Faafetai mo le asiasi ile Nature.com.O le su'esu'ega o lo'o e fa'aogaina e fa'atapula'aina le lagolago a le CSS.Mo le poto sili ona lelei, matou te fautuaina oe e te faʻaogaina se suʻesuʻega fou (pe faʻamalo le Faiga Faʻatasi i Internet Explorer).I le taimi nei, ina ia mautinoa le faʻaauauina o le lagolago, matou te tuʻuina atu le saite e aunoa ma sitaili ma JavaScript.
O le atina'eina o meaola ninii e aofia ai le fa'afete'ena'i i le va o filifiliga faanatura, lea e fa'atupuina ai le fa'aleleia atili o parasite, ma fa'ase'e fa'atagata, lea e mafua ai ona leiloa kenera ma fa'aputu ai suiga leaga.O iinei, ina ia malamalama pe faʻafefea ona tupu lenei faʻalavelave i luga o le fua o se tasi macromolecule, matou te faʻamatalaina le cryo-EM fausaga o le ribosome o Encephalitozoon cuniculi, o se meaola eukaryotic ma se tasi o genomes aupito itiiti i le natura.O le faʻaitiitia tele o le rRNA i le E. cuniculi ribosomes o loʻo faʻatasi ma suiga faʻavae e leʻi tupu muamua, e pei o le evolusione o fesoʻotaʻiga rRNA fused e leʻi iloa muamua ma rRNA e aunoa ma bulges.E le gata i lea, o le E. cuniculi ribosome na sao mai le leiloa o vaega o le rRNA ma polotini e ala i le atinaʻeina o le gafatia e faʻaogaina ai molelaʻau laiti e pei o faʻataʻitaʻiga faʻataʻitaʻiga o vaega faʻaleagaina o le rRNA ma polotini.I le aotelega, matou te faʻaalia o le molecular structures ua leva ona manatu e faʻaitiitia, faʻaleagaina, ma e mafai ona faʻavaivaia suiga o loʻo i ai le tele o faiga faʻamalieina e faʻamalosia ai i latou e ui lava i le ogaoga o faʻalavelave mole.
Talu ai ona o le tele o vaega o microbial parasites ei ai meafaigaluega mole mole tulaga ese e faʻaogaina ai a latou 'au, e masani ona tatou atiaʻe togafitiga eseese mo vaega eseese o parasites1,2.Ae ui i lea, o faʻamaoniga fou o loʻo taʻu mai ai o nisi vaega o le evolusione parasite e faʻafeiloaʻi ma e tele lava ina vaʻaia, e faʻaalia ai se faʻavae talafeagai mo togafitiga faʻapitoa i microbial parasites3,4,5,6,7,8,9.
O galuega talu ai ua fa'ailoa mai ai se fa'asologa masani o le evolusione i meaola ninii e ta'ua o le genome reduction po'o le genome decay10,11,12,13.O suʻesuʻega o loʻo iai nei o loʻo faʻaalia ai pe a tuʻu e meaola ninii o latou olaga ola saoloto ma avea ma parasite intracellular (poʻo endosymbionts), o latou genomes e faʻasolosolo malie ae ofoofogia metamorphoses i le faitau miliona o tausaga9,11.I se fa'agasologa ua ta'ua o le genome decay, e fa'aputuina e ni fa'ama'i fa'ama'i ni suiga leaga e fa'aliliuina ai le tele o genes sa taua muamua i pseudogenes, e o'o atu ai i le faasolosolo malie o le gau o le kenele ma le fa'aleagaina o suiga14,15.O lenei pa'u e mafai ona fa'aumatia e o'o atu i le 95% o kenera o lo'o i totonu ole tino matua matutua pe a fa'atusatusa atu i meaola vavalalata vavalalata ola saoloto.O le mea lea, o le atinaʻeina o parasite intracellular o se toso-o-taua i le va o malosiaga faʻafeagai se lua: Darwinian natural selection, e oʻo atu ai i le faʻaleleia atili o parasites, ma le paʻu o le genome, lafoina parasites i le galo.O le auala na mafai ai e le parasite ona alu aʻe mai lenei toso-o-tau ma taofi le gaioiga o lona fausaga mole e tumau pea le le manino.
E ui lava e le o malamalama atoatoa i le auala o le genome pala, e foliga mai e tupu tele ona o le faʻasolosolo faʻasolosolo.Talu ai ona o parasite e ola i totonu o tagata laiti, fa'afeusuaiga, ma fa'agata fa'agata, e le mafai ona latou fa'amae'aina suiga fa'aleagaina lea e tutupu i nisi taimi a'o faia le DNA.O lenei mea e mafua ai le faʻaputuina o suiga leaga ma faʻaitiitia ai le genome parasite.O se taunuuga, o le parasite e le gata e leiloa kenera e le toe manaʻomia mo lona ola i totonu o le siosiomaga intracellular.O le le mafaia e le faitau aofaʻi o parasite ona faʻamutaina lelei suiga faʻaleagaina e mafua ai ona faʻaputuina nei suiga i le genome, e aofia ai o latou kene sili ona taua.
O le tele o lo tatou malamalama i le taimi nei o le faʻaitiitia o le genome e faʻavae naʻo luga o faʻatusatusaga o faʻasologa o genome, ma le itiiti ifo o le gauai atu i suiga i mole mole moni o loʻo faʻatinoina galuega tau fale ma avea ma faʻamoemoega o vailaʻau.O suʻesuʻega faʻatusatusa ua faʻaalia ai o le mamafa o suiga ole microbial intracellular e foliga mai e faʻaalia ai polotini ma nucleic acids e sese ma faʻapipiʻi, e sili atu ona faalagolago le chaperone ma hypersensitive i le vevela19,20,21,22,23.E le gata i lea, o le tele o parasite-tutoʻatasi evolusione o nisi taimi e vavae ese e tusa ma le 2.5 piliona tausaga-na oʻo i se faʻaletonu tutusa o nofoaga autu e pulea lelei i la latou faʻasologa o porotini5,6 ma le faʻaleleia o DNA24.Ae ui i lea, e itiiti se mea e iloa e uiga i le aʻafiaga o le olaga intracellular i luga o isi meatotino uma o macromolecules telefoni feaveaʻi, e aofia ai mole mole fetuutuunai i se avega faʻateleina o suiga leaga.
I lenei galuega, ina ia malamalama atili i le evolusione o polotini ma nucleic acids o microorganisms intracellular, matou fuafuaina le fausaga o ribosomes o le intracellular parasite Encephalitozoon cuniculi.O le E. cuniculi o se meaola e pei o le gaʻo o loʻo iai i se vaega o microsporidia parasitic o loʻo i ai ni genom eukaryotic e le masani ai ma o lea e faʻaaogaina ai ni meaola faʻataʻitaʻi e suʻesuʻe ai le genome decay25,26,27,28,29,30.Talu ai nei, o le cryo-EM ribosome fausaga na fuafuaina mo genomes moderately faaitiitia o Microsporidia, Paranosema locustae, ma Vairimorpha necatrix31,32 (~ 3.2 Mb genome).O nei fausaga o loʻo fautua mai ai o le leiloa o le faʻalauteleina o le rRNA e tauia e le atinaʻeina o fesoʻotaʻiga fou i le va o palatini ribosomal tuaoi poʻo le mauaina o msL131,32 ribosomal proteins fou.Species Encephalitozoon (genome ~ 2.5 miliona bp), faʻatasi ai ma le latou aiga vavalalata Ordospora, faʻaalia le maualuga maualuga o le faʻaitiitia o le genome i eukaryotes - e itiiti ifo i le 2000 kenera-coding genes, ma e faʻamoemoeina o latou ribosomes e le gata e leai ni vaega faʻalautele rRNA (rRNA fragments e faʻaeseese ai le eukaryol ribosomes mai le ribosomes faʻamaʻi e maua ai foʻi le eukaryotic ribosome) homologues i le E. cuniculi genome26,27,28.O le mea lea, na matou faʻamaonia ai o le E. cuniculi ribosome e mafai ona faʻaalia ni taʻiala e leʻi iloa muamua mo le faʻaogaina o le mole i le genome decay.
O la matou cryo-EM fausaga e fai ma sui o le eukaryotic cytoplasmic ribosome laʻititi e faʻaalia ma maua ai le faʻamalamalamaga i le faʻafefea ona aʻafia le faʻaitiitiga o le genome i le fausaga, faʻapotopotoga, ma le evolusione o masini mole mole e faʻatatau i le sela.Na matou iloa o le E. cuniculi ribosome ua solia le tele o mataupu faavae lautele faasao o RNA gaugau ma ribosome potopotoga, ma maua ai se polotini ribosomal fou, le iloa muamua.E leʻi mafaufauina, matou te faʻaalia ai o microsporidia ribosomes ua faʻaleleia le gafatia e fusifusia ai mole mole laiti, ma faʻapea o le tipiina i le rRNA ma proteins e faʻaosoina ai suiga fou e mafai ona maua ai uiga aoga i luga o le ribosome.
Ina ia faʻaleleia lo matou malamalama i le atinaʻeina o polotini ma nucleic acids i totonu o meaola i totonu o le tino, na matou filifili e faʻaesea E. cuniculi spores mai aganuu o siama mamamei ua afaina ina ia faʻamamā ai o latou ribosomes ma fuafua le fausaga o nei ribosomes.E faigata ona maua se numera tele o microsporidia parasitic ona e le mafai ona faʻatupuina microsporidia i se meaʻai.Nai lo o lea, latou te tutupu ma fanafanau na o totonu lava o le sela e nofo ai.O le mea lea, ina ia maua le E. cuniculi biomass mo le faʻamamaina o ribosome, na matou faʻamaʻiina le laina sela sela mamame RK13 ma E. cuniculi spores ma faʻatupuina nei sela faʻamaʻi mo ni nai vaiaso ina ia mafai ai e E. cuniculi ona tupu ma faʻateleina.I le fa'aogaina o se monolayer fa'ama'i pipisi e tusa ma le afa mita sikuea, na mafai ai ona matou fa'amamāina pe tusa ma le 300 mg o Microsporidia spores ma fa'aogaina e fa'aesea ribosomes.Ona matou faʻalavelaveina lea o spores faʻamamaina i pulu tioata ma vavae ese ribosomes mama e faʻaaoga ai le stepwise polyethylene glycol fractionation o lysates.O lenei mea na mafai ai ona matou maua pe tusa ma le 300 µg o E. cuniculi ribosomes mata mo le suʻesuʻeina o fausaga.
Ona matou aoina mai lea o ata cryo-EM e faʻaaoga ai faʻataʻitaʻiga ribosome na maua ma faʻaogaina nei ata e faʻaaoga ai matapulepule e fetaui ma le tele o le ribosomal subunit, ulu laʻititi laʻititi, ma le vaega laiti.I le faagasologa o lenei faagasologa, na matou aoina ai ata o le 108,000 ribosomal particles ma faʻatusatusa ata cryo-EM faʻatasi ai ma se iugafono o le 2.7 Å (Ata Faʻaopoopo 1-3).Ona matou faʻaogaina lea o ata cryoEM e faʻataʻitaʻi ai le rRNA, ribosomal protein, ma le hibernation factor Mdf1 e fesoʻotaʻi ma E. cuniculi ribosomes (Fig. 1a, b).
a Fa'atulagaga o le E. cuniculi ribosome i fa'alavelave fa'atasi ai ma le fa'ameamea Mdf1 (pdb id 7QEP).b Fa'afanua o le fa'atama'itaga Mdf1 feso'ota'i ma le E. cuniculi ribosome.c Fa'afanua fausaga lua fa'atusatusa le rRNA toe maua i ituaiga Microsporidian i fausaga ribosomal ua iloa.O loʻo faʻaalia e panels le nofoaga o faʻapipiʻi rRNA fragments (ES) ma nofoaga faʻamalosi ribosome, e aofia ai le decoding site (DC), le sarcinicin loop (SRL), ma le peptidyl transferase center (PTC).d O le eletise eletise e fetaui ma le peptidyl transferase centre o le E. cuniculi ribosome o loʻo taʻu mai ai o lenei nofoaga catalytic e tutusa le fausaga i le E. cuniculi parasite ma ona 'au, e aofia ai le H. sapiens.u, f O le tutusa eletonika density o le decoding nofoaga autu (e) ma le schematic fausaga o le decoding nofoaga autu (f) faailoa mai o E. cuniculi o totoe U1491 nai lo A1491 (E. coli numera) i le tele o isi eukaryotes.O lenei suiga ua ta'u mai ai e ono ma'ale'ale le E. cuniculi i vailaau fa'ama'i e fa'atatau i lenei nofoaga galue.
I le faʻatusatusa i le faʻatulagaina muamua o le V. necatrix ma le P. locustae ribosomes (o fausaga uma e lua o loʻo faʻatusalia ai le microsporidia aiga Nosematidae ma e tutusa lava le tasi i le isi), 31,32 E. cuniculi ribosomes e feagai ma le tele o faagasologa o le rRNA ma le fragmentation protein.Fa'aopoopo fa'aletonu (Ata Fa'aopoopo 4-6).I le rRNA, o suiga sili ona mataʻina e aofia ai le leiloa atoa o le 25S rRNA fragment ES12L faʻateleina ma le faʻaleagaina o vaega o h39, h41, ma H18 helices (Fig. 1c, Faʻaopoopo Ata 4).I totonu o polotini ribosomal, o suiga sili ona mataʻina na aofia ai le leiloa atoa o le eS30 protein ma le faʻapuupuu o le eL8, eL13, eL18, eL22, eL29, eL40, uS3, uS9, uS14, uS17, ma eS7 proteins (Faʻaopoopoga Faʻatusa 4, 5).
O le mea lea, o le faʻaitiitia tele o genomes o ituaiga Encephalotozoon / Ordospora o loʻo faʻaalia i lo latou fausaga ribosome: E. cuniculi ribosomes maua le leiloa sili ona mataʻutia o mea o le porotini i le eukaryotic cytoplasmic ribosomes i lalo o le fausaga fausaga, ma latou te le maua foi na vaega rRNA ma polotini o loo faasaosaoa lautele i le eukaryotes domains e le gata i le ola.O le fausaga o le E. cuniculi ribosome o loʻo maua ai le faʻataʻitaʻiga mole mole muamua mo nei suiga ma faʻaalia ai mea tutupu faʻafuaseʻi ua le amanaʻia e le faʻatusatusaina o genomics ma suʻesuʻega o le intracellular biomolecular structure (Faʻaopoopo Ata 7).I lalo ifo, matou te faʻamatalaina ia mea taʻitasi faʻatasi ai ma o latou tupuaga faʻasolosolo ma o latou aʻafiaga i luga o le gaioiga o ribosome.
Ona matou iloa ai lea, i le faaopoopo atu i le tele o le rRNA truncations, E. cuniculi ribosomes ei ai rRNA fesuiaiga i se tasi o latou nofoaga galue.E ui lava o le peptidyl transferase centre o le E. cuniculi ribosome o loʻo i ai le fausaga tutusa ma isi eukaryotic ribosomes (Fig. 1d), e ese le nofoaga o le decoding ona o le fesuiaiga o le faasologa i le nucleotide 1491 (E. coli numera, Ata 1e, f).E taua tele lenei mata'ituina ona o le nofoaga e filifili ai eukaryotic ribosomes e masani lava ona i ai toega G1408 ma le A1491 pe a fa'atusatusa i vaega o siama siama A1408 ma le G1491.O lenei fesuiaiga o loʻo faʻavaeina ai le lagona eseese o ribosomes siama ma eukaryotic i le aiga aminoglycoside o vailaʻau faʻamaʻi ribosomal ma isi molelaʻau laiti e faʻatatau i le nofoaga e filifili ai.I le nofoaga decoding o le E. cuniculi ribosome, toega A1491 na suia i le U1491, e mafai ona fausia ai se tulaga faʻapipiʻi faʻapitoa mo molelaʻau laiti faʻatatau i lenei nofoaga galue.O loʻo iai foʻi le A14901 fesuiaiga tutusa i isi microsporidia e pei o le P. locustae ma le V. necatrix, o loʻo fautua mai ai o loʻo salalau i ituaiga microsporidia (Fig. 1f).
Ona o matou E. cuniculi ribosome samples na vavae ese mai spores metabolically inactive, matou tofotofoina le cryo-EM map o E. cuniculi mo le faʻamatalaina muamua o ribosome fusifusia i lalo o le atuatuvale poʻo le matelaina tulaga.Fa'atupu fa'ama'i 31,32,36,37, 38. Na matou fa'atusaina le fa'atulagaina muamua o le ribosome hibernating ma le fa'afanua cryo-EM o le E. cuniculi ribosome.Mo fa'amau, S. cerevisiae ribosomes sa fa'aogaina i le lavelave fa'atasi ma le hibernation factor Stm138, o se akerise ribosomes i fa'alavelave fa'atasi ma le Lso232 fa'ata, ma le V. necatrix ribosomes i fa'alavelave fa'atasi ma Mdf1 ma Mdf231 mea.I le taimi lava e tasi, na matou maua ai le cryo-EM density e fetaui ma le vaega totoe Mdf1.E tutusa ma le Mdf1 o loʻo fusifusia i le V. necatrix ribosome, o le Mdf1 foʻi e fusifusia i le E. cuniculi ribosome, lea e poloka ai le nofoaga E o le ribosome, atonu e fesoasoani e faʻaogaina ai ribosomes pe a faʻaleagaina spores parasite i le metabolically inactivation (Ata 2).).
Ua poloka e le Mdf1 le nofoaga E o le ribosome, lea e foliga mai e fesoasoani e fa'agataina le ribosome pe a o'o ina le gaioi fa'ato'aga.I le fausaga o le E. cuniculi ribosome, na matou iloa ai o le Mdf1 o loʻo faia se fesoʻotaʻiga e leʻi iloa muamua ma le L1 ribosome stem, o le vaega o le ribosome lea e faʻafaigofie ai le tuʻuina atu o le tRNA deacylated mai le ribosome i le taimi o le protein synthesis.O nei fesoʻotaʻiga o loʻo fautua mai ai o le Mdf1 e vavae ese mai le ribosome e faʻaaoga ai le masini tutusa e pei o le deacetylated tRNA, e tuʻuina atu ai se faʻamatalaga talafeagai mo le auala e aveese ai e le ribosome Mdf1 e toe faʻaleleia ai le faʻaogaina o le protein.
Ae ui i lea, o le matou fausaga na faʻaalia ai se fesoʻotaʻiga le iloa i le va o le Mdf1 ma le L1 ribosome leg (le vaega o le ribosome e fesoasoani e faʻasaʻo le tRNA deacylated mai le ribosome i le taimi o le protein synthesis).Aemaise lava, Mdf1 faʻaogaina fesoʻotaʻiga tutusa e pei o le vaega tulilima o le mole tRNA deacylated (Ata. 2).O lenei faʻataʻitaʻiga mole mole e leʻi iloa muamua na faʻaalia ai o le Mdf1 e vavae ese mai le ribosome e faʻaaoga ai le masini tutusa e pei o le deacetylated tRNA, lea e faʻamatalaina ai le auala e aveese ai e le ribosome lenei mea faʻagata e toe faʻagaoioia ai le protein synthesis.
I le fausiaina o le rRNA faʻataʻitaʻiga, na matou iloa ai o le E. cuniculi ribosome e masani ona gaugau vaega rRNA, lea na matou taʻua o le fused rRNA (Fig. 3).I ribosomes o loʻo faʻalauteleina vaega e tolu o le olaga, o le rRNA e gaugau i fausaga e faʻavae ai le tele o le rRNA poʻo le paʻu faavae ma gaugau le tasi ma le isi pe fegalegaleai ma ribosomal proteins38,39,40.Ae ui i lea, i le E. cuniculi ribosomes, e foliga mai e solia e rRNA lenei mataupu faavae gaugau e ala i le faaliliuina o nisi o latou helices i vaega rRNA tatala.
Faiga o le H18 25S rRNA helix i S. cerevisiae, V. necatrix, ma E. cuniculi.E masani lava, i ribosomes o loʻo faʻasalalau vaega e tolu o le olaga, o lenei fesoʻotaʻiga e faʻapipiʻi i totonu o se RNA helix e aofia ai le 24 i le 34 toega.I le Microsporidia, i se fa'afeagai, o lenei rRNA so'otaga ua fa'aitiitiga fa'aitiitiga i le lua fa'amaua'i fa'a'oa o le uridine e na'o le 12 o totoe.O le tele o nei toega o loʻo faʻaalia i soʻo.O le ata o loʻo faʻaalia ai o le microsporidia parasitic e foliga mai e soli tulafono lautele o le gaugau o le rRNA, lea e masani ona faʻapipiʻi ai faʻavae rRNA i isi faʻavae pe aʻafia i fegalegaleaiga rRNA-protein.I microsporidia, o nisi vaega o le rRNA e maua i luga o se gauga le lelei, lea e avea ai le rRNA helix muamua ma se vaega manoa e tasi e faʻalauteleina toetoe lava i se laina saʻo.O le i ai o nei itulagi e le masani ai e mafai ai e microsporidia rRNA ona fusifusia vaega mamao o le rRNA e faʻaaoga ai se numera laʻititi o faʻavae RNA.
O le faʻataʻitaʻiga sili ona mataʻina o lenei suiga faʻasolosolo e mafai ona matauina i le H18 25S rRNA helix (Fig. 3).I ituaiga mai le E. coli i tagata, o faʻavae o lenei rRNA helix o loʻo i ai 24-32 nucleotides, e fai ai se helix e le masani ai.I fausaga ribosomal na iloa muamua mai V. necatrix ma P. locustae, 31,32 o faʻavae o le H18 helix o loʻo i ai se vaega e le faʻaogaina, ae o loʻo faʻasaoina le paʻu o le nucleotide.Ae ui i lea, i le E. cuniculi ua avea lenei vaega rRNA ma sootaga sili ona puupuu 228UUUGU232 ma 301UUUUUUUUU307.E le pei o vaega masani o le rRNA, o nei uridine-rich linkers e le faʻapipiʻiina pe faʻafesoʻotaʻi tele ma polotini ribosomal.Nai lo lena, latou te faʻaaogaina le solvent-tatala ma faʻamaʻi atoatoa fausaga e faʻalautele ai le rRNA strands toetoe lava saʻo.O lenei fa'a'oloa fa'amanino e fa'amatala ai le fa'aogaina e E. cuniculi na'o le 12 RNA fa'avae e fa'atumu ai le 33 Å va i le va o le H16 ma le H18 rRNA helices, ae o isi ituaiga e mana'omia a itiiti ifo ma le faaluaina le tele o fa'avae rRNA e fa'atumu ai le avanoa.
O le mea lea, e mafai ona tatou faʻaalia, e ala i le gaugau malosi le lelei, microsporidia parasitic ua atiaʻe se taʻiala e faʻakonekarate e oʻo lava i vaega o le rRNA o loʻo tumau pea le faʻasaoina o ituaiga i vaega e tolu o le olaga.E foliga mai, e ala i le faaputuputu suiga e suia rRNA helices i pupuu poly-U linkers, E. cuniculi e mafai ona fausia ni vaega rRNA e le masani ai o loo i ai ni nai nucleotides e mafai mo ligation o fasi vaega rRNA mamao.E fesoasoani lea e fa'amatala ai pe fa'apefea ona ausia e le microsporidia se fa'aitiitiga tele i le fa'avae mole mole fa'avae e aunoa ma le fa'aletonu o latou fausaga ma le fa'atinoina.
O le isi mea e le masani ai o le E. cuniculi rRNA o le foliga mai o le rRNA e aunoa ma ni mafiafia (Ata 4).O pulupulu o nucleotides e leai ni paga faavae e mimilo ese mai le RNA helix nai lo le natia i totonu.Ole tele ole rRNA protrusions e fai ma fa'apipi'i mole, fesoasoani i le fusifusia o palatini ribosomal lata ane po'o isi vaega rRNA.O nisi o pulupulu e fai e pei o fa'amau, e fa'ataga ai le rRNA helix e fefiloi ma gaugau lelei mo le fa'atupuina o porotini 41 .
a O le rRNA protrusion (S. cerevisiae numera) e le o iai mai le E. cuniculi ribosome structure, ae o loʻo iai i le tele o isi eukaryotes b E. coli, S. cerevisiae, H. sapiens, ma E. cuniculi ribosomes totonu.parasites e leai se tele o pupuu rRNA anamua, sili ona faasaoina.O nei mafiafia e faʻamautu ai le fausaga o ribosome;o le mea lea, o lo latou toesea i microsporidia o loʻo faʻaalia ai le faʻaitiitia o le mautu o le gaugau rRNA i microsporidia parasites.Faatusatusaga ma P stems (L7/L12 stems in bacteria) o loʻo faʻaalia ai o le leiloa o le rRNA bumps i nisi taimi e fetaui ma foliga fou o patupatu i tafatafa o le leiloa.O le H42 helix i le 23S / 28S rRNA o loʻo i ai se faʻailoga anamua (U1206 i Saccharomyces cerevisiae) faʻatatau e le itiiti ifo i le 3.5 piliona tausaga ona o lona puipuiga i vaega e tolu o le olaga.I microsporidia, ua faʻaumatia lenei faʻalavelave.Ae ui i lea, na aliali mai se pupu fou i tafatafa o le pupu na leiloa (A1306 i E. cuniculi).
O le mea e ofo ai, na matou iloa ai o le E. cuniculi ribosomes e leai se tele o le rRNA bulges o loʻo maua i isi ituaiga, e aofia ai le sili atu ma le 30 bulges faʻasaoina i isi eukaryotes (Fig. 4a).O lenei gau e faʻaumatia ai le tele o fesoʻotaʻiga i le va o le ribosomal subunits ma le rRNA helices lata ane, o nisi taimi e faia ai ni avanoa gaogao tetele i totonu o le ribosome, ma faʻateleina ai le E. cuniculi ribosome pe a faʻatusatusa i le tele o ribosomes masani (Fig. 4b).E le gata i lea, na matou iloa ai o le tele o nei bulges na leiloloa foi i le V. necatrix ma le P. locustae ribosome structures, lea na le amanaiaina e suʻesuʻega faʻavae muamua31,32.
O nisi taimi o le leiloa o le rRNA bulges e faʻatasi ma le atinaʻeina o bulges fou i tafatafa o le leiloa.Mo se faʻataʻitaʻiga, o le ribosomal P-stem o loʻo i ai se U1208 bulge (i Saccharomyces cerevisiae) na sao mai le E. coli i tagata ma o lea e faʻatatau i le 3.5 piliona tausaga.A'o faia le polotini, e fesoasoani lenei fa'ato'a i le la'au P e fealua'i i le va o fa'aputuga matala ma tapuni ina ia mafai ai e le ribosome ona su'e mea fa'aliliu ma tu'u atu i le nofoaga galue.I le E. cuniculi ribosomes, e le o iai lenei mafiafia;ae ui i lea, o se mafiafia fou (G883) o loʻo i totonu o le tolu taʻaloga faavae e mafai ona fesoasoani i le toe faʻaleleia o le fetuutuunai sili ona lelei o le P stem (Fig. 4c).
O a matou faʻamatalaga i luga o le rRNA e aunoa ma le faʻapipiʻiina o loʻo fautua mai ai o le faʻaitiitia o le rRNA e le gata i le leiloa o elemene rRNA i luga o le pito i luga o le ribosome, ae e mafai foi ona aofia ai le ribosome nucleus, e fatuina ai se faaletonu mole mole faʻapitoa e leʻi faʻamatalaina i sela ola saoloto.o lo'o matauina ituaiga olaola.
Ina ua maeʻa le faʻataʻitaʻiina o polotini ribosomal canonical ma le rRNA, na matou iloa ai e le mafai e vaega ribosomal masani ona faʻamatalaina vaega e tolu o le ata cryo-EM.E lua o nei fasi vaega o ni molelaiti laiti i le lapopoa (Ata. 5, Faaopoopo Ata. 8).O le vaega muamua o loʻo faʻapipiʻiina i le va o ribosomal proteins uL15 ma le eL18 i se tulaga e masani ona nofoia e le C-terminus o le eL18, lea e faapuupuuina i E. cuniculi.E ui lava e le mafai ona tatou iloa le faʻamatalaga o lenei mole, o le lapoʻa ma foliga o lenei motu mafiafia e faʻamalamalamaina lelei e ala i le iai o mole mole spermidine.O lona fusifusia i le ribosome e faʻamautuina e microsporidia-specific mutations i le uL15 proteins (Asp51 ma Arg56), lea e foliga mai e faʻateleina ai le vavalalata o le ribosome mo lenei mole laʻititi, aʻo latou faʻatagaina le uL15 e afifi le tamai mole i totonu o se fausaga ribosomal.Faaopoopo Ata 2).8, faʻamatalaga faaopoopo 1, 2).
Cryo-EM faʻataʻitaʻiga o loʻo faʻaalia ai le i ai o nucleotides i fafo atu o le ribose e fusifusia i le E. cuniculi ribosome.I le E. cuniculi ribosome, o lenei nucleotide o loʻo nofo i le nofoaga e tasi ma le 25S rRNA A3186 nucleotide (Saccharomyces cerevisiae numera) i le tele o isi eukaryotic ribosomes.b I le ribosomal structure o E. cuniculi, o lenei nucleotide o loʻo i le va o ribosomal proteins uL9 ma le eL20, ma faʻamautu ai le fesoʻotaʻiga i le va o palatini e lua.cd eL20 fa'asologa fa'asao su'esu'ega i ituaiga microsporidia.O le phylogenetic tree of Microsporidia species (c) ma le tele o le faasologa o le faasologa o le eL20 protein (d) o loʻo faʻaalia ai o totoe o le nucleotide-binding F170 ma le K172 o loʻo faʻasaoina i le tele o Microsporidia masani, sei vagana ai S. lophii, sei vagana ai le Microsporidia lala vave, lea na taofia ai le ES39L rRNA.E fa'aalia e le fa'atusa lea o toega fa'amauga nucleotide F170 ma le K172 o lo'o i ai na'o le eL20 o le genome microsporidia fa'aitiitia, ae le o isi eukaryotes.I le aotelega, o nei faʻamatalaga o loʻo fautua mai ai o Microsporidian ribosomes ua atiaʻe se nucleotide binding site e foliga mai e fusifusia mole AMP ma faʻaaogaina e faʻamautu ai fegalegaleaiga protein-protein i le fausaga ribosomal.O le maualuga o le faʻasaoina o lenei nofoaga faʻapipiʻi i Microsporidia ma lona toesea i isi eukaryotes e taʻu mai ai o lenei nofoaga e mafai ona maua ai se avanoa e ola ai mo Microsporidia.O le mea lea, o le nucleotide-binding pocket i le microsporidia ribosome e le foliga mai o se mea faʻaleagaina poʻo se faʻaiʻuga o le faʻaleagaina o le rRNA e pei ona faʻamatalaina muamua, ae o se faʻafouga faʻafouina aoga e mafai ai e le microsporidia ribosome ona faʻapipiʻi saʻo mole mole laiti, faʻaaogaina e fai ma poloka mole mole.poloka fau mo ribosomes.O lenei su'esu'ega ua na'o le microsporidia ribosome e iloa e fa'aogaina se nucleotide e tasi e fai ma poloka faufale.f Ala fa'afuafuaga fa'atusa e maua mai le fusifusia nucleotide.
O le mamafa lona lua mole mole mamafa mamafa o loʻo i luga o le fesoʻotaʻiga i le va o polotini ribosomal uL9 ma le eL30 (Fig. 5a).O lenei atinaʻe na faʻamatalaina muamua i le fausaga o le Saccharomyces cerevisiae ribosome o se nofoaga faʻapipiʻi mo le 25S nucleotide o le rRNA A3186 (vaega o le ES39L rRNA faʻaopoopoga)38.Na faʻaalia i le degenerate P. locustae ES39L ribosomes, o lenei fesoʻotaʻiga e fusifusia ai se nucleotide e tasi e le iloa 31, ma e manatu o lenei nucleotide o se faʻaitiitiga mulimuli o le rRNA, lea o le umi o le rRNA e ~ 130-230 faavae.ES39L ua fa'aitiitia ile nucleotide e tasi 32.43.O a matou ata cryo-EM e lagolagoina le manatu e mafai ona faʻamatalaina le mamafa e nucleotides.Ae ui i lea, o le maualuga maualuga o le matou fausaga na faʻaalia ai o lenei nucleotide o se molelaʻau extraribosomal, atonu o le AMP (Fig. 5a, b).
Ona matou fesili lea pe na aliali mai le nucleotide binding site i le E. cuniculi ribosome pe na iai muamua.Talu ai ona o le fusifusia o le nucleotide e masani ona faʻasalalau e le Phe170 ma le Lys172 toega i le eL30 ribosomal protein, na matou iloiloina le faʻasaoina o nei toega i le 4396 sui eukaryotes.E pei o le uL15 o loʻo i luga, na matou iloa ai o le Phe170 ma le Lys172 toega o loʻo faʻasaoina tele naʻo Microsporidia masani, ae leai i isi eukaryotes, e aofia ai Microsporidia Mitosporidium ma Amphiamblys atypical, lea e le faʻaititia ai le ES39L rRNA fragment 44, 45, 45c.-e).
Faʻatasi, o nei faʻamaumauga e lagolagoina le manatu e faapea o E. cuniculi ma atonu o isi microsporidia canonical ua faʻaleleia le gafatia e puʻeina lelei le tele o metabolites laiti i le fausaga ribosome e totogi ai le paʻu o le rRNA ma le maualuga o le porotini.I le faia o lea mea, ua latou atiina ae ai se tomai tulaga ese e fusifusia ai nucleotides i fafo atu o le ribosome, e faʻaalia ai o fausaga mole mole parasitic e taui e ala i le puʻeina o metabolites laiti ma faʻaaogaina e fai ma faʻataʻitaʻiga o le RNA faʻaleagaina ma vaega o porotini..
O le vaega lona tolu e leʻi faʻataʻitaʻiina o la matou faʻafanua cryo-EM, o loʻo maua i totonu o le ribosomal subunit tele.O le maualuga maualuga (2.6 Å) o la tatou faafanua o loʻo fautua mai ai o lenei mamafa e aʻafia i polotini ma tuʻufaʻatasiga tulaga ese o toega o filifili lapopoa, lea na mafai ai ona tatou iloa lenei mamafa o se porotini ribosomal e leʻi iloa muamua na matou taʻua o le msL2 (Microsporidia-specific protein L2) (metotia, ata 6).O la matou su'esu'ega homology na fa'aalia ai o le msL2 o lo'o fa'asaoina i le Microsporidia clade o le genus Encephaliter ma Orosporidium, ae leai i isi ituaiga, e aofia ai isi Microsporidia.I totonu o le ribosomal structure, msL2 o loʻo i ai se avanoa e mafua mai i le leiloa o le ES31L rRNA faʻalauteleina.I lenei gaogao, msL2 fesoasoani e fa'amautu le gaugau o le rRNA ma e mafai ona totogi mo le leiloa o le ES31L (Ata 6).
a Electron density ma faʻataʻitaʻiga o le Microsporidia-specific ribosomal protein msL2 maua i E. cuniculi ribosomes.b O le tele o ribosomes eukaryotic, e aofia ai le 80S ribosome o Saccharomyces cerevisiae, ua leiloa le ES19L rRNA amplification i le tele o ituaiga Microsporidian.O le faʻatulagaina muamua o le V. necatrix microsporidia ribosome o loʻo taʻu mai ai o le leiloa o le ES19L i nei faʻamaʻi e tauia e le evolusione o le msL1 ribosomal protein fou.I lenei suʻesuʻega, na matou iloa ai o le E. cuniculi ribosome foi na atiina ae se ribosomal RNA mimic protein faaopoopo e avea o se taui manino mo le leiloa o le ES19L.Peita'i, o le msL2 (o lo'o ta'ua nei o le polotini ECU06_1135) ma le msL1 e 'ese'ese le fa'avae ma le fa'afuafuaga.c O lenei su'esu'ega o le fa'atupuina o msL1 ma le msL2 ribosomal proteins e le'i feso'ota'i e fa'ailoa mai ai afai e fa'aputuina e ribosome suiga leaga i totonu o latou rRNA, e mafai ona latou ausia tulaga e le'i tupu muamua o le tu'ufa'atasiga eseese e o'o lava i se vaega la'ititi o meaola vavalalata.O lenei su'esu'ega e mafai ona fesoasoani e fa'amanino ai le amataga ma le fa'atupuina o le mitochondrial ribosome, lea e lauiloa ona o lona fa'aitiitia o le rRNA ma le fesuisuia'i fa'aletonu i le tuufaatasiga o porotini i ituaiga.
Ona matou faʻatusatusaina lea o le msL2 protein ma le msL1 protein na faʻamatalaina muamua, naʻo le microsporidia-specific ribosomal protein o loʻo maua i le V. necatrix ribosome.Na matou manana'o e su'e pe o le msL1 ma le msL2 e feso'ota'i i le evolusione.O la matou suʻesuʻega na faʻaalia ai o le msL1 ma le msL2 o loʻo nofoia le lua tutusa i le fausaga o le ribosom, ae e eseese tulaga faʻavae ma tulaga maualuga, lea e faʻaalia ai lo latou tupuaga tutoatasi (Fig. 6).O le mea lea, o le matou mauaina o le msL2 o loʻo tuʻuina atu ai faʻamaoniga e mafai e vaega o ituaiga eukaryotic faʻapipiʻi ona faʻatupuina tutoʻatasi polotini ribosomal faʻapitoa e totogi ai le leiloa o vaega o le rRNA.O lenei su'esu'ega e iloga i le tele o ribosomes eukaryotic cytoplasmic o lo'o i ai se polotini e le fesuisuia'i, e aofia ai le aiga lava e tasi o 81 ribosomal proteins.O foliga vaaia o le msL1 ma le msL2 i ituaiga eseese o microsporidia e tali atu ai i le leiloa o vaega lautele rRNA e taʻu mai ai o le faaleagaina o le fausaga mole mole o le parasite e mafua ai ona sailia e parasite suiga suiga, lea e ono iu ai ina latou mauaina i le faitau aofaʻi o parasite.fausaga.
Mulimuli ane, ina ua maeʻa la matou faʻataʻitaʻiga, matou te faʻatusatusaina le tuʻufaʻatasiga o le E. cuniculi ribosome ma le mea na valoia mai le genome sequence.O nisi o polotini ribosomal, e aofia ai le eL14, eL38, eL41, ma le eS30, na manatu muamua e misi mai le E. cuniculi genome ona o le leai o ni o latou homologues mai le E. cuniculi genome.O le leiloa o le tele o polotini ribosomal o lo'o va'ai mai fo'i i le tele o isi fa'ama'i fa'aitiitiga ma endosymbionts.Mo se fa'ata'ita'iga, e ui lava o le tele o siama ola fua o lo'o i ai le aiga lava e tasi e 54 ribosomal proteins, ae na'o le 11 o nei aiga porotini o lo'o i ai fa'ata'ita'iga e mafai ona iloa i genom su'esu'e ta'itasi o siama fa'asaina.I le lagolagoina o lenei manatu, o le leiloa o polotini ribosomal ua faʻataʻitaʻiina i le V. necatrix ma le P. locustae microsporidia, lea e le maua ai le eL38 ma le eL4131,32 proteins.
Ae ui i lea, o matou fausaga o loʻo faʻaalia ai e naʻo le eL38, eL41, ma le eS30 o loʻo leiloloa moni i le E. cuniculi ribosome.O le eL14 protein na faʻasaoina ma o loʻo faʻaalia e le matou fausaga le mafuaʻaga e le mafai ai ona maua lenei polotini i le suʻesuʻega homology (Fig. 7).I le E. cuniculi ribosomes, o le tele o le eL14 faʻapipiʻi nofoaga ua leiloa ona o le faʻaleagaina o le rRNA-amplified ES39L.I le leai o le ES39L, eL14 leiloa le tele o lona fausaga lona lua, ma na o le 18% o le faasologa eL14 e tutusa i E. cuniculi ma S. cerevisiae.O lenei fa'asologa leaga o le fa'asaoina e mata'ina ona e o'o lava i Saccharomyces cerevisiae ma Homo sapiens-o meaola na tutupu mai i le 1.5 piliona tausaga le va-e sili atu nai lo le 51% o toega tutusa i le eL14.O lenei faaletonu o le faasaoina o loo faamatalaina ai le mafuaaga o le E. cuniculi eL14 o loo taua i le taimi nei o le polotini M970_061160 ae le o le eL1427 ribosomal protein.
ma le Microsporidia ribosome na leiloa le ES39L rRNA faʻaopoopoga, lea na faʻaumatia ai se vaega o le eL14 ribosomal protein binding site.I le leai o le ES39L, o le eL14 microspore protein e maua ai le leiloa o le fausaga lona lua, lea e faʻaleagaina ai le α-helix muamua o le rRNA-binding i se laʻititi umi.b Fa'asologa o fa'asologa e tele e fa'aalia ai o le polotini eL14 e matua fa'asaoina i ituaiga eukaryotic (57% fa'asologa fa'asologa i le va o le fefete ma tagata homologues), ae le lelei le fa'asaoina ma le eseese i microsporidia (lea e le sili atu i le 24% o toega e tutusa ma le eL14 homologue).mai S. cerevisiae po'o H. sapiens).O lenei fa'asao le lelei o le fa'asologa ma le fesuiaiga o le fausaga lona lua o lo'o fa'amatalaina ai le mafua'aga e le'i maua ai le eL14 homologue i E. cuniculi ma pe aisea ua manatu ai ua leiloa lenei polotini i le E. cuniculi.I se fa'atusatusaga, E. cuniculi eL14 sa fa'ailoa muamua o se polotini M970_061160 putative.O lenei faʻamatalaga e faʻaalia ai o le microsporidia genome diversity o loʻo faʻatauvaʻa i le taimi nei: o nisi o kenera o loʻo manatu nei e leiloa i microsporidia o loʻo faʻasaoina moni lava, e ui lava i foliga matua eseese;nai lo lena, o nisi e manatu e fa'ailoga mo kenera microsporidia mo polotini e patino i anufe (fa'ata'ita'iga, le polotini hypothetical M970_061160) e fa'asino tonu mo polotini eseese e maua i isi eukaryotes.
O lenei su'esu'ega e ta'u mai ai o le fa'alumaina o le rRNA e mafai ona o'o atu ai i se fa'aletonu tele o le fa'asaoina o fa'asologa i palatini ribosomal lata ane, ma fa'aalia ai nei polotini e le mafai ona iloa mo su'esu'ega homology.O le mea lea, e mafai ona tatou faʻamaualuga le tulaga moni o le faʻaleagaina o mole i totonu o meaola laiti genome, talu ai o nisi o polotini e manatu e leiloa o loʻo tumau pea, e ui lava i foliga sili ona suia.
E fa'afefea ona fa'atumauina e parasite le galuega a latou masini mole mole i lalo o tulaga o le fa'aitiitia tele o le genome?O a matou suʻesuʻega e taliina lenei fesili e ala i le faʻamatalaina o le fausaga mole mole lavelave (ribosome) o E. cuniculi, o se meaola e iai se tasi o genomes eukaryotic laʻititi.
Ua iloa mo le toeitiiti atoa le luasefulu tausaga o le polotini ma le RNA mole i microbial parasites e masani ona ese mai a latou mole mole tutusa i ituaiga ola fua ona e leai ni nofoaga autu e pulea lelei, ua faaitiitia i le 50% o lo latou tele i microbes ola saoloto, ma isi.tele suiga fa'avaivai e fa'aleagaina ai le gaugau ma le fa'atinoina.Mo se faʻataʻitaʻiga, o le ribosomes o meaola laiti genome, e aofia ai le tele o parasites intracellular ma endosymbionts, ua faamoemoe e le lava ni polotini ribosomal ma e oo atu i le tasi vaetolu o rRNA nucleotides pe a faatusatusa i ituaiga ola saoloto 27, 29, 30, 49. Ae ui i lea, o le auala o loʻo galue nei molelaʻau i le parasite e tumau pea le tele o suʻesuʻega faʻapitoa e ala i mea lilo.
O a matou suʻesuʻega o loʻo faʻaalia ai o le fausaga o macromolecules e mafai ona faʻaalia ai le tele o vaega o le evolusione e faigata ona maua mai suʻesuʻega genomic faʻatusatusa masani o parasites intracellular ma isi meaola faʻasaina (Faʻaopoopo Ata 7).Mo se faʻataʻitaʻiga, o le faʻataʻitaʻiga o le porotini eL14 o loʻo faʻaalia ai e mafai ona tatou faʻatauvaʻa le tulaga moni o le faʻaleagaina o mea mole mole i ituaiga meaola.O parasite encephalitic ua talitonu nei o loʻo i ai le faitau selau o kenera faʻapitoa microsporidia.Ae ui i lea, o a matou faʻaiʻuga o loʻo faʻaalia ai o nisi o nei kenera e foliga mai e faʻapitoa e naʻo le eseesega tele o kenera e masani ai i isi eukaryotes.E le gata i lea, o le faʻataʻitaʻiga o le porotini msL2 o loʻo faʻaalia ai le ala tatou te le amanaiaina ai polotini ribosomal fou ma manatu faatauvaa i mea o loʻo i totonu o masini mole mole parasitic.O le faʻataʻitaʻiga o mole mole laiti e faʻaalia ai le auala e mafai ai ona tatou le amanaʻia mea fou sili ona atamai i fausaga mole mole parasitic e mafai ona tuʻuina atu ia i latou ni gaioiga fou.
A tu'ufa'atasia, o nei fa'ai'uga e fa'aleleia atili ai lo tatou malamalama i le 'ese'esega i le va o fausaga mole o meaola fa'atapula'aina ma a latou fa'atusa i meaola ola fua.Matou te faʻaalia o masini molekalale, ua leva ona manatu e faʻaitiitia, faʻaleagaina, ma oʻo atu i suiga faʻavaivaia eseese, nai lo le i ai o se seti o mea e le masani ai le faʻatulagaina.
I le isi itu, o le non-bulky rRNA fragments ma fused fragments lea na matou maua i ribosomes o E. cuniculi o loʻo fautua mai ai o le faʻaitiitia o le genome e mafai ona suia e oʻo lava i vaega na o masini mole mole faavae o loʻo faʻasaoina i vaega e tolu o le olaga - pe a uma le toeitiiti 3.5 piliona tausaga.tuputupu ae tutoatasi o ituaiga.
O vaega o le rRNA e leai se faʻafefe ma fused i E. cuniculi ribosomes e matua fiafia lava i le malamalama o suʻesuʻega muamua o mole RNA i siama endosymbiotic.Mo se faʻataʻitaʻiga, i le aphid endosymbiont Buchnera aphidicola, rRNA ma tRNA molecules ua faʻaalia e iai le vevela-maʻaleʻale fausaga ona o le A + T tuʻufaʻatasiga faʻaituau ma se vaega maualuga o le non-canonical base pairs20,50.O nei suiga i le RNA, faʻapea foʻi ma suiga i molecules protein, ua manatu nei e nafa ma le faʻalagolago tele o endosymbionts i paaga ma le le mafaia e endosymbionts ona faʻafeiloaʻi le vevela 21, 23 .E ui lava o le parasitic microsporidia rRNA o loʻo iai suiga faʻapitoa, o le natura o nei suiga e taʻu mai ai o le faʻaitiitia o le mautu o le vevela ma le maualuga o le faʻalagolago i polotini chaperone atonu o foliga masani o mole RNA i meaola e faʻaititia genomes.
I le isi itu, o matou fausaga o loʻo faʻaalia ai o le microsporidia parasite ua tupu aʻe se tomai tulaga ese e tetee atu ai i le lautele o le rRNA ma vaega o porotini, faʻalauteleina le mafai ona faʻaogaina le tele ma faigofie ona maua metabolites laiti e pei o faʻataʻitaʻiga o le faʻaleagaina o le rRNA ma vaega o porotini.Fa'aleagaina le fausaga mole..O lenei manatu e lagolagoina e le mea moni e faapea o molelaʻau laiti e tauia mo le leiloa o vaega o porotini i le rRNA ma ribosomes o le E. cuniculi e fusifusia i microsporidia-faʻapitoa toega i le uL15 ma le eL30 proteins.O loʻo faʻaalia ai o le fusifusia o tamaʻi molelaʻau i ribosomes atonu o se oloa o filifiliga lelei, lea na filifilia ai suiga faʻapitoa Microsporidia i ribosomal proteins mo lo latou gafatia e faʻateleina le vavalalata o ribosomes mo mole mole laiti, lea e ono oʻo atu ai i meaola ribosomal sili atu ona lelei.O le su'esu'ega o lo'o fa'aalia ai se fa'afouga atamai i le fausaga mole o meaola ninii ma maua ai se malamalamaga sili atu pe fa'afefea ona fa'atumauina galuega fa'atino e le mole mole parasite e ui lava i le fa'aitiitia o le evolusione.
I le taimi nei, o le faʻamaoniaina o nei moleki laiti o loʻo tumau pea le le manino.E le o manino pe aisea e ese ai le foliga o nei molelaiti laiti i le fausaga o le ribosomal i le va o ituaiga microsporidia.Aemaise lava, e le o manino pe aisea e matauina ai le fusifusia o le nucleotide i ribosomes o E. cuniculi ma P. locustae, ae le o ribosomes o le V. necatrix, e ui lava i le i ai o le F170 o totoe i le eL20 ma le K172 proteins o V. necatrix.O lenei tapeina e mafai ona mafua mai i le toega 43 uL6 (o loʻo i tafatafa o le nucleotide faʻamau taga), o le tyrosine i le V. necatrix ae le o le threonine i le E. cuniculi ma le P. locustae.Ole filifili pito sili ona manogi ole Tyr43 e mafai ona faʻalavelave ile fusifusia nucleotide ona o le faʻapipiʻiina.I le isi itu, o le tapeina o le nucleotide e mafai ona mafua ona o le maualalo o le iuga o le cryo-EM imaging, lea e taofia ai le faʻataʻitaʻiina o V. necatrix ribosomal fragments.
I le isi itu, o la matou galuega o loʻo fautua mai ai o le faʻagasologa o le genome e mafai ona avea ma se malosi faʻavae.Aemaise lava, o le fausaga o le E. cuniculi ribosome o loʻo taʻu mai ai o le leiloa o le rRNA ma vaega o le porotini i le microsporidia ribosome e fatuina ai le mamafa o le evolusione e faʻaleleia ai suiga i le fausaga o ribosome.O nei fesuiaiga e tupu mamao mai le nofoaga galue o le ribosome ma foliga mai e fesoasoani e faatumauina (pe toe faʻafoʻisia) faʻapotopotoga sili ona lelei ribosome e ono faʻalavelaveina e le faʻaitiitia o le rRNA.O lo'o fa'ailoa mai ai o se fa'afouga tele o le microsporidia ribosome e foliga mai ua tupu a'e i se mana'oga e fa'asa'o le fa'a'ese'esega o kene.
Masalo e sili ona faʻaalia lenei mea i le fusifusia o nucleotide, lea e leʻi matauina lava i isi meaola i le taimi nei.O le mea moni o toega nucleotide-binding o loʻo i ai i microsporidia masani, ae le o isi eukaryotes, o loʻo fautua mai ai o nucleotide-binding sites e le naʻo ni mea e faʻatali e mou, poʻo le nofoaga mulimuli mo le rRNA e toe faʻafoʻi i foliga o nucleotides taʻitasi.Nai lo lena, o lenei 'upega tafaʻilagi e foliga mai o se mea aoga e mafai ona tupu i luga o le tele o taamilosaga o filifiliga lelei.Nucleotide nofoaga e fusifusia atonu o se mea e maua mai i filifiliga faanatura: a faʻaleagaina le ES39L, e faʻamalosia le microsporidia e saili taui e toe faʻaleleia ai le biogenesis sili ona lelei pe a leai se ES39L.Talu ai ona o lenei nucleotide e mafai ona faʻataʻitaʻiina le fesoʻotaʻiga mole o le A3186 nucleotide i le ES39L, o le nucleotide mole e avea ma poloka faufale o le ribosome, o le fusia o ia mea e faʻaleleia atili e ala i suiga o le faasologa o le eL30.
E tusa ai ma le evolusione mole o parasite intracellular, o la matou suʻesuʻega o loʻo faʻaalia ai o le malosi o le filifiliga faanatura Darwinian ma le faʻasolosolo faʻasolosolo o le genome decay e le faʻaogaina tutusa, ae oscillate.Muamua, o le fa'a'ese'ese fa'a kenera e fa'ate'aina ai vaega taua o biomolecules, e matua mana'omia ai se taui.Na'o le taimi lava e fa'amalieina ai e parasite lenei mana'oga e ala i Darwinian natural selection ona maua ai lea e latou macromolecules se avanoa e atiina ae ai o latou uiga sili ona manaia ma fou.O le mea taua, o le evolusione o nucleotide saisai nofoaga i le E. cuniculi ribosome taʻu mai ai o lenei gau-i-maua mamanu o le evolusione mole e le gata amortizes deleterious suiga, ae o nisi taimi faaee atu atoatoa galuega tauave i macromolecules parasitic.
O lenei manatu e ogatasi ma le manatu o le paleni o le gaioi a Sewell Wright, lea e ta'ua ai o se faiga sa'o o filifiliga fa'alenatura e fa'atapula'aina ai le gafatia o meaola e fa'afouina51,52,53.Ae peita'i, afai e fa'alavelaveina le fa'a'ese'esega fa'alenatura, o nei fa'ase'e e mafai ona maua ai ni suiga e le mafai ona fa'afetaui (pe fa'aleagaina) ae o'o atu ai i isi suiga e maua ai le malosi maualuga atu po'o le gaioiga fou.E lagolagoina e le matou auivi lenei manatu e ala i le faʻaalia o le ituaiga tutusa o suiga e faʻaitiitia ai le gaugau ma le gaioiga o se biomolecule e foliga mai o le autu autu lea mo lona faʻaleleia.E tusa ai ma le faʻataʻitaʻiga o le win-win evolutionary model, o la matou suʻesuʻega o loʻo faʻaalia ai o le genome decay, e masani ona vaʻaia o se faʻagasologa o le degenerative, o se faʻataʻitaʻiga tele foi o mea fou, o nisi taimi ma atonu e masani ona faʻatagaina macromolecules e maua ai ni gaioiga fou.mafai ona faʻaaogaina.