Qaar ka mid ah mawduucyada cilad-bixinta LC-da waligeed ma dhicin, maadaama ay jiraan arrimo ku saabsan dhaqanka LC, xitaa sida tiknoolajiyada qalabku ay sii wanaajiso waqti ka dib. Waxaa jira siyaabo badan oo ay dhibaatooyinku uga soo bixi karaan nidaamka LC oo ay ku dhamaanayaan qaabka ugu sarreeya ee liita.Marka arrimaha la xidhiidha qaabka ugu sarreeya ay soo baxaan, liis gaaban oo ah sababaha suurtogalka ah ee natiijooyinkani waxay ka caawinayaan fududaynta khibradeena cillad-bixinta.
Waxay ahayd madadaalo qorista "LC Troubleshooting" column iyo ka fikirida mawduucyada bil kasta, sababtoo ah mawduucyada qaarkood weligood ma baxaan style. Iyadoo duurka ku ee chromatography cilmi baaris mawduucyo gaar ah ama fikrado noqdaan gaboobay sida ay u bedelay by cusub iyo fikrado ka wanaagsan, berrinkii cilad-saarista, tan iyo markii maqaalkii ugu horeeyay ee cilad-soo-baxa ka soo muuqday joornaalkan ( LC Journal in the time) 8 ayaa weli ah O Waxay diiradda saareen dhowr qaybood oo xallinta dhibaatooyinka LC ee isbeddellada casriga ah ee saameeya chromatography dareeraha (LC) (tusaale ahaan, isbarbardhigga isbarbardhigga fahamkayaga saameynta cadaadiska ee sii-haynta [2] Horumarka Cusub) Fasiraaddayada natiijooyinka LC iyo sida loo xalliyo qalabka casriga ah ee LC. Qaybtan bishan, waxaan sii wadayaa taxanahayga "Diisambar 2 iyo qaar ka mid ah dhimashada"Diisambar 2) Mawduuca ugu muhiimsan ee taxanahan ayaa aad u khuseeya shaxda derbiga ee caanka ah ee LCGC ee "Hagaha Xallinta Dhibaatada LC" (4) oo ku dhegan shaybaaro badan. Qaybta saddexaad ee taxanahan, waxaan doortay inaan diirada saaro arrimaha la xidhiidha qaabka ugu sarreeya ama sifooyinka ugu sarreeya. Faahfaahin ku saabsan hal maqaal, markaa qaybtan koowaad ee mawduuca, waxaan diiradda saari doonaa qaar ka mid ah kuwa aan arko inta badan. Waxaan rajeynayaa in dadka isticmaala yar iyo weyn ee LC ay heli doonaan talooyin waxtar leh iyo xusuusin mawduucan muhiimka ah.
Waxaan isku arkaa inaan si sii kordheysa uga jawaabo su'aalaha cilad-raadinta "wax kasta waa suurtagal" jawaabtani waxay u muuqan kartaa mid sahlan marka la tixgelinayo indho-indheynta ay adag tahay in la tarjumo, laakiin waxaan u arkaa inay inta badan ku habboon tahay. Sababo badan oo suurtagal ah oo ah qaabka ugu sarreeya ee liita, waxaa muhiim ah in la ilaaliyo maskax furan marka la tixgelinayo waxa dhibaatadu noqon karto, iyo si ay u awoodaan in ay mudnaanta siiyaan sababaha suurtagalka ah si ay u bilaabaan dadaalladayada cilad-bixinta, diiradda saaraya kuwa ugu badan, fursadaha suurtogalka ah waa mid aad u muhiim ah.
Talaabada muhiimka ah ee jimicsi kasta oo cilad-sheegid ah - laakiin mid ka mid ah oo aan u maleynayo in la yareeyey - waa garashada in ay jirto dhibaato u baahan in la xalliyo. Aqoonsiga in ay jirto dhibaato inta badan macnaheedu waa aqoonsiga in waxa ku dhacaya qalabku uu ka duwan yahay filashadayada, kuwaas oo lagu qaabeeyey aragti, aqoonta empirical, iyo waayo-aragnimada (5) . gees, dabo, iwm.), laakiin sidoo kale in width. Our filashada ee qaabka ugu sarreeya ee dhabta ah waa mid fudud. Aragtida (6) si fiican u taageertaa rajada buug-yaraha in, inta badan, meelaha ugu sarreysa chromatographic waa in ay ahaadaan kuwo isku mid ah oo waafaqsan qaabka qaybinta Gaussian, sida ku cad Jaantus 1a. Waxa aan ka fileyno ballaadhka ugu sarreeya waa mawduuc kale oo ka sii adag. Bilicda la arki karo - si kale haddii loo dhigo, qaar ka mid ah siyaabaha wax u khaldami karaan. Inta ka hartay qaybtan, waxaan waqti ku qaadan doonaa inaan ka wada hadalno tusaalooyin gaar ah oo ku saabsan xaaladaha u horseedi kara noocyadan qaabka.
Mararka qaarkood meelaha ugu sarreeya ayaan lagu arkin dhammaan chromatogram-ka halkaas oo la filayo in la soo saaro. Jaantuska derbiga ee kor ku xusan wuxuu muujinayaa in maqnaanshaha ugu sarreeya (marka loo eego muunadda dhabta ah waxay ka kooban tahay falanqeeyaha bartilmaameedka ah ee diiradda saaraya in ay ka dhigto jawaab-celinta ku filan si ay u aragto kor ku xusan qaylada) badanaa waxay la xiriirtaa qalabka qaar ka mid ah qalabka ama xaaladaha wajiga wareega ee khaldan (haddii la arko dhammaan).meelaha ugu sarreeya, sida caadiga ah aad u "daciif ah"). Liis gaaban oo dhibaatooyinka iman kara iyo xalalka qaybtan waxaa laga heli karaa shaxda I.
Sida kor ku xusan, su'aasha ah intee in le'eg balaadhinta ugu sarreysa waa in loo dulqaataa ka hor inta aan fiiro gaar ah la siin oo aan isku dayin in la hagaajiyo waa mawduuc adag oo aan ka hadli doono maqaal mustaqbalka ah. Waayo-aragnimadaydu waxay tahay in ballaarinta ugu sarreysa ee muhiimka ah ay inta badan la socoto isbeddel weyn oo ku yimaada qaabka ugu sarreeya, iyo dabada ugu sarreysa waa mid aad u badan marka loo eego pre-peak ama kala qaybsanaan.
Mid kasta oo ka mid ah arrimahan ayaa si faahfaahsan loogu falanqeeyay qodobbadii hore ee Cilad-bixinta LC, akhristayaasha mawduucyadan xiiseeya waxay tixraaci karaan maqaalladan hore si ay u helaan macluumaad ku saabsan sababaha asaasiga ah iyo xalalka arrimahan.Faahfaahin dheeraad ah
Dabada ugu sarreysa, hore-u-dhigga ugu sarreeya, iyo kala-goynta dhammaantood waxaa sababi kara ifafaale kiimikaad ama jireed, iyo liiska xalalka suurtagalka ah ee dhibaatooyinkani aad ayey u kala duwan yihiin, iyadoo ku xidhan haddii aan la tacaaleyno dhibaato kiimiko ama jireed meelaha ugu sarreeya ayaa saameeya, laakiin inta soo hartay waxay u muuqdaan kuwo fiican, sababtu waxay u badan tahay kiimiko.
Sababaha kiimikaad ee dabada ugu sarreysa ayaa aad u adag in si kooban looga hadlo halkan. Akhristaha xiisaha leh waxaa loo tixraacaa arrinta dhawaanta ee "LC Troubleshooting" si loogu doodo qoto dheer (10) . Si kastaba ha ahaatee, wax sahlan oo la isku dayo waa in la yareeyo xajmiga falanqaynta la isku duray oo la eego haddii qaabka ugu sarreeya uu soo fiicnaado sses, ama xaaladaha chromatographic waa in la beddelo si qaababka ugu sarreeya loo helo xitaa tiro badan oo la isku duro.
Waxa kale oo jira sababo badan oo suurtogal ah oo jireed oo loogu talagalay dawaynta ugu sarreysa. Akhristayaasha xiiseynaya dood faahfaahsan oo ku saabsan suurtogalnimada waxaa loo tixraacaa arrin kale oo dhowaan ah "LCD Troubleshooting" (11) .Mid ka mid ah sababaha jireed ee caadiga ah ee dabada ugu sarreysa waa isku xirka liidata ee barta u dhaxaysa duritaanka iyo qalabka (12) ). mugga irbado yar yar oo leh ferrule ah in la qaabeeyey gal capillary ahama birta ah.Ka dib markii qaar ka mid ah tijaabooyinka cilad bilowga hore, waxaan ogaanay in qoto dheer dekedda ee stator waalka duritaanka ahaa mid aad u qoto dheer ka badan waxaan loo isticmaalaa in, taasoo keentay in mugga dhintay weyn ee hoose ee dekedda.Dhibaatada Tani si fudud loo xalliyo by beddelo loop irbado la dekedda kale, waxaan hagaajin kartaa mugga ee mugga ee booska kale ee ku habboon.
Meelaha ugu sarreeya sida kuwa lagu muujiyey Jaantuska 1e sidoo kale waxaa sababi kara dhibaatooyin jireed ama kiimiko. Sababta caadiga ah ee jireed ee cidhifka hogaaminaya waa in sariirta qaybta tiirarka aan si fiican loo buuxin, ama in qaybaha ay dib u habeeyeen waqti ka dib. Marka la eego shuruudaha ku habboon (tooska ah), qadarka falanqaynta ee lagu hayo marxaladda taagan (sidaa daraadeed, factor retention) waxay si toos ah ula xiriirtaa fiirsashada falanqaynta ee tiirka Waxaa intaa dheer, qaababka aan tooska ahayn ayaa go'aamiya qaabka ugu sarreeya ee chromatographic, taasoo keentay in hogaanka ama cidhifyada daba-galka ah.Sida culeyska xad-dhaafka ah ee keena dabada ugu sarreysa (10), hogaaminta ugu sarreysa ee ay keento sii-haynta aan tooska ahayn ayaa sidoo kale lagu ogaan karaa iyada oo la dhimayo mass analyte la isku duro. Haddii ugu sarreysa ay soo fiicnaato, habka waa in la beddelo tayada qaab-dhismeedka chromat-ka waa in la beddelaa si aan u dhaafin cidhifka.
Mararka qaarkood waxaan aragnaa waxa u muuqda inuu yahay "kala qaybsanaan", sida ku cad Jaantuska 1f. Tallaabada ugu horreysa ee xallinta dhibaatadan waa in la go'aamiyo in qaabka ugu sarreeya ay sabab u tahay qayb ka mid ah isku-dhafka (ie, joogitaanka laba qaybood oo kala duwan laakiin si dhow u sarreeya) ance waxba kuma laha tiirka laftiisa. Inta badan, tilmaanta ugu muhiimsan ee go'aankani waa haddii dhammaan meelaha ugu sarreeya chromatogram-ka ay muujinayaan qaabab kala qaybsan, ama hal ama laba kaliya. Haddii ay tahay hal ama laba kaliya, waxay u badan tahay inay tahay arrin wadajir ah;haddii dhammaan meelaha ugu sarreeya la kala qaybiyo, waxay u badan tahay inay tahay arrin jireed, oo ay u badan tahay inay la xiriirto tiirka laftiisa.
Kala qaybsanaanta ugu sarreysa ee la xidhiidha sifooyinka jireed ee tiirka laftiisa ayaa inta badan sabab u ah qayb ka mid ah xannibaadaha gudaha ama dibedda, ama dib-u-habaynta qaybaha tiirka, taas oo u oggolaanaysa wajiga wareega in uu ka dhaqso badan yahay marxaladda wareega ee meelaha qaarkood ee samaynta kanaalka tiirkasi kastaba ha ahaatee, waayo-aragnimadayda, tani badanaa waa wakhti gaaban halkii ay ka ahaan lahayd xal dheer. Tani waxay inta badan u dhintaa tiirarka casriga ah haddii qaybaha dib-u-soo-noqoshada gudaha tiirka. Marka la eego, waxa fiican in la beddelo tiirka oo la sii wado.
Heerka ugu sarreeya ee Jaantuska 1g, oo sidoo kale laga soo xigtay tusaale ahaan shaybaarkayga gaarka ah, sida caadiga ah waxay muujinaysaa in calaamaduhu aad u sarreeyo oo uu gaadhay heerka ugu sarreeya ee jawaabta jawaabta. sida iftiinka qaloocan iyo "hadka mugdiga ah", taasoo ka dhigaysa calaamadda mid aad u "daahsoon" muuqaal ahaan kana madax bannaan diiradda falanqaynta.Marka ay tani dhacdo, dhibaatada inta badan si fudud ayaa loo xalin karaa iyada oo la yareynayo mugga duritaanka ee falanqeeyayaasha-hoos u dhigista mugga duritaanka, la milo muunadda, ama labadaba.
Dugsiga chromatography, waxaan isticmaalnaa calaamadda qalabka (ie, y-axis ee chromatogram) sida tilmaame diiradda falanqaynta ee muunadda. Sidaa darteed waxay u muuqataa wax aan caadi ahayn in la arko chromatogram oo leh calaamad ka hooseeya eber, sida tarjumaadda fudud ayaa ah in tani ay muujinayso diiradda falanqeeye taban - taas oo dabcan aan suurtogal ahayn jir ahaan.
Xaaladdan oo kale, ugu sarreysa taban si fudud macnaheedu waa in molecules eluting ka tiirka nuugo iftiin ka yar marka loo eego wajiga mobile laftiisa isla markiiba ka hor iyo ka dib peak. Tani waxay dhici kartaa, tusaale ahaan, marka la isticmaalayo wavelengths ogaanshaha yara hooseeya (<230 nm) iyo daro wajiga mobile in nuugo inta badan iftiinka ee mawjadaha kuwan. aks si loo diyaariyo qalooca calibration oo la helo macluumaad sax ah oo sax ah, markaa ma jirto sabab aasaasi ah oo looga fogaado iyaga per se (habkan waxaa mararka qaarkood loo yaqaan "ogaanshaha UV aan tooska ahayn") (13) . Si kastaba ha ahaatee, haddii aan dhab ahaantii rabno in aan ka fogaano meelaha ugu sarreeya ee guud ahaan, marka la eego ogaanshaha nuugista, xalka ugu fiican waa in la isticmaalo marxalado kala duwan oo lagu ogaanayo dhererka dhererka ama wareegga wareegga si ay u nuugaan marxaladda iftiinka moobiilka si ka badan marxaladda moobilka si ay u nuugaan marxaladda iftiinka moobilka si ka badan marka loo eego qaabka moobiilka falanqeeya.
Meesha ugu sarreysa ayaa sidoo kale soo bixi kara marka la isticmaalayo index refractive (RI) ogaanshaha marka index refractive ee qaybaha kale oo aan ahayn analyte ee muunada, sida matrix dareere ah, ka duwan yahay index refractive ee wajiga mobile. Tani waxay sidoo kale ku dhacdaa ogaanshaha UV-vis, laakiin saamaynta this u janjeera in la dhimay marka loo eego in RI la ogaado. Labada xaaladood, muunad yareyn karaa in ka kooban ee ka kooban moobil by ogaanshaha. waji
Qaybta saddexaad ee mawduuca aasaasiga ah ee cilad-bixinta LC, waxaan ka hadlay xaaladaha kuwaas oo qaabka ugu sarreeya ee la arkay uu ka duwan yahay qaabka ugu sarreeya ee la filayo ama caadiga ah. Cilad-celinta waxtarka leh ee dhibaatooyinka noocan oo kale ah waxay ku bilaabataa aqoonta qaababka ugu sarreeya ee la filayo (oo ku salaysan aragti ama waayo-aragnimo hore oo leh hababka jira), markaa ka leexashada rajooyinkan waa cad. Faahfaahinta ayaa bixisa meel wanaagsan oo laga bilaabo cilad-bixinta, laakiin ma qabato dhammaan fursadaha. Akhristayaasha xiiseynaya liis qoto dheer oo sababaha iyo xalalka waxay tixraaci karaan jaantuska derbiga ee LCGC "Hagaha Xallinta Dhibaatada LC".
(4) shaxanka darbiga LCGC “Hagaha Cilad-bixinta LC”.https://www.chromatographyonline.com/view/troubleshooting-wallchart (2021).
(6) A. Felinger, Falanqaynta Xogta iyo Habaynta Calaamadaha Chromatography (Elsevier, New York, NY, 1998), bogga 43-96.
(8) Wahab MF, Dasgupta PK, Kadjo AF iyo Armstrong DW, Anal.Chim.Journal.Rev.907, 31–44 (2016).https://doi.org/10.1016/j.aca.2015.11.043.