Qaar ka mid ah mawduucyada cilad-bixinta LC-da waligeed ma dhicin, maadaama ay jiraan arrimo ku saabsan dhaqanka LC, xitaa sida tiknoolajiyada qalabku ay sii wanaajiso waqti ka dib. Waxaa jira siyaabo badan oo ay dhibaatooyinku uga soo bixi karaan nidaamka LC oo ay ku dhamaanayaan qaabka ugu sarreeya ee liita.Marka arrimaha la xidhiidha qaabka ugu sarreeya ay soo baxaan, liis gaaban oo ah sababaha suurtogalka ah ee natiijooyinkani waxay ka caawinayaan fududaynta khibradeena cillad-bixinta.
Waxay ahayd madadaalo qorista this "LC Troubleshooting" column iyo fikirka ku saabsan mawduucyada bil kasta, sababtoo ah mawduucyada qaar ka mid ah weligood ma baxaan style. Iyadoo duurka ku ah ee chromatography cilmi baaris mawduucyo gaar ah ama fikrado noqdaan gaboobay sida ay u bedelay by cusub iyo fikrado ka fiican, berrinkii cilad-saarista, tan iyo markii maqaalkii ugu horeeyay ee cilad ka soo muuqday joornaalkan ( LC Journal in the time) 8 Dhowrkii sano ee la soo dhaafay, waxaan diiradda saaray dhowr qaybood oo xallinta dhibaatooyinka LC ee isbeddellada casriga ah ee saameeya chromatography dareeraha (tusaale ahaan, isbarbardhigga isbarbardhigga fahamkayaga saameynta cadaadiska ee sii-haynta [2] Horumarka Cusub) Fasiraaddayada natiijooyinka LC iyo sida loo xalliyo qalabka casriga ah ee LC Mawduucyada dhimashada iyo dhimashada" mawduucyada cilad-bixinta LC - walxo u fiican cilad kasta waa lagama maarmaan, iyadoon loo eegin da'da nidaamka aan isticmaaleyno. Mawduuca udubdhexaadka ah ee taxanahan ayaa aad u khuseeya LCGC ee caanka ah "Hagaha Xallinta Dhibaatada LC" shaxda derbiga (4) oo ku dhegan shaybaaro badan. Qaybta saddexaad ee taxanahan, waxaan doortay in aan diirada saaro arrimaha la xidhiidha qaabka ugu sarreeya ama qaababka kala duwan ee 4. Qaabka ugu sarreeya ee liita! Ma tixgelin karno dhammaan arrimahan si faahfaahsan hal maqaal, markaa qaybtan koowaad ee mawduuca, waxaan diiradda saari doonaa qaar ka mid ah kuwa aan arko inta badan. Waxaan rajeynayaa in dadka isticmaala yar iyo waayeelka LC ay heli doonaan talooyin waxtar leh iyo xusuusin mawduucan muhiimka ah.
Waxaan isku arkaa inaan si sii kordheysa uga jawaabo su'aalaha cilad-raadinta "wax kasta waa suurtagal" jawaabtani waxay u muuqan kartaa mid sahlan marka la tixgelinayo indho-indheynta ay adag tahay in la tarjumo, laakiin waxaan u arkaa inay inta badan ku habboon tahay. Sababo badan oo suurtagal ah oo ah qaabka ugu sarreeya ee liita, waxaa muhiim ah in la ilaaliyo maskax furan marka la tixgelinayo waxa dhibaatadu noqon karto, iyo si ay u awoodaan in ay mudnaanta siiyaan sababaha suurtagalka ah si ay u bilaabaan dadaalladayada cilad-bixinta, diiradda saaraya kuwa ugu badan, fursadaha suurtogalka ah waa mid aad u muhiim ah.
Talaabada muhiimka ah ee jimicsi kasta oo cilad-sheegid ah - laakiin mid ka mid ah oo aan u maleynayo in la yareeyey - ayaa aqoonsanaya in ay jirto dhibaato u baahan in la xalliyo. Aqoonsiga in ay jirto dhibaato inta badan macnaheedu waa aqoonsiga in waxa ku dhacaya qalabku uu ka duwan yahay filashadayada, kuwaas oo lagu qaabeeyey aragti, aqoonta empirical, iyo khibrad (5) . qalafsanaan, geeska hogaaminaya, dabo, iwm.), laakiin sidoo kale ballaca. Rajadayada qaabka ugu sarreeya ee dhabta ah waa mid fudud. Aragtida (6) waxay si fiican u taageertaa rajada buug-gacmeedka in, inta badan, meelaha ugu sarreeya ee chromatographic waa inay noqdaan kuwo isku dhafan oo waafaqsan qaabka qaybinta Gaussian, sida ku cad sawirka 1a. Waxa aan ka fileyno mawduuca ugu sarreeya, mawduuca kale ee mawduuca mustaqbalka ayaa ka wada hadli doona mawduucyada ugu sarreeya. Jaantuska 1 wuxuu muujinayaa qaar ka mid ah fursadaha kale ee la arki karo - si kale haddii loo dhigo, siyaabaha qaar ay wax u khaldami karaan
Mararka qaarkood meelaha ugu sarreeya ayaan lagu arkin dhammaan chromatogram-ka halkaas oo la filayo in la soo saaro. Jaantuska derbiga ee kor ku xusan wuxuu muujinayaa in maqnaanshaha ugu sarreeya (marka loo eego muunadda dhabta ah waxay ka kooban tahay falanqeeyaha bartilmaameedka ah ee diiradda saaraya in ay ka dhigto jawaab-celinta ku filan si ay u aragto kor ku xusan qaylada) badanaa waxay la xiriirtaa qalabka qaar ka mid ah qalabka ama xaaladaha wajiga wareega ee khaldan (haddii la arko dhammaan). meelaha ugu sarreeya, sida caadiga ah aad u "daciif ah"). Liis gaaban oo dhibaatooyinka iman kara iyo xalalka qaybtan waxaa laga heli karaa shaxda I.
Sida kor ku xusan, su'aasha ah intee in le'eg balaadhinta ugu sarreysa waa in loo dulqaataa ka hor intaanan fiiro gaar ah lahayn oo aan isku dayin in la hagaajiyo waa mawduuc adag oo aan ka hadli doono maqaal mustaqbalka ah. Waayo-aragnimadaydu waxay tahay in ballaarinta ugu sarreysa ee muhiimka ah ay inta badan la socoto isbeddel weyn oo ku yimaada qaabka ugu sarreeya, iyo dabada ugu sarreysa waxay ka badan tahay ka hor-sare ama kala qaybsanaan.
Mid kasta oo ka mid ah arrimahan ayaa si faahfaahsan loogu falanqeeyay qodobbadii hore ee Cilad-bixinta LC, akhristayaasha mawduucyadan xiiseeya waxay tixraaci karaan maqaalladan hore si ay u helaan macluumaad ku saabsan sababaha asaasiga ah iyo xalalka arrimahan. Faahfaahin dheeraad ah
Dabada ugu sarreysa, hor-u-dhigga ugu sarreeya, iyo kala qaybsanaanta dhammaan waxaa sababi kara ifafaale kiimikaad ama jireed, iyo liiska xalalka suurtagalka ah ee dhibaatooyinkan aad ayey u kala duwan yihiin, iyadoo ku xiran haddii aan la tacaaleyno dhibaato kiimiko ama jireed kaliya hal ama dhowr meelood oo sare ayaa saameeya, laakiin inta soo hartay waxay u muuqdaan kuwo fiican, sababtu waxay u badan tahay kiimiko.
Sababaha kiimikaad ee dabada ugu sarreysa ayaa aad u adag in si kooban looga hadlo halkan. Akhristaha xiisaha leh waxaa loo tixraacaa arrintii ugu dambeysay ee "Cudurka LC" ee dood qoto dheer oo qoto dheer (10) . Si kastaba ha ahaatee, wax sahlan oo la isku dayo waa in la yareeyo xajmiga falanqaynta la isku duray oo la eego haddii qaabka ugu sarreeya uu fiicnaado tiro yar oo falanqeeye ah, ama xaaladaha chromatographic waa in la beddelo si qaababka ugu sarreeya loo helo xitaa tiro weyn oo la isku duro.
Waxa kale oo jira sababo badan oo jireed oo suurtagal ah oo loogu talagalay dawaynta ugu sarreysa. Akhristayaasha xiiseynaya dood faahfaahsan oo ku saabsan suurtogalnimada waxaa loo tixraacaa arrin kale oo dhowaan ah "LCD Troubleshooting" (11) .Mid ka mid ah sababaha jireed ee caadiga ah ee dabada ugu sarreysa waa isku xirka liidata ee barta inta u dhaxaysa duritaanka iyo qalabka (12) .Tusaale aad u daran ayaa lagu muujiyay Jaantuska 1d, oo aan ku helnay nidaamka shaybaarka dhowr toddobaad ka hor, oo aan la isticmaalin qalab cusub. ka hor, oo lagu rakibay loop mugga mugga yar yar oo leh ferrule ah oo lagu dhejiyay capillary birta aan lahayn.Ka dib markii qaar ka mid ah tijaabooyinka dhibaatooyinka bilawga ah, waxaan ogaanay in qoto dheer ee dekedda ee stator valve duritaanka uu ahaa mid aad u qoto dheer oo ka sii qoto dheer intii aan loo isticmaalin, taasoo keentay in mugga weyn ee dhintay ee hoose ee dekedda. Dhibaatadani si fudud ayaa loo xalliyaa iyada oo la beddelayo wareegga cirbadda ee mugga saxda ah ee booska kale ee saxda ah, waxaanu ka takhalusi karnaa wareegga mugga ee mugga mugga kale ee ku habboon. dekedda.
Wajahada ugu sarreysa sida kuwa lagu muujiyey Jaantuska 1e waxa kale oo ay sababi karaan dhibaatooyin jidheed ama kiimiko Xaaladaha ku-meel-gaadhka ah ee "non-linear" . Marka la eego shuruudaha qumman (tooska ah), qadarka falanqaynta ee lagu hayo marxaladda taagan (sidaa daraadeed, factor retention) waxay si toos ah ula xiriirtaa xoojinta falanqaynta ee tiirka Waxa dheer, qaababka aan tooska ahayn ayaa go'aamiya qaabka ugu sarreeya ee chromatographic, taasoo keentay in ay horseedaan ama geesaha raacaan. gees, ama xaaladaha chromatographic waa in la beddelo si loo yareeyo dhaqankan.
Mararka qaarkood waxaan aragnaa waxa u muuqda inuu yahay "kala qaybsanaan", sida ku cad Jaantuska 1f. Tallaabada ugu horreysa ee xallinta dhibaatadan waa in la go'aamiyo in qaabka ugu sarreeya ay sabab u tahay qayb ka mid ah isku-dhafka (ie, joogitaanka laba qaybood oo kala duwan laakiin si dhow u sarreeya) laxidhiidha Waxqabadka jidheed waxba kuma laha tiirka laftiisa. Inta badan, tilmaanta ugu muhiimsan ee go'aankani waa haddii dhammaan meelaha ugu sarreeya ee chromatogram-ka ay muujiyaan qaabab kala-baxsan, ama hal ama laba kaliya. Haddii ay tahay hal ama laba kaliya, waxay u badan tahay inay tahay arrin wadajir ah; haddii dhammaan meelaha ugu sarreeya la kala qaybiyo, waxay u badan tahay inay tahay arrin jireed, oo ay u badan tahay inay la xiriirto tiirka laftiisa.
Kala qaybsanaanta ugu sarreysa ee la xidhiidha sifooyinka jireed ee tiirka laftiisa ayaa inta badan sabab u ah qayb ka mid ah xannibaadaha gudaha ama dibedda, ama dib-u-habaynta qaybaha tiirka, taas oo u oggolaanaysa wajiga wareega in uu ka dhaqso badan yahay marxaladda wareega ee meelaha qaarkood ee samaynta kanaalka tiirka si kastaba ha ahaatee, waayo-aragnimadayda, tani badanaa waa wakhti gaaban halkii ay ka ahaan lahayd xal dheer. Tani waxay inta badan u dhintaa tiirarka casriga ah haddii qaybaha dib-u-soo-noqoshada gudaha tiirka. Marka la eego, waxa fiican in la beddelo tiirka oo la sii wado.
Heerka ugu sarreeya ee Jaantuska 1g, oo sidoo kale laga soo bilaabo tusaale ahaan dhawaan shaybaarkayga, sida caadiga ah waxay muujinaysaa in calaamaduhu aad u sarreeyo oo uu gaadhay dhamaadka sare ee jawaabta jawaabta. Ilaha buuqa, sida iftiinka qaloocan iyo "hadka mugdiga ah", taas oo ka dhigaysa calaamadda mid aad u "daahsoon" muuqaal ahaan kana madaxbannaan diiradda falanqaynta. Marka ay tani dhacdo, dhibaatada inta badan si fudud ayaa loo xalin karaa iyada oo la yareynayo mugga duritaanka ee falanqeeyayaasha-hoos u dhigista mugga duritaanka, la milo muunadda, ama labadaba.
Dugsiga chromatography, waxaan isticmaalnaa calaamadda qalabka (ie, y-axis ee chromatogram) sida tilmaame diiradda falanqaynta ee muunadda. Sidaa darteed waxay u muuqataa wax aan caadi ahayn in la arko chromatogram oo leh calaamad ka hooseeya eber, sida tarjumaadda fudud ayaa ah in tani ay muujinayso diiradda falanqeeye taban - taas oo dabcan aan suurtogal ahayn jir ahaan.
Xaaladdan oo kale, ugu sarreysa taban si fudud macnaheedu waa in molecules eluting ka tiirka nuugo iftiin ka yar marka loo eego wajiga mobile laftiisa isla markiiba ka hor iyo ka dib peak. Tani waxay dhici kartaa, tusaale ahaan, marka la isticmaalayo wavelengths ogaanshaha yara hooseeya (<230 nm) iyo daro wajiga mobile in nuugo inta badan iftiinka ee kuwan mawjada. dhab ahaantii isticmaali kara meelaha ugu sarreeya taban si ay u diyaariyaan qalooca calibration oo aad u hesho macluumaad sax ah oo sax ah, sidaas darteed ma jirto sabab aasaasi ah oo looga fogaado iyaga per se (habkan waxaa mararka qaarkood loo tixraacaa sida " Ogaanshaha UV dadban ") (13) . Si kastaba ha ahaatee, haddii aan runtii rabno inaan ka fogaanno meelaha ugu sarreeya oo dhan, in ay dhacdo ogaanshaha nuugista, xalka ugu fiican waa in la isticmaalo marxalad ogaanshaha kala duwan si ka badan mawjada anangte in ka badan beddelka halabuurka mobile ka badan. marxaladda guurguura si ay u nuugaan iftiin ka yar marka loo eego falanqaynta.
Meesha ugu sarreysa ayaa sidoo kale soo bixi kara marka la isticmaalayo index refractive (RI) ogaanshaha marka index refractive ee qaybaha kale oo aan ahayn falanqaynta ee muunada, sida matrix dareere ah, ka duwan yahay index refractive ee wajiga mobile. Tani waxay sidoo kale ku dhacdaa ogaanshaha UV-vis, laakiin saamaynta this u janjeera in la yareeyey marka loo eego RI ogaanshaha. Labada xaaladood, muunad yareyn karaa in ka kooban halbeegga u dhow by baaritaanka. ilaa kan wajiga wareega.
Qaybta saddexaad ee mawduuca aasaasiga ah ee cilad-bixinta LC, waxaan ka hadlay xaaladaha kuwaas oo qaabka ugu sarreeya ee la arkay uu ka duwan yahay qaabka ugu sarreeya ee la filayo ama caadiga ah. Cilad-celinta waxtarka leh ee dhibaatooyinka noocan oo kale ah waxay ku bilaabataa aqoonta qaababka ugu sarreeya ee la filayo (oo ku salaysan aragti ama waayo-aragnimo hore oo leh hababka jira), markaa ka leexashada rajooyinkan waa cad. Inta badan. Ogaanshaha tafaasiishan waxay siisaa meel wanaagsan oo laga bilaabo cilad-bixinta, laakiin ma qabato dhammaan fursadaha. Akhristayaasha xiiseynaya liis qotodheer oo qotodheer oo ah sababaha iyo xalalka waxay tixraaci karaan jaantuska derbiga LCGC "Hagaha Dhibaatooyinka LC".
(4) shaxanka darbiga LCGC “Hagaha Cilad-bixinta LC”.https://www.chromatographyonline.com/view/troubleshooting-wallchart (2021).
(6) A. Felinger, Falanqaynta Xogta iyo Habaynta Calaamadaha Chromatography (Elsevier, New York, NY, 1998), bogga 43-96.
(8) Wahab MF, Dasgupta PK, Kadjo AF iyo Armstrong DW, Anal.Chim.Journal.Rev. 907, 31–44 (2016).https://doi.org/10.1016/j.aca.2015.11.043.