د Nature.com د لیدنې لپاره مننه. هغه براوزر نسخه چې تاسو یې کاروئ محدود CSS ملاتړ لري. د غوره تجربې لپاره، موږ سپارښتنه کوو چې تاسو یو تازه شوی براوزر وکاروئ (یا په انټرنیټ اکسپلورر کې د مطابقت حالت غیر فعال کړئ). په عین حال کې، د دوامداره ملاتړ ډاډ ترلاسه کولو لپاره، موږ به سایټ پرته له سټایلونو او جاواسکریپټ څخه وړاندې کړو.
د مرغانو زرغونتیا د سپرم ذخیره کولو ټیوبونو (SST) کې د اوږدې مودې لپاره د کافي وړ سپرم ذخیره کولو وړتیا پورې اړه لري. هغه دقیق میکانیزم چې له مخې یې سپرماتوزا SST ته ننوځي، ژوند کوي او پریږدي لاهم جنجالي پاتې دی. د شارکاسي چرګانو سپرم د راټولیدو لپاره لوړ تمایل ښودلی، د ډیری حجرو لرونکي ګرځنده فلیمینټس بنډلونه جوړوي. په یوه مبهم فیلوپین ټیوب کې د سپرماتوزا حرکت او چلند د مشاهدې کولو ستونزې له امله، موږ د سپرماتوزا سره ورته د مایکرو فلوایډیک وسیله کارولې ترڅو د سپرماتوزا راټولیدو او حرکت مطالعه کړو. دا څیړنه بحث کوي چې د سپرم بنډلونه څنګه جوړیږي، څنګه حرکت کوي، او په SST کې د سپرم استوګنې غځولو کې د دوی ممکنه رول. موږ د سپرم سرعت او ریولوژیکي چلند وڅیړ کله چې د مایع جریان د هایدروسټاټیک فشار (د جریان کچه = 33 µm/s) لخوا د مایکرو فلوایډیک چینل دننه تولید شو. سپرماتوزوا د جریان پر وړاندې لامبو وهي (مثبت ریولوژي) او د سپرماتوزون بنډل سرعت د واحد سپرماتوزوا په پرتله د پام وړ کم شوی دی. د سپرم بنډلونه لیدل شوي چې په یوه حلقه کې حرکت کوي او د نورو واحد سپرمونو د استخدام سره اوږدوالی او ضخامت زیاتیږي. د سپرم بنډلونه د مایکرو فلوایډیک چینلونو د اړخ دیوالونو ته نږدې کیدل او تړل لیدل شوي ترڅو د مایع جریان سرعت له 33 µm/s څخه ډیر سره له مینځه لاړ نشي. د سپرم بنډلونه د مایکرو فلوایډیک چینلونو د اړخ دیوالونو ته نږدې کیدل او تړل لیدل شوي ترڅو د مایع جریان سرعت له 33 µm/s څخه ډیر سره له مینځه لاړ نشي. Было замечено, что пучки сперматозоидов приближаются и прилипают к боковым стенкам микрофлюидных каналов, чбтозымов. скоростью потока жидкости> 33 мкм / с. د سپرم بنډلونه لیدل شوي چې د مایکرو فلوایډیک چینلونو اړخ دیوالونو ته نږدې کیږي او ورسره نښلي ترڅو د مایع جریان کچه له 33 µm/s څخه ډیر نه وي.观察到精子束接近并粘附在微流体通道的侧壁，以避免被流体流速> 33 µm/s 扫过.33 µm/s 扫过. Было замечено, что пучки сперматозоидов приближаются и прилипают к боковым стенкам микрожидкостного канала, чботязоидов сперматозоидов жидкости со скоростью > 33 mkm/с. د سپرم بنډلونه لیدل شوي چې د مایکرو فلوایډیک چینل د اړخ دیوالونو ته نږدې کیږي او ورسره نښلي ترڅو د 33 µm/s څخه ډیر د مایع جریان لخوا له مینځه لاړ نشي.د سکین کولو او لیږد الکترون مایکروسکوپي څرګنده کړه چې د سپرم بنډلونه د پراخو غلیظو موادو لخوا ملاتړ شوي وو. ترلاسه شوي معلومات د شرکازي چرګ سپرماتوزووا ځانګړی خوځښت ښیي، او همدارنګه د سپرماتوزووا وړتیا چې راټول شي او ګرځنده بنډلونه جوړ کړي، کوم چې په SMT کې د سپرماتوزووا د اوږدمهاله ذخیره کولو په ښه پوهیدو کې مرسته کوي.
په انسانانو او ډیری څارویو کې د القاح ترلاسه کولو لپاره، سپرم او هګۍ باید په مناسب وخت کې د القاح ځای ته ورسیږي. له همدې امله، ملګرتیا باید د تخمدان څخه مخکې یا په هغه وخت کې ترسره شي. له بلې خوا، ځینې تی لرونکي ژوي، لکه سپي، او همدارنګه غیر تی لرونکي ډولونه، لکه حشرات، کب، خزندګان، او مرغان، سپرم په خپلو تناسلي ارګانونو کې د اوږدې مودې لپاره ذخیره کوي تر هغه چې د دوی هګۍ د القاح لپاره چمتو نشي (غیر متناسب القاح 1). مرغان د سپرماتوزووا د ژوند وړتیا ساتلو توان لري چې د 2-10 اونیو لپاره د هګیو القاح کولو وړتیا لري.
دا یو ځانګړی ځانګړتیا ده چې مرغان له نورو څارویو څخه توپیر کوي، ځکه چې دا د څو اونیو لپاره د یو ځل القاح وروسته د یو ځل ملګرتیا او تخمدان پرته د القاح لوړ احتمال چمتو کوي. د سپرم ذخیره کولو اصلي ارګان، چې د سپرم ذخیره کولو ټیوب (SST) په نوم یادیږي، د رحم د جنکشن په داخلي مخاطي پوښونو کې موقعیت لري. تر اوسه پورې، هغه میکانیزمونه چې له مخې یې سپرم د سپرم بانک ته ننوځي، ژوند کوي او وځي په بشپړ ډول نه دي پوه شوي. د پخوانیو مطالعاتو پراساس، ډیری فرضیې وړاندې شوي، مګر هیڅ یو یې تایید شوی نه دی.
فورمان۴ فرضیه وکړه چې سپرماتوزوا د SST اپیتیلیل حجرو (ریولوژي) کې موقعیت لرونکي پروټین چینلونو له لارې د مایع جریان د سمت په وړاندې د دوامداره oscillatory حرکت له لارې په SST غار کې خپل استوګنځی ساتي. ATP د دوامداره فلاجیلر فعالیت له امله کم شوی چې سپرم د SST لیمین کې ساتلو لپاره اړین دی او حرکت په پای کې کمیږي تر هغه چې سپرم د مایع جریان له لارې د سپرم بانک څخه بهر شي او د سپرم القاح کولو لپاره د پورته کیدونکي فیلوپین ټیوب لاندې نوی سفر پیل کړي. هګۍ (فورمان۴). د سپرم ذخیره کولو دا ماډل د SST اپیتیلیل حجرو کې د اکواپورین 2، 3 او 9 د معافیتي کیمیا کشف لخوا ملاتړ کیږي. تر نن نیټې پورې، د چرګانو د منی ریولوژي او د SST ذخیره کولو کې د هغې رول، د اندام سپرم انتخاب، او د سپرم سیالۍ په اړه مطالعات کم دي. په چرګانو کې، سپرم د طبیعي ملګرتیا وروسته اندام ته ننوځي، مګر د سپرماتوزووا له 80٪ څخه ډیر د ملګرتیا وروسته د اندام څخه بهر کیږي. دا وړاندیز کوي چې اندام په مرغیو کې د سپرم انتخاب لپاره لومړنی ځای دی. سربیره پردې، دا راپور ورکړل شوی چې د سپرماتوزووا څخه چې په مهبل کې القاح شوي د 1٪ څخه کم په SSTs2 کې پای ته رسیږي. په مهبل کې د چرګانو په مصنوعي القاح کې، د سپرماتوزووا شمیر چې SST ته رسیږي د تخمدان وروسته 24 ساعته زیاتیږي. تر اوسه پورې، د دې پروسې په جریان کې د سپرم انتخاب میکانیزم روښانه نه دی، او د سپرم حرکت ممکن د SST سپرم جذب کې مهم رول ولوبوي. د فیلوپین ټیوبونو د غټو او مبهم دیوالونو له امله، د مرغیو په فیلوپین ټیوبونو کې د سپرم حرکت مستقیم څارنه ستونزمنه ده. له همدې امله، موږ د القاح وروسته د سپرماتوزووا د SST ته د لیږد په اړه اساسي پوهه نلرو.
په دې وروستیو کې د تی لرونکو ژوو په تناسلي برخه کې د سپرم لیږد کنټرولولو لپاره ریولوژي د یو مهم فکتور په توګه پیژندل شوې ده. د حرکت سپرماتوزووا د اوسني وخت په مقابل کې د مهاجرت کولو وړتیا پراساس، ظفیراني او نورو 8 د کورا مایکرو فلوایډیک سیسټم کارولی ترڅو د قلم شوي منی نمونو څخه د حرکت سپرماتوزووا په غیر فعال ډول جلا کړي. د منی دا ډول ترتیب د طبي بانجھ والي درملنې او کلینیکي څیړنې لپاره اړین دی، او د دودیزو میتودونو په پرتله غوره دی چې وخت او کار ته اړتیا لري او کولی شي د سپرم مورفولوژي او جوړښتي بشپړتیا سره موافقت وکړي. په هرصورت، تر اوسه پورې، د چرګانو د تناسلي ارګانونو څخه د سپرم حرکت باندې د ترشحاتو اغیزې په اړه هیڅ مطالعه نه ده ترسره شوې.
د هغه میکانیزم په پام کې نیولو پرته چې په SST کې سپرم ذخیره کوي، ډیری څیړونکو لیدلي چې د چرګانو 9، 10، بټیو 2، او فیل مرغ 11 په SST کې اوسیدونکي سپرماتوزوا سر په سر راټولیږي ترڅو د سپرم بنډلونه جوړ کړي. لیکوالان وړاندیز کوي چې د دې راټولیدو او په SST کې د سپرماتوزوا اوږدمهاله ذخیره کولو ترمنځ اړیکه شتون لري.
ټینګاري او لیک ۱۲ د چرګانو د سپرم ترلاسه کونکي غدې کې د سپرماتوزووا ترمنځ د قوي اړیکې راپور ورکړ او پوښتنه یې وکړه چې ایا د مرغیو سپرماتوزووا د تی لرونکو سپرماتوزووا په څیر راټولیږي. دوی باور لري چې د واس ډیفرینز کې د سپرم ترمنځ ژورې اړیکې ممکن د هغه فشار له امله وي چې په یوه کوچنۍ ځای کې د لوی شمیر سپرم شتون له امله رامینځته کیږي.
کله چې د سپرماتوزووا چلند په تازه ځړول شوي شیشې سلایډونو کې ارزول کیږي، د راټولیدو لنډمهاله نښې لیدل کیدی شي، په ځانګړي توګه د منی د څاڅکو په څنډو کې. په هرصورت، راټولیدل ډیری وختونه د دوامداره حرکت سره تړلي گردش عمل لخوا ګډوډ شوي، کوم چې د دې پدیدې لنډمهاله طبیعت تشریح کوي. څیړونکو دا هم ولیدل چې کله چې کمونکی منی ته اضافه شو، اوږد شوي "د تار په څیر" حجروي مجموعې څرګندې شوې.
د سپرماتوزون د تقلید لپاره لومړني هڅې د ځړیدلي څاڅکي څخه د یو پتلي تار په لرې کولو سره ترسره شوې، چې په پایله کې یې د سپرم په څیر یو اوږد شوی ویسیکل د منی له څاڅکي څخه راوتلی و. سپرماتوزوا سمدلاسه د ویسیکل دننه په موازي ډول قطار شو، مګر ټول واحد په چټکۍ سره د 3D محدودیت له امله ورک شو. له همدې امله، د سپرماتوزوا د راټولیدو مطالعه کولو لپاره، دا اړینه ده چې د سپرماتوزوا حرکت او چلند په مستقیم ډول په جلا شوي سپرم ذخیره کولو ټیوبونو کې مشاهده شي، کوم چې ترلاسه کول ستونزمن دي. له همدې امله، دا اړینه ده چې یو وسیله رامینځته شي چې د سپرماتوزوا تقلید وکړي ترڅو د سپرم حرکت او راټولیدو چلند مطالعاتو ملاتړ وکړي. بریلارډ او نور 13 راپور ورکړی چې په بالغو چرګانو کې د سپرم ذخیره کولو ټیوبونو اوسط اوږدوالی 400-600 µm دی، مګر ځینې SSTs کولی شي تر 2000 µm پورې اوږد وي. میرو او اوګاساوارا ۱۴ د سیمینیفیرس غدې په لویو او غیر لویو سپرم ذخیره کولو ټیوبونو ویشلې، چې دواړه یې په اوږدوالي (~500 µm) او د غاړې پلنوالی (~38 µm) کې ورته وو، مګر د ټیوبونو د لیمین اوسط قطر په ترتیب سره 56.6 او 56.6 µm و. . په ترتیب سره 11.2 µm. په اوسني څیړنه کې، موږ د مایکرو فلوایډیک وسیله کارولې چې د چینل اندازه یې 200 µm × 20 µm (W × H) ده، چې د هغې کراس برخه د امپلیفایډ شوي SST سره نږدې ده. سربیره پردې، موږ د سپرم حرکت او د جریان مایع کې د راټولیدو چلند معاینه کړ، کوم چې د فورمین فرضیې سره مطابقت لري چې د SST اپیتیلیل حجرو لخوا تولید شوي مایع سپرم په لیمین کې د مخالف جریان (ریولوژیکي) لوري کې ساتي.
د دې مطالعې موخه دا وه چې په فیلوپین ټیوب کې د سپرماتوزووا د حرکت مشاهده کولو ستونزې له منځه یوسي او په متحرک چاپیریال کې د سپرماتوزووا د ریولوژي او چلند مطالعې له ستونزو څخه مخنیوی وشي. د مایکرو فلوایډیک وسیله کارول شوې وه چې د چرګ په تناسلي برخو کې د سپرم حرکت تقلید کولو لپاره هایدروسټاټیک فشار رامینځته کوي.
کله چې د نطفې د نمونې یوه څاڅکي (۱:۴۰) د مایکرو چینل وسیلې ته بار شي، د سپرم دوه ډوله حرکتونه پیژندل کیدی شي (جلا سپرم او تړلی سپرم). سربیره پردې، سپرماتوزا د جریان په وړاندې لامبو وهلو ته تمایل درلود (مثبت ریولوژي؛ ویډیو ۱، ۲). که څه هم د سپرم بنډلونو سرعت د یوازیني سپرم په پرتله ټیټ و (p < 0.001)، دوی د سپرم سلنه زیاته کړه چې مثبت ریوټیکسس ښیې (p < 0.001؛ جدول 2). که څه هم د سپرم بنډلونو سرعت د یوازیني سپرم په پرتله ټیټ و (p < 0.001)، دوی د سپرم سلنه زیاته کړه چې مثبت ریوټیکسس ښیې (p < 0.001؛ جدول 2). Хотя пучки сперматозоидов имели более низкую скорость, чем у одиночных сперматозоидов (p < 0,001), они увеличева низкую скорость сперматозоидов, демонстрирующих положительный реотаксис (p < 0,001; таблица 2). که څه هم د سپرماتوزووا بنډلونو د واحد سپرماتوزووا په پرتله ټیټ سرعت درلود (p < 0.001)، دوی د سپرماتوزووا سلنه زیاته کړه چې مثبت ریوټیکسس ښیې (p < 0.001؛ جدول 2).尽管精子束的速度低于孤独精子的速度（p < 0.001）، 但它们增加了显示阳性流变性的精子百分比）p <0.001；表2）.尽管 精子束 的 速度 低于 孤独 的 速度 （p <0.001） ，但 增加 了 显示 嵁性 显示百分比 （p <0.001 ； 2….….…..））) Хотя скорость пучков сперматозоидов была ниже, чем у одиночных сперматозоидов (p < 0,001), они увеличивали процозоидов положительной реологией (p <0,001; таблица 2). که څه هم د سپرم بنډلونو سرعت د واحد سپرماتوزووا په پرتله ټیټ و (p < 0.001)، دوی د مثبت ریولوژي سره د سپرماتوزووا سلنه زیاته کړه (p < 0.001؛ جدول 2).د واحد سپرماتوزوا او ټفټس لپاره مثبت ریولوژي په ترتیب سره نږدې 53٪ او 85٪ اټکل شوې ده.
لیدل شوي چې د شارکاسي چرګانو سپرماتوزوا د انزال وروسته سمدلاسه خطي بنډلونه جوړوي، چې لسګونه کسان پکې شامل دي. دا ټفټونه د وخت په تیریدو سره په اوږدوالي او ضخامت کې زیاتیږي او ممکن د څو ساعتونو لپاره په ویټرو کې پاتې شي مخکې لدې چې له مینځه لاړ شي (ویډیو 3). دا فلیمینټس بنډلونه د ایکیدنا سپرماتوزوا په څیر شکل لري چې د ایپیډیډیمیس په پای کې جوړیږي. د شارکاشي چرګ منی موندل شوی چې د راټولولو وروسته د یوې دقیقې څخه په کم وخت کې د راټولیدو او د جالیو بنډل جوړولو لپاره لوړ تمایل لري. دا بیمونه متحرک دي او د نږدې دیوالونو یا جامد شیانو سره د چپه کیدو توان لري. که څه هم د سپرم بنډلونه د سپرم حجرو سرعت کموي، دا روښانه ده چې په میکروسکوپي ډول دوی خپل خطي زیاتوي. د بنډلونو اوږدوالی په بنډلونو کې د راټول شوي سپرم شمیر پورې اړه لري. د بنډل دوه برخې جلا شوې وې: لومړنۍ برخه، د راټول شوي سپرم د آزاد سر په شمول، او وروستۍ برخه، د لکۍ او د سپرم ټوله لرې پای په شمول. د لوړ سرعت کیمرې (۹۵۰ fps) په کارولو سره، د بنډل په لومړۍ برخه کې د راټول شوي سپرماتوزوا آزاد سرونه لیدل شوي، چې د دوی د څرخیدونکي حرکت له امله د بنډل حرکت لپاره مسؤل دي، پاتې نور یې د هیلیکل حرکت سره بنډل ته کشوي (ویډیو ۴). په هرصورت، په اوږدو ټفټونو کې، دا لیدل شوي چې ځینې وړیا سپرم سرونه د بدن سره تړلي دي او د ټفټ وروستۍ برخه د ټفټ د هڅولو لپاره د وین په توګه عمل کوي.
پداسې حال کې چې د مایعاتو په ورو جریان کې، د سپرم بنډلونه یو بل سره موازي حرکت کوي، په هرصورت، دوی یو بل سره یوځای کیدل پیل کوي او هر هغه څه سره وصل کیږي چې لاهم پاتې دي، ترڅو د جریان سرعت زیاتیدو سره د جریان جریان له مینځه لاړ نشي. بنډلونه هغه وخت رامینځته کیږي کله چې یو څو سپرم حجرې یو بل ته نږدې کیږي، دوی په همغږۍ کې حرکت پیل کوي او د یو بل شاوخوا پوښل کیږي، او بیا په یوه چپچینې ماده پورې تړل کیږي. شکلونه 1 او 2 ښیې چې سپرم څنګه یو بل ته نږدې کیږي، یو جنکشن جوړوي کله چې لکۍ یو بل شاوخوا پوښل کیږي.
څېړونکو د سپرم ریولوژي د مطالعې لپاره په مایکرو چینل کې د مایع جریان رامینځته کولو لپاره هایدروسټاټیک فشار کارولی. د 200 µm × 20 µm (W × H) اندازه او د 3.6 µm اوږدوالی سره یو مایکرو چینل کارول شوی و. د کانټینرونو ترمنځ مایکرو چینلونه وکاروئ چې په پایونو کې سرنجونه نصب شوي وي. د چینلونو د ډیر څرګندیدو لپاره د خوړو رنګ کارول شوی و.
د انټر کنیکټ کیبلونه او لوازمات دیوال سره وتړئ. ویډیو د فیز کنټراسټ مایکروسکوپ سره اخیستل شوې. د هر عکس سره، د فیز کنټراسټ مایکروسکوپي او نقشه کولو انځورونه وړاندې کیږي. (الف) د دوه جریانونو ترمنځ اړیکه د هیلیکل حرکت له امله د جریان مقاومت کوي (سور تیر). (ب) د ټیوب بنډل او چینل دیوال ترمنځ اړیکه (سور تیر)، په ورته وخت کې دوی د دوو نورو بنډلونو سره وصل دي (ژېړ تیر). (ج) د مایکرو فلوایډیک چینل کې د سپرم بنډلونه یو بل سره وصل کول پیل کوي (سور تیر)، د سپرم بنډلونو جال جوړوي. (د) د سپرم بنډلونو د شبکې جوړول.
کله چې د منحل شوي سپرم یو څاڅکی په مایکرو فلوایډیک وسیله کې بار شو او یو جریان رامینځته شو، د سپرم بیم د جریان د سمت په خلاف حرکت کولو لپاره مشاهده شو. بنډلونه د مایکرو چینلونو دیوالونو سره په کلکه فټ کیږي، او د بنډلونو په لومړۍ برخه کې آزاد سرونه د دوی په وړاندې په کلکه فټ کیږي (ویډیو 5). دوی د دوی په لاره کې هر ډول ثابت ذراتو سره هم وصل کیږي، لکه کثافات، ترڅو د جریان لخوا د تیریدو په وړاندې مقاومت وکړي. د وخت په تیریدو سره، دا ټفټونه اوږده فلامینټونه کیږي چې نور واحد سپرماتوزوا او لنډ ټفټونه نیسي (ویډیو 6). لکه څنګه چې جریان ورو کیږي، د سپرم اوږدې کرښې د سپرم لینونو شبکه جوړول پیل کوي (ویډیو 7؛ شکل 2).
د لوړ جریان سرعت (V > 33 µm/s) کې، د تارونو سرپل حرکتونه د دې هڅې په توګه زیاتیږي چې د سپرم جوړونکو ډیری انفرادي بنډلونه ونیسي چې د جریان د روانیدونکي ځواک په وړاندې ښه مقاومت کوي. د لوړ جریان سرعت (V > 33 µm/s) کې، د تارونو سرپل حرکتونه د دې هڅې په توګه زیاتیږي چې د سپرم جوړونکو ډیری انفرادي بنډلونه ونیسي چې د جریان د روانیدونکي ځواک په وړاندې ښه مقاومت کوي. При высокой скорости потока (V > 33 мкм/с) спиралевидные движения нитей усиливаются, поскольку они пытаются поймавтельные. сперматозоидов, образующих пучки, которые лучше противостоят дрейфующей силе потока. د لوړ جریان په نرخونو (V > 33 µm/s) کې، د تارونو څرخیدونکي حرکتونه زیاتیږي ځکه چې دوی هڅه کوي ډیری انفرادي سپرماتوزوا ونیسي چې بنډلونه جوړوي چې د جریان د روان ځواک په وړاندې ښه مقاومت کولی شي.在高流速(V > 33 µm/s) د在 高 流速 (v> 33 µm/s) 时，的螺旋运动增加，以试图许多形成束单个貾廾图抵抗 的漂移力.. При высоких скоростях потока (V > 33 мкм/с) спиральное движение нитей увеличивается в попытке захватить множестево. сперматозоидов, образующих пучки, чтобы лучше сопротивляться силам дрейфа потока. د لوړ جریان نرخونو (V > 33 µm/s) کې، د فلامینټونو هیلیکل حرکت د ډیری انفرادي سپرماتوزوا د نیولو هڅه کې زیاتیږي چې د جریان د جریان د قوتونو په وړاندې ښه مقاومت کولو لپاره بنډلونه جوړوي.دوی دا هم هڅه وکړه چې مایکرو چینلونه د غاړې دیوالونو سره وصل کړي.
د سپرم بنډلونه د سپک مایکروسکوپي (LM) په کارولو سره د سپرم سرونو او د تاو شوي لکۍ د کلسترونو په توګه پیژندل شوي. د سپرم بنډلونه چې مختلف مجموعې لري د تاو شوي سرونو او فلاجیلر مجموعو، څو فیوز شوي سپرم لکۍ، د سپرم سرونه چې په لکۍ پورې تړلي دي، او د سپرم سرونه چې د خم شوي نیوکلی سره د څو فیوز شوي نیوکلی په توګه پیژندل شوي دي. د لیږد الکترون مایکروسکوپي (TEM). د سکین کولو الکترون مایکروسکوپي (SEM) وښودله چې د سپرم بنډلونه د سپرم سرونو پوښل شوي مجموعې وې او د سپرم مجموعې د پوښل شوي لکۍ سره تړلې شبکه ښودلې.
د سپرماتوزووا مورفولوژي او الټراسټرکچر، د سپرماتوزووا بنډلونو جوړښت د سپک مایکروسکوپي (نیم برخې)، سکین کولو الیکټرون مایکروسکوپي (SEM) او لیږد الیکټرون مایکروسکوپي (TEM) په کارولو سره مطالعه شو، د سپرم سمیرونه د اکریډین نارنجي سره رنګ شوي او د ایپی فلوروسینس مایکروسکوپي په کارولو سره معاینه شوي.
د سپرم سمیر رنګ د اکریډین نارنجي سره (انځور 3B) ښودلې چې د سپرم سرونه یو بل سره تړل شوي او د پټونکي موادو سره پوښل شوي وو، کوم چې د لویو ټوفټونو د جوړولو لامل شو (انځور 3D). د سپرم بنډلونه د سپرم مجموعو څخه جوړ شوي وو چې د تړلو لکیو شبکه یې درلوده (انځور 4A-C). د سپرم بنډلونه د ډیری سپرماتوزووا لکیو څخه جوړ شوي دي چې یوځای تړل شوي دي (انځور 4D). رازونه (انځور 4E،F) د سپرماتوزووا بنډلونو سرونه پوښلي وو.
د سپرماتوزووا بنډل جوړول د فیز کنټراسټ مایکروسکوپي او د سپرم سمیرونو په کارولو سره چې د اکریډین نارنجي سره رنګ شوي دي، ښودل شوي چې د سپرم سرونه یو بل سره تړلي دي. (الف) د سپرم لومړني ټفټ جوړښت د سپرم (سپین حلقه) او درې سپرم (ژېړ حلقه) سره پیل کیږي، چې سرپل یې له لکۍ څخه پیل کیږي او په سر کې پای ته رسیږي. (ب) د سپرم سمیر عکس مایکروګراف چې د اکریډین نارنجي سره رنګ شوی وي چې د سپرم سرونه (تیرونه) ښیې. خارجیدل سر (ونه) پوښي. میګنیفیکیشن × 1000. (ج) د مایکرو فلوایډیک چینل کې د جریان لخوا لیږدول شوي لوی بیم پراختیا (په 950 fps کې د لوړ سرعت کیمرې په کارولو سره). (د) د سپرم سمیر مایکروګراف چې د اکریډین نارنجي سره رنګ شوی وي چې لوی ټفټونه (تیرونه) ښیې. میګنیفیکیشن: × 200.
د سپرم بیم او د سپرم سمیر سکین کول د الکترون مایکروګراف. (A، B، D، E) د سپرماتوزووا ډیجیټل رنګ سکین کولو الکترون مایکروګرافونه دي، او C او F د اکریډین نارنجي رنګ شوي سپرم سمیرونو مایکروګرافونه دي چې د څو سپرماتوزووا ضمیمه ښیې چې د کاډال جال پوښل شوی. (AC) د سپرم مجموعې د تړلو لکیو (تیرو) شبکې په توګه ښودل شوي. (D) د څو سپرماتوزووا چپکیدل (د چپکونکي مادې سره، ګلابي خاکه، تیر) د لکۍ شاوخوا پوښل. (E او F) د سپرم سر مجموعې (نښې) د چپکونکي موادو سره پوښل شوي (نښې). سپرماتوزووا د څو ورټیکس په څیر جوړښتونو سره بنډلونه جوړ کړل (F). (C) ×400 او (F) ×200 لویوالی.
د لیږد الکترون مایکروسکوپي په کارولو سره، موږ وموندله چې د سپرم بنډلونه تړلي لکۍ لري (انځور 6A، C)، سرونه د لکۍ سره تړلي دي (انځور 6B)، یا سرونه د لکۍ سره تړلي دي (انځور 6D). په بنډل کې د سپرماتوزووا سرونه منحني دي، چې په دوه برخه کې اټومي سیمې (انځور 6D) وړاندې کوي. د چیرا بنډل کې، سپرماتوزووا یو تاو شوی سر درلود چې دوه اټومي سیمې او څو فلاجیلر سیمې (انځور 5A) لري.
د ډیجیټل رنګ الکترون مایکروګراف چې د سپرم بنډل کې د نښلونکو لکیو او د سپرم سرونو سره د نښلولو موادو ښودنه کوي. (الف) د سپرماتوزووا د لوی شمیر سره نښلول شوی لکۍ. وګورئ چې لکۍ په پورټریټ (غشی) او منظره (غشی) پروجیکشنونو کې څنګه ښکاري. (ب) د سپرم سر (غشی) د لکۍ (غشی) سره وصل دی. (ج) د سپرم څو لکۍ (غشی) سره وصل دي. (د) د جمع کولو مواد (AS، نیلي) څلور سپرم سرونه (ارغواني) سره وصل کوي.
د سکین کولو الکترون مایکروسکوپي د سپرم بنډلونو کې د سپرم سرونو کشف کولو لپاره کارول شوې وه چې د سراو یا غشا سره پوښل شوي وو (شکل 6B)، دا په ګوته کوي چې د سپرم بنډلونه د حجروي موادو لخوا تړل شوي وو. راټول شوي مواد د سپرم سر کې متمرکز وو (د جیلی فش سر په څیر مجلس؛ شکل 5B) او په لرې واټن کې پراخ شوي، کله چې د اکریډین نارنجي سره رنګ شي نو د فلوروسینس مایکروسکوپي لاندې یو روښانه ژیړ بڼه ورکوي (شکل 6C). دا ماده د سکین کولو مایکروسکوپ لاندې په څرګنده توګه لیدل کیږي او د باندر په توګه ګڼل کیږي. نیمه پتلي برخې (شکل 5C) او د سپرم داغونه چې د اکریډین نارنجي سره رنګ شوي وو د سپرم بنډلونه یې وښودل چې په ګڼه توګه بسته شوي سرونه او تاو شوي لکۍ لري (شکل 5D).
مختلف فوتو مایکروګرافونه چې د سپرم سرونو او تاو شویو لکیو راټولول ښیي چې د مختلفو میتودونو په کارولو سره کارول کیږي. (الف) د سپرم بنډل د کراس سیکشنل ډیجیټل رنګ لیږد الکترون مایکروګراف چې د دوه برخو نیوکلیوس (نیلي) او څو فلاجیلر برخو (شنه) سره د کویل شوي سپرم سر ښیې. (ب) د ډیجیټل رنګ سکین کولو الکترون مایکروګراف چې د جیلیفش په څیر سپرم سرونو (تیرونو) کلستر ښیې چې پوښل شوي ښکاري. (ج) نیمه نری برخه چې د سپرم سرونه (تیرونه) او تاو شوي لکۍ (تیرونه) ښیې. (د) د سپرم د سمیر مایکروګراف چې د اکریډین نارنجي سره رنګ شوی د سپرم سرونو (تیرونو) او تاو شوي تړل شوي لکۍ (تیرونو) مجموعې ښیې. په یاد ولرئ چې یو چپچینی ماده (S) د سپرماتوزون سر پوښي. (د) × 1000 لویوالی.
د لیږد الکترون مایکروسکوپي (انځور 7A) په کارولو سره، دا هم یادونه وشوه چې د سپرم سرونه تاو شوي وو او نیوکلی یې یو سرپل شکل درلود، لکه څنګه چې د سپرم سمیرونو لخوا تایید شوی چې د اکریډین نارنجي سره رنګ شوي او د فلوروسینس مایکروسکوپي (انځور 7B) په کارولو سره معاینه شوي.
(الف) د ډیجیټل رنګ لیږد الکترون مایکروګراف او (ب) د اکریډین نارنجي رنګ شوي سپرم سمیر چې د سپرم سرونو او لکیو نښلول ښیې (تیرونه). (ب) × ۱۰۰۰ لویوالی.
یوه په زړه پورې موندنه دا ده چې د شرکازي سپرم د ګرځنده فلیمینټو بنډلونو جوړولو لپاره راټولیږي. د دې بنډلونو ځانګړتیاوې موږ ته اجازه راکوي چې په SST کې د سپرماتوزووا جذب او ذخیره کولو کې د دوی ممکنه رول درک کړو.
د ملګرتیا وروسته، سپرم اندام ته ننوځي او د انتخاب له یوې سختې پروسې څخه تیریږي، چې په پایله کې یوازې محدود شمیر سپرمونه SST ته ننوځي 15,16. تر اوسه پورې، هغه میکانیزمونه چې له لارې سپرم SST ته ننوځي او وځي روښانه ندي. په چرګانو کې، سپرماتوزا د 2 څخه تر 10 اونیو پورې د اوږدې مودې لپاره په SST کې زیرمه کیږي، چې د نوعې پورې اړه لري 6. په SST کې د ذخیره کولو پرمهال د منی د حالت په اړه شخړه پاتې ده. ایا دوی په حرکت کې دي یا په آرام کې؟ په بل عبارت، د سپرم حجرات څنګه د دومره اوږدې مودې لپاره په SST کې خپل موقعیت ساتي؟
فورمان۴ وړاندیز وکړ چې د SST استوګنځی او اخراج د سپرم د حرکت له مخې تشریح کیدی شي. لیکوالان فرض کوي چې سپرم د SST اپیتیلیم لخوا رامینځته شوي مایع جریان په وړاندې د لامبو وهلو سره خپل موقعیت ساتي او سپرم د SST څخه بهر کیږي کله چې د دوی سرعت د هغه نقطې څخه ښکته شي چې دوی د انرژۍ نشتوالي له امله بیرته حرکت پیل کوي. زانيبوني۵ د SST اپیتیلیم حجرو په اپیکل برخه کې د اکواپورین 2، 3، او 9 شتون تایید کړ، کوم چې ممکن په غیر مستقیم ډول د فورمان د سپرم ذخیره کولو ماډل ملاتړ وکړي. په اوسني څیړنه کې، موږ وموندله چې د شارکاشي سپرماتوزووا نږدې نیمایي په جریان کې مایع کې مثبت ریولوژي ښیې، او دا چې راټول شوي سپرم بنډلونه د سپرماتوزووا شمیر زیاتوي چې مثبت ریولوژي ښیې، که څه هم راټولیدل دوی ورو کوي. څنګه سپرم حجرې د مرغۍ د فیلوپین ټیوب څخه د القاح ځای ته سفر کوي په بشپړ ډول نه پوهیږي. په تی لرونکو حیواناتو کې، فولیکولر مایع کیمو سپرماتوزووا جذبوي. په هرصورت، داسې انګیرل کیږي چې کیموټریکټینټونه سپرماتوزوا ته د اوږد واټن ته د رسیدو لپاره لارښوونه کوي. له همدې امله، نور میکانیزمونه د سپرم لیږد مسؤلیت لري. د سپرم وړتیا چې د فالوپین ټیوب مایع په وړاندې چې د ملګرتیا وروسته خوشې کیږي د سپرم په نښه کولو کې یو لوی فاکتور ګڼل کیږي. پارکر 17 وړاندیز وکړ چې سپرماتوزوا په مرغیو او خزندګانو کې د سلیري جریان په وړاندې د لامبو وهلو له لارې د تخمدانونو څخه تیریږي. که څه هم دا په مرغیو کې په تجربوي ډول نه دی ښودل شوی، اډولفي 18 لومړی کس و چې وموندله چې د مرغیو سپرم مثبت پایلې ورکوي کله چې د فلټر کاغذ پټې سره د پوښ سلیپ او سلایډ ترمنځ د مایع یو پتلی طبقه رامینځته شي. ریولوژي. هینو او یاناګیماچي [19] د موږک تخمدان-ټیوب-رحم کمپلیکس په پرفیوژن حلقه کې ځای په ځای کړ او د رنګ 1 µl یې په استممس کې داخل کړ ترڅو په فالوپین ټیوبونو کې د مایع جریان لیدل شي. دوی په فالوپین ټیوب کې د انقباض او آرامۍ خورا فعال حرکت ولید، په کوم کې چې ټول رنګ بالونه په ثابت ډول د فالوپین ټیوب امپولا ته حرکت کوي. لیکوالان د سپرم د لوړوالي او القاح لپاره د ښکته څخه پورته فیلوپین ټیوبونو ته د ټیوب د مایع جریان اهمیت باندې ټینګار کوي. بریلارډ 20 راپور ورکړی چې په چرګانو او فیل مرغانو کې، سپرماتوزوا د اندام له ننوتلو څخه د فعال حرکت له لارې مهاجرت کوي، چیرته چې دوی زیرمه کیږي، د رحم-اندام جنکشن ته، چیرته چې دوی زیرمه کیږي. په هرصورت، دا حرکت د رحم د جنکشن او انفنډیبولم ترمنځ اړین ندي ځکه چې سپرماتوزوا د غیر فعال بې ځایه کیدو له لارې لیږدول کیږي. د دې پخوانیو سپارښتنو او په اوسني مطالعې کې ترلاسه شوي پایلو په پوهیدو سره، دا فرض کیدی شي چې د سپرماتوزوا وړتیا د پورته جریان حرکت کول (ریولوژي) یو له هغو ځانګړتیاو څخه دی چې د انتخاب پروسه پر بنسټ والړ ده. دا د اندام له لارې د سپرماتوزوا تیریدنه او د ذخیره کولو لپاره CCT ته د دوی ننوتل ټاکي. لکه څنګه چې فورمان 4 وړاندیز کړی، دا ممکن د سپرم د SST او د هغې د استوګنې ځای ته د یوې مودې لپاره د ننوتلو او بیا د وتلو پروسه هم اسانه کړي کله چې د دوی سرعت ورو شي.
له بلې خوا، ماتسوزاکي او ساسنامي ۲۱ وړاندیز وکړ چې د مرغیو سپرماتوزوا د نارینه او ښځینه تناسلي لارو کې د حرکت له استراحت څخه حرکت ته بدلون مومي. په SST کې د میشت سپرم حرکت مخنیوی د سپرم د اوږدې ذخیره کولو وخت تشریح کولو او بیا د SST پریښودو وروسته د بیا ژوندي کیدو لپاره وړاندیز شوی. د هایپوکسیک شرایطو لاندې، ماتسوزاکي او نور. ۱ په SST کې د لیکټیټ لوړ تولید او خوشې کیدو راپور ورکړی، کوم چې ممکن د میشت سپرم حرکت د مخنیوي لامل شي. پدې حالت کې، د سپرم ریولوژي اهمیت د سپرماتوزووا په انتخاب او جذب کې منعکس کیږي، نه د دوی په ذخیره کې.
د سپرم د راټولیدو نمونه په SST کې د سپرم د اوږدې مودې لپاره د منلو وړ توضیح ګڼل کیږي، ځکه چې دا په چرګانو کې د سپرم ساتلو یوه عامه نمونه ده 2,22,23. باکسټ او نورو 2 مشاهده کړه چې ډیری سپرماتوزووا یو بل سره تړلي وو، فاسکیولر مجموعې جوړوي، او واحد سپرماتوزووا په ندرت سره په کویل CCM کې موندل شوي. له بلې خوا، وین او نورو 24 په چرګانو کې د SST لیمین کې ډیر خپاره شوي سپرماتوزووا او لږ سپرماتوزووا ټفټونه ولیدل. د دې مشاهدو پراساس، دا فرض کیدی شي چې د سپرم راټولیدو تمایل د مرغیو او په ورته انزال کې د سپرماتوزووا ترمنځ توپیر لري. سربیره پردې، وان کری او نورو 9 وړاندیز وکړ چې د راټولیدو سپرماتوزووا تصادفي جلا کول د فیلوپین ټیوب لیمین ته د سپرماتوزووا د تدریجي ننوتلو مسؤلیت لري. د دې فرضیې له مخې، د ټیټ راټولیدو ظرفیت سره سپرماتوزووا باید لومړی له SST څخه وباسي. په دې شرایطو کې، د سپرماتوزووا د راټولیدو وړتیا ممکن په ناپاکو مرغیو کې د سپرم سیالۍ په پایله اغیزه وکړي. سربیره پردې، څومره چې راټول شوي سپرم جلا کیږي، هومره زرغونتیا اوږد ساتل کیږي.
که څه هم د سپرماتوزووا ټولګه او په بنډلونو کې راټولیدل په څو مطالعاتو کې لیدل شوي دي 2,22,24، دوی د SST دننه د دوی د کینیماتیک مشاهدې پیچلتیا له امله په تفصیل سره تشریح شوي ندي. په ویټرو کې د سپرم راټولیدو مطالعې لپاره ډیری هڅې شوي دي. پراخه مګر لنډمهاله راټولیدل هغه وخت لیدل شوي کله چې نری تار د ځړیدلي تخم څاڅکي څخه لرې شو. دا د دې حقیقت لامل کیږي چې یو اوږد شوی بلبل له څاڅکي څخه راوتلی، د سیمینل غدې تقلید کوي. د 3D محدودیتونو او لنډ څاڅکي وچولو وختونو له امله، ټول بلاک په چټکۍ سره خراب شو 9. په اوسني څیړنه کې، د شارکاشي چرګانو او مایکرو فلوایډیک چپس په کارولو سره، موږ وکولی شو تشریح کړو چې دا ټفټونه څنګه جوړیږي او څنګه حرکت کوي. د سپرم بنډلونه د منی راټولولو وروسته سمدلاسه جوړ شوي او وموندل شول چې په سرپل کې حرکت کوي، کله چې په جریان کې شتون ولري مثبت ریولوژي ښیې. سربیره پردې، کله چې په میکروسکوپي ډول لیدل کیږي، د سپرم بنډلونه د جلا شوي سپرماتوزووا په پرتله د حرکت کولو خطي زیاتوالي لپاره لیدل شوي. دا وړاندیز کوي چې د سپرم راټولیدل ممکن د SST ننوتلو دمخه واقع شي او د سپرم تولید د فشار له امله یوې کوچنۍ سیمې پورې محدود نه دی لکه څنګه چې مخکې وړاندیز شوی و (ټینګاري او لیک 12). د ټفټ جوړیدو په جریان کې، سپرماتوزووا په همغږۍ کې لامبو وهي تر هغه چې دوی یو جنکشن جوړ کړي، بیا د دوی لکۍ د یو بل شاوخوا پوښل کیږي او د سپرماتوزوون سر آزاد پاتې کیږي، مګر د سپرماتوزوون لکۍ او لرې برخه د چپچینې مادې سره یوځای پاتې کیږي. له همدې امله، د لیګامینټ آزاد سر د حرکت مسؤلیت لري، د لیګامینټ پاتې برخه کشوي. د سپرم بنډلونو سکین کولو الکترون مایکروسکوپي د سپرم سرونه وښودل چې د ډیری چپچینې موادو سره پوښل شوي، وړاندیز کوي چې د سپرم سرونه په آرامۍ بنډلونو کې وصل شوي، کوم چې ممکن د ذخیره کولو ځای (SST) ته له رسیدو وروسته پیښ شوي وي.
کله چې د سپرم سمیر د اکریډین نارنجي سره رنګ شي، د سپرم حجرو شاوخوا بهر حجروي چپکونکي مواد د فلوروسینټ مایکروسکوپ لاندې لیدل کیدی شي. دا ماده د سپرم بنډلونو ته اجازه ورکوي چې د شاوخوا سطحو یا ذراتو سره وصل شي او وصل شي ترڅو دوی د شاوخوا جریان سره نه تیریږي. په دې توګه، زموږ مشاهدې د ګرځنده بنډلونو په بڼه د سپرماتوزووا د چپکولو رول ښیې. د جریان په وړاندې د لامبو وهلو او نږدې سطحو سره د چپکولو وړتیا سپرم ته اجازه ورکوي چې په SST کې اوږد پاتې شي.
روتشیلډ۲۵ د هیموسایتومیټري کیمره کارولې ترڅو د غواګانو د منی د څاڅکي په تعلیق کې د لامبو وهلو ویش مطالعه کړي، د مایکروسکوپ د عمودی او افقی نظری محور دواړو سره د کیمرې له لارې عکس مایکروګرافونه واخلي. پایلو وښودله چې سپرماتوزوا د چیمبر سطحې ته متوجه شوي. لیکوالان وړاندیز کوي چې ممکن د سپرم او سطحې ترمنځ هایدروډینامیک تعاملات وي. د دې په پام کې نیولو سره، د شارکاشي چرګ منی د چپچینې ټوفټونو جوړولو وړتیا سره، دا ممکن د دې احتمال زیات کړي چې منی به د SST دیوال سره وصل شي او د اوږدې مودې لپاره زیرمه شي.
Bccetti او Afzeliu26 راپور ورکړ چې د سپرم ګلایکوکالیکس د ګیمیټ پیژندلو او راټولیدو لپاره اړین دی. فورمان 10 مشاهده کړه چې د نیورامینیډیز سره د مرغیو د منی درملنې سره د ګلایکوپروټین-ګلایکولیپیډ پوښونو کې د α-ګلایکوسیډیک بانډونو هایدرولیسس د سپرم حرکت اغیزه کولو پرته د زیږون کمیدو لامل شوی. لیکوالان وړاندیز کوي چې د ګلایکوکالیکس باندې د نیورامینیډیز اغیز د رحم-اندام جنکشن کې د سپرم تسلسل زیانمنوي، په دې توګه د زیږون کمول. د دوی مشاهدې دا احتمال له پامه نشي غورځولی چې د نیورامینیډیز درملنه ممکن د سپرم او اووسایټ پیژندنه کمه کړي. فورمان او اینګل 10 وموندله چې زرغونتیا کمه شوه کله چې چرګان د نیورامینیډیز سره درملنه شوي منی سره د اندام نه دننه تخمدان شوي. په هرصورت، د نیورامینیډیز درملنې شوي سپرم سره IVF د کنټرول چرګانو په پرتله په زیږون اغیزه نه ده کړې. لیکوالان دې نتیجې ته ورسیدل چې د سپرم غشا شاوخوا د ګلایکوپروټین-ګلایکولیپیډ پوښ کې بدلونونو د سپرم د القاح کولو وړتیا کمه کړې، د رحم-اندام په جنکشن کې د سپرم د جذب مخه نیسي، چې په پایله کې د رحم-اندام د جنکشن سرعت له امله د سپرم ضایعات زیاتوي، مګر د سپرم او هګۍ پیژندنه اغیزه نه کوي.
په فیل مرغانو کې باکسټ او باوچن ۱۱ د SST په لومین کې کوچني ویسیکلونه او د غشا ټوټې وموندلې او ولیدل چې ځینې دانې د سپرم غشا سره یوځای شوي دي. لیکوالان وړاندیز کوي چې دا اړیکې ممکن په SST کې د سپرماتوزووا اوږدمهاله ذخیره کولو کې مرسته وکړي. په هرصورت، څیړونکو د دې ذراتو سرچینه مشخص نه کړه، ایا دوی د CCT اپیتیلیل حجرو لخوا پټ شوي، د نارینه تناسلي سیسټم لخوا تولید او پټ شوي، یا پخپله د سپرم لخوا تولید شوي. همدارنګه، دا ذرات د راټولیدو مسؤلیت لري. ګروټزنر او نور 27 راپور ورکړ چې د ایپیډیډیمال اپیتیلیل حجرې یو ځانګړی پروټین تولید او پټوي چې د واحد-سور سیمینل ټراکټونو جوړولو لپاره اړین دی. لیکوالان دا هم راپور ورکوي چې د دې بنډلونو خپریدل د ایپیډیډیمال پروټینونو تعامل پورې اړه لري. نیکسن او نور 28 وموندله چې اډینیکسا یو پروټین، اسیدیک سیستین بډایه اوستیونیکټین پټوي؛ SPARC په لنډو چونچیو ایکیدنا او پلیټیپس کې د سپرم ټفټونو په جوړولو کې دخیل دی. د دې بیمونو خپریدل د دې پروټین له لاسه ورکولو سره تړاو لري.
په اوسني څیړنه کې، د الکترون مایکروسکوپي په کارولو سره د الټراسټرکچر تحلیل ښودلې چې سپرماتوزوا د ډیرو غلیظو موادو سره تړلی دی. دا مواد د هغه راټولیدو مسؤلیت ګڼل کیږي چې د تړلو سرونو ترمنځ او شاوخوا کې راټولیږي، مګر د لکۍ په سیمه کې په ټیټ غلظت کې. موږ فرض کوو چې دا راټولیدونکی ماده د نارینه تناسلي سیسټم (ایپیډیډیمیس یا واس ډیفرینز) څخه د منی سره یوځای خارج کیږي، ځکه چې موږ ډیری وختونه د انزال په جریان کې د لمف او سیمینل پلازما څخه جلا کیدونکي منی ګورو. راپور ورکړل شوی چې لکه څنګه چې د مرغیو سپرماتوزوا د ایپیډیډیمیس او واس ډیفرینز څخه تیریږي، دوی د پختوالي پورې اړوند بدلونونو څخه تیریږي چې د پروټینونو تړلو او د پلازما لیما سره تړلي ګلایکوپروټینونو ترلاسه کولو وړتیا ملاتړ کوي. په SST کې د میشت سپرم غشاګانو باندې د دې پروټینونو دوام وړاندیز کوي چې دا پروټینونه ممکن د سپرم غشا ثبات 30 ترلاسه کولو اغیزه وکړي او د دوی زیږون 31 وټاکي. احمد او نورو راپور ورکړی چې د نارینه تناسلي سیسټم له مختلفو برخو څخه ترلاسه شوي سپرماتوزوا (د خصیو څخه تر لرې واټن پورې) د مایع ذخیره کولو شرایطو لاندې د ژوند وړتیا کې تدریجي زیاتوالی ښودلی، پرته له دې چې د ذخیره کولو تودوخې ته پام وشي، او په چرګانو کې ژوند وړتیا هم د مصنوعي القاح وروسته په فیلوپین ټیوبونو کې زیاتیږي.
د شارکاشي چرګانو سپرم ټفټونه د نورو ډولونو لکه ایکډنا، پلاټیپوس، لرګي موږکان، د هوسۍ موږکان، او ګیني سور په پرتله مختلف ځانګړتیاوې او دندې لري. په شارکاسي چرګانو کې، د سپرماتوزووا بنډلونو جوړښت د واحد سپرماتوزووا په پرتله د دوی د لامبو سرعت کم کړ. په هرصورت، دې بنډلونو د ریولوژیکي پلوه مثبت سپرماتوزووا سلنه زیاته کړه او د سپرماتوزووا وړتیا یې زیاته کړه چې په متحرک چاپیریال کې ځان ثبات کړي. په دې توګه، زموږ پایلې پخوانۍ وړاندیز تاییدوي چې په SST کې د سپرم راټولیدل د اوږدې مودې سپرم ذخیره کولو سره تړاو لري. موږ دا هم فرض کوو چې د سپرم د ټفټونو جوړولو تمایل ممکن په SST کې د سپرم د ضایع کیدو کچه کنټرول کړي، کوم چې ممکن د سپرم سیالۍ پایله بدله کړي. د دې انګیرنې له مخې، د ټیټ راټولیدو ظرفیت سره سپرماتوزووا لومړی SST خوشې کوي، پداسې حال کې چې د لوړ راټولیدو ظرفیت سره سپرماتوزووا ډیری اولادونه تولیدوي. د واحد سوري سپرم بنډلونو جوړښت ګټور دی او د مور او پلار تناسب اغیزه کوي، مګر یو مختلف میکانیزم کاروي. په ایکیدنا او پلیټیپوس کې، سپرماتوزوا د بیم د مخکینۍ سرعت د زیاتوالي لپاره یو بل سره موازي تنظیم شوي دي. د ایکیدنا بنډلونه د واحد سپرماتوزوا په پرتله شاوخوا درې ځله ګړندي حرکت کوي. داسې انګیرل کیږي چې په ایکیدنا کې د داسې سپرم ټوفټونو جوړول د تسلط ساتلو لپاره یو ارتقايي تطبیق دی، ځکه چې ښځینه جنسي اړیکې لري او معمولا د څو نارینه وو سره ملګرتیا کوي. له همدې امله، د مختلفو انزال شویو سپرماتوزوا د هګۍ القاح لپاره سخته سیالي کوي.
د شارکاسي چرګانو د ګډ سپرماتوزووا د فیز کنټراسټ مایکروسکوپي په کارولو سره لیدل اسانه دي، کوم چې ګټور ګڼل کیږي ځکه چې دا د سپرماتوزووا د چلند اسانه مطالعه ته اجازه ورکوي په ویټرو کې. هغه میکانیزم چې د سپرم ټوفټ جوړښت یې په شارکاسي چرګانو کې د تکثیر هڅوي هم د هغه څخه توپیر لري چې په ځینو پلاسینټل تی لرونکو کې لیدل کیږي چې د همکارۍ سپرم چلند استازیتوب کوي لکه د لرګیو موږکان، چیرې چې ځینې سپرماتوزووا هګیو ته رسیږي، د نورو اړوندو اشخاصو سره مرسته کوي چې د دوی هګیو ته ورسیږي او زیان ورسوي. ځان ثابت کړي. د خیرخواهۍ چلند. ځان القاح 34. په سپرماتوزووا کې د همکارۍ چلند یوه بله بیلګه په هرن موږکانو کې وموندل شوه، چیرې چې سپرماتوزووا وکولی شول چې د جینیاتي پلوه اړونده سپرماتوزووا سره وپیژني او یوځای کړي او د غیر اړونده سپرماتوزووا په پرتله د دوی سرعت زیاتولو لپاره د همکارۍ ګروپونه جوړ کړي. 35.
په دې څیړنه کې ترلاسه شوي پایلې د SWS کې د سپرماتوزووا د اوږدې مودې ذخیره کولو په اړه د فومن د تیوري سره مخالفت نه کوي. څیړونکي راپور ورکوي چې سپرم حجرات د اوږدې مودې لپاره د SST په لیکه کې د اپیتیلیل حجرو په جریان کې حرکت ته دوام ورکوي، او د یوې ټاکلې مودې وروسته، د سپرم حجرو د انرژۍ زیرمې کمیږي، چې په پایله کې د سرعت کمښت رامینځته کیږي، کوم چې د کوچني مالیکولر وزن لرونکي موادو اخراج ته اجازه ورکوي. د SST د لیمن څخه د مایع جریان سره د سپرماتوزووا انرژي د فیلوپین ټیوب غار. په اوسني څیړنه کې، موږ ولیدل چې د واحد سپرم نیمایي د روان مایعاتو په وړاندې د لامبو وهلو وړتیا ښودلې، او په بنډل کې د دوی چپکولو د مثبت ریولوژي ښودلو وړتیا زیاته کړې. سربیره پردې، زموږ معلومات د ماتسوزاکي او نورو سره مطابقت لري. 1 چا راپور ورکړ چې په SST کې د لیکټیټ سرایت زیاتوالی ممکن د اوسیدونکي سپرم حرکت مخه ونیسي. په هرصورت، زموږ پایلې د سپرم حرکت لیګامینټونو جوړښت او د دوی ریولوژیکي چلند د مایکرو چینل دننه د متحرک چاپیریال په شتون کې تشریح کوي ترڅو په SST کې د دوی چلند روښانه کړي. راتلونکې څېړنې ممکن د راټولوونکي اجنټ کیمیاوي جوړښت او اصل په ټاکلو تمرکز وکړي، کوم چې بې له شکه به د څیړونکو سره د مایع منی ذخیره کولو او د زیږون موده زیاتولو لپاره د نویو لارو په رامینځته کولو کې مرسته وکړي.
په څیړنه کې پنځلس ۳۰ اونیو عمر لرونکي نر شارکاسي (همجنس باز غالب؛ نا نا) د سپرم ډونرانو په توګه غوره شوي وو. مرغۍ د مصر د اشیت ولایت د اشیت پوهنتون د کرنې پوهنځي د څیړنې چرګانو فارم کې پالل شوي وو. مرغۍ په انفرادي پنجرو کې ځای پر ځای شوي وې (۳۰ x ۴۰ x ۴۰ سانتي متره)، د رڼا پروګرام (۱۶ ساعته رڼا او ۸ ساعته تیاره) لاندې او یو خواړه ورکړل شوي وو چې ۱۶۰ ګرامه خام پروټین، ۲۸۰۰ کیلوکالوري میټابولیز وړ انرژي، ۳۵ ګرامه کلسیم هر یو لري. په هر کیلوګرام رژیم کې ۵ ګرامه شته فاسفورس.
د معلوماتو له مخې، د ۳۶، ۳۷، د معدې د مساج له لارې د نارینه وو څخه منی راټول شوی و. د ۱۵ نارینه وو څخه د منی ټولټال ۴۵ نمونې په ۳ ورځو کې راټولې شوې. منی (n = ۱۵/ورځ) سمدلاسه د بیلسویل چرګانو د منی د حل سره ۱:۱ (v:v) حل شو، چې پکې پوټاشیم ډای فاسفیټ (۱.۲۷ ګرامه)، مونوسوډیم ګلوټامیټ مونو هایدریټ (۰.۸۶۷ ګرامه)، فرکتوز (۰.۵ ډ) انهایډروس سوډیم شامل دي. اسټیټ (۰.۴۳ ګرامه)، ټریس (هایډروکسی میتیل) امینو میتان (۰.۱۹۵ ګرامه)، پوټاشیم سیټریټ مونو هایدریټ (۰.۰۶۴ ګرامه)، پوټاشیم مونو فاسفیټ (۰.۰۶۵ ګرامه)، مګنیزیم کلورایډ (۰.۰۳۴ ګرامه) او H2O (۱۰۰ ملی لیتر)، pH = ۷، ۵، osmolarity ۳۳۳ mOsm/kg۳۸. د منی د ښه کیفیت (رطوبت) ډاډ ترلاسه کولو لپاره د منحل شوي منی نمونې لومړی د سپک مایکروسکوپ لاندې معاینه شوې او بیا د اوبو په حمام کې د 37 درجو سانتی ګراد په تودوخه کې زیرمه شوې ترڅو د راټولولو وروسته نیم ساعت کې وکارول شي.
د سپرماتوزووا حرکيات او ریولوژي د مایکرو فلوایډیک وسیلو د سیسټم په کارولو سره تشریح شوي. د منی نمونې په بیلټسویل ایویان منی ډیلوینټ کې 1:40 ته نور هم کمې شوې، په مایکرو فلوایډیک وسیله کې بار شوې (لاندې وګورئ)، او حرکي پیرامیټرې د کمپیوټر شوي منی تحلیل (CASA) سیسټم په کارولو سره ټاکل شوي چې دمخه د مایکرو فلوایډیک ځانګړتیا لپاره رامینځته شوي. په مایع میډیا کې د سپرماتوزووا د خوځښت په اړه (د میخانیکي انجینرۍ څانګه، د انجینرۍ پوهنځی، اسیوت پوهنتون، مصر). پلگ ان په دې لینک ډاونلوډ کیدی شي: http://www.assiutmicrofluidics.com/research/casa39. منحنی سرعت (VCL، μm/s)، خطي سرعت (VSL، μm/s) او اوسط ټراجکټوري سرعت (VAP، μm/s) اندازه شوي. د سپرماتوزووا ویډیوګانې د انورټډ آپټیکا XDS-3 فیز کنټراسټ مایکروسکوپ (د 40x هدف سره) په کارولو سره اخیستل شوي چې د ټیکسن ISH1000 کیمرې سره وصل دي چې د 3 ثانیو لپاره په 30 fps کې. د CASA سافټویر څخه کار واخلئ ترڅو لږترلږه درې ساحې او په هر نمونه کې 500 سپرم ټراجیکټوري مطالعه کړئ. ثبت شوې ویډیو د کور جوړ شوي CASA په کارولو سره پروسس شوې. د CASA پلګ ان کې د حرکت تعریف د جریان نرخ په پرتله د سپرم د لامبو سرعت پراساس دی، او نور پیرامیټرونه لکه د اړخ څخه اړخ حرکت پکې شامل ندي، ځکه چې دا د مایع جریان کې ډیر باوري موندل شوی. ریولوژیکي حرکت د مایع جریان لوري په وړاندې د سپرم حجرو حرکت په توګه تشریح شوی. سپرماتوزووا د ریولوژیکي ملکیتونو سره د حرکت سپرماتوزووا شمیر سره ویشل شوي؛ سپرماتوزووا چې په آرام کې وو او په کنویکټیو ډول حرکت کونکي سپرماتوزووا له شمیرې څخه ایستل شوي وو.
ټول کارول شوي کیمیاوي توکي د ایلګومهوریا درمل جوړونې (قاهره، مصر) څخه ترلاسه شوي، پرته لدې چې بل ډول یادونه وشي. دا وسیله د ایل-شیري او نورو لخوا تشریح شوي 40 سره د ځینو تعدیلاتو سره تولید شوې. هغه مواد چې د مایکرو چینلونو جوړولو لپاره کارول شوي د شیشې پلیټونه (هاورډ ګلاس، ورسیسټر، MA)، SU-8-25 منفي مقاومت (مایکرو کیم، نیوټن، CA)، ډایسیټون الکول (سیګما الډریچ، سټین هایم، جرمني)، او پولی اسیټون شامل وو. -184، ډاو کارنینګ، میډلینډ، میشیګان). مایکرو چینلونه د نرم لیتوګرافي په کارولو سره جوړ شوي. لومړی، د مطلوب مایکرو چینل ډیزاین سره یو روښانه محافظتي مخ ماسک په لوړ ریزولوشن پرنټر کې چاپ شوی و (پریزماتیک، قاهره، مصر او پیسفک هنرونو او ډیزاین، مارخم، ON). ماسټرونه د شیشې پلیټونو په کارولو سره د سبسټریټ په توګه جوړ شوي وو. پلیټونه په اسیټون، ایزوپروپانول او ډیونیز شوي اوبو کې پاک شوي وو او بیا د سپن کوټینګ (3000 rpm، 1 دقیقې) لخوا د SU8-25 د 20 µm پرت سره پوښل شوي وو. بیا د SU-8 طبقې په نرمۍ سره وچې شوې (65°C، 2 دقیقې او 95°C، 10 دقیقې) او د 50 ثانیو لپاره د UV وړانګو سره مخ شوې. د افشا کیدو وروسته په 65°C او 95°C کې د 1 دقیقې او 4 دقیقو لپاره پخه کړئ ترڅو د افشا شوي SU-8 طبقې سره وصل شي، وروسته د 6.5 دقیقو لپاره د ډایسیټون الکول کې پراختیا. وافلونه په کلکه پخه کړئ (200°C د 15 دقیقو لپاره) ترڅو د SU-8 طبقه نوره هم ټینګه شي.
PDMS د مونومر او هارډینر د 10:1 وزن په تناسب سره مخلوط کولو سره چمتو شو، بیا په ویکیوم ډیسیکیټر کې ګاز ډیګز شو او په SU-8 اصلي چوکاټ کې واچول شو. PDMS په تنور (120°C، 30 دقیقې) کې روغ شو، بیا چینلونه پرې شول، له ماسټر څخه جلا شول، او سوراخ شول ترڅو ټیوبونو ته اجازه ورکړل شي چې د مایکرو چینل په داخل او خارج کې وصل شي. په پای کې، د PDMS مایکرو چینلونه د پورټ ایبل کورونا پروسسر (الیکټرو-ټیکنیک محصولات، شیکاګو، IL) په کارولو سره د مایکروسکوپ سلایډونو سره په دایمي ډول وصل شول لکه څنګه چې په بل ځای کې تشریح شوي. پدې څیړنه کې کارول شوی مایکرو چینل 200 µm × 20 µm (W × H) اندازه کوي او 3.6 سانتي متره اوږد دی.
د مایکرو چینل دننه د هایدروسټاټیک فشار له امله رامینځته شوی مایع جریان د داخلي زیرمو کې د خارجي زیرمو کې د لوړوالي توپیر Δh39 څخه پورته د مایع کچه ساتلو سره ترلاسه کیږي (شکل 1).
چیرته چې f د رګیدو ضریب دی، چې د مستطیل چینل کې د لامینار جریان لپاره f = C/Re په توګه تعریف شوی، چیرته چې C د چینل د اړخ تناسب پورې اړه لري یو ثابت دی، L د مایکرو چینل اوږدوالی دی، Vav د مایکرو چینل دننه اوسط سرعت دی، Dh د چینل هیدرولیک قطر دی، g د جاذبې سرعت دی. د دې معادلې په کارولو سره، د چینل اوسط سرعت د لاندې معادلې په کارولو سره محاسبه کیدی شي: