Helitaanka nafaqada iyo qaybinta nafaqadu waxay isku daraysaa caleenta cayayaanka iyo sifooyinka taariikhda nolosha. Si loo magdhabo cilladaha nafaqooyinka gaarka ah ee marxaladaha kala duwan ee nolosha, cayayaanku waxay heli karaan nafaqooyinkan iyada oo loo marayo quudinta dheeriga ah, tusaale ahaan, iyada oo la quudinayo dheecaanka laf dhabarta ee habka loo yaqaan 'puddles. si loo qiimeeyo in An. Kacdoonka arabiensis ee kaadida lo'da ee helitaanka nafaqo waxay hagaajisaa sifooyinka taariikhda nolosha.
Hubi in ay badbaado leedahay.arabiensis waxaa soo jiitay urta cusub, 24-saac, 72-saacadood, iyo 168-saacadood kaadida lo'da, iyo marti-raadinta iyo dhiig-quudinta (48-saacadood cuntada ka dib) dheddigga waxaa lagu qiyaasaa Y-tube olfactometer ah, iyo dheddigga uurka leh ayaa lagu qiimeeyay kiimikaad la isku daray si loo baadho bayoolaji. Isku dhafka kaadida lo'da ee dhammaan fasalada afarta da'da ah. Isku-dhafka synthetic ee xeryahooda bioactive ayaa lagu qiimeeyay Y-tube iyo tijaabooyinka beerta. Si loo baaro kaadida lo'da iyo urea-ka ugu weyn ee nitrogen-ku jira sida cuntooyinka dheeriga ah ee ka hortagga duumada, cabbirrada quudinta iyo astaamaha taariikhda nolosha ayaa la qiyaasay. lagu qiimeeyay badbaadada, duulista ku xidhan, iyo taranka.
Raadi dhiigga martida loo yahay.In shaybaarka iyo goobaha waxbarashada, Carabta ayaa lagu sawiray in ay dabiiciga ah iyo synthetic udgoon ee kaadida lo'da cusub iyo da'da ah. Haweenka uurka leh waxay ahaayeen kuwo aan dan ka lahayn jawaabaha kaadida lo'da ee goobaha taranka. Marti-gelinta iyo dheddigga dhuuqaya waxay si firfircoon u nuugaan kaadida lo'da iyo HOL duulimaadka, badbaadada, ama taranka.
Qaadashada Anopheles arabinis iyo qaybinta kaadida lo'da si loo hagaajiyo sifooyinka taariikhda nolosha
Helitaanka nafaqeynta iyo qaybinta nafaqadu waxay isku daraysaa caleenta cayayaanka iyo sifooyinka taariikhda nolosha [1,2,3] Cayayaanka waxay awoodaan inay doortaan oo helaan cunto oo ay sameeyaan quudin magdhow ah oo ku salaysan helitaanka cuntada iyo shuruudaha nafaqada [1, 3] Qaybinta nafaqooyinka waxay ku xiran tahay habka nolosha-taariikhda waxayna u horseedi kartaa shuruudo kala duwan oo loogu talagalay tayada cuntada iyo tirada ee heerarka nolosha ee kala duwan, 2 si loo magdhabo heerarka nolosha ee kala duwan. Cayayaanka waxay ku heli karaan nafaqooyinkan iyada oo loo marayo quudinta dheeriga ah, sida dhoobada, saxarada kala duwan iyo dheecaanka laf dhabarta, iyo bakhti, habka loo yaqaan puddles [2].In kasta oo noocyada kala duwan ee balanbaalista iyo aboorka ayaa ugu horreyn lagu tilmaamay, godad waraabinta waxay sidoo kale ku dhacaan amarrada kale ee cayayaanka, iyo soo jiidashada iyo quudinta noocyadan kheyraadka ah waxay yeelan karaan saameyn la taaban karo oo ku saabsan caafimaadka iyo 6 kale. ,7].Kaneecada duumada Anopheles gambiae sensu lato (sl) waxay u soo baxdaa sidii qof weyn oo 'nafaqa-darro ah' [8], markaa waraabinta ayaa laga yaabaa inay door muhiim ah ka ciyaaraan sifooyinka taariikhda nolosha, laakiin dhaqankan ilaa hadda waa la dayacay.
Qaadashada Nitrogen-ka ee kaneecada Anopheles ee dumarka qaangaarka ah ayaa xaddidan sababtoo ah kaydka kalooriyada hoose ee laga soo qaaday marxaladda dirxiga iyo isticmaalka aan fiicnayn ee cuntada dhiigga [9]. kaneecadu waxay isticmaali kartaa quudinta dheeriga ah ee qashin-qubka laf-dhabarta si ay u helaan xeryahooda nitrogenous kuwaas oo kor u qaadaya la qabsiga iyo duulimaadka, sida ay muujiyeen cayayaanka kale [2]. Marka la eego, soo jiidashada xooggan oo kala duwan ee mid ka mid ah noocyada walaalaha ee gudaha An. Gambian sl nooc kakan, Anopheles arabinis, kaadida lo'da cusub iyo da'da cusub, Abin, 3 waa mid xiiso leh. Opportunistic in ay dookhyada martida loo yahay oo loo yaqaan in ay la xidhiidhaan oo ay ku quudiyaan lo'da.Kaadi lo'da waa kheyraad hodan ku xeryahooda nitrogenous, iyadoo urea xisaabin 50-95% of total nitrogen ee kaadida cusub [15, 16].Sida kaadi lo'da da'da, microorganisms ka faa'iidaysato khayraadkan si loo yareeyo kakanaanta ee saacadaha nitrogen gudahood.24. la xiriirta hoos u dhac ku yimaada nitrogen-ga dabiiciga ah, microorganisms alkalophilic (badankood oo soo saara xayndaabyada sunta kaneecada) way koraan [15], taas oo noqon karta dhedig Ann.arabiensis ayaa doorbidaya inay soo jiidato kaadida da'da 24 saacadood ama ka yar [13, 14].
Daraasaddan, martida loo yahay iyo Ans-da dhiigga ayaa la raadiyay. Inta lagu jiro wareegga ugu horreeya ee gonadotropin, arabiensis ayaa lagu qiimeeyay helitaanka xeryahooda nitrogenous, oo ay ku jiraan HOL, isku-darka kaadida Kaadida ayaa la qiimeeyay si loo go'aamiyo in kuwan ay bixiyeen tilmaamo lagu kalsoonaan karo oo loogu talagalay martida loo yahay iyo kuwa dhiigga lagu quudiyo An. Raadinta kheyraadkan nafaqada ee suurtagalka ah, arabiensis waxay ogaadeen isku-xirnaanta kiimikada ee ka dambeeya soo jiidashada kala duwanaanta. dawladaha physiological. Soo jiidashada kaneecada.Natiijooyinka la helay ayaa xaqiijinaya in An. arabiensis waxay helaysaa oo u qaybisaa xeryahooda nitrogenous ee laga helo kaadida laf dhabarta si ay u saameeyaan sifooyinka taariikhda nolosha. Natiijooyinkan waxaa looga hadlay macnaha cawaaqibka cudurrada faafa ee suurtagalka ah iyo sida loogu isticmaali karo ilaalinta iyo xakamaynta vector.
Anopheles arabicans (Dongola strain) ayaa lagu hayaa 25 ± 2 °C, 65 ± 5% RH iyo 12:12 h iftiin: wareeg madow 30 ml koob (Nolato Hertila, Åstorp, SE) ka dibna loo wareejiyay baqashada Bugdorm (30 cm × 30 cm × 30 cm; MegaView Science, Taichung, Taiwan) si loogu oggolaado soo bixitaanka dadka waaweyn. dheddigga loo isticmaalo tijaabooyinka tuubada duulista waxay gaajoonayeen kaliya 4-6 saacadood oo leh biyo ad libitum. Si loo diyaariyo kaneecada dhiigga jaqaya ee bioassays xiga, 4 dpe dheddigga waxaa la siiyay dhiigga idaha defibrotic (Håtunalab, Bro, SE) iyadoo la isticmaalayo nidaamka quudinta xuubabka (Helpington Workshomotek UK). dheddigga ayaa markaa loo wareejiyay qafisyada shakhsi ahaaneed waxayna si toos ah u bixiyeen cunto, sida hoos ku qoran, ama 10% sucrose ad libitum 3 maalmood ka hor tijaabooyinka hoos lagu sharaxay. Dumarkii dambe ayaa loo isticmaalay bioassays tube duulimaadka waxaana loo wareejiyay shaybaarka, ka dibna waxay lahaayeen biyaha ad libitum ee saacadaha 4-6 ka hor tijaabada.
Qiimaynta quudinta ayaa loo isticmaalay in lagu qiyaaso isticmaalka kaadida iyo kaadida ee qaangaarka An. Arab . Marti-geliyaha iyo dheddigga dhiig-miirashada ayaa la siiyay cunto ay ku jiraan 1% kaadida lo'da cusub iyo kuwa da'da ah ee la qasi jiray, xaddi kala duwan oo urea ah, iyo laba kontarool oo (10% sukrose iyo biyo) 48 h. Intaa waxaa dheer, midabaynta cuntada ( FF xy ml-1 mg cyanide 2650-17-1. kaneecada ee saxan weyn oo Petri ah (12 cm dhexroor iyo 6 cm oo dherer ah; Semadeni, Ostermundigen, CH; Jaantuska 1A) ee mugdiga dhamaystiran ee 25 ± 2 cm ° C iyo 65 ± 5% qoyaan qaraabo ah. Tijaabooyinkan ayaa lagu soo celiyay 5 ilaa 10 jeer. Ka dib marka la soo bandhigo cuntada, kaneecada ayaa la dhigayaa - ° C dheeraad ah.
U fiirso kaadida lo'da iyo kaadida oo ay nuugo qofka martida loo yahay iyo dhedigga dhiigga jaqa Anopheles arabianus. In tijaabada quudinta (A), kaneecada dheddigga waxaa la siiyay cunto ka kooban kaadi sac cusub iyo mid duq ah, xajmiyo kala duwan oo urea, sukrose (10%), iyo biyo nadiif ah (H2O). in dumarka martida loo yahay ay nuugaan kaadida lo'da ee 72-saac in ka yar 168-saac kaadida lo'da (B) . Celceliska wadarta nitrogen-ka kooban (± heerka weecasho) ee kaadida waxaa lagu soo bandhigaa gudaha gudaha. ANOVA iyadoo la adeegsanayo falanqaynta hoc ee Tukey; p <0.05)
Si loo sii daayo cuntada la nuugo, kaneecada si gaar ah ayaa loo geliyay 1.5 ml tuubooyinka microcentrifuge oo ay ku jiraan 230 µl oo biyo nadiif ah iyo nudaha ayaa la carqaladeeyay iyadoo la adeegsanayo matoor la tuuri karo iyo xadhig la'aan (VWR International, Lund, SE), oo ay ku xigto centrifugation 10 krpm 10 min . microplate (Sigma-Aldrich) iyo nuugista (λ620) waxaa lagu go'aamiyey iyadoo la isticmaalayo spectrophotometer-ku salaysan microplate reader (SPECTROStar® Nano, BMG Labtech, Ortenberg, DE) nm) 620 nm; UV 1800, Shimadzu, Kista, SE) .Si loo qiyaaso qaadashada cuntada, qalooca caadiga ah ayaa la diyaariyey by qasitaan taxane ah si ay u soo saaraan 0.2 µl ilaa 2.4 µl of 1 mg ml-1 xylene cyanide. Markaas, cufnaanta indhaha ee caddadka dheeha la og yahay ayaa loo isticmaalay si loo go'aamiyo.
Xogta mugga ayaa lagu falanqeeyay iyada oo la adeegsanayo falanqaynta hal-geesoodka ah ee kala duwanaanta (ANOVA) oo ay ku xigto Tukey's post hoc isbarbardhigga (JMP Pro, v14.0.0, SAS Institute Inc., Cary, NC, US, 1989-2007) . v8.0.0 ee Mac, GraphPad Software, San Diego, CA, US).
Qiyaastii 20 µl ee muunadaha kaadida ee koox kasta oo da 'kasta ah ayaa lagu xidhay Chromosorb® W/AW (10 mg 80/100 mesh, Sigma Aldrich) iyo ku duuban kaabsal daasad ah (8 mm × 5 mm) Kaabsoosha ayaa la geliyey qolka gubanaya ee CHNSFlash/O analyzer. Waltham, MA, US) si loo go'aamiyo waxa ku jira nitrogen ee ku jira kaadida cusub iyo kuwa da'da ah sida ku cad nidaamka soo saaraha
Si loo qiimeeyo saameynta cuntada ay ku leedahay badbaadada martida martida loo yahay iyo kuwa dhiigga jaqaya, kaneecada ayaa si gaar ah loogu dhejiyay suxuunta waaweyn ee Petri (12 cm dhexroor iyo 6 cm oo dherer ah; Semadeni) oo leh godad daboolan oo daboolan oo dabool ah (3 cm dhexroor) oo leh hawo iyo cunto. kontaroolada, 10% sukrose iyo biyo. Cunto kasta waxaa lagu shubay tampon ilkeed (DAB Dental AB, Upplands Väsby, SE) oo la geliyey 5 ml sirinji (Thermo Fisher Scientific, Göteborg, SE), tuubada waa laga saaray, waxaana la dul saaray saxan petri saxan ah (sida ku qeexan shaybaarkaaga maalin kasta). kaneecada ayaa la tiriyaa laba jeer maalintii, halka kaneecada dhintay la tuuray ilaa kaneecada ugu dambeysa ay dhimato (n = 40 daaweyn kasta).
Duuliyaha kaneecada caado u ah oo ku salaysan Attisano et al.[17], oo ka samaysan 5 mm dhumucdiisuna waxay tahay 5 mm dhumucdiisuna waxay tahay 5 mm dhumucdiisuna waxay tahay 10 cm dheer x 10 cm sare oo aan hore iyo gadaal (Jaantus. 3: top). labo ka mid ah magnets neodymium ayaa u dhexeeya 9 cm. Tuubo siman oo ka sameysan wax isku mid ah (6.5 cm L) waxay kala qaybisay tuubada toosan si ay u sameyso cudud isku xiran iyo cudud qaadata qayb yar oo aluminium ah oo ah calaamad iftiin ah.
Dumarka 24-saacadood ee gaajeysan ayaa la siiyay cuntada kor ku xusan 30 daqiiqo ka hor inta aan la xakameynin. Kaneecada dheddigga ah ee si buuxda loo quudiyo ayaa markaa si gaar ah loogu suuxiyay barafka 2-3 min waxaana lagu dhejiyay biinanka cayayaanka leh beeswax (Joel Svenssons Vaxfabrik AB, Munka Ljungby, SE) ka dibna waxaa lagu duubay tuubooyin jiif ah.F Logger-ka gaarka loo leeyahay, ka dibna lagu kaydiyo oo la soo bandhigo iyadoo la isticmaalayo PC-Lab 2000 ™ software (v4.01; Velleman, Gavere, BE) .Mashiinnada duulista waxaa la dhigay qol cimilo-habboon (12 h: 12 h, iftiin: mugdi, 25 ± 2 ° C, 65 ± 5% RH).
Si loo sawiro qaabka dhaqdhaqaaqa duulimaadka, wadarta guud ee duulimaadka (m) iyo tirada guud ee hawlaha duulimaadka ee isku xigta ayaa la xisaabiyay saacadiiba saacada 24. Intaa waxaa dheer, celceliska masaafada u duulaya dumarka shakhsi ahaaneed ayaa la barbardhigay daawaynta oo la falanqeeyay iyada oo la adeegsanayo hal-jid ANOVA iyo Tukey's post hoc analysis (JMP Pro, v14.0.0), celceliska masaafada daweynta ee Inc. factor. Intaa waxaa dheer, celceliska tirada wareegyada waxaa lagu xisaabiyaa 10-daqiiqo oo dheeraad ah.
Si loo qiimeeyo saameynta cuntada ee waxqabadka taranka ee An.arabiensis, lix dumar ah (4 dpe) ayaa si toos ah loogu wareejiyay baqashada Bugdorm (30 cm × 30 cm × 30 cm) ka dib ururinta dhiigga ka dibna la siiyay cuntada tijaabada ah ee 48 h sida kor lagu sharaxay. Saacadaha, beddelashada 24 saacadood kasta. Ku celi nidaam kasta oo cunto ah 20-50 jeer. Ukunta ayaa la tiriyay oo la duubay qafis kasta oo tijaabo ah. Tusaalooyinka ukumaha ayaa loo isticmaalay si loo qiimeeyo celceliska cabbirka iyo dhererka kala duwanaanshaha ukumaha shakhsi ahaaneed (n ≥ 200 halkii cunto) iyadoo la adeegsanayo Mikroskoob Dialux-20 (DM1000; Ernst, Leratz Weraica) (DFC) 320 R2; Leica Microsystems Ltd. DE) v14.0.0, Machadka SAS Inc.).
Kaadida da'da ah ee 1 saac ka dib, 24 saac, 72 saac iyo 168 saac kaadi da' ah ayaa laga soo aruuriyay shaybaar laga soo aruuriyay lo'da Zebu, jinsiyadaha Arsi. Bacaha dubista polyamide (Toppits Cofresco, Frischhalteprodukte GmbH iyo Co., Minden, DE) ee 3 l polyamide oo dabool leh Durbaannada caaga ah ee vinyl chloride. Headspace volatiles ka mid kasta oo muunad kaadi bovine ah ayaa la soo ururiyey si toos ah (cusub) ama ka dib korriinka heerkulka qolka 24 h, 68 muunad kasta hrine iyo 1.
Ururinta isbeddellada madax-bannaanida, nidaamka wareegga-xiran ayaa loo isticmaalay si loogu wareego qulqulka gaaska kaarboon-filtered ee firfircoon (100 ml min-1) iyada oo loo marayo bacda polyamide ilaa tiirarka xayeysiinta ee 2.5 h iyadoo la adeegsanayo bamka vacuum diaphragm (KNF Neuberger, Freiburg, DE) . tubbada (5.5 cm x 3 mm id) oo ka kooban 35 mg ee Porapak Q (50/80 mesh; Waters Associates, Milford, MA, US) inta u dhaxaysa furayaasha dhogorta dhalada ah. Isticmaalka ka hor, tiirka waxaa lagu nadiifiyey 1 ml oo dib loo nadiifiyey n-hexane (Merck, Darmstadt, DE) iyo 9 ml pentane saafi ah. Aldrich) Waxyaalaha la isku dhejiyay waxaa lagu soo saaray 400 μl oo pentane ah. Ururinta hawada sare ayaa la isku daray ka dibna lagu kaydiyay -20 ° C ilaa loo isticmaalo falanqayn dheeraad ah.
Jawaabaha dhaqanka ee marti-raadinta iyo dhiig-cunista An.Headspace soosaaray kacsanaan laga soo ururiyay cusub, 24-h, 72-h, iyo 168-h-kaadi kaadida ayaa lagu falanqeeyay soosaaray degenaansho ka kaneecada Arabidopsis iyadoo la isticmaalayo olfactometer tube galaas toos ah [18] . Dhaqdhaqaaqa.Arab [19] . Tuubada muraayadda olfactometer (80 cm × 9.5 cm id) ayaa lagu iftiimiyay 3 ± 1 lx iftiinka cas ee korka ah. Dhuxusha la sifeeyay iyo qulqulka hawada qoyan (25 ± 2 ° C, 65 ± 2% qoyaan qaraabo ah) ayaa soo maray bioassay at 30 cm s sm aan lahayn dhexda birta ah ee la soo dhex mariyay birta birta ah ee la soo dhex mariyay birta la jeexjeexay. Qaab dhismeedka tuubbada lebbiska ah Kaneecada-doonista ama kaneecada dhiigga-dhuuqida ayaa lagu dhejiyay qafis shakhsi ahaaneed 2-3 saacadood ka hor bilawga tijaabada Daqiiqado 5 ah oo la sii daayo Inc.).
Jawaabta taranka ee madaxa bannaanka laga soo saaro kaadida lo'da cusub iyo kuwa da'da ah ayaa lagu falanqeeyay qafisyada Bugdorm (30 cm × 30 cm × 30 cm; MegaView Science) 10 μl oo ka mid ah soosaar kasta oo madax bannaan oo ah 1:10 dilution.Qaddarka siman ee pentane ayaa loo isticmaalay si loo hagaajiyo koobka xakamaynta.Daawaynta iyo koobabka xakamaynta ayaa la isku dhaafsaday tijaabo kasta si loo xakameeyo saamaynta booska. Toban haween ah oo dhiig-quudh ah ayaa lagu sii daayay baqashada tijaabada ah ee ZT 9-11 iyo ukunta koobabka ayaa lagu tiriyaa 24 saacadood ka dib. koob - tirada ukunta la dhigay koobka kantaroolka)/(tirada guud ee ukunta la dhigay)
Gas chromatographic iyo ogaanshaha qaabka anteenada elektarooniga ah (GC-EAD) falanqaynta dheddigga An.arabiensis ayaa la sameeyay sidii hore loogu sharraxay [20] . iyo kaadida gabowga. Kala qaybinta dareeraha, 4 psi ee nitrogen ayaa lagu daray oo loo kala qaybiyay 1: 1 Gerstel 3D / 2 iskutallaabta mugga hooseeya ee dhintay (Gerstel, Mülheim, DE) inta u dhaxaysa qalabka ionization ololka iyo EAD. Qalabka dareeraha ee GC ee EAD waxaa la dhex mariyey Gerstel ODP-2 xariiqda wareejinta, kaas oo la socdo 5 × tube 8 ° C foornada, oo lagu daray heerkulka GC 1. waxaa lagu qasi jiray kaarboon-filter, hawo qoyan (1.5 l min-1) .Anteenada waxaa la dhigay 0.5 cm meel ka baxsan tuubada.Kaneecada shaqsi kasta ayaa lagu xisaabtamayaa hal nuqul, iyo kaneecada martida loo yahay, ugu yaraan saddex nuqul ayaa lagu sameeyay kaadida da 'kasta.
Aqoonsiga xeryahooda bioactive ee ururinta hawada sare ee kaadida lo'da cusub iyo kuwa da'da ah iyadoo la adeegsanayo isku-darka GC iyo spectrometer mass (GC-MS; 6890 GC iyo 5975 MS; Teknolojiyadda Agilent) si loo soo saaro jawaabaha anteenada ee falanqaynta GC-EAD, oo ku shaqeysa habka ionization ee elektiroonigga ah ee 70 eVMS oo leh UI capillared tiirka (60 m × 0.25 mm dhexroorka gudaha, dhumucda filimka 0.25 μm) iyadoo la isticmaalayo helium sida marxaladda wareega wareega celceliska celceliska socodka tooska ah ee 35 cm s-1.A 2 μl muunad ayaa lagu duraa iyadoo la adeegsanayo goobaha duritaanka isku midka ah iyo heerkulka foornada sida falanqaynta GC-EAD. Compounds ayaa la aqoonsaday iyadoo lagu saleynayo wakhtiga haynta iyo index index. Maktabada NIST14 (Agilent) .Xirmooyinka la aqoonsaday ayaa lagu xaqiijiyay in la isku duro heerarka dhabta ah (Faylka Dheeraadka ah 1: Shaxda S2) .Tirinta, heptyl acetate (10 ng, 99.8% nadiifinta kiimikada, Aldrich) ayaa lagu duray sida heerka dibadda.
Qiimaynta waxtarka isku dar ah urta synthetic oo ka kooban xeryahooda bioactive ee lagu aqoonsaday kaadida cusub iyo kuwa da'da ah si ay u soo jiidato martida-raadinta iyo dhiig-nuujinta Ans.arabiensis, iyadoo la adeegsanayo olfactometer isku mid ah iyo borotokoolka kor ku xusan. Isku-darka synthetic waxay ku ekaayeen halabuurka iyo saamiga isku-dhafka ah ee isku-dhafka ah ee isku-dhafka ah ee madax-xanuunsan2-hour-hour, 4-hour cusub 72-saacadood, iyo 168-saacadood kaadida da'da ah (Jaantuska 5D-G; Faylka Dheeraadka ah 1: Shaxda S2) .Si loo falanqeeyo, isticmaal 10 μl of 1: 100 dilution oo ah isku-darka dhammaystiran ee synthetic, oo leh heerka guud ee sii-deynta oo u dhexeysa qiyaastii 140-2400 ng h-1, si loo qiimeeyo-soo-jiidashada dhiigga. Isku-dhafka dhamaystiran, kaas oo isku-dhafka kala-goynta ee isku-dhafka hal-abuurka ah ee isku-dhafka dhamaystiran laga saaro. Ka raadso jawaabaha martida loo yahay iyo kuwa dhiigga lagu quudiyo Ans.Arab vs synthetic iyo subtractive mixes ayaa lagu falanqeeyay iyada oo la adeegsanayo dib-u-celinta saadka ee magac-u-yaalka ah oo ay ku xigto isbarbardhigga lammaanaha ee saamiyo aan caadi ahayn (JMP Pro, v14.0.0, SAS Institute Inc.).
Si loo qiimeeyo bal in kaadida lo'da ay u adeegi karto inay noqoto meel ay ku nool yihiin oo loogu talagalay kaneecada duumada, kaadida lo'da cusub iyo kuwa da'da ah, ee la soo ururiyay sida kor lagu sharaxay, iyo biyaha waxaa la dhex galiyay 3 l baaldi (100 ml) oo la shiiday oo la dhigay dabinno sed ah. (BG-HDT version; BioGents, Regensburg, DE).Toban dabin ayaa la dhigay meel 50 m u jirta daaqa, 400 mitir u jirta bulshada tuulada (Silay, Ethiopia, 5°53′24′N, 37°29′24′′E) iyo wax lo’ ah oo aan lahayn, dhul daaqsimeedka joogtada ah iyo tuulooyinka. goobta daawaynta waxa loo rogaa habeen kasta wadar ahaan shan habeen.Tirooyinka kaneecada ee lagu qabtay dabinka lagu kaadiyay kaadida da'aha kala duwan ayaa la barbardhigay iyada oo la adeegsanayo dib-u-celinta saadka oo leh qaybinta beta binomial (JMP Pro, v14.0.0, SAS Institute Inc.).
Tuulo duumo-demic ah oo u dhow magaalada Maki, gobolka Oromia, Itoobiya (8° 11′ 08″ N, 38° 81′ 70″ E; Jaantuska 6A) .Daraasadda ayaa la sameeyey intii u dhaxaysay badhtamihii Agoosto iyo badhtamihii Sebtembar ka hor inta aan la buufin gudaha gudaha sannadlaha ah, oo ay weheliso xilli roobaadyo dheer. daraasadda (Jaantus. 6A) Shuruudaha lagu soo xulay guryaha waxay ahaayeen: in aan xoolaha loo ogoleyn guriga, in aan gudaha lagu karin karin (xabo ama dhuxusha) lama ogola (ugu yaraan inta lagu jiro xilliga tijaabada), iyo guryaha ugu badnaan laba qof oo deggan, oo ku seexday sunta cayayaanka. Under the treatment net. Oggolaanshaha Anshaxa waxaa la siiyay Guddiga Dib-u-eegista Anshaxa Cilmi-baarista ee Hay'adda (IRB/022/2016) ee Kulliyadda Sayniska Dabiiciga ah (CNS-IRB), Jaamacadda Addis Ababa, iyada oo la raacayo tilmaamaha lagu aasaasay Baaqa Ururka Caafimaadka Adduunka ee Helsinki ('kebele') heerka. Naqshadaynta tijaabada ah waxay raacday qaab 2 × 2 Laatiin ah, kaas oo isku-dhafka synthetic iyo kontaroolada loo qoondeeyay guryaha lammaanaha habeenkii ugu horreeya oo la isku dhaafsado guryaha habeenkii tijaabada ah ee xiga. Nidaamkan ayaa soo noqnoqday toban jeer. Intaa waxaa dheer, si loo qiyaaso dhaqdhaqaaqa kaneecada ee guryaha la soo xulay, dabinnada CDC ayaa loo dejiyay inay socdaan shan isku xigta, habeenada dhexe iyo maalinta tijaabada ah.
Isku-darka synthetic oo ka kooban lix xeryood oo bioactive ah ayaa lagu milmay heptane (97.0% dareeraha GC darajada, Sigma Aldrich) waxaana lagu sii daayay 140 ng h-1 iyadoo la isticmaalayo qalab suuf ah [20]. Xakamaynta iyo Kahortagga Cudurrada (CDC) dabinka iftiinka (Shirkadda John W. Hock, Gainesville, FL, US; Jaantus 6A) .Dabinnada ayaa la laadlaadiyay 0.8 - 1 m oo ka sarreeya dhulka, meel u dhow cagta sariirta, iyo tabaruce ayaa seexday shabag kaneeco ah oo aan la daweyn oo la qalay inta u dhaxaysa 18: 00 iyo 06: 30, xaalad jireed oo aan la qabin. uurka badhkii, iyo uurka [21] ka dib ayaa la baadhay iyadoo la isticmaalayo falgalka silsiladda polymerase (PCR) si loo aqoonsado noocyada morphologically loo aqoonsaday sida A. gambiae sl. Xubnaha kakan [23]. 0. SAS Institute Inc.).
Qiimee in ay badbaado leedahay 0.0001 iyo F(5,299) = 56.00, p <0.0001, siday u kala horreeyaan; Jaantuska 1B,C) mM marka la barbar dhigo dhammaan uruurinta kale iyo biyaha, halka aan laga sooci karin 10% sukrose (F (10,813) = 15.72, p <0.0001; Jaantuska 1D) 78.35, p <0.0001; Jaantuska 1.1E) .Waxaa intaa dheer, marka la barbardhigo labada dawladood ee jireed, dheddigga phlebotomized waxay nuugeen urea ka badan dumarka martida loo yahay ee ugu hooseeya, iyo dheddiggani waxay nuugeen xaddi la mid ah urea oo aad u sarreeya (F(1,950.8). 1F, G) .In kasta oo qaadashada cuntada urea-ku jirta ay u muuqatay in ay leedahay qiyamka ugu fiican (Jaantus 1D, E), dheddigga labada dawladood ee jireed waxay awoodeen in ay wax ka beddelaan qadarka HOL ee la nuugo dhammaan qaybaha HOL ee qaabka log-linear (Jaantus. 1F, G). .Si la mid ah, kaneecadu waxay u muuqataa inay xakamayso qaadashada nitrogen-ka iyada oo nidaamisa qadarka kaadida ee nuugista, maadaama qadarka nitrogen ee kaadidu ay ka muuqato qadarka nuugista (Jaantus 1B, C iyo B insets).
Si loo qiimeeyo saamaynta kaadida iyo kaadida ee badbaadada kaneecada martida loo yahay iyo dhiig-nuujinta, dheddigga ayaa la quudin jiray kaadida dhammaan afarta da'da (cusub, 24 h, 72 h, iyo 168 h post-deposition) iyo tiro badan oo ah uruurinta urea, iyo sidoo kale biyo nadiif ah iyo 10 % sucroseure waxay u adeegtay falanqaynta guud ee 2. badbaadada dumarka martida loo yahay (Kaadi: χ2 = 108.5, df = 5, p <0.0001; urea: χ2 = 122.8, df = 5, p <0.0001; Jaantus. 2B, C) iyo = dheddigga dhiigga la quudiyo (put: 9 χ0). 0.0001; HOL Heerarka, kuwa la quudiyo 72-h kaadi fadhiid ah (p = 0.016) oo leh suurtogalnimada badbaadada ugu hooseysa (Jaantus. 2B) .Intaa waxaa dheer, dheddigga martigeliyaha ah ee quudiyay 135 mM urea waxay ka badbaaday in ka badan kantaroolka biyaha (p <0.04) 0.001 iyo p = 0.012, siday u kala horreeyaan; Jaantuska 2D), halka dumarka lagu quudiyo kaadida saacadaha 72 ay ka badbaadeen in ka badan kuwa la quudiyo dheddigga kaadida cusub iyo kaadida 24-saacadood (p <0.0001 iyo p = 0.013, siday u kala horreeyaan; Jaantuska 2D, 3-M) marka la quudiyo dhiigga 1 ee kale. uruurinta HOL iyo biyaha (p <0.013; Jaantuska 2E).
Badbaadinta martida martida loo yahay iyo kuwa dhiigga jaqaya Anopheles arabinis oo quudinaysa kaadida lo'da iyo urea.In bioassay (A), kaneecada dheddigga ah ayaa la siiyay cunto ka kooban kaadi sac cusub iyo da 'weyn, uruurin kala duwan oo HOL, sucrose (10%) iyo biyo nadiif ah (H2O) . Badbaadinta martida martida loo yahay iyo Esu, dhiig kasta ayaa la duubay. 12 saacadood ilaa dhammaan dumarka la quudiyo kaadida (B, D) iyo urea (C, E), iyo kontaroolada, Sukrose iyo biyaha, ay dhinteen.
Wadarta masaafada iyo tirada wareegyada lagu go'aamiyay tijaabada duulista duulimaadka ee saacadaha 24 waxay ku kala duwan yihiin martigeliyaha-raadinta iyo kaneecada dhiigga jaqaya, taas oo muujisay dhaqdhaqaaq yar oo duulimaad ah guud ahaan (Jaantus 3) . Kaneecada 168-saacadood ee da'da ah ee lagu quudiyo kaadida ayaa soo bandhigtay qaabab duulimaad oo kala duwan waxayna ahaayeen kuwo ugu horrayn maalintii. kaadida la nuugay 72-saacadood waxay la kulantay hoos u dhac joogto ah oo dhaqdhaqaaqa ah in ka badan 24 saacadood (Jaantus 3).
Waxqabadka duulimaadka ee ugaadhsiga-raadinta dhiigga dhuuqaya naag Anopheles arabinis quudinta on kaadida lo'da iyo urea.In tijaabada warshad duulista, kaneecada dheddigga quudin on kaadida lo'da cusub iyo kuwa da'da ah, uruurinta kala duwan ee HOL, sucrose (10%), iyo biyo distilled (H2O) ayaa lagu xidhxidhay si jiif ah, si xor ah u wareegaan hubka (fiiri hubka). (midig) dheddigga, wadarta masaafada iyo tirada duullimaadyada saacaddii ee cunto kasta muddo 24-saac ah ayaa la duubay ( madow: cawl; iftiin: caddaan). Celceliska masaafada iyo celceliska tirada feerka ayaa lagu muujiyay midigta jaantuska dhaqdhaqaaqa wareegga. Baararka khaladku waxay matalaan khaladka caadiga ah ee celceliska. Falanqaynta tirakoobka eeg qoraalka
Guud ahaan, dhaqdhaqaaqa duulimaadka guud ee haweenka martida loo yahay waxay raaceen qaab la mid ah masaafada duulimaadka ee saacadaha 24. Masaafada celceliska duulimaadka ayaa si weyn u saameeyay cuntada la cunay (F(5, 138) = 28.27, p <0.0001), iyo marti-gelinta dheddigga 72 saacadood ee kaadida ayaa u duulay masaafo dheer oo dhan (p 0). Kaneecada sucrose-cuntay ayaa duushay in ka badan mid cusub (p = 0.022) iyo 24-h-kaadi (p = 0.022) -kaneecada quudinaysa. Hababka hawlqabadku waxay ahaayeen kuwo isku mid ah, dheddigga martida loo yahay ee quudin jiray HOL waxay si aad ah u korodhay celceliska fogaanta duulimaadka iyadoo ku xidhan fiirsashada la nuugo (F(5, 138) = 1310.91, p <0.0001) .
Dhaqdhaqaaqa duulimaadka guud ee kaneecada dhiigga-dhuuqa waxay ahayd mid deggan oo joogtaysa saacadaha 24 ee dhammaan cuntooyinka, iyada oo korodhka dhaqdhaqaaqa kaadida ee qaybta labaad ee xilliga mugdiga ah ee haweenka lagu quudiyo biyaha iyo sidoo kale dheddigga la quudiyo cusub iyo 24 saacadood (sawir 3) Cuntada urea ma samayn (F (5, 138) = 1.36, p = 0.24)
Saamaynta quudinta kaadida iyo kaadimareenka ee cabbiraadaha taranka ayaa lagu qiimeeyay bioassays-ka ukunta (Jaantuska 4A) waxaana la baadhay iyadoo loo eegayo tirada ukumaha ay dhaddig kasta dhigtay, cabbirka ukunta, iyo dirxiga ugu horreeya ee dhowaan dillaacay 4B) .Dumarku waxay quudin jireen kaadida 24-saacadood, cunnada dhiiga ayaa si aad ah uga badan ugxanta dheddigga waxay quudin jireen cuntooyinka kale ee kaadida waxayna la mid yihiin kuwa la quudiyo sukrose (Jaantus. 4B) dheddigga sucrose-cunista oo soo saara ukumo aad uga weyn kan dheddigga biyaha quudiya, halka ukumaha dheddigga ah ee lagu quudiyo 168 h ee kaadidu ay aad uga yaraayeen (Jaantus. 4C). Intaa waxaa dheer, cuntada kaadida ayaa si weyn u saamaysay xajmiga dirxiga (F(5, 187) = 7.86, p <0.0001), oo leh 20001 p <0.0001) dheddigga kaadida la quudiyo marka loo eego ukumaha laga soo saaro dirxiga ukunta. Biyo-cunista iyo 168-saac dheddigga kaadida ah (Jaantuska 4D).
Waxqabadka taranka ee dumarka Anopheles arabinis quudinta kaadida lo'da iyo urea.Kaneecada dheddigga ee dhiigga ku quudin jirtay ayaa la quudin jiray cuntooyin ka kooban kaadi sac cusub iyo da' weyn, xajmiyo kala duwan oo HOL, sucrose (10%), iyo biyo nadiif ah (H2O) saacadaha 48 ka hor inta aan la gelin bioassays-lambarka iyo helitaanka ukunta 4. E), cabbirka ukunta (C, F) iyo cabbirka dirxiga (D, G) ayaa si weyn u saameeyay cuntada la bixiyay (Kaadi lo'da: BD; urea: EG) . Macnaha halbeeg kasta oo lagu cabbiro iyadoo la adeegsanayo magacyo xaraf oo kala duwan ayaa si weyn uga duwan midba midka kale (hal-dariiq ANOVA iyadoo la adeegsanayo falanqaynta hoc ee Tukey; p <0.05) .
Sida qaybta ugu weyn ee nitrogenous ee kaadida, urea, marka la siiyo cunto ahaan dheddigga dhiigga ku quudiya, waxay si weyn u saamaysay cabbirada taranka ee dhammaan daraasadaha. Tirada ukumaha ay dhigeen dumarku waxay quudiyeen HOL, ka dib cunto dhiig, taas oo ku xidhan xoojinta urea (F(11, 360) = 4.69; p <0.0001), 4 haweenku waxay quudiyaan 3µM. mM waxay dhigtay ukumo badan (Jaantuska 4E) .Dumarka lagu quudiyo xadiga urea ee 134 µM ama ka sareeya waxay dhigtaan ukumo ka weyn kuwa dhediga ah ee lagu quudiyo biyaha <0.0001) ayaa ahaa mid aad u kala duwan (Jaantus. 4G).
Soojiidashada guud ee martida-raadinta kaadida bovine madax bannaanka soo-baxyo kacsan (72 saacadood: p = 0.0060, 168 saacadood: p = 0.012, pentane: p = 0.00070), Marka laga reebo urta kaadida cusub (p = 0.13; Jaantuska 5B) .In kasta oo soo jiidashada guud ee kaneecada dhiigga jaqaya = d = p urta kaadida, ma ahayn mid aad u kala duwan (8χ4). 0.067; Jaantuska 5C), dheddiggaan waxaa la ogaaday in ay aad ugu soo jiidanayeen meelaha madaxa laga soo saaray ee isbedbedelaya marka la barbardhigo kaadida da'da ah ee 72-saac marka la barbar dhigo kontaroolada (p = 0.0066; Jaantuska 5C).
Jawaabaha dabeecadda ee urta lo'da ee dabiiciga ah iyo synthetic ee raadinta martida iyo dhiigga Anopheles arabianus.Schematic of the glass tube olfactometer (A).Soo jiidashada madax bannaan oo soosaaray kaadida lo'da cusub iyo kuwa da'da ah si ay u martigeliso (B) iyo dhiig-jaqidda (C) kaneecada. Ka raadi meel bannaan oo cusub. 24-saac (E), 72-saac (F), iyo 168-saacadood (G) kaadida lo'da da'da ah ayaa muujinaya.Electron anteenada ogaanshaha (EAD) raad muujinaya isbedel danab jawaab xeryahooda bioactive in headspace eluted ka chromatograph gaaska oo la ogaaday by a flame ionization detector (FID) ). Heerarka (µg h-1) ee xeryahooda bayooloji firfircoon ayaa la muujiyaa soo jiidatay magacyada xarfaha kala duwan ayaa si weyn uga duwanaa midba midka kale (hal-jid ANOVA iyadoo la adeegsanayo falanqaynta hoc ee Tukey; p <0.05)
Dheddig Ann.arabiensis, 72 h iyo 120 h ka dib cuntada dhiigga, inta lagu jiro dhalidda, wax door bid ah looma muujin madax bannaan oo laga soosaaray kaadida lo'da cusub iyo kuwa da'da ah marka la barbar dhigo kontaroolada pentane (χ2 = 3.07, p> 0.05; Faylka dheeriga ah 1: Jaantuska. S1).
Waayo, dhedig Ann.arabiensis, GC-EAD iyo GC-MS falanqaynta aqoonsaday siddeed, lix, saddex iyo saddex xeryahooda bioactive (Jaantus 5D-G) .In kasta oo kala duwanaansho in tirada xeryahooda in elicited jawaabaha electrophysiological ayaa la arkay, inta badan xeryahooda, kuwaas oo ahaa joog kasta headspace soosaaray kacsan oo laga soo ururiyey kaadida cusub iyo da'da ah. Sidaa darteed, anteeno kaliya ee ka soo baxay xarunta dheddigga ah ee ka korraysa ka soo xeryahooda jidheed kasta. xadka ayaa lagu daray falanqayn dheeraad ah.
Wadarta xadiga sii daynta kacsan ee xeryahooda bioactive ee ururinta hawada sare waxay ka korodhay 29 µg h-1 ee kaadida cusub ilaa 242 µg h-1 ee kaadida 168-saacadood, inta badan sababtoo ah p-cresol iyo m-formaldehyde Phenol waxay kordhisaa iyo sidoo kale phenol. decanal, hoos u dhac ku yimaada da'da kaadida ee sii kordheysa, taas oo la xiriirta hoos u dhaca la arkay ee xoojinta calaamadaha (badanaa) ee chromatogram (Jaantus. 5D) -G guddi bidix) iyo jawaabaha jir ahaaneed ee xeryahooda (Jaantus. 5D-G guddiga saxda ah).
Guud ahaan, isku dhafka synthetic waxa uu lahaa saamiga dabiiciga ah ee isku midka ah ee xeryahooda bioactive ee lagu aqoonsaday soosaarayaasha kacsan ee kaadida cusub iyo kuwa da'da ah ee madaxyada kaadida (Jaantus. 5D-G) oo uma muuqan inay soo jiidanayso rafcaan weyn raadinta martigeliyaha (χ2 = 8.15, df = 4, p = 0.083; Jaantus. 5H) ama dhiig-sugida = 4, p = 0.30; Jaantuska 5I) Si kastaba ha ahaatee, isbarbardhigga laba-geesoodka ah ee u dhexeeya daaweynta ayaa muujisay in kaneecada martida loo yahay ay si weyn u soo jiidatay isku dhafka kaadida ee 24-h marka la barbardhigo kontaroolada pentane (p = 0.0086; Jaantuska 5H).
Si loo qiimeeyo doorka qaybaha shakhsi ahaaneed ee isku-dhafka synthetic ee kaadida 24-h-da'da, lix isku-dar ah oo kala-goys ah ayaa lagu qiimeeyay ka soo horjeeda isku-dhafka dhamaystiran ee baaritaanka Y-tube, kaas oo xeryahooda gaarka ah laga saaray. 1: Jaantuska S2A), dhammaan isku-dhafka kala-goynta ayaa ka soo jiidasho badnaa marka loo eego kuwa si buuxda isku dhafan. Taas beddelkeeda, ka saarista isku-dhafka shakhsi ahaaneed ee isku-dhafka dhammaystiran ma saameynin jawaabaha habdhaqanka ee kaneecada dhiigga-dhuuqista (χ2 = 11.38, df = 6, p = 0.077), marka laga reebo decanal, taas oo keentay hoos u dhaca heerka 2 ee heerka 0. 1: Sawirka S2B).
Tuulo ku taal Itoobiya oo duumada ka jirto, waxtarka isku dhafka kaadida lo'da ee 24-saacadood ee soo jiidashada kaneecada ee xaaladaha deegaanka ayaa la qiimeeyay toban habeen 35.4% waxay ahaayeen Culex spp. 0.0001) .Dabinnada aan dabin ayaa la dhigay mid kasta oo ka mid ah shanta habeen ee kantaroolka bilowga, dhexe, iyo dhammaadka tijaabada Kaneecada lagu qabtay dabinada ay ku jiraan isku darka synthetic ayaa si weyn u kordhay: martigeliyaha raadinta (χ2 (0, 2107) = 138.7, p <0.0001), quudinta dhiiga dhow (χ2 (0, 650) = 32.2, p <0.0001 = 0.0123; Faylka dheeriga ah 1: Shaxda S1) Tani waxay sidoo kale ka muuqataa wadarta tirada kaneecada ee la qabtay: martigeliyaha raadinta> dhiig-nuujinta> uur leh> uur yar> lab.
Qiimaynta goobta ee waxtarka kaadida lo'da synthetic ee 24-saacadood isku darka ah arabesques (B), laakiin maaha Anopheles farroes (C), si ka duwan, saameyn ku-tiirsanaanta nafsiyeed ee gobolka. Intaa waxaa dheer, dabinnadani waxay qabteen tiro aad u kordhay oo ka mid ah kaneecada Culex. (D) Marka la barbardhigo xakamaynta waxay u taagan yihiin tusmada xulashada celceliska ee lammaane dabinada xakamaynta (furan; N = 5). .Asterisks waxay tilmaamaysaa heerarka muhiimka ah ee tirakoobka (*p = 0.01 iyo *** p <0.0001)
Saddexda nooc ayaa si kala duwan loogu qabtay dabinada ay ku jiraan isku-darka synthetic. Raadinta martida loo yahay (χ2 (1, 1345) = 71.7, p <0.0001), quudinta dhiigga (χ2 (1, 517) = 16.7, p <0.0001) = uurka (χ2(1, 1.45). a .arabiensis ayaa lagu xayiray dabinka oo sii deynaya isku dhafka synthetic (Jaantus. 6B), halka qadarka An uusan ka duwanayn. Pharoensis ee gobollo kala duwan oo jireed ayaa la helay (Jaantus. 6C) 0.0004; Sawirka 6D), marka la barbar dhigo dabinka xakamaynta.
Dabinnada martigelinta ee ku yaal meel ka baxsan martigaliyayaasha suurtagalka ah ee u dhexeeya goobaha taranka iyo bulshooyinka reer miyiga ah ee Itoobiya ayaa loo adeegsaday si loo qiimeeyo in kaneecada duumada ay u isticmaasho urta kaadida lo'da sida calaamadda deegaanka. kaneecada ayaa la soo jiitay oo la qabtay, inkastoo tiro yar, oo ka madax bannaan da'da kaadida (χ2 (5, 25) = 2.29, p = 0.13; Faylka dheeriga ah 1: Jaantuska S3)
Kaneecada Duumadu waxay helaysaa oo qaybisaa xeryahooda nitrogen-ku jira iyada oo loo marayo quudinta magdhowga kaadida lo'da (ie, puddles) si kor loogu qaado sifooyinka taariikhda nolosha, oo la mid ah cayayaanka kale [2, 4, 24, 25, 26]. Kaneecada dheddigga ah waxay kheyraadkan ku heleysaa ur waxayna awoodaan inay nidaamiyaan qaadashada xeryahooda nitrogenous ee kaadida, oo ay ku jiraan urea, qaybta ugu weyn ee nitrogenous ee kaadida [15, 16]. sifooyinka taranka ee shakhsiyaadka dhiigga ku quudiyo inta lagu jiro wareegga ugu horreeya ee gonadotropic. Sidaa darteed, isku-darka kaadidu waxay door muhiim ah ka ciyaaraan door nafaqo oo muhiim ah oo loogu talagalay xuubka duumada ee xiran sida dadka qaangaarka ah ee nafaqo-xumada leh [8], maadaama ay siiso kaneecada dheddigga ah ee awood u leh inay helaan xeryahooda nitrogenous ee muhiimka ah iyagoo ku hawlan quudinta khatarta hoose ee khatarta ah. Awoodda vector-ka.Intaa waxaa dheer, hab-dhaqankani waxa uu noqon karaa bar-tilmaameedka barnaamijyada maaraynta vector mustaqbalka.