Nature.com گهمڻ لاءِ توهان جي مهرباني.برائوزر جو نسخو توهان استعمال ڪري رهيا آهيو محدود CSS سپورٽ آهي.بهترين تجربي لاءِ، اسان سفارش ڪريون ٿا ته توهان هڪ اپڊيٽ ٿيل برائوزر استعمال ڪريو (يا انٽرنيٽ ايڪسپلورر ۾ مطابقت واري موڊ کي بند ڪريو).ساڳئي وقت ۾، مسلسل حمايت کي يقيني بڻائڻ لاء، اسان سائيٽ کي بغير اسٽائل ۽ جاوا اسڪرپٽ پيش ڪنداسين.
پکين جي زرخيزي جو دارومدار ان جي قابليت تي هوندو آهي ته اهي سپرم اسٽوريج نلڪن (SST) ۾ ڊگھي عرصي تائين ڪافي قابل اسپرم کي ذخيرو ڪري سگھن.صحيح ميکانيزم جنهن جي ذريعي اسپرماتوزوا داخل ٿئي ٿو، اندر رهي ٿو، ۽ SST کي ڇڏي ٿو، تڪراري رهي ٿو.شارڪاسي مرغي جي سپرم جمع ٿيڻ لاءِ هڪ اعليٰ رجحان ڏيکاريو، ڪيترن ئي سيلن تي مشتمل موبائيل فليمينٽس بنڊل ٺاهيندي.هڪ اوپيڪ فيلوپيئن ٽيوب ۾ اسپرماتوزوا جي حرڪت ۽ رويي جو مشاهدو ڪرڻ جي مشڪل جي ڪري، اسان اسپرماتوزوا جي ايگلوٽينيشن ۽ موٽيلٽي جو مطالعو ڪرڻ لاءِ اسپرماتوزوا سان ملندڙ مائڪرو چينل ڪراس-سيڪشن سان هڪ مائڪرو فلوئڊڪ ڊيوائس استعمال ڪيو.هن مطالعي تي بحث ڪيو ويو آهي ته اسپرم بنڊل ڪيئن ٺاهيندا آهن، اهي ڪيئن هلن ٿا، ۽ SST ۾ سپرم جي رهائش کي وڌائڻ ۾ انهن جو ممڪن ڪردار.اسان اسپرم جي رفتار ۽ ريولوجيڪل رويي جي تحقيق ڪئي جڏهن مائع جي وهڪري کي مائڪرو فلائيڊڪ چينل اندر هائڊروسٽٽڪ پريشر (فلو جي شرح = 33 µm/s) ذريعي پيدا ڪيو ويو.اسپرماتوزوا موجوده (مثبت ريهالوجي) جي خلاف ترڻ جو رجحان رکي ٿو ۽ اسپرماتوزون بنڊل جي رفتار سنگل اسپرماتوزوا جي مقابلي ۾ تمام گھٽ ٿي وڃي ٿي.اسپرم بنڊلز کي سرپل ۾ منتقل ٿيڻ ۽ ڊگھائي ۽ ٿلهي ۾ اضافو ڏٺو ويو آهي جيئن وڌيڪ اڪيلو سپرم ڀرتي ڪيا ويا آهن. اسپرم بنڊلن کي ڏٺو ويو ته مائڪرو فلائيڊڪ چينلز جي پاسي جي ڀتين جي ڀرسان ۽ ان تي عمل ڪندي، سيال جي وهڪري جي رفتار سان 33 µm/s کان بچڻ لاء. اسپرم بنڊلن کي ڏٺو ويو ته مائڪرو فلائيڊڪ چينلز جي پاسي جي ڀتين جي ڀرسان ۽ ان تي عمل ڪندي، سيال جي وهڪري جي رفتار سان 33 µm/s کان بچڻ لاء. Было замечено, что пучки сперматозоидов приближаются и прилипают к боковым стенкам микрофлюидных каналов ю потока жидкости> 33 мкм / с. اسپرم بنڊلز کي ڏٺو ويو آهي ته جيئن مائڪرو فلائيڊڪ چينلز جي پاسي جي ڀتين ڏانهن ويجهن ۽ ان تي عمل ڪن ته جيئن فلوئڊ جي وهڪري جي شرح > 33 µm/s تي لهي وڃڻ کان بچڻ لاءِ.观察到精子束接近并粘附在微流体通道的侧壁，以避免被流体流速> 33 µm/s 扫上.33 µm/s 扫过. Было замечено, что пучки сперматозоидов приближаются и прилипают к боковым стенкам микрожидкостного канала, чбодожидкостного канала сти со скоростью > 33 mkm/с. 33 µm/s تي رطوبت جي وهڪري کان پري ٿيڻ کان بچڻ لاءِ اسپرم بنڊلن کي مائڪرو فلائيڊڪ چينل جي پاسي واري ديوار ڏانهن ويجهڻ ۽ ان تي عمل ڪرڻ لاءِ ڏٺو ويو آهي.اسڪيننگ ۽ ٽرانسميشن اليڪٽران خوردبيني ظاهر ڪيو آهي ته سپرم بنڊل گهڻو ڪري گھڻن مواد سان سهڪار ڪيا ويا آهن.حاصل ڪيل ڊيٽا Sharkazi chicken spermatozoa جي منفرد متحرڪيت کي ظاهر ڪري ٿو، انهي سان گڏ اسپرماتوزوا جي صلاحيت کي گڏ ڪرڻ ۽ موبائيل بنڊز ٺاهڻ جي صلاحيت، جيڪا SMT ۾ اسپرماتوزوا جي ڊگھي مدت جي اسٽوريج کي بهتر سمجهڻ ۾ مدد ڪري ٿي.
انسانن ۽ اڪثر جانورن ۾ ڀاڻ حاصل ڪرڻ لاءِ، نطفه ۽ هڏيون لازمي وقت تي ڀاڻ واري جاءِ تي پهچڻ گهرجن.تنهن ڪري، ملن ovulation کان اڳ يا وقت تي ٿيڻ گهرجي.ٻئي طرف، ڪي ٿلهي جانور، جهڙوڪ ڪتا، گڏوگڏ غير ٿلهي جانور، جهڙوڪ حشرات، مڇي، رينگڻ ۽ پکي، پنهنجي پيدائشي عضون ۾ سپرم کي هڪ ڊگهي عرصي تائين ذخيرو ڪندا آهن، جيستائين انهن جا آنا ڀاڻ لاءِ تيار نه ٿين (Asynchronous fertilization 1).پکي 2 کان 10 هفتا 2 تائين آنڊن کي ڀاڻ ڏيڻ جي قابل اسپرماتوزوا جي قابليت کي برقرار رکڻ جي قابل هوندا آهن.
اها هڪ منفرد خصوصيت آهي جيڪا پکين کي ٻين جانورن کان ڌار ڪري ٿي، ڇاڪاڻ ته اهو ڪيترن ئي هفتن تائين هڪ ئي وقت ۾ گڏجڻ ۽ ovulation کان سواءِ هڪ ئي حمل کان پوءِ ڀاڻ جو تمام گهڻو امڪان مهيا ڪري ٿو.اسپرم اسٽوريج جو مکيه عضوو، جنهن کي سپرم اسٽوريج ٽيوب (SST) سڏيو ويندو آهي، جيڪو uterovaginal junction تي اندروني ميوڪوسل فولڊ ۾ واقع آهي.اڄ تائين، ميکانيزم جنهن جي ذريعي سپرم داخل ٿئي ٿو، رهائش ۽ ٻاهران اسپرم بينڪ کي مڪمل طور تي سمجهي نه سگهيو آهي.پوئين اڀياس جي بنياد تي، ڪيترائي مفروضا پيش ڪيا ويا آهن، پر انهن مان ڪنهن به تصديق نه ڪئي وئي آهي.
Forman4 اهو تصور ڪيو ته اسپرماتوزوا SST گفا ۾ پنهنجي رهائش کي برقرار رکي ٿو مسلسل oscillatory تحريڪ جي ذريعي پروٽين جي وهڪري جي هدايت جي خلاف SST epithelial Cells (rheology) تي واقع پروٽين چينلز ذريعي.SST ليمن ۾ اسپرم کي رکڻ لاءِ لڳاتار فليگلر سرگرمي جي ڪري ATP ختم ٿي وڃي ٿي ۽ حرڪت آخرڪار ان وقت تائين گهٽجي وڃي ٿي جيستائين سپرم اسپرم بئنڪ مان فلوئڊ جي وهڪري ذريعي ٻاهر نڪري وڃي ۽ سپرم کي ڀاڻڻ لاءِ مٿي ٿيندڙ فيلوپيئن ٽيوب جي هيٺان هڪ نئون سفر شروع ڪري.آنو (Forman4).اسپرم اسٽوريج جو هي ماڊل ايس ايس ٽي اپيٿيليل سيلز ۾ موجود ايڪوپورنس 2، 3 ۽ 9 جي امونوسيٽو ڪيمسٽري پاران دريافت ڪرڻ جي مدد سان آهي.اڄ تائين، ڪڪڙ جي سيمن رويولوجي تي اڀياس ۽ SST اسٽوريج ۾ ان جي ڪردار، ويجنل سپرم جي چونڊ، ۽ سپرم جي مقابلي ۾ گهٽتائي آهي.ڪڪڙن ۾، سپرم قدرتي ميلاپ کان پوء ويجن ۾ داخل ٿئي ٿو، پر 80 سيڪڙو کان وڌيڪ اسپرماتوزوا ملن کان ٿوري دير بعد ويجن مان خارج ٿي ويندا آهن.هن مان معلوم ٿئي ٿو ته ويجنا پکين ۾ سپرم جي چونڊ لاءِ بنيادي ماڳ آهي.ان کان علاوه، اهو ٻڌايو ويو آهي ته 1٪ کان گهٽ اسپرماتوزوا اندامن ۾ ڀريل آهي SSTs2 ۾ ختم ٿي.ويجينا ۾ چڪن جي مصنوعي ڄمڻ ۾، SST تائين پهچندڙ اسپرماتوزوا جو تعداد 24 ڪلاڪن کان پوءِ انسيمينيشن کان پوءِ وڌي ويندو آهي.هينئر تائين، هن عمل جي دوران سپرم جي چونڊ جو ميکانيزم واضح ناهي، ۽ سپرم جي حرڪت SST اسپرم اپٽيڪ ۾ اهم ڪردار ادا ڪري سگهي ٿي.فيلوپيئن ٽيوب جي ٿلهي ۽ اوپيڪ ديوارن جي ڪري، پکين جي فيلوپين نلين ۾ سپرم جي حرڪت کي سڌو سنئون مانيٽر ڪرڻ ڏکيو آهي.تنهن ڪري، اسان وٽ بنيادي ڄاڻ نه آهي ته ڪيئن اسپرماتوزوا ڀاڻ کان پوء SST ڏانهن منتقلي.
Rheology کي تازو تسليم ڪيو ويو آهي هڪ اهم عنصر جي طور تي ٿلهي جي جينياتي ۾ سپرم ٽرانسپورٽ کي ڪنٽرول ڪرڻ.متحرڪ اسپرماتوزوا جي قابليت جي بنياد تي نقلي طور تي لڏپلاڻ ڪرڻ لاء، Zaferani et al8 استعمال ڪيو ھڪڙو corra microfluidic system to passively motile spermatozoa کي قلمبند ٿيل سيمن جي نمونن مان الڳ ڪرڻ.هن قسم جي سيمن جي ترتيب کي طبي بانجھ پن جي علاج ۽ ڪلينڪل تحقيق لاءِ ضروري آهي، ۽ روايتي طريقن تي ترجيح ڏني ويندي آهي جيڪي وقت ۽ محنت وارا هوندا آهن ۽ سپرم مورفولوجي ۽ ساخت جي سالميت کي سمجهوتو ڪري سگهن ٿا.بهرحال، اڄ تائين، سپرم جي حرڪت تي ڪڪڙ جي جينياتي عضون مان رطوبت جي اثر تي ڪو به مطالعو نه ڪيو ويو آهي.
SST ۾ ذخيرو ٿيل سپرم کي برقرار رکڻ واري ميکانيزم جي باوجود، ڪيترن ئي تحقيق ڪندڙن ڏٺو آهي ته رهواسي اسپرماتوزوا مرغي 9، 10، ڪوئل 2، ۽ ترڪي 11 جي SST ۾ سر کان مٿي ايگلوٽينيٽ اسپرم بنڊل ٺاهيندا آهن.ليکڪن جو مشورو ڏنو ويو آهي ته SST ۾ اسپرماتوزوا جي هن مجموعي ۽ ڊگهي مدت جي اسٽوريج جي وچ ۾ هڪ تعلق آهي.
ٽنگاري ۽ ڍنڍ 12 ٻڌايو ته ڪڪڙ جي اسپرميٽوزوا جي وچ ۾ هڪ مضبوط تعلق آهي مرغي جي اسپرم حاصل ڪندڙ غدود ۾ ۽ سوال ڪيو ته ڇا avian spermatozoa agglutinate ساڳيءَ طرح mamalian spermatozoa وانگر.انهن جو خيال آهي ته ويس ڊيفرنس ۾ سپرم جي وچ ۾ گہرا لاڳاپا هڪ ننڍڙي جڳهه ۾ سپرم جي وڏي تعداد جي موجودگي جي سبب پيدا ٿيندڙ دٻاء جي ڪري ٿي سگهي ٿي.
جڏهن تازي لٽڪندڙ شيشي جي سلائڊن تي اسپرماتوزوا جي رويي جو جائزو وٺندي، جمع ٿيڻ جي عارضي نشانيون ڏسي سگهجن ٿيون، خاص طور تي سيمين بوندن جي ڪنارن تي.بهرحال، مسلسل حرڪت سان جڙيل گھمڻ واري عمل جي ڪري، مجموعي طور تي ڦهليل هئي، جيڪا هن رجحان جي عارضي نوعيت کي بيان ڪري ٿي.محققن اهو پڻ محسوس ڪيو ته جڏهن مني ۾ ڊيلوئنٽ شامل ڪيو ويو، ڊگهو "ڌاڳو جهڙو" سيل مجموعا ظاهر ٿيا.
اسپرماتوزون کي نقل ڪرڻ جي شروعاتي ڪوششون لٽڪندڙ قطرن مان هڪ پتلي تار کي هٽائي ڇڏيون ويون، جنهن جي نتيجي ۾ هڪ ڊگھي سپرم جهڙو ويسيڪل نمي جي قطرن مان نڪرندو هو.spermatozoa فوري طور تي هڪ متوازي انداز ۾ vesicle جي اندر قطار ۾، پر سڄو يونٽ 3D جي حد جي ڪري جلدي غائب ٿي ويو.تنهن ڪري، اسپرماتوزا جي جمع ٿيڻ جو مطالعو ڪرڻ لاء، اهو ضروري آهي ته اسپرماتوزا جي حرڪت ۽ رويي کي سڌو سنئون الڳ ٿيل اسپرم اسٽوريج نلڪن ۾، جنهن کي حاصل ڪرڻ ڏکيو آهي.تنهن ڪري، اهو ضروري آهي ته هڪ اوزار تيار ڪيو وڃي جيڪو اسپرمٽوزوا کي نقل ڪري ٿو ته جيئن اسپرم جي متحرڪ ۽ متحرڪ رويي جي مطالعي جي حمايت ڪن.Brillard et al13 ٻڌايو ته بالغ ڪڪڙن ۾ اسپرم اسٽوريج نلڪن جي سراسري ڊيگهه 400-600 µm آهي، پر ڪجهه SSTs 2000 µm تائين ڊگهو ٿي سگهي ٿو.ميرو ۽ اوگاسوارا 14 سيمينيفيرس غدودن کي وڌايل ۽ غير وڌايل سپرم اسٽوريج ٽيوبلز ۾ ورهايو، جن جي ڊيگهه (~ 500 µm) ۽ گردن جي ويڪر (~ 38 µm) هئي، پر ان نلڪن جو اوسط ليمن قطر 56.6 ۽ 56.6 µm هو..، ترتيب سان 11.2 μm.موجوده مطالعي ۾، اسان 200 µm × 20 µm (W × H) جي چينل جي سائيز سان هڪ مائڪرو فلائيڊڪ ڊيوائس استعمال ڪيو، جنهن جي ڪراس سيڪشن ڪجهه حد تائين وڌيل SST جي ويجهو آهي.ان کان علاوه، اسان وهندڙ سيال ۾ اسپرم جي حرڪت ۽ جمع ٿيڻ واري رويي جي جانچ ڪئي، جيڪا فورمن جي مفروضي سان مطابقت رکي ٿي ته ايس ايس ٽي اپيٿيليل سيلز پاران پيدا ڪيل سيال اسپرم کي ليمن ۾ رکي ٿو هڪ مخالف (ريولوجيڪل) هدايت ۾.
هن مطالعي جو مقصد فيلوپيئن ٽيوب ۾ اسپرماتوزوا جي حرڪت جي مشاهدي جي مسئلن کي دور ڪرڻ ۽ متحرڪ ماحول ۾ اسپرماتوزوا جي رويولوجي ۽ رويي جي مطالعي جي مشڪلاتن کان بچڻ لاءِ هو.هڪ microfluidic ڊوائيس استعمال ڪيو ويو جيڪو مرغي جي جينات ۾ سپرم جي حرڪت کي نقل ڪرڻ لاء هائيڊروسٽيٽڪ پريشر ٺاهي ٿو.
جڏهن ٿلهي ٿيل سپرم نموني جو هڪ قطرو (1:40) مائڪرو چينل ڊيوائس ۾ لوڊ ڪيو ويو، ٻن قسمن جي سپرم جي حرڪت جي سڃاڻپ ٿي سگهي ٿي (الگ ٿيل سپرم ۽ پابند اسپرم).ان کان علاوه، اسپرماتوزوا موجوده جي خلاف ترڻ جي ڪوشش ڪئي (مثبت rheology؛ وڊيو 1، 2). جيتوڻيڪ اسپرم بنڊلن ۾ لونسم اسپرم جي ڀيٽ ۾ گھٽ رفتار هئي (p <0.001)، انهن اسپرم جو سيڪڙو وڌايو مثبت ريوٽڪسس ڏيکاريندي (p <0.001؛ ٽيبل 2). جيتوڻيڪ اسپرم بنڊلن ۾ لونسم اسپرم جي ڀيٽ ۾ گھٽ رفتار هئي (p <0.001)، انهن اسپرم جو سيڪڙو وڌايو مثبت ريوٽڪسس ڏيکاريندي (p <0.001؛ ٽيبل 2). Хотя пучки сперматозоидов имели более низкую скорость, чем у одиночных сперматозоидов (p < 0,001), они увелие низкую скорость EMONSTRIRUYUщих положительный реотаксис (p <0,001; таблица 2). جيتوڻيڪ spermatozoa جي بنڊلن جي رفتار هڪ واحد اسپرماتوزوا جي ڀيٽ ۾ گھٽ هئي (p <0.001)، انهن اسپرماتوزوا جو سيڪڙو وڌايو جيڪو مثبت ريوٽڪسس ڏيکاري ٿو (p <0.001؛ ٽيبل 2).尽管精子束的速度低于孤独精子的速度（p <0.001）،但它们增加了澾示阳性流<0.001 ليڪس 2).尽管 精子束 的 速度 低于 孤独 的 速度 （p <0.001） ， 但 增加 了 显示 了 显示 孤史 嵧昳性(p <0.001 2. .......))) Хотя скорость пучков сперматозоидов была ниже, чем у одиночных сперматозоидов (p < 0,001) ельной реологией (p <0,001; таблица 2). جيتوڻيڪ اسپرم بنڊل جي رفتار سنگل اسپرماتوزوا (p <0.001) جي ڀيٽ ۾ گهٽ هئي، انهن مثبت ريهالوجي (p <0.001؛ ٽيبل 2) سان اسپرماتوزا جو سيڪڙو وڌايو.اڪيلو اسپرماتوزوا ۽ ٽفٽس لاءِ مثبت رويولوجي جو اندازو لڳايو ويو آهي تقريبن 53٪ ۽ 85٪، ترتيب سان.
اهو ڏٺو ويو آهي ته شارڪسي ڪڪڙن جو اسپرماٽوزا انزال ٿيڻ کان پوءِ فوري طور تي لڪير بنڊل ٺاهي ٿو، جنهن ۾ درجنين فردن تي مشتمل آهي.اهي ٽفٽ وقت سان گڏ ڊگھائي ۽ ٿلهي ۾ وڌندا آهن ۽ ختم ٿيڻ کان اڳ ڪيترن ئي ڪلاڪن تائين ويٽرو ۾ رهي سگهن ٿا (وڊيو 3).اهي تنتي بنڊل echidna spermatozoa جي شڪل ۾ هوندا آهن جيڪي ايپيڊيڊيمس جي آخر ۾ ٺهندا آهن.شارڪشي مرغي جي سمن کي گڏ ڪرڻ کان پوءِ هڪ منٽ کان به گهٽ وقت ۾ جمع ٿيڻ ۽ هڪ ريٽيڪيوليٽ بنڊل ٺاهڻ جو اعليٰ رجحان مليو آهي.اهي شعاع متحرڪ آهن ۽ ڪنهن به ويجھي ديوار يا جامد شين سان لٺ ڪرڻ جي قابل آهن.جيتوڻيڪ سپرم بنڊل سپرم سيلز جي رفتار کي گھٽائي ٿو، اهو واضح آهي ته ميڪروڪوپي طور تي انهن جي لڪير وڌائي ٿي.بنڊلن جي ڊگھائي مختلف ٿئي ٿي ان جي بنياد تي بنڊلن ۾ گڏ ٿيل سپرم جي تعداد تي.بنڊل جا ٻه حصا الڳ ڪيا ويا: شروعاتي حصو، جنهن ۾ جمع ٿيل سپرم جو آزاد مٿو، ۽ ٽرمينل حصو، جنهن ۾ دم ۽ سپرم جي پوري پري واري پڇاڙي شامل آهي.تيز رفتار ڪئميرا (950 fps) استعمال ڪندي، بنڊل جي شروعاتي حصي ۾ Agglutinated spermatozoa جا آزاد سر ڏٺا ويا، بنڊل جي حرڪت لاءِ ذميوار انهن جي oscillatory motion جي ڪري، باقي انهن کي ڇڪڻ واري حرڪت سان بنڊل ۾ گھليو (وڊيو 4).بهرحال، ڊگھي ٽفٽن ۾، اهو ڏٺو ويو آهي ته ڪجهه آزاد سپرم مٿو جسم سان لڳل آهن ۽ ٽفٽ جو ٽرمينل حصو وين جي طور تي ڪم ڪري ٿو جيڪو ٽوفٽ کي اڳتي وڌائڻ ۾ مدد ڪري ٿو.
جڏهن ته رطوبت جي سست وهڪري ۾، سپرم بنڊل هڪ ٻئي سان متوازي هلندا آهن، جڏهن ته، اهي اوورليپ ٿيڻ شروع ڪندا آهن ۽ هر شيءِ سان چپڪندا آهن جيڪي اڃا تائين آهن، ته جيئن وهڪري جي رفتار وڌندي موجوده وهڪري سان ڌوئي نه وڃي.بنڊل تڏهن ٺهي ويندا آهن جڏهن چند سپرم سيلز هڪ ٻئي جي ويجهو ايندا آهن، اهي هم وقت سازي ۾ هلڻ شروع ڪندا آهن ۽ هڪ ٻئي جي چوڌاري لپيٽڻ شروع ڪندا آهن، ۽ پوءِ هڪ چپچپا مادي سان جڙيل هوندا آهن.انگ اکر 1 ۽ 2 ڏيکاري ٿو ته سپرم ڪيئن هڪ ٻئي جي ويجهو ايندا آهن، هڪ سنگم ٺاهيندي آهي جيئن دم هڪ ٻئي جي چوڌاري لپي ويندا آهن.
محقق سپرم ريولوجي جي مطالعي لاء مائڪرو چينل ۾ سيال جي وهڪري کي پيدا ڪرڻ لاء هائڊروٽيڪڪ پريشر لاڳو ڪيو.200 µm × 20 µm (W × H) جي ماپ ۽ 3.6 µm جي ڊيگهه سان هڪ مائڪرو چينل استعمال ڪيو ويو.ڪنٽينرز جي وچ ۾ مائڪرو چينلز استعمال ڪريو جن جي سرنجون سرن تي لڳل آهن.چينلن کي وڌيڪ ڏسڻ لاءِ فوڊ رنگ استعمال ڪيو ويو.
ڀت سان ڳنڍيل ڪيبل ۽ لوازمات کي ڳنڍيو.وڊيو هڪ مرحلي جي ابتڙ خوردبيني سان ورتو ويو.هر تصوير سان، مرحلو برعڪس مائڪرو اسڪوپي ۽ نقشي جون تصويرون پيش ڪيون ويون آهن.(الف) ٻن ندين جي وچ ۾ لاڳاپو هلڪي حرڪت (لال تير) جي ڪري وهڪري جي مزاحمت ڪري ٿو.(ب) ٽيوب بنڊل ۽ چينل جي ڀت جي وچ ۾ ڪنيڪشن (لال تير)، ساڳئي وقت اهي ٻه ٻيا بنڊل (پيلو تير) سان ڳنڍيل آهن.(سي) مائڪرو فلائيڊڪ چينل ۾ اسپرم بنڊل هڪ ٻئي سان ڳنڍڻ شروع ڪن ٿا (لال تير)، اسپرم بنڊلن جو ميش ٺاهي ٿو.(ڊي) اسپرم بنڊلن جي نيٽ ورڪ جو ٺهڻ.
جڏهن ٿلهي ٿيل سپرم جو هڪ قطرو مائڪرو فلائيڊڪ ڊوائيس ۾ لوڊ ڪيو ويو ۽ هڪ وهڪري ٺاهي وئي، سپرم بيم کي وهڪري جي هدايت جي خلاف منتقل ٿيڻ جو مشاهدو ڪيو ويو.مائيڪرو چينلز جي ديوارن تي بنڊل چڱيءَ طرح سان فٽ ٿين ٿا، ۽ بنڊلن جي شروعاتي حصي ۾ مفت هيڊز انھن جي خلاف چڱيءَ طرح فٽ ٿين ٿا (ويڊيو 5).اهي پنهنجي رستي ۾ موجود ڪنهن به اسٽيشنري ذرڙن سان به چِٽي رهيا آهن، جهڙوڪ ملبو، ڪرنٽ جي وهنجڻ جي مزاحمت ڪرڻ لاءِ.وقت گذرڻ سان گڏ، اهي ٽفٽ ڊگها تارا بڻجي ويندا آهن جيڪي ٻين سنگل اسپرماتوزوا ۽ ننڍا ٽفٽن کي ڇڪيندا آهن (ويڊيو 6).جيئن ته وهڪري سست ٿيڻ شروع ٿئي ٿي، سپرم جون ڊگھيون لائينون اسپرم لائينن جو نيٽ ورڪ ٺاهڻ شروع ڪن ٿيون (ويڊيو 7؛ تصوير 2).
تيز وهڪري جي رفتار (V > 33 µm/s) تي، ڌاڙن جي سرپل تحريڪن کي وڌايو ويندو آهي ته جيئن ڪيترن ئي انفرادي اسپرم ٺاهيل بنڊلن کي پڪڙڻ جي ڪوشش ڪري، وهڪري جي وهندڙ قوت جي بهتر مزاحمت ڪن. تيز وهڪري جي رفتار (V > 33 µm/s) تي، ڌاڙن جي سرپل تحريڪن کي وڌايو ويندو آهي ته جيئن ڪيترن ئي انفرادي اسپرم ٺاهيل بنڊلن کي پڪڙڻ جي ڪوشش ڪري، وهڪري جي وهندڙ قوت جي بهتر مزاحمت ڪن. При высокой скорости потока (V > 33 мкм/с) спиралевидные движения нитей усиливаются, поскольку они пытаются поймавидные мкм/с зоидов, образующих пучки, которые лучше противостоят дрейфующей силе потока. تيز وهڪري جي شرحن تي (V > 33 µm/s)، ڪنارن جي هلڪي هلچل وڌي ٿي، جيئن اهي ڪيترن ئي انفرادي اسپرماتوزوا کي پڪڙڻ جي ڪوشش ڪن ٿيون، جيڪي وهڪري جي وهندڙ قوت کي بهتر نموني مزاحمت ڪرڻ جي قابل آهن.在高流速(V > 33 µm/s) 时，螺纹的螺旋运动增加,以试图捕捉许多形成报束的单个精子动的漂移力.在 高 流速 (v> 33 µm/s) 时 ， 螺旋 运动 增加 ， 以 试图 许多形成 束 单 个 精廾抗 的漂移力 . . . . . . . . . При высоких скоростях потока (V > 33 мкм/с) спиральное движение нитей увеличивается в попытке захватить множестях множествово разующих пучки، чтобы лучше сопротивляться силам дрейфа потока. تيز وهڪري جي شرحن تي (V > 33 µm/s)، تنتن جي هلڪي هلچل ڪيترن ئي انفرادي اسپرماتوزوا کي پڪڙڻ جي ڪوشش ۾ وڌي ٿي ته جيئن وهڪري جي وهڪري جي قوتن کي بهتر نموني مزاحمت ڪري سگهجي.انهن به ڪوشش ڪئي ته microchannels کي sidewalls سان ڳنڍڻ.
اسپرم بنڊل جي سڃاڻپ ڪئي وئي سپرم سرن جي ڪلسٽرز ۽ لائيٽ مائڪرو اسڪوپي (LM) استعمال ڪندي ڪرلنگ دم.مختلف مجموعن سان گڏ اسپرم بنڊلز کي پڻ ٽوڙيل مٿو ۽ فليگيلر ايگريگيٽس، گھڻن فيوز ٿيل اسپرم ٽيلز، هڪ دم سان ڳنڍيل اسپرم هيڊز، ۽ اسپرم هيڊز جن کي بيٽ نيوڪلئي سان ملائيل فيوزڊ نيوڪلئي طور سڃاتو ويو آهي.ٽرانسميشن اليڪٽران مائڪروسکوپي (TEM).اسڪيننگ اليڪٽران مائڪرو اسڪوپي (SEM) ڏيکاري ٿي ته سپرم بنڊل اسپرم جي سرن جي مجموعن کي ڍڪيل هئا ۽ سپرم مجموعن ۾ ويڙهيل دم جو هڪ ڳنڍيل نيٽ ورڪ ڏيکاريو ويو.
اسپرماتوزوا جي مورفولوجي ۽ الٽرا اسٽرڪچر، اسپرماتوزوا بنڊل جي ٺهڻ جو اڀياس ڪيو ويو لائٽ مائڪرو اسڪوپي (اڌ سيڪشن)، اسڪيننگ اليڪٽران مائيڪرو اسڪوپي (SEM) ۽ ٽرانسميشن اليڪٽران مائڪرو اسڪوپي (TEM)، اسپرم سميئرز کي ايڪريڊائن نارنجي سان داغدار ڪيو ويو ۽ مائيڪرو فلوڪوپينس استعمال ڪيو ويو.
اسپرم سمير جو داغ ايڪريڊين نارنگي (Fig. 3B) سان ظاهر ٿيو ته سپرم جا مٿا هڪٻئي سان جڙيل هئا ۽ ڳجهي مواد سان ڍڪيل هئا، جنهن جي ڪري وڏا ٽفٽ (Fig. 3D) ٺهڻ لڳا.اسپرم بنڊلز تي مشتمل هوندو آهي سپرم مجموعن سان ڳنڍيل دم جي نيٽ ورڪ سان (Fig. 4A-C).اسپرم بنڊل ڪيترن ئي اسپرماتوزوا جي پڇن مان ٺهيل هوندا آهن جيڪي هڪٻئي سان جڙيل هوندا آهن (تصوير 4D).راز (Fig. 4E,F) spermatozoa جي بنڊلن جا مٿا ڍڪيل آھن.
اسپرماتوزوا بنڊل جي ٺهڻ مرحلي ۾ ڪنٽراسٽ مائڪرو اسڪوپي ۽ اسپرم سميئرز کي استعمال ڪندي ايڪريڊائن نارنجي سان داغ ٿيل، ڏيکاريو ويو ته اسپرماتوزوا جا مٿا گڏجي چپڪندا آهن.(الف) ابتدائي سپرم ٽفٽ ٺهڻ شروع ٿئي ٿو سپرم (سفيد دائرو) ۽ ٽن سپرم (پيلو دائرو) سان، سرپل دم کان شروع ٿئي ٿو ۽ مٿي تي ختم ٿئي ٿو.(ب) اسپرم سمير جو فوٽو مائڪرو گراف، اڪريڊائن نارنگي سان داغدار اسپرم هيڊز (تير) ڏيکاري ٿو.خارج ٿيڻ سر (سر) کي ڍڪي ٿو.ميگنيفڪيشن × 1000. (سي) مائڪرو فلائيڊڪ چينل ۾ وهڪري ذريعي منتقل ٿيندڙ وڏي بيم جي ترقي (950 fps تي تيز رفتار ڪئميرا استعمال ڪندي).(D) اسپرم سمير جو مائڪرو گراف، اڪريڊائن نارنگي سان داغدار آهي، جنهن ۾ وڏا ٽفٽ (تير) ڏيکاريل آهن.واڌارو: × 200.
اسپرم بيم جي اسڪيننگ اليڪٽران مائڪروگراف ۽ اسپرم سميئر کي ايڪريڊين نارنگي سان داغدار ڪيو ويو آهي.(A, B, D, E) اسپرميٽوزوا جا ڊجيٽل رنگ اسڪيننگ اليڪٽران مائيڪروگرافس آهن، ۽ سي ۽ ايف ايڪريڊين نارنجي داغدار اسپرم سميئر جا مائيڪروگرافس آهن، جيڪي ڪيڊل ويب کي لپيٽڻ واري ڪيترن ئي اسپرميٽوزوا جي ڳنڍ کي ڏيکاريندا آهن.(AC) اسپرم مجموعا ڏيکاريا ويا آھن ھڪڙي نيٽ ورڪ جي طور تي منسلڪ دم (تير).(D) ڪيترن ئي اسپرماتوزوا (چپڻ واري مادو سان، گلابي آئوٽ لائن، تير سان) دم جي چوڌاري لپڻ.(اي ۽ ايف) اسپرم سر جو مجموعو (پوائنٽر) چپڪندڙ مواد سان ڍڪيل (پوائنٽر).اسپرماتوزوا ڪيترن ئي ڀور جھڙي ساختن (F) سان گڏ بنڊل ٺاهي ٿو.(سي) × 400 ۽ (ف) × 200 ميگنائيزيشن.
ٽرانسميشن اليڪٽران مائيڪرو اسڪوپي استعمال ڪندي، اسان ڏٺو ته سپرم بنڊلن سان ڳنڍيل پڇ (Fig. 6A, C)، مٿيون دم سان جڙيل آهن (Fig. 6B)، يا دم سان جڙيل مٿو (Fig. 6D).بنڊل ۾ اسپرماتوزوا جا مٿا مڙيل آهن، سيڪشن ٻن ايٽمي علائقن ۾ موجود آهن (تصوير 6D).چيري بنڊل ۾، اسپرماتوزا جو مٿو مڙيل ھوندو ھو جنھن ۾ ٻه ائٽمي علائقا ۽ گھڻا جھنڊا ھوندا ھئا (تصوير 5A).
ڊجيٽل رنگ جو اليڪٽران مائيڪروگراف اسپرم بنڊل ۾ ڳنڍڻ واري دم کي ڏيکاري ٿو ۽ اسپرم جي سرن کي ڳنڍيندڙ مواد.(الف) اسپرماتوزوا جي وڏي تعداد جي منسلڪ دم.نوٽ ڪريو ته دم ڪيئن نظر اچي ٿو ٻنهي پورٽريٽ (تير) ۽ لينڊ اسڪيپ (تير) پروجيڪشن ۾.(ب) سپرم جو مٿو (تير) دم (تير) سان ڳنڍيل آهي.(ج) ڪيترائي اسپرم ٽائل (تير) جڙيل آهن.(D) Agglutination material (AS، blue) چار اسپرم سرن کي ڳنڍي ٿو (جامني).
اسڪيننگ اليڪٽران مائيڪرو اسڪوپي استعمال ڪئي وئي سپرم جي سرن کي معلوم ڪرڻ لاءِ سپرم بنڊلن ۾ جيڪي رطوبتن يا جھلين سان ڍڪيل آهن (شڪل 6B)، اهو ظاهر ڪري ٿو ته سپرم بنڊل خارجي مادو ذريعي لنگر انداز هئا.جمع ٿيل مواد اسپرم هيڊ ۾ مرڪوز ڪيو ويو (جيلي فش هيڊ جهڙو اسمبلي؛ تصوير 5B) ۽ فاصلي سان وڌايو ويو، فلوروسينس مائڪرو اسڪوپي جي تحت هڪ شاندار پيلو ظهور ڏي ٿو جڏهن اڪريڊائن نارنگي (تصوير 6C) سان داغ ٿيل آهي.هي مادو واضح طور تي اسڪيننگ خوردبيني جي هيٺان ڏسڻ ۾ اچي ٿو ۽ هڪ باندر سمجهيو ويندو آهي.نيم ٿلها حصا (Fig. 5C) ۽ اسپرم اسميئرز جو اڪريڊائن نارنگي سان داغ ٿيل اسپرم بنڊل ڏيکاريا ويا جن ۾ گھڻا ڀريل مٿا ۽ ڪرل ٿيل دم (تصوير 5D).
مختلف فوٽو مائيڪروگرافس مختلف طريقن سان استعمال ڪندي سپرم سرن ۽ فولڊ ٿيل دم جي مجموعي کي ڏيکاريندي.(الف) ڪراس-سيڪشنل ڊجيٽل رنگ ٽرانسميشن اليڪٽران مائيڪروگراف هڪ سپرم بنڊل جو هڪ ڪنڊل سپرم سر ڏيکاري ٿو جنهن ۾ ٻه حصا نيوڪليس (نيرو) ۽ ڪيترن ئي فليگلر حصا (سائي).(ب) ڊجيٽل رنگ اسڪيننگ اليڪٽران مائڪرو گراف ڏيکاريندي جيلي فش جھڙي اسپرم هيڊز (تير) جو ڪلستر جيڪو ڍڪيل نظر اچي ٿو.(سي) نيم پتلي سيڪشن جنهن ۾ جمع ٿيل اسپرم هيڊز (تير) ۽ ڪرل ٿيل دم (تير).(D) اسپرم سمير جو مائڪرو گراف، اڪريڊائن نارنگي سان داغ ٿيل آهي، جنهن ۾ اسپرم هيڊز (تير) ۽ ڪرل ٿيل پيرن واري دم (تير) جو مجموعو ڏيکاريو ويو آهي.ياد رهي ته هڪ چپچپا مادو (S) اسپرماتوزون جي مٿي کي ڍڪي ٿو.(ڊي) × 1000 ميگنائيزيشن.
ٽرانسميشن اليڪٽران مائڪرو اسڪوپي (Fig. 7A) کي استعمال ڪندي، اهو پڻ نوٽ ڪيو ويو ته سپرم جا مٿا موڙيا ويا هئا ۽ نيوڪلئي کي هڪ سرپل شڪل هئي، جيئن ته اسپرم اسميئرز جي تصديق ڪئي وئي جيڪا ايڪريڊين نارنجي سان داغ ٿيل هئي ۽ فلوروسينس مائڪرو اسڪوپي (Fig. 7B) استعمال ڪندي جانچ ڪئي وئي.
(A) ڊجيٽل رنگ ٽرانسميشن اليڪٽران مائڪروگراف ۽ (B) Acridine نارنجي داغدار اسپرم سمير ڏيکاري ٿو ڪوئلڊ هيڊز ۽ اسپرم جي سرن ۽ دم (تير) جي منسلڪ.(ب) × 1000 ميگنائيزيشن.
هڪ دلچسپ ڳولها اها آهي ته شارڪزي جي سپرم کي گڏ ڪري موبائل فليمنٽ بنڊل ٺاهي ٿو.انهن بنڊلن جي ملڪيت اسان کي SST ۾ اسپرماتوزوا جي جذب ۽ اسٽوريج ۾ انهن جي ممڪن ڪردار کي سمجهڻ جي اجازت ڏئي ٿي.
ملن کان پوء، سپرم اندام ۾ داخل ٿئي ٿو ۽ هڪ شديد چونڊ عمل مان گذري ٿو، جنهن جي نتيجي ۾ صرف محدود تعداد ۾ سپرم SST15,16 ۾ داخل ٿين ٿا.اڄ تائين، ميکانيزم جنهن جي ذريعي سپرم داخل ٿئي ٿو ۽ SST کان ٻاهر نڪرندو آهي واضح ناهي.پولٽري ۾، اسپرماتوزوا SST ۾ 2 کان 10 هفتن جي وڌايل مدت لاءِ محفوظ ڪيا ويندا آهن، جن تي دارومدار رکي ٿو 6.SST ۾ اسٽوريج دوران مني جي حالت بابت تڪرار رهي ٿو.ڇا اهي حرڪت ۾ آهن يا آرام ۾؟ٻين لفظن ۾، اسپرم سيلز ڪيتري عرصي تائين SST ۾ پنهنجي پوزيشن کي ڪيئن برقرار رکندا آهن؟
Forman4 تجويز ڪيو ته SST رهائش ۽ خارج ٿيڻ جي وضاحت ڪري سگهجي ٿي سپرم جي حرڪت جي لحاظ کان.ليکڪن جو خيال آهي ته اسپرم SST epithelium پاران ٺاهيل سيال جي وهڪري جي خلاف ترڻ سان پنهنجي پوزيشن کي برقرار رکندا آهن ۽ سپرم SST مان خارج ٿي ويندا آهن جڏهن انهن جي رفتار ان نقطي کان هيٺ اچي ٿي جتان اهي توانائي جي کوٽ سبب پوئتي هلڻ شروع ڪن ٿا.Zaniboni5 تصديق ڪئي Aquaporins 2، 3، ۽ 9 جي apical حصي ۾ SST epithelial سيلز، جيڪي اڻ سڌي طرح فورمن جي سپرم اسٽوريج ماڊل کي سپورٽ ڪري سگھن ٿيون.موجوده مطالعي ۾، اسان ڏٺو ته شارڪشي جي اسپرماتوزا جو اڌ حصو وهندڙ مايع ۾ مثبت ريهالوجي ڏيکاري ٿو، ۽ اهو جمع ٿيل اسپرم بنڊل مثبت ريولوجي ڏيکاريندڙ اسپرماتوزوا جو تعداد وڌائي ٿو، جيتوڻيڪ Agglutination انهن کي سست ڪري ٿو.ڪيئن اسپرم سيلز پکين جي فيلوپيئن ٽيوب کي ڀاڻ جي سائيٽ تائين سفر ڪندا آهن، مڪمل طور تي سمجهي نه سگهيو آهي.ٿلهي جانورن ۾، فوليڪيولر فلوئڊ ڪيمو ايٽڪٽر اسپرماتوزوا کي متاثر ڪري ٿو.تنهن هوندي به، chemoattractants مڃيو وڃي ٿو ته سپرماتوزوا کي ڊگھي فاصلي تائين سڌو رستو ڏيکاريندو آهي.تنهن ڪري، ٻيا ميڪانيزم سپرم ٽرانسپورٽ لاء ذميوار آهن.ملن کان پوءِ جاري ڪيل فيلوپيئن ٽيوب جي رطوبت جي خلاف اسپرم جي اصليت ۽ وهڪري جي صلاحيت کي ٻڌايو ويو آهي ته چوٿون ۾ سپرم کي نشانو بڻائڻ ۾ هڪ وڏو عنصر آهي.پارڪر 17 تجويز ڪيو ته اسپرماتوزوا پکين ۽ ريپٽائلز ۾ سليري ڪرنٽ جي خلاف ترڻ ذريعي بيضي جي نالن کي پار ڪري ٿو.جيتوڻيڪ اهو تجرباتي طور تي پکين ۾ ظاهر نه ڪيو ويو آهي، Adolphi18 پهريون شخص هو جنهن اهو معلوم ڪيو ته ايوان اسپرم مثبت نتيجا ڏئي ٿو جڏهن فلٽر پيپر جي پٽي سان ڍڪيل ۽ سلائيڊ جي وچ ۾ مائع جي هڪ پتلي پرت ٺاهي وئي آهي.ريالوجي.Hino ۽ Yanagimachi [19] هڪ ماؤس جي اووري-ٽيوبل-يوٽرين ڪمپليڪس کي پرفيوشن رنگ ۾ رکيو ۽ 1 µl مس کي اسٿمس ۾ داخل ڪيو ته جيئن فيلوپيئن ٽيوب ۾ سيال جي وهڪري کي ڏسڻ لاءِ.هنن فيلوپيئن ٽيوب ۾ ڇڪتاڻ ۽ آرام جي هڪ تمام سرگرم حرڪت کي محسوس ڪيو، جنهن ۾ سڀ انڪ بالز مسلسل فيلوپيئن ٽيوب جي امپولا ڏانهن وڌي رهيا هئا.ليکڪ سپرم جي واڌ ويجهه ۽ ڀاڻ جي لاءِ هيٺئين پاسي کان مٿئين فيلوپيئن ٽيوب تائين نلڪن جي وهڪري جي اهميت تي زور ڏين ٿا.Brillard20 ٻڌايو ته ڪڪڙن ۽ ترڪي ۾، اسپرماتوزوا فعال حرڪت سان ويجن جي داخل ٿيڻ کان لڏپلاڻ ڪندا آهن، جتي اهي ذخيرو ٿيل آهن، utero-vaginal junction ڏانهن، جتي اهي ذخيرو ٿيل آهن.بهرحال، هن حرڪت جي ضرورت نه آهي uterovaginal junction ۽ infundibulum جي وچ ۾ ڇاڪاڻ ته اسپرماتوزوا غير فعال بي گھرڻ ذريعي منتقل ڪيا ويندا آهن.انهن پوئين سفارشن کي ڄاڻڻ ۽ موجوده مطالعي ۾ حاصل ڪيل نتيجن کي، اهو فرض ڪري سگهجي ٿو ته اسپرماتوزوا جي اپ اسٽريم کي منتقل ڪرڻ جي صلاحيت (ريولوجي) انهن خاصيتن مان هڪ آهي جنهن تي چونڊ عمل مبني آهي.اهو اندام جي ذريعي اسپرماتوزوا جي گذرڻ ۽ اسٽوريج لاءِ سي سي ٽي ۾ انهن جي داخلا کي طئي ڪري ٿو.جيئن Forman4 تجويز ڪيو آهي، اهو پڻ اسپرم جي عمل کي آسان بڻائي سگهي ٿو SST ۽ ان جي رهائش واري هنڌ ۾ داخل ٿيڻ ۽ پوء ٻاهر نڪرڻ شروع ٿئي ٿو جڏهن انهن جي رفتار سست ٿيڻ شروع ٿئي ٿي.
ٻئي طرف، Matsuzaki ۽ Sasanami 21 تجويز ڪيو ته avian spermatozoa نر ۽ مادي جي پيدائش واري پٿرن ۾ ڊورمنسي کان حرڪت ۾ حرڪت واري تبديلين مان گذري ٿو.SST ۾ رهائشي اسپرم جي حرڪت جي روڪٿام کي اسپرم جي ڊگھي اسٽوريج وقت جي وضاحت ڪرڻ ۽ پوء ايس ايس ٽي ڇڏڻ کان پوء ٻيهر بحال ڪرڻ جي تجويز ڏني وئي آهي.hypoxic حالتن جي تحت، Matsuzaki et al.1 ٻڌايو ويو آهي اعلي پيداوار ۽ ايس ايس ٽي ۾ ليڪٽيٽ جي ڇڏڻ، جيڪا شايد رهائشي سپرم جي حرڪت کي روڪي سگھي ٿي.هن معاملي ۾، سپرم rheology جي اهميت spermatozoa جي چونڊ ۽ جذب ۾ ظاهر ٿئي ٿو، ۽ نه انهن جي ذخيري ۾.
اسپرم ايگلوٽينيشن جو نمونو SST ۾ سپرم جي ڊگھي اسٽوريج جي مدت لاءِ قابل اطمينان وضاحت سمجهي وڃي ٿو، ڇاڪاڻ ته هي پولٽري 2,22,23 ۾ سپرم جي برقرار رکڻ جو هڪ عام نمونو آهي.Bakst et al.2 ڏٺو ويو ته اڪثر اسپرماتوزوا هڪ ٻئي سان جڙيل آهن، فاسڪولر مجموعا ٺاهي رهيا آهن، ۽ اڪيلو اسپرماتوزوا تمام گهٽ ڪوئل CCM ۾ مليا آهن.ٻئي طرف، Wen et al.24 ڏٺو ويو وڌيڪ پکڙيل اسپرماتوزوا ۽ ٿور اسپرماتوزوا ٽفٽس مرغن ۾ SST ليمن ۾.انهن مشاهدن جي بنياد تي، اهو فرض ڪري سگهجي ٿو ته سپرم جي جمع ٿيڻ جو رجحان پکين جي وچ ۾ ۽ هڪ ئي انزال ۾ اسپرماتوزا جي وچ ۾ مختلف آهي.ان کان سواء، Van Krey et al.9 تجويز ڪيو ته جمع ٿيل اسپرماتوزوا جي بي ترتيب واري تقسيم فيلوپيئن ٽيوب جي ليمن ۾ اسپرماتوزوا جي تدريجي داخل ٿيڻ لاءِ ذميوار آهي.هن مفروضي جي مطابق، اسپرماتوزوا کي گهٽ ۾ گهٽ ايگلوٽينيشن جي صلاحيت سان پهريون ڀيرو SST مان خارج ڪيو وڃي.ان سلسلي ۾، اسپرماتوزا جي قابليت کي گڏ ڪرڻ جي صلاحيت شايد گندي پکين ۾ سپرم جي مقابلي جي نتيجن تي اثر انداز ڪري سگهي ٿي.ان کان علاوه، گهڻي وقت تائين جمع ٿيل سپرم جدا ٿي ويندا آهن، گهڻي زرخيزي برقرار رکي ٿي.
جيتوڻيڪ spermatozoa جي مجموعي ۽ بنڊلن ۾ مجموعو ڪيترن ئي مطالعي ۾ ڏٺو ويو آهي 2,22,24، انهن کي تفصيل سان بيان نه ڪيو ويو آهي ڇاڪاڻ ته SST جي اندر انهن جي ڪائناتي مشاهدي جي پيچيدگي جي ڪري.ويٽرو ۾ اسپرم ايگلوٽينشن جو مطالعو ڪرڻ لاءِ ڪيتريون ئي ڪوششون ڪيون ويون آهن.وسيع پر عارضي مجموعو ڏٺو ويو جڏهن ٿلهي تار کي ٻج جي ٻج مان هٽايو ويو.اهو حقيقت ڏانهن وٺي ٿو ته هڪ ڊگهو بلبل ڊپ مان نڪرندو آهي، سيمينل غدود جي نقل ڪندي.3D حدن ۽ مختصر ڊريپ خشڪ ٿيڻ جي ڪري، سڄو بلاڪ جلدي خراب ٿي ويو 9.موجوده مطالعي ۾، شارڪشي ڪڪڙن ۽ مائڪرو فلائيڊڪ چپس کي استعمال ڪندي، اسان بيان ڪرڻ جي قابل هئا ته اهي ٽفٽ ڪيئن ٺاهيندا آهن ۽ اهي ڪيئن هلن ٿا.اسپرم بنڊلز سمن جي جمع ٿيڻ کان پوءِ فوري طور تي ٺاهيا ويا ۽ هڪ سرپل ۾ منتقل ٿيڻ لاءِ ڏٺا ويا، مثبت rheology ڏيکاريندي جڏهن وهڪري ۾ موجود هجي.ان کان علاوه، جڏهن macroscopically ڏٺو ويو، سپرم بنڊل ڏٺو ويو آهي ته الڳ ٿيل اسپرماتوزوا جي مقابلي ۾ حرڪت جي لڪير کي وڌائڻ لاء.اهو مشورو ڏئي ٿو ته اسپرم جي جمع ٿيڻ SST جي دخول کان اڳ ٿي سگهي ٿي ۽ اهو سپرم جي پيداوار هڪ ننڍڙي علائقي تائين محدود نه آهي دٻاء جي ڪري جيئن اڳ ۾ تجويز ڪيل آهي (ٽنگاري ۽ ڍنڍ 12).ٽفٽ ٺهڻ دوران، اسپرماٽوزون هڪجهڙائي ۾ ترينديون آهن تيستائين اهي هڪ سنگم ٺاهينديون آهن، پوءِ انهن جون پڇون هڪ ٻئي جي چوڌاري ويڙهي وينديون آهن ۽ سپرماٽوزون جو مٿو آزاد رهندو آهي، پر اسپرماٽوزون جو دم ۽ پري وارو حصو هڪ چپچپا مادو سان گڏ چپڪي پوندو آهي.تنهن ڪري، ligament جي آزاد سر تحريڪ لاء ذميوار آهي، باقي ligament کي ڇڪيندي.اسپرم بنڊلز جي اسڪيننگ اليڪٽران مائيڪرو اسڪوپي ۾ ڏيکاريل اسپرم هيڊز جڙيل آهن جن کي تمام گهڻي لچڪدار مواد سان ڍڪيو ويو آهي، جنهن مان معلوم ٿئي ٿو ته اسپرم هيڊز آرام واري بنڊلن ۾ جڙيل هئا، جيڪي شايد اسٽوريج سائيٽ (SST) تي پهچڻ کان پوءِ پيدا ٿيا هجن.
جڏهن اسپرم سميئر کي ايڪريڊين نارنگي سان داغ ڪيو ويندو آهي، سپرم سيلز جي چوڌاري ٻاهران چپڪندڙ مواد فلورسنٽ خوردبيني هيٺ ڏسي سگهجي ٿو.هي مادو سپرم بنڊلن کي ڪنهن به ڀرپاسي جي مٿاڇري يا ذرڙن سان جڙيل رهڻ جي اجازت ڏئي ٿو ته جيئن اهي ڀرپاسي جي وهڪري سان نه وهن.اهڙيء طرح، اسان جا مشاهدو موبائل بنڊلن جي صورت ۾ اسپرماتوزوا آسنجن جي ڪردار کي ڏيکاري ٿو.انهن جي موجوده جي خلاف ترڻ جي صلاحيت ۽ ويجھي سطحن تي لٺڻ جي صلاحيت سپرم کي SST ۾ گهڻي وقت تائين رهڻ جي اجازت ڏئي ٿي.
Rothschild25 هڪ hemocytometry ڪيمرا استعمال ڪيو ته جيئن بوائن جي مني جي فلوٽنگ ورڇ کي معطلي جي هڪ قطري ۾ پڙهائڻ لاءِ، مائڪرو اسڪوپ جي عمودي ۽ افقي نظري محور سان ڪئميرا ذريعي فوٽو ميڪروگرافس وٺي.نتيجن مان ظاهر ٿيو ته اسپرماتوزوا چيمبر جي مٿاڇري ڏانهن متوجه ٿيا.ليکڪ جو مشورو ڏئي ٿو ته سپرم ۽ مٿاڇري جي وچ ۾ hydrodynamic تعامل ٿي سگھي ٿو.ان ڳالهه کي نظر ۾ رکندي، شارڪشي ڪڪڙ جي مني جي چپچپا ٽفٽ ٺاهڻ جي صلاحيت سان گڏ، اهو امڪان وڌي سگهي ٿو ته مني SST جي ڀت سان لڳندو ۽ ڊگهي عرصي تائين محفوظ رهندو.
Bccetti ۽ Afzeliu26 ٻڌايو ته اسپرم گلائڪوڪليڪس گيميٽ جي سڃاڻپ ۽ جمع ڪرڻ لاءِ گهربل آهي.Forman10 مشاهدو ڪيو ته گلائڪوپروٽين-گلائڪوليپيڊ ڪوٽنگن ۾ α-glycosidic بانڊز جي هائڊروليسس نيورامينيڊس سان ايويين سيمن جو علاج ڪندي ان جي نتيجي ۾ سپرم جي حرڪت کي متاثر ڪرڻ کان سواءِ زرخيزي ۾ گهٽتائي ٿي.ليکڪن جو مشورو ڏنو ويو آهي ته گلائڪوڪليڪس تي نيورامينيڊس جو اثر utero-vaginal junction تي سپرم جي تسلسل کي متاثر ڪري ٿو، ان ڪري زرخيزي کي گھٽائي ٿو.انهن جا مشاهدا ان امڪان کي نظر انداز نٿا ڪري سگهن ته نيورامينيڊس جو علاج سپرم ۽ oocyte جي سڃاڻپ کي گهٽائي سگھي ٿو.Forman ۽ Engel10 اهو معلوم ڪيو ته زرخيزي گهٽجي وئي جڏهن مرغي کي اندروني طور تي سيمين سان علاج ڪيو ويو نيورامينيڊس سان.بهرحال، IVF سان نيورامينيڊس علاج ٿيل سپرم زرخيزي تي ڪنٽرول ڪڪڙ جي مقابلي ۾ اثر انداز نه ڪيو.ليکڪ ان نتيجي تي پهتا ته اسپرم جي جھلي جي چوڌاري گلائڪوپروٽين-گلائڪوليپڊ ڪوٽنگ ۾ تبديليون utero-vaginal junction تي اسپرم جي sequestration کي خراب ڪندي اسپرم جي فرٽيلائيزيشن جي صلاحيت کي گھٽائي ٿي، جنهن جي نتيجي ۾ utero-vaginal junction جي رفتار جي ڪري اسپرم جي نقصان ۾ اضافو ٿيو، پر utero-vaginal junction تي اثر انداز نه ٿيو.
ترڪي Bakst ۽ Bauchan 11 ۾ SST جي ليمن ۾ ننڍڙا ويسڪلز ۽ جھلي جا ٽڪرا ڏٺا ويا ۽ ڏٺائون ته انھن مان ڪجھ داڻا سپرم جھلي سان مليا ھئا.ليکڪن جو مشورو ڏنو ويو آهي ته اهي رشتا SST ۾ اسپرماتوزوا جي ڊگهي مدت اسٽوريج ۾ مدد ڪري سگھن ٿيون.بهرحال، محقق انهن ذرات جو ماخذ بيان نه ڪيو، ڇا اهي سي سي ٽي اپيٿيليل سيلز طرفان ڳجها آهن، مردن جي پيدائش واري نظام طرفان پيدا ڪيل ۽ ڳجهي آهن، يا خود سپرم طرفان پيدا ڪيل آهن.ان سان گڏ، اهي ذرات گڏ ڪرڻ لاء ذميوار آهن.Grützner et al27 ٻڌايو ته epididymal epithelial cells هڪ مخصوص پروٽين پيدا ڪري ٿو ۽ ڳنڍي ٿو جيڪو سنگل پور سيمينل پيچرن جي ٺهڻ لاءِ گهربل آهي.ليکڪ پڻ رپورٽ ڪن ٿا ته انهن بنڊلن جي ڦهلائڻ جو دارومدار ايپيڊيڊيمل پروٽين جي رابطي تي آهي.Nixon et al28 اهو معلوم ٿيو ته ايڊنيڪسا هڪ پروٽين، تيزابي سيسٽين سان مالا مال اوستيوونڪٽين کي خارج ڪري ٿو.SPARC ننڍي چوڪ واري ايڪيڊناس ۽ پلاٽائپس ۾ سپرم ٽفٽس جي ٺهڻ ۾ ملوث آهي.انهن شعاعن جو پکڙجڻ هن پروٽين جي نقصان سان جڙيل آهي.
موجوده مطالعي ۾، اليڪٽران مائڪروسکوپي استعمال ڪندي الٽرا ڍانچي جي تجزيي ڏيکاري ٿي ته اسپرماتوزوا گھڻن مواد جي وڏي مقدار تي عمل ڪري ٿو.اهي مادا ان مجموعي لاءِ ذميوار سمجهيا وڃن ٿا جيڪي ٿلهي سرن جي وچ ۾ ۽ ان جي چوڌاري ڪن ٿا، پر دم واري علائقي ۾ گهٽ ڪنسنٽريشن تي.اسان فرض ڪريون ٿا ته هي جمع ڪندڙ مادو مردن جي پيداواري نظام (ايپيڊڊيمس يا ويس ڊيفرنس) مان نڪرندو آهي ۽ مني سان گڏ هوندو آهي، ڇو ته اسان اڪثر ڪري انزال جي دوران لفف ۽ سيمينل پلازما کان ڌار ٿيڻ جو مشاهدو ڪندا آهيون.اهو ٻڌايو ويو آهي ته جيئن avian spermatozoa epididymis ۽ vas deferens مان گذري ٿو، اهي پختگي سان لاڳاپيل تبديلين مان گذري رهيا آهن جيڪي پروٽين کي پابند ڪرڻ ۽ پلازما ليما سان لاڳاپيل گلائڪوپروٽين حاصل ڪرڻ جي صلاحيت جي حمايت ڪن ٿيون.SST ۾ رهائشي اسپرم جھلي تي انهن پروٽينن جي تسلسل مان معلوم ٿئي ٿو ته اهي پروٽين شايد اسپرم جھلي جي استحڪام 30 جي حصول تي اثر انداز ڪن ٿا ۽ انهن جي زرخيزي 31 کي طئي ڪن ٿا.Ahammad et al32 ٻڌايو ته مردن جي پيدائش واري نظام جي مختلف حصن مان حاصل ڪيل اسپرماتوزوا (ٽيسٽس کان وٺي ڊسٽل ويس ڊيفرنس تائين) مائع اسٽوريج جي حالتن ۾ قابل عمل واڌارو ڏيکاري ٿو، اسٽوريج جي درجه حرارت جي پرواهه ڪرڻ کان سواء، ۽ ڪڪڙن ۾ قابل عمل پڻ وڌي ٿو فيلوپيئن ٽيوب ۾ مصنوعي انجڻ کان پوء.
شارڪشي ڪڪڙ جي اسپرم ٽفٽس جون خاصيتون ۽ ڪم ٻين نسلن جهڙوڪ ايچڊناس، پلاٽائپس، ڪاٺ جي چوهاڻ، هرڻ جي چوڏس ۽ گني پگ کان مختلف آهن.شارڪاسي ڪڪڙن ۾، اسپرماتوزوا بنڊلن جي ٺهڻ سان انهن جي ترڻ جي رفتار سنگل اسپرماتوزوا جي مقابلي ۾ گهٽجي ٿي.بهرحال، اهي بنڊل rheologically مثبت spermatozoa جي فيصد کي وڌايو ۽ هڪ متحرڪ ماحول ۾ پاڻ کي مستحڪم ڪرڻ لاء اسپرماتوزوا جي صلاحيت کي وڌايو.اهڙيء طرح، اسان جا نتيجا اڳئين تجويز جي تصديق ڪن ٿا ته SST ۾ اسپرم ايگلوٽيشن ڊگھي مدت جي اسپرم اسٽوريج سان لاڳاپيل آهي.اسان اهو پڻ سمجهون ٿا ته اسپرم جي تڪميل ٽفٽ ٺاهڻ لاءِ SST ۾ اسپرم جي نقصان جي شرح کي ڪنٽرول ڪري سگهي ٿي، جيڪا سپرم مقابلي جي نتيجن کي تبديل ڪري سگهي ٿي.هن مفروضي موجب، اسپرماتوزوا گھٽ ايگلوٽينيشن ظرفيت سان ايس ايس ٽي کي پهرين ڇڏيندو آهي، جڏهن ته اسپرماٽوزووا تمام گهڻو اولاد پيدا ڪري ٿو.واحد-پوري اسپرم بنڊلز جو ٺهڻ فائديمند آهي ۽ والدين-ٻار جي تناسب کي متاثر ڪري ٿو، پر هڪ مختلف ميکانيزم استعمال ڪري ٿو.echidnas ۽ platypuses ۾، spermatozoa هڪ ٻئي سان متوازي ترتيب ڏنل آهن ته جيئن بيم جي اڳتي وڌڻ جي رفتار کي وڌايو وڃي.echidnas جا بنڊل سنگل اسپرماتوزوا جي ڀيٽ ۾ ٽي دفعا تيز ھلندا آھن.اهو مڃيو وڃي ٿو ته echidnas ۾ اهڙين سپرم ٽفٽس جو ٺهڻ هڪ ارتقائي موافقت آهي جيڪو تسلط برقرار رکڻ لاءِ آهي، ڇاڪاڻ ته عورتون بيوقوف آهن ۽ اڪثر ڪري ڪيترن ئي مردن سان ملن ٿيون.تنهن ڪري، مختلف انزال مان اسپرماتوزوا آنند جي ڀاڻ لاءِ سخت مقابلو ڪن ٿا.
شارڪسي ڪڪڙن جي Agglutinated spermatozoa کي فيز ڪنٽراسٽ مائيڪرو اسڪوپي استعمال ڪندي ڏسڻ لاءِ آسان آهي، جنهن کي فائديمند سمجهيو ويندو آهي ڇاڪاڻ ته اها ويٽرو ۾ اسپرماتوزوا جي رويي جو آسان مطالعو ڪرڻ جي اجازت ڏئي ٿي.اهو ميکانيزم جنهن سان اسپرم ٽفٽ ٺهڻ سان شارڪاسي ڪڪڙن ۾ نسلن کي فروغ ڏئي ٿو، اهو به ان کان مختلف آهي، جيڪو ڪجهه پلاسنٽل ٿلهي جانورن ۾ ڏٺو ويو آهي جيڪو ڪوآپريٽو اسپرم جي رويي جي نمائندگي ڪري ٿو جهڙوڪ ڪاٺ جي چوهڙا، جتي ڪجهه اسپرماتوزا آنڊن تائين پهچن ٿا، ٻين لاڳاپيل ماڻهن کي انهن جي آنڊن تائين پهچڻ ۽ نقصان پهچائڻ ۾ مدد ڪن ٿا.پاڻ کي ثابت ڪرڻ لاء.پرهيزگاري وارو عمل.Self-fertilization 34. spermatozoa ۾ ڪوآپريٽو رويي جو هڪ ٻيو مثال هرڻ جي چوٿين ۾ مليو، جتي اسپرماتوزوا سڀ کان وڌيڪ جينياتي طور تي لاڳاپيل اسپرماتوزوا کي سڃاڻڻ ۽ ان سان ملائڻ جي قابل هئا ۽ ڪوآپريٽو گروپ ٺاهي رهيا هئا ته جيئن غير لاڳاپيل اسپرماتوزوا 35 جي مقابلي ۾ پنهنجي رفتار کي وڌايو وڃي.
ھن مطالعي ۾ حاصل ڪيل نتيجا SWS ۾ اسپرماتوزوا جي ڊگھي مدي واري اسٽوريج جي فومن جي نظريي جي تضاد نٿا ڪن.محققن جو چوڻ آهي ته اسپرم سيلز هڪ وڌايل عرصي تائين ايس ايس ٽي کي قطار ۾ رکيل اپيٿيليل سيلز جي وهڪري ۾ حرڪت ڪندا رهندا آهن ۽ هڪ خاص وقت کان پوءِ سپرم سيلز جا انرجي اسٽور ختم ٿي ويندا آهن، جنهن جي نتيجي ۾ رفتار ۾ گهٽتائي ايندي آهي، جنهن جي ڪري ننڍڙن ماليڪيولر وزن جي مواد کي خارج ڪرڻ جي اجازت ملي ٿي.اسپرماتوزوا جي توانائي SST جي لومين مان سيال جي وهڪري سان گڏ فلوپين ٽيوب جي گفا.موجوده مطالعي ۾، اسان ڏٺو آهي ته اڌ اڪيلو سپرم وهندڙ سيال جي خلاف ترڻ جي صلاحيت ڏيکاري ٿو، ۽ بنڊل ۾ انهن جي چپن کي مثبت ريولوجي ڏيکارڻ جي صلاحيت وڌائي.ان کان علاوه، اسان جي ڊيٽا انهن سان مطابقت رکي ٿي Matsuzaki et al.1 جن ٻڌايو ته ايس ايس ٽي ۾ ليڪٽيٽ سيڪشن وڌائي سگھي ٿي رهائشي سپرم جي حرڪت کي روڪي سگھي ٿي.تنهن هوندي، اسان جا نتيجا بيان ڪري ٿو سپرم موٽائل لئگيمنٽ جي ٺهڻ ۽ انهن جي rheological رويي جي موجودگي ۾ هڪ متحرڪ ماحول جي موجودگي ۾ هڪ microchannel اندر SST ۾ انهن جي رويي کي بيان ڪرڻ جي ڪوشش ۾.مستقبل جي تحقيق تي ڌيان ڏئي سگھي ٿو ڪيميائي ساخت ۽ اصليت جو تعين ڪرڻ واري ايجنٽ جو، جيڪو بلاشڪ محققن کي مدد ڪندو نئين طريقن کي وڌائڻ ۾ مائع سيمن کي ذخيرو ڪرڻ ۽ زرخيزي جي مدت کي وڌائڻ.
پندرهن 30-هفتن جي ننگي ڳچيء واري نر شارڪاسي (homozygous dominant؛ Na Na) کي مطالعي ۾ اسپرم ڊونرز طور چونڊيو ويو.پکين کي ريسرچ پولٽري فارم جي فيڪلٽي آف ايگريڪلچر، اشٽ يونيورسٽي، اشٽ گورنريٽ، مصر ۾ پاليو ويو.پکين کي انفرادي پنجرن ۾ رکيو ويو (30 x 40 x 40 سينٽي)، هڪ روشني پروگرام (16 ڪلاڪ روشني ۽ 8 ڪلاڪ اونداهي) جي تابع هئا ۽ هڪ غذا ڏني وئي جنهن ۾ 160 گرام خام پروٽين، 2800 ڪيڪال ميٽابولائيزبل توانائي، 35 گرام ڪلسيم هر هڪ.5 گرام موجود فاسفورس في ڪلوگرام غذا.
انگن اکرن موجب 36، 37، مردن مان مني گڏ ڪيو ويو پيٽ جي مساج ذريعي.مجموعي طور تي 45 سيمين جا نمونا 15 مردن کان 3 ڏينهن دوران گڏ ڪيا ويا.Semen (n = 15/day) کي فوري طور تي 1:1 (v:v) بيلسويل پولٽري Semen Diluent سان ملايو ويو، جنهن ۾ پوٽاشيم ڊيفاسفيٽ (1.27 g)، مونوسوڊيم گلوٽاميٽ مونوهائيڊريٽ (0.867 g)، فرڪٽوز (0.5 d) اينهائيڊس سوڊيم شامل آهن.acetate (0.43 g)، tris (hydroxymethyl) aminomethane (0.195 g)، potassium citrate monohydrate (0.064 g)، potassium monophosphate (0.065 g)، مگنيشيم کلورائڊ (0.034 g) ۽ H2O = 100 mH/3mOslarity (100 mH/73g، p3m3g)، 8.مٺي ٿيل سيمن جا نمونا پهريان هڪ هلڪي خوردبيني هيٺ جانچيا ويا ته جيئن مني جي سٺي معيار (نمي) کي يقيني بڻائي سگهجي ۽ پوءِ گڏ ڪرڻ کان پوءِ اڌ ڪلاڪ اندر استعمال ٿيڻ تائين 37 ° C تي پاڻي جي غسل ۾ محفوظ ڪيو ويو.
spermatozoa جي kinematics ۽ rheology بيان ڪيو ويو آهي مائڪرو فلائيڊڪ ڊوائيسز جي سسٽم کي استعمال ڪندي.سيمين جا نمونا وڌيڪ 1:40 تي ٺهيا ويا Beltsville Avian Semen Diluent ۾، هڪ microfluidic device ۾ لوڊ ڪيو ويو (هيٺ ڏسو)، ۽ kinetic parameters جو تعين ڪيو ويو ڪمپيوٽرائزڊ Semen Analysis (CASA) سسٽم استعمال ڪندي اڳ ۾ مائڪرو فلائيڊڪس جي خاصيت لاءِ تيار ڪيو ويو.مائع ميڊيا ۾ اسپرماتوزوا جي متحرڪ تي (مڪينيڪل انجنيئرنگ ڊپارٽمينٽ، فيڪلٽي آف انجنيئرنگ، اسيوٽ يونيورسٽي، مصر).پلگ ان تي ڊائون لوڊ ڪري سگھجي ٿو: http://www.assiutmicrofluidics.com/research/casa39.وکر جي رفتار (VCL، μm/s)، لڪير جي رفتار (VSL، μm/s) ۽ سراسري رفتار جي رفتار (VAP، μm/s) ماپي وئي.اسپرماتوزوا جون وڊيوز ورتيون ويون هڪ inverted Optika XDS-3 مرحلو ڪنٽراسٽ مائڪرو اسڪوپ (40x مقصد سان) هڪ Tucson ISH1000 ڪيمرا سان ڳنڍيل 30 fps تي 3 s لاءِ.CASA سافٽ ويئر استعمال ڪريو گھٽ ۾ گھٽ ٽن علائقن جو مطالعو ڪرڻ ۽ 500 سپرم پيچرو في نموني.رڪارڊ ٿيل وڊيو کي گھر جي CASA استعمال ڪندي پروسيس ڪيو ويو.CASA پلگ ان ۾ حرڪت جي تعريف، وهڪري جي رفتار جي مقابلي ۾ سپرم جي ترڻ جي رفتار تي ٻڌل آهي، ۽ ان ۾ ٻيا پيرا ميٽر شامل نه آهن جهڙوڪ پاسي کان پاسي واري حرڪت، جيئن اهو مليو آهي ته اهو سيال جي وهڪري ۾ وڌيڪ قابل اعتماد آهي.Rheological تحرڪ بيان ڪيو ويو آهي سپرم سيلز جي حرڪت جي خلاف سيال جي وهڪري جي هدايت جي خلاف.rheological خاصيتن سان Spermatozoa متحرڪ اسپرماتوزوا جي تعداد سان ورهايل هئا؛spermatozoa جيڪي آرام ۾ هئا ۽ convectively حرڪت ڪندڙ spermatozoa کي ڳڻپ مان خارج ڪيو ويو.
سڀئي ڪيميائي استعمال ڪيا ويا ايلگوموريا دواسازي (قاهره، مصر) مان حاصل ڪيا ويا جيستائين ٻي صورت ۾ نوٽ ڪيو وڃي.ڊوائيس تيار ڪئي وئي جيئن بيان ڪيل ايل شيري ايٽ ال.40 ڪجھ تبديلين سان.مائڪرو چينلز ٺاهڻ لاءِ استعمال ٿيندڙ مواد ۾ شيشي جون پليٽون (هورڊ گلاس، ورسيسٽر، ايم اي)، SU-8-25 منفي مزاحمت (مائڪرو ڪيم، نيوٽن، CA)، ڊياسيٽون الڪوحل (سگما الڊرچ، اسٽين هيم، جرمني)، ۽ پوليسيٽون شامل آهن.-184، ڊو ڪارننگ، مڊلينڊ، مشي گن).مائڪرو چينلز نرم ليٿوگرافي استعمال ڪندي ٺاهيا ويا آهن.پهريون، هڪ صاف حفاظتي چهرو ماسڪ گهربل مائڪرو چينل ڊيزائن سان هڪ اعليٰ ريزوليوشن پرنٽر تي ڇپيو ويو (پريزميٽڪ، قاهره، مصر ۽ پئسفڪ آرٽس اينڊ ڊيزائن، مارخم، آن).ماسٽرز شيشي جي پليٽن کي ذيلي ذخيري طور استعمال ڪيو ويو.پليٽن کي ايسٽون، آئسوپروپنول ۽ ڊيونائيزڊ پاڻي ۾ صاف ڪيو ويو ۽ پوءِ SU8-25 جي 20 µm پرت سان اسپن ڪوٽنگ (3000 rpm، 1 منٽ) سان گڏ ڪيو ويو.SU-8 پرت کي پوءِ نرميءَ سان خشڪ ڪيو ويو (65 ° C، 2 منٽ ۽ 95 ° C، 10 منٽ) ۽ 50 s تائين UV شعاعن جي سامهون رکيو ويو.نمائش کان پوءِ 65°C ۽ 95°C تي 1 منٽ ۽ 4 منٽ لاءِ بيڪ ڪريو ڪراس لنڪ ايڪسپوز ٿيل SU-8 پرت لاءِ، جنهن کانپوءِ 6.5 منٽ لاءِ ڊياسيٽون الڪوحل ۾ واڌارو ڪيو وڃي.SU-8 پرت کي وڌيڪ مضبوط ڪرڻ لاءِ وافلز کي سخت بيڪ ڪريو (200 ° C 15 منٽ لاءِ).
PDMS تيار ڪيو ويو مونومر ۽ هارڊنر کي 10:1 جي وزن جي تناسب ۾ ملايو، پوءِ ويڪيوم ڊيسيڪيٽر ۾ ڊيگاس ڪيو ويو ۽ SU-8 مين فريم تي لڳايو ويو.PDMS کي تندور (120 ° C، 30 منٽ) ۾ علاج ڪيو ويو، پوء چينلن کي ڪٽي ڪڍيو ويو، ماسٽر کان الڳ ڪيو ويو، ۽ سوراخ ڪيو ويو ته ٽيوب کي مائڪرو چينل جي انٽ ۽ آئوٽليٽ تي ڳنڍڻ جي اجازت ڏني وئي.آخرڪار، PDMS مائڪرو چينلز هڪ پورٽبل ڪورونا پروسيسر (اليڪٽرو ٽيڪنڪ پراڊڪٽس، شکاگو، IL) استعمال ڪندي مائڪرو اسڪوپ سلائيڊز سان مستقل طور تي ڳنڍيل هئا جيئن ته ٻي جاء تي بيان ڪيو ويو آهي.هن مطالعي ۾ استعمال ٿيل مائڪرو چينل 200 µm × 20 µm (W × H) ۽ 3.6 سينٽي ڊگهو آهي.
مائڪرو چينل جي اندر هائڊروسٽٽيڪڪ پريشر جي ذريعي پيدا ٿيندڙ سيال جي وهڪري کي حاصل ڪيو ويندو آهي انٽ ريزروائر ۾ سيال جي سطح کي برقرار رکڻ سان اوچائي فرق Δh39 کان مٿي آئوٽ ليٽ ذخيري ۾ (تصوير 1).
جتي f رگڙ جو ڪوئفيشئٽ آهي، جنهن کي f = C/Re طور بيان ڪيو ويو آهي هڪ مستطيل چينل ۾ لامينار جي وهڪري لاءِ، جتي C هڪ مستقل آهي چينل جي اسپيڪٽ ريشو تي منحصر آهي، L مائڪرو چينل جي ڊيگهه آهي، Vav مائڪرو چينل جي اندر اوسط رفتار آهي، Dh چينل جو هائيڊولڪ قطر آهي، g - acceleration جي تيز رفتار.ھن مساوات کي استعمال ڪندي، اوسط چينل جي رفتار کي ھيٺ ڏنل مساوات استعمال ڪندي حساب ڪري سگھجي ٿو: