Përvetësimi dhe shpërndarja e lëndëve ushqyese integron tiparet e ushqimit të insekteve dhe të historisë së jetës. Për të kompensuar mangësitë në lëndë ushqyese specifike në faza të ndryshme të jetës, insektet mund t'i marrin këto lëndë ushqyese nëpërmjet ushqimit plotësues, për shembull, duke u ushqyer me sekrecione të vertebrorëve në një proces të njohur si pellgje. Prandaj mushkonjat Anopheles, si për shkak të riprodhimit, ashtu edhe për riproduktet e arabiurit. .Qëllimi i këtij studimi ishte të vlerësonte nëse An.Agjitacioni arabiensis në urinën e lopës për marrjen e lëndëve ushqyese përmirëson karakteristikat e historisë së jetës.
Sigurohuni që është e sigurt.arabiensis u tërhoq nga era e urinës së freskët, 24-orëshe, 72-orëshe dhe 168-orëshe të lopës, dhe femrat që kërkonin bujtës dhe të ushqyer me gjak (48 orë vakt pas gjakderdhjes) u matën në një olfaktometër me tub Y dhe u identifikua një analizë biologjike e kombinuar për femrat shtatzëna. Komponimet në urinën e lopës në të katër klasat e moshave. Përzierjet sintetike të përbërjeve bioaktive u vlerësuan në sprovat me tubin Y dhe në terren. Për të hetuar urinën e lopës dhe përbërësin e saj kryesor që përmban azot, ure, si dieta të mundshme shtesë për vektorët e malaries, parametrat e të ushqyerit dhe karakteristikat e historisë së jetës. U mat proporcioni dhe sasia e mushkonjave femra që përthitheshin nga femra. u vlerësuan për mbijetesën, fluturimin e lidhur dhe riprodhimin.
Kërkoni gjakun dhe ushqimin e strehuesit. Në studimet laboratorike dhe në terren, arabët u tërhoqën nga aroma natyrale dhe sintetike e urinës së freskët dhe të moshuar të lopës. Femrat shtatzëna ishin indiferente ndaj përgjigjeve të urinës së lopës në vendet e vezëve. fluturimi, mbijetesa ose riprodhimi.
Përvetësimi dhe shpërndarja e urinës së lopës nga Anopheles arabinis për përmirësimin e karakteristikave të historisë së jetës. Ushqimi shtesë i urinës së lopës ndikon drejtpërdrejt në kapacitetin vektorial duke rritur mbijetesën ditore dhe densitetin e vektorit, dhe në mënyrë indirekte duke ndryshuar aktivitetin e fluturimit dhe për këtë arsye duhet të merret parasysh në modelet e ardhshme.
Përvetësimi dhe shpërndarja e lëndëve ushqyese integron karakteristikat e ushqimit të insekteve dhe historisë së jetës [1,2,3]. Insektet janë në gjendje të zgjedhin dhe të përftojnë ushqim dhe të kryejnë ushqim kompensues bazuar në disponueshmërinë e ushqimit dhe kërkesat për lëndë ushqyese [1, 3]. Shpërndarja e lëndëve ushqyese varet nga procesi i historisë së jetës dhe mund të çojë në kërkesa të ndryshme për cilësinë dhe sasinë specifike të dietës për stadin e cilësisë dhe sasisë specifike të ushqimit në jetë. trientet, insektet mund t'i marrin këto lëndë ushqyese nëpërmjet ushqimit plotësues, si për shembull me baltën, jashtëqitjet dhe sekrecionet e ndryshme të vertebrorëve dhe kërmave, një proces i njohur si pellgje [2]. Edhe pse një shumëllojshmëri e llojeve të fluturave dhe molave ​​përshkruhen kryesisht, vrimat e ujitjes ndodhin edhe në insektet e tjera dhe burimet e tjera të ushqimit, dhe në këto lloje të tjera të jetës, mund të kenë efekte të rëndësishme për ushqimin e insekteve. 2, 4, 5, 6] ,7]. Mushkonja e malaries Anopheles gambiae sensu lato (sl) shfaqet si një i rritur i 'kequshqyer' [8], kështu që lotimi mund të luajë një rol të rëndësishëm në karakteristikat e tij të historisë së jetës, por kjo sjellje deri më tani është lënë pas dore. Përdorimi i agjitacionit si një mjet i rëndësishëm për rritjen e kësaj vëmendjeje mund të ketë një mjet luftarak të rëndësishëm për të rritur këtë vëmendje.
Marrja e azotit tek mushkonjat femra të rritura Anopheles është e kufizuar për shkak të rezervave të ulëta kalorike të bartura nga faza larvake dhe përdorimit joefikas të miellit të gjakut [9]. Femra Ann.gambiae sl zakonisht e kompenson këtë duke plotësuar me vakte suplementare gjaku [10, 11], duke vënë kështu më shumë njerëz në rrezik të prekjes së mushkonjave dhe duke vënë më shumë njerëz në rrezik të kontraktimit të sëmundjes. mushkonjat mund të përdorin ushqimin plotësues të jashtëqitjeve të vertebrorëve për të përvetësuar komponime azotike që përmirësojnë përshtatjen dhe manovrimin e fluturimit, siç demonstrohet nga insektet e tjera [2]. Në këtë drejtim, tërheqja e fortë dhe e dallueshme e një prej llojeve të vëllezërve brenda An. Kompleksi i specieve gambian sl, Anopheles arabinis A. binis është oportunist në preferencat e strehuesit dhe njihet se lidhet dhe ushqehet me bagëti. Urina e lopës është një burim i pasur me komponime azotike, me ure që përbën 50-95% të totalit të azotit në urinën e freskët [15, 16]. Meqenëse urina e lopës plaket, mikroorganizmat brenda 4 orëve përdorin kompleksitetin e këtyre resurseve [5]. Rritja e shpejtë e amoniakut, e shoqëruar me një rënie të azotit organik, lulëzojnë mikroorganizmat alkalofilë (shumë prej të cilëve prodhojnë komponime toksike për mushkonjat) [15], të cilat mund të jenë femra.
Në këtë studim, u kërkuan Ans të strehuar dhe të ushqyer me gjak. Gjatë ciklit të tij të parë të gonadotropinës, arabiensis u vlerësua për marrjen e komponimeve azotike, duke përfshirë urenë, me përzierjen e urinës. Më pas, një seri eksperimentesh u kryen për të vlerësuar se si mushkonjat femra shpërndajnë këtë lëndë ushqyese të mundshme, për riprodhimin e mëtejshëm të riprodhimit dhe riprodhimit të mëtejshëm. rine u vlerësua për të përcaktuar nëse këto ofronin të dhëna të besueshme për një bujtës dhe të ushqyer me gjak. Në kërkimin e tyre për këtë burim të mundshëm ushqyes, arabiensis zbuloi korrelacione kimike pas tërheqjes diferenciale të vëzhguar. gjendjet fiziologjike.Tërheqja e mushkonjave. Rezultatet e marra konfirmojnë se An.arabiensis përvetëson dhe shpërndan komponimet azotike që gjenden në urinën e vertebrorëve për të ndikuar në karakteristikat e historisë së jetës. Këto rezultate diskutohen në kontekstin e pasojave të mundshme epidemiologjike dhe se si ato mund të përdoren për mbikëqyrjen dhe kontrollin e vektorëve.
Anopheles arabicans (shtamimi Dongola) u mbajt në 25 ± 2 °C, 65 ± 5% RH dhe një cikël dritë: errësirë ​​12:12 orë. Larvat u rritën në tabaka plastike (20 cm × 18 cm × 7 cm) të mbushura me ujë të distiluar dhe u ushqyen me ujë të distiluar. në gota 30 ml (Nolato Hertila, Åstorp, SE) dhe më pas u transferua në kafazet Bugdorm (30 cm × 30 cm × 30 cm; MegaView Science, Taichung, Taiwan) për të lejuar shfaqjen e të rriturve. Të rriturve iu dha një zgjidhje saharoze 10%, e cila u ofrua dieta 4 ditë pas dëshirës. menjëherë përpara eksperimentit, ose u vunë nga uria gjatë natës me ujë të distiluar përpara eksperimentit, siç përshkruhet më poshtë. Femrat e përdorura për eksperimentet e tubave të fluturimit u vunë nga uria vetëm për 4-6 orë me ujë ad libitum. Për të përgatitur mushkonjat që thithin gjak për analizat e mëvonshme, 4 femrave dpe iu pajisën me gjak defibrotik dele (amembrane, membrane, membrane, disktore, membrane, membrane, duke përdorur gjakun e deficit. Accrington, MB). Femrat plotësisht të mbingarkuara u transferuan më pas në kafaze individuale dhe u dhanë direkt dietë, siç përshkruhet më poshtë, ose 10% saharozë ad libitum për 3 ditë përpara eksperimenteve të përshkruara më poshtë. Femrat e fundit u përdorën për bioansaimet e tubave të fluturimit dhe u transferuan në laborator, dhe më pas kishin ujë të distiluar ad libitum për 4-6 orë përpara eksperimentit.
Analizat e të ushqyerit u përdorën për të përcaktuar sasinë e konsumit të urinës dhe uresë tek femrat e rritura An.Arabe. Femrave pritëse dhe të ushqyera me gjak iu dha një dietë që përmbante 1% urinë të holluar të freskët dhe të vjetër të lopës, përqendrime të ndryshme ure dhe dy kontrolle (10% saharozë dhe ujë) për 48 orë. Përveç kësaj, ngjyrosje ushqimore C1-1000C; 1; Sigma-Aldrich, Stokholm, SE) iu shtua dietës dhe u furnizua në një matricë 4 × 4 në tuba mikrocentrifuge 250 µl (Axygen Scientific, Union City, CA, US; Figura 1A) Mbushni deri në skaj (~ 300 µl). Për të shmangur konkurrencën e mundshme midis mushkonjave në 10 cm të mëdha (ngjyra Petri në 10 cm dhe mushkonja). diametër dhe 6 cm lartësi; Semadeni, Ostermundigen, CH; Figura 1A) në errësirë ​​të plotë në 25 ± 2 cm °C dhe lagështi relative 65 ± 5%.
Kërkoni urinë dhe ure të gjedhit të përthithur nga strehuesi dhe femra Anopheles arabianus që thith gjak. Në provën e ushqyerjes (A), mushkonjave femra iu dha një dietë e përbërë nga urina e freskët dhe e vjetër e lopës, përqendrime të ndryshme ure, saharozë (10%) dhe ujë të distiluar (H2O). Nuk kërkon gjak të përthithur nga çdo dietë tjetër (B) Femrat që kërkojnë nikoqirë thithin urinën e lopës për 72 orë më pak se urinën e lopës 168 orë (B). Përmbajtja mesatare totale e azotit (± devijimi standard) i urinës përfaqësohet në hyrje. (ANOVA njëkahëshe duke përdorur analizën post hoc të Tukey; p <0.05). Shiritat e gabimit përfaqësojnë gabimin standard të mesatares (BE). Vija e drejtë e ndërprerë përfaqëson vijën e regresionit log-linear (F, G)
Për të çliruar ushqimin e përthithur, mushkonjat u vendosën individualisht në tuba mikrocentrifuge 1,5 ml që përmbanin 230 μl ujë të distiluar dhe indi u ndërpre duke përdorur një shtypës të disponueshëm dhe motor pa kabllo (VWR International, Lund, SE), e ndjekur nga centrifugimi në 10 krpm për 10 min. ldrich) dhe absorbimi (λ620) u përcaktua duke përdorur një lexues mikropllakash të bazuar në spektrofotometra (SPECTROStar® Nano, BMG Labtech, Ortenberg, DE) nm). Përndryshe, mushkonjat u bluan në 1 ml ujë të distiluar, 900 μl prej të cilave u transferuan për analizë në një 20 lm spectrocuvtc; 0, Shimadzu, Kista, SE). Për të përcaktuar sasinë e marrjes dietike, u përgatit një kurbë standarde me hollim serik për të dhënë 0.2 µl deri në 2.4 µl 1 mg ml-1 ksilen cianid. Më pas, densiteti optik i përqendrimeve të njohura të bojës u përdor për të përcaktuar sasinë e ushqimit të gëlltitur çdo mushkonjë.
Të dhënat e volumit u analizuan duke përdorur analizën e variancës njëkahëshe (ANOVA) e ndjekur nga krahasimet post-hoc të Tukey në çift (JMP Pro, v14.0.0, SAS Institute Inc., Cary, NC, US, 1989–2007). Analizat e regresionit linear përshkruan marrjen e uresë të varur nga përqendrimi dhe përgjigjet e krahasimit të uresë të varur nga përqendrimi (përgjigjet e prirjes ndaj pritësit, v14.0.0). .0.0 për Mac, GraphPad Software, San Diego, CA, SHBA).
Përafërsisht 20 µl mostra të urinës nga secila grupmoshë u lidhën në Chromosorb® W/AW (10 mg 80/100 rrjetë, Sigma Aldrich) dhe u kapsuluan në kapsula kallaji (8 mm × 5 mm). Kapsulat u futën në dhomën e djegies së një analizuesi CHNS, Thelshmo, CHNS20, Scientificr. US) për të përcaktuar përmbajtjen e azotit në urinën e freskët dhe të vjetëruar sipas protokollit të prodhuesit. Azoti total (g N l-1) u mat në bazë të përqendrimeve të njohura të uresë të përdorura si standard.
Për të vlerësuar efektin e dietës në mbijetesën femërore që kërkon nikoqirë dhe gjak thithëse, mushkonjat u vendosën individualisht në enë të mëdha Petri (12 cm në diametër dhe 6 cm në lartësi; Semadeni) me një vrimë të mbuluar me rrjetë në kapak (3 cm në diametër) me Për ventilim dhe furnizim me ushqim. , 10% saharozë dhe ujë. Çdo dietë u hodh me pipetë në një tampon dentar (DAB Dental AB, Upplands Väsby, SE) i futur në një shiringë 5 ml (Thermo Fisher Scientific, Gothenburg, SE), pistoni u hoq dhe u vendos sipër një pjate petri të përshkruar si më sipër. thumbat numëroheshin dy herë në ditë, ndërsa mushkonjat e ngordhura hidheshin deri në ngordhjen e mushkonjave të fundit (n = 40 për trajtim). Mbijetesa e mushkonjave të ushqyera me dieta të ndryshme u analizua statistikisht duke përdorur kurbat e mbijetesës Kaplan-Meyer dhe testet log-rank për të krahasuar krahasimet e shpërndarjes së mbijetesës ndërmjet dietave.Stass0tis.
Një mulli me porosi për fluturimin e mushkonjave bazuar në Attisano et al.[17], i bërë nga panele akrilike të tejdukshme me trashësi 5 mm (10 cm të gjerë x 10 cm të gjatë x 10 cm të lartë) pa panele të përparme dhe të pasme (Fig. 3: sipër). ndahet midis një çifti magnetësh neodymium 9 cm larg njëri-tjetrit. Një tub horizontal i bërë nga i njëjti material (6,5 cm L) e preu tubin vertikal për të formuar një krah të lidhur dhe një krah që mbante një copë të vogël fletë alumini si një sinjal që ndërpret dritën.
Femrave të uritura 24-orëshe iu dha dieta e mësipërme për 30 minuta përpara kufizimit. Mushkonjat femra të ushqyera plotësisht u anestezuan më pas individualisht në akull për 2-3 minuta dhe u ngjitën në kunjat e insekteve me dyll blete (Joel Svenssons Vaxfabrik AB, Munka Ljungby, dhe më pas u hodhën në krahë horizontalisht për fluturim në SE). u regjistruan nga një regjistrues të dhënash të ndërtuar me porosi, më pas u ruajtën dhe u shfaqën duke përdorur softuerin PC-Lab 2000™ (v4.01; Velleman, Gavere, BE). Mulliri i fluturimit u vendos në një dhomë të rregulluar nga klima (12 orë: 12 orë, dritë: errësirë, 25 ± 2 °C, 65 ± 5% RH).
Për të vizualizuar modelin e aktivitetit të fluturimit, distanca totale e fluturuar (m) dhe numri total i aktiviteteve të fluturimit të njëpasnjëshëm u llogaritën në orë gjatë një periudhe 24-orëshe. Për më tepër, distancat mesatare të fluturuara nga femrat individuale u krahasuan përgjatë trajtimeve dhe u analizuan duke përdorur ANOVA njëkahëshe dhe analizën post hoc të Tukey (JMP Pro, v14.0.0, instituti S). Dicionalisht, numri mesatar i raundeve llogaritet në rritje prej 10 minutash.
Për të vlerësuar efektin e dietës në performancën riprodhuese të An.arabiensis, gjashtë femra (4 dpe) u transferuan direkt në kafazet e Bugdorm (30 cm × 30 cm × 30 cm) pas grumbullimit të gjakut dhe më pas u dhanë dieta eksperimentale për 48 orë siç përshkruhet më sipër. Më pas dietat u hoqën dhe gotat e pjelljes (30 ml) u siguruan me ujë për 4 orë në ditë të tretë; Nolato Her 20 ml. , duke ndryshuar çdo 24 orë. Përsëriteni çdo regjim diete 20-50 herë. Vezët u numëruan dhe u regjistruan për secilin kafaz eksperimental. Nënkampionët e vezëve u përdorën për të vlerësuar variacionin mesatar të madhësisë dhe gjatësisë së vezëve individuale (n ≥ 200 për dietë) duke përdorur një mikroskop Dialux-20 të pajisur me Lesnztlar, DM1000, DM100. (DFC) 320 R2;Leica Microsystems Ltd., DE). Vezët e mbetura u mbajtën në një dhomë të kontrolluar nga klima në kushte standarde të rritjes për 24 orë, dhe u matën një nën-kampion i larvave të fillimit të parë të shfaqur së fundi (n ≥ 200 për dietë). Numri i vezëve dhe madhësia e trajtimit të një veze dhe VA-së u krahasua midis NO-ve dhe çelësave. analiza c (JMP Pro, v14.0.0, SAS Institute Inc.).
Të paqëndrueshmet e hapësirës së kokës nga urinë e freskët (1 orë pas kampionimit), 24 orë, 72 orë dhe 168 orë urinë u mblodhën nga mostrat e mbledhura nga bagëtia Zebu, racat Arsi. Për lehtësi, mostrat e urinës u mblodhën herët në mëngjes ndërsa lopët ishin ende në hambar. thasët e pjekjes (Toppits Cofresco, Frischhalteprodukte GmbH and Co., Minden, DE) në 3 l poliamid me kapak Në bateri plastike me klorur vinil. Paqëndrueshmëritë e hapësirës së kokës nga çdo mostër e urinës së gjedhit u mblodhën drejtpërdrejt (të freskëta) ose pas maturimit në temperaturën e dhomës secila mostër për 28 orë dhe 1 orë, grupi përfaqësues 1 orë.
Për mbledhjen e substancave të paqëndrueshme të hapësirës së sipërme, u përdor një sistem me qark të mbyllur për të qarkulluar një rrymë gazi të filtruar me karbon të aktivizuar (100 ml min-1) përmes një qese poliamide në kolonën e absorbimit për 2,5 orë duke përdorur një pompë vakumi me diafragmë (KNF Neuberger, Freiburg, DE). n tub (5,5 cm x 3 mm id) që përmban 35 mg Porapak Q (50/80 rrjetë; Waters Associates, Milford, MA, US) midis prizave të leshit të qelqit. Paqëndrueshmëria e absorbuar u eluat me 400 μl pentan. Koleksionet e hapësirës së kokës u grumbulluan dhe më pas u ruajtën në -20°C derisa të përdoren për analiza të mëtejshme.
Përgjigjet e sjelljes së ekstrakteve të paqëndrueshme An. Headspace të mbledhura nga urina e freskët, 24 orë, 72 dhe 168 orë, u analizuan për ekstrakte të paqëndrueshme nga mushkonjat Arabidopsis duke përdorur një olfaktometer me tub qelqi të drejtë. .Arab [19].Një olfaktometër tub xhami (80 cm × 9,5 cm id) u ndriçua me 3 ± 1 lx dritë të kuqe nga lart. Rrjedha e ajrit të filtruar dhe të lagështuar me qymyr druri (25 ± 2 °C, 65 ± 2% lagështia relative pa stampim) kalohet në një seri prej çeliku 1 bio. s, duke krijuar një rrjedhje laminare dhe një strukturë të njëtrajtshme shtëllunge. Shpërndarësi i tamponit dentar (4 cm × 1 cm; L:D; DAB Dental AB), i pezulluar nga një spirale 5 cm në skajin e erës të olfaktometrit, me ndryshime stimuluesi çdo 5 minuta. Për analizë, u përdor 10 μl e çdo hapësire të kokës, 10 μl nga çdo stimulues i barabartë me një sasi të barabartë 1. një kontroll. Mushkonjat individuale që kërkonin strehë ose thithin gjak u vendosën në kafaze çlirimi individual 2-3 orë përpara fillimit të eksperimentit. Kafazi i lëshimit u vendos në anën e kundërt të olfaktometrit dhe mushkonjat u lejuan të ambientohen për 1 min, dhe më pas valvula e fluturës së kafazit ose një kafaz u hap në kontakt me kontrollin. burimi brenda 5 minutave pas lëshimit. Secili ekstrakt i paqëndrueshëm i hapësirës së sipërme dhe kontrolli u përsëritën të paktën 30 herë dhe për të shmangur efektet e çdo dite, i njëjti numër trajtimesh dhe kontrollesh u testuan në çdo ditë eksperimentale. Kërkoni përgjigje nga grupet Ans. Arabisht kundrejt hapësirës së kokës, u analizuan duke përdorur krahasimet nominale të ndjekura nga regres logistikë10. .0, Instituti SAS Inc.).
Përgjigja e vezëve të An-së. Ekstraktet e hapësirës së kokës nga urina e freskët dhe e vjetër e lopës u analizuan në kafaze Bugdorm (30 cm × 30 cm × 30 cm; MegaView Science). Kupat plastike (30 ml; Nolato Hertila) të mbushura me 20 ml ujë të distiluar, me kusht që filxhani i vezëve të vendosej përballë nënshtresës së vezëve. ed me 10 μl të secilës ekstrakt të hapësirës së kokës në një hollim 1:10. Një sasi e barabartë pentani u përdor për të rregulluar filxhanin e kontrollit. Kupat e trajtimit dhe kontrollit u shkëmbyen midis secilit eksperiment për të kontrolluar efektet e pozicionit. Dhjetë femra të ushqyera me gjak u lëshuan në kafaze eksperimentale në ZT 9-11 dhe vezët në gota u llogaritën në formulat e llogaritjes për 24 orë më vonë. në filxhanin e trajtimit – numri i vezëve të vendosura në filxhanin e kontrollit)/(numri i përgjithshëm i vezëve të shtruara).Çdo trajtim u përsërit 8 herë.
Analiza e zbulimit të modelit kromatografik të gazit dhe antenës elektronike (GC-EAD) e An.arabiensis femër u krye siç u përshkrua më parë [20]. Shkurtimisht, ekstraktet e freskëta të avullueshme të hapësirës së sipërme u ndanë duke përdorur një Agilent Technologies 6890 GC (Santa Clara, CA, US) të pajisur me një shtresë HP-5 mm5 × 5 μm të trashë (30 mm). teknologjitë e shkëlqyeshme).dhe urinën e plakjes. Hidrogjeni u përdor si fazë lëvizëse me një shpejtësi mesatare lineare të rrjedhës prej 45 cm s-1. Çdo mostër (2 μl) u injektua për 30 sekonda në modalitetin pa ndarje me një temperaturë hyrëse prej 225 °C. Temperatura e furrës GC u programua nga 35 °C (3 minuta mbajtje) në 300 °C (3 minuta mbajtje) në 300 °C min. ent spliter, u shtua 4 psi azot dhe u nda 1:1 në një kryqëzim me vëllim të ulët të vdekur Gerstel 3D/2 (Gerstel, Mülheim, DE) midis detektorit të jonizimit të flakës dhe EAD. Kapilari i rrjedhës GC për EAD kaloi përmes një linje transferimi Gerstel ODP-2, e cila e gjurmon atë në një linjë transferimi Gerstel ODP-2 (8 °C, plus 0 °C, temperaturën 1 mm, plus 0C) në xhamin 5. u përzie me ajër të lagësht të filtruar me karbon (1,5 l min−1). Antena u vendos 0,5 cm nga dalja e tubit. Çdo mushkonjë individuale përbënte një kopje, dhe për mushkonjat që kërkonin bujtës, të paktën tre përsëritje u kryen në mostrat e urinës të çdo moshe.
Identifikimi i komponimeve bioaktive në koleksionet e hapësirës së sipërme të urinës së freskët dhe të vjetëruar të gjedhit duke përdorur një spektrometër të kombinuar GC dhe masë (GC-MS; 6890 GC dhe 5975 MS; Agilent Technologies) për të nxjerrë përgjigje antenale në analizën GC-EAD, që funksionon në modalitetin e jonizimit të ndikimit elektronik, i pajisur me modalitetin e jonizimit të ndikimit elektronik në HP7-5. një kolonë kapilare (diametri i brendshëm 60 m × 0,25 mm, trashësia e filmit 0,25 μm) duke përdorur heliumin si fazë të lëvizshme me një normë mesatare lineare rrjedhjeje prej 35 cm s-1. Një kampion 2 μl u injektua duke përdorur të njëjtat cilësime të injektorit dhe temperaturën e furrës si për analizën GC-EAD. biblioteka NIST14 (Agilent). Përbërjet e identifikuara u konfirmuan duke injektuar standarde autentike (Skedari Shtesë 1: Tabela S2). Për përcaktimin sasior, heptil acetat (10 ng, pastërti kimike 99,8%, Aldrich) u injektua si një standard i jashtëm.
Vlerësimi i efikasitetit të një përzierjeje aromash sintetike të përbërë nga përbërës bioaktive të identifikuara në urinën e freskët dhe të vjetëruar për të tërhequr Ans.arabiensis që kërkon bujtës dhe thith gjak, duke përdorur të njëjtin olfaktometër dhe protokoll si më sipër. Përzierjet sintetike imitonin përbërjen dhe përmasat e përbërjeve në 2 ekstrakte të përziera dhe në hapësirën e freskët të kokës. orë dhe urinë e vjetëruar 168 orë (Figura 5D-G; Skedari Shtesë 1: Tabela S2). Për analizë, përdorni 10 μl të një hollimi 1:100 të përzierjes plotësisht sintetike, me një shpejtësi të përgjithshme lëshimi që varion nga përafërsisht 140-2400 ng h-1, për vlerësimin e përzierjes së gjakut të kryer dhe atraktivitetit të plotë të mushkonjave. s, në të cilat hiqen përzierjet zbritëse të përbërjeve të vetme të përzierjes së plotë. Kërkoni përgjigje nga strehuesit dhe të ushqyer me gjak Ans.Arab vs përzierjet sintetike dhe zbritëse u analizuan duke përdorur regresionin nominal logjistik të ndjekur nga krahasimet në çift për raportet tek (JMP Pro, v14.0.0, SAS Institute Inc.).
Për të vlerësuar nëse urina e lopës mund të shërbejë si shenjë e habitatit pritës për mushkonjat e malaries, urina e freskët dhe e vjetër e lopës, e mbledhur siç përshkruhet më sipër, dhe uji u vendosën në kova rrjetë prej 3 l (100 ml) dhe u vendosën në grackat e karremit të bujtësit.(Versioni BG-HDT; BioGents, Regensburg, DE). Dhjetë kurthe të vendosura 50 m larg njëra-tjetrës në kullotë, 400 m nga komuniteti i fshatit (Silay, Etiopi, 5°53´24´´N, 37°29´24´´E) dhe asnjë bagëti, në tokat e përhershme të mbarështimit, u lanë të grumbullohen në tokat e përhershme të shumimit dhe fshatrat. Çdo vend trajtimi rrotullohet çdo natë për një total prej pesë netësh. Numrat e mushkonjave të kapur në kurthe të karrezuara me urinë të moshave të ndryshme u krahasuan duke përdorur regresionin logjistik me një shpërndarje binomiale beta (JMP Pro, v14.0.0, SAS Institute Inc.).
Në një fshat endemik të malaries pranë qytetit të Maki, rajoni i Oromisë, Etiopi (8° 11′ 08″ në veri, 38° 81′ 70″ në E; Figura 6A). Studimi u krye midis mesit të gushtit dhe mesit të shtatorit para fillimit vjetor të brendshëm të brendshëm, së bashku me spërkatjen vjetore të brendshme të brendshme 5-50 veçmas) të vendosura në periferi të fshatit u zgjodhën për studim (Fig. 6A). Kriteret e përdorura për përzgjedhjen e shtëpive ishin: nuk lejoheshin kafshë në shtëpi, nuk lejohej gatimi në ambiente të mbyllura (vizatimi i druve të zjarrit ose qymyrit) (të paktën gjatë periudhës së provës) dhe shtëpitë me maksimum dy banorë, duke fjetur në insekticide.nën rrjetën e trajtuar të mushkonjave. Miratimi etik është dhënë nga Bordi i Rishikimit të Etikës së Kërkimit Institucional (IRB/022/2016) i Fakultetit të Shkencave të Natyrës (CNS-IRB), Universiteti i Addis Ababa, në përputhje me udhëzimet e përcaktuara nga Deklarata e Shoqatës Botërore të Mjekësisë të Helsinkit. Pëlqimi nga çdo kryefamiljar i distriktit është marrë me ndihmën e të gjithë stafit të distriktit në fund me të gjithë stafin e distriktit. ('kebele') niveli. Dizajni eksperimental ndoqi një dizajn katror latin 2 × 2, në të cilin përzierjet dhe kontrollet sintetike u caktuan në shtëpitë e çiftuara në natën e parë dhe u ndërruan midis shtëpive në natën tjetër eksperimentale. Ky proces u përsërit dhjetë herë. Për më tepër, për të vlerësuar aktivitetin e mushkonjave në shtëpitë e zgjedhura, kurthe CDC në të njëjtën kohë të fillimit të natës u vendosën në pesë grackat e CDC-së në orën e fillimit të ditës në fund të ditës. .
Një përzierje sintetike që përmban gjashtë komponime bioaktive u shpërnda në heptan (97.0% tretës i klasës GC, Sigma Aldrich) dhe u lëshua në 140 ng h-1 duke përdorur një shpërndarës me fitil pambuku [20]. Shpërndarësi i fitilit lejoi që të gjitha komponimet të liroheshin në përmasa konstante gjatë gjithë eksperimentit të ardhshëm 12 orësh. Kurthi i dritës për Kontrollin dhe Parandalimin e Sëmundjeve (CDC) (John W. Hock Company, Gainesville, FL, SHBA; Figura 6A). Kurthat u varën 0.8 – 1 m mbi tokë, afër këmbës së shtratit dhe një vullnetar flinte nën një rrjetë mushkonjash të patrajtuar dhe operohej midis orës 18:00 dhe 6:00. ed, të ushqyer, gjysmë shtatzënë dhe shtatzënë [21] më pas u ekzaminuan duke përdorur analizën e reaksionit zinxhir polimerazë (PCR) për të identifikuar speciet e identifikuara morfologjikisht si A. gambiae sl. Anëtarë të kompleksit [23]. Në studimin në terren, kurthja e shtëpive të çiftuara u analizua duke përdorur një model të varur nga trajtimi i ndryshueshëm dhe i varur nga trajtimi. ishte efekti fiks (JMP® 14.0.0. Instituti SAS Inc.).Këtu, ne raportojmë vlerat χ2 dhe p nga testi i raportit të gjasave.
Vlerëso nëse është e sigurt.arabiensis ishte në gjendje të merrte urinën, burimin e saj kryesor të azotit, ure, me ushqim të drejtpërdrejtë, brenda 48 orëve nga administrimi për 4 ditë pas (dpe) testeve të ushqyerjes me strehëza dhe të ushqyera me gjak (Fig. 1A). Si femrat kërkuese, ashtu edhe ato që thithin gjak, thithën shumë më shumë ujë se dieta tjetër (F,520) < 0,0001 dhe F(5,299) = 56,00, p <0,0001, përkatësisht; Fig. 1B,C). Për më tepër, femrat që kërkonin strehë kishin ngrënë më pak në urinë në 72 orë në krahasim me urinë në 168 orë (Fig. 1B). Kur iu ofrua një dietë e madhe që përmbante një sasi të madhe ushqimore që përmbante një sasi të madhe 2. 69 mM krahasuar me të gjitha përqendrimet e tjera dhe ujin, ndërkohë që nuk dallohet nga saharoza 10% (F(10,813) = 15.72, p <0.0001; Figura 1D). Kjo ishte në kontrast me reagimin e femrave të ushqyera me gjak, të cilat zakonisht thithnin shumë më shumë ujë që përmbante më pak ure (50% më pak se 50F) 78.35, p < 0.0001; Figura 1).1E). Për më tepër, kur krahasohen midis dy gjendjeve fiziologjike, femrat e flebotomizuara thithën më shumë ure se femrat që kërkonin bujtës në përqendrime më të ulëta, dhe këto femra thithën sasi të ngjashme ure në përqendrime më të larta (F(2,01,08)Fig. 1F, G). Ndërsa marrja nga një dietë që përmban ure dukej se kishte vlera optimale (Fig. 1D, E), femrat në të dyja gjendjet fiziologjike ishin në gjendje të modulonin sasinë e uresë së përthithur në të gjithë gamën e përqendrimeve të uresë në një mënyrë log-lineare (Fig. 1F, G).Në mënyrë të ngjashme, mushkonjat duket se kontrollojnë marrjen e tyre të azotit duke rregulluar sasinë e urinës së përthithur, pasi sasia e azotit në urinë reflektohet në sasinë e përthithur (Figura 1B, C dhe B).
Për të vlerësuar efektet e urinës dhe uresë në mbijetesën e mushkonjave që kërkonin dhe thithin gjak, femrat u ushqyen me urinë të të katër moshave (të freskëta, 24 orë, 72 orë dhe 168 orë pas depozitimit) dhe një sërë përqendrimesh ure, si dhe ujë të distiluar dhe 10 % e një diete të servuar mbi saharozën (kjo analizë e kontrolluar nga një dietë 2). e gjithë mbijetesa në femrat që kërkojnë strehë (urinë: χ2 = 108,5, df = 5, p < 0,0001; ure: χ2 = 122,8, df = 5, p < 0,0001; Fig. 2B, C) dhe femrat e ushqyera me gjak (urina: 9.00,0 = p. : χ2 = 137,9, df = 5, p < 0,0001; Figura 2D, E). Në të gjitha eksperimentet, femrat që ushqeheshin me një dietë me urinë, ure dhe ujë kishin nivele dukshëm më të ulëta të mbijetesës në krahasim me femrat që ushqeheshin me dietë me saharozë (Figura 2B-E). urina e ndenjur (p = 0.016) që ka probabilitetin më të ulët të mbijetesës (Fig. 2B). Për më tepër, femrat që kërkojnë bujtës të ushqyera me 135 mM ure mbijetuan më gjatë se kontrollet e ujit (p <0.04) (Fig.2C). Krahasuar me ujin, gratë e ushqyera me urinë të freskët dhe urinë 24-orëshe mbijetuan më gjatë (p = 0.001 dhe p = 0.012, përkatësisht; Figura 2D), ndërsa gratë e ushqyera me urinë 72-orëshe mbijetuan më shumë se ato të ushqyera me urinë të freskët të shkurtër të femrës dhe 24 orë, respektivisht p<0,00, p. Figura 2D). Kur ushqeheshin me 135 mM ure, femrat e ushqyera me gjak mbijetuan më gjatë se të gjitha përqendrimet e tjera të uresë dhe ujit (p < 0.013; Figura 2E).
Mbijetesa e gruas Anopheles arabinis që thith gjakun që ushqehet me urinë dhe ure të lopës. Në analizën biologjike (A), mushkonjave femra iu dha një dietë e përbërë nga urina e freskët dhe e vjetëruar e lopës, përqëndrime të ndryshme ure, saharozë (10%) dhe ujë të distiluar (H2O). 12 orë derisa të gjitha femrat e ushqyera me urinë (B, D) dhe ure (C, E) dhe kontrollet, saharozë dhe ujë, të kenë vdekur
Distanca totale dhe numri i raundeve të përcaktuara në testin e mullirit të fluturimit gjatë një periudhe 24-orëshe ndryshonte midis mushkonjave që kërkonin nikoqirë dhe atyre që thithnin gjak, të cilat treguan më pak aktivitet fluturimi në përgjithësi (Fig. 3). Mushkonjat që kërkonin nikoqirë që siguronin urinë ose saharozë dhe ujë të freskët dhe të vjetër treguan modele të dallueshme fluturimi (Fig. Mushkonjat e moshës 168-orëshe që ushqeheshin me urinë shfaqën modele të ndryshme fluturimi dhe ishin kryesisht ditore. Mushkonjat femra që siguruan saharozë ose urinë 72-orëshe treguan aktivitet gjatë gjithë periudhës 24-orëshe, ndërsa femrat që ushqeheshin me ujë ishin më aktive gjatë mesit të periudhës. Urina e moshës 72-orëshe përjetoi një rënie të vazhdueshme të aktivitetit gjatë 24 orëve (Figura 3).
Performanca në fluturim e femrave Anopheles arabinis që kërkon gjak, e cila ushqehet me urinë dhe ure të lopës. Në testin e mullirit të fluturimit, mushkonjat femra të ushqyera me urinë të freskët dhe të vjetëruar të lopës, përqendrime të ndryshme ure, saharozë (10%) dhe ujë të distiluar (H2O) u lidhën në krahët horizontale (për gjakderdhje të lirshme). djathtas) femrat, distanca totale dhe numri i fluturimeve në orë për çdo dietë gjatë një periudhe 24-orëshe u regjistruan (e errët: gri; e lehtë: e bardhë). Distanca mesatare dhe numri mesatar i periudhave të shkurtra tregohen në të djathtë të grafikut të aktivitetit qarkullues. Shiritat e gabimit përfaqësojnë gabimin standard të mesatares. Analiza statistikore shiko tekstin
Në përgjithësi, aktiviteti i përgjithshëm i fluturimit të femrave që kërkonin nikoqirë ndoqi një model të ngjashëm me atë të distancës së fluturimit gjatë një periudhe 24-orëshe. Distanca mesatare e fluturimit u ndikua ndjeshëm nga dieta e gëlltitur (F(5, 138) = 28.27, p <0.0001) dhe femrat që kërkonin nikoqirë gëlltitën 72 orë distanca më të gjata dhe në mënyrë të konsiderueshme në krahasim me dieta të tjera 01 Mushkonjat e ushqyera fluturuan më gjatë se të freskëtat (p = 0,022) dhe urinën e moshës 24 orëshe (p = 0,022) të ushqyera me mushkonjat. Ndryshe nga modeli i aktivitetit të fluturimit të përshkruar nga dieta e urinës, femrat e ushqyera me ure që kërkonin pritës shfaqën një aktivitet të vazhdueshëm fluturimi gjatë gjysmës së dytë të aktivitetit të Fig. , femrat pritëse të ushqyera me ure rritën ndjeshëm distancën mesatare të fluturimit në varësi të përqendrimit të përthithur (F(5, 138) = 1310.91, p <0.0001). Femrat pritëse të ushqyera me çdo përqendrim ure fluturuan më gjatë se femrat që ushqeheshin me ujë ose saharozë (p <0.03).
Aktiviteti i përgjithshëm i fluturimit të mushkonjave që thithin gjak ishte i qëndrueshëm dhe i qëndrueshëm gjatë 24 orëve në të gjitha dietat, me rritje të aktivitetit të urinës gjatë gjysmës së dytë të periudhës së errët për femrat e ushqyera me ujë si dhe tek femrat e ushqyera të freskëta dhe 24 orëshe (imazhi 3). Ndërsa dieta me urinë ndikoi ndjeshëm distancën mesatare të fluturimit tek femrat e ushqyera me gjak dieta nuk bëri (F(5, 138) = 1,36, p = 0,24) .me urinë të tjera dhe dietë kontrolli (të freskëta, p = 0,0091; 72 orë, p = 0,0022; 168 orë, p = 0,001; saharozë, p = 0,0017, p = d H2O, 3, 6).
Efektet e ushqyerjes me urinë dhe ure në parametrat riprodhues u vlerësuan në analizat biologjike për vendosjen e vezëve (Figura 4A) dhe u hetuan sipas numrit të vezëve të vendosura nga secila femër, madhësisë së vezëve dhe larvave të moshës së parë të sapoçelur. Numri i vezëve të hedhura. 8; Fig. 4B). Femrat që ushqeheshin me urinë 24-orëshe, vakti i gjakut bënte dukshëm më shumë vezë sesa femrat që ushqeheshin me dieta të tjera me urinë dhe ishin të ngjashme me ato të ushqyera me saharozë (Fig. 4B). Po kështu, madhësia e vezëve të bëra nga femrat e ushqyera me urinë ndryshonte sipas dietës (F(5, 20.8 <109), femrat e ushqyera me rinë dhe saharozë që bënin vezë dukshëm më të mëdha se femrat e ushqyera me ujë, ndërsa vezët e femrave të ushqyera me 168 orë urinë ishin dukshëm më të vogla (Fig. 4C). Për më tepër, dieta e urinës ndikoi ndjeshëm në madhësinë e larvave (F(5, 187) = 7.80 më e madhe 0, p <10 më e madhe, p <10 më e madhe). Femrat e ushqyera me urinë 4 dhe 72 orëshe sesa nga vezët e bëra nga larvat e vezëve. Femrat e ushqyera me ujë dhe 168 orë me urinë (Figura 4D).
Performanca riprodhuese e femrave Anopheles arabinis që ushqehet me urinë dhe ure të lopës. Mushkonjat femra të ushqyera me gjak u ushqyen me dieta të përbëra nga urina e freskët dhe e vjetër e lopës, përqendrime të ndryshme ure, saharozë (10%) dhe ujë të distiluar (H2O) për 48 orë përpara se të vendoseshin në bioanalizimet e vezëve (4 orë me madhësi B, marrja e vezëve). (C, F) dhe madhësia e larvave (D, G) u ndikuan ndjeshëm nga dieta e ofruar (urina e lopës: BD; ure: EG). Mesatet për çdo parametër të matur duke përdorur emra të ndryshëm shkronjash ishin dukshëm të ndryshme nga njëri-tjetri (ANOVA njëkahëshe duke përdorur analizën post hoc të Tukey; p <0.05). Shiritat e gabimit përfaqësojnë gabimin standard të mean
Si përbërësi kryesor azotik i urinës, ureja, kur ofrohet si dietë për femrat e ushqyera me gjak, ndikoi ndjeshëm në parametrat riprodhues në të gjitha studimet. Numri i vezëve të hedhura nga femrat e ushqyera me ure, pas një vakti gjaku, në varësi të përqendrimit të uresë (F(11, 360) = 4.69; 3 1 μM përqendrimi midis 4.69; 31 μM, p < 0.0 mM lëshoi ​​më shumë vezë (Figura 4E). Femrat e ushqyera me përqendrime ure prej 134 μM ose më lart, bëjnë vezë më të mëdha se femrat e ushqyera me ujë (F(10, 4245) = 36.7; p < 0.0001; Figura 4F) dhe madhësia e larvave me përqendrime të ngjashme me nënën 30. 9; p <0.0001) ishte më e ndryshueshme (Fig. 4G).
Atraktiviteti i përgjithshëm ndaj ekstrakteve të paqëndrueshme të hapësirës së kokës së urinës së gjedhit që kërkon pritës. Arabiensis i vlerësuar në olfaktometrin e tubit të qelqit (Fig. 5A) u ndikua ndjeshëm nga mosha e urinës (χ2 = 15.9, df = 4, p = 0.0032; Fig. 5B tregoi se nivelet më të larta të tërheqjes në 2 orë u vunë re). për të gjitha trajtimet e tjera (72 orë: p = 0,0060, 168 orë: p = 0,012, pentan: p = 0,00070), me përjashtim të erës së urinës së freskët (p = 0,13; Figura 5B). Edhe pse tërheqja e përgjithshme e mushkonjave që thithnin gjak ishte shumë e ndryshme (2, 8, 8 o 7, nuk ishte shumë e ndryshme ndaj mushkonjave që thithnin gjakun). 0.067; Fig. 5C), këto femra u gjetën të jenë dukshëm më tërheqëse për ekstraktet e paqëndrueshme të hapësirës së kokës krahasuar me urinën e moshës 72-orëshe krahasuar me kontrollet (p = 0.0066; Figura 5C).
Përgjigjet e sjelljes ndaj aromave natyrale dhe sintetike të urinës së lopës në kërkimin e bujtësit dhe Anopheles arabianus të ushqyer me gjak. Skematika e olfaktometrit të tubit të qelqit (A). Tërheqja e ekstrakteve të paqëndrueshme të hapësirës së kokës nga urina e freskët dhe e vjetër e lopës tek bujtësi (B) dhe thithja e gjakut (C) nga reaksioni i fytit të freskut të mushkonjave. Tregohen urina e lopës së moshës 24-orëshe (E), 72-orëshe (F) dhe 168-orëshe (G). Gjurmët e zbulimit të antenës elektronike (EAD) tregojnë ndryshimet e tensionit në përgjigje të përbërjeve bioaktive në hapësirën kryesore të elustruar nga kromatografi i gazit dhe të zbuluar nga një detektor i përgjigjes së jonizimit të flakës (Freaplika e reaksionit të shkallës së jonizimit të flakës). Tregohen vetitë dhe shpejtësia e lëshimit (µg h-1) të përbërjeve biologjikisht aktive. Një yll i vetëm (*) tregon një përgjigje të qëndrueshme me amplitudë të ulët. Yjet e dyfishtë (**) tregojnë përgjigje të papërsëritshme. Gjeni strehuesin (H) dhe thithjen e gjakut (I) An.arabiensis ka tërheqje të ndryshme të moshave të freskëta dhe moshave sintetike. ed to emrat e shkronjave të ndryshme ishin dukshëm të ndryshëm nga njëri-tjetri (ANOVA njëkahëshe duke përdorur analizën post hoc të Tukey;p < 0.05).Shifrat e gabimit paraqesin gabim standard të shkallës
Femra Ann.arabiensis, 72 orë dhe 120 orë pas vaktit të gjakut, gjatë pjelljes së vezëve, nuk u shfaq asnjë preferencë për ekstraktet e paqëndrueshme të hapësirës së sipërme nga urina e freskët dhe e vjetër e lopës në krahasim me kontrollet e pentanit (χ2 = 3.07, p > 0.05; Skedari shtesë 1: Fig. S1).
Për femra Ann.arabiensis, GC-EAD dhe GC-MS analizat identifikuan tetë, gjashtë, tre dhe tre komponime bioaktive (Figura 5D-G). Edhe pse u vunë re dallime në numrin e përbërësve që shkaktuan përgjigje elektrofiziologjike, shumica e këtyre komponimeve ishin të pranishme në çdo përgjigje të paqëndrueshme të hapësirës së kokës. antenat mbi pragun u përfshinë në analiza të mëtejshme.
Shkalla totale e lirimit të paqëndrueshëm të përbërësve bioaktive në koleksionin e hapësirës së kokës u rrit nga 29 μg h-1 në urinë të freskët në 242 μg h-1 në urinë të moshës 168-orëshe, kryesisht për shkak të rritjes së p-kresolit dhe m-formaldehidit të Fenolit si dhe të fenolit. Në të kundërt, shkalla e lirimit të përbërësve të tjerë u zvogëlua si dhe exe 2. mosha, e cila lidhej me uljen e vërejtur të intensitetit të sinjalit (bollëk) në kromatogramin (Fig. 5D)-G paneli i majtë) dhe përgjigjet fiziologjike ndaj këtyre komponimeve (Fig. 5D-G paneli i djathtë).
Në përgjithësi, përzierja sintetike kishte një raport të ngjashëm natyror të përbërjeve bioaktive të identifikuara në ekstraktet e paqëndrueshme të hapësirave kryesore të urinës së freskët dhe të vjetër (Fig. 5D–G) dhe nuk dukej të nxiste tërheqëse të rëndësishme në kërkimin e një strehuesi (χ2 = 8,15, df = 4, p = 0,083; 1,083, 1,083, ose 4-gjak). f = 4, p = 0,30; Fig. 5I). Megjithatë, krahasimet post hoc në çift midis trajtimeve treguan se mushkonjat që kërkonin bujtës ishin dukshëm tërheqëse për përzierjen sintetike të urinës 24 orëshe krahasuar me kontrollet e pentanit (p = 0,0086; Figura 5H).
Për të vlerësuar rolin e përbërësve individualë në përzierjet sintetike të urinës së moshës 24 orë, gjashtë përzierje zbritëse u vlerësuan kundrejt përzierjeve të plota në analizën e tubit Y, në të cilën u hoqën përbërësit individualë. Për mushkonjat që kërkonin bujtës, zbritja e përbërësve individualë nga përzierja e plotë kishte një efekt të rëndësishëm në përgjigjet e sjelljes (χ2 = 19.6, p. Figura S2A), të gjitha përzierjet zbritëse ishin më tërheqëse se më të vogla se të përziera plotësisht. Në të kundërt, heqja e përbërjeve individuale nga përzierja plotësisht sintetike nuk ndikoi në reagimet e sjelljes së mushkonjave që thithin gjak (χ2 = 11,38, df = 6, p = 0,077), me përjashtim të niveleve të shtuara në dekanale, p. Skedari 1: Figura S2B).
Në një fshat endemik të malaries në Etiopi, efikasiteti i një përzierjeje sintetike të urinës 24-orëshe të lopës në tërheqjen e mushkonjave në kushte fushore u vlerësua për dhjetë netë (Fig. 6A). Gjithsej 4,861 mushkonja u kapën dhe u identifikuan, nga të cilat 45.7% ishin Anthrophaeen . 35.4% ishin Culex spp. (Skedari shtesë 1: Tabela S1). Anopheles arabinis është i vetmi anëtar i kompleksit të specieve An.Gambian i identifikuar nga analiza PCR. Mesatarisht, 320 mushkonja u kapën në natë, gjatë së cilës kurthe me karrem përzierje sintetike kapën më shumë (3χ20, 7 kurthe pa përzierje) p < 0,0001) .Kurthe pa karreme u vendosën në secilën nga pesë netët e kontrollit në fillim, në mes dhe në fund të provës.Numra të ngjashëm mushkonjash u kapën në secilën palë kurthe, duke treguar asnjë paragjykim midis shtëpive (χ2(0, 1665) = 9 × 5, krahasuar me popullsinë e kontrolluar, no.3 me rënie gjatë periudhës së studimit, par 10-0 numri i mushkonjave të kapur në kurthet që përmbanin përzierjen sintetike u rrit ndjeshëm: kërkimi i bujtësit (χ2(0, 2107) = 138.7, p <0.0001), ushqyerja e fundit me gjak (χ2(0, 650) = 32.2, p <0.0001) dhe shtatzënia (χ2001) dhe shtatzënia (χ20)Skedari shtesë 1: Tabela S1). Kjo reflektohet gjithashtu në numrin total të mushkonjave të kapura: strehuesi që kërkon > gjakpirës > shtatzënë > gjysmë shtatzënë > mashkull.
Vlerësimi në terren i efikasitetit të një përzierjeje 24-orëshe të aromës së urinës sintetike të lopës. Provat në terren u kryen në Etiopinë jug-qendrore (hartë), pranë qytetit të Maki (fut), duke përdorur një kurth drite të Qendrave për Kontrollin e Sëmundjeve (CDC) (djathtas) në shtëpitë e çiftuara, me një dizajn latin të tërhequr (imazhin ajror të femrës) (Anfrom captures ajror). arabeska (B), por jo Anopheles farroes (C), në një mënyrë të ndryshme, një efekt fiziologjik i varur nga gjendja. Përveç kësaj, këto kurthe kapën një numër në rritje të konsiderueshme të mushkonjave strehuese Culex. përfaqësojnë indeksin mesatar të përzgjedhjes në çifte kurthe kontrolli (të hapura; N = 5).) Yjet tregojnë nivelet e rëndësisë statistikore (*p = 0,01 dhe ***p < 0,0001)
Të tre llojet u kapën në mënyra të ndryshme në kurthe që përmbajnë përzierje sintetike. Në kërkim të bujtësit (χ2(1, 1345) = 71.7, p <0.0001), të ushqyerit me gjak (χ2(1, 517) = 16.7, p < 0.0001) dhe shtatzënisë (χ2(1, 1, 4) = 1.81. sis u bllokua në kurthin që lëshonte përzierjen sintetike (Fig. 6B), ndërsa sasia e An nuk ndryshonte. U gjetën Pharoensis në gjendje të ndryshme fiziologjike (Fig. 6C). Për Culex, vetëm një rritje e konsiderueshme e numrit të mushkonjave që kërkonin bujtës u gjet në kurthet e karremuara me përzierjen sintetike (χ19, 60 =3, D) ), krahasuar me kurthe kontrolli.
Grackat e karremit pritës të vendosura jashtë strehuesve të mundshëm midis vendeve të shumimit dhe komuniteteve rurale në Etiopi u përdorën për të vlerësuar nëse mushkonjat e malaries përdorin erën e urinës së lopës si një shenjë të habitatit bujtës. Në mungesë të shenjave të strehës, nxehtësisë dhe me ose pa praninë e erës së urinës së lopës, nuk u kapën mushkonja (Shtesë e mushkonjave, prezenca e lartë e Fig, Fig. mushkonjat femra të malaries u tërhoqën dhe u kapën, megjithëse në numër të vogël, pavarësisht nga mosha e urinës (χ2(5, 25) = 2.29, p = 0.13; Skedari shtesë 1: Figura S3 ).Në të kundërt, kontrollet e ujit nuk kapën mushkonjat e malaries në temperatura të larta (Figura shtesë S3: Figura shtesë 1:).
Mushkonjat e malaries fitojnë dhe shpërndajnë komponime që përmbajnë azot nëpërmjet të ushqyerit kompensues me urinën e lopës (p.sh., pellgje) për të përmirësuar tiparet e historisë së jetës, të ngjashme me insektet e tjera [2, 4, 24, 25, 26]. Urina e lopës është një burim lehtësisht i disponueshëm për vegjetacion i rinovueshëm dhe i lidhur ngushtë me sëmundjen. shtëpitë rurale dhe vendet e vezëve. Mushkonjat femra e gjejnë këtë burim me anë të nuhatjes dhe janë në gjendje të rregullojnë marrjen e komponimeve azotike në urinë, duke përfshirë urenë, përbërësi kryesor azotik në urinë [15, 16]. Në varësi të gjendjes fiziologjike të mushkonjave femërore, lëndët ushqyese në mushkonja, pasi mushkonjat rriten në aktivitetin e urines, pasi që fluturimi i mushkonjave rritet në urinë. mbijetesa dhe karakteristikat riprodhuese të individëve që ushqehen me gjak gjatë ciklit të parë gonadotropik. Prandaj, përzierja e urinës luan një rol të rëndësishëm ushqyes për vektorët e malaries që janë të mbyllur si të rriturit e kequshqyer [8], pasi u siguron mushkonjave femra aftësinë për të përvetësuar komponime të rëndësishme azotike duke u angazhuar në ushqimin me rrezik të ulët, duke rritur aktivitetin e tyre me rrezikshmëri të ulët dhe pritshmërinë e tyre. vënë, të gjitha këto ndikojnë në kapacitetin vektorial.Për më tepër, kjo sjellje mund të jetë objektivi i programeve të ardhshme të menaxhimit të vektorëve.