د Nature.com لیدلو لپاره مننه.د براوزر نسخه چې تاسو یې کاروئ محدود CSS ملاتړ لري.د غوره تجربې لپاره، موږ وړاندیز کوو چې تاسو یو تازه شوی براوزر وکاروئ (یا په انټرنیټ اکسپلورر کې د مطابقت حالت غیر فعال کړئ).په ورته وخت کې، د دوامداره ملاتړ ډاډ ترلاسه کولو لپاره، موږ به سایټ پرته له سټایلونو او جاواسکریپټ وړاندې کړو.
Angustifolius lupin (NLL, Lupinus angustifolius L.) یو نبات دی چې د خواړو تولید او د خاورې ښه کولو لپاره کارول کیږي.د نبات په توګه د NLL نړیواله پراختیا ډیری رنځجنیک فنګسونه جذب کړي، په شمول د لوپین انتراکنوز، کوم چې د ویجاړونکي انتراکنوز ناروغۍ المل کیږي.دوه ایلیلونه، Lanr1 او AnMan، کوم چې د مقاومت زیاتوالي وړاندیز کوي، د NLL په نسل کې کارول شوي، مګر د مالیکول لاندې میکانیزمونه نامعلوم پاتې دي.په دې څیړنه کې، Lanr1 او AnMan مارکرونه د اروپایی NLL نمونو سکرین کولو لپاره کارول شوي.په کنټرول شوي چاپیریال کې د واکسین ازموینې د دواړو مقاومت کونکو تمویل کونکو اغیزمنتوب تایید کړ.د جین مختلف توضیحي پروفایل کول د نمایندګي مقاومت لرونکي او حساس لینونو کې ترسره شوي.د انتراکنوز مقاومت د جین اونټولوژي اصطلاحاتو "GO: 0006952 دفاعي ځواب"، "GO: 0055114 Redox Process"، او "GO: 0015979 فوتوسنتیسس" له ډیر څرګندیدو سره تړاو درلود.برسېره پردې، د Lanr1 (83A: 476) لین د واکسین کولو وروسته په چټکۍ سره د پام وړ ټرانسکریټوم بیا پروګرام ښودلی، پداسې حال کې چې نورو لینونو په دې ځواب کې شاوخوا 42 ساعته ځنډ ښودلی.دفاعي غبرګونونه د TIR-NBS، CC-NBS-LRR او NBS-LRR جینونو سره تړلي دي، 10 پروټینونه چې په رنځپوهنه کې دخیل دي، د لیپید لیږد پروټینونه، Endoglucan-1,3-β-glucosidase، glycine بډایه د حجرو دیوال پروټینونه، او د اکسیجن د عکس العمل له لارې جینونه.83A:476 ته لومړني ځوابونه، په شمول د فوتوسنتز سره تړلي جینونو محتاط فشار، د فنګسي بیولوژي د نباتي ودې مرحلې په جریان کې د بریالي محافظت سره همغږي، دا وړاندیز کوي چې یو تاثیر کونکی معافیت هڅوي.د منډیلوپ غبرګون ورو شوی، لکه څنګه چې ټول افقی ډریګ دی.
تنګ پاڼی لیوپین (NLL, Lupinus angustifolius L.) یو لوړ پروټین غله ده چې د لویدیځ مدیترانې په سیمه کې سرچینه لري 1,2.دا اوس مهال د څارویو او انسانانو لپاره د خوراکي محصول په توګه کرل کیږي.دا د نبات د گردش په سیسټمونو کې د شنو سرې په توګه هم ګڼل کیږي چې د نایتروجن د سمبیوټیک نایتروجن فکس کولو باکتریا لخوا تنظیم او د خاورې جوړښت په ټولیزه توګه ښه کوي.NLL په تیره پیړۍ کې د کورنی کولو چټک بهیر څخه تیر شوی او لاهم د لوړ نسل فشار 3,4,5,6,7,8,9,10,11,12 لاندې دی.د NLL په پراخه کښت سره، د ناروغیو فنګسونو بریالیتوب نوي کرهنیز ځایونه رامینځته کړل او د نوي فصل ویجاړونکي ناروغیو لامل شول. د لیوپین کروندګرو او نسل ورکونکو لپاره ترټولو د پام وړ د انتراکنوز ظاهري بڼه وه چې د رنځجني فنګس، Colletotrichum lupini (Bondar) Nirenberg، Feiler او Hagedorn13 له امله رامنځته کیږي. د لیوپین کروندګرو او نسل ورکونکو لپاره ترټولو د پام وړ د انتراکنوز ظاهري بڼه وه چې د رنځجني فنګس، Colletotrichum lupini (Bondar) Nirenberg، Feiler او Hagedorn13 له امله رامنځته کیږي. Наиболее примечательным для фермеров и селекционеров люпина было появление антракноза, вызванного патогеннымирбреным для фермеров Hagedorn13. د لیوپین کروندګرو او نسل ورکونکو لپاره ترټولو د پام وړ د انتراکنوز رامینځته کیدل وو چې د رنځجن فنګس Colletotrichum lupini (Bondar) Nirenberg, Feiler and Hagedorn13 له امله رامینځته شوي.د orn13 引起的.对于羽扇豆农民和饲养者来说,最引人注目的是炭疽病的出现,它是由病原农民和饲养者来说 Наиболее поразительным для фермеров и селекционеров люпина является появление антракноза, вызываемого патоибормеров , Feiler & Hagedorn13. د لیوپین کروندګرو او نسل اخیستونکو ته ترټولو مهم د انتراکنوز رامینځته کیدل دي چې د کولیټوټریچم لوپیني (بونډار) نیرنبرګ ، فیلر او هاګیډورن 13 د رنځجن فنګس لخوا رامینځته کیږي.د ناروغۍ لومړني راپورونه له برازیل او متحده ایالاتو څخه راغلي، چې په ترتیب سره په 1912 او 1929 کې نښې نښانې لیدل کیږي.په هرصورت، شاوخوا 30 کاله وروسته، دا ناروغي د Colletotrichum gloeosporioides (Penz.) Penz په نوم نومول شوې. & Sacc., teleomorph Glomerella cingulata (Stoneman) Spauld. & Sacc., teleomorph Glomerella cingulata (Stoneman) Spauld. & Sacc., телеоморф Glomerella cingulata (Stoneman) Spauld. او Sacc.، د ګلومیریلا سینګولاټا (سټون مین) سپولډ ټیلومورف. & Sacc. 有目的形态的Glomerella cingulata (Stoneman) Spauld. & Sacc. 有目的形态的Glomerella cingulata (Stoneman) Spauld. & Sacc., Glomerella cingulata (Stoneman) Spauld в Целенаправленной морфологии. & Sacc., Glomerella cingulata (Stoneman) Spauld in Targeted Morphology. او ایچ شرینک،. او ایچ شرینک، .او ایچ شرینک. & H.施伦克,. & H.施伦克,.او H. Schlenk، .د 20 پیړۍ په مینځ کې د ناروغۍ لومړني فینوټایپنګ ترسره شوي د NLL او ژیړ لوپین (L. luteus L.) لاسرسي کې یو څه مقاومت ښودلی ، مګر ټول سپین لوپین (L. albus L.) معاینه شوي لاسرسی خورا حساس و15,16.مطالعاتو ښودلې چې د انتراکنوز وده د اورښت (د هوا رطوبت) او د تودوخې (د 12-28 درجې درجې درجې کې) سره تړاو لري، چې د 17، 18 په لوړه تودوخه کې د مقاومت څخه سرغړونه کوي. په حقیقت کې، د کونیډیا د ټوکیدنې او د ناروغۍ پیل کولو لپاره اړین وخت، د 12 °C څخه څلور ځله کم و (12 °C 4 °C) په منځنۍ درجه کې د 12 ° C څخه څلور ساعته کم. شرایط19.په دې توګه، روانه نړیواله تودوخه د انتراکنوز د خپریدو لامل شوې.په هرصورت، دا ناروغي په فرانسه (1982) او اوکراین (1983) کې د احتمالي ګواښ د مخنیوي په توګه لیدل شوې، مګر په 20,21 کې د لوپین صنعت لخوا په ښکاره توګه له پامه غورځول شوې.څو کاله وروسته دا وژونکې ناروغي په ټوله نړۍ کې خپره شوه او د لوپین تولیدونکي لوی هیوادونه لکه آسټرالیا، پولنډ او جرمني 22,23,24 هم اغیزمن کړل.د 1990 لسیزې په نیمایي کې د انتراکنوز د خپریدو وروسته، پراخه سکرینینګ د NLL19 نمونو کې د ډیری مقاومت لرونکي بسپنه ورکوونکو پیژندلو المل شو.د انتراکنوز په وړاندې د NLL مقاومت د دوو جلا جلا غالبو ایلیلونو لخوا کنټرول کیږي چې په بیلابیلو ګرمپلازم سرچینو کې موندل کیږي: Lanr1 په تنجیل کې او وانګا او انمان په کښت کې.Mandalay 25, 26. دا الیلونه د مالیکول مارکر بشپړوي چې د نسل پالنې په پروګرامونو کې د مقاومت لرونکي ګرمپلازم انتخاب ملاتړ کوي 25,26,27,28,29,30.د مقاومت لرونکي نسل لین 83A:476 چې Lanr1 ایلیل لیږدوي د حساس ځنګلي کرښې P27255 سره تیریږي ترڅو د RIL نفوس ترلاسه کړي چې د انتراکنوز مقاومت لپاره جلا کیږي، کوم چې دا ممکنه کړه چې د Lanr1 لوکس د کروموزوم NLL-1131، 32 loignistance، 32. د جینومیک چوکاټ سره د انتراکنوز کولو لپاره، NLL په ورته کروموزوم (NLL-11) کې د ټولو دریو ایلیلونو موقعیت په ګوته کړ، مګر په مختلف پوستونو کې 29,34,35.په هرصورت، د RILs لږ شمیر او د مارکرانو او ورته ایلیلونو ترمنځ لوی جنیټیک فاصله له امله، د دوی د اصلي جینونو په اړه هیڅ باوري پایلې نشي اخیستل کیدی.له بلې خوا، په لوپینونو کې د ریورس جینیکیک کارول ستونزمن دي ځکه چې د دوی د بیا تولید خورا ټیټ ظرفیت لري، کوم چې د جینیاتي لاسوهنې ستونزمن کوي37.
د کورني ګرمپلازم پراختیا چې په همجنسي حالت کې د مطلوب ایلیل لیږدوي، لکه 83A:476 (Lanr1) او Mandelup (AnMan)، په ځنګلي نفوس کې د الیلونو د مخالف ترکیبونو د شتون په مقابل کې د انتراکنوز مقاومت مطالعې لپاره دروازه پرانیستې.د مالیکول میکانیزم امکانات.د ځانګړو جینټایپونو لخوا رامینځته شوي دفاعي ځوابونه پرتله کړئ.دا څیړنه د C. لوپیني واکسین کولو لپاره د NLL لومړني ټرانسکریټوم غبرګون ارزوي.لومړی، د اروپایی NLL ګرمپلاسم پینل چې 215 لینونه لري د مالیکول مارکرونو په کارولو سره سکرین شوی و چې Lanr1 او AnMan ایلیلونه په نښه کوي.د انتراکنوز فینوټایپینګ بیا په 50 NLL لینونو کې ترسره شو، مخکې د مالیکول مارکرونو لپاره غوره شوي، د کنټرول شرایطو لاندې.د دې تجربو پراساس، څلور لینونه چې د انتراکنوز مقاومت او Lanr1/AnMan الیلیک ترکیب کې توپیر لري د دوه بشپړونکي طریقې په کارولو سره د توپیر دفاعي جین څرګندولو پروفایل کولو لپاره غوره شوي: د لوړې کچې RNA ترتیب کول او د ریښتیني وخت PCR اندازه کول.
د NLL ګرمپلازم (N = 215) د سیټ سکرینینګ د Lanr1 (Anseq3 او Anseq4) او AnMan (Anseq4) او AnMan (AnManM1) سره په نښه کولو سره وښودله چې یوازې یوه کرښه (95726، Salamanca-b ته نږدې) په داسې حال کې چې د ټولو "مقاومت" نښه موندلو لپاره د ټولو "مقاومت" نښه پراخه کوي. په 158 (~73.5%) لینونو کې د ټولو نښه کونکو تناسب.دیارلس لینونو د Lanr1 مارکر دوه "مقاومت" ایلیلونه تولید کړل، او 8 کرښې د Lanr1 "مقاومت" ایلیلونه تولید کړل.مارکرد AnMan مارکر "مقاومت" ایلیل (اضافی جدول S1).د Anseq3 مارکر لپاره دوه لینونه heterozygous او د AnManM1 مارکر لپاره یو هیټروزیګس وو.42 لینونه (19.5٪) د Anseq3 او Anseq4 ایلیلونو مخالف پړاوونه ترسره کوي، چې د دې دوو ځایونو ترمنځ د بیا یوځای کیدو لوړه فریکونسۍ په ګوته کوي.د انتراکنوز فینوټایپونه تر کنټرول لاندې شرایطو کې (اضافی جدول S2) د ازمول شوي جینټایپونو په مقاومت کې تغیر څرګند کړ، کوم چې د انتراکنوز په شدت کې منعکس شوی و.په اوسط نمرو کې توپیر له 1.8 (منطقي مقاومت) څخه تر 6.9 (حساس) پورې او د نبات د وزن توپیر له 0.62 (حساسیت) څخه تر 4.45 g (مقاومت) پورې دی. د تجربې په دوو نقلونو کې لیدل شوي ارزښتونو ترمنځ د پام وړ اړیکه شتون درلود (0.51 د ناروغۍ د شدت نمرې لپاره، P = 0.00017 او 0.61 د نبات وزن لپاره، P <0.0001) او همدارنګه د دې دوو پیرامیټونو ترمنځ (− 0.59 او − 0.77, P < 0.000). د تجربې په دوو نقلونو کې لیدل شوي ارزښتونو ترمنځ د پام وړ اړیکه شتون درلود (0.51 د ناروغۍ د شدت نمرې لپاره، P = 0.00017 او 0.61 د نبات وزن لپاره، P <0.0001) او همدارنګه د دې دوو پیرامیټونو (− 0.59 او − 0.77، P <100) ترمنځ. Выявлена ​​достоверная корреляция между значениями, наблюдаемыми в двух повторностях эксперимента (0,51 для баля1,0блестов,0блести = и 0,61 для массы растения, P < 0,0001), а также между этими двумя параметрами (-0,59 и -0,77, Р < 0,00001) 0,0001). د تجربې په دوو تکرارونو کې د لیدل شویو ارزښتونو ترمنځ د پام وړ اړیکه وموندل شوه (0.51 د ناروغۍ د شدت نمرې، P = 0.00017 او 0.61 د نبات وزن لپاره، P <0.0001)، او همدارنګه د دې دوو پیرامیټونو ترمنځ (- 0.59 او -0.77، P <010، P <010).在两次重复实验中观察到的值之间存在显着相关性（疾病严重程度评分为实验中观察到的值之间存在显着相关性（疾病严重程度评分为程度评分为0.0.51. 0.61،P <0.0001）以及这两个参数之间（- 0.59 和- 0.77، P <0.0001).在 两 次 重复 实验 中 观察 的 值 之间 存在 相关性 （疾病 严重 程度 严重 程度 评 分丆冺 5 p. 0.00017 ， 植物 为 0.61 ， p <0.0001） 以及 两 个 参数 之间 （（（- 0.59 和 0.59和-59和和- 0.77، P <0.0001). Наблюдалась значительная корреляция между значениями, наблюдаемыми в двух повторностях растения 0,61، P <0,0001)، и между этими двумя параметрами (-0,59 и -0,0001) 0,77، P <0,0001. په نقل کې د لیدل شوي ارزښتونو ترمنځ د پام وړ اړیکه شتون درلود (د ناروغۍ شدت سکور 0.51، P = 0.00017 او د نبات وزن 0.61، P <0.0001) او د دې دوو پیرامیټونو (-0.59 او -0.0001) 0.707، P <0001 ترمنځ. ).په حساسو نباتاتو کې لیدل شوي معمولي نښې عبارت دي له د ډډ کنډک کول او د "شپه د کمان" جوړښت ته ورته وي، وروسته د نارنجي/ګلابي سپوروزوایټس سره بیضوي زخمونه (اضافی شکل. 1).د اسټرالیا لاسرسۍ چې Lanr1 (83A:476 او تنجیل) او AnMan (Mandelup) جینونه لري په متوسط ​​ډول مقاومت لري، 0.0331 او 0.0036).ځینې ​​لینونه چې "مقاومت" Lanr1 او/یا AnMan ایلیلونه هم لري د ناروغۍ نښې څرګندوي.
په زړه پورې خبره دا ده چې یو څو NLL لینونه چې هیڅ "مقاومت" مارکر ایلیل نلري د انتراکنوز مقاومت لوړه کچه څرګنده کړه (د Lanr1 یا AnMan جینټایپونو په پرتله د پرتلې وړ یا لوړه)، لکه بورګین (P ارزښت <0.0001 د دواړو پیرامیټونو لپاره)، بوجار (P ارزښت <0.0001 د دواړو پیرامیټونو لپاره) او د پوجار (P ارزښت <0.0001 او د B4/0001 وزن لپاره د 0.0001 وزن او د 0.0001 لپاره د نبات سکور) (د P ارزښت <0.0001 د سکور لپاره او د وزن لپاره غیر مهم دی). په زړه پورې خبره دا ده چې یو څو NLL لینونه چې هیڅ "مقاومت" مارکر ایلیل نلري د انتراکنوز مقاومت لوړه کچه څرګنده کړه (د Lanr1 یا AnMan جینټایپونو په پرتله د پرتلې وړ یا لوړه)، لکه بورګین (P ارزښت <0.0001 د دواړو پیرامیټونو لپاره)، بوجار (P ارزښت <0.0001 د دواړو پیرامیټونو لپاره) او د پوجار (P ارزښت <0.0001 او د B4/0001 وزن لپاره د 0.0001 وزن او د 0.0001 لپاره د نبات سکور) (د P ارزښت <0.0001 د سکور لپاره او د وزن لپاره غیر مهم دی). Интересно, что несколько линий NLL, лишенных какого-либо «резистентного» маркерного аллеля, показали высокий уровень устоинь устои высокий. вимый или более высокий, чем для генотипов Lanr1 или AnMan) , таких как Boregine (значение P <0,0001 для обоих параметров (Paramетров) <ц0якидеки, Bojar и 0,001 для массы растения) и популяции B-549/79b (значение P <0,0001 для оценки и незначимо для массы). په زړه پورې خبره دا ده چې د NLL څو کرښې چې کوم مقاومت لرونکي مارکر ایلیل نلري د انتراکنوز په وړاندې د مقاومت لوړه کچه ښودلې (د Lanr1 یا AnMan جینوټایپونو سره پرتله کول یا لوړ دي)، لکه بورګین (P ارزښت <0.0001 د دواړو پیرامیټونو لپاره)، بوجار (P ارزښت <0.0001 د دواړو پیرامیټونو لپاره) او د نبات لپاره د P ارزښت <0.0001 او د نباتاتو لپاره د 0.05001 وزن /79b (د ارزونې لپاره د P ارزښت <0.0001 او د وزن لپاره مهم ندي).有趣的是，一些缺乏任何“抗性”标记等位基因的NLL 系显示出高水平的炭疽病抗怗د种群B-549/79b（得分P 值< 0.0001، 重量不显着）. دا په زړه پورې ده چې ځینې NLL سیسټمونه چې هیڅ "انټيجنیک" مارکر نلري لوړ افقی مقاومت ښیي (د Lanr1 یا AnMan جینونو سره مساوي یا لوړ)، لکه بورګین (دواړه پیرامیټونه P <0.0001)، بوجار (د P ارزښت <0.0001، د نبات وزن) 0.09/701 بی ارزښت (0.09/70 B 0.09) 1، وزن د پام وړ ندی). Интересно, что некоторые линии NLL، лишенные каких-либо маркерных аллей «резистентности»، показали высокие уровни устовымичности. или выше, чем у генотипов Lanr1 или AnMan)، такие как Boregine (значение P для обоих параметров <0,0001)، Bojar (значение P <0,000п,0001, ) ляция B-549/79b (оценка P-значение <0,0001, масса незначительна). په زړه پورې خبره دا ده چې ځینې NLL لینونه چې هیڅ ډول مقاومت لرونکي مارکر ایلیلونه نلري د انتراکنوز مقاومت لوړه کچه ښودلې (د Lanr1 یا AnMan جینوټایپونو سره پرتله یا لوړه)، لکه بورګین (P ارزښت د دواړو پیرامیټونو لپاره <0.0001)، بوجار (P-value <0.0001، B700/b019 وزن او د نبات وزن (0.000، B700/B) وزن. د P- ارزښت <0.0001، وزن د پام وړ ندی).دا پدیده د مقاومت د نوي جینیتیک سرچینې احتمال وړاندیز کوي، د مارکر جینوټایپونو او د ناروغۍ فینوټایپونو ترمنځ د ارتباط نشتوالی تشریح کوي (د P ارزښتونه له ~ 0.42 څخه ~ 0.98 پورې).په دې توګه، د کولموګوروف-سمیرنوف ازموینې وښودله چې د انتراکنوز مقاومت ډاټا تقریبا په نورمال ډول د نمرو لپاره ویشل شوي (P-values ​​0.25 and 0.11) او د نباتاتو ډله (P-values ​​0.47 and 0.55)، دا وړاندیز کوي چې زه فرض کوم چې د Anthracnose په پرتله ډیر ایلیلونه شامل دي.
د انتریکنوز مقاومت د سکرینینګ د پایلو پراساس، د ټرانسکریپټوم تحلیل لپاره 4 لینونه غوره شوي: 83A:476، بورګین، منډیلپ، او نفوس 22660. دا لینونه د RNA ترتیب کولو په واسطه د انتریکس مقاومت لپاره بیا ازمول شوي، په دې شرط چې په تیرو ازموینو کې ورته ورته وي.د سکور ارزښتونه په لاندې ډول وو: بورګین (1.71 ± 1.39)، 83A: 476 (2.09 ± 1.38)، منډیلپ (3.82 ± 1.42) او نفوس 22660 (6.11 ± 1.29).
د Illumina NovaSeq 6000 پروتوکول په اوسط ډول په هر نمونه کې د 40.5 Mread جوړه ترلاسه کړه (29.7 څخه تر 54.4 Mreads) (اضافی جدول S3).د حوالې په ترتیب کې د سمون نمرې له 75.5٪ څخه تر 88.6٪ پورې وې.د بیولوژیکي نقلونو تر مینځ د تجربوي ډولونو ترمینځ د لوستلو شمیرې ډاټا اوسط اړیکه له 0.812 څخه تر 0.997 پورې (معنی 0.959) پورې اړه لري. د 35,170 جینونو څخه چې تحلیل شوي، 2917 هیڅ څرګندونه نده څرګنده کړې، او نور 4785 جینونه په نشتوالي کې څرګند شوي (د اساس معنی <5). د 35,170 جینونو څخه چې تحلیل شوي، 2917 هیڅ څرګندونه نده څرګنده کړې، او نور 4785 جینونه په نشتوالي کې څرګند شوي (د اساس معنی <5). Из 35 170 проанализированных генов 2917 не проявляли экспрессии, а остальные 4785 генов экспрессировались на незвналозированных на незвналяли е <5). د 35,170 جینونو څخه چې تحلیل شوي، 2917 هیڅ څرګندونه نده ښودلې، او پاتې 4785 جینونه په نشتوالي کې څرګند شوي (د اساس معنی <5).在分析的35,170 个基因中，2917 个没有表达，其他4785 个基因的表达可以因的表达可以忽略不计ﹰ35,170 Из 35 170 проанализированных генов 2917 не экспрессировались, а остальные 4785 генов имели незначительную экспрессировались (<<< ). د تحلیل شوي 35,170 جینونو څخه، 2917 څرګند شوي ندي او پاتې 4785 جینونه د پام وړ څرګندونه لري (اساس معنی <5).په دې توګه، د تجربې په جریان کې د څرګند شوي جینونو شمیر (بیس معنی ≥ 5) و 27,468 (78.1٪) (اضافی جدول S4).
د لومړي ځل نقطې څخه، ټولو NLL لینونو د C. lupini (strain Col-08) د ټرانسکریپټوم (جدول 1) د بیا پروګرام کولو په واسطه د واکسین کولو ته ځواب ووایه، په هرصورت، د لینونو ترمنځ د پام وړ توپیرونه لیدل شوي.په دې توګه، د مقاومت کرښه 83A:476 (د Lanr1 جین لیږدوي) په لومړي ځل نقطه (6 hpi) کې د پام وړ ټرانسکریپټوم ریپروګرامینګ ښودلی چې پدې وخت کې د نورو وخت نقطو په پرتله د جلا شوي پورته او ښکته جینونو په شمیر کې 31-69 چنده زیاتوالي سره.برسېره پردې، دا چوکۍ لنډمهاله وه، ځکه چې یوازې د یو څو جینونو څرګندونې د دویم ځل په نقطه (12 hpi) کې د پام وړ بدلون موندلی.په زړه پورې خبره دا ده چې بورګین، چې د ګراف په ازموینه کې یې هم د لوړې کچې مقاومت ښودلی، د تجربې په جریان کې دومره لوی ټرانسکریپشن بیا پروګرام نه دی کړی.په هرصورت، د توپیر څرګند شوي جینونو شمیر (DEG) د بورګین او 83A:476 لپاره په 12 HPI کې یو شان و.دواړه منډیلپ او نفوس 22660 په وروستي وخت نقطه کې د DEG لوړوالی ښودلی (48 l/s)، په دفاعي ځوابونو کې نسبتا ځنډ په ګوته کوي.
ځکه چې 83A: 476 د نورو ټولو لینونو په پرتله په 6 HPI کې د C. لوپیني په ځواب کې د لوی ټرانسکریټوم بیا پروګرم کولو سره مخ شو، په دې وخت کې د DEGs ~ 91٪ لیدل شوي د نسب سره ځانګړي وو (انځور 1).په هرصورت، د مطالعې لینونو ترمنځ په لومړیو ځوابونو کې یو څه تکرار شتون درلود، لکه 68.5٪، 50.9٪، او 52.6٪ DEG په بورګین، منډیلپ، او نفوس 22660 کې، په ترتیب سره، د وخت په ځینو ټکو کې په 83A: 476 کې موندل شوي سره یوځای شوي.په هرصورت، دا DEGs د ټولو DEGs یوازې د یوې کوچنۍ برخې (0.97–1.70٪) لپاره حساب کوي چې اوس مهال د 83A:476 په کارولو سره کشف شوي.برسېره پردې، په دې وخت کې د ټولو لینونو څخه 11 DEGs همغږي وو (اضافی جدول S4-S6)، په شمول د نباتاتو د دفاع ځوابونو عام اجزا شامل دي: د لیپید لیږد پروټین (TanjilG_32225)، Endoglucan-1,3-β-glucoside انزایم (TanjilG_233384)، دوه تنجیل جی_23384، او د تنجیل 232384 پروتینونه jilG_31531)، بنسټیز latex پروټین (TanjilG_32352)، او دوه ګلیسین بډایه ساختماني حجرو دیوال پروټینونه (TanjilG_19701 او TanjilG_19702).د 83A:476 او بورګین تر منځ د 24 HPI (ټولټال 16-38٪ DEG) او د منډیلپ او نفوس 22660 ترمنځ په 48 HPI کې (ټول 14-20٪ DEG) کې د ټرانسکریپټوم ځوابونو کې نسبتا لوړ اوورلیپ هم شتون درلود.
د وین ډیاګرام د تنګ پاڼی لیوپین (NLL) لینونو کې د توپیر لرونکي څرګند شوي جینونو (DEG) شمیر ښیې چې د کولیټوټریچم لوپیني (سټرین Col-08 د ویرجینیس ، پولنډ ، 1999 کې د لوپین ساحو څخه ترلاسه شوی) سره انوکول شوي.د NLL لینونه تحلیل شوي دي: 83A: 476 (مقاومت، د Lanr1 ایلیل لیږدونکي)، بورګین (مقاومت، جنیټیک شالید نامعلوم)، منډیلپ (متوسط ​​مقاومت، د AnMan ایلیل لیږدونکي) او نفوس 22660 (ډیر حساس).د hpi لنډیز د واکسین کولو څخه څو ساعته وروسته ولاړ دی.د ګراف ساده کولو لپاره صفر ارزښتونه لرې شوي.
په 6 hpi کې د ډیر اکسپریس جینونو سیټ د کینونیکي R جین ډومینونو شتون لپاره تحلیل شوی و (اضافی جدول S7).دې مطالعې د NBS-LRR ډومینونو سره یوازې په 83A: 476 کې د کلاسیک ناروغیو مقاومت جینونو ټرانسکریټوم انډکشن څرګند کړ.په دې مجموعه کې یو TIR-NBS-LRR جین (tanjilg_05042)، پنځه CC-NBS-LRR جینونه (tanjilg_06165, tanjilg_06162, tanjilg_22773, tanjilg_22640, and tanjilg_1640, tanjilg_16, and tanjilg_16, tanjilg, 62)، او څلور NBS-LRRE (tanjilg_16162) او همدارنګه څلور NBS-Lrr (tanjilg_16162) او څلور NBS-LRR (TANJILG_16162).دا ټول جینونه کینونیکي ډومینونه لري چې په خوندي ترتیبونو کې تنظیم شوي.د NBS-LRR ډومین جینونو سربیره، ډیری RLL کنیزونه په 6 hpi کې فعال شوي، چې یو یې په بورګین (TanjilG_19877) کې، دوه په منډیلپ کې (TanjilG_07141 او TanjilG_19877) او په نفوس کې 22660 (TanjilG1308 او TanjilG1304) 27:476.
هغه جینونه چې د C. lupini (strain Col-08) سره د واکسین کولو په ځواب کې د پام وړ بدل شوي بیان سره د جین اونټولوژي (GO) د بډایه کولو تحلیل (اضافی جدول S8) سره مخ شوي. د بیولوژیکي پروسې ترټولو ډیر تکرار شوی اصطلاح "GO: 0006952 دفاعي غبرګون" و چې د 16 څخه په 6 (وخت × کرښه) کې د لوړ اهمیت (P ارزښت <0.001) سره ترکیب کې څرګند شو (2 شکل). د بیولوژیکي پروسې ترټولو ډیر تکرار شوی اصطلاح "GO: 0006952 دفاعي غبرګون" و چې د 16 څخه په 6 (وخت × کرښه) کې د لوړ اهمیت (P ارزښت <0.001) سره ترکیب کې څرګند شو (2 شکل). Наиболее часто чрезмерно представленным термином биологического процесса был «GO: 0006952 защитный ответвявякой ответ, защитный отвевя6» время × линия) комбинаций с высокой значимостью (значение P <0,001) (рис. 2). د بیولوژیکي پروسې تر ټولو ډیر تکرار شوی اصطلاح 'GO: 0006952 دفاعي ځواب' و، کوم چې د 16 څخه 6 (وخت × نسب) سره د لوړ اهمیت (P ارزښت <0.001) (2 شکل) کې څرګند شوی.د具有高显着性（P 值<0.001）（图2）. د بیولوژیکي پروسې ترټولو نمایشي اصطالح "GO: 0006952 دفاعي غبرګون" دی، کوم چې د 16 (时间×线) ترکیبونو څخه په 6 کې ښکاري، د لوړ اهمیت سره (P ارزښت <0.001) (图2). Наиболее часто чрезмерно представленным термином биологического процесса был «GO: 0006952 دفاعي ځواب», который появленным представленным мя × линия) с высокой значимостью (значение P <0,001) (рис. 2). د بیولوژیکي پروسې ترټولو ډیر تکرار شوی اصطلاح 'GO: 0006952 دفاعي ځواب' و، کوم چې د 16 ترکیبونو څخه په 6 کې څرګند شوی (وخت × کرښه) د لوړ اهمیت سره (P ارزښت <0.001) (2 انځور).دا اصطلاح په دوه وختونو کې په 83A: 476 او بورګین (6 او 24 hpi) کې او په یو وخت کې په منډیلپ او نفوس 22660 کې (په ترتیب سره 12 او 6 hpi) کې ډیر څرګند شوی.دا یوه تمه شوې پایله ده، د مقاومت لینونو ضد فنګس غبرګون روښانه کوي.برسېره پر دې، 83A:476 C. lupini ته ځواب ووایه چې په چټکۍ سره د اکسیډیټیو برسټ پورې اړوند جینونه چې د "GO:0055114 redox process" اصطلاح لخوا نمایندګي شوي، یو ځانګړی دفاعي غبرګون څرګندوي، پداسې حال کې چې بورګین د 'GO' اصطلاح پورې اړوند ځانګړي دفاعي غبرګون څرګند کړ.: 0006950 د فشار غبرګون ".نفوس 22660 د افقی مقاومت غبرګون فعال کړی چې ثانوي میټابولیتونه پکې شامل دي، د اصطلاحاتو ډیر شمیر په ګوته کوي "GO:0016104 Process of triterpene biosynthesis" او "GO:0006722 Process of triterpene metabolism" (دواړه اصطالحات په ورته ډول محاسبه شوي د GO اصطالحاتو سره تړاو لري) sis، د منډیلپ عکس العمل ثبات د بورګین او نفوس 22660 ترمنځ و. سربیره پردې، د لومړني غبرګون 83A:476 (6 hpi) او ځنډیدلي غبرګون Mandelup او Population 22660 کې د GO:0015979 'فوټوسینتیز' اصطلاح او نور اړوند بیولوژیکي پروسې شاملې دي.
د بایوپروسس جین اونټولوژي اصطلاحات د انټراکس لیوپین (NLL) سره د انتراکس لیوپین (Col-08 فشار چې په ویرجینیس ، پولینډ کې د لوپین ساحو څخه ترلاسه شوي په 1999 کې ترلاسه شوي) د ټرانسکریټوم ځوابونو په جریان کې د توپیر څرګند شوي جینونو په تشریح کې غوره شوي.د NLL لینونه تحلیل شوي دي: 83A: 476 (مقاومت، د هوموزایګوس لینر 1 ایلیل لیږدونکي)، بورګین (مقاومت، نامعلوم جینیکیک شالید)، منډیلپ (متوسط ​​مقاومت، د هوموزایګس انمان ایلیل لیږدونکي) او نفوس 22660 (د حساسیت وړ).
ځکه چې د دې مطالعې موخه د جینونو پیژندل دي چې د انتراکنوز مقاومت کې مرسته کوي، هغه جینونه چې د GO "GO: 0006952 دفاعي ځوابونو" او "GO: 0055114 Redox processes" اصطلاحاتو ته ټاکل شوي د کټ آف سره تحلیل شوي ځکه چې د بیس لاین معنی لږ تر لږه ≥ 30 سره.× په وخت کې نقطه د log2 د احصایوي پلوه د پام وړ ارزښتونو سره یوځای کول (د فولډ بدلون).د دې معیارونو سره د جینونو شمیر د GO:0006952 لپاره 65 او د GO:0055114 لپاره 524 وو.
83A:476 د GO:0006952 اصطالح سره تشریح شوي د DEG دوه چوټونه ښکاره کړل، لومړی یې په هر انچ کې په 6 جینونو کې (64 جینونه، پورته او ښکته مقررات) او دویمه یې په هر انچ کې 24 جینونه (15 جینونه، یوازې د پورته مقرراتو).بورګین دا هم وښودله چې GO: 0006952 په ورته وخت کې لوړ شوی، مګر د لږ DEG (11 او 8) او غوره فعالیت سره.منډیلوپ په 12 او 48 HPI کې د GO:0006952 دوه لوړوالی ښودلی، دواړه 12 جینونه لري (لومړی یې د فعال جینونو سره، او دویم یې یوازې د فشار وړ جینونو سره)، پداسې حال کې چې د 6 HPI (13 جینونو) کې د 22660 نفوس د زیاتوالي لوړه کچه درلوده.مقرراتدا باید په پام کې ونیول شي چې د GO:0006952 DEG 96.4٪ په دې څوکو کې ورته ډول غبرګون (پورته یا ښکته) درلود، چې د ښکیلو جینونو په شمیر کې توپیر سره سره په دفاعي ځوابونو کې د پام وړ زیاتوالی په ګوته کوي.د GO:0006952 په اصطلاح پورې اړوند د ترتیبونو ترټولو لویه ډله د ستورویشن سټریس سره تړلي پیغام پروټین 22 (SAM22-like) کوډ کوي، کوم چې د 10 ټولګي د رنځپوهنې سره تړلي پروټین (PR-10) پروټین کلیډ او اصلي پروټین لیټیکس پورې اړه لري.ورته (MLP-like) پروټین) پروټین (انځور 3).دواړه ډلې د بیان په ماهیت او د غبرګون په لور کې توپیر درلود.د SAM22 په څیر پروټینونو کوډ کولو جینونه د وخت په لومړیو ټکو (6 یا 12 hpi) کې ثابت او د پام وړ انډکشن ښودلی او عموما د تجربې په پای کې غیر ځواب ویونکي و (48 hpi)، پداسې حال کې چې د MLP په څیر پروټین په 6 hpi کې همغږي ښودلې.hpi.83A: 476 او منډیلپ په 48 hp/in کې، نږدې ټول نور ډیټا ټکي غیر ځواب ویونکي وو.برسېره پردې، د SAM22 په څیر د پروټین جینونو د بیان پروفایلونو کې توپیر د انتراکنوز په مقاومت کې لیدل شوي تغیرات تعقیب کړل، ځکه چې ډیر مقاومت لرونکي لینونه د ډیر حساس جینونو په پرتله دا جینونه په پام کې نیولو سره ډیر وخت لري.یو بل LlR18A/B-لکه PR-10 جین د SAM22 په څیر پروټین جین ته خورا ورته څرګند نمونه ښودلې.
د بیولوژیکي پروسې اصلي برخې "GO:0006952 دفاعي ځواب" او د Lanr1 او AnMan alleles د کاندید جینونو د بیان نمونې پیژندل شوي.د Log2 پیمانه د inoculated (Colletotrichum lupini, strain Col-08, د لوپین ساحو څخه ترلاسه شوي، Wizhenica, Poland, 1999) او کنټرول (sham-inoculated) نباتاتو ترمنځ په ورته وخت کې د log2 ارزښت (fold change) استازیتوب کوي.لاندې تنګ لیف لیوپین لینونه تحلیل شوي: 83A:476 (مقاومت، د هوموزایګوس لینر 1 ایلیل لیږدوي)، بورګین (مقاومت، جنیټیک شالید نامعلوم)، منډیلپ (متوسط ​​مقاومت، د همجنسي انمان ایلیل لیږدوي)، او نفوس 22660 (مقاومت).
برسېره پر دې، د RNA-seq نوماند جینز Lanr1 (TanjilG_05042) او AnMan (TanjilG_12861) د بیان پروفایلونه ارزول شوي (3 انځور).TanjilG_05042 جین په 83A:476 کې یوازې په لومړي ځل نقطه (6 hpi) کې د پام وړ غبرګون (فعالیت) ښودلی، پداسې حال کې چې TanjilG_12861 په منډیلوپ کې یوازې په دوو وختونو کې د پام وړ و: 6 hpi (ډاون ریګولیشن) او 24 hpi (6 hpi).سره.)د تنظیم وړ)).
د GO:0055114 "redox process" په اصطلاح کې تر ټولو ډیر څرګند شوي جینونه د سایټوکروم P450 پروټینونو او پیرو آکسیډیز کوډ کولو جینونه وو (4 شکل).د نمونو لپاره چې له 83A:476 څخه په 6 HPI کې جلا شوي، اعظمي یا لږ تر لږه log2 (د فولډ بدلون) ارزښتونه (د 86.6٪ جینونو لپاره) په عمومي ډول د واکسین شوي او کنټرول بوټو ترمنځ لیدل شوي، چې د جنسي انوکول کولو لپاره د دې جینټایپ لوړ غبرګون په ګوته کوي.83A: 476 د پام وړ GO: 0055114 DEG په 6 hpi (503 جینونو) کې ښودلی، پداسې حال کې چې پاتې لینونه په 48 hpi کې (بورجین، 31 جینونه؛ منډیلپ، 85 جینونه؛ او نفوس 22660، 78 جینونه)).د GO:0055114 کورنۍ په ډیری جینونو کې، د واکسین کولو دوه ډوله غبرګونونه (فعالیت او مخنیوی) لیدل شوي.په زړه پورې خبره دا ده چې تر 97.6٪ پورې DEGs د GO: 0055114 په منډیلوپ کې په 48 hp کې د اصطالح لپاره پیژندل شوي ، دا مشاهدې وړاندیز کوي چې د پام وړ کوچنۍ پیمانه سره سره (د بدل شوي ریډوکس جینونو شمیر ، د 503 په مقابل کې 85) ، د ځنډیدلو نمونه د انسان د لومړني ټرانسکریپټوم ځواب ته ورته ځواب دی. ۷۶.په بورګین او نفوس 22660 کې، دا همغږي په ترتیب سره په 51.6٪ او 75.6٪ کې ټیټه ده.
د بیولوژیکي پروسې "GO: 0055114 Redox پروسې" اصطلاح د اصلي برخو د بیان نمونې څرګندې شوې.د Log2 پیمانه د inoculated (Colletotrichum lupini, strain Col-08, د لوپین ساحو څخه ترلاسه شوي، Wizhenica, Poland, 1999) او کنټرول (sham-inoculated) نباتاتو ترمنځ په ورته وخت کې د log2 ارزښت (fold change) استازیتوب کوي.لاندې تنګ لیف لیوپین لینونه تحلیل شوي: 83A:476 (مقاومت، د هوموزایګوس لینر 1 ایلیل لیږدوي)، بورګین (مقاومت، جنیټیک شالید نامعلوم)، منډیلپ (متوسط ​​مقاومت، د همجنسي انمان ایلیل لیږدوي)، او نفوس 22660 (مقاومت).
83A:476 د C. lupini (strain Col-08) سره د واکسین کولو په اړه ټرانسکریټومیک غبرګونونه د GO:0015979 "photosynthesis" او نور اړوند بیولوژیکي پروسې (FIG. 5) ته منسوب شوي جینونو همغږي خاموش کول هم شامل دي.دا GO:0015979 DEG سیټ 105 جینونه لري چې په 83A:476 کې په 6 hpi کې د پام وړ فشار شوي.په دې سبسیټ کې، 37 جینونه هم په منډیلپ کې په 48 HPI کې او 35 په ورته وخت کې د 22660 نفوس کې ټیټ شوي، په شمول د 19 DEGs په شمول چې د دواړو جینوټایپونو لپاره عام دي.د GO اصطلاح پورې اړوند هیڅ DEGs: 0015979 په هر ترکیب کې د پام وړ فعال ندي (لین x وخت).
د بیولوژیکي پروسې "GO:0015979 فوتوسنتز" اصطلاح د اصلي برخو د بیان نمونې څرګندې شوې.د Log2 پیمانه د inoculated (Colletotrichum lupini, strain Col-08, د لوپین ساحو څخه ترلاسه شوي، Wizhenica, Poland, 1999) او کنټرول (sham-inoculated) نباتاتو ترمنځ په ورته وخت کې د log2 ارزښت (fold change) استازیتوب کوي.لاندې تنګ لیف لیوپین لینونه تحلیل شوي: 83A:476 (مقاومت، د هوموزایګوس لینر 1 ایلیل لیږدوي)، بورګین (مقاومت، جنیټیک شالید نامعلوم)، منډیلپ (متوسط ​​مقاومت، د همجنسي انمان ایلیل لیږدوي)، او نفوس 22660 (مقاومت).
د توپیري بیان تحلیلونو پایلو پراساس او احتمالا د رنځجن فنګسي په وړاندې په دفاعي ځوابونو کې دخیل و ، د اوو جینونو دا سیټ د ریښتیني وخت PCR (ضمني جدول S9) لخوا د بیان پروفایلونو مقدار کولو لپاره غوره شوی و.
د پوټیټیو پروټین جین تنجیل جی_10657 د کنټرول (میک) نباتاتو (اضافی جدول S10, S11) په پرتله په ټولو مطالعاتو کرښو او وخت نقطو کې د پام وړ هڅول شوی و.برسېره پردې، د تنجیل جی_10657 بیان پروفایل د ټولو لینونو لپاره د تجربې په جریان کې مخ په زیاتیدونکي رجحان ښودلی.نفوس 22660 په 24 HPI (انځور 6a) کې د 114-fold فعالولو سره د انوکولیشن لپاره د تنجیل جی_10657 ترټولو لوړ حساسیت او د لوړ نسبي بیان کچه (4.4 ± 0.4) ښودلې.د PR10 LlR18A پروټین جین TanjilG_27015 هم په ټولو کرښو او وخت نقطو کې فعالیت ښودلی، په ډیرو ډیټا نقطو کې احصایوي اهمیت سره (انځور 6b).د TanjilG_10657 په څیر، د TanjilG_27015 ترټولو لوړ نسبي بیان کچه په 22660 انوکول شوي نفوس کې په 24 HPI (19.5 ± 2.4) کې لیدل شوې.د اسید Endochitinase جین TanjilG_04706 د بورګین 6 hpi (انځور 6c) پرته په ټولو لیکو او هر وخت کې د پام وړ لوړ شوی و.دا د لومړي ځل ټکي (6 HPI) کې په 83A: 476 (10.5 ځله) کې په کلکه هڅول شوی او په نورو لینونو کې په اعتدال ډول لوړ شوی (6.6-7.5 ځله).د تجربې په جریان کې، د تنجیل جی_04706 بیان په 83A:476 او بورګین کې په ورته کچه پاتې شو، پداسې حال کې چې په منډیلپ او نفوس 22660 کې دا د پام وړ زیاتوالی موندلی، نسبتا لوړ ارزښتونو ته رسیږي (په ترتیب سره 5.9 ± 1.5 او 6.2 ± 1.5).Endoglucan-1,3-β-glucosidase-like gen TanjilG_23384 په لومړي دوه وخت نقطو (6 او 12 hpi) کې د نفوس 22660 (انځور 6d) پرته په ټولو لیکو کې لوړ فعالیت ښودلی.د TanjilG_23384 ترټولو لوړ نسبي بیان کچه په دوهم ځل نقطه (12 hpi) کې په منډیلپ (2.7 ± 0.3) او 83A: 476 (1.5 ± 0.1) کې لیدل شوې.په 24 HPI کې، TanjilG_23384 بیان په ټولو مطالعه شویو کرښو کې نسبتا ټیټ و (له 0.04 ± 0.009 څخه تر 0.44 ± 0.12 پورې).
د ټاکل شوي جینونو بیان پروفایلونه (ag) د کمیتي PCR لخوا څرګند شوي.6، 12 او 24 شمیرې د واکسین کولو څخه وروسته ساعتونه استازیتوب کوي.د LanDExH7 او LanTUB6 جینونه د نورمال کولو لپاره کارول شوي او LanTUB6 د یو لړ لړۍ انډول کولو لپاره کارول شوي.د تېروتنې بارونه د درې بیولوژیکي نقلونو پر بنسټ معیاري انحراف څرګندوي، چې هر یو یې د دریو تخنیکي نقلونو اوسط دی. د انوکول شوي (Colletotrichum lupini, strain Col-08, په 1999 کې د پولینډ په ویرزینیکا کې د لوپین ساحې څخه ترلاسه شوي) او کنټرول (مک-انوکول شوي) نباتاتو ترمنځ د څرګندولو په کچه کې د توپیرونو احصایوي اهمیت د ډیټا پوائنټونو پورته نښه شوي (*P ارزښت <0.05, 0.05.***P ارزښت <0.05,***P قدر 01). د انوکول شوي (Colletotrichum lupini, strain Col-08, په 1999 کې د پولینډ په ویرزینیکا کې د لوپین ساحې څخه ترلاسه شوي) او کنټرول (مک-انوکول شوي) نباتاتو ترمنځ د څرګندولو په کچه کې د توپیرونو احصایوي اهمیت د ډیټا پوائنټونو پورته نښه شوي (*P ارزښت <0.05, 0.05.***P ارزښت <0.05,***P قدر 01). Статистическая значимость различий в уровнях экспрессии между инокулированными (Colletotrichum lupini, штамм Col-08, всплучен в 9 получен вспрессии между. рженице, Польша) и контрольными (ложно инокулированными) растениями отмечена над точками данных (*значение P < 0,05, P <0,05, P**01*** ≤ 0,001). د احصایې له پلوه د پام وړ توپیرونه د انوکولیټ شوي (Colletotrichum lupini, strain Col-08, په 1999 کې د پولینډ په ویرزینیس کې د لیوپین له ساحې څخه ترلاسه شوي) او کنټرول (شام - انوکول شوي) نباتات د ډیټا پوائنټونو څخه پورته یادونه شوي (*P ارزښت <0.05, **P-value 0.05, **P-value 0. ).接种（Colletotrichum lupini, Col-08株, 1999年从波兰Wierzenica的羽扇豆田获得）和对照澗）和对照澩澩接苴草峾復接苴草復差异的统计学显着性标记在数据点上方（*P值<0.05, **P 值≤ 0.01, ***P 值≤ 0.001).接种 （colletotrichum lupini ， color-08 株 ， 1999 年 波兰 波兰 wierzenica 的 羽扇 获得） 和 对照 湴湉弈接糤弈湴片差异 的统计学 显着性 标记 数据点 上方*p 值 <0.05, **P ≤ 0.01, ***P ≤ 0.001). Статистически значимые различия в уровнях экспрессии между инокулированными ольша, в 1999 г.) и контрольными (ложно инокулированными) растениями отмечены над точками данных (* значение P < 0,0,05,05,*** ение ≤ 0,001). د احصایوي پلوه د پام وړ توپیرونه د انوکول شوي (Colletotrichum lupini, strain Col-08, په 1999 کې د پولینډ په Verzhenice کې د لوپین ساحو څخه ترلاسه شوي) او کنټرول (Sham-inoculated) نباتات د ډیټا پوائنټونو څخه پورته یادونه شوي (*P value <0.05, **P-value ≤0.**P-value ≤0.** 1).د NLL لینونه تحلیل شوي دي: 83A: 476 (مقاومت، د هوموزایګوس Lanr1 ایلیل لیږدونکي)، منډیلپ (اعتدال مقاومت، د همجنسي انمان ایلیل لیږدونکي)، بورګین (مقاومت، نامعلوم جینیکیک شالید) او نفوس 22660 (د حساسیت وړ).
د کاندید جین تنجیل جی_05042 په Lanr1 لوکوس کې د RNA-seq مطالعاتو څخه ترلاسه شوي پروفایلونو څخه د څرګند ډول څرګند ډول څرګند کړ (6e انځور).د دې جین د پام وړ فعالیت په منډیلپ او 22660 نفوس کې لیدل شوی (تر 39.7 او 11.7 ځله پورې، په ترتیب سره)، په پایله کې د لوړ بیان کچه (تر 1.4 ± 0.14 او 7.2 ± 1.3 پورې، په ترتیب سره).83A:476 همدارنګه د تنجیل جی_05042 جین (تر 3.8-fold پورې) یو څه لوړوالی هم څرګند کړ، په هرصورت، د ترلاسه شوي نسبي بیان کچه (0.044 ± 0.002) د منډیلپ او د 22660 نفوس په پرتله د 30 څخه ډیر ټیټه وه.د qPCR لخوا تحلیل شوي په جعلي واکسین شوي (کنټرول) ډولونو کې د جینټایپونو ترمینځ د څرګندیدو په کچه کې د پام وړ توپیر ښودلی چې د 22660 او 83A: 476 نفوس تر مینځ 58 ځله توپیر ته رسیدلی ، او همدارنګه د 22660 او 22660 نفوس ترمینځ دوه چنده توپیر ترلاسه شوی.
په AnMan لوکس کې امیدوار جین، TanjilG_12861، په 83A: 476 کې د واکسین کولو په ځواب کې فعال شوی و او منډیلپ، په 22660 نفوس کې بې طرفه و، او په بورګین (شکل 6f) کې کم شوی و.د تنجیل جی_12861 جین نسبي څرګندونه په 83A: 476 (0.14±0.01) کې ترټولو لوړه وه.د 17.4 kDa ټولګي I د تودوخې شاک پروټین جین TanjilG_05080 HSP17.4 په ټولو مطالعه شوي فشارونو او وخت نقطو کې د نسبي بیان کچه ټیټه ښودلې (شکل 6g).تر ټولو لوړ ارزښت په 22660 نفوس کې په 24 HPI کې لیدل شوی (0.14 ± 0.02، د واکسین کولو په ځواب کې اته چنده زیاتوالی).
د جین څرګندولو پروفایلونو پرتله کول (7 شکل) د TanjilG_10657 او څلورو نورو جینونو تر مینځ لوړ اړیکه څرګنده کړه: TanjilG_27015 (r = 0.89)، TanjilG_05080 (r = 0.85)، TanjilG_05042 (r = 0.85)، TanjilG_05042 (r = 0.70) او TanjilG_708 (r = 0.7).دا ډول پایلې ممکن د دفاع ځوابونو په جریان کې د دې جینونو ګډ تنظیم په ګوته کړي.TanjilG_12861 او TanjilG_23384 جینونه د نورو جینونو په پرتله د ټیټ پییرسن ارتباط کوفیینټ ارزښتونو سره (په ترتیب سره له 0.08 څخه 0.43 او -0.19 څخه 0.28 پورې) مختلف بیان پروفایلونه ښودلي.
د جین بیان پروفایلونو تر مینځ اړیکې د کمیتي PCR په کارولو سره کشف شوي.لاندې تنګ لیف لوپین لینونه تحلیل شوي: 83A:476 (مقاومت، د هوموزایګوس Lanr1 ایلیل لیږدونکي)، منډیلپ (متوسط ​​مقاومت، د همجنسي انمان ایلیل لیږدونکي)، بورګین (مقاومت، جنیټیک شالید نامعلوم)، او نفوس 22660 (مقاومت وړ).درې وخت ټکي محاسبه شوي (6، 12 او 24 ساعته وروسته د واکسین کولو)، په شمول د انوکول شوي (کولیټوتریکم لوپیني، سټرین کول-08، په 1999 کې د پولینډ په ویرزینیس کې د لیوپین له ساحو څخه ترلاسه شوي) او کنټرول (شام انوکول شوي) نباتات.پیمانه د Pearson ارتباط ضمیمه ارزښت ښیې.
د ترلاسه شویو معلوماتو پراساس چې د 6 هارس پاور په هر انچ کې ترلاسه شوي، WGCNA په 9981 DEG کې ترسره شوي چې د واکسین شوي او کنټرول بوټو پرتله کولو سره پیژندل شوي ترڅو په ابتدايي دفاعي ځوابونو تمرکز وکړي (ضمني جدول S12).دوه ویشت جین ماډلونه (کلسترونه) د جینټایپونو او تجربوي ډولونو ترمنځ د ارتباطي (مثبت یا منفي) بیان پروفایلونو سره وموندل شول. په اوسط ډول، د جین بیان کچه په ترتیب سره 83A:476 > Mandelup > Boregine > Population 22660 (په دواړو ډولونو کې، په هرصورت، دا رجحان د کنټرول نباتاتو کې پیاوړی و). په اوسط ډول، د جین بیان کچه په ترتیب سره 83A:476 > Mandelup > Boregine > Population 22660 (په دواړو ډولونو کې، په هرصورت، دا رجحان د کنټرول نباتاتو کې پیاوړی و). В среднем уровни экспрессии генов снижались в порядке 83A:476 > Mandelup > Boregine > نفوس 22660 трольных растений). په اوسط ډول، د جین بیان کچه په ترتیب 83A:476 > Mandelup > Boregine > Population 22660 کې کمه شوې (په دواړو ډولونو کې، په هرصورت، دا رجحان د کنټرول نباتاتو کې پیاوړی و).平均而言，基因表达水平按83A:476 > Mandelup > Boregine > نفوس 22660植物中更强).平均而言，基因水平按 83a: 476> mandelup> boregine> نفوس 22660 的 顺序 下降 在 ， 在种 䙭翭 按更) ….. . В среднем уровни экспрессии генов снижались в ряду 83A:476 > Mandelup > Boregine > نفوس 22660 х растений). په اوسط ډول، د 83A:476> Mandelup> Boregine> Population 22660 لړۍ کې د جین بیان کچه راټیټه شوې (په هرصورت، په دواړو ډولونو کې، دا رجحان د کنټرول نباتاتو کې پیاوړی و).واکسین کول د جین بیان د لوړولو په پایله کې رامینځته شوي، په ځانګړې توګه په 18، 19، 14، 6 او 1 ماډلونو کې (د اغیزې په نزولي ترتیب کې)، منفي مقررات (د بیلګې په توګه 9 او 20 ماډلونه) یا د بې طرفه اغیزو سره (د مثال په توګه 11، 22، 8 او 13 ماډلونه).د GO اصطلاح بډایه کولو تحلیل (ضمیمي جدول S13) د GO: 0006952 محافظتي ځوابونه په ګوته کړل چې د انوکول شوي ماډل (18) لپاره د اعظمي فعالیت سره ، پشمول د qPCR لخوا تحلیل شوي جینونه (TanjilG_04706, TanjilG_2333874, TanjilG_233874, and 5006952) ډیری انوکولیټ ډیری فشار شوي فوتوسنتیز ماډلونه (9).ماډل 18 متمرکز (8 انځور) د تنجیل جی_26536 جین په توګه پیژندل شوی و چې د PR-10 په څیر LlR18B پروټین کوډ کوي، او ماډل 9 متمرکز تنجیل جی_28955 جین د فوتوسیسټم II PsbQ پروټین کوډ کولو په توګه پیژندل شوی.یو نوماند د انتراکنوز مقاومت جین Lanr1، TanjilG_05042، په 22 ماډل (9 شکل) کې موندل شوی او د "GO:0044260 Cellular macromolecular metabolic processes" او "GO:0006355 Transscriptional templating dNAG1_202" سره تړاو لري.جین د تودوخې فشار لیږد فکتور A-4a (HSFA4a) کوډ کوي.
د بیولوژیکي پروسې د ډیر څرګند شوي شرایطو سره د ماډلونو د جین شریک بیان وزن لرونکي شبکې تحلیل "GO: 0006952 دفاعي ځوابونه".د qPCR (TanjilG_04706، TanjilG_23384، TanjilG_10657 او TanjilG_27015) لخوا تحلیل شوي څلور جینونو روښانه کولو لپاره لیګیشن ساده شوی و.
د بیولوژیکي پروسې اصطالح "GO: 0006355: د انتقالي مقرراتو، DNA ټیمپلینګ" سره د ماډل د جین شریک بیان وزن لرونکي شبکې تحلیل او د کاندید انتراکنوز مقاومت جین Lanr1 TanjilG_05042 لیږدوي.د تنجیل جی_05042 جین او مرکزي تنجیل جی_01212 جین جلا کولو لپاره لیګیشن ساده شوی و.
په آسټرالیا کې راټول شوي د انتراکنوز مقاومت سکرینینګ ښودلې چې ډیری لومړني خوشې شوي کښتونه حساس دي؛کالیا، کورومپ او منډیلپ د معتدل مقاومت په توګه بیان شوي، پداسې حال کې چې وونگا، تنجیل او 83A: 476 د 26,27,31 لوړ مقاومت په توګه بیان شوي.ورته مقاومت لرونکی ایلیل درلود، د Lanr1 نومول شوی، او کورومپ او منډیلپ یو بل مختلف ایلیل درلود، چې AnMan10, 26, 39 ډیزاین شوی، پداسې حال کې چې کالیا په یو بل ایلیل تیریږي., Lanr2.په آلمان کې د انتریکنوز مقاومت لپاره سکرینینګ د دې لامل شو چې د مقاومت وړ کرښه Bo7212 د Lanr1 پرته بل نوماند ایلیل سره وپیژني چې LanrBo36 نومول شوی.
زموږ مطالعې په ازمول شوي ګرمپلازم کې د Lanr1 ایلیل خورا ټیټ فریکونسۍ (شاوخوا 6٪) په ګوته کړه.دا مشاهده د Anseq3 او Anseq4 مارکرونو په کارولو سره د ختیځ اروپا ګرمپلازم د سکرین کولو پایلو سره مطابقت لري ، کوم چې ښودلې چې Lanr1 ایلیل یوازې په دوه بیلاروسی لینونو کې شتون لري.دا وړاندیز کوي چې Lanr1 ایلیل لا تر اوسه په پراخه کچه د محلي نسل پالنې پروګرامونو لخوا نه کارول کیږي، برعکس په آسټرالیا کې، چیرته چې دا د مارکر په مرسته د نسل پالنې لپاره یو له مهمو ایلیلونو څخه دی.دا کیدای شي د استرالیا راپور په پرتله د اروپا ساحو شرایطو کې د Lanr1 ایلیل لخوا چمتو شوي مقاومت ټیټې کچې له امله وي.برسېره پردې، په آسټرالیا کې د زیاتو بارانونو په سیمو کې د انتراکنوز مطالعې ښودلې چې د Lanr1 ایلیل لخوا منځګړیتوب شوي مقاومت غبرګون ممکن د هوا په شرایطو کې اغیزمن نه وي چې د ناروغۍ وده او چټک پرمختګ سره مرسته کوي 19,42.په حقیقت کې، په اوسنۍ څیړنه کې، د انتریکنوز ځینې نښې نښانې په جینوټایپونو کې هم لیدل شوي چې د Lanr1 ایلیل لیږدوي، دا وړاندیز کوي چې مقاومت ممکن د C. lupini د پراختیا لپاره په غوره شرایطو کې ورک شي.برسېره پر دې، د Anseq3 او Anseq4 مارکرونو د شتون غلط مثبت تشریحات، چې د Lanr1 لوکس څخه نږدې 1 سانتي متره دي، ممکن 28,30,43 دي.
زموږ مطالعې ښودلې چې 83A:476، د Lanr1 ایلیل لیږدوي، په لومړي تحلیل شوي وخت (6 hpi) کې د لوی پیمانه ټرانسکریپټوم ریپروګرام کولو سره د C. lupini inoculation ته ځواب ووایه، پداسې حال کې چې په منډیلپ کې، د AnMan ایلیل لیږد، ترانسکریټومیک غبرګونونه ډیر وروسته لیدل شوي.(له 24 څخه تر 48 hp پورې).په دفاعي ځوابونو کې دا لنډمهاله تغیرات د ناروغۍ نښو کې توپیرونو سره تړاو لري، د مقاومت په وړاندې د بریالي ځواب لپاره د ابتدايي ناروغیو پیژندلو اهمیت په ګوته کوي.د نبات د نسجونو د اخته کیدو لپاره، د انتراکس سپورونه باید د کوربه په سطحه د ډیری پرمختیایي مرحلو څخه تیر شي، پشمول د ټوکیدنې، د حجرو ویش، او د اپریسوریم جوړول.ضمیمه یو عفوني جوړښت دی چې د کوربه سطح سره نښلوي او د کوربه نسجونو ته د ننوتلو اسانتیا برابروي.په دې توګه، د نخود په استخراج کې د C. gloeosporioides سپورو د 75-90 دقیقو انکیوبیشن وروسته د نیوکلیوس لومړی ویش، د 90-120 دقیقو وروسته د جراثیمو تیوب جوړیدل، او د 4 ساعتونو وروسته 45.د منګو C. gloeosporioides د 40٪ څخه ډیر د انکیوبیشن څخه وروسته د 3 ساعتونو څخه وروسته او د 4 ساعتونو وروسته شاوخوا 20٪ د اپریسرز رامینځته کیدل ښودلي.د C. gloeosporioides د ویروس سره تړلي CAP20 جین د 4 h 46 دقیقو وروسته د CAP20 پروټین لوړ غلظت سره د ایوکاډو سطح موم کې د 3.5 h انکیوبیشن وروسته د ایپی فایټ جوړونکي کونیډیا کې د لیږد فعالیت ښودلی.په ورته ډول، په C. trifolii کې د melanin biosynthesis genes فعالیت د 2-ساعت انکیوبیشن په جریان کې هڅول شوی و او د 1 ساعت وروسته د اپریسوریم رامینځته کیدو سره.د پاڼو د نسجونو مطالعاتو ښودلې چې د سټرابیري د C. acutatum سره د لومړي ځل لپاره په 8 hpi کې فشار لري، پداسې حال کې چې روميان د C. coccodes سره په لومړي ځل په 4 hpi48,49 کې فشار لري.په لویه کچه د Colletotrichum spp د وخت اندازه سره مطابقت لري.ساري پروسه.83A:476 ته چټک دفاعي ځوابونه په دې لیکه کې د نباتاتو مقاومت او د تاثیر کونکي محرک معافیت (ETI) جینونو ښکیلتیا وړاندیز کوي، پداسې حال کې چې د منډیلپ ځنډول غبرګونونه د مایکرو-اوسیع شوي مالیکولر نمونې محرک معافیت (MTI) فرضیه مالتړ کوي.په ځنډني غبرګون کې د پورته یا ښکته تنظیم شوي جینونو تر منځ جزوي اوورلیپ هم د دې مفهوم ملاتړ کوي، ځکه چې ETI اکثرا د MTI چټک او پرمختللي غبرګون ګڼل کیږي چې د انفیکشن په ځای کې د پروګرام شوي حجرو مړینې پای ته رسیږي، د انفیلیکیک شاک 51,52 په نوم پیژندل کیږي.
ډیری جینونه چې د جین اونټولوژي GO:0006952 "دفاعي ځواب" په پراخه کچه معرفي شوي اصطالح ته منسوب شوي د سټریس هڅول روژه پیغام 22 پروټین (SAM22 ته ورته) او اوه لوی لیټیک پروټین خوښونکي (MLPs) 11 هومولوګونه دي.د پروټین په څیر 31، 34، 43 او 423 د ترتیب سره ورته والی ښودلی.د SAM22 په څیر جینونو د پام وړ فعالیت ښودلی چې اوږدمهاله دوام لري، د انتراکنوز د مقاومت کچه ​​لوړه شوې (83A:476 او بورګین).په هرصورت، د MLP په څیر جینونه یوازې په هغو لیکو کې کم شوي چې د کاندید مقاومت ایلیل لیږدوي (83A: 476/Lanr1 په 6 hpi او Mandelup/AnMan په 24 hpi کې).دا باید په پام کې ونیول شي چې د SAM22 په څیر ټول پیژندل شوي هومولوګونه د جین کلستر څخه سرچینه اخلي چې شاوخوا 105 kb پراخیږي، پداسې حال کې چې د MLP په څیر جینونه د جینوم جلا جلا سیمو څخه سرچینه اخلي.د دې ډول SAM22 په څیر جینونو همغږي شوي فعالیت زموږ د NLL مقاومت د Diaporthetoxica inoculation په تیرو څیړنو کې هم وموندل شو، دا وړاندیز کوي چې دوی د دفاعي غبرګون په افقی برخو کې ښکیل دي.دا پایله د SAM22 په څیر جینونو د ټپي کیدو یا درملنې لپاره د سالیسیلیک اسید ، فنګسي هڅوونکو ، یا هایدروجن پیرو اکسایډ سره د مثبت ځواب راپورونو لخوا هم ملاتړ کیږي.
د MLP په څیر جینونه ښودل شوي چې مختلف ابیوټیک او بیوټیک فشارونو ته ځواب ووایی ، پشمول په ډیری نباتاتو ډولونو کې د باکتریا ، ویروس او رنځجن فنګسي انتاناتو 55.د نباتاتو او ناروغیو تر منځ د ځینو تعاملاتو په وړاندې د غبرګون الرښوونه د قوي زیاتوالي (د بیلګې په توګه، د پنبې د اخته کیدو په وخت کې د Verticillium dahliae سره) د پام وړ کمیدو پورې (د بیلګې په توګه، د مڼې د ونې د الټرنیریا spp سره د انفیکشن وروسته) 56,57.د MLP په څیر د 423 جین د پام وړ کموالی د ایف نایجر انتان او د مڼې د ونې بوتریوسفیریا بیرینجیانا f سره د ایوکاډو دفاع په جریان کې لیدل شوی.cn.piricola او Alternaria alternata د مڼې pathotypes58,59 دي.برسېره پردې، د مڼې کالي د MLP په څیر د 423 جین څخه ډیر څرګندیدل د مقاومت سره تړلي جینونو ټیټ څرګندونه درلوده او د فنګس انفیکشن لپاره ډیر حساس وو.د Fusarium oxysporum f څخه وروسته، د MLP په څیر 423 جین هم په مقاومت لرونکي عام لوبیا ګرمپلازم کې ودرول شو.cn.د لوبیا انفیکشن 60.
د PR-10 کورنۍ نور غړي چې زموږ د RNA-seq مطالعې کې پیژندل شوي د LlR18A او LlR18B جینونه د لوړولو په ځواب کې وو، په بیله بیا د لیپید لیږد پروټین DIR1 لپاره لوړ شوي (1 جین) یا ښکته (3 جین) جین..برسېره پردې، WGCNA په دې ماډل کې د LlR18B جین د مرکز په توګه روښانه کوي، کوم چې د واکسین کولو لپاره خورا حساس دی او ډیری محافظتي غبرګون جینونه لري.د LlR18A او LlR18B جینونه په ژیړ لوپین پاڼو کې د رنځجنیک باکتریا په ځواب کې هڅول شوي، او همدارنګه د D. toxica انوکولیشن وروسته په NLL ډډونو کې، پداسې حال کې چې د دې جینونو د وریجو هوموولوژ، RSOsPR10، په چټکۍ سره د فنګسي اسیدونو په انتاناتو کې دخیل و. د DIR1 جین غیر مشخص لیپید ټرانسپورټ پروټینونه کوډ کوي کوم چې د سیسټمیک ترلاسه شوي مقاومت (SAR) پیل لپاره اړین دي.د محافظتي تعاملاتو په پراختیا سره، د DIR1 پروټین د انتاناتو له تمرکز څخه د فلویم له لارې لیږدول کیږي ترڅو په لرې پرتو ارګانونو کې SAR هڅوي.په زړه پورې خبره دا ده چې تنجیل جی_02313 DIR1 جین په لومړي ځل د 84A:476 او نفوس 22660 په لیکو کې د پام وړ هڅول شوی و، مګر د انتراکنوز مقاومت یوازې په 84A:476 کرښه کې په بریالیتوب سره وده وکړه.دا کیدای شي په NLL کې د DIR1 جین ځینې فرعي فعالیت ته اشاره وکړي، ځکه چې پاتې درې هومولوګز یوازې په 83A: 476 لاین کې په 6 hpi کې واکسین کولو ته ځواب ووایه، او دا ځواب د لاندې لور ته لیږدول شوی.
زموږ په څیړنه کې، د بیولوژیکي پروسې سره مطابقت لرونکي ترټولو عام اجزا چې "GO: 0055114 Redox process" نومیږي د سایټوکروم P450 پروټین، پیروکسایډس، لینولیک اسید 9S-/13S-lipoxygenase، او 1-aminocyclopropane-1-carboxylic acid oxidase.برسېره پردې، زموږ WGCNA د HSFA4a هومولوګ د یو مرکز په توګه تعریفوي چې ماډلونه لیږدوي لکه د Lanr1 مقاومت جین کاندید تنجیل جی_05042.HSFA4a په نباتاتو کې د اټومي لیږد ریډکس پورې تړلي مقرراتو برخه ده.
Cytochrome P450 پروټینونه اکسیډروډکټیسونه دي چې د NADPH او/یا O2 پورې تړلي هایدروکسیلیشن تعاملات په لومړني او ثانوي میټابولیزم کې کټالیز کوي، په شمول د xenobiotics میټابولیزم، او همدارنګه هورمونونه، شحمي اسیدونه، سټیرولونه، د حجرو دیوال اجزا، بایوپولیمر، او د 9 په مطالعه کې د بایوپولینز وړتیا، د بایوپولینسیس 9 ساتنه کې. د نبات سایټوکروم P450 فعالیت له -10.6 log2 (fold change) څخه 5.7 ته راټیټ شوی د لوی شمیر بدل شوي هومولوګونو (37) او د ځانګړي جینونو ترمینځ د غبرګون نمونو کې توپیرونو له امله ، چې پورته بیاکتنه منعکس کوي..په دومره لوی پروټین کې د NLL جینونو د بیولوژیکي فعالیت روښانه کولو لپاره یوازې د RNA-seq ډیټا کارول به خورا قیاس وي.په هرصورت، دا د یادولو وړ ده چې ځینې سایټوکروم P450 جینونه د ناروغۍ فنګسي یا باکتریا په وړاندې د مقاومت زیاتوالي سره تړاو لري، په شمول د 69,70,71 الرجیک تعاملاتو کې مرسته.
د دریم ټولګي پیرو آکسیډیزونه د نبات څو اړخیز انزایمونه دي چې د نبات د ودې او پراختیا په جریان کې د میټابولیک پروسو په پراخه لړۍ کې دخیل دي ، او همدارنګه د چاپیریال فشارونو لکه مالګینتوب ، وچکالۍ ، د لوړ ر lightا شدت ، او د رنځجن برید 72 په ځواب کې.Peroxidases د نباتاتو د څو ډولونو په تعامل کې د Anthracis سره دخیل دي، په شمول Stylosanthes humilis او C. gloeosporioides، Lens culinaris او C. truncatum، Phaseolus vulgaris او C. lindemuthianum، Cucumis sativus او C. lagenarium73,76,74.غبرګون خورا چټک دی، ځینې وختونه حتی په 4 HPI کې، مخکې له دې چې فنګس د نبات نسج ته ننوځي 73.د پیرو آکسیډیز جین هم د D. toxica NLL انوکولیشن ته ځواب ووایه.د اکسیډیټیو برسټ تنظیم کولو یا د اکسیډیټیک فشار له مینځه وړو لپاره د دوی ځانګړي دندو سربیره ، پیروکسایډز کولی شي د لینګیفیکیشن ، سبونیټ یا ځانګړي مرکباتو کراس لینک کولو پرمهال د حجرو دیوال تقویه کولو پراساس د فزیکي خنډونو رامینځته کولو سره د رنځجن وده کې مداخله وکړي.دا فعالیت په سیلیکو کې د تنجیل جی_03329 جین ته منسوب کیدی شي چې د پوټینټ لیګنین جوړونکي اینون پیروکسایډس کوډ کوي چې زموږ په مطالعې کې د 83A: 476 په 6 HPI کې مقاومت لرونکي کرښې کې د پام وړ لوړ شوی و ، مګر په نورو فشارونو او وخت ټکو کې ندي چې ځواب یې نه وي ورکړی.
د لینولیک اسید 9S-/13S-lipoxygenase د لیپید بایوسینتیز 78 د اکسیډیټیو لاره کې لومړی ګام دی.د دې لارې محصولات د نبات په دفاع کې ډیری دندې لري، پشمول د کالوز او پیکټین زیرمو د جوړولو له لارې د حجرو دیوال پیاوړتیا، او د اکسیجن فشار تنظیمول د عکس العمل اکسیجن ډولونو تولید له لارې 79,80,81,82,83.په اوسنۍ څیړنه کې، د لینولیک اسید 9S-/13S-lipoxygenase بیان په ټولو فشارونو کې بدلون موندلی، مګر په حساس نفوس کې 22660 کې، په مختلفو وختونو کې لوړوالی غالب شوی، پداسې حال کې چې د مقاومت لرونکي Lanr1 او AnMan ایلیل لیږدونکي فشارونو کې، دا د لیپوکسینټینټ پرتونو کې د دې متنوع تعاملاتو په ساتنه کې ټینګار کوي. .
د 1-aminocyclopropane-1-carboxylate oxidase (ACO) هومولوګ د پام وړ لوړ شوی (9 جینونه) یا ښکته شوي (2 جینونه) کله چې د لیوپین سره واکسین شي.د دوو استثناوو سره، دا ټول ځوابونه په 6 hp کې پیښ شوي.په 83A: 476 کې.د ACO پروټینونو لخوا منځګړیتوب شوی انزیماتیک عکس العمل د ایتیلین په تولید کې د نرخ محدودولو ګام دی او له همدې امله په لوړه کچه تنظیم شوی 84.ایتیلین یو نبات هورمون دی چې د نبات پراختیا تنظیمولو او د ابیوټیک او بیوټیک فشار شرایطو ته ځواب ویلو کې مختلف رول لوبوي.د ACO لیږد شاملول او د ایتیلین سیګنالینګ لارې فعالول د هیمی بایوټروفیک فنګس اوریزا اوریزا په وړاندې د وریجو مقاومت زیاتولو کې د عکس العمل اکسیجن ډولونو او فایټولیکسین تولید تنظیمولو سره دخیل دي.د M. oryzae او C. lupini88,89 تر منځ د پاڼی د انفیکشن یو ډیر ورته بهیر موندل شوی، په دې څیړنه کې د 83A:476 په لیکه کې د ACO هومولوګز د پام وړ لوړولو پس منظر په وړاندې، د NLL anthracnose Ethylene ته د مقاومت د ورکولو احتمال د سیګنلینګ مرکزي مرحلې په سیګنل کولو مرحله کې بدلوي.
په اوسنۍ څیړنه کې، د فوتوسنتز سره تړلي ډیری جینونو په لویه پیمانه فشار په 83A:476 کې په 6 hpi کې او په منډیلوپ او 22660 نفوس کې په 48 hpi کې لیدل شوی.د دې بدلونونو کچه او پرمختګ د کچې سره متناسب دی.په دې تجربه کې د انتراکنوز مقاومت لیدل شوی.په دې وروستیو کې، د فوتوسنتز پورې اړوند ټرانسکریپټونو قوي او ابتدايي جبران د نبات-پیتوجن تعامل په ډیری ماډلونو کې راپور شوي، په شمول د رنځجنیک باکتریا او فنګسي.چټکتیا (په ځینو تعاملاتو کې د 2 HPI څخه) او د انفیکشن په ځواب کې د فوتوسنتز سره تړلي جینونو نړیوال فشار کولی شي د نبات معافیت رامینځته کړي د عکس العمل اکسیجن ډولونو ځای په ځای کولو او د سیلیسیلیک اسید لارې سره د دوی تعامل د الرجیک عکس العمل منځګړیتوب لپاره 90,94.
په پایله کې، د خورا مقاومت لرونکي نسب (83A:476) لپاره وړاندیز شوي د دفاعي غبرګون میکانیزمونه د R جین لخوا د چټک رنځجن پیژندل شامل دي (احتمالا TIR-NBS-LRR TanjilG_05042) او د الرجیک غبرګون منځګړیتوب سیلیسیلیک اسید او ایتیلین د اوږدې مودې سیګنال په واسطه رامینځته کول شامل دي.عمل د DIR-1 پروټین لخوا ملاتړ کیږي.دا باید په پام کې ونیول شي چې د C. لوپیني انفیکشن لپاره د بایوټروفیک دوره ډیره لنډه ده (نږدې 2 ورځې)، وروسته د نیکروټیک وده 95.د دې پړاوونو تر مینځ لیږد ممکن د نیکروسس سره تړاو ولري او د ethylene-inducible پروټینونو بیان سره تړاو ولري چې په کوربه نباتاتو کې د حساسیت غبرګون لپاره د محرک په توګه کار کوي.نو ځکه، د بایوټروفیک مرحله کې د C. لوپیني د بریالي نیولو لپاره وخت کړکۍ خورا تنګ دی.په 83A:476 کې په 6 hpi کې د redox او فوتوسنتز سره تړلي جینونو بیا پروګرام کول د فنګسي هایفا د پرمختګ سره مطابقت لري او د بایوټروفیک مرحله کې د بریالي محافظتي غبرګون د پراختیا خبر ورکوي.د منډیلپ او د 22660 نفوس ټرانسکریټومیک غبرګون ممکن د فنګس په نیولو کې ډیر ځنډ وکړي مخکې له دې چې نیکروټیک وده ته لاړ شي، په هرصورت، مینډیلپ ممکن د 22660 نفوس په پرتله ډیر اغیزمن وي ځکه چې د PR-10 پروټین نسبتا ګړندۍ مقررات افقی مقاومت ته وده ورکوي.
ETI، د کینونیکي R جین لخوا پرمخ وړل کیږي، داسې ښکاري چې د لوبیا د انتراکنوز مقاومت لپاره یو عام میکانیزم وي.په دې توګه، د میډیکاګو ترونکاټولا په ماډل کې، د انتراکنوز مقاومت د RCT1 جین لخوا ورکړل شوی، چې د TIR-NBS-LRR97 نبات R جین ټولګي غړی دی.دا جین په الفافا کې د پراخه سپیکٹرم انتراکنوز مقاومت هم ورکوي کله چې حساس نباتاتو ته لیږدول کیږي.په عام لوبیا (P. vulgaris) کې، تر اوسه پورې له دوو درجن څخه ډیر د انتراکنوز مقاومت جینونه پیژندل شوي.ځینې ​​​​دا جینونه په هغو سیمو کې موندل کیږي چې هیڅ ډول کینونیکي R جینونه نلري، مګر ډیری نور د کروموزومونو په څنډو کې موقعیت لري چې د NBS-LRR جین کلستر لري، په شمول د TIR-NBS-LRRs99.د جینوم پراخه SSR مطالعې هم د NBS-LRR جین تړاو په عام لوبیا کې د انتراکنوز مقاومت سره تایید کړ.کینونیکي R جین هم په جینومیک سیمه کې وموندل شو چې په سپینه لوپین 101 کې د لوی انتراکنوز مقاومت لوکس لري.
زموږ کار ښیي چې یو سمدستي مقاومت عکس العمل چې د نبات د انفیکشن په لومړیو مرحلو کې فعال شوی (په غوره توګه د 12 hpi څخه وروسته)، په مؤثره توګه د تنګ پاڼو لرونکی لیوپین د انتراکنوز څخه ساتي چې د کولیلوټریچم لوپیني فنګس د ناروغۍ له امله رامینځته کیږي.د لوړې کچې ترتیب کولو په کارولو سره، موږ په NLL بوټو کې د انتریکنوز مقاومت جینونو توپیر لرونکي بیان پروفایلونه د Lanr1 او AnMan مقاومت جینونو لخوا منځګړیتوب ښودلي.بریالي دفاع کې د پروټینونو لپاره د جینونو ډیزاین په احتیاط سره شامل دي چې په ریډکس، فوتوسنتز، او رنځپوهنه کې د نبات د لومړي تماس په څو ساعتونو کې د ناروغ سره اړیکه لري.ورته محافظتي عکس العملونه، مګر په وخت کې ځنډول، د ناروغیو څخه د نباتاتو په ساتنه کې خورا لږ اغیزمن دي.د انتریکس مقاومت چې د Lanr1 جین لخوا منځګړیتوب شوی د R جین (اثر - محرک معافیت) د عادي چټک غبرګون سره ورته دی، پداسې حال کې چې د AnMan جین ډیر احتمال افقي غبرګون چمتو کوي (معافیت د مایکروب پورې تړلي مالیکولر نمونې لخوا رامینځته شوی)، د پایښت منځنۍ کچې چمتو کوي.
215 NLL لینونه چې د انتراکنوز مارکرونو لپاره کارول کیږي د 74 cultivars، 60 لینونه چې د کراس کولو یا نسل کولو په واسطه ترلاسه شوي، 5 mutants، او 76 وحشي یا اصلي جراثیم.دا کرښې له ۱۷ هېوادونو څخه راغلې چې په عمده توګه له پولنډ (۵۸)، هسپانیې (۴۷)، جرمني (۲۷)، اسټرالیا (۲۶)، روسیه (۱۹)، بیلاروس (۷)، ایټالیا (۵) او نورې کرښې دي.د 10 هیوادونو څخه.په سیټ کې د حوالې مقاومت لینونه هم شامل دي: 83A: 476، تنجیل، وانګا د Lanr1 ایلیل لیږدوي، او منډیلپ د انمان ایلیل لیږدوي.لینونه د اروپا لوپین جینیټیک سرچینې ډیټابیس څخه ترلاسه شوي چې د پوزناان پلانټ بریډینګ لمیټډ، ویاتورو، پولنډ لخوا ساتل کیږي (اضافی جدول S1).
نباتات د کنټرول شوي شرایطو لاندې کرل شوي (فوټوپیریډ 16 ساعته، د ورځې په جریان کې د تودوخې 25 درجې او په شپه کې 18 درجې سانتي ګراد).دوه بیولوژیکي نقلونه تحلیل شوي.DNA د پروتوکول مطابق د DNeasy Plant Mini Kit (Qiagen, Hilden, Germany) په کارولو سره د دریو اونیو پخوانیو پاڼو څخه جلا شوی و.د جلا شوي DNA کیفیت او غلظت د spectrophotometric میتودونو لخوا ارزول شوی (NanoDrop 2000; Thermo Fisher Scientific, Waltham, MA, USA).د AnManM1 مارکر چې د انتراکنوز مقاومت جین په نښه کوي AnMan (د Cv. Mandelup څخه اخیستل شوی) او د Anseq3 او Anseq4 مارکر د Lanr1 جین (د cv. تنجیل څخه اخیستل شوی) سره 11,26,28 تحلیل شوي.د مقاومت لرونکي ایلیل لپاره هوموزایګوټس د "1" په توګه، حساسیت - د "0" په توګه، او هیټروزایګوټس - د 0.5 په توګه.
د AnManM1، AnSeq3 او AnSeq4 مارکرونو لپاره د سکرینینګ پایلو او د وروستي تعقیب تجربو لپاره د تخمونو شتون پراساس، 50 NLL لینونه د انتراکنوز مقاومت فینوټایپینګ لپاره غوره شوي.تحلیل په نقل سره په کمپیوټر کنټرول شوي شنو خونو کې د 14 ساعتونو فوټوپیریډ سره ترسره شو چې د ورځې په اوږدو کې د تودوخې درجه 22 سانتي ګراد او په شپه کې 19 درجې سانتي ګراد وي.تخمونه تر کرلو دمخه (د جنین په مقابل اړخ کې د تخم کوټ په تیز تیغ سره پرې کول) د کښت کولو دمخه د تخم د پوټکي د ډیر سخت کیدو له امله د تخم د بې خوبۍ مخه نیسي او د یوشان ټوکیدنې ډاډ ترلاسه کوي.نباتات په لوښو (11 × 11 × 21 سانتي متره) کې د جراثیمو خاورو سره کرل شوي (TS-1 REC 085 متوسط ​​​​اساسي، Klasmann-Deilmann Polska, Warsaw, Poland).د کولیټوتریکم لوپیني Col-08 فشار سره واکسین ترسره شو، چې په 1999 کې د لوی پولنډ په Verzhenitsa (52° 27′ 42″ N 17° 04′ 05″ E) کې د تنګو پاڼو لرونکي لوپین بوټو له ډډونو څخه کرل شوي.یوه سیمه ترلاسه کړئ.جلا کول د SNA په منځني ډول په 20 درجو سانتي ګراد کې د تور ر lightا لاندې د 21 ورځو لپاره کرل شوي ترڅو سپورولیشن رامینځته کړي.د کرلو څخه څلور اونۍ وروسته، کله چې نبات د 4-6 پاڼو پړاو ته رسیدلی و، د 0.5 x 106 conidia په هر ملی لیتر غلظت کې د کونیډیا د تعلیق سره د سپری کولو په واسطه واکسین ترسره شو.د واکسین کولو وروسته، بوټي د 24 ساعتونو لپاره په تیاره کې ساتل شوي چې شاوخوا 98٪ رطوبت او د 25 درجې تودوخې درجه د کانډیا د ټوکیدنې او د انفیکشن پروسې اسانه کولو لپاره.بیا نباتات د 14-ساعت فوټوپیریډ الندې په 22°C ورځ/19°C د شپې او 70% رطوبت کې کرل شوي.د ناروغۍ سکور د واکسین کولو څخه 22 ورځې وروسته رامینځته شوی او په ډډونو او پاڼو کې د نیکروټیک زخمونو شتون یا نشتوالي پورې اړه لري له 0 (معافیت) څخه تر 9 (ډیر حساس) پورې اړه لري.برسېره پردې، د سکور کولو وروسته، د بوټو وزن اندازه شوی.د مارکر جینټایپونو او ناروغۍ فینوټایپونو ترمینځ اړیکې د نقطې دوه تسلسل ارتباط په توګه محاسبه شوي (د انتراکنوز مقاومت فینوټایپ تحلیل لپاره د کرښو په سیټ کې د هیټروزایګوس مارکرونو نشتوالی).