شپږ فرعي مخلوطونه ارزول شوي، په کوم کې چې انفرادي مرکبات لرې شوي. د کوربه توب غوښتونکو مچیو لپاره، د بشپړ مخلوط څخه د انفرادي مرکباتو کمول د چلند غبرګونونو باندې د پام وړ اغیزه درلوده (χ2 = 19.63، df = 6، p = 0.0032؛ اضافي فایل 1: شکل S2A)، ټول فرعي مخلوطونه د بشپړ مخلوط څخه کوچني څخه ډیر زړه راښکونکي وو. برعکس، د بشپړ مصنوعي مخلوط څخه د انفرادي مرکباتو لرې کول د وینې څښونکي مچیو چلند غبرګونونو اغیزه نه کوي (χ2 = 11.38، df = 6، p = 0.077)، د ډیکانال استثنا پرته، کوم چې د بشپړ مخلوط جذب په پرتله ټیټې کچې پایله درلوده (p = 0.022؛ اضافي فایل 1: شکل S2B).
په ایتوپیا کې د ملاریا په یوه کلي کې، د لسو شپو لپاره د ځمکې په شرایطو کې د مچیو په جذبولو کې د غواګانو د 24 ساعته پیشاب مصنوعي مخلوط اغیزمنتوب ارزول شوی و (انځور 6A). په ټولیزه توګه 4,861 مچۍ ونیول شوې او پیژندل شوې، چې له دې جملې څخه 45.7٪ انتروپوس ګامبیا ایس ایل وو، 18.9٪ انوفیل فاروینسس وو او 35.4٪ کولیکس ایس پی پی وو. (اضافي فایل 1: جدول S1). انوفیل عربینیس د ان. ګامبیان ډولونو کمپلیکس یوازینی غړی دی چې د PCR تحلیل لخوا پیژندل شوی. په اوسط ډول، په هره شپه کې 320 مچۍ نیول شوي، په دې موده کې د مصنوعي مخلوط بیتونو سره د وخت جالونو د مخلوط پرته د جوړو جالونو په پرتله ډیر مچۍ نیولي (χ2(0, 3196) = 170.0, p < 0.0001). د محاکمې په پیل، منځ او پای کې د پنځو کنټرول شپې په هر یو کې غیر بند شوي جالونه تنظیم شوي وو. د مچیو ورته شمیر وو په هر جوړه جالونو کې نیول شوي، چې د کورونو ترمنځ هیڅ تعصب نه ښیې (χ2(0, 1665) = 9 × 10-13, p > 0.05) او د مطالعې په موده کې د نفوس کمښت نه دی. د کنټرول جالونو په پرتله، د مصنوعي مخلوط لرونکي جالونو کې د نیول شویو مچیو شمیر د پام وړ زیات شوی: کوربه لټول (χ2(0, 2107) = 138.7, p < 0.0001)، د وینې وروستي تغذیه (χ2(0, 650) = 32.2, p < 0.0001) او امیندوارۍ (χ2(0, 228) = 6.27, p = 0.0123; اضافي فایل 1: جدول S1). دا د نیول شویو مچیو په ټول شمیر کې هم منعکس کیږي: کوربه لټول > وینه څښونکي > امیندواره > نیمه امیندواره > نارینه.
د غوا د پیشاب د بوی د ۲۴ ساعته مخلوط د اغیزمنتوب ساحه ارزونه. د ساحې آزموینې په سویل-مرکزي ایتوپیا (نقشه) کې، د ماکي ښار ته نږدې ترسره شوې (داخل کړئ)، د ناروغیو کنټرول مرکزونو (CDC) د رڼا جال (ښي خوا ته) په جوړه کورونو کې کارول شوي، د لاتین مربع ډیزاین (هوایی انځور) (A) سره. مصنوعي بوی لرونکي CDC فوټو ټریپونه ښځینه انوفیلس عربیسک (B) جذبوي او نیسي، مګر د انوفیلس فارو (C) نه، په مختلف ډول، د فیزیولوژیکي حالت پورې تړلي اغیز. برسېره پردې، دې جالونو د کوربه کولیکس مچیو د پام وړ زیاتوالی نیولی. (D) د کنټرول سره پرتله کول. په چپ اړخ کې بارونه د مچیو د اوسط انتخاب شاخص استازیتوب کوي چې د بوی لرونکي بیت (شنه) او کنټرول (خلاص) جالونو (N = 10) کې نیول شوي، پداسې حال کې چې په ښي اړخ کې بارونه د کنټرول جالونو په جوړه کې د اوسط انتخاب شاخص استازیتوب کوي (خلاص؛ N = 5). ستوري د احصایوي اهمیت کچه ​​په ګوته کوي (*p = 0.01 او ***p < 0.0001)
درې ډولونه په مختلفو جالونو کې نیول شوي وو چې مصنوعي مخلوط لري. د کوربه (χ2(1, 1345) = 71.7, p < 0.0001)، د وینې تغذیه (χ2(1, 517) = 16.7, p < 0.0001) او امیندوارۍ (χ2(1, 180) = 6.11, p = 0.0134) په لټه کې. a .arabiansis په هغه جال کې بند پاتې شو چې مصنوعي مخلوط خوشې کوي (شکل 6B)، پداسې حال کې چې د An مقدار توپیر نه درلود. په مختلفو فزیولوژیکي حالتونو کې Pharoensis وموندل شول (شکل 6C). د Culex لپاره، یوازې د کنټرول جالونو سره پرتله شوي جالونو کې د کوربه توب په لټه کې د مچیو په شمیر کې د پام وړ زیاتوالی وموندل شو (χ2(1,1319) = 12.6, p = 0.0004; شکل 6D).
په ایتوپیا کې د نسل ورکولو ځایونو او کلیوالي ټولنو ترمنځ د احتمالي کوربه څخه بهر موقعیت لرونکي کوربه بیت جالونه د دې ارزولو لپاره کارول شوي چې ایا د ملاریا مچان د غوا د پیشاب بوی د کوربه استوګنځي نښې په توګه کاروي. د کوربه اشارو، تودوخې، او د غوا د پیشاب بوی سره یا پرته، هیڅ مچان نه دي نیول شوي (اضافي فایل 1: شکل S3). په هرصورت، د لوړې تودوخې او د غوا د پیشاب بوی په شتون کې، ښځینه ملاریا مچان جذب او نیول شوي، که څه هم په لږ شمیر کې، د پیشاب عمر څخه خپلواک (χ2(5, 25) = 2.29, p = 0.13; اضافي فایل 1: شکل S3). برعکس، د اوبو کنټرولونو په لوړه تودوخه کې د ملاریا مچان نه دي نیولي (اضافي فایل 1: شکل S3).
د ملاریا مچۍ د غوا د پیشاب (یعنې، ډنډونو) د جبرانونکي تغذیې له لارې نایتروجن لرونکي مرکبات ترلاسه کوي او توزیع کوي ترڅو د ژوند تاریخ ځانګړتیاوې لوړې کړي، د نورو حشراتو په څیر [2، 4، 24، 25، 26]. د غوا پیشاب یو په اسانۍ سره شتون لرونکی تجدید کیدونکی سرچینه ده چې د ملاریا ویکتورونو لپاره د آرام ځایونو سره نږدې تړاو لري، لکه د غواګانو او لوړو بوټو کلیوالي کورونو او د زیږون ځایونو ته نږدې. ښځینه مچۍ دا سرچینه د بوی له لارې موندلی او د دې توان لري چې په پیشاب کې د نایتروجن مرکباتو جذب تنظیم کړي، پشمول د یوریا، په پیشاب کې د نایتروجن اصلي برخه [15، 16]. د ښځینه مچۍ د فزیولوژیکي حالت پورې اړه لري، په پیشاب کې مغذي مواد د کوربه توب غوښتونکي ښځینه مچیو د الوتنې فعالیت او بقا لوړولو لپاره ځانګړي شوي، او همدارنګه د لومړي ګوناډوټروپیک دورې په جریان کې د وینې تغذیه کونکو اشخاصو بقا او تولیدي ځانګړتیاوې. له همدې امله، د پیشاب مخلوط د ملاریا ویکتورونو لپاره مهم تغذیه رول لوبوي چې د خوارځواکۍ لویانو په څیر تړل شوي دي [8]، ځکه چې دا ښځینه مچیو ته د ټیټ خطر تغذیه کې د ښکیلتیا له لارې د مهم نایتروجن مرکباتو ترلاسه کولو وړتیا چمتو کوي. دا موندنه د پام وړ لري د ایپیډیمولوژیکي پایلو له امله، لکه څنګه چې میرمنې د خپل ژوند تمه، فعالیت او د زیږون تولید زیاتوي، چې ټول یې د ویکتور ظرفیت اغیزه کوي. سربیره پردې، دا چلند ممکن د راتلونکي ویکتور مدیریت پروګرامونو هدف وي.