Javascript este în prezent dezactivat în browserul dvs. Unele caracteristici ale acestui site web nu vor funcționa când javascript este dezactivat.
Înregistrați-vă cu detaliile dvs. specifice și medicamentul de interes specific și vă vom potrivi informațiile pe care le furnizați cu articolele din baza noastră de date extinsă și vă vom trimite prompt prin e-mail o copie PDF.
作者 Stella S, Vitale SR, Martorana F, Massimino M, Pavone G, Lanzafame K, Bianca S, Barone C, Gorgone C, Fichera M, Manzella L
Stefania Stella, 1,2 Silvia Rita Vitale, 1,2 Federica Martorana, 1,2 Michele Massimino, 1,2 Giuliana Pavone, 3 Katia Lanzafame, 3 Sebastiano Bianca, 4 Chiara Barone, 5 Cristina Gorgone, 6 Marco Fichera, 6, 7 Livia Manzella, Clinica de Medicină Livia Manzella1, 21, Universitatea din Catania, 1, 22, Departamentul de Medicină din Catania, 1, 22, Ex. Italia; 2 Centrul de Oncologie și Hematologie Experimentală, AOU Policlinico „G.Rodolico – San Marco”, Catania , 95123, Italia;3 Oncologie Medicală, AOU Policlinico „G.Rodolico – San Marco”, Catania, 95123, Italia;4 Medical Genetics, ARNAS Garibaldi, Catania, 95123, Italia;5 Medicine Genetics, ASP, Syracuse, 96100, Italia;6 Departamentul de Științe Biomedicale și Biotehnologie, Universitatea din Catania, Genetică Medicală, Catania, Italia, 95123;7Oasi Research Institute-IRCCS, Troina, 94018, Italia Comunicari: Stefania Stella, tel +39 095 378 1946, email [email protected];[email protected] Scop: mutații ale liniei germinale în BRCA1 și BRCA2 și cancer de sân (BC), ovar (OC) și altele asociate cu un risc de cancer pe viață. Testarea genei BRCA este cheia pentru evaluarea riscului individual, precum și pentru găsirea de metode de prevenire la purtătorii sănătoși și pentru adaptarea tratamentelor la pacienții cu cancer. Variantele genice în familiile siciliene, lipsesc studiile care vizează în mod specific populațiile din estul Siciliei. Scopul studiului nostru a fost să investigheze incidența și distribuția modificărilor germinale patogene BRCA într-o cohortă de pacienți BC din estul Siciliei și să evalueze asocierea acestora cu trăsături specifice BC utilizând secvențierea de generația următoare. %) au avut o variantă patogenă BRCA, 17 (49%) în BRCA1 și 18 (51%) în BRCA2. Alterările BRCA1 sunt predominante la pacienții cu BC triplu negativi, în timp ce mutațiile BRCA2 sunt mai frecvente la pacienții cu BC luminal. pacienții din estul Siciliei și confirmă rolul analizei NGS în identificarea pacienților cu BC ereditar. În general, aceste date sunt în concordanță cu dovezile anterioare care susțin screening-ul BRCA pentru prevenirea și tratamentul adecvat al cancerului la purtătorii de mutații.
Cancerul de sân (BC) este cea mai frecventă malignitate la nivel mondial și cel mai mortal cancer la femei.1 Caracteristicile biologice care determină prognosticul BC și comportamentul clinic au fost studiate pe larg și parțial elucidate de-a lungul timpului. De fapt, câțiva markeri surogat sunt utilizați în prezent pentru a clasifica BC în diferite subtipuri moleculare. Aceștia sunt receptorul de estrogen (ER) și/sau receptorul de estrogen (ER) și/sau factor de amplificare 2 epidermal (ERP), factor de amplificare 2 uman. indicele de proliferare Ki-67 și gradul tumorii (G).2 Combinația acestor variabile a identificat următoarele categorii de BC: 1) Tumorile luminale, care prezintă expresie ER și/sau PgR, au reprezentat 75% din BC. Aceste tumori au fost împărțite în continuare în Luminal A, când Ki-67 a fost sub 20% și HER2 negativ și mai mare de HER2, când prezența Ki-HER272 a fost egală cu Ki-HER27 și amplificarea% peste. ție, indiferent de indicele de proliferare;2) Tumori HER2+ care sunt ER și PgR negative, dar prezintă amplificare HER2. Acest grup reprezintă 10% din toate tumorile mamare;3) Cancerul de sân triplu negativ (TNBC), care nu prezintă expresie ER și PgR și amplificare HER2, reprezintă aproximativ 15% din cancerele de sân.2-4
Printre aceste subtipuri BC, gradul tumorii și indicele de proliferare reprezintă biomarkeri transversali care sunt asociați direct și independent cu agresivitatea și prognosticul tumorii.5,6
Pe lângă caracteristicile biologice menționate mai sus, rolul modificărilor genetice moștenite care duc la dezvoltarea BC a devenit din ce în ce mai important în ultimii ani.7 Aproximativ 1 din 10 tumori mamare sunt moștenite din cauza modificărilor liniei germinale în anumite gene.8 Două studii epidemiologice mari, care au implicat mai mult de 180.000 de femei, au identificat recent grupul de gene ATM, BRCA, BRCA, BRCA1, BRCA, BRCA, BRCA, BRCA, BRCA, BRCA, BRCA, BRCA, BRCA, BRCA, BRCA, BRCA, BRCA, BRCA, BRCA, BRCA, BRCA, BRCA, CH K2, PALB2, RAD51C și RAD51D) sunt responsabili în primul rând pentru BC ereditar. Printre aceste gene, BRCA1 și BRCA2 (denumite în continuare BRCA1/2) au prezentat cea mai puternică corelație cu dezvoltarea tumorilor mamare.9-12 tic, colorectal și melanom. De la vârsta de 13 până la 80 de ani, incidența cumulată a BC este de 72% la femeile cu o variantă patogenă (PV) BRCA1 și de 69% la femeile cu PV BRCA2.14
În mod remarcabil, o publicație recentă sugerează că riscul de BC depinde de tipul de PV. De fapt, în comparație cu variantele patogene trunchiate, variantele flagring missense, în special în gena BRCA1, sunt asociate cu un risc redus de BC, în special la femeile în vârstă.15
Prezența BRCA1 sau BRCA2 PV a fost asociată cu diferite caracteristici biologice și clinicopatologice.16,17 BC-urile asociate BRCA1 tind să fie clinic agresive, slab diferențiate și foarte proliferative. Aceste tumori sunt de obicei triplu negative și au o vârstă fragedă de debut. n B și apar de obicei la adulții în vârstă.16-18 În special, mutațiile BRCA1 și BRCA2 cresc sensibilitatea la tratamente specifice, inclusiv sărurile de platină și medicamentele vizate, cum ar fi inhibitorii de poli(ADP-riboză) polimerazei (PARPi).19,20.
În ultimii câțiva ani, implementarea secvențierii de generație următoare (NGS) în practica clinică a permis unui număr tot mai mare de pacienți BC să se supună testelor moleculare pentru sindroamele de susceptibilitate la cancer, inclusiv BRCA1/2.21. 1/2 screening în populații specifice, evidențiind diferențele între regiunile geografice.24–27 Deși există rapoarte despre cohorta BC în vestul Siciliei, sunt disponibile mai puține date despre screening-ul BRCA1/2 în populația din estul Siciliei.28,29.
Descriem aici rezultatele screening-ului BRCA1/2 la nivelul liniei germinale la pacienții BC din estul Siciliei, corelând în continuare prezența mutațiilor BRCA1 sau BRCA2 cu principalele caracteristici clinicopatologice ale acestor tumori.
Un studiu retrospectiv a fost realizat la „Centrul de Oncologie Experimentală și Hematologie” de la Spitalul Policlinico.Rodolico – San Marco din Catania.Din ianuarie 2017 până în martie 2021, un total de 455 de pacienți cu cancer de sân și ovarian, melanom, pancreas sau prostată au fost îndrumați către laboratorul nostru de diagnostic molecular/diagnostic BRCA în conformitate cu studiul nostru genetic BRCA. și toți participanții au furnizat consimțământul informat scris înainte de analiza moleculară.
Caracteristicile histologice și biologice (ER, PgR, statusul HER2, Ki-67 și gradul) ale BC au fost evaluate pe biopsie de bază sau probe chirurgicale, luând în considerare doar componentele tumorale agresive. Pe baza acestor caracteristici, BC-urile au fost clasificate după cum urmează: luminal A (ER+ și/sau PgR+, HER+, HER+, 672-2-ER2, HER2, HER2, HER2, HER2) -, Ki-67≥20%), luminal B-HER2+ (ER și/sau PgR+, HER2+), HER2+ (ER și PgR-, HER2+) sau triplu negativ (ER și PgR-, HER2-).
Înainte de a evalua starea mutației BRCA1 și BRCA2, o echipă multidisciplinară care include un oncolog, un genetician și un psiholog a efectuat un consult de genetică tumorală pentru fiecare pacient pentru a determina prezența BRCA1 și/sau BRCA1.sau indivizi cu risc ridicat de PV în gena BRCA2. Selecția pacientului a fost efectuată conform ghidurilor Societății Italiane de Oncologie Medicală (AIOM) și recomandărilor locale siciliene.30,31 Aceste criterii includ: (i) antecedente familiale de variante patogene cunoscute în genele de susceptibilitate (de exemplu, BRCA1, BRCA2, TP53, PTEN);(ii) bărbați cu BC;(iii) cei cu BC și OC;(iv) femei cu BC <36 ani, TNBC <60 ani sau BC bilateral <50 ani;(v) antecedente medicale personale de BC <50 de ani și cel puțin o rudă de gradul I: (a) BC <50 de ani;(b) CO non-mucinoase și nelimitate de orice vârstă;(c) BC bilateral;(d) masculin BC;(e) cancer pancreatic;(f) cancer de prostată;(vi) două sau mai multe antecedente personale de BC > 50 de ani și antecedente familiale de BC, OC sau cancer pancreatic pentru rudele care sunt rude de gradul întâi între ele (inclusiv rude cu care este rudă de gradul I);(vii) Istoricul personal de OC și cel puțin o rudă de gradul I: (a) BC <50 de ani;(b) NOC;(c) BC bilateral;(d) masculin BC;(vii) femelă cu OC seros de grad înalt.
A 20 mL peripheral blood sample was obtained from each patient and collected into EDTA tubes (BD Biosciences).Genomic DNA was isolated from 0.7 mL whole blood samples using the QIAsymphony DSP DNA Midi kit Isolation Kit (QIAGEN, Hilden, Italy) according to the manufacturer's instructions and passed through a Qubit® 3.0 Fluorometer (Thermo Fisher Scientific, Waltham, MA, USA) Perform quantification.Îmbogățirea țintei și pregătirea bibliotecii sunt efectuate de Oncomine™ BRCA Research Assay Chef, gata pentru a fi încărcat în Kit-ul Ion AmpliSeq™ Chef Reagents DL8 pentru prepararea automată a bibliotecii conform instrucțiunilor producătorului. Kitul constă din două pool-uri multiplex PCR care pot fi utilizate pentru a studia toate primerii BRCA1 (NM_00730020020073002. În general, 15 µL din fiecare probă diluată de ADN (10 ng) au fost adăugate pe plăcile cu coduri de bare pentru pregătirea bibliotecii și toți reactivii și consumabilele au fost încărcate pe instrumentul Ion Chef™. în conformitate cu instrucțiunile producătorului. În cele din urmă, bibliotecile sunt combinate în raporturi echimolare în tuburi de probă de bibliotecă Ion Chef™ (tuburi cu coduri de bare) și încărcate pe instrumentul Ion Chef™. Secvențierea a fost efectuată folosind un instrument Ion Torrent S5 (Thermo Fisher Scientific) (Thermo Fisher Scientific) folosind o analiză Ion 510 Fisher Scientific (ThermoDQS) a fost efectuată de către ThermoDQSmart. srl) și Ion Reporter Software.
Toate variantele de nomenclatură au urmat ghidurile actuale ale Human Genome Variation Consortium, disponibile online (HGVS, http://www.hgvs.org/mutnomen). Semnificația clinică a variantelor BRCA1/2 a fost definită utilizând clasificarea Consorțiului Internațional ENIGMA (Evidence-Based Network for Interpreting Germline Mutant Alleles) și consultând diferite baze de date, cum ar fi https://enisort. CHANGE , ClinVar, IARC_LOVD și UMD. Clasificarea include cinci categorii de risc distincte: benign (categoria I), probabil benign (categoria II), variantă cu semnificație incertă (VUS, categoria III), probabil patogen (categoria IV) și patogen (categoria V).
Pentru a atribui o potențială semnificație clinică fiecărui VUS, au fost utilizați următorii algoritmi computaționali de predicție a proteinelor: MUTATION TASTER, 33 PROVEAN-SIFT (http://provean.jcvi.org/index.php), POLYPHEN-2 (http:///genetics.bwh.harvard.edu/pph2/) și Align-GVGD (http://provean.jcvi.org/index.php) și Align-GVGD. arianții clasificați în clasa 1 și 2 au fost considerați de tip sălbatic.
Secvențierea Sanger a confirmat prezența fiecărei variante patogene. Pe scurt, o pereche de primeri specifici a fost proiectată pentru fiecare variantă detectată utilizând secvențele de referință ale genelor BRCA1 și BRCA2 (NG_005905.2, NM_007294.3 și NG_012772.3, NM_000005. Secvențierea țintită a fost efectuată de PCre3, respectiv țintită). .
Pacienții care au fost testați negativ pentru gena BRCA1/2 au fost testați prin amplificare multiplex dependentă de sondă de ligatură (MLPA) conform instrucțiunilor producătorului pentru a evalua prezența unor rearanjamente genomice mari (LGR). Pe scurt, probele de ADN sunt denaturate și sunt utilizate până la 60 de sonde specifice genelor BRCA1 și BRCA2, fiecare detectie cu o lungime de produse de ADN specifică de aproximativ 60 produse. formarea unui set unic de ampliconi PCR, au fost apoi analizate prin electroforeză capilară și prin software-ul Cofalyser.Net împreună cu tabelele Cofalyser adecvate specifice lotului (www.mrcholland.com).
Variabilele clinicopatologice selectate (gradul histologic și indicele de proliferare Ki-67%) au fost asociate cu prezența BRCA1/2 PV, calculate utilizând software-ul Prism v. 8.4 utilizând testul exact Fisher presupunând că valoarea p <0,05 este semnificativă.
Între ianuarie 2017 și martie 2021, 455 de pacienți au fost testați pentru mutațiile BRCA1/2 ale liniei germinale. Testarea mutațiilor a fost efectuată la Centrul de Oncologie și Hematologie Experimentală al Spitalului Policlinico. Conform ghidului sicilian (http://www.gurs.regione.sicilia.it/Indicep1. dolico of Catania – San Marco” în total, 389 pacienți Au fost cancer mamar, 37 cancer ovarian, 16 cancer pancreatic, 8 cancer de prostată și 5 melanoame.Distribuția pacienților în funcție de tipul de cancer și rezultatele analizei este prezentată în Figura 1.
Figura 1 prezintă o diagramă de flux care arată o imagine de ansamblu a studiului. Pacienții cu tumori mamare, melanom, pancreatice, de prostată sau ovariene au fost testate pentru mutații ale genelor BRCA1 și BRCA2.
Abrevieri: PVs, varianta patogenă;VUS, variantă de semnificație incertă;WT, secvență BRCA1/2 de tip sălbatic.
Ne-am concentrat selectiv studiile pe cohortele de cancer de sân. Pacienții aveau o vârstă medie de 49 de ani (interval 23-89) și erau predominant femei (n=376, sau 97%).
Dintre acești subiecți, 64 (17%) au avut mutații BRCA1/2 și au fost toți femei. Treizeci și cinci (9%) au avut PV și 29 (7,5%) au avut VUS. Șaptesprezece (48,6%) din cele 35 de variante patogene au apărut în BRCA1 și 18 (51,4%) în BRCA2, în timp ce 5 (51,4%) au apărut în BRCA2, în timp ce 5 VRCA2817%) (BRCA2817%) (BRCA2817). 2 (Figurile 1 și 2).LGR nu a fost prezent în analiza MLPA.
Figura 2. Analiza mutațiilor BRCA1 și BRCA2 la 389 de pacienți cu cancer de sân. (A) Distribuția variantelor patogene (PV) (roșu), a variantelor cu semnificație incertă (VUS) (portocaliu) și WT (albastru) la 389 de pacienți cu cancer de sân;(B) 389 de paciente cu cancer de sân Treizeci și cinci (9%) au avut variante patogene (PV) BRCA1/2. Dintre acestea, 17 (48,6%) au fost purtători BRCA1 PV (roșu închis) și 18 (51,4%) au fost purtători BRCA2 (roșu deschis);(C) 29 (7,5%) din 389 de subiecți au purtat VUS, 5 (17,2%) gene BRCA1 (portocaliu închis) și 24 (82,8%) gene BRCA2 (portocaliu deschis).
Abrevieri: PVs, varianta patogenă;VUS, variantă de semnificație incertă;WT, secvență BRCA1/2 de tip sălbatic.
Apoi am investigat prevalența subtipurilor moleculare BC la pacienții cu BRCA1/2 PV. Distribuția a inclus 2 (5,7%) luminale A, 15 (42,9%) luminale B, 3 (8,6%) luminale B-HER2+, 2 (5,7%) HER2+ și 13 (37,1%) pacienți TNBC (dintre 92,41%) pacienți cu TNBC. 1,8%) au avut boala HER2+, iar 10 (58,8%) au avut TNBC. Tumorile fără mutații BRCA1 au fost luminale A sau luminale B-HER2+ (Figura 3). În subgrupul BRCA2-pozitiv, 10 (55,6%) tumori au fost luminale B, 3 (16,7%) au fost luminale B-HER16+, luminale B-HER16 %) și luminale B-HER1. Figura 3). Nu au fost prezente tumori HER2+ în acest grup. Astfel, mutațiile BRCA1 sunt predominante la pacienții cu TNBC, în timp ce modificările BRCA2 sunt predominante la indivizii cu lumen B.
Figura 3 Prevalența subtipurilor de cancer de sân la pacienții cu variante patogene în BRCA1 și BRCA2. Histogramele care arată distribuția PV-urilor BRCA1- (roșu închis) și BRCA2- (roșu deschis) între subtipurile moleculare ale pacienților cu cancer de sân.
Abrevieri: PVs, varianta patogenă;HER2+, receptorul 2 al factorului de creștere epidermic uman pozitiv;TNBC, cancer mamar triplu negativ.
Ulterior, am evaluat tipul și localizarea genelor PV BRCA1 și BRCA2. În PV BRCA1, am observat 7 variante de un singur nucleotide (SNV), 6 deleții, 3 dublări și 1 inserție. O singură mutație (c.5522delG) reprezintă o nouă descoperire. TAAT. Această modificare implică o deleție a cinci nucleotide (CTAAT) în exonul 15 BRCA1, ducând la înlocuirea aminoacidului leucină cu tirozină la codonul 1679 și, datorită unei deplasări a translației cu un codon stop alternativ prezis, duce la trunchierea prematură a proteinei. regiunea SUA (c.4357+1G>T) (Tabelul 1).
În ceea ce privește BRCA2 PV, am observat 6 deleții, 6 SNV și 2 duplicări. Niciuna dintre modificările constatate nu este nouă. Trei mutații au recidivat în populația noastră, c.428dup și c.8487+1G>A observate la 3 subiecți, urmate de c.5851_5854delAGTT. pe 5 din BRCA2, prezis că va codifica o proteină trunchiată, nefuncțională. Mutația c.8487+1G>A are loc în regiunea intrronică a intronului 19 BRCA2 (± 1,2) și afectează secvența consensului de splicing, ducând la splicing alterat, rezultând în varianta anormală sau absentă a proteinei c. ștergerea nucleotidelor din pozițiile nucleotidelor 5851 până la 5854 în exonul de codificare 10 al genei BRCA2 și are ca rezultat o deplasare translațională cu un codon stop alternativ prezis (p.S1951WfsTer). În mod remarcabil, așa cum s-a raportat anterior, ambele modificări au fost detectate în aceeași mutație c.631G>A și c.631G>A. înlocuirea adenozinei (A) în exonul 7 BRCA2 cu o nucleotidă care conține guanină (G), rezultând o schimbare a valinei în izoleucină la codonul 211, izoleucina Aminoacidul este un aminoacid cu proprietăți foarte asemănătoare. Această modificare afectează splicing-ul normal de ARNm. ding BRCA2. Modificarea c.7008-2A>T poate genera transcrieri multiple de diferite lungimi. În plus, în grupul de PV BRCA2, 4 din 18 modificări (22,2%) au fost intrronice.
Apoi am mapat mutațiile dăunătoare BRCA1/2 în domeniile funcționale și regiunile de legare a proteinelor (Fig. 4). În gena BRCA1, 50% din PV au fost localizate în regiunea clusterului cancerului de sân (BCCR), în timp ce 22% dintre mutații au fost localizate în regiunea clusterului cancerului ovarian (OCCR) (Fig. 4A 4A). .8% dintre mutații au fost localizate în OCCR (Fig. 4B). În continuare, am evaluat localizarea PV în domeniile proteinei BRCA1 și BRCA2. Pentru proteina BRCA1, am găsit trei PV în domeniile buclă și spirală și două mutații în domeniul BRCT (Fig. 4A). modificări exonice au fost detectate în domeniile de legare oligo/oligozaharide (OB) și turn (T) (Figura 4B).
Figura 4 Reprezentarea schematică a proteinelor BRCA1 și BRCA2 și localizarea variantelor patogene. Această figură arată distribuția variantelor patogene BRCA1 (A) și BRCA2 (B) la pacienții cu cancer de sân. Mutațiile exonice sunt afișate cu albastru, în timp ce variantele intrronice sunt afișate cu portocaliu. Înălțimea barei reprezintă numărul de cazuri. Proteinele BRCA1 și BRCA2 sunt raportate. domeniu buclă (RING) și o secvență de localizare nucleară (NLS), un domeniu bobină spiralată, un domeniu cluster SQ/TQ (SCD) și un domeniu C-terminal BRCA1 (BRCT). ), și Un NLS pe ​​partea C. Zonele numite Regiunea Clusterului Cancerului de Sân (BCCR) și Regiunea Clusterului Cancerului Ovarian (OCCR) sunt afișate în partea de jos.*Reprezintă mutații care determină codoni stop.
Am investigat apoi caracteristicile clinicopatologice ale BC care s-ar putea corela cu prezența BRCA1/2 PV. Înregistrările clinice complete au fost disponibile pentru 181 de pacienți BRCA1/2 negativi (non-purtători) și toți purtătorii (n = 35). A existat o corelație între rata de proliferare a tumorii și gradul.
Am calculat distribuția Ki-67 pe baza medianei cohortei noastre (25%, interval <10-90%). Subiecții cu Ki-67 < 25% au fost definiți ca „Ki-67 scăzut”, în timp ce indivizii cu valori ≥ 25% au fost considerați „Ki-67 ridicat”. ers (Fig. 5A).
Figura 5 Corelația Ki-67 cu distribuția gradului la femeile cu cancer de sân cu și fără PV BRCA1 și BRCA2. (A) Boxplot care arată valorile mediane Ki-67 la 181 de pacienți BC non-purtători față de pacienți cu PV BRCA1 (18) sau BRCA2 (17). grupuri (G2 și G3) în funcție de starea mutației BRCA1 și BRCA2 (subiecți WT, purtători de PV BRCA1 și BRCA2).
De asemenea, am examinat dacă gradul tumorii este corelat cu prezența BRCA1/2 PV. Deoarece G1 BC a fost absent în populația noastră, am împărțit pacienții în două grupuri (G2 sau G3). În concordanță cu rezultatele Ki-67, analiza a evidențiat o corelație semnificativă statistic între gradul tumorii și mutația BRCA1, cu o proporție mai mare de purtători BRCA1-50 (purtători de tumori non-G3. ure 5B).
Progresele în tehnologia de secvențiere a ADN-ului au permis progrese fără precedent în testarea genetică BRCA1/2, cu implicații cruciale pentru pacienții cu antecedente familiale de cancer. Până în prezent, aproximativ 20.000 de variante BRCA1/2 au fost identificate și clasificate conform Societății Americane de Genetică Medicală35 și sistemul ENIGMA35,36. rata BRCA1/2 PV a variat de la 8% la 37%, arătând o mare variabilitate intra-țară.38,39 Cu o populație de aproape 5 milioane de locuitori, Sicilia este a cincea regiune ca mărime din Italia în ceea ce privește numărul de locuitori. Deși există date privind distribuția BRCA1/2 în vestul Siciliei, nu există dovezi extinse în partea de est a insulei.
Studiul nostru este unul dintre primele rapoarte privind incidența BRCA1/2 PV la pacienții cu BC din estul Siciliei.28 Ne-am concentrat analiza pe BC, deoarece aceasta este de departe cea mai frecventă boală din cohorta noastră.
La testarea a 389 de pacienți BC, 9% aveau BRCA1/2 PV, distribuite uniform între BRCA1 și BRCA2. Aceste rezultate sunt în concordanță cu cele raportate anterior în populația italiană. , niciunul dintre acești bărbați nu a dezvoltat un BRCA1/2 PV, așa că au fost candidați pentru analize moleculare suplimentare pentru a exclude prezența unor mutații mai puțin frecvente, cum ar fi PALB2, RAD51C și D, printre altele. Variante de semnificație incertă au fost găsite la 7% dintre subiecții la care BRCA2 VUS a fost evident. Chiar și acest rezultat este în concordanță cu dovezile preexistente428,41.
Când am analizat distribuția subtipurilor moleculare BC la femeile mutante BRCA1/2, am confirmat asocierile cunoscute între TNBC și BRCA1 PV (58,8%) și între luminale B BC și BRCA2 PV (55,6%).
Apoi ne concentrăm pe tipul și locația PV BRCA1/2. În cohorta noastră, cel mai frecvent PV BRCA1 a fost c.5035_5039delCTAAT.Deși Incorvaia și colab.nu au descris această variantă în cohorta lor siciliană, alți autori au raportat-o ​​ca o linie germinativă BRCA1 PV.34 Mai multe PV BRCA1 au fost găsite în cohorta noastră – de exemplu c.181T>G, c.514del, c.3253dupA și c.5266dupC – care au fost observate în Sicilia, două mutații ale BRCA1. 266dupC) se găsesc în mod obișnuit la evreii ashkenazi din Europa de Est și Centrală (Polonia, Cehia), sloveni, austrieci, maghiari, belarusi și germani), 44,45 și, în Statele Unite și Argentina, a fost recent definită ca o „variantă germinală recurentă” la pacienții italieni cu BC și OC. , chiar Incorvaia et al.a găsit varianta c.3253dupA în unele familii din Catania.28 Cele mai reprezentative PV BRCA2 sunt c.428dup, c.5851_5854delAGTT și varianta intrronică c.8487+1G>A, care au fost raportate mai detaliat 28 la un pacient din Palermo cu c.428dup, c.5851_5854delAGTT, observată în nord-vestul casei din c.428dup, c. Sicilia, în principal în regiunile Trapani și Palermo, în timp ce c.5851_5854delAGTT PV a fost observată în gospodăriile din nord-vestul Siciliei. Varianta 8487+1G>A a fost mai frecventă la subiecții din Messina, Palermo și Caltanissetta.28 Rebbeck și colab.a descris anterior alterarea c.5851_5854delAGTT în Columbia.37 Un alt BRCA2 PV, c.631+1G>A, a fost găsit la pacienți BC și OC din Sicilia (Agrigento, Siracusa și Ragusa).28 În mod remarcabil, am observat coexistența a două variante BRCA2 (BRCA22>A) și pe care le presupunem la pacientul c. d să fie segregate în modul cis, așa cum s-a raportat anterior astfel.34,46 Aceste mutații uble BRCA2 sunt într-adevăr observate frecvent în regiunea italiană și s-a descoperit că introduc codoni stop prematuri, afectând splicing-ul ARN mesager și provocând eșecul proteinei BRCA2.47,48.
De asemenea, am cartografiat PV-urile BRCA1 și BRCA2 în regiunile presupuse OCCR și BCCR ale domeniilor și genelor proteice. Aceste regiuni au fost descrise de Rebbeck și colab.ca zone de risc pentru dezvoltarea cancerului ovarian și, respectiv, de sân.49 Cu toate acestea, dovezile privind asocierea dintre localizarea variantelor liniei germinale și riscul de cancer de sân sau ovarian rămân controversate.28,50-52 În populația noastră, PV-urile BRCA1 erau localizate predominant în regiunea BCCR, în timp ce PV-urile BRCA2 erau localizate predominant în regiunea OCCR și regiunea OCCR. și caracteristicile BC. Acest lucru se poate datora numărului limitat de pacienți cu mutații BRCA1/2. Din perspectiva domeniului proteic, PV-urile BRCA1 sunt distribuite de-a lungul întregii proteine, iar modificările BRCA2 se găsesc de preferință în domeniul repetat BRC.
În cele din urmă, am corelat caracteristicile clinicopatologice ale BC cu BRCA1/2 PV. Datorită numărului limitat de pacienți incluși, am găsit doar o corelație semnificativă între Ki-67 și gradul tumorii. 20%. Cu toate acestea, acest prag nu se aplică populației noastre de pacienți cu mutații BRCA1/2, care are o valoare mediană a Ki-67 de 25%. Această tendință în ratele ridicate de Ki-67 poate fi explicată prin prevalența în cohortele noastre luminale B și TNBC, dintre care puține tumori luminale A au fost prezente. 53,54 Din rezultatele analizei noastre, o corelație semnificativă nu este surprinzătoare. Apare între Ki-67 și gradele ridicate și prezența BRCA1 PV. De fapt, tumorile legate de BRCA1 sunt tipice pentru TNBC și prezintă caracteristici mai agresive.16,17.
În concluzie, acest studiu oferă un raport privind starea mutațională a BRCA1/2 într-o cohortă BC din estul Siciliei. În general, constatările noastre sunt în concordanță cu dovezile preexistente, atât în ​​ceea ce privește prevalența mutației, cât și caracteristicile clinicopatologice în BC. frecvente decât BRCA1/2.Acest lucru va permite identificarea și gestionarea adecvată a numărului tot mai mare de subiecți cu risc crescut de cancer din cauza mutațiilor genetice.
Am confirmat că pacienții au semnat consimțământul informat pentru a-și elibera mostrele tumorale în mod anonim în scopuri de cercetare. Toți pacienții au semnat consimțământul informat scris conform Declarației de la Helsinki. În conformitate cu politica AOU Policlinico „G.Rodolico – S.Marco”, acest studiu a fost exceptat de la evaluarea etică, deoarece analiza BRCA1/2 a fost efectuată în conformitate cu consimțământul informat al pacienților pentru utilizarea datelor clinice și consimțământul scris al pacienților pentru utilizarea în scopuri clinice și a tuturor pacienților. .
Mulțumim prof. Paolo Vigneri pentru asistența acordată în îngrijirea pacienților cu cancer de sân, așa cum a solicitat Comitetul de etică.
Federica Martorana raportează onorari de la Istituto Gentili, Eli Lilly, Novartis, Pfizer. Ceilalți autori declară că nu există conflicte de interese în această lucrare.
1. Sung H, Ferlay J, Siegel RL, et al.Global Cancer Statistics 2020: GLOBOCAN estimează incidența și mortalitatea a 36 de tipuri de cancer în 185 de țări din întreaga lume.CA Cancer J Clin.2021;71(3):209-249.doi: 10.3326/caac.222