Nature.com වෙත පිවිසීම ගැන ඔබට ස්තූතියි. ඔබ භාවිතා කරන බ්‍රව්සර් අනුවාදයේ CSS සඳහා සීමිත සහයක් ඇත. හොඳම අත්දැකීම සඳහා, ඔබ යාවත්කාලීන කළ බ්‍රව්සරයක් භාවිතා කරන ලෙස අපි නිර්දේශ කරමු (නැතහොත් Internet Explorer හි අනුකූලතා මාදිලිය අක්‍රිය කරන්න). මේ අතරතුර, අඛණ්ඩ සහාය සහතික කිරීම සඳහා, අපි විලාස සහ JavaScript නොමැතිව අඩවිය ප්‍රදර්ශනය කරන්නෙමු.
සිදුරු සහිත සිලිකා අංශු සාර්ව සිදුරු සහිත අංශු ලබා ගැනීම සඳහා සොල්-ජෙල් ක්‍රමයක් මගින් සකස් කරන ලදී. මෙම අංශු N-ෆීනයිල්මැලයිමයිඩ්-මෙතිල්වයිනයිලිසොසයනේට් (PMI) සහ ස්ටයිරීන් සමඟ ප්‍රතිවර්ත කළ හැකි එකතු කිරීමේ ඛණ්ඩන දාම හුවමාරුව (RAFT) බහුඅවයවීකරණය මගින් පොලිස්ටරීන් (PMP) ස්ථාවර අවධියේ N-ෆීනයිල්මැලයිමයිඩ් අන්තර්කරණය සකස් කිරීම මගින් ව්‍යුත්පන්න කරන ලදී. පටු සිදුරු සහිත මල නොබැඳෙන වානේ තීරු (100 × 1.8 mm id) පොහොර ඇසුරුම් මගින් ඇසුරුම් කරන ලදී. පෙප්ටයිඩ පහකින් (Gly-Tyr, Gly-Leu-Tyr, Gly-Gly-Tyr-Arg, Tyr-Ile-Gly-Ser-Arg, leucine enkephalin) වර්ණදේහ කාර්ය සාධනය) සහ මිනිස් සෙරුමය ඇල්බියුමින් (HAS) ට්‍රිප්සින් ජීර්ණයෙන් සමන්විත පෙප්ටයිඩ මිශ්‍රණයක PMP තීරු වෙන් කිරීම ඇගයීමට ලක් කරන ලදී. ප්‍රශස්ත එලියුෂන් තත්වයන් යටතේ, පෙප්ටයිඩ මිශ්‍රණයේ න්‍යායාත්මක තහඩු ගණන තහඩු 280,000/m² තරම් ඉහළ අගයක් ගනී. වෙන් කිරීමේ කාර්ය සාධනය සංසන්දනය කිරීමේදී වාණිජ Ascentis Express RP-Amide තීරුව සමඟ සංවර්ධනය කරන ලද තීරුවේ, PMP තීරුවේ වෙන් කිරීමේ කාර්ය සාධනය වෙන් කිරීමේ කාර්යක්ෂමතාව සහ විභේදනය අනුව වාණිජ තීරුවට වඩා උසස් බව නිරීක්ෂණය විය.
මෑත වසරවලදී, ජෛව ඖෂධ කර්මාන්තය වෙළඳපල කොටසෙහි සැලකිය යුතු වැඩිවීමක් සහිත පුළුල් වන ගෝලීය වෙළඳපොළක් බවට පත්ව ඇත. ජෛව ඖෂධ කර්මාන්තයේ පුපුරන සුලු වර්ධනයත් සමඟ1,2,3, පෙප්ටයිඩ සහ ප්‍රෝටීන විශ්ලේෂණය බෙහෙවින් අපේක්ෂා කෙරේ. ඉලක්කගත පෙප්ටයිඩයට අමතරව, පෙප්ටයිඩ සංස්ලේෂණය අතරතුර අපද්‍රව්‍ය කිහිපයක් ජනනය වන අතර, එමඟින් අපේක්ෂිත සංශුද්ධතාවයේ පෙප්ටයිඩ ලබා ගැනීම සඳහා වර්ණදේහ පිරිසිදු කිරීම අවශ්‍ය වේ. ශරීර තරල, පටක සහ සෛලවල ප්‍රෝටීන විශ්ලේෂණය සහ ගුනාංගීකරනය කිරීම අතිශයින්ම අභියෝගාත්මක කාර්යයකි, මන්ද තනි සාම්පලයක හඳුනාගත හැකි විභව විශේෂ විශාල සංඛ්‍යාවක් ඇත.ස්කන්ධ වර්ණාවලීක්ෂය පෙප්ටයිඩ සහ ප්‍රෝටීන් අනුක්‍රමණය සඳහා ඵලදායී මෙවලමක් වුවද, එවැනි සාම්පල එක් පාස් එකකින් ස්කන්ධ වර්ණාවලීක්ෂයට එන්නත් කළහොත්, වෙන්වීම සුදුසු නොවේ.MS විශ්ලේෂණයට පෙර ද්‍රව වර්ණදේහ (LC) වෙන් කිරීම් ක්‍රියාත්මක කිරීමෙන් මෙම ගැටළුව අවම කර ගත හැකි අතර, එමඟින් දී ඇති කාලයකදී ස්කන්ධ වර්ණාවලීක්ෂයට ඇතුළු වන විශ්ලේෂණ ගණන අඩු කරනු ඇත4,5,6. ඊට අමතරව, ද්‍රව අවධි වෙන් කිරීමේදී, විශ්ලේෂණ පටු කලාපවල අවධානය යොමු කළ හැකි අතර, එමඟින් මෙම විශ්ලේෂණ සාන්ද්‍රණය කළ හැකි අතර MS හඳුනාගැනීමේ සංවේදීතාව වැඩි දියුණු කිරීම. පසුගිය දශකය තුළ ද්‍රව වර්ණදේහ විද්‍යාව (LC) සැලකිය යුතු ලෙස දියුණු වී ඇති අතර ප්‍රෝටියෝමික් විශ්ලේෂණයේ ජනප්‍රිය තාක්‍ෂණයක් බවට පත්ව ඇත7,8,9,10.
ප්‍රතිලෝම-අදියර ද්‍රව වර්ණදේහ විද්‍යාව (RP-LC) ස්ථාවර අවධිය ලෙස ඔක්ටඩසයිල්-වෙනස් කරන ලද සිලිකා (ODS) භාවිතා කරමින් පෙප්ටයිඩ මිශ්‍රණ පිරිසිදු කිරීම සහ වෙන් කිරීම සඳහා බහුලව භාවිතා වේ11,12,13. කෙසේ වෙතත්, RP ස්ථාවර අවධීන් ඒවායේ සංකීර්ණ ව්‍යුහය සහ ඇම්ෆිෆිලික් ස්වභාවය නිසා පෙප්ටයිඩ සහ ප්‍රෝටීන සතුටුදායක ලෙස වෙන් කිරීමක් සපයන්නේ නැත14,15. එබැවින්, මෙම විශ්ලේෂණ සමඟ අන්තර් ක්‍රියා කිරීමට සහ රඳවා ගැනීමට ධ්‍රැවීය සහ ධ්‍රැවීය නොවන කොටස් සහිත පෙප්ටයිඩ සහ ප්‍රෝටීන විශ්ලේෂණය කිරීමට විශේෂයෙන් නිර්මාණය කරන ලද ස්ථාවර අවධීන් අවශ්‍ය වේ16. බහුමාධ්‍ය අන්තර්ක්‍රියා සපයන මිශ්‍ර-මාදිලි වර්ණදේහ විද්‍යාව, පෙප්ටයිඩ, ප්‍රෝටීන සහ අනෙකුත් සංකීර්ණ මිශ්‍රණ වෙන් කිරීම සඳහා RP-LC සඳහා විකල්පයක් විය හැකිය. මිශ්‍ර-මාදිලි ස්ථාවර අවධීන් කිහිපයක් සකස් කර ඇති අතර, මෙම අවධීන් සමඟ ඇසුරුම් කරන ලද තීරු පෙප්ටයිඩ සහ ප්‍රෝටීන වෙන් කිරීම් සඳහා භාවිතා කර ඇත17,18,19,20,21. මිශ්‍ර-මාදිලි ස්ථාවර අවධීන් (WAX/RPLC, HILIC/RPLC, ධ්‍රැවීය අන්තර්කාලනය/RPLC) වේ ධ්‍රැවීය සහ ධ්‍රැවීය නොවන කාණ්ඩ දෙකෙහිම පැවැත්ම නිසා පෙප්ටයිඩ සහ ප්‍රෝටීන් වෙන් කිරීම් සඳහා සුදුසු වේ22,23,24,25,26,27,28 .ඒ හා සමානව, සහසංයුජව බන්ධනය වූ ධ්‍රැවීය කාණ්ඩ සමඟ ධ්‍රැවීය අන්තර්කලාපන ස්ථිතික අවධීන් ධ්‍රැවීය සහ ධ්‍රැවීය නොවන විශ්ලේෂණ සඳහා හොඳ වෙන් කිරීමේ බලයක් සහ අද්විතීය තේරීමක් පෙන්නුම් කරයි, මන්ද වෙන්වීම විශ්ලේෂක සහ ස්ථිති අවධිය අතර අන්තර්ක්‍රියා මත රඳා පවතී. බහුමාධ්‍ය අන්තර්ක්‍රියා 29, 30, 31, 32. මෑතකදී, ෂැං සහ වෙනත් අය. 30 ඩොඩෙසිල්-අවසන් කරන ලද පොලිඇමයින් ස්ථාවර අවධියක් සකස් කර හයිඩ්‍රොකාබන, විෂාදනාශක, ෆ්ලේවනොයිඩ්, නියුක්ලියෝසයිඩ්, එස්ටජන් සහ තවත් විශ්ලේෂණ කිහිපයක් සාර්ථකව වෙන් කළේය. ධ්‍රැවීය අන්තර්කැලේටරයේ ධ්‍රැවීය සහ ධ්‍රැවීය නොවන කාණ්ඩ දෙකම ඇත, එබැවින් එය ජලභීතික සහ ජලාකර්ෂණීය කොටස් දෙකම ඇති පෙප්ටයිඩ සහ ප්‍රෝටීන වෙන් කිරීමට භාවිතා කළ හැකිය. ධ්‍රැවීය-කාවැද්දූ තීරු (උදා: ඇමයිඩ්-කාවැද්දූ C18 තීරු) වාණිජමය වශයෙන් Ascentis Express RP-Amide තීරු යන වෙළඳ නාමය යටතේ ලබා ගත හැකි නමුත් මෙම තීරු ඇමයින් 33 විශ්ලේෂණය සඳහා පමණක් භාවිතා කරයි.
වත්මන් අධ්‍යයනයේ දී, HSA හි පෙප්ටයිඩ සහ ට්‍රිප්සින් ජීර්ණ වෙන් කිරීම සඳහා ධ්‍රැවීය-කාවැද්දූ ස්ථාවර අවධියක් (N-ෆීනයිල්මැලයිමයිඩ්-කාවැද්දූ පොලිස්ටිරීන්) සකස් කර ඇගයීමට ලක් කරන ලදී. ස්ථාවර අවධිය පහත උපාය මාර්ගය භාවිතා කරමින් සකස් කරන ලදී. සකස් කිරීමේ ප්‍රොටෝකෝලයට යම් යම් වෙනස්කම් සහිතව අපගේ පෙර ප්‍රකාශනයේ දී ඇති ක්‍රියා පටිපාටියට අනුව සිදුරු සහිත සිලිකා අංශු සකස් කරන ලදී. යූරියා, පොලිඑතිලීන් ග්ලයිකෝල් (PEG), TMOS, ජල ඇසිටික් අම්ලය අනුපාතය විශාල සිදුරු ප්‍රමාණයකින් යුත් සිලිකා අංශු සකස් කිරීම සඳහා සකස් කරන ලදී. දෙවනුව, නව ලිගන්ඩයක්, ෆීනයිල්මැලයිමයිඩ්-මෙතිල් වයිනයිල් අයිසොසයනේට්, සංස්ලේෂණය කර ධ්‍රැවීය කාවැද්දූ ස්ථාවර අවධියක් සකස් කිරීම සඳහා සිලිකා අංශු ව්‍යුත්පන්න කිරීමට භාවිතා කරන ලදී. ප්‍රතිඵලයක් ලෙස ස්ථාවර අවධිය ප්‍රශස්ත ඇසුරුම් යෝජනා ක්‍රමය භාවිතා කරමින් මල නොබැඳෙන වානේ තීරුවකට (100 × 1.8 මි.මී. id) ඇසුරුම් කරන ලදී. තීරුව තුළ සමජාතීය ඇඳක් සෑදීම සහතික කිරීම සඳහා තීරු ඇසුරුමට යාන්ත්‍රික කම්පනය සමඟ සහාය වේ. පෙප්ටයිඩ පහකින් සමන්විත පෙප්ටයිඩ මිශ්‍රණ ඇසුරුම් කළ තීරු වෙන් කිරීම ඇගයීමට; (Gly-Tyr, Gly-Leu-Tyr, Gly-Gly-Tyr-Arg, Tyr-Ile-Gly-Ser-Arg, Leucine Enkephalin) සහ මිනිස් සෙරුම් ඇල්බියුමින් (HAS) හි ට්‍රිප්සින් ජීර්ණය. HSA හි පෙප්ටයිඩ මිශ්‍රණය සහ ට්‍රිප්සින් ජීර්ණය හොඳ විභේදනයකින් සහ කාර්යක්ෂමතාවයකින් වෙන් වන බව නිරීක්ෂණය විය. PMP තීරුවේ වෙන් කිරීමේ කාර්ය සාධනය Ascentis Express RP-Amide තීරුවේ ක්‍රියාකාරිත්වය සමඟ සංසන්දනය කරන ලදී. PMP තීරුවේ පෙප්ටයිඩ සහ ප්‍රෝටීන දෙකම හොඳින් විසඳා ඇති බව නිරීක්ෂණය කරන ලද අතර එය Ascentis Express RP-Amide තීරුවට වඩා කාර්යක්ෂම විය.
PEG (පොලිඑතිලීන් ග්ලයිකෝල්), යූරියා, ඇසිටික් අම්ලය, ට්‍රයිමෙතොක්සි ඕතොසිලිකේට් (TMOS), ට්‍රයිමෙතිල් ක්ලෝරෝසිලේන් (TMCS), ට්‍රිප්සින්, මානව සෙරුම් ඇල්බියුමින් (HSA), ඇමෝනියම් ක්ලෝරයිඩ්, යූරියා, හෙක්සේන් මෙතිල්ඩිසිලාසේන් (HMDS), මෙතක්‍රිලොයිල් ක්ලෝරයිඩ් (MC), ස්ටයිරීන්, 4-හයිඩ්‍රොක්සි-ටෙම්පෝ, බෙන්සොයිල් පෙරොක්සයිඩ් (BPO), HPLC ශ්‍රේණියේ ඇසිටොනයිට්‍රයිල් (ACN), මෙතනෝල්, 2-ප්‍රොපනෝල් සහ ඇසිටෝන් සිග්මා-ඇල්ඩ්‍රිච් (ශාන්ත ලුවී, MO, ඇමරිකා එක්සත් ජනපදය) වෙතින් මිලදී ගන්නා ලදී.
යූරියා (ග්‍රෑම් 8), පොලිඑතිලීන් ග්ලයිකෝල් (ග්‍රෑම් 8) සහ 0.01 N ඇසිටික් අම්ලය මිලි ලීටර් 8 ක් මිශ්‍රණයක් විනාඩි 10 ක් කලවම් කර, පසුව අයිස්-සීතල තත්වයන් යටතේ TMOS මිලි ලීටර් 24 ක් එයට එකතු කරන ලදී. ප්‍රතික්‍රියා මිශ්‍රණය 40°C දී පැය 6 ක් රත් කර, පසුව 120°C දී පැය 8 ක් මල නොබැඳෙන වානේ ස්වයංක්‍රීය ක්ලේව් එකක රත් කරන ලදී. ජලය වත් කර ඉතිරි ද්‍රව්‍ය 70°C දී පැය 12 ක් වියළන ලදී. වියළන ලද මෘදු ස්කන්ධය උඳුනක සුමටව අඹරා 550°C දී පැය 12 ක් කැල්සින් කරන ලදී. අංශු ප්‍රමාණය, සිදුරු ප්‍රමාණය සහ මතුපිට ප්‍රදේශයේ ප්‍රජනන හැකියාව පරීක්ෂා කිරීම සඳහා කාණ්ඩ තුනක් සකස් කර සංලක්ෂිත කරන ලදී.
පූර්ව සංස්ලේෂණය කරන ලද ලිගන්ඩ් ෆීනයිල්මැලයිමයිඩ්-මෙතිල්වයිනයිලිසොසයනේට් (PCMP) සමඟ සිලිකා අංශු මතුපිට වෙනස් කිරීමෙන් පසුව ස්ටයිරීන් සමඟ රේඩියල් බහුඅවයවීකරණය කිරීමෙන්, ධ්‍රැවීය කාණ්ඩ අඩංගු සංයෝගයක් සකස් කරන ලදී. සමස්ථ සහ පොලිස්ටිරීන් දාම සඳහා ස්ථාවර අවධිය. සකස් කිරීමේ ක්‍රියාවලිය පහත විස්තර කෙරේ.
වියළි ටොලුයින් වල N-ෆීනයිල්මැලයිමයිඩ් (200 mg) සහ මෙතිල් වයිනයිල් අයිසොසයනේට් (100 mg) දියකර, ෆීනයිල්මැලයිමයිඩ්-මෙතිල් වයිනයිල් අයිසොසයනේට් කොපොලිමර් (PMCP) සකස් කිරීම සඳහා ප්‍රතික්‍රියා ප්ලාස්කුවට 2,2′-අසොයිසොබියුටිරොනිට්‍රයිල් (AIBN) 0.1 mL එකතු කරන ලදී. මිශ්‍රණය 60°C දී පැය 3ක් රත් කර, පෙරා 40°C දී උඳුනක පැය 3ක් වියළා ගන්නා ලදී.
වියළි සිලිකා අංශු (ග්‍රෑම් 2) වියළි ටොලුයින් (මිලි ලීටර් 100) තුළ විසුරුවා හැර, කලවම් කර මිලි ලීටර් 500 ක වටකුරු පතුලේ ෆ්ලාස්කුවක විනාඩි 10 ක් ධ්වනිකරණය කරන ලදී. PMCP (මිලිග්‍රෑම් 10) ටොලුයින් තුළ දිය කර, බිංදු පුනීලයක් හරහා ප්‍රතික්‍රියා ෆ්ලාස්කුවට බිංදු ආකාරයෙන් එකතු කරන ලදී. මිශ්‍රණය පැය 8 ක් 100°C දී ප්‍රත්‍යාවර්තනය කර, පෙරීම කර ඇසිටෝන් සමඟ සෝදා 60°C දී පැය 3 ක් වියළන ලදී. ඉන්පසු, PMCP-බන්ධිත සිලිකා අංශු (ග්‍රෑම් 100) ටොලුයින් (මිලි ලීටර් 200) තුළ දිය කර, 4-හයිඩ්‍රොක්සි-ටෙම්පෝ (මිලි ලීටර් 2) උත්ප්‍රේරකයක් ලෙස ඩයිබියුටයිල්ටින් ඩයිලෝරේට් 100 µL ඉදිරියේ එකතු කරන ලදී. මිශ්‍රණය පැය 8 ක් 50°C දී කලවම් කර, පෙරීම කර පැය 3 ක් 50°C දී වියළන ලදී.
ස්ටයිරීන් (1 mL), බෙන්සොයිල් පෙරොක්සයිඩ් BPO (0.5 mL), සහ TEMPO-PMCP-අමුණා ඇති සිලිකා අංශු (1.5 g) ටොලුයින් තුළ විසුරුවා හැර නයිට්‍රජන් සමඟ පිරිසිදු කරන ලදී. ස්ටයිරීන් බහුඅවයවීකරණය පැය 12 ක් 100°C දී සිදු කරන ලදී. ප්‍රතිඵලයක් ලෙස නිෂ්පාදිතය මෙතනෝල් වලින් සෝදා 60°C දී එක රැයකින් වියළන ලදී. සමස්ත ප්‍රතික්‍රියා යෝජනා ක්‍රමය රූප සටහන 1 හි දක්වා ඇත.
10-3 Torr ට අඩු අවශේෂ පීඩනයක් ලබා ගැනීම සඳහා සාම්පල පැය 1 ක් 393 K දී වායු ඉවත් කරන ලදී. P/P0 = 0.99 සාපේක්ෂ පීඩනයකදී අවශෝෂණය කරන ලද N2 ප්‍රමාණය මුළු සිදුරු පරිමාව තීරණය කිරීම සඳහා භාවිතා කරන ලදී. හිස් සහ ලිගන්ඩ්-බන්ධිත සිලිකා අංශුවල රූප විද්‍යාව ස්කෑනිං ඉලෙක්ට්‍රෝන අන්වීක්ෂයකින් (හිටාචි හයි ටෙක්නොලොජීස්, ටෝකියෝ, ජපානය) පරීක්ෂා කරන ලදී. වියළි සාම්පල (හිස් සිලිකා සහ ලිගන්ඩ්-බන්ධිත සිලිකා අංශු) ඇලවුම් කාබන් පටියක් භාවිතයෙන් ඇලුමිනියම් තීරුවක් මත තබා ඇත. Q150T ස්පුටර් කෝටරයක් ​​භාවිතයෙන් සාම්පල මත රන් ආලේප කරන ලද අතර, සාම්පල මත 5 nm Au ස්ථරයක් තැන්පත් කරන ලදී. මෙය අඩු වෝල්ටීයතා භාවිතා කරමින් ක්‍රියාවලි කාර්යක්ෂමතාව වැඩි දියුණු කරන අතර සියුම් ධාන්‍ය, සීතල ඉසීම සපයයි. තාප ඉලෙක්ට්‍රෝනයක් (වෝල්තම්, MA, USA) මූලද්‍රව්‍ය විශ්ලේෂණය සඳහා ෆ්ලෑෂ් EA1112 මූලද්‍රව්‍ය විශ්ලේෂකයක් භාවිතා කරන ලදී. අංශු ප්‍රමාණයේ ව්‍යාප්තිය ලබා ගැනීම සඳහා මැල්වර්න් (වෝර්සෙස්ටර්ෂයර්, UK) මාස්ටර්සයිසර් 2000 අංශු ප්‍රමාණයේ විශ්ලේෂකයක් භාවිතා කරන ලදී. නිරුවත් සිලිකා අංශු සහ ලිගන්ඩ්-බන්ධිත සිලිකා අංශු (මිලිග්‍රෑම් 5 බැගින්) අයිසොප්‍රොපනෝල් මිලි ලීටර් 5 ක විසුරුවා හැර, මිනිත්තු 10 ක් සඳහා සොනිකේට් කර, මිනිත්තු 5 ක් සඳහා සුළි සුළඟට දමා, මාස්ටර්සයිසර් හි දෘශ්‍ය බංකුව මත තබන ලදී. තාප ගුරුත්වාකර්ෂණමිතික විශ්ලේෂණය 30 සිට 800 °C දක්වා උෂ්ණත්ව පරාසයක් තුළ මිනිත්තුවකට 5 °C අනුපාතයකින් සිදු කරන ලදී.
(100 × 1.8 මි.මී. id) මානයන්ගෙන් යුත් වීදුරු ආලේපිත මල නොබැඳෙන වානේ පටු සිදුරු සහිත තීරු, ස්ලරි ඇසුරුම් ක්‍රමය භාවිතයෙන් ඇසුරුම් කරන ලද අතර, Ref හි භාවිතා කරන ලද ක්‍රියා පටිපාටියම යොදන ලදී. 31. 1 µm ෆ්‍රිට් එකක් අඩංගු පිටවන සවි කිරීමක් සහිත මල නොබැඳෙන වානේ තීරුවක් (වීදුරු ආලේපිත, 100 × 1.8 mm id) ස්ලරි පැකර් එකකට (ඇල්ටෙක් ඩියර්ෆීල්ඩ්, IL, USA) සම්බන්ධ කරන ලදී. මෙතනෝල් මිලි ලීටර් 1.2 ක ස්ථාවර අදියර මිලිග්‍රෑම් 150 ක් අත්හිටුවීමෙන් ස්ථාවර අදියර පොහොරක් සකස් කර ගබඩා තීරුවට යවන්න. මෙතනෝල් ස්ලරි ද්‍රාවකය මෙන්ම ප්‍රචාලන ද්‍රාවකය ලෙසද භාවිතා කරන ලදී. මිනිත්තු 10 ක් සඳහා 100 MP, මිනිත්තු 15 ක් සඳහා 80 MP සහ මිනිත්තු 30 ක් සඳහා 60 MP පීඩන යෙදීමෙන් තීරුව අනුපිළිවෙලින් පුරවන්න. ඇසුරුම් කිරීමේදී, තීරුවේ ඒකාකාර ඇසුරුම් කිරීම සහතික කිරීම සඳහා GC තීරු ෂේකර් දෙකක් (ඇල්ටෙක්, ඩියර්ෆීල්ඩ්, IL, ඇමරිකා එක්සත් ජනපදය) සමඟ යාන්ත්‍රික කම්පනය යොදන ලදී. ස්ලරි පැකර් වසා තීරුව තුළ ඇති ඕනෑම හානියක් වැළැක්වීම සඳහා පීඩනය සෙමින් මුදා හරින්න. ස්ලරි ඇසුරුම් ඒකකයෙන් තීරුව විසන්ධි කර එහි ක්‍රියාකාරිත්වය පරීක්ෂා කිරීම සඳහා තවත් සවි කිරීමක් ඇතුල්වීමට සහ LC පද්ධතියට සම්බන්ධ කරන්න.
LC පොම්පයක් (10AD Shimadzu, ජපානය), 50nL එන්නත් ලූපයක් සහිත ඉන්ජෙක්ටරයක් ​​(Valco (USA) C14 W.05), පටල ඩිගසර් (Shimadzu DGU-14A), UV-VIS කේශනාලිකා කවුළුවක් ඉදිකරන ලදී. විශේෂ µLC උපාංග අනාවරකය (UV-2075) සහ වීදුරු ආලේපිත ක්ෂුද්‍ර තීරු. අමතර තීරු කලාප පුළුල් කිරීමේ බලපෑම අවම කිරීම සඳහා ඉතා පටු සහ කෙටි සම්බන්ධක නල භාවිතා කරන්න. ඇසුරුම් කිරීමෙන් පසු, කේශනාලිකා (50 μm id 365 සහ අඩු කරන සංගම් කේශනාලිකා (50 μm) අඩු කරන සංගම් කේශනාලිකා (50 μm) අඩු කරන සංගම් කේශනාලිකා (Multichro 2000 මෘදුකාංගය භාවිතයෙන් ස්ථාපනය කරන ලදී. 254 nm හි අධීක්ෂණය UV අවශෝෂණය සඳහා විශ්ලේෂක පරීක්ෂා කරන ලදී. OriginPro8 (Northampton, MA) විසින් වර්ණදේහ දත්ත විශ්ලේෂණය කරන ලදී.
මිනිස් සෙරුමයෙන් ලබාගත් ඇල්බියුමින්, ලයොෆිලීකරණය කළ කුඩු, ≥ 96% (ඇගරෝස් ජෙල් ඉලෙක්ට්‍රෝෆොරසිස්) 3 mg ට්‍රිප්සින් (1.5 mg), 4.0 M යූරියා (1 mL) සහ 0.2 M ඇමෝනියම් බයිකාබනේට් (1 mL) සමඟ මිශ්‍ර කර ඇත. ද්‍රාවණය විනාඩි 10 ක් කලවම් කර පැය 6 ක් 37°C ජල ස්නානයක තබා, පසුව 0.1% TFA මිලි ලීටර් 1 කින් නිවා දමන ලදී. ද්‍රාවණය පෙරීම කර 4°C ට අඩුවෙන් ගබඩා කරන්න.
පෙප්ටයිඩ මිශ්‍රණ සහ HSA ට්‍රිප්සින් ජීර්ණ වෙන් කිරීම PMP තීරු මත වෙන වෙනම ඇගයීමට ලක් කරන ලදී. PMP තීරුව මගින් HSA හි පෙප්ටයිඩ මිශ්‍රණය සහ ට්‍රිප්සින් ජීර්ණය වෙන් කිරීම පරීක්ෂා කර ප්‍රතිඵල Ascentis Express RP-Amide තීරුවට සංසන්දනය කරන්න. න්‍යායාත්මක තහඩු අංකය පහත පරිදි ගණනය කෙරේ:
හිස් සිලිකා අංශු සහ ලිගන්ඩ්-බන්ධිත සිලිකා අංශු වල SEM රූප රූපය 2 හි දක්වා ඇත. හිස් සිලිකා අංශු (A, B) වල SEM රූප අපගේ පෙර අධ්‍යයනයන්ට වෙනස්ව, මෙම අංශු ගෝලාකාර වන අතර එහි අංශු දිගටි හෝ අක්‍රමවත් සමමිතියක් ඇති බව පෙන්නුම් කරයි. ලිගන්ඩ්-බන්ධිත සිලිකා අංශු (C, D) මතුපිට හිස් සිලිකා අංශු වලට වඩා සුමට වන අතර එය සිලිකා අංශු මතුපිට ඇති පොලිස්ටිරින් දාම ආලේපනය නිසා විය හැකිය.
හිස් සිලිකා අංශු (A, B) සහ ලිගන්ඩ්-බන්ධිත සිලිකා අංශු (C, D) වල ඉලෙක්ට්‍රෝන අන්වීක්ෂ රූප පරිලෝකනය කිරීම.
හිස් සිලිකා අංශු සහ ලිගන්ඩ්-බන්ධිත සිලිකා අංශුවල අංශු ප්‍රමාණයේ ව්‍යාප්තිය රූපය 3(A) හි දක්වා ඇත. පරිමාව මත පදනම් වූ අංශු ප්‍රමාණයේ ව්‍යාප්ති වක්‍ර මගින් රසායනික වෙනස් කිරීමෙන් පසු සිලිකා අංශුවල ප්‍රමාණය වැඩි වූ බව පෙන්නුම් කළේය (රූපය 3A). වත්මන් අධ්‍යයනයෙන් සහ පෙර අධ්‍යයනයෙන් සිලිකා අංශුවල අංශු ප්‍රමාණයේ ව්‍යාප්ති දත්ත වගුව 1(A) හි සංසන්දනය කර ඇත. PMP හි පරිමාව මත පදනම් වූ අංශු ප්‍රමාණය, d(0.5), ad(0.5) අගය 3.05 μm (පොලිස්ටිරින්-බන්ධිත සිලිකා අංශු) සමඟ අපගේ පෙර අධ්‍යයනයට සාපේක්ෂව 3.36 μm වේ.34. ප්‍රතික්‍රියා මිශ්‍රණයේ PEG, යූරියා, TMOS සහ ඇසිටික් අම්ලයේ විවිධ අනුපාත හේතුවෙන් මෙම කණ්ඩායමට අපගේ පෙර අධ්‍යයනයට සාපේක්ෂව පටු අංශු ප්‍රමාණයේ ව්‍යාප්තියක් තිබුණි.PMP අවධියේ අංශු ප්‍රමාණය අප කලින් අධ්‍යයනය කළ පොලිස්ටිරින්-බන්ධිත සිලිකා අංශු අවධියට වඩා තරමක් විශාලය.මෙයින් අදහස් කරන්නේ ස්ටයිරීන් සමඟ සිලිකා අංශු මතුපිට ක්‍රියාකාරීත්වය සිලිකා මතුපිට මත පොලිතීන් තට්ටුවක් (0.97 µm) පමණක් තැන්පත් කර ඇති බවයි, නමුත් PMP අදියරේදී ස්ථරයේ ඝණකම 1.38 µm විය.
හිස් සිලිකා අංශු සහ ලිගන්ඩ්-බන්ධිත සිලිකා අංශුවල අංශු ප්‍රමාණයේ ව්‍යාප්තිය (A) සහ සිදුරු ප්‍රමාණයේ ව්‍යාප්තිය (B).
වත්මන් අධ්‍යයනයේ සිලිකා අංශුවල සිදුරු ප්‍රමාණය, සිදුරු පරිමාව සහ මතුපිට ප්‍රමාණය වගුව 1(B) හි දක්වා ඇත. හිස් සිලිකා අංශු සහ ලිගන්ඩ්-බන්ධිත සිලිකා අංශු වල PSD පැතිකඩ රූපය 3(B) හි දක්වා ඇත. ප්‍රතිඵල අපගේ පෙර අධ්‍යයනයට සැසඳිය හැකිය. හිස් සහ ලිගන්ඩ්-බන්ධිත සිලිකා අංශුවල සිදුරු ප්‍රමාණය පිළිවෙලින් 310 සහ 241 වන අතර, එයින් පෙන්නුම් කරන්නේ 1(B) වගුවේ දැක්වෙන පරිදි රසායනික වෙනස් කිරීමෙන් පසු සිදුරු ප්‍රමාණය 69 කින් අඩු වන බවත්, වක්‍රයේ වෙනස රූපය 3(B) හි දක්වා ඇති බවත්ය. ඒ හා සමානව, රසායනික වෙනස් කිරීමෙන් පසු සිලිකා අංශුවල සිදුරු පරිමාව 0.67 සිට 0.58 cm3/g දක්වා අඩු විය. දැනට අධ්‍යයනය කර ඇති සිලිකා අංශුවල නිශ්චිත මතුපිට ප්‍රමාණය 116 m2/g වන අතර එය අපගේ පෙර අධ්‍යයනයට (124 m2/g) සැසඳිය හැකිය. වගුව 1(B) හි පෙන්වා ඇති පරිදි, සිලිකා අංශුවල මතුපිට ප්‍රමාණය (m2/g) ද 116 m2/g සිට රසායනික වෙනස් කිරීමෙන් පසු 105 m2/g.
ස්ථාවර අවධියේ මූලද්‍රව්‍ය විශ්ලේෂණයේ ප්‍රතිඵල වගුව 2 හි දක්වා ඇත. වත්මන් ස්ථාවර අවධියේ කාබන් පැටවීම 6.35% ක් වන අතර එය අපගේ පෙර අධ්‍යයනයේ කාබන් පැටවීමට වඩා අඩුය (පොලිස්ටිරින් බන්ධිත සිලිකා අංශු, පිළිවෙලින් 7.93% 35 සහ 10.21%) 42. වත්මන් ස්ථාවර අවධියේ කාබන් පැටවීම අඩුය, මන්ද වත්මන් SP සකස් කිරීමේදී, ස්ටයිරීන් වලට අමතරව, ෆීනයිල්මැලයිමයිඩ්-මෙතිල්වයිනයිලිසොසයනේට් (PCMP) සහ 4-හයිඩ්‍රොක්සි-ටෙම්පෝ වැනි සමහර ධ්‍රැවීය ලිගන්ඩ් භාවිතා කරන ලදී. වත්මන් ස්ථාවර අවධියේ නයිට්‍රජන් බර ප්‍රතිශතය 2.21% ක් වන අතර, පෙර අධ්‍යයනයන්හි නයිට්‍රජන් බරින් 0.1735 සහ 0.85% ට සාපේක්ෂව. මෙයින් අදහස් කරන්නේ ෆීනයිල්මැලයිමයිඩ් නිසා වත්මන් ස්ථාවර අවධියේදී නයිට්‍රජන් හි wt % වැඩි බවයි. ඒ හා සමානව, නිෂ්පාදන (4) සහ (5) වල කාබන් පැටවීම 2.7% ක් වූ අතර පිළිවෙලින් 2.9% ක් වූ අතර, අවසාන නිෂ්පාදනයේ (6) කාබන් පැටවීම 6.35% ක් වූ අතර, වගුව 2 හි දක්වා ඇත. බර අඩු වීම PMP ස්ථාවර අවධිය සමඟ පරීක්ෂා කරන ලද අතර, TGA වක්‍රය රූපය 4 හි දක්වා ඇත. TGA වක්‍රය 8.6% ක බර අඩු වීමක් පෙන්නුම් කරයි, එය කාබන් පැටවීම (6.35%) සමඟ හොඳ එකඟතාවයකින් යුක්ත වන අතර මන්ද ලිගන්ඩ් වල C පමණක් නොව N, O සහ H ද අඩංගු වේ.
සිලිකා අංශු මතුපිට වෙනස් කිරීම සඳහා ෆීනයිල්මැලයිමයිඩ්-මෙතිල්වයිනයිලිසොසයනේට් ලිගන්ඩ් තෝරා ගනු ලැබුවේ එයට ධ්‍රැවීය ෆීනයිල්මැලයිමයිඩ් කාණ්ඩ සහ වයිනයිලිසොසයනේට් කාණ්ඩ ඇති බැවිනි. වයිනයිල් අයිසොසයනේට් කාණ්ඩවලට සජීවී රැඩිකල් බහුඅවයවීකරණය මගින් ස්ටයිරීන් සමඟ තවදුරටත් ප්‍රතික්‍රියා කළ හැකිය. දෙවන හේතුව නම්, විශ්ලේෂකය සමඟ මධ්‍යස්ථ අන්තර්ක්‍රියාවක් ඇති සහ විශ්ලේෂකය සහ ස්ථාවර අවධිය අතර ශක්තිමත් විද්‍යුත් ස්ථිතික අන්තර්ක්‍රියාවක් නොමැති කණ්ඩායමක් ඇතුළු කිරීමයි, මන්ද ෆීනයිල්මැලයිමයිඩ් කොටසට සාමාන්‍ය pH අගයේදී අථත්‍ය ආරෝපණයක් නොමැති බැවිනි. ස්ථාවර අවධියේ ධ්‍රැවීයතාව ප්‍රශස්ත ස්ටයිරීන් ප්‍රමාණය සහ නිදහස් රැඩිකල් බහුඅවයවීකරණයේ ප්‍රතික්‍රියා කාලය මගින් පාලනය කළ හැකිය. ප්‍රතික්‍රියාවේ අවසාන පියවර (නිදහස්-රැඩිකල් බහුඅවයවීකරණය) ඉතා වැදගත් වන අතර ස්ථාවර අවධියේ ධ්‍රැවීයතාව වෙනස් කළ හැකිය. මෙම ස්ථාවර අදියරවල කාබන් පැටවීම පරීක්ෂා කිරීම සඳහා මූලද්‍රව්‍ය විශ්ලේෂණය සිදු කරන ලදී. ස්ටයිරීන් ප්‍රමාණය සහ ප්‍රතික්‍රියා කාලය වැඩි කිරීම ස්ථාවර අවධියේ කාබන් පැටවීම වැඩි කරන බව නිරීක්ෂණය විය සහ අනෙක් අතට. විවිධ සාන්ද්‍රණයන් සහිත ස්ටයිරීන් සමඟ සකස් කරන ලද SP වලට විවිධ කාබන් පැටවීම් ඇත. නැවතත්, මෙම ස්ථාවර අදියර මල නොබැඳෙන වානේ තීරු වලට පටවන්න. සහ ඒවායේ වර්ණදේහ ක්‍රියාකාරිත්වය පරීක්ෂා කරන්න (වරණීයතාව, විභේදනය, N අගය, ආදිය). මෙම අත්හදා බැලීම් මත පදනම්ව, පාලිත ධ්‍රැවීයතාව සහ හොඳ විශ්ලේෂක රඳවා තබා ගැනීම සහතික කිරීම සඳහා PMP ස්ථාවර අවධිය සකස් කිරීම සඳහා ප්‍රශස්ත සූත්‍රගත කිරීමක් තෝරා ගන්නා ලදී.
ජංගම අවධියක් භාවිතා කරමින් PMP තීරුවක් භාවිතයෙන් පෙප්ටයිඩ මිශ්‍රණ පහක් (Gly-Tyr, Gly-Leu-Tyr, Gly-Gly-Tyr-Arg, Tyr-Ile-Gly-Ser-Arg, leucine enkephalin) ද ඇගයීමට ලක් කරන ලදී; 80 μL/min ප්‍රවාහ අනුපාතයකින් 60/40 (v/v) ඇසිටොනයිට්‍රයිල්/ජලය (0.1% TFA). ප්‍රශස්ත අපද්‍රව්‍ය ඉවත් කිරීමේ තත්වයන් යටතේ, තීරුවකට න්‍යායාත්මක තහඩු අංකය (N) (100 × 1.8 mm id) 20,000 ± 100 (තහඩු 200,000/m²) වේ. වගුව 3 PMP තීරු තුන සඳහා N අගයන් ලබා දෙන අතර වර්ණදේහ රූපය 5A හි දක්වා ඇත. ඉහළ ප්‍රවාහ අනුපාතයකින් (700 μL/min) PMP තීරුවක වේගවත් විශ්ලේෂණය, මිනිත්තුවක් තුළ පෙප්ටයිඩ පහක් ඉවත් කරන ලදී, N අගයන් ඉතා හොඳ විය, තීරුවකට 13,500 ± 330 (100 × 1.8 mm id), තහඩු 135,000/m ට අනුරූප වේ (රූපය 5B). සමාන ප්‍රමාණයේ තීරු තුනක් (100 × 1.8 mm id) PMP ස්ථාවර අවධියේ විවිධ කොටස් තුනකින් ඇසුරුම් කරන ලදී. ප්‍රජනන හැකියාව පරීක්ෂා කරන්න. එක් එක් තීරුව සඳහා විශ්ලේෂණ සාන්ද්‍රණය ප්‍රශස්ත එලියුෂන් තත්ත්වයන් සහ න්‍යායාත්මක තහඩු N ගණන සහ එක් එක් තීරුවේ එකම පරීක්ෂණ මිශ්‍රණය වෙන් කිරීම සඳහා රඳවා ගැනීමේ කාලය භාවිතා කරමින් වාර්තා කරන ලදී. PMP තීරු සඳහා ප්‍රජනන හැකියාව දත්ත 4 වගුවේ දක්වා ඇත. PMP තීරුවේ ප්‍රජනන හැකියාව 3 වගුවේ දක්වා ඇති පරිදි ඉතා අඩු %RSD අගයන් සමඟ හොඳින් සහසම්බන්ධ වේ.
PMP තීරුව (B) සහ Ascentis Express RP-Amide තීරුව (A) මත පෙප්ටයිඩ මිශ්‍රණය වෙන් කිරීම; ජංගම අවධිය 60/40 ACN/H2O (TFA 0.1%), PMP තීරු මානයන් (100 × 1.8 mm id); විශ්ලේෂණාත්මක සංයෝගවල ඉවත් කිරීමේ අනුපිළිවෙල: 1 (Gly-Tyr), 2 (Gly-Leu-Tyr), 3 (Gly-Gly-Tyr-Arg), 4 (Tyr-Ile-Gly-Ser-Arg) සහ 5 (ලියුසීන්) අම්ලය එන්කෙෆලින්)).
ඉහළ කාර්යසාධනයක් සහිත ද්‍රව වර්ණදේහ විද්‍යාවේදී මිනිස් සෙරුම් ඇල්බියුමින් වල ට්‍රිප්ටික් ජීර්ණ වෙන් කිරීම සඳහා PMP තීරුවක් (100 × 1.8 mm id) ඇගයීමට ලක් කරන ලදී. රූපය 6 හි ඇති වර්ණදේහයෙන් පෙන්නුම් කරන්නේ නියැදිය හොඳින් වෙන් වී ඇති බවත් විභේදනය ඉතා හොඳ බවත්ය. HSA ජීර්ණ 100 µL/min ප්‍රවාහ අනුපාතයක්, ජංගම අවධිය 70/30 ඇසිටොනයිට්‍රයිල්/ජලය සහ 0.1% TFA භාවිතා කරමින් විශ්ලේෂණය කරන ලදී. වර්ණදේහයේ (රූපය 6) පෙන්වා ඇති පරිදි, HSA ජීර්ණය පෙප්ටයිඩ 17 ට අනුරූප වන කඳු මුදුන් 17 කට බෙදා ඇත. HSA ජීර්ණයේ එක් එක් උච්චයේ වෙන් කිරීමේ කාර්යක්ෂමතාව ගණනය කරන ලද අතර අගයන් 5 වගුවේ දක්වා ඇත.
HSA (100 × 1.8 mm id) හි ට්‍රිප්ටික් ජීර්ණයක් PMP තීරුවක් මත වෙන් කරන ලදී; ප්‍රවාහ අනුපාතය (100 µL/min), ජංගම අවධිය 60/40 ඇසිටොනයිට්‍රයිල්/ජලය 0.1% TFA සමඟ.
මෙහි L යනු තීරු දිග, η යනු ජංගම අවධියේ දුස්ස්රාවිතතාවය, ΔP යනු තීරු පසුපස පීඩනය සහ u යනු ජංගම අවධියේ රේඛීය ප්‍රවේගයයි. PMP තීරුවේ පාරගම්යතාව 2.5 × 10-14 m2, ප්‍රවාහ අනුපාතය 25 μL/min වූ අතර 60/40 v/v ACN/ජලය භාවිතා කරන ලදී. PMP තීරුවේ (100 × 1.8 mm id) පාරගම්යතාව අපගේ පෙර අධ්‍යයනයට සමාන විය Ref.34. මතුපිටින් සිදුරු සහිත අංශු වලින් පිරී ඇති තීරුවේ පාරගම්යතාව: 1.3 μm අංශු සඳහා 1.7 × 10-15, 1.7 μm අංශු සඳහා 3.1 × 10-15, 5.2 × 10-15 සහ 2.5 × 10-14 m2 2.6 μm අංශු සඳහා 5 μm අංශු සඳහා 43. එබැවින්, PMP අවධියේ පාරගම්යතාව 5 μm ට සමාන වේ. හර-කවච අංශු.
මෙහි Wx යනු ක්ලෝරෝෆෝම් වලින් ඇසුරුම් කරන ලද තීරුවේ බර වන අතර, Wy යනු මෙතනෝල් වලින් ඇසුරුම් කරන ලද තීරුවේ බර වන අතර, ρ යනු ද්‍රාවකයේ ඝනත්වයයි. මෙතනෝල් (ρ = 0.7866) සහ ක්ලෝරෝෆෝම් (ρ = 1.484) වල ඝනත්වය. අප කලින් අධ්‍යයනය කළ SILICA PARTICLES-C18 තීරු (100 × 1.8 mm id) 34 සහ C18-යූරියා තීරු 31 හි මුළු සිදුරු පිළිවෙලින් 0.63 සහ 0.55 විය. මෙයින් අදහස් කරන්නේ යූරියා ලිගන්ඩ් පැවතීම ස්ථාවර අවධියේ පාරගම්යතාව අඩු කරන බවයි. අනෙක් අතට, PMP තීරුවේ (100 × 1.8 mm id) මුළු සිදුරු 0.60 කි. PMP තීරු වල පාරගම්යතාව C18-බන්ධිත සිලිකා අංශු වලින් ඇසුරුම් කරන ලද තීරු වලට වඩා අඩුය, මන්ද C18 වර්ගයේ ස්ථාවර අදියරවලදී C18 ලිගන්ඩ් සිලිකා අංශු වලට රේඛීය දාම ලෙස සම්බන්ධ වී ඇති අතර, පොලිස්ටිරීන් වර්ගයේ ස්ථාවර අවධි වලදී, ඒ වටා සාපේක්ෂව ඝන පොලිමර් තට්ටුවක් සෑදී ඇත. සාමාන්‍ය අත්හදා බැලීමකදී, තීරු සිදුරු ගණනය කරනු ලබන්නේ:
රූපය 7A,B මඟින් වෑන් ඩීම්ටර් බිම් කොටසේ එකම ඉවත් කිරීමේ කොන්දේසි (එනම්, 60/40 ACN/H2O සහ 0.1% TFA) භාවිතා කරමින් PMP තීරුව (100 × 1.8 mm id) සහ Ascentis Express RP-Amide තීරුව (100 × 1.8 mm id) පෙන්වයි. තෝරාගත් පෙප්ටයිඩ මිශ්‍රණ (Gly-Tyr, Gly-Leu-Tyr, Gly-Gly-Tyr-Arg, Tyr-Ile-Gly-Ser-Arg, Leucine Enkephalin) 20 µL/ කින් සකස් කරන ලදී. තීරු දෙකෙහිම අවම ප්‍රවාහ අනුපාතය 800 µL/min වේ. PMP තීරුව සහ Ascentis Express RP-Amide තීරුව සඳහා ප්‍රශස්ත ප්‍රවාහ අනුපාතයේ (80 µL/min) අවම HETP අගයන් පිළිවෙලින් 2.6 µm සහ 3.9 µm විය. HETP අගයන් පෙන්නුම් කරන්නේ PMP තීරුවේ (100 × 1.8 mm id) වෙන් කිරීමේ කාර්යක්ෂමතාව වාණිජමය වශයෙන් ලබා ගත හැකි Ascentis Express RP-Amide තීරුවට (100 × 1.8 mm id) වඩා බෙහෙවින් හොඳ බවයි. රූපය 7(A) හි වෑන් ඩීම්ටර් කුමන්ත්‍රණයෙන් පෙන්නුම් කරන්නේ වැඩිවන ප්‍රවාහය සමඟ N අගය අඩුවීම අපගේ පෙර අධ්‍යයනයට සාපේක්ෂව සැලකිය යුතු නොවන බවයි.ඉහළ වෙන් කිරීමේ කාර්යක්ෂමතාව Ascentis Express RP-Amide තීරුවට සාපේක්ෂව PMP තීරුවේ (100 × 1.8 mm id) වත්මන් කාර්යයේදී භාවිතා කරන අංශු හැඩය, ප්‍රමාණය සහ සංකීර්ණ තීරු ඇසුරුම් ක්‍රියා පටිපාටිවල වැඩිදියුණු කිරීම් මත පදනම් වේ34.
(A) 0.1% TFA සහිත 60/40 ACN/H2O හි PMP තීරුවක් (100 × 1.8 mm id) භාවිතයෙන් ලබාගත් වෑන් ඩීම්ටර් බිම් කොටස (HETP එදිරිව ජංගම අවධි රේඛීය ප්‍රවේගය). (B) 0.1% TFA සහිත 60/40 ACN/H2O හි Ascentis Express RP-Amide තීරුවක් (100 × 1.8 mm id) භාවිතයෙන් ලබාගත් වෑන් ඩීම්ටර් බිම් කොටස (HETP එදිරිව ජංගම අවධි රේඛීය ප්‍රවේගය).
ඉහළ කාර්යසාධනයක් සහිත ද්‍රව වර්ණදේහ විද්‍යාවේදී කෘතිම පෙප්ටයිඩ මිශ්‍රණ සහ මිනිස් සෙරුම් ඇල්බියුමින් (HAS) ට්‍රිප්සින් ජීර්ණ වෙන් කිරීම සඳහා ධ්‍රැවීය-කාවැද්දූ පොලිස්ටිරීන් ස්ථාවර අවධියක් සකස් කර ඇගයීමට ලක් කරන ලදී. පෙප්ටයිඩ මිශ්‍රණ සඳහා PMP තීරුවල වර්ණදේහ කාර්ය සාධනය වෙන් කිරීමේ කාර්යක්ෂමතාව සහ විභේදනය සඳහා විශිෂ්ටයි. PMP තීරුවල වැඩිදියුණු කළ වෙන් කිරීමේ කාර්ය සාධනය සිලිකා අංශුවල අංශු ප්‍රමාණය සහ සිදුරු ප්‍රමාණය, ස්ථාවර අවධියේ පාලිත සංස්ලේෂණය සහ සංකීර්ණ තීරු ඇසුරුම් කිරීම වැනි විවිධ හේතු නිසා වේ. ඉහළ වෙන් කිරීමේ කාර්යක්ෂමතාවයට අමතරව, ඉහළ ප්‍රවාහ අනුපාතවලදී අඩු තීරු පසුපස පීඩනය මෙම ස්ථාවර අවධියේ තවත් වාසියකි. PMP තීරු හොඳ ප්‍රතිනිෂ්පාදන හැකියාවක් පෙන්නුම් කරන අතර පෙප්ටයිඩ මිශ්‍රණ විශ්ලේෂණය සහ විවිධ ප්‍රෝටීන වල ට්‍රිප්සින් ජීර්ණය සඳහා භාවිතා කළ හැකිය. ස්වාභාවික නිෂ්පාදන, ඖෂධීය ශාක වලින් ජෛව ක්‍රියාකාරී සංයෝග සහ ද්‍රව වර්ණදේහ විද්‍යාවේදී දිලීර සාරය වෙන් කිරීම සඳහා මෙම තීරුව භාවිතා කිරීමට අපි අදහස් කරමු. අනාගතයේදී, ප්‍රෝටීන සහ මොනොක්ලෝනල් ප්‍රතිදේහ වෙන් කිරීම සඳහා PMP තීරු ද ඇගයීමට ලක් කෙරේ.
ෆීල්ඩ්, ජේකේ, යුවර්බි, එම්ආර්, ලෝ, ජේ., තෝගර්සන්, එච්. සහ පීටර්සන්, පී. ප්‍රතිලෝම අදියර වර්ණදේහ විද්‍යාව මගින් පෙප්ටයිඩ වෙන් කිරීමේ පද්ධති පිළිබඳ පර්යේෂණ I කොටස: තීරු ලක්ෂණකරණ ප්‍රොටෝකෝලයක් සංවර්ධනය කිරීම. ජේ. වර්ණදේහ විද්‍යාව.1603, 113–129.https://doi.org/10.1016/j.chroma.2019.05.038 (2019).
ගෝමස්, බී. සහ තවත් අය. බෝවන රෝග සඳහා ප්‍රතිකාර කිරීම සඳහා නිර්මාණය කර ඇති වැඩිදියුණු කළ ක්‍රියාකාරී පෙප්ටයිඩ. ජෛව තාක්ෂණය. උසස්.36(2), 415-429. https://doi.org/10.1016/j.biotechadv.2018.01.004 (2018).
ව්ලීගේ, පී., ලිසොව්ස්කි, වී., මාටිනෙස්, ජේ. සහ ක්‍රෙස්ට්චැටිස්කි, එම්. සින්තටික් චිකිත්සක පෙප්ටයිඩ: විද්‍යාව සහ වෙළඳපොළ. ඖෂධ සොයාගැනීම.15 (1-2) අද, 40-56.https://doi.org/10.1016/j.drudis.2009.10.009 (2010).
ෂී, එෆ්., ස්මිත්, ආර්ඩී සහ ෂෙන්, වයි. උසස් ප්‍රෝටියොමික් ද්‍රව වර්ණදේහ විද්‍යාව.ජේ. වර්ණදේහ විද්‍යාව.ඒ 1261, 78–90 (2012).
ලියු, ඩබ්ලිව්. සහ තවත් අය. උසස් ද්‍රව වර්ණදේහ-ස්කන්ධ වර්ණාවලීක්ෂය පුළුල් ලෙස ඉලක්ක කරගත් පරිවෘත්තීය විද්‍යාව සහ ප්‍රෝටියෝමික්ස් ඇතුළත් කිරීමට හැකියාව ලබා දෙයි. ඇනස්. චිම්. ඇක්ටා 1069, 89–97 (2019).
චෙස්නට්, එස්එම් සහ සැලිස්බරි, ජේජේ ඖෂධ සංවර්ධනයේ UHPLC හි කාර්යභාරය.ජේ. සැප්. විද්‍යා.30(8), 1183-1190 (2007).
වූ, එන්. සහ ක්ලවුසන්, ඒඑම් වේගවත් වෙන් කිරීම් සඳහා අතිශය අධි පීඩන ද්‍රව වර්ණදේහ විද්‍යාවේ මූලික සහ ප්‍රායෝගික අංශ.ජේ. සැප්. Sci.30(8), 1167-1182.https://doi.org/10.1002/jssc.200700026 (2007).
Wren, SA & Tchelitcheff, P. ඖෂධ සංවර්ධනයේදී අතිශය ඉහළ කාර්යසාධනයක් සහිත ද්‍රව වර්ණදේහයේ යෙදීම.J. Chromatography.1119(1-2), 140-146.https://doi.org/10.1016/j.chroma.2006.02.052 (2006).
ගු, එච්. සහ තවත් අය. එන්ටර්වෛරස කාර්යක්ෂමව පිරිසිදු කිරීම සඳහා තෙල්-ජලයේ ඉහළ අභ්‍යන්තර අවධි ඉමල්ෂන් වලින් සකස් කරන ලද ඒකශිලා සාර්ව සිදුරු සහිත හයිඩ්‍රොජෙල්. රසායනික. බ්‍රිතාන්‍ය. ජේ. 401, 126051 (2020).
ෂි, වයි., ෂියැං, ආර්., හෝර්වත්, සී. සහ විල්කින්ස්, ජේඒ ප්‍රෝටියෝමික්ස් හි ද්‍රව වර්ණදේහයේ කාර්යභාරය. ජේ. වර්ණදේහ. ඒ 1053(1-2), 27-36 (2004).
Fekete, S., Veuthey, J.-L. & Guillarme, D. චිකිත්සක පෙප්ටයිඩ සහ ප්‍රෝටීන වල ප්‍රතිලෝම-අදියර ද්‍රව වර්ණදේහ වෙන් කිරීම්වල නැගී එන ප්‍රවණතා: න්‍යාය සහ යෙදුම්.J. Pharmacy.Biomedical Science.anus.69, 9-27 (2012).
ගිලාර්, එම්., ඔලිවෝවා, පී., ඩාලි, ඒඊ සහ ගෙබ්ලර්, ජේසී පළමු සහ දෙවන වෙන් කිරීමේ මානයන්හි විවිධ pH අගයන් භාවිතා කරමින් RP-RP-HPLC පද්ධතියක් භාවිතා කරමින් පෙප්ටයිඩ ද්විමාන වෙන් කිරීම.ජේ. සැප්. Sci.28(14), 1694-1703 (2005).
Feletti, S. et al. C18 උප-2 μm සම්පූර්ණ සහ මතුපිටින් සිදුරු සහිත අංශු වලින් පිරී ඇති ඉහළ කාර්යක්ෂමතා වර්ණදේහ තීරුවල ස්කන්ධ හුවමාරු ලක්ෂණ සහ චාලක ක්‍රියාකාරිත්වය විමර්ශනය කරන ලදී.J. සැප්. Sci.43 (9-10), 1737-1745 (2020).
පියෝවේසානා, එස්. සහ තවත් අය. ශාක ජෛව ක්‍රියාකාරී පෙප්ටයිඩ හුදකලා කිරීම, හඳුනා ගැනීම සහ වලංගු කිරීම පිළිබඳ මෑත කාලීන ප්‍රවණතා සහ විශ්ලේෂණාත්මක අභියෝග. ගුදය. ජීව විද්‍යාත්මක ගුදය. රසායනික.410(15), 3425–3444.https://doi.org/10.1007/s00216-018-0852-x (2018).
මුලර්, ජේ.බී. සහ තවත් අය. ජීවන රාජධානියේ ප්‍රෝටෝමික් භූ දර්ශනය. නේචර් 582(7813), 592-596.https://doi.org/10.1038/s41586-020-2402-x (2020).
DeLuca, C. et al. සූදානම් කිරීමේ ද්‍රව වර්ණදේහ මගින් චිකිත්සක පෙප්ටයිඩ පහළට සැකසීම. අණු (බාසල්, ස්විට්සර්ලන්තය) 26(15), 4688(2021).
යැං, වයි. සහ ජෙන්ග්, එක්ස්. මිශ්‍ර මාදිලියේ වර්ණදේහ විද්‍යාව සහ ජෛව බහු අවයවක සඳහා එහි යෙදුම.ජේ. වර්ණදේහ විද්‍යාව.ඒ 1218(49), 8813–8825 (2011).
මිශ්‍ර මාදිලියේ ප්‍රෝටීන් වර්ණදේහ සඳහා ෂාඕ, ජී., ඩොං, එක්ස්.-වයි. සහ සන්, වයි. ලිගන්ඩ්ස්: මූලධර්මය, චරිත නිරූපණය සහ නිර්මාණය.ජේ. ජෛව තාක්‍ෂණය.144(1), 3-11 (2009).