Waad ku mahadsan tahay booqashada Nature.com.Nooca browserka aad isticmaalayso waxa uu leeyahay taageerada CSS oo xadidan.Waayo-aragnimada ugu fiican, waxaan kugula talineynaa inaad isticmaasho browser-ka la cusboonaysiiyay (ama aad damiso Habka Laqabsiga ee Internet Explorer).Dhanka kale, si loo xaqiijiyo taageerada joogtada ah, waxaan ka dhigi doonaa goobta iyada oo aan lahayn qaabab iyo JavaScript.
Bacriminta shimbiraha waxay ku xiran tahay awoodda ay u leeyihiin inay ku kaydiyaan shahwo ku filan oo shaqayn karta muddo dheer gudaha tuubooyinka kaydinta shahwada (SST).Habka saxda ah ee spermatozoa ay u gasho, u degto, ugana baxdo SST ayaa weli ah muran.Xawada digaaga sharkasi waxay muujisay rabitaan aad u sarreeya oo ah agglutination, samaynta xidhmooyin fiilo wareeg ah oo ka kooban unugyo badan.Sababtoo ah dhibka ah in la eego dhaqdhaqaaqa iyo dabeecadda shahwada ee tuubada fallopian, waxaan isticmaalnay qalab microfluidic ah oo leh qaybta microchannel ee la mid ah kan shahwada si aan u barano spermatozoa agglutination iyo dhaqdhaqaaqa.Daraasadani waxay ka hadlaysaa sida xidhmooyinka shahwada u samaysmaan, sida ay u guuraan, iyo doorka suurtogalka ah ee ay ku leeyihiin fidinta degenaanshaha shahwada ee SST.Waxaan baarnay xawaaraha shahwada iyo dabeecadda rheological markii socodka dareeraha uu ka dhex abuurmay kanaalka microfluidic cadaadiska hydrostatic (heerka socodka = 33 µm/s).Xawada shahwadu waxay u janjeertaa inay ka dabaasho oo ka hortimaado tan hadda jirta (rheology togan) iyo xawaaraha xidhmada spermatozoon aad ayuu hoos ugu dhacay marka loo eego hal shahwo.Xirmooyinka shahwada ayaa la arkay in ay si wareeg ah u socdaan oo ay kordhiyaan dhererka iyo dhumucda marka shahwo badan oo keli ah la qoro. Xirmooyinka shahwada ayaa la arkay iyagoo ku soo dhowaanaya oo ku dheggan darbiga kanaalada microfluidic si looga fogaado in lagu xaaqo xawaaraha socodka dareeraha> 33 µm/s. Xirmooyinka shahwada ayaa la arkay iyagoo ku soo dhowaanaya oo ku dheggan darbiga kanaalada microfluidic si looga fogaado in lagu xaaqo xawaaraha socodka dareeraha> 33 µm/s. Было zaмечено, что пучки сперматозоидов приближаются ть сметания со скоростью потока жидкости> 33 мкм / с. Xirmooyinka shahwada ayaa la arkay inay soo dhawaadaan oo ay ku dhegaan darbiyada dhinac ee kanaalada microfluidic si looga fogaado in lagu xaaqo heerka socodka dareeraha>33µm/s.观察到精子束接近并粘附在微流体通道的侧壁上，以避免被流体流速> 33 µ过。33 µm/s 扫过. Былозамечено, что пучки сперматозоидов ь сметания потоком жидкости со скоростью > 33 мкм/с. Xirmooyinka shahwada ayaa la arkay in ay soo dhawaadaan oo ay ku dheggan yihiin darbiyada dhinac ee kanaalka microfluidic si looga fogaado in uu xaaqo qulqulka dareeraha ee>33 µm/s.Baadhitaanka iyo gudbinta microscopy elektarooniga ah ayaa shaaca ka qaaday in xidhmooyinka shahwada ay taageereen walxo cufan oo badan.Xogta la helay waxay muujinaysaa dhaqdhaqaaqa gaarka ah ee Sharkazi digaaga spermatozoa, iyo sidoo kale awoodda spermatozoa si ay u agglutinate oo ay u sameeyaan xirmooyinka moobiilka, taas oo gacan ka geysaneysa faham wanaagsan oo ku saabsan kaydinta muddada dheer ee spermatozoa ee SMT.
Si loo gaaro bacriminta bini'aadamka iyo xayawaanka intooda badan, shahwada iyo ukunta waa inay yimaadaan goobta bacriminta waqtiga saxda ah.Sidaa darteed, lammaaneyaashu waa inay dhacaan ka hor ama wakhtiga ugxan-sidaha.Dhanka kale, naasleyda qaarkood, sida eeyaha, iyo noocyada aan naasleyda ahayn, sida cayayaanka, kalluunka, xamaaratada, iyo shimbiraha, waxay ku kaydiyaan shahwada xubnaha taranka muddo dheer ilaa ay ukuntoodu diyaar u yihiin bacriminta (bacriminta asynchronous 1).Shimbiraha waxa ay awoodaan in ay joogteeyaan awoodda shahwada oo awood u leh in ay bacrimiso ukunta 2-10 toddobaad2.
Tani waa sifo gaar ah oo ka sooca shimbiraha iyo xayawaanka kale, sababtoo ah waxay siinaysaa suurtogalnimada bacriminta sare ka dib hal bacrin ah dhowr toddobaad iyada oo aan lahayn galmo iyo ugxan isku mar ah.Xubinta kaydinta shahwada ee ugu weyn, oo loo yaqaanno tuubada kaydinta shahwada (SST), waxay ku taal laalaabka xuubka gudaha ee isgoyska uterovaginal.Ilaa hadda, hababka ay shahwada u gasho, u degto, ugana baxdo bangiga shahwada si buuxda looma fahmin.Iyada oo ku saleysan daraasado hore, mala-awaal badan ayaa la soo bandhigay, laakiin midkoodna lama xaqiijin.
Forman4 wuxuu qiyaasay in shahwadu ay ku sii jirto deggenaanshahooda gudaha godka SST iyada oo loo marayo dhaqdhaqaaq isdaba-joog ah oo ka soo horjeeda jihada dareeraha ee marinnada borotiinka ee ku yaal unugyada epithelial SST (rheology).ATP waa la dhammeeyay sababtoo ah dhaqdhaqaaqa caleenta joogtada ah ee loo baahan yahay si loo ilaaliyo shahwadu ku jirta lumen SST iyo dhaqdhaqaaqa dhaqdhaqaaqa ayaa ugu dambeyntii hoos u dhacaya ilaa shahwadu ay ka soo baxdo banka shahwada iyadoo la raacayo qulqulka dareeraha oo ay bilaabaan safar cusub oo hoos u dhigaya tuubada xuubka xuubka si ay u bacrimiyaan shahwada.Ukun (Forman4).Qaabkan kaydinta shahwada waxaa taageeray ogaanshaha immunocytochemistry ee aquaporins 2, 3 iyo 9 ee ku jira unugyada epithelial SST.Ilaa hadda, daraasado ku saabsan rheology shahwada digaagga iyo doorka ay ku leedahay kaydinta SST, xulashada shahwada siilka, iyo tartanka shahwada ayaa maqan.Digaagga, shahwadu waxay gashaa xubinta taranka haweenka ka dib galmo dabiici ah, laakiin in ka badan 80% spermatozoa ayaa laga soo saaraa xubinta taranka wax yar ka dib galmo.Tani waxay soo jeedinaysaa in siilku yahay goobta koowaad ee xulashada shahwada shimbiraha.Intaa waxaa dheer, waxaa la sheegay in wax ka yar 1% shahwada lagu bacrimiyay xubinta taranka haweenka ay ku dhamaato SSTs2.Bacriminta macmalka ah ee chicks ee xubinta taranka, tirada shahwada ee gaadhay SST waxay u egtahay inay korodho 24 saacadood ka dib dhalmada.Ilaa hadda, habka xulashada shahwada inta lagu jiro hawshan ma cadda, dhaqdhaqaaqa shahwada ayaa laga yaabaa inay door muhiim ah ka qaadato qaadashada shahwada SST.Darbiyada dhumuc weyn iyo mugdiga ah ee tuubooyinka ugxan-sidaha awgeed, way adagtahay in si toos ah loola socdo dhaqdhaqaaqa shahwada ee tuubooyinka ugxan-sidaha ee shimbiraha.Sidaa darteed, waxaa naga maqan aqoonta aasaasiga ah ee ku saabsan sida shahwada ay ugu gudubto SST ka dib bacriminta.
Rheology ayaa dhawaan loo aqoonsaday inay tahay arrin muhiim ah oo lagu xakameynayo gaadiidka shahwada ee xubinta taranka naasleyda.Iyada oo ku saleysan awoodda shahwada dhaqaaqa in ay si toos ah u haajiraan, Zaferani et al8 waxay adeegsadeen nidaamka corra microfluidic si ay si aan toos ahayn uga soocaan shahwadda dhaqaaqa shaybaarada shahwada.Kala soocida shahwada noocaan ah waxay lama huraan u tahay daawaynta dhalmo la'aanta caafimaadka iyo cilmi baarista caafimaadka, waxaana laga door bidaa hababka dhaqanka ee waqti iyo xoog badan leh waxayna wax u dhimi kartaa qaabka shahwada iyo hufnaanta qaabdhismeedka.Si kastaba ha ahaatee, ilaa maanta, ma jiraan daraasado lagu sameeyay saamaynta dheecaannada ka soo baxa xubnaha taranka ee digaagga ee dhaqdhaqaaqa shahwada.
Iyadoo aan loo eegin habka lagu ilaalinayo shahwada lagu kaydiyo SST, baarayaal badan ayaa arkay in spermatozoa agglutinate deggan madaxa-ilaa-madaxa ee SST ee digaagga 9, 10, quails 2, iyo turkiga 11 si ay u sameeyaan xirmooyinka shahwada agglutinated.Qorayaashu waxay soo jeedinayaan in uu jiro xiriir ka dhexeeya agglutination-kan iyo kaydinta muddada dheer ee shahwada ee SST.
Tingari iyo Lake12 ayaa sheegay in xiriir xooggan uu ka dhaxeeyo shahwada shahwada ee qanjirka shahwada ee digaaga waxayna su'aal ka keeneen in shahwada avian agglutinate ay la mid tahay shahwada naasleyda.Waxay aaminsan yihiin in xidhiidhka qoto dheer ee ka dhexeeya shahwada ee vas deferens ay sabab u tahay walbahaarka ka yimaada joogitaanka tirada badan ee shahwada meel yar.
Marka la qiimeeyo hab-dhaqanka shahwada ee shaleemooyinka dhalada ah ee cusub, calaamadaha ku-meel-gaadhka ah ee agglutination ayaa lagu arki karaa, gaar ahaan cidhifyada dhibcaha shahwada.Si kastaba ha ahaatee, agglutination ayaa inta badan lagu dhibay ficilka wareega ee la xidhiidha dhaqdhaqaaqa joogtada ah, kaas oo sharaxaya dabeecadda ku-meel-gaarka ah ee dhacdadan.Cilmi-baadhayaashu waxay sidoo kale ogaadeen in marka dareeraha lagu daro shahwada, isku-darka unugga "thread-like" oo dhaadheer ayaa soo muuqday.
Isku daygii hore ee la isku dayey in lagu shaheeyo shahwada waxaa la sameeyey iyada oo laga saaray silig dhuuban dhibic ka laadlaadsan, taas oo keentay in shahwo u eg shahwo dheer oo ka soo baxa dhibicda shahwada.Xawada shahwadu waxay isla markiiba si is barbar yaac ah ugu safatay xuubabka, laakiin unuggii oo dhan ayaa si degdeg ah u baaba'ay xaddidaadda 3D awgeed.Sidaa darteed, si loo barto spermatozoa agglutination, waxaa lagama maarmaan ah in la ilaaliyo dhaqdhaqaaqa iyo habdhaqanka spermatozoa si toos ah tuubooyinka kaydinta shahwada ee go'doonsan, taas oo ay adagtahay in la gaaro.Sidaa darteed, waa lagama maarmaan in la horumariyo qalab u eg shahwada si ay u taageeraan daraasadaha dhaqdhaqaaqa shahwada iyo dabeecadda agglutination.Brillard et al13 ayaa sheegay in celceliska dhererka tuubooyinka kaydinta shahwada ee chicks qaangaarka ah ay tahay 400-600 µm, laakiin SST-yada qaarkood waxay noqon karaan ilaa 2000 µm.Mero iyo Ogasawara14 waxay u qaybiyeen qanjidhada seminiferous tuubooyinka kaydinta shahwada balaartay iyo kuwa aan weynayn, labaduba waxay ahaayeen isku mid dherer ahaan (~ 500 µm) iyo ballaca qoorta (~ 38 µm), laakiin celceliska dhexroorka lumen ee tuubooyinka wuxuu ahaa 56.6 iyo 56.6 µm.., siday u kala horreeyaan 11.2 μm, siday u kala horreeyaan.Daraasadda hadda jirta, waxaan isticmaalnay aaladda microfluidic leh cabirka kanaalka 200 µm × 20 µm (W × H), kaas oo qaybta isdhaafka ah ay xoogaa ku dhowdahay kan SST ee la xoojiyay.Intaa waxaa dheer, waxaan baarnay dhaqdhaqaaqa shahwada iyo habdhaqanka agglutination ee dareeraha qulqulaya, taas oo la socota fikradda Foreman ee ah in dareeraha ay soo saaraan unugyada epithelial SST ay ku hayaan shahwada lumen ee jihada ka soo horjeeda (rheological).
Ujeedada daraasaddan ayaa ahayd in laga gudbo dhibaatooyinka la fiirsashada dhaqdhaqaaqa shahwada ee tuubada fallopian iyo in laga fogaado dhibaatooyinka barashada rheology iyo habdhaqanka spermatozoa ee jawi firfircoon.Aalad microfluidic ah ayaa la isticmaalay taaso abuurta cadaadis hydrostatic si ay u ekaato dhaqdhaqaaqa shahwada ee xubnaha taranka ee digaaga.
Marka dhibic ka mid ah muunadda shahwada la badhxay (1:40) lagu shubo aaladda microchannel, laba nooc oo dhaqdhaqaaqa shahwada ayaa la aqoonsan karaa ( shahwo gooni ah iyo shahwa xidhan).Intaa waxaa dheer, shahwada spermatozoa waxay u egtahay inay ku dabaasho ka soo horjeeda hadda (rheology togan; video 1, 2). Inkasta oo xidhmooyinka shahwadu ay ka xawaare hooseeyaan kan shahwada keligood ah (p <0.001), waxay kordhiyeen boqolkiiba shahwada muujisa rheotaxis togan (p <0.001; Shaxda 2). Inkasta oo xidhmooyinka shahwadu ay ka xawaare hooseeyaan kan shahwada keligood ah (p <0.001), waxay kordhiyeen boqolkiiba shahwada muujisa rheotaxis togan (p <0.001; Shaxda 2). Хотя пучки сперматозоидов имели более низкую скорость , чем ерматозоидов, демонстрирующих положительный реотаксис (p <0,001; таблица 2). Inkasta oo xidhmooyinka spermatozoa ay lahaayeen xawaare ka hooseeya kan shahwada keliya (p <0.001), waxay kordhiyeen boqolkiiba spermatozoa oo muujinaya rheotaxis wanaagsan (p <0.001; Shaxda 2).尽管精子束的速度低于孤独精子的速度（p <0.001），但它们增加了显示阳性显示阳性的显示阳<0.001；表2）尽管精子束 的 速度(p <0.001; 2…..))) Хотя скорость пучков сперматозоидов была ниже. дов с положительной реологией (p <0,001; таблица 2). Inkasta oo xawaaraha xidhmooyinka shahwada ay ka hooseeyaan kan hal shahwada (p <0.001), waxay kordhiyeen boqolkiiba spermatozoa oo leh rheology togan (p <0.001; Shaxda 2).Rheology togan ee spermatozoa-ka keliya iyo tuftaha waxaa lagu qiyaasaa qiyaastii 53% iyo 85%, siday u kala horreeyaan.
Waxaa la arkay in shahwada digaagga sharkasi isla markiiba ka dib biya baxa ay sameeyaan xidhmo toosan, oo ka kooban daraasiin shakhsi ah.Tuftsyadani waxay kordhiyaan dhererka iyo dhumucda wakhti ka dib waxaana laga yaabaa inay ku sii jiraan vitro dhowr saacadood ka hor intaanay kala bixin (fidiyaha 3).Xirmooyinkan fiilo leh waxay u qaabaysan yihiin echidna spermatozoa oo samaysma dhammaadka epididymis.Shahwada digaaga ee Sharkashi ayaa la ogaaday inay u janjeerto inay agglutinate ku samayso oo ay samayso xidhmo reticulate ah in ka yar hal daqiiqo ka dib ururinta.Alwaaxyadani waa kuwo firfircoon oo awood u leh inay ku dhegaan darbiyada u dhow ama walxaha taagan.Inkasta oo xirmooyinka shahwada ay yareeyaan xawaaraha unugyada shahwada, waxaa cad in macroscopically ay kordhiyaan linearity.Dhererka xidhmooyinku way kala duwan yihiin iyadoo ku xidhan tirada shahwada lagu ururiyo xidhmooyinka.Laba qaybood oo xidhmo ah ayaa la go'doomiyey: qaybta hore, oo ay ku jiraan madaxa xorta ah ee shahwada agglutinated, iyo qaybta terminal, oo ay ku jiraan dabada iyo dhammaan dhamaadka fog ee shahwada.Isticmaalka kamarad xawaare sare leh (950fps), madaxyada bilaashka ah ee shahwada agglutinated ayaa lagu arkay qaybta hore ee xirmada, oo mas'uul ka ah dhaqdhaqaaqa xirmada sababtoo ah dhaqdhaqaaqooda oscillatory, kuwa soo haray waxay ku jiidayaan xirmo leh dhaqdhaqaaq helical ah (Video 4).Si kastaba ha ahaatee, tufaaxyada dhaadheer, waxaa la arkay in qaar ka mid ah madaxyada shahwada ee xorta ah ay ku dheggan yihiin jirka iyo qaybta dambe ee tufka ay u dhaqmaan sidii faan si ay u caawiyaan kicinta tufka.
Inta ay ku jiraan qulqulka dareeraha ah, xidhmooyinka shahwada ayaa is barbar socda, si kastaba ha ahaatee, waxay bilaabaan inay is-kordhiyaan oo ay ku dhegaan wax kasta oo weli jira, si aysan u dhaqin qulqulka hadda socda marka xawaaraha socodka uu kordho.Xirmooyinka ayaa sameysma marka ay isu soo dhawaadaan in yar oo unugyo shahwo ah, waxay bilaabaan inay si isku mid ah u socdaan oo ay isku duubaan, ka dibna ay ku dhegaan walax dhegdheg ah.Jaantusyada 1 iyo 2 waxay muujinayaan sida shahwadu isu soo dhowaanayso, oo samaynaysa meel isku xidha marka dabada isku duubto midba midka kale.
Cilmi-baadhayaashu waxay codsadeen cadaadiska hydrostatic si ay u abuuraan qulqulka dareeraha ee microchannel si ay u bartaan rheology shahwada.Microchannel leh cabbirkiisu yahay 200 µm × 20 µm (W × H) iyo dhererka 3.6 µm ayaa la isticmaalay.Isticmaal microchannels inta u dhaxaysa weelasha ay ku jiraan saliingadaha ku rakiban cidhifyada.Midabaynta cuntada ayaa loo isticmaalay in kanaalada laga dhigo mid muuqda.
Ku xidh fiilooyinka iyo qalabka isku xidha ee gidaarka.Fiidiyowga waxaa lagu qaaday mikroskoob ka duwan wajiga.Sawir kasta, mikroskoobyada isbarbardhiga wajiga iyo sawirada khariidaynta ayaa la soo bandhigay.(A) Xidhiidhka ka dhexeeya labada durdur waxay ka hortagtaa qulqulka sababtoo ah dhaqdhaqaaqa helical (falaarta cas).(B) Xidhiidhka u dhexeeya xidhmada tuubada iyo gidaarka kanaalka ( fallaadho guduudan ), isla markaana waxay ku xidhan yihiin laba xidhmo oo kale ( fallaadho huruud ah ).(C) Xirmooyinka shahwada ee kanaalka microfluidic waxay bilaabaan inay isku xiraan midba midka kale ( fallaadho guduudan ), iyaga oo sameynaya xirmo shahwo ah.(D) Samaynta isku xidhka xidhmooyinka shahwada.
Marka dhibicda shahwada la qaso lagu shubo aaladda microfluidic oo socodka la abuuray, shahwada shahwada ayaa la arkay inay ka soo horjeedo jihada socodka.Xidhmooyinku waxay si fiican ugu habboon yihiin derbiyada microchannels, iyo madaxyada xorta ah ee qaybta hore ee xidhmooyinka ayaa si fiican ugu habboon iyaga (fiidiyow 5).Waxa kale oo ay ku dheggan yihiin walxaha taagan ee jidkooda ku jira, sida qashinka, si ay isaga caabiyaan in hadda uu xaaqo.Muddo ka dib, tufyadani waxay noqonayaan fiilo dhaadheer oo dabinaysa spermatozoa kale iyo tufo gaaban (Video 6).Marka qulqulka qulqulka uu bilaabo inuu hoos u dhaco, xadhkaha dhaadheer ee shahwada waxay bilaabaan inay sameeyaan shabakad xariiqyo shahwo ah (Video 7; Jaantuska 2).
Xawaaraha socodka sare (V> 33 µm/s), dhaqdhaqaaqa wareegyada ee duntu waa la kordhiyaa iyada oo la isku dayayo in la qabto xidhmo badan oo shahwo ah oo samaysmaya xidhmooyin si fiican u caabbinta xoogga qulqulka qulqulaya. Xawaaraha socodka sare (V> 33 µm/s), dhaqdhaqaaqa wareegyada ee duntu waa la kordhiyaa iyada oo la isku dayayo in la qabto xidhmo badan oo shahwo ah oo samaysmaya xidhmooyin si fiican u caabbinta xoogga qulqulka qulqulaya. Привысой скорости потока (V > 33 мкм/с) скачать видео - Heerarka qulqulka sare (V> 33 µm/s), dhaqdhaqaaqa xargaha xargaha ayaa kordha marka ay isku dayayaan inay qabtaan shahwo-shahwoo badan oo gaar ah oo sameysa xirmo kuwaas oo awood u leh inay iska caabiyaan xoogga qulqulaya ee qulqulka.在高流速(V > 33 µm/s) 时，螺纹的聺旋运动增加，以试图捕捉许多形成束的单个，精卻从流动的漂移力。在 高 流速 (v> 33 µm/s) 时 ，的 漂移力............... Привысоких скоростях потока матозоидов, образующих пучки, чтобы лучше сопротивляться силам дрейфа потока. Heerarka socodka sare (V> 33 µm/s), dhaqdhaqaaqa helical ee fiilooyinka ayaa kordhiya isku dayga lagu doonayo in lagu qabto shahwada shahwada oo samaysa xidhmooyin si ay si fiican uga hortagto xoogagga qulqulaya ee socodka.Waxay sidoo kale isku dayeen in ay ku dhejiyaan microchannels dhinacyada.
Xirmooyinka shahwada waxaa loo aqoonsaday inay yihiin rucubyo madax shahwo ah iyo dabo duuduuban iyadoo la isticmaalayo mikroskoobyo fudud (LM).Xirmooyinka shahwada oo leh wadaryo kala duwan ayaa sidoo kale loo aqoonsaday inay yihiin madax qalloocan iyo isku geynta caleenta, dabo shahwadeed oo badan, madax shahwo oo dabada ku dheggan, iyo madax shahwo leh nuklei qaloocsan sida nuclei badan oo isku dhafan.gudbinta mikroskoobyada elektarooniga ah (TEM).Scaning electron microscopy (SEM) ayaa muujisay in xidhmooyinka shahwada ay yihiin wadaryo xiiran oo madax shahwo ah iyo wadarta shahwadu waxay muujiyeen shabakad ku lifaaqan dabo duuban.
Qaab-dhismeedka iyo ultrastructure ee shahwada, samaynta xidhmooyinka spermatozoa ayaa la bartay iyadoo la isticmaalayo mikroskoob iftiin (qayb nus), iskaanka microscopy elektarooniga ah (SEM) iyo gudbinta elektarooniga microscopy (TEM), smears shahwada waxaa lagu wasakheeyey orange acridine iyo baadhay iyadoo la isticmaalayo epifluorescence microscopy.
Midabaynta shahwada oo leh orange acridine (Jaantus 3B) waxay muujisay in madaxyada shahwadu ay isku dheggan yihiin oo lagu daboolay walxo sir ah, taas oo keentay in la sameeyo tufaaxyo waaweyn (Jaantus. 3D).Xirmooyinka shahwadu waxay ka koobnaayeen isku-darka shahwada oo leh shabakad dabo ku dheggan (Jaantus. 4A-C).Xirmooyinka shahwada waxay ka kooban yihiin dabo shahwo badan oo isku dheggan (Jaantus. 4D).Siraha (Jaantus. 4E,F) waxay qariyeen madaxyada xidhmooyinka shahwada.
Sameynta xirmada shahwada Iyadoo la adeegsanayo mikroskoobyada kala duwan ee wajiga iyo smears shahwada leh oo leh orange acridine ah, waxay muujisay in madaxyada spermatozoa ay isku dheggan yihiin.(A) Samaynta shahwada hore waxay ku bilaabataa shahwo (goobo cad) iyo saddex shahwad (goobada jaalaha ah), iyadoo wareeggu ka bilaabmayo dabada oo uu ku dhammaanayo madaxa.(B) Sawir qaade laga qaaday smear shahwad leh oo leh orange acridine ah oo muujinaya madax shahwad ku dheggan ( fallaadho).Dheecaanku wuxuu daboolaa madaxyada.Magnification × 1000. (C) Horumarinta laydhka weyn ee lagu qaado qulqulka kanaalka microfluidic (adoo isticmaalaya kamarad xawaare sare leh oo ah 950fps).(D) Micrograph smear shahwo leh oo leh orange acridine oo muujinaya tufo waaweyn (Falaar).Weyneynta: ×200.
Baaritaanka mikrogaraafka elektarooniga ah ee shahwada shahwada iyo smear shahwada leh oo leh orange acridine ah.(A, B, D, E) waa mikrogaraafka elektarooniga ah ee shahwada, iyo C iyo F waa micrographs of acridine orange smears shahwada leh oo muujinaya lifaaqa spermatozoa badan oo duuban webka caudal.(AC) Isku-darka shahwada waxa loo muujiyaa sidii shabakad dabo ku dheggan (Fallaaho).(D) Ku dheggan dhowr shahwadood (oo leh walax dhejis ah, dulmar casaan ah, falaar) oo ku duuban dabada.E iyo FXawada shahwadu waxay samaysatay xidhmo leh dhowr qaab-dhismeedka vortex-ka u eg (F).(C) ×400 iyo (F) ×200 weynaynta.
Isticmaalka mikroskoobyada elektarooniga ah ee gudbinta, waxaan ogaanay in xirmooyinka shahwada ay leeyihiin dabo ku dheggan (Jaantus. 6A, C), madaxyo ku dheggan dabo (Jaantus. 6B), ama madaxyo ku dheggan dabo (Jaantus. 6D).Madax spermatozoa ee xidhmada waa qalloocan, oo soo bandhigaya qaybta laba gobol ee nukliyeerka (Jaantus. 6D).Xirmada la jeexay, shahwadu waxay lahayd madax qalloocan oo leh laba gobol oo nukliyeer ah iyo gobollo badan oo calan ah (Jaantus. 5A).
Midab elektaroonik ah oo mikrogaraf ah oo muujinaya dabada isku xidha xidhmada shahwada iyo walxaha agglutinating ee isku xidha madaxyada shahwada.(A) Dabada ku dheggan tiro badan oo shahwada ah.U fiirso sida ay dabada ugu muuqato sawirka ( falaarta) iyo saadaasha muuqaalka (falaarta).(B) Madaxa (Falaarta) shahwada waxay ku xiran tahay dabada ( falaarta).(C) Dhowr dabo oo shahwo ah ayaa ku dheggan.(D) Qalabka Agglutination (AS, buluug) wuxuu isku xiraa afar madax shahwo (guduud).
Baadhitaanka mikroskoobyada elektarooniga ah ayaa loo isticmaalay in lagu ogaado madaxyada shahwada ee xidhmooyinka shahwada ee lagu daboolay dheecaano ama xuub (Jaantus 6B), taas oo muujinaysa in xidhmooyinka shahwada ay ku xidhmeen walxo ka baxsan.Maaddada agglutinated waxay ku ururtay madaxa shahwada (jellyfish head-like meeting; Jaantuska. 5B) oo si qoto dheer loo ballaariyay, taasoo siinaya muuqaal jaale ah oo dhalaalaya oo hoos yimaada mikroskoobyada fluorescence marka lagu dhejiyo orange acridine (Jaantus. 6C).Walaxdan si cad ayay uga dhex muuqataa mikroskoob hoostooda waxaana loo arkaa inay tahay wax-xidhaha.Qaybaha khafiifka ah (Jaantus. 5C) iyo smears shahwada leh oo leh orange acridine ayaa muujiyay xidhmo shahwo ah oo ay ku jiraan madaxyo cufan iyo dabo duuban (Jaantus. 5D).
Sawirro-garaafyo kala duwan oo muujinaya isku-darka madaxyada shahwada iyo dabo laablaaban iyadoo la adeegsanayo habab kala duwan.(A) Mikrogaraafka elektarooniga ah ee gudbinta midabka dhijitaalka ah ee qayb-qaybta ah ee xidhmo shahwad ah oo muujinaysa madaxa shahwada duuban oo leh laba qaybood oo nukleus ah (buluug) iyo qaybo badan oo calanka ah (cagaaran).(B) Mikrogaraafka elektarooniga ah ee sawirka midabka dhijitaalka ah oo muujinaya koox ka kooban madax shahwadeed oo u eg jellyfish ( fallaadho ) oo u muuqda in la daboolay.(C) Qayb yar oo khafiif ah oo muujinaysa madax shahwadeed oo la isku daray (Falaaraha) iyo dabo laalaaban (Falaaraha).(D) Micrograph ee smear shahwad leh oo leh orange acridine ah oo muujinaya isku-darka madaxyada shahwada (Falaaraha) iyo dabo-duuban ( fallaaro).Ogow in walax dhegdheg leh (S) ay daboosho madaxa shahwada.(D) × 1000 weynayn.
Isticmaalka gudbinta microscopy elektarooniga ah (Jaantus. 7A), waxa kale oo la xusay in madax shahwadu qalloocan yihiin iyo xudunta udubyada waxay lahaayeen qaab wareeg ah, sida lagu xaqiijiyay shahwada shahwada leh acridine orange oo la baaray iyadoo la isticmaalayo microscopy fluorescence (Jaantus. 7B).
(A) Mikrogaraafka elektarooniga ah ee gudbinta midabka dhijitaalka ah iyo (B) Xadhkaha shahwada leh ee Acridine orange oo muujinaya madax isku duuban iyo ku dhegganaanshaha madaxyada shahwada iyo dabo ( fallaaro).(B) × 1000 weynayn.
Helitaanka xiisaha leh ayaa ah in shahwada Sharkazi ay isu geyso si ay u sameeyaan xirmooyin fiilo wareeg ah.Qalabka xirmooyinkan ayaa noo ogolaanaya inaan fahamno doorka suurtagalka ah ee ay ku leeyihiin nuugista iyo kaydinta shahwada ee SST.
Galmada ka dib, shahwadu waxay gashaa xubinta taranka oo ay marto hab doorasho oo aad u daran, taasoo keentay in tiro xaddidan oo shahwadu gasho SST15,16.Ilaa hadda, hababka ay shahwadu u gasho ama uga baxdo SST ma cadda.Digaagga, spermatozoa waxaa lagu kaydiyaa SST muddo dheer oo ah 2 ilaa 10 toddobaad, iyadoo ku xiran nooca6.Muranka ayaa weli ku saabsan xaaladda shahwada inta lagu jiro kaydinta gudaha SST.Ma dhaqdhaqaaq bay ku jiraan mise way nasanayaan?Si kale haddii loo dhigo, sidee bay unugyada shahwadu u ilaalinayaan booskooda SST muddo dheer?
Forman4 waxa uu soo jeediyay in deganaanshaha SST iyo ka saarista lagu macnayn karo dhaqdhaqaaqa shahwada.Qorayaashu waxay qiyaasayaan in shahwadu ay ilaalinayso booskooda iyagoo ku dabaalanaya qulqulka dareeraha ee SST epithelium iyo in shahwadu ay ka soo baxdo SST marka xawaarahoodu hoos u dhaco heerka ay bilaabaan inay dib u socdaan tamar la'aan awgeed.Zaniboni5 waxay xaqiijisay joogitaanka aquaporins 2, 3, iyo 9 ee qaybta apical ee unugyada epithelial SST, kuwaas oo laga yaabo inay si dadban u taageeraan qaabka kaydinta shahwada Foreman.Daraasadda hadda jirta, waxaan ogaanay in ku dhawaad ​​kala bar shahwada Sharkashi ay muujiso rheology togan ee dareeraha qulqulaya, iyo in xirmooyinka shahwada agglutinated ay kordhiso tirada shahwada oo muujisa rheology togan, inkastoo agglutination ay hoos u dhigto.Sida unugyadu shahwadu ugu socdaalaan tuubada fallopian-ka ee shimbiraha si ay u tagaan goobta bacriminta ayaan si buuxda loo fahmin.Naasleyda, dareeraha follicular kiimiko ayaa soo jiidata shahwada.Si kastaba ha ahaatee, kiimikooyinka ayaa la rumeysan yahay inay toosiyaan shahwada si ay ugu dhawaadaan masaafo dheer7.Sidaa darteed, habab kale ayaa mas'uul ka ah qaadista shahwada.Awooda ay shahwadu u leedahay in ay jihayso oo ay ku qulqulo dheecaanka tuubada ugxan-sidaha ee la sii daayo ka dib marka la is-qabo ayaa la sheegay in ay tahay arrin weyn oo lagu bartilmaameedsado shahwada jiirarka.Parker 17 wuxuu soo jeediyay in shahwadu ay ka gudubto ugxan-yari iyadoo ku dabaalanaysa qulqulka shimbiraha iyo xamaaratada.Inkasta oo aan si tijaabo ah loogu soo bandhigin shimbiraha, Adolphi18 waxay ahayd qofkii ugu horreeyay ee helay in shahwada avian-ku ay bixiso natiijooyin wanaagsan marka lakab khafiif ah oo dareere ah oo u dhexeeya daboolka iyo slide lagu sameeyo xariijimo warqad shaandho ah.Rheology.Hino iyo Yanagimachi [19] waxay dhigeen jiirka ugxan-tubal-uterine kakaxda giraanta fayraska waxayna ku dureen 1 µl oo khad ah isthmus si loo arko socodka dareeraha ee tuubooyinka ugxan-sidaha.Waxay dareemeen dhaq-dhaqaaq aad u firfircoon oo foosha iyo nasashada ee tuubada ugxan-sidaha, kaas oo dhammaan kubbadaha khadku ay si tartiib tartiib ah ugu sii jeedaan ampulla ee tuubada ugxan-mareenka.Qorayaashu waxay ku nuuxnuuxsadeen muhiimadda ay leedahay qulqulka dheecaanka tuubada ee ka imanaya hoose ilaa tubooyinka fallopian sare ee kor u qaadista shahwada iyo bacriminta.Brillard20 ayaa sheegay in digaagga iyo turkiga, spermatozoa ay u guuraan dhaqdhaqaaq firfircoon oo ka yimaada albaabka xubinta taranka, halkaas oo ay ku kaydsan yihiin, si ay u xiraan ilmo-galeenka-siilka, halkaas oo lagu kaydiyo.Si kastaba ha ahaatee, dhaqdhaqaaqan looma baahna inta u dhaxaysa isgoysyada uterovaginal iyo infundibulum sababtoo ah shahwada waxaa lagu qaadaa barokac aan caadi ahayn.Ogaanshaha talooyinkan hore iyo natiijooyinka laga helay daraasadda hadda jirta, waxaa loo qaadan karaa in awoodda shahwada si ay kor ugu socoto (rheology) waa mid ka mid ah sifooyinka habka xulashada uu ku saleysan yahay.Tani waxay go'aaminaysaa marinka spermatozoa ee siilka iyo gelitaankooda CCT si loo kaydiyo.Sida Forman4 soo jeediyay, tani waxay sidoo kale fududeyn kartaa habka shahwada gelaysa SST iyo deegaankeeda in muddo ah ka dibna ka baxdo marka xawaarahooda bilaabo inuu hoos u dhaco.
Dhanka kale, Matsuzaki iyo Sasanami 21 waxay soo jeediyeen in shahwada avian-ka ay maraan isbeddelka dhaqdhaqaaqa hurdada ee dhaqdhaqaaqa taranka ragga iyo dumarka.Joojinta dhaqdhaqaaqa shahwada dadka deggan SST ayaa la soo jeediyay si loo sharaxo wakhtiga kaydinta shahwada ee dheer iyo ka dib soo kicinta ka dib marka laga tago SST.Xaaladaha hypoxic, Matsuzaki et al.1 ayaa sheegay wax soo saarka sare iyo sii deynta caanaha ee SST, taas oo keeni karta in la joojiyo dhaqdhaqaaqa shahwada dadka deegaanka.Xaaladdan oo kale, muhiimada rheology shahwada waxay ka muuqataa xulashada iyo nuugista spermatozoa, oo aan ku jirin kaydintooda.
Habka agglutination shahwada waxaa loo arkaa sharraxaad macquul ah ee muddada dheer ee kaydinta shahwada ee SST, maadaama tani ay tahay qaabka caadiga ah ee xajinta shahwada ee digaaga2,22,23.Bakst iyo al.2 ayaa la ogaaday in shahwada badankoodu ay isku dheggan yihiin, iyaga oo samaynaya isku-darka fascicular, iyo spermatozoa-ka keliya ayaa dhif ah laga helay shimbiraha CCM.Dhanka kale, Wen et al.24 ayaa lagu arkay shahwo badan oo kala firdhisan iyo spermatozoa yar oo ku jira lumen SST ee digaagga.Iyada oo ku saleysan indha-indhayntan, waxaa loo qaadan karaa in u janjeerta shahwada agglutination ay ku kala duwan tahay shimbiraha iyo inta u dhexeysa shahwada ee isla shahwada.Intaa waxaa dheer, Van Krey et al.9 waxay soo jeedisay in kala-soocidda random ee shahwada agglutinated ay mas'uul ka tahay gelitaanka tartiib-tartiib ah ee shahwada ee gudaha lumen ee tuubada fallopian.Marka loo eego mala-awaalkan, shahwada leh awoodda agglutination hoose waa in marka hore laga saaro SST.Xaaladdan oo kale, awoodda spermatozoa ee agglutinate waxay noqon kartaa arrin saameynaysa natiijada tartanka shahwada ee shimbiraha wasakhaysan.Intaa waxaa dheer, muddada dheer ee shahwada agglutinated ayaa kala go'a, bacriminta dheer waa la ilaaliyaa.
Inkasta oo isku-darka spermatozoa iyo isu-ururinta xirmooyinka lagu arkay dhowr daraasadood2,22,24, si faahfaahsan looma qeexin sababtoo ah kakanaanta indho-indhayntooda kinematic gudaha SST.Dhawr jeer ayaa la isku dayay in lagu barto shahwada agglutination in vitro.Isku darka ballaaran laakiin ku meel gaadhka ah ayaa la arkay markii siligga khafiifka ah laga saaray dhibicdii abuurka lulatay.Tani waxay keenaysaa xaqiiqda ah in xumbo dheeraysa ay ka soo baxdo dhibicda, ku dayashada qanjidhada seminal.Sababo la xiriira xaddidaadaha 3D iyo waqtiyada qallajinta faleebbooyinka gaaban, dhammaan xannibaadda ayaa si dhakhso ah u burburtay9.Daraasadda hadda jirta, iyadoo la adeegsanayo digaagga Sharkashi iyo chips microfluidic, waxaan awoodnay inaan sharaxno sida tufyadani u sameeyaan iyo sida ay u dhaqaaqaan.Xirmooyinka shahwada ayaa isla markiiba samaysmay ka dib ururinta shahwada waxaana la ogaaday inay ku socdaan wareegyo, taasoo muujinaysa rheology togan marka la joogo socodka.Intaa waxaa dheer, marka si weyn loo eego, xirmooyinka shahwada ayaa la arkay si ay u kordhiyaan toosnaanta dhaqdhaqaaqa marka la barbardhigo shahwada go'doonsan.Tani waxay soo jeedinaysaa in shahwada agglutination ay dhici karto ka hor inta aan la galin SST iyo in wax soo saarka shahwadu aanu ku koobnayn meel yar oo ay ugu wacan tahay walaaca sidii hore loo soo jeediyay (Tingari iyo Lake12).Inta lagu jiro samaynta tufka, spermatozoa waxay ku dabaashaa si isku mid ah ilaa ay ka sameeyaan isgoys, ka dibna dabadooda ayaa isku duubaya midba midka kale oo madaxa spermatozoon ayaa weli ah mid xor ah, laakiin dabada iyo qaybta fog ee shahwada waxay ku dheggan yihiin walax dhegdheg leh.Sidaa darteed, madaxa xorta ah ee seedaha ayaa mas'uul ka ah dhaqdhaqaaqa, jiidaya inta kale ee seedaha.Baadhitaanka mikroskoobyada elektarooniga ah ee xidhmooyinka shahwada waxay muujisay madax shahwadeed oo ku dheggan oo ay ku daboolan yihiin waxyaabo badan oo dhegdheg leh, taas oo soo jeedinaysa in madaxyada shahwadu ay ku xidhan yihiin xidhmooyin nasasho ah, kuwaas oo laga yaabo inay dhaceen ka dib markii ay gaadheen goobta kaydinta (SST).
Marka sperm smear lagu dheehdo liinta acridine, walxaha kobaca ka baxsan unugyada shahwada ayaa lagu arki karaa iyada oo hoos timaada mikroskoob fluorescent.Maadadani waxay u oggolaanaysaa xidhmooyinka shahwada inay ku dhegganaadaan oo ay ku dhegaan meel kasta oo ku wareegsan ama qaybo ka mid ah si aanay ula socon socodka ku wareegsan.Sidaa darteed, indha-indhayntayadu waxay muujinayaan doorka spermatozoa adhesion ee qaabka xirmooyinka wareega.Awoodda ay u leeyihiin inay ku dabaasho oo ka soo horjeedaan hadda oo ay ku dhegaan meelaha u dhow waxay u oggolaanaysaa shahwadu inay ku sii jirto SST waqti dheer.
Rothschild25 waxay isticmaashay kamarada hemocytometry si ay u barato sabayn qaybinta shahwada bovine ee dhibco ganaax ah, iyada oo sawirqaade sawirqaade ah ku qaadaysa kamarad leh dhidibo toosan iyo toosan oo mikroskoob ah.Natiijadu waxay muujisay in shahwada spermatozoa ay soo jiidatay dusha sare ee qolka.Qorayaashu waxay soo jeedinayaan in ay jiri karaan isdhexgalka hydrodynamic ee u dhexeeya shahwada iyo dusha sare.Iyadoo la tixgelinayo tan, oo ay weheliso awoodda shahwada digaagga Sharkashi si ay u sameeyaan tufaax dhegdheg ah, waxay kordhin kartaa suurtogalnimada in shahwadu ay u hoggaansamaan derbiga SST oo lagu kaydiyo wakhti dheer.
Bccetti iyo Afzeliu26 ayaa sheegay in shahwada glycocalyx looga baahan yahay aqoonsiga gamete iyo agglutination.Forman10 wuxuu arkay in hydrolysis of α-glycosidic bonds ee daahan glycoprotein-glycolipid iyadoo lagu daweynayo shahwada avian ee neuraminidase ay keentay hoos u dhaca bacriminta iyada oo aan saameyn ku yeelan dhaqdhaqaaqa shahwada.Qorayaashu waxay soo jeedinayaan in saameynta neuraminidase ee glycocalyx ay waxyeeleyso kala-soocidda shahwada ee isgoysyada utero-siilka, taas oo yareyneysa bacriminta.Aragtidooda ma iska indho tiri karaan suurtagalnimada in daawaynta neuraminidase ay yarayn karto aqoonsiga shahwada iyo oocyte.Forman iyo Engel10 waxay ogaadeen in bacriminta ay hoos u dhacday markii digaagga lagu beeray xubinta taranka iyada oo lagu daaweeyay neuraminidase.Si kastaba ha ahaatee, IVF oo leh neuraminidase lagu daweeyay shahwada ma aysan saameyn bacriminta marka la barbardhigo digaagga.Qorayaashu waxay soo gabagabeeyeen in isbeddelka ku yimaada glycoprotein-glycolipid ee ku wareegsan xuubka shahwada ay hoos u dhigtay awoodda shahwada si ay u bacrimiso iyada oo wiiqaysa kala-soocidda shahwada ee isgoysyada ilmo-galeenka-siilka, taas oo kordhinaysa lumista shahwada sababtoo ah xawaaraha isku-dhafka ilmo-galeenka-siilka, laakiin aan saameyn ku yeelan aqoonsiga shahwada iyo ukunta.
Turkiga Bakst iyo Bauchan 11 waxay ka heleen xuub yar yar iyo jajabyo xuub ah oo ku jira lumen ee SST waxayna arkeen in qaar ka mid ah granules-kaas ay ku milmeen xuubka shahwada.Qorayaashu waxay soo jeedinayaan in cilaaqaadyadani ay gacan ka geysan karaan kaydinta muddada dheer ee shahwada ee SST.Si kastaba ha ahaatee, cilmi-baarayaashu ma aysan cayimin meesha ay ka yimaadeen qaybahan, haddii ay yihiin kuwo ay soo saareen unugyada epithelial CCT, oo ay soo saareen oo ay siiyeen habka taranka ee ragga, ama ay soo saaraan shahwada lafteeda.Sidoo kale, qaybahan ayaa mas'uul ka ah agglutination.Grützner et al27 ayaa sheegay in unugyada epididymal epithelial ay soo saaraan oo ay qariyaan borotiin gaar ah oo looga baahan yahay samaynta marinnada seminal ee hal dalool ah.Qorayaashu waxay sidoo kale soo tebinayaan in kala firdhinta xidhmooyinkani ay ku xiran tahay isdhexgalka borotiinnada epididymal.Nixon et al28 waxay ogaadeen in adnexa ay qarsoodiayso borotiinka, osteonectin acidic cysteine-rich;SPARC waxay ku hawlan tahay samaynta tufannada shahwada ee echidnas-gaaban iyo platypuses.Kala firdhinta alwaaxyadaas waxay la xidhiidha luminta borotiinkan.
Daraasadda hadda jirta, falanqaynta ultrastructural iyadoo la adeegsanayo mikroskoobyada elektarooniga ah ayaa muujisay in shahwadu ay ku dheggan tahay xaddi badan oo cufan ah.Maaddooyinkaan waxaa loo maleynayaa inay mas'uul ka yihiin agglutination-ka kaas oo isku dhejiya inta u dhaxaysa iyo hareeraha madaxyada ku dheggan, laakiin qadar hoose oo ka mid ah gobolka dabada.Waxaan u maleyneynaa in walaxdan agglutinating ay ka soo baxdo nidaamka taranka ee ragga (epidididymis ama vas deferens) oo ay weheliso shahwada, maadaama aan inta badan aragno shahwada oo ka soocaya lymfa iyo plasma seminal inta lagu jiro shahwada.Waxaa la soo wariyay in marka shahwada avian-ka ay sii maraan epididymis iyo vas deferens, ay ku dhacaan isbeddello la xiriira korriinka kuwaas oo taageera awoodda ay ku xiraan borotiinnada oo ay helaan glycoprotein-la-xiriira plasma lemma.Ku adkaysiga borotiinnadan ee xuubka shahwada deganaanshaha ee SST waxay soo jeedinaysaa in borotiinadani ay saameyn ku yeelan karaan helitaanka xasilloonida xuubka shahwada 30 oo ay go'aamiyaan bacrimintooda 31.Ahammad et al32 ayaa sheegay in shahwada laga helay qaybo kala duwan oo ka mid ah nidaamka taranka ee lab ah (laga bilaabo xiniinyaha ilaa vas deferens distal) ayaa muujisay koror horusocod ah oo ku-meel-gaar ah oo hoos yimaada xaaladaha kaydinta dareeraha, iyadoon loo eegin heerkulka kaydinta, iyo suurtagalnimada digaagga ayaa sidoo kale kordhiya tuubbooyinka ugxan-yari ka dib dhalmada macmalka ah.
Tuftsyada shahwada digaagga Sharkashi waxay leeyihiin astaamo iyo shaqooyin ka duwan noocyada kale sida echidnas, platypuses, jiirarka qoryaha, jiirka deerada, iyo doofaarka guinea.Digaagga sharkasi, samaynta xidhmooyinka spermatozoa waxay hoos u dhigtay xawaaraha dabaasha marka loo eego hal spermatozoa.Si kastaba ha ahaatee, xidhmooyinkani waxay kordhiyeen boqolkiiba shahwada rheologically togan waxayna kordhiyeen awoodda shahwada si ay isu dejiyaan jawi firfircoon.Sidaa darteed, natiijooyinkayagu waxay xaqiijinayaan soo jeedintii hore ee ahayd in shahwada agglutination ee SST ay la xiriirto kaydinta shahwada muddada-dheer.Waxaan sidoo kale qiyaasaynaa in u janjeera shahwadu inay samaysmaan tufaax ay xakamayn karto heerka luminta shahwada ee SST, taas oo bedeli karta natiijada tartanka shahwada.Marka loo eego male-awaalkan, shahwada leh awoodda agglutination hoose ayaa sii deynaysa SST marka hore, halka shahwada leh awoodda agglutination sare ay soo saarto inta badan faracyada.Samaynta xidhmooyinka shahwada hal dalool ah ayaa faa'iido leh oo saameeya saamiga waalidka iyo ilmaha, laakiin waxay isticmaashaa hab ka duwan.Echidnas iyo platypuses, shahwada spermatozoa waxaa loo habeeyey si barbar socda midba midka kale si loo kordhiyo xawaaraha hore ee laydhka.Xirmooyinka echidnas ayaa saddex jeer ka dhaqso badan hal shahwo.Waxa la rumaysan yahay in samaynta tufannada shahwada ee echidnas ay tahay laqabsasho korriin ah oo lagu ilaalinayo xukunka, maadaama dheddigu ay yihiin kuwo si xun u galmooda oo inta badan ay la socdaan dhawr nin.Sidaa darteed, shahwada shahwada ee shahwadaha kala duwan ayaa si adag ugu tartamaya bacriminta ukunta.
Agglutinated spermatozoa ee digaagga sharkasi way fududahay in la sawiro iyadoo la adeegsanayo mikroskoobyada isbarbardhigga wajiga, taas oo loo arko inay faa'iido leedahay sababtoo ah waxay u oggolaaneysaa daraasad sahlan oo ku saabsan dabeecadda shahwada ee vitro.Habka ay samaynta shahwadu ay kor ugu qaaddo taranka digaagga sharkasi ayaa sidoo kale ka duwan tii lagu arko naasleyda mandheerta qaarkood oo ka dhigan dabeecadda shahwada iskaashatada sida jiirarka alwaax, halkaasoo spermatozoa qaarkood ay gaarto ukunta, taasoo ka caawineysa shakhsiyaadka kale ee la xiriira inay gaaraan oo dhaawacaan ukumahooda.si aad isu caddeyso.dhaqan wanaagga.Is-bacriminta 34. Tusaale kale oo ka mid ah hab-dhaqanka iskaashiga ee shahwada ayaa laga helay jiirarka deerada, halkaas oo shahwadu ay awood u yeelatay inay aqoonsato oo ay ku biirto shahwada ugu badan ee la xidhiidha spermatozoa waxayna sameeyaan kooxo iskaashi si ay u kordhiyaan xawaarahooda marka loo eego shahwada35 aan xidhiidh la lahayn.
Natiijooyinka lagu helay daraasaddan kama hor imanayso aragtida Foman ee kaydinta muddada dheer ee shahwada ee SWS.Cilmi-baadhayaashu waxay sheegeen in unugyada shahwadu ay sii wadaan inay ku sii socdaan qulqulka unugyada epithelial ee ku dahaaran SST muddo dheer, iyo wakhti go'an ka dib, kaydka tamarta ee unugyada shahwada waa la yareeyaa, taas oo keentay hoos u dhaca xawaaraha, taas oo u ogolaanaysa in laga saaro walxaha yaryar ee miisaanka unugyada.tamarta spermatozoa oo leh qulqulka dareeraha ka imanaya lumen ee SST godka tuubada ugxan-sidaha.Daraasadda hadda jirta, waxaynu ku aragnay in kala badh shahwada kelida ahi ay muujisay awoodda ay kaga dabbaalan karaan dareeraha qulqulaya, iyo ku dhegganaanshaha xidhmooyinku waxay kordhisay awoodda ay u leeyihiin inay muujiyaan rheology togan.Intaa waxaa dheer, xogtayadu waxay la socotaa kuwa Matsuzaki et al.1 kuwaas oo sheegay in dheecaanka nuujinta ee kordhay ee SST laga yaabo inuu joojiyo dhaqdhaqaaqa shahwada dadka deggan.Si kastaba ha ahaatee, natiijooyinkayagu waxay qeexayaan samaynta seedaha dhaqdhaqaaqa shahwada iyo habdhaqankooda rheological ee joogitaanka jawi firfircoon gudaha microchannel si ay isku dayaan inay cadeeyaan dabeecadooda SST.Cilmi-baarista mustaqbalka waxay diiradda saari kartaa go'aaminta ka kooban kiimikada iyo asalka wakiilka agglutinating, taas oo shaki la'aan ka caawin doonta cilmi-baarayaasha inay horumariyaan habab cusub oo lagu kaydiyo shahwada dareeraha ah iyo kordhinta muddada bacriminta.
Shan iyo toban 30-toddobaad jir ah sharkasi lab ah oo qoor qaawan (homozygous dominant; Na Na) ayaa daraasadda lagu doortay deeq-bixiyeyaasha shahwada.Shimbiraha waxaa lagu koriyay Beerta Digaagga Cilmi-baarista ee Kuliyadda Beeraha, Jaamacadda Ashit, Gobolka Ashit, Masar.Shimbiraha waxaa lagu xareeyay qafisyo gaar ah (30 x 40 x 40 cm), oo lagu sameeyay barnaamij iftiin (16 saacadood oo iftiin ah iyo 8 saacadood oo mugdi ah) waxaana la quudiyay cunto ka kooban 160 g borotiinka cayriin, 2800 kcal oo tamar metabolizable ah, 35 g oo calcium ah midkiiba.5 garaam oo fosfooraska la heli karo kiilogaraam cunto ah.
Sida laga soo xigtay xogta 36, ​​37, shahwada ayaa laga soo ururiyay ragga iyadoo la adeegsanayo duugista caloosha.Isu geyn 45 muunadood oo shahwadeed ah ayaa laga soo qaaday 15 nin muddo 3 maalmood ah.shahwada (n = 15/maalintii) ayaa isla markiiba lagu qasi jiray 1:1 (v:v) iyadoo Belsville Poultry Semen Diluent, oo ka kooban potassium diphosphate (1.27 g), monosodium glutamate monohydrate (0.867 g), fructose (0.5 d) sodium anhydrous.Acetate (0.43 g), tris (hydroxymethyl) aminomethane (0.195 g), potassium citrate monohydrate (0.064 g), potassium monophosphate (0.065 g), chloride magnesium (0.034 g) iyo H2O (100 ml), pH = 7, 5, osmolarity 333 mOsm.Shayooyinka shahwada la badhxay ayaa marka hore lagu baadhay mikroskoob khafiif ah si loo hubiyo tayada shahwada wanaagsan (qoyaanka) ka dibna lagu kaydiyaa biyaha qubeyska 37°C ilaa la isticmaalo nus saac gudahood ka dib ururinta.
Kinematics iyo rheology ee spermatozoa waxaa lagu sifeeyaa iyadoo la isticmaalayo nidaamka qalabka microfluidic.Shayooyinka shahwada ayaa lagu sii daray ilaa 1:40 gudaha Beltsville Avian Semen Diluent, oo lagu shubay aaladda microfluidic (hoos eeg), iyo cabirrada kinetic ayaa lagu go'aamiyay iyadoo la adeegsanayo nidaamka Falanqaynta shahwada Kombiyuutarka (CASA) oo hore loogu sameeyay sifaynta microfluidics.ku saabsan dhaqdhaqaaqa shahwada ee warbaahinta dareeraha ah (Waaxda Injineerinka Farsamada, Kulliyadda Injineerinka, Jaamacadda Assiut, Masar).Plugin-ka waxaa laga soo dejisan karaa: http://www.assiutmicrofluidics.com/research/casa39.Xawaaraha qalooca (VCL, μm/s), xawaaraha toosan (VSL, μm/s) iyo celceliska xawaaraha dhabbaha (VAP, μm/s) ayaa la cabbiray.Fiidiyowyada shahwada waxaa la qaaday iyadoo la adeegsanayo mikroskoob ka soo horjeeda wajiga Optika XDS-3 (oo leh 40x ujeedo) oo ku xiran kamarada Tucson ISH1000 ee 30fps ee 3 s.Isticmaal software-ka CASA si aad u barato ugu yaraan saddex meelood iyo 500 oo shahwada shahwad muunadkiiba.Fiidiyowga la duubay waxaa lagu farsameeyay iyadoo la isticmaalayo CASA guriga lagu sameeyo.Qeexida dhaqdhaqaaqa ee fur-in CASA waxay ku saleysan tahay xawaaraha dabaasha ee shahwada marka loo eego heerka socodka, kumana jiraan xaddidaadyo kale sida dhaqdhaqaaqa dhinac-ilaa-dhinac ah, sababtoo ah tan ayaa la ogaaday in lagu kalsoonaan karo socodka dareeraha.Dhaqdhaqaaqa rheological waxaa lagu tilmaamaa dhaqdhaqaaqa unugyada shahwada ee ka soo horjeeda jihada socodka dareeraha.Spermatozoa leh sifooyinka rheological waxaa loo qaybiyay tirada shahwada dhaqdhaqaaqa;spermatozoa kuwaas oo ku jiray nasasho iyo spermatozoa si toos ah u dhaqdhaqaaqa ayaa laga saaray tirinta.
Dhammaan kiimikooyinka la isticmaalay waxaa laga helay Elgomhoria Pharmaceuticals (Qaahira, Masar) ilaa si kale loo xuso.Qalabka waxaa loo soo saaray sida ay ku qeexeen El-sherry et al.40 oo leh xoogaa wax ka beddel ah.Qalabka loo isticmaalo in lagu sameeyo mikrochannels waxaa ka mid ahaa taarikada dhalada ah (Howard Glass, Worcester, MA), SU-8-25 diidmo diidmo ah (MicroChem, Newton, CA), khamriga diacetone (Sigma Aldrich, Steinheim, Germany), iyo polyacetone.-184, Dow Corning, Midland, Michigan).Microchannels waxaa lagu sameeyay iyadoo la isticmaalayo lithography jilicsan.Marka hore, maaskaro waji ilaalin oo cad oo leh nashqad microchannel ee la rabay ayaa lagu daabacay daabacaha xallinta sare leh (Prismatic, Qaahira, Masar iyo Baasifigga Fanka iyo Naqshadeynta, Markham, ON).Masters-ka waxaa lagu sameeyay iyadoo la isticmaalayo taarikada dhalada sida substrates.Taarikada waxaa lagu nadiifiyey acetone, isopropanol iyo biyo deionized ka dibna lagu dahaadhay lakabka 20 µm ee SU8-25 oo lagu daboolay lafdhabarta (3000 rpm, 1 min).Lakabyada SU-8 ayaa markaa si tartiib ah loo engejiyey (65°C, 2 min iyo 95°C, 10 min) oo waxay soo gaadheen shucaaca UV ilaa 50 s.Soo-gaadhista ka dib waxaad ku dubtaa 65°C iyo 95°C 1 min iyo 4min si aad iskaga gudubto lakabyada SU-8 ee qaawan, oo ay ku xigto horumarinta khamriga diacetone 6.5 min.Si adag u dubi waffles (200 ° C 15 daqiiqo) si aad u sii adkeyso lakabka SU-8.
PDMS waxaa la diyaariyey iyadoo la isku qasayo monomer-ka iyo qallafsanaha ee saamiga miisaanka 10:1, ka dib waxaa lagu shubay qalajiyaha faakuumka oo lagu shubay qaabka SU-8.PDMS waxaa lagu daaweeyay foorno (120°C, 30 min), ka dibna kanaalada waa la jaray, laga soocay sayidkii, oo dalooliyay si loogu ogolaado in tubooyinka lagu xidho meesha laga soo galo iyo meesha laga soo galo microchannel-ka.Ugu dambayntii, microchannels-ka PDMS waxa si joogto ah loogu xidhay sawir-qaadaha mikroskoob iyadoo la adeegsanayo processor-ka la qaadan karo ee corona (Alaabada Korantada-Farsamada, Chicago, IL) sida lagu sifeeyay meelo kale.Microchannel-ka loo adeegsaday daraasaddan waxa uu cabbiraa 200 µm × 20 µm (W × H) oo dhererkiisu waa 3.6 cm.
Dheecaanka dareeraha ee uu keeno cadaadiska hydrostatic ee gudaha microchannel waxaa lagu gaaraa iyadoo la ilaalinayo heerka dareeraha kaydka gudaha ee ka sarreeya farqiga dhererka Δh39 ee kaydka dibadda (Jaantus. 1).
halka f ay tahay iskudarka is jiid-jiidka, oo lagu qeexay f = C/Re for laminar flow ee kanaalka leydilaha ah, halkaas oo C uu yahay mid joogto ah oo ku xiran saamiga kanaalka, L waa dhererka microchannel, Vav waa celceliska xawaaraha gudaha microchannel, Dh waa dhexroorka haydarooliga ee kanaalka, g - dardargelinta culeyska.Isticmaalka isla'egtan, celceliska xawaaraha kanaalka waxaa lagu xisaabin karaa iyadoo la adeegsanayo isla'egta soo socota: