هڪ انقلابي نئون ان لائن اسٽيٽڪ ميڪر تيار ڪيو ويو آهي جيڪو خاص طور تي اعليٰ ڪارڪردگي واري مائع ڪروميٽوگرافي (HPLC) ۽ الٽرا هاءِ پرفارمنس واري مائع ڪروميٽوگرافي (HPLC ۽ UHPLC) سسٽم جي سخت گهرجن کي پورو ڪرڻ لاءِ ٺاهيو ويو آهي. ٻن يا وڌيڪ موبائل مرحلن جي خراب ميلاپ جي نتيجي ۾ سگنل کان شور جو تناسب وڌيڪ ٿي سگهي ٿو، جيڪو حساسيت کي گهٽائي ٿو. گهٽ ۾ گهٽ اندروني حجم ۽ جامد مکسر جي جسماني طول و عرض سان ٻن يا وڌيڪ سيالن جو هڪجهڙائي جامد ميلاپ هڪ مثالي جامد ميڪر جي اعليٰ معيار جي نمائندگي ڪري ٿو. نئون جامد ميڪر نئين 3D پرنٽنگ ٽيڪنالاجي استعمال ڪندي اهو حاصل ڪري ٿو هڪ منفرد 3D structure ٺاهڻ لاءِ جيڪو بهتر هائيڊروڊائنامڪ جامد ميڪنگ فراهم ڪري ٿو جنهن ۾ مرکب جي في يونٽ اندروني حجم ۾ بنيادي سائن ويو ۾ سڀ کان وڌيڪ سيڪڙو گهٽتائي آهي. روايتي ميڪر جي اندروني حجم جو 1/3 استعمال ڪرڻ سان بنيادي سائن ويو 98٪ گهٽجي ٿو. مکسر ۾ هڪ ٻئي سان ڳنڍيل 3D فلو چينل شامل آهن جن ۾ مختلف ڪراس-سيڪشنل علائقن ۽ رستي جي ڊيگهه شامل آهن جيئن سيال پيچيده 3D جاميٽري کي پار ڪري ٿو. ڪيترن ئي ٽرٽوس وهڪري جي رستن تي ملائڻ، مقامي ٽربولنس ۽ ايڊيز سان گڏ، مائڪرو، ميسو ۽ ميڪرو اسڪيل تي ملائڻ جي نتيجي ۾. هي منفرد مکسر ڪمپيوٽيشنل فلوئڊ ڊائنامڪس (CFD) سموليشن استعمال ڪندي ٺاهيو ويو آهي. پيش ڪيل ٽيسٽ ڊيٽا ڏيکاري ٿو ته بهترين ملائڻ گهٽ ۾ گهٽ اندروني حجم سان حاصل ڪيو ويندو آهي.
30 سالن کان وڌيڪ عرصي کان، مائع ڪروميٽوگرافي ڪيترن ئي صنعتن ۾ استعمال ڪئي وئي آهي، جن ۾ دواسازي، جراثيم ڪش، ماحولياتي تحفظ، فارنزڪ، ۽ ڪيميائي تجزيو شامل آهن. في ملين يا گهٽ حصن جي ماپ ڪرڻ جي صلاحيت ڪنهن به صنعت ۾ ٽيڪنالاجي ترقي لاءِ اهم آهي. خراب ملاوٽ جي ڪارڪردگي خراب سگنل کان شور جي تناسب جو سبب بڻجي ٿي، جيڪو ڪروميٽوگرافي ڪميونٽي لاءِ ڳولا جي حدن ۽ حساسيت جي لحاظ کان هڪ تڪليف آهي. جڏهن ٻه HPLC سالوينٽس کي ملائي رهيا آهن، ته ڪڏهن ڪڏهن ٻاهرين ذريعن سان ملاوٽ کي مجبور ڪرڻ ضروري هوندو آهي ته جيئن ٻن سالوينٽس کي هڪجهڙائي ڪري سگهجي ڇاڪاڻ ته ڪجهه سالوينٽس چڱي طرح نه ملندا آهن. جيڪڏهن سالوينٽس کي مڪمل طور تي نه ملايو وڃي، ته HPLC ڪروميٽوگرام جي خرابي ٿي سگهي ٿي، جيڪو پاڻ کي تمام گهڻو بيس لائين شور ۽/يا خراب چوٽي شڪل جي طور تي ظاهر ڪري ٿو. خراب ملاوٽ سان، بيس لائين شور وقت سان گڏ ڊيٽيڪٽر سگنل جي سائن ويو (اڀرڻ ۽ گرڻ) جي طور تي ظاهر ٿيندو. ساڳئي وقت، خراب ملاوٽ وسيع ۽ غير متناسب چوٽين جو سبب بڻجي سگهي ٿو، تجزياتي ڪارڪردگي، چوٽي شڪل، ۽ چوٽي ريزوليوشن کي گهٽائي ٿو. صنعت تسليم ڪيو آهي ته ان-لائن ۽ ٽي اسٽيٽڪ مکسر انهن حدن کي بهتر بڻائڻ ۽ استعمال ڪندڙن کي گهٽ ڳولا جي حد (حساسيت) حاصل ڪرڻ جي اجازت ڏيڻ جو هڪ ذريعو آهن. مثالي اسٽيٽڪ مکسر گهٽ ۾ گهٽ حجم ۽ وڌ ۾ وڌ سسٽم ٿرو پُٽ سان گڏ اعليٰ ميڪنگ ڪارڪردگي، گهٽ ڊيڊ حجم ۽ گهٽ دٻاءُ جي گهٽتائي جي فائدن کي گڏ ڪري ٿو. ان کان علاوه، جيئن تجزيو وڌيڪ پيچيده ٿيندو وڃي ٿو، تجزيه نگارن کي معمول مطابق وڌيڪ پولر ۽ ملائڻ ۾ مشڪل سالوينٽس استعمال ڪرڻ گهرجن. ان جو مطلب آهي ته بهتر ميڪنگ مستقبل جي جاچ لاءِ ضروري آهي، اعليٰ ميڪر ڊيزائن ۽ ڪارڪردگي جي ضرورت کي وڌيڪ وڌائيندي.
موٽ تازو ئي پيٽنٽ ٿيل PerfectPeakTM ان لائن اسٽيٽڪ مکسرز جي هڪ نئين رينج تيار ڪئي آهي جنهن ۾ ٽي اندروني حجم آهن: 30 µl، 60 µl ۽ 90 µl. اهي سائز اڪثر HPLC ٽيسٽن لاءِ گهربل حجم ۽ ميڪنگ خاصيتن جي حد کي ڍڪيندا آهن جتي بهتر ميڪنگ ۽ گهٽ ڊسپريشن جي ضرورت هوندي آهي. سڀئي ٽي ماڊل 0.5 انچ قطر ۾ آهن ۽ هڪ ڪمپيڪٽ ڊيزائن ۾ صنعت جي اڳواڻي واري ڪارڪردگي فراهم ڪن ٿا. اهي 316L اسٽينلیس سٹیل مان ٺهيل آهن، انرٽينس لاءِ غير فعال، پر ٽائيٽينيم ۽ ٻيا سنکنرن جي مزاحمتي ۽ ڪيميائي طور تي غير فعال ڌاتو مصر پڻ موجود آهن. انهن مکسرز ۾ وڌ ۾ وڌ آپريٽنگ پريشر 20,000 psi تائين آهي. شڪل 1a تي 60 µl موٽ اسٽيٽڪ مکسر جي تصوير آهي جيڪا هن قسم جي معياري ميڪرز کان گهٽ اندروني حجم استعمال ڪندي وڌ ۾ وڌ ميڪنگ ڪارڪردگي فراهم ڪرڻ لاءِ ٺهيل آهي. هي نئون اسٽيٽڪ مکسر ڊيزائن هڪ منفرد 3D ڍانچي ٺاهڻ لاءِ نئين اضافي پيداوار واري ٽيڪنالاجي استعمال ڪري ٿو جيڪا ڪروميٽوگرافي انڊسٽري ۾ استعمال ٿيندڙ ڪنهن به ميڪر کان گهٽ اندروني وهڪري استعمال ڪري ٿي جامد مرکب حاصل ڪرڻ لاءِ. اهڙا مکسر هڪ ٻئي سان ڳنڍيل ٽي-dimensional وهڪري چينلن تي مشتمل هوندا آهن جن ۾ مختلف ڪراس-سيڪشنل علائقا ۽ مختلف رستي جي ڊيگهه هوندي آهي جيئن مائع اندر پيچيده جاميٽري رڪاوٽن کي پار ڪري ٿو. شڪل 1b نئين مکسر جو هڪ اسڪيميٽڪ ڊاگرام ڏيکاري ٿو، جيڪو انليٽ ۽ آئوٽ ليٽ لاءِ انڊسٽري معيار 10-32 ٿريڊڊ HPLC ڪمپريشن فٽنگ استعمال ڪري ٿو، ۽ پيٽنٽ ٿيل اندروني مکسر پورٽ جي ڇانوَ واري نيري سرحدون آهن. اندروني وهڪري جي رستن جا مختلف ڪراس-سيڪشنل علائقا ۽ اندروني وهڪري جي مقدار اندر وهڪري جي هدايت ۾ تبديليون ٽربلنٽ ۽ ليمينر وهڪري جا علائقا پيدا ڪن ٿيون، جنهن جي ڪري مائڪرو، ميسو ۽ ميڪرو اسڪيل تي ملاوٽ ٿئي ٿي. هن منفرد مکسر جي ڊيزائن ۾ ڪمپيوٽيشنل فلوئڊ ڊائنامڪس (CFD) سموليشن استعمال ڪيا ويا ته جيئن وهڪري جي نمونن جو تجزيو ڪيو وڃي ۽ گهر ۾ تجزياتي جاچ ۽ گراهڪ فيلڊ تشخيص لاءِ پروٽوٽائپنگ کان اڳ ڊيزائن کي بهتر بڻايو وڃي. اضافي پيداوار روايتي مشيننگ (ملنگ مشينون، ليٿس، وغيره) جي ضرورت کان سواءِ سڌو سنئون CAD ڊرائنگ مان 3D جاميٽري حصن کي پرت ذريعي پرت ڪيو وڃي. اهي نوان جامد مکسر هن عمل کي استعمال ڪندي تيار ڪرڻ لاءِ ٺاهيا ويا آهن، جتي مکسر باڊي CAD ڊرائنگ مان ٺاهي وئي آهي ۽ پرزا اضافي پيداوار استعمال ڪندي پرت سان ٺاهيل (ڇپيل) آهن. هتي، ڌاتو پائوڊر جي هڪ پرت جيڪا لڳ ڀڳ 20 مائڪرون ٿلهي آهي، جمع ڪئي وئي آهي، ۽ هڪ ڪمپيوٽر ڪنٽرول ٿيل ليزر چونڊيل طور تي پائوڊر کي ڳاري ٿو ۽ هڪ مضبوط شڪل ۾ فيوز ڪري ٿو. هن پرت جي مٿان هڪ ٻيو پرت لاڳو ڪريو ۽ ليزر سنٽرنگ لاڳو ڪريو. هن عمل کي ورجايو جيستائين حصو مڪمل طور تي ختم نه ٿئي. پوءِ پائوڊر کي غير ليزر بانڊ ٿيل حصي مان هٽايو ويندو آهي، هڪ 3D پرنٽ ٿيل حصو ڇڏي ويندو آهي جيڪو اصل CAD ڊرائنگ سان ملندو آهي. آخري پراڊڪٽ ڪجهه حد تائين مائڪرو فلائيڊڪ عمل سان ملندڙ جلندڙ آهي، مکيه فرق اهو آهي ته مائڪرو فلائيڊڪ جزا عام طور تي ٻه طرفي (فليٽ) هوندا آهن، جڏهن ته اضافي پيداوار استعمال ڪندي، پيچيده وهڪري جا نمونا ٽي طرفي جاميٽري ۾ ٺاهي سگهجن ٿا. اهي نل هن وقت 316L اسٽينلیس سٹیل ۽ ٽائيٽينيم ۾ 3D پرنٽ ٿيل حصن جي طور تي موجود آهن. گهڻا ڌاتو مصر، پوليمر ۽ ڪجهه سيرامڪس هن طريقي کي استعمال ڪندي اجزاء ٺاهڻ لاءِ استعمال ڪري سگهجن ٿا ۽ مستقبل جي ڊيزائن/پروڊڪٽس ۾ غور ڪيو ويندو.
چانور. 1. 90 μl موٽ اسٽيٽڪ ميڪسر جي تصوير (الف) ۽ ڊاگرام (ب) نيري رنگ ۾ ڇانوَ ٿيل ميڪسر فلوئڊ فلو رستي جي ڪراس سيڪشن کي ڏيکاري ٿي.
ڊيزائن جي مرحلي دوران جامد مکسر جي ڪارڪردگي جا ڪمپيوٽيشنل فلوئڊ ڊائنامڪس (CFD) سموليشن هلايو ته جيئن موثر ڊيزائن کي ترقي ڪرڻ ۽ وقت وٺندڙ ۽ مهانگا آزمائشي ۽ غلطي جا تجربا گهٽائي سگهجن. COMSOL ملٽي فزڪس سافٽ ويئر پيڪيج استعمال ڪندي جامد مکسر ۽ معياري پائپنگ (نو-مڪسر سموليشن) جو CFD سموليشن. هڪ حصي اندر فلوئڊ جي رفتار ۽ دٻاءُ کي سمجهڻ لاءِ پريشر-ڊرائيو ٿيل ليمينار فلوئڊ ميڪينڪس استعمال ڪندي ماڊلنگ. هي فلوئڊ ڊائنامڪس، موبائل فيز مرڪب جي ڪيميائي ٽرانسپورٽ سان گڏ، ٻن مختلف مرڪوز مائع جي ميلاپ کي سمجهڻ ۾ مدد ڪري ٿو. ماڊل جو مطالعو وقت جي فنڪشن جي طور تي ڪيو ويو آهي، 10 سيڪنڊن جي برابر، مقابلي واري حل جي ڳولا دوران حساب جي آساني لاءِ. نظرياتي ڊيٽا پوائنٽ پروب پروجيڪشن ٽول استعمال ڪندي وقت سان لاڳاپيل مطالعي ۾ حاصل ڪئي وئي، جتي ڊيٽا گڏ ڪرڻ لاءِ نڪرڻ جي وچ ۾ هڪ نقطو چونڊيو ويو. CFD ماڊل ۽ تجرباتي ٽيسٽن هڪ متناسب نموني والو ۽ پمپنگ سسٽم ذريعي ٻه مختلف سالوينٽس استعمال ڪيا، جنهن جي نتيجي ۾ نموني لائن ۾ هر سالوينٽس لاءِ متبادل پلگ پيدا ٿيو. پوءِ انهن سالوينٽس کي جامد مکسر ۾ ملايو ويندو آهي. شڪل 2 ۽ 3 ترتيب وار هڪ معياري پائپ (ڪوبه مکسر نه) ۽ هڪ موٽ اسٽيٽڪ ميڪسر ذريعي وهڪري جي نقل ڏيکارين ٿا. نقل 5 سينٽي ميٽر ڊگهي ۽ 0.25 ملي ميٽر آئي ڊي تي سڌي ٽيوب تي هلائي وئي ته جيئن هڪ جامد مکسر جي غير موجودگي ۾ ٽيوب ۾ پاڻي ۽ خالص ايسٽونائٽرائل جي متبادل پلگ جي تصور کي ظاهر ڪري سگهجي، جيئن شڪل 2 ۾ ڏيکاريل آهي. نقل ۾ ٽيوب ۽ ميڪسر جي صحيح طول و عرض ۽ 0.3 ملي ليٽر/منٽ جي وهڪري جي شرح استعمال ڪئي وئي.
چانور. 2. 0.25 ملي ميٽر جي اندروني قطر سان 5 سينٽي ميٽر ٽيوب ۾ CFD وهڪري جو نقل ڪرڻ، HPLC ٽيوب ۾ ڇا ٿئي ٿو، يعني مکسر جي غير موجودگي ۾. مڪمل ڳاڙهو پاڻي جي ماس فريڪشن جي نمائندگي ڪري ٿو. نيرو پاڻي جي کوٽ جي نمائندگي ڪري ٿو، يعني خالص ايسٽونائيٽريل. ٻن مختلف مائع جي متبادل پلگ جي وچ ۾ ڊفيوژن علائقا ڏسي سگهجن ٿا.
چانور. 3. 30 ملي ليٽر جي مقدار سان جامد مکسر، COMSOL CFD سافٽ ويئر پيڪيج ۾ ماڊل ڪيو ويو آهي. ليجنڊ مکسر ۾ پاڻي جي ماس فريڪشن جي نمائندگي ڪري ٿو. خالص پاڻي ڳاڙهي رنگ ۾ ۽ خالص ايسٽونائٽرائل نيري رنگ ۾ ڏيکاريو ويو آهي. نقل ٿيل پاڻي جي ماس فريڪشن ۾ تبديلي ٻن مائع جي ميلاپ جي رنگ ۾ تبديلي جي نمائندگي ڪري ٿي.
شڪل 4 تي، ملاوٽ جي ڪارڪردگي ۽ ملاوٽ جي مقدار جي وچ ۾ رابطي جي ماڊل جي تصديق جو مطالعو ڏيکاري ٿو. جيئن ملاوٽ جي مقدار وڌندي، ملاوٽ جي ڪارڪردگي وڌندي. ليکڪن جي ڄاڻ موجب، هن CFD ماڊل ۾ مکسر اندر ڪم ڪندڙ ٻين پيچيده جسماني قوتن کي حساب ۾ نه ٿو رکي سگهجي، جنهن جي نتيجي ۾ تجرباتي تجربن ۾ ملاوٽ جي ڪارڪردگي وڌيڪ ٿيندي. تجرباتي ملاوٽ جي ڪارڪردگي کي بنيادي سائنوسائيڊ ۾ سيڪڙو گهٽتائي جي طور تي ماپيو ويو. ان کان علاوه، پوئتي دٻاءُ ۾ واڌ عام طور تي ملاوٽ جي سطحن ۾ اضافو ڪري ٿي، جن کي سموليشن ۾ حساب ۾ نه رکيو ويندو آهي.
هيٺ ڏنل HPLC حالتون ۽ ٽيسٽ سيٽ اپ خام سائن لهرن کي ماپڻ لاءِ استعمال ڪيا ويا ته جيئن مختلف جامد مکسرن جي نسبتي ڪارڪردگي جو مقابلو ڪري سگهجي. شڪل 5 ۾ ڊاگرام هڪ عام HPLC/UHPLC سسٽم لي آئوٽ ڏيکاري ٿو. جامد مکسر کي پمپ کان پوءِ ۽ انجڪٽر ۽ سيپريشن ڪالم کان اڳ سڌو ميڪسر رکي جانچيو ويو. گهڻيون پس منظر جون سائنوسائيڊل ماپون جامد مکسر ۽ UV ڊيٽيڪٽر جي وچ ۾ انجڪٽر ۽ ڪيپيلري ڪالم کي نظرانداز ڪندي ڪيون وينديون آهن. سگنل کان شور جي تناسب جو جائزو وٺڻ ۽/يا چوٽي جي شڪل جو تجزيو ڪرڻ وقت، سسٽم جي ترتيب شڪل 5 ۾ ڏيکاريل آهي.
شڪل 4. جامد مکسر جي هڪ حد لاءِ ملاوٽ جي ڪارڪردگي بمقابله ملاوٽ جي مقدار جو پلاٽ. نظرياتي نجاست تجرباتي نجاست ڊيٽا جي ساڳئي رجحان جي پيروي ڪري ٿي جيڪا CFD سموليشن جي صحيحيت جي تصديق ڪري ٿي.
هن ٽيسٽ لاءِ استعمال ٿيندڙ HPLC سسٽم هڪ Agilent 1100 Series HPLC هو جنهن ۾ هڪ UV ڊيڪٽر هڪ PC هلائيندڙ Chemstation سافٽ ويئر ذريعي ڪنٽرول ڪيو ويو هو. ٽيبل 1 ٻن ڪيس اسٽڊيز ۾ بنيادي سائنوسائيڊز جي نگراني ڪندي مکسر جي ڪارڪردگي کي ماپڻ لاءِ عام ٽيوننگ حالتون ڏيکاري ٿو. تجرباتي ٽيسٽ سالوينٽس جي ٻن مختلف مثالن تي ڪيا ويا. ڪيس 1 ۾ ملايل ٻه سالوينٽس سالوينٽس A (ڊيونائيزڊ پاڻي ۾ 20 ايم ايم امونيم ايسٽيٽ) ۽ سالوينٽس B (80٪ ايسٽونائيٽريل (ACN)/20٪ ڊيونائيزڊ پاڻي) هئا. ڪيس 2 ۾، سالوينٽس A ڊيونائيزڊ پاڻي ۾ 0.05٪ ايسٽون (ليبل) جو حل هو. سالوينٽس B 80/20٪ ميٿانول ۽ پاڻي جو مرکب آهي. ڪيس 1 ۾، پمپ کي 0.25 ml/min کان 1.0 ml/min جي وهڪري جي شرح تي مقرر ڪيو ويو، ۽ ڪيس 2 ۾، پمپ کي 1 ml/min جي مسلسل وهڪري جي شرح تي مقرر ڪيو ويو. ٻنهي صورتن ۾، محلولن A ۽ B جي ميلاپ جو تناسب 20% A/80% B هو. ڪيس 1 ۾ ڊيٽيڪٽر کي 220 nm تي مقرر ڪيو ويو هو، ۽ ڪيس 2 ۾ ايسٽون جي وڌ ۾ وڌ جذب کي 265 nm جي طول موج تي مقرر ڪيو ويو هو.
ٽيبل 1. ڪيس 1 ۽ 2 لاءِ HPLC ترتيبون ڪيس 1 ڪيس 2 پمپ اسپيڊ 0.25 ml/min کان 1.0 ml/min 1.0 ml/min سالوينٽ A 20 mM امونيم ايسٽيٽ ڊيونائيزڊ پاڻي ۾ 0.05% ايسٽون ڊيونائيزڊ پاڻي ۾ سالوينٽ B 80% ايسٽونٽرائل (ACN) / 20% ڊيونائيزڊ پاڻي 80% ميٿانول / 20% ڊيونائيزڊ پاڻي سالوينٽ تناسب 20% A / 80% B 20% A / 80% B ڊيٽيڪٽر 220 nm 265 nm
چانور. 6. سگنل جي بيس لائين ڊرفٽ حصن کي هٽائڻ لاءِ لو-پاس فلٽر لاڳو ڪرڻ کان اڳ ۽ پوءِ ماپيل مخلوط سائن لهرن جا پلاٽ.
شڪل 6، ڪيس 1 ۾ مخلوط بيس لائين شور جي هڪ عام مثال آهي، جيڪا بيس لائين ڊرفٽ تي بار بار ٿيندڙ سائنوسائيڊل نموني جي طور تي ڏيکاريل آهي. بيس لائين ڊرفٽ پس منظر سگنل ۾ سست واڌ يا گهٽتائي آهي. جيڪڏهن سسٽم کي ڪافي وقت تائين متوازن رهڻ جي اجازت نه ڏني وڃي، ته اهو عام طور تي گهٽجي ويندو، پر جڏهن سسٽم مڪمل طور تي مستحڪم هجي ته به بي ترتيبي سان ڊرفٽ ٿيندو. هي بيس لائين ڊرفٽ تڏهن وڌي ويندو آهي جڏهن سسٽم تيز گريڊينٽ يا هاءِ بيڪ پريشر حالتن ۾ ڪم ڪري رهيو آهي. جڏهن هي بيس لائين ڊرفٽ موجود هوندو آهي، ته نموني کان نموني تائين نتيجن جو مقابلو ڪرڻ ڏکيو ٿي سگهي ٿو، جنهن کي خام ڊيٽا تي گهٽ پاس فلٽر لاڳو ڪري انهن گهٽ فريڪوئنسي تبديلين کي فلٽر ڪري سگهجي ٿو، ان ڪري هڪ فليٽ بيس لائين سان هڪ اوسيليشن پلاٽ فراهم ڪري ٿو. شڪل 6 ۾ گهٽ پاس فلٽر لاڳو ڪرڻ کان پوءِ مکسر جي بيس لائين شور جو پلاٽ پڻ ڏيکاريو ويو آهي.
CFD سموليشن ۽ ابتدائي تجرباتي جاچ مڪمل ڪرڻ کان پوءِ، مٿي بيان ڪيل اندروني حصن کي استعمال ڪندي ٽي الڳ الڳ جامد مکسر تيار ڪيا ويا جن ۾ ٽي اندروني حجم شامل آهن: 30 µl، 60 µl ۽ 90 µl. هي رينج گهٽ تجزياتي HPLC ايپليڪيشنن لاءِ گهربل حجم ۽ ملاوٽ جي ڪارڪردگي جي حد کي ڍڪيندو آهي جتي گهٽ طول و عرض جي بنيادن کي پيدا ڪرڻ لاءِ بهتر ملاوٽ ۽ گهٽ پکيڙ جي ضرورت هوندي آهي. شڪل 7 تي مثال 1 جي ٽيسٽ سسٽم تي حاصل ڪيل بنيادي سائن ويو ماپون ڏيکاريون ويون آهن (ايڪٽونائٽريل ۽ امونيم ايسٽيٽ ٽريسرز جي طور تي) ٽن حجم جامد مکسر سان ۽ ڪو به مکسر نصب نه ڪيو ويو. شڪل 7 ۾ ڏيکاريل نتيجن لاءِ تجرباتي ٽيسٽ حالتون سڀني 4 ٽيسٽن ۾ مسلسل رکيون ويون هيون جدول 1 ۾ بيان ڪيل طريقيڪار مطابق 0.5 ml/min جي سالوينٽ وهڪري جي شرح تي. ڊيٽاسيٽس تي هڪ آفسيٽ ويليو لاڳو ڪريو ته جيئن انهن کي سگنل اوورليپ کان سواءِ پاسي سان ڏيکاري سگهجي. آفسيٽ مکسر جي ڪارڪردگي جي سطح کي جانچڻ لاءِ استعمال ٿيندڙ سگنل جي طول و عرض کي متاثر نٿو ڪري. مکسر کان سواءِ سراسري سائنوسائيڊل ايمپليٽيوڊ 0.221 mAi هو، جڏهن ته 30 µl، 60 µl، ۽ 90 µl تي اسٽيٽڪ موٽ ميڪرز جا ايمپليٽيوڊ ترتيب وار 0.077، 0.017، ۽ 0.004 mAi تائين گهٽجي ويا.
شڪل 7. ڪيس 1 لاءِ HPLC UV ڊيٽيڪٽر سگنل آفسيٽ بمقابله وقت (امونيم ايسٽيٽ اشاري سان ايسٽونٽرائل) جيڪو ميڪسر کان سواءِ سالوينٽ ميڪسنگ ڏيکاري ٿو، 30 µl، 60 µl ۽ 90 µl موٽ ميڪسر بهتر ميڪسنگ ڏيکاري ٿو (گهٽ سگنل ايمپليٽيوڊ) جيئن جامد ميڪسر جو حجم وڌي ٿو. (اصل ڊيٽا آفسيٽ: 0.13 (ڪو به ميڪر نه)، 0.32، 0.4، 0.45mA بهتر ڊسپلي لاءِ).
شڪل 8 ۾ ڏيکاريل ڊيٽا شڪل 7 ۾ ساڳيا آهن، پر هن ڀيري انهن ۾ ٽن عام طور تي استعمال ٿيندڙ HPLC جامد مکسرن جا نتيجا شامل آهن جن ۾ اندروني مقدار 50 µl، 150 µl ۽ 250 µl آهي. چانور. شڪل 8. ڪيس 1 لاءِ HPLC UV ڊيٽيڪٽر سگنل آفسيٽ بمقابله ٽائيم پلاٽ (ايڪٽونائٽريل ۽ امونيم ايسٽيٽ اشارن جي طور تي) جامد مکسر کان سواءِ سالوينٽ جي ملاوٽ، موٽ جامد مکسر جي نئين سيريز، ۽ ٽي روايتي مکسر (اصل ڊيٽا آفسيٽ 0.1 (بغير ميڪر)، 0.32، 0.48، 0.6، 0.7، 0.8، 0.9 mA آهي بهتر ڊسپلي اثر لاءِ). بنيادي سائن ويو جي فيصد گھٽتائي جو حساب سائن ويو جي ايمپليٽيوڊ جي ايمپليٽيوڊ جي تناسب سان ڪيو ويندو آهي بغير ميڪسر نصب ٿيل. ڪيس 1 ۽ 2 لاءِ ماپيل سائن ويو اٽينيوئيشن فيصد ٽيبل 2 ۾ درج ڪيا ويا آهن، هڪ نئين اسٽيٽڪ ميڪر جي اندروني مقدار ۽ صنعت ۾ عام طور تي استعمال ٿيندڙ ست معياري ميڪر سان گڏ. شڪل 8 ۽ 9 ۾ ڊيٽا، ۽ گڏوگڏ ٽيبل 2 ۾ پيش ڪيل حساب، ڏيکاري ٿو ته موٽ اسٽيٽڪ ميڪر 98.1٪ تائين سائن ويو اٽينيوئيشن فراهم ڪري سگهي ٿو، جيڪو انهن ٽيسٽ حالتن هيٺ روايتي HPLC ميڪر جي ڪارڪردگي کان تمام گهڻو وڌيڪ آهي. شڪل 9. ڪيس 2 لاءِ HPLC UV ڊيڪٽر سگنل آفسيٽ بمقابله ٽائيم پلاٽ (ميٿانول ۽ ايسٽون ٽريسرز جي طور تي) ڪو به اسٽيٽڪ ميڪر (گڏيل) نه ڏيکاريندي، موٽ اسٽيٽڪ ميڪرز جي هڪ نئين سيريز ۽ ٻه روايتي ميڪر (اصل ڊيٽا آفسيٽ 0، 11 (بغير ميڪر)، 0.22، 0.3، 0.35 mA ۽ بهتر ڊسپلي لاءِ). صنعت ۾ عام طور تي استعمال ٿيندڙ ست مکسر جو پڻ جائزو ورتو ويو. انهن ۾ ڪمپني A (نامزد ميڪر A1، A2 ۽ A3) ۽ ڪمپني B (نامزد ميڪر B1، B2 ۽ B3) جا ٽي مختلف اندروني حجم وارا مکسر شامل آهن. ڪمپني C صرف هڪ سائيز جي درجه بندي ڪئي.
ٽيبل 2. جامد مکسر اسٽيرنگ خاصيتون ۽ اندروني حجم جامد مکسر ڪيس 1 سائنوسائيڊل بحالي: ايسٽونيٽرائل ٽيسٽ (ڪارڪردگي) ڪيس 2 سائنوسائيڊل بحالي: ميٿانول پاڻي ٽيسٽ (ڪارڪردگي) اندروني حجم (µl) ڪوبه مکسر ناهي - - 0 موٽ 30 65% 67.2% 30 موٽ 60 92.2% 91.3% 60 موٽ 90 98.1% 97.5% 90 مکسر A1 66.4% 73.7% 50 مکسر A2 89.8% 91.6% 150 مکسر A3 92.2% 94.5% 250 مکسر B1 44.8% 45.7% 9 35 مکسر B2 845.% 96.2% 370 مکسر سي 97.2% 97.4% 250
شڪل 8 ۽ جدول 2 ۾ نتيجن جو تجزيو ڏيکاري ٿو ته 30 µl موٽ اسٽيٽڪ ميڪر ۾ A1 ميڪر جي برابر ملائڻ جي ڪارڪردگي آهي، يعني 50 µl، جڏهن ته، 30 µl موٽ ۾ اندروني حجم 30٪ گهٽ آهي. جڏهن 60 µl موٽ ميڪر جو مقابلو 150 µl اندروني حجم A2 ميڪر سان ڪيو ويو، ته ملاوٽ جي ڪارڪردگي ۾ 89٪ جي مقابلي ۾ 92٪ جي معمولي بهتري آئي، پر وڌيڪ اهم ڳالهه اها آهي ته ملاوٽ جي هي اعليٰ سطح مکسر جي مقدار جي 1/3 تي حاصل ڪئي وئي. ساڳيو مکسر A2. 90 µl موٽ ميڪر جي ڪارڪردگي 250 µl جي اندروني حجم سان A3 ميڪر جي ساڳئي رجحان جي پيروي ڪئي. اندروني حجم ۾ 3 ڀيرا گهٽتائي سان 98٪ ۽ 92٪ جي ملاوٽ جي ڪارڪردگي ۾ بهتري پڻ ڏٺي وئي. ساڳيا نتيجا ۽ مقابلو مکسر B ۽ C لاءِ حاصل ڪيا ويا. نتيجي طور، جامد مکسر Mott PerfectPeakTM جي نئين سيريز مقابلي واري مقابلي واري مکسر جي ڀيٽ ۾ وڌيڪ ملاوٽ جي ڪارڪردگي فراهم ڪري ٿي، پر گهٽ اندروني حجم سان، بهتر پس منظر شور ۽ هڪ بهتر سگنل-کان-شور تناسب، بهتر حساسيت تجزيه، چوٽي جي شڪل ۽ چوٽي جي ريزوليوشن فراهم ڪري ٿي. ڪيس 1 ۽ ڪيس 2 جي مطالعي ٻنهي ۾ ملاوٽ جي ڪارڪردگي ۾ ساڳيا رجحانات ڏٺا ويا. ڪيس 2 لاءِ، 60 ml Mott، هڪ موازنہ ڪندڙ مکسر A1 (اندروني حجم 50 µl) ۽ هڪ موازنہ ڪندڙ مکسر B1 (اندروني حجم 35 µl) جي ملاوٽ جي ڪارڪردگي جو مقابلو ڪرڻ لاءِ (ميٿانول ۽ ايسٽون اشارن جي طور تي) استعمال ڪندي ٽيسٽ ڪيا ويا.، ڪارڪردگي ميڪسر نصب ڪرڻ کان سواءِ خراب هئي، پر ان کي بنيادي تجزيي لاءِ استعمال ڪيو ويو. 60 ml Mott مکسر ٽيسٽ گروپ ۾ بهترين مکسر ثابت ٿيو، ملاوٽ جي ڪارڪردگي ۾ 90٪ واڌارو فراهم ڪيو. هڪ موازنہ ڪندڙ مکسر A1 ملاوٽ جي ڪارڪردگي ۾ 75٪ بهتري ڏٺي جنهن کان پوءِ هڪ موازنہ ڪندڙ B1 مکسر ۾ 45٪ بهتري ڏٺي. ڪيس 1 ۾ سائن وکر ٽيسٽ جي حالتن هيٺ مکسرن جي هڪ سيريز تي وهڪري جي شرح سان هڪ بنيادي سائن ويو ريڊڪشن ٽيسٽ ڪئي وئي، صرف وهڪري جي شرح تبديل ٿي وئي. ڊيٽا ڏيکاري ٿي ته 0.25 کان 1 ملي ليٽر/منٽ تائين وهڪري جي شرح جي حد ۾، سائن ويو ۾ شروعاتي گهٽتائي ٽنهي ميڪسر جي مقدار لاءِ نسبتاً مستقل رهي. ٻن ننڍن حجم وارن ميڪسرن لاءِ، وهڪري جي شرح گهٽجڻ سان سائن ويوڊل ڪنٽرڪشن ۾ معمولي واڌ ٿيندي آهي، جيڪا ميڪسر ۾ سالوينٽ جي رهائش واري وقت ۾ واڌ جي ڪري متوقع آهي، جيڪا ڊفيوژن ميڪنگ کي وڌائڻ جي اجازت ڏئي ٿي. وهڪري جي گهٽتائي سان سائن ويو جي گھٽتائي وڌڻ جي اميد آهي. جڏهن ته، سڀ کان وڌيڪ سائن ويو بيس ايٽينيوشن سان سڀ کان وڏي ميڪسر حجم لاءِ، سائن ويو بيس ايٽينيوشن عملي طور تي تبديل نه ٿيو (تجرباتي غير يقيني صورتحال جي حد اندر)، قدرن سان 95٪ کان 98٪ تائين. چانور. 10. ڪيس 1 ۾ وهڪري جي شرح جي مقابلي ۾ سائن ويج جو بنيادي گهٽتائي. ٽيسٽ متغير وهڪري جي شرح سان سائن ٽيسٽ جهڙين حالتن ۾ ڪئي وئي، جنهن ۾ ايسٽونائيٽرائيل ۽ پاڻي جي 80/20 مرکب جو 80٪ ۽ 20 ايم ايم امونيم ايسٽيٽ جو 20٪ انجيڪشن ڪيو ويو.
پيٽنٽ ٿيل PerfectPeakTM ان لائن اسٽيٽڪ مکسرز جي نئين ترقي يافته رينج ٽن اندروني حجمن سان: 30 µl، 60 µl ۽ 90 µl گھڻن HPLC تجزين لاءِ گهربل حجم ۽ ميڪنگ ڪارڪردگي جي حد کي ڍڪيندي آهي جنهن کي بهتر ميڪنگ ۽ گهٽ ڊسپريشن فلورز جي ضرورت هوندي آهي. نئون اسٽيٽڪ مکسر نئين 3D پرنٽنگ ٽيڪنالاجي استعمال ڪندي اهو حاصل ڪري ٿو هڪ منفرد 3D ڍانچي ٺاهڻ لاءِ جيڪو بهتر هائيڊروڊائنامڪ اسٽيٽڪ مکسنگ فراهم ڪري ٿو جنهن ۾ اندروني مرکب جي في يونٽ حجم ۾ بنيادي شور ۾ سڀ کان وڌيڪ سيڪڙو گهٽتائي آهي. روايتي ميڪر جي اندروني حجم جو 1/3 استعمال ڪرڻ سان بنيادي شور 98٪ گهٽجي ٿو. اهڙا مکسر هڪ ٻئي سان ڳنڍيل ٽي-dimensional وهڪري چينلز تي مشتمل آهن جن ۾ مختلف ڪراس-سيڪشنل علائقن ۽ مختلف رستي جي ڊيگهه آهي جيئن مائع اندر پيچيده جاميٽري رڪاوٽن کي پار ڪري ٿو. اسٽيٽڪ مکسرز جو نئون خاندان مقابلي واري ميڪرز تي بهتر ڪارڪردگي فراهم ڪري ٿو، پر گهٽ اندروني حجم سان، نتيجي ۾ بهتر سگنل-کان-شور تناسب ۽ گهٽ مقدار جي حد، انهي سان گڏ اعلي حساسيت لاءِ بهتر چوٽي شڪل، ڪارڪردگي ۽ ريزوليوشن.
هن شماري ۾ ڪروميٽوگرافي - ماحول دوست آر پي-ايڇ پي ايل سي - تجزيو ۽ صفائي ۾ ايسٽونائيٽرائيل کي آئسوپروپنول سان تبديل ڪرڻ لاءِ ڪور شيل ڪروميٽوگرافي جو استعمال - نئين گئس ڪروميٽوگراف لاءِ…
بزنس سينٽر انٽرنيشنل ليب ميٽ لميٽيڊ اوڪ ڪورٽ سينڊريج پارڪ، پورٽرز ووڊ سينٽ البانس هرٽفورڊ شائر AL3 6PH برطانيه