غذائيت جي حصول ۽ ورڇ جيت جي چاري ۽ زندگي جي تاريخ جي خاصيتن کي ضم ڪري ٿي. زندگي جي مختلف مرحلن تي مخصوص غذائيت ۾ گهٽتائي کي پورو ڪرڻ لاءِ، ڪيڙا اهي غذائيت اضافي کاڌ خوراڪ ذريعي حاصل ڪري سگهن ٿا، مثال طور، هڪ عمل ۾ جيڪو پڊلز جي نالي سان سڃاتو وڃي ٿو، ريڙهن واري رطوبتن کي کارائڻ سان. مڇر اينوفيليس عرباني غذائيت جو شڪار نظر اچي ٿو ۽ تنهن ڪري، ميٽابولزم ۽ پيدائش ٻنهي لاءِ غذائيت جي ضرورت آهي. هن مطالعي جو مقصد اهو جائزو وٺڻ هو ته ڇا غذائيت جي حصول لاءِ ڳئون جي پيشاب تي اين. عربينسس جي حرڪت زندگي جي تاريخ جي خاصيتن کي بهتر بڻائي ٿي.
پڪ ڪريو ته اهو محفوظ آهي. arabiensis تازي، 24 ڪلاڪ، 72 ڪلاڪ، ۽ 168 ڪلاڪ پراڻي ڳئون جي پيشاب جي بوءَ ڏانهن متوجه ٿيو، ۽ ميزبان ڳولڻ ۽ رت پيارڻ واري (48 ڪلاڪ رت جي ماني کان پوءِ) عورتن کي Y-ٽيوب olfactometer ۾ ماپيو ويو، ۽ حاملہ عورتن کي اسپوننگ ٽيسٽ لاءِ جائزو ورتو ويو. پوءِ هڪ گڏيل ڪيميائي ۽ اليڪٽرروفيزيولوجيڪل تجزيو استعمال ڪيو ويو ته جيئن سڀني چئن عمر جي طبقن ۾ ڳئون جي پيشاب ۾ بايو ايڪٽو مرڪب جي سڃاڻپ ڪري سگهجي. Y-ٽيوب ۽ فيلڊ ٽرائلز ۾ بايو ايڪٽو مرڪب جي مصنوعي مرکبن جو جائزو ورتو ويو. مليريا ویکٹرز لاءِ امڪاني اضافي غذا جي طور تي ڳئون جي پيشاب ۽ ان جي مکيه نائٽروجن تي مشتمل مرڪب يوريا جي جاچ ڪرڻ لاءِ، کاڌ خوراڪ جي پيرا ميٽرز ۽ زندگي جي تاريخ جي خاصيتن کي ماپيو ويو. مادي مڇرن جو تناسب ۽ ڳئون جي پيشاب ۽ يوريا جي جذب ڪيل مقدار جو جائزو ورتو ويو. کاڌ خوراڪ کان پوءِ، عورتن کي بقا، ٽيٿرڊ فلائيٽ، ۽ پيدائش لاءِ جائزو ورتو ويو.
ميزبان جي رت ۽ غذائيت جي ڳولا ڪريو. ليبارٽري ۽ فيلڊ اسٽڊيز ۾، عربن کي تازي ۽ پراڻي ڳئون جي پيشاب جي قدرتي ۽ مصنوعي خوشبوءَ ڏانهن راغب ڪيو ويو. حامله عورتون اناج جي جڳهن تي ڳئون جي پيشاب جي ردعمل کان لاتعلق هيون. ميزبان ڳولڻ واريون ۽ رت چوسڻ واريون عورتون فعال طور تي ڳئون جي پيشاب ۽ يوريا جذب ڪن ٿيون ۽ انهن وسيلن کي زندگي جي تاريخ جي واپار جي مطابق پرواز، بقا، يا پيدائش لاءِ جسماني حالت جي ڪم جي طور تي مختص ڪن ٿيون.
انوفيلس عربين زندگي جي تاريخ جي خاصيتن کي بهتر بڻائڻ لاءِ ڳئون جي پيشاب جي حصول ۽ ورڇ. ڳئون جي پيشاب جي اضافي کاڌ خوراڪ روزاني بقا ۽ ویکٹر کثافت کي وڌائيندي سڌو سنئون ویکٹر جي صلاحيت کي متاثر ڪري ٿي، ۽ اڻ سڌي طرح پرواز جي سرگرمي کي تبديل ڪندي ۽ تنهن ڪري مستقبل جي ماڊلز ۾ غور ڪيو وڃي.
غذائيت جي حصول ۽ ورڇ جيتن جي چاري ۽ زندگي جي تاريخ جي خاصيتن کي ضم ڪري ٿي [1,2,3]. حشرات خوراڪ چونڊڻ ۽ حاصل ڪرڻ ۽ خوراڪ جي دستيابي ۽ غذائيت جي ضرورتن جي بنياد تي معاوضي واري کاڌ خوراڪ انجام ڏيڻ جي قابل آهن [1, 3]. غذائيت جي ورڇ زندگي جي تاريخ جي عمل تي منحصر آهي ۽ حشرات جي مختلف زندگي جي مرحلن ۾ غذا جي معيار ۽ مقدار لاءِ مختلف گهرجن کي جنم ڏئي سگهي ٿي [1, 2]. مخصوص غذائيت ۾ گهٽتائي کي پورو ڪرڻ لاءِ، حشرات اهي غذائيت اضافي کاڌ خوراڪ ذريعي حاصل ڪري سگهن ٿا، جهڙوڪ مٽي، مختلف اخراج ۽ vertebrates جي رطوبتن، ۽ مردار، هڪ عمل جنهن کي puddles [2] طور سڃاتو وڃي ٿو. جيتوڻيڪ تتليون ۽ پتنگن جي قسمن جي مختلف قسمن کي بنيادي طور تي بيان ڪيو ويو آهي، پاڻي جي سوراخ ٻين حشرات جي آرڊر ۾ پڻ ٿين ٿا، ۽ انهن قسمن جي وسيلن ڏانهن ڪشش ۽ انهن کي کارائڻ صحت ۽ ٻين زندگي جي تاريخ جي خاصيتن تي اهم اثر پئجي سگهي ٿو [2, 4, 5, 6]،7]. مليريا مڇر اينوفيلس گيمبي ​​سينسو لاتو (sl) هڪ 'غذائيت جو شڪار' بالغ [8] جي طور تي اڀري ٿو، تنهنڪري پاڻي ڏيڻ هڪ ڪردار ادا ڪري سگهي ٿو. ان جي زندگي جي تاريخ جي خاصيتن ۾ اهم ڪردار، پر هن رويي کي اڃا تائين نظرانداز ڪيو ويو آهي. هن اهم گاڏي ۾ غذائي اجزاء جي مقدار کي وڌائڻ جي ذريعي طور تي ايجيٽيشن جو استعمال ڌيان جي لائق آهي ڇاڪاڻ ته ان جا اهم وبائي نتيجا ٿي سگهن ٿا.
بالغ مادي اينوفيلس مڇرن ۾ نائٽروجن جو استعمال محدود آهي ڇاڪاڻ ته لاروا اسٽيج کان گهٽ ڪيلوريڪ ذخيرا ۽ رت جي ماني جي غير موثر استعمال جي ڪري [9]. مادي اين. گيمبي ​​ايس ايل عام طور تي اضافي رت جي ماني سان اضافي ڪرڻ سان ان جي تلافي ڪري ٿي [10، 11]، انهي ڪري وڌيڪ ماڻهن کي بيماري ۾ مبتلا ٿيڻ جي خطري ۾ وجهي ٿي ۽ مڇرن کي شڪار جي وڌيڪ خطري ۾ وجهي ٿي. متبادل طور تي، مڇر نائٽروجني مرکبات حاصل ڪرڻ لاءِ vertebrates excreta جي اضافي کاڌ خوراڪ استعمال ڪري سگهن ٿا جيڪي موافقت ۽ پرواز جي حرڪت کي وڌائين ٿا، جيئن ٻين حشرات پاران ڏيکاريل آهي [2]. هن سلسلي ۾، An. گيمبين ايس ايل اسپيشيز ڪمپليڪس، اينوفيلس عربين، تازو ۽ پراڻو ڳئون جو پيشاب [12،13،14]، اندر ڀائر نسلن مان هڪ جي مضبوط ۽ الڳ ڪشش دلچسپ آهي. اينوفيلس عربين پنهنجي ميزبان ترجيحن ۾ موقعي پرست آهي ۽ ڍورن سان لاڳاپيل ۽ کارائڻ لاءِ سڃاتو وڃي ٿو. ڳئون جو پيشاب نائٽروجني مرکبات سان مالا مال هڪ وسيلو آهي، يوريا تازي پيشاب ۾ ڪل نائٽروجن جو 50-95٪ آهي. [15، 16]. ڳئون جي پيشاب جي عمر سان، مائڪروجنزم انهن وسيلن کي استعمال ڪندي 24 ڪلاڪن اندر نائٽروجني مرکبات جي پيچيدگي کي گهٽائيندا آهن [15]. امونيا ۾ تيزيءَ سان واڌ سان، نامياتي نائٽروجن ۾ گهٽتائي سان لاڳاپيل، الڪلوفيلڪ مائڪروجنزم (جن مان گھڻا مڇرن لاءِ زهر آلود مرکبات پيدا ڪن ٿا) وڌندا آهن [15]، جيڪا عورت ٿي سگهي ٿي Ann.arabiensis ترجيحي طور تي 24 ڪلاڪ يا گهٽ عمر جي پيشاب ڏانهن متوجه ٿيندي آهي [13، 14].
هن مطالعي ۾، ميزبان ۽ رت سان کارايل اينز جي ڳولا ڪئي وئي. ان جي پهرين گوناڊوٽروپن چڪر دوران، عربينسس جو پيشاب جي ملاوٽ ذريعي نائٽروجني مرکبات، بشمول يوريا جي حصول لاءِ جائزو ورتو ويو. اڳتي هلي، تجربن جو هڪ سلسلو ڪيو ويو ته ڪيئن مادي مڇر هن امڪاني غذائي وسيلن کي بهتر بقا، پيدائش ۽ وڌيڪ چاري لاءِ مختص ڪن ٿا. آخرڪار، تازي ۽ پراڻي ڳئون جي پيشاب جي بوءَ جو جائزو ورتو ويو ته اهو طئي ڪيو وڃي ته ڇا اهي ميزبان ۽ رت سان کارايل اينز لاءِ قابل اعتماد اشارا فراهم ڪن ٿا. هن امڪاني غذائي وسيلن جي ڳولا ۾، اربينسس مشاهدو ڪيل فرق واري ڪشش جي پويان ڪيميائي لاڳاپا دريافت ڪيا. 24 ڪلاڪن جي عمر واري پيشاب ۾ سڃاڻپ ٿيل غير مستحڪم نامياتي مرکبات (VOCs) جي مصنوعي گند جي مرکبن جو وڌيڪ جائزو فيلڊ جي حالتن هيٺ ڪيو ويو، ليبارٽري جي حالتن هيٺ حاصل ڪيل نتيجن کي وڌايو ۽ مختلف جسماني حالتن تي بوائن پيشاب جي گند جي اثر کي ظاهر ڪيو. مڇر جي ڪشش. حاصل ڪيل نتيجا تصديق ڪن ٿا ته اين. اربينسس زندگي جي تاريخ جي خاصيتن کي متاثر ڪرڻ لاءِ ريڙه دار پيشاب ۾ ملندڙ نائٽروجني مرکبات حاصل ڪري ٿو ۽ ورهائي ٿو. انهن نتيجن تي بحث ڪيو ويو آهي ته امڪاني وبائي مرض جي نتيجن جي حوالي سان ۽ انهن کي ویکٹر نگراني ۽ ڪنٽرول لاءِ ڪيئن استعمال ڪري سگهجي ٿو.
اينوفيلس عربڪنس (ڊونگولا اسٽرين) کي 25 ± 2 °C، 65 ± 5% RH ۽ 12:12 ڪلاڪ جي روشني: اونداهي چڪر تي برقرار رکيو ويو. لاروا کي پلاسٽڪ جي ٽري (20 سينٽي ميٽر × 18 سينٽي ميٽر × 7 سينٽي ميٽر) ۾ ڊسٽل پاڻي سان ڀريل پاليو ويو ۽ ٽيٽرامين® مڇي جو کاڌو (ٽيٽرا ورڪ، ميل، ڊي اي) کارايو ويو. پوپي کي 30 ملي ليٽر پيالن ۾ گڏ ڪيو ويو (نولاتو هرٽيلا، آسٽورپ، ايس اي) ۽ پوءِ بگڊورم ڪيجز (30 سينٽي ميٽر × 30 سينٽي ميٽر × 30 سينٽي ميٽر؛ ميگا ويو سائنس، تائيچنگ، تائيوان) ۾ منتقل ڪيو ويو ته جيئن بالغن جي ظاهر ٿيڻ جي اجازت ڏني وڃي. بالغن کي ظهور کان 4 ڏينهن بعد (ڊي پي اي) تائين 10٪ سوڪروز حل ايڊ ليبٽم فراهم ڪيو ويو، جنهن موقعي تي ميزبان ڳولڻ واري عورتن کي تجربي کان فوري طور تي غذا پيش ڪئي وئي، يا تجربي کان اڳ ڊسٽل پاڻي سان رات جو بکيو ويو، جيئن هيٺ بيان ڪيو ويو آهي. فلائيٽ ٽيوب تجربن لاءِ استعمال ٿيندڙ عورتن کي بکيو ويو صرف 4-6 ڪلاڪ پاڻي جي اشتهار سان. رت چوسڻ واري مڇرن کي بعد ۾ بايو ايسز لاءِ تيار ڪرڻ لاءِ، 4 ڊي پي اي مادين کي جھلي فيڊنگ سسٽم (هيموٽڪ ڊسڪوري ورڪشاپس، ايڪرنگٽن، برطانيه) استعمال ڪندي ڊيفائبروٽڪ رڍن جو رت (هاتوناباب، برو، ايس اي) فراهم ڪيو ويو. مڪمل طور تي ڀريل مادين کي پوءِ انفرادي پنجرن ۾ منتقل ڪيو ويو ۽ سڌو سنئون غذا فراهم ڪئي وئي، جيئن هيٺ بيان ڪيو ويو آهي، يا هيٺ بيان ڪيل تجربن کان 3 ڏينهن اڳ 10٪ سوڪروز ايڊ ليبٽم. بعد ۾ مادين کي فلائيٽ ٽيوب بايو ايسز لاءِ استعمال ڪيو ويو ۽ ليبارٽري ڏانهن منتقل ڪيو ويو، ۽ پوءِ تجربي کان 4-6 ڪلاڪ اڳ ڊسٽل واٽر ايڊ ليبٽم ڏنو ويو.
بالغ عرب عورتن ۾ پيشاب ۽ يوريا جي استعمال جي مقدار کي طئي ڪرڻ لاءِ فيڊنگ اسيس استعمال ڪيا ويا. ميزبان ڳولڻ واري ۽ رت پياريندڙ عورتن کي 48 ڪلاڪن لاءِ 1٪ پتلي تازي ۽ پراڻي ڳئون جي پيشاب، يوريا جي مختلف ڪنسنٽريشن، ۽ ٻه ڪنٽرول (10٪ سوڪروز ۽ پاڻي) تي مشتمل غذا فراهم ڪئي وئي. ان کان علاوه، کاڌي جي رنگ سازي (1 mg ml-1 xylene cyanide FF؛ CAS 2650-17-1؛ Sigma-Aldrich، Stockholm، SE) کي غذا ۾ شامل ڪيو ويو ۽ 250 µl مائڪرو سينٽرفيوج ٽيوب ۾ 4 × 4 ميٽرڪس ۾ فراهم ڪيو ويو (Axygen Scientific، Union City، CA، US؛ شڪل 1A) ڪنڊ تائين ڀريو (~300 µl). مڇرن ۽ رنگ جي ممڪن اثرن جي وچ ۾ مقابلي کان بچڻ لاءِ، 10 مڇرن کي هڪ وڏي پيٽري ڊش ۾ رکو (قطر ۾ 12 سينٽي ميٽر ۽ اوچائي ۾ 6 سينٽي ميٽر؛ Semadeni، Ostermundigen، CH؛ شڪل 1A) مڪمل اونداهي ۾ 25 ± 2 سينٽي ميٽر °C ۽ 65 ± 5٪ نسبت سان. نمي. اهي تجربا 5 کان 10 ڀيرا ورجايا ويا. غذا جي سامهون اچڻ کان پوءِ، مڇرن کي وڌيڪ تجزيو تائين -20 °C تي رکيو ويو.
ميزبان ۽ رت چوسڻ واري مادي اينوفيلس عربانس پاران جذب ڪيل بوائن پيشاب ۽ يوريا جي ڳولا ڪريو. کاڌ خوراڪ جي آزمائش (A) ۾، مادي مڇرن کي تازو ۽ پراڻو ڳئون جو پيشاب، يوريا جي مختلف مقدار، سوڪروز (10٪)، ۽ ڊسٽلڊ پاڻي (H2O) تي مشتمل غذا فراهم ڪئي وئي. ميزبان ڳوليندڙ (B) ۽ رت پيئندڙ (C) ماديون ڪنهن به ٻئي غذا جي جانچ ڪيل کان وڌيڪ سوڪروز جذب ڪيون. نوٽ ڪريو ته ميزبان ڳوليندڙ عورتون 168 ڪلاڪن جي ڳئون جي پيشاب (B) کان گهٽ 72 ڪلاڪن جي ڳئون جي پيشاب کي جذب ڪن ٿيون. پيشاب جي سراسري ڪل نائٽروجن مواد (± معياري انحراف) ان سيٽ ۾ نمائندگي ڪئي وئي آهي. ميزبان ڳوليندڙ (D، F) ۽ رت چوسڻ واريون (E، G) عورتون خوراک تي منحصر انداز ۾ يوريا کڻنديون آهن. مختلف اکرن جي نالن سان وچين سانس ۾ ورتل مقدار (D، E) هڪ ٻئي کان خاص طور تي مختلف هئا (ٽوڪي جي پوسٽ هاڪ تجزيو استعمال ڪندي هڪ طرفي ANOVA؛ p < 0.05). غلطي بار اوسط (BE) جي معياري غلطي جي نمائندگي ڪن ٿا. سڌي ڊيش ٿيل لائن لاگ-لينئر ريگريشن لائن جي نمائندگي ڪري ٿي. (ف، جي)
جذب ٿيل کاڌي کي ڇڏڻ لاءِ، مڇرن کي انفرادي طور تي 1.5 ملي ليٽر مائڪرو سينٽريفيوج ٽيوب ۾ رکيو ويو جنهن ۾ 230 µl ڊسٽلڊ پاڻي هو ۽ ٽشو کي ڊسپوزيبل پيسٽل ۽ ڪارڊليس موٽر (VWR انٽرنيشنل، لنڊ، SE) استعمال ڪندي خراب ڪيو ويو، جنهن کان پوءِ 10 krpm تي 10 منٽن لاءِ سينٽريفيوگيشن ڪئي وئي. سپرنيٽينٽ (200 µl) کي 96-وي مائڪرو پليٽ (سگما-الڊرچ) ڏانهن منتقل ڪيو ويو ۽ جذب (λ620) کي اسپيڪٽرو فوٽوميٽر تي ٻڌل مائڪرو پليٽ ريڊر (SPECTROStar® Nano، BMG Labtech، Ortenberg، DE) nm استعمال ڪندي طئي ڪيو ويو. متبادل طور تي، مڇرن کي 1 ملي ليٽر ڊسٽلڊ پاڻي ۾ پيس ڪيو ويو، جنهن مان 900 µl اسپيڪٽرو فوٽوميٽرڪ تجزيو لاءِ ڪيويٽ ۾ منتقل ڪيو ويو (λ 620 nm؛ UV 1800، Shimadzu، Kista، SE). غذائي مقدار جي مقدار کي مقدار ڏيڻ لاءِ، هڪ معياري وکر سيريل ڊائليشن ذريعي تيار ڪيو ويو ته جيئن 0.2 µl پيدا ٿئي. 1 mg ml-1 زائلين سائانائيڊ جي 2.4 µl تائين. پوءِ، معلوم رنگ جي ڪنسنٽريشن جي آپٽيڪل کثافت کي هر مڇر پاران کاڌي جي مقدار کي طئي ڪرڻ لاءِ استعمال ڪيو ويو.
حجم ڊيٽا جو تجزيو ويريئنس جي هڪ طرفي تجزيي (ANOVA) استعمال ڪندي ڪيو ويو جنهن کان پوءِ ٽوڪي جي پوسٽ هاڪ جوڙو وار مقابلو (JMP Pro, v14.0.0, SAS Institute Inc., Cary, NC, US, 1989–2007). لڪير ريگريشن تجزيي ۾ ڪنسنٽريشن تي منحصر يوريا جي مقدار کي بيان ڪيو ويو ۽ ميزبان ڳولڻ ۽ رت چوسڻ وارن مڇرن جي وچ ۾ جوابن جو مقابلو ڪيو ويو (GraphPad Prism v8.0.0 for Mac, GraphPad Software, San Diego, CA, US).
هر عمر جي گروپ مان تقريبن 20 µl پيشاب جا نمونا Chromosorb® W/AW (10 mg 80/100 mesh، Sigma Aldrich) تي ٻڌل هئا ۽ ٽين ڪيپسول (8 mm × 5 mm) ۾ ڍڪيل هئا. ٺاهيندڙ جي پروٽوڪول مطابق تازي ۽ پراڻي پيشاب ۾ نائٽروجن جي مواد کي طئي ڪرڻ لاءِ ڪيپسول CHNS/O تجزيه نگار (Flash 2000، Thermo Fisher Scientific، Waltham، MA، US) جي ڪمبشن چيمبر ۾ داخل ڪيا ويا. ڪل نائٽروجن (g N l-1) معيار طور استعمال ٿيندڙ ڄاتل سڃاتل يوريا ڪنسنٽريشن جي بنياد تي مقدار ڪئي وئي.
ميزبان جي ڳولا ۽ رت چوسڻ واري مادي جي بقا تي غذا جي اثر جو جائزو وٺڻ لاءِ، مڇرن کي انفرادي طور تي وڏي پيٽري ڊشز (12 سينٽي ميٽر قطر ۽ 6 سينٽي ميٽر اوچائي؛ سيماڊيني) ۾ رکيو ويو، ڍڪ ۾ هڪ ميش سان ڍڪيل سوراخ (3 سينٽي ميٽر قطر) سان وينٽيليشن ۽ کاڌي جي فراهمي لاءِ. غذا 4 ڊي پي اي کان پوءِ سڌو سنئون فراهم ڪئي وئي ۽ ان ۾ 1٪ پتلي تازي ۽ پراڻي ڳئون جو پيشاب، يوريا جي چار ڪنسنٽريشن، ۽ ٻه ڪنٽرول، 10٪ سکروز ۽ پاڻي شامل هئا. هر غذا کي ڏندن جي ٽيمپون (DAB ڊينٽل AB، Upplands Väsby، SE) تي پائپ ڪيو ويو جيڪو 5 ملي ليٽر سرنج (ٿرمو فشر سائنٽيفڪ، گوٿنبرگ، SE) ۾ داخل ڪيو ويو، پلنجر کي هٽايو ويو، ۽ پيٽري ڊش جي مٿان رکيو ويو (شڪل 1). 1A). هر روز پنهنجي غذا تبديل ڪريو. مٿي بيان ڪيل ليبارٽري کي برقرار رکو. بچيل مڇرن کي ڏينهن ۾ ٻه ڀيرا ڳڻيو ويو، جڏهن ته مئل مڇرن کي رد ڪيو ويو جيستائين آخري مڇر مري نه ويو (n = 40 في علاج). مختلف غذا تي کارايل مڇرن جي بقا جو شمارياتي طور تي تجزيو ڪيو ويو استعمال ڪندي ڪيپلان-ميئر جي بقا جي وکر ۽ لاگ-رينڪ ​​ٽيسٽ غذا جي وچ ۾ بقا جي تقسيم جي مقابلي لاءِ (IBM SPSS شماريات 24.0.0.0).
Attisano et al.[17] تي ٻڌل هڪ ڪسٽم مچھر اڏامڻ واري مل، جيڪا 5 ملي ميٽر ٿلهي صاف ايڪريلڪ پينلن (10 سينٽي ميٽر ويڪر x 10 سينٽي ميٽر ڊگهو x 10 سينٽي ميٽر اوچائي) مان ٺهيل آهي بغير اڳيان ۽ پوئين پينلن جي (شڪل 3: مٿي). هڪ عمودي ٽيوب سان هڪ پيوٽ اسيمبلي جيڪا گئس ڪروميٽوگرافي ڪالم (0.25 ملي ميٽر آئي ڊي؛ 7.5 سينٽي ميٽر ايل) مان ٺهيل آهي جنهن جا سر هڪ ڪيڙن جي سوئي سان چپڪيل آهن جيڪي نيوڊيميم مقناطيس جي هڪ جوڙي جي وچ ۾ 9 سينٽي ميٽر جي فاصلي تي لٽڪيل آهن. ساڳئي مواد مان ٺهيل هڪ افقي ٽيوب (6.5 سينٽي ميٽر ايل) عمودي ٽيوب کي ورهائي هڪ ٽيچر ٿيل بازو ۽ هڪ بازو ٺاهيندي هئي جيڪا روشني ۾ مداخلت ڪندڙ سگنل جي طور تي ايلومينيم ورق جو هڪ ننڍڙو ٽڪرو کڻي ويندي هئي.
24 ڪلاڪن جي بکايل عورتن کي پابندي کان اڳ 30 منٽن لاءِ مٿي ڏنل غذا ڏني وئي. مڪمل طور تي کارايل مادي مڇرن کي پوءِ انفرادي طور تي برف تي 2-3 منٽن لاءِ بي هوشي ڪئي وئي ۽ موم سان ڪيڙن جي پنن سان ڳنڍيو ويو (جوئل سوينسن ويڪس فيبرڪ اي بي، منڪا لجنگبي، ايس اي) ۽ پوءِ افقي ٽيوب جي هٿن سان ڳنڍيو ويو. فلائنگ مل. في فلائيٽ انقلابن کي ڪسٽم بلٽ ڊيٽا لاگر پاران رڪارڊ ڪيو ويو، پوءِ پي سي-ليب 2000™ سافٽ ويئر (v4.01؛ ويلمن، گيور، بي اي) استعمال ڪندي محفوظ ۽ ڏيکاريو ويو. فلائيٽ مل کي موسمياتي طور تي منظم ڪمري ۾ رکيو ويو (12 ڪلاڪ: 12 ڪلاڪ، روشني: اونداهو، 25 ± 2 °C، 65 ± 5% RH).
پرواز جي سرگرمي جي نموني کي ڏسڻ لاءِ، 24 ڪلاڪن جي عرصي دوران في ڪلاڪ ڪل اڏامندڙ فاصلو (m) ۽ لڳاتار پرواز جي سرگرمين جو ڪل تعداد ڳڻيو ويو. ان کان علاوه، انفرادي عورتن پاران اڏامندڙ سراسري فاصلن جو مقابلو علاج ۾ ڪيو ويو ۽ هڪ طرفي ANOVA ۽ ٽوڪي جي پوسٽ هاڪ تجزيي (JMP Pro، v14.0.0، SAS انسٽيٽيوٽ انڪارپوريشن) استعمال ڪندي تجزيو ڪيو ويو، جتي سراسري فاصلي کي هڪ منحصر متغير سمجهيو ويندو هو، جڏهن ته علاج هڪ آزاد عنصر آهي. اضافي طور تي، رائونڊ جو سراسري تعداد 10 منٽن جي واڌ ۾ ڳڻيو ويندو آهي.
An.arabiensis جي پيدائشي ڪارڪردگي تي غذا جي اثر جو جائزو وٺڻ لاءِ، ڇهه ماديون (4 dpe) رت گڏ ڪرڻ کان پوءِ سڌو سنئون بگڊورم پنجرن (30 سينٽي ميٽر × 30 سينٽي ميٽر × 30 سينٽي ميٽر) ۾ منتقل ڪيون ويون ۽ پوءِ مٿي بيان ڪيل 48 ڪلاڪن لاءِ تجرباتي غذا فراهم ڪئي وئي. پوءِ غذا کي هٽايو ويو ۽ 20 ملي ليٽر ڊسٽل پاڻي سان ڀريل اسپوننگ پيالا (30 ملي ليٽر؛ نولاٽو هرٽيلا) ٽئين ڏينهن 48 ڪلاڪن لاءِ فراهم ڪيا ويا، هر 24 ڪلاڪن ۾ تبديل ٿيندا رهيا. هر غذائي نظام کي 20-50 ڀيرا ورجايو. هر تجرباتي پنجري لاءِ انڊا ڳڻيا ۽ رڪارڊ ڪيا ويا. انڊا جا ذيلي نمونا انفرادي انڊن جي اوسط سائيز ۽ ڊيگهه جي تبديلي جو جائزو وٺڻ لاءِ استعمال ڪيا ويا (n ≥ 200 في غذا) هڪ ڊائلڪس-20 مائڪروسڪوپ (DM1000؛ ارنسٽ ليٽز ويٽزلر، ويٽزلر، ڊي اي) استعمال ڪندي هڪ ليڪا ڪئميرا (DFC) 320 R2 سان ليس؛ ليڪا مائڪرو سسٽم لميٽيڊ، ڊي اي). باقي آنا 24 ڪلاڪن لاءِ معياري پرورش جي حالتن ۾ موسمياتي ڪنٽرول واري ڪمري ۾ رکيا ويا، ۽ تازو ظاهر ٿيندڙ پهرين انسٽار لاروا (n ≥ 200 في غذا) جو هڪ ذيلي نمونو ماپيو ويو، جيئن مٿي بيان ڪيو ويو آهي. علاج ۽ هڪ طرفي ANOVA ۽ ٽوڪي جي پوسٽ هاڪ تجزيي (JMP Pro، v14.0.0، SAS انسٽيٽيوٽ انڪارپوريٽڊ) جي وچ ۾ انڊن جي تعداد ۽ انڊن ۽ لاروا جي سائيز جو مقابلو ڪيو ويو.
زيبو ڍورن، ارسي نسلن مان گڏ ڪيل نمونن مان تازي (1 ڪلاڪ بعد نموني)، 24 ڪلاڪ، 72 ڪلاڪ ۽ 168 ڪلاڪ جي پيشاب مان هيڊ اسپيس وولٽائل گڏ ڪيا ويا. سهولت لاءِ، پيشاب جا نمونا صبح سوير گڏ ڪيا ويا جڏهن ڳئون اڃا تائين گودام ۾ هيون. پيشاب جا نمونا 10 فردن کان گڏ ڪيا ويا ۽ هر نموني جي 100-200 ملي ليٽر کي انفرادي پوليامائيڊ بيڪنگ بيگز (ٽاپٽس ڪوفريسڪو، فريش هالٽي پروڊڪٽ GmbH ۽ ڪمپني، منڊن، ڊي اي) ۾ 3 ليٽر پوليامائيڊ ۾ ونائل ڪلورائڊ پلاسٽڪ ڊرم ۾ ڍڪڻ سان منتقل ڪيو ويو. هر بوائن پيشاب جي نموني مان هيڊ اسپيس وولٽائل سڌو سنئون (تازو) يا پختگي کان پوءِ ڪمري جي حرارت تي 24 ڪلاڪ، 72 ڪلاڪ ۽ 168 ڪلاڪن لاءِ گڏ ڪيا ويا، يعني هر پيشاب جو نمونو هر عمر جي گروپ جو نمائندو هو.
هيڊ اسپيس وولٽائلز ڪليڪشن لاءِ، هڪ بند لوپ سسٽم استعمال ڪيو ويو ته جيئن هڪ چالو ڪاربن فلٽر ٿيل گيس اسٽريم (100 ملي لٽر منٽ-1) کي پوليامائيڊ بيگ ذريعي 2.5 ڪلاڪن لاءِ ايڊسورپشن ڪالم تائين ڊايافرام ويڪيوم پمپ (KNF نيوبرگر، فريبرگ، ڊي اي) استعمال ڪندي گردش ڪري سگهجي. ڪنٽرول جي طور تي، هيڊ اسپيس ڪليڪشن هڪ خالي پوليامائيڊ بيگ مان ڪيو ويو. ايڊسورپشن ڪالم ٽيفلون ٽيوبنگ (5.5 سينٽي x 3 ملي لٽر آئي ڊي) مان ٺاهيو ويو هو جنهن ۾ 35 ملي گرام پوراپڪ ڪيو (50/80 ميش؛ واٽرز ايسوسيئيٽس، ملفورڊ، ايم اي، يو ايس) شيشي جي اون پلگ جي وچ ۾ شامل هو. استعمال کان اڳ، ڪالم کي 1 ملي لٽر ري ڊسٽل ٿيل اين-هيڪسين (مرڪ، ڊارمسٽڊٽ، ڊي اي) ۽ 1 ملي لٽر پينٽين (99.0٪ خالص سالوينٽ جي سي گريڊ، سگما الڊرچ) سان فلش ڪيو ويو. ايڊسورب ٿيل وولٽائلز کي 400 μl پينٽين سان ايليوٽ ڪيو ويو. هيڊ اسپيس ڪليڪشن کي گڏ ڪيو ويو ۽ پوءِ -20 ° C تي ذخيرو ڪيو ويو جيستائين وڌيڪ تجزيو لاءِ استعمال نه ڪيو وڃي.
ميزبان جي ڳولا ۽ رت کائڻ واري اين جي رويي جي جوابن. تازي، 24-h، 72-h، ۽ 168-h-aged پيشاب مان گڏ ڪيل هيڊ اسپيس غير مستحڪم عرقن جو تجزيو سڌي شيشي جي ٽيوب olfactometer [18] استعمال ڪندي Arabidopsis مڇرن مان غير مستحڪم عرقن لاءِ ڪيو ويو. تجربا ZT 13-15 دوران ڪيا ويا، اين جي گهر ڳولڻ واري سرگرمي جي چوٽي واري دور ۾. Arab [19]. هڪ گلاس ٽيوب olfactometer (80 cm × 9.5 cm id) مٿي کان 3 ± 1 lx ڳاڙهي روشني سان روشن ڪيو ويو. چارڪو فلٽر ٿيل ۽ نم ٿيل هوا جو وهڪرو (25 ± 2 °C، 65 ± 2% نسبتي نمي) 30 cm s-1 تي بايو ايسي پاس ڪيو. هوا کي اسٽينلیس اسٽيل ميش اسڪرين جي هڪ سيريز مان گذري ٿو، هڪ ليمينر وهڪرو ۽ هڪ يونيفارم پلم structure ٺاهي ٿو. ڏندن جي ٽيمپون ڊسپينسر (4 cm × 1 cm; L:D; DAB ڊينٽل AB), 5 سينٽي ڪوئلي مان معطل ٿيل olfactometer جي ونڊ ورڊ اينڊ، هر 5 منٽن ۾ stimulator تبديلين سان. تجزيي لاءِ، هر هيڊ اسپيس ايڪسٽريڪٽ جو 10 μl، 1:10 کي ملائي، هڪ محرک طور استعمال ڪيو ويو. ڪنٽرول جي طور تي پينٽين جي برابر مقدار استعمال ڪئي وئي. تجربي جي شروعات کان 2-3 ڪلاڪ اڳ انفرادي ميزبان ڳولڻ يا رت چوسڻ وارا مڇر انفرادي رليز ڪيج ۾ رکيا ويا. رليز ڪيج کي olfactometer جي هيٺئين پاسي تي رکيو ويو، ۽ مڇرن کي 1 منٽ لاءِ مطابقت پيدا ڪرڻ جي اجازت ڏني وئي، ۽ پوءِ پنجري جي تتلي والو کي ڇڏڻ لاءِ کوليو ويو. علاج يا ڪنٽرول ڏانهن ڪشش جو تجزيو ڪيو ويو جيئن مڇرن جي تناسب جيڪو ڇڏڻ جي 5 منٽن اندر ذريعو سان رابطي ۾ آيو. هر هيڊ اسپيس غير مستحڪم نچوڙ ۽ ڪنٽرول کي گهٽ ۾ گهٽ 30 ڀيرا نقل ڪيو ويو، ۽ ڪنهن به هڪ ڏينهن جي اثرات کان بچڻ لاءِ، هر تجرباتي ڏينهن تي ساڳئي تعداد ۾ علاج ۽ ڪنٽرول آزمايا ويا. ميزبان ۽ رت سان ڀريل جوابن کان جواب ڳوليو. عربي بمقابله هيڊ اسپيس سيٽن جو تجزيو نامياري لاجسٽڪ ريگريشن استعمال ڪندي ڪيو ويو جنهن کان پوءِ عجيب تناسب لاءِ جوڙي وار مقابلو ڪيو ويو. (جي ايم پي پرو، وي 14.0.0، ايس اي ايس انسٽيٽيوٽ انڪارپوريٽڊ).
اين جي اسپوننگ جواب. تازي ۽ پراڻي ڳئون جي پيشاب مان هيڊ اسپيس ڪڍڻ جو تجزيو بگڊورم پنجرن ۾ ڪيو ويو (30 سينٽي ميٽر × 30 سينٽي ميٽر × 30 سينٽي ميٽر؛ ميگا ويو سائنس). پلاسٽڪ جا پيالا (30 ايم ايل؛ نولاٽو هرٽيلا) 20 ايم ايل ڊسٽلڊ پاڻي سان ڀريل هئا جيڪي اسپوننگ سبسٽريٽ فراهم ڪندا هئا ۽ پنجري جي مخالف ڪنڊن ۾ 24 سينٽي ميٽر جي فاصلي تي رکيا ويا هئا. علاج جا پيالا هر هيڊ اسپيس ڪڍڻ جي 10 μl سان 1:10 جي گهٽتائي تي ترتيب ڏنا ويا. ڪنٽرول ڪپ کي ترتيب ڏيڻ لاءِ پينٽين جي برابر مقدار استعمال ڪئي وئي. پوزيشن اثرات کي ڪنٽرول ڪرڻ لاءِ هر تجربي جي وچ ۾ علاج ۽ ڪنٽرول ڪپ مٽايا ويا. ڏهه رت پيئندڙ ماديون تجرباتي پنجرن ۾ ZT 9-11 تي ڇڏيا ويا ۽ پيالن ۾ انڊا 24 ڪلاڪن بعد ڳڻيا ويا. اسپوننگ انڊيڪس جي حساب لاءِ فارمولا هي آهي: (علاج جي پيالي ۾ رکيل انڊن جو تعداد - ڪنٽرول ڪپ ۾ رکيل انڊن جو تعداد)/(رکيل انڊن جو ڪل تعداد). هر علاج کي 8 ڀيرا ورجايو ويو.
عورت An.arabiensis جو گئس ڪروميٽوگرافڪ ۽ اليڪٽران اينٽينا پيٽرن ڊيٽيڪشن (GC-EAD) تجزيو اڳ ۾ بيان ڪيل طور تي ڪيو ويو [20]. مختصر طور تي، تازي هيڊ اسپيس وولٽائل ايڪسٽريڪٽس کي ايجيلنٽ ٽيڪنالاجيز 6890 جي سي (سانتا ڪلارا، سي اي، يو ايس) استعمال ڪندي الڳ ڪيو ويو جيڪو HP-5 ڪالم (30 ميٽر × 0.25 ملي ميٽر آئي ڊي، 0.25 μm فلم ٿولهه، ايجيلنٽ ٽيڪنالاجيز) سان ليس هو. ۽ پيشاب جي عمر. هائيڊروجن کي موبائل فيز طور استعمال ڪيو ويو جنهن جي سراسري لڪير جي وهڪري جي شرح 45 سينٽي ميٽر s-1 هئي. هر نموني (2 μl) کي 30 سيڪنڊن لاءِ ورهايل موڊ ۾ 225 °C جي انليٽ گرمي پد سان انجيڪٽ ڪيو ويو. GC اوون جو گرمي پد 35 °C (3 منٽ هولڊ) کان 300 °C (10 منٽ هولڊ) تائين 10 °C منٽ-1 تي پروگرام ڪيو ويو. GC ايفلوئنٽ اسپلٽر ۾، نائٽروجن جو 4 psi شامل ڪيو ويو ۽ 1:1 کي گرسٽل 3D/2 لو ڊيڊ واليوم ڪراس (گرسٽل، ملهائيم، DE) ۾ فليم آئنائيزيشن ڊيڪٽر ۽ EAD جي وچ ۾ ورهايو ويو. EAD لاءِ GC ايفلوئنٽ ڪيپليري کي گرسٽل ODP-2 ٽرانسفر لائن ذريعي منتقل ڪيو ويو، جيڪو GC اوون جي گرمي پد کان علاوه 5 °C کي ٽريڪ ڪري ٿو، هڪ شيشي جي ٽيوب (10 سينٽي ميٽر × 8 ملي ميٽر) ۾، جتي ان کي ڪاربان فلٽر ٿيل، نم ٿيل هوا (1.5 l منٽ−1) سان ملايو ويو. اينٽينا کي ٽيوب جي آئوٽ ليٽ کان 0.5 سينٽي ميٽر پري رکيو ويو هو. هر هڪ انفرادي مڇر هڪ نقل لاءِ حساب ڪيو، ۽ ميزبان ڳوليندڙ مڇرن لاءِ، هر عمر جي پيشاب جي نمونن تي گهٽ ۾ گهٽ ٽي نقل ڪيا ويا.
GC-EAD تجزيي ۾ اينٽينل جوابن کي حاصل ڪرڻ لاءِ گڏيل GC ۽ ماس اسپيڪٽروميٽر (GC-MS؛ 6890 GC ۽ 5975 MS؛ Agilent ٽيڪنالاجيز) استعمال ڪندي تازي ۽ پراڻي بوائن پيشاب جي هيڊ اسپيس ڪليڪشن ۾ بايو ايڪٽو مرڪبن جي سڃاڻپ، 70 eV تي اليڪٽران امپيڪٽ آئنائيزيشن موڊ ۾ ڪم ڪندي. GC هڪ HP-5MS UI-ڪوٽيڊ فيوزڊ سليڪا ڪيپيلري ڪالم (60 m × 0.25 mm اندروني قطر، 0.25 μm فلم جي ٿولهه) سان ليس هو، هيليم کي موبائل فيز طور استعمال ڪندي 35 سينٽي ميٽر s-1 جي سراسري لڪير واري وهڪري جي شرح سان. هڪ 2 μl نموني کي GC-EAD تجزيي لاءِ ساڳئي انجيڪٽر سيٽنگز ۽ اوون جي درجه حرارت استعمال ڪندي انجيڪٽ ڪيو ويو. مرڪبن جي سڃاڻپ انهن جي برقرار رکڻ جي وقت (ڪوواٽ انڊيڪس) ۽ ماس اسپيڪٽرا جي بنياد تي ڪسٽم لائبريري ۽ NIST14 لائبريري (Agilent) جي مقابلي ۾ ڪئي وئي. سڃاڻپ ٿيل مرڪبن جي تصديق مستند معيارن کي انجيڪٽ ڪندي ڪئي وئي (اضافي فائل 1: ٽيبل S2). مقدار جي لاءِ، هيپٽائل ايسٽيٽ (10 اين جي، 99.8٪ ڪيميائي پاڪائي، الڊرچ) کي ٻاهرين معيار جي طور تي داخل ڪيو ويو.
مٿي ڏنل ساڳئي olfactometer ۽ پروٽوڪول کي استعمال ڪندي، تازي ۽ پراڻي پيشاب ۾ سڃاڻپ ٿيل بايو ايڪٽو مرکبن تي مشتمل هڪ مصنوعي گند مرکب جي اثرائتي جو جائزو وٺڻ. مصنوعي مرکب تازي، 24-ڪلاڪ، 48-ڪلاڪ، 72-ڪلاڪ، ۽ 168-ڪلاڪ عمر واري پيشاب جي مخلوط هيڊ اسپيس غير مستحڪم عرق ۾ مرکبن جي جوڙجڪ ۽ تناسب جي نقل ڪئي (شڪل 5D-G؛ اضافي فائل 1: ٽيبل S2). تجزيي لاءِ، ميزبان ۽ رت چوسڻ واري مڇرن جي ڪشش جو جائزو وٺڻ لاءِ، مڪمل طور تي مصنوعي مرکب جي 1:100 جي گھٽتائي جي 10 μl استعمال ڪريو، جنهن جي مجموعي رليز جي شرح تقريبن 140-2400 ng h-1 تائين آهي. ان کان پوءِ، ٽيسٽ مڪمل مرکبن تي ڪئي ويندي آهي، جنهن ۾ مڪمل مرکب جي واحد مرکبن جي گھٽتائي واري مرکبن کي هٽايو ويندو آهي. ميزبان ۽ رت پيئندڙ جوابن کان جواب ڳوليو. عرب بمقابله مصنوعي ۽ گھٽتائي واري مرکبن جو تجزيو نامياري لاجسٽڪ ريگريشن استعمال ڪندي ڪيو ويو جنهن کان پوءِ طاق تناسب لاءِ جوڙي وار مقابلو (JMP Pro, v14.0.0, SAS Institute Inc.).
اهو جائزو وٺڻ لاءِ ته ڇا ڳئون جو پيشاب مليريا جي مڇرن لاءِ ميزبان رهائش جي اشاري طور ڪم ڪري سگهي ٿو، مٿي بيان ڪيل طور تي گڏ ڪيل تازو ۽ پراڻو ڳئون جو پيشاب، ۽ پاڻي کي ميش ٿيل 3 ليٽر بالٽيون (100 ملي ليٽر) ۾ رکيو ويو ۽ ميزبان بيت جي ڦڙن ۾ رکيو ويو. (BG-HDT نسخو؛ بايوجنٽس، ريگنسبرگ، ڊي اي). ڏهه ڦڙا چراگاهه ۾ 50 ميٽر جي مفاصلي تي رکيا ويا، ڳوٺ جي برادري کان 400 ميٽر پري (سلي، ايٿوپيا، 5°53'24'N، 37°29'24'E) ۽ ڪو به ڍور نه، مستقل نسل جي ميدانن ۽ ڳوٺن تي. ميزبان جي موجودگي کي نقل ڪرڻ لاءِ پنج ڦڙا گرم ڪيا ويا، جڏهن ته پنج ڦڙا گرم نه ڇڏيا ويا. هر علاج جي جڳهه کي رات جو ڪل پنج راتين لاءِ گھمايو ويندو آهي. مختلف عمرن جي پيشاب سان چاڙهيل ڦڙن ۾ پڪڙيل مڇرن جي تعداد جو مقابلو بيٽا بائنوميئل ورڇ (JMP Pro، v14.0.0، SAS انسٽيٽيوٽ انڪارپوريٽڊ) سان لاجسٽڪ ريگريشن استعمال ڪندي ڪيو ويو.
ايٿوپيا جي اوروميا علائقي ۾ ماڪي شهر جي ويجهو هڪ مليريا جي وبائي ڳوٺ ۾ (8° 11′ 08″ اتر، 38° 81′ 70″ اوڀر؛ شڪل 6A). مطالعي جي وچ آگسٽ ۽ وچ سيپٽمبر جي وچ ۾ سالياني اندروني بقايا اسپرينگ کان اڳ ڪئي وئي، هڪ ڊگهي برسات جي موسم سان گڏ. مطالعي لاءِ ڳوٺ جي ٻاهرئين پاسي واقع پنج جوڙا گھر (20-50 ميٽر جي فاصلي تي) چونڊيا ويا (شڪل 6A). گھرن کي چونڊڻ لاءِ استعمال ٿيندڙ معيار هي هئا: گھر ۾ ڪنهن به جانور کي اجازت نه هئي، گھر اندر ڪو به کاڌو پچائڻ (ڪاٺ يا ڪوئلي کي ڪڍڻ) جي اجازت نه هئي (گهٽ ۾ گهٽ آزمائشي دور ۾)، ۽ گھرن ۾ وڌ ۾ وڌ ٻه رهواسي، غير جراثيم ڪش دوائن ۾ سمهڻ. علاج ٿيل مڇر داني جي تحت. اخلاقي منظوري اديس ابابا يونيورسٽي جي فيڪلٽي آف نيچرل سائنسز (CNS-IRB) جي اداري ريسرچ ايٿڪس ريويو بورڊ (IRB/022/2016) پاران ڏني وئي آهي، هيلسنڪي جي ورلڊ ميڊيڪل ايسوسيئيشن ڊڪليئريشن پاران قائم ڪيل هدايتن جي مطابق. صحت جي توسيع جي عملي جي مدد سان گهر جي هر سربراهه کان رضامندي حاصل ڪئي وئي. سڄي عمل کي ضلعي ۽ وارڊ ('ڪيبيل') سطح تي مقامي انتظاميه پاران منظور ڪيو ويو آهي. تجرباتي ڊيزائن 2 × 2 لاطيني چورس ڊيزائن جي پيروي ڪئي، جنهن ۾ مصنوعي مرکب ۽ ڪنٽرول پهرين رات جوڙيل گهرن کي تفويض ڪيا ويا ۽ ايندڙ تجرباتي رات تي گهرن جي وچ ۾ تبديل ڪيا ويا. اهو عمل ڏهه ڀيرا ورجايو ويو. اضافي طور تي، چونڊيل گهرن ۾ مڇر جي سرگرمي جو اندازو لڳائڻ لاءِ، سي ڊي سي جال ڏينهن جي ساڳئي وقت فيلڊ ٽرائل جي شروعات، وچ ۽ آخر ۾ مسلسل پنج راتيون هلائڻ لاءِ مقرر ڪيا ويا.
هڪ مصنوعي مرکب جنهن ۾ ڇهه بايو ايڪٽو مرڪب شامل هئا، هيپٽين (97.0٪ سالوينٽ GC گريڊ، سگما الڊرچ) ۾ حل ڪيو ويو ۽ 140 اين جي ايڇ-1 تي ڪپهه جي وِڪ ڊسپينسر [20] استعمال ڪندي جاري ڪيو ويو. وِڪ ڊسپينسر 12 ڪلاڪن جي تجربي دوران سڀني مرڪبن کي مسلسل تناسب ۾ ڇڏڻ جي اجازت ڏني. هيپٽين کي ڪنٽرول طور استعمال ڪيو ويو. شيشي کي سينٽرز فار ڊزيز ڪنٽرول اينڊ پريوينشن (سي ڊي سي) لائيٽ ٽريپ (جان ڊبليو هاڪ ڪمپني، گينس ويل، ايف ايل، يو ايس؛ شڪل 6A) جي داخلا پوائنٽ جي ڀرسان معطل ڪيو ويو. جال زمين کان 0.8 - 1 ميٽر مٿي، بستري جي پيرن جي ويجهو لٽڪايا ويا، ۽ هڪ رضاڪار هڪ غير علاج ٿيل مڇر جي ڄاري هيٺ سمهيو ۽ 18:00 ۽ 06:30 جي وچ ۾ هلايو ويو. جنس ۽ جسماني حيثيت (غير کاڌل، کارايل، نيم حاملہ، ۽ حاملہ [21] پاران پڪڙيل مڇرن کي بعد ۾ پوليمريز چين ري ايڪشن (PCR) تجزيو استعمال ڪندي اسڪرين ڪيو ويو ته جيئن مورفولوجيڪل طور تي A. gambiae sl جي طور تي سڃاڻپ ڪيل نسلن جي سڃاڻپ ڪري سگهجي. ڪمپليڪس جا ميمبر [23]. فيلڊ اسٽڊي ۾، جوڙيل گهرن جي ٽريپنگ جو تجزيو هڪ نامياري لاجسٽڪ فٽ ماڊل استعمال ڪندي ڪيو ويو، جتي ڪشش انحصار متغير هئي ۽ علاج (مصنوعي مرکب بمقابله ڪنٽرول) مقرر اثر هو (JMP® 14.0. 0. SAS انسٽيٽيوٽ انڪارپوريٽڊ). هتي، اسان امڪان تناسب ٽيسٽ مان χ2 ۽ p-قدرن جي رپورٽ ڪريون ٿا.
جائزو وٺو ته ڇا اهو محفوظ آهي. arabiensis پيشاب، ان جو مکيه نائٽروجن ذريعو، يوريا، سڌو سنئون کارائڻ ذريعي حاصل ڪرڻ جي قابل هو، 4 ڏينهن جي پوسٽ (dpe) ميزبان-ڳوليندڙ ۽ رت-چوسيندڙ عورتن جي کاڌ خوراڪ جي آزمائشن لاءِ انتظاميه جي 48 ڪلاڪن اندر (شڪل 1A). ميزبان-ڳوليندڙ ۽ رت-چوسيندڙ عورتون ٻئي ڪنهن به ٻئي غذا يا پاڻي جي ڀيٽ ۾ تمام گهڻو وڌيڪ سکروز جذب ڪن ٿيون (F(5,426) = 20.15، p < 0.0001 ۽ F(5,299) = 56.00، p < 0.0001، ترتيب وار؛ شڪل 1B،C). ان کان علاوه، ميزبان-ڳوليندڙ عورتون 168 ڪلاڪن جي پيشاب جي مقابلي ۾ 72 ڪلاڪن ۾ پيشاب ۾ گهٽ کائيندا هئا (شڪل 1B). جڏهن يوريا تي مشتمل غذا پيش ڪئي وئي، ميزبان-ڳوليندڙ عورتون ٻين سڀني ڪنسنٽريشن ۽ پاڻي جي مقابلي ۾ 2.69 mM تي يوريا جي تمام گهڻي مقدار جذب ڪن ٿيون، جڏهن ته 10٪ سکروز کان الڳ نه ٿي سگهن ٿيون. (F(10,813) = 15.72، p < 0.0001؛ شڪل 1D). اهو رت پيئندڙ عورتن جي ردعمل جي ابتڙ هو، جيڪي عام طور تي پاڻي جي ڀيٽ ۾ خاص طور تي وڌيڪ يوريا تي مشتمل غذا جذب ڪن ٿيون، جيتوڻيڪ 10٪ سکروز کان گهٽ (F(10,557) = 78.35، p < 0.0001؛ شڪل 1).1E). ان کان علاوه، جڏهن ٻن جسماني حالتن جي وچ ۾ مقابلو ڪيو ويو، ته فليبوٽومائيزڊ عورتون گهٽ ۾ گهٽ ڪنسنٽريشن تي ميزبان ڳولڻ واري عورتن جي ڀيٽ ۾ وڌيڪ يوريا جذب ڪيون، ۽ انهن عورتن وڌيڪ ڪنسنٽريشن تي يوريا جي ساڳي مقدار جذب ڪئي (F(1,953) = 78.82، p < 0.0001؛ شڪل 1F، G). جڏهن ته يوريا تي مشتمل غذا مان حاصل ڪرڻ ۾ بهترين قدر نظر آيا (شڪل 1D، E)، ٻنهي جسماني حالتن ۾ عورتون لاگ-لينئر فيشن ۾ يوريا جي ڪنسنٽريشن جي پوري حد تي جذب ٿيل يوريا جي مقدار کي ماڊل ڪرڻ جي قابل هيون (شڪل 1F، G). ). ساڳئي طرح، مڇر پيشاب جي جذب جي مقدار کي منظم ڪندي پنهنجي نائٽروجن جي جذب کي ڪنٽرول ڪندا نظر اچن ٿا، ڇاڪاڻ ته پيشاب ۾ نائٽروجن جي مقدار جذب ٿيل مقدار ۾ ظاهر ٿئي ٿي (شڪل 1B، C ۽ B انسٽس).
ميزبان جي ڳولا ڪندڙ ۽ رت چوسيندڙ مڇرن جي بقا تي پيشاب ۽ يوريا جي اثرن جو جائزو وٺڻ لاءِ، عورتن کي چئني عمرن جي پيشاب (تازو، 24 ڪلاڪ، 72 ڪلاڪ، ۽ 168 ڪلاڪ جمع ٿيڻ کان پوءِ) ۽ يوريا جي مقدار جي هڪ حد، انهي سان گڏ ڊسٽل پاڻي ۽ 10٪ سکروز کي ڪنٽرول طور ڪم ڪيو ويو (شڪل 2A). هن بقا جي تجزيي مان ظاهر ٿيو ته غذا ميزبان جي ڳولا ڪندڙ عورتن ۾ مجموعي بقا تي اهم اثر ڇڏيو (پيشاب: χ2 = 108.5، df = 5، p < 0.0001؛ يوريا: χ2 = 122.8، df = 5، p < 0.0001؛ شڪل 2B، C) ۽ رت پيئندڙ عورتن (پيشاب: χ2 = 93.0، df = 5، p < 0.0001؛ يوريا: χ2 = 137.9، df = 5، p < 0.0001؛ شڪل 2D،E). سڀني تجربن ۾، عورتن کي پيشاب، يوريا ۽ پاڻي جي غذا ڏني وئي، انهن جي بقا جي شرح انهن عورتن جي مقابلي ۾ گهٽ هئي جيڪي سکروز غذا ڏني وئي هئي (شڪل 2B-E). ميزبان ڳوليندڙ عورتن کي تازو ۽ باسي پيشاب ڏنو ويو، انهن جي بقا جي شرح مختلف هئي، جن کي 72 ڪلاڪ باسي پيشاب ڏنو ويو (p = 0.016) انهن جي بقا جو امڪان گهٽ هو (شڪل 2B). ان کان علاوه، ميزبان ڳوليندڙ عورتن کي 135 ملي ميٽر يوريا ڏنو ويو، پاڻي جي ڪنٽرول کان وڌيڪ وقت تائين زنده رهيو (p < 0.04) (شڪل 2C). پاڻي جي مقابلي ۾، تازو پيشاب ۽ 24 ڪلاڪ پيشاب سان پياريل عورتون وڌيڪ وقت تائين زنده رهيون (p = 0.001 ۽ p = 0.012، ترتيب وار؛ شڪل 2D)، جڏهن ته 72 ڪلاڪ پيشاب سان پياريل عورتون انهن جي ڀيٽ ۾ وڌيڪ وقت تائين زنده رهيون جيڪي عورتن کي مختصر تازو پيشاب ۽ 24 ڪلاڪ پيشاب سان پياريل هيون (p < 0.0001 ۽ p = 0.013، ترتيب وار؛ شڪل 2D). جڏهن کارايو ويو 135 ملي ميٽر يوريا، رت پيئندڙ عورتون يوريا ۽ پاڻي جي ٻين سڀني ڪنسنٽريشنز کان وڌيڪ وقت تائين زنده رهيون (p < 0.013؛ شڪل 2E).
ميزبان ۽ رت چوسڻ واري مادي اينوفيلس عربين جي بقا ڳئون جي پيشاب ۽ يوريا تي کارائيندي. بايو ايسي (A) ۾، مادي مڇرن کي تازو ۽ پراڻو ڳئون جي پيشاب، يوريا، سکروز (10٪) ۽ ڊسٽلڊ پاڻي (H2O) جي مختلف مقدار تي مشتمل غذا فراهم ڪئي وئي. ميزبان ڳولڻ واري (B، C) ۽ رت چوسڻ واري (D، E) مڇرن جي بقا هر 12 ڪلاڪن ۾ رڪارڊ ڪئي وئي جيستائين سڀئي ماديون پيشاب (B، D) ۽ يوريا (C، E) تي کارائينديون آهن، ۽ ڪنٽرول، سکروز ۽ پاڻي، مري ويندا آهن.
24 ڪلاڪن جي عرصي دوران فلائيٽ مل ٽيسٽ ۾ طئي ٿيل ڪل فاصلو ۽ رائونڊ جو تعداد ميزبان ڳولڻ وارن ۽ رت چوسڻ وارن مڇرن جي وچ ۾ مختلف هو، جيڪي مجموعي طور تي گهٽ پرواز جي سرگرمي ڏيکاريا (شڪل 3). ميزبان ڳولڻ وارا مڇر جيڪي تازو ۽ پراڻو پيشاب يا سڪروز ۽ پاڻي فراهم ڪندا هئا، انهن مختلف پرواز جا نمونا ڏيکاريا (شڪل 3)، تازي پيشاب تي کارائيندڙ مادا صبح جو وڌيڪ سرگرم هئا، جڏهن ته 24 ۽ 168 ڪلاڪن جي عمر وارا مڇر جيڪي پيشاب تي کارائيندا هئا، اهي مختلف پرواز جا نمونا ڏيکاريندا هئا ۽ بنيادي طور تي روزانو هئا. مادي مڇر جيڪي سڪروز يا 72 ڪلاڪن جو پيشاب فراهم ڪندا هئا، انهن 24 ڪلاڪن جي عرصي دوران سرگرمي ڏيکاري، جڏهن ته پاڻي فراهم ڪندڙ مادا وچ واري عرصي دوران وڌيڪ سرگرم هئا. سڪروز تي کارائيندڙ مڇرن رات جو دير سان ۽ صبح جو سوير سرگرمي جي بلند ترين سطح جو مظاهرو ڪيو، جڏهن ته جيڪي 72 ڪلاڪن جي عمر وارا پيشاب پيئندا هئا انهن 24 ڪلاڪن دوران سرگرمي ۾ مسلسل گهٽتائي جو تجربو ڪيو (شڪل 3).
شڪاري جي ڳولا ڪندڙ رت چوسڻ واري مادي اينوفيلس عربين جي پرواز جي ڪارڪردگي ڳئون جي پيشاب ۽ يوريا تي کارائيندي. فلائيٽ مل ٽيسٽ ۾، تازي ۽ پراڻي ڳئون جي پيشاب تي کارائيندڙ مادي مڇر، يوريا، سوڪروز (10٪)، ۽ ڊسٽلڊ پاڻي (H2O) جي مختلف مقدار کي افقي، آزادانه طور تي گھمندڙ هٿن (مٿي) سان ڳنڍيو ويو. ميزبان جي ڳولا ڪندڙ (کاٻي) ۽ رت چوسڻ واري (ساڄي) عورتن لاءِ، 24 ڪلاڪن جي عرصي دوران هر غذا لاءِ في ڪلاڪ ڪل فاصلو ۽ پروازن جو تعداد رڪارڊ ڪيو ويو (ڪارو: گرين؛ هلڪو: اڇو). سرڪيڊين سرگرمي گراف جي ساڄي پاسي سراسري فاصلو ۽ بائوٽس جو سراسري تعداد ڏيکاريو ويو آهي. غلطي بار اوسط جي معياري غلطي جي نمائندگي ڪن ٿا. شمارياتي تجزيو متن ڏسو
عام طور تي، ميزبان ڳوليندڙ عورتن جي مجموعي پرواز جي سرگرمي 24 ڪلاڪن جي عرصي دوران پرواز جي فاصلي جي نموني جي پيروي ڪئي. اوسط پرواز جو فاصلو غذا کائڻ سان خاص طور تي متاثر ٿيو (F(5, 138) = 28.27, p < 0.0001)، ۽ ميزبان ڳوليندڙ عورتون 72 ڪلاڪ پيشاب کائينديون هيون ٻين سڀني غذائن (p < 0.0001) جي مقابلي ۾ تمام گهڻي فاصلي تي پرواز ڪنديون هيون، ۽ سکروز کارائيندڙ مڇر تازي (p = 0.022) ۽ 24 ڪلاڪن جي عمر وارن پيشاب (p = 0.022) کارائيندڙ مڇرن کان وڌيڪ پرواز ڪندا هئا. پيشاب جي غذا پاران بيان ڪيل پرواز جي سرگرمي جي نموني جي برعڪس، يوريا کارائيندڙ ميزبان ڳوليندڙ عورتن 24 ڪلاڪن جي عرصي دوران مسلسل پرواز جي سرگرمي جو مظاهرو ڪيو، جيڪو اونداهي مرحلي جي ٻئي اڌ دوران چوٽي تي پهچي ويو (شڪل 3). جيتوڻيڪ سرگرمي جا نمونا ساڳيا هئا، ميزبان ڳوليندڙ عورتن يوريا کارايو جذب ٿيل ڪنسنٽريشن (F(5, 138) = 1310.91, p) جي لحاظ کان اوسط پرواز جي فاصلي کي خاص طور تي وڌايو. < 0.0001). ميزبان ڳوليندڙ عورتن کي يوريا جي ڪنهن به مقدار کي کارايو ويو، انهن عورتن جي ڀيٽ ۾ پاڻي يا سکروز (p < 0.03) کان وڌيڪ وقت گذريو.
رت چوسڻ وارن مڇرن جي مجموعي پرواز جي سرگرمي سڀني غذائن ۾ 24 ڪلاڪن کان وڌيڪ مستحڪم ۽ برقرار رهي، پاڻي تي کارايل عورتن لاءِ ۽ تازو ۽ 24 ڪلاڪ پراڻي عورتن لاءِ اونداهي دور جي ٻئي اڌ دوران پيشاب جي سرگرمي ۾ اضافو ٿيو (تصوير 3). جڏهن ته پيشاب جي غذا رت پيئندڙ عورتن ۾ اوسط پرواز جي مفاصلي کي خاص طور تي متاثر ڪيو (F(5, 138) = 4.83, p = 0.0004)، يوريا غذا (F(5, 138) = 1.36, p = 0.24) نه ڪيو. ٻين پيشاب ۽ ڪنٽرول غذا سان (تازو، p = 0.0091؛ 72 ڪلاڪ، p = 0.0022؛ 168 ڪلاڪ، p = 0.001؛ sucrose، p = 0.0017؛ dH2O، p = 0.036).
پيشاب ۽ يوريا جي کاڌ خوراڪ جي پيداواري پيرا ميٽرز تي اثرن جو جائزو آنا ڏيڻ واري بايو ايسي (شڪل 4A) ۾ ڪيو ويو ۽ هر مادي پاران ڏنل آنڊن جي تعداد، آنا جي سائيز، ۽ نئين نڪتل پهرين انسٽار لاروا جي مطابق جاچ ڪئي وئي. آنڊن جو تعداد ڏنو ويو. پيشاب ڪندڙ عرب عورتون غذا جي لحاظ کان مختلف هيون (F(5,222) = 4.38، p = 0.0008؛ شڪل 4B). عورتون 24 ڪلاڪن جو پيشاب کارائينديون هيون، رت جو کاڌ خوراڪ ٻين پيشاب جي کاڌ خوراڪ جي ڀيٽ ۾ تمام گهڻو وڌيڪ آنا ڏينديون هيون ۽ انهن کي سوڪروز کارائينديون هيون (شڪل 4B). ساڳئي طرح، پيشاب ڪندڙ عورتن پاران ڏنل آنڊن جو سائز غذا جي لحاظ کان مختلف هوندو هو (F(5, 209) = 12.85، p < 0.0001)، 24 ڪلاڪن جو پيشاب ۽ سوڪروز کارائيندڙ عورتون پاڻي کارائيندڙ عورتن جي ڀيٽ ۾ تمام وڏا آنا ڏينديون هيون، جڏهن ته 168 ڪلاڪ پيشاب سان کارائيندڙ عورتن جا آنا تمام ننڍا هئا (شڪل 4C). ان کان علاوه، پيشاب جي غذا لاروا کي خاص طور تي متاثر ڪيو. سائيز (F(5, 187) = 7.86, p < 0.0001)، جنهن ۾ 24 ۽ 72 ڪلاڪن جي عمر وارن پيشاب ڪندڙ مادين پاران ڏنل آنڊن مان تمام وڏا لاروا نڪرندا آهن جيڪي انڊن جي لاروا مان ڏنل آنڊن جي ڀيٽ ۾. پاڻي پياريندڙ ۽ 168 ڪلاڪن جي پيشاب ڪندڙ مادين (شڪل 4D).
ڳئون جي پيشاب ۽ يوريا تي کارائيندڙ مادي اينوفيلس عربين جي توليدي ڪارڪردگي. رت پياريندڙ مادي مڇرن کي بايو ايسي ۾ رکڻ ۽ آنا ڏيڻ وارا ذيلي ذخيرا حاصل ڪرڻ کان اڳ 48 ڪلاڪن تائين تازي ۽ پراڻي ڳئون جي پيشاب، يوريا، سکروز (10٪)، ۽ ڊسٽلڊ پاڻي (H2O) تي مشتمل غذا ڏني وئي. 48 ڪلاڪ (A). انڊي نمبر (B، E)، انڊي سائيز (C، F) ۽ لاروا سائيز (D، G) مهيا ڪيل غذا کان خاص طور تي متاثر ٿيا (ڳئون جو پيشاب: BD؛ يوريا: EG). مختلف اکرن جي نالن سان ماپيل هر پيرا ميٽر لاءِ مطلب هڪ ٻئي کان خاص طور تي مختلف هئا (ٽوڪي جي پوسٽ هاڪ تجزيو استعمال ڪندي هڪ طرفي ANOVA؛ p < 0.05). غلطي بار اوسط جي معياري غلطي جي نمائندگي ڪن ٿا.
پيشاب جي اهم نائٽروجني جزو جي طور تي، يوريا، جڏهن رت پيئندڙ عورتن کي غذا طور فراهم ڪئي ويندي آهي، سڀني مطالعي ۾ پيداواري معيارن کي خاص طور تي متاثر ڪيو. رت جي ماني کان پوءِ يوريا کارائيندڙ عورتن پاران ڏنل آنڊن جو تعداد، يوريا جي ڪنسنٽريشن (F(11, 360) = 4.69; p < 0.0001) تي منحصر آهي، 134 µM ۽ 1.34 mM جي وچ ۾ يوريا جي ڪنسنٽريشن کي کارائيندڙ عورتن وڌيڪ آنا ڏينديون آهن (شڪل 4E). 134 µM يا ان کان مٿي جي يوريا ڪنسنٽريشن تي کارائيندڙ عورتون پاڻي تي کارائيندڙ عورتن کان وڏا آنا ڏينديون آهن (F(10, 4245) = 36.7; p < 0.0001; شڪل 4F)، ۽ لاروا جي سائيز، جيتوڻيڪ مائرن ۾ يوريا جي ساڳي ڪنسنٽريشن کان متاثر ٿي (F(10, 3305) = 37.9; p < 0.0001) وڌيڪ متغير هئي (شڪل 4G).
ميزبان جي ڳولا ڪندڙ بووائن پيشاب جي هيڊ اسپيس غير مستحڪم عرق ڏانهن مجموعي طور تي ڪشش. شيشي جي ٽيوب اولفيڪوٽوميٽر (شڪل 5A) ۾ جائزو ورتو ويو عربينسس پيشاب جي عمر (χ2 = 15.9، df = 4، p = 0.0032؛ شڪل 5B) کان خاص طور تي متاثر ٿيو. پوسٽ هاڪ تجزيي مان ظاهر ٿيو ته 24 ڪلاڪن ۾ باسي پيشاب جي بدبو ٻين سڀني علاجن جي مقابلي ۾ ڪشش جي سطح کي تمام گهڻو بلند ڪيو (72 ڪلاڪ: p = 0.0060، 168 ڪلاڪ: p = 0.012، پينٽين: p = 0.00070)، تازي پيشاب جي بوءَ کان سواءِ (p = 0.13؛ شڪل 5B). جيتوڻيڪ رت چوسيندڙ مڇرن جي پيشاب جي بوءَ ڏانهن مجموعي ڪشش خاص طور تي مختلف نه هئي (χ2 = 8.78، df = 4، p = 0.067؛ شڪل 5C)، اهي عورتون 72 ڪلاڪن جي عمر جي مقابلي ۾ هيڊ اسپيس غير مستحڪم عرق لاءِ خاص طور تي وڌيڪ پرڪشش مليون. ڪنٽرول جي مقابلي ۾ پيشاب (p = 0.0066؛ شڪل 5C).
ميزبان ۽ رت سان ڀريل اينوفيلس عربانس جي ڳولا ۾ قدرتي ۽ مصنوعي ڳئون جي پيشاب جي بدبوءَ لاءِ رويي جا ردعمل. شيشي جي ٽيوب آلفيڪٽوميٽر (A) جو اسڪيميٽ. تازي ۽ پراڻي ڳئون جي پيشاب مان ميزبان (B) ۽ رت چوسڻ واري (C) مڇرن ڏانهن هيڊ اسپيس جي غير مستحڪم نڪتن جو ڪشش. لارڊ اين جي ٽينٽيڪل رد عمل کي ڳوليو. تازي (D)، 24-ڪلاڪ (E)، 72-ڪلاڪ (F)، ۽ 168-ڪلاڪ (G) عمر واري ڳئون جي پيشاب کان الڳ ٿيل هيڊ اسپيس جا عرق ڏيکاريا ويا آهن. اليڪٽران اينٽينا جي ڳولا (EAD) جا نشان گيس ڪروميٽوگراف مان نڪتل ۽ شعلا آئنائيزيشن ڊيڪٽر (FID) پاران معلوم ڪيل هيڊ اسپيس ۾ بايو ايڪٽو مرڪبن جي جواب ۾ وولٽيج تبديليون ڏيکارين ٿا. اسڪيل بار رد عمل جي طول و عرض (mV) بمقابله برقرار رکڻ جي وقت (s) جي نمائندگي ڪري ٿو. حياتياتي طور تي فعال مرڪبن جون خاصيتون ۽ ڇڏڻ جي شرح (µg h-1) ڏيکاريل آهن. هڪ واحد ستارو (*) هڪ مسلسل گهٽ طول و عرض جي جواب کي ظاهر ڪري ٿو. ٻٽي ستارا (**) غير پيداواري کي ظاهر ڪن ٿا. جواب. ميزبان (H) ۽ رت چوسڻ واري (I) کي ڳولهيو. An.arabiensis تازي ۽ پراڻي ڳئون جي پيشاب جي خوشبوءَ جي مصنوعي مرکبن لاءِ مختلف اپيلون رکي ٿو. مختلف اکرن جي نالن ڏانهن متوجه ٿيندڙ مڇرن جو سراسري تناسب هڪ ٻئي کان خاص طور تي مختلف هو (ٽوڪي جي پوسٽ هاڪ تجزيو استعمال ڪندي هڪ طرفي ANOVA؛ p < 0.05). غلطي بار پيماني جي معياري غلطي جي نمائندگي ڪن ٿا.
عورت Ann.arabiensis، رت جي ماني کان 72 ڪلاڪ ۽ 120 ڪلاڪ پوءِ، سپوننگ دوران، پينٽين ڪنٽرولز جي مقابلي ۾ تازي ۽ پراڻي ڳئون جي پيشاب مان هيڊ اسپيس volatile extracts لاءِ ڪا به ترجيح نه ڏيکاري وئي (χ2 = 3.07، p > 0.05؛ اضافي فائل 1: شڪل S1).
عورت Ann.arabiensis لاءِ، GC-EAD ۽ GC-MS تجزين اٺ، ڇهه، ٽي ۽ ٽي حياتياتي فعال مرکبات جي سڃاڻپ ڪئي (شڪل 5D-G). جيتوڻيڪ اليڪٽرروفيزيولوجيڪل ردعمل پيدا ڪندڙ مرکبات جي تعداد ۾ فرق ڏٺو ويو، انهن مان گھڻا مرکبات تازي ۽ پراڻي پيشاب مان گڏ ڪيل هر هيڊ اسپيس غير مستحڪم اقتباس ۾ موجود هئا. تنهن ڪري، هر اقتباس لاءِ، صرف اهي مرکبات جيڪي حد کان مٿي عورت اينٽينا مان جسماني ردعمل پيدا ڪن ٿا، وڌيڪ تجزين ۾ شامل ڪيا ويا.
هيڊ اسپيس ڪليڪشن ۾ بايو ايڪٽو مرڪبن جي ڪل غير مستحڪم ڇڏڻ جي شرح تازي پيشاب ۾ 29 µg h-1 کان وڌي 168 ڪلاڪن جي عمر واري پيشاب ۾ 242 µg h-1 ٿي وئي، خاص طور تي p-cresol ۽ m-formaldehyde Phenol جي واڌ سان گڏ فينول جي ڪري. ان جي ابتڙ، ٻين مرڪبن جي ڇڏڻ جي شرح، جهڙوڪ 2-cyclohexen-1-one ۽ decanal، پيشاب جي عمر ۾ واڌ سان گهٽجي وئي، جيڪا ڪروميٽوگرام (شڪل 5D)-G کاٻي پينل) ۾ سگنل جي شدت (ڪثرت) ۾ مشاهدو ڪيل گهٽتائي ۽ انهن مرڪبن جي جسماني ردعمل (شڪل 5D-G ساڄي پينل) سان لاڳاپيل هئي.
مجموعي طور تي، مصنوعي مرکب ۾ تازي ۽ پراڻي پيشاب جي هيڊ اسپيس جي غير مستحڪم عرق ۾ سڃاڻپ ٿيل بايو ايڪٽو مرکبات جو هڪجهڙو قدرتي تناسب هو (شڪل 5D-G) ۽ ميزبان (χ2 = 8.15، df = 4، p = 0.083؛ شڪل 5H) يا رت چوسڻ وارا مڇر (χ2 = 4.91، df = 4، p = 0.30؛ شڪل 5I) جي ڳولا ۾ اهم اپيل پيدا ڪرڻ لاءِ ظاهر نه ٿيو. جڏهن ته، علاج جي وچ ۾ پوسٽ هاڪ جوڙو وار مقابلي ڏيکاريو ته ميزبان ڳولڻ وارا مڇر پينٽين ڪنٽرول جي مقابلي ۾ 24-ڪلاڪ عمر جي پيشاب جي مصنوعي مرکب لاءِ خاص طور تي پرڪشش هئا (p = 0.0086؛ شڪل 5H).
24-h-aged پيشاب جي مصنوعي مرکب ۾ انفرادي اجزاء جي ڪردار جو جائزو وٺڻ لاءِ، Y-ٽيوب ٽيسٽ ۾ مڪمل مرکبن جي خلاف ڇهه ذيلي مرکبن جو جائزو ورتو ويو، جنهن ۾ انفرادي مرکبن کي هٽايو ويو. ميزبان ڳولڻ وارن مڇرن لاءِ، مڪمل مرکب مان انفرادي مرکبن کي گھٽائڻ جو رويي جي ردعمل تي هڪ اهم اثر پيو (χ2 = 19.63، df = 6، p = 0.0032؛ اضافي فائل 1: شڪل S2A)، سڀئي ذيلي مرکب مڪمل طور تي مخلوط کان ننڍا کان وڌيڪ پرڪشش هئا. ان جي ابتڙ، مڪمل طور تي مصنوعي مرکب مان انفرادي مرکبن کي هٽائڻ رت چوسڻ وارن مڇرن جي رويي جي ردعمل تي اثر انداز نه ٿيو (χ2 = 11.38، df = 6، p = 0.077)، ڊيڪينل جي استثنا سان، جنهن جي نتيجي ۾ مڪمل مرکب جي ڪشش جي مقابلي ۾ گهٽ سطح هئي (p = 0.022؛ اضافي فائل 1: شڪل S2B).
ايٿوپيا جي هڪ مليريا-مقامي ڳوٺ ۾، ڏهن راتين لاءِ ميدان جي حالتن ۾ مڇرن کي راغب ڪرڻ ۾ 24 ڪلاڪ ڳئون جي پيشاب جي مصنوعي مرکب جي اثرائتي جو جائزو ورتو ويو (شڪل 6A). ڪل 4,861 مڇرن کي پڪڙيو ويو ۽ سڃاڻپ ڪئي وئي، جن مان 45.7٪ Anthropus.gambiae sl، 18.9٪ Anopheles pharoensis ۽ 35.4٪ Culex spp هئا. (اضافي فائل 1: ٽيبل S1). Anopheles arabinis An.Gambian species complex جو واحد ميمبر آهي جيڪو PCR تجزيي ذريعي سڃاڻپ ڪيو ويو آهي. سراسري طور تي، هر رات 320 مڇر پڪڙيا ويا، جنهن دوران مصنوعي مرکب جي بتن سان ٽائيم ٽريپس بغير مرکب جي جوڙيل ڦڙن کان وڌيڪ مڇر پڪڙيا (χ2(0, 3196) = 170.0, p < 0.0001). آزمائش جي شروعات، وچ ۽ آخر ۾ پنجن ڪنٽرول راتين مان هر هڪ تي غير بيٽ ٿيل ڦڙا مقرر ڪيا ويا. مڇرن جي ساڳي تعداد هئي هر هڪ جوڙي جي ڦندي ۾ پڪڙيل، گهرن جي وچ ۾ ڪو به تعصب نه هجڻ جي نشاندهي ڪري ٿو (χ2(0, 1665) = 9 × 10-13, p > 0.05) ۽ مطالعي جي عرصي دوران آبادي ۾ ڪا به گهٽتائي نه آئي. ڪنٽرول ڦندي جي مقابلي ۾، مصنوعي مرکب تي مشتمل ڦندي ۾ پڪڙيل مڇرن جو تعداد خاص طور تي وڌي ويو: ميزبان ڳولڻ (χ2(0, 2107) = 138.7, p < 0.0001)، تازو رت پيئڻ (χ2(0, 650) = 32.2, p < 0.0001) ۽ حمل (χ2(0, 228) = 6.27, p = 0.0123; اضافي فائل 1: ٽيبل S1). اهو پڪڙيل مڇرن جي ڪل تعداد ۾ پڻ ظاهر ٿئي ٿو: ميزبان ڳولڻ > رت چوسيندڙ > حاملہ > نيم حاملہ > نر.
24 ڪلاڪن جي مصنوعي ڳئون جي پيشاب جي گند جي ميلاپ جي اثرائتي جو ميداني جائزو. ڏکڻ-مرڪزي ايٿوپيا (نقشو) ۾، ماکي شهر جي ويجهو (داخل ڪريو) فيلڊ ٽرائل ڪيا ويا، سينٽر فار ڊيزيز ڪنٽرول (سي ڊي سي) لائيٽ ٽريپ (ساڄي) کي جوڙيل گهرن ۾ استعمال ڪندي، لاطيني چورس ڊيزائن (هوائي تصوير) (اي) سان. مصنوعي گند سان ڀريل سي ڊي سي فوٽو ٽريپ ماده اينوفيلس عربسڪس (بي) کي راغب ڪن ٿا ۽ پڪڙين ٿا، پر اينوفيلس فارو (سي) نه، هڪ مختلف انداز ۾، هڪ جسماني حالت تي منحصر اثر. ان کان علاوه، انهن ٽريپس ميزبان ڪيوليڪس مڇرن جي خاص طور تي وڌندڙ تعداد کي پڪڙيو. (ڊي) ڪنٽرول سان مقابلو ڪيو ويو. کاٻي پاسي وارا بار بدبودار بيت (سائي) ۽ ڪنٽرول (کليل) ٽريپس (اين = 10) جي جوڙن ۾ پڪڙيل مڇرن جي سراسري چونڊ انڊيڪس جي نمائندگي ڪن ٿا، جڏهن ته ساڄي پاسي وارا بار ڪنٽرول ٽريپس (کليل؛ اين = 5) جي جوڙن ۾ سراسري چونڊ انڊيڪس جي نمائندگي ڪن ٿا. ). ستارا شمارياتي اهميت جي سطح کي ظاهر ڪن ٿا (*p = 0.01 ۽ ***p < 0.0001)
ٽنهي قسمن کي مصنوعي مرکبن تي مشتمل ڦندن ۾ مختلف طرح سان پڪڙيو ويو. ميزبان (χ2(1, 1345) = 71.7, p < 0.0001)، رت جي فراهمي (χ2(1, 517) = 16.7, p < 0.0001) ۽ حمل (χ2(1, 180) = 6.11, p = 0.0134) جي ڳولا ۾ a .arabiensis مصنوعي مرکب کي جاري ڪندڙ ڦند ۾ ڦاسي پيو هو (شڪل 6B)، جڏهن ته An جي مقدار مختلف نه هئي. مختلف جسماني حالتن ۾ Pharoensis مليا (شڪل 6C). Culex لاءِ، ڪنٽرول ڦندن جي مقابلي ۾، مصنوعي مرکب (χ2(1,1319) = 12.6, p = 0.0004; شڪل 6D) سان ڦاسي پوندڙ ڦندن ۾ ميزبانن جي ڳولا ڪندڙ مڇرن جي تعداد ۾ صرف هڪ اهم اضافو مليو، ڪنٽرول ڦندن جي مقابلي ۾.
ايٿوپيا ۾ نسل جي جڳهن ۽ ڳوٺاڻن برادرين جي وچ ۾ امڪاني ميزبانن کان ٻاهر واقع ميزبان بيت جا ڦڙا استعمال ڪيا ويا ته ڇا مليريا مڇر ڳئون جي پيشاب جي گند کي ميزبان رهائش جي اشاري طور استعمال ڪن ٿا. ميزبان اشارن جي غير موجودگي ۾، گرمي، ۽ ڳئون جي پيشاب جي گند جي موجودگي سان يا بغير، ڪو به مڇر پڪڙيو نه ويو (اضافي فائل 1: شڪل S3). جڏهن ته، اعلي درجه حرارت ۽ ڳئون جي پيشاب جي گند جي موجودگي ۾، مادي مليريا مڇر متوجه ٿيا ۽ پڪڙيا ويا، جيتوڻيڪ گهٽ تعداد ۾، پيشاب جي عمر کان آزاد (χ2(5, 25) = 2.29, p = 0.13; اضافي فائل 1: شڪل S3). ان جي ابتڙ، پاڻي جي ڪنٽرول مليريا مڇرن کي تيز گرمي پد تي پڪڙيو نه (اضافي فائل 1: شڪل S3).
مليريا جا مڇر ڳئون جي پيشاب (يعني تلاءَ) تي معاوضي واري کاڌ خوراڪ ذريعي نائٽروجن تي مشتمل مرکبات حاصل ڪندا آهن ۽ ورهائيندا آهن ته جيئن ٻين حشرات وانگر زندگي جي تاريخ جي خاصيتن کي وڌايو وڃي [2، 4، 24، 25، 26]. ڳئون جو پيشاب هڪ آساني سان دستياب قابل تجديد وسيلو آهي جيڪو مليريا جي ویکٹرن لاءِ آرام جي جڳهن سان ويجهي سان لاڳاپيل آهي، جهڙوڪ ڳئون جا ڍڳا ۽ ڳوٺاڻن گهرن ۽ اسپوننگ سائيٽن جي ويجهو ڊگها ٻوٽا. مادي مڇر هن وسيلن کي بوءَ ذريعي ڳوليندا آهن ۽ پيشاب ۾ نائٽروجن مرکبات جي جذب کي منظم ڪرڻ جي قابل هوندا آهن، جنهن ۾ يوريا شامل آهي، پيشاب ۾ اهم نائٽروجن جزو [15، 16]. مادي مڇر جي جسماني حالت تي منحصر ڪري، پيشاب ۾ غذائي اجزاء ميزبان ڳولڻ واري مادي مڇرن جي پرواز جي سرگرمي ۽ بقا کي وڌائڻ لاءِ مختص ڪيا ويندا آهن، انهي سان گڏ پهرين گوناڊوٽروپڪ چڪر دوران رت پيئندڙ فردن جي بقا ۽ پيداواري خاصيتن کي. تنهن ڪري، پيشاب جو ملاوٽ مليريا ویکٹرن لاءِ هڪ اهم غذائي ڪردار ادا ڪري ٿو جيڪي غذائيت جي شڪار بالغن وانگر بند آهن [8]، ڇاڪاڻ ته اهو مادي مڇرن کي گهٽ خطري واري کاڌ خوراڪ ۾ مشغول ٿي اهم نائٽروجن مرکبات حاصل ڪرڻ جي صلاحيت فراهم ڪري ٿو. هن ڳولا ۾ اهم آهي وبائي مرض جا نتيجا، جيئن عورتون پنهنجي عمر جي توقع، سرگرمي ۽ پيدائشي پيداوار وڌائين ٿيون، اهي سڀ ویکٹر جي صلاحيت کي متاثر ڪن ٿا. ان کان علاوه، هي رويو مستقبل جي ویکٹر مئنيجمينٽ پروگرامن جو نشانو ٿي سگهي ٿو.