ڪجهه LC مسئلا حل ڪرڻ جا موضوع ڪڏهن به پراڻا نه هوندا آهن، ڇاڪاڻ ته LC مشق ۾ مسئلا هوندا آهن، جيتوڻيڪ اوزار ٽيڪنالاجي وقت سان گڏ بهتر ٿيندي آهي. اهڙا ڪيترائي طريقا آهن جن ۾ LC سسٽم ۾ مسئلا پيدا ٿي سگهن ٿا ۽ خراب چوٽي جي شڪل ۾ ختم ٿي سگهن ٿا. جڏهن چوٽي جي شڪل سان لاڳاپيل مسئلا پيدا ٿين ٿا، انهن نتيجن جي ممڪن سببن جي هڪ مختصر فهرست اسان جي مسئلي جي حل جي تجربي کي آسان بڻائڻ ۾ مدد ڪري ٿي.
هي "LC ٽربل شوٽنگ" ڪالم لکڻ ۽ هر مهيني موضوعن تي سوچڻ ۾ مزو آيو آهي، ڇاڪاڻ ته ڪجهه موضوع ڪڏهن به انداز کان ٻاهر نه ويندا آهن. جڏهن ته ڪروميٽوگرافي جي تحقيق جي ميدان ۾ ڪجهه موضوع يا خيال متروڪ ٿي ويندا آهن ڇاڪاڻ ته انهن کي نوان ۽ بهتر خيالن طرفان رد ڪيو ويندو آهي، ٽربل شوٽنگ جي ميدان ۾، جڏهن کان پهريون ٽربل شوٽنگ آرٽيڪل هن جرنل (ان وقت LC جرنل) ۾ 1983 (1) ۾ ظاهر ٿيو هو. گذريل ڪجهه سالن کان، مون ڪيترن ئي LC ٽربل شوٽنگ سيڪشنز تي ڌيان ڏنو آهي معاصر رجحانات تي جيڪي مائع ڪروميٽوگرافي (LC) کي متاثر ڪن ٿا (مثال طور، برقرار رکڻ تي دٻاءُ جي اثر جي اسان جي سمجھ جو لاڳاپو مقابلو [2] نئين ترقي) LC نتيجن جي اسان جي تشريح ۽ جديد LC اوزارن سان ڪيئن مسئلو حل ڪجي. هن مهيني جي قسط ۾، مان پنهنجي سيريز (3) جاري رکي رهيو آهيان، جيڪا ڊسمبر 2021 ۾ شروع ٿي هئي، جيڪا LC ٽربل شوٽنگ جي ڪجهه "زندگي ۽ موت" موضوعن تي ڌيان ڏنو - عنصر جيڪي ڪنهن به ٽربل شوٽر لاءِ بهترين آهن ضروري آهن، ڪابه پرواهه ناهي ته اسان ڪهڙي به عمر جو نظام استعمال ڪري رهيا آهيون. هن سيريز جو بنيادي موضوع آهي LCGC جي مشهور "LC ٽربل شوٽنگ گائيڊ" وال چارٽ (4) سان تمام گهڻي لاڳاپيل آهي جيڪو ڪيترن ئي ليبارٽريز ۾ لٽڪيل آهي. هن سيريز جي ٽئين حصي لاءِ، مون چوٽي جي شڪل يا چوٽي جي خاصيتن سان لاڳاپيل مسئلن تي ڌيان ڏيڻ جو انتخاب ڪيو. ناقابل يقين حد تائين، وال چارٽ خراب چوٽي جي شڪل جي 44 مختلف امڪاني سببن جي فهرست ڏئي ٿو! اسان انهن سڀني مسئلن تي هڪ مضمون ۾ تفصيل سان غور نٿا ڪري سگهون، تنهن ڪري موضوع تي هن پهرين قسط ۾، مان ڪجهه تي ڌيان ڏيندس جيڪي مان اڪثر ڏسندو آهيان. مون کي اميد آهي ته نوجوان ۽ پوڙها LC استعمال ڪندڙ هن اهم موضوع تي ڪجهه مددگار صلاحون ۽ ياد ڏياريندڙ ڳوليندا.
مان پاڻ کي "ڪجهه به ممڪن آهي" سان مسئلن جي حل جي سوالن جا جواب وڌيڪ ۽ وڌيڪ ڏيندي ڏسان ٿو. هي جواب آسان لڳي سگهي ٿو جڏهن انهن مشاهدن تي غور ڪيو وڃي جن جي تشريح ڪرڻ ڏکيو آهي، پر مون کي اهو اڪثر مناسب لڳندو آهي. خراب چوٽي جي شڪل جي ڪيترن ئي ممڪن سببن سان، اهو ضروري آهي ته کليل ذهن رکڻ گهرجي جڏهن غور ڪيو وڃي ته مسئلو ڇا ٿي سگهي ٿو، ۽ ممڪن سببن کي ترجيح ڏيڻ جي قابل هجڻ لاءِ اسان جي مسئلن جي حل جي ڪوششن کي شروع ڪرڻ لاءِ، انهن عام امڪانن تي ڌيان ڏيڻ لاءِ، هي نقطو تمام ضروري آهي. ممڪن آهي.
ڪنهن به مسئلي جي حل جي مشق ۾ هڪ اهم قدم - پر هڪ جيڪو مون کي لڳي ٿو ته گهٽ سمجهيو ويندو آهي - اهو تسليم ڪرڻ آهي ته هڪ مسئلو آهي جنهن کي حل ڪرڻ جي ضرورت آهي. اهو تسليم ڪرڻ ته هڪ مسئلو آهي اڪثر ڪري اهو تسليم ڪرڻ جو مطلب آهي ته اوزار سان ڇا ٿئي ٿو اهو اسان جي اميدن کان مختلف آهي، جيڪي نظريي، تجرباتي علم، ۽ تجربي جي شڪل ۾ آهن (5). هتي حوالو ڏنو ويو "چوٽي جي شڪل" اصل ۾ نه رڳو چوٽي جي شڪل (سميٽرڪ، غير متناسب، هموار، فلفي، ليڊنگ ايج، ٽيلنگ، وغيره) ڏانهن اشارو ڪري ٿو، پر ويڪر ڏانهن پڻ. اصل چوٽي جي شڪل لاءِ اسان جون اميدون سادي آهن. نظريو (6) درسي ڪتاب جي اميد کي چڱي طرح سپورٽ ڪري ٿو ته، اڪثر ڪيسن ۾، ڪروميٽوگرافڪ چوٽيون هميٽرڪ هجڻ گهرجن ۽ گاسي ورڇ جي شڪل سان مطابقت رکن ٿيون، جيئن شڪل 1a ۾ ڏيکاريل آهي. چوٽي جي ويڪر مان اسان ڇا توقع ڪريون ٿا اهو هڪ وڌيڪ پيچيده مسئلو آهي، ۽ اسان هن موضوع تي مستقبل جي مضمون ۾ بحث ڪنداسين. شڪل 1 ۾ ٻيون چوٽي شڪلون ڪجهه ٻين امڪانن کي ڏيکارين ٿيون جيڪي مشاهدو ڪري سگهجن ٿيون - ٻين لفظن ۾، ڪجهه طريقن سان شيون غلط ٿي سگهن ٿيون. هن قسط جي باقي حصي ۾، اسان ڪجهه مخصوص تي بحث ڪرڻ ۾ وقت گذارينداسين حالتن جا مثال جيڪي انهن شڪلن جي قسمن ڏانهن وٺي سگهن ٿا.
ڪڏهن ڪڏهن ڪروميٽوگرام ۾ چوٽيون بلڪل به نه ڏٺيون وينديون آهن جتي انهن جي ايلوٽ ٿيڻ جي اميد ڪئي ويندي آهي. مٿي ڏنل وال چارٽ ظاهر ڪري ٿو ته چوٽي جي غير موجودگي (فرض ڪيو ته نموني ۾ اصل ۾ هڪ ڪنسنٽريشن تي ٽارگيٽ اينالائيٽ شامل آهي جيڪو ڊيڪٽر جواب کي شور کان مٿي ڏسڻ لاءِ ڪافي بڻائڻ گهرجي) عام طور تي ڪجهه اوزار جي مسئلي يا غلط موبائل فيز حالتن سان لاڳاپيل هوندو آهي (جيڪڏهن بلڪل ڏٺو وڃي). چوٽيون، عام طور تي تمام گهڻيون "ڪمزور"). هن درجي ۾ امڪاني مسئلن ۽ حلن جي هڪ مختصر فهرست جدول I ۾ ملي سگهي ٿي.
جيئن مٿي ذڪر ڪيو ويو آهي، اهو سوال ته ڌيان ڏيڻ ۽ ان کي درست ڪرڻ جي ڪوشش ڪرڻ کان اڳ چوٽي جي وسيع ٿيڻ کي ڪيترو برداشت ڪرڻ گهرجي، اهو هڪ پيچيده موضوع آهي جنهن تي مان مستقبل جي مضمون ۾ بحث ڪندس. منهنجو تجربو اهو آهي ته اهم چوٽي جي وسيع ٿيڻ اڪثر چوٽي جي شڪل ۾ هڪ اهم تبديلي سان گڏ هوندو آهي، ۽ چوٽي جي ٽيلنگ پري چوٽي يا ورهائڻ کان وڌيڪ عام آهي. بهرحال، نامياري طور تي هموار چوٽيون پڻ وسيع ڪيون وينديون آهن، جيڪي ڪجهه مختلف سببن جي ڪري ٿي سگهن ٿيون:
انهن مان هر هڪ مسئلي تي ٽربل شوٽنگ ايل سي جي پوئين شمارن ۾ تفصيل سان بحث ڪيو ويو آهي، ۽ انهن موضوعن ۾ دلچسپي رکندڙ پڙهندڙ انهن مسئلن جي بنيادي سببن ۽ ممڪن حلن بابت معلومات لاءِ انهن پوئين مضمونن جو حوالو ڏئي سگهن ٿا. وڌيڪ تفصيل.
چوٽي جي پڇاڙي، چوٽي جي سامهون، ۽ ورهائڻ سڀ ڪيميائي يا جسماني رجحان جي ڪري ٿي سگهن ٿا، ۽ انهن مسئلن جي امڪاني حلن جي فهرست وڏي پيماني تي مختلف آهي، ان تي منحصر آهي ته اسان ڪيميائي يا جسماني مسئلي سان ڊيل ڪري رهيا آهيون. اڪثر ڪري، ڪروميٽوگرام ۾ مختلف چوٽين جو مقابلو ڪندي، توهان اهم اشارا ڳولي سگهو ٿا ته مجرم ڪير آهي. جيڪڏهن ڪروميٽوگرام ۾ سڀئي چوٽيون هڪجهڙيون شڪلون ڏيکارين ٿيون، ته سبب گهڻو ڪري جسماني نه هوندو آهي. جيڪڏهن صرف هڪ يا ڪجهه چوٽيون متاثر ٿين ٿيون، پر باقي ٺيڪ نظر اچن ٿيون، ته سبب گهڻو ڪري ڪيميائي آهي.
چوٽي جي ٽيلنگ جا ڪيميائي سبب تمام پيچيده آهن جن تي هتي مختصر طور تي بحث ڪرڻ ممڪن ناهي. دلچسپي رکندڙ پڙهندڙ کي وڌيڪ گهري بحث لاءِ "LC ٽربل شوٽنگ" جي تازي شماري جو حوالو ڏنو ويو آهي (10). بهرحال، ڪوشش ڪرڻ لاءِ هڪ آسان شيءِ اها آهي ته انجيڪٽ ٿيل اينالائيٽ جي ماس کي گهٽايو وڃي ۽ ڏسو ته ڇا چوٽي جي شڪل بهتر ٿئي ٿي. جيڪڏهن ائين آهي، ته پوءِ اهو هڪ سٺو اشارو آهي ته مسئلو "ماس اوورلوڊ" آهي. هن صورت ۾، طريقو ننڍن تجزياتي ماس کي انجيڪشن ڪرڻ تائين محدود هجڻ گهرجي، يا ڪروميٽوگرافڪ حالتن کي تبديل ڪرڻ گهرجي ته جيئن وڏي ماس کي انجيڪشن ڪرڻ سان به سٺي چوٽي شڪلون حاصل ڪري سگهجن.
چوٽي جي ٽيلنگ جا ڪيترائي امڪاني جسماني سبب پڻ آهن. امڪانن جي تفصيلي بحث ۾ دلچسپي رکندڙ پڙهندڙن کي "LC ٽربل شوٽنگ" (11) جي هڪ ٻئي تازي شماري جو حوالو ڏنو ويو آهي. چوٽي جي ٽيلنگ جي وڌيڪ عام جسماني سببن مان هڪ انجڪٽر ۽ ڊيڪٽر (12) جي وچ ۾ هڪ نقطي تي خراب ڪنيڪشن آهي. هڪ انتهائي مثال شڪل 1d ۾ ڏيکاريل آهي، جيڪو ڪجهه هفتا اڳ منهنجي ليبارٽري ۾ حاصل ڪيو ويو هو. هن صورت ۾، اسان هڪ نئين انجيڪشن والو سان هڪ سسٽم ٺاهيو جيڪو اسان اڳ ۾ استعمال نه ڪيو هو، ۽ هڪ ننڍڙو حجم انجيڪشن لوپ هڪ فيرول سان نصب ڪيو جيڪو اسٽينلیس اسٽيل ڪيپيلري تي ٺهيل هو. ڪجهه شروعاتي مشڪلاتن جي حل جي تجربن کان پوءِ، اسان محسوس ڪيو ته انجيڪشن والو اسٽيٽر ۾ پورٽ جي کوٽائي اسان جي عادت کان تمام گهڻي هئي، جنهن جي نتيجي ۾ پورٽ جي تري ۾ هڪ وڏو ڊيڊ حجم پيدا ٿيو. هي مسئلو آساني سان انجيڪشن لوپ کي ٻئي ٽيوب سان تبديل ڪرڻ سان حل ڪيو ويندو آهي، اسان پورٽ جي تري ۾ ڊيڊ حجم کي ختم ڪرڻ لاءِ فيرول کي مناسب پوزيشن ۾ ترتيب ڏئي سگهون ٿا.
شڪل 1e ۾ ڏيکاريل چوٽي جا محاذ جسماني يا ڪيميائي مسئلن جي ڪري پڻ ٿي سگهن ٿا. ليڊنگ ايج جو هڪ عام جسماني سبب اهو آهي ته ڪالمن جو پارٽيڪل بيڊ چڱي طرح ڀريل نه آهي، يا اهو ته ذرڙا وقت سان گڏ ٻيهر منظم ٿي ويا آهن. جيئن هن جسماني رجحان جي ڪري چوٽي جي ٽيلنگ سان، هن کي درست ڪرڻ جو بهترين طريقو ڪالمن کي تبديل ڪرڻ ۽ جاري رکڻ آهي. بنيادي طور تي، ڪيميائي اصل سان ليڊنگ ايج چوٽي جون شڪلون اڪثر ڪري پيدا ٿين ٿيون جن کي اسين "غير لڪير" برقرار رکڻ جي حالتن کي سڏيندا آهيون. مثالي (لڪير) حالتن جي تحت، اسٽيشنري مرحلي (تنهن ڪري، برقرار رکڻ جو عنصر) پاران برقرار رکيل تجزيي جي مقدار لڪير سان ڪالمن ۾ تجزيي جي ڪنسنٽريشن سان لاڳاپيل آهي. ڪروميٽوگرافڪ طور تي، ان جو مطلب اهو آهي ته جيئن ڪالمن ۾ داخل ڪيل تجزيي جو ماس وڌندو آهي، چوٽي ڊگهي ٿيندي آهي، پر وسيع نه ٿيندي آهي. هي تعلق ٽٽي ويندو آهي جڏهن برقرار رکڻ جو رويو غير لڪير هوندو آهي، ۽ چوٽيون نه رڳو ڊگهيون ٿينديون آهن پر وڌيڪ وسيع پڻ ٿينديون آهن جيئن وڌيڪ ماس انجيڪٽ ڪيو ويندو آهي. ان کان علاوه، غير لڪير شڪلون ڪروميٽوگرافڪ چوٽين جي شڪل کي طئي ڪن ٿيون، جنهن جي نتيجي ۾ ليڊنگ يا ٽريلنگ ڪنارا پيدا ٿين ٿا. جيئن ماس اوورلوڊ سان جيڪو چوٽي جو سبب بڻجندو آهي ٽيلنگ (10)، نان لائنر برقرار رکڻ جي ڪري چوٽي جي اڳواڻي جي تشخيص پڻ انجيڪٽ ٿيل تجزياتي ماس کي گهٽائڻ سان ڪري سگهجي ٿي. جيڪڏهن چوٽي جي شڪل بهتر ٿئي ٿي، ته طريقو تبديل ڪيو وڃي ته جيئن انجيڪشن جي معيار کان وڌيڪ نه هجي جيڪو اڳواڻي واري ڪناري جو سبب بڻجندو آهي، يا هن رويي کي گهٽائڻ لاءِ ڪروميٽوگرافڪ حالتن کي تبديل ڪيو وڃي.
ڪڏهن ڪڏهن اسان اهو ڏسندا آهيون ته ڇا "تقسيم" چوٽي نظر اچي ٿي، جيئن شڪل 1f ۾ ڏيکاريل آهي. هن مسئلي کي حل ڪرڻ ۾ پهريون قدم اهو طئي ڪرڻ آهي ته ڇا چوٽي جي شڪل جزوي ڪو-ايليوشن (يعني ٻن الڳ پر ويجهي ايليوٽ ٿيندڙ مرکبن جي موجودگي) جي ڪري آهي. جيڪڏهن اصل ۾ ٻه مختلف تجزيه نگار هڪ ٻئي جي ويجهو ايليوٽ ڪري رهيا آهن، ته پوءِ اهو انهن جي ريزوليوشن کي بهتر بڻائڻ جو معاملو آهي (مثال طور، چونڊ، برقرار رکڻ، يا پليٽ ڳڻپ کي وڌائڻ سان)، ۽ ظاهري "تقسيم" چوٽيون جسماني ڪارڪردگي سان لاڳاپيل آهن. پاڻ ڪالمن سان ڪو به تعلق ناهي. گهڻو ڪري، هن فيصلي جو سڀ کان اهم اشارو اهو آهي ته ڇا ڪروميٽوگرام ۾ سڀئي چوٽيون ورهايل شڪلون ڏيکارين ٿيون، يا صرف هڪ يا ٻه. جيڪڏهن اهو صرف هڪ يا ٻه آهي، اهو شايد هڪ ڪو-ايليوشن مسئلو آهي؛ جيڪڏهن سڀئي چوٽيون ورهايل آهن، اهو شايد هڪ جسماني مسئلو آهي، گهڻو ڪري ڪالمن سان لاڳاپيل آهي.
ڪالمن جي جسماني خاصيتن سان لاڳاپيل ورهايل چوٽيون عام طور تي جزوي طور تي بند ٿيل انليٽ يا آئوٽ ليٽ فريٽس، يا ڪالمن ۾ ذرڙن جي ٻيهر ترتيب جي ڪري هونديون آهن، جنهن جي ڪري موبائل فيز ڪالمن چينل جي ٺهڻ جي ڪجهه علائقن ۾ موبائل فيز کان وڌيڪ تيز وهندو آهي. ٻين علائقن ۾ (11). جزوي طور تي بند ٿيل فريٽ کي ڪڏهن ڪڏهن ڪالمن ذريعي وهڪري کي الٽ ڪندي صاف ڪري سگهجي ٿو؛ جڏهن ته، منهنجي تجربي ۾، اهو عام طور تي ڊگهي مدت جي حل جي بدران هڪ مختصر مدت آهي. جديد ڪالمن سان اهو اڪثر ڪري موتمار هوندو آهي جيڪڏهن ذرات ڪالمن اندر ٻيهر گڏ ٿين ٿا. هن نقطي تي، ڪالمن کي تبديل ڪرڻ ۽ جاري رکڻ بهتر آهي.
شڪل 1g ۾ چوٽي، منهنجي پنهنجي ليبارٽري ۾ هڪ تازي مثال مان پڻ، عام طور تي اشارو ڪري ٿي ته سگنل ايترو بلند آهي جو اهو جوابي حد جي اعليٰ آخر تائين پهچي چڪو آهي. آپٽيڪل جاذب ڊيڪٽرز (هن صورت ۾ UV-vis) لاءِ، جڏهن تجزياتي ڪنسنٽريشن تمام گهڻو هوندو آهي، تجزياتي ڊيڪٽر فلو سيل مان گذرندڙ روشني جو گهڻو حصو جذب ڪري ٿو، جنهن سان تمام گهٽ روشني معلوم ٿي سگهي ٿي. انهن حالتن ۾، فوٽو ڊيٽيڪٽر مان برقي سگنل شور جي مختلف ذريعن، جهڙوڪ گم ٿيل روشني ۽ "ڪارو ڪرنٽ" کان تمام گهڻو متاثر ٿئي ٿو، جيڪو سگنل کي ظاهر ۾ تمام گهڻو "مبهم" بڻائي ٿو ۽ تجزياتي ڪنسنٽريشن کان آزاد آهي. جڏهن اهو ٿئي ٿو، مسئلو اڪثر ڪري تجزياتي جي انجيڪشن جي مقدار کي گهٽائڻ سان حل ڪري سگهجي ٿو - انجيڪشن جي مقدار کي گهٽائڻ، نموني کي گهٽائڻ، يا ٻئي.
ڪروميٽوگرافي اسڪول ۾، اسين نموني ۾ تجزياتي ڪنسنٽريشن جي اشاري طور ڊيڪٽر سگنل (يعني، ڪروميٽوگرام ۾ y-محور) استعمال ڪندا آهيون. تنهنڪري صفر کان هيٺ سگنل سان ڪروميٽوگرام ڏسڻ عجيب لڳي ٿو، ڇاڪاڻ ته سادي تشريح اها آهي ته اهو هڪ منفي تجزياتي ڪنسنٽريشن کي ظاهر ڪري ٿو - جيڪو يقيناً جسماني طور تي ممڪن ناهي. منهنجي تجربي ۾، منفي چوٽيون اڪثر ڪري نظر اينديون آهن جڏهن آپٽيڪل جاذب ڊيڪٽرز (مثال طور، UV-vis) استعمال ڪندي.
هن صورت ۾، هڪ منفي چوٽي جو مطلب صرف اهو آهي ته ڪالمن مان نڪرندڙ ماليڪيول چوٽي کان فوري طور تي اڳ ۽ بعد ۾ موبائل فيز کان گهٽ روشني جذب ڪن ٿا. اهو ٿي سگهي ٿو، مثال طور، جڏهن نسبتا گهٽ ڊيٽيڪشن طول موج (<230 nm) ۽ موبائل فيز اضافو استعمال ڪندي جيڪي انهن موج موج تي گهڻي روشني جذب ڪن ٿا. اهڙا اضافو موبائل فيز سالوينٽ جزا جهڙوڪ ميٿانول يا بفر جزا جهڙوڪ ايسٽيٽ يا فارميٽ ٿي سگهن ٿا. ڪو به اصل ۾ منفي چوٽي کي ڪيليبريشن وکر تيار ڪرڻ ۽ صحيح مقداري معلومات حاصل ڪرڻ لاءِ استعمال ڪري سگهي ٿو، تنهن ڪري انهن کان بچڻ جو ڪو بنيادي سبب ناهي (هن طريقي کي ڪڏهن ڪڏهن "اڻ سڌي UV ڳولڻ" سڏيو ويندو آهي) (13). بهرحال، جيڪڏهن اسان واقعي منفي چوٽين کان مڪمل طور تي بچڻ چاهيون ٿا، جذب جي ڳولا جي صورت ۾، بهترين حل هڪ مختلف ڊيٽيڪشن طول موج استعمال ڪرڻ آهي ته جيئن تجزيه نگار موبائل فيز کان وڌيڪ جذب ڪري، يا موبائل فيز جي جوڙجڪ کي تبديل ڪري ته جيئن اهي تجزيه نگارن کان گهٽ روشني جذب ڪن.
جڏهن نموني ۾ تجزياتي کان سواءِ ٻين حصن جو ريفريڪٽو انڊيڪس، جهڙوڪ سالوينٽ ميٽرڪس، موبائل فيز جي ريفريڪٽو انڊيڪس کان مختلف هوندو آهي، ته منفي چوٽيون پڻ ظاهر ٿي سگهن ٿيون. اهو UV-vis ڊيٽيڪشن سان پڻ ٿئي ٿو، پر هي اثر RI ڊيٽيڪشن جي نسبت گهٽجي ويندو آهي. ٻنهي صورتن ۾، نموني ميٽرڪس جي جوڙجڪ کي موبائل فيز سان وڌيڪ ويجهڙائي سان ملائي منفي چوٽين کي گهٽائي سگهجي ٿو.
LC ٽربل شوٽنگ جي بنيادي موضوع تي ٽئين حصي ۾، مون انهن حالتن تي بحث ڪيو جن ۾ مشاهدو ڪيل چوٽي جي شڪل متوقع يا عام چوٽي جي شڪل کان مختلف آهي. اهڙن مسئلن جو اثرائتي مسئلو حل ڪرڻ متوقع چوٽي جي شڪلن جي ڄاڻ سان شروع ٿئي ٿو (نظريي يا موجوده طريقن سان اڳوڻي تجربي جي بنياد تي)، تنهن ڪري انهن اميدن کان انحراف واضح آهن. چوٽي جي شڪل جي مسئلن جا ڪيترائي مختلف امڪاني سبب آهن (تمام گهڻو ويڪرو، ٽيلنگ، ليڊنگ ايج، وغيره). هن قسط ۾، مان ڪجهه سببن تي تفصيل سان بحث ڪريان ٿو جيڪي مان اڪثر ڏسان ٿو. انهن تفصيلن کي ڄاڻڻ مسئلو حل ڪرڻ شروع ڪرڻ لاءِ هڪ سٺي جڳهه فراهم ڪري ٿو، پر سڀني امڪانن کي پڪڙي نٿو سگهي. سببن ۽ حلن جي وڌيڪ گهري فهرست ۾ دلچسپي رکندڙ پڙهندڙ LCGC "LC ٽربل شوٽنگ گائيڊ" وال چارٽ جو حوالو ڏئي سگهن ٿا.
(4) ايل سي جي سي "ايل سي ٽربل شوٽنگ گائيڊ" وال چارٽ. https://www.chromatographyonline.com/view/troubleshooting-wallchart (2021).
(6) اي. فيلينگر، ڪروميٽوگرافي ۾ ڊيٽا تجزيو ۽ سگنل پروسيسنگ (ايلسويئر، نيو يارڪ، اين وائي، 1998)، صفحا 43-96.
(8) وهاب ايم ايف، داس گپتا پي ڪي، ڪڊجو اي ايف ۽ آرمسٽرانگ ڊي ڊبليو، اينل.چم.جرنل.ريو. 907، 31–44 (2016).https://doi.org/10.1016/j.aca.2015.11.043.