د ویټرو مطالعاتو پراساس په شارکسي چرګانو کې د سپرم ریولوژی ، جمع کولو او توفټینګ په اړه نوي لیدونه

د Nature.com لیدلو لپاره مننه.د براوزر نسخه چې تاسو یې کاروئ محدود CSS ملاتړ لري.د غوره تجربې لپاره، موږ وړاندیز کوو چې تاسو یو تازه شوی براوزر وکاروئ (یا په انټرنیټ اکسپلورر کې د مطابقت حالت غیر فعال کړئ).په ورته وخت کې، د دوامداره ملاتړ ډاډ ترلاسه کولو لپاره، موږ به سایټ پرته له سټایلونو او جاواسکریپټ وړاندې کړو.
د مرغانو زرغونتیا د دوی په وړتیا پورې اړه لري چې د سپرم ذخیره کولو نلونو (SST) کې د اوږدې مودې لپاره کافي وړ سپرم ذخیره کړي.دقیق میکانیزم چې له مخې یې سپرماتوزوا SST ته ننوځي، استوګنځي او پریږدي متنازع پاتې دي.د شارکسي چرګانو سپرم د جمع کولو لپاره لوړ تمایل ښودلی، د ګرځنده فلامینټو بنډلونه جوړوي چې ډیری حجرې لري.په ناپاک فیلوپین ټیوب کې د سپرماتوزا د حرکت او چلند د لیدو د ستونزو له امله، موږ د سپرماتوزووا په څیر د مایکرو چینل کراس سیکشن سره یو مایکرو فلویډیک وسیله کارولې ترڅو د سپرماتوزووا جمع او حرکت مطالعه کړي.دا څیړنه پدې اړه بحث کوي چې څنګه د سپرم بنډلونه جوړیږي، دوی څنګه حرکت کوي، او په SST کې د سپرم استوګنې پراخولو کې د دوی ممکن رول.موږ د سپرم سرعت او ریولوژیکي چلند وڅیړلو کله چې د مایع جریان د مایکرو فلویډیک چینل کې د هایدروستیټیک فشار (د جریان کچه = 33 µm/s) لخوا رامینځته شو.سپرماتوزوا د اوسني (مثبت rheology) په مقابل کې لامبو وهي او د سپرماټوزون بنډل سرعت د واحد سپرماتوزوا په پرتله د پام وړ کم شوی.د سپرم بنډلونه لیدل شوي چې په سرپل کې حرکت کوي او اوږدوالی او ضخامت کې زیاتوالی ځکه چې یو واحد سپرم استخدام کیږي. د سپرم بنډلونه د مایکرو فلویډیک چینلونو د غاړې دیوالونو ته نږدې او تعقیب شوي لیدل شوي ترڅو د مایع جریان سرعت> 33 µm/s سره د تیریدو مخه ونیسي. د سپرم بنډلونه د مایکرو فلویډیک چینلونو د غاړې دیوالونو ته نږدې او تعقیب شوي لیدل شوي ترڅو د مایع جریان سرعت> 33 µm/s سره د تیریدو مخه ونیسي. Было замечено, что пучки сперматозоидов приближаются и прилипают к боковым стенкам микрофлюидных каналов, чбтозьсених каналов ю потока жидкости> 33 мкм / с. د سپرم بنډلونه لیدل شوي چې د مایکرو فلوایډیک چینلونو غاړې دیوالونو ته نږدې کیږي او تعقیبوي ترڅو د مایع جریان نرخونو> 33 µm/s کې د تیریدو مخه ونیسي.观察到精子束接近并粘附在微流体通道的侧壁,以避免被流体流速> 33 µm/s 扫过.33 µm/s 扫过. Было замечено, что пучки сперматозоидов приближаются и прилипают к боковым стенкам микрожидкостного канала, чтобыждозоидов канала сти со скоростью > 33 mkm/с. د سپرم بنډلونه لیدل شوي چې د مایکرو فلوایډیک چینل غاړې دیوالونو ته نږدې کیږي او تعقیبوي ترڅو د 33 µm/s په اندازې کې د مایع جریان له مینځه وړلو څخه مخنیوی وشي.سکیننګ او لیږد الکترون مایکروسکوپي څرګنده کړه چې د سپرم بنډلونه د ډیری کثافاتو موادو لخوا ملاتړ شوي.ترلاسه شوي معلومات د شارکازي چرګ سپرماتوزوا ځانګړی خوځښت څرګندوي، او همدارنګه د سپرماتوزا وړتیا د ګرځنده بنډلونو راټولولو او جوړولو لپاره، کوم چې په SMT کې د سپرماتوزوا اوږدمهاله ذخیره کولو ښه پوهه کې مرسته کوي.
په انسانانو او ډیری حیواناتو کې د القاح ترلاسه کولو لپاره، سپرم او هګۍ باید په مناسب وخت کې د القاح ځای ته ورسیږي.له همدې امله، د ovulation څخه مخکې یا په وخت کې ملن کول باید ترسره شي.له بلې خوا، ځینې تی لرونکي حیوانات، لکه سپي، او همدارنګه غیر تی لرونکي ډولونه لکه حشرات، کب، حیوانات او مرغان، سپرم په خپلو تولیدي ارګانونو کې د اوږدې مودې لپاره ذخیره کوي تر هغه چې د دوی هګۍ د القاح لپاره چمتو نه وي (اسینکرونوس القاح 1).مرغان د 2-10 اونیو لپاره د هګیو د القاح کولو توان لري د سپرماتوزا وړتیا وساتي.
دا یو ځانګړی ځانګړتیا ده چې مرغان د نورو حیواناتو څخه توپیر کوي، ځکه چې دا د څو اونیو لپاره د یوځل ملایم او تخمدان څخه پرته د یوې امیندوارۍ وروسته د القاح ډیر احتمال چمتو کوي.د سپرم ذخیره کولو اصلي ارګان چې د سپرم ذخیره کولو ټیوب (SST) په نوم یادیږي، د رحم په داخل کې د uterovaginal جنکشن کې موقعیت لري.تر اوسه پورې، هغه میکانیزمونه چې سپرم یې د سپرم بانک ته ننوځي، استوګنځي او بهر کوي په بشپړه توګه نه پوهیږي.د پخوانیو مطالعاتو پر بنسټ، ډیری فرضیې وړاندې شوي، مګر هیڅ یو یې تایید شوی نه دی.
Forman4 فرض کړه چې سپرماتوزا د SST په غار کې د پروتین چینلونو له لارې چې د SST اپیتیلیل حجرو (rheology) کې موقعیت لري د مایع جریان د سمت په وړاندې د دوامداره oscillatory حرکت له لارې خپل استوګنځي ساتي.ATP د SST لومین کې د سپرم ساتلو لپاره د دوامداره فلیګیلر فعالیت له امله له مینځه وړل کیږي او حرکت په پای کې کمیږي تر هغه چې سپرم د مایع جریان په واسطه د سپرم بانک څخه تیریږي او د سپرم د القاح کولو لپاره د پورته کیدونکي فیلوپین ټیوب لاندې نوی سفر پیل کړي.هګۍ (Forman4).د سپرم ذخیره کولو دا ماډل د SST اپیتیلیل حجرو کې موجود aquaporins 2, 3 او 9 د امونوسیټو کیمیا لخوا د کشف لخوا ملاتړ کیږي.تر اوسه پورې، د چرګانو د منی ریاولوژي او د SST ذخیره کولو کې د هغې رول، د اندامونو سپرم انتخاب، او د سپرم سیالۍ نشتوالی.په چرګانو کې، سپرم د طبیعي ملن څخه وروسته اندام ته ننوځي، مګر د 80٪ څخه ډیر سپرماتوزا د ملن څخه لږ وخت وروسته د اندام څخه بهر کیږي.دا وړاندیز کوي چې اندام په مرغیو کې د سپرم انتخاب لپاره لومړنی ځای دی.برسېره پردې، دا راپور شوي چې د 1٪ څخه کم سپرماتوزا په اندام کې القاح کیږي په SSTs2 کې پای ته رسیږي.په اندامونو کې د چرګانو په مصنوعي تخمدان کې، د سپرماتوزوا شمیر چې SST ته رسیږي د زیږون څخه 24 ساعته وروسته زیاتیږي.تر اوسه پورې، د دې پروسې په جریان کې د سپرم انتخاب میکانیزم ناڅرګند دی، او د سپرم حرکت ممکن د SST سپرم په جذب کې مهم رول ولوبوي.د فیلوپین ټیوبونو د موټی او ناپاکو دیوالونو له امله، دا ستونزمنه ده چې په مستقیم ډول د مرغیو په فیلوپین ټیوب کې د سپرم حرکت وڅیړئ.له همدې امله، موږ په دې اړه لومړنۍ پوهه نه لرو چې څنګه سپرماتوزا د القاح وروسته SST ته لیږدوي.
ریاولوژي په دې وروستیو کې د تی لرونکي تناسلي تنفس کې د سپرم ټرانسپورټ کنټرول مهم فکتور په توګه پیژندل شوی.د حرکتي سپرماتوزا د وړتیا پراساس چې په اوسني وخت کې مهاجرت وکړي، Zaferani et al8 د کورا مایکرو فلوایډیک سیسټم کارولی ترڅو د قلم شوي منی نمونو څخه حرکتي سپرماتوزوا په غیر فعال ډول جلا کړي.دا ډول د منی ترتیب کول د طبي کمبودۍ درملنې او کلینیکي څیړنو لپاره اړین دي، او د دودیزو میتودونو په پرتله غوره کیږي چې د وخت او کار سخت وي او کولی شي د سپرم مورفولوژي او ساختماني بشپړتیا سره جوړجاړی وکړي.په هرصورت، تر اوسه پورې، د سپرم په حرکت کې د چرګانو د تناسلي ارګانونو څخه د رطوبت اغیزې په اړه هیڅ څیړنه نه ده ترسره شوې.
د هغه میکانیزم په پام کې نیولو پرته چې په SST کې سپرم ذخیره کوي، ډیری څیړونکو لیدلي چې اوسیدونکي سپرماتوزا د 9، 10، مرغانو 2، او 11 مرغانو په SST کې د سر څخه سر سره یوځای کیږي ترڅو د سپرم بنډلونه جوړ کړي.لیکوالان وړاندیز کوي چې په SST کې د سپرماتوزوا د دې راټولولو او اوږدې مودې ذخیره کولو ترمنځ اړیکه شتون لري.
Tingari او Lake12 د چرګ د سپرماتوزووا د سپرماتوزا تر مینځ د پیاوړې اړیکې راپور ورکړی چې د چرګانو سپرم ترلاسه کونکي غدې کې دي او پوښتنه یې کړې چې ایا د حیوان سپرماتوزا په ورته ډول د تی لرونکي سپرماتوزا په څیر agglutinate کوي.دوی په دې باور دي چې په vas deferens کې د سپرم ترمنځ ژورې اړیکې ممکن د فشار له امله وي چې په کوچنۍ ځای کې د سپرم لوی شمیر شتون له امله رامینځته کیږي.
کله چې په تازه ځړول شوي شیشې سلایډونو کې د سپرماتوزا چلند ارزول کیږي ، د جمع کیدو لنډمهاله نښې لیدل کیدی شي ، په ځانګړي توګه د منی څاڅکو په څنډو کې.په هرصورت، جمع کول اکثرا د دوامداره حرکت سره تړلي گردشي عمل لخوا ګډوډ شوي، کوم چې د دې پیښې انتقالي ماهیت تشریح کوي.څیړونکو دا هم لیدلي چې کله چې په منی کې ډیلیونټ اضافه شوی و، اوږد شوی "د تار په څیر" حجرو مجموعه ښکاره شوه.
د سپرماتوزون د تقلید لپاره لومړنۍ هڅې د ځړول شوي څاڅکي څخه د یو پتلي تار په لرې کولو سره ترسره شوې ، چې په پایله کې یې د منی د څاڅکي څخه د سپرم په څیر اوږده ویسیکل راوتلی و.سپرماتوزوا سمدلاسه په موازي ډول د ویسیکل دننه قطار کېده، مګر ټول واحد د 3D محدودیت له امله په چټکۍ سره ورک شو.له همدې امله، د سپرماتوزا د جمع کولو مطالعې لپاره، دا اړینه ده چې د سپرماتوزا حرکت او چلند په مستقیم ډول په جلا جلا سپرم ذخیره ټیوبونو کې وڅیړل شي، کوم چې ترلاسه کول ستونزمن دي.له همدې امله، دا اړینه ده چې داسې وسیله رامینځته کړئ چې د سپرماتوزا نقل کوي ترڅو د سپرم د حرکت او جمع کولو چلند مطالعاتو ملاتړ وکړي.Brillard et al13 راپور ورکړی چې په بالغ چرګانو کې د سپرم ذخیره کولو نلونو منځنۍ اوږدوالی 400-600 µm دی، مګر ځینې SSTs کیدای شي تر 2000 µm پورې اوږد وي.Mero او Ogasawara14 سیمینیفرس غدود په پراخو او غیر لوی شوي سپرم ذخیره کولو نلونو ویشلي، چې دواړه یې په اوږدوالي (~ 500 µm) او د غاړې په عرض (~ 38 µm) کې یو شان وو، مګر د ټیوبونو منځنۍ لومین قطر 56.6 او 56.6 µm و..، په ترتیب سره 11.2 μm.په اوسنۍ څیړنه کې، موږ د 200 µm × 20 µm (W × H) د چینل اندازه سره د مایکرو فلوایډیک وسیله کارولې، چې د کراس برخه یو څه د پراخ شوي SST سره نږدې ده.برسېره پردې، موږ په جریان کې د سپرم حرکت او د راټولولو چلند معاینه کړ، کوم چې د فورمین فرضیې سره مطابقت لري چې د SST اپیتیلیل حجرو لخوا تولید شوي مایع په لیمین کې په یو متقابل (ریولوژیکي) لوري کې ساتي.
د دې مطالعې موخه د فیلوپین ټیوب کې د سپرماتوزا د حرکت د لیدلو ستونزې لرې کول او په متحرک چاپیریال کې د سپرماتوزا د ریولوژی او چلند مطالعې له ستونزو څخه مخنیوی و.یو مایکرو فلوایډیک وسیله کارول شوې وه چې د چرګ په تناسلي برخو کې د سپرم حرکت کولو لپاره د هایدروستیټیک فشار رامینځته کوي.
کله چې د منحل شوي سپرم نمونې یو څاڅکي (1:40) په مایکرو چینل وسیله کې بار شي، د سپرم حرکت دوه ډوله پیژندل کیدی شي (جال شوی سپرم او پابند سپرم).برسېره پردې، سپرماتوزا د اوسني (مثبت ریولوژي؛ ویډیو 1، 2) په وړاندې لامبو وهل. که څه هم د سپرم بنډلونه د یوازینۍ سپرم (p <0.001) په پرتله ټیټ سرعت درلود، دوی د سپرم فیصده زیاته کړه چې مثبت ریوتیکسیز ښکاره کوي (p <0.001؛ جدول 2). که څه هم د سپرم بنډلونه د یوازینۍ سپرم (p <0.001) په پرتله ټیټ سرعت درلود، دوی د سپرم فیصده زیاته کړه چې مثبت ریوتیکسیز ښکاره کوي (p <0.001؛ جدول 2). Хотя пучки сперматозоидов имели более низкую скорость, чем у одиночных сперматозоидов (p < 0,001), они увелие низкую скорость, они увелие низкую скорость емонстрирующих положительный реотаксис (p <0,001; таблица 2). که څه هم د سپرماتوزوا بنډلونو د واحد سپرماتوزوا (p <0.001) په پرتله ټیټ سرعت درلود، دوی د سپرماتوزا فیصده زیاته کړه چې مثبت ریوټیکسس ښیي (p <0.001؛ جدول 2).尽管精子束的速度低于孤独精子的速度(p <0.001),但它们增加了澾示阳性流<0.001.2.尽管 精子束 的 速度 低于 孤独 的 速度 (p <0.001) ,但 增加 了显示子子嵏寧子子子子子(p <0.001 ; 2.….…..…))) Хотя скорость пучков сперматозоидов была ниже, чем у одиночных сперматозоидов (p < 0,001), они увеличивали процопожидов ельной реологией (p <0,001; таблица 2). که څه هم د سپرم بنډلونو سرعت د واحد سپرماتوزا (p <0.001) په پرتله ټیټ و، دوی د مثبت ریولوژی سره د سپرماتوزا فیصده زیاته کړه (p <0.001؛ جدول 2).د واحد سپرماتوزوا او توفټس لپاره مثبت ریولوژی په ترتیب سره نږدې 53٪ او 85٪ اټکل شوی.
دا لیدل شوي چې د شارکسي چرګانو سپرماتوزا د انزال څخه سمدلاسه وروسته خطي بنډلونه جوړوي، چې په لسګونو افراد لري.دا ټفټونه د وخت په تیریدو سره په اوږدوالي او ضخامت کې وده کوي او کیدای شي د ویشلو دمخه د څو ساعتونو لپاره په ویټرو کې پاتې شي (ویډیو 3).دا فلامینټس بنډلونه د echidna spermatozoa په څیر شکل لري چې د ایپیډیډیمس په پای کې جوړیږي.د شارکشي چرګ منی د راټولولو څخه وروسته د یوې دقیقې څخه لږ وخت کې د راټولولو او د ریټیکولټ بنډل جوړولو لپاره لوړ تمایل موندلی.دا بیمونه متحرک دي او د دې وړتیا لري چې نږدې دیوالونو یا جامد شیانو ته ودریږي.که څه هم د سپرم بنډلونه د سپرم حجرو سرعت کموي، دا روښانه ده چې په میکروسکوپي ډول دوی خپل خطي وړتیا زیاتوي.د بنډلونو اوږدوالی په بنډلونو کې د راټول شوي سپرم په شمیر پورې اړه لري.د بنډل دوه برخې جلا شوې وې: لومړنۍ برخه، د جمع شوي سپرم د آزاد سر په ګډون، او ترمینل برخه، په شمول د لکۍ او د سپرم ټول لرې پای.د تیز رفتار کیمرې (950 fps) په کارولو سره ، د بنډل په لومړۍ برخه کې د جمع شوي سپرماتوزوا وړیا سرونه لیدل شوي ، د بنډل د حرکت لپاره مسؤل دي د دوی د حرکت حرکت له امله ، پاتې نور یې د هیلیکل حرکت سره بنډل ته کشوي (ویډیو 4).په هرصورت، په اوږده توفټونو کې، دا لیدل شوي چې ځینې وړیا سپرم سرونه په بدن پورې تړلي دي او د توفټ وروستۍ برخه د وینس په توګه کار کوي ترڅو د توفټ په حرکت کې مرسته وکړي.
په داسې حال کې چې د مایعاتو په ورو جریان کې، د سپرم بنډلونه یو بل سره موازي حرکت کوي، په هرصورت، دوی په هر هغه څه باندې تیریږي او چپکیږي چې د جریان سرعت زیاتیږي، د اوسني جریان لخوا مینځل نشي.بنډلونه هغه وخت جوړیږي کله چې یو څو سپرم حجرې یو بل ته نږدې شي، دوی په ترکیب کې حرکت پیل کوي او د یو بل په شاوخوا کې پوښل کیږي، او بیا د چپچینې مادې سره تړل کیږي.1 او 2 شکلونه ښیې چې سپرم څنګه یو بل ته نږدې کیږي، یو جنکشن رامینځته کوي کله چې لکۍ یو بل ته نږدې وي.
څیړونکو د سپرم ریولوژی مطالعه کولو لپاره په مایکرو چینل کې د مایع جریان رامینځته کولو لپاره هایدروستیټیک فشار پلي کړ.یو مایکرو چینل د 200 µm × 20 µm (W × H) اندازه او د 3.6 µm اوږدوالی سره کارول شوی و.د کانټینرونو ترمینځ مایکرو چینلونه وکاروئ د سرنجونو سره په پای کې نصب شوي.د خواړو رنګ کول د چینلونو د ډیر لیدلو لپاره کارول کیده.
دیوال ته کیبلونه او لوازم یو له بل سره وصل کړئ.ویډیو د مرحلې برعکس مایکروسکوپ سره اخیستل شوې.د هر عکس سره، د پړاو برعکس مایکروسکوپي او نقشه کولو انځورونه وړاندې کیږي.(الف) د دوو جریانونو ترمنځ اړیکه د جریان مقاومت کوي د هیلیک حرکت (سرخ تیر) له امله.(ب) د ټیوب بنډل او د چینل دیوال (سرخ تیر) ترمنځ اړیکه، په ورته وخت کې دوی د دوو نورو بنډلونو (ژېړ تیر) سره وصل دي.(C) په مایکرو فلایډیک چینل کې د سپرم بنډلونه د یو بل سره نښلول پیل کوي (سرخ تیر)، د سپرم بنډلونو جال جوړوي.(D) د سپرم بنډلونو د شبکې جوړول.
کله چې د منحل شوي سپرم یو څاڅکي په مایکرو فلایډیک وسیله کې بار شوي او جریان رامینځته شوی ، د سپرم بیم د جریان د سمت پروړاندې حرکت کولو مشاهده شوی.بنډلونه د مایکرو چینلونو دیوالونو په وړاندې په آرامۍ سره فټ کیږي، او د بنډلونو په ابتدايي برخه کې وړیا سرونه د دوی په وړاندې په نرمۍ سره فټ کیږي (ویډیو 5).دوی په خپله لاره کې هر ډول سټینري ذرات ته هم ودریږي، لکه کثافات، چې د جریان لخوا د تیریدو په وړاندې مقاومت کوي.د وخت په تیریدو سره، دا توفټونه په اوږده تنفس بدلیږي چې نور واحد سپرماتوزا او لنډ توفټونه (ویډیو 6).لکه څنګه چې جریان ورو پیل کیږي، د سپرم اوږده لیکې د سپرم لینونو شبکه جوړوي (ویډیو 7؛ شکل 2).
د لوړ جریان سرعت (V> 33 µm/s) کې، د تارونو سرپل حرکتونه د دې هڅې په توګه زیاتیږي چې ډیری انفرادي سپرم جوړونکي بنډلونه د جریان د جریان ځواک سره مقاومت وکړي. د لوړ جریان سرعت (V> 33 µm/s) کې، د تارونو سرپل حرکتونه د دې هڅې په توګه زیاتیږي چې ډیری انفرادي سپرم جوړونکي بنډلونه د جریان د جریان ځواک سره مقاومت وکړي. При высокой скорости потока (V > 33 мкм/с) спиралевидные движения нитей усиливаются, поскольку они пытаются поймавтельные зоидов, образующих пучки, которые лучше противостоят дрейфующей силе потока. د لوړ جریان په نرخونو (V> 33 µm/s) کې، د سیندونو هیلیکي حرکتونه ډیریږي ځکه چې دوی هڅه کوي ډیری انفرادي سپرماتوزوا بنډلونه ونیسي کوم چې د جریان د جریان ځواک سره مقاومت کولو وړتیا لري.在高流速(V> 33 µm/s)动的漂移力.在 高 流速 (v> 33 µm/s) 时,的螺旋运动增加,以试图许多形成束单个貾廾图抗 的漂移力.. При высоких скоростях потока (V > 33 мкм/с) спиральное движение нитей увеличивается в попытке скоростях потока разующих пучки, чтобы лучше сопротивляться силам дрейфа потока. د لوړ جریان په نرخونو کې (V> 33 µm/s)، د فلامینټونو هیلیکي حرکت په دې هڅه کې وده کوي چې ډیری انفرادي سپرماتوزوا بنډلونه ونیسي ترڅو د جریان د جریان قوتونو سره ښه مقاومت وکړي.دوی همدارنګه هڅه وکړه چې مایکرو چینلونه د غاړې دیوالونو سره وصل کړي.
د سپرم بنډلونه د سپک مایکروسکوپي (LM) په کارولو سره د سپرم د سرونو او کرینګ لکۍ کلسترونو په توګه پیژندل شوي.د نطفې بنډلونه چې د مختلفو مجموعو سره دي د ټوټ شوي سرونو او فلیګیلر مجموعو په توګه هم پیژندل شوي، د سپرم ډیری ملنډې لکۍ، د سپرم سرونه په لکۍ پورې تړلي، او د سپرم سرونه چې د نطفې نیوکلی سره د څو فیوز شوي نیوکلی په توګه پیژندل شوي.د لیږد بریښنایی مایکروسکوپي (TEM).د الکترون مایکروسکوپي سکین کولو (SEM) وښودله چې د سپرم بنډلونه د سپرم سرونو مجموعه پوښل شوي او د سپرم مجموعه د پوښل شوي لکۍ تړل شوې شبکه ښیې.
د سپرماتوزا مورفولوژي او الټرا جوړښت، د سپرماتوزا بنډلونو جوړښت د سپک مایکروسکوپي (نیم برخې)، سکین کولو الیکترون مایکروسکوپي (SEM) او لیږد الکترون مایکروسکوپي (TEM) په کارولو سره مطالعه شوي، د سپرم سمیرونه د اکریډین نارنجي سره داغ شوي او د مایکرو فلوسکوپیسین په کارولو سره معاینه شوي.
د اکریډین نارنجي سره د سپرم سمیر داغونه (انځور 3B) وښودله چې د سپرم سرونه یو بل سره تړل شوي او د پټو موادو سره پوښل شوي، چې د لویو ټوفټونو (انځور 3D) د رامینځته کیدو لامل شوي.د سپرم بنډلونه د نطفې د مجموعو څخه جوړ شوي چې د تړل شوي لکۍ شبکې سره (انځور 4A-C).د سپرم بنډلونه د ډیری سپرماتوزا د لکۍ څخه جوړ شوي دي چې یو بل سره تړل شوي دي (انځور 4D).رازونه (Fig. 4E,F) د سپرماتوزوا بنډلونو سرونه پوښلي.
د سپرماتوزووا بنډل جوړښت د پړاو برعکس مایکروسکوپي او د سپرم سمیرونو په کارولو سره چې د اکریډین نارنجي رنګ شوي، دا وښودله چې د سپرماتوزا سرونه یو بل سره تړلي دي.(الف) د نطفې لومړنۍ توفټ جوړونه د سپرم (سپین دایره) او درې سپرم (ژېړ دایره) سره پیل کیږي، د سپرم سره پیل کیږي او په سر کې پای ته رسیږي.(ب) د سپرم سمیر عکس مایکروګراف چې په اکریډین نارنجي رنګ شوی د سپرم سرونه (تیر) ښیي.مایع سر پوښي.میګنیفیکیشن × 1000. (C) د لوی بیم پراختیا چې په مایکرو فلویډیک چینل کې د جریان په واسطه لیږدول کیږي (په 950 fps کې د لوړ سرعت کیمرې کارول).(D) د سپرم سمیر مایکروګراف د اکریډین نارنجي سره رنګ شوی چې لوی توفټونه (تیرونه) ښیې.پراخوالی: ×200.
د سپرم بیم الکترون مایکروګراف سکین کول او د سپرم سمیر د اکریډین نارنجي رنګ شوی.(A, B, D, E) د سپرماتوزا ډیجیټل رنګ سکین کولو الکترون مایکروګرافونه دي، او C او F د اکریډین نارنجي رنګ شوي سپرم سمیرونو مایکروګرافونه دي چې د څو سپرماتوزووا ضمیمه ښیې چې د کاډال ویب لپټ کوي.(AC) د سپرم مجموعه د تړل شوي لکۍ (تیر) د شبکې په توګه ښودل شوي.(D) د څو سپرماتوزوا چپک کول (د چپکونکي مادې سره، ګلابي نقشه، تیر) د لکۍ په شاوخوا کې لپاس.(E او F) د سپرم سر مجموعه (پوائنټرونه) د چپکونکي موادو سره پوښل شوي (پوائنټرونه).سپرماتوزووا د څو ورتیکس په څیر جوړښتونو (F) سره بنډلونه جوړ کړي.(C) × 400 او (F) × 200 لویوالی.
د لیږد د الکترون مایکروسکوپي په کارولو سره، موږ وموندله چې د سپرم بنډلونه د لکۍ سره نښلول شوي (انځور 6A، C)، سرونه د لکۍ سره نښلول شوي (6B انځور)، یا سرونه د لکۍ سره نښلول شوي (انځور 6D).په بنډل کې د سپرماتوزوا سرونه منحل شوي، په دوه اټومي برخو کې شتون لري (انځور 6D).په چیری بنډل کې، سپرماتوزا دوه اتومي سیمې او څو فلیګیلر سیمې سره یو متوجه سر درلود (انځور 5A).
د ډیجیټل رنګ الکترون مایکروګراف د سپرم بنډل کې نښلونکي لکۍ ښیې او د سپرم سرونه سره نښلوي.(الف) د سپرماتوزا د لوی شمیر سره تړلی لکۍ.پام وکړئ چې لکۍ په دواړو پورټریټ (تیر) او منظره (تیر) اټکلونو کې څنګه ښکاري.(ب) د سپرم سر (تیر) د لکۍ (تیر) سره تړلی دی.(ج) د سپرم څو لکۍ (تیرونه) تړل شوي دي.(D) Agglutination مواد (AS، نیلي) د سپرم څلور سرونه (جامني) سره نښلوي.
د سکن کولو الکترون مایکروسکوپي د سپرم په بنډلونو کې د سپرم سرونو موندلو لپاره کارول کیده چې په رطوبت یا غشا پوښل شوي (شکل 6B) ، دا په ګوته کوي چې د سپرم بنډلونه د بهر حجرو موادو لخوا لنگر شوي.راټول شوي مواد د سپرم په سر (د جیلیفش سر په څیر مجلس؛ شکل 5B) کې متمرکز شوي او په لرې توګه پراخ شوي، د فلوروسینس مایکروسکوپي الندې یو روښانه ژیړ بڼه ورکوي کله چې د اکریډین نارنج (انځور 6C) سره رنګ شوی وي.دا ماده په واضح ډول د سکین کولو مایکروسکوپ لاندې لیدل کیږي او د باندر په توګه ګڼل کیږي.نیمه پتلې برخې (انځور 5C) او د سپرم بویونه د اکریډین نارنجي رنګ شوي د سپرم بنډلونه ښیې چې په کثافاتو ډک شوي سرونه او کرل شوي لکۍ لري (انځور 5D).
مختلف فوټومیکروګرافونه د مختلف میتودونو په کارولو سره د سپرم سرونو او پوښ شوي لکۍ راټولول ښیې.(A) د سپرم بنډل کراس سیکشنل ډیجیټل رنګ لیږد الیکټران مایکروګراف د دوه برخو نیوکلیوس (نیلي) او څو فلیګیلر برخو (شنو) سره د نطفې سرې ښیې.(B) د ډیجیټل رنګ سکینګ الکترون مایکروګراف د جیلیفش په څیر د سپرم سرونو (تیرو) کلستر ښیې چې پوښل شوي ښکاري.(C) نیمه پتلی برخه د سپرم سرونه (تیرونه) او کرل شوي لکۍ (تیر) ښیې.(D) د سپرم سمیر مایکروګراف چې په اکریډین نارنجي رنګ شوی د سپرم د سرونو مجموعه (تیرونه) او کرل شوي تړل شوي لکۍ (تیر) ښیي.په یاد ولرئ چې یو چپکشی ماده (S) د سپرماتوزون سر پوښي.(D) × 1000 لویوالی.
د انتقالي الکترون مایکروسکوپي په کارولو سره (انځور 7A)، دا هم یادونه شوې چې د سپرم سرونه غوڅ شوي او نیوکلی یې سپیرل شکل لري، لکه څنګه چې د سپرم سمیرونو لخوا تایید شوي چې د اکریډین نارنجي رنګ شوي او د فلوروسینس مایکروسکوپي (7B انځور) په کارولو سره معاینه شوي.
(A) د ډیجیټل رنګ لیږد الیکټران مایکروګراف او (B) د اکریډین نارنجي داغ لرونکي سپرم سمیر چې کویل شوي سرونه او د سپرم سرونه او لکۍ (تیر) ښیي.(ب) × 1000 لویوالی.
یوه په زړه پورې موندنه دا ده چې د شارکزي سپرم د ګرځنده فلیمینټو بنډلونو جوړولو لپاره راټولیږي.د دې بنډلونو ملکیت موږ ته اجازه راکوي چې په SST کې د سپرماتوزا جذب او ذخیره کولو کې د دوی احتمالي رول پوه شو.
د ملن کولو وروسته، سپرم اندام ته ننوځي او د انتخاب د شدید بهیر څخه تیریږي، په پایله کې یوازې یو محدود شمیر سپرم SST15,16 ته ننوځي.تر نن نیټې پورې، هغه میکانیزمونه چې سپرم یې SST ته ننوځي او بهر کوي روښانه ندي.په چرګانو کې، سپرماتوزوا په SST کې د 2 څخه تر 10 اونیو پورې د اوږدې مودې لپاره ذخیره کیږي، د نوعې پورې اړه لري.په SST کې د ذخیره کولو پرمهال د منی حالت په اړه جنجال پاتې دی.ایا دوی په حرکت یا آرام کې دي؟په بل عبارت، د سپرم حجرې څنګه د اوږدې مودې لپاره په SST کې خپل موقف ساتي؟
Forman4 وړاندیز وکړ چې د SST استوګنځی او خارج کول د سپرم حرکت په شرایطو کې تشریح کیدی شي.لیکوالان داسې انګیري چې سپرم د SST اپیتیلیم لخوا رامینځته شوي مایع جریان پروړاندې لامبو وهلو سره خپل موقعیت ساتي او دا سپرم د SST څخه ایستل کیږي کله چې د دوی سرعت له هغه نقطې څخه ښکته وي چې دوی د انرژي نشتوالي له امله شاته حرکت پیل کوي.Zaniboni5 د SST اپیتیلیل حجرو په apical برخه کې د aquaporins 2, 3, او 9 شتون تایید کړ، کوم چې کیدای شي په غیر مستقیم ډول د Foreman د سپرم ذخیره کولو ماډل مالتړ وکړي.په اوسنۍ څیړنه کې، موږ وموندله چې د شارکشي شاوخوا نیمایي سپرماتوزا په روانی مایع کې مثبت ریولوژی ښیي، او دا جمع شوي سپرم بنډلونه د سپرماتوزا شمیر ډیروي چې مثبت ریولوژی ښیي، که څه هم جمع کول یې ورو کوي.د سپرم حجرې څنګه د مرغۍ د فیلوپین ټیوب څخه د القاح ځای ته سفر کوي په بشپړ ډول نه پوهیږي.په تی لرونکو حیواناتو کې، فولیکولر مایع کیموات سپرماتوزا جذبوي.په هرصورت، داسې انګیرل کیږي چې کیموټراکټینټ سپرماتوزا د اوږد واټن 7 ته د رسیدو لپاره لارښوونه کوي.له همدې امله، نور میکانیزمونه د سپرم ټرانسپورټ مسولیت لري.په موږکانو کې د سپرم په نښه کولو کې د سپرم وړتیا د فیلوپین ټیوب مایعاتو په مقابل کې چې د میلون څخه وروسته خوشې کیږي د حرکت کولو او جریان کولو لپاره یو لوی فاکتور دی.پارکر 17 وړاندیز وکړ چې سپرماتوزا په مرغیو او ریټیټیل کې د سلیري جریان په وړاندې د لامبو وهلو له لارې د تخمدان څخه تیریږي.که څه هم دا په تجربوي ډول په مرغانو کې نه دی ښودل شوی، Adolphi18 لومړی کس و چې وموندله چې د الوتونکي سپرم مثبت پایلې ورکوي کله چې د پوښ او سلایډ تر مینځ د مایع یو پتلی طبقه د فلټر کاغذ د یوې پټې سره رامینځته کیږي.ريولوژيهینو او یاناګیماچي [19] د موږک تخمدان-ټیوبل-یوټرین کمپلیکس په پرفیوژن حلقه کې ځای په ځای کړ او 1 µl رنګ یې په استمس کې داخل کړ ترڅو په فیلوپین ټیوب کې د مایع جریان لیدلو لپاره.دوی په فیلوپین ټیوب کې د انقباض او آرامۍ خورا فعال حرکت لیدلی ، په کوم کې چې د رنګ ټول بالونه په ثابت ډول د فیلوپین ټیوب امپولا ته حرکت کوي.لیکوالان د سپرم د لوړولو او القاح لپاره له ښکته څخه پورته فیلوپین ټیوب ته د ټیوب مایع جریان په اهمیت ټینګار کوي.Brillard20 راپور ورکړی چې په چرګانو او مرغانو کې، سپرماتوزا د اندام د ننوتلو څخه د فعال حرکت په واسطه مهاجرت کوي، چیرته چې دوی زیرمه شوي، د رحم - اندام جنکشن ته، چیرته چې دوی زیرمه شوي.په هرصورت، دا حرکت د uterovaginal junction او infundibulum ترمنځ اړین ندی ځکه چې سپرماتوزا د غیر فعال بې ځایه کیدو په واسطه لیږدول کیږي.د دې پخوانیو وړاندیزونو په پوهیدو او په اوسنۍ څیړنه کې د ترلاسه شویو پایلو په پوهیدو سره، داسې انګیرل کیدی شي چې د سپرماتوزا وړتیا د پورته حرکت لپاره (ریولوژی) یو له هغو ملکیتونو څخه دی چې د انتخاب پروسه یې پر بنسټ والړ ده.دا د اندام له لارې د سپرماتوزا تیریدل او د ذخیره کولو لپاره CCT ته د دوی ننوتل ټاکي.لکه څنګه چې Forman4 وړاندیز کړی، دا کیدای شي د سپرم د SST او د هغې د استوګنې ځای ته د یوې مودې لپاره د ننوتلو پروسه هم اسانه کړي او بیا د وتلو وروسته کله چې د دوی سرعت ورو شي.
له بلې خوا، ماتسوزاکي او ساسانامي 21 وړاندیز وکړ چې د حیوان سپرماتوزا د نارینه او ښځینه تناسلي جریانونو کې له استراحت څخه حرکت ته حرکت کوي.په SST کې د اوسیدونکي سپرم حرکت مخنیوی وړاندیز شوی ترڅو د سپرم اوږد ذخیره کولو وخت تشریح کړي او بیا د SST پریښودو وروسته بیا ژوندي شي.د هایپوکسیک شرایطو لاندې، Matsuzaki et al.1 په SST کې د لیټیټ لوړ تولید او خوشې کیدو راپور ورکړی، کوم چې کیدای شي د اوسیدونکي سپرم حرکت مخه ونیسي.په دې حالت کې، د سپرم ریولوژی اهمیت د سپرماتوزا په انتخاب او جذب کې منعکس کیږي، نه د دوی په ذخیره کې.
د سپرم جمع کولو نمونه په SST کې د سپرم د اوږدې مودې ذخیره کولو لپاره د منلو وړ توضیح ګڼل کیږي، ځکه چې دا په 2,22,23 چرګانو کې د سپرم د ساتلو یوه عامه بڼه ده.Bakst et al.2 ولیدل چې ډیری سپرماتوزا یو بل سره وتښتي، فاسکیکولر مجموعه جوړوي، او واحد سپرماتوزوا په ندرت سره په کویل CCM کې موندل شوي.له بلې خوا، وین او نور.24 په چرګانو کې په SST لیمین کې ډیر ویشل شوي سپرماتوزا او لږ سپرماتوزوا ټفټونه ولیدل.د دې کتنو پر بنسټ، دا انګیرل کیدی شي چې د سپرم د راټولولو تمایل د مرغیو ترمنځ او په ورته انزال کې د سپرماتوزا ترمنځ توپیر لري.برسېره پردې، وان کری او نور.9 وړاندیز وکړ چې د Agglutinated spermatozoa تصادفي جلا کول د فیلوپین ټیوب لومین ته د سپرماتوزوا تدریجي ننوتلو مسؤلیت لري.د دې فرضیې له مخې، سپرماتوزوا باید د ټیټ جمع کولو ظرفیت سره لومړی له SST څخه ویستل شي.په دې شرایطو کې، د سپرماتوزا وړتیا د جمع کولو لپاره کیدای شي یو فاکتور وي چې په ناپاکو مرغیو کې د سپرم سیالۍ پایلې اغیزه کوي.برسېره پردې، څومره چې جمع شوي سپرم جلا کیږي، د اوږدې مودې زیږون ساتل کیږي.
که څه هم په بنډلونو کې د سپرماتوزوا مجموعه او مجموعه په ډیری مطالعاتو 2,22,24 کې لیدل شوي، دوی په SST کې د دوی د کینیماتیک مشاهدې پیچلتیا له امله په تفصیل سره ندي تشریح شوي.په ویټرو کې د سپرم جمع کولو مطالعې لپاره ډیری هڅې شوي.پراخه مګر لنډمهاله مجموعه هغه وخت مشاهده شوه کله چې پتلی تار د زنګون شوي تخم له څاڅکي څخه لیرې شو.دا د دې حقیقت لامل کیږي چې یو اوږد شوی بلبل د څاڅکي څخه راوتلی ، د سیمینل غدې تقلید کوي.د 3D محدودیتونو او لنډ ډریپ وچولو وختونو له امله، ټول بلاک په چټکۍ سره ویجاړ شو9.په اوسنۍ څیړنه کې، د شارکشي چرګانو او مایکرو فلوایډیک چپسونو په کارولو سره، موږ وکولی شو تشریح کړو چې دا توفټونه څنګه جوړیږي او څنګه حرکت کوي.د سپرم بنډلونه د منی له راټولولو وروسته سمدلاسه رامینځته شوي او موندل شوي چې په سرپل کې حرکت کوي، کله چې په جریان کې موجود وي مثبت ریولوژی ښیي.برسېره پردې، کله چې په میکروسکوپیک ډول لیدل کیږي، د سپرم بنډلونه لیدل شوي چې د جلا شوي سپرماتوزا په پرتله د حرکت کولو خطي وړتیا زیاتوي.دا وړاندیز کوي چې د سپرم راټولول ممکن د SST د ننوتلو دمخه واقع شي او د سپرم تولید د فشار له امله په کوچنۍ سیمه پورې محدود نه وي لکه څنګه چې مخکې وړاندیز شوی (ټینګاري او لیک 12).د توفټ جوړیدو په وخت کې، سپرماټوزا په همغږي کې تیریږي تر هغه چې دوی یو جنکشن جوړ کړي، بیا د دوی لکۍ د یو بل په شاوخوا کې پټیږي او د سپرماټوزون سر آزاد پاتې کیږي، مګر د سپرماټوزون لکۍ او لرې برخه د چپچینې مادې سره یوځای پاتې کیږي.له همدې امله، د لیګامینټ وړیا سر د حرکت لپاره مسؤل دی، د لیګامینټ پاتې برخه راښکته کوي.د سپرم بنډلونو سکین کولو الکترون مایکروسکوپي وښودله چې د سپرم سرونه په ډیرو چپچینو موادو پوښل شوي، دا وړاندیز کوي چې د سپرم سرونه په آرامۍ بنډلونو کې تړل شوي، چې ممکن د ذخیره کولو ځای (SST) ته د رسیدو وروسته پیښ شوي وي.
کله چې د سپرم سمیر د اکریډین نارنجي سره داغ وي، د سپرم حجرو شاوخوا بهر حجروي چپکونکي مواد د فلوروسینټ مایکروسکوپ لاندې لیدل کیدی شي.دا ماده د سپرم بنډلونو ته اجازه ورکوي چې د شاوخوا شاوخوا سطحو یا ذراتو سره ودریږي او د شاوخوا شاوخوا جریان سره تیر نشي.په دې توګه، زموږ کتنې د ګرځنده بنډلونو په بڼه کې د سپرماتوزووا اډیشن رول ښیي.د دوی وړتیا د اوسني په وړاندې د لامبو وهلو او نږدې سطحو ته د پاتې کیدو وړتیا سپرم ته اجازه ورکوي چې په SST کې اوږد پاتې شي.
Rothschild25 د تعلیق په څنډه کې د غوایانو د منی د تیریدلو توزیع مطالعه کولو لپاره د هیموسایټومیټری کیمره کارولې ، د کیمرې له لارې د مایکروسکوپ عمودی او افقی نظری محور سره فوټومیکروګرافونه اخلي.پایلو وښودله چې سپرماتوزا د خونې سطحې ته جذب شوي.لیکوالان وړاندیز کوي چې ممکن د سپرم او سطح ترمنځ هایدروډینامیک تعاملات شتون ولري.د دې په نظر کې نیولو سره، د شارکشي چرګ د منی وړتیا سره د چپچینې ټوفټونو جوړولو لپاره، دا ممکن د دې احتمال زیات کړي چې منی به د SST دیوال ته غاړه کیږدي او د اوږدې مودې لپاره ذخیره شي.
Bccetti او Afzeliu26 راپور ورکړی چې سپرم ګلیکوکلیکس د ګیمیټ پیژندلو او راټولولو لپاره اړین دی.Forman10 لیدلي چې د α-glycosidic بانډونو هایدرولیسس په ګلیکوپروټین-ګلایکولیپیډ کوټینګونو کې د حیواني منی د نیورامینیډیز سره د درملنې له لارې د زیږون کمیدو لامل شوی پرته له دې چې د سپرم حرکت اغیزه وکړي.لیکوالان وړاندیز کوي چې په ګلیکوکلیکس باندې د نیورامینیډیز اغیز د رحم - اندامونو په جنکشن کې د سپرم استخراج خرابوي، په دې توګه د زیږون کچه راټیټوي.د دوی مشاهدې نشي کولی دا احتمال له پامه غورځوي چې د نیورامینډیز درملنه ممکن د سپرم او oocyte پیژندل کم کړي.Forman او Engel10 وموندله چې زرغونتیا هغه وخت کمه شوه کله چې چرګان په عصبي ډول د منی سره د نیورامینیډیز درملنه کیږي.په هرصورت، IVF د نیورامینیډیز درملنه شوي سپرم سره د کنټرول چرګانو په پرتله په زرغونتیا اغیزه نه کوي.لیکوالان دې نتیجې ته ورسیدل چې د سپرم غشا په شاوخوا کې د ګلیکوپروټین - ګلایکولیپیډ پوښښ کې بدلونونو د سپرم د القاح کولو وړتیا کمه کړې چې د رحم د اندامونو په جنکشن کې د سپرم د تخریب مخه نیسي، چې په پایله کې یې د سپرم ضایعات د رحم د اندامونو د سرعت له امله زیات شوي، مګر د هګۍ اندامونو او د هګۍ په ارتباط اغیزه نلري.
په ترکیه کې Bakst او Bauchan 11 د SST په لیمین کې کوچني رګونه او د غشا ټوټې وموندلې او ولیدل چې ځینې دا دانه د سپرم غشا سره یوځای شوي.لیکوالان وړاندیز کوي چې دا اړیکې ممکن په SST کې د سپرماتوزوا اوږدې مودې ذخیره کولو کې مرسته وکړي.په هرصورت، څیړونکو د دې ذراتو سرچینه مشخصه نه کړه، ایا دوی د CCT اپیتیلیل حجرو لخوا پټ شوي، د نارینه تناسلي سیسټم لخوا تولید شوي او پټ شوي، یا پخپله د سپرم لخوا تولید شوي.همدارنګه، دا ذرات د راټولولو لپاره مسؤل دي.Grützner et al27 راپور ورکړی چې د ایپیډیډیمل اپیتیلیل حجرې یو ځانګړی پروټین تولیدوي او پټوي چې د واحد-پوور سیمینل لاریو د جوړولو لپاره اړین دي.لیکوالان دا هم راپور ورکوي چې د دې بنډلونو خپریدل د ایپیډیډیمل پروټینونو په تعامل پورې اړه لري.Nixon et al28 وموندله چې اډنیکسا یو پروټین پټوي، د اسیدیک سیسټین بډایه اوستیونیکټین؛SPARC په لنډو چونګښو echidnas او platypuses کې د سپرم ټفټس په جوړولو کې دخیل دی.د دې بیمونو ویشل د دې پروټین له لاسه ورکولو سره تړاو لري.
په اوسنۍ څیړنه کې، د الکترون مایکروسکوپي په کارولو سره الټرا ساختماني تحلیل وښودله چې سپرماتوزا په لوی مقدار کې د کثافاتو موادو سره تړلي دي.داسې انګیرل کیږي چې دا مواد د جمع کولو لپاره مسؤل دي چې د سرونو په مینځ کې او شاوخوا شاوخوا کې راټولیږي، مګر د لکۍ په سیمه کې په ټیټ غلظت کې.موږ ګومان کوو چې دا جمع کوونکې ماده د نارینه تناسلي سیسټم (ایپیډیډیمیس یا واس ډیفرنس) څخه د منی سره بهر کیږي، ځکه چې موږ ډیری وختونه د انزال په وخت کې د لیمف او سیمینل پلازما څخه جلا کول وینو.دا راپور شوي چې لکه څنګه چې د حیوان سپرماتوزا د ایپیډیډیمیس او واس ډیفرنس څخه تیریږي، دوی د پختوالي پورې اړوند بدلونونو سره مخ کیږي چې د پروټینونو د تړلو او د پلازما لیما پورې تړلي ګلیکوپروټینونو ترلاسه کولو وړتیا ملاتړ کوي.په SST کې د اوسیدونکي سپرم غشا باندې د دې پروټینونو دوام وړاندیز کوي چې دا پروټینونه ممکن د سپرم غشا ثبات 30 ترلاسه کولو اغیزه وکړي او د دوی زیږون 31 مشخص کړي.Ahammad et al32 راپور ورکړی چې سپرماتوزا د نارینه تناسلي سیسټم له مختلفو برخو څخه ترلاسه شوي (د ټیسس څخه د ډیسټل vas deferens پورې) د مایع ذخیره کولو شرایطو کې، د ذخیره کولو تودوخې په پام کې نیولو پرته، او د چرګانو لپاره د فایلوپین ټیوبونو کې د مصنوعي انزیمیشن څخه وروسته د عمل وړتیا وده کوي.
د شارکشي د چرګانو سپرم ټفټونه د نورو ډولونو په پرتله مختلف ځانګړتیاوې او دندې لري لکه echidnas، platypuses، لرګي موږک، هرن موږکان، او ګیني سور.په شارکسي چرګانو کې، د سپرماتوزا بنډلونو جوړیدو د واحد سپرماتوزا په پرتله د لامبو سرعت کم کړی.په هرصورت، دې بنډلونو د ریولوژیکي پلوه مثبت سپرماتوزا فیصده زیاته کړه او د سپرماتوزا وړتیا یې زیاته کړه ترڅو په متحرک چاپیریال کې ځان ثبات کړي.په دې توګه، زموږ پایلې پخوانی وړاندیز تاییدوي چې په SST کې د سپرم راټولول د اوږدې مودې سپرم ذخیره کولو سره تړاو لري.موږ دا فرضیه هم کوو چې د نطفې رامینځته کولو لپاره د سپرم تمایل ممکن په SST کې د سپرم ضایع کیدو کچه کنټرول کړي ، کوم چې ممکن د سپرم سیالۍ پایله بدله کړي.د دې انګیرنې له مخې، سپرماتوزوا د ټیټ جمع ظرفیت سره لومړی SST خوشې کوي، پداسې حال کې چې سپرماتوزا د لوړ جمع ظرفیت سره ډیری اولادونه تولیدوي.د واحد د سپرم بنډلونو جوړول ګټور دي او د مور او پلار او ماشوم تناسب اغیزه کوي، مګر یو مختلف میکانیزم کاروي.په echidnas او platypuses کې، سپرماتوزوا یو بل سره موازي ترتیب شوي ترڅو د بیم مخکینۍ سرعت زیات کړي.د echidnas بنډلونه د واحد سپرماتوزا په پرتله شاوخوا درې ځله چټک حرکت کوي.داسې انګیرل کیږي چې په echidnas کې د دې ډول سپرم ټوفټونو رامینځته کول د واکمنۍ ساتلو لپاره یو تکامل موافقت دی، ځکه چې میرمنې متواضع دي او معمولا د څو نارینه وو سره یوځای کیږي.له همدې امله، د مختلف انزال څخه سپرماتوزا د هګۍ د القاح لپاره سخته سیالي کوي.
د شارکسي چرګانو Agglutinated spermatozoa د پړاو برعکس مایکروسکوپي په کارولو سره د لیدلو لپاره اسانه دي، کوم چې ګټور ګڼل کیږي ځکه چې دا په ویټرو کې د سپرماتوزا د چلند اسانه مطالعې ته اجازه ورکوي.هغه میکانیزم چې د سپرم توفټ جوړښت یې په شارکسي چرګانو کې تکثیر ته وده ورکوي له هغه څخه هم توپیر لري چې په ځینو پلیسینټل تی لرونکو حیواناتو کې لیدل کیږي چې د کوپراتیف سپرم چلند نمایندګي کوي لکه د لرګیو موږک، چیرې چې ځینې سپرماتوزا هګیو ته رسیږي، د نورو اړوندو اشخاصو سره مرسته کوي چې خپلو هګیو ته ورسیږي او زیانمن کړي.خپل ځان ثابتولو لپاره.پرهیزګاره چلندځان ته القاح کول 34. په سپرماتوزووا کې د کوپراتیف چلند بله بیلګه په هرن موږک کې وموندل شوه، چیرې چې سپرماتوزا د دې توان درلود چې د جینیکي پلوه خورا اړوند سپرماتوزو سره وپیژني او یوځای کړي او د کوپراتیف ګروپونه رامینځته کړي ترڅو د غیر مربوط سپرماتوزا په پرتله خپل سرعت ډیر کړي.
په دې څیړنه کې ترلاسه شوي پایلې په SWS کې د سپرماتوزا د اوږدې مودې ذخیره کولو په اړه د فومن نظریې سره مخالفت نه کوي.څیړونکي راپور ورکوي چې د سپرم حجرې د اوږدې مودې لپاره د SST په لیکه کې د اپیتیلیل حجرو جریان کې حرکت ته دوام ورکوي ، او د یوې ټاکلې مودې وروسته ، د سپرم حجرو انرژي ذخیره له مینځه وړل کیږي چې په پایله کې یې سرعت کمیږي ، کوم چې د کوچني مالیکولر وزن لرونکي موادو اخراج ته اجازه ورکوي.د سپرماتوزوا انرژي د SST د لیمین څخه د مایع جریان سره د فلوپیان ټیوب غار.په اوسنۍ څیړنه کې، موږ ولیدل چې د واحد سپرم نیمایي د روانی مایعاتو په وړاندې د لامبو کولو وړتیا ښودلې، او په بنډل کې د دوی چپکوالی د مثبت ریولوژی ښودلو وړتیا لوړه کړې.سربیره پردې، زموږ معلومات د Matsuzaki et al سره مطابقت لري.1 چا راپور ورکړی چې په SST کې د لیکټیټ سراو زیاتوالی ممکن د اوسیدونکي سپرم حرکت مخه ونیسي.په هرصورت، زموږ پایلې په SST کې د دوی چلند روښانه کولو په هڅه کې د مایکرو چینل دننه د متحرک چاپیریال په شتون کې د سپرم متحرک لیګامینټونو رامینځته کول او د دوی ریولوژیکي چلند تشریح کوي.راتلونکې څیړنه ممکن د کیمیاوي جوړښت او د اګلوټینینګ ایجنټ اصليت په ټاکلو تمرکز وکړي، کوم چې به بې له شکه له څیړونکو سره مرسته وکړي چې د مایع منی ذخیره کولو لپاره نوې لارې رامینځته کړي او د زیږون موده زیاته کړي.
په څیړنه کې پنځلس 30 اوونیزې د نری غاړې نارینه شارکسي (هموزیګوس غالب؛ نا نا) د سپرم ډونرانو په توګه غوره شوي.دا مرغان د مصر د اشیت پوهنتون، د کرنې پوهنځي د څیړنې د چرګانو فارم کې ساتل شوي.مرغان په انفرادي پنجرو کې ځای پر ځای شوي وو (30 x 40 x 40 سانتي متره)، د رڼا پروګرام (16 ساعته رڼا او 8 ساعته تیاره) تابع شوي او د 160 ګرام خام پروټین، 2800 کیلو کیلو میټابولیز وړ انرژي، هر یو 35 ګرامه کلسیم لرونکي خواړه تغذیه شوي.۵ ګرامه شته فاسفورس په هر کیلو ګرام خوراک کې.
د 36، 37 معلوماتو له مخې، منی د معدې د مساج په واسطه د نارینه وو څخه راټول شوی.د 45 منی نمونې په 3 ورځو کې د 15 نارینه وو څخه راټول شوي.منی (n = 15/day) سمدلاسه 1:1 (v:v) د Belsville پولټري Semen Diluent سره منحل شو، کوم چې د پوتاشیم ډیفاسفیټ (1.27 g)، مونوسوډیم ګلوټامیټ مونو هایدریټ (0.867 g)، فرکټوز (0.5 d) انهایډروس سوډیم لري.Acetate (0.43 g)، tris (hydroxymethyl) aminomethane (0.195 g)، پوټاشیم سیټریټ مونو هایدریټ (0.064 g)، پوتاشیم مونوفاسفیټ (0.065 g)، مګنیزیم کلورایډ (0.034 g) او H2O (100 m3k/3m3 ml، p3m3 ګرامه) ۸.د منی منحل شوي نمونې لومړی د سپک مایکروسکوپ لاندې معاینه شوې ترڅو د منی ښه کیفیت (لندبل) ډاډمن کړي او بیا د اوبو په حمام کې د 37 درجې سانتي ګراد کې زیرمه شوي ترڅو د راټولولو وروسته نیم ساعت کې وکارول شي.
د سپرماتوزا کایناتیک او ریولوژي د مایکرو فلوایډیک وسیلو سیسټم په کارولو سره تشریح شوي.د منی نمونې نور هم په Beltsville Avian Semen Diluent کې 1:40 ته راټیټ شوي، په مایکرو فلوایډیک وسیله کې بار شوي (لاندې وګورئ)، او کاینټیک پیرامیټونه د کمپیوټر شوي سیمن تحلیل (CASA) سیسټم په کارولو سره ټاکل شوي چې مخکې د مایکرو فلویدیک ځانګړتیا لپاره رامینځته شوي.په مایع میډیا کې د سپرماتوزا د خوځښت په اړه (د میخانیکي انجینرۍ څانګه، د انجینرۍ پوهنځی، د اسیټ پوهنتون، مصر).دا پلگ ان له دې ځایه ډاونلوډ کیدی شي: http://www.assiutmicrofluidics.com/research/casa39.د منحني سرعت (VCL, μm/s)، خطي سرعت (VSL, μm/s) او د اوسط سرعت سرعت (VAP, μm/s) اندازه شوي.د سپرماتوزوا ویډیوګانې د 30 fps کې د 3 s لپاره په 30 fps کې د Tucson ISH1000 کیمرې سره وصل شوي د برعکس Optika XDS-3 پړاو برعکس مایکروسکوپ (د 40x هدف سره) په کارولو سره اخیستل شوي.د CASA سافټویر وکاروئ لږترلږه درې ساحې مطالعه کړئ او په هر نمونه کې د 500 سپرم ټراجیکټریز.ثبت شوې ویډیو د کور جوړ شوي CASA په کارولو سره پروسس شوې.په CASA پلگ ان کې د حرکت تعریف د جریان د اندازې په پرتله د سپرم د لامبو سرعت پر بنسټ والړ دی، او نور پیرامیټونه نه لري لکه د غاړې څخه بل حرکت، ځکه چې دا د مایع جریان کې خورا باوري موندل شوي.ریولوژیکي حرکت د مایع جریان د سمت په وړاندې د سپرم حجرو حرکت په توګه بیان شوی.سپرماتوزوا د ریولوژیکي ملکیتونو سره د متحرک سپرماتوزا د شمیر لخوا ویشل شوي؛سپرماتوزوا چې په آرام کې وو او په حرکت کې سپرماتوزا د شمیر څخه ایستل شوي وو.
ټول کارول شوي کیمیاوي توکي د ایلګوموریا درملتون (قاهره، مصر) څخه ترلاسه شوي پرته لدې چې بل ډول یادونه وشي.دا وسیله لکه څنګه چې د ایل شیری ایټ ال لخوا تشریح شوې جوړه شوې وه.40 د ځینو بدلونونو سره.هغه مواد چې د مایکرو چینلونو د جوړولو لپاره کارول کیږي د شیشې تختې (هوارډ ګلاس، ورسیسټر، MA)، SU-8-25 منفي مقاومت (MicroChem، نیوټن، CA)، ډیاسیټون الکول (سګما الډریچ، سټین هایم، جرمني)، او پولی ایسټون شامل دي.-184، ډاو کارنینګ، میډلینډ، میشیګان).مایکرو چینلونه د نرم لیتوګرافي په کارولو سره جوړ شوي.لومړی، د مطلوب مایکرو چینل ډیزاین سره یو روښانه محافظتي مخ ماسک په لوړ ریزولوشن پرنټر کې چاپ شوی و (پریزماتیک، قاهره، مصر او پیسفک هنرونه او ډیزاین، مارکم، آن).ماسټران د شیشې پلیټونو څخه د سبسټریټ په توګه جوړ شوي.پلیټونه په اکټون، اسوپروپانول او ډیونیز شوي اوبو کې پاک شوي او بیا د SU8-25 20 µm پرت سره د سپین کوټینګ (3000 rpm، 1 دقیقې) په واسطه پوښل شوي.د SU-8 پرتونه بیا په نرمۍ سره وچ شوي (65°C، 2 دقیقې او 95°C، 10 دقیقې) او د 50 ثانیو لپاره د UV وړانګو سره مخ شوي.د افشا کیدو وروسته په 65°C او 95°C کې د 1 دقیقو او 4 دقیقو لپاره پخه کړئ ترڅو د SU-8 پرتونو سره کراس لینک ښکاره شي، وروسته د 6.5 دقیقو لپاره د ډیاسیټون الکول پراختیا.د SU-8 طبقې د لا قوي کولو لپاره وافلونه (د 15 دقیقو لپاره 200 درجې سانتي ګراد) په کلکه پخه کړئ.
PDMS د 10:1 وزن په تناسب کې د مونومر او هارډینر مخلوط کولو سره چمتو شوی و، بیا په ویکیوم ډیسیکیټر کې ډیګاس شوی او د SU-8 اصلي چوکاټ کې اچول شوی.PDMS په تنور (120 ° C، 30 دقیقو) کې روغ شوی و، بیا چینلونه پرې شوي، له ماسټر څخه جلا شوي، او سوراخ شوي ترڅو ټیوبونو ته اجازه ورکړي چې د مایکرو چینل دننه او بهر کې وصل شي.په نهایت کې، د PDMS مایکرو چینلونه په دایمي توګه د پورټ ایبل کورونا پروسیسر په کارولو سره د مایکروسکوپ سلایډونو سره وصل شوي (د بریښنا تخنیکي محصولات ، شیکاګو ، IL) لکه څنګه چې په بل ځای کې تشریح شوي.په دې څیړنه کې کارول شوي مایکرو چینل د 200 µm × 20 µm (W × H) اندازه کوي او 3.6 سانتي متره اوږد دی.
د مایع جریان د مایکرو چینل دننه د هایدروستیټیک فشار لخوا هڅول کیږي د داخلي ذخیرې کې د مایع کچه ساتلو له لارې ترلاسه کیږي Δh39 په خارجي ذخیرې کې د لوړوالي توپیر (1 شکل).
چیرته چې f د رګونو مجموعه ده، په مستطیل چینل کې د لامینار جریان لپاره د f = C/Re په توګه تعریف شوی، چیرې چې C د چینل د اړخ تناسب پورې اړه لري، L د مایکرو چینل اوږدوالی دی، Vav د مایکرو چینل دننه اوسط سرعت دی، Dh د چینل هیدرولیک قطر دی، د g – accelerity gracelity.د دې معادلې په کارولو سره، د اوسط چینل سرعت د لاندې مساواتو په کارولو سره محاسبه کیدی شي:


د پوسټ وخت: اګست-17-2022