"Mos dyshoni kurrë se një grup i vogël qytetarësh të përkushtuar dhe të menduar mirë mund ta ndryshojnë botën. Në fakt, është i vetmi që ekziston."
Misioni i Cureus është të ndryshojë modelin e hershëm të botimeve mjekësore, në të cilin paraqitja e hulumtimeve mund të jetë e kushtueshme, komplekse dhe që kërkon shumë kohë.
Plazma/prp e pasur me trombocite, rigjenerimi i indeve, aktivizimi i trombociteve, terapia proliferative me glukozë, trombocitet, terapia proliferative
Citoni këtë artikull si: Harrison TE, Bowler J, Reeves K, et al. (17 maj 2022) Efekti i glukozës në numërimin dhe vëllimin e trombociteve: implikime për mjekësinë rigjeneruese. Cure 14(5): e25081. doi:10.7759/cureus.25081
Tretësirat e plazmës së pasur me trombocite (PRP) dhe glukozës hipertonike përdoren zakonisht për injeksion në mjekësinë rigjeneruese, ndonjëherë së bashku. Efekti i glukozës hipertonike në lizën dhe aktivizimin e trombociteve nuk është raportuar më parë. Ne testuam efektin e përqendrimeve të larta të glukozës në numërimin e trombociteve dhe eritrociteve, si dhe në vëllimet e qelizave në PRP dhe gjak të plotë (WB). Një ulje e shpejtë e pjesshme e numërimit të trombociteve ndodhi me të gjitha përzierjet e glukozës të përziera me PRP ose gjak të plotë, në përputhje me lizën e pjesshme. Pas minutës së parë, numërimi i trombociteve mbeti i qëndrueshëm, duke sugjeruar një akomodim të shpejtë të trombociteve të mbetura në hipertonitet ekstrem (>2000 mOsm). Pas minutës së parë, numërimi i trombociteve mbeti i qëndrueshëm, duke sugjeruar një akomodim të shpejtë të trombociteve të mbetura në hipertonitet ekstrem (>2000 mOsm). Pas fillimit të minutы koliчество trombocitov mbetet стабильным, что указывает на быструю аккомодацию остаточных тромбоцитов до эkstremalьnogo (>2000 mOsm) hipertonusa. Pas minutës së parë, numërimi i trombociteve mbeti i qëndrueshëm, duke treguar një akomodim të shpejtë të trombociteve të mbetura në hipertonitet ekstrem (>2000 mOsm).第一分钟后，血小板计数保持稳定，表明残余血小板迅速适应极端（> 200 mOsm）高渗状态.2000 mOsm）高渗状态. Pas parë минуты количество тромбоцитов стабильсь стабильным, что указывает на быструю адаптацию остаточных тромбоцитов к экстремальному (>2000 mOsm) гиперосмолярному состоянию. Pas minutës së parë, numërimi i trombociteve mbeti i qëndrueshëm, duke treguar një përshtatje të shpejtë të trombociteve të mbetura në gjendjen ekstreme hiperosmolare (>2000 mOsm).Përqendrimet e glukozës prej 25% e lart rezultuan në një rritje të konsiderueshme të vëllimit mesatar të trombociteve (MPV), duke treguar një fazë të hershme të aktivizimit të trombociteve. Nevojiten studime të mëtejshme për të përcaktuar nëse ndodh liza ose aktivizimi i trombociteve dhe nëse injektimi hipertonik i glukozës vetëm ose në kombinim me PRP mund të ofrojë përfitim shtesë klinik.
Në vitet 1950, kirurgu amerikan George Hackett zbuloi se mund të lehtësonte përgjithmonë dhimbjet e kyçeve dhe të shpinës tek shumë pacientë duke injektuar një tretësirë ​​proliferative në tendona dhe ligamente. Eksperimentet e tij në lepuj treguan se trajtimi, të cilin ai e quajti terapi proliferative, shkaktonte zgjerimin dhe forcimin e tendonave. Studimet histologjike kanë konfirmuar se gjatë këtij procesi prodhohet kolagjen i ri [1].
Gjatë dekadave të para, u provuan shumë zgjidhje të ndryshme shpërndarjeje. Deri në vitet 1990, shumica e praktikuesve i konsideronin përqendrimet e larta të glukozës si metodën më të sigurt dhe më efektive. Megjithatë, mekanizmi i veprimit mbetet i paqartë.
Pak studime klinike u kryen në shekullin e 20-të pas punës së Hackett. Megjithatë, në vitet 2000 pati interes të ripërtërirë dhe disa prova klinike të suksesshme të terapisë proliferative u përfunduan për trajtimin e dhimbjes së shpinës së poshtme [2], osteoartritit të gjurit [3] dhe epikondilitit lateral [4].
Rigjenerimi i indeve kërkon pjesëmarrjen e qelizave staminale. Prandaj, përqendrimet e larta të glukozës duhet të nxisin disi migrimin, replikimin dhe diferencimin e qelizave staminale. Ne hipotetizojmë se trombocitet mund të veprojnë si lajmëtarë dhe se përqendrimet e larta të glukozës mund të shkaktojnë që trombocitet të çlirojnë citokina dhe faktorë rritjeje, duke nxitur kështu proceset rigjeneruese, veçanërisht migrimin e qelizave staminale në zonat me përqendrime të larta të glukozës.
Aktivizimi i trombociteve gjithmonë i paraprin një rritjeje të kalciumit intraqelizor [5]. Liu et al. në vitin 2008 treguan se nivelet e larta të glukozës rrisin aktivitetin e kanaleve të potencialit kanonik të receptorit të përkohshëm tip 6 (TRPC6) në membranën plazmatike, gjë që çon në një fluks të joneve të kalciumit në trombocite [6]. Një studim tjetër tregoi se ekspozimi i zonës margjinale të mikrotubulave ndaj joneve të kalciumit shkakton relaksim, zgjerim dhe deformim të zonës margjinale, e cila nga ana tjetër shkakton një ndryshim në formë nga disku në sferik, duke rezultuar në vëllimin mesatar të trombociteve (MPV) [7].
Hipoteza jonë në këtë studim është se ekspozimi i trombociteve ndaj përqendrimeve të larta të glukozës ndikon në zonën margjinale të mikrotubulave dhe në mjedisin intraqelizor, duke çuar në një rritje të MPV-së.
Të gjithë pjesëmarrësit nënshkruan një formular pëlqimi të informuar pasi u shpjeguan detajet e studimit dhe para se të merrnin mostrat. Në këtë studim, u përdorën vetëm mostrat PRP me hematokrit më të madh se 2% në mënyrë që numërimi i eritrociteve (eritrociteve) dhe vëllimi mesatar korpuskular i qelizave të kuqe të gjakut (MCV) të mund të përfshiheshin për krahasim.
Studimi u krye në katër faza, faza e parë ishte PRP dhe fazat e mbetura ishin gjak i plotë (Tabela 1). Siç është përshkruar më parë [8], të gjitha forcat centrifugale relative (RCF, forca g) u llogaritën nga pika e mesit (Rmid, në cm) e kolonës së gjakut në shiringën centrifugale. Ne zgjodhëm të përdorim MPV si një shënues të sensibilizimit të trombociteve dhe numërimin e trombociteve si një tregues të lizës së mundshme të trombociteve, të cilat të dyja mund të maten lehtësisht në analizuesit standardë të hematologjisë.
Në fazën e parë, 47 vullnetarë dhuruan mostra gjaku - një tub me acid etilendiaminetetraacetik (EDTA) dhe një mostër gjaku të plotë PRP (të antikoaguluar me citrat natriumi (NaCl, 3%)) (Tabela 1). Vendoseni menjëherë pajisjen në tub. Numërimi i plotë i gjakut (CBC) u krye në mostrat EDTA në trefish, dhe mostrat NaCl u analizuan në trefish për analizën CBC, dhe më pas PRP u përgatit me metoda të ndryshme të përshkruara më sipër [8]. Të gjitha mostrat PRP u përgatitën me centrifugim në 900-1000 g. Përzieni çdo mostër PRP në një mikser vorteks për 5-10 sekonda, pastaj ndani pesë alikuote 0.5 ml në tuba.
Për të vlerësuar efektin e ekspozimit ndaj trombociteve në përqendrimet e larta të glukozës, sasi të barabarta (0.5 ml) të glukozës 0%, 5%, 12.5%, 25% dhe 50% në ujë u përzien me mostrat e trombociteve për të marrë përqendrime 0%, 2.5%, 6.25%, 12.5% ​​​​dhe 25% të përzierjes së glukozës dhe përzieni tubat në një tundës tubi për 15 minuta. TAC i secilës përzierje u analizua në trefish pas 15 minutash. Numërimi i trombociteve (PLT), numërimi i RBC, MCV dhe MPV u mesatarizuan për secilën tub, dhe numërimi mesatar i trombociteve, numërimi i RBC, MCV dhe MPV u llogaritën për të gjitha mostrat PRP.
Pasi përfundoi faza e parë e mbledhjes së të dhënave, vumë re një rritje të konsiderueshme të vëllimit të trombociteve në trombocitet PRP pas shtimit të D50W. Trombocitet PRP nuk përfaqësojnë domosdoshmërisht të gjitha trombocitet në gjak, dhe mjedisi PRP ndryshon nga mjedisi WB. Prandaj, vendosëm të kryenim një fazë të dytë të provës së efektit të shtimit të D50W në gjakun e plotë.
Për raundin e dytë, ne zgjodhëm një madhësi mostre prej 30 personash bazuar në rezultatet e serisë së parë, siç përshkruhet në seksionin e Analizës. Në këtë seri, 20 vullnetarë dhuruan mostra gjaku (Tabela 1). Gjaku i plotë (1.8 ml) u mor në një shiringë 3 ml dhe u antikoagulua me 0.2 ml 40% NaCl. Shiringa e gjakut të plotë u përzie për pesë sekonda me një mikser vorteks dhe CBC u analizua në trefish. Pas analizës, gjaku i antikoaguluar u shtua në 2 ml glukozë 50% në një shiringë 5 ml (përqendrimi përfundimtar i glukozës ishte afërsisht 25% (D25)) dhe u vendos në një tub tundës për 30 minuta. Pas 30 minutash, D25/CBC në shiringat WB u analizuan në trefish. Numërimi i trombociteve, numërimi i RBC, MCV dhe MPV për shiringë u mesatarizuan, dhe PLT mesatare, numërimi i RBC, MCV dhe MPV u llogaritën për secilën mostër para dhe pas shtimit të glukozës.
Meqenëse trombocitet në gjakun e plotë ekspozohen zakonisht ndaj glukozës hipertonike gjatë terapisë proliferative të glukozës për shkak të injeksionit minimal invaziv, dhe nuk është e zakonshme të kombinohet PRP me glukozë hipertonike pak para injektimit, vendosëm të studiojmë glukozën hipertonike në kombinim me WB në Seksionin 1. Hapi i Tretë dhe i Katërt. Në secilën fazë, 20 vullnetarë dhuruan 7-8 ml ACD-A (acid që përmban citrat trinatriumi (22.0 g/l), acid citrik (8.0 g/l) dhe glukozë (24.5 g/l), tretësirë ​​citrat dekstroze) për antikoagulantë të gjakut (Tabela 1). Vetëm përzierjet e glukozës më të mëdha se 12.5% ​​u përdorën për të përcaktuar përqindjen e pragut të shoqëruar me një rritje të MPV. Në fazën e tretë, 1 ml gjak vendoset në një provëz. Pastaj përzieni gjakun në një mikser vorteks për 10 sekonda duke shtuar 1 ml glukozë 30%, glukozë 40% ose glukozë 50% në tub për të marrë një përqendrim përfundimtar të glukozës prej 15%, 20% dhe 25%, përkatësisht. Mostrat e gjakut me glukozë u analizuan për CBC menjëherë pas përzierjes dhe u përsëritën çdo dy minuta për 30 minuta.
Gjatë përzierjes fillestare, shtimi i glukozës hipertonike 1:1 dhe WB ose PRP i ekspozon trombocitet ndaj përqendrimeve mbi 25% për disa sekonda. Në hapin e katërt, për të vlerësuar efektin e glukozës hipertonike me përqendrime minimale fillestare maksimale dhe për të testuar kufirin e sipërm të efektit të glukozës, ne shtuam vetëm një sasi të vogël gjaku në D25W ose D50W. Vendosni 1 ml D25W ose D50W në një tub dhe shtoni 0.2 ml WB ndërsa përzieni mostrën për 10 sekonda. Në këto raste, gjaku u ekspozua ndaj glukozës në një përqendrim afërsisht 20% mbi përqendrimin përfundimtar, në vend të 50% mbi përqendrimin përfundimtar si në Fazën 3, duke rezultuar në përqendrime përfundimtare të glukozës prej 20.8% dhe 41.6%. Mostrat e përziera u analizuan në të njëjtin interval kohor si në hapin 3.
Në hapin e parë të secilës seri hollimi të glukozës, u morën 30 mostra pasi kjo ishte madhësia e përshtatshme e mostrës për studimin pilot [9]. Në fund të secilës fazë (duke përfshirë fazën e parë), vlerësoni përshtatshmërinë e madhësisë së mostrës duke përdorur formulën e përdorur për të përcaktuar madhësinë e mostrës së nevojshme për të vlerësuar mesataren e variablit të rezultatit të vazhdueshëm në një popullatë. Formula n = Z2 x SD2 /E2. Në këtë ekuacion, Z është rezultati Z, SD është devijimi standard dhe E është gabimi i dëshiruar [10]. Alfa jonë është 0.05, që korrespondon me një vlerë Z prej 1.96, dhe ne presim një gabim prej 5 (në përqindje). Prandaj ne zgjidhim për n = (1.962 x SD2)/52. Rezultatet treguan se madhësia e mostrës së kërkuar për secilën fazë ishte më e vogël se numri aktual i mbledhur.
Gjatë periudhave 1, 3 dhe 4 duke përdorur më shumë se një përqendrim glukoze, efekti i përqendrimeve të ndryshme të glukozës u analizua duke krahasuar ndryshimin fraksional midis kohës 0 dhe çdo kohe pasuese (faza 1 në 15 minuta, periudha 3 në 15 minuta). dhe katër në 15 sekonda, pastaj çdo dy minuta.) Shkalla e ndryshimit për secilën periudhë kohore u krahasua duke përdorur testin Mann-Whitney U sepse të dhënat nuk ndiqnin një shpërndarje normale siç përcaktohet nga testi i normalitetit Shapiro-Wilk. Meqenëse një analizë 1-me-1 e disa grupeve (pesë) u krye në hapat e parë, të tretë dhe të katërt (pesë në total), u krye një korrigjim Bonferroni për të rregulluar vlerën e dëshiruar alfa në ≤0.01 por jo ≤0.05.
Ulja e numrit të trombociteve me të gjitha përqendrimet e dekstrozës hipertonike dhe një rritje e MPV në trombocitet PRP në përqendrim dekstroze >12.5%: Numri i trombociteve PRP u rrit nga një në pesë herë përqendrimin krahasuar me gjakun e plotë bazë, duke ndryshuar në varësi të metodës (nuk përshkruhet). Ulja e numrit të trombociteve me të gjitha përqendrimet e dekstrozës hipertonike dhe një rritje e MPV në trombocitet PRP në përqendrim dekstroze >12.5%: Numri i trombociteve PRP u rrit nga një në pesë herë përqendrimin krahasuar me gjakun e plotë bazë, duke ndryshuar në varësi të metodës (nuk përshkruhet). Уменьшение количества тромбоцитов при всех концентрациях гипертонической декстрозы и увеличение MPV në trombocitah PRP në koncentrime dekstrozы > 12,5%: koliчество trombocitov PRP увеличилось во 1-5 разной тромив метода (не показано). Ulje e numrit të trombociteve në të gjitha përqendrimet hipertonike të dekstrozës dhe rritje e MPV në trombocitet PRP në përqendrim dekstroze >12.5%: Numri i trombociteve PRP është rritur 1-5 herë krahasuar me gjakun e plotë bazë, varësisht nga metoda (nuk tregohet). ).在> 12,5% 的葡萄糖浓度下，所有浓度的高渗葡萄糖降低血小板计数，PRMP 丰杰度下增加：与基线全血相比，PRP 血小板计数从浓度的1 倍上升到5 倍，因方法而 Në përqendrim glukoze >12.5%, përqendrimi i lartë i glukozës ul numërimin e gjakut, MPV e gjakut të PRP rritet: krahasuar me 与基线全血, numërimi i gjakut i PRP rritet nga 1 në 5 herë më shumë se përqendrimi (nuk përshkruhet). Për shkak të koncentrateve të trombociteve >12,5% në të gjitha koncentratet, një MPV e zvogëluar në trombocitet, PRP: trombocitet PRP zvogëlohet nga 1- deri në 5-kontrata. концентрациями цельной крови, во зависност nga metoda (ne описано ). Në përqendrimet e glukozës >12.5%, të gjitha përqendrimet e glukozës në gjendje hipertensive ulën numrin e trombociteve dhe rritën MPV-në në trombocitet PRP: Numri i trombociteve PRP u rrit 1 deri në 5 herë krahasuar me përqendrimet bazë në gjakun e plotë, varësisht nga metoda (siç përshkruhet).Figura 1 tregon se numri i trombociteve u ul me pothuajse 75% pas hollimit në ujë dhe me 20-30% pas 15 minutash hollimi me përqendrime të ndryshme të glukozës krahasuar me PRP bazë dhe një hollim 1:1 të rregulluar për vëllimin (1- k1 me korrigjimin e vëllimit). k -1 mbarështim).1 mbarështim).
Numri i qelizave në çdo hollim shprehet si një pjesë e numrit origjinal para hollimit.
MPV u ul minimalisht gjatë prodhimit të PRP, pa ndryshime të mëtejshme në përqendrimet e hollimit në 12.5% ​​​​në ujë ose glukozë (duke përfshirë përzierjet e glukozës PRP me 25%) dhe u rrit me më shumë se 20% pas hollimit në tretësirë ​​glukoze 50% (Fig. 2). Në të kundërt, eritrocitet nuk treguan ndryshim të rëndësishëm në vëllim në asnjë hollim tjetër përveç H2O.
Vëllimi mesatar i qelizave në çdo hollim shprehet si përqindje e vëllimit origjinal para hollimit.
Një ulje e ngjashme, por më pak e theksuar e numrit të trombociteve dhe një rritje e CVR-së u vunë re në BC të ekspozuar ndaj 50% glukozë (për t'u formuluar me 25% glukozë). Tabela 2 krahason numrin e qelizave dhe vëllimet e qelizave në gjakun e plotë të holluar në 50% dekstrozë me të dhënat e PRP të fazës 1 të holluara në 50% dekstrozë. Ndryshimet në numrin e RBC-ve dhe MCV të RBC-ve nuk ishin të dukshme dhe nuk ishin në qendër të vëmendjes sonë.
SD = devijimi standard, MD = ndryshimi mesatar midis grupeve, SE = devijimi standard i ndryshimit mesatar, RBC = eritrocite, PLT = trombocite, PRP = plazma e pasur me trombocite, WB = gjak i plotë
Pas shtimit të D50W në WB, përqindja e humbjes së trombociteve të rregulluar për hollim ishte 7.7% (310 ± 73 kundrejt 286 ± 96) krahasuar me 17.8% për hollimin PRP në D50W (664 ± 348 kundrejt 544 ± 277). MPV WB u rrit me 16.8% (nga 10.1 ± 0.5 në 11.8 ± 0.6), ndërsa MPV PRP u rrit me 26% (9.2 ± 0.8 kundrejt 11.6 ± 0.7). Edhe pse ndryshimet mesatare si në uljen e numrit të trombociteve ashtu edhe në rritjen e MPV ishin dukshëm më të mëdha me PRP, ndryshimet në uljen e numrit të trombociteve brenda WB ishin pothuajse domethënëse (310 ± 73 në 286 ± 96 (-7.7%); p = .06) dhe rritja e MPV ishte domethënëse (10.1 ± 0.5 në 11.8 ± 0.6 (+16.8) p < .001). Edhe pse ndryshimet mesatare si në uljen e numrit të trombociteve ashtu edhe në rritjen e MPV ishin dukshëm më të mëdha me PRP, ndryshimet në uljen e numrit të trombociteve brenda WB ishin pothuajse domethënëse (310 ± 73 në 286 ± 96 (-7.7%); p = .06) dhe rritja e MPV ishte domethënëse (10.1 ± 0.5 në 11.8 ± 0.6 (+16.8) p < .001).Edhe pse ndryshimet mesatare si në uljen e numrit të trombociteve ashtu edhe në rritjen e CVR ishin dukshëm më të mëdha me PRP, ndryshimet në rënien e numrit të trombociteve brenda WB ishin pothuajse domethënëse (310 ± 73 në 286 ± 96 (-7.7%); p = 0.06).увеличение MPV было значительным (nga 10,1 ± 0,5 deri në 11,8 ± 0,6 (+16,8) p < 0,001). rritja e MPV ishte e rëndësishme (nga 10.1 ± 0.5 në 11.8 ± 0.6 (+16.8) p < 0.001).尽管PRP 在血小板计数减少和MPV 增加方面的平均差异显着更大，但WB内血小板计数减少的变化几乎是显着的（310 ± 73 至286 ± 96 (-7,7%)；p = .06）和V的增加是显着的（10,1 ± 0,5 到 11,8 ± 0,6 (+16,8) p < .001).尽管 PRP 在 血小板 计数 和 和 增加 方面 的 平均 差异 显着 大 杅 但 佡谆 冄减少 的 几乎 是 显着 的 （（（310 ± 73 至 286 ± 96 (-7.7%) ； p = .06）和MPV 的嘯0 的 ± 73 至 (-7.7%) ； p = .06）和MPV 的嘯 的 的和± 0,5 到 11,8 ± 0,6 (+16.8) p < 0.001).Ndryshimi në uljen e numrit të trombociteve brenda WB ishte pothuajse i rëndësishëm (nga 310 ± 73 në 286 ± 96 (-7.7%); p = 0.06), megjithëse PRP kishte ndryshime mesatare dukshëm më të mëdha në uljen e numrit të trombociteve dhe rritjen e MPV-së, dhe rritja e MPV-së ishte e rëndësishme.(nga 10,1 ± 0,5 deri në 11,8 ± 0,6 (+16,8) р < 0,001). (nga 10.1 ± 0.5 në 11.8 ± 0.6 (+16.8) p < 0.001).
Një përqendrim përfundimtar prej 20% glukozë ishte i nevojshëm për të parë një ndryshim të rëndësishëm në MPV, por ndryshimi në MPV ishte më i theksuar në përqendrimin përfundimtar prej 25%. Humbja e trombociteve u stabilizua pas rënies fillestare. Ne vumë re një rënie të ndjeshme fillestare të CVR, megjithatë, CVR u rivendos shpejt në përqendrimin përfundimtar të glukozës prej 25%, i cili ishte dukshëm më i lartë se nivelet e CVR të vëzhguara në përqendrimet përfundimtare të glukozës prej 20% dhe 15% (Fig. 3 dhe në të majtë të Tabelës 3; kutitë e hijezuara). tregojnë vlerat p ≤ alfa me një korrigjim Bonferroni prej 0.01). Pati gjithashtu një rënie të ndjeshme fillestare në numrin e PLT, të vëzhguar në fazën fillestare prej 0-15 s, dhe më pas mbeti i qëndrueshëm (nga 15 s në 30 min; në të majtë të tabelës 4).
Shtimi i përqendrimeve të ndryshme të glukozës në gjakun e plotë rezultoi në një rënie të shpejtë fillestare të MPV, e ndjekur nga një rikuperim i varur nga përqendrimi prej më shumë se 20%. Legjenda tregon përqendrimin e glukozës pas hollimit. D15, D20 dhe D25 u kryen në një hollim 1:1. D21 dhe D41 u kryen në një hollim 1:5.
Tabela 4 tregon ndryshimin në numrin e trombociteve kur hollohet në glukozë hipertonike. Ne vumë re një marrëdhënie të varur nga doza midis rënies së menjëhershme të numrave PLT në hollimin 1:1 dhe në hollimin 1:5. Duke krahasuar hollimet 1:1 si një grup i vetëm me hollimet 1:5, grupi 1:1 pati një rënie të menjëhershme të numrit të trombociteve më pak se grupi 1:5 66±48,000 (23%) kundrejt 99±69,000 (37%), p = 0.014) në grupin 1:5. Pas një rënieje fillestare në pikën e parë të matjes, numri i trombociteve si përqindje e glukozës u stabilizua (Fig. 4).
Kur gjaku i plotë i shtohet glukozës në raportin 1:1, numri i trombociteve zvogëlohet me rreth 25%. Megjithatë, kur gjaku i plotë shtohet në raportin 1:5, zvogëlimi ishte shumë më i madh - rreth 50%.
Glukoza prej 41% e rriti MPV-në më shpejt dhe në mënyrë më dramatike sesa 25% ose 21%. Rezultatet e MPV-së tregohen në Figurën 3. Në të gjitha hollimet e tjera, nuk u vu re asnjë ulje fillestare e menjëhershme e MPV-së pas shtimit të 50% glukozë. Kur u përdor glukozë 25% (përqendrimi i glukozës 20.8% në hollimin përfundimtar), ndryshimi në MPV ishte i krahasueshëm me ndryshimin në glukozën 20% në një hollim 1:1 (Fig. 3). Megjithëse ndryshimet në MPV ishin fillimisht më të mëdha në përqendrimin e përzier 41% sesa në 25%, ndryshimi në MPV midis 41% dhe 25% pas 16 minutash nuk ishte më i rëndësishëm (Tabela 3, djathtas). Është gjithashtu interesante që glukoza prej 25% e rriti MPV-në në mënyrë më efektive sesa 20.8%.
Ky studim in vitro e konfirmoi pjesërisht hipotezën tonë. Ai tregoi lizë të mundshme të pjesshme të trombociteve nga përzierja e dekstrozës, një akomodim të shpejtë të trombociteve ndaj hipertonitetit ekstrem dhe një rritje të ndjeshme të MPV në përgjigje të përqendrimeve > 25% të dekstrozës hipertonike. Ai tregoi lizë të mundshme të pjesshme të trombociteve nga përzierja e dekstrozës, një akomodim të shpejtë të trombociteve ndaj hipertonitetit ekstrem dhe një rritje të ndjeshme të MPV në përgjigje të përqendrimeve > 25% të dekstrozës hipertonike. On pokasal potencialьnый частичный лизис тромбоцитов примесью декстрозы, быструю аккомодацию тромбоцитов до экстремального гипертонуса и значительное повышение MPV në kthimin e hipertonicheskuyu koncentraciyu 5%. Ai tregoi lizë të pjesshme të mundshme të trombociteve me dekstrozë, akomodim të shpejtë të trombociteve në hipertonitet ekstrem dhe një rritje të konsiderueshme të MPV në përgjigje të niveleve hipertonike të dekstrozës >25%.它显示出通过葡萄糖混合物潜在的部分血小板溶解，血小板快速适应极端高渗，以及响应> 25% 浓度的高渗葡萄糖时MPV 显着上升。它 显示 出 通过 葡萄糖 潜在 的 部分 血小板 溶解 血小板 快速 适庯 极的响应> 25% 浓度 高渗 葡萄糖 时 时 mpv 显着。。。。。 Он показывает потенциальный частичный лизис тромбоцитов смесями со глюкозой, быструю адаптацию тромбоцитов к екстремальному гипертонусу и значительное увеличение MPV në kundërshtimin e koncentratit në vlerën e 25% të lartë. Tregon lizë të pjesshme të mundshme të trombociteve nga përzierjet e glukozës, përshtatje të shpejtë të trombociteve ndaj hipertonitetit ekstrem dhe një rritje të konsiderueshme të MPV në përgjigje të glukozës hipertonike >25%.Rritja fillestare ishte maksimale në ekspozimin prej 41.6% ndaj glukozës, por rritja e MPV iu afrua ekspozimit prej 25% ndaj glukozës afërsisht 20 minuta pas ekspozimit.
Përqendrimi i trombociteve ndikohet nga glukoza. Vumë re se sasia e PLT u ul në të gjitha hollimet e glukozës. Një rënie e ndjeshme e numrit të trombociteve në hollimet H2O (0%) të serisë PRP mund të shoqërohet me lizë osmotike. Nga ana tjetër, kjo mund të jetë një artefakt i shkaktuar nga grumbullimi i trombociteve, por kjo është në kontrast me mungesën e ndryshimit të MPV në këtë hollim. Ky zbulim do të thotë që disa trombocite janë shumë të ndjeshme ndaj hiposmolaritetit.
Në të gjitha hollimet 1:1 të glukozës, sasia e PLT u ul me 20-30%, madje edhe me D5W (hipotonike në 252 mOsm), gjë që mund të tregojë një efekt specifik jo-osmotik të glukozës, pasi si PLT ashtu edhe MPV mbetën të pandryshuara në një rritje trefish të përqendrimit të glukozës nga D5W në D25W. Në fakt, përqendrimet e PLT tentuan të rriteshin pak me rritjen e osmolaritetit.
Ulja e PLT midis hollimeve 1:1 dhe 1:5 do të thotë që efekti i tretjes varet nga përqendrimi fillestar dhe përfundimtar i glukozës. Nëse do të varej vetëm nga përqendrimi fillestar, atëherë do të pritej të shihej një ndryshim në reduktimin e PLT midis përqendrimeve 1:1. Por ne nuk e shohim. Nëse efekti i lizës varet vetëm nga përqendrimi përfundimtar i glukozës, atëherë nuk presim shumë ndryshim midis një hollimi 20% 1:1 dhe një hollimi 20.8% 1:5. E megjithatë ne ia dolëm.
Nëse ndodh humbja e trombociteve për shkak të lizës së trombociteve, formohet një lizat i pjesshëm, pas të cilit citokinat dhe faktorët e rritjes çlirohen në mjedisin jashtëqelizor. Disa studime kanë treguar se lizat i trombociteve është pothuajse aq efektiv sa PRP sa një tretësirë ​​përhapjeje [11]. Vetë PRP është treguar të jetë një tretësirë ​​efektive për trajtimin e përhapjes [12-14].
Trombocitet joaktive qarkullojnë në formën e një disku të përforcuar me disa struktura të brendshme. Gjatë aktivizimit, ato marrin një formë më sferike ose amebe, duke rezultuar në një rritje të vëllimit. Rritja e vëllimit kërkon një rritje të sipërfaqes, e cila është rezultat i nxjerrjes së sistemit të tubave të hapur (OCS) dhe shtimit të granulave ekzocitike në membranë. Mbetet për t'u përcaktuar nëse rritja e MPV e shkaktuar nga glukoza hipertonike përfshin njërin apo të dy këta mekanizma, por nëse është i dyti, atëherë një rritje e MPV do të tregonte degranulim.
Ky studim tregoi se ekspozimi ndaj përqendrimeve të larta të glukozës në PRP ose në trombocitet e gjakut të plotë rezultoi në një rritje të MPV brenda 15 minutave me një përqendrim glukoze prej 25% dhe 41.6%, përkatësisht.
Rritja e MPV të trombociteve mund të jetë për shkak të zgjerimit të gërshetave përreth mikrotubulave në përgjigje të fluksit të kalciumit. Liu et al. Glukoza është treguar se ndërmjetëson fluksin e kalciumit përmes kanalit TRPC6 të trombociteve [6]. Hipoteza jonë është se glukoza shkakton relaksim të gërshetave të mikrotubulave, duke çuar në një rritje të MPV dhe sensibilizimin dhe/ose aktivizimin e trombociteve. Megjithatë, duke gjykuar nga rezultatet tona, kjo është vetëm një pjesë e historisë. Në testet tona, asnjë përqendrim nën D25W nuk rezultoi në një rritje të MPV. Duke pasur parasysh që nuk kemi testuar ekspozimin ndaj përqendrimeve të glukozës midis 12.5% ​​dhe 25%, rezultatet tona të fazës 1 sugjerojnë se mund të ketë një prag në këtë diapazon të përqendrimeve të glukozës që çon në një rritje të MPV. Testimet e mëtejshme në fazat 3 dhe 4 treguan se 20-25% glukozë duket të jetë pragu për këtë, por mbetet e paqartë pse.
Gjithashtu, vumë re një ulje prej ~9% të MPV pas centrifugimit. Nuk është e qartë nëse kjo ulje e MPV është për shkak të trombociteve më të mëdha dhe më të dendura të bllokuara në shtresën e qelizave të kuqe të gjakut të centrifugës. Ky vëzhgim mund të jetë i rëndësishëm për klinicistët pasi mund të nënkuptojë që trombocitet PRP janë një nëngrup më i vogël dhe më pak i dendur i trombociteve të WB.
Në një studim të mëparshëm, ne treguam se përgatitja e PRP-së ​​me metoda manuale është e lirë [8]. Nëse glukoza sensibilizon trombocitet e indeve ose PRP-në, duke i bërë ato më të ndjeshme ndaj aktivizimit, ose nëse PRP prodhohet me veti të lizatit të pjesshëm, kjo mund të rrisë rigjenerimin dhe të zvogëlojë nevojën për terapi. Prandaj, kombinimi i PRP-së ​​dhe glukozës shumë të përqendruar mund të jetë më efektiv nga ana e kostos sesa PRP-ja ose glukoza vetëm.
Studimi ynë ka disa mangësi. Së pari, ne përdorim PRP të marrë nga disa metoda të ndryshme. Kjo mund të çojë në rezultate kontradiktore. Së dyti, ne nuk ishim në gjendje të kryenim një analizë biokimike të asnjërës prej mostrave tona për të përcaktuar më saktë nëse kishte ndodhur aktivizimi i trombociteve. Ne do të donim të matnim P-selektinën, faktorin 4 të trombociteve, agregatet monocitike të trombociteve ose shënjues të tjerë të aktivizimit të trombociteve për të kuptuar më mirë shkallën ose praninë e degranulimit të granulave alfa, por kjo është përtej fushëveprimit të këtij studimi. Së treti, ne nuk ishim në gjendje të konfirmonim me anë të mikroskopisë elektronike ose metodave të tjera se rritja e MPV në trombocitet e ekspozuara ndaj glukozës ishte për shkak të efektit në ngatërresat e mikrotubulave.
Përzierjet e WB ose PRP me 25% glukozë rritën MPV-në, duke sinjalizuar fillimin e aktivizimit të trombociteve, megjithëse ky studim nuk tregoi përparim të agregimit ose degranulimit. Përzierja hipertonike e glukozës rezultoi në humbje të trombociteve, që ndoshta përfaqëson një efekt litik. Aktivizimi i pjesshëm ose liza e trombociteve mund të shkaktojë rigjenerimin e indeve pas injektimit të trombociteve. Nuk është e qartë se në çfarë pasojash klinike mund të çojnë këto ndryshime. Studime të mëtejshme kanë demonstruar matje më të sakta të aktivizimit ose lizës dhe kanë vlerësuar efektet e ndryshme klinike të përzierjeve hipertonike të glukozës me WB ose PRP.
Terapia proliferative e glukozës është një terapi rigjeneruese e thjeshtë dhe e lirë që po zgjerohet me shpejtësi dhe mbështet kërkimet klinike. Ky studim sugjeron një mekanizëm fiziologjik që, nëse konfirmohet, mund të na ndihmojë të kuptojmë një pjesë të mekanizmit rigjenerues të terapisë proliferative.
Informatikë Biomjekësore dhe Shëndetësore në Universitetin e Misurit, Shkolla e Mjekësisë Kansas City, Kansas City, SHBA
Subjektet Njerëzore: Të gjithë pjesëmarrësit në këtë studim dhanë ose nuk dhanë pëlqimin e tyre. Shoqata Ndërkombëtare për Mjekësinë Qelizore ka lëshuar miratimin ICMS-2017-003. Protokolli i mëposhtëm është miratuar për përdorim të mëtejshëm nga Bordi i Rishikimit Institucional të Shoqatës Ndërkombëtare për Mjekësinë Qelizore: Titulli: Llogaritja e rendimentit të ilaçit në plazmën e pasur me trombocite bazuar në numërimin bazë të trombociteve të CBC. Subjektet Shtazore: Të gjithë autorët konfirmuan se asnjë kafshë ose ind nuk ishte i përfshirë në këtë studim. Konflikte Interesi: Në përputhje me Formularin Uniform të Zbulimit të ICMJE-së, të gjithë autorët deklarojnë sa vijon: Informacion mbi pagesën/shërbimin: Të gjithë autorët deklarojnë se nuk kanë marrë mbështetje financiare nga asnjë organizatë për punën e paraqitur. Marrëdhëniet Financiare: Të gjithë autorët deklarojnë se aktualisht ose brenda tre viteve të fundit nuk kanë marrëdhënie financiare me ndonjë organizatë që mund të jetë e interesuar në punën e paraqitur. Marrëdhënie të Tjera: Të gjithë autorët deklarojnë se nuk ka marrëdhënie ose aktivitete të tjera që mund të ndikojnë në punën e paraqitur.
Harrison TE, Bowler J, Reeves K et al. (17 maj 2022) Efekti i glukozës në numërimin dhe vëllimin e trombociteve: implikime për mjekësinë rigjeneruese. Cure 14(5): e25081. doi:10.7759/cureus.25081
© Të drejtat e autorit 2022 Harrison et al. Ky është një artikull me qasje të hapur i shpërndarë sipas kushteve të Licencës së Attributionit Creative Commons CC-BY 4.0. Lejohet përdorimi, shpërndarja dhe riprodhimi i pakufizuar në çdo medium, me kusht që të përmenden autori dhe burimi origjinal.