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Composição e caracterização da nanoemulsão de cloridrato de clorexidina como um promissor irrigante antibacteriano do canal radicular: estudos in vitro e ex vivo
作者 Abdelmonem R., Younis MK, Hassan DH, El-Sayed Ahmed MAEG, Hassanien E., El-Batuti K., Elfaham A.
Rehab Abdelmonem, 1 Mona K. Younis, 1 Doaa H. Hassan, 1 Mohamed Abd El-Gawad El-Sayed Ahmed, 2 Ehab Hassanein, 3 Kariem El-Batuti, 3 Alaa Elfaham 31 Ciência e Tecnologia, Faculdade de Farmácia e Farmácia Industrial, Universidade Misr, Cidade de 6 de outubro, Egito;2 Departamento de Microbiologia e Imunologia, Faculdade de Farmácia, Misr University of Science and Technology, 6 de outubro, Egito;3 Departamento de Endodontia, Universidade Ain Shams, Cairo, Egito Introdução e Objetivo: O cloridrato de cloro e hexidina [Chx.HCl] possui atividade antibacteriana de amplo espectro, ação prolongada e baixa toxicidade, portanto, é recomendado como um potencial irrigante do canal radicular.O objetivo deste estudo foi usar uma nova composição de nanoemulsão Chx.HCl para aumentar o poder de penetração, limpeza e ação antibacteriana de Chx.HCl e usá-lo como um irrigante de canal radicular.Métodos: Nanoemulsões de Chx.HCl foram preparadas usando dois óleos diferentes: ácido oleico e Labrafil M1944CS, dois surfactantes, Tween 20 e Tween 80, e co-surfactante, propileno glicol.Trace um diagrama de fase pseudo-ternário para indicar o sistema ótimo.As formulações de nanoemulsão preparadas foram avaliadas quanto ao conteúdo da droga, tempo de emulsificação, dispersibilidade, tamanho da gota, liberação da droga in vitro, estabilidade termodinâmica, atividade antibacteriana in vitro e estudos in vitro das formulações selecionadas.A ação penetrante, de limpeza e antibacteriana da nanoemulsão Chx.HCl 0,75% e 1,6% foi comparada com partículas de tamanho normal como irrigante de canal radicular.Resultados.A formulação escolhida foi a F6 com 2% de Labrafil, 12% de Tween 80 e 6% de propilenoglicol.Tamanho de partícula pequeno (12,18 nm), tempo de emulsificação curto (1,67 segundos) e dissolução rápida após 2 minutos.Verificou-se que é um sistema termodinamicamente/fisicamente estável.Em comparação com o tamanho de partícula Chx.HCl convencional, a maior concentração de nanoemulsão Chx.HCl 1,6% apresentou melhor penetração devido ao menor tamanho de partícula.Em comparação com um material de tamanho de partícula normal (2609,56 µm2), a nanoemulsão de 1,6% Chx.HCl tem a menor área de superfície média de detritos residuais (2001,47 µm2).Conclusão: A composição da nanoemulsão Chx.HCl tem melhor capacidade de limpeza e ação antibacteriana.Tem uma ação bactericida altamente eficaz contra Enterococcus faecalis, e a taxa de contração da célula bacteriana é alta ou completamente destruída.Palavras-chave: cloridrato de clorexidina, nanoemulsão, irrigação do canal radicular, penetração, efeito de limpeza, irrigação antibacteriana.
As nanoemulsões, uma classe de emulsões com tamanhos de gotículas na faixa de 50 a 500 nm, têm recebido muita atenção nos últimos anos devido às suas propriedades únicas.Boas propriedades de limpeza, não são afetados pela dureza da água, na maioria dos casos apresentam baixa toxicidade e ausência de interações eletrostáticas.2 A nanotecnologia tem um tamanho de partícula ultrapequeno, uma grande área de superfície em relação à massa e propriedades físicas e químicas únicas em comparação com produtos a granel semelhantes, e também abre novas perspectivas no tratamento e prevenção de infecções dentárias.3 O cloridrato de clorexidina (Chx.HCl) é ligeiramente solúvel em água, muito ligeiramente solúvel em álcool e gradualmente mancha à luz.4,5 SH.O HCl tem ação antibacteriana de amplo espectro, ação prolongada e baixa toxicidade.Devido a essas propriedades, também é recomendado como um potencial irrigante do canal radicular.As principais vantagens do Chx.HCl são baixa citotoxicidade, ausência de odor e sabor desagradável.6-9 Vários tipos de lasers têm sido usados ​​para melhorar a desinfecção do canal radicular.O efeito bactericida dos lasers depende do comprimento de onda e da energia, bem como da exposição térmica, que provoca alterações na parede celular bacteriana, o que leva a uma alteração do gradiente osmótico até a morte celular.A interação entre lasers e irrigadores do canal radicular abre novos horizontes na desinfecção pulpar.10 A energia ultrassônica produz altas frequências, mas baixas amplitudes. Os arquivos são projetados para oscilar em frequências ultrassônicas de 25–30 kHz, que estão além do limite da percepção auditiva humana (>20 kHz). Os arquivos são projetados para oscilar em frequências ultrassônicas de 25–30 kHz, que estão além do limite da percepção auditiva humana (>20 kHz). Файлы предназначены для колебаний на ультразвуковых частотах 25–30 кГц, которые находятся за пред елами слухового восприятия человека (> 20 кГц). As limas são projetadas para vibrar em frequências ultrassônicas de 25-30 kHz, que estão além do alcance da audição humana (> 20 kHz).这些文件被设计成在25–30 kHz 的超声波频率下振荡，这超出了人类听觉感知的极限(>20 kHz)。这些文件被设计成在 25–30 kHz Файлы рассчитаны на колебания на ультразвуковых частотах 25–30 кГц, что выходит за пределы слухово го восприятия человека (>20 кГц). As limas são projetadas para vibrações em frequências ultrassônicas de 25-30 kHz, que estão além dos limites da audição humana (>20 kHz).Eles operam em oscilação transversal, estabelecendo os modos característicos de nós e antinós ao longo de seu comprimento.O termo “irrigação ultrassônica passiva” (PUI) é um protocolo de irrigação no qual nenhum instrumento ou parede entra em contato com limas ou instrumentos endodônticos.Durante a PUI, a energia do ultrassom é transferida da lima vibratória para a solução de irrigação no canal radicular.Este último pode causar fluxo sônico e cavitação do agente de lavagem.11 Com base nos dados acima, considera-se apropriado usar a nanotecnologia para avaliar a melhoria da ação de penetração e limpeza do Chx.HCl.
O cloridrato de clorexidina Chx.HCl foi gentilmente cedido pela Arab Drug Company for Pharmaceuticals (Cairo, Egito).Labrafil M 1944 CS (oleoilpolioxi-6-glicerídeo) foi generosamente fornecido por Gattefosse (Saint Priest, França).Tween 20 (monolaurato de polioxietileno (20) sorbitano), Tween 80 (monooleato de polioxietileno (80) sorbitano), ácido oleico, propileno glicol da Gomhorya Company (Cairo, Egito)).Extração de dentes uniradiculares não cariados para tratamento periodontal ou ortodôntico, Departamento de Ciências Maxilofaciais, Faculdade de Odontologia, Universidade Ain Shams, Cairo, Egito.Cultura pura de Enterococcus faecalis (cepa ATCC 29212) cultivada em caldo de extrato de cérebro e coração (BHI) (RC CLEANER, IIchung Dental Ltd., Seul, Coréia).
A solubilidade de Chx.HCl em vários meios (ácido oleico, Labrafil M 1944CS, Tween 20, Tween 80, propilenoglicol e água) foi estudada.Um grande excesso de Chx.HCl (50 mg) é colocado em um tubo de centrífuga e 5,0 g da fase média são adicionados.A mistura foi agitada em um misturador de vórtice por 15 minutos e, em seguida, armazenada em temperatura ambiente.Após 24 horas, o pellet de droga insolúvel no tubo foi centrifugado a 3.000 rpm por 5 minutos para obter um sobrenadante límpido.Colete solução de amostra suficiente e dilua-a com n-butanol.As amostras diluídas foram filtradas em papel de filtro Whatman 102 e então diluídas apropriadamente com n-butanol para determinar a concentração do fármaco na solução saturada.As amostras foram analisadas com um espectrofotômetro UV a 260 nm com n-butanol como controle.12.13
Um pseudo-diagrama de fase tripla foi construído para determinar a proporção exata de cada componente necessário na formulação para obter os parâmetros ótimos de uma nanoemulsão ideal.14 A formulação foi formulada usando óleos (ou seja, ácido oleico e Labrafil M1944CS), surfactantes (ou seja, Tween 20 e Tween 80) e um surfactante adicional, ou seja, propileno glicol.Primeiro, misturas separadas de surfactantes (sem co-surfactantes) e óleos foram preparadas em diferentes proporções de volume (de 1:9 a 9:1).Quando a mistura for titulada com água (adicionando água gota a gota), monitore de perto a mistura de límpida a turva como ponto final.Esses pontos finais são então marcados em um diagrama de fase pseudo-tripla.Todo o processo foi repetido para misturas de surfactante e surfactante secundário (Smix) preparadas nas proporções 2:1 e 3:1 e misturadas com óleos selecionados15,16 um.
Sistemas de nanoemulsão contendo Chx.HCl foram preparados usando Labrafil M 1944 CS como fase oleosa e tensoativo Tween 80 ou 20 e propileno glicol como tensoativo adicional e finalmente água, Tabela 1. A droga foi dissolvida em Labrafil M 1944 CS e a água combinada de tensoativo e tensoativo secundário foi adicionada a uma taxa lenta com mistura gradual.A quantidade de surfactante e co-surfactante adicionada, bem como a porcentagem de fase oleosa que pode ser adicionada, é determinada usando um diagrama de fase pseudo-ternário.Um gerador ultrassônico (Ultrasonic LC 60 H, Elma, Alemanha) foi usado para atingir a faixa de tamanho desejada para dispersar os grânulos.Em seguida, equilibre-o.17
O teste de dispersibilidade foi realizado usando um aparelho de dissolução (Dr. Schleuniger Pharmaton, Modelo Diss 6000, Thun, Suíça) no qual 1 ml de cada preparação foi adicionado a 500 ml de água a 37±0,5°C.A agitação suave é assegurada por pás de dissolução de aço inoxidável padrão girando a 50 rpm.A emulsão resultante foi determinada visualmente e classificada como límpida, translúcida com coloração azulada, leitosa ou turva.Escolha uma fórmula clara para pesquisas futuras.18.19
A extração de Chx.HCl a partir de composições de nanoemulsão otimizadas com base no diagrama de fase pseudo-tripla leva à produção de n-butanol usando tecnologia ultrassônica.Após diluição adequada, os extratos foram analisados ​​espectrofotometricamente no comprimento de onda de 260 nm quanto ao teor de Chx.HCl.vinte
Para testar o tempo de autoemulsificação, 1 ml de cada composição foi adicionado a um béquer com 250 ml de água destilada e mantido a 37 ± 1°C com agitação constante a 50 rpm.O tempo de autoemulsificação é considerado como o tempo durante o qual o pré-concentrado forma uma mistura homogênea após a diluição.vinte e um
Para análise do tamanho das gotas, dilua 50 mg da formulação otimizada para 1000 ml com água em um frasco e misture delicadamente à mão.A distribuição do tamanho da gota foi determinada usando um instrumento Malvern Zetasizer 2000 (Malvern Instruments Ltd., Malvern, Reino Unido) sob condições de detecção de retroespalhamento de 173º, temperatura de 25ºC e índice de refração de 1,330.vinte e dois
Os estudos de dissolução in vitro foram realizados usando um aparelho USP Tipo II (pá) (Dr. Schleuniger Pharmaton, Diss Model 6000) a 50 rpm.Água destilada (500 ml) mantida a uma temperatura de 37±0,5°C foi utilizada como meio de dissolução e 5 ml da composição preparada foram adicionados gota a gota ao meio de dissolução.Então, em vários intervalos, 5 ml do meio de dissolução foram retirados e a quantidade de droga liberada foi determinada espectrofotometricamente a 254 nm.As experiências foram realizadas em triplicado.vinte e três
Em seguida, foram medidos os parâmetros cinéticos de liberação in vitro de Chx.HCl a partir de nanoemulsões preparadas com base na mesma.Cinética zero, primeira e segunda ordem e modelos de difusão de Higuchi foram testados para selecionar a sequência cinética mais adequada para a liberação de Chx.HCl.
2 ml de cada formulação foram armazenados à temperatura ambiente durante 48 horas antes de ser observada a separação de fases.Amostras de 1 ml de cada formulação de nanoemulsão de Chx.HCl foram então diluídas para 10 ml e 100 ml com água destilada a 25° C e armazenadas por 24 horas.Em seguida, observou-se a separação de fases.vinte e um
Em seguida, amostras de 2 ml de cada composição foram transferidas separadamente para frascos transparentes com tampa de rosca e armazenadas em geladeira a 2°C por 24 horas.Em seguida, foram removidos e armazenados a 25°C e 40°C.Um único ciclo de resfriamento-descongelamento foi realizado.As amostras foram então observadas quanto à separação de fases e precipitação do fármaco.vinte e um
Uma amostra de 5 ml de cada formulação de nanoemulsão Chx.HCl foi transferida para um tubo de vidro e colocada em uma centrífuga de laboratório (Shanghai Surgical Instrument Factory Microcentrifuge Model 800, Shanghai, República Popular da China) e centrifugada a 4000 rpm por 5 minutos.As amostras foram então observadas quanto à separação de fases e precipitação do fármaco.vinte e um
Todos os experimentos foram aprovados pelo Comitê de Ética Institucional da Universidade Ain Shams, Egito.Foram selecionados 50 dentes humanos uniradiculares não cariados com ápice formado.Dentes extraídos foram usados ​​após obtenção de consentimento informado por escrito assinado pelo paciente.Os dentes incluem incisivos superiores e inferiores e pré-molares inferiores.As superfícies externas das raízes foram tratadas com uma cureta e todos os dentes foram submetidos à esterilização da superfície em NaOCl 0,5% por 24 horas e, em seguida, armazenados em solução salina estéril até o uso.A coroa foi removida com um disco diamantado de lado seguro e o comprimento do dente foi normalizado para 16 mm do ápice à margem coronal.24,25 De acordo com a solução de enxágue, os dentes são divididos nos seguintes grupos:
(A) As amostras do grupo (n=24) foram lavadas com nanoemulsão de Chx.HCl.O subgrupo (I) (n = 12) lavou as amostras com 5 ml de nanoemulsão de Chx.HCl na concentração de 0,75%.O subgrupo (II) (n=12) lavou as amostras com 5 ml de nanoemulsão Chx.HCl 1,6%.(B) Um grupo (n=24) de amostras será lavado com 5 ml de Chx.HCl 2% de tamanho de partícula normal.Grupo controle: (n=2) lavados com 5 ml de soro fisiológico sem ativação.
Foram selecionados 44 dentes humanos uniradiculares não cariados com ponta formada.Os dentes incluem incisivos superiores e inferiores e pré-molares inferiores.As superfícies externas das raízes foram tratadas com uma cureta e todos os dentes foram submetidos à esterilização da superfície em NaOCl 0,5% por 24 horas e, em seguida, armazenados em solução salina estéril até o uso.As coroas foram removidas com um disco diamantado de segurança e o comprimento do dente foi normalizado para 16 mm do ápice à margem coronal.24,25,29
Preparo mecânico da lima apical principal tamanho 50 usando métodos padronizados.Use solução salina estéril como irrigante durante a cirurgia.Finalmente, o canal radicular foi lavado com 2 ml de 17% EDTA por 1 minuto para remover a smear layer.Toda a superfície radicular, incluindo o forame apical de cada espécime, foi coberta com duas camadas de esmalte (cola de cianoacrilato) para evitar infiltrações.Os dentes são então colocados verticalmente em um bloco de tártaro para facilitar o manuseio e a identificação.29-33 As amostras foram então autoclavadas a 121ºC e 15 psi por 20 minutos.Após a esterilização, todas as amostras foram transportadas e processadas em condições estéreis usando instrumentos estéreis.Os canais radiculares foram contaminados com uma cultura pura de Enterococcus faecalis (cepa ATCC 29212) cultivada em caldo de extrato de cérebro e coração (BHI) por 24 horas a 37°C.Usando uma micropipeta estéril, injete uma suspensão transparente de inóculo de E. faecalis nos canais radiculares preparados de todos os dentes.Os blocos foram então colocados em béqueres estéreis e incubados a 37°C por 24 horas.31, 34, 35
(A) As amostras do grupo (n=24) foram lavadas com nanoemulsão de Chx.HCl.As amostras do subgrupo (I) (n=12) foram lavadas com 5 ml de nanoemulsão Chx.HCl 0,75% concentração.O subgrupo (II) (n = 12) enxaguou as amostras com 5 ml de nanoemulsão Chx.HCl 1,6% concentração.
Grupo controle: controle positivo, (n=4) o canal radicular contaminado foi lavado com 5 ml de solução salina e mantido como controle positivo.Controle Negativo: (n=4) Os espécimes não foram injetados com suspensão, ou seja, o canal radicular não foi contaminado com E. faecalis, e foi mantido estéril como controle negativo para confirmar a esterilização e confiabilidade do procedimento.Use 5 ml de solução de lavagem de teste em cada amostra.Cada amostra foi então submetida a uma lavagem final com 1 ml de solução salina estéril.
Uma ponta de papel estéril de tamanho 35 é usada para coletar amostras de canais radiculares.A ponta de papel foi inserida no tubo até o comprimento de trabalho, deixada por 10 segundos e depois transferida para placas de ágar para determinar o número de unidades formadoras de colônias (CFU) por placa.As placas foram incubadas a 37ºC por 24 horas e então avaliadas visualmente quanto ao crescimento bacteriano.A placa transparente mostra a esterilização completa.Placas borradas são consideradas para mostrar crescimento positivo.O número médio de CFUs na zona de crescimento bacteriano por placa foi determinado e o número de CFUs foi calculado.Os sobreviventes são medidos principalmente com contagens viáveis ​​em placas de gotejamento.Além disso, um copo de vazamento foi usado para contar UFCs baixas e uma diluição para 106 foi usada para contar UFCs altas.36.37
Prepare tubos contendo 15 ml de meio de ágar descongelado pré-esterilizado em autoclave no mesmo dia do experimento.Enterococcus faecalis é um coco anaeróbico Gram-positivo facultativo que pode sobreviver em pH muito alto, acidez e altas temperaturas.39 Amostras bacterianas (Enterococcus faecalis ATCC 29212) foram preparadas misturando células de colônias com solução salina estéril.As amostras bacterianas foram então diluídas com solução salina para corresponder a McFarland 0,5, equivalente a 108 UFC/mL.O volume de amostra adicionado foi de 10 µl.39 Um padrão de turbidez (McFarland 0,5)40 foi preparado despejando 0,6 ml de solução de di-hidrato de cloreto de bário a 1% (10 g/l) em um cilindro graduado de 100 ml e enchendo até 100 ml com ácido sulfúrico a 1% (10 g/l).Os padrões de turbidez foram colocados nos mesmos tubos que as amostras de caldo e armazenados à temperatura ambiente por 6 meses no escuro e selados para evitar a evaporação.Abra a tampa da placa de Petri vazia e despeje a amostra no meio da placa.Se o ágar estiver completamente solidificado, inverter a placa e incubar a 37°C por 24 horas.
Todos os dados foram coletados, tabulados e submetidos à análise estatística.A análise estatística foi realizada usando o IBM® SPSS® Statistical Versão 17 para Windows (SPSS Inc., IBM Corporation, Armonk, NY, EUA).
A solubilidade de Chx.HCl em várias fases oleosas, soluções de surfactantes, soluções de co-surfactantes e água foi estudada.Chx.Hcl tem a maior solubilidade em Labrafil M e a menor solubilidade em ácido oleico.A maior solubilidade do fármaco na fase oleosa é importante para as nanoemulsões porque as nanoemulsões são capazes de manter o fármaco na forma dissolvida, o que significa que a maior solubilidade do fármaco no óleo resulta em menos óleo na formulação e, portanto, menos fármaco.carregamento Uma certa quantidade de surfactante e co-surfactante é necessária para emulsionar as gotas de óleo.
Um diagrama de pseudo-fase tripla foi construído para definir regiões de nanoemulsão e otimizar as concentrações de óleos selecionados, surfactantes e surfactantes adicionais (Labrafil M, Tween 80, Tween 20 e propilenoglicol, respectivamente).Chx.Hcl apresenta solubilidade muito baixa em ácido oleico, resultando em turvação quando o ácido oleico é titulado com a primeira gota de água.Portanto, o sistema ácido oleico foi excluído deste estudo.Outras formulações foram preparadas usando uma mistura 1:9 de óleo e surfactante.faixa de pH e força iônica, então esses surfactantes foram escolhidos.
Todas as formulações preparadas eram claras, exceto para o Sistema F2, que parecia turvo e, portanto, foi excluído de estudos de avaliação adicionais.
A formulação de nanoemulsão ideal deve ser capaz de se dispersar completa e rapidamente quando diluída com agitação suave.As formulações de nanoemulsão Chx.HCl apresentaram tempos de emulsificação curtos, de 1,67 a 12,33 segundos.Tween 80 tem o menor tempo de emulsificação.Isso pode ser explicado pela maior capacidade solubilizante do Tween 80. O tempo de autoemulsificação aumenta com o aumento da concentração do surfactante, o que pode ser devido ao aumento da viscosidade do sistema sob a ação do surfactante.
O tamanho da gota da emulsão determina a taxa e a extensão da liberação do fármaco.Tamanho de gota de emulsão menor resulta em menor tempo de emulsificação e maior área de superfície para absorção de drogas.Os tamanhos médios de gotículas das composições selecionadas da nanoemulsão de Chx.HCl foram 711±0,44, 587±15,3, 10,97±0,11, 16,43±4,55 e 12,18±2,48, e o PDI foi de 0,76, 0,19, 0,61, 0,47 e 0,76 para F1, F2., F3 e 0,16 respectivamente F4, F5 e F6.As formulações contendo Tween 80 como surfactante apresentaram esferulitos menores.Isso pode ser devido ao seu maior poder emulsificante.Um valor de PDI mais baixo indica uma distribuição de tamanho de sistema mais estreita.Essas formulações têm uma aparência limpa porque seus raios de gotículas são menores que o comprimento de onda óptico da luz visível (390-750 nm) no qual ocorre dispersão mínima de luz.41
Na fig.2 mostra a porcentagem de Chx.HCl liberada da formulação formulada.A liberação completa do fármaco das formulações preparadas da nanoemulsão Chx.HCl variou de 2 a 7 minutos.Observou-se que a maior taxa de liberação do fármaco foi obtida no caso da formulação de nanoemulsão Chx.HCl F6 (2 min), o que pode ser devido à presença do Tween 80, que apresentou maior grau de emulsificação, e da nanoemulsão resultante.fornece uma grande área de superfície para a liberação do fármaco, permitindo maiores taxas de liberação do fármaco.Ao mesmo tempo, as propriedades de solubilidade do propilenoglicol permitem que uma grande quantidade de surfactantes hidrofílicos seja dissolvida no óleo.40
Verificou-se que a liberação de Chx.HCl in vitro segue uma ordem cinética diferente, e nenhuma ordem cinética clara pode refletir a liberação do fármaco de formulações de nanoemulsão preparadas de forma diferente.A liberação cinética de fármacos F4 é cinética de primeira ordem, o que significa que eles são liberados proporcionalmente à quantidade de fármaco que permanece dentro deles.42 A liberação cinética de outras drogas foi consistente com o modelo de difusão de Higuasha, que indicou que a quantidade de droga liberada foi proporcional à raiz quadrada da droga total e à solubilidade da droga na nanoemulsão.42
As formulações selecionadas foram submetidas a variação de estabilidade termodinâmica por teste de estresse usando ciclos de calor-resfriamento, centrifugação e ciclos de congelamento-descongelamento.Observou-se que as formulações F3 e F4 apresentaram precipitação do fármaco após os ciclos de descongelamento, enquanto a F1 apresentou espessamento (gelificação).F5 e F6 passaram no ciclo de centrifugação contínua, no teste de aquecimento-resfriamento e no teste de congelamento-descongelamento.Nanoemulsões são sistemas termodinamicamente estáveis ​​formados em certas concentrações de óleo, surfactante e água sem separação de fases, emulsificação ou craqueamento.É a estabilidade térmica que distingue as nanoemulsões das emulsões, que são cineticamente estáveis ​​e eventualmente se separam em fases.19 F3 apresentou tamanho de partícula maior (587 nm) do que outras formulações, o que pode explicar a separação de fases e a precipitação da droga em testes de estabilidade termodinâmica.F4 contendo Tween 80 e sem co-surfactante apresentou precipitação do fármaco, o que pode indicar a necessidade do uso de propileno glicol e Tween 80 para melhorar a estabilidade das formulações de nanoemulsão.F1 contendo Tween 20 sem surfactante adicional exibiu espessamento (gelificação), que é um aumento na viscosidade ou resistência do gel devido à agregação de gotículas.
Os resultados de estabilidade demonstram a importância da presença de um surfactante adicional de propilenoglicol para aumentar a dispersão de partículas e prevenir a precipitação do fármaco.43 F6 foi a melhor formulação devido ao pequeno tamanho de partícula (12,18 nm), curto tempo de emulsificação (1,67 segundos) e rápida taxa de dissolução após 2 minutos.Verificou-se que era um sistema termodinamicamente/fisicamente estável e, portanto, foi selecionado para um estudo mais aprofundado.
As falhas após o tratamento do canal radicular estão se tornando mais frequentes, o que significa que os pacientes correm um risco maior de desenvolver infecções mais complexas.44,45 O biofilme deve ser removido durante a desinfecção e obturação dos canais radiculares.46,47 Devido à complexidade do sistema de canais radiculares, torna-se difícil remover completamente os canais radiculares bacterianos usando apenas instrumentos e irrigação.48 A eficácia das soluções de enxágue do canal radicular depende da penetração do irrigante no DT e da duração da exposição às bactérias.49 Portanto, novos métodos de esterilização completa do canal radicular foram experimentados e testados.Os enxágues convencionais não eliminam completamente o E. faecalis devido à menor penetração do DT.50.
O poder de limpeza médio do enxágue da nanoemulsão foi de 2.001,47 µm2 e o tamanho médio das partículas do abrilhantador foi de 2.609,56 µm.A diferença média entre a lavagem de nanoemulsão e a lavagem de tamanho de partícula normal foi de 608,09 µm2. Houve uma diferença estatisticamente significativa (P<0,001) entre os irrigantes de nanoemulsão e os irrigantes de tamanho de partícula normal com (valor de P 0,00052). Houve uma diferença estatisticamente significativa (P<0,001) entre os irrigantes de nanoemulsão e os irrigantes de tamanho de partícula normal com (valor de P 0,00052). Между ирригационными растворами наноэмульсии и ирригационными растворами с нормальным размером частиц наб людалась статистически высокозначимая (P<0,001) разница (значение P 0,00052). Houve uma diferença estatisticamente significativa (P<0,001) (valor de P 0,00052) entre os irrigantes de nanoemulsão e os irrigantes de partículas normais.纳米乳液冲洗剂和正常粒径冲洗剂之间存在统计学上高度显着的差异（P<0,001）（P 值0,00052） 。纳米乳液冲洗剂和正常粒径冲洗剂之间存在统计学上高度显着的差异（P<0,001）（P 值0,00052） 。 Между ополаскивателем с наноэмульсией и ополаскивателем с нормальным размером частиц была статистически о чень значимая разница (P<0,0001) (значение P 0,00052). Houve uma diferença estatisticamente muito significativa (P<0,0001) entre o enxágue de nanoemulsão e o enxágue de tamanho de partícula normal (valor de P 0,00052).A nanoemulsão apresentou uma diferença estatisticamente muito significativa em relação ao material de granulometria normal, apresentando uma menor área superficial média de detritos residuais, ou seja, o material da nanoemulsão apresentou a melhor capacidade de limpeza, conforme mostra a figura 3.
Figura 3. Comparação do desempenho de limpeza dos abrilhantadores: (A) com Nano CHX laser ativado, (B) com CHX laser ativado, (C) com PUI Nano CHX, (D) sem ativação Nano CHX, (E) sem ativação CHX e (F)) ativação CHX PUI.
A área superficial média dos fragmentos Chx.HCl 1,6% restantes foi de 2.320,36 µm2, e a área superficial média de Chx.HCl 2% foi de 2.949,85 µm2. Houve uma diferença estatisticamente significativa (P<0,001) entre a maior concentração de irrigantes de nanoemulsão e os irrigantes de tamanho de partícula normal (P-valor 0,00000). Houve uma diferença estatisticamente significativa (P<0,001) entre a maior concentração de irrigantes de nanoemulsão e os irrigantes de tamanho de partícula normal (P-valor 0,00000). Нюююююааа нююююаааюююю perar с стиисger (p <0,001) рзница мжж и бо ио ио цо цо ыо ио ио цо цо цо ц ыч ыж мо цо и мч нюююююючч ês 'юююююючч nso нюююююч nso юююююю nso ююююю nso нюююючч nso юююч nch с decidз и и мж м нюююююч ês' нюююююч nso нюююююч nso нюююююю nso нюююююю nso нююююю nso. с т т с с с с с с с с ир цацациорасоцbol ицацционыи иорамомitivamente с нормармыны р ч чччаuldade (значение< ччччч nso иоами ччччч nso и и и с с с с с с с с с с с ир ир ир land и Shвцие ife и Shнцацацbolц и т с с с с с с с ife и Shви иорццerar Houve uma diferença estatisticamente significativa (P<0,001) entre a maior concentração de irrigantes de nanoemulsão e irrigantes de tamanho de partícula normal (valor de P 0,00000).较高浓度的纳米乳液冲洗剂与正常粒径冲洗剂之间存在统计学上高度显着的差异（P<0,001）（ P 值0,00000）。较高浓度的纳米乳液冲洗剂与正常粒径冲洗剂之间存在统计学显着的差异（P<0,001）（P 0 0,0 Наблюдалась статистически очень значимая разница (P<0,001) между более высокими концентрациями ополаски вателя с наноэмульсией и ополаскивателя с нормальным размером частиц (значение P 0,00000). Houve uma diferença estatisticamente muito significativa (P<0,001) entre concentrações mais altas de enxágue de nanoemulsão e enxágue de tamanho de partícula normal (valor de P 0,00000).Embora a concentração do irrigante de nanoemulsão fosse menor do que a do irrigante de tamanho de partícula normal, essa concentração mais baixa foi significativamente mais eficaz na remoção de detritos e mais eficaz na limpeza dos canais radiculares.
PUI teve uma diferença estatisticamente altamente significativa (p<0,001) quando comparado a outros métodos de ativação. PUI teve uma diferença estatisticamente altamente significativa (p<0,001) quando comparado a outros métodos de ativação. PUI имел статистически высокозначимую разницу (p<0,001) по сравнению с другими методами активации. PUI teve uma diferença estatisticamente altamente significativa (p<0,001) em comparação com outros métodos de ativação.与其他激活方法相比，PUI 具有统计学上非常显着的差异(p<0,001)。与其他激活方法相比，PUI 具有统计学上非常显着的差异(p<0,001)。 По сравнению с другими методами активации PUI имел статистически очень значимую разницу (p<0,001). Comparado com outros métodos de ativação, o PUI teve uma diferença estatisticamente muito significativa (p<0,001).Com a ativação do ISP, a área média da superfície residual dos detritos foi de 1695,31 µm2. A diferença média entre PUI e Laser foi de 987,89929, mostrando diferença estatisticamente significativa (P<0,001) com (p-valor 0,00000). A diferença média entre PUI e Laser foi de 987,89929, mostrando diferença estatisticamente significativa (P<0,001) com (p-valor 0,00000). Средняя разница между PUI и Laser составила 987,89929, демонстрируя высокостатистически значимую (P<0,001) разницу с (p-значение 0,00000). A diferença média entre PUI e Laser foi de 987,89929, mostrando uma diferença estatisticamente significativa (P<0,001) de (p-valor 0,00000). PUI e Laser 之间的平均差异为987.89929，显示出高度统计学显着性(P<0,001) 差异(p 值0,00000)。PUI e Laser Средняя разница между PUI и Laser составила 987,89929, что свидетельствует о высокой статистической значимости (P<0 ,001) разницы (p-значение 0,00000). A diferença média entre PUI e Laser foi de 987,89929, indicando uma diferença de alta significância estatística (P<0,001) (p-valor 0,00000). A diferença média entre PUI e nenhuma ativação foi de 712,40643 mostrando uma diferença estatisticamente significativa (P<0,001) com um valor p de 0,00098). A diferença média entre PUI e nenhuma ativação foi de 712,40643, mostrando uma diferença estatisticamente significativa (P<0,001) com um valor de p de 0,00098).um valor P de 0,451211. Средняя разница между PUI и отсутствием активации составила 712,40643, демонстрируя высокостатистически значиму ю (P<0,001) разницу с p-значением 0,00098). A diferença média entre PUI e nenhuma ativação foi de 712,40643, mostrando uma diferença estatisticamente significativa (P<0,001) com um valor de p de 0,00098).Valor P 0,451211. PUI 和未激活之间的平均差异为712.40643，显示高度统计学显着性差异(P<0,001)，p 值为0,00098)。PSI Средняя разница между PUI инактивацией составила 712,40643, что свидетельствует о высокой статистической з начимости разницы (P<0,001, p-значение 0,00098). A diferença média entre PUI e inativação foi de 712,40643, indicando uma alta significância estatística da diferença (P<0,001, p-valor 0,00098).使用激光激活或不激活在统计学上没有显着差异(P>0,05) P 值为0,451211。使用激光激活或不激活在统计学上没有显着差异(P>0,05) P 值为0,451211。 P 0,451211 . Não houve diferença estatisticamente significativa (P>0,05) com ou sem ativação do laser com valor de P de 0,451211.A área superficial média dos fragmentos remanescentes após a ativação do laser foi de 2683,21 µm2.A área superficial média dos fragmentos restantes sem ativação foi de 2.407,72 µm2.Comparado com a ativação ou não ativação do laser, o PUI apresentou uma área de superfície de cavaco média estatisticamente menor, ou seja, o melhor poder de limpeza.
O poder de limpeza médio do enxágue da nanoemulsão foi de 2.001,47 µm2 e o tamanho médio das partículas do abrilhantador foi de 2.609,56 µm.A diferença média entre a lavagem de nanoemulsão e a lavagem de tamanho de partícula normal foi de 608,09 µm2. Houve diferença estatisticamente significativa (P<0,001) entre os irrigantes de nanoemulsão e os irrigantes de tamanho de partícula normal com (valor de P 0,00052). Houve diferença estatisticamente significativa (P<0,001) entre os irrigantes de nanoemulsão e os irrigantes de tamanho de partícula normal com (valor de P 0,00052). Между ирригационными растворами наноэмульсии и ирригационными растворами с нормальным размером частиц бы ла статистически высокозначимая (P<0,001) разница (значение P 0,00052). Houve uma diferença estatisticamente significativa (P<0,001) (valor de P 0,00052) entre os irrigantes de nanoemulsão e os irrigantes de partículas normais.纳米乳液冲洗剂与正常粒径冲洗剂之间存在统计学上高度显着的差异（P<0,001）（P值0,00052） 。 P<0,001）（P值0,00052）。 Между ополаскивателем с наноэмульсией и ополаскивателем с нормальным размером частиц была статистически о чень значимая разница (P<0,0001) (значение P 0,00052). Houve uma diferença estatisticamente muito significativa (P<0,0001) entre o enxágue de nanoemulsão e o enxágue de tamanho de partícula normal (valor de P 0,00052).Em comparação com um material de tamanho de partícula normal, a nanoemulsão tem uma diferença estatisticamente muito significativa, mostrando uma área de superfície residual média menor, ou seja, o material de nanoemulsão tem melhor capacidade de limpeza, conforme mostrado na Figura 3.
A área superficial média dos fragmentos Chx.HCl 1,6% restantes foi de 2.320,36 µm2, e a área superficial média de Chx.HCl 2% foi de 2.949,85 µm2. Houve diferença estatisticamente significativa (P<0,001) entre a maior concentração de irrigantes de nanoemulsão e os irrigantes de tamanho de partícula normal (P-valor 0,00000). Houve uma diferença estatisticamente significativa (P<0,001) entre a maior concentração de irrigantes de nanoemulsão e os irrigantes de tamanho de partícula normal (P-valor 0,00000). Имелась статистически высокодостоверная (P<0,001) разница между более высокой концентрацией наноэмульсионн ых ирригационных средств и ирригационными растворами с нормальным размером частиц (значение P 0,00000). Houve uma diferença estatisticamente significativa (P<0,001) entre a maior concentração de irrigantes de nanoemulsão e irrigantes de tamanho de partícula normal (valor de P 0,00000).较高浓度的纳米乳液冲洗剂与正常粒径冲洗剂之间存在统计学上高度显着的差异（P<0,001）（ P值0,00000）。较高浓度的纳米乳液冲洗剂与正常粒径冲洗剂之间存在统计学上高度显着的差异（P<0,001）（ P000 Наблюдалась статистически высокозначимая разница (P <0,001) между более высокими концентрациями ополаскив ателя с наноэмульсией и ополаскивателем с нормальным размером частиц (значение P 0,00000). Houve uma diferença estatisticamente significativa (P < 0,001) entre concentrações mais altas de enxágue de nanoemulsão e enxágue de tamanho de partícula normal (valor de P 0,00000).Embora a concentração do irrigante de nanoemulsão fosse menor do que a do irrigante de tamanho de partícula normal, essa concentração mais baixa foi significativamente mais eficaz na remoção de detritos e mais eficaz na limpeza dos canais radiculares.
O PUI teve diferença significativa estatisticamente alta (p<0,001) quando comparado aos outros métodos de ativação. O PUI teve diferença significativa estatisticamente alta (p<0,001) quando comparado aos outros métodos de ativação. PUI имел статистически высокую значимую разницу (p<0,001) по сравнению с другими методами активации. O PUI apresentou diferença estatisticamente significativa (p<0,001) em relação aos demais métodos de ativação.与其他激活方法相比，PUI 具有统计学上的显着差异(p<0,001)。 Comparado com outros métodos de ativação, o PUI apresenta diferença estatisticamente significativa (p<0,001). PUI статистически значимо отличался (p<0,001) по сравнению с другими методами активации. PUI foi estatisticamente significativamente diferente (p<0,001) em comparação com outros métodos de ativação.Durante a ativação do PUI, a área média de detritos superficiais residuais foi de 1695,31 μm2. A diferença média entre PUI e Laser foi 987,89929 mostrando diferença altamente estatisticamente significativa (P<0,001) com (p-valor 0,00000). -valor 0,451211). A diferença média entre PUI e Laser foi de 987,89929, mostrando diferença estatisticamente significativa (P<0,001) com (p-valor 0,00000).A diferença média entre PUI e nenhuma ativação foi de 712,40643, mostrando diferença estatisticamente significativa (P<0,001) com (p -valor 0,00098).O uso de ativação do Laser ou nenhuma ativação não foi significativamente diferente estatisticamente (P>0,05) com (P-valor 0,451211). Средняя разница между PUI и лазером составила 987,89929, демонстрируя высокостатистически значимую (P<0,001) ра зницу с (p-значение 0,00000). A diferença média entre PUI e laser foi de 987,89929, demonstrando uma diferença estatisticamente significativa (P<0,001) com (p-valor 0,00000). - значение 0,00098). разницы (P>0,05) с (P-значение 0,451211). - valor 0,00098).O uso de ativação do laser ou nenhuma ativação teve uma diferença estatisticamente significativa (P>0,05) com (P-valor 0,451211). PUI 和激光之间的平均差异为987.89929，与(p 值0.00000) 差异具有高度统计学意义(P<0.001)。 A diferença média entre PUI e laser é 987,89929, e a diferença (p 值 0,00000) tem uma alta significância estatística (P <0,001). Средняя разница между PUI и лазером составила 987,89929, что было высоко статистически значимым (P<0,001) с ( значение p 0,00000). A diferença média entre PUI e laser foi de 987,89929, o que foi estatisticamente altamente significativo (P<0,001) com (valor de p 0,00000). PUI 与未激活之间的平均差异为712.40643，与(p) 差异具有高度统计学意义(P<0,001) -值0,00098)。 A diferença média entre PUI e inativo é 712,40643, sendo que a diferença (p) tem alta significância estatística (P<0,001) – valor 0,00098. Средняя разница между PUI и инактивацией составила 712,40643, что было высоко статистически значимым с раз ницей (p) (P<0,001 — значение 0,00098). A diferença média entre PUI e inativação foi de 712,40643, o que foi altamente significativo estatisticamente com diferença (p) (P<0,001 – valor 0,00098).使用激光激活或不激活没有显着统计学差异(P>0,05) 与(P 值0,451211)。 Não houve diferença estatística significativa entre ativação e não ativação do laser (P>0,05) e (P 值0,451211). Не было статистически значимой разницы (P>0,05) по сравнению с (значение P 0,451211) с лазерной активацией или без нее. Não houve diferença estatisticamente significativa (P>0,05) em comparação com (P valor 0,451211) com ou sem ativação do laser.A área superficial média dos fragmentos remanescentes durante a ativação do laser foi de 2683,21 μm2.A área superficial média dos fragmentos restantes sem ativação foi de 2.407,72 μm2.Comparado com a ativação ou não ativação do laser, o PUI tem uma área de superfície média estatisticamente menor do chip, ou seja, melhor capacidade de limpeza.
O efeito médio do enxágue com nanoemulsão na remoção de detritos foi estatisticamente significativamente maior do que o enxágue com tamanho de partícula normal.Chx.HCl 1,6%, PUI 1938,77 µm2, 2510,96 µm2 com laser.Sem ativação, o valor médio é 2511,34 µm2.Quando 2% Chx.HCl foi usado e ativado com um laser, os resultados foram os piores e a quantidade de detritos foi máxima.Os mesmos resultados foram obtidos quando a Chx.HCl 0,75% não foi ativada.Obviamente, os melhores resultados foram obtidos usando maiores concentrações de abrilhantador na nanoemulsão.O PUI foi mais eficaz na ativação do irrigante e na lavagem de detritos, conforme mostrado na Figura 3A-F)).
Conforme mostrado na Tabela 2, a nanoemulsão Chx.HCl teve um desempenho melhor do que as partículas de tamanho normal em termos de contagem de microorganismos viáveis ​​e teve uma boa correlação com a penetração da formulação e o efeito de limpeza de acordo com os seguintes parâmetros: tamanho, concentração do agente de lavagem e método de ativação.
As bactérias podem ser completamente destruídas usando uma concentração maior de abrilhantador.Mesmo com a ativação do PUI, 0,75% Chx.HCl teve o pior efeito antibacteriano.A ativação do laser tem um efeito negativo em enxágues de nanoemulsão.Como pode ser visto em todos os resultados anteriores, o uso de um laser reduz a eficiência da nanoemulsão Chx.HCl 0,75%, onde a UFC do nanoChx.HCl 0,75% é 195, que é um valor muito alto, indicando que os reagentes nesta concentração são comparáveis ​​à ativação do laser.Os lasers de diodo são fototérmicos, portanto, tanto a luz quanto o calor podem fazer com que a nanoemulsão perca seu efeito antibacteriano.O resultado de altas concentrações é a destruição completa das bactérias.Nano Chx.HCl 1,6% apresentou crescimento bacteriano negativo na presença de ativação do laser, o que significa que o laser não afetou a capacidade antibacteriana do nano Chx.HCl 1,6%.Pode-se concluir que o material de nanoemulsão com maior concentração tem um melhor efeito antibacteriano.
Neste trabalho, nanoemulsões Chx.HCl foram preparadas usando dois óleos diferentes, dois surfactantes e um co-surfactante, a formulação ótima (F6) com tamanho de partícula pequeno, tempo de emulsificação curto e alta taxa de dissolução) foi escolhida.Além disso, (F6) foi testado quanto à estabilidade termodinâmica/física.Na nanoemulsão Chx.HCl na concentração de 1,6%, a nanoemulsão Chx.HCl apresentou a melhor permeabilidade nos túbulos dentinários em comparação com o Chx.HCl tradicional como fluido de enxágue, e o PUI como método de ativação teve uma capacidade de limpeza.Além disso, estudos antibacterianos da nanoemulsão Chx.HCl mostraram eliminação completa de bactérias.Os resultados confirmaram isso.A nanoemulsão Chx.HCl pode ser considerada um líquido de lavagem promissor.
Somos muito gratos à equipe do laboratório de pesquisa da Misr University of Science and Technology por seu grande apoio.