ඉහළ කාර්යසාධනයක් සහිත ද්‍රව වර්ණදේහ (HPLC) සහ අතිශය ඉහළ කාර්යසාධනයක් සහිත ද්‍රව වර්ණදේහ (HPLC සහ UHPLC) පද්ධතිවල දැඩි අවශ්‍යතා සපුරාලීම සඳහා විප්ලවීය නව පේළිගත ස්ථිතික මිශ්‍රණයක් විශේෂයෙන් සංවර්ධනය කර ඇත. ජංගම අවධි දෙකක් හෝ වැඩි ගණනක් දුර්වල ලෙස මිශ්‍ර කිරීම ඉහළ සංඥා-ශබ්ද අනුපාතයකට හේතු විය හැකි අතර එමඟින් සංවේදීතාව අඩු වේ. ස්ථිතික මිශ්‍රණයක අවම අභ්‍යන්තර පරිමාවක් සහ භෞතික මානයන් සහිත තරල දෙකක් හෝ වැඩි ගණනක් සමජාතීය ස්ථිතික මිශ්‍ර කිරීම කදිම ස්ථිතික මිශ්‍රණයක ඉහළම ප්‍රමිතිය නියෝජනය කරයි. මිශ්‍රණයේ අභ්‍යන්තර පරිමාව ඒකකයකට පාදක සයින් තරංගයේ ඉහළම ප්‍රතිශත අඩුවීමක් සමඟ වැඩිදියුණු කළ ජල ගතික ස්ථිතික මිශ්‍රණයක් සපයන අද්විතීය 3D ව්‍යුහයක් නිර්මාණය කිරීම සඳහා නව ස්ථිතික මිශ්‍රකය නව 3D මුද්‍රණ තාක්ෂණය භාවිතා කිරීමෙන් මෙය සාක්ෂාත් කර ගනී. සාම්ප්‍රදායික මිශ්‍රණයක අභ්‍යන්තර පරිමාවෙන් 1/3 ක් භාවිතා කිරීමෙන් මූලික සයින් තරංගය 98% කින් අඩු කරයි. මිශ්‍රකය තරලය සංකීර්ණ 3D ජ්‍යාමිතීන් හරහා ගමන් කරන විට විවිධ හරස්කඩ ප්‍රදේශ සහ මාර්ග දිග සහිත අන්තර් සම්බන්ධිත 3D ප්‍රවාහ නාලිකා වලින් සමන්විත වේ. දේශීය කැළඹිලි සහ සුළි සමඟ ඒකාබද්ධව බහු කැළඹිලි සහිත ප්‍රවාහ මාර්ග ඔස්සේ මිශ්‍ර කිරීමෙන් ක්ෂුද්‍ර, මෙසෝ සහ මැක්‍රෝ පරිමාණයන්හි මිශ්‍ර වීම සිදුවේ. මෙම අද්විතීය මිශ්‍රණය පරිගණකමය තරල ගතිකය (CFD) සමාකරණ භාවිතයෙන් නිර්මාණය කර ඇත. ඉදිරිපත් කරන ලද පරීක්ෂණ දත්තවලින් පෙනී යන්නේ අවම අභ්‍යන්තර පරිමාවක් සමඟ විශිෂ්ට මිශ්‍රණයක් ලබා ගත හැකි බවයි.
වසර 30 කට වැඩි කාලයක් තිස්සේ, ඖෂධ, පළිබෝධනාශක, පාරිසරික ආරක්ෂාව, අධිකරණ වෛද්‍ය විද්‍යාව සහ රසායනික විශ්ලේෂණය ඇතුළු බොහෝ කර්මාන්තවල ද්‍රව වර්ණදේහ විද්‍යාව භාවිතා කර ඇත. ඕනෑම කර්මාන්තයක තාක්ෂණික සංවර්ධනය සඳහා මිලියනයකට කොටස් හෝ ඊට අඩුවෙන් මැනීමේ හැකියාව ඉතා වැදගත් වේ. දුර්වල මිශ්‍ර කිරීමේ කාර්යක්ෂමතාව දුර්වල සංඥා-ශබ්ද අනුපාතයට හේතු වන අතර, එය හඳුනාගැනීමේ සීමාවන් සහ සංවේදීතාව අනුව වර්ණදේහ ප්‍රජාවට කරදරයකි. HPLC ද්‍රාවක දෙකක් මිශ්‍ර කිරීමේදී, සමහර ද්‍රාවක හොඳින් මිශ්‍ර නොවන බැවින්, ද්‍රාවක දෙක සමජාතීය කිරීමට බාහිර ක්‍රම මගින් මිශ්‍ර කිරීමට බල කිරීම අවශ්‍ය වේ. ද්‍රාවක හොඳින් මිශ්‍ර කර නොමැති නම්, HPLC වර්ණදේහයේ පිරිහීම සිදුවිය හැකි අතර, එය අධික මූලික ශබ්දය සහ/හෝ දුර්වල උච්ච හැඩය ලෙස ප්‍රකාශ වේ. දුර්වල මිශ්‍රණය සමඟ, මූලික ශබ්දය කාලයත් සමඟ අනාවරක සංඥාවේ සයින් තරංගයක් (නැගීම සහ වැටීම) ලෙස දිස්වනු ඇත. ඒ සමඟම, දුර්වල මිශ්‍ර කිරීම පුළුල් වීම සහ අසමමිතික උච්චයන්, විශ්ලේෂණාත්මක ක්‍රියාකාරිත්වය අඩු කිරීම, උච්ච හැඩය සහ උච්ච විභේදනය අඩු කිරීමට හේතු විය හැක. මෙම සීමාවන් වැඩිදියුණු කිරීමේ සහ පරිශීලකයින්ට අඩු හඳුනාගැනීමේ සීමාවන් (සංවේදීතා) ලබා ගැනීමට ඉඩ සලසන මාධ්‍යයක් ලෙස ඉන්-ලයින් සහ ටී ස්ථිතික මිශ්‍රණ යන්ත්‍ර කර්මාන්තය හඳුනාගෙන ඇත. කදිම ස්ථිතික මිශ්‍රණය ඉහළ මිශ්‍ර කිරීමේ කාර්යක්ෂමතාව, අඩු මළ පරිමාව සහ අඩු පීඩන පහත වැටීමේ ප්‍රතිලාභ අවම පරිමාව සහ උපරිම පද්ධති ප්‍රතිදානය සමඟ ඒකාබද්ධ කරයි. ඊට අමතරව, විශ්ලේෂණය වඩාත් සංකීර්ණ වන විට, විශ්ලේෂකයින් නිතිපතා වැඩිපුර ධ්‍රැවීය සහ මිශ්‍ර කිරීමට අපහසු ද්‍රාවක භාවිතා කළ යුතුය. මෙයින් අදහස් කරන්නේ අනාගත පරීක්ෂණ සඳහා වඩා හොඳ මිශ්‍ර කිරීමක් අත්‍යවශ්‍ය වන අතර, උසස් මිශ්‍රණ නිර්මාණය සහ කාර්ය සාධනය සඳහා අවශ්‍යතාවය තවදුරටත් වැඩි කරන බවයි.
මොට් මෑතකදී අභ්‍යන්තර වෙළුම් තුනක් සහිත පේටන්ට් බලපත්‍රලාභී PerfectPeakTM පේළිගත ස්ථිතික මිශ්‍රක නව පරාසයක් සංවර්ධනය කර ඇත: 30 µl, 60 µl සහ 90 µl. වැඩිදියුණු කළ මිශ්‍ර කිරීම සහ අඩු විසරණය අවශ්‍ය වන බොහෝ HPLC පරීක්ෂණ සඳහා අවශ්‍ය පරිමාවන් සහ මිශ්‍ර කිරීමේ ලක්ෂණ පරාසය මෙම ප්‍රමාණ ආවරණය කරයි. මාදිලි තුනම විෂ්කම්භය 0.5″ වන අතර සංයුක්ත සැලසුමකින් කර්මාන්තයේ ප්‍රමුඛ කාර්ය සාධනයක් ලබා දෙයි. ඒවා 316L මල නොබැඳෙන වානේ වලින් සාදා ඇති අතර, නිෂ්ක්‍රීයතාවය සඳහා නිෂ්ක්‍රීය කර ඇත, නමුත් ටයිටේනියම් සහ අනෙකුත් විඛාදනයට ප්‍රතිරෝධී සහ රසායනිකව නිෂ්ක්‍රීය ලෝහ මිශ්‍ර ලෝහ ද ඇත. මෙම මිශ්‍රකවල උපරිම ක්‍රියාකාරී පීඩනය 20,000 psi දක්වා ඇත. රූපයේ දැක්වේ. 1a මෙම වර්ගයේ සම්මත මික්සර් වලට වඩා කුඩා අභ්‍යන්තර පරිමාවක් භාවිතා කරන අතර උපරිම මිශ්‍ර කිරීමේ කාර්යක්ෂමතාව සැපයීම සඳහා නිර්මාණය කර ඇති 60 µl මොට් ස්ථිතික මිශ්‍රකයක ඡායාරූපයකි. මෙම නව ස්ථිතික මික්සර් සැලසුම ස්ථිතික මිශ්‍රණයක් ලබා ගැනීම සඳහා වර්ණදේහ කර්මාන්තයේ දැනට භාවිතා කරන ඕනෑම මික්සරයකට වඩා අඩු අභ්‍යන්තර ප්‍රවාහයක් භාවිතා කරන අද්විතීය 3D ව්‍යුහයක් නිර්මාණය කිරීම සඳහා නව ආකලන නිෂ්පාදන තාක්ෂණය භාවිතා කරයි. එවැනි මිශ්‍රක, ද්‍රවය ඇතුළත සංකීර්ණ ජ්‍යාමිතික බාධක තරණය කරන විට, විවිධ හරස්කඩ ප්‍රදේශ සහ විවිධ මාර්ග දිග සහිත අන්තර් සම්බන්ධිත ත්‍රිමාණ ප්‍රවාහ නාලිකා වලින් සමන්විත වේ. රූපයේ. රූපය 1b නව මිශ්‍රකයේ ක්‍රමානුරූප රූප සටහනක් පෙන්වයි, එය ඇතුල්වීම සහ පිටවීම සඳහා කර්මාන්ත සම්මත 10-32 නූල් සහිත HPLC සම්පීඩන සවි කිරීම් භාවිතා කරන අතර පේටන්ට් බලපත්‍රලාභී අභ්‍යන්තර මික්සර් වරායේ සෙවන ලද නිල් මායිම් ඇත. අභ්‍යන්තර ප්‍රවාහ මාර්ගවල විවිධ හරස්කඩ ප්‍රදේශ සහ අභ්‍යන්තර ප්‍රවාහ පරිමාව තුළ ප්‍රවාහ දිශාවේ වෙනස්කම් කැළඹිලි සහිත සහ ලැමිනර් ප්‍රවාහයේ කලාප නිර්මාණය කරන අතර එමඟින් ක්ෂුද්‍ර, මෙසෝ සහ සාර්ව පරිමාණයන්හි මිශ්‍ර වීමට හේතු වේ. මෙම අද්විතීය මිශ්‍රකයේ සැලසුම, ප්‍රවාහ රටා විශ්ලේෂණය කිරීමට සහ අභ්‍යන්තර විශ්ලේෂණ පරීක්ෂණ සහ පාරිභෝගික ක්ෂේත්‍ර ඇගයීම සඳහා මූලාකෘති කිරීමට පෙර සැලසුම පිරිපහදු කිරීමට පරිගණකමය තරල ගතිකය (CFD) සමාකරණ භාවිතා කළේය. ආකලන නිෂ්පාදනය යනු සාම්ප්‍රදායික යන්ත්‍රෝපකරණ (ඇඹරුම් යන්ත්‍ර, වැසිකිළි ආදිය) අවශ්‍යතාවයකින් තොරව CAD චිත්‍ර වලින් සෘජුවම 3D ජ්‍යාමිතික සංරචක මුද්‍රණය කිරීමේ ක්‍රියාවලියයි. මෙම නව ස්ථිතික මිශ්‍රක මෙම ක්‍රියාවලිය භාවිතයෙන් නිෂ්පාදනය කිරීමට නිර්මාණය කර ඇති අතර, එහිදී මික්සර් ශරීරය CAD චිත්‍ර වලින් නිර්මාණය කර ඇති අතර ආකලන නිෂ්පාදනය භාවිතයෙන් කොටස් ස්ථරයෙන් ස්ථරයට (මුද්‍රණය කර) සකස් කර ඇත. මෙහිදී, මයික්‍රෝන 20 ක් පමණ ඝන ලෝහ කුඩු තට්ටුවක් තැන්පත් කර ඇති අතර, පරිගණක පාලිත ලේසර් මඟින් තෝරාගත් උණු කර කුඩු ඝන ආකාරයකට විලයනය කරයි. මෙම ස්ථරයට ඉහළින් තවත් ස්ථරයක් යොදන්න සහ ලේසර් සින්ටර් කිරීම යොදන්න. කොටස සම්පූර්ණයෙන්ම අවසන් වන තුරු මෙම ක්‍රියාවලිය නැවත කරන්න. ඉන්පසු කුඩු ලේසර් නොවන බන්ධිත කොටසෙන් ඉවත් කරනු ලැබේ, මුල් CAD ඇඳීමට ගැලපෙන ත්‍රිමාණ මුද්‍රිත කොටසක් ඉතිරි වේ. අවසාන නිෂ්පාදනය ක්ෂුද්‍ර තරල ක්‍රියාවලියට තරමක් සමාන වන අතර, ප්‍රධාන වෙනස වන්නේ ක්ෂුද්‍ර තරල සංරචක සාමාන්‍යයෙන් ද්විමාන (පැතලි) වීමයි, ආකලන නිෂ්පාදනය භාවිතා කරන අතර, සංකීර්ණ ප්‍රවාහ රටා ත්‍රිමාණ ජ්‍යාමිතිය තුළ නිර්මාණය කළ හැකිය. මෙම කරාම දැනට 316L මල නොබැඳෙන වානේ සහ ටයිටේනියම් වලින් ත්‍රිමාණ මුද්‍රිත කොටස් ලෙස ලබා ගත හැකිය. බොහෝ ලෝහ මිශ්‍ර ලෝහ, පොලිමර් සහ සමහර පිඟන් මැටි මෙම ක්‍රමය භාවිතා කර සංරචක සෑදීම සඳහා භාවිතා කළ හැකි අතර අනාගත සැලසුම්/නිෂ්පාදන වලදී සලකා බලනු ලැබේ.
සහල්. 1. නිල් පැහැයෙන් වර්ණාලේප කර ඇති මික්සර් තරල ප්‍රවාහ මාර්ගයේ හරස්කඩක් පෙන්වන 90 μl මොට් ස්ථිතික මිශ්‍රණයක ඡායාරූපය (අ) සහ රූප සටහන (ආ).
කාර්යක්ෂම සැලසුම් සංවර්ධනය කිරීමට සහ කාලය ගතවන සහ මිල අධික අත්හදා බැලීම් සහ දෝෂ අත්හදා බැලීම් අඩු කිරීමට උපකාරී වන පරිදි සැලසුම් අවධියේදී ස්ථිතික මික්සර් ක්‍රියාකාරිත්වයේ පරිගණක තරල ගතික (CFD) සමාකරණ ක්‍රියාත්මක කරන්න. COMSOL බහු භෞතික විද්‍යා මෘදුකාංග පැකේජය භාවිතයෙන් ස්ථිතික මික්සර් සහ සම්මත නල මාර්ග (මිශ්‍රකයක් නොමැති අනුකරණය) CFD අනුකරණය. කොටසක් තුළ තරල ප්‍රවේගය සහ පීඩනය තේරුම් ගැනීම සඳහා පීඩන-ධාවනය කරන ලද ලැමිනර් තරල යාන්ත්‍ර විද්‍යාව භාවිතයෙන් ආකෘති නිර්මාණය. ජංගම අවධි සංයෝගවල රසායනික ප්‍රවාහනය සමඟ ඒකාබද්ධව, මෙම තරල ගතිකය, විවිධ සාන්ද්‍රිත ද්‍රව දෙකක් මිශ්‍ර කිරීම තේරුම් ගැනීමට උපකාරී වේ. සංසන්දනාත්මක විසඳුම් සොයන අතරතුර ගණනය කිරීමේ පහසුව සඳහා ආකෘතිය තත්පර 10 ට සමාන කාලයේ ශ්‍රිතයක් ලෙස අධ්‍යයනය කෙරේ. ලක්ෂ්‍ය පරීක්ෂණ ප්‍රක්ෂේපණ මෙවලම භාවිතයෙන් කාල-සහසම්බන්ධ අධ්‍යයනයකින් න්‍යායාත්මක දත්ත ලබා ගන්නා ලද අතර, එහිදී දත්ත එකතු කිරීම සඳහා පිටවීමේ මැද ලක්ෂ්‍යයක් තෝරා ගන්නා ලදී. CFD ආකෘතිය සහ පර්යේෂණාත්මක පරීක්ෂණ සමානුපාතික සාම්පල කපාටයක් සහ පොම්ප පද්ධතියක් හරහා වෙනස් ද්‍රාවක දෙකක් භාවිතා කළ අතර, එහි ප්‍රතිඵලයක් ලෙස නියැදි රේඛාවේ එක් එක් ද්‍රාවකය සඳහා ප්‍රතිස්ථාපන ප්ලග් එකක් ඇති විය. මෙම ද්‍රාවක පසුව ස්ථිතික මික්සරයක මිශ්‍ර කරනු ලැබේ. රූප 2 සහ 3 පිළිවෙලින් සම්මත පයිප්පයක් හරහා (මිශ්‍රකයක් නොමැතිව) සහ මොට් ස්ථිතික මික්සර් හරහා ප්‍රවාහ සමාකරණ පෙන්වයි. රූපය 2 හි පෙන්වා ඇති පරිදි, ස්ථිතික මිශ්‍රණයක් නොමැති විට නලයට ජලය සහ පිරිසිදු ඇසිටොනයිට්‍රයිල් ප්ලග් ප්‍රත්‍යාවර්තව නලයට දැමීමේ සංකල්පය නිරූපණය කිරීම සඳහා සමාකරණය සෙන්ටිමීටර 5 ක් දිග සහ 0.25 මි.මී. හැඳුනුම්පතක් මත ක්‍රියාත්මක කරන ලදී. සමාකරණය නළයේ සහ මිශ්‍රකයේ නිශ්චිත මානයන් සහ 0 .3 ml/min ප්‍රවාහ අනුපාතයක් භාවිතා කළේය.
සහල්. 2. HPLC නලයක, එනම් මික්සර් නොමැති විට, සිදුවන දේ නිරූපණය කිරීම සඳහා 0.25 mm අභ්‍යන්තර විෂ්කම්භයක් සහිත 5 cm නලයක CFD ප්‍රවාහය අනුකරණය කිරීම. සම්පූර්ණ රතු පැහැයෙන් ජලයේ ස්කන්ධ භාගය නිරූපණය වේ. නිල් පැහැයෙන් ජලය නොමැතිකම නිරූපණය වේ, එනම් පිරිසිදු ඇසිටොනයිට්‍රයිල්. වෙනස් ද්‍රව දෙකක ප්‍රත්‍යාවර්ත ප්ලග් අතර විසරණ කලාප දැකිය හැකිය.
සහල්. 3. COMSOL CFD මෘදුකාංග පැකේජයේ ආකෘතිගත කර ඇති, මිලි ලීටර් 30 ක පරිමාවක් සහිත ස්ථිතික මික්සර්. පුරාවෘත්තය මික්සර් එකේ ඇති ජලයේ ස්කන්ධ භාගය නිරූපණය කරයි. පිරිසිදු ජලය රතු පැහැයෙන් ද පිරිසිදු ඇසිටොනයිට්‍රයිල් නිල් පැහැයෙන් ද දක්වා ඇත. අනුකරණය කරන ලද ජලයේ ස්කන්ධ භාගයේ වෙනස ද්‍රව දෙකක් මිශ්‍ර කිරීමේ වර්ණය වෙනස් වීමෙන් නිරූපණය කෙරේ.
රූපයේ. 4 මිශ්‍ර කිරීමේ කාර්යක්ෂමතාව සහ මිශ්‍ර කිරීමේ පරිමාව අතර සහසම්බන්ධතා ආකෘතිය පිළිබඳ වලංගුකරණ අධ්‍යයනයක් පෙන්වයි. මිශ්‍ර කිරීමේ පරිමාව වැඩි වන විට, මිශ්‍ර කිරීමේ කාර්යක්ෂමතාව වැඩි වනු ඇත. කතුවරුන්ගේ දැනුමට අනුව, මිශ්‍රකය තුළ ක්‍රියා කරන අනෙකුත් සංකීර්ණ භෞතික බලවේග මෙම CFD ආකෘතියේ දී ගණනය කළ නොහැකි අතර, එහි ප්‍රතිඵලයක් ලෙස පර්යේෂණාත්මක පරීක්ෂණ වලදී ඉහළ මිශ්‍ර කිරීමේ කාර්යක්ෂමතාවයක් ඇති වේ. පර්යේෂණාත්මක මිශ්‍ර කිරීමේ කාර්යක්ෂමතාව මනිනු ලැබුවේ පාදක සයිනොසොයිඩ් හි ප්‍රතිශත අඩුවීමක් ලෙස ය. ඊට අමතරව, වැඩිවන පසුපස පීඩනය සාමාන්‍යයෙන් ඉහළ මිශ්‍ර කිරීමේ මට්ටම් ඇති කරයි, ඒවා සමාකරණයේදී සැලකිල්ලට නොගනී.
විවිධ ස්ථිතික මික්සර්වල සාපේක්ෂ කාර්ය සාධනය සංසන්දනය කිරීම සඳහා අමු සයින් තරංග මැනීම සඳහා පහත HPLC තත්වයන් සහ පරීක්ෂණ සැකසුම භාවිතා කරන ලදී. රූප සටහන 5 හි රූප සටහන සාමාන්‍ය HPLC/UHPLC පද්ධති පිරිසැලසුමක් පෙන්වයි. ස්ථිතික මික්සර් පරීක්ෂා කරන ලද්දේ මික්සර් පොම්පයට පසුව සහ ඉන්ජෙක්ටරය සහ වෙන් කිරීමේ තීරුවට පෙර සෘජුවම තැබීමෙනි. බොහෝ පසුබිම් සයිනාකාර මිනුම් සිදු කරනු ලබන්නේ ස්ථිතික මික්සර් සහ UV අනාවරකය අතර ඉන්ජෙක්ටරය සහ කේශනාලිකා තීරුව මඟ හැරීමෙනි. සංඥා-ශබ්ද අනුපාතය තක්සේරු කිරීමේදී සහ/හෝ උච්ච හැඩය විශ්ලේෂණය කිරීමේදී, පද්ධති වින්‍යාසය රූප සටහන 5 හි දක්වා ඇත.
රූපය 4. ස්ථිතික මික්සර් පරාසයක් සඳහා මිශ්‍ර කිරීමේ කාර්යක්ෂමතාවයට එරෙහිව මිශ්‍ර කිරීමේ පරිමාව පිළිබඳ සැලැස්ම. න්‍යායාත්මක අපිරිසිදුකම CFD සමාකරණවල වලංගුභාවය තහවුරු කරන පර්යේෂණාත්මක අපිරිසිදු දත්ත හා සමාන ප්‍රවණතාවයක් අනුගමනය කරයි.
මෙම පරීක්ෂණය සඳහා භාවිතා කරන ලද HPLC පද්ධතිය වූයේ Chemstation මෘදුකාංගයක් ධාවනය වන PC එකක් මගින් පාලනය වන UV අනාවරකයක් සහිත Agilent 1100 Series HPLC පද්ධතියකි. සිද්ධි අධ්‍යයන දෙකක දී මූලික සයිනොසොයිඩ් නිරීක්ෂණය කිරීමෙන් මික්සර් කාර්යක්ෂමතාව මැනීම සඳහා සාමාන්‍ය සුසර කිරීමේ කොන්දේසි වගුව 1 හි දැක්වේ. ද්‍රාවක සඳහා විවිධ උදාහරණ දෙකක් මත පර්යේෂණාත්මක පරීක්ෂණ සිදු කරන ලදී. 1 වන අවස්ථාවෙහි මිශ්‍ර කරන ලද ද්‍රාවක දෙක වූයේ ද්‍රාවක A (ඩයෝනීකරණය කළ ජලයේ 20 mM ඇමෝනියම් ඇසිටේට්) සහ ද්‍රාවක B (ඩයෝනීකරණය කළ ජලයේ 80% ඇසිටෝනයිට්‍රයිල් (ACN)/20% ඩයෝනීකරණය කළ ජලය) ය. 2 වන අවස්ථාවෙහිදී, ද්‍රාවක A යනු ඩයෝනීකරණය කළ ජලයේ 0.05% ඇසිටෝන් (ලේබලය) ද්‍රාවණයකි. ද්‍රාවක B යනු 80/20% මෙතනෝල් සහ ජලය මිශ්‍රණයකි. 1 වන අවස්ථාවෙහිදී, පොම්පය 0.25 ml/min සිට 1.0 ml/min දක්වා ප්‍රවාහ අනුපාතයකට සකසා ඇති අතර, 2 වන අවස්ථාවෙහිදී, පොම්පය 1 ml/min නියත ප්‍රවාහ අනුපාතයකට සකසා ඇත. අවස්ථා දෙකේදීම, A සහ ​​B ද්‍රාවක මිශ්‍රණයේ අනුපාතය 20% A/80% B විය. 1 වන අවස්ථාවෙහිදී අනාවරකය 220 nm ලෙස සකසා ඇති අතර, 2 වන අවස්ථාවෙහිදී ඇසිටෝන් උපරිම අවශෝෂණය 265 nm තරංග ආයාමයකට සකසා ඇත.
වගුව 1. අවස්ථා 1 සහ 2 සඳහා HPLC වින්‍යාස කිරීම් අවස්ථා 1 අවස්ථාව 2 පොම්ප වේගය 0.25 ml/min සිට 1.0 ml/min දක්වා 1.0 ml/min ද්‍රාවකය A 20 mM අයනීකරණය කළ ජලයේ ඇමෝනියම් ඇසිටේට් 0.05% අයනීකරණය කළ ජලයේ ඇසිටෝන් ද්‍රාවකය B 80% ඇසිටොනයිට්‍රයිල් (ACN) / 20% අයනීකරණය කළ ජලය 80% මෙතනෝල් / 20% අයනීකරණය කළ ජලය ද්‍රාවක අනුපාතය 20% A / 80% B 20% A / 80% B අනාවරකය 220 nm 265 nm
සහල්. 6. සංඥාවේ මූලික ප්ලාවිත සංරචක ඉවත් කිරීම සඳහා අඩු-පාස් පෙරහනක් යෙදීමට පෙර සහ පසු මනින ලද මිශ්‍ර සයින් තරංගවල කොටස්.
1 වන අවස්ථාවෙහි මිශ්‍ර පාදක ශබ්දය සඳහා රූප සටහන 6 සාමාන්‍ය උදාහරණයකි, එය පාදක ප්ලාවිතය මත අධිස්ථාපනය කරන ලද පුනරාවර්තන සයිනොසොයිඩල් රටාවක් ලෙස දැක්වේ. පාදක ප්ලාවිතය යනු පසුබිම් සංඥාවේ මන්දගාමී වැඩිවීමක් හෝ අඩුවීමකි. පද්ධතියට ප්‍රමාණවත් කාලයක් සමතුලිත වීමට ඉඩ නොදුනහොත්, එය සාමාන්‍යයෙන් පහත වැටෙනු ඇත, නමුත් පද්ධතිය සම්පූර්ණයෙන්ම ස්ථායී වූ විට පවා අක්‍රමවත් ලෙස පාවී යනු ඇත. පද්ධතිය බෑවුම් අනුක්‍රමණයක හෝ ඉහළ පසුපස පීඩන තත්වයන් යටතේ ක්‍රියාත්මක වන විට මෙම පාදක ප්ලාවිතය වැඩි වීමට නැඹුරු වේ. මෙම පාදක ප්ලාවිතය පවතින විට, සාම්පලයෙන් සාම්පලයට ප්‍රතිඵල සංසන්දනය කිරීම දුෂ්කර විය හැකි අතර, මෙම අඩු සංඛ්‍යාත විචලනයන් පෙරහන් කිරීම සඳහා අමු දත්ත වලට අඩු පාස් පෙරහනක් යෙදීමෙන් එය ජය ගත හැකි අතර එමඟින් පැතලි පාදක රේඛාවක් සහිත දෝලන කුමන්ත්‍රණයක් සපයයි. රූපයේ. රූපය 6 හි අඩු පාස් පෙරහනක් යෙදීමෙන් පසු මික්සර්ගේ මූලික ශබ්දයේ කුමන්ත්‍රණයක් ද පෙන්වයි.
CFD සමාකරණ සහ මූලික අත්හදා බැලීම් සම්පූර්ණ කිරීමෙන් පසුව, ඉහත විස්තර කර ඇති අභ්‍යන්තර සංරචක භාවිතා කරමින් අභ්‍යන්තර පරිමාවන් තුනක් සමඟ වෙනම ස්ථිතික මිශ්‍රක තුනක් සංවර්ධනය කරන ලදී: 30 µl, 60 µl සහ 90 µl. මෙම පරාසය අඩු විශ්ලේෂණ HPLC යෙදුම් සඳහා අවශ්‍ය පරිමාවන් පරාසය සහ මිශ්‍ර කිරීමේ කාර්ය සාධනය ආවරණය කරයි, එහිදී අඩු විස්තාර පාදක රේඛා නිපදවීමට වැඩිදියුණු කළ මිශ්‍ර කිරීම සහ අඩු විසරණය අවශ්‍ය වේ. රූපයේ 7 හි උදාහරණ 1 හි පරීක්ෂණ පද්ධතියෙන් ලබාගත් මූලික සයින් තරංග මිනුම් (අන්‍යෝන්‍ය වශයෙන් ඇසිටොනයිට්‍රයිල් සහ ඇමෝනියම් ඇසිටේට්) ස්ථිතික මිශ්‍රක පරිමාවන් තුනක් සහ මිශ්‍රක ස්ථාපනය කර නොමැති අතර පෙන්වයි. රූපය 7 හි පෙන්වා ඇති ප්‍රතිඵල සඳහා පර්යේෂණාත්මක පරීක්ෂණ කොන්දේසි වගුව 1 හි දක්වා ඇති ක්‍රියා පටිපාටියට අනුව 0.5 ml/min ද්‍රාවක ප්‍රවාහ අනුපාතයකින් පරීක්ෂණ 4 පුරාම නියතව පැවතුනි. දත්ත කට්ටලවලට ඕෆ්සෙට් අගයක් යොදන්න එවිට ඒවා සංඥා අතිච්ඡාදනයකින් තොරව පැත්තෙන් පෙන්විය හැකිය. ඕෆ්සෙට් මික්සර්හි කාර්ය සාධන මට්ටම විනිශ්චය කිරීමට භාවිතා කරන සංඥාවේ විස්තාරයට බලපාන්නේ නැත. මික්සර් නොමැතිව සාමාන්‍ය සයිනාකාර විස්තාරය 0.221 mAi වූ අතර, 30 µl, 60 µl සහ 90 µl හි ස්ථිතික මොට් මික්සර්වල විස්තාරය පිළිවෙලින් 0.077, 0.017 සහ 0.004 mAi දක්වා පහත වැටුණි.
රූපය 7. HPLC UV අනාවරක සංඥා ඕෆ්සෙට් එදිරිව. මික්සර් නොමැතිව ද්‍රාවක මිශ්‍ර කිරීම පෙන්වන අවස්ථාව 1 (ඇමෝනියම් ඇසිටේට් දර්ශකය සහිත ඇසිටොනයිට්‍රයිල්) සඳහා කාලය, ස්ථිතික මික්සර් පරිමාව වැඩි වන විට වැඩිදියුණු කළ මිශ්‍ර කිරීම (අඩු සංඥා විස්තාරය) පෙන්වන 30 µl, 60 µl සහ 90 µl මොට් මික්සර්. (සැබෑ දත්ත ඕෆ්සෙට්: 0.13 (මික්සර් නැත), වඩා හොඳ සංදර්ශකය සඳහා 0.32, 0.4, 0.45mA).
රූපය 8 හි දැක්වෙන දත්ත රූපය 7 හි ඇති ආකාරයටම වේ, නමුත් මෙවර ඒවාට 50 µl, 150 µl සහ 250 µl අභ්‍යන්තර පරිමාවන් සහිත බහුලව භාවිතා වන HPLC ස්ථිතික මිශ්‍රක තුනක ප්‍රතිඵල ඇතුළත් වේ. සහල්. රූපය 8. HPLC UV අනාවරක සංඥා ඕෆ්සෙට් එදිරිව කාල සටහන 1 අවස්ථාව සඳහා (ඇසිටොනිට්‍රයිල් සහ ඇමෝනියම් ඇසිටේට් දර්ශක ලෙස) ස්ථිතික මිශ්‍රකයක් නොමැතිව ද්‍රාවකය මිශ්‍ර කිරීම, මොට් ස්ථිතික මිශ්‍රකවල නව මාලාව සහ සාම්ප්‍රදායික මිශ්‍රක තුනක් (සැබෑ දත්ත ඕෆ්සෙට් 0.1 (මික්සර් නොමැතිව), 0.32, 0.48, 0.6, 0.7, 0.8, 0.9 mA පිළිවෙලින් වඩා හොඳ සංදර්ශක බලපෑමක් සඳහා). පාදක සයින් තරංගයේ ප්‍රතිශත අඩු කිරීම ගණනය කරනු ලබන්නේ මික්සර් ස්ථාපනය නොකර සයින් තරංගයේ විස්තාරය සහ විස්තාරය අතර අනුපාතයෙනි. 1 සහ 2 අවස්ථා සඳහා මනින ලද සයින් තරංග දුර්වල කිරීමේ ප්‍රතිශතයන්, නව ස්ථිතික මිශ්‍රකයක අභ්‍යන්තර පරිමාවන් සහ කර්මාන්තයේ බහුලව භාවිතා වන සම්මත මිශ්‍රක හතක් සමඟ වගුව 2 හි ලැයිස්තුගත කර ඇත. රූප සටහන් 8 සහ 9 හි දත්ත මෙන්ම වගුව 2 හි ඉදිරිපත් කර ඇති ගණනය කිරීම් වලින් පෙන්නුම් කරන්නේ, මෙම පරීක්ෂණ තත්වයන් යටතේ සාම්ප්‍රදායික HPLC මිශ්‍රකයක කාර්ය සාධනයට වඩා බොහෝ සෙයින් වැඩි වන Mott ස්ථිතික මිශ්‍රකයට 98.1% ක සයින් තරංග දුර්වල කිරීමක් සැපයිය හැකි බවයි. රූපය 9. HPLC UV අනාවරක සංඥා ඕෆ්සෙට් එදිරිව කාල සටහන 2 අවස්ථාව සඳහා (මෙතනෝල් සහ ඇසිටෝන් ට්‍රේසර් ලෙස) ස්ථිතික මිශ්‍රකයක් නොපෙන්වයි (ඒකාබද්ධ), මොට් ස්ථිතික මිශ්‍රක නව මාලාවක් සහ සාම්ප්‍රදායික මිශ්‍රක දෙකක් (සැබෑ දත්ත ඕෆ්සෙට් 0, 11 (මික්සර් නොමැතිව.), 0.22, 0.3, 0.35 mA සහ වඩා හොඳ සංදර්ශකයක් සඳහා). කර්මාන්තයේ බහුලව භාවිතා වන මික්සර් හතක් ද ඇගයීමට ලක් කරන ලදී. මේවාට A සමාගමෙන් (නම් කරන ලද මික්සර් A1, A2 සහ A3) සහ B සමාගමෙන් (නම් කරන ලද මික්සර් B1, B2 සහ B3) වෙනස් අභ්‍යන්තර පරිමාවන් තුනක් සහිත මික්සර් ඇතුළත් වේ. C සමාගම ශ්‍රේණිගත කර ඇත්තේ එක් ප්‍රමාණයකට පමණි.
වගුව 2. ස්ථිතික මික්සර් කලවම් කිරීමේ ලක්ෂණ සහ අභ්‍යන්තර පරිමාව ස්ථිතික මික්සර් අවස්ථාව 1 සයිනොසොයිඩල් ප්‍රතිසාධනය: ඇසිටොනයිට්‍රයිල් පරීක්ෂණය (කාර්යක්ෂමතාව) අවස්ථාව 2 සයිනොසොයිඩල් ප්‍රතිසාධනය: මෙතනෝල් ජල පරීක්ෂණය (කාර්යක්ෂමතාව) අභ්‍යන්තර පරිමාව (µl) නැත මික්සර් – - 0 මොට් 30 65% 67.2% 30 මොට් 60 92.2% 91.3% 60 මොට් 90 98.1% 97.5% 90 මික්සර් A1 66.4% 73.7% 50 මික්සර් A2 89.8% 91.6% 150 මික්සර් A3 92.2% 94.5% 250 මික්සර් B1 44.8% 45.7% 9 35 මික්සර් B2 845.% 96.2% 370 මික්සර් C 97.2% 97.4% 250
රූප සටහන 8 සහ වගුව 2 හි ප්‍රතිඵල විශ්ලේෂණයෙන් පෙන්නුම් කරන්නේ 30 µl Mott ස්ථිතික මික්සර් එක A1 මික්සර් එකට සමාන මිශ්‍ර කිරීමේ කාර්යක්ෂමතාවයක් ඇති බවයි, එනම් 50 µl, කෙසේ වෙතත්, 30 µl Mott එකේ අභ්‍යන්තර පරිමාව 30% කින් අඩුය. 60 µl Mott මික්සර් එක 150 µl අභ්‍යන්තර පරිමාව A2 මික්සර් එක සමඟ සංසන්දනය කිරීමේදී, 89% ට සාපේක්ෂව 92% ක මිශ්‍ර කිරීමේ කාර්යක්ෂමතාවයේ සුළු දියුණුවක් ඇති විය, නමුත් වඩා වැදගත් දෙය නම්, මෙම ඉහළ මට්ටමේ මිශ්‍ර කිරීම මික්සර් පරිමාවෙන් 1/3 කින් ලබා ගැනීමයි. සමාන මික්සර් A2. 90 µl Mott මික්සර් එකේ කාර්ය සාධනය 250 µl අභ්‍යන්තර පරිමාවක් සහිත A3 මික්සර් එකට සමාන ප්‍රවණතාවයක් අනුගමනය කළේය. අභ්‍යන්තර පරිමාව 3 ගුණයකින් අඩු කිරීමත් සමඟ 98% සහ 92% ක මිශ්‍ර කිරීමේ කාර්ය සාධනයේ වැඩිදියුණු කිරීම් ද නිරීක්ෂණය විය. B සහ C මිශ්‍රණ යන්ත්‍ර සඳහා සමාන ප්‍රතිඵල සහ සැසඳීම් ලබා ගන්නා ලදී. එහි ප්‍රතිඵලයක් ලෙස, Mott PerfectPeakTM නව ස්ථිතික මිශ්‍රණ මාලාව සැසඳිය හැකි තරඟකාරී මිශ්‍රණ යන්ත්‍රවලට වඩා ඉහළ මිශ්‍ර කිරීමේ කාර්යක්ෂමතාවයක් සපයයි, නමුත් අඩු අභ්‍යන්තර පරිමාවක් සහිතව, වඩා හොඳ පසුබිම් ශබ්දයක් සහ වඩා හොඳ සංඥා-ශබ්ද අනුපාතයක් සපයයි, වඩා හොඳ සංවේදීතාව විශ්ලේෂණ, උච්ච හැඩය සහ උච්ච විභේදනය. 1 වන අවස්ථාව සහ 2 වන අවස්ථාව යන අධ්‍යයන දෙකෙහිම මිශ්‍ර කිරීමේ කාර්යක්ෂමතාවයේ සමාන ප්‍රවණතා නිරීක්ෂණය විය. 2 වන අවස්ථාව සඳහා, 60 ml Mott, සැසඳිය හැකි මිශ්‍රණයක් A1 (අභ්‍යන්තර පරිමාව 50 µl) සහ සැසඳිය හැකි මිශ්‍රණයක් B1 (අභ්‍යන්තර පරිමාව 35 µl) සංසන්දනය කිරීම සඳහා (දර්ශක ලෙස මෙතනෝල් සහ ඇසිටෝන්) භාවිතා කරමින් පරීක්ෂණ සිදු කරන ලදී. , මික්සර් ස්ථාපනය නොකර කාර්ය සාධනය දුර්වල විය, නමුත් එය මූලික විශ්ලේෂණය සඳහා භාවිතා කරන ලදී. 60 ml Mott මික්සර් පරීක්ෂණ කණ්ඩායමේ හොඳම මික්සර් බව ඔප්පු වූ අතර, මිශ්‍ර කිරීමේ කාර්යක්ෂමතාවයේ 90% ක වැඩිවීමක් ලබා දුන්නේය. සැසඳිය හැකි මික්සර් A1 මිශ්‍ර කිරීමේ කාර්යක්ෂමතාවයේ 75% ක දියුණුවක් සහ සැසඳිය හැකි B1 මික්සර් එකක 45% ක දියුණුවක් දක්නට ලැබුණි. 1 වන අවස්ථාවෙහිදී සයින් වක්‍ර පරීක්ෂණයට සමාන කොන්දේසි යටතේ මිශ්‍රක මාලාවක් මත ප්‍රවාහ අනුපාතය සහිත මූලික සයින් තරංග අඩු කිරීමේ පරීක්ෂණයක් සිදු කරන ලද අතර, ප්‍රවාහ අනුපාතය පමණක් වෙනස් විය. දත්ත වලින් පෙන්නුම් කළේ 0.25 සිට 1 ml/min දක්වා ප්‍රවාහ අනුපාත පරාසය තුළ, සයින් තරංගයේ ආරම්භක අඩුවීම මිශ්‍රක පරිමාවන් තුනටම සාපේක්ෂව නියතව පවතින බවයි. කුඩා පරිමා මික්සර් දෙක සඳහා, ප්‍රවාහ අනුපාතය අඩු වන විට සයිනාකාර හැකිලීමේ සුළු වැඩිවීමක් ඇති අතර, එය මිශ්‍රකයේ ද්‍රාවකයේ පදිංචි කාලය වැඩි වීම නිසා අපේක්ෂා කෙරේ, එමඟින් විසරණ මිශ්‍රණය වැඩි වීමට ඉඩ සලසයි. ප්‍රවාහය තවදුරටත් අඩු වන විට සයින් තරංගයේ අඩු කිරීම වැඩි වනු ඇතැයි අපේක්ෂා කෙරේ. කෙසේ වෙතත්, ඉහළම සයින් තරංග පාදක දුර්වලතාවයක් සහිත විශාලතම මික්සර් පරිමාව සඳහා, සයින් තරංග පාදක දුර්වලතාවය පාහේ නොවෙනස්ව පැවතුනි (පර්යේෂණාත්මක අවිනිශ්චිතතාවයේ පරාසය තුළ), අගයන් 95% සිට 98% දක්වා පරාසයක පවතී. සහල්. 10. 1 වන අවස්ථාවෙහිදී සයින් තරංගයක ප්‍රවාහ අනුපාතයට එදිරිව මූලික දුර්වල කිරීම. පරීක්ෂණය සිදු කරන ලද්දේ විචල්‍ය ප්‍රවාහ අනුපාතයක් සහිත සයින් පරීක්ෂණයට සමාන කොන්දේසි යටතේ වන අතර, ඇසිටොනයිට්‍රයිල් සහ ජලය 80/20 මිශ්‍රණයකින් 80% ක් සහ 20 mM ඇමෝනියම් ඇසිටේට් වලින් 20% ක් එන්නත් කරමිනි.
අභ්‍යන්තර වෙළුම් තුනක් සහිත පේටන්ට් බලපත්‍රලාභී PerfectPeakTM පේළිගත ස්ථිතික මික්සර්වල අලුතින් සංවර්ධනය කරන ලද පරාසය: 30 µl, 60 µl සහ 90 µl, වැඩිදියුණු කළ මිශ්‍ර කිරීම සහ අඩු විසරණ බිම් අවශ්‍ය වන බොහෝ HPLC විශ්ලේෂණ සඳහා අවශ්‍ය පරිමාව සහ මිශ්‍ර කිරීමේ කාර්ය සාධන පරාසය ආවරණය කරයි. නව ස්ථිතික මික්සර් මෙය සාක්ෂාත් කරගන්නේ නව 3D මුද්‍රණ තාක්ෂණය භාවිතා කිරීමෙන් අද්විතීය 3D ව්‍යුහයක් නිර්මාණය කිරීම සඳහා අභ්‍යන්තර මිශ්‍රණයේ ඒකක පරිමාවකට මූලික ශබ්දයේ ඉහළම ප්‍රතිශත අඩු කිරීම සමඟ වැඩිදියුණු කළ ජල ගතික ස්ථිතික මිශ්‍රණයක් ලබා දීමෙනි. සාම්ප්‍රදායික මික්සරයක අභ්‍යන්තර පරිමාවෙන් 1/3 ක් භාවිතා කිරීමෙන් මූලික ශබ්දය 98% කින් අඩු වේ. එවැනි මික්සර් විවිධ හරස්කඩ ප්‍රදේශ සහ විවිධ මාර්ග දිග සහිත අන්තර් සම්බන්ධිත ත්‍රිමාණ ප්‍රවාහ නාලිකා වලින් සමන්විත වන අතර එමඟින් ද්‍රවය ඇතුළත සංකීර්ණ ජ්‍යාමිතික බාධක තරණය කරයි. ස්ථිතික මික්සර්වල නව පවුල තරඟකාරී මික්සර්වලට වඩා වැඩිදියුණු කළ කාර්ය සාධනයක් ලබා දෙයි, නමුත් අඩු අභ්‍යන්තර පරිමාවක් සහිතව, එහි ප්‍රතිඵලයක් ලෙස වඩා හොඳ සංඥා-ශබ්ද අනුපාතය සහ අඩු ප්‍රමාණාත්මක සීමාවන් මෙන්ම ඉහළ සංවේදීතාව සඳහා වැඩිදියුණු කළ උච්ච හැඩය, කාර්යක්ෂමතාව සහ විභේදනය ලබා දේ.
මෙම කලාපයේ වර්ණදේහ විද්‍යාව - පරිසර හිතකාමී RP-HPLC - විශ්ලේෂණය සහ පිරිසිදු කිරීමේදී ඇසිටොනයිට්‍රයිල් අයිසොප්‍රොපනෝල් සමඟ ප්‍රතිස්ථාපනය කිරීම සඳහා හර-කවච වර්ණදේහ භාවිතය -... සඳහා නව වායු වර්ණදේහ විද්‍යාව.
ව්‍යාපාරික මධ්‍යස්ථානය ජාත්‍යන්තර ලැබ්මේට් ලිමිටඩ් ඕක් කෝට් සැන්ඩ්‍රිජ් පාර්ක්, පෝටර්ස් වුඩ් ශාන්ත ඇල්බන්ස් හර්ට්ෆර්ඩ්ෂයර් AL3 6PH එක්සත් රාජධානිය