Faleminderit që vizituat Nature.com.Versioni i shfletuesit që po përdorni ka mbështetje të kufizuar për CSS.Për përvojën më të mirë, ju rekomandojmë të përdorni një shfletues të përditësuar (ose çaktivizoni modalitetin e përputhshmërisë në Internet Explorer).Ndërkohë, për të siguruar mbështetje të vazhdueshme, ne do ta bëjmë faqen pa stile dhe JavaScript.
Gjakderdhja e pakontrolluar është një nga shkaqet kryesore të vdekjes.Arritja e hemostazës së shpejtë siguron mbijetesën e subjektit si një ndihmë e parë gjatë luftimeve, aksidenteve në trafik dhe operacioneve për uljen e vdekjeve.Skela e përbërë e përforcuar me fibra nanoporoze (NFRCS) që rrjedh nga një përbërje e thjeshtë hemostatike formuese e filmit (HFFC) si një fazë e vazhdueshme mund të shkaktojë dhe përmirësojë hemostazën.Zhvillimi i NFRCS bazohet në hartimin e krahut të pilivesës.Struktura e krahut të pilivesës përbëhet nga krahë tërthor dhe gjatësor, dhe membranat e krahëve janë të lidhura me njëra-tjetrën për të ruajtur integritetin e mikrostrukturës.HFFC mbulon në mënyrë uniforme sipërfaqen e fibrës me një film me trashësi nanometër dhe lidh trashësinë e pambukut të shpërndarë rastësisht (Ct) (faza e shpërndarë) për të formuar një strukturë nanoporoze.Kombinimi i fazave të vazhdueshme dhe të shpërndara ul koston e produktit me dhjetë herë në krahasim me produktet komerciale.NFRCS i modifikuar (tampona ose shirita dore) mund të përdoret në një sërë aplikimesh biomjekësore.Studimet in vivo kanë arritur në përfundimin se Cp NFRCS i zhvilluar shkakton dhe përmirëson procesin e koagulimit në vendin e aplikimit.NFRCS mund të modulojë mikromjedisin dhe të veprojë në nivel qelizor për shkak të strukturës së tij nanoporoze duke rezultuar në shërimin më të mirë të plagëve në modelin e plagës së prerjes.
Gjakderdhja e pakontrolluar gjatë situatave luftarake, intraoperative dhe emergjente mund të përbëjë një kërcënim serioz për jetën e të plagosurit1.Këto kushte çojnë më tej në një rritje të përgjithshme të rezistencës vaskulare periferike, duke çuar në shok hemorragjik.Masat e duhura për të kontrolluar gjakderdhjen gjatë dhe pas operacionit konsiderohen potencialisht kërcënuese për jetën2,3.Dëmtimi i enëve të mëdha çon në humbje masive të gjakut, duke rezultuar në një shkallë vdekshmërie prej ≤ 50% në luftime dhe 31% gjatë operacionit1.Humbja masive e gjakut çon në një ulje të vëllimit të trupit, gjë që redukton prodhimin kardiak.Një rritje e rezistencës totale vaskulare periferike dhe një dëmtim progresiv i mikroqarkullimit çojnë në hipoksi në organet që mbështesin jetën.Shoku hemorragjik mund të ndodhë nëse gjendja vazhdon pa ndërhyrje efektive1,4,5.Komplikime të tjera përfshijnë përparimin e hipotermisë dhe acidozës metabolike, si dhe një çrregullim koagulimi që pengon procesin e koagulimit.Shoku i rëndë hemorragjik shoqërohet me një rrezik më të lartë të vdekjes6,7,8.Në shokun e shkallës III (progresive), transfuzioni i gjakut është thelbësor për mbijetesën e pacientit gjatë sëmundshmërisë dhe vdekshmërisë intraoperative dhe postoperative.Për të kapërcyer të gjitha situatat e mësipërme kërcënuese për jetën, ne kemi zhvilluar një skelë të përbërë nanoporoze të përforcuar me fibra (NFRCS) që përdor një përqendrim minimal të polimerit (0.5%) duke përdorur një kombinim të polimereve hemostatikë të tretshëm në ujë.
Me përdorimin e përforcimit të fibrave, mund të zhvillohen produkte me kosto efektive.Fijet e rregulluara rastësisht i ngjajnë strukturës së krahut të një pilivesa, të balancuara nga vijat horizontale dhe vertikale në krahë.Venat tërthore dhe gjatësore të krahut komunikojnë me membranën e krahut (Fig. 1).NFRCS përbëhet nga Ct i përforcuar si një sistem skele me forcë fizike dhe mekanike më të mirë (Figura 1).Për shkak të përballueshmërisë dhe mjeshtërisë, kirurgët preferojnë të përdorin matës me fije pambuku (Ct) gjatë operacioneve dhe veshjeve. Prandaj, duke marrë parasysh përfitimet e tij të shumta, duke përfshirë > 90% celulozë kristaline (nxjerr në rritjen e aktivitetit hemostatik), Ct u përdor si një sistem skeletor i NFRCS9,10. Prandaj, duke marrë parasysh përfitimet e tij të shumta, duke përfshirë > 90% celulozë kristaline (nxjerr në rritjen e aktivitetit hemostatik), Ct u përdor si një sistem skeletor i NFRCS9,10. Следовательно, учитывая его многочисленные преимущества, во том числе > 90% кристаллической целлюлозы (участвует в повышении гемостатической aktivitete), Ctolьзовали во kaчесты90FletSke. Prandaj, duke pasur parasysh përfitimet e tij të shumta, duke përfshirë >90% celulozë kristaline (e përfshirë në rritjen e aktivitetit hemostatik), Ct u përdor si sistemi skeletor NFRCS9,10.因此，考虑到它的多重益处，包括> 90% 的结晶纤维素（有助于增强止觼S的结晶纤维素（有助于增强止觼S 9,10 vjet.因此，考虑到它的多重益处，包括> 90%Prandaj, duke pasur parasysh përfitimet e tij të shumta, duke përfshirë mbi 90% celulozë kristalore (ndihmon në rritjen e aktivitetit hemostatik), Ct u përdor si një skelë për NFRCS9,10.Ct u mbulua sipërfaqësisht (u vu re formimi i filmit me nano të trashë) dhe u ndërlidh me një përbërje hemostatike film-formuese (HFFC).HFFC vepron si një matrigel, duke mbajtur së bashku Ct të vendosura rastësisht.Dizajni i zhvilluar transmeton stres brenda fazës së shpërndarë (fibrat përforcuese).Është e vështirë të përftohen struktura nanoporoze me forcë të mirë mekanike duke përdorur përqendrime minimale të polimerit.Përveç kësaj, nuk është e lehtë të personalizosh kallëpe të ndryshme për aplikime të ndryshme biomjekësore.
Figura tregon një diagram të dizajnit NFRCS bazuar në strukturën e krahut të pilivesës (A).Ky imazh tregon një analogji krahasuese të strukturës së krahut të një pilivesa (venat ndërthurëse dhe gjatësore të krahut janë të ndërlidhura) dhe një fotomikrografë tërthore të Cp NFRCS (B).Paraqitja skematike e NFRCS.
NFRC-të u zhvilluan duke përdorur HFFC si një fazë të vazhdueshme për të adresuar kufizimet e mësipërme.HFFC përbëhet nga polimere të ndryshme hemostatike që formojnë film duke përfshirë kitozanin (si polimer kryesor hemostatik) me metilcelulozë (MC), hidroksipropil metilcelulozë (HPMC 50 cp) dhe alkool polivinil (PVA)) (125 kDa) si një polimer mbështetës që nxit formimin e trombit.formimi.Shtimi i polivinilpirrolidinës K30 (PVP K30) përmirësoi kapacitetin e thithjes së lagështirës së NFRCS.Polietileni glikol 400 (PEG 400) u shtua për të përmirësuar lidhjen e kryqëzuar të polimerit në përzierjet e polimereve të lidhura.Tre përbërje të ndryshme hemostatike HFFC (Cm HFFC, Ch HFFC dhe Cp HFFC), përkatësisht chitosan me MC (Cm), kitosan me HPMC (Ch) dhe kitosan me PVA (Cp), u aplikuan në Ct.Studime të ndryshme të karakterizimit in vitro dhe in vivo kanë konfirmuar aktivitetin hemostatik dhe shërues të plagëve të NFRCS.Materialet e përbëra të ofruara nga NFRCS mund të përdoren për të personalizuar forma të ndryshme të skelave për të përmbushur nevojat specifike.
Përveç kësaj, NFRCS mund të modifikohet si një fashë ose rrotull për të mbuluar të gjithë zonën e lëndimit të ekstremiteteve të poshtme dhe pjesëve të tjera të trupit.Në mënyrë të veçantë për dëmtimet e gjymtyrëve luftarake, modeli i projektuar NFRCS mund të ndryshohet në një gjysmë krahu ose këmbë të plotë (Figura S11 plotësuese).NFRCS mund të bëhet një rrip dore me ngjitës indi, i cili mund të përdoret për të ndaluar gjakderdhjen nga lëndimet e rënda vetëvrasëse të kyçit të dorës.Qëllimi ynë kryesor është të zhvillojmë një NFRCS me sa më pak polimer që të jetë e mundur që mund t'i dorëzohet një popullsie të madhe (nën kufirin e varfërisë) dhe që mund të vendoset në një çantë të ndihmës së parë.E thjeshtë, efikase dhe ekonomike në dizajn, NFRCS përfiton komunitetet lokale dhe mund të ketë një ndikim global.
Kitozani (pesha molekulare 80 kDa) dhe amaranti u blenë nga Merck, Indi.Hidroksipropil metilcelulozë 50 Cp, polietilen glikol 400 dhe metilcelulozë janë blerë nga Loba Chemie Pvt.LLC, Mumbai.Alkooli polivinil (pesha molekulare 125 kDa) (87-90% i hidrolizuar) u ble nga National Chemicals, Gujarat.Polivinilpirrolidina K30 u ble nga Molychem, Mumbai, shtupa sterile u blenë nga Ramaraju Surgery Cotton Mills Ltd., Tamil Nadu, me ujë Milli Q (sistemi i pastrimit të ujit Direct-Q3, Merck, Indi) si transportues.
NFRCS u zhvillua duke përdorur një metodë liofilizimi11,12.Të gjitha përbërjet HFFC (Tabela 1) u përgatitën duke përdorur një përzierës mekanik.Përgatitni një tretësirë ​​0,5% të kitozanit duke përdorur 1% acid acetik në ujë duke e përzier vazhdimisht me 800 rpm në një përzierës mekanik.Pesha e saktë e polimerit të ngarkuar të treguar në Tabelën 1 iu shtua tretësirës së kitosanit dhe u trazua derisa të përftohej një tretësirë ​​e qartë polimeri.PVP K30 dhe PEG 400 iu shtuan përzierjes së përftuar në sasitë e treguara në Tabelën 1, dhe përzierja vazhdoi derisa të përftohej një zgjidhje e pastër polimer viskoze.Banja që rezulton e solucionit të polimerit u sonikua për 60 minuta për të hequr flluskat e bllokuara të ajrit nga përzierja e polimerit.Siç tregohet në figurën suplementare S1 (b), Ct u shpërnda në mënyrë të barabartë në çdo pus të një pllake (kallëp) me 6 pusi të plotësuar me 5 ml HFFC.
Pllaka me gjashtë puse u sonikua për 60 minuta për të arritur lagështim dhe shpërndarje uniforme të HFFC në rrjetin Ct.Më pas ngrijeni pjatën me gjashtë puseta në -20°C për 8-12 orë.Pllakat e ngrirjes u liofilizuan për 48 orë për të marrë formulime të ndryshme të NFRCS.E njëjta procedurë përdoret për të prodhuar forma dhe struktura të ndryshme, të tilla si tampona ose tampona cilindrikë, ose çdo formë tjetër për aplikime të ndryshme.
Kitozani i peshuar me saktësi (80 kDa) (3%) shpërndahet në acid acetik 1% duke përdorur një përzierës magnetik.Në tretësirën e përftuar të kitozanit iu shtua 1% PEG 400 dhe u trazua për 30 minuta.Tretësirën e përftuar e hidhni në një enë katrore ose drejtkëndore dhe e ngrini në -80°C për 12 orë.Mostrat e ngrira u liofilizuan për 48 orë për të marrë Cs13 poroz.
NFRCS i zhvilluar iu nënshtrua eksperimenteve duke përdorur spektroskopinë infra të kuqe të transformimit Fourier (FTIR) (Shimadzu 8400 s FTIR, Tokio, Japoni) për të konfirmuar përputhshmërinë kimike të kitosanit me polimerët e tjerë14,15.Spektrat FTIR (gjerësia e diapazonit spektral nga 400 në 4000 cm-1) të të gjitha mostrave të testuara u morën duke kryer 32 skanime.
Shkalla e përthithjes së gjakut (BAR) për të gjitha formulimet u vlerësua duke përdorur metodën e përshkruar nga Chen et al.16 me modifikime të vogla.NFRK-të e zhvilluara të të gjitha përbërjeve u thanë në një furrë me vakum në 105°C gjatë natës për të hequr tretësin e mbetur.30 mg NFRCS (pesha fillestare e kampionit – W0) dhe 30 mg Ct (kontroll pozitiv) u vendosën në enë të veçanta që përmbajnë një përzierje prej 3,8% citrate natriumi.Në intervale kohore të paracaktuara, pra 5, 10, 20, 30, 40 dhe 60 sekonda, NFRCS u hoqën dhe sipërfaqet e tyre u pastruan nga gjaku i paabsorbuar duke vendosur mostrat në Ct për 30 sekonda.Pesha përfundimtare e gjakut të përthithur nga NFRCS 16 u konsiderua (W1) në çdo moment kohor.Llogaritni përqindjen BAR duke përdorur formulën e mëposhtme:
Koha e mpiksjes së gjakut (BCT) u përcaktua siç raportohet nga Wang et al.17 .Koha e nevojshme që gjaku i plotë (gjaku i miut i parapërzier me 3.8% citrate natriumi) të mpikset në prani të NFRCS u llogarit si BCT e kampionit të testimit.Komponentët e ndryshëm të NFRCS (30 mg) u vendosën në shishe 10 ml me kapak me vidë dhe u inkubuan në 37°C.Gjaku (0.5 ml) u shtua në flakon dhe 0.3 ml 0.2 M CaCl2 u shtua për të aktivizuar koagulimin e gjakut.Së fundi, përmbysni shishkën çdo 15 sekonda (deri në 180°) derisa të formohet një mpiksje e fortë.BCT e kampionit vlerësohet nga numri i rrokullisjeve 17,18.Bazuar në BCT, dy përbërje optimale nga NFRCS Cm, Ch dhe Cp u zgjodhën për studime të mëtejshme të karakterizimit.
BCT e përbërjeve Ch NFRCS dhe Cp NFRCS u përcaktua duke zbatuar metodën e përshkruar nga Li et al.19 .Vendosni 15 x 15 mm2 Ch NFRCS, Cp NFRCS dhe Cs (kontroll pozitiv) në enë të veçanta Petri (37 °C).Gjaku që përmbante 3.8% citrate natriumi u përzie me 0.2 M CaCl2 në një raport vëllimi 10:1 për të filluar procesin e koagulimit të gjakut.20 μl e përzierjes së gjakut të miut 0.2 M CaCl2 u aplikua në sipërfaqen e mostrës dhe u vendos në një enë Petri bosh.Kontrolli ishte gjaku i derdhur në enët boshe Petri pa Ct.Në intervale fikse prej 0, 3 dhe 5 minutash, ndaloni koagulimin duke shtuar 10 ml ujë të dejonizuar (DI) në kampionin që përmban enën pa e shqetësuar mpiksjen.Eritrocitet e pakoaguluara (eritrocitet) i nënshtrohen hemolizës në prani të ujit të dejonizuar dhe çlirojnë hemoglobinë.Hemoglobina në pika të ndryshme kohore (HA(t)) u mat në 540 nm (λmax hemoglobina) duke përdorur një spektrofotometër UV-Vis.Absorbimi absolut i hemoglobinës (AH(0)) në 0 min prej 20 µl gjaku në 10 ml ujë të deionizuar është marrë si standard referencë.Marrja relative e hemoglobinës (RHA) e gjakut të koaguluar u llogarit nga raporti HA(t)/HA(0) duke përdorur të njëjtën grumbull gjaku.
Duke përdorur një analizues teksture (Texture Pro CT V1.3 Build 15, Brookfield, USA), u përcaktuan vetitë ngjitëse të NFRK në indet e dëmtuara.Shtypni një enë cilindrike me fund të hapur në pjesën e brendshme të lëkurës së derrit (pa shtresën e yndyrës).Mostrat (Ch NFRCS dhe Cp NFRCS) u aplikuan nëpërmjet kanulës në kallëpe cilindrike për të krijuar ngjitje në lëkurën e derrit.Pas një inkubimi prej 3 minutash në temperaturën e dhomës (RT) (25° C.), forca ngjitëse NFRCS u regjistrua me një shpejtësi konstante prej 0,5 mm/sek.
Karakteristika kryesore e ngjitësve kirurgjikale është rritja e mpiksjes së gjakut duke reduktuar humbjen e gjakut.Koagulimi pa humbje në NFRCS u vlerësua duke përdorur një metodë të publikuar më parë me modifikime të lehta 19 .Bëni një tub mikrocentrifuge (2 ml) (diametri i brendshëm 10 mm) me një vrimë 8 × 5 mm2 në njërën anë të tubit të centrifugës (që përfaqëson një plagë të hapur).NFRCS përdoret për të mbyllur hapjen dhe shiriti përdoret për të mbyllur skajet e jashtme.Shtoni 20 µl 0,2 M CaCl2 në tubin e mikrocentrifugës që përmban parapërzierjen 3,8% të citratit të natriumit.Pas 10 minutash, tubat e mikrocentrifugës u hoqën nga enët dhe u përcaktua rritja e masës së enëve për shkak të rrjedhjes së gjakut nga NFRK (n = 3).Humbja e gjakut Ch NFRCS dhe Cp NFRCS u krahasuan me Cs.
Integriteti i lagësht i NFRCS u përcaktua bazuar në metodën e përshkruar nga Mishra dhe Chaudhary21 me modifikime të vogla.Vendoseni NFRCS në një balonë Erlenmeyer 100 ml me 50 ml ujë dhe rrotullojeni për 60 s pa formuar një majë.Inspektimi vizual dhe prioritizimi i mostrave për integritetin fizik bazuar në mbledhjen.
Forca lidhëse e HFFC me Ct u studiua duke përdorur metoda të publikuara më parë me modifikime të vogla.Integriteti i veshjes sipërfaqësore u vlerësua duke ekspozuar NFRK ndaj valëve akustike (stimuj të jashtëm) në prani të ujit milliQ (Ct).NFRCS i zhvilluar Ch NFRCS dhe Cp NFRCS u vendosën në një gotë të mbushur me ujë dhe u sonikuan për 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10 dhe 30 minuta, respektivisht.Pas tharjes, diferenca në përqindje midis peshës fillestare dhe përfundimtare të NFRCS u përdor për të llogaritur përqindjen e humbjes së materialit (HFFC).BCT in vitro mbështeti më tej forcën lidhëse ose humbjen e materialeve sipërfaqësore.Efikasiteti i lidhjes së HFFC me Ct siguron koagulim të gjakut dhe një shtresë elastike në sipërfaqen e Ct22.
Homogjeniteti i NFRCS-së së zhvilluar u përcaktua nga BCT e mostrave (30 mg) të marra nga vendndodhje të përgjithshme të zgjedhura rastësisht të NFRCS.Ndiqni procedurën BCT të përmendur më parë për të përcaktuar pajtueshmërinë me NFRCS.Afërsia midis të pesë mostrave siguron mbulim uniform të sipërfaqes dhe depozitim HFFC në rrjetë Ct.
Zona nominale e kontaktit të gjakut (NBCA) u përcaktua siç u raportua më parë me disa modifikime.Koaguloni gjakun duke shtrënguar 20 µl gjak midis dy sipërfaqeve të Ct, Ch NFRCS, Cp NFRCS dhe Cs.Pas 1 ore, të dy pjesët e stentit u ndanë dhe matën manualisht zonën e mpiksjes.Vlera mesatare e tre përsëritjeve u konsiderua NBCA NFRCS19.
Analiza e thithjes dinamike të avullit (DVS) u përdor për të vlerësuar efektivitetin e NFRCS për të thithur ujin nga mjedisi i jashtëm ose nga vendi i dëmtimit përgjegjës për fillimin e koagulimit.DVS vlerëson ose regjistron thithjen dhe humbjen e avullit në një kampion në mënyrë gravimetrike duke përdorur një ekuilibër ultra të ndjeshëm me një rezolucion masiv prej ±0,1 µg.Një presion i pjesshëm i avullit (lagështia relative) gjenerohet nga një kontrollues elektronik i rrjedhës së masës rreth kampionit duke përzier gazra bartës të ngopur dhe të thatë. Sipas udhëzimeve të Farmakopisë Evropiane, bazuar në përqindjen e marrjes së lagështisë nga mostrat, mostrat u kategorizuan në 4 kategori (0-0,012% w/w− jo higroskopik, 0,2–2% w/w pak higroskopik, 2–15% mesatarisht higroskopik)235 higroskopik dhe > 3.5. Sipas udhëzimeve të Farmakopisë Evropiane, bazuar në përqindjen e marrjes së lagështisë nga mostrat, mostrat u kategorizuan në 4 kategori (0-0,012% w/w– jo higroskopik, 0,2–2% w/w pak higroskopik, 2–15 % mesatarisht higroskopik)235 higroskopik dhe > 3.5.Në përputhje me rekomandimet e Farmakopesë Evropiane, në varësi të përqindjes së përthithjes së lagështisë nga mostrat, mostrat u ndanë në 4 kategori (0–0,012% w/w – jo higroskopike, 0,2–2% w/w pak higroskopike, 2– pesëmbëdhjetë %).% moderimno gigroskopik и > 15% очень гигроскопичен)23. % mesatarisht higroskopik dhe > 15% shumë higroskopik)23.根据欧洲药典指南，根据样品吸收水分的百分比，样品分为4 £汻（0-2%w-012% w. /w 轻微吸湿性、2-15 % 适度吸湿，> 15% 非常吸湿）23.根据 欧洲 药典 指南 ， 根据 吸收 水分 的 百分比 样品 分为 分为 分-为 分为 分-0%w/为湿 性 、 、 、 、 0,2-2% W/w 轻微 、 2-15% 适度 吸湿 ，> 15% 非常吸湿）23。Në përputhje me rekomandimet e Farmakopesë Evropiane, mostrat ndahen në 4 klasa në varësi të përqindjes së lagështisë së thithur nga kampioni (0-0,012% ndaj peshës - jo higroskopike, 0,2-2% ndaj peshës pak higroskopike, 2-15% ndaj peshës).% moderimno gigroskopik, > 15 % очень гигроскопичен) 23. % mesatarisht higroskopik, > 15% shumë higroskopik) 23.Efikasiteti higroskopik i NFCS X NFCS dhe TsN NFCS u përcaktua në një analizues DVS TA TGA Q5000 SA.Gjatë këtij procesi, u mor koha e funksionimit, lagështia relative (RH) dhe pesha e mostrës në kohë reale në 25°C24.Përmbajtja e lagështisë llogaritet me analizë të saktë të masës NFRCS duke përdorur ekuacionin e mëposhtëm:
MC është lagështia NFRCS.m1 – pesha e thatë e NSAID-ve.m2 është masa e NFRCS në kohë reale në një RH të caktuar.
Sipërfaqja totale u vlerësua duke përdorur një eksperiment adsorbimi të azotit me azot të lëngshëm pas zbrazjes së mostrave në 25 °C për 10 orë (< 7 × 10-3 Torr). Sipërfaqja totale u vlerësua duke përdorur një eksperiment adsorbimi të azotit me azot të lëngshëm pas zbrazjes së mostrave në 25 °C për 10 orë (< 7 × 10-3 Torr). Vërejtje e plotë vlerësohet me ndihmën e eksperiencës për adsorbimet e azota jetkim azotom pas oporoznenija shkollimit në 25 °C në masën 10 ch (< 7 × 10-3 Tor). Sipërfaqja totale u vlerësua duke përdorur një eksperiment adsorbimi të azotit me azot të lëngshëm pasi mostrat u zbrazën në 25°C për 10 orë (< 7 × 10-3 Torr).在25°C 清空样品10 小时（< 7 × 10-3 Torr）后，使用液氮的氮吸附实靌估计总表✨ 25°C Vlerat e përgjithshme vlerësohen me përdorimin e eksperimenteve në adsorbations azota jetkim azotom pas oporozneniya образцов në 10 orë në 25°C (< 7 × 10-3 torr). Sipërfaqja totale u vlerësua duke përdorur eksperimente të përthithjes së azotit me azot të lëngshëm pasi mostrat u zbrazën për 10 orë në 25°C (< 7 x 10-3 torr).Sipërfaqja totale, vëllimi i poreve dhe madhësia e poreve NFRCS u përcaktuan me një Quantachrome nga NOVA 1000e, Austri duke përdorur softuerin RS 232.
Përgatitni 5% RBC (kripur si hollues) nga gjaku i plotë.Pastaj transferoni një sasi të vogël HFFC (0,25 ml) në një pjatë me 96 puse dhe masë RBC 5% (0,1 ml).Inkuboni përzierjen në 37°C për 40 minuta.Një përzierje e qelizave të kuqe të gjakut dhe serumit u konsiderua si një kontroll pozitiv, dhe një përzierje e kripur dhe qelizave të kuqe të gjakut si një kontroll negativ.Hemaglutinimi u përcaktua sipas shkallës Stajitzky.Shkallët e propozuara janë si më poshtë: + + + + agregate të dendur kokrrizore;+ + + jastëkë të poshtëm të lëmuar me skaje të lakuara;+ + jastëkë të poshtëm të lëmuar me skaje të grisura;+ unaza të ngushta të kuqe rreth skajeve të jastëkëve të lëmuar;– (negativ) butoni i kuq diskret 12 në qendër të pusit të poshtëm.
Hemokompatibiliteti i NFRCS është studiuar sipas metodës së Organizatës Ndërkombëtare për Standardizim (ISO) (ISO10993-4, 1999)26,27.Metoda gravimetrike e përshkruar nga Singh et al.Janë bërë modifikime të vogla për të vlerësuar formimin e trombit në prani ose në sipërfaqe të NFRCS.500 mg Cs, Ch NFRCS dhe Cp NFRCS u inkubuan në solucion fiziologjik të puferuar me fosfat (PBS) për 24 orë në 37°C.Pas 24 orësh, PBS u hoq dhe NFRCS u trajtua me 2 ml gjak që përmban 3.8% citrate natriumi.Në sipërfaqen e NFRCS, shtoni 0,04 ml CaCl2 0,1 M në mostrat e inkubuara.Pas 45 minutash, u shtuan 5 ml ujë të distiluar për të ndaluar koagulimin.Gjaku i koaguluar në sipërfaqen e NFRK u trajtua me tretësirë ​​formaldehidi 36-38%.Mpiksjet e fiksuara me formaldehid u thanë dhe u peshuan.Përqindja e trombozës u vlerësua duke llogaritur peshën e gotës pa gjak dhe kampion (kontroll negativ) dhe gotës me gjak (kontroll pozitiv).
Si konfirmim fillestar, mostrat u vizualizuan nën një mikroskop optik për të kuptuar aftësinë e veshjes së sipërfaqes HFFC, të ndërlidhur Ct dhe rrjetit Ct për të formuar pore.Seksione të holla të Ch dhe Cp nga NFRCS u shkurtuan me një teh bisturi.Seksioni që rezulton u vendos në një rrëshqitje xhami, të mbuluar me një mbulesë, dhe skajet u fiksuan me zam.Sllajdet e përgatitura u panë nën një mikroskop optik dhe u bënë fotografi me zmadhime të ndryshme.
Depozitimi i polimerit në rrjetet Ct u vizualizua duke përdorur mikroskopin fluoreshent bazuar në metodën e përshkruar nga Rice et al.29. Përbërja HFFC e përdorur për formulimin ishte përzier me një ngjyrë fluoreshente (amaranth) dhe NFRCS (Ch & Cp) u përgatitën sipas metodës së përmendur më parë. Përbërja HFFC e përdorur për formulimin ishte përzier me një ngjyrë fluoreshente (amaranth) dhe NFRCS (Ch & Cp) u përgatitën sipas metodës së përmendur më parë.Përbërja HFFC e përdorur për formulim u përzie me një ngjyrë fluoreshente (amaranth) dhe u përftua NFRCS (Ch dhe Cp) sipas metodës së përmendur më parë.将用于配方的HFFC 组合物与荧光染料（苋菜）混合，并按照前面提到的戶菜）混合，并按照前面提到的戶方将用于配方的HFFC 组合物与荧光染料（苋菜）混合，并按照前面提到的戶菜）混合，并按照前面提到的戶方Përbërja HFFC e përdorur në formulim u përzier me një ngjyrë fluoreshente (Amaranth) dhe mori NFRCS (Ch dhe Cp), siç u përmend më herët.Prerjet e holla të NFRK-së u prenë nga mostrat e marra, u vendosën në rrëshqitës xhami dhe u mbuluan me rrëshqitës mbulues.Vëzhgoni rrëshqitjet e përgatitura nën një mikroskop fluoreshent duke përdorur një filtër të gjelbër (310-380 nm).Imazhet janë marrë me zmadhim 4x për të kuptuar marrëdhëniet Ct dhe depozitimin e tepërt të polimerit në rrjetin Ct.
Topografia e sipërfaqes së NFRCS Ch dhe Cp u përcaktua duke përdorur një mikroskop të forcës atomike (AFM) me një konsol ultra të mprehtë TESP në modalitetin e përgjimit: 42 N/m, 320 kHz, ROC 2-5 nm, Bruker, Tajvan.Vrazhdësia e sipërfaqes u përcaktua nga katrori mesatar i rrënjës (RMS) duke përdorur softuerin (Scanning Probe Image Processor).Vendndodhje të ndryshme NFRCS u shfaqën në imazhe 3D për të kontrolluar uniformitetin e sipërfaqes.Devijimi standard i pikës për një zonë të caktuar përcaktohet si vrazhdësia e sipërfaqes.Ekuacioni RMS u përdor për të përcaktuar ashpërsinë e sipërfaqes së NFRCS31.
Studimet e bazuara në FESEM u kryen duke përdorur FESEM, SU8000, HI-0876-0003, Hitachi, Tokio, për të kuptuar morfologjinë sipërfaqësore të Ch NFRCS dhe Cp NFRCS, të cilat treguan BCT më të mirë se Cm NFRCS.Studimi FESEM u krye sipas metodës së përshkruar nga Zhao et al.32 me modifikime të vogla.NFRCS 20 deri në 30 mg Ch NFRCS dhe Cp NFRCS u parapërzien me 20 μl citrat natriumi 3,8% të parapërzier me gjak miu.20 μl 0.2 M CaCl2 iu shtuan mostrave të trajtuara me gjak për të filluar koagulimin dhe mostrat u inkubuan në temperaturën e dhomës për 10 minuta.Përveç kësaj, eritrocitet e tepërta u hoqën nga sipërfaqja e NFRCS duke shpëlarë me kripë.
Mostrat pasuese u trajtuan me 0,1% glutaraldehyde dhe më pas u thanë në një furrë me ajër të nxehtë në 37°C për të hequr lagështinë.Mostrat e thara u mbuluan dhe u analizuan 32 .Imazhet e tjera të marra gjatë analizës ishin formimi i mpiksjes në sipërfaqen e fibrave individuale të pambukut, depozitimi i polimerit midis Ct, morfologjia (forma) e eritrociteve, integriteti i mpiksjes dhe morfologjia e eritrociteve në prani të NFRCS.Zonat NFRCS të patrajtuara dhe zonat NFRCS të trajtuara me Ch dhe Cp të inkubuara me gjak u skanuan për jone elementare (natrium, kalium, azot, kalcium, magnez, zink, bakër dhe selen)33.Krahasoni përqindjet e joneve elementare midis mostrave të trajtuara dhe të patrajtuara për të kuptuar akumulimin e joneve elementare gjatë formimit të mpiksjes dhe homogjenitetit të mpiksjes.
Trashësia e veshjes së sipërfaqes Cp HFFC në sipërfaqen Ct u përcaktua duke përdorur FESEM.Seksionet kryq të Cp NFRCS u prenë nga korniza dhe u mbuluan me spërkatje.Mostrat e veshjes me spërkatje që rezultuan u vëzhguan nga FESEM dhe trashësia e veshjes së sipërfaqes u mat 34, 35, 36.
Mikro-CT me rreze X ofron imazhe 3D jo-shkatërruese me rezolucion të lartë dhe ju lejon të studioni rregullimin e brendshëm strukturor të NFRK.Mikro-CT përdor një rreze me rreze X që kalon nëpër kampion për të regjistruar koeficientin lokal të zbutjes lineare të rrezeve X në kampion, gjë që ndihmon në marrjen e informacionit morfologjik.Vendndodhja e brendshme e Ct në Cp NFRCS dhe Cp NFRCS e trajtuar me gjak u ekzaminua me mikro-CT për të kuptuar efikasitetin e përthithjes dhe mpiksjen e gjakut në prani të NFRCS37,38,39.Strukturat 3D të mostrave të Cp NFRCS të trajtuara me gjak dhe të patrajtuara u rindërtuan duke përdorur mikro-CT (V|tome|x S240, Phoenix, Gjermani).Duke përdorur versionin 2.2 të softuerit VG STUDIO-MAX, disa imazhe me rreze X u morën nga kënde të ndryshme (idealisht mbulim 360°) për të zhvilluar imazhe 3D për NFRCS.Të dhënat e mbledhura të projeksionit u rindërtuan në imazhe vëllimore 3D duke përdorur softuerin përkatës të thjeshtë 3D ScanIP Academic.
Përveç kësaj, për të kuptuar shpërndarjen e mpiksjes, 20 μl gjak të parapërzier citrat dhe 20 μl 0,2 M CaCl2 u shtuan në NFRCS për të filluar koagulimin e gjakut.Mostrat e përgatitura lihen të forcohen.Sipërfaqja NFRK u trajtua me 0,5% glutaraldehyde dhe u tha në një furrë me ajër të nxehtë në 30-40 ° C për 30 min.Mpiksja e gjakut e formuar në NFRCS u skanua, u rindërtua dhe u vizualizua një imazh 3D i mpiksjes së gjakut.
Analizat antibakteriale u kryen në Cp NFRCS (më së miri në krahasim me Ch NFRCS) duke përdorur metodën e përshkruar më parë me modifikime të vogla.Aktiviteti antibakterial i Cp NFRCS dhe Cp HFFC u përcaktua duke përdorur tre mikroorganizma të ndryshëm testues [S.aureus (baktere gram-pozitive), E.coli (baktere gram-negative) dhe Candida e bardhë (C.albicans)] që rriteshin në agar në enët Petri në një inkubator.Inokuloni në mënyrë të njëtrajtshme 50 ml të suspensionit të kulturës bakteriale të holluar në një përqendrim 105-106 CFU ml-1 mbi mjedisin e agarit.Derdhni mediumin në një enë Petri dhe lëreni të ngurtësohet.Në sipërfaqen e pllakës së agarit u bënë puse për t'u mbushur me HFFC (3 puse për HFFC dhe 1 për kontroll negativ).Shtoni 200 µl HFFC në 3 puse dhe 200 µl pH 7,4 PBS në pusin e 4-të.Në anën tjetër të enës Petri, vendosni një disk Cp NFRCS 12 mm në agarin e ngurtësuar dhe njomet me PBS (pH 7,4).Tabletat e ciprofloksacinës, ampicilinës dhe flukonazolit konsiderohen si standarde referimi për Staphylococcus aureus, Escherichia coli dhe Candida albicans.Matni zonën e frenimit me dorë dhe bëni një imazh dixhital të zonës së frenimit.
Pas miratimit etik institucional, studimi u krye në Kolegjin Mjekësor të Edukimit dhe Kërkimit Kasturba në Manipal, Karnataka, në Indinë jugore.Protokolli eksperimental TEG in vitro është shqyrtuar dhe miratuar nga Komiteti i Etikës Institucionale i Kolegjit Mjekësor Kasturba, Manipal, Karnataka (IEC: 674/2020).Subjektet u rekrutuan nga dhurues vullnetarë gjaku (nga 18 deri në 55 vjeç) nga banka e gjakut të spitalit.Përveç kësaj, nga vullnetarët u mor një formular pëlqimi i informuar për marrjen e mostrave të gjakut.Native TEG (N-TEG) ​​u përdor për të studiuar efektin e formulimit Cp HFFC në gjakun e plotë të parapërzier me citratin e natriumit.N-TEG njihet gjerësisht për rolin e tij në ringjalljen në pikën e kujdesit, i cili krijon probleme për mjekët për shkak të potencialit për vonesë klinike të rëndësishme në rezultate (testet rutinë të koagulimit).Analiza N-TEG u krye duke përdorur gjak të plotë.Pëlqimi i informuar dhe historia e detajuar mjekësore u mor nga të gjithë pjesëmarrësit.Studimi nuk përfshiu pjesëmarrës me komplikime hemostatike ose trombotike si shtatzënia/pas lindjes ose sëmundje të mëlçisë.Subjektet që merrnin barna që ndikojnë në kaskadën e koagulimit u përjashtuan gjithashtu nga studimi.Testet bazë laboratorike (hemoglobina, koha e protrombinës, tromboplastina e aktivizuar dhe numri i trombociteve) u kryen tek të gjithë pjesëmarrësit sipas procedurave standarde.N-TEG përcakton viskoelasticitetin e mpiksjes së gjakut, strukturën fillestare të mpiksjes, ndërveprimin e grimcave, forcimin e mpiksjes dhe lizën e mpiksjes.Analiza N-TEG ofron të dhëna grafike dhe numerike mbi efektet kolektive të disa elementeve qelizore dhe plazmës.Analiza N-TEG u krye në dy vëllime të ndryshme të Cp HFFC (10 µl dhe 50 µl).Si rezultat, 1 ml gjak të plotë me acid citrik iu shtua 10 μl Cp HFFC.Shtoni 1 ml (Cp HFFC + gjak i citruar), 340 µl gjak të përzier në 20 µl 0,2 M CaCl2 që përmban enë TEG.Më pas, enët TEG u ngarkuan në TEG® 5000, US për të matur R, K, këndin alfa, MA, G, CI, TPI, EPL, LY 30% të mostrave të gjakut në prani të Cp HFFC41.
Protokolli i studimit in vivo u rishikua dhe u miratua nga Komiteti Institucional i Etikës së Kafshëve (IAEC), Shkolla e Mjekësisë Kasturba, Instituti Manipal i Arsimit të Lartë, Manipal (IAEC/KMC/69/2020).Të gjitha eksperimentet e kafshëve janë kryer në përputhje me rekomandimet e Komitetit për Kontrollin dhe Mbikëqyrjen e Eksperimentimit të Kafshëve (CPCSEA).Të gjitha studimet in vivo NFRCS (2 × 2 cm2) u kryen te minjtë femra Wistar (me peshë 200 deri në 250 g).Të gjitha kafshët u ambientuan në një temperaturë prej 24-26°C, kafshët kishin akses të lirë në ushqim dhe ujë standard ad libitum.Të gjitha kafshët u ndanë rastësisht në grupe të ndryshme, secili grup përbëhej nga tre kafshë.Të gjitha studimet janë kryer në përputhje me Animal Studies: Report of In Vivo Experiments 43 .Përpara studimit, kafshët u anestezuan me administrim intraperitoneal (ip) të një përzierjeje prej 20-50 mg ketamine (për 1 kg peshë trupore) dhe 2-10 mg ksilazine (për 1 kg peshë trupore).Pas studimit, vëllimi i gjakderdhjes është llogaritur duke vlerësuar diferencën midis peshës fillestare dhe përfundimtare të mostrave, si vëllim gjakderdhës i kampionit është marrë vlera mesatare e marrë nga të tre testet.
Modeli i amputimit të bishtit të miut u zbatua për të kuptuar potencialin e NFRCS për të moduluar gjakderdhjen në traumë, luftim ose aksident trafiku (modeli i lëndimit).Prisni 50% të bishtit me një teh bisturi dhe vendoseni në ajër për 15 s për të siguruar gjakderdhje normale.Përveç kësaj, mostrat e testimit u vendosën në bishtin e një miu duke ushtruar presion (Ct, Cs, Ch NFRCS dhe Cp NFRCS).Gjakderdhja dhe PCT u raportuan për ekzemplarët testues (n = 3) 17,45.
Efektiviteti i kontrollit të presionit të NFRCS në luftime u hetua në një model të arteries femorale sipërfaqësore.Arteria femorale ekspozohet, shpohet me një trokar 24G dhe rrjedh gjak brenda 15 sekondave.Pasi vërehet gjakderdhje e pakontrolluar, kampioni i provës vendoset në vendin e shpimit me presion të ushtruar.Menjëherë pas aplikimit të mostrës së provës, u regjistrua koha e koagulimit dhe u vëzhgua efikasiteti hemostatik për 5 minutat e ardhshme.E njëjta procedurë u përsërit me Cs dhe Ct46.
Dowling et al.47 propozoi një model të dëmtimit të mëlçisë për të vlerësuar potencialin hemostatik të materialeve hemostatike në kontekstin e gjakderdhjes intraoperative.BCT u regjistrua për mostrat Ct (kontrolli negativ), kuadri Cs (kontrolli pozitiv), mostrat Ch NFRCS dhe mostrat Cp NFRCS.Vena kava suprahepatike e miut u ekspozua duke kryer një laparotomi mesatare.Pas kësaj, pjesa distale e lobit të majtë u pre me gërshërë.Bëni një prerje në mëlçi me një teh bisturi dhe lëreni të rrjedh gjak për disa sekonda.Mostrat e testit Ch NFRCS dhe Cp NFRCS të peshuara saktë u vendosën në sipërfaqen e dëmtuar pa asnjë presion pozitiv dhe BCT u regjistrua.Grupi i kontrollit (Ct) më pas ushtroi presion i ndjekur nga Cs 30 s47 pa thyer dëmtimin.
Analizat e shërimit të plagëve in vivo u kryen duke përdorur një model plage prerëse për të vlerësuar vetitë shëruese të plagëve të NFRCS-ve të zhvilluara të bazuara në polimer.Modelet e plagëve ekscizionale janë përzgjedhur dhe kryer sipas metodave të publikuara më parë me modifikime të vogla19,32,48.Të gjitha kafshët u anestezuan siç përshkruhet më parë.Përdorni një grusht biopsie (12 mm) për të bërë një prerje të thellë rrethore në lëkurën e shpinës.Vendet e përgatitura të plagës u veshën me Cs (kontroll pozitiv), Ct (duke njohur që pambuku ndërhyjnë në shërimin), Ch NFRCS dhe Cp NFRCS (grupi eksperimental) dhe një kontroll negativ pa asnjë trajtim.Në çdo ditë të studimit, sipërfaqja e plagës u mat në të gjithë minjtë.Përdorni një aparat fotografik dixhital për të bërë një foto të zonës së plagës dhe vendosni një salcë të re.Përqindja e mbylljes së plagës është matur me formulën e mëposhtme:
Bazuar në përqindjen e mbylljes së plagës në ditën e 12-të të studimit, lëkura e miut të grupit më të mirë u ekscizua ((Cp NFRCS) dhe grupi i kontrollit) dhe u studiua me ngjyrosje H&E dhe ngjyrosje trikrome Masson. Bazuar në përqindjen e mbylljes së plagës në ditën e 12-të të studimit, lëkura e miut të grupit më të mirë u ekscizua ((Cp NFRCS) dhe grupi i kontrollit) dhe u studiua me ngjyrosje H&E dhe ngjyrosje trikrome Masson.Bazuar në përqindjen e mbylljes së plagës në ditën e 12-të të studimit, lëkura e minjve të grupit më të mirë ((Cp NFRCS) dhe grupit të kontrollit) u pre dhe u ekzaminua duke u ngjyrosur me hematoksilin-eozinë dhe trikromin Masson.根据研究第12天的伤口闭合百分比，切除最佳组((Cp NFRCS)和对照组)的大连椌猄大迌褌分比迟迌最佳组sson三色染色研究.根据研究第12天的伤口闭合百分比，切除最佳组((Cp NFRCS)和对照组)的大迌褌猄大迌褌猄大迌褌猼眳组)Minjtë në grupin më të mirë ((Cp NFRCS) dhe grupet e kontrollit) u ekscizuan për ngjyrosjen e hematoksilin-eozinës dhe ngjyrosjen trikrome të Masson bazuar në përqindjen e mbylljes së plagës në ditën e 12-të të studimit.Procedura e zbatuar e ngjyrosjes është kryer sipas metodave të përshkruara më parë49,50.Shkurtimisht, pas fiksimit në formalinë 10%, mostrat u dehidratuan duke përdorur një sërë alkoolesh të klasifikuara.Përdorni një mikrotomë për të marrë seksione të holla (5 µm të trasha) të indit të prerë.Seksione të holla serike të kontrolleve dhe Cp NFRCS u trajtuan me hematoksilin dhe eozinë për të studiuar ndryshimet histopatologjike.Njolla trikrome e Masson-it u përdor për të zbuluar formimin e fibrileve të kolagjenit.Rezultatet e marra u studiuan verbërisht nga patologët.
Stabiliteti i mostrave të Cp NFRCS u studiua në temperaturën e dhomës (25°C ± 2°C/60% RH ± 5%) për 12 muaj51.Cp NFRCS (ngjyrosja e sipërfaqes dhe rritja mikrobike) u inspektua vizualisht dhe u testua për rezistencë ndaj konsumit dhe BCT sipas metodave të mësipërme të përshkruara në seksionin Materialet dhe Metodat.
Shkallëzimi dhe riprodhueshmëria e Cp NFRCS u ekzaminua duke përgatitur Cp NFRCS me madhësi 15×15 cm2.Përveç kësaj, mostrat 30 mg (n = 5) u ndanë nga fraksione të ndryshme të Cp NFRCS dhe BCT e mostrave të studiuara u vlerësua siç përshkruhet më herët në seksionin Metodat.
Ne jemi përpjekur të zhvillojmë forma dhe struktura të ndryshme duke përdorur kompozime Cp NFRCS për aplikime të ndryshme biomjekësore.Forma ose konfigurime të tilla përfshijnë tamponët konik për gjakderdhjet nga hundët, procedurat dentare dhe tamponët cilindrikë për gjakderdhjen vaginale.
Të gjitha grupet e të dhënave shprehen si mesatare ± devijim standard dhe u analizuan me ANOVA duke përdorur Prism 5.03 (GraphPad, San Diego, CA, USA) i ndjekur nga testi i krahasimeve të shumëfishta të Bonferroni (*p<0.05).
Të gjitha procedurat e kryera në studimet njerëzore ishin në përputhje me standardet e Institutit dhe Këshillit Kombëtar të Kërkimeve, si dhe me Deklaratën e Helsinkit 1964 dhe ndryshimet e saj të mëvonshme, ose standarde të ngjashme etike.Të gjithë pjesëmarrësit u informuan për veçoritë e studimit dhe natyrën e tij vullnetare.Të dhënat e pjesëmarrësve mbeten konfidenciale pasi të mblidhen.Protokolli eksperimental TEG in vitro është shqyrtuar dhe miratuar nga Komiteti i Etikës Institucionale i Kolegjit Mjekësor Kasturba, Manipal, Karnataka (IEC: 674/2020).Vullnetarët nënshkruan pëlqimin e informuar për të mbledhur mostra gjaku.
Të gjitha procedurat e kryera në studimet e kafshëve janë kryer në përputhje me Fakultetin e Mjekësisë Kastuba, Instituti Manipal i Arsimit të Lartë, Manipal (IAEC/KMC/69/2020).Të gjitha eksperimentet e projektuara me kafshë u kryen në përputhje me udhëzimet e Komitetit për Kontrollin dhe Mbikëqyrjen e Eksperimentimit të Kafshëve (CPCSEA).Të gjithë autorët ndjekin udhëzimet ARRIVE.
Spektrat FTIR të të gjitha NFRCS u analizuan dhe u krahasuan me spektrin e kitozanit të paraqitur në figurën 2A.Majat karakteristike spektrale të kitozanit (të regjistruara) në 3437 cm-1 (shtrirje OH dhe NH, mbivendosje), 2945 dhe 2897 cm-1 (shtrirje CH), 1660 cm-1 (sforcim NH2), 1589 cm-1 (përkulje N–H), 117 cm (shtrirje N–H), 117 cm (shtrirje OH dhe 1,17 cm) hidroksil dytësor), 993 cm-1 (shtrirje CO, Bo-OH) 52.53.54.Tabela plotësuese S1 tregon vlerat e spektrit të përthithjes FTIR NFRCS për kitosan (raportues), kitosan të pastër, Cm, Ch dhe Cp.Spektrat FTIR të të gjitha NFRCS (Cm, Ch dhe Cp) treguan të njëjtat breza thithës karakteristikë si chitosan i pastër pa ndonjë ndryshim të rëndësishëm (Fig. 2 A).Rezultatet e FTIR konfirmuan mungesën e ndërveprimeve kimike ose fizike midis polimerëve të përdorur për të zhvilluar NFRCS, duke treguar se polimerët e përdorur janë inerte.
Karakterizimi in vitro i Cm NFRCS, Ch NFRCS, Cp NFRCS dhe Cs.(A) përfaqëson spektrat e kombinuara FTIR të përbërjeve të kitosanit dhe Cm NFRCS, Ch NFRCS dhe Cp NFRCS nën komprimim.(B) a) Shkalla e marrjes së gjakut të plotë të NFRCS Cm, Ch, Cp dhe Cg (n = 3);Mostrat Ct treguan një BAR më të lartë sepse shtupa e pambukut ka një efikasitet më të lartë përthithjeje;b) Gjaku pas përthithjes së gjakut Ilustrimi i mostrës së absorbuar.Paraqitja grafike e BCT e kampionit testues C (Cp NFRCS kishte BCT më të mirë (15 s, n = 3)). Të dhënat në C, D, E dhe G u shfaqën si mesatare ± SD, dhe shiritat e gabimit përfaqësojnë SD, ***p <0.0001. Të dhënat në C, D, E dhe G u shfaqën si mesatare ± SD, dhe shiritat e gabimit përfaqësojnë SD, ***p <0.0001. Данные во C, D, E dhe G parashtrohen si средneе ± standarde отклонение, një plan i gabuar i parashtresës standarde отклонение, ***p <0,0001. Të dhënat në C, D, E dhe G paraqiten si mesatare ± devijimi standard, dhe shiritat e gabimit përfaqësojnë devijimin standard, ***p<0.0001. C、D、E 和G 中的数据显示为平均值± SD，误差线代表SD，***p <0,0001。 C、D、E 和G 中的数据显示为平均值± SD，误差线代表SD，***p <0,0001。 Данные во C, D, E dhe G do të thotë se çfarë domethënie është ± standarde отклонение, plani i gabuar i parashtresës standarde отклонение, ***p <0,0001. Të dhënat në C, D, E dhe G tregohen si mesatare ± devijimi standard, shiritat e gabimit përfaqësojnë devijimin standard, ***p<0.0001.