Јавасцрипт је тренутно онемогућен у вашем претраживачу. Неке функције ове веб странице неће радити када је ЈаваСцрипт онемогућен.
Региструјте се са својим специфичним детаљима и одређеним леком од интереса и ми ћемо ускладити информације које дате са чланцима у нашој обимној бази података и одмах вам послати ПДФ копију е-поштом.
作者 Стелла С, Витале СР, Марторана Ф, Массимино М, Павоне Г, Ланзафаме К, Бианца С, Бароне Ц, Горгоне Ц, Фицхера М, Манзелла Л
Стефаниа Стела, 1,2 Силвиа Рита Витале, 1,2 Федерица Марторана, 1,2 Мицхеле Массимино, 1,2 Гиулиана Павоне, 3 Катиа Ланзафаме, 3 Себастиано Бианца, 4 Цхиара Бароне, 5 Цристина Горгоне, 6 Марцо Ман Екзелла 1 Департмент, Ц. цине, Универзитет у Катанији, Катанија, 95123, Италија;2 Центар за експерименталну онкологију и хематологију, АОУ Полицлиницо “Г.Родолицо – Сан Марцо”, Катанија, 95123, Италија;3 Медицинска онкологија, АОУ Поликлиника „Г.Родолицо – Сан Марцо”, Катанија, 95123, Италија;4 Медицинска генетика, АРНАС Гарибалди, Катанија, 95123, Италија;5 Медицинска генетика, АСП, Сиракуза, 96100, Италија;6 Одељење за биомедицинске и биотехнолошке науке, Универзитет у Катанији, медицинска генетика, Катанија, Италија, 95123;7Оаси Ресеарцх Институте-ИРЦЦС, Троина, 94018, Италија Комуникације: Стефаниа Стелла, тел +39 095 378 1946, емаил [емаил протецтед];[заштићено е-поштом] Сврха: Мутације заметне линије у БРЦА1 и БРЦА2 и утврђени рак дојке (БЦ), јајника (ОЦ) и други повезани са доживотним ризиком од рака. Тестирање на БРЦА ген је кључно за процену индивидуалног ризика, као и за проналажење метода превенције код здравих носилаца и прилагођавање третмана код пацијената оболелих од карцинома. Иако постоје широки географски подаци о вБРЦА2 широм региона вБРЦА2. БРЦА патогене варијанте у сицилијанским породицама, недостају студије које су посебно циљане на популације у источној Сицилији. Циљ наше студије је био да се истражи инциденца и дистрибуција БРЦА патогених промена заметне линије у кохорти пацијената са БЦ са источне Сицилије и да се процени њихова повезаност са специфичним карактеристикама присуства тумора БЦ и прогенеративним карактеристикама присуства следећег БЦ-а. РЕЗУЛТАТИ: Свеукупно, 35 пацијената (9%) је имало БРЦА патогену варијанту, 17 (49%) у БРЦА1 и 18 (51%) у БРЦА2. БРЦА1 промене су преовлађујуће код троструко негативних пацијената са БЦ, док су БРЦА2 мутације чешће код пацијената са луминалним БЦ, без тумора са БЦ пацијентима и са БРЦА1 значајно вишим испитаницима. животни индекс. Закључци: Наши налази пружају преглед мутационог статуса БРЦА код пацијената са БЦ са источне Сицилије и потврђују улогу НГС анализе у идентификацији пацијената са наследним БЦ. Свеукупно, ови подаци су у складу са претходним доказима који подржавају БРЦА скрининг за правилну превенцију и лечење рака код носилаца мутације.
Рак дојке (БЦ) је најчешћи малигнитет у свету и најсмртоноснији рак код жена.1 Биолошке карактеристике које одређују прогнозу БЦ и клиничко понашање су опширно проучаване и делимично разјашњене током времена. У ствари, неколико сурогат маркера се тренутно користи за класификовање БЦ у различите молекуларне подтипове. То су рецептори за рецепторе БЦ у различитим молекуларним подтиповима), и/или рецептор за хумани рецептор естрогена (ЕР) и/или фактор раста прогмала естрогена (ЕР) и/или ификацију, индекс пролиферације Ки-67 и степен тумора (Г).2 Комбинацијом ових варијабли идентификоване су следеће категорије БЦ: 1) Луминални тумори, који показују експресију ЕР и/или ПгР, чинили су 75% БЦ. Ови тумори су даље подељени на Луминални А, када је Ки-67 био испод 20% и Луминални тумор када је Ки-67 био испод 20% и на Луминал Б, када је Ки-ХЕР2 био негативан, био је једнак или изнад ХЕР2 ХЕР2. 2 амплификација, без обзира на индекс пролиферације;2) ХЕР2+ тумори који су ЕР и ПгР негативни, али показују појачање ХЕР2. Ова група чини 10% свих тумора дојке;3) Троструко негативни карцином дојке (ТНБЦ), који не показује експресију ЕР и ПгР и ХЕР2 амплификације, чини око 15% карцинома дојке.2-4
Међу овим подтиповима БЦ, степен тумора и индекс пролиферације представљају биомаркере попречног пресека који су директно и независно повезани са агресивношћу и прогнозом тумора.5,6
Поред горе поменутих биолошких карактеристика, улога наслеђених генетских промена које доводе до развоја БЦ је постала све важнија у последњих неколико година.7 Отприлике 1 од 10 тумора дојке наслеђује се због промена заметне линије у специфичним генима.8 Две велике епидемиолошке студије које су укључивале више од 180.000 гена су недавно идентификовале више од 180,000, а БРЦА гена (АТМ АРД група жена). 1, БРЦА2, ЦХК2, ПАЛБ2, РАД51Ц и РАД51Д) првенствено одговорни за наследни БЦ. Међу овим генима, БРЦА1 и БРЦА2 (у даљем тексту БРЦА1/2) показали су најјачу корелацију са развојем тумора дојке.9-12 У ствари, као и друге малигне мутације, ризик од малигне мутације БЦ12 значајно повећавају животни ризик од малигних тумора дојке. укључујући јајнике, простату, панкреас, колоректал и меланом. Од 13 до 80 година, кумулативна инциденција БЦ је 72% код жена са БРЦА1 патогеном варијантом (ПВ) и 69% код жена са БРЦА2 ПВ.14
Нарочито, недавна публикација сугерише да ризик од БЦ зависи од типа ПВ. У ствари, у поређењу са варијантама патогеног скраћења, очигледне миссенсе варијанте, посебно у гену БРЦА1, повезане су са смањеним ризиком од БЦ, посебно код старијих жена.15
Присуство БРЦА1 или БРЦА2 ПВ је повезано са различитим биолошким и клиничкопатолошким карактеристикама.16,17 БРЦА1-повезани БЦ имају тенденцију да буду клинички агресивни, слабо диференцирани и високо пролиферативни. Ови тумори су обично троструко негативни и имају рано доба почетка. лиферативни индекси. Ови тумори су чешћи у лумену Б и обично се јављају код старијих одраслих особа.16-18 Посебно, мутације у БРЦА1 и БРЦА2 повећавају осетљивост на специфичне третмане, укључујући соли платине и циљане лекове као што су инхибитори поли(АДП-рибозе) полимеразе (ПАРПи).19,20).
Током протеклих неколико година, примена секвенцирања следеће генерације (НГС) у клиничкој пракси омогућила је све већем броју пацијената са БЦ да се подвргну молекуларном тестирању на синдроме осетљивости на рак, укључујући БРЦА1/2.21 Истовремено, дефиниције засноване на прецизним критеријумима у вези са породичном анамнезом, демографским и клиничкопатолошким карактеристикама да би се боље идентификовале22/2БР ЦА у овом контексту је вредно идентификације2 БРЦА. акумулирање на БРЦА1/2 скринингу у одређеним популацијама, наглашавајући разлике између географских региона.24–27 Иако постоје извештаји о БЦ кохорти на западној Сицилији, мање података је доступно о БРЦА1/2 скринингу у популацији источне Сицилије.28,29
Овде описујемо резултате БРЦА1/2 скрининга заметне линије код пацијената са БЦ са источне Сицилије, даље повезујући присуство БРЦА1 или БРЦА2 мутација са главним клиничкопатолошким карактеристикама ових тумора.
Ретроспективна студија је спроведена у „Центру за експерименталну онкологију и хематологију” у болници Полицлиницо. Родолико – Сан Марко у Катанији. Од јануара 2017. до марта 2021. године, укупно 455 пацијената са дојкама и јајницима, меланомом, панкреасом или порођајним геном је упућено на дијагностички порођајни ген БРЦА. у складу са Хелсиншком декларацијом, а сви учесници су дали писмени информисани пристанак пре молекуларне анализе.
Хистолошке и биолошке карактеристике (ЕР, ПгР, ХЕР2 статус, Ки-67 и степен) БЦ су процењене на биопсији језгра или хируршким узорцима, узимајући у обзир само агресивне компоненте тумора. На основу ових карактеристика, БЦ су класификовани на следећи начин: луминални А (ЕР+ и/или ПгР+, ХЕР2-, или %), Б-Р2+, Пг-6 Ки-67≥20%), луминални Б-ХЕР2+ (ЕР и/или ПгР+, ХЕР2+), ХЕР2+ (ЕР и ПгР-, ХЕР2+) или троструко негативни (ЕР и ПгР-, ХЕР2-).
Пре процене статуса мутације БРЦА1 и БРЦА2, мултидисциплинарни тим укључујући онколога, генетичара и психолога спровео је консултације о генетици тумора за сваког пацијента како би утврдио присуство БРЦА1 и/или БРЦА1.или особе са високим ризиком од ПВ у БРЦА2 гену. Селекција пацијената је извршена у складу са смерницама Италијанског удружења за медицинску онкологију (АИОМ) и локалним препорукама Сицилије.30,31 Ови критеријуми укључују: (и) породичну историју познатих патогених варијанти гена осетљивости (нпр. БРЦА1, БР53,2, БРЦАПТ 1, БРЦА2);(ии) мужјаци са БЦ;(иии) оне са БЦ и ОЦ;(ив) жене са БЦ <36 година, ТНБЦ <60 година или билатералном БЦ <50 година;(в) лична медицинска историја БЦ <50 година и најмање један сродник у првом степену: (а) БЦ < 50 година;(б) не-муцинозни и негранични ОЦ било ког узраста;(ц) билатерални БЦ;(д) мужјак БЦ;(е) рак панкреаса;(ф) рак простате;(ви) две или више Лична историја БЦ > 50 година и породична историја БЦ, ОЦ или карцинома панкреаса за рођаке који су једни другима у првом степену (укључујући рођаке са којима је она у првом степену);(вии) Лична историја ОЦ и најмање једног сродника у првом степену: (а) пне <50 година;(б) НОЦ;(ц) билатерални БЦ;(д) мужјак БЦ;(вии) женка са серозним ОЦ високог степена.
Узорак периферне крви од 20 мЛ је добијен од сваког пацијента и сакупљен у ЕДТА епрувете (БД Биосциенцес). Геномска ДНК је изолована из узорака пуне крви од 0,7 мЛ коришћењем КИАсимпхони ДСП ДНК Миди кита за изолацију (КИАГЕН, Хилден, Италија) према упутствима произвођача и пропуштена кроз метар за изолацију од произвођача (КИАГЕН, Хилден, Италија). шунка, МА, САД) Извршите квантификацију.Циљно обогаћивање и припрему библиотеке врши Онцомине™ БРЦА Ресеарцх Ассаи Цхеф, спреман за убацивање у комплет Ион АмплиСек™ Цхеф реагенса ДЛ8 за аутоматску припрему библиотеке у складу са упутствима произвођача. Комплет се састоји од два мултиплекс ПЦР скупа прајмера који се могу користити за проучавање свих БРЦА1 (НМ_0073) прајмера гена . укратко, 15 µЛ сваког разблаженог узорка ДНК (10 нг) је додато на плоче са бар кодом за припрему библиотеке и сви реагенси и потрошни материјали су стављени на Ион Цхеф™ инструмент. Аутоматска припрема библиотеке и обједињавање библиотеке узорака са бар кодом су затим изведени на инструменту Ион Цхеф™. Валтхам, МА, САД) према упутствима произвођача. Коначно, библиотеке се комбинују у еквимоларним односима у епруветама са узорцима библиотеке Ион Цхеф™ (епрувете са бар кодом) и учитавају се у Ион Цхеф™ инструмент. Секвенцирање је изведено коришћењем Ион Торрент С5 (Тхермо Фисхер Сциентифиц) инструмента (Тхермо Фисхер Сциентифиц) коришћењем инструмента Фисхер 0 (Тхермо Фисхер Сциентифиц) (Тхермо Фисхер С11). фиц).Анализу података вршили су Амплицон Суите (СмартСек срл) и Ион Репортер Софтваре.
Све варијанте номенклатуре су пратиле тренутне смернице Конзорцијума за варијације људског генома, доступне на мрежи (ХГВС, хттп://ввв.хгвс.орг/мутномен). Клинички значај БРЦА1/2 варијанти дефинисан је коришћењем класификације Међународног конзорцијума ЕНИГМА (Евиденце-Басед Нетворк, Мрежа за тумачење заснована на доказима) базе података као што су АРУП, БРЦАЕКСЦХАНГЕ, ЦлинВар, ИАРЦ_ЛОВД и УМД. Класификација укључује пет различитих категорија ризика: бенигни (категорија И), вероватно бенигни (категорија ИИ), варијанта неизвесног значаја (ВУС, категорија ИИИ), вероватно патогена (категорија ИВ), и анализа протеинске структуре Вца на патогене функције (такође анализирају структуру протеина Вца). информативни алат са приступом 30 база података.32
Да би се сваком ВУС-у доделио потенцијални клинички значај, коришћени су следећи алгоритми за предвиђање рачунарских протеина: МУТАТИОН ТАСТЕР, 33 ПРОВЕАН-СИФТ (хттп://провеан.јцви.орг/индек.пхп), ПОЛИПХЕН-2 (хттп:// /генетицс.бвх.харвард.еду/ппх.гдвгдг-гвгв2/) и Алигн. д_инпут.пхп).Варијанте класификоване као класа 1 и 2 сматране су дивљим типом.
Сангер секвенцирање је потврдило присуство сваке патогене варијанте. Укратко, пар специфичних прајмера је дизајниран за сваку откривену варијанту коришћењем референтних секвенци гена БРЦА1 и БРЦА2 (НГ_005905.2, НМ_007294.3 и НГ_012772.3, НМ_012772.3, НМ_012772.3, НМ_012772.3, НМ_9.030). секвенцирање.
Пацијенти који су били негативни на БРЦА1/2 ген тестирани су амплификацијом сонде зависне од мултиплексне лигације (МЛПА) у складу са упутствима произвођача да би се проценило присуство великих геномских реаранжмана (ЛГР). Укратко, узорци ДНК су денатурисани и до 60 БРЦА1 и БРЦА2 гена коришћено је. У свакој ДНК-специфичној секвенци коришћене су сонде за детекцију 6 нуклеотидне секвенце. производи амплификације, који се састоје од јединственог скупа ПЦР ампликона, су затим анализирани капиларном електрофорезом и софтвером Цофалисер.Нет у вези са одговарајућим табелама Цофалисер специфичним за серије (ввв.мрцхолланд.цом).
Одабране клиничкопатолошке варијабле (хистолошки степен и Ки-67% индекс пролиферације) су повезане са присуством БРЦА1/2 ПВ, израчунато коришћењем софтвера Присм в. 8.4 коришћењем Фишеровог егзактног теста уз претпоставку да је п-вредност <0,05 значајна.
У периоду од јануара 2017. до марта 2021. године, 455 пацијената је тестирано на мутације БРЦА1/2 заметне линије. Тестирање мутација је обављено у Центру за експерименталну онкологију и хематологију болнице Полицлиницо. Према Сицилијанским смерницама (хттп://ввв.гурс.регионе.1хдицепс.регионе.1хдицепс.цом/ 10 Геннаио 2020), Родолицо оф Цатаниа – Сан Марцо” укупно, 389 пацијената Било је карцинома дојке, 37 рака јајника, 16 карцинома панкреаса, 8 рака простате и 5 меланома.Дистрибуција пацијената према типу рака и резултатима анализе приказана је на слици 1.
Слика 1 приказује дијаграм тока који приказује преглед студије. Пацијенти са туморима дојке, меланома, панкреаса, простате или јајника су тестирани на мутације у БРЦА1 и БРЦА2 генима.
Скраћенице: ПВс, патогена варијанта;ВУС, варијанта неизвесног значаја;ВТ, БРЦА1/2 секвенца дивљег типа.
Селективно смо фокусирали наше студије на кохорте рака дојке. Пацијенткиње су имале средњу старост од 49 година (распон 23-89) и биле су претежно жене (н=376, или 97%).
Од ових испитаника, 64 (17%) је имало БРЦА1/2 мутације и сви су били женског пола. Тридесет пет (9%) је имало ПВ, а 29 (7,5%) је имало ВУС. Седамнаест (48,6%) од 35 патогених варијанти појавило се у БРЦА1 и 18 (51,4%) док се појавило у БРЦА1 (5БРЦА27%) (2, БРЦА27%). .8%) у БРЦА2 (Слике 1 и 2). ЛГР није био присутан у МЛПА анализи.
Слика 2. Анализа БРЦА1 и БРЦА2 мутација код 389 пацијената са карциномом дојке.(А) Дистрибуција патогених варијанти (ПВ) (црвена), варијанти неизвесног значаја (ВУС) (наранџаста) и ВТ (плава) код 389 пацијената са раком дојке;(Б) 389 пацијената са карциномом дојке Тридесет пет (9%) је имало БРЦА1/2 патогене варијанте (ПВ). Међу њима, 17 (48,6%) су били носиоци БРЦА1 ПВ (тамноцрвени) и 18 (51,4%) носиоци БРЦА2 (светлоцрвени);(Ц) 29 (7,5%) од 389 испитаника имало је ВУС, 5 (17,2%) БРЦА1 гена (тамно наранџасте) и 24 (82,8%) БРЦА2 гена (светло наранџасте).
Скраћенице: ПВс, патогена варијанта;ВУС, варијанта неизвесног значаја;ВТ, БРЦА1/2 секвенца дивљег типа.
Затим смо истражили преваленцију БЦ молекуларних подтипова код пацијената са БРЦА1/2 ПВ. Дистрибуција је укључивала 2 (5,7%) луминалног А, 15 (42,9%) луминалног Б, 3 (8,6%) луминалног Б-ХЕР2+, 2 (5,7%) ХЕР2+ и 13 пацијената са ТНБЦ2+ и 13 (37,1 %) пацијената (37.1А мо ) . %) је имало луминални Б БЦ, 2 (11,8%) је имало ХЕР2+ болест, а 10 (58,8%) је имало ТНБЦ. Тумори без БРЦА1 мутација били су или луминални А или луминални Б-ХЕР2+ (Слика 3). У БРЦА2-позитивној подгрупи, 10 (55,6%) су били луминални Б-тумори (55,6%) (55,6%) луминални Б-3. 16,7%) ТНБЦ и 2 (11,1%) су били луминални А (Слика 3). У овој групи нису били присутни ХЕР2+ тумори. Дакле, БРЦА1 мутације су преовлађујуће код пацијената са ТНБЦ, док су БРЦА2 промене предоминантне код особа са луменом Б.
Слика 3 Преваленција подтипова рака дојке код пацијената са патогеним варијантама у БРЦА1 и БРЦА2.Хистограми који показују дистрибуцију БРЦА1- (тамно црвена) и БРЦА2- (светлоцрвена) ПВ међу молекуларним подтиповима пацијената са карциномом дојке. Бројеви пријављени у свакој кутији представљају проценат пацијената са брБРЦАБРЦА подтиповима рака дојке.
Скраћенице: ПВс, патогена варијанта;ХЕР2+, позитиван рецептор 2 хуманог епидермалног фактора раста;ТНБЦ, троструко негативан рак дојке.
Затим смо проценили тип и локализацију гена БРЦА1 и БРЦА2 ПВ. У БРЦА1 ПВ смо приметили 7 појединачних варијанти нуклеотида (СНВ), 6 делеција, 3 дупликације и 1 инсерцију. Само једна мутација (ц.5522делГ) ​​представља ново откриће за оба субјекта. 9делЦТААТ.Ова промена укључује брисање пет нуклеотида (ЦТААТ) у БРЦА1 ексону 15, што резултира супституцијом аминокиселине леуцином тирозином на кодону 1679, а због транслационог померања оквира са предвиђеним алтернативним стоп кодоном који је довео до превременог одсецања других протеина, није откривено само једно одсецање протеина. Консензусни регион места спајања (ц.4357+1Г>Т) (Табела 1).
Што се тиче БРЦА2 ПВ, приметили смо 6 делеција, 6 СНВ-а и 2 дупликације. Ниједна од пронађених промена није нова. Три мутације су се поновиле у нашој популацији, ц.428дуп и ц.8487+1Г>А примећене код 3 субјекта, праћене ц.5851_584 случаја реаговања у два случаја ц.5851_584. понављање Ц у ексону 5 БРЦА2, за које је предвиђено да кодира скраћени, нефункционални протеин. Мутација ц.8487+1Г>А се јавља у интроничном региону БРЦА2 интрона 19 (± 1,2) и утиче на консензус секвенцу спајања, што резултира измењеним спајањем или абнормалном путањом ц.8487+1Г>А. мрав је последица делеције од 4 нуклеотида са нуклеотидних позиција 5851 до 5854 у кодирајућем егзону 10 гена БРЦА2 и резултира транслационим померањем оквира са предвиђеним алтернативним стоп кодоном (п.С1951ВфсТер). Приметно је да су као што је раније објављено, оба ц.6 измењена у Ц-А80 и у ц.А80 исти. пацијент.34 Прва мутација укључује замену аденозина (А) у БРЦА2 ексону 7 са нуклеотидом који садржи гванин (Г), што доводи до промене валина у изолеуцин на кодону 211, изолеуцин Аамино киселина је амино киселина са веома сличним својствима. мине (Т) супституција пре ексона 13 гена који кодира БРЦА2. Промена ц.7008-2А>Т може да генерише више транскрипата различите дужине. Штавише, у групи БРЦА2 ПВ, 4 од 18 промена (22,2%) су биле интронске.
Затим смо мапирали БРЦА1/2 штетне мутације у функционалним доменима и регионима који се везују за протеине (Слика 4). У БРЦА1 гену, 50% ПВ је било лоцирано у региону кластера рака дојке (БЦЦР), док је 22% мутација било лоцирано у региону кластера рака јајника (ОЦЦР) (Слика 3БРЦА5% ПВ варијанти, на слици 3БРЦА52% ПВ. БЦЦР регион и 42,8% мутација су лоцирани у ОЦЦР (Слика 4Б). Затим смо проценили локацију ПВ унутар БРЦА1 и БРЦА2 протеинских домена. За БРЦА1 протеин, пронашли смо три ПВ у доменима петље и намотаног калема, и две мутације у домену БРЦТ 4 БРЦА за БРЦТ 4 БВма (Слика. домену понављања, док су 3 интронске и 3 егзонске промене откривене у доменима који се везују за олиго/олигосахариде (ОБ) и торањ (Т) (слика 4Б).
Слика 4 Шематски приказ БРЦА1 и БРЦА2 протеина и локализација патогених варијанти. Ова слика приказује дистрибуцију БРЦА1 (А) и БРЦА2 (Б) патогених варијанти код пацијената са карциномом дојке. Егзонске мутације су приказане плавом бојом, док су интроничне варијанте приказане наранџастом. Трака је њихова висина и приказани су функционални случајеви БРЦАБР2А1 (БРЦАБР2А домена). БРЦА1 протеин садржи домен петље (РИНГ) и секвенцу нуклеарне локализације (НЛС), домен намотаног намотаја, домен кластера СК/ТК (СЦД) и БРЦА1 Ц-терминални домен (БРЦТ).(Б) БРЦА2 протеин садржи осам БРЦ понављања, ДНК-везујући домен са три хелигонасте домене или хелиго-лигонални домен везујући (ОБ) набори, домен торња (Т) и НЛС на Ц страни. Области које се називају регион кластера рака дојке (БЦЦР) и регион кластера рака јајника (ОЦЦР) су приказане на дну.* Представља мутације које одређују стоп кодоне.
Затим смо истражили клиничко-патолошке карактеристике БЦ које би могле да корелирају са присуством БРЦА1/2 ПВ. Комплетни клинички записи су били доступни за 181 БРЦА1/2-негативног пацијента (који нису носиоци) и све носиоце (н = 35). Постојала је корелација између стопе пролиферације тумора и степена.
Израчунали смо дистрибуцију Ки-67 на основу медијане наше кохорте (25%, опсег <10-90%). Субјекти са Ки-67 < 25% су дефинисани као „низак Ки-67″, док су појединци са вредностима ≥ 25% сматрани „високим Ки-67″. Значајне разлике Ки-67″. ерс (слика 5А).
Слика 5 Корелација Ки-67 са дистрибуцијом степена код жена са карциномом дојке са и без БРЦА1 и БРЦА2 ПВ. (А) Оквирни дијаграм који приказује средње вредности Ки-67 код 181 пацијената са БЦ који нису носиоци у односу на БРЦА1 (18) или БРЦА2 (17) ПВ пацијената. П вредности су сматране за ББЦ статистички значајне пацијенте са карциномом. групе хистолошког степена (Г2 и Г3) према статусу мутације БРЦА1 и БРЦА2 (ВТ субјекти, БРЦА1 и БРЦА2 ПВ носиоци).
Исто тако, испитали смо да ли је степен тумора у корелацији са присуством БРЦА1/2 ПВ. Пошто је Г1 БЦ био одсутан у нашој популацији, поделили смо пацијенте у две групе (Г2 или Г3). У складу са резултатима Ки-67, анализа је открила статистички значајну корелацију између степена тумора и БРЦА1 БЦ мутације у поређењу са вишом мутацијом тумора Гп не-БР1 0,005) (Слика 5Б).
Напредак у технологији секвенцирања ДНК омогућио је невиђени напредак у генетском тестирању БРЦА1/2, са кључним импликацијама за пацијенте са породичном историјом рака. До данас је идентификовано и класификовано око 20.000 БРЦА1/2 варијанти према Америчком друштву за медицинску генетику 35 и према систему ЕНИГТА 136 против добро познат. Унутар Италије, стопа БРЦА1/2 ПВ се кретала од 8% до 37%, што показује велику варијабилност унутар земље.38,39 Са популацијом од скоро 5 милиона, Сицилија је пети највећи регион у Италији у смислу броја становника. Иако нема података о дистрибуцији бивших становника Сицилије1/2 на истоку земље. н делу острва.
Наша студија је један од првих извештаја о инциденци БРЦА1/2 ПВ код пацијената са БЦ на источној Сицилији.28 Нашу анализу смо фокусирали на БЦ, пошто је ово далеко најчешћа болест у нашој кохорти.
Приликом тестирања 389 пацијената са БЦ, 9% је имало БРЦА1/2 ПВ, равномерно распоређене између БРЦА1 и БРЦА2. Ови резултати су у складу са онима који су претходно пријављени у италијанској популацији.28 Занимљиво је да су 3% (13/389) наше кохорте били мушкарци. Ова стопа је виша од очекиване за мушке карцинома дојке/БЦ2 на основу селекције мушке популације (1% од свих ЦАБР10 ризика за популацију на бази ЦА). Међутим, ниједан од ових мушкараца није развио БРЦА1/2 ПВ, тако да су били кандидати за даљу молекуларну анализу како би се искључило присуство мање уобичајених мутација као што су ПАЛБ2, РАД51Ц и Д, између осталих. Варијанте неизвесног значаја пронађене су код 7% испитаника код којих је БРЦА2 ВУС био евидентан. Чак и овај резултат је конзистентан14,428.
Када смо анализирали дистрибуцију БЦ молекуларних подтипова код БРЦА1/2 мутантних жена, потврдили смо познате повезаности између ТНБЦ и БРЦА1 ПВ (58,8%) и између луминалног Б БЦ и БРЦА2 ПВ (55,6%).16,43 Луминални А и ХЕР2+ тумори код БРЦА1/2+ тумора у БРЦА1 и БРЦА1 ПВ су конзистентни подаци из литературе о БРЦА1 и царри432.
Затим се фокусирамо на тип и локацију БРЦА1/2 ПВ. У нашој кохорти, најчешћи БРЦА1 ПВ је био ц.5035_5039делЦТААТ. Иако Инцорваиа ет ал.нису описали ову варијанту у својој сицилијанској кохорти, други аутори су је пријавили као заметну линију БРЦА1 ПВ.34 Неколико БРЦА1 ПВ је пронађено у нашој кохорти – нпр. ц.181Т>Г, ц.514дел, ц.3253дупА и ц.5266дупЦ – ц.5266дупЦ – ц.5266дупЦ – од којих су две уочене у С.БР18 (од којих су две пронађене у С.БР8. 181Т>Г и ц.5266дупЦ) се обично налазе у Ашкенази Јеврејима источне и централне Европе (Пољска, Чешка), словеначка, аустријска, мађарска, белоруска и немачка), 44,45 и, у Сједињеним Државама и Аргентини, недавно је дефинисана као „понављајућа варијанта заметне линије“.44 ОЦ раније идентификована је код пацијената са источним италијанским раком. пацијенти са северне Сицилије у Палерму и Месини. Занимљиво је да су чак и Инцорваиа ет ал.пронашао варијанту ц.3253дупА у неким породицама у Катанији.28 Најрепрезентативнији БРЦА2 ПВс су ц.428дуп, ц.5851_5854делАГТТ и интроничка варијанта ц.8487+1Г>А, које су детаљније описане 28 код пацијента у Палерму,428дп.П.Г. ед у домаћинствима на северозападу Сицилије, углавном у регионима Трапани и Палермо, док је ц.5851_5854делАГТТ ПВ примећен у домаћинствима на северозападу Сицилије. Варијанта 8487+1Г>А била је чешћа код субјеката из Месине, Палерма и2 ал Резбета и Калтанисбета.претходно је описана промена ц.5851_5854делАГТТ у Колумбији.37 Још један БРЦА2 ПВ, ц.631+1Г>А, пронађен је код пацијената са БЦ и ОЦ са Сицилије (Агригенто, Сиракуза и Рагуза).28 Приметно је да смо приметили коегзистенцију две варијанте БРЦА22> ц.312>ц. ) код истог пацијента, за којег смо претпоставили да је одвојен у цис режиму, као што је раније објављено на тај начин.34,46 Ове БРЦА2 убле мутације се заиста често примећују у италијанском региону и откривено је да уводе преурањене стоп кодоне, утичући на спајање месинџер РНК и узрокујући неуспех БРЦА2 протеина.47,44
Такође смо мапирали БРЦА1 и БРЦА2 ПВ у претпостављеним ОЦЦР и БЦЦР регионима протеинских домена и гена. Ове регионе су описали Реббецк ет ал.као подручја ризика за развој карцинома јајника и рака дојке, респективно.49 Међутим, докази о повезаности између локације варијанти заметне линије и ризика од рака дојке или јајника остају контроверзни.28,50-52 У нашој популацији, БРЦА1 ПВ су били претежно лоцирани у БЦЦР региону, док су БРЦА2 ПВ-ови били лоцирани између БРЦА2 ПВ које смо икада могли да пронађемо у региону који није било лоциран у било којој регији. претпостављени ОЦЦР и БЦЦР региони и карактеристике БЦ. Ово може бити због ограниченог броја пацијената са БРЦА1/2 мутацијама. Из перспективе протеинског домена, БРЦА1 ПВ се дистрибуирају дуж целог протеина, а БРЦА2 промене се првенствено налазе у домену понављања БРЦ.
Коначно, повезали смо клиничко-патолошке карактеристике БЦ са БРЦА1/2 ПВ. Због ограниченог броја укључених пацијената, нашли смо само значајну корелацију између Ки-67 и степена тумора. Иако је процена и тумачење Ки-67 донекле контроверзна, извесно је да су високе стопе пролиферације повезане са поновним појавом, „повећаним ризиком од смањења“ да би се направила разлика у односу на „повећан ризик од смањења“ да а „низак“ Ки-67 је 20%. Међутим, овај праг се не односи на нашу популацију пацијената са мутацијом БРЦА1/2, која има средњу вредност Ки-67 од 25%. Овај тренд високих стопа Ки-67 може се објаснити преваленцијом у нашим луминалним Б и ТНБЦ кохортама, од којих је неколико присутних луминалних А2-5 тумора, чини се да је било присутних луминалних А2-5 тумора, који сугеришу да су неки од луминалних А2-5 тумора били присутни –37 који су били већи од тумора. 0%) може боље стратифицирати пацијенте према њиховој прогнози.53,54 Према резултатима наше анализе, значајна корелација није изненађујућа. Јавља се између високог Ки-67 и степена и присуства БРЦА1 ПВ. Заправо, тумори повезани са БРЦА1 су типични за ТНБЦ и показују агресивније карактеристике.16,17
У закључку, ова студија пружа извештај о мутационом статусу БРЦА1/2 у БЦ кохорти са источне Сицилије. Свеукупно, наши налази су у складу са постојећим доказима, како у погледу преваленције мутација тако и клиничкопатолошких карактеристика у БЦ. Више студија у већим популацијама БРЦА1/2-мутантних пацијената, као што је процена присуства мутантних мутантних пацијената са проширеном анализом мутантног БЦ-а, су проширене анализе ПВ који су различити и ређи од БРЦА1/2. Ово ће омогућити идентификацију и правилно управљање све већим бројем субјеката са повећаним ризиком од рака услед генетских мутација.
Потврдили смо да су пацијенти потписали информисани пристанак да анонимно дају своје узорке тумора у сврху истраживања. Сви пацијенти су потписали писмени информисани пристанак у складу са Хелсиншком декларацијом. Према политици АОУ Полицлиницо „Г.Родолицо – С.Марцо“, ова студија је изузета од етичког прегледа јер је БРЦА1 Цонсентенцес дала и писану анализу свих пацијената у складу са клиничком праксом. коришћење њихових података у истраживачке сврхе.
Захваљујемо проф. Паолу Вигнерију на његовој помоћи у збрињавању пацијената са раком дојке на захтев Етичког комитета.
Федерика Марторана пријављује хонораре од Иституто Гентили, Ели Лилли, Новартис, Пфизер. Остали аутори изјављују да нема сукоба интереса у овом раду.
1. Сунг Х, Ферлаи Ј, Сиегел РЛ, ет ал. Глобал Цанцер Статистицс 2020: ГЛОБОЦАН процењује учесталост и морталитет од 36 карцинома у 185 земаља широм света.ЦА Цанцер Ј Цлин.2021;71(3):209-249.3216ца: